annals of neurosciencesannalsofneurosciences.org/journal/publications/2008_3.pdfinstruction to...
TRANSCRIPT
Volume 15Volume 15 20082008Issue - 3Issue - 3
Annals
of
Neurosciences
Official Journal ofIndian Academy of Neurosciences
Volume 15 Issue - 3 (July) 2008
ISSN 0972-7531
Annals
of
Neurosciences
Official Journal ofIndian Academy of Neurosciences
Editorial Address : Prof. Rakesh Shukla
The Editor,Annals of Indian Academy of NeurosciencesDepartment of NeurologyKing Georges’s Medical University,Lucknow-226 003 India.Phone: 91-522-2257090Fax:91-522-2257090Email : [email protected]
Subscription Information : Annual subscription rates are rupees Four Hundred in India/Forty Dollars or Twenty Five Poundsabroad. The subscription should be sent to The Editor, Annals of Neurosciences, Department ofNeurology, King George’s Medical University, Lucknow-226 003. The claim for issues not received,should be sent within 3 months of publication of the issue concerned. Later claims will not beentertained.
Editorial Board
Editor : Dr. Rakesh Shukla (Lucknow)
Co-Editors : Dr. RK Garg (Lucknow)
Dr (Ms). NC Singh (Manesar)
Dr (Ms). N Patro (Gwalior)
Immediate Past Editor : Dr. AM Kar ((Lucknow))
Editorial Advisors : Dr. AK Agarwal (Lucknow)
: Dr. Maheep Bhatnagar (Udaipur)
: Dr. Veena Bijlani (New Delhi)
: Dr. BN Dhawan (Lucknow)
: Dr. Madhu Dikshit (Lucknow)
: Dr. YK Gupta (New Delhi)
: Dr. Mahdi Hasan (Lucknow)
: Dr. Preeti Joshi (Bangalore)
: Dr. S Mohanty (Bhubaneshwar)
: Dr. Devika Nag (Lucknow)
: Dr. Chandishwar Nath (Lucknow)
: Dr. Nityanand (Lucknow)
: Dr. SC Pandey (USA)
: Dr. HC Pant (USA)
: Dr. SS Parmar (USA)
: Dr. Ishan Patro (Gwalior)
: Dr. Ram Raghubir (Lucknow)
: Dr. V Ravindranath (New Delhi)
: Dr. M Sandler (UK)
: Dr. PK Seth (Lucknow)
: Dr. KK Sharma (New Delhi)
: Dr. KC Singhal (Aligarh)
: Dr. RC Srimal (Lucknow)
: Dr. Shashi Wadhwa (New Delhi)
: Dr. CL Wong (Hong Kong)
Indian Academy of Neurosciences
New Executive (2007 – 2008)
President : Dr. BN Dhawan, Lucknow
Vice Presidents : Dr. HC Pant, Bethesda, USA
Dr. IK Patro, Gwalior
Dr (Ms). PG Joshi, Bangalore
Dean : Dr. M Hasan, Lucknow
General Secretary : Dr. MK Thakur, Varanasi
Secretary HQ : Dr. VK Khanna, Lucknow
Secretary International Affairs : Dr. Yogesh Dwivedi, Chicago, USA
Joint Secretary : Dr. P Seth, Manesar
Treasurer : Dr. A K Agrawal, Lucknow
Chief Editor : Dr. R Shukla, Lucknow
Co-Editors : Dr. RK Garg, Lucknow
Dr (Ms). NC Singh, Manesar
Dr (Ms). N Patro, Gwalior
Members : Dr. NB Joshi, Bangalore
Dr. S Bappiraju, Hyderabad
Dr (Ms). Debjani Guha, Kolkata
Dr. A Anand, Chandigarh
Dr. NK Subhedar, Nagpur
Dr. BG Unni, Jorhat
Dr. F Islam, New Delhi
IBRO and FAONS Representative : Dr (Ms). V Ravindranath, Manesar
Immediate Past President : Dr. PN Tandon, New Delhi
Immediate Past General Secretary : Dr (Ms). PG Joshi, Bangalore
Dr. AK Agrawal : Developmental Toxicology Division, Industrial Toxicology Research Centre, MG Marg, Lucknow – 226 001,
India. Tel +91-522-2627586 (Lab) +93352- 61505 (Cell), Email [email protected]
Dr. MK Thakur : Professor, Department of Zoology, Banaras Hindu University, Varanasi – 221 005, India. Tel. +91-542-
(Lab), +94505-47155 (Cell), Email [email protected]
Dr. VK Khanna : Developmental Toxicology Division, Industrial Toxicology Research Centre, MG Marg, Lucknow – 226 001,
India. Tel +91-522-2627586 (Lab) +91-522-2781897 (Res), Email [email protected]
Editorial Message
Dear Colleagues,
It gives me great pleasure to place before you the July issue of this year, which contains the presidentialaddress, two original articles, one review article and one case report. I hope that some more speakers atthe last year’s conference also give their work for publication in the journal following the lead taken by ProfPN Tandon.
The spectacular advances in neurosciences in the last couple of decades have made it possible to not onlyexplore but also to modify the function of human brain, even human mind and consciousness at suchlevels that it has aroused concerns about their ethical implications. Prof PN Tandon in his PresidentialAddress on Neuroethics delivered at the Silver Jubilee Conference at Varanasi last year deals with thevarious aspects of this.
Peroxidation of cellular membrane lipids, or circulating lipoprotein molecules generate highly reactivealdehydes among which one of the most important is 4-hydroxynonenal (HNE), which is a highly reactivemolecule due to Ü, â unsaturation. At low concentrations, HNE is involved in cell signaling whereas highconcentrations of HNE are cytotoxic. Siddiqui et al. have examined the metabolism of HNE in PC-12cells and studied its cytotoxic effects. They have also looked at the effect of nontoxic concentrations ofHNE on neurotransmitter receptors. At low concentrations, HNE is primarily metabolized by glutathiolationand oxidation, whereas at higher concentrations, in addition to glutathiolation and oxidation a significantfraction of HNE is reduced in PC-12 cells.
Zidovudine is used in pregnant HIV positive women to prevent transmission of infection to the baby.Zidovudine exposure during prenatal period is associated with alterations in brain morphology and functionin the baby. Rajalakshmi et al have assessed the neurobehavioral effects of one stage zidovudineexposure during pregnancy and lactation in F1 and F2 generation of mice. Their results suggest thatneurobehavioural functions are affected in F1 generation and there is recovery in F2 generation. Recoveryin F2 generation beyond normal profile could be due to activation of oncogenes as a result of chromosomalalterations.
The primary human brain tumours account for less than 2% of all human cancers but yet cause adisproportionate burden of cancer related morbidity and mortality. Research in the past four decades hasresulted in no improvement in the survival of these patients. A variety of chromosomal alterations havebeen reported for various brain tumours. The p53 gene is one of the most important and intensely studiedhuman tumour suppressor gene. Gope et al have reviewed the functional modulation of p53 gene inhuman brain tumour development.
Cognitive and behavioral problems are common in children with West syndrome. These behavioral disordersfurther impair the educational and social developmental of such children. Agarwal et al report a case oftreatment resistant Attention Deficit Hyperactivity Disorder as an outcome of West syndrome.
Dr Rakesh Shukla
Annals of Neurosciences
Vol 15, Issue-3 (July), 2008
Contents
� Instruction to the authors i-ii
Presidential Oration
� Neuroethics: Presidential Address Indian Academy of Neurosciences 54Silver Jubilee Conference, Varanasi, IndiaP N Tandon
Original Article
� Metabolism Of 4-Hydroxy Trans 2- Nonenal (Hne) In Cultured Pc-12 Cells 60MA Siddiqui, MP Kashyap, VK Khanna,
VK Gupta, VK Tripathi, S Srivastva, AB Pant
� Neurobehavioral Profile of F and F Generation Mice Following one Stage 69Zidovudine Exposure Through Pregnancy and LactationCh Rajlakshmi, Asima Bhattacharyya,
Anshuman Trigunayat, Bl Pandey
Review Article
� Functional Modulation of The P53 Gene and Its Protein 75In Human Brain TumorsRohini Keshava, Mathivanan Jothi,
Mohan L Gope , Rajalakshmi Gope .
Case Report
� Treatment Resistant Attention Deficit Hyperactivity Disorder 87An Outcome of West Syndrome: A Case ReportVivek Agarwal, Adarsh Tripathi, T Sivakumar
Instruction To Authors
Articles related to clinical and basic neurosciences can besent for publication to the Editor, Annals of Neurosciences,Department of Neurology, King George’s Medical University,Lucknow-226 003 India.
General Information
1. Send all articles in triplicate (with a floppy 3 ½”/CD-ROM,wherever possible) by registered post/courier.
2. All articles must be accompanied by a covering letter signedby all authors confirming that article has not been publishedor submitted elsewhere, either in part or in total. Thisrestriction does not apply to abstracts published in connectionwith scientific meetings.
3. The editorial board may modify the articles partially or whollyto bring it to set pattern of the journal to ensure continuityin style.
4. The views expressed in article will remain the opinion ofauthors and editorial board accepts no responsibility forthese.
5. The papers which have been published become the propertyof the Journal and should not be published or reproduced infull or in part elsewhere without the permission of the Editor.
Original Articles
� Typed double space on A/4 size bond paper with a 3 cmmargin all around. Type on one side of paper only.
� Article should not exceed 10-12 type written pages includingreferences but excluding tables.
� The sequence of article should be as follows:
— Title page
— Abstract
— Keywords
— Introduction
— Material & Methods
— Results
— Discussion
— Acknowledgement
— References
— Tables
— Legends to figure
A. Titles and Author’s Name
� On a separate page.
� Concise & descriptive title.
� Authors name be given as initials followed by surname.
� The academic degree & designations with name of institutionis given at bottom of page after superscribing individualauthors names with asterisks.
� Give address for communication at bottom of pages withtelephone numbers.
B. Abstract
� This should be given on a separate page in a structuredformat.
� This should not exceed 250 words for original article and100 for case reports.
� It should include background, aims of study, methodology,results and conclusion. The problem being addressed in thestudy and conclusion of its result must be expressed clearlyin the abstract.
C. Key Words
� These are required for indexing of article in the journal.
� The key words should not include words in title as title isautomatically indexed.
� The Key words may be taken from Medical Subjects Headings(Me SH) published under these headings.
� Discussion should avoid repetitions of results or review ofliterature.
� Text should not contain data given in tables.
� Abbreviations must be avoided in title, subtitle and summary.
� Only Generic name of drugs should be used Brand namesmay be used in material method section only when thesehave been used in research.
� Material taken from other sources must be accompanied bya written statement from the author and the publisher.
D. Statistical Methods
� Describe methods used in details.
� Present the results in logical sequence in text, tables orillustrations.
� In discussion emphasize newer aspects of study and theconclusions that follow from them.
E. Tables
� Type each table in double space on a separate page.
� Provide a title for each table and indicate its position in thetext.
� Number the table in Arabic numerals.
� Put explanatory note in the foot note (and not in heading).
� Do not use internal horizontal and vertical rules.
� Number of tables should be in proportion to length of thetext.
F. Illustrations
� As far as possible the figures should be professionallydesigned, on glossy paper & large enough to be legible evenafter reduction to fit the width of a single column.
� The back of each figure should have name of author, sequencenumber and proper orientation (e.g. ‘top’).
� Figure should be unmounted.
� Photographs and illustrations should be 7 x cm or 14 cm.
� Electron micrographs should have internal scale markers.
� Patients photographs should be accompanied by permissionor subject should not be identifiable.
� Legends for illustrations should be triple spaced on a separatepaper.
� Upto four illustrations will be published free of cost. Additionalfigures or colour prints will be charged to the authors atprevalent rates.
� Each illustration and table must be cited in the text.
G. References
� Vancouver system of references should be used.
� Reference in text should be given as number within brackets
(rather than superior figures).
� No. of references should not exceed 30 for original articles,
10 for short article, 8 for case report and 3 for a letter to
editor.
� References should be numbered in order of their appearance
in the text.
� Personal communications are to be identified in the text
and not in the reference.
� Cross references (“Quo.. by-”) should be avoided.
� As far as possible, Indian references be quoted.
� Name of all authors should be mentioned upto four, if morethan four, first three names are mentioned followed by ‘et al’.
The form of references is as follows
From a Journal
Name of Author. Title Name of Journal Year; Vol: Page No.
e.g. Pandey P, Pradhan S. Homocysteine : A possiblemodifiable risk factor in vascular dementia. Ann Neuro Sci2006; 13:12-18
From a Chapter in a Book
� Name of Author.Name of Topic. Name of Editors. Name ofBook. Place of Publication. Name of Publishers, Year; Vol.:Page.
e.g. Fullplus BW. Characterisation, isolation and purificationof cholinergic receptors. In : Theselff S Ed., Motor innervationof muscle, 2nd ed. London : Academic Press 1976; 11-26.
From a Book
� Name of Author. Name of Book. Place of Publication. Nameof Publisher, Year; Page.
e.g. Ali K Datta. Problems in diagnostic radiology, Bombay:KK Publishers. 1980 : 3-16.
� For further details please refer to International Committeeof Medical Journals Edition. Uniform requirement formanuscript submitted to biomedical journals. N Engl J Med1991; 324 : 424-8. BMJ 1991; 302: 338-41.
H. Correspondence
Letter to editors may comment on articles published in journal ormay provide additional original data or information. The textshould not exceed 500 words and a maximum of 3 referencesare permitted. The letter must be received within six weeks ofarticle’s publication.
I. Review and Actions
The editorial board examines the manuscripts and sends them toreviewers. The article not accepted will be informed within sixweeks usually but decision on potentially acceptable articles maytake longer.
�� ����������� ���������������������������
���������� ���������� ����������� ������ �� ��������������� ������ ����������������� ���
���������������������� � ����� ��� ���������� ��� �������������������������������������� �������������������� �� ��������������� � ����� ��� ���������� ���� ������������������������!"���#��� ��$�%��&��&�������������� �������������
�������� ������������������������������������������������������ ����������!����������"#��$�����������$��%�����&�'����(�� ������� �$������)!*���� ���$������������$�������!�� ��$��������"$����$����������'������$��������'������������� �������������'��$��'!���������������!#�+�$�)����%$��+�����+�$���+���!�,*���)����'�!�'������������������$������������$��$��!��!�� -�������"�$��$�������������������������������� ��������.��������$�����!���$����!����$��/����*�0���)������������$��1�$������)!� ����$�������$�����*
���!�������1��"�2����������������$�����������)�� �����! ��)��$��)������������$��'�$������������*�������)��������$�'��!�� �������$����������"�������������������$��)�������#�������#���������������������.)��������$����$�������$�)��������#����$�����������!���)#����������������'�������'�$����*3$������������������������������������$�������������� �������$����)����������'�������������!��4������'����������)�� !��$�� ������� �$�)���'���#������$�)���)����������������������$���������$�����$�������������������'����$�����$���)�������*��������������!������5����$���������������� �� �����������#� '���� )�����#� )����#� ������)������#� ������������ ���� �)������ ��$�������� � � '���� 6)�$������� ��#������'������)������#���!$�������!� ������������'�$����#��$��)���������������������)���� ����$�����$�)���)����������!�$����������!�����)�����$���*%�)���$�1������������$������������ ���)�����$��������$�)������!� ���� ������)!� �$��� ������ ���*� 3$�� ��� ������)���$)��������$����������������77���$�����������������8����$���!�)�����������$�������������������������!� ���'!���������������*
3��)�����$����$���$���������� ��$����������������$����������$������������ ��$����"��������*�*�2������$���9�*�/$��)����� ��$����$�������������������������������������'���������������$��'������������� �:���$�#�'��������"�����'�����������#��$����������������$������������� �����$���� ������������������������$������������2���������*�0��)�� ������ ����$�����)�2������$�����������"���'!�� ������4�����*
�!" � � ��3$�����)�2������$��"��������'!�/���)�%� ����������'�#8�$�� ����� ��$�����$!��$����������$����$�������"������� ��$������)����� #������$���)����� #��$��$�)���'���;��<�*
=�55������� ��������#�8�$���4�)������� �$�"�"��"�����������"�$��$�������������� ��������#����)���!#�)������!#�� ���!��#������$���$�����$!�� ������� ��)���'!������������������ �������!���'����)�$���)�;*�8�����6�����$�����'��6����� �������)�����"�$���'����'������$�����$!�� �� �;��>�*
+�����)��!#�82������$������������"�$���$��#���������������)��������� �����������������$� ����������"�$�$���������� �����������������$����� ;*����*
3������������:����� �������"������1����������$����� �������������"$����������"�$��$���� �����������)��� ������.��!$���������������*
� #��� �$% �!�#&!�� '!#/$����$�����)�2������$��)�$��$����'���������������!��$����������$����'�����4�������� ���)��!�!������������!��������������!$�.������!#�������� ��������)����� ���!$����������#��$���$�)������������)��������!��)#�)��������� � �� �������!� � � ��������� � ��)����� ���$����� �������� �����������������"�$��$������������*�������!����7>7#��(�))������������'!�?2@%(A��'��������$���������������$��$!����������$��� �������������������������������� ������$��)�������)�����!�'����)�$���)�#������"$$���$�����������'�������������������$����$��8��������� ��$��'����"�����������!���4������;*�/��$����������'���$��$���������������������$��*�B�"����#��$���������������)��������$�� ����� ����������������$�$������������"��)�����������$����$���������*3$����$���������������'����������*�3$������77>#�?2@%(A(�))�������������!����@�$������2���������*���� *�&���.�����-����#�������C���������#���')������������������?2@%(A*���� �����������5���'!���2��D���������������"�$�?(%DE�%��� ����?������!����$��?%��������#���)���!�����������82������$�.+�������$�� ���������������������������"�������������������������F�*����������������������������������������$����',������$���)�����&�������� �:���$�#����"�,����������2������$��$���'����������*�D���$���))��5����)��� ��$���)��������������2�����������*
���&! �" �!���!�( �#� 2������$��"�������������'��������!�"�$����������������
� �'���$������������������4�����'�!������������������������'���#�'�$����#���� ���������������*
� 3$����)������������'��"��������'��������'�$�����#���"��������$�����������������$��'��"��������'����������������#�������������������������� �$���'��� ��� �$��������!�'��"������$���������������� ��$�1��*
3$���2������$��$����"��)�,�����'������#
� @�$��� �2��������
� 2���������� �@�$�
����������� ��������������������������� ��
��( �# �" �!���#� !��!� 3$����$�����������������"�$��������� ����������
������$*
� @���������� ���$��#����������������)����� ��$����������*
� @�$��� �������� �����������.��������!#������������!#��!$���!�����������������*
�!���#� !��! �" ��( �#@4���������$���������'����� ���$��#�)����#��������������#�$�)���������������� *
��������������� ��$�����$����������� � ���."��#���� �������#��������������!#��������#��)���$!#�������)#�������,���)�������$��'����� ��)������1��"������� �'���� �����*
C����5����$���$�)���'�$�����������������'!�����'��������$�����$�������������������� �����'�$����#������������������$����������������$����'�������1��� ����������'����� ���$������)�����'�$����*�3$�������!��>��!����������4�)������ ��$����=���#�"$�� ����"�������,��!�����$�� ���������'�������"�$�$��$!��������!����������$��������� ���������)������6'��)������'���� �)�1���)�����$���#�����������$����"�7�*3$��$���'���� ���$����������$�����'!����������)�������$�������*� ���������G� @���� � @)����#� C������ ���� B�)��:����;����*
B�"����#���)����'���)�$��5��#�83$�����������)�����8������;� ��$��'���.��$���$��4���������������!���)�������������������.�����$������$���$�������)����������$���'�$�������$�!��������)������$�'�$������"$$�������"�$�����������#����������������#������$��$����$�� �����'���;����*
������ ($��$����� � � ?������!� � � (�� ����� %��� ����.82��������#���������������1��"��$���������'����� �)�����!;*
3)��"��G�����)��)��������'�������$����!� ���$��*�3$������������!��$�����)��������$��'����"����������������)�����)���)���*
)(* # �(!�! $ �!!� "�� #&!� " � � #� &% �!+2��"�$�������� ��)�� �������� "�$� �$�� �4����� ?2@%(A������������B�)���=���)�#�B�)���=���������#�:���$����B�)���C�$���#���$��������������������2����������$����������� ������ ������� ���� ������� �� ��� �� �$���� ����������������*
D���$� ������� ���� �$��#� 8��� �$�� ������ � � �$�� ����� (�����!#����������$�����������������������"$������1�����������#���#�)�!�$������� ������ �����������!#��4������� ���'�!����$��������$���'������!����)��������HHHH*������������$��'������� ����������� �"$��"�����#�� �����������HHHH**I��������������!��$����$���'�����������"��������� ��$����$�������������� ��)�����������;����*
2���������������$���������������������������)�$�������������� ����� ��))���!��$���'������������'�)�����������*�������������!$�������#���������������#���$���������� �����#� ��$��������#� ��'���� �4�����#� ��������#� ��)�����E��)��������������������$�������*�3$�������
�)��������"���������� �2��������)�#�2����)��1����#2��������$���������������'!��$���))���!���������������� �:���$�*
?�������������$��$������� ����������� ���$�������������#����������������$���������� �)���������������'���$�#���� �$�� ����� ����� �$��� �������$�� )���� $���#� ���� 1�!� �����)��������� ��������*
/�$��������.���������������������� ��$��'����)�$���)����������"�$�����$�)�������'���������������*�3$������������������'�������������$����������� �����������������$���� �$�� "�!�� �� "$$� �$��� ��"� 1��"������ "��� '�� ����*82������$��$������ ���#�������$����������!;���9�*
/$����$����������������'����$���#�����'�!����$�������� )������$����$#��$�!���������������������!������������������ �������� )���������� ���� ��� �$�� ���� � � �$��)�����!� ����)����������� ���'�$�����������*����������'��������)���� ������$)�������$�)����'���!���������!#��$������������)�!������������������'������������$�������"$$��$��"���� ��)�� �������!�)�!��$������<�*
��,! ��!$# �" �&!� $% ��( �$% ���!��#� ����� � ��������� ��� ������� ��� �$�� �������� �������� � '�)�������$�#��$����������)��������������� ���$���������
�� (������� ���������������������$���������)����� �'����)���)��������������*�*#���)�����#���!$��
'� +������ ���!$����������� .���5�#�C����#�)��� ��
� C�1�� ��������� "�$� )������'��� �����J� 3���������+��������)������� �����������'�$����J�C������� ���$���������� ���!$�������!*
�� ?���� �������������������$������ ����������� ��"$$��������!��������$!��4������$����!��������'����*�*���������)���������������"$$��������$������'��!� �������������)�� ����������*
�� =���������$��)���������������������
� ������'�$����
� ���������)��������� �$����$!#����)��� ��������.�*�*)�)��!.�� ��)� � � ������*� ?��� � � ������ ��� )�)��!��$���)���� '!� ��������#� ��)!� ���������#� ������ ������ �����"�$�������'!����������������1�������#������$������'����������������������)���4�� ���*�3$����$��������������������$�)��������$����������$���)����"������$����)�1����������$�)������8�����$�)��;���>�*
�"��,!� ��#!����������������'�������$����������$�����������������������!���))��5������$��?���������������������:���$�����B�)���C�$���'!�?2@%(A��*�*�������� ���$�)�������!����$�)�����$��#����)�4)5��'��� �������)�)5����!�$��)#���������$��������)!��������������������'��!#�������� ��$�)��� �������'��!� ���� ��������� ������!#� ����!� ����� �������!#����.���)�������������.���)��5�������#�����������������������������$����������� �� ��)���������*
�� ����������� ���������������������������
��!����������#��������������$��������)������������������������)����������� �������$#����$�)�����',���������������� ��������� ��)����������� ��$����������������*�3$������� ��$��� ������� ������!� �� ���� � � � ����#� $�����#��!$����$��������� ��������������������"�$���)����*C������)�!�$���� ���'�� ��1��� ����'���� �������� � �$�� ���������������������������������������� ��$���))���!�������*D����$������������)������������)�!�'���������*
���������� �� ������� 3��� ������!� ����$� )����� �)�������������� �����.���)����!� �����*�B�"����#�"�$�������������������)������ �����'����� ���!�����������"�$�������� ���� )�����)���*� ��� ������� �$�� ����� ��� �����$��������� ����������������������$�$�����"����������!�'����������� "�$� '���.����$*� 3$�� ������ )�������� ������������������� ������ �'���.����$."$��$�����)������������'�������� �"$����'���� ����������$��'������)� �����������*/$��� �� )���� �������#� ������� ����#� ������!� �����'�������������������'��$�'��������$�$����'����������"�#��$���'��������$����',��������������!������"���'��������� ��)�������� �����.��'��� �������� �����5��� '!� �$�� ���� ������)!*�����*
������ � ������� �� ����� �� ���������� ���� ���� ��������������@����)����� �����$����$�������)������� '���.����$�������������������)���������������������������$����������� ������)�����$��'��������������� ��)'�!�������������������� �$���������������������� �����������*3$��$�����������)������#�������������������)��������"$�������� ������ �������� ���)����� ���)������� ��������!#�)'�!������)�����������$#�������� ����5����#�'�)���������*����=�55�����������!��))�����#�����������)��!�� �$����$���������� ������)�����$���������#�8/$����$���������!�� ���)�������������������)'�!�;�>�K������������������������$��� ��� ��� ��������� )������ � � �$�� ������������� :���$�(�))������ �?2@%(A#���������� �����������������4����������!� � ����� ��"�*� ��� )�!� '�� )�������� ��)� �� �����!��������������������"��������������$���� ��'�����"�$����������'���*�3$��� ����������!��� � ������� �����$������)��!����������������������$��'�������� �$�)���� ��"���$!�� )������������'��������)��1���$��'�������� �'���� �����*/$�����)�!��������������������)���������������������$��� �"����������#����"�������"#��$���'��������$�������$#��$���$�"�������)'�!������������'!���)����� ������'���"�$������!�'���'�������������������������*�:�������)�!#� ����$���)��'��������'������$����������!��$����$������))����)��������������*
%)����!���$������))�#�������������������� ����������"�$���"�� �����������!���)����������!�������������������������������� ������ ��*��� ������ ������� '!�2$�����%$ � � $��$��$�������$����'�����F�*�?�����$����"�)�������$������������ ������������)�����2$�����%$ �����(��������� ��)��$��/����+�����(�������� �(�������?������!�2*I*#������������ �� �� ���������� ���������� ������ ��)���������� �$��������������"�$�� ���"��4���#���"�����$��'������������!����� �����$��������������������$�������#���"�!���������$���$������'��'� ���*�3$�!������������$����$���������)���������������$����)�����������������������!����)����������������������)�!
������!��$�"������� ��"�������#��� ������$�������� ���������"�� �$�"���$��������������������*
��( �$% ##�!# �!%$�!� �� �!��� ,$- �- .��$ � �$&& �-/ ��$ � � �-!� �� �� �-�)����� �����.������� �3$����������������������$�� ����� ����������� �� ������ !����� $���� '���� �� �$�� ���� � � �$������)����*�/$����$��������� �))����������� ����������������������$����!#��$��������������$�������� ���)�,�����$���������"$�������� ����4�������$�)����$���$�#�'�$����#���������!�����������)�1��*�����������:���������������$��#8C����� +C�����������)�����������$������'��!�� ��'�����)������)����� � � '������� ���������� � � �)���4� $�)�������������$�����4���������$���$������������)�1��#�)������������)����������,���)���#����������������)#����������!����$�)����)�������*�����$�������������)������������� ����������'����� �)�����!��������������K�(������!����;*�����'���"����#���*
##�!# �" �!�#��$% �!#&��# 0 % �* "��� , �$% �""!��!8�������� � ���."�� �����$���� ����������!������$���)�� ����!����'!�$������"����������'���'������� ��$���������� �$�'�������������4������*�������!���"!����$����������������� ����$��������'!�����'������������'��!� ����)�����'���������������������)���*���!��'���)���!����������'!�'����)�����)�����$���!� ����$�)�������������$�������)���*��� ������"!�����������1��� ����$��������4������$���������'��������$����$�"���'���)���!#�������������������)�����)�� �����#�$���'!�������#�8B���!����G������*�B��'��������;*����$���'��������������$���������������������� ��)������������$���"�)�!$������)���������,�����'���*�� ��$������ �)���$�"�"������� ���������"���'����)����������������������'��!������� ��,������!���)*
��������� �'�$�����������������#�)������������'��� ��"�$�$�� $���� � � ��"� )����#� ������ ���� �������$!���������$�����*����"$�������������$�� ��)�����'���������$���!K/$��������$�������������� �����'���'���������� ��#����������$������� ��4�������$�)����$���$�����������*�%���$���+����"����� �$��� �$�� ����� ��� )����� � � �$�� '���� ��$� ��� �$�����������'!� ��������)���������������)������+C���)�$�'���������������$�� ����)����������������)������$���8����������������#������������������������!���������������;�����$��� �����������'��� ����$����������7�*�B����������'�����$������ ���������� ����������$���������������������'��!����������)��������$)���� ����)�������*��))�����$�)��'��� ��$����������������������� ������������� ���"�������.)�������$������������!�+C������ +C�#�'����$����)������'�����5��� ���'����)��������"$$������$�!��������$�������*
/�������������������$�������������������������.)��������������������$�������� �����������$���$��#� ������#������������1��"���������*�3$����$����'������������������������'��'���.)����� ��.�������� ��$�������*�3$���������� ���
����������� ��������������������������� ��
��$���������������������*�3$�!�����������$���8"��"�������������� ����$������)������� ���������G����$�����L��������'���!G#�$���)���� ��$�������G����$���������������������G���$���$��������"�$����"�$����$�����$���������#������$�������������� ��$�� ��)���������#� ���������������!�������;*������0�����'��� ������ ���������'�������������"$���������"�����!����������"$����$�!�"������������$������$����*�D��"���"$�������������$����$�����!�� ��$��(�)�����5���M��"�����������)�����(M������5����9�����������������@@=����������$��)��$���8'���� ����������;*�/$�����)��������������$��������������$���'�����������'��!�� ��$��������#���$����"������$���"��)�!�'�����������$������� �'������)�����#�)��!$���� ������ �$�� ��������� �'���� ��� )�������� ��� �����������������$����������!�������� �����)�� �����$�����$���$�*�����������B������$�����8'����)�����$���������!����������������������������*��)������$����$���#���$���'�������������������������#����������!������#���������������#��������,���#� ������!� ��� ������#� �������#� )������������HHHHH**
%���������������'���������������$������������������$���"$��$���"�������������'��� ������������#�"$��$�����������'�����������"$�����1��!�����))�����)������"$��$��������������!������$���� �����)�)����;����*
=����������(�$�����������$�������������"������'�'�!�$���������� ��)���� �������$����"HHHHH���"����������"���$������$����"#�����'!������)������������������)�����#'���'!������ ��)���������G��)��������������'���� ���."�������������'��!���9�*�����$�����"#�8����������"���$��������������)����!����$������������������������� �,����*�3$�!��������#82��������������1��!��������������!�$����$���"���$��������$����"G�������������)�����*�B�"����#�"��)�������$���������������������������1��!����$������$��"�!���������$�1��'���$�)�������#������$���)�����������'��!HHHHHH;*�3$�"��� ���$����)�������$����'������� ����"������������)��)������������$�)���'�$�����������������'��!� ����)�*�3$����������������$����',���� ���"������$��'���������� ��������������������)��� ��$���$�����$���3����������� ��$��C�!��%���!�0�������-���9>7#����<�*
��( �$% ##�!# �!%$�!� ��1��$ � ��($��!,!��2������!�����)'���� ���$�������4����$���$�����$����',�����$����$���)����� ��$����������� ��$��� �������*��������)���$����$���������������������������"���)�1����$���)�������'�����������!�����*�3$���������$���������� �����"� ��)�� ������*�� ��������� ������������#���)����)����������$����!$������� ������������$��$��5��#�"���$�����'������"����$�1��'�����$�������)��������� �$�������$���"��*�%$������������'������"��������������!����������$���$�����K�2����������������$���&�)���/������'��������$���8��������$���)����$�����'����)������� �$��;*
0�����������$�������� �����'��!�� �������)����������� ��'������$���)������ �������$������������!���)����))������������������������$��)������������)��������$�����$�
��)�*���������������'!�=�55��������$��$���������8%$�����$��%)����:����"�$������� ��+�)��!�@�$�����#�2��������#2���.)�������3�����;#�)��!�L�)���������G��������������������������'����)��1�����������$��� ���!�����>�*�2�'���0�������@��M�����G���)���!�+�)��!��$��)����������"��1�������������������'����������$��������������(C@:*�3$������+@+�<�<� �� ������!� �� ����� ����*� %�)�� ������ �������!�����'��� ��� �������� "�$� )�)��!� ��������� )�!� �������������������$��$����$!����������*�%$������$��'�����)����K����$������� ������)��������������$��K
3$�����������$��������������!��'�����$��������)������ ��!$������ �����#� C����#� +��� ��*� 3$�� �$��)����������������$���"��������!����)� ����$���������������$����"�����������$�� ����"���������� �/$������������'����$���!����������$�������)���������#����$����$���,��������������� ��K�9�*D�1�!�)�� '������� �$��#� 8$�)��� ���� ��$���������$���)����)�1����������$�)������L�����$�)��G��<�*�D���$��������#�8B�"�������$����$���)����� ��$����������� ������!#�����"$���1����� ����!�)�$��"�����������'����)������$��������!."���� ���K�%$������#�"��$�����)'�����������������������'��$�������$������������"�$�����)��������������)����!.�)�������������8��$�����"��� �$����;��<�*�3���!��$������ ����� ������� ���� ������ ��� ��)� ������������)������*� ��� �����#� "����� �$�� ��������� ����� 8)�)��!��$�����;�'�������� ��� ��)��$���4�)�����#�����$���������� ��� ����)������K
�!���#� !��! � ��( �#����$����������)��'�� �!����������$������������������'����������� ���� �����)�������� ��������������������4������*�*��$������ '���� ���!�� �� $�)��� '�$����#� )����� �$��� �� )�!� '��������'��� ���������$���'�$����*����)����������������$���"� ���������������$���>��!����������4�)����� ������$����=����"$�� ����"�������,��!�����$�� ���������'�������"�$�$��$!��������!����������$��������� ���������)�����'�������'���� �)�1���)�����$�������*�3$������� ��$�1����������'������)��� ��)��$��"��1�� ����������)������$�'��1��������G��@���� �@)����#�C����������B�)���:����$�����'�������� �$���������.@����.��������$����)����������"�$�)�������'��)��������������8�������������)���������������)�1�����)�����$��;*�B�������)����$��#�8�����������!#��'�������$���"$���"��������$������!�������������$��"��1���� '�����!���)�;�����*���)������������������ !#�8���$���$�������!���)�����$��'�������������!������������)�����'�$����#��$�!������������'!������������������ ����$������������ �)�����!������$�*� 3$���� �!���)�� ���� ������ �������� )�1��� ��� ��������!;*�B�"����#�������'�����������!���������$����$����������)�����8������;�� ��$��'���*����������������$��������'���$������.���)������������� �����!���� �����������4���������>�*3$����������)�� �������� ��������������)���������������������� �*
3$����������)������������������8'�$�������'���;�"$$�������!����������!�)�����������$���'�$����*���� �����������)��� ��$����$����������� ���$����������$��'��1#�8@�$��N����������:��������:�$���� �����'��)������A����������;
�� ����������� ���������������������������
����*��/�$��������������$��������#��$��������)�������$�����$�����$�"��8��$������;�� �������"$��������������� ��������# �������#������������#��)���$���"�$���$���#����������,�1��#����������������)�����G�� ��#������$����������������������#���� ��)����� $���� ���� ����� ��� ����$� �$�)*� 3$�� ������������������ � � �������'��� '�$����#� )����� ��������#����������#��������������4�������$��������'�����$����',��� �����������������$*�:�$������� ������$�����������!�'��������'!���!$������#���!$�������#�����������������������������������)����#�'���)����������!���������!�'!�����������F�*�3$����������$����$������������������)������� �����$�)����$!��������������)�����!���<�*�����������C� �������������$��� +C����������$������'�������������������$���$��#�� ������������)�������)���4��������'�$�������������$�� ������������������)��������� ������'��!����)�1��,���)�����$��� ���1�� �$���)����� �1�� �������� ������ )�1��� ����������������*� �3$������ ���� �$���������'����� ���������� ���*�3$��"����1��"��������������!����)�.M�����.:�!.������ '�������� �)!������� ������#� �������� �� �'���)��� ��4���'�$����#�"$$������'���������������$��*�0������ ��$�$!���$���)�������������L����G.�'�����!����������������$�������$���'�$����*���������"�$���������G���!����)�������������5����$�������$����� �����������)���*�3$���������$��������� � �$�!�$���������������*�3$�������� ,������ �"�4�)�����"$$����)��������������)���$����������������� ��$�'���#���������)������!���!���)�����$��'���#������������!��1��������$���'�$����*�@)�����#�������)�1��#��������'��'�$����� ���� �������� �� ��$��� ������ $���� '������������ ���!��4������*�/��'�������$����)���������!���)���������������)����������������*�3$������������1��$�"���������������������������"$����!���)����$��'�������)����)�����!� ���� !��� ��� '�� ���"����*� ��)���� �����)��#8?����������!���'�������$���"$���"��������$������!������������$��"��1���� ��������!���)��� ��$��'�������*�:����$�����! ��� �$��� �$���� ���� '���� �4������� ���� ��)�� )�!� ����� '�)�� �'�����������!#������$��������!� ���������!#�'��������� �����*�3$��)�!���)����!������������'�������������������� ��$�'�������'����� �)�������������9�*
����� #� � ##�!#������� �������� ��� '���.)�$��� ��������#� ������� '���� � ��������!#�'��� ������������.���)�����������!��"������������'����� �$������������� ����� �������������� ������������������7�*��)�����������������������$�������'��������������������!� ������*�����$����$�������� ������������)����!����������,���)����K�/����$��'����5���� ��$��)����������)����� ������� ��� )����K� B�"� "��� �� '������ ������������� � � �$�'�������'����� �)����������������'�$�����)�� !�����$�����$�����$��� ��)��"��1K��9#9������'���������� ������#����������!$����$��������!������"$��$����$����������"����������� '����1��K�/$���)��������������������"����$������$�����������$������������������������$�����)��)����)�!�'����������)�1��������������������������,���)�����'���������G��'�$������9��*
�!"!�!��!#�� �� �������������������� ��!��"�� ��� �������#$� ����������%�����
������&����'�(� !�������
�� )�������� ����*����� ��������������� &��&���'������$����������������+��, ����������&��������- ����.�/�&������01�2011�������
0� ��!���� ��������� �������� � � ���� ��'�������������/������� +��� �������3�0�����2�0���
1� "�� ��4��������� � � ���'�5����� �� 6�� �������7�� 8)���� ����������$$��&� ���� 5����9� ���� ����� : �������&��;���� �������������+�02�1��������"���5 ���������/���� ����
�� <�==���&���"��*�����������, �����*��������������� ��� ���;��������%� $� �:� ���������'�(� !����>�
>� )��������-� ��"����� ��������������� �������#��� �������������� ���������* ���������� �������>3��?�����2�@�
@� �� �����������$$��&� ���� 5������/��� �����: �������&���A &���=��,+�;���5����������������/"5�����"���� �����+��02�1�������"��5 ���������/���� �����"��
�� 5� ����� ���� ��� B�� &��&� �������� ������� ��� ��� ��������� ���� ���� �������������3�������02�?�
?� ��������� ��- ����"���������������"���)���C8)���� ����������$$��&����5����9�/��� �����: �������&��;���� �������������+� �02�1�� �����"���5 ���������/���� ���D�
��� ;�������� ���;���� ��9�� B � �� B�������� ������ ����%�����- ����%� $� �/���������'�(� !���??1�
��� ;�������;��*����� ���-�������"������-���E�� ��B������� )�$��������C8)���� �����������$$��&� ���� 5����9� ���� ����� : �������&��;����������������+��02�1��������"���5 ���������/���� ���D�
��� 5� ������ ��� ������ ���&����E�� �������������4���� ����'�� ��� ���'�����������'��������� �E��� ��������13����1��2���
�0� )����� ���-��!��� ��/��%�������<���� ���� )��� ���������$� �$����E�������&�&��&�����$�,��������� ����������� �E���� ���������3�>��?@@2���
�1� ������������2;���� ��B������������ ����������� �$� ��/������������� )-/� �� �B"/A��A���,� � �??�� C)�� : �������&��� *�� �� "������$$��2��
��� 5�!�+����5��A� �:���������5��� ���/����F�������������-����������&+ �E���������5� � �"� ����.�<� ��#���'�(� !�������
�>� "� ������� �����"�����=��*�����&�����;������*���$ �������&�������4� !��&�< ��$� ��2��� "�$���,� � ���>�� *��� :��������� ��������"������� E��"� �$����� �� ����
�@� "�������������G������,+�%�����:����$� ���6�� ����� ����������������'�"���������������+�����>3��>2@�
��� ;����� ��� $���� ��&� $� ���������- ���� ������ ���� ,���������� �������+�: �����������E� ���+�: �������1�
�?� �� ���"����'���� ���������� ���� $ �,����� )���� ��������� ���� �����'��, ���������������������������H��������CB�D�-�<� �����;����: �����'�(� !����13���@2�?��
��� 4��$��: ��5���� �I ��J��&��,���;;��B��� &��&���� ���������&����� ���2�����������: �����������$� �����������-�������������3�����?21?�
��� J��&��,����;���G������,+��"�<�==���&��C���>D�
��� :�����$���%������: �E��������&�����$�,����$ �$� �+���'�"����������0�����+���1�3�0�21��
�0� < ��������/���������5� � ���� ��'����� ��������������&���������&�����E� +����&��:����* ���� �"���J����-����130�?���@@�2���
�1� 5� �������"���������&�����������������$��������������&����E����� ����������� �������� � ���� ���B���� ������/�&���� �������@3�?��0>02>1�
��� ���� ���� "4�� -���� �� ��� ;�������%�� * ����� ;� ����;������� ��)�$�� ����� �� ������� ������ ��� ,���E�� � ������� ��� �� �+� ����&�� ��������$ � ������ �� ��#����� ���� ����������???3�����0�20@�
�>� :���;4�CB�D�B�������G������������- ��������-���E��� �: �,��������A$$� ���������� "$ ��&� 2�� ��&� �?�0�
����������� ��������������������������� ��
�@� :������ ��*��� ���������� ����������,���E��� ��"��������??�3�1�����0�
��� < ������;��"���� E����� -��+�� ���JB������������ )���E����&�������������������&�&����������� ���H��&������"�����������3��?0������2���
�?� :���$��:���5��������� ������������, ���������� ���������3�1��@@�2@>�
0�� 5� ��������� ��������� ���� $ �������� ���� ���� $������$������ � ����� ����&����E��������������3�?����
���!���, �� �$&!� �� �!���!�( �#3$�����$���"���'���'����� ��$��)�)'����� �����������)!�� 2����������������������� �"�)������� ��$���'��!��)�������"��� �$�� ����"��� �������� ���� @.)��� �$�� ��)�� ��������O�'�*�*�
�* �����!����������������$����',��K
�* ����$��������� �������� ���"$$����������!��K
9* ����$��������� �������'����"$$�!���"������1�����1��")���K
�� ����������� ���������������������������
������������ ��������������������������������������������������
��������������� ��� ������� �� ������� ������� ���������� ��� ������� ���������������� ������������������������������������������� ������� ������������������������ ���!����"#������� �$��������������������%��&������� �����&���������&������'(��%�)������������ ������*��������� �������������������������������+�������������������� ��������������������,-.-�/��*�01��$2�$����������334115��%,"������6����*��785�933�343:904�;�-*�<35��=���"785�88<91>>1>>��$�+���"?���*���785�933�343033:;@����*���+A��B���� @���-��@C��+A��B�����-��@��� �� � �� ���������������
����� !��� ��� �� ����� � ����� ���� � � �! � ��� �� ���� �� � ��"��" �#�������� ����������α$�β%&����&��� ����� � � $��$� ��# ������%�%�� ���� '()�*��& � ��α$�β%&����&�����$�'()� �� #�� � � � � ����� ��� �&� *�+�� �,� ��� ��������$�'()� ������� ������ �����!�����!�,� � �����!� ����� �����������'()�� �� ��#�����*�-� �.��!����� �� ������'()�,����. �� " �� ���� �� �� ��.�������'()*�-� �"� � ��� ��� ���!������, � ����� ��&���� #���� ��� �� ��.�������'()����/0%���� �����������&� ��� �� ��#��� �� ������'()����, �������� � �� ������%�#������ �����������'()���� &���������� ��� � "���*�&�� ����� ��,�� ����� ��� /0%��� � ���$� ��� �,� "� ���!�������� ���������'()����"������� �� ��.��1 ��. �!�&��������������#������$�,� � ��������!� ��"����!��������� ��������$�������������!�&���������������#������$�����!������������������ '()� ��� � �&� �� ��� /0%��� � ���*� 2� � �$� ��� ��!� ���� ��������$� '()� ���� ��,�� �� � �.&����� � �� �,� ��"�.���" �3�$��� ����&��&������ ����� ����,��������� ����. �� ���.���� �*�2�����" �����"������� ����������,������!�&������ �����&�����'()����"� � �������,�����%45%'()���� ���� � �&� ��� ��.��� �45%�'(*�', � �$� &���3 � �� ���������&����� ���$�� �&�������45%'()������������ 1 ��. ���� �� �&���� $����� �����.����������� �� �&���� $��������.������� �� �&�������45%'()����/0%���� ���*�', � �$������������ ��� ���$�#���������'()����/0%���� ����,�����!��������� ����.�� �� . � ��� � � � � � ��! ��� � ����.���$� . �� �$�&!! ����!��������� � � �� � ��! ��� %� ���� ��#��������'()���������"�������&� ������ � ������������'()����� &����� ���*
��������� �/0%���� ���$�'()�� ��.����$�#��� �&���� �
"��#$%!�&#"'�#������ ���� �������. ����"����� ������� � ���! ���� � ������ �� �"�� �� ������&���!���� ���� ����$����� ���%� " ��&���$� &��!���������� ��$��� &���������������$����. � ���������� �*+��!����� �� � .�%����&��������� ��$����� ����!�� � �������"��" �#�������"��&������� �. ��� � �� �����+�1� �� �6����� �� +��$��&���"� ���� ����$�/��3����6����� �� $�� � .�������� ����������3 ��%7�*
8������%� ���� ��" �#������ �� ���������&����&��� ����"���� �������� �! � ���������� �� ����� ���3# ���������$�,����&"���"���� &���������� ����������β%���������! � ��� ��� � ������&��� ������&����&��� ����� � � �*�9����ω%:�"� &����&��� ����� ����������������� $����� ��� $����� �� �$��� ������.&�������� � � ��! � ��� ���� ��� ��%� ��# ��3 ����*������ �����&�� ��# ��3 ����$��%� ��# $������%�% ����'()�$�! � ��� ������� ����ω%:�"� &����&��� ������ ��������&������������������������ ��������$������ � �� ������� ��.� ���� ������& ���������!�.�������� *�-� � � ���"���������&� ���α$�β�&����&���������'()� �� ��� ��� ��!�� � � ����� �,���� � ��&���� �&�� "��� �� �&��� ��!�&������ $�� �� �� $�� ��� $������������� ���"�� ���$�����,����&�� ��������*�'()����! � ��� �������!����� ����������&���!��"���#��������������&���� ���&"��;7<��� �� ������ ����! � ��� ���&���!���"���" �#������*�'�!����� �����������'()�� �� ��#��$�,� � ����, ����� �����������'()���&��� � ��� "���� ������ ���� ! � � #"� ����� ���� � ��� ��!�����!�$��$=$�:$���*
> ��&� ��� � ���� � � ���� ���!�� �� ����� ������� �! � ��� ������!����� ��������$��������. ���&!! �� ��������� �� ���� ������"��� ��� �� ��&���� �� �������� �����������"� �&����*�5�!��������?&������ �� �� �� � � ��� � � ���� � ���� . � ��� ��. � �� �� ��.����"�� �� ���&������� �" �#���� %����� 1 ��#�������� ����� �����$� #������ ������������ �� �&�� ��� �� ���"� ���� �� ��.����*�@&��� ��� $�α$�β%&����&��� ����� � � ��� �"��&� ���&���!�� ��.�������� � ������&!�$��#�������������$������� �&.�?&��&����"� ������"��&������$�$=$:$��*
+��&�&��������&����&��� ����� � � ������ ���"��&�������. ��.� �� ��&�� ��� � ����"����!�������������$� *!*�"�� �������� �� . � �� � � ��� � � �� ��� � . �� ���&��� ������ �����1 ����� ���������� &������"��� ����,����+�1� �� �6�������/��3�������� �� ��;�*�-� �����& ���� �����'()���� � ��� ��""�#���� � �=%����� ��������������� �� ��� !������.��������� � .��"�������&�����"��� ����,����+���������"��� ����,���������!����� ���"���� ���:�*�2&���"� ���&�� ����,�����$� ����� �� ������& �� ��� ������"��� ����,����+�$�'()���3 ��� ���� �"�� ������ ���� �3���� $���&$�� &������ ���"�� ���$������ �!�&����� ������"�� ���,�� �� ��&��������� �� &��#����� ?& �� �*������ �� � .������� #���"��� ����,����+������ � ����� ,���� A , � .�� �$� � &���� ���� ����� � �� �� ���&�"����� � ��� �� � "� � �� � ��'()%"�� ���� ���&�����$��$���*����0� &�1� ���%B��.���� �� $��� ���!� ������&�&�������'()������������ � �$�.&��������� &������������!������ ���7$�=$���*
9��� ���!����� �����������'()����������#���� �"�� �$��,�� � ����'()��������&��&���� �� ��� ����� � � ���� ������ ������ ����!�����!*�'()� #"�&� ���&��� �������� ��&������!�����!�.
����������� ��������������������������� ��
���������!��� �2+/C$���� ��%������� ��"�� ���3���� ������%B&�(%� �������"�� ���3���� ������� ���7$�:��,��� �����.����!��&�� ��������3%>�������� �=$��$���*�'()���� ����� ����&���� �� � "���&�����*�5�&�� ����� ���,�������'()�����.����4���!�����!���&��������������"���� �� � "����.&��������&� �������������� � "�� �����!�,���������� � "����;�*
-� ��� ��� �� � �����.&���� ��'()� ���� ���&��&���� � � ��� ���� � � �����" ������"����!��������� ������� �#���!�����!$������ �� ������ �� �� ���� � �� �� ��.����� �� �� � � ��� � � �*2 ��.�������'()����, �����&�� �������� ���������������&�������& �$�.&���� �.��� ������� �������������� �� ��.������α$�β�%&����&��� ����� � � ���&������'()��������, ���&�� ������� �� � .����*� ��� �� � "� � ��� ��&� $�, � ��� � #���� �� �� � ��.�������'()����/0%���� ���*
� �(�& )� "$��(�*#$�!�""�#"��� �/0%���0 ����, � ��&��&� �� ���7<�0���%�;7<����"� � ������!���&����� ����=��0����(&��� ���2�#�&� $�@%��'����� ����&��&� �� ��&���&""� � �� ��,�����*7<�� ����.��� � �&��@>5�$��7<���� �� �&�$��*�<����&��.����.��� ��������.�������3���������4�.�*�@�������� �� ��.�������&�� �$"����! �:%���� ����, � �&� �*����.���� ����� �� ����,���� ��&� �. ��� "���.�& �� � #��&���*
$� %����� ��� #���& '"�� �+��� �� � �" ���� �� �� ������$� �! ���$����!������3���$�, � �"&����� ������5�!���0� �����0�"�� �/��*�A��*�5�*�A&��$�2�$�D5+$�&�� ����� �,�� ����� �*(&��� �����#�&� �@%���'�����&��&� �� ��&�$�����.�����$�� ���.��� �� �&��������� �� �&��, � �"&����� ������4�.��>8A$D5+*�0&��&� �,�� �������� ��"����������&��.� ��&� ������� ��&� �, � �"��&� ����� ������ �����(&��$�D5+*�2�����E�,�� ��&.� �������� ��� ���1 ��,�� ���,���&� ����������� � #" ��� ���*'()�,���"&����� ������0� � ��0� ������$�D*5*+*
!��&�# "������������(� �� %����)*+� ��� ������ ����&�� '�"���� �-� ��������. � ��F�%�'G�'()�,���� ��� ��1 ������� ���� �� ��� ������'()$�,�����,���#���1 ������ ��%3 �� ������� �&���!�"� � �%�&""�� ��������������������#���1��!�! ��� ��*� -� � � �&����!� 3 �� �,��� �&��� �� � �&� �� �� �� ��� �� ��� ������'()�. �&���!�������� ��(�>'���-� �F�%
�'G�'().���� ��. ������� ��� ����,���"&���� ����'/A0*��5��&��&����� ���� ���'()�,��� ���.���� ��. �!���������!��"� %�����" �����" �40%25�*
�$�%��� ��# %�%�� � ��'(��,���� ��� ��1 �� �1 �������� �. ���&.����!�:�H������F�%�'G'()�,����=��H�����&��������&���"��� ����� ��.���������� �� �&���� �+8�������*�H�2�(+�/'����*�7H2�"�����&��"��"��� $�"'�:*�$H��������!��*�H2A��5��*�-� �� ������,�������� ��. ����,��!��� �� �� �� ����.��.��� � ��� ���H��*� -� � �1 � � ,�� � � �� �� . &��������������&���!����+�����0 ����"� "%��$������'(������ ������� �,���"&���� ����'/A0����� ����. ���.� *�5��&��&����� ���� ����'(�,��� ���.���� ��. �!���������!��"� %�����" �����" �40%25�*
�%' ��# %����%�%�� ���� ����� '(+��,��� � ��� ��1 �� . ���&.����!����H������'()��'%'()��,�����*�H&��������� � � � � ��! ��� $������*7H�2�(+������*�H2�"�����&��"��"��� $
"'��*�$H����7HI0*�-� �� ������,�������� ��. ����,��!��� ���� �� �����.��.��� ����=��H��*�-� � �1 � �,���� �� ��. &������������������'(+� ��� �� � ������� �,���"&���� ��. �'/A0*5��&��&���� �� ���� � �� '(+� ,��� ���.���� �� . � !��������!��"� %������" �����" �40%25�*
-� ���J&!�� ���� �&� ��!�&������ �45'��,����'()�45%'()��,���"� "�� ��. ����&.����!���K�����F�%�'G'()�77$����"�������,����7�K�����45'�����*��2�"�����&��"��"��� $"'��*�$��������������� �" ���&� *�-� �� ������,�������� �. ����,��!��� ����&�"������'()����������*�-� �45%'()��J&!�� �,���"&���� ��. �� � �� �"��� �'/A0����� ����. ��. �,*@���� �� ��� �������� �� �&� ���������� �!�&������ %'()��J&!�� �45%�'(�$�����������45%'()�,������&.�� ��,���=���������(+�/'���������K!������� �� �&���� �����*��2"�����&��"��"��� $�"'�:*�$����=������=�I0*�-� �� ������,������� ��. ����,��!��� ����&�"������(+�/'����=�����*5��&��&���� �� ���� � ��'(+�,��� ���.���� �� . � � ����"�� ���1����%������" �����" �40%25�*
)�,!��� "���� �5 ��� ��1 ����������������� ��.��� ����45%'()�����45%�'(�, � �� "���� ��. �'/A0�&���!���������� � �� � "��� ���5�0� ��&���"� % ?&���.��� ��,���� �*�<�?& &�������&��� ��������*�-� ���"&����, � � �&� ��&���!��!���� �����������!������ ���+��*�<��?& &�������&��� ���������������� ���>����<��� ������� ���������,���� �����������*�-� �!���� ���,��� ���.���� ���&����������� ���>�� ��� ���<����������$��:<����=�����$�����,���� ��������������& ���������*�@&��� ��� $������ �� #������������ ���>�� ��� ��:�<$��������������������7��������� ��� �����<�����,���� �������������& ����������*
� ��!���& ��%� ���-� ������#���&�����.�!/��0 �@�40%25����� � �����'(�����'(+$��� ����"� ��, � �� ������1 �������� �� �� ������� �,���� ���� ��($�%.������ �� ���� ��%�����&��� ����� �>5-@+������������:�I0*�-� ���#�&� �,���� �������� �" ���&� �����������?&���, � �&� �������� ���*�-� �40%0��25����� ����,���" ���� ��&���!���'/7�;��'/7;�=�40�25�� �� ��' ,� ���/��3���L�/���+��$�0+$�D5+�&�� ����� �� � ��������1�������������*�-� ���"&����, � � "���� �� �� �� .�� �� "��� � ��"����� � ��&��� �>%725$=����M��*�7�������M��*�7����������3� �������B�9�5�� ������@���$� 0+$� D5+*� -� � 40� ��J ����� "��� ���� ��� ���� � �" ���&� �, � � � �� �� ���I0$� ,���� � ��&�� !��� ����� ���������� ��������"��*���J ������, � ���� ������ ��"����� ����� ,������ ���� ��"���"&�! ��������������,��!���J ����*�-� �40� ��� �" ���&� �,���� ����������� �������I0���������������� ����� �� ���������� �����I0�����������I0$�,�����,���� ������7���*�D�� ���� � ���������$��� �� � �������� �����'(����'(+�� ������� ��,����*�������;*7������� �" ���� � ��$�$���*
@���� �40%25����� ������'()$��*�����������*�7�2���&������%�$=$�$7$:%" �����&�. �1 ���� ��# ����� �� �������� /@>'+��,��� ��� �� �� �� � ���"� �� ���� �� ���#�&� ��, � ��� # ������������������&.�� �����=������������� �" ���&� *+�� �� ���&.����� �� ����"� ��, � � #����� �� ��������� #�� ��������!������"������� ����� ���&��&��������*�-� ���#�&� �, � �� �����&! �����������"�������� �&"" ��� #�� ��� ��,����"���� ��������� ��&�� ������! �*�-� ���� �����"� ��, �
�� ����������� ���������������������������
� ������1 ��,����>5-@+����� ����. ���.� ��������� 1 ��. �40%25���$���*
+"�#������ �� 1���2 ������ ������#���&���� �0� ������� ����� ���� �� �45%'()�����45%�'(�, � � ���.���� �� . � ����"�� ����1�����������" ���� �� �)5��25�*�-� ����"� �, � ����� 1 ���������!� �?&����"� �2��������A0N������&� ������ ����. �������-� �)5���25�" �����!�"���� � ���, � ������,�����"����� �����! $�=*��3�L��� �����! $��=��L� #����������! $�;��L��&�� �.��3�� �" ���&� $�����I0L���������������� �" ���&� $�����I0*�(���! �����=�"*�*�*�,���&� ������ .&��1 �!��*�5��"� ��, � �� ������&� �����7��K������ ������� �,�� ���� ��������� 7��7���*��� ������$� ���� �""�� �� �� �� ������" ���"��� � ��&���!���'�������� ���! �"&�"��������� ���7K�����*�5" �����, � ���?&�� ������� ���� �����������������&�������� ���� ����! ������O����������������&����*
��� '�"�#������� ��������� #" ��� ����� ����. ���� ���� ��&�� ��'()�� ��.����*�/0%���0 �����&��&� ����������������, � ���&.�� �����"� %,��� ��=�I0������� ��'��3P��>����� ��5���5�&����'>55�*�/� %,��� ��=�I0��'>55�������.� ���.� �� ��� �� �� � ���.���� � �� /0��� � ���� ��� �� � �&������ �� �� #" ��� ��*�-� ����&.�����,�������� ��,������ ������������%���K2�F�'G%'()�����*7����'>55*�+��?&���, � �,������,����������� ����� �$�� �����&! �������H���M����������������I0$���� �� ��&" ��������,���&����� ���� � �������""�� �� ����������5�0�� � �� %"��� ���&��*�-� �� ��.��� ����F�'G%'(), � �� � ���� ��. �?&����� ��!��� ������������ ���� �����������*�������&���" �3��, � ����� 1 ��. �)5��25���40O0��25*
1���'�������(��3������#� ��� �/0%���� ����, � ����&.�� �����*7����'>55�,���&����,�����*�7��2���.����$��*����2���� ����$�*7��2������1� ���7*��K2�. �� �����=���������=�I0*�'�%'()$�7�K2�,����� ����� ������� ����&.������ ����� �������"� ������� ����&.�����,�������� ��&�����������������=���������=�I0*�+�� ���� ����&.����$�� ����, � �� "���� ������� ����&.������ ��&�������� ��������. � ��� ��.��� �� #��&� ������ �� ��&��, � �� ��� ��. �� � �� �"��� �'/A0��������� 1 �. �)5��25���40�25����� ����. ���.� *
�(�%)��)�,!�&������(���� ���(�# ����� ���#� � #����2 ������()*+� �������&�� '�"���� ������ ����������� ��1 �����?&����� �������. � ��'()���������"&����� �� ��.��� �$�, � ���.���� ���� � �� � "��� �'/A0�� ���� ��� � ����. �� ���$�������� ���$�����*�+����,�����@�!&� ��$�'()���������������"&����� � ��.��� �� ��� � � � "���� �� &�� �� &�� ������!��"�����������*�', � �$�!�&������ ����J&!�� ����'()�45%'()���������� �&� ��"��&���45%�'(���% �&� ��,������ �� � ������� ����=����*��'($��� �� �&� ��� ��.��� ���'()� �&� �,������ �� � �������� ���=�����$�,� � ���'(+$��� �#���1 �� ��.��� ���'()� �&� ��,������ �� � �������� ���=�����*'()� ,��� �&� �� ��� �=����*� @�� �� � ?&������������ ���������� ��1�������'()���������� ��.��� �$�� ������������, � ���� �� ������������?&���� ���������������%�7��K���,��&� �����?&������������������������� �,� � ����� �� ������!���?&��,���&� �����������" ���� ��������� �������� ����. �. �,*
!� � #����2 ������(�%"� ������"�#��4% ����'��+�1/�� 4�&������ ����J&!�� ���'()�45%'()������� �&� ��� ��.��� 45%�'(��, � �������� ��1 ��. �)5�%25*�5��"� ����� �"����!���� �!�&������ ����J&!�� ��'/A0�/ �3����, � ���� ��&�� �����! �����" �������������� 1 ��. �)5�%25����� ����. �&�� ��$������������$�����-�)5�%25�������!������� �! ��45%'()�����45%�'(�������&����� �����@�!*��*�-� �)5��������" ���&������ �� �! ���45%'()���, ������ �&�������F2Q'G�
,������@DE����:�*�+������������"���� ������,����@DE���:,����� ����� �����������. ������&!�� �������45%'()�������!������ ������������!� �,�� ���� �&� ������� �"�� ����:����$. ��&� ��� ���:��" �� ���&���. ���"� � � ���� �� ������, ��� �����! ������ ��:���" �� �*�-� �)5���������" ���&���� �! ���45%�'(����"�� �������!� �"� &�%�� �&�������F2Q'G�
,������@DE����& ����::*�(���&!�� �������& ���� � ���������� �"�� ������, � �.� �� �*
min0 20 40 60
CP
M
0
2500
5000 GS
X
DH
N
HN
E
HN
A
Fig.1: HPLC profile for the separation of HNE and its putative metabolites.
min0 20 40 60
CP
M
0
2500
5000 GS
X
DH
N
HN
E
HN
A
Fig.1: HPLC profile for the separation of HNE and its putative metabolites.
m/z440 460 480
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
446.2
464.2 466.2
Fig. 2: Electrospray ionization - mass spectrum of reagent GS-HNE and GS-DHN.
m/z440 460 480
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
446.2
464.2 466.2
m/z440 460 480
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
446.2
464.2 466.2
Fig. 2: Electrospray ionization - mass spectrum of reagent GS-HNE and GS-DHN.
!� � #����2 ������(��)*�)*�� ���)*+�'���!/�� �@��� �������� ��1��������'($�'/A0�/ �3���$�,����&.J �� ���40%25����� ���*�-� ����"� ��, � �������� ������ ����. ��&�� �$������������$����������� ��������� ������ �� ������1 ����"� �,�����J �� �������� �40*�+����,�����@�!�=+$���40$�'(� �&� ��,������ �� � �������� ����*������*�@�!*�=>���,��� ����!� �������"��� ������'(*�-� ���!���&� �����,������1���& �����;;$��=����������, � ��& ���2%0'��-25��� ���! . �, ��0�%0��$�2%07'������&��� �����.��������,� � �������. � �������2%0'=�� �" ���� � *�5��&��&������ ���� ���'(+$'/A0�/ �3����$�,��� ���.���� ��. �40%25����� ���*�-� ����"� �
����������� ��������������������������� ��
, � �������� ���������� 1 ������ ����. ������'(*�+����,����@�!��+$���40$�'(+� �&� ��,������ �� � �������� ���;*7�����*@�!*��>���,���� ����!� �������"��� �����'(+*�-� ���!���&� ����,������1����& ������7�����=���, � ��& ���2%07'������2%0'=�� �" ���� � *�5��&��&������ ���� ���'()�'/A0�/ �3����,��� ���.���� ��. �40%25�&�� ���� ���������1�������������*@�!&� �7+���,���� �40�"���� ���'()���*;;����������@�!*�7>��,���������!� �������"��� ��*
� ������!� ��� �� �� ��&��,��� � � ���� �� . �� ��&���!����������� ������ �" �3� �&���!�,������� � �������� �� ������ '()*��+����,�����@�!*�:$�/0%��� ���� ����� ��� �� ��.��1 �'()��������� �������� ��������� " �� ������� �*�9� ���� � ����, � ����&.�� ��,������K2�F�'G%'()$�R;�<���'()�,��� ��.��1 �����7�����,� � ������&.��������� �� ����,�������μ2F�'G%'()$�� �&�� ������� �� ��.�������S�7�<�'()����7����*D�� �� �� � ���������$���� ������� ���&.����$��� �S�7�<&�� ��.��1 ��'()� � ���� �� ��� �� �� ��&�*� -� � ��������������� �� �� � �������� ����&.������ ��&��,�����T�<LU�<������������ �,���� �� � �������� �����%����&.� ����������� ����������&.����*
Fig. 3: Gas chromatography - mass spectrum of reagent DHN
m/z75 150 225 300
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
147
199
23173 B
287
min6 8 10
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100 8.08 A
Fig. 3: Gas chromatography - mass spectrum of reagent DHN
m/z75 150 225 300
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
147
199
23173 B
287
m/z75 150 225 300
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
147
199
23173
m/z75 150 225 300
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
147
199
23173 B
287
min6 8 10
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100 8.08 A
min6 8 10
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100 8.08
min6 8 10
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100 8.08 A
Fig. 4: Gas chromatography mass spectrum of reagent HNA
m/z100 200 300
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100B
73
147
245
301
m/z100 200 300
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100B
73
147
245
301
min8 10 12
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
)*+�#���&����� �-� #���� �'()�� ��.��������/0%��� ���$�� ����, � ��&��&� �������������� �*�-� ��&��&� �� ��&�,���� �� �������� �� ����, � ����&.�� ��,�����%���K2�F�'G%'()�����*7����'>55*����&.��������� �� ����,�����%���K2�'()���=������������&� �����!�������������! � ���� ������.���� ���� � ���� ��. ��� �2--����� *�@��� ��&���!��� ���� ���'()� ��.����$����?&���, � �,������,���������&����� �������� ����������� � ��� �� �� ��&��,��� � "���� �� . �'/A0*�'()
m/z150 225 300 375 450
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100152
167 196
283
303333
373
403
m/z150 225 300 375 450
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100152
167 196
283
303333
373
403
Fig. 5: Gas chromatography mass spectrum of reagent HNE
min15 20 25
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
10021.99
min15 20 25
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
10021.99
min0 20 40 60
Unm
etab
oliz
ed H
NE
0
50
100HNE (1μM)HNE (5μM)HNE (10μM)HNE (20μM)
Fig. 6: Time and concentration dependent consumption of 3H-HNE in PC-12 Cells.
5 ���(�# ����� ��� #� � #����2 ����� �(� )*+/�������&�� '�"����� ��� �!/67� #�""� � @�� �� � ?&������������ ���������� ��1�������'()%� ��� ��� ��.��� �$�/0%���� ����, � ���&.�� ��,����7�K2�F�'G%'()������*����&.������ ��&��,��� "���� �������� �� ���������� ��������. � ��� ��.��� �� #��&� ������ ����&.������ ��&��, � �� "���� ����'/A0*�D"��'/A0� "����������� �� ��&�$��������&���" �3��, � �����!� ����" ������'()�� ��.��� ��@�!*�������� �.��������� �� � ������� �� ����� ��� ��1 �����������*�+����,�����@�!*��$���� ���������&.�����,����7�μ2�F�'G%'()$��:<����� ������������ ���
�� ����������� ���������������������������
�� �� ��&��,��� "� � ��� ��� !�&������ � ��J&!�� �*� -�&�$��J&!�����,����!�&������ ��"" ������. �����"��$���!�%������� �&� ���'()� �������������/0%���� ���*�> ��&� ��� �� ���/ �3�� �� �� �'()%�� �� �� /0%��� � ���� ,��� �� ������� �� � �! ��!�&������ ����J&!�� �$������������� �"����!��������" �3�, � �&.J �� ����)5���25������ ����������� ��1 ��� �� ��.��� ��"� � �����������" �3*�-� �)5���������" ���&����'/A0�/ �3����, ����"� ��������" �3����@DE��::*�$�,�����,�������!� ����� �Q������! ����� ���45%�'(�@�!*���*�����,������1����& ��� �:�*�� ������:*�� � �" ���� � $� � "� � ���45%'()����� �����&!�� �������!������!������� �����&�� �� � ���������45%'()*�E&���������������� ���!���������� ��������45%'()����45%�'(���, �������:�<����� ���J&!�� �,�������� �� �&� �����45%�'(�$�,� � ���=��<����� ���J&!�� �,���"� � �����45%'()*
�&.J �� ����25����� ���*�+����,�����@�!*���>$����� �&������,������@DE����& ���=��$���� �"����!���� ������1 ��'(+$�,��.� �� �*�-� ����!� �������"��� �������������,����&�����. �� ����������������� ��� ����'(+$����������!������" �3���������& ��'(+*
min0 20 40 60
CP
M
0
1500
3000
I
III
IIIV
V VI
Fig. 7: HPLC profile for the metabolism of 3H-HNE in PC-12 Cells.
m/z440 460 480
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
446.2464.2
466.2
m/z440 460 480
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
446.2464.2
466.2
Fig. 8: ESI+-MS of glutathionyl conjugates formed by the incubation of 3H-HNE with PC-12 Cells.
-� �� ���'/A0�/ �3���$�,��������&�� ������<����� ���������������� $���� �"�� ������ �� ���� �! ����'(�@�!*���*5��&��&������ ���� ��������" �3�,��� ���.���� ��. �40%25*�+���,�����@�!*�;$��� �� � �������� ��������!� �������"��� ���������" �3�,����� ���������� �! ����'($����������!������" �3�������& ����'(*
-� �� ���'/A0�/ �3����$�,������ "� � ������<��� �� � ��������������� $�,����� ���������� �! ���'(+�@�!*���*�-�������� ��1 �����" �3��&��� �$������������� �"����!��������" �3�, � �"� �$������� �������&.J �� ����40O0��25*�-� �!���������!��"�@�!*���+����,����"���� ������ ��%��� " �� ���" �3�,������ � ���& � �� ������� �� � �! ���'(+*� -���� " �3�,��� �&��� �
m/z75 150 225 300
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
min6 8 10
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100 8.08 A
min6 8 10
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100 8.08
min6 8 10
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100 8.08 A
Fig. 9: GC-MS of DHN formed by the incubation of 3H-HNE with PC-12 Cells.
m/z100 200 300
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100245
30114773
B
m/z100 200 300
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100245
30114773
B
min8 10 12
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100 A9.51
min8 10 12
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100 A9.51
Fig. 10: GC-MS of HNA formed by the incubation of 3H-HNE with PC-12 Cells.
-� �'/A0$�/ �3���$�� "� � ����!��<������������ $����"�� ����!��.��.��� � ��� ���� ��� ���� �"" ���� �� . � �& � �� �� &�� ��.��1 ��'()$����� ���� �&� ��,������� ����& ��� ��������� �! ���'()��=�����*�40%0�25��������" �3�@�!*�������, �������� �� � �������� ��������!� �������"��� ����������" �3����� ���������� �! ���'()$��&!! ����!������" �3�����& ���'()*
-,��� �� " �3��, � � .� �� ����'/A0$� �&���!�,���� �� � � �������� ����7=�/ �3��������7������/ �3������ �" ���� � *-� � �" �3��� "� � �� ��7�������<������������ *�5��&��&������ ���� ���� � �" �3������ �����. �� ���.���� �*
!��#���� ���������������&�� '�"��&��(�)*+�����!/67!�""� �( #��, � #���� ����� ��������� " �� ���� ��.������'()����/0���� ���*�+��� ����. ���.� �,� ��/0%���� ���, � ����&.�� ��,��������7�μ2�F�'G%'()������$�S�'()�,��� ��.��1 ������!�&������ ����J&!�� ������'(+�, � ��� ���J�� ��.��� �����&����!����;�<����� �� ��.����*����&.�������� �� ����,�������V2�F�'G%'()������$�� �&�� ���������� �������� " �� ������� �� ����!�&������ ���J&!�� ����������,� � ��
����������� ��������������������������� ��
���&��� ������ �� �,���.� �� ������� �#���������'()��'(+�@�!*����*�D�� ���� � ���������$����.&������� �� �,��.� �� �� ��� �� � � �&����� ��'()� ���'(� @�!*� ���*�2� ��!������������� �� ��, � �����.� �� ������� ���� �������'()��/ �3�������/ �3���*����&.��������� �� ����,�������K2�F�'G%'()����������������&� �����!�������������! ������ ����������!�&������ ���J&!�� �$��'($�'(+�����/ �3��*�', � �� ��.�������'()���/ �3���,������� �� ��. ���� �����&�� ��� � � ��������*�2� � �$� �7<� ��'()� � ���� �� � ��� ��.��1 ��&�� ���� � ���������*
��,���&���� � �����.��������=��$����������!��������� ���� ���� �����.���� ����� � ���� ��. ��� �2--����� *
8���������� ������ ����&.������ ��&������.���������� �����%�� �� ��/0%���� ����� "���� ����'/A0����� ����. ���.� *�(����! �,���.� �� ������� ���&���������������� �� �� � ����/ �3���%��*�-� �)5���������" ���&����" �3���.���� �������.���������� �����%�� �� ��� �����������������,�������� � �� ����� ��.&����� ���������45%'()�45%�'(�@�!*��=�*
m/z150 225 300 375 450
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
303
403333373
283
152
167
196
m/z150 225 300 375 450
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
100
303
403333373
283
152
167
196
303
403333373
283
152
167
196
min15 20 25
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
10021.99
min15 20 25
Abu
ndan
ce (
%)
0
50
10021.99
Fig. 11: GC-MS of DHN formed by the incubation of 3H-HNE with PC-12 Cells.
X Data1 2 3 4
Met
abo
lites
of
HN
E (
nm
ole
s)
0
2
4
6GSXDHNHNAHNEPeak VPeak VI
1 5 10 20 nmoles HNE
Fig. 12: Concentration dependent metabolism of HNE in PC-12 cells.
1�����(�# ����� �(� ���� &�� '�"�#� � ��8 ��� (��� ���&�� '�"��&��(�)*+�����!/67�!�""� �-� �'/A0����������" �����"������� � ����� �� �� ����. ���� ��� �� ������� ������� ���J��� ��.����"��&�������,���� �����������'()���/0%���� ������ �45%'()$�45%�'(�����'(+*�-��� ���� ��� .��� ������ "���,� �� ����� �� ��� �� � �������� �� �� � � ��.��� �$��� �/0%���� ����, � ����&.�� ������������=�I0�,�������.�������+8���.����$�7��μ2������ ����$����μ2�$�+A�'. �� �$�7�μ2������0 ����� �/�7�������1� �7���K2�����*7����'>55$���� ��,�����7� V2�F�'G%'()�,������ ���� �� � ��&�$������� ����&.�����,��������& ������������������=����*�0 �������&.�� ��,����'>55�&�� ���� ����������������� �� ���������*����&.��������� �/0%���� ����,����7*��K2�'()$�,���
X Data1 2 3 4 5 6 7
Abu
ndan
ce (
%)
0
20
40ControlSorbinil (50 μM)Tolrestat (10 μM)
GS
-HN
E
GS
-DH
N
DH
N
HN
A
HN
E
Pea
k V
Pea
k V
I
Fig. 13: Metabolism of HNE in PC-12 cells treated with aldose reductase inhibitors.
-� �� ��.�������'()����/0%���� ����,��$��, � �$���!��������� ����.�� �� . � �� � +A�'� ����.���$� . �� �*� @�!*� ���� -� ����������� ����/ �3�������� �"����!���'(+�� �� �� ��. W�7<����� ����"� %���&.�� ��,����. �� �������"�� ��,������ ��� �� ��,����F�'G%'()���� *�����������$��� ��.&����� ��45%'()�����/ �3���,�����!��������� ����� �� �����. �� ��� �� �� ���"� �� ��� ��"�� �� �� ������*� >�� �� �� �� � .� �������$�, ���� ��������� �����������'(+��������� 1 ��. +A�'$� ���� ����� ����.����� ��'(+� �������� � ���� �� ���� �"����!����� �� ������ �!�&������ %���3 ��� ��.���������.&����� ���/ �3��*
GS
-HN
E
GS
-DH
N
DH
N
HN
A
HN
E
Pea
k V
Pea
k V
I X Data1 2 3 4 5 6 7
Abu
ndan
ce (
%)
0
25
50ControlBenomyl (5 μM)
* (P<0.001)
Fig. 14: Metabolism of HNE in PC-12 cells treated with
aldehyde dehyogenase inhibitor benomyl.
���&.�������/0%���� ����,���������1� $�� �� �� ���� ���� ��'()�� ��.����*��+����,�����@�!*��7��� � �,�����W:�������� �� ������ ��.&����� ���&�� ��.��1 ��'()*�2����1� �������!��� �����.�� ���� �!�&������ ����J&!�� ���������*�+��!���������� �� �� �W���<��,��� ��� �������� ����������'(+� ��������1� %�� �� �� � ���� ��� ��"�� �� �� �����*�+��� �"����!����� �� �,�������.� �� �����/ �3������������������1� %�� �� ��� ���*
�� ����������� ���������������������������
�&�!%��&#"-� �� � �"� �����#������ ���� ��$����,�����"��&���������!�� � ����� �# ! ���" �� ��8�5��� �,� ��������#������� � �� �$������ ��&� ������ �� &��!�������� �� ������� ���$����������� $� ��.���� ����� ! � ����� *��#������ � ��� ��� ��� ���� ����!� ��"����� �� ��� �� �&�. �� �� � &�� ! � ����� � ����� ��������� ��1 ��. ��.����������� ������&�&��������� "��������.��������������" ������"�� ���������� �� ��� &���$���3 +�1� �� �P����� �� �+��$�/��3P����� �� $�A , �.�� ��� ��� ���� �� �$��� ��"������� ������� �����+A5�$�����'&����!����� �� �7$��%���*
-� � �� ������#������ ���� �����X"��%�������� ���Y$��&������ &������ �. ��&�&����� $�� �� $��������� ��&��� ���,� �� �#������ �����! � ����� ��&� ��� ��� ?& �� ���� &�� ! %� �����*�/ �#���������� ��&����� �.��� ���"���$�������&�����!��""�� ����� �&� ��! � ��� ����!�� �� ����� ���� � � �����!,������ ���������"����������%� ��# �� ����'()�*�-� "� � �� ���'()�������� �� �����.���������& ������ � .��"������&��� �� +�� "��� ���$� ���� ��� �"����� ���� �� +A5� "��� ���*���&������� ������ ��&�� �� ��,� "� � �� � �� '()� ��� &���.����� ����!� ���������� ��� �"��?& �����+�$������ �� �"�������� �� ���&�������� &��������"������+A5$����A , �.�� ����� ������������.������� ��� &�������/��3����P����� �� �/�������������&� �A , �.�� ����� �� ��A>��*�-�&�$����� �� ��� � ����'()����� &�� ! � ����� ������ ����������&������� �����������.&������'()����.���������& �������� �"���"� ���!������ ���#������ ���� �������� � ���� �� �$����� �" ����� �'()��������������.����������� ���� "����*
2������� ���&�� ����&��������� ��� � ���.���� ���������"���� ��� ���� � � ���&������'()$�2�+��������� ����� �������� ��,���� &��!���������� ��*�', � �$������ ����3�,���.&��,� �� �'()� ������&��� � ����� �� ��� �� �"���! � ������ �� ���� �� "�� ��*�-� ��#���!�����"����!����� �� ������� � ���� � � �,&���. �� " �� ������� ���� ��� ������ ������ �� ���*�9 ���� �� � �� � #���� �� �� �� ��.�������'()� ���/0%��� � ���*�� ��������������� �.��!�����"���,� ��,������� ������ ������� � � �� ��.�����,&���&��.� �&�� �� �&��� �� ��� ���!��
,� �� ������.�������� �% #"� ���������� � � �� ��.��1��! �1 � ��,&������ ���� ���"����!����������#���!�������� ���*
'()�,���&� ��������� ��α$β�%&����&��� ����� � � ����� ���� "� � ����&"��;7<����� ������&����&��� ����� � � ��"��&� ��&���!������"���#�������)�� �.�& �$� ����*$��;;��*��&���!�#��������������������������� #��"� $�'()����! � ��� ��������%��� #� ���� ��������� � � �����!� #��*�5��� ���� �����"� �� � ���"��� $�'()����� ����� ������#������ � � ��! � ��� ��&���!� ��"��� " �#������*� ��� ��.�� �� �"���� &�� �,���!�&������ $�����,����� �� �� $��������� ������ ��� �� ���& ���"�� ���$� ���� ���"�� �� �� ���� � � �� � ��#��� ���� ! ��#�� �� ����=�*
-� �� �&������&����&� ���,������� � ���� �1 ������"���,� ������.&� ����� �� ��.�������'()����� &������ ���*�+����������� � ��&� ���'()�� ��.��������/0%���� ����,���������������� '()�,�����"��� ��������� ������ #��&� �������� ����&.����� ��&�*���� ���������" �� ���Z��<������ ������������ �,��� ���� �� . � �� � � ���*� -� � � ����� �&!! ��� ����� ��! �&���� � � ��! � ��� ��. ���"���" �#����������� ��� ��.���"�� �� �������� �. �� ��.��1 ���������� ����� #��&� ������� �� &������ ���*
�� ����� ���J��"���,� ����'()�� ��.��������/0���� ����"" ������. �#���������'(+*������ ���� �$�� ������������&���� ���$�'(+����! � ��� ��. ���� � � �� � ��! ��� %����� 1 �#���������'()��$�$��%���$��������������� �1 ������"���,� �� �. �� �"���.� ����'(+������������� &������ ���*�-� .�������������� � ������� � � �� � ��! ��� �$�����&���!��� ��������������� � � �� � ��! ��� $�,������� �. �� �"���.� �������� 1��!�'()�#������*�-������ ,������� �!�� � ��. ��� .� ����������������� �"� � �� ����� ���������������� � � � � ��! ��� �����.����. �� �$��� �����������'(+�,����!��������� ���� �&�� �*���������������� ���������������� � � � ! ��! ��� ��$�� �&������!������!�������*�/��3�P����.���� :$��$�7��������,����������� �.����� �������������. �#���1 �. ��&�������� ����� � � �� ! ��! ��� ���� � � �� � �! ��� ��*�@&��� ����&�� ���� �� ?&�� ���� #���� ��� ������.&������" ��������1 � ������� � � �� � ��! ��� ������� �� ��.������'()��������&��&���� � � ��� ����� � � �� ���� &����� � ���*�#���������'()���������. ���&!! �� ����. ������ 1 ��. � ����� �/�7��� �:�*��&�� ����� ��,�� ����� ����.����� �� ����� �/�7���,���������1� $�����%� � ���� �/�7�����.���$��� �� � "������� � ����.�� �� �� � #������� ��'()$� .&�� ���� �� �� ���� �!�&�������������'()�������, ���,��'()� ��.��1��!���"���� ����� �� ���*��-���� ������� ���,� �� �������������&!��" ������� �"�� ������ ��/�7������.�������,��,��� ���� � � �� ��.��1��!��.���� ��� �� � � ���$� ���,����� ��� ����.�������/�7��,&���. �� � � ��&������ ��������������! &�*
5����������� ��� ��.��� �$�'(+�,���������"��� � #��&� ������� �� ���*�+���&!��������������� ���!������,����. �� ?&�� ����� ���� ��� ��" �����������"�� ��������� ����������"�� ��$��������3 � �������� � ���&#���'(+�����!����������� ����������!���� . �� ���� �� ��� "���� . � �� � ���� � ����� �����"�� �$� ,������� � ����!� $����&"%� !&��� ���&���!�#������ ���� ��*
GS
-HN
E
GS
-DH
N
DH
N
HN
A
HN
E
Pea
k V
Pea
k V
I X Data1 2 3 4 5 6 7
Abu
ndan
ce (
%)
0
25
50ControlMiconazole (0.5 mM)
*
*P<0.001
**
Fig. 15: Metabolism of HNE in PC-12 cells treated with
cytochrome P450 inhibitor miconazole.
����������� ��������������������������� �
�������������#������$���J&!�����,����!�&������ �45'������"" ������. �����J���&� ���'()�� ��.��������/0��� ���*�9 ��&������������� � �� ����W�7<����� �� ��.��1 ��'(),�������� �������45'���J&!�� �*�-� � #� �����,�����'()�����J&!�� ��,����45'������ � �� ���������"���.� ��������.� �� ���� ��� ����%���$�� ���� �����������&����� ���� ��*�9��� �'()�"���� &�� �� �����,����45'���������2���� �����&��$�������. ��"�"� ������������� ��&��������������45%'()�����& ��!�&������ �5%������ ��� %� ���� ������� ���$�,����� ����� ����&�����������:��H��� ��� ���� ��"���� &����� ����*5 � ����!�&������ �5%������ ��� ����� �. �������1 ������ �.����*['()%�" �����[�!�&������ �5%������ ��� ��%�H������������7\�����&�����$��&!! �� ������� � ��� ���" �������� ���� ��.��1 ��"���" �#�������"��&���$��������"� � �������� �.����$�����&!��� ������1����������� �3�� ����"�" ��� ������ �� &����� �1 � ��� ����. ��, ���������� ��1 �*
)5�%25���!�&������ ����J&!�� ����, ������$�������������45%'()$� ��!��������� ��&���� �� �� � � �&� �� ���� �� �� ��J&!�� %45%�'($�, � � ���� � �� � �� ��� �� � ���&.����� ��&����/0%���� �������&.�� ��,����'()*�-� ���&����45%�'(�� �� � �������� ����&.�������/0%���� ����,����'()�����"���.� ����������� ������� ����������&����� ���*�-� � �&� ����J&!�� $�45%�'($��&������� � ��� ����������� ���� �&����� ��45%'()� �� ��J&!����� �� �'(�,����45'*', � �$��& � �� ���� �� �� � ��J&!�� �� ��� � � � ���,��!� �&����$�������&���3 � �������'(��&����"���� &�� �� ����,���45'$���������� ���� �� ���$� �1 ����������� �������� ����&����������. �, ��45'������'(��� �����. ��� ����� ��*�-�&�$����"" ����&���3 � ������45%�'(����� �������� �������������&���. �, ���'(�����45'*�-������ ,�����&��� ���&""�� �. �&��.� ���������������&.�������/0%���� ����,����F�'G�'(�������� �&�������� �����������45%�'(�����������,��*-�&�$��� �������3 � ��&� ���45%�'(����������"" ������. �1 � %����� 1 �� � �&����� �� 45%'()*� -���� � �&���� ������������������ �� ���������������&����� ������������ 1 ��. �� �"� ��"���,� � �1 � �+8*�', � �$�&��.� ����������,��������/0%���� ���$�����������45%�'(������������ 1 ��. ���� �� �&���� ����� �"� %���&.�������/0%���� ����,�������� � �&���� �����.�������.����������� ����������������.���45%�'(�������*� @&��� �� ��&�� �� �� � � ?&�� �� �� ��� ���!�� � �� .��� ������"���,� ������� ������� �����������45%�'(���� &������ ���*�2� � �$�����&!�������! ������������� ���J&!�� ,���� �� � ������� �� �&� �����$��� �� ��.������!�������� �������� �&���� ��������������� ��������. � ���.���� �*�(�45%'(+����&����, � �� �� � ������/0%���� ������ �� ��,����'()*', � �$�� ���"�&������������'(+�������������� �� �� �� ���� . ��� �� � �������� �&��� ���'()%�� �� �������=$���$�.&��� � ��&������� �����#���������0 �%4� %'()�����(%�� � �%0 �%'()����� �� �����45%'()*��&������������������!&���. �, ���� � �"���.����� �$�.&��� � ��� � ��$�������� �����$����� �������� � �� ����#���������45%'()���������������� �'()������� ����� 1 �� . � ��� ��� � � �� � ��! ��� $� ���� ����� �� ��J&!�������'(+�,����45'�� ����� ����� ��� ���" � �,���'(+*
�&�������������,���������&.�������/0%���� ����,������!� ���� �����������'()����,&���. � #" �� ��&�� ��"����!����
���������������� ��,���� ����� ��#������ ���� ��$�� �&�� ������ ����� �� ������������� ,�� ��.��� ��/ �3����������*+���&!�$����&��&������ ����� ������ � ���"&������� ����. � ���.���� �$�/ �3����% �&� ��,����� �! ���'(+%����� *�-����&���. ������"�������&� ������ � ������������'()�,� ��� �45-������#��%� �&���� �� ��.��1��!���"���� ���� #��&�� �$"�����&���� �&�� ���� ��������������&� ������ � � �#������ ��� ��*
�#9��8"��%&��� �-� ��&������� �!��� �&������� ���$�������������&� ���-#���! �8 � ����$�A&�3�,$��������3 ����� � ������� �"� � ���,�3*�-���������"�������� �"�J ���,�3����������� �&""�� ��. �05�8�( ,�9�3�/�J ���(9/%=�������������0&������2 ������ 8 � ����$�( ,�� ���*� -� � � �������� ��.���� ��������� �. �2�*�8�J ���2���������������3�,� �! �*
�(+(�("!(��� � ��������� ��� ����� �� ��� ���� �� ��� ��� ���� ������������� �
�� �����!��� ���������� ��������� ��� ���� ����"������ �� ���� ��#��#� �!���������� ����������$����%&�$� �!$���������'��������(��))�*+�),� %-)&%.��
�� � ���������������/����0(��1����2��������� ���������������"����������#���3�$��� ���������"���������!���4�����3&������$���#�# �����&�� ���������$��&�%&��$� �!$������&�&������������������ ������������������������� ����� ���������*����,++)&+���
+� 5������6���'�����7� ����� �������������������8���7����� ��#�������������� ��������������������������#���#� �!�������&�� ����������$���%&�$� �!$� ���&� �&�������� 9%&�:;,� ���� �� ������� ��������&�����$4�� ���������������%&�:&7��������������<�7�������� �7������7������7 �3���(��'�������������-*����,�.-��=�.--��
%� 1���>��1������8���1$���'���0�������������2���������������:���7������$�����0����������0� ����� ��������&%&�$� �!$&�&����������������' ���� ?������ "$� ����#�� 0�������� ��#���� $� 1�@���� �� �����7 �#�$�������� ��# �$�?������8�����#��� ���� $��������5����?�!��������-��)�� .��&.���
�� 6�"������ ��� 8� #�$� ?��� ���"�� ��� A��/��� 8(�� � �� ��� ��$���'��� ���� ������� �� �����&%&�$� �!$&�&�������� �� 0���&0�#�������������5����?�!��������-*��),��%%&����
-� � ����������������� �����B��7�1��������8���"����������#���#� �!�������# ������� %&�$� �!$� � ���&�&�������� ��� ��������� � ��� ��� ��� � (�� '����������))���.+,����)+&���)��
.� � ������������B���3�������A�� ����(8���� ���� �������/�������# �#� �����������$��� ���������"$�������� ����������'��������� $��)))*�+��,%�&�%�
�� ��$ ��18��C����/��0����� ���A1�����������%&�$� �!$�������&�� ���������������#���#� �!������������# �������� ����� �����������4����� D����������(��� �������)).*�-�,��)�=��).�
)� E� ���/���������� ����F������6�� �������������������������������%&�$� �!$��������# �����������������A� /���������������A ���������������F����))-*�)+,�-)-=.���
��� ���4��/������' �������(��8� #�$��?���:��������������������"�������� ���&%&�$� �!$&�&�������� "$� " ���� ��������� ���� G ��� 5���� '����� H8�������*+),�)�+�=�)�%�
��� A��� � �F�� � �������� 1A�� ���3�������� �� � 5���!� 5�7�������� �� %&�$� �!$&�&�������&���������:�����������'� �� �0$���������"$�G������������������ ���������?�7���(��������A ������I��(��'�������������-*���,� +���%=+��--�
��� J$������ 5�� ��$����� 8�� 6����� E�� ������ �� ��" ���� $� ���7���� �����#�������� �� �!�������� # ������� ��� ���� " ���� ��� ������ �� �$�������$�� �#�$���� �#������7$����-*��-,���.=��%�
�+� 1����:�(�������"���E��1����8����������������#������ ��������!�����������7������# ��������7������� ��������������� �" ��������������������G ���5���'����H�8�������*�+),%)��=�����
� ����������� ���������������������������
�%� B��������? ��1$���'���8� /��"� $�B5��1������8��� �� ���������������%&�$� �!$�������������� ���������� ���!����� /� ������#���#� �!���������������" �������8������7������� �#�� ����������� �$���4����� D������������ �"��������7��7����-*�.,���)%=��))�
��� �"�����8��'���� �����0��� �������������A +6KA6LK:56�K����7�����7#���3�$�� ��� �� ������ ��� ���� ��� � �77� � # ��������� "$� ��&� �������� �����$�&1&�� �������������#��&��#����������7�������:&����������!��������� ����������� ���!����$,���#����������� ���4����� M�����������G ���5����'����8������.*�%�,�+.�&+�%�
�-� ��� ���5����� ������03���������C�����/�A���������%&�$� �!$����������&���������&���������0 ��&����#��������#�#������"$�# ������7��!#� ��� 0�!!� ��� ���� �������� ��� ���� �$������ ���� ���� "�����7� ��� G���'��������� $� ����*� %.,�%+&��-�
�.� � ��������� ��� ����� ���/� � '�� '�����7� � ��� � A �"��� ��� 1�#��#� �!���������� ����������$���������!���������� ����������������7���� �, ������������� ��������������(��A�$���������*���+�,��-��&��-�)�
��� � ��������� ��� 5������ 6��� ?������� 5�� ��� ���� ���� �"������ �� ������ ���������������"������$#� # ���� ��������������� ���������������������0��"��������-* ��,)��&)���
�)� (���� �A��J!���������� �������A� /�����M����������������� ������+*��+,��-&+-�
��� � ��������� ��� 0�!��� '1�� ���� (�� ��� ���� 8���"������ �� ��#��� #� �!�������# �������%&�$� �!$�������� 9�:;� ��� ���� $�� ��$���,�5������������ ����������G ���5�����'����8�������*���),�-%�&-���
��� ������ ��6��'�����5��?��7�>1����������������� ����������������"��7��� $������� ������������#����������������# ������������7���� ���5�������*)�,�%�&�%-�
��� �� ���$�0A��6 ����0(��A��� ����05��A ��!�����&������������#���#� �!���������� ��������� ��� ��#����$���,� ���������� �� %&�$� �!$�������&� ���������������$��&# ������ ��������� ����� 5��� ?�!����� �)).*� ��,� �)�&)���
�+� ���#�$�'A�����3� ��'(��A��� ����05��:������&����������������������#���������� � �!� �������� � ��7���& �7������� /������&�K�� �������$� ���� %&�$� �!$���������(�'������������.*����,�)��&+.�
�%� ���3� �� '(�� 0�� �� (��� A��� ���� 05�� 5������&�#������ ���������� ���"����� "$� %&�$� �!$�������� ���� %&�!��������� ������� � ���&���/��7���� ����"����#��$�� �4������������5���?�!��������.*��,����&���)�
��� 8�������(�8��0� $��:8�����/��� ��������8(�A��/����� ��8���"�������%&�$� �!$&�����&�&�������� "$� ���� ��� � ����� �$����� 8�������� �� ��0�#�����������7�������0N�������"����$�������5����?�!��������%*�.,� ��.�&��.)�
�-� ������� �����#�����1(��?�����������������$���� �����A%��������$4��!����������O�P&������ ����������$������� ����'��������'��#�$����.*%-%,� ��.&�)-�
�.� �3������E���E��7�E��?�3� ��6���������5�7����������%&�$� �!$�������&�����������7�����7�"$�7������������&� ���� ������G ���5�����'����8�����%*�+.,�-�.&-�)�
��� ��� $�(��G� �����4�E��0�" ��3� �1��������� ������������������� �������#���3�$����%&�$� �!$������������"������������� ���������5���?�!�������+*��-� ,+��&.�
����������� ��������������������������� ��
������������ ������� �� �� ���� ��������� ���� ��������� ������� ��������� ��������������� �������� �� �������
������������ ����� ������������������������������ ������������������������������� ������������������ ���������������������������������� ������������������������ ���������������� ���!�����"������������ ����������� ���������������#����������������� �����������������$������%&&'''(����%')*+(,,-',&.%���/���0��1����������2�����"��"� ������������� ���������
���������������������������������������������������� ����������������������!��!��������������!������"�#����$�����$����������������%�������$��$����������&��������������$$'��(������!!�����)�����%$'�����$����!��������������!�������������*+#�������"� ,��� ��� �!� ���� �������� ����'� ���� ��� ������� ��������%������$��!!������!����-������&��������(��������������������'�����$����������.������.�������������!����"��������/0�������1�����'��������������������!���$��#��������������$$'�!������'����!��������������������������'�������������' ���!���������$�$!�"�*�����$���������������2��$��$�����!���$$��������"�.���������������������������)���������������!3�-4����'�����)����������������%�������$��������!�����������'����������(��'����������%�������!�$����������������'�����������!�$������)��$�������$��-��&������5����������-��&������".����������������������������������������.�����"�6������������!� 3�-4�� ��'�)� .������ ����� �$��� ��%7������ ��� ���������%������$��������"�8������$����������(����������������!�����������������%$�'��������������������������!���(��'��.�������������������������'����������.�����"�+��������������!�����������'�����������������������'� �� ����&�������(�����������������!�������.�����"�. ����)��������$������$�����&��������������������������'���������������������������������������������.�����"�#�$��������������������%����!��������������$���������$�'�.���������������������. ���������%�����"��9���$���!�5�������������&������������������������$�����������%$������.������������������$��������%$�'��.���6���$$�����$���������������������%������$�!������������!!��������.����������������������'���.�����������"�9�����'��.������������%�'���������$����!$������$��%�����������������!��������������������$���!�����������$��$��������"
����� ���!�8������$)�*+#)�:$�������$�����&�)�5������������&������)��6��������)�*���������"
� ��!"#��$! ������������%�����(�����$'������������������� ������
����������������������������!��!�������������%�%'�/ )��"�������� �(������� ������ �������$� ������ �� ��������$'���������������$�����������%����������$��'�����!������������%�%'"�:��$����(��������$���������������������1�'�������$���$�������������������������������$��'�!���������������������!���$������$�����������������$��(��������������������� �!� &������� /�-��"� ;� ����'� �!� �%�����$���� ������%������$��%�������������%�������������������������������$$'��(���������&�������/4- ��"�6����������������������� ��������� ������� �!� ���� !�������$� ������� �� �������$&��������(��������������/ ��"�9������������$����$������$������!!������%���������$����$$'����������"�,��������������1����$�����!����%���������������"������������������)���������������������-�� �������'���������������'���������������$��������������������$�������������������!!�����"�,������%��������������������������&�������������$��������������� ��������'� ��� $�������� / <�"� ��� ���� �������� ����'�����%�������$�����������!������!!�������������������������������!!�����������3�-4����'�"�,�����(�����!$���!�&�����������������(����������$��������!!�������!���������������%'��%������. ��!!�������!�&�������������������$�"�;�'��������������������!���������%$����������������������%'����'��!�.�������������!����������$$'��(���������"
,���������������'������������������#��������������������������%�������$��!!������!�&��������(���������������������'�����$$�8����+���$���'�/8+��� �"�,�����(�������������!�������������%'����������!������������$$'��(������/. �������$��������������������������%�������$����������������������!!����!��������������(�����������"
���%�$�&� � " �%�'!"�
�� ���"���� ��������������� � ����� �
;!����������$��!�����������$�:�����*�������)�����������������'������������������%����#�������"�5�$������!���$�������������0-����������-4����'���$������������������������������������������!� ���$�������!���$�����"�;� ��������$���-���1��'�$�)���������������������0�=���*)���$���������'��!<0-00>�������������"�.���������������/.������������������������$�����0��������������/.�������������������"�,���. ������������������������������������$$�3�-4����'�����"�.��������������� ���� �������� �����������.���������������"#�$��$')�.�����������������������������������3�-4����'�����""
6�$'��������$��'�.������������������!�����������'����3�-4���'���$����)����'���1�.������������$�����������"�?��������.�/�@ �������.��/�@ ����$��������������$�/�@ �������������%7��������������%������$�����'"�.���������������������0���� �� 1�� ��� �������� /3���4��� ����� ��$����)�*�$������*�����')�A��)������)����$$'�!������'������!�������������������$��'��$$���������$���'� �"�8������$���������������������� ������� ��� �$)� ����"������ ����������� ��������&��� �� ���$�%������'��!����������$�������!�B���������'������� ��>�!���$���������������%�����"�:2��$��$�����!����$$��������������������$$'����������$����"�8����$����!�$�%������'�����$�����/+�����%$������+���3-��)������� 4�0������$���������!�$$��������������"
�� ����������� ���������������������������
�%��� (!� %#�!�%'�)$!��& ���%��*% �,�������������������!��������������������%������$�����������%�����$�������������')���(��'������!!��������$���������������'"�,���$�����������������%����������������!�$��������)���(��'��������������������$�������$��-��&�����$����������������'����������������5����������-��&������",�����������������������������-�A�����;�����������!����*�����$�����/�@ ��)�A�����?�����������!�. �����/�@ ������A�����*�����������!�.������/�@ ��"
�+% ($%&" �%��C�������������'�������$����������������!�$���������/ 0�"�������$�����/�@ �������������!������!����������������������������!�$��������������!��$'�������������������!!$����/43���(�43��������������$$�"�,�����������������������������%$��1"�,���%�������!����������%�����%'�3������1�����$�������� 3��2��$��&���2�����"�,����������������%'��$������������$�������������!��������������"�,���%�������!��������$�����������%����������������$���"�;!�������������)��������������������������$'��$�������������������������������B�>� ������$"� .�$$����� %������$� ����������� �%�����)��%�$�����/���%����!��������������2�����%�������������%���!��������)�!��2����'��!��������/��$�������$$��������)��������/��%%�������%��'�������������������������%%��������������������)�����$��������!� ���%$�'�/���������������!���$��$$���"�6%�������������������������0�������������������������������������"
�&%)��%" +&#� *�,%;��$�����������������������$�������$�����&��/ 3�������������(��'"�.���������/ 0�(�0�����!�������&��������������4������$�������$��-������������"�,��������������������������$$��/ �������$��������������������������������!���$���!���$$"�,����&�� ���� �$������ �0��� !���� ���� !$���"� ,������� ���������$$'��(��������0-�������������������������"�:��������������$�����������������$��$��!����!�����������������"�����������������������������������$����)��������%����!��������������������������$�����������������������������������������������$��������"
�!��$� -��%� *�,% �%��#����$�$����������������'����������������������&��/ B�"�,����&������������!���%$��1�����$������$�/���������" <�)������������!$$���������������!�<<�������������/�0�*�"�;�����$���$��!����/4�������������������1��������������%�$��������$��$���������������!������!�����2��������"�,����$��!��������������������������������������������'��/��!������������'����������"�;������%��������!������������)������������2������!� !���� �������� ��$��� �$���� ���� ��������� �!� ���� ���$�������������"�;$$�����$��!�$$�����������2������!��������������":���������������$�����������������!�����������$$�������������$����������������$$�����4�������������!��������$��!���"�,��$�����'���������������$��!����������������"��!�����������������%$�����$�����������������$��!���)�������$!�������������$������������$��!����!�������������"
,������������!�!�������$�����������������������������!������'�!������������������%'�<���������������������!�!�������$������������������������(����'"�;!��������������$��!��������������������8��%�����$�/��������$��!�������������������<����$����":���������������$��������������$�������������������$'���$���������������$�����������������������%�������������������������2���������!��������$���������$$'�����������$��!���������������"
6������$������!��������%�����$)���%$��1��$��!����������(������ ����%����������!�����!������������$���������2������������������������������!���������%��������$��!���"�:����������������������!�������$���!�4�������������$�������"�,���$�����'��������������$��!�����������������/���1��������'�"
����$��$��& �&.�$�;��$'����!�������������������%'����������#8##������� �"����!�����"�����������(�����������������=�#:��$���"�,������������!�������$'����%'����-����������;+6 ;-�D���1�$�E�$$�/DE�����������!�$$�����%'��������������!�8��-�������!������!!������������5�$��$�-9������#�������+������D��$�/#+D�,���"�8-�$���F�"�0�������1����������$��$��!����!�����"
�%�#&� � " �$��#��$! �����������������������������������'����� �����������"�#������������$�����������$'������������������������������������������������'��!�������)��$���������������%�������$����!$�����������$$���������!������������"
,���������������'�!�����������!!�����!�&��������(���������������������$���� ������������$���'�������������%������$����!$���!���� �!!�����"� ��� �� ����������� ����������� ������� �'�������$������������������������������%'�3����8+��/8�������$��'�"� ��� ������������ ����')� �����������!�������(�����������(��������$$�8+�� �������$����������!������������������/ <�"�*�����������������������$����������������������������������!�������!�������(���!$��������!�����&��������(������"�,��������������'�����%����������������#�����������!�������$����$��������������%������*�- ����)�������������1�'�"
6���� !�$�� ����� ���$�'�� ������ �%��������� ����� ������������������!���(����%��������������������$�"�;����������!����,�%$�- �/�-%�)�����. ������������!����������������(��������&��������������������$����� ����8+������$��$'��(�%������$���������%$�'����!$�������������"�,������������������������.�������������!!������"�6�������������')�����.������������������!����$'������������%$�'����!$��������������������������(������������$��������!����"�5��'��!������������%������������ ����� !�$�� ����� ���� �������� ��� ��������������������������������������%����������/ �-���"�����������������&��������(�������$��������!��������������������$����������������������������������(������. ���������������$�",�����$���!����������������������'�%���!���������������$��$�����(�$������1�������������!����%$�'����!$����.��!!������!������������$����!���������'"�,����������������$������������'�������������!����$'��!!������%��������������!. ����.���!!�������������������������(������������$"��������%�
����������� ��������������������������� ��
��"��#�$�!�%&&���� &�' � (�� ���)*+���,��-�����.� &������� ����� ������ (���������/��#+0� �� 1���& ��"���( ��1����������)(����� ��2����3�4%0$
5� �1� ��"��� � ���� �� 6�� " �� 5� � �� 7���������)/��"��0 )/��"��0 ��� ��)4��0 )/��"��0 �)/��"��0
*�����$ �"0�= 0"�B �B"3�=<"�< 3B"3�=� "0� �"�=�"00 "<�=�"3�
. �A�������� B"�= "�� ��"��=<"B 4"�= 0"�< �"�=�"�0 "3=�"0<
.��A�������� �B"�=�"� �3"<=0�"B �3"<=0"�4 �"�=�"3� "�=�"04
D-��$�� " < �"< � 0"<�4 �"0B �"�B�
�-��$�� �"030 �"� < �"��� �"� B �"���
��"��#"$�!�5� �1�� �1�� � ��������"��2�� 1�������4/�������& ��6�� " ���1�� �
5� �1� 8 19(���
*�����$� ��. �"4� F�"�
*�����$� ��.� <"�� F�"�
. � ��.� 0"00 F�"��
Fig1. Percentage of ambulation, rearing, immobility Pd., Grooming and faecal pellets of perinatally ZDV treated F1 mice and F2 bred as compared
to control mice.
-80
-60
-40
-20
0
20
40
60
80
100
Ambulation (No.) Rearing (No.) Immobility Pd.(Sec.)
Grooming (No.) Faecal pellets(No.)
% o
f Am
bula
tion,
Rea
ring,
Imm
obili
ty P
d., G
room
ing
and
Fae
cal p
elle
ts c
ontr
ol m
ice
F1 F2
��������������������������������������������%$�����������'������&��������(�����������������!����"
;���������,�%$�G�/�-��������%�����������$�������$�����&�������������!��������(���������!���(��'�%������"���������������������������������������$)�. ���������������������������������!�������!�������'����������������$�������.���������������$�"�������� ���� ����. ���������������� $������ ������$��������������������������������"�,������������������$�����!!������������������!�.�����������������������������%����!����������%�����$�����������������)����������������������������$��������. ����������"�,����%�������������������$$��������������'���������������(��'�/� �"�,�������������������������$��$'������������.���������������������%������������$�$��$�"�,���������������������������������������������������������'���. �����������!�$$������(������������������������$�&������"
,�������$����!�E�������&����������$�'�����,�%$���/�-%���������!������!!�����������������%�����$"�,����������������'����$������"��������������������!�����������������'�2����������������%����������. �����.�������������!����"�,������������������������������!�������'�%�������. ����.�����������"#�����$')�����$��������������������������������������������$�����'���������������������������������������&������"�,��������$���(�%�����������������������$�����'����!$��"�#����������������$������&��������(������. ��������������������!����!�$������"�6�������������')�����.�������������������$��������%$�'��������������������������������������������������!����������"�,����%$�'���������������$��!����/���1�������'�����������������. �����������%����������1��������'
��������������.���������������"�,������%�����$�������������$$����!������������'����!$�������������%�������������������!����&��������(��������������������$����!���!������������'"
,�������$$�����$��!������$���������8+��3����'�������������$���������"�,����!!�����������%����������������������������������������������/ ) �)� ����'�%�������������%�%��������!!���������!�������������������������������%$��$1��������!����������������$�������!���$'���'���$$'����$��'$��1����!!�����"�,�����������������������%�������$�!���������������!!��������. ������������!������(���������&��������������������������'������$$� ����8+���1������������������"E�����������(������������'����!$����!�. ���������������!!��������������!�$!����"�,����%����������.�������������!����������������������!�������������������������������������� ��!!����� �� . � ���������"� ��������� �!� �������������������������������������������$'����������������'%�'���������$����!$������������!�������$�)��������.�����������
�� ����������� ���������������������������
��"��:�$�!���1 ��� ���� �1�� �1�� � ��������)4/������0� &��������"��� &������ ��� ��� �������
5� �1 8 19(���
*�����$� ��. �"<� +#
*�����$� ��.� <"�3 F�"�
. � ��.� 0"�0 F�"��
��"��:�$�!�%&&���� &�' � (�� ���)*+���,��-�����.� &������� ����� ������ (�����1� ��/��#+0� ����(�����1����;��"���( ��)(����� ��2����3�4%0
5� �1 / $� &����� ��� � � ����1���� �
<1������ � ������� <1�������)���0 � ��������)���0
*�����$ "��=0"B0 B"0= "�� ��"��= 0"30 � �"�= 0"30
. ���� �"3�= "<4 �"<�= "�< �B"�=��"<B B "��=��"<
.����� <"��=�"43 <"3�=�"4� 3�"4�=<�"<� � " �= "�3
D-�$�� �"< � "��B �"B<� �"�B0
�-�$�� �"� 0 �"��< �" 0< �"���
��"��:"$�!���1 ��� ��5� �1��� �1�� � ��������)4/������0� &��������"��� &������ ��� �� 1������$
5� �1� 8 19(���
*�����$� ��. �"4 +#
*�����$� ��.� �"� F�"�0
. � ��.� <"�0 F�"��
Fig 2a. Percentage of No. of entries in closed and open arm in elevated plus maze test
-40
-20
0
20
40
60
80
100
120
F1 F2
% o
f No.
of e
ntrie
s in
ope
n an
d cl
osed
arm
No. of entries in open arm (No.) No. of entries in closed arm (No.)
Fig 2b. Percentage of time spent in closed and open arm in elevated plus maze test
-40
-20
0
20
40
60
80
100
120
F1 F2
% o
f tim
e s
pe
nt in
clo
sed
and
ope
n a
rm
Time spent in closed arm (sec.) Time sepnt in open arm (sec.)
����������� ��������������������������� ��
���"��="$�!�� ��� ���� �1�� �1�� � ��������& ��� "���� �
5� �1� 8 19(���
*�����$� ��. <" < F�"�
*�����$� ��.� �"3� F�"�0
.�� ��.� "�B +#
��"��=�$�!�2��������� �� &�� �������� ������������ ��� &�%���1����������� �����1���� ������8����������� ���� "���� ������� �������� ����������1��& ����� ��)2����3�4%20
5� �1�����������������������������������%���1���������)���� ��0 �� "���� � /��� 1��& ��6 66 666 �� �
*�����$ 3"<�=�<"�� <"B�=0"0< "��=�"�� ��"40= "�B 0"0�=�"��
. ���� �"4B=�"0B �"4�=�"0 "�B=�"0< �<"<�=�"43 �"��= "40
.����� 3"0�=��"�< 0"��=3"<� 0"4=�" < � "0=�" 4 3"�0=0"0�
D-�$�� �" � �"�33 �"�04 B"� � "43�
�-�$�� �"�B0 �"43B �"��� �"��B �"�B<
�����������������������$�%$������������'"�#������������������ ���������� !���-� �����$� ������� $����� ��� ��������� $��$� �!����(�������&'��������������$$������������������������
/��)���"E�������(��������$'������%�������$�����������������H�&��������(������������������������������������!!�������������������������"�,��������2�������!������������'���
��������������������������!��������������������$���������!����������������������������"������'�%��������������$����%�����������1�������������$!���������������������������!���������������$$�/�<)�0�"
�%(%�% �%��� ����� �������� ��������� ��!� �����"�������#��"��������"� ��������"
" �������������$�����������#�������%�&� ���"%�����'�"$�(�#�&�#���" ��"���"�������)���#��**+,�--�.���/-0���
�� ��� ����������" �""���1��23�������&����)���"��������� &�%����(�#�&�#����������� �����"�'�����'�"$�$����� ������#�������%�&� ��� ����"���������)���#��**�,�-�4.���/04��
-� 5��$��� )5�� 6����7��8�""� 9�� �"� ������"��$��# ���� #������ �&����#� !%�� �$���" ��� ��#� ����� :���"�"�"�&�� �����%���� �� ������ ����� #���%��%"�������'��������"� �����#����"��"����;���� ��"��(�#�&�#�����#�����&�#�����"�;�������������+,���.����0�/�
+� � ��$���������1�� �� �����<�"�����"������=�%�����"������"��$��# ���"�;���"%������ ����"�������"� ��(�#�&�#�����;���� ��������7����#��������,�*��.��4*0���
�� >�&�� �?�� ?���� #� �?�� 9� �� ���� �"� ���� �� #���� ��"��$��# ������� ����������0% 0��#�� %"$ ���!�����"������=�%���� ���"���%0�;����#"����������#�� �&� ���" ���� ��"������$�!�"� ����� #��&����6�;����������,�.� ---0+4�
4� 5����$�����6� #����������"���1���"�����1� ���"��"���"��$��# ����#%����"�����#��� ���"��� �;���� �� "�� ��"� �" �&� ��� ��������#�� ���������� ?����"��***,�-�+@.����+0�*�
/� 1�� �� �����>�&�� �?����0A� "$�� ?�� �"� ���� <� � "$��8����� ��#� B���"�6 ������������"�#%� C8B6�D� ����� ?���0"� ����"��$��# ���� "�;���"%
Fig 3. Percentage of various parameters in Water Maze Test
-60
-50
-40
-30
-20
-10
0
10
Escape latency (1stsession)
Escape latency (2ndsession)
Escape latency (3rdsession)
Probe Trial New Platform Trial
% o
f diff
eren
t par
amet
ers
in W
ater
Maz
e T
est
F1 F2
���AB�0������"�#� ����"��!� �� "��AB�0����"�#���"$� ���)�B>�����-,--.� �/�0�-�
�� 2��&� ��2�����#� ����?���>�'���5����"�����6 ���������"������"����-30�(�#�� �E�� -30#�#��;%"$%��#���� C�F6D.� "��� �������"%� �������� ��#����"�;���"%�����������#����=�%���)��"������� �B��"��**/,��*.���4�04���
*� 6�%�� �?�� � �����)��� �&���?��6$�����"���� ��� "���(�#�&�#����#�����" �"���� ��� "$�� �$%������ ��#� !�$�&�� ��� #�&�������"� �������1�#��" ��B>��AB��B���"��**�,�-.�-��0���
��� 1�"%=��F��?���#�?���������5���"�����?�� �����#��"� !������������ �����(�#�&�#����C�F6D�" ��"�#� �"����� �!�����%��**/,��.��-0��
��� �����'$�"�0�5���=�?���>�'0�#'� #��>?�����=��A?.��� �!�$�&�� ����#�� ������%����"����� ���"���(�#�&�#�����;���� �����������0>�'��% �"�.�� ������� %� ��#�������� �"�;�����6� �"�����**�,���.����0���
��� 5���#���7��>�'0��#'� #�>���� �!�$�&�� ������"������ ���"�����F6�;���� ������� ����0�>�'��%��#��"� �"����� �"�;�����6� �"����***,���.-�*0-4-�
�-� �������# ��� ������ ���� ���5 ���$�� B�� ����&����� ���"�� �� � ���"��(�#�&�#����" ��"���"������� �������#����� %�������"������� �0'��������#�%������#��"��������� �"�;������%���***,���.��/0�4�
� ����������� ���������������������������
�+� ���� ��������� �����<��?��3�� B ���"�����1 ������#��� ���"����;���� �� "��F6� � � � ���"�� ���� ����&�� !�$�&�� � �� �#��"� �>0�� �����1�%�$��$� �������%�����,����.�+�+0���
��� ?��"� � � �� �"$���������%� !���#� ���������#���� �� ��;��"%� #��� #� ��1$� ������6$� ��**�,�+4.�-��0+��
�4� ?��"� �� �� �6$������������0��(�� "������� ����;��"%� ��� "$��������1�%�$��$� �������%��*�/,�*�.���0����
�/� �� ������>�&�������"���'�"� ���(��� ���#� ��� ��"�#%�������"������ ��������"$�� �"��)��� �������"$�#����*�+,���.�+/04��
��� �� ���� �)���B���������?���%���)1��A��������)A��>��������#����"������ �������� �����!���� �#���#� ��� ����"�#�0��#���#� �;�����&�� ��������?��������*�-,�--.���/0���
�*� 8�"�$�������5 ��#� �����)��8$�"��<)��1� ���" �����#��$� ���������������%���� �� "$�� ��$����#� � ������� �������� �����"�#� !%� "$��>0�#�������� ����"� � ������"� �9G<� -�-*-� ��� "$�� �"�1�%�$��$� �������%��**�,���*.�+�0��
��� 8�##���"���)?��>��%�����>�'�����1���"�����5�$�&��� ����$� �������%��H>�0��=�3�#�������� ����"� �.�� "$� ���!"%��������'��$� ������������ �!��� ��#� ��"� ��"����� '�"$� H>0��=�3� ����"� ��� 1 ��� �� �01�%�$��$� ������5����1�%�$��" %��**�,��*.����0-��
��� ?�&����>��5 ����������8���� 8���"������� �!�$�&�� ������������"������� �"� � #�&�������"����F6� �;���� ����� �"�;����� 6� �"��� ���+,�4.� 4�0/��
��� ����>��5�"� ������$�$����"�����B�" �������� ��;�#�"����I� �#��"�����"�"�����"$�� �����"������" �������������"� ��<09�����5���#��10���6�;����?�""��***,���4.�*-0��4�
�-� �����9��������� � "$�������#� �#�;0 �����"�#� ������� " �������������� 6������������������,�-4.��0-��
�+� ��!������<� !� �)?�������������B��.���!������<� !� �)?��#����1�"$����%�-����#��1$���#���$��.�?�������""0��&����***,����0����
��� � ��=�6��1� %�����2����1���"������������� ���#�������� ���"$����%������� �� B�.����$�����?��"�����#����2;� #�6�;"!��=���2������%�����
�#���&�������'�7� =.�2;� #�J��&� ��"%�1 ���������,���/0�+��
����������� ��������������������������� ��
����������� ���������������������� �������������������������������
������������� �������������������� �������������� �������������������������������� ��������������������������������� ����������������������� ������������� !""#$�����%�����������������������&�'��&'��������������� !""("�����%�����)������������*)���+��������,����-�.��-���)��/'�����������������������-0��/12#!3�4��%������������ ����������������������������������)������������������� �������������������������������� ����������������������� ������������ !""#$%)���*"$15"#!$$ 1# ,�6*"$15"#! !253"7����*�����8�����%/��%��%��������������*������8&����%��������������� ����������
���������������������������������������������� ����������!����� ���������������������������������������������������������� ���������������������� ��"� ����������� ���������������������������������������������������� ����#���$���� ���� ��%����������������������� ����&����������������������������� ����"��'���&�������� �����������%�(���������������)��������� ����� ����������������������*��� ����&������������������������+������������� ��+����� ��&���������&�&��������������,-������"� ����������� ������� ��������� �������������������������&����������������������� �������"������*,�&������������������������������������������ �������������������������������&����"��.��������������+������ ������/����� ����� ���� �����������+� ����� ������"��0������������������������������*,�&���������������+������������������������������������&��"��1���������������*,�&��������������&��� ������� ��� ��� ������� ������� ����� ����� +� ���������"��2�+����#������������������������������������� ��� ����������� ���� ����� ����� ����� � ��������� �����������������+ ��������*,������������������ ������������ �����������������������������"��.������������+�����������+������������� ����� ���������*,�&�������������������������� ������"
�������� � 0���� ������#� 3� 4� �#� 3����������#� �*,������#�5��4,-������������ ����#������������������&���
������ ��!��2����������������������������������� �������������� ���������������������������� �����������������������&������ �����
�6&����7�"�������������������������������& � �� ������� ��& ����"�2�+����#������& �����������������&�������&������������������������������������� ��������7�"��������������������������� �������� �&���������������������� ��#�������#����������������������������������������� ����������� ����������������������� ���������89:���"��1��� �� ����������� ���� ����� ������ ����&� ���� 89:��� �7#��"� ���� ��������� ���������������������������&���������������� �������������������#��������������������� �� �������"�5������ ���� ������ ��� �� ����� ������� � ���� ������� �������������� ���� ��� �����������#� ���� ���� ������������ ���& �� ��������� ��������;01�"������ &�������& ������������&���������� �������������������� ������������������������ ����,�"
��������
�"#$���%�� &������!��� &���
������
; ��������������������������������������������������&��������������*�!����� ���������������������������������-�!����� ���������� &���������� �����������������395����������#*�"� '����������� ������ ���� �����$���� �� ��!� ��� � �� &��������������������������������������� ��������&����& � � ������"� '����$���� �� �*!� ��� & ����� ���� &�������& ���������$���� &������������"�; ��������
�� ����������� ���������������������������
����� ���������������������+� ��������� ������ ������7#���".��&����� �& ������������� �����!���������)���� ����������� ��"1� ��������������������������� ���������� ����������������������� �����������������������$������������������)�����������������+��������� ������ ��������������� ���+���������������������������"���������������&&��������������������� ���������� ������������&���������������������(�"
���� ����
1���&������������������������������������������������������"������������� ���������������������4& � ��������������� � ������� ��������&� �����$���� �� ��!� ��� � �������� ����� ����"�1��������&�������������� �������� ������� ���&��"�������������������������������������� ����"� 1���&����� �� �� ���&�� ����� ���+� �� ���� �������������#�+��������� ������� ���������������$���� �� 7"�2�+����#�����&������� &���������&������������� ������ ���������7 7��7#��"
!����"�����#$���
�������� �� �������������������������������������������������������� �������������������� &������������������������� ����"������&��������%������������+����*�����-���������������������%����������� �����������������������7#��"
2����&�� ������������������������������� ���&��������&�����$���� ���!���������������� ���������������������������*!��������������������������������+�����������2��� 4<�������=2<����������"�������������� ������������������� ��������+���������&������,������(���������>�"�;��& �& �����������&�����������������������$������������ ������������������������ ��������������������� ����������������������&� ���������������$����)�� �"�3����������&������������������������ �&����������������������������������& �������������������������� ���&�#�+���������������������%��� ���������*����7����������������� ������(*����>���������7#��"
�"&#��&�1��������������������������������������� �+�&�+��� ����?����#��� ��&���������&���������������������� �����������.38�".38�������� ��������������������������� �+�&��������������������#����� �������� ����&����� ��������+��������+�%�&#����������������&������������������� ��� "������������������������������&�������������������������������&����� �� �������� �����#�&��+�������#����� �&�������?���������������>�"�8������������� ��������������������������&&���������������������� ���������"�:�� ������������������������4��������������&���� ����#�+���4����&����� ���#����������������������������������&��&���%������� ����������������������������"�0������������������������#���+����#� �� ��&���������� �����������������������$��������������������������������������#���������������������� ��� ���+ ������ �&������������� �������"
��!�'�("3��������������&���������$��������������������� �������� �&���������������������������������%��������+����� ��� �������� ��� ��������������������� ����������"�5�����������&������ ��������������������������������$��������������� ��?����������� ����������������&������������������������������"������������������������������&&����������&��������������&������������������$��������������������#���&�������������� ���?�&����������������&����� �����������+����%������������������� ����������"�'�������� ����� ���������������������������������� �����?����������������� �������������� ���%���������=������������� %������������&��������������#�� ��� #������#��������� ����� �� %��94��������������#�������� ������������� ��$��������������������&��������������$���������������� ������������������������ ��&������������������������ ��������7#��"
�'���!%!���!�����������!�(.��7->-#�����@�� ��2�� ���A�&��?������@2A����� ������ ��������������������������������� ���������� �������������������������������+���� ��������������������� ��������������&�����������������������������������"�.��+��������)���� �������� �� 7--,#� +��� � ����� ������ ����� ��������������������� �-�"� ���� @2A� ��������� ������� �����>���/������&�������������������7����������&��������������������,#7�#77�"������� ���������������������������� � �����#�����&��#��������� �������#� ������������������������� ����#�&����� �������#��� �����&�������������������������#���������������+"
�!���#��)�'�("������������� �&�����������������������+�� �����+�������+���������������������6&������"������� �������������������� ������� ������ �&� � �������� +��� ��%��� ������������ �&� ���&������$����� ������ ����#,#-#77�"����&�����..����������������+���������� � ���������������
������� �� �� � � �� �� �������� �������� ��� ����������������������������� ���������������� ������������ ��������� ������� ����������� ��� ��������� ������ ������������!""�#
����������� ��������������������������� ��
��������"� � ���� &����� ...� ���� ���� ������������ �$���������&� ��&���� ��� ���� ���� �$����&� ��� �$� �� ��������� �&��+���������&�� � ����"�������������� �&��������;01�����&� ������� �"���������+����&����&�������� � �������� ����� ������������������������� ��� ������&����� ��-�"����� ����� &�������& � � ���������������� ��� � �������������� ��+����������� ����������� ������ ����-#77�"�������� ����� �&�������������&�����.����&������&����� ������+�� �&��������#��������� �������%��+������������������#������� ����������4� �������-�"
�$�$�!��'�$���!����!�����!��� &���'�������������������� �� �����������������������������������������������������������������7��"��' � � �����������)������������������������7>�� ���&������*,�����967�&���� ��������������+����� ����������������&�����.��7,�"���;���������������>������������� ��������������������������������7��"���<�������������?�&������<A2����������������()#�7,)������)�������������������������������������"�1��������(�!����&�����..������������������ �������� � ������7>�#�� ���&�����*,�&���� ���#����������������������������&��*,�� � �+������������������������7*�"��<A2��������������.���&�������07������*,�&���������������������������������������������������������7(4���"���'�� ����������������$����������8�;6�������������������������������������� �&���������& ������������������������������� ����������& �������� �������7�#�,�"��.��& �� �������������������������*,�����������������&���� ���� :;64�� ��� ����������� �$�������� ���� ����� ��$ ����� ������� ����"� '� ������ ����������� &���� ���)���� ���������������������������������3�B9�#�+���������������������7(���*�"���7(���������������������������������������� ������������%��������3�B��"�3�B����������� �$�+��� �� �� ���� ������ ���#� ���� ������� ������� ��� ���� ����������������&���������� ���������07���������� ����� ��������074��������&��+�������������"��.�������������������7(�����07������������������;01���������� ��������������������������������������(�"���07��������������������������������*!����&�4&�������������������>�"��<A2��������������.���&���������
�07�&��������������������������������������7-#��#�7�"���� ������� �������������������������������������7����� ��������������&����&�4&�������������������"�1����������+� ����<A2���8�:9#��������������������&���� �������������������7�)����������������������������� �������������������;01�"3���&����� ��� ���� ���� ����� ��� ������� ���� �� ������������ �������������������������7#�(#�>#�-#�7�#�7,#7>#�7-���������������������������������������,�"��������������� ��������� � ������� ���� ��������� +��� �������&������������������������)� ����"�3��������� �&���#���������� �������)#�7�)#�7*)#�7)#�-)�����7>)#�������������������&�4&���������&����"��.��������#�� ���������������*,������������������&����������������������������� �� ����%��������� &��������������������������&�������#,#�7�"
!�(���!����������($&$��3�������?�������&�������3���������&���������������&�&�1�.����������%�����&��������� �������������������������������������"�8������������������&�������8:��������&������& ��������������������&�������58:3������������ ���������� �����������&�&��������������������"���'�3�����������+����������+ ����� ����%��������&���������������������+���������&��������������"�5���������74�������4+�&�����1�.������� ����� ������� +��� �&�� ��������� �>�"� ������ �� ������������������������1������)���������������������#��� ��%������������ ������������������������������#���������������������������������������&����������������������&����� ��-�"� � 6��� ���� �������#� ��+����#� ���� %��� ��� �����������&���������� ������ ���������+������������������������������ ��������������$������� �&� ���&����"�@� ���������������������������&������&��#���/������������������������������������$�������������������� �����������������������&��������������4�� �����.38"���$�������������������&����� ����������� ������ �&� �������,��"��������������� �������������������������������������������������&���"����%������������&����+�������������������������������������������� �&� ���&���������"�����������������+��������������������������������������&� ���������"�<�� ��������������������)���#�� ���&��$����� ���� #�������������#���������������������&���#�������������������������������>�"2&� ����������������������������� ��������������������������+� 4 �� ����������C������$��� �#������������������&�����+����3��� �4(��D&�����%���E�����������������+������ ����&�����������?������� �+�,������������������� �����������������&���������������������������,7�"�'��� ��������������������������� ����������������������� ��������������+���7�*4�������#�#>�"��8�������+������������������������+�&������������ ��� ���&�� %�� 8������?��#� 339F� ���� =������#����?� ����� ���� <������ � ���������� ��� ��#�#>�"' ������������������������ ����&��������&���������������� �������4������ � ������������ ���� ���� �� �������� ��� +���������&������+���3����������039F�#����������������������� ���������������������������4& �����&����#����� ���������������������������������������&������#�#>�"
����������������������&�����+ ��������*,�&��������������������������������������������������������+����,��"�=���������4
���������� � ��������������������������������$���������� ��������!����!""#
�� ����������� ���������������������������
��&�&��� ���&�� ���� ������ ���� ������C� ��� �&���� ����� �����������������&�&������������6;6������������������������ �� ���� �������������$���������,,�"������������ ���������&� ����)��� ��� 0����� 9������� 3������� �������� ������&��&���� ������������������������� &�����& �����������������������������������"������������������������� �������������������������� �&�� �,�#,*�"����&������� �������� �� �������������� ������������� ����������������������� �������������� �������� ��������������� ��������������������� �������������������������������������� �������,(�"
#����%&� �
�����*,�&�����������+�����&�� ��������������������&��������"�A������������������������������*,����������&����������������6�������������������������������%�����+����� �*,� &���� +��� ������ ��� ��� �� ���)����� ���&��� ���� ��� ���&�����#�+������� �������������������,>�"��2�+����#����������������������&���������������$����������������*, ������������������� ���������������������+�������� ������������*,�&������������������������+������� ����������������,�#,-�"�5����)���������������+���������*,�+���������������������������&���"�0�����������7--�#��*,�+���+�� ������������� ������ ����������� &���� ���� +��� ���&�?��� ��� ���� ��� ������)���� �� ��������� &���� �� ����� ����� *�!� ��� � � ��������������#�7���6&����,�"
������� +��� 0& � ..� ��������� ��?���� �&������ �� �+��� �������?�����+����*,��� ����������������+�������������������7��%�����&���������/������������������������"�2�+����#����������������������+������������� �-�%�����&������ ��&+�������7��%�����&����"�0�����������&����������������� � ����������������*,�&������������������� �0& �..���?�������+��� ������� �� ���� ������ 7� ����"� � ���� + �� ����� �*,� &����$�������������������+���������������������������������������� ������� � 0& � ..� ���� ���� ���� �*,� ������� � ��� ���� �������������$����������������������������&����������� ���������>�������������������� ��������&�����*#�����6&����,#�#*�"
'��$(�$���)�����%&�*�����
�����*,�&���������������������������,-,����������+������ �� ���+�&������*,�%�����-�"�0�����������������������������������*,��������������������������������������������#�������������������� �������������������������������� ����94�������#�������������� ���)����4������9'����&�������������������� �������� ���������$�������� ���34������ ��������6&����,�
+�)�����)��%&
���� ������ �*,� &���� ������� � ��������� ���������� ��������������� �� ���� ������������� ����������������������$��������������� ����������������������4������������������������������ �������������������������������7#*��"�.������������������ �������������� �&����+�����$����-�����7��������������&���������� 4 ��&����*,#�������������������������������������������������$���7�#�����������������)�����+���7������7*����� ���������#��������� �#�������������� ������� ������+����������-���������������� ���� �+�������������������������"�����#����������������������+���������������G�H�56HB:93I���������������������+���������������G1<<�<�@3J6<.955I��*��"���������������������� �������������� ����������������7#*��"
�)$�#�����&!'"�+�� �������� ��� ���� �*,� ��� �#� �(,� ���� �>,� ����� �����������"�����������������������(,������>,�&��������������� ���������������������������*,"�5� �������*,#�������(,�����>,�������������4� &�����#������9'#����������������������� �*,4���������� &����#� ���� ����� ��������� �*74*,��6&������"
���������'��!���'����!%!���!���*����!'!+��!������� $(�����!����%�#������$!�8�������� ���������*,��������������������+����������������)����4����� �9'� ����&� �*��"� � '����$���� �� 7>��������� ������������������������������������� ���� �+�&�9'�����&�������������?�&������������� ����� ����F=��4 &����������"�.������������������������ �����������(#�-#�7*#��#�,,#�,>#��(���������������7�#��7�������94������ ���&��C5���,7*�����5���,-��������34������ ������C���������7*�#
�������%�
'��$(�$���)�����%&����������,-
�����������*,�&������ �������������������7>�7,"7�����"5��������� ������ ��������� ������������������& ���*,�&���������������&��������,�"�����&�������������% ��������%�����&������9'#�������������������������������� ����������������"�.����������77��$���#�������$����������4���&��$��#�� �+�������� ��&�������������7��%���� ��&�����*���6&����,�"���������������&� ������������������+���������$����*#�>�����"������*,���9'���������� �������$���� ���"��%��� ��&�����(���6&����,���������������������������������� �#+��������$���������� ����;����������>�"
�6<8���� �������;������9'������������� ������������
����������� ��������������������������� ��
����7**#�5���7�-������������ ������**#*(�"�.��������#�����**#5��� ,>(� ���� 5��� ,>�� ���� ��������� ��� ��� ��������� ���������� ������������������� �"��8�������� ��������5���,,#�(����������7�������������+������������������ �4 ����������*,��������������������� ?����������"�'��� ���������*,����&&��������������������������*,����� ������������������ ���������**#*(�"�F���������� ��������������*,����������� �����������4 �����������+������� �4 ������(���������������*>�"2���&����������� �4 ��������*,��������������� ������������� �+� ��� ���������������� ����������������)��� �������������)�������&��������9���1�1�����������(5�������������*#**#*>���6&����*�"
��'$��%�#���!���$''��"�'$���$���*,��������������� �� ����%����������������� ����������������� ������������������� �� �����������������������9'�����&���6&����*�"��*,������������ ���������������;745���������������;�41���������%�������������� �� ��(�#(7�"������������������&� �������������������������������4�&�� ������ �� �����&������"�.���������������9'�����&���*,����������+�����������������������������������+�������&�������7��@'67#�3�47���(��"����7���������������������� �����3�B���� �$�����������������%������������������������&������������� ��������������� ��&���� �� ��������"�����#�����&����������������3�B�#���7����&���+������������*,������������� ���������;745������������*#(,���6&����(�"
#�������#�#���!��*,� �� %��+�� ��� �������� ��������� �����&�� ����������4��������������������������������������������������������������������� ����������&������������������ ����*#(��"�+����/�������+������&&�������������������&��� ������������������ ������ �$����� ����+��� ���� ���� ��������������������������������������+��"������ �%����+�����*,4������������������������������������������������� ���������� ��������������������������4����������������������0 4�� ��� �#� 0�$#� ��� +� � ��� ���� 02,4�� �� �������� 8���#9�$�#�����0�"�����������������������������4��������������4�������� 0 4�� �������#� �������� ������&� ���� �� ����� ��������������������������������������� ���� ����&������������������������������"�1����������������������������*,4������������������������������ �� �����&�� �������������+��"������$���������+������ �����&� ���������*,������������� ��������������������&� ���������*,4�������� ������������� ���������������*#(����6&����(�"
�������!#�!��,!��$#$��$������!-!�!$���%�#��!���#�#���!��������������������������4��������������������*,�������������������������������&����������� ���������������+����
�������&�
�������'�
�$'' '���� ���!�����%�#�������*,�����+����������������������������&���������������������������������������+������������������������$������������&�� ����������9'�����&�#����&�����������#�����$�#� � �������� ��������� ����#���������� ������&����������$����9A������������*��"���������������&�� ��� ��������������� � ������������������������������������������� ������� �������9'���� ����#�������������&��&���������� �������*-�"��'���&�������������������������������*,�������������&������������&��������9'������ ���*#*>���6&����(�"
�������(�
�� ����������� ���������������������������
�� ������ ����������&�����$��&����"�.�������������&&������������������������4��������������4�������������������*,��������� ����� ��� ������� ������������������� �������������� ����������������������������*#(*�"
��!�#�#���!��$%%$�����%�#���*,��������������������������������������������� ����������������������������"������ �� �%�&��*,�������������������������� ��� ��������� ����� ����� �*,4�������� �����������"5������������� ���������+ ��������*,�������������������&������ ������"�.�������������&&������������������������� ���������� �������*,�������&���������������������9'�����"������� �������*,������������������ ������������&�����������������������������������&������&&������������ �������������������� ������������������ �����������������*,��*#(*�"
#���!���$�$��$��$�����(!�(�*,�������� ���&� ���������������������������������������������&�� ��� ���&��������� ������#��9'�����&�#����&�������������$�������������������������&����"�:�� �����������������������������*,���� � ������������������������������&�����5=4��� ��&�4�����&��#�+���������������������*,"������4���&����$�������������� ����� ������������ ���������������� ���������� ������� ������������������������ ���� ������ �9'� ��� ����"� 2����� � �� ����� ����� �$��������&����������:�67���������7�'�6����81<�������������������� ���������&������������4����������*,�����������������"������������� ��� ������������ ������+ ��������*,������������((�"
'�����������������������+���+����*,���������������������������������������&����� ��&�&��(>�"�F��&�������� ��������� ���+���� �������� + �� ����� �*,� ������ ���������������&����� ��&�&�+���������������"�.������������������ ������� �� ���� � ��� ����� ��������� ����� ������ ���������������$���� ��� �����+ ��������*,��������������&���������������&�&"�'����������������� ��� �����*,��� �������� ��������� ��&���������� ��������������������*,������?�&�������������� ����������������������"���������+������������� ��� ��� ��&�������������� ��� �����+ �� �����������������(>�"
#���!���)$���!��$����$��%��$�$�!������!'!�"3���������+��������� �������*,����������&�&��������&���#����� ����� ����� �*,� ������� ��� ����� ��������������������� � ������� ���� ����� ������� ��� ��� �� �����&�� �����?�&������ ������ ����������� ����������&����������?�&�������� ����"�'���� ����������������������� ��������� �����������������������*,��� ���"������ � ����9'���� ���������+�������������4���������������9'�������&����������������������"�@�����������9'�������&���������������������� ������ �������������&����� ����&����&���������� ��������������������� ����������&�����"��+�������&�������� �����& ��� �&�������������0������K83��������+����������
�*,�����&������������)�����"�8����������������&������������K83��������� ���������������+����������������������������+ ��������*,���������������F=���������"��F����������������������& ��� �&��������������������� ��+�������+��������������"����������������$���������������������� �������������������� �� �%�&�+ ��������*,������&������� ���� �������*,�������������������9'���������*#*-��6&����(�"
#���!�� !%%$�$��!��!��������&��"��!� $-$'�#&$���*,� ������� ��� ���� ��������� ��� �$���� ���� ������� ������� ��������������������������������&�����)����"���*,�������������������������������+����������������������� ����� ���������� ��&����������&��+����������� ��������������&��� ��� ���� ��4����� ���� ��&� �� �� ������� %��+�� ���$������ �"�2&�4���)������������ ������� �������� ���� ���&������ ������������#��� ���������� ����������������������������������������������������������������*,4��������������������������� ����+�������������������� ��� ���� ��"� 5������ ����� ��&&������ ���� �������� ��� �� �*,4����������LL&������LL���������������������� ��������+���� ������D������4��������E��� �����������&�� �������&�������&���9'�����&����������������������4����&��+������� ������� ������� ���"��*,���� �����&&���������� �����%����� �����������&���������&����������������������� �����������(��"
������������������� ����� ������*,������ �������&�����"9������ 4��������������+�4������������+����������$������������� ����&�����������&��������#��� ����+�����������&������������������ ������ ��������� ���������+� �������$��������&������� ������� ������"�' ���������������*,������������������+��������������������� �������������&�������������� ��� ����������������������������� ������������������&�����&��������� ������"�;����� ����&����������+������������*,��������������+������������ ������������&��������"�' �%� ���+���� ���� ���������� ���� ��� �����&��� ������ ����� ���������&����� ��&�&������������������������(-�"
��'$��%�#���!������!��($�$�!�.���������� ��� &���4 ��� �*,� ��������� �� ���� ��� � � <46�������������������������+��������� ����������������������������& ����&&���������� �����������*,�&�����������&�����"��������������*,��� ����+�����&� �������������������������������?������������ ��������*,��������� ������������������ ��������&�����"��*,����������������� ����������&������������� &�����#�+���������������������������������*�!���� ����������#�*���6&����(�"�.������ �������� ������������������� .'�3� �*,� �������� ��������� ������ ���� 7-#��-� ������������������*,���������"
����+ ��������*,��������������������� ��+��������������9'������+ ��������*,���������"�A�����������*,�������������������������� ���������������������������� ����������������������� ��� ���� + �� ����� �*,� ������"� ���� �� %��+�� ��� ���G�������� ��&����I� ������ ��� ��������� �>7�"� � .�� ���
����������� ��������������������������� ��
�������������������� ������� � ����������*,�&���������������������������� ����������������������� � ��#�� ����&�� ������ ���� �����#� + �� ����� � � �� ���� �������� ��������� �����&�������>��"
�*,� �����������������������������������������)������������������������*,����������������������������+��������������)����4���������������������&����"�3���������������*,�����������$���������������������+ ��������*,����������������������� ������ ����D&��4��4������E����������>,�"1�������*,�� � ����$����������� � ���� �%�&��*,����� ������������� �����&��� ������� #� ��������� ������� ���� ��������������� �������>��"��;��4��4�������������������*,����%��+������$�������&���������������&������������������������$��������������������&��������&��������������� ��������� ���>,�"
1�������*,����������������+�������������� ����������� ������������ ����������������������+� �%��+����������� ������������� ���������+ ��������*,"��5���� �������*,���������������������+������� ��������� ������������������ #��������*,��������� ���#�+�����������$�������&������������*(�".������� ���� ����� ��� ���� ������� �*,� �������� ��� ���� ������������,��#�,>,#�,��������&��������������� ��������5��,-�#�5���7*#������7��������������������������4�������� � ����>*�"��8�������� ��������������������������&&������������� ��������������*,����������������&������&�������������� ����&������� ������������� ���"�;������� ��� ������������� �������5���(#�7*#�,>����������7����+ ��������*,�������������������� ��������������������������&������������������������������������ �����>*�"��5�������������F=4 &��4��������������������������+���������������*,��������������������������������� ����������� ��������5���7*#� �� ?����������� ���������������������1�1�4����������&���������>(�"������������ ������ ����� ��������� ����� ��� ������� �*,� ��� 5��� 7*���������������������������� ����������������&����������0�����������&#������"�8�������� ���������*,����5���,-�������������������������� ?�������������������������>>�"��.���������������� �� ���������(�!���������������+������� ������������*,#����������+���+ ��������*,#����+������������ �������5���,-����>��"�<���������������� ������������5���,-�������������������������������&���������� ������������*,������ ��������*,4�����������������&&����&�����������������������&���������������������*,��>-�"��5���,-����������� ���������������&&������������������ �������������������&���������)������� � � ������� ����"� � 2&���� ��� �� ��� 5��� ,-���������� ������*,��������������������+����&������� �������#���������&�������������������&��������������������&�� �)�������� ������������"�.��������5���,-����������� ���������������*,�������������)���� ���������������������� �� ���������33�"�.�������������&&������������������������������&���������������������������*,������&��������4� &����?����#����������������&����������� �������������&&����������������� ������ ������� �>��"� � .�������� �������&�� ��� 5��� ,-���������� ��������������*,��������+������������������&�&�����& ����������������������� �+���&�������������������7�".��������#�5���,-����������� �������������*,��������+��
������������������������������ �����+���������=5�������&��������������������7(#7>�"
'�$���!�����%��)$�#����$�$�!��� &������!�� &���' ����������������*,�&������������������������� �&��������& �����������������������&&������������*,�� �������� ������������������������ �+4&�������������������������&���������+���������������&�������� �&� �&������-477#�7�"��1��������������*,�&�����������������������������������*�!����& �������7�"���������������������+���<46���������������#�+��������&��� ��� ��������� �� ���� �*,� &���� ���� ����������� ��� ������� ������������������������� ���� ������������& ������������� ��� ���� ������ �������� ��&&������ �� ���� � �� �� ���� �*,�����������& ���&����������"��'���������+ ��������*,�������& �� ��������� �������� � ���� �������������� ���������� &���������������������&����� �������*,������������������������ ���������,�"��*,������������������������+������������������ �����&���������+������ �+��������������$��������� �����������&�������������������*,��������� ������������� �������������"��'��� ��������+ ��������*,��������������������������������������������"������ ��������*,�&�������<A2�������� ���������� ���������� ��������������&���������& ����� ��7#�*�"� � .�� �������� ����������������&����� ...����������(�!������������������������������������*,�&��������������(�"���*,������������&&���������� ������� ����������&������� ��� ��������� & �� �������"� ���� �*,� ������� ����������������$���� ��7*������!���� �+�&����������������#,*� ��� (�!� ��� ���� ���� �����������#� ���� �*� ��� >�!� ��& �� ����������>�"��1� &��������&���������������������� ����������������������+���������&��$������������*,���������7#�>�"
#���������)$��#$ �!�����($�1������������*,�&���� �������������������������������������������������&��� &��������������������*,�����*,4����+���� ������� �� �������%��+�����������)���� ������ ��"����������#�������������*,������ ����������&�����"�5������������ �����������*,������ ����������&� ��������� �� ��������������������#��������������������*,�����+���������������� �&� ������&��������������������������������"�1� �� ������������������&����������� ?���*,��&�� �&���� ��+�����������*,� ����������� �&�����������������������#�&�����������#��� 4�� �� ���&�����������+����������������&����#����������������������� ���������"�A�����������&���� ������������������� ��*,�����+��#���������������4����������&�����������*,������ �%��������*,��� �����$�������-�"���*,������������������������ �� ������&����������������� �&�"�.����������������� �� ����������������������4�����������������"'��������)����������*,�����+����������$� ��������������������������������� ��+�����������������������������9'����&�&��&������-��"��'�4�*,������������&&�������������������������&�����& �����+�����������+���������������������������������"��������������������&�&�����&�#��������*,�&���������������������������������������������������
� ����������� ���������������������������
���&������ ����������������������� �������������� ��������������&�����&�������������������&�������������������)����"'� ������ ������ ��� ���� � �� ����� ������ ������ ������� �������� �������&� �������������*,�����+����������������$����������1�1K#�����&�������&� ���������*,"��1�1K������������������������������������������������������&���������������������������������-7�"
� ��$������� �2�������������������������������)������������ ��������� �� ��&������ ��������� �������� �#� ������� ������������&��� ���� �������� ���&������� ��� ������ ������� ���� ���� &��������������"�0���������������������&���������������������������� ������������+���������������������� �����������& ����#-����6&����>�"�@������&�����&������ ����������
���� ������������������������ �������&�����������������*#-*#-(�"��@ ��������*,������������������������������� ����+� 4%��+���9'�����&�������#�+�����%��+�������������9'�������������"�8����������������������*,�� � ����������+ ������� � ������ �������������4������������ �$�������&����������������+ ��������*,�������"�������������*,������������������ �$���%��+�����������������+ ��������*,�����������G����������&����I������������ ��&������� �������+ �������*,���������� ���&����������������������������#�� �� ��������������������"��8�����������������*,����������������� +���� ��������������� ��������� �� ����������������� ��������*#-*#-(���6&����-��"�.������������ � �����������*,�&�������� ��������+�� ������ ����������������������+����� �� �����������&�������-(���6&����-�"
<A2���������*,�&���� ���#��������� ��� �����*,���9'�������������� ������������������������������������������� &���������������������������7�"������������� ��� ������*,���9'����������������������� ������������������������������ ���������������&� ���������*,�����+�����->�"�����������#����� ��������������������������&&������������� �����������*,�&�������������� ����� ������������������������������7���6&�����#�-�"
�������������������������� ��� ������*,����������� ������������������������� ������ ������� ����������������������1�1�4���������*,���&������������+�������������������-��"������������������������������������������������������ �� ��+���������� ��� �����+ ��������*,���������->�"�����������#���������� ������������������� ��� �����*,���������� �� �������������������������� �+�&��+�&�������������������&����"1���&���������������������������� �����&������� �+�&��+�&���������7�"������ �+�&��+�&����������������&������� ������ ���������������&������������������������������������������*,�������� ��� �#�+������������ ������� ���&
�������)�
�)���������&���������������������� ������������ �������&����������������&�����������&�������� �&� �&�����"�����������&������ ���������������������?�� �+4&����������&�4&���������������������+�����6&���������#7�#7(#�7>#�7#�>#-,�"
����+ ��������*,����������%��+������������������ �� ���%���������������;7����5�����;�����1������������������������ �� �"�F���������� ����������*,�&������%��+��������$����������� �+��� ��� ����� �������"��.��������������������� � ������������������� ��������9'�����&������ ��� �����*,������������������������������������� �"�'����������������9'�����&�#��*,���%��+����������� �� ���������+���� �� � �+� ������ ��� ���� ����&��� �9'"� � .�� ���� ����&�� ��������� ������������*,����������%��+������������������������������� ������� �����������������&����9'���*�"�������������*,������������&������������������������� ���&�������������&����1�1�#������������&�������&� ��������*,�������#�+������������������ ����*,�������� ��� ������� �� ����*#-����6&����-��"�1����������������*,�&���� ������� �������� �����������������*,�������#�+����������������1�1�4�������� ��&�������� ���� ����� ���� ��� �� ���
�������*�
����������� ��������������������������� �
����������������&�����&��+�������������������������6&����7��"
.���������������&�����5���,-����������� ��������������*,�������+����������� ���������&�4&�����& ��������&�����...����.=� �;01��"� ��� ���� �������#� �+��� �������&�� ��� 5��� ,-���������� ��������������*,�+�������������� ����� �+4&����& �������������&��������� ����� �&� �&���������+� ����������������������������������7���6&����77�"��8������������������������&�����5���,-����������� ��������������*,��������������������������������������� �����+���������=5���������&���������� ���7(#7>�"�����=5������������������&����������������������������������&� ����� ������������������������������� ������������ �--�"� ����������#� ������������� ������� �� ����������&�����5���,-����������� ��������������*,���������� ��������&�4&�����& ������� ����������������&����� �������������� �������������������7�"��8�������� ������������5���,-����������������*,��������������������������������� ?�������*,�����������>>�"��.����������������������������������&�����5��,-�� ��������� ����� ����� ��� �*,� ������� �� �� ���� ��� ����������������&� ������ �����������#�+����� ����������������1�1�4����������&���������6&����77�"�������� ������ ������� ���������&���� ��� �����5���,-����������� �������������*,�����������������&�4&�����& ������6&����77�"������+ ������ �*,� ������� ���� ����� ��������� ��� ������ �� ������4 %������������+���������������9'���7�����6&����7��"��.��������� �����������������������&�����������&�����5���,-���������� ��������������*,���������������&�4&�����& ������ ��������)��������� ����������������"��������������+ ��������*,�����&&��������������&� �����9�������� �����������������������������7���������������������� ������������������ ������ �������� ������������#�+������������ ������
������ ���� ������� �6&���� 77�"� .�������� 5��� ,-���������� ����������������*,�������������������&&���������������� ��� �������� ��&����� ������� �����&�� ������4� &����?����#�����������������&����������� ����������������&&��������������������������� �� �����������33���>��"@ ��������*,����������� ��������������������&����������� �����������5���,-����������**�"�������&�4&�����& ����#������ �� �����;01������%��+���������� �&� �������������������&&�������������+����������� ���������� ���������7���������������������������������������&���������"�����������#��������������&���
�������+�
�������"�
��������
�� ����������� ���������������������������
�������&�����5���,-����������� ��������������*,���������� ��������&�4&�����& ������� ��������������+��������&&��������������������������������7���6&����77�"��:�����?�&������ ������������������������������ �+����������&�����5���,-���������� ��������������*,����������� ����� �+4&�����& �������+� ��������&��������� �&�����������������������������������������"�1���&���������������������������� �����&�#� �+�&��+�&������� �&� �� ���4�&&�������������������6&���7�#�77�"�8�����������&�����������&�����5���,-����������� �������������*,���������������&�4&�������������� �������&&���������&� ���&&����������������&��+�&��������+����&����� �������������� #����������������������������������������������� ��7���6&����7�#�77�"��1�������#������������ �+����������&����5���,-����������� ��������������*,���� �+�&��+�&�������� %�����&���������&&�������������� ���� ���4�&&�������������+��� �+���� ��������������� "��.���������� �������������� �+&��+�&���������� �������������������������������#������� ��*,4����������������"�����#�������������������� ��� ����*,���������� ����������� �����*,4��������������������+����������� �+4&��+�&����������7���6&����77�"
����' �!��2����������������������������������������� ���������&����� �����"� ��������� �� ��������� ������������ ���� ���� ��������������� �� ���� ������ � ��� ������ �������"� � ���������#���� �������������� �������������������� ��������&�����������������������"�������*,�&�����������������������������������������������������&����+���������������� �&��+������� ������"��:$�������� ����������&&������������������������*,��� ��������� ��������������� ��� ��M�&������������#�$�������#� ��� ������9'�����������#��������������������������4����� ����� ���������"��'�����������������������#� ������������������������ ��� ���� ��� �������������������������������������������� �� ����������������� ������"��.�������#�������������*,���������� ��&�+�������+ ��������*,�� ��� ��������������������������������������������� ����������� �� ����������������&������"������#�������������������&���������������������������������� ����������*,�&�����������������$�����������������������������#���������� ����� ���������������� ��#�����������������������#������#��������� ������������������������� ���� ������������ ���������������4����������� ���������&����������������������������������������"
�.��/'$�($&$��@������%�� �������� ������������������9.12'95�9�������&������������������������&������������������+���+������������������������� ���������������������+"��5��������������� ���������������������������������������������������/������������������������������0������ �&����0��#�;�������������.���#�����"��"�;�����8���� �.�����&�����#����/����������0��8�A>�,�1:���-�7,,�->"��6���� ������������������������N��������5�������������6� �+������N�6#�5�6������B�����1N�����F;3�����&������ ���%��+ ��&��"
�$%$�$��$��� ������������������������������� � !��"�#����$��������%� �� ��&�!�'�
�� �(�%����")*� �� �� ����� %�+%� �� ��� (�%����")� ���� �!�%�������!���,��-)�.�������� �����%�!������/�
�� #���0� 1,�� ����� � 2� &�!�'������� � �� %���� ����� �)�%���� ��!� �!�1����!��(�������((����%%��3����������!�3��0����� ������
4� ���������1���# ����5��� �*����������%������!�6�������2��� ����� ��� "1�)����% )����/7� �8�*�9���
/� :�)�������$����2 ��# ����5��� �*�������)���(�!����(( ��������!��!��$�;� 0��;����� �����������"�%���7������
�� <�"�0�� ��:��������1��1�(���%���9-���!��%�!�����������!�������� ����� �%������!�"���%�����%� �%����������% ��)%�����!����"�!��! �"�����"�������2��� �(�%�����+(��� ��������7��=/*��/8>9�>�
=� ���"�:��3����������?�!� ��,���%�����5���# ��������� ������-� �%����%�!)�6 ��(��?�( �!��%������%� ����!� ��0���"���������$����������� �(�!������#���� 0� ��1 ������/7��4*����49���
8� ����"������,��6�%���1 �����-�������%�����@�% �� ������%��� ��!��"�������!�% ��%���%�����!����A:��,� %�������%B�� ������
�� 2�����;����!�%B0�������(����-����������%����-�%$��������B��"� �!��%�����!�(�%��%� )��!�����*���!��� �(%���� �%�!)������� � �����7� �>�*�4>89/�4�
>� :��������1��#� "� �1��������%���� �#3�� ��%���"�����%)(��"���%��� ���%������% ����� ������)�%����#� ���*��( ��"� 9�� ��"���>>4�
��� :��������1����������3:�&�!�'�3� �!� ���%��< "�����%���*����������%�����%��� ����)����C ������@�?��1 ����������
��� :��������1����������������%���� �#3���%�����5���3 <����������%�����%��� ����%����� ������)�%����2��� �(�%�����+(��� ��������7��=�*���9�>�
��� 3��%� �� 0�#����%� �,��,������� � "���%���� �� ������ "��������� <(���<�������>>�7�8*����9���
�4� 6�%������ ����������2��# �$��5���%����������������� ��- ���%������ &C�'� "���� �+( ������� ���C�9�������%�!� (����)%��� ��% ��)%������� �(�%�����((���� �-���������7��=*�4=�9=8�
�/� ���� 2?��:� �)������:� �)���� ���%����� �,������� �"���%������- ���%��� ���� ����� ����>>>7��=*�/4>9/��
��� ?�����!�#:��,����!���?��� � �!���2����%�������%� �%�������%���51�4"�������������"������������� �?����>>/7���/*��4�/94��
�=� ��)����� � 11�� ,�%�������� 2�� ?������ :�� �%� ���� �"�� !�(��!��%(���(�� )��%���� ��!� !� �"���%���� �� (�4� ������ ���%�-��� ���$����������,����� ����"����������=7��/�*�4�9/=�
�8� ��)������ 11�� ?������ :��,�%�������� 2�� �%� ���� � 5��� (�4� "���� ��!���������%�-��� ����$���������������� ��������=7��4*�889>��
��� ��)������ 11��5������?��,�%��������2���%������5���%��� ���(( ���� "���� �%���-���%���� &?#�'� ��� ������ ���%�-��� � ���$�������������� ��������=7��4*���49�/�
�>� ,�%�������� 2�� ?������ :�� 6�(��,��� �%� ���� � ��%� �!� �% ��%� �� ��!!� �"���%�!� �+( ������� �� %��� %��� � ��(( ���� � "���� �%���-���%���&?#�'����������- ����%��� ����,��������#����������87�4��*�=8988�
��� ,�%��������2��?������:��6�(��,����%����� �1����-��� ������ %��� %��� ��(( ���� � "���� �%���-���%���� &?#�'� ��� ������ - ���� %��� !�����(���%��������� ���������87��/*��8�9���
��� ?������ :��,�%�������� 2�� ��%��)� � ��!� 1 �-��� 1��� �%� ���� ����� ���%� �B)"���%)���%���(�4�"������!�!� �"���%�!��+( ����������%���?���!�( �%�������������- ����%��� ���,��������#����������87�4��*����9���
��� 5������?����%��)� � ��!�1 �-���1���,�%��������2�� �%� ���� ���%� �!�% ��%� ����!��+( ���������?#��"������!���� ����!�(���(�� )��%�����(?-�������������%�-��� ����$����������,��������#�����������7��8�*��49���
�4� � �������,��C����:�� � %����,���%�����1��%���%9!� ���!�" �$%����%� ��!��%�� ���(%� �����������"������%�����*��+( ���������������"� �?���!�( �%���� ��""��%�� %��� ( ������� �� ��%�� ���� ��!�(� �� ���� ���(������� �?����>>�7���*�4��49�>�
����������� ��������������������������� ��
�/� 3�%���-��:��5����-����<����%��:���%������<�� ��+( ���������%����6C ���(%� ���!�(�4���%�%������ ����%����)��+�����������%��������%�����( ��� )���!������!� )�"���-���%������# ����1�%�����>>=7�=*���89�4�
��� 2��������� ��2���� �-�������%������� ��������>�!���%������((��" ���������%� � �����(�����!���%� � ���-�%�9��"����!���%�������������"�����%��� �������� �?����>>�7���*��=�/9���
�=� A�0��:��<���;�� ������23��%��������:�D�(�=�� �?#���%� �%��������� ��� %�����E� �%)� �� "���-���%����� ��!� � �� ���� ���)� �� ���%�!������� ?����>>=7��=*����9�4�
�8� ������23�������%0� �#����� ���:,���%�����5��� �%���-���%����"�������������!��������"���%�( �" �����������% ��)%������������ ����>>/74=*� 8�/9���
��� ,��%����,�� @� ����,�*�# ����5��� ��� @�*� ���$�-� &�!'�� ���)���(�!�� �� ������������ ���( ��"� ��� ��"��@%��)������7���4�94/�
�>� 1 ����,����� ������� F�������������� �%� ���� � ���� �%��� �����������!��"��������������- ����%��� ��-)�����"�( �%�����"��%��� ���������(��% ����()���%�,�!��>>=7��*��4�49���
4�� <�%� "�� !���� ���-� "�C ��?�-�����2����%������� �)�����"�������� �!-)���"��%��� ������������"��"������ �- ���-���!���$��-���!����������!� -���!9- ���� -� �� � (� ���-���%)� ����$��"� !�+���%������% ��%���%� ���(�%���%��$�%��- ���� %��� ���2��� ��� "� ��>>>7�>�*�4��94���
4�� C���0��"� � 2���?�!��%�� �()� ��!� �!���� "���������"����%� �� - �����%��%�������� �<�����?�(�����7�4*�/�/9�>�
4�� ��"���� !� ��6����%�� �()�� �- ����%��� �*�%�����!����%������� "�� �������7��/*�49>�
44� ,� �� ������C ��!���!� ��?������#���%�����5����!���!����!���%����!���!������"��� ����-�%� ��!�%������� ����� ( ���� �%���� ��� ��% ��� 2��� �������>>>7/4*� ��>9�/�
4/� ;���5�����9C��!��,����"���� �!�����(� %���������( ������! �"�!����� )�)�%�����2������#�����������=7�>8*����/9>��
4�� :����,?�� #��� ;�� @$�%�� ��� �%� ���� @�( ������%� �� ����� 9%� "�%��"%�� �()������"������� �� ��� ���% ��%�-�������!�%��� ��-)�����-�%�����56C9���"�����"��1 ����%�����!�����A������87���/*�4/=�9=��
4=� ?�!!)� 6?�� #��E���� ,��� ,���������� 1�� �%� ���� � ������� � %� "�%�!����(� %������� � ���"��"���!�% ��%���%���- ����%��� ������������� ?������=7���*�==889�=�
48� ,�$�%�,������"����:��� �����%�����?�� ��"����%����%���������� �(�4"�������� )%� ����0������������% ���� ��!�-)�C ���!��� �����%� ���>��74�/*� =4494=�
4�� ���)�������6��!��"� ���1������9:�����<���%�����,�%�����- ��� �����������+( ����%$��% ���� ���"���%��%�(�4��(�������<���"�����>��7�4*4�49���
4>� C����)� ���� ��!�� 13�� 5��� 5 �� �%� ���� � ��%���%��"� ��%�%����� � % ���� ��%����-)�(�4�( �!������ "����( �!��%� %��%� � ���������8�9(�4����(��+�$�%�������%� �!����9�����,��������#�����>��7��*��4�94>�
/�� ����%����,����! ���0)������"���%����#���%�����(�4���%�%������������������ ������������>>�7���4*��/>9�4�
/�� ��������2��,����!�2��C����)�����5���(�4� %���� ���(( ���� �"�����%� ����>>�7�4��*�/�49�=�
/�� ,�# �!��<3��,� )����6��������5���"����� �������(�4�������� �%��� ��%�"��� ��� ����%�!� ��� �� ���������8� ��� %� � �� &�8(�4'�� 1 ����%����!�����A����>�=7���4*��4�94/�
/4� #��������� ��� ���-�1��� �$� !���� �%� ���� 5 ���� ��%���� �������%�!(�4�( �%�����������!�!�-)���"��������������� ���������8������%�����,���6���%��>��7����*�����9���
//� ���-�1��� �$� !������� ��%� �B�%������%���������(�4�"�����,�������#������>�=7�=*��48>9���
/�� ��������2��(�4�� %��� ������� � "�%�0��(� � � � " �$%����!�!��������������>>87���*�4�494��
/=� ,�%�����$�0��6�����-�1��1�������%�����@����%������!���� ��%� �B�%��������������(�4����������*��+( ���������%���������(�4�"������,#<2���>�/7�4*�4��89=��
/8� ?�"������1�(��0� �,��3�--��6���%�����(�4�������� �%��� ���%�"��*�����)������?�������������� �����!��%�%����������- )������!�%��� ���,�������#�����>��7���*������9���
/�� #����������������0���1,����0������%� ���� � �� �� ��%���� ��� %���% ��%� ���� %���( �%���9��!��"� �"������ %���������(�4�"�����6����>��7�8�*��/�9���
/>� ��"���%����#��:��B�� �:3��(�4����%������!�!)����%�����������>>�7�8�*��49�=�
��� #�� !���2���C� ���!���:��,� �)9F��E�$�0��C��%�����(�4����� ������ �"���%��(�4�% ���� �(%��������%���%)��6�������������7��>*�����948�
��� 2��%� ����,� ���,��� :������36� 2 �� (84� ��� �� ������� G�� ��%���� ������H�(�49 ���%�!�( �%���� %��%� ���� ��!�����(�(%�������%� ���>>874�>*� �>�9>/�
��� :������36�2 ��5������ "��"�(�4�"��������)��2��%������� �@��%��>>>7>�*� �>/9>��
�4� ,���������1�4*����0�%��%���(��%��- �!"��%��%����%� ����6�������������7�>*� ��>�9>>�
�/� �((�5?��������1��?�"���%������ %���� )(%�����I�����9�(��������9-��!��"� ���%������ (�4�-)�( �%���� 0�����������!��( ��"� � -��)�(J���%�#�����>>/7��>*��>�9��=�
��� �((����������!� �����3����"������"�%��(�4*�- ��0��"�%���(��%% �����%�������!����%������!���1�%����#����1� �������7�/�*���89/��
�=� #�!�� �,�� ���"� F�� � 1��%9% �����%������ ��!����%���� �� (�4� ��%��� �"���������%�?�������� ����/7�/*�8>49����
�8� ��������2�� ��3��C��"�F��5���1�4�(�%�$�)*�$��%�I���%����� ������%�-���+(�� �!K���������%����� ����=7��4*����894=�
��� 2��������������2��5���(�4����%�������� ���%��2��������������7���/*�/�4>9/��
�>� ��"���%����#������������������2���� ��"�%���(�4���%$� 0���%� ������7/��*� 4�89���
=�� ,��������%B� ��� ����)� <�� < ��� ,�� ���!�%������ ����-�%���� �% ���� ��%������!��������( ���� �%����-)���%��(� �%� �9�����%������%��%��(�4��������>>�7�=�*�=8�9���
=�� �%�$� %��� ��0��66��1� ��0�����C���%����� ����!������ ��������!������)����-���0��%�6�D,�-)�(�4��<���"�����>>�7���*���>9���
=�� ��9��� )�3���5�0����5������������������%������3�C�����(�%��%������!��%� ��(�4�%��� ���(( ��������������>>47�8�*���89���
=4� ���-���?2������, ��1���0�%%�#����%������(�49!�(��!��%�6��� ��%���������(?#9 ���%�!�( �%�������!����!�� �(%�!�-)�%���������(�(�������� ����=�8�����( �%������1 ����%�����!�����A����>>/7�>�*��4��9�/�
=/� C �!����2�����$���3�����% ������(�(%�����-)�(�4��<���"�������47��*� >�4�9/��
=�� < ���,�������������0��"�-)�(�4*� ����� !��%����!� ����� ����������%���� ����47���*�/4�9/��
==� @%������:����� ��6�����(���� 2��?�"���%������ ������� � ����������� -)(�4���� �2�#�����������7���=�*���8�/9>��
=8� ������$� ����������(�4����%�� "���������"��"K�2������1�)���������7�>�*� �4944�
=�� ����1���������1��5��� ���(( ���� �*���!�����(��"� ����� �(�4K��� #�����>>87�8*���//9/8�
=>� ,�! ������� �� �-��� ��,���%�����"� �((�� �����99%��� ���� �� (�4� ���!��%���� �"��������#�������#��(�)��?��������������7�44�*����944�
8�� <����� �,�� ��������1���� ���!��C ����%�������%����� �51�4���%�%����(��% ����!� ���!*��� %���� � �"��� �%��"��)(�%��������� %����%����")������� ��@�?������1�-�����/7���8*���/898��
8�� ,���� �2��,�!����������% �����%��������%���%�!���%��%�(�4�$�%��$��!%)(�� ! ����� %���$��!9%)(�� (�4�( �%���� ��%�� %�����%��%� ���� ��%�����������>>�7�=�*�8=�98/�
8�� 3���-� "�?���<���"�������!� %��� � ��(( ���� �"�������������� �2������>>/7�//*��=�98��
�� ����������� ���������������������������
84� ����<�E���,6������%$�"�12��6���9�9���%������%�%��������%���%��� ��(( ���� �"����(�4������������ �?��������7��=*���4�9��/��
8/� ��%%�� ����1�%�����F��-�%%��6���%������6���������%������%�%��������(�4��%� ��6���%��>>47�/*�/�9=�
8�� ,�����%��5��#���������5�� �-������ ���%��������%���%�(�%%� ����(�4(���(�� )��%�������������%��� ���<���"��������7���*�44/�9/8�
8=� ,����0�����<�� ���%��� ����#��#�����0��� ���� �%� ����,�%��%� (�4� ������%�%�%����)�(���(�� )��%�!��%��� ������� ���A�9��!���!��������0��%��� �*�����������%����?:�D��,�1�0�������<���"�������47���*��>��9==�
88� ��0�"�����:����0���%�� ����$���,����%�����1���(�� )��%�������� ���4>���%�-���B���%���%�% ��� �� ��%������%��� ���(( ���� �( �%����(�4�#��������% )��>>87�4=*�����89�/�
8�� C� ���%�� ,�� :� �-�)����� ��� ,�%����%�� ,�� � �%� ���� C �I���%(���(�� )��%���� �%� �� ���� 4>�� ��� ��� � �+( ����!�(�4�( �%���� !��� %������������%�%���� ��� �� ��������� %��� � ��� )� % ��%�� 2� 1�%���� ����7�>8*� ��9��
8>� ;�(��#�� �����2:��F���"�����%������� 4>��(���(�� )��%���� �"���%���%������"��������%��������%��%�(�4������� �?������/7�=/*�/8/>9�/�
��� ,�%����%��,��C� ���%��,��:� �-�)���������%�����1 �"���%�����"������������ ����4>��(���(�� )��%���������� ��+( ����!�(�4�( �%���������������(��"�����I�������������� ��������<�����")����/7�=8*��/49���
��� �"����,�� ���"� 2����������3:���!����������%����������� �"���%�����"���������� �<(���<������>>87�>*����9���
��� ,��� �����C� �� ��C#��#������?,���%�����,���"���%�"�����*�"���%�����!�-����")�����" ������%%� ��6��������������7���*��4��944�
�4� ����,�� ��6��?���� �:������ ���������%���������"������������%� ��"��" �$%��� ��%���!��� (����"���������"�����!���!�-)�% ���� ���$��!9%)(��(�4���������%��"���-���%�����������1 ����%�����!�����A����>>�7�>�*����9���
�/� ?�-���,1�������������"����;��!�����3���%��������������%������$��!�%)(�(�4�( �%���� �����������% ��)%����������� �?����>>47��4*�4/=�9=8�
��� C��)��2��6���B9,��B�������;��"�3:���%�����5� "�%��"����"����%�� �()� �"��������� ����� ����>>>7��=*�//�9/��
�=� @����� ��:��#�����,#��6��0�� ,���%������� �"���%������%���(�/�?CD,�,�D(�4� (�%�$�)� ��� �� ( � �I����%�� � � ������ ��% ��)%��� "������$�%��6�9��% ����%�������% ���"�����-�� ����%���������� �?�������7�=�*/�89�/�
�8� ����,;��2��"�� ��:���5���1�4�( �%������� ��+( ������������% ��)%�����(�������;������,�!�2��>>�7��4=*����9�=�
��� �%�0����� 5��6���-� 2�� 1 ��(��%�� � � (�49-���!� ����� � %�� �()�� ��%�#�������1�������7����*�4��9���
�>� ������1�� �((�5?��� �"�!������ )���!�(�4��� �"��������5�!�)�����47�*� 4/89���
>�� �����!%9A�� ����?:��,������� �%� "�%����� �!��%����������")��<���"������47���*��84�944�
>�� ��� ����������������������������%�����@���%���%������%���(�4�(�%�$�)��� �%���-���%������%� ������=7��///*�=�9=�
>�� �-��0��?�� �% ����"� �������� ��%� ?2�� ?�""�� ����� &�!�'�� 5���������� ������)�%�����5�%�$���2�� ������1 ����������
>4� <���;��5���)��5��@���0�$��5���%��������������%������$��!9%)(��(�4�����% ��)%����� ��� �������%�!� $�%�� ��� ����!� (��� �+( �������� � ��%��� �(�%����#� ���>>87�>/*���98�
>/� C��"����2������21����!$�"�?����%������,!��������?@6���"� 9!�(��!��%�-�I��%��� ( �%���� ��"���� � � �%���� ��!� (�4�� � 2�#�������������7� �8�*�>/�9���
>�� ,��� ��:6������13���1�4����-��!��"�����-����!���%�!�-)���%� �%��%���%� �%������� ��%�������I����- �������,#<�2��>>>7���*�8=498��
>=� 1��"�;�����������������%�����@���-�%������,�,��-)���(>�����% �-�%���%���%��%�(�4��%�-���B�%�����2�#�������������7���8=*�/���49>��
>8� ��(���� ??�� ���"� �2�� ������ � 2��� @�� ����!� �(�(%������ (�4� �(9 �"���%����� ��!� �� �-���� � ��� ����� !�"��� �%���� ��� �(�� 9!������%���0�)����)�! ����������1 ����%�����!�����A�������87����/*��4�>9>/�
>�� ;��������,����B�0��:��:�!��������%������-�� �����%�-���%)���$��!9%)(�(�4�( �%������������������"��� ������������������#�������#��(�)��?�������������7��44�*�/�49���
>>� #��� �,���,�0� ��������1� )��,��1 �!��%� �������%�-��� ����$������" �$%�� ���(�%���%��$�%����� ��- ���%�����5)(�����2��� ��� "�����7>=*� ��89���
���� ���B���%���5����������2��:��!������3��!9%)(��(�4��!�(%����L��%��%M9��0������ ��%����$����-���!�%�������,#<�2��>>47����*�����9���
����������� ��������������������������� ��
��������������������������� ��������������������������������� �������������������������
��������� ������������������������������������������ ������������������������������������������������ ������������������������������������ !��������"�#�$���#�%�������������������&�'��(�)*++,--.������������ ������������������� /*0*0-1,2���������"�����#�3�'��(�)*++,-+4��56�5����7�20*28.2+8948-:;����7������(�#��)��-,<#����;��������������� �������������
��������������������������������������������������������������������������������� �����������������������!����"��������������#�$��������������!��������"�������������"������!�������#�%������&���������������������!�������"�������"�����������������������!�����������������������������!��������������#������������"�����������!�������������������������������!���"������������������������������!��������������#
��������� ��������������&�'�����&�(�%�
�������� ��)��������������!����������!!�����!�������������������������������������������"�������#�(�����*+,��-��!�����������������������������������������������&�+.-�������!���������������+�-��������"�� �������������+&��#�$�����������������������!��������"��������������������������������"�����!�����������#�%������&���������������������������������������������������!���"����������������������������������#���������"�������������!��������������������(����������!�%�"�����������������(�%�����������������!��������������#
���!��!"���
�������
(�+�,����,����!�������������������������"��������'/�������"�������!���������������������"���&������������������������������������#�%�������������"����������������!��#�0��������!������������������������������������������������"���#�0��������������������������� ���������������!����#�%���112���������������!�"�������������3����"��"��#�4$�������������������#�0�����������������������������!���"��������������������������������#�0�������������"������������5������"�������!����������"�����������!���+�����#�0������"�������������
"�����������������"��������������!����������������!���5��� �&�������������������"������!!������������������"�����������""������#�0������������"���������������"������������������������!�#�%������&�����"������������������"�����������������������!��#�������#
6����.��������!���������"�������!�����������������"�����������!!�������������#�0�����������������������"������������� ��"�������������#�0��������������"�����������������������#0������������ �������������������������!��������������"�������!�������������������������#�0������""��������!���������������!������"�������#�0�����������������������������������������������������#�0������������ �������������������������������#$������������!�������������!���������������������������������������������#
�#�$ ��� ��/������ �7�������� ��� ���� ������� ���� ����������#�'��7������������������"����������������!!�������������#0����������!��������������������������������������� ������#%���8#9#�����:�����0�����!��������������#
� �%��� ��������!��$!��0�����������������������������!������������!����"��������������,����������"�������������������������������"����0;8<�$=��������.�#�0�������"��������������"�������� �����&�����7������"����+#5���� �����&�����!����"����5���������������"��������"����+#��������������>�����������������������!�#�%������&�������������"������������5�����������!������3�"�����5��� �#�%������������(�%��=�����0������������!����5�����+���!�����������3�"��������������#�8�����������?���"���������������������������������������>����#�0���������������"������!�(�%����������������������������������!���#
� ����� ��$�����������������������������������������!�(�%����"�������������������������������������"���������������+�-��!"���������������������#�(�%�������!!������������������"�����#�0����������������������"���������"�!���������!���(�%��������������������������"��������������3�"��#$�������������������������������������!������������!(�%��������������������������������������!!������!���������!�(�%��"�����#�$�������������"�����������������������������������������������������������!���������������"��"����������"�����������������"��"����5�#
1"��"�������������������������������������������!���������������������"�������&��������������������3��������������#(�������&�4��"������!�����!�����������������������������������������������&�����"������������"��������������������������� ����� ��� (�%�#� 1����������� ���� "���������������������������� ����� ��� ������� ����,������������ �� �����������#�$���������&��!!����������������!��"��"�������������������"���������"�������������������!�"�����������������������������"�������#
�� ����������� ���������������������������
6���������������������!�����������"��������������������������������� �!� ���������� "�������� �� ����������� �"��"����������#
�!&!�!��!��� ���������������� ��������� ���!����" ��� ��� � ���#��$�����%��&� ��!�#��
'$ �(��� � � $������!)������� ������*��+�,"���-������� ��� &���� ������).�������""���*���&������� �/��001)�����230�
�� ��44�""�� 5�� �����"�*�� �� � ����*�� ��� ��"����� ���6��"� �!� ����$��������� ���7�� 81)802���
3� ��� �����&�!����" ����������"�����+��� ������"����� ��"�"��"����������������"��� ��� � ���8���� �"�����"�,"� �*�������6������"���9�)���� ����&�!����" ��� & ���/� �����
8� :�����5;�������"�*���� �����*�� �����"��������������"����!� ����)�������"����� � � � ���"���� �� � ��������� � ��"����� $��������� ���7�81� )��02��