daftar pustaka -...

60

DAFTAR PUSTAKA

1. Haleem NYA, El-Aasar HM, Zaki SM, Sabry SM, El-Zainy AW.

Concomittant protective and therapeutic role of verapamil in chronic mercury

induced nephrotoxicity in the adult rat: histological, morphometric and

ultrastructural study. Arch Med Sci [Internet]. 2015 [cited 2015 Nov 23];

11(1):199-209. Available from: PubMed.

2. The Centers for Disease Control and Prevention. Mercury. United States: The

Centers for Disease Control and Prevention; 2009.

3. United Nations Environment Programme. Mercury_time to act. Geneva:

Division of Technology, Industry, and Economics UNEP; 2013.p.1-44.

4. Nirmala K, Hastuti YP, Yuniar V. Tokisisitas merkuri (Hg) dan tingkat

kelangsungan hidup, pertumbuhan, gambaran darah, dan kerusakan organ

pada ikan Oreochromis niloticus. Jurnal Akuakultur Indonesia [Internet]. 2012

[cited 2015 Dec 1]; 11(1):38-48. Available from:

journal.ipb.ac.id/index.php/jai/article/download/7196/pdf.

5. Ghosh D, Mandal DK. Histopathological effects and bioaccumulation of

mercury in the kidney of an indian major corp, Labeo rohita (Hamilton). Bull

Environ Contam Toxicol [Internet]. 2012 [cited 2015 Dec 1]; 89(3):479-83.

Available from: SpringerLink.

6. Branco V, Ramos P, Canario J, Lu J, Holmgren A, Carvalho C. Biomarkers of

adverse response to mercury: histopathology versus thioredoxin reductase

activity. Journal of Biomedicine and Biotechnology [Internet]. 2012 [cited

2015 Dec 1]; 2012:1-10. Available from: Hindawi Publishing Corporation.

7. Zalups RK, Barfuss DW. Nephrotoxicity of inorganic mercury co-

administered with L-cysteine. Toxicology [Internet]. 1996 [cited 2015 Dec 1];

109(1):15-29. Available from: PubMed.

8. Lash LH, Putt DA, Hueni SE, Payton SG, Zwickl J. Interactive toxicity of

inorganic mercury and trichloroethylene in rat and human proximal tubules:

61

effects on apoptosis, necrosis, and glutathione status. Toxicol Appl Pharmacol

[Internet]. 2007 [cited 2015 Dec 1]; 221(3):349-62. Available from: PubMed.

9. Al-Madani WA, Siddiqi NJ, Alhomida AS. Renal toxicity of mercuric

chloride at different time intervals in rats. Biochemistry Insights [Internet].

2009 [cited 2015 Dec 1]; 2(1):37-45. Available from: Libertas Academica.

10. Hazelhoff MH, Bulacio RP, Torres AM. Gender related differences in kidney

injury induced by mercury. Int J Mol Sci [Internet]. 2012 [cited 2015 Dec 1];

13(8):10523-36. Available from: PubMed.

11. Alfian Z. Merkuri : Antara manfaat dan efek penggunaannya bagi kesehatan

manusia dan lingkungan. Medan: Universitas Sumatera Utara; 2012.

12. World Health Organization. Elemental mercury and inorganic mercury

compounds: human health aspects. Geneva: World Health Organization;

2003.p.1-68.

13. Japan Public Health Association. Preventive measures against environmental

mercury pollution and its health effects. Japan: Public Health Association;

2001.p.1-117.

14. Clarkson TW, Magos L, Myers GJ. The toxicology of mercury — Current

exposures and clinical manifestations. New England Journal of Medicine

[Internet]. 2003 [cited 2015 Dec 10]; 349:1731-7. Available from:

http://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMra022471.

15. Lasut MT. Proses bioakumulasi dan biotransfer merkuri ( Hg ) pada

organisme perairan di dalam wadah terkontrol. Jurnal Matematika dan Sains

[Internet]. 2009 [cited 2015 Dec 1]; 14(3): 89-95. Available from:

http://journal.fmipa.itb.ac.id/jms/article/viewFile/246/252.

16. U.S. Geological Survey. Mercury contamination of aquatic ecosystems

[pamphlet]. P (United States): U.S. Geological Survey; 1995.

17. Broussard L.A, Hammett-Stabler C.A, Winecker R.E, Ropero-Miller J.D. The

toxicology of mercury. Laboratory Medicine [Internet]. 2002 [cited 2016 Jan

3]; 33(8):614-25. Available from:

http://labmed.oxfordjournals.org/content/labmed/33/8/614.full.pdf.

62

18. Syversen T, Kaur P. The toxicology of mercury and its compounds. Journal of

Trace Elements in Medicine and Biology [Internet]. 2012 [cited 2015 Dec 1];

26(4):215-26. Available from: Elsevier.

19. Zalups R.K. Molecular interactions with mercury in the kidney. Pharmacol

Rev [Internet]. 2000 [cited 2015 Dec 31]; 52(1):113-43. Available from:

PubMed.

20. Diamond G.L, Zalups R.K. Understanding renal toxicity of heavy metals.

Toxicologic Pathology [Internet]. 1998 [cited 2016 Jan 3]; 26(1):92-103.

Available from: http://tpx.sagepub.com/content/26/1/92.full.pdf.

21. Berndt W.O. The role of transport in chemical nephrotoxicity. Toxicologic

Pathology [Internet]. 1998 [cited 2016 Jan 3]; 26(1):52-7. Available from:

http://tpx.sagepub.com/content/26/1/52.full.pdf.

22. Bernhoft R.A. Mercury toxicity and treatment : A review of the literature.

Journal of Environmental and Public Health [Internet]. 2011 [cited 2015 Dec

3]; 2012:1-10. Available from: Hindawi Publishing Corporation.

23. Diner B, Brenner B [Internet]. Toxicity, mercury. New York: Mount Sinai

School of Medicine; c2015 [updated 2005 Oct 18; cited 2015 Dec 31].

Available from:

http://www.nj.gov/health/eohs/gloucester/franklin_township/kiddie_kollege/di

ner05_toxicity_mercury.pdf.

24. Marieb E.N, Hoehn K.N. Human anatomy and physiology (10th Edition).

California: Benjamin/Cummings Publishing Company; 2015.

25. Gea A. Systema urogenitale. Semarang: Bagian Anatomi Fakultas Kedokteran

Universitas Diponegoro; 1986.p.1-8.

26. Nurdjaman, Soejoto, Soetedjo, Hussein S.M, Bambang R.B, Susilaningsih N,

et al. Lecture notes histologi II. Semarang: Bagian Histologi Fakultas

Kedokteran Universitas Diponegoro;2004.p.72-85.

27. Brakeman P. Structure and function of the kidney [unpublished lecture notes].

University of California, San Fransisco; lecture given 2014 Aug 4.

28. Junqueira L, Carneiro J. Histologi dasar teks dan atlas. 10th ed. Jakarta: EGC:

2007.p.369-77.

63

29. Kidney Research UK. The kidneys – a basic guide [homepage on the Internet].

No date [cited 2016 Jan 2]. Available from:

https://www.kidneyresearchuk.org/health-information/resources/the-kidneys-

a-basic-guide.

30. Guyton A.C, Hall J.E. Fisiologi kedokteran. 9th ed. Jakarta:EGC; 1997.p.512-

3.

31. Goldstein R.S, Schnellmann R.G. Toxic response of the kidney. In: Klaaseen

C.D, Amdur M.O, Doull J, editors. Cassaret and Doull's Toxicology: The

Basic Science of Poisons. 5th ed. USA: McGraw-Hill; 1996.p.426-8,435.

32. Putra P.B. Pengaruh pemberian dekstrometorfan dosis bertingkat per oral

terhadap gambaran histopatologi ginjal tikus Wistar [dissertation]. Semarang:

Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro; 2010.

33. Tubulointerstitial diseases [homepage on the Internet]. c2009 [updated 2009

Jan 30; cited 2016 Jan 21]. Available from:

http://www.kidneypathology.com/English_version/Tubulointerstitial_diseases.

html.

34. Suhita N.L.P.R, Sudira I.W, Winaya I.B.O. Histopatologi ginjal tikus putih

akibat pemberian ekstrak pegagan (Centella asiatica) peroral. Buletin

Veteriner Udayana [Internet]. 2013 [cited 2016 Jan 22]; 5(2):71-8. Available

from: http://ojs.unud.ac.id/index.php/buletinvet/article/view/5741/4347.

35. Tim Pengajar Patologi Anatomi. 2011. Pedoman Kuliah Mahasiswa Patologi

Anatomi 2. Semarang: FK UNDIP.

36. Dahlan M.S. Statistika untuk kedokteran dan kesehatan. 4th ed. Jakarta:

Penerbit Salemba Medika; 2009.p.83-10.

64

LAMPIRAN

LAMPIRAN 1. ETHICAL CLEARANCE

65

LAMPIRAN 2. SURAT SELESAI PENELITIAN

66

LAMPIRAN 3. PERHITUNGAN DOSIS

Dosis LD-50 : 40 mg/kgBB

Kelompok Kontrol : 0 mg/kgBB

Kelompok Perlakuan 1 : ¼ dosis LD-50 = ¼ X 40 mg/kgBB = 10 mg/kgBB

Sampel Berat Badan Tikus (gram)

Jumlah Larutan HgCl2 yang Diambil (ml)

Aquades yang Ditambahkan

(ml)

Total Sonde (ml)

Contoh 200 1 1 2 P1-1 128 0,64 ≈ 0,6 1,4 2 P1-2 111 0,55 ≈ 0,6 1,4 2 P1-3 114 0,57 ≈ 0,6 1,4 2 P1-4 120 0,6 1,4 2 P1-5 138 0,69 ≈ 0,7 1,3 2 P1-6 110 0,55 ≈ 0,6 1,4 2 P1-7 113 0,65 ≈ 0,7 1,3 2 P1-8 120 0,6 1,4 2 P1-9 156 0,78 ≈ 0,8 1,2 2

Kelompok Perlakuan 2 : ½ dosis LD-50 = ½ X 40 mg/kgBB = 20 mg/kgBB

Sampel Berat Badan Tikus (gram)

Jumlah Larutan HgCl2 yang Diambil (ml)

Aquades yang Ditambahkan

(ml)

Total Sonde (ml)

Contoh 200 2 0 2 P2-1 134 1,34 ≈ 1,3 0,7 2 P2-2 118 1,18 ≈ 1,2 0,8 2 P2-3 140 1,4 0,6 2 P2-4 142 1,42 ≈ 1,4 0,6 2 P2-5 178 1,78 ≈ 1,8 0,2 2 P2-6 110 1,1 0,9 2 P2-7 134 1,34 ≈ 1,3 0,7 2 P2-8 145 1,45 ≈ 1,5 0,5 2 P2-9 143 1,43 ≈ 1,4 0,6 2

67

LAMPIRAN 4. METODE BAKU PEMERIKSAAN HISTOLOGI

A. Cara Pengambilan Jaringan dan Fiksasi

1. Mengambil jaringan yang dibutuhkan sesegera mungkin setelah tikus

dimatikan (kurang dari 2 jam) dengan ukuran 1x1x1 cm.

2. Memasukkan ke dalam larutan fiksasi dengan urutan kerja sebagai berikut:

a. Memfiksasi jaringan dalam larutan Bouin maksimal 6 jam.

b. Memindahkan jaringan ke dalam larutan formalin 10%.

c. Memperkecil ukuran jaringan.

d. Memasukkan jaringan ke dalam alkohol 70% ±24 jam, kemudian

dilanjutkan dengan alkohol 80-90%.

e. Mencampur larutan xylol dan alkohol dengan perbandingan 1:1 dalam

waktu ±24 jam.

f. Memasukkan jaringan ke dalam xylol 1,2,3 dalam waktu masing-

masing 30 menit, sehingga jaringan terlihat tembus pandang.

g. Mencampur larutan xylol dan parafin dengan perbandingan 1:1 selama

20 menit/24 jam dengan dipanaskan dalam oven 600C.

h. Memasukkan jaringan ke dalam paraffin 1,2,3 selama masing-masing

1 jam.

i. Memasukkan jaringan ke dalam paraffin 4 dalam waktu 30 menit, lalu

mencetak jaringan dalam blok parafin, kemudian didinginkan ±24 jam.

j. Memotong dengan mikrotom.

68

B. Cara Pemotongan Blok

a. Menyiapkan object glass bersih.

b. Memberi albumin di tengah object glass.

c. Merekatkan albumin dengan object glass.

d. Memotong blok yang sudah disiapkan dengan ketebalan 4 mikron, lalu

memasukkannya ke dalam air panas ±600C.

e. Mengambil jaringan dengan object glass yang sudah bersih diberi albumin

meyer.

f. Mengeringkan jaringan.

g. Menghilangkan parafin yang ada pada object glass atau jaringan dnegan

memanaskan di dalam oven 600C atau dengan menggunakan tungku.

C. Pewarnaan

a. Memasukkan jaringan ke dalam laruan xylol 1 ±5 menit.

b. Memasukkan jaringan ke dalam larutan xylol 2 ±5 menit.

c. Memasukkan jaringan ke dalam larutan alkohol xylol ±2 menit.

d. Membilas jaringan dnegan alkohol 96% - 50% masing-masing ±30 menit.

e. Membilas jaringan dengan aquades 1 kali ±10 menit.

f. Memasukkan jaringan ke dalam Hematoksilin ±2-10 menit.

g. Membilas jaringan dengan air mengalir sampai bersih.

h. Membilas jaringan dengan alkohol 50-96%.

i. Memasukkan jaringan ke dalam Eosin ±2-5 menit.

j. Membilas jaringan dengan alkohol 96% sebanyak 2 kali.

69

k. Membersihkan kotoran-kotoran yang ada di sekitar jaringan dengan

alkohol xylol.

l. Memasukkan jaringan ke dalam xylol 1,2 ±5 menit, langsung ditutup kaca

penutup.

m. Maka jadilah preparat.

70

LAMPIRAN 5. GAMBARAN HISTOPATOLOGI GINJAL TIKUS WISTAR

Kelompok K dengan perbesaran 400x ( Panah hijau : sel tubulus normal )

Kelompok P1 dengan perbesaran 400x ( Panah hijau : dilatasi tubulus / kerusakan

derajat ringan )

71

Kelompok P1 dengan perbesaran 400x ( Panah hijau : degenerasi albuminosa /

kerusakan derajat sedang )

Kelompok P2 dengan perbesaran 400x ( Panah hijau : nekrosis sel tubulus / kerusakan derajat berat )

72

LAMPIRAN 6. HASIL PENGAMATAN GAMBARAN HISTOPATOLOGI GINJAL

Keterangan: 0 = sel normal

1 = dilatasi tubulus

2 = degenerasi albuminosa

3 = nekrosis sel tubulus

LP 1 LP 2 LP 3 LP 4 LP 5 Skor Tertinggi Derajat

K1 0 1 0 0 0 1 Ringan K2 0 2 2 0 2 2 Sedang K3 2 2 0 2 2 2 Sedang K4 0 0 1 0 2 2 Sedang K5 1 1 2 1 0 2 Sedang K6 0 0 0 0 2 2 Sedang K7 0 0 1 0 0 1 Ringan K8 0 0 1 0 0 1 Ringan K9 0 0 0 0 2 2 Sedang

P1-1 2 2 1 1 2 2 Sedang P1-2 1 1 2 0 2 2 Sedang P1-3 0 1 2 3 1 3 Berat P1-4 3 2 1 2 2 3 Berat P1-5 0 1 2 2 3 3 Berat P1-6 1 2 2 3 2 3 Berat P1-7 0 2 2 3 3 3 Berat P1-8 2 2 3 3 3 3 Berat P1-9 1 0 1 1 2 2 Sedang

P2-1 0 2 2 3 3 3 Berat P2-2 1 0 3 2 2 3 Berat P2-3 2 0 1 1 3 3 Berat P2-4 3 3 2 0 3 3 Berat P2-5 1 0 3 3 2 3 Berat P2-6 1 3 2 3 1 3 Berat P2-7 0 3 3 2 3 3 Berat P2-8 1 0 2 2 3 3 Berat P2-9 3 3 0 1 0 3 Berat

73

LAMPIRAN 7. HASIL ANALISIS STATISTIK

Tests of Normalityb

.617 9 .000

.617 9 .000

KelompokKontrolPerlakuan 1

GinjalStatist ic df Sig.

Shapiro-Wilk

Lil liefors Significance Correctiona.

Ginjal is constant when Kelompok = Perlakuan 2. Ithas been omit ted.

b.

Case Summaries

Ginjal

9 1.67 .500 2.00 1 29 2.67 .500 3.00 2 39 3.00 .000 3.00 3 3

27 2.44 .698 3.00 1 3

KelompokKontrolPerlakuan 1Perlakuan 2Total

N Mean Std. Deviation Median Minimum Maximum

Test of Homogeneity of Variances

Ginjal

32.000 2 24 .000

LeveneStatistic df1 df2 Sig.

74

Kruskal-Wallis Test

Mann-Whitney Test

Ranks

9 6.009 16.009 20.00

27

KelompokKontrolPerlakuan 1Perlakuan 2Total

GinjalN Mean Rank

Test Statisticsa,b

18.7782

.000

Chi-SquaredfAsymp. Sig.

Ginjal

Kruskal Wallis Testa.

Grouping Variable: Kelompokb.

Ranks

9 6.00 54.009 13.00 117.00

18

KelompokKontrolPerlakuan 1Total

GinjalN Mean Rank Sum of Ranks

Test Statisticsb

9.00054.000-3.042

.002

.004a

Mann-Whitney UWilcoxon WZAsymp. Sig. (2-tailed)Exact Sig. [2*(1-tailedSig.)]

Ginjal

Not corrected for ties .a.

Grouping Variable: Kelompokb.

75

Mann-Whitney Test

Mann-Whitney Test

Ranks

9 8.00 72.009 11.00 99.00

18

KelompokPerlakuan 1Perlakuan 2Total

GinjalN Mean Rank Sum of Ranks

Test Statisticsb

27.00072.000-1.844

.065

.258a

Mann-Whitney UWilcoxon WZAsymp. Sig. (2-tailed)Exact Sig. [2*(1-tailedSig.)]

Ginjal

Not corrected for ties .a.

Grouping Variable: Kelompokb.

Ranks

9 5.00 45.009 14.00 126.00

18

KelompokKontrolPerlakuan 2Total

GinjalN Mean Rank Sum of Ranks

Test Statisticsb

.00045.000-3.912

.000

.000a

Mann-Whitney UWilcoxon WZAsymp. Sig. (2-tailed)Exact Sig. [2*(1-tailedSig.)]

Ginjal

Not corrected for ties .a.

Grouping Variable: Kelompokb.

76

LAMPIRAN 8. DOKUMENTASI PENELITIAN

Sampel penelitian Garam HgCl2

Stok larutan HgCl2 Pengambilan larutan HgCl2

Sampel disonde Anestesi overdosis

77

Sampel setelah anestesi Pengambilan organ ginjal

Formalin Ginjal tikus

Pemotongan organ ginjal Hasil pemotongan

78

Pembuatan blok parafin Pemotongan jaringan

Hasil pemotongan jaringan Pengecatan Hematoksilin-Eosin

79

LAMPIRAN 9. BIODATA MAHASISWA

Nama Lengkap : Andre Wiguna

NIM : 22010112130154

Tempat, Tanggal Lahir : Kendal, 3 Oktober 1994

Jenis Kelamin : Laki-laki

Alamat : Puri Anjasmoro J I / 16, Semarang

No HP : 089683700685

E-mail : andrelc10@yahoo.com

Riwayat Pendidikan : TK Kanisius Brana (1998-2000)

SD PL Bernardus (2000-2006)

SMP PL Domenico Savio (2006-2009)

SMA Kolese Loyola (2009-2012)

Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro (Masuk

tahun 2012 )

Pengalaman Organisasi : Sie Rohani PRMK FK UNDIP (2014)

Ketua Divisi Komunikasi Internal PRMK FK UNDIP

(2015)