josh powell virus research

Post on 07-Jul-2015

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Engineer  “Arg-­‐Gly-­‐Asp”  (RGD)  

RGD:    stem-­‐cell    

adhesion  epitope  also  target  cancer  

cells  that  up-­‐regulate  integrin  

TYMV  with  RGD  subsDtuDon  at  residue  44  

Wild-­‐type  

N-­‐term:  Mutant  

pH-­‐dependent  enhanced  stability  Mutate  the  internal  scaffold  N-­‐terminus  of  CP    

Robust  TYMV  virus-­‐like  parDcles  in  E.  coli  

 In  vitro  reassembly  from  a  denatured  

state  

AMer  many  months  crystal  structure  data  for  TYMV  and  

mutants!    

TYMV  can  form  a  molecular  “container”  aMer  release  of  RNA,  nano-­‐inspired  applicaDons  with  a  protein  shell  with  a  small  “hole”  

AMer  freeze-­‐thaw  

before  

TYMV  dual-­‐subgenomic  RNA  for  expression  of  GFP  and  GUS.    Future  downstream  use  for  vaccine  development  

Biophysical  studies  of  TYMV  CharacterizaDon  empty,  virion  and  intermediate  parDcles  

Northerns,  Westerns,  gradient  centrifugaDon,  etc.  

Previous  Work  (masters):    Signaling  of  a  Cytomegalovirus  (CMV)  chemokine  receptor  US28:  plenty  of  cloning,  Dssue  culture,  immuno-­‐precipitaDon/fluorescence  and  construcDng  CMV  knockout  mutants  

US28  chemokine  

Recent  TYMV  arDcle    &  (cover  image)    Jan  2011,  more  publicaDons  to  come!  

Publish  or    Perish!!!!!  

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