4 metodos en microbiologia

8/19/2019 4 Metodos en Microbiologia

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Métodos en Microbiología

Ing. Edwin H. Valle

Microbiología

Carrera de Zootecnia-CUNOR


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Microscopios Microscopía


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Microscopía de ca!po claro

En la !icroscopía de

ca!po claro" el ca!po

!icrosc#pico o $rea

obser%ada est$

brillante!ente il&!inada

los ob'etos en est&dio

aparecen !$s osc&ros

(&e el )ondo.


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Microscopía de ca!po osc&ro

En la !icroscopía

de ca!po osc&ro"

se &sa el !is!o!icroscopio" solo

(&e se agrega &n

condensador de

ca!po osc&ro.


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Microscopía de )l&orescencia

Es i!portante !&

&tili*ado en el laboratorio

+ospitalario. ,e &sa paraea!inar !&estras (&e

+an sido teidas con

colorantes de

)l&orocro!o.


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Microscopía de )l&orescencia

/er!ite &n !aor contraste entre s&stancias de di)erentegrosor o índice de re)racci#n. ,e logra !ediante el &so de &n

condensador &n ob'eti%o especiales (&e controlan la

il&!inaci#n del ob'eto.

,e logran acent&ar las ligeras di)erencias en el espesor o

en los índices de re)racci#n de las estr&ct&ras cel&lares.


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/reparaciones para el ea!en por

!icroscopía #ptica

,&spensi#n en lí(&ido


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4rotis


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5ota pendiente


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6écnicas de 6inci#n

,e &tili*an !&c+os colorantes org$nicos para teir

los !icroorganis!os para s& obser%aci#n al

!icroscopio" con el ob'eto de7

8 Obser%ar !e'or el aspecto !or)ol#gico8 Identi)icar partes estr&ct&rales

8 9&dar a identi)icar :o di)erencias organis!os

si!ilares


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0os principales pasos para preparar &na !&estra

teida para s& obser%aci#n al !icroscopio son71. Colocar &n )rotis o &na pelíc&la )ina sobre el

portaob'etos

;. 4i'aci#n del )rotis por calor

" o &na serie de reacti%os =tinci#n

di)erencial>


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6inci#n si!ple

8 En esta se &tili*a solo &na sol&ci#ncolorante.

8 El )rotis se in&nda con la sol&ci#n

colorante se de'a act&ar por &n tie!podeter!inado.

8 ,e la%a con ag&a se seca.

8 5eneral!ente las cél&las se tien de)or!a &ni)or!e


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6inci#n di)erencial

8 En este tipo de tinci#n" los

!icroorganis!os son ep&estos a !$s de

&n reacti%o" con el ob'eto de poner de

!ani)iesto di)erencias entre distintos tipos

de cél&las.


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6inci#n de 5ra!

8 Es &na de las técnicas de tinci#n

di)erencial" !as i!portante &tili*ada en

!icrobiología.

8 El procedi!iento es el sig&iente7


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,ol&ciones en elorden deaplicaci#n

5ra! positi%as 5ra! negati%as

Cristal %ioleta 0as cél&las se tiende %ioleta

0as cél&las se tien de%ioleta

,ol&ci#n de odo ,e )or!a &n co!ple'oc%-I" las cé&lassig&en %ioleta

,e )or!a &n co!ple'oc%-I" las cé&las sig&en%ioleta

9lco+ol 0as paredescel&lares sedes+idratan" laper!eabilidad de lapared cel&lar

dis!in&e" las cél&lasper!anecen %ioleta

,e etraen lípidos delas paredes cel&lares"los poros se agrandan el co!ple'o CV-I seeli!ina" las cél&las

(&edan incoloras

,a)ranina 0as cél&las no sea)ectan

0as cél&las to!an estecolorante se tien dero'o


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6écnicas de c&lti%o p&ro

8 Un c&lti%o p&ro consta de &na poblaci#n de cél&las"

pro%enientes de &na sola cél&la progenitora.

8 N&estro a!biente alberga &na gran cantidad de

!icroorganis!os" &n est&dio adec&ado re(&iere de

técnicas (&e per!itan conocer ordenar la co!ple'a

poblaci#n =c&lti%o !ito> separarla en s&s distintas

especies =c&lti%o p&ro>.


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8 0as cél&las crecen r$pida!ente" (&e en 1? a

;@ +oras l&ego de la inoc&laci#n se tienen!asas %isibles de cél&las lla!adas colonias.

8 Cada colonia es &n c&lti%o p&ro de &na sola

clase de !icroorganis!o.

8 Una %e* obtenidos los c&lti%os p&ros" p&ede sernecesario !antener en condiciones el c&lti%o

para (&e sigan creciendo d&rnate cierto período

de tie!po.

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Conser%aci#n

del c&lti%o

Corto tie!po Re)rigeraci#nde 2 a 12A C

0argo tie!po

Nitr#genolí(&ido a

-1B3A C

es+idratados congelados

=0io)ili*ados>


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Métodos para el aisla!iento de

c&lti%os p&ros


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Etensi#n en placas


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,ie!bra en !asa en placa


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,ie!bra en t&bo

8 En estrías


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,ie!bra con ag&'a por picad&ra


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C&lti%o de enri(&eci!iento


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9isla!iento de &na sola bacteria


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eter!inaci#n del aspecto del

creci!iento del c&lti%o

!icrobiano" tanto en !edioslí(&idos co!o s#lidos.

Identi)icaci#n de los ca!bios

(&í!icos reali*ados por los

!icroorganis!os

eter!inaci#n de la co!posici#n

(&í!ica de los co!ponentescel&lares


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Caracteri*aci#n !ediante el

est&dio de antígenos" presentes

en s& s&per)icie.

eter!inaci#n del potencial de

prod&cir en)er!edades"!ediante la inoc&laci#n en

ani!ales o plantas

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