analisis asam amino

38
Analisis Asam Amino, Peptida dan Protein Oleh Kelompok I-3 Kelas I 1. Firdaus Kabiru Massey, NRP : 1130462 2. Rona Rihadah , NRP : 1130124 3. Fitriana Sani, NRP : 1130215 4. Ananda Kusuma Sejati, NRP : 1130209 5. Cynthia Kusumadewi, NRP : 1130005 6. Lolly widiya Srinita, NRP : 1120123 7. Dini Yuniati, NRP : 1120126

Upload: rona-mutthe

Post on 24-Nov-2015

138 views

Category:

Documents


5 download

TRANSCRIPT

Analisis Asam Amino, Peptida dan Protein

OlehKelompok I-3Kelas I

1. Firdaus Kabiru Massey,NRP : 11304622. Rona Rihadah,NRP : 11301243. Fitriana Sani,NRP : 11302154. Ananda Kusuma Sejati,NRP : 11302095. Cynthia Kusumadewi,NRP : 11300056. Lolly widiya Srinita,NRP : 11201237. Dini Yuniati,NRP : 1120126

Laboratorium BiokimiaFakultas Farmasi Universitas Surabaya2014

Daftar isi

Daftar isi.1BAB 1 : Tujuan percobaan21.1 Tujuan umum...21.2 Tujuan khusus..2BAB 2 : Hasil dan Pembahasan.32.1 Tabel hasil32.2 Pembahasan..6BAB 3 : Daftar pustaka10Lampiran11

BAB 1Tujuan Percobaan

1.1 Tujuan Umum :Untuk analisis atau identifikasi asam amino, peptida dan protein.

1.2 Tujuan Khusus :1. Uji BiuretMendektesi ikatan peptida pada suatu bahan2. Uji MillonIdentifikasi asam amino yang mengandung monohidroksi benzen3. Uji XantoproteinIdentifikasi asam amino tirosin, triptofan atau fenilalanin4. Uji HellerMenentukan adanya protein secara kualitatif5. Uji Koagulasi PanasMenentukan adanya protein secara kualitatif6. Uji Pengendapan Protein dengan Logam BeratMengetahui pengaruh logam berat terhadap kelarutan protein7. Pengendapan Protein oleh Garam-Garam AnorganikMengetahui pengaruh garam konsentrasi tinggi terhadap kelarutan protein8. Uji Denaturasi ProteinMengamati peristiwa denaturasi dan mengetahui faktor-faktor yang dapat menimbulkan perubahan struktur pada protein

BAB 2Hasil Pengamatan dan Pembahasan

2.1 Tabel Pengamatan :

Tabel 2.1.1 Hasil Pengamatan Uji Biuret dan MillonSampel UjiHasil PengamatanKesimpulan

Reaksi Uji Biuret

Putih Telurpositif, warna unguTerdapat ikatan peptida

Susupositif, warna unguTerdapat ikatan peptida

Gelatinpositif, warna unguTerdapat ikatan peptida

Air Liurpositif, warna unguTerdapat ikatan peptida

Reaksi Uji Millon

Putih Telurterbentuk endapan setelah dipanaskan, warna endapan merahTerdapat asam amino yang mengandung monohidroksi benzena

Susuterbantuk endapan setelah dipanaskan, warna endapan merahTerdapat asam amino yang mengandung monohidroksi benzena

Gelatintidak terbantuk endapan setelah dipanaskanTidak terdapat asam amino yang mengandung monohidroksi benzena

Air Liurterbantuk endapan setelah dipanaskan, warna endapan merahTerdapat asam amino yang mengandung monohidroksi benzena

Tabel 2.1.1 Hasil Pengamatan Uji Xantoprotein, Heller, Koagulasi Panas, Pengendapan dengan LogamSampel UjiHasil PengamatanKesimpulan

Reaksi Uji Xantoprotein

Air LiurAir Liur + asam sitrat + NaOH 10 % kuning keruh, endapan kuningTerdapat gugus aromatic (benzene) yang berupa asam amino tirosin, triptofan dan fenilalanin.

GelatinGelatin + asam sitrat + NaOH 10 % tidak berubah warnaTidak gugus aromatic (benzene) yang berupa asam amino tirosin, triptofan dan fenilalanin.

SusuSusu + asam sitrat + NaOH 10 % kuning orange, ada gumpalanTerdapat gugus aromatic (benzene) yang berupa asam amino tirosin, triptofan dan fenilalanin.

Reaksi Uji Heller

Air Liur encerAir Liur + asam nitrat prespitasi putih, tidak berwarna Positif

SusuSusu + asam sitrat prespitasi putih ada kuning oleh gumpalanPositif

Putih TelurPutih Telur + asam sitrat prespitasi putih ada kuning oleh gumpalanPositif

Reaksi Uji Koagulasi Panas

GelatinGelatin + Asam asetat endapanNegatif

SusuSusu + Asam asetat endapanPositif

Putih TelurPutih Telur + Asam asetat endapanPositif

Reaksi Uji Pengendapan Protein dengan Logam Berat

GelatinFiltrat : + Pb Asetat 10% larutan jernih+ CuSO4 larutan teap jernihLogam berat tidak dapat melarutkan protein

Endapan : + Pb Asetat 10% tidak ada endapan CuSO4 tidak ada endapanLogam berat tidak dapat melarutkan protein

SusuFiltrat : + Pb Asetat 10% larutan putih+ CuSO4 hijau toscaLogam berat dapat melarutkan protein

Endapan : + Pb Asetat 10% terdapat endapan putih+ CuSO4 endapan putihLogam berat dapat melarutkan protein

Putih TelurFiltrat :+ Pb Asetat 10% warna putih keruh+ CuSO4 larutan berwarna putih keruhLogam berat dapat melarutkan protein

Endapan :+ Pb Asetat 10% terdapat endapan putih+ CuSO4 terdapat endapan putihLogam berat dapat melarutkan protein

Tabel 2.1.3 Hasil Pengamatan Uji Pengendapan Protein dengan Garam AnorganikTabung123

Sampel + (NH4)2SO4SusuPutih telurGelatin

EndapanAdaAdaTidak ada

Pisahkan endapan dengan menyaring

Uji Biuret :

FiltratUnguUnguBiru jernih

Endapan Ungu Ungu-

Uji millon :

FiltratTak berwarna + endapan merahEndapan putihTak berwarna

Endapan MerahMerah-

Tabel 2.1.4 Hasil Pengamatan Uji Denaturasi ProteinTabung1234

Larutan SampelSusuPutih telurMinyakLarutan pati

Penambahan AlkoholEndapan / tidak Endapan Endapan Endapan Endapan

Uji Biuret

-endapan

-filtratEndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

-EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

- EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan)

- EndapanPutih (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan)

Penambahan asam asetatEndapan / tidakEndapanEndapan TidakTidak

Uji Biuret-endapan

-filtrat- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

- EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan)

- EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan)

Penambahan NaOHEndapan / tidakEndapanTidak (albunin melarut )EndapanTidak

Uji Biuret-endapan

-filtrat- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

- EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratUngu (+)

- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

- EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan)

Penambahan Buffer AsetatEndapan / tidakEndapanEndapanEndapanTidak

Uji Biuret-endapan

-filtrat- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan)

Penambahan air mendidihEndapan / tidakEndapanTidakTidakTidak

Uji Biuret

-endapan

-filtrat- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

- EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratUngu (+)

- EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan- EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan)

Penambahan deterjenEndapan / tidakEndapanEndapanEndapanTidak

Uji Biuret

-Endapan

-filtrat

- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

EndapanUngu (+)

FiltratUngu (+)

EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan)

Dilakukan pengunjanganEndapan / tidakEndapanendapanTidakEndapan

Uji Biuret-endapan

-Filtrat- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

-EndapanBening (Tidak ada endapan)

- FiltratBening (Tidak ada endapan)

- EndapanUngu (+)

- FiltratUngu (+)

2.2 Pembahasan :

1. Uji biuret Digunakan sebagai uji untuk mendeteksi ikatan peptida pada suatu bahan. Uji ini adalah cara klasik yang diperkenalkan oleh Riegler pada tahun 1914 melalui observasi substansi yang mengandung dua atau lebih ikatan peptida yang membentuk warna ungu dengan tembaga di dalam larutan alkalin. Uji biuret merupakan uji yang mudah, cepat dan tidak mahal. Pada larutan alkali, protein mereduksi Cupric (Cu2+) menjadi Cuprous (Cu+) yang beraksi dengan ikatan peptida.Uji biuret dilakukan dengan sampel (putih telur, susu, gelatin, Air liur) sebanyak 2 ml yang dimasukkan didalam tabung reaksi, dengan menambahkan 2 ml natrium Hidroksida 10% kemudian ditambahkan larutan tembaga sulfat (CuSO4) 0,1% 1ml. Hasil yang terbentuk dalam 4 sampel praktikum kami yaitu berwarna ungu. Hal tersebut menunjukkan adanya rangkaian peptida didalam 4 sampel kami. Hal ini Ikatan peptida dapat ditunjukkan (salah satunya) dengan warna spesifik yang dihasilkan dari reaksi antara ikatan peptida dengan larutan NaOH dan CuSO4. NaOH akan berfungsi sebagai katalis, karena ion OH- dari NaOH akan menarik salah satu ion H+ dari -NH2- protein, sehingga memungkinkan protein membentuk kompleks dengan Cu2+ dari CuSO4. kompleks antara protein dengan CuSO4 inilah yang kemudian membentuk warna ungu pada sampel.

2. Uji MillonDigunakan untuk mendeteksi tirosin pada sampel protein. Prinsip kerjanya adalah kelompok phenol atau monohidroksi benzene dari tirosin bereaksi dengan ion merkuri pada kondisi asam dari sodium nitrit, menghasilkan warna merah kompleks. Pada percobaan kami, sampel putih telur, susu, gelatin dan air liur menghasilkan warna merah. Artinya adalah keempat sampel tersebut positif memiliki gugus phenol pada ikatan proteinnya.

3. Uji XantoproteinDigunakan untuk identifikasi protein yang mengandung residu asam aminod dengan radikal fenil dalam struktur kimianya (protein yang mengandung asam amino fenilalanin atau tirosin).

Asam nitrat pekat bereaksi dengan cincin fenil untuk memberi warna kuning. Penambahan larutan alkali menyebabkan warna jingga pada sampel.

Hasil dari uji pada sampel kami (susu, gelatin, dan air liur) adalah : susu dan air liur mempunyai gugus fenil dengan memberi warna kuning/jingga sedangkan pada gelatin tidak memberi hasil positif.

4. Uji HellerUji ini dilakukan degan mencampurkan susu, putih telur dan air liur dengan HNO3 pekat sehingga hasilnya akan terbentuk endapan yang berwarna putih pada permukaan larutan. Hal ini menandakan bahwa di dalam semua sampel terkandung protein. Protein pecah kemudian mengalami denaturasi oleh HNO3. Protein jika terkena asam pekat (HNO3) akan terjadi denaturasi protein di permukaan, tetapi jika berlangsung lama, denaturasi akan berlangsung terus-menerus sampai cincin putih menghilang.Hasil dari pemeriksaan protein terhadap semua sampel menggunakan tes heller yaitu dengan penambahan asam nitrat pekat pada sampel yang jika terdapat protein akan membentuk suatu lapisan terpisah dan ditunjukkan dengan terbentuknya endapan putih. Hasil pemeriksaan dengan menggunakan tes heller menunjukkan hasil pemeriksaan yang positif (+). Hal ini menunjukkan bahwa semua sampel yang diperiksa terdapat protein..

5. Uji Koagulasi ProteinSalah satu faktor yang menyebabkan denaturasi protein adalah perubahan temperature. Memasak putih telur merupakan contoh denaturasi protein yang tidak reversible. Suatu putih telur adalah cairan tidak berwarna yang mengandung albumin, yakni protein globular yang larut. Pemanasan putih telur itu mengakibatkan albumin membuka lipatan dan mengendap, dihasilkan suatu zat padat putih. Itu adalah contoh dari penggumpalan protein akibat pemanasan. Penambahan asam pada protein juga mengakibatkan denaturasi, sehingga terjadi penggumapalan. Ikatan garam pada protein adalah ionik dan terjadi karena gaya tarik menarik antara gugus karboksil dan NH3 yang berdekatan. Pada percobaan, digunakan pemanasan dengan air mendidih serta penambahan asam asetat. Perubahan yang terjadi adalah timbulnya endapan. Hasil yang kami peroleh yaitu susu dan putih telur positif mengendap sedangkan gelatin tidak mengendap.

6. Uji Pegendapan Protein dengan Logam BeratDasar reaksi ini adalah penetralan muatan. Pengendapan akan terjadi apabila protein berada pada daerah alkalis terhadap titik isoelektrknya, yang mana protein bermuatan negatif. Dengan adanya ion positif dari logam berat, terjadilah penetralan dan terjadi garam proteinat yang mengendap.Logam berat yang dipakai dalam percobaan adalah Pb asetat dan Copper sulfat (CuSO4). Sedangkan sampel yang kami pakai adalah susu, putih telur dan gelatin. Hasil yang diperoleh yaitu susu dan putih telur positif mengendap sedangkan gelatin tidak mengendap.

7. Pengendapan protein oleh Garam-garam anorganikLangkah awal dalam uji protein ini ialah menentukan bahan alam yang akan diproses. Penentuan ini didasarkan pada kadar protein yang terkandung di dalamnya. Tentu saja dipilih bahan alam yang mempunyai kadar protein tinggi dan mudah diperoleh. Analisis terhadap kadar protein dalam bahan alam tersebut perlu dilakukan untuk memperoleh data tentang kadar protein yang akan uji. Pengendapan protein dengan garam dipengaruhi oleh beberapa faktor yaitu pH, temperatur, konsentrasi protein, dan garam yang digunakan. Konsentrasi protein merupakan faktor terpenting dalam scaling-up karena pemurnian skala besar memberikan hasil yang lebih banyak dibanding skala laboratorium (Walker dkk., 1988). Pengendapan protein dalam ekstrak sel dan jaringan dapat dilakukan dengan penambahan reagen.Pada uji pengendapan dengan garam, larutan protein dijenuhkan hingga keruh menggunkan (NH4)2SO4. penambahan garam tersebut maka akan terbbentuk endapan. Hal ini sesuai menurut Stryer. Menurut Stryer Daya larut kebanyakan protein dalam larutan garam dengan konsentrasi tinggi menjadi rendah. Efek ini dikenal dengan salting out (Stryer, 2000). Hubungan daya larut protein dengan kadar garam berbeda antara satu protein dengan protein lainnya. Amonium sulfat merupakan garam yang umum digunakan dalam pengendapan protein secara salting out karena memiliki kelarutan yang tinggiPada percobaan kami larutan susu dan putih telur memberikan hasil positif dengan indikasi terdapatnya endapan putih ataupun larutan yang menjadi putih keruh sedangkan pada gelatin didapatkan hasil negatif dengan indikasi tidak terdapatnya endapan dari hasil tersebut terjadi karena ammonium sulfat memiliki tingkat kelarutan yang lebih tinggi daripada protein. Sehingga pada saat penambahan ammonium sulfat, ammounium sulfat akan melarut dalam air atau pelarutnya dan mendesak protein keluar, kembali dalam bentuk solidnya, sehingga terbentuklah protein yang terendapkan.Setelah kami mendapatkan hasil berupa endapan larutan yang kami uji akan kami saring guna memisahkan endapan dan fitratnya. Dan dilanjutkan dengan uji biuret dan uji millon.Salah satu cara menguji adanya protein dalam makanan adalah dengan melakukan uji biuret. Biuret merupakan persenyawaan dengan dua gugus karbonil dan tiga gugus amino dan membentuk ikatan koordinat dengan CU2+ dengan cara yang sama dengan protein. Uji ini dapat digunakan untuk menguji senyawa-senyawa yang memiliki ikatan peptida. Itulah sebabnya uji biuret dapat digunakan untuk mengetahui ada tidaknya protein di dalam makanan. Adanya protein ditandai dengan terbentuknya warna ungu. Dari hasil uji kami dari 3 sampel (susu, putih telur, dan gelatin) yang memberikan hasil positif yaitu susu dan putih telur dengan indikasi terbentuknya warna ungu pada endapan dan fitratnya yang artinya susu dan putih telur memiliki iktan peptida. Sedangkan pada gelatin tidak terdapat ikatan peptide karena tidak terbentuknya warna ungu pada endapat maupun pada fitratnya. Setelah melakukan uji biuret kelompok kami melakukan uji millon yang bertujuan untuk identifikasi asam amino yang mengandung monohidroksi benzen. Pereaksi millon adalah larutan merkuro dan merkuri nitrat dalam asam nitrat. Apabila pereaksi ini ditambahkan pada larutan protein, akan menghasilkan endapan putih yang akan berubah menjadi warna merah oleh pemanasan. Pada dasarnya reaksi ini positif untuk fenol-fenol, karena terbentuknya senyawa merkuri dengan gugus hidroksifenil yang bewarna. Protein yang mengandung tirosin akan memberikan hasil positif Dari hasil praktikum kami didapatkan hasil positif untuk endapan dan filtrat susu dan putih telur. Sedangkan pada gelatin tidak terdapat perubahan warna merah.

8. Uji Denaturasi ProteinDenaturasi protein adalah hilangnya sifat-sifat struktur lebih tinggi oleh terkacaunya ikatan hydrogen dan gaya-gaya skunder lain yang memutuskan molekul protein. Akibat dari suatu denaturasi adalah hilangnya banyak sifat sifat biologis suatu protein (Fessenden 1989).Salah satu penyebab denaturasi protein adalah perubahan temperatur, dan juga perubahan pH. Perubahan pH yang terjadi karena penambahan asam atau basa dapat merusak ikatan garam yang terdapat pada protein tersebut. Ikatan garam dalam molekul protein adalah senyawa ionik dan terjadi Karen gaya tarik menarik antara COO- dan NH3 yang berdekatan. Penambahan asam berarti penambahan ion H+ dan mengubah COO- menjadi COOH dan mengakibatkan gaya tarik menarik hilang atau kerusakan ikatan garam dalam molekul protein. Penambahan basa yang berarti penambahan OH akan mengubah NH3+ menjadi NH2+ dan air.Faktor-faktor lain yang dapat menyebabkan denaturasi protein adalah deterjen, radiasi zat pengoksidasi atau pereduksi, dan perubahan jenis pelarut. Denaturasi dapat bersifat reversible, jika suatu protein hanya dikenai kondisi denaturasi yang lembut seperti perubahan pH. Jika protein dikembangkan ke lingkungan alamnya, hal ini untuk memperoleh kembali struktur lebih tingginya yang alamiah dalam suatu proses yang disebut denaturasi. Denaturasi umumnya sangat lambat atau tidak terjadi sama sekali (Fessenden 1989).Denaturasi protein juga dapat diartikan suatu proses terpecahnya ikatan hidrogen, ikatan garam atau bila susunan ruang atau rantai polipeptida suatu molekul protein berubah. Dengan kata lain denaturasi adalah terjadi kerusakan struktur primer, skunder, tersier, dan struktur kuartener, tetapi struktur primer (ikatan peptida) masih utuh. Susunan protein dapat dilhat sebagai hirarki, yaitu berupa struktur primer (tingkat I), skunder (tingkat II), tersier (tingkat III), dan kuartener (tingkat IV).Pada percobaan kami menggunakan alkohol, asam asetat, NaOH, buffer asetat 1 M, pemanasan air mendidih, penambahan deterjen dan pengguncangan intensif sebagai faktor denaturasi. Lalu setelah terjadi pengendapan, filtrat disaring dan diuji biuret untuk membuktikan adanya protein. Begitu juga pada endapan yang dilakukan uji biuret.Hasil yang diperoleh adalah

BAB 3KESIMPULAN1. Pada Uji Biuret, albumin, kasein, gelatin, dan air liur menghasilkan warna lembayung/ungu, ini menunjukkan terdapat ikatan peptida pada semua bahan tersebut.2. Pada Uji Milon, susu, putih telur, dan air liur ditambahkan dengan pereaksi milon menghasilkan endapan, dan setelah dipanaskan berubah warna menjadi warna merah muda, sedangkan gelatin tidak mengalami perubahan sama sekali. Hal tersebut menunjukkan susu, putih telur, dan air liur mengandung monohidroksi benzene, sedangkan gelatin tidak.3. Pada Uji Xantoprotein, susu dan putih telur menghasilkan warna kuning jingga, gelatin tetap berwarna bening, menunjukkan susu dan putih telur menghasilkan cincin benzene sedangkan gelatin tidak.4. Pada Uji Heller, susu, putih telur, dan air liur encer menghasilkan endapan putih, menunjukkan terdapat protein semua bahan tersebut.5. Pada Uji Koagulasi Panas, susu dan putih telur menghasilkan endapan setelah didihkan dan ditetesi asam asetat menunjukkan susu dan putih telur positif mengandung protein. Gelatin tidak.6. Pada Uji Pengendapan Protein dengan Logam Berat, susu setelah ditambahkan Pb asetat menghasilkan endapan putih susu, pada putih telur setelah ditambahkan Pb asetat menghasilkan endapan putih, dan pada gelatin ditambahkan Pb asetat menghasilkan larutan putih agak keruh. Pada penambahan CuSO4 susu menghasilkan endapan putih susu, putih telur menghasilkan endapan putih kuning dan gelatin tetap bening. Hal itu menunjukkan susu dan putih telur mengendapkan logam berat.7. Pengendapan protein oleh garam-garam anorganikSetelah ditambahkan (NH4)2SO4 susu menghasilkan endapan, putih telur menghasilkan sedikit endapan, dan gelatin tidak menghasilkan endapan. Dilakukan uji biuret pada endapan susu menghasilkan warna ungu dan filtrate susu menghasilkan warna ungu, begitu juga pada endapan dan filtrate putih telur dilakukan uji biuret, endapan putih telur tidak berwarna, sedangkan filtrate putih telur menghasilkan warna ungu. Hasil-hasil tersebut menunjukkan filtrate dan endapan susu mengandung peptide, begitu juga dengan filtrate putih telur, Denaturasi Proteina. Penambahan Alkohol Susu, putih telur dan , sedangkan minyak dan larutan pati tidak. Saat dilakukan uji biuret filtrate serta endapan susu dan putih telur menghasilkan warna ungu, filtrate larutan pati berwarna bening endapannya berwarna putih.b. Penambahan Asam Asetatsusu dan putih telur yang menghasilkan endapan sedangkan minyak, dan larutan pati tidak. Saat dilakukan uji biuret, filtrate dan endapan susu menghasilkan warna ungu, endapan putih telur bening, filtrate putih telur menghasilkan warna ungu, sedangkan pada minyak dan larutan pati menghasilkan endapan dan filtrate yang bening.c. Penambahan NaOHSusu dan minyak menghasilkan endapan, sedangkan putih telur dan larutan pati tidak. Saat dilakukan uji biuret filtrate dan endapan susu menghasilkan warna ungu, pada putih telur filtratnya menghasilkan warna ungu tetapi endapannya bening, sedangkan pada larutan pati menghasilkan endapan dan filtrate yang bening.d. Penambahan buffer asetatSusu dan putih telur menghasilkan endapan, sedangkan minyak, dan larutan pati tidak. Saat dilakukan uji biuret filltrat dan endapan putih telur dan susu menghasilkan warna ungu, sedangkan pada minyak dan larutan pati hanya menghasilkan filtrate yang berwarna kuning dan bening.e. Penambahan air mendidihSusu menghasilkan endapan, sedangkan putih telur, minyak, dan larutan pati tidak. Saat dilakukan uji biuret filtrate dan endapan susu menghasilkan warna ungu, begitu juga dengan filtrate putih telur menghasilkan warna ungu, sedangkan larutan yang lain hanya menghasilkan warna bening.f. Penambahan deterjenSusu putih telur dan minyak menghasilkan endapan, sedangkan larutan pati tidak. Setelah dilakukan uji biuret filtrate dan endapan pada susu, putih telur dan minyak menghasilkan warna ungu, sedangkan pada larutan pati berwarna bening.g. Penambahan gunjanganSusu dan putih telur menghasilkan endapan, sedangkan minyak dan larutan pati tidak. Setelah dilakukan uji biuret filtrate dan endapan susu menghasilkan warna ungu, begitu juga filtrate putih telur menghasilkan warna ungu, tetapi endapan putih telur berwarna bening sama dengan filtrate dan endapan dari minyak dan larutan pati.

Daftar Pustaka

Digilib.unimus.ac.id diakses pada 31 Maret 2014 pukul 10.51 WIBFessenden & Fessenden. 1986. Kimia Organik edisi ketiga. Diterjemahkan oleh Aloysius Hadyana Pudjaatmakan, Ph.D. Jakarta : ErlanggaSumardjo, Damin. 2006. Pengantar Kimia : Buku Panduan Kuliah Mahasiswa Kedokteran & Strata 1 Fakultas Bioeksakta. Jakarta:EGCBintang, Maria. 2010. Biokimia Teknik Penelitian. Jakarta : Erlangga

Lampiran

Hasil Pengamatan Uji BiuretPutih telurSusuGelatinAir liur

Hasil Pengamatan Uji MillonPutih telurSusuGelatinAir liur

Hasil Pengamatan Uji XantoproteinHasil Pengamatan Uji HellerHasil Pengamatan Uji Koagulasi PanasHasil Pengamatan Uji Pengendapan dengan Logam Berat

Hasil Pengamatan Uji Pengendapan Protein dengan Garam AnorganikSusuPutih TelurGelatin

Filtrat SusuPutih TelurGelatinBiuretMillonBiuretMillonBiuretMillon Endapan SusuPutih TelurBiuretMillonBiuretMillon

Hasil Pengamatan Uji Denaturasi ProteinSusu

+ alkohol

Uji biuret endapan

+ asam asetat

Uji biuret endapan

+ NaOH

Uji biuret endapan

Uji biuret filtrat

+buffer asetat

Uji biuret endapan

+ air mendidih

Uji biuret filtrat

+ deterjen

Uji biuret filtrat

Putih telur

+ alkohol + asam asetat +buffer asetat + deterjen

Pengunjangan

Minyak+ deterjen +buffer asetat + asam asetat + NaOH + air mendidih Pengujangan

Pertanyaan 1. Apakah yang di maksud dengan salting in dan salting out ?

Salting in adalah peristiwa dimana adanya zat terlarut tertentu yang menyebabkan kelarutan zat utama di dalam solvent menjadi lebih besar. Dengan kata lain zat yang awalnya sukar larut menjadi mudah larut dengan adanya zat terlarut tertentu. Contoh : Riboflavin tidak larut air, tetapi larut dalam larutan yang mengandung nicotinamid.Salting out adalah peristiwa dimana adanya zat terlarut tertentu yang mempunyai kelarutan lebih besar disbanding zat utama sehingga menyebabkan penurunan kelarutan zat utama (terbentuk endapan karena adanya reaksi kimia).Contoh : reaksi antara papaverin HCl dengan Solutio Charcot menyebabkan kelarutan papaverin base menurun.