bartonelosis
TRANSCRIPT
![Page 1: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/1.jpg)
DIAGNOSTICO DE LA ENFERMEDAD DE CARRION
Tec.Lab: Placido Santos Falcón
![Page 2: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/2.jpg)
![Page 3: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/3.jpg)
COMPONENTES EPIDEMIOLOGICOS DE LA ENFERMEDAD DE CARRION
![Page 4: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/4.jpg)
HISTORIA
![Page 5: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/5.jpg)
PERSONAJEs EMBLEMATICOs
DANIEL ALCIDES CARRION 1885
DR. A. BARTON 1909
![Page 6: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/6.jpg)
CARACTERISTICAS MICROBIOLOGICAS Bartonellabacilliformis
•Bacilo Gram(-) pleomórfico•0.2-0.5 por 1-2um•Aeróbico, no fermentativo•Móvil,unipolar 2-16 flagelos•Intracelular de células endoteliales y
eritrocitos.•Coloración grosella o violeta con
Giemsa.
![Page 7: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/7.jpg)
•Aislamiento en medios sólidos a partir de muestras clínicas.
•Requiere medios enriquecidos.
•Crecimiento lento
•Temperatura óptima 28ºC
•No reactiva a pruebas bioquímicas
CARACTERISTICAS MICROBIOLOGICAS Bartonellabacilliformis
![Page 8: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/8.jpg)
A. Reacomodo Bacteriano-período asintomático (4-5días)
B.C. Inf. Cél endoteliales vasos capilares (Strong)-Siembra bact. al torrente sanguíneo-colonización eritrocitos maduros(desencadenantes sist. inmunológico, grado de invasividad)
D. Depresión sit. inmune(sobre infecciones) -Hiperplasia del reticulocito endotelial, linfadenomegalia y hepatoesplenomegalia. Liberación factor antigénico, hiperproliferación de células endoteliales ----formación de verrugas
PATOGENESIS Y FISIOPATOLOGIA
![Page 9: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/9.jpg)
PRUEBAS DE DIAGNOSTI CO
ENFERMEDAD DE CARRION
![Page 10: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/10.jpg)
DIAGNOSTICO DIRECTO MEDIANTE COLORACION GIEMSA
![Page 11: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/11.jpg)
COLORACION GIEMSAFUNDAMENTO:
•Acción combinada de azul de metileno y eosina(efecto Romanowsky) naturaleza ácida o básica de estructuras celulares determina afinidad por los componentes del colorante policromático de Giemsa.
Ácidos nucleicos—coloración púrpura(azul de metileno)Hemoglobina-coloración rosada con eosina (ácida)
Otras estructuras se tiñen por combinación de ambos (neutrófilos)
![Page 12: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/12.jpg)
CRITERIOS PARA LA IDENTIFICACION DE FORMAS DE BartonellabacilliformisEN EXTENDIDOS SANGUINEOS COLOREADOS CON GIEMSA
Resultados de lecturas repetibles y reproducibles
Coloración grosella(rojo cereza
![Page 13: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/13.jpg)
CRITERIOS PARA LA IDENTIFICACION DE FORMAS DE Bartonellabacilliformis
EN EXTENDIDOS SANGUINEOS COLOREADOS CON GIEMSA
Microorganismos intracelulares
Posibilidades de error en gota gruesa
![Page 14: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/14.jpg)
CRITERIOS PARA LA IDENTIFICACION DE FORMAS DE Bartonella bacilliformisEN EXTENDIDOS SANGUINEOS COLOREADOS CON GIEMSA
Ubicación dentro del eritrocito(central, bordes)
Dimensiones y morfología similar para cada forma bacteriana Cocos ligeramente ovalados individuales, pares o cadenas cortas Bacilos finos de bordes aguzados alargados, frecuentemente en V, individuales o grupos Cocobacilos cortos y gruesos
Morfología variable de acuerdo a la fase de la enfermedad
![Page 15: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/15.jpg)
CRITERIOS PARA LA IDENTIFICACION DE FORMAS DE BartonellabacilliformisEN EXTENDIDOS SANGUINEOS COLOREADOS CON
GIEMSA
Número de microorganismos por eritrócito: Formas cocoides de 1 a 15 Bacilares de 1 a 8
Diferenciación con otras estructuras intraeritrocitarias
![Page 16: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/16.jpg)
CRITERIOS PARA LA IDENTIFICACION DE FORMAS DE BartonellabacilliformisEN EXTENDIDOS SANGUINEOS COLOREADOS
CON GIEMSA
Diferenciación con otras estructuras intraeritrocitariasAplicación de criterios de identificación
![Page 17: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/17.jpg)
CRITERIOS PARA LA IDENTIFICACION DE FORMAS DE
BartonellabacilliformisEN EXTENDIDOS SANGUINEOS COLOREADOS CON GIEMSA
Ausencia de refringencia, formas bacterianas no presentan brillo metálico
![Page 18: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/18.jpg)
LECTURA DE LAMINAS COLOREADAS
Enfocar campos microscópicos de aprox.100 eritrocitos y contar el número de eritrocitos infectados.
Elevado% de eritrocitos infectados-lectura de 50campos microscópicos.
Escaso % de eritrocitos infectados lectura de 200 a + campos microscópicos
Negativo, no se observan eritrocitos infectados en 200 campos observados
REPORTE DE RESULTADOS
Los resultados positivos deben expresar:
Porcentaje de eritrocitos infectados.
La forma del microorganismo observado (bacilos, cocobacilos o cocos)Ejemplo: 85% forma bacilar, 1% forma cocoide.Ayuda diagnóstica importante
Otros: presencia de punteado basófilo, granulaciones tóxicas, alteraciones eritrocíticas.
![Page 19: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/19.jpg)
CAUSAS DE ERROR EN EL DIAGNOSTICO DIRECTO
Extendido sanguíneo excesivamente grueso o muy fino
Inadecuada conservación de extendidos sanguíneos( luz, temperatura ,humedad ,polvo o insectos)
Tiempo de tinción insuficiente o muy prolongado.
Empleo de solución colorante excesivamente ácida o alcalina.
Presencia de precipitado, o utilización de colorante sin filtrar
Alteración de células sanguíneas por acción del anticoagulante.
Coloración de extendidos sanguíneos sin previa fijación.
Frotices sanguíneos almacenados por períodos prolongados
![Page 20: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/20.jpg)
EXAMEN DIRECTOVENTAJAS Y DESVENTAJAS
No se requieren equipos sofisticados
Bajo costo
Requerimiento mínimo de insumos y reactivos.
Ejecución rápida
Procedimiento sencillo
Resultados inmediatos
Sensibilidad baja (frotis negativo no descarta la enfermedad)Fase aguda 36%, fase crónica ≤10%Especificidad 96%
Requiere personal capacitado.
Posibilidades de errores en la lectura Falsos positivos Falsos negativos
![Page 21: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/21.jpg)
DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO POR CULTIVO OBTENCION DE MUESTRA
![Page 22: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/22.jpg)
¿CUANDO SOLICITAR UN CULTIVO?
•Pacientes procedentes de zonas endémicas con signos y síntomas compatibles.
•Un examen directo negativo no descarta la Enfermedad.
•Diagnóstico diferencial.
•Paciente preferentemente sin tratamiento de antibióticos.
•Control de tratamiento antimicrobiano.
![Page 23: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/23.jpg)
CULTIVO Bartonella bacilliformis
VENTAJAS
-Permite aislamientoagente etiológico.
-Mayor sensibilidad.
-Posibilita identificación posterior por PCR.
DESVENTAJAS
-Requiere personal entrenado.
-Equipamiento.
-Costo elevado.
-Resultados en 30 a 45 días.
![Page 24: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/24.jpg)
OBTENCION DE OTRAS MUESTRAS CULTIVO
Material estéril rotulado para toma de muestra.
Desinfección minuciosa.
Biopsias de lesiones verrucosas o tejidos
LCR
Médula ósea
Otros fluidos orgánicos
![Page 25: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/25.jpg)
MEDIO DE CULTIVO Bartonellabacilliformis
Pesar cantidades exactas.
Control de esterilidad sangre desfibrinada de carnero.
Control del pH de agua destilada y medio licuado.
Autoclavado.
Dispensar en cabina de bioseguridad.
Enriquecido con sangre sales y aminoácidos.
Medio bifásico favorece crecimiento bacteriano. Utilización de placas para sub cultivos
![Page 26: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/26.jpg)
MEDIO DE CULTIVO Bartonella bacilliformis
•Medio bifásico
•Fase sólida: Agar Columbia 10% sangre carnero desfibrinada, ext. Levadura 0.25%
•Fase líquida: RPMI1640conL-glutamina y bicarbonato de Na
•Aplicación de procedimientos de control de calidad interno: esterilidad y viabilidad 28ºC, numeración lotes, etiquetado.
•Almacenamiento 4-8ºC.
![Page 27: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/27.jpg)
MEDIO DE CULTIVO
Bartonellabacilliformis
•Muestra de sangre total en tubos vacutainer con anticoagulante.
•Aplicación de medidas de bioseguridad.
•Identificación de muestras.
•Homogenizar con el anticoagulante.
•Mantener de 4-8ºC
•Procesar dentro de los 7-14 días.
![Page 28: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/28.jpg)
MEDIO DE CULTIVO
Bartonellabacilliformis
•Atemperar medios de cultivo bifásicos.
•Rotulación.
•Inoculación de 1cc de sangre total.
•Homogenizar.
•Incubar 28-30ºC.
•Revisión minuciosa cultivos en 72 hrs.
•Desarrollo contaminantes, repetir cultivo.
•Medidas bioseguridad.
![Page 29: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/29.jpg)
CARACTERIZACION BACTERIOLOGICA Bartonella bacilliformis
Desarrollo bacteriano a partir de 5-7 días, hasta 15 días.
Colonias no hemolíticas, pequeñas, translúcidas, brillantes.
Fase líquida no presenta turbidez
Sub-cultivos en placas de agar sangre
Desarrollo 3-4 días
Colonias con las mismas características culturales.
Sub-cultivos ciegos, aumentan sensibilidad.
Cultivos negativos, observación tiempo máximo 30 días
![Page 30: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/30.jpg)
CARACTERIZACION BACTERIOLOGICA Bartonella bacilliformis
Homogenizar colonias en SSF estéril.
Coloración de Gram modificada.
Lectura con objetivo de inmersión.
Bacilos finos gram negativos claramente visibles en cultivos jóvenes.
Pruebas moleculares confirmación ( PCR )
Crio preservación cepas confirmadas
![Page 31: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/31.jpg)
RESULTADOS
![Page 32: BARTONELOSIS](https://reader033.vdocument.in/reader033/viewer/2022052903/5572130d497959fc0b917f6e/html5/thumbnails/32.jpg)
AVANCES EN EL DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DE Bartonella bacilliformisIMPLEMENTACION DE LA VIGILANCIA DE LA SUCEPTIBILIDAD ANTIMICROBIANA
MEDIANTE TRES METODOS DE LABORATORIO
20% cepasResistentes aCiprofloxacina2%cepasResistentes a Cloranfenicol