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Bioseguridad en laboratorios docentes de microbiología en

Ciencias Agropecuarias

C O L E C C I Ó NÁNGEL RAMOS SÁNCHEZTextos de Enseñanza de Ciencias Agropecuarias

Bioseguridad en laboratorios docentes de microbiología en

Ciencias Agropecuarias

Iris Antonina Sánchez González

Julio Cámara-Córdova

Jahicela Liévano Morales

Sánchez González, Iris Antonina

Bioseguridad en laboratorios docentes de microbiología en Ciencias Agropecuarias / Iris Antonina Sánchez González, Julio Cámara-Córdova, Jahicela Liévano Morales. -- Primera edición. -- Tabasco: Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, 2017.

39 + i páginas: Ilustraciones. -- (Colección: Ángel Ramos Sánchez: Textos de enseñanza de ciencias agropecuarias).

Incluye referencias bibliográficas.

ISBN 978-607-606-424-5

1. Laboratorios biológicos – Medidas de seguridad. \ I. Sánchez González, Iris Antonina , Autor \ II. Cámara-Córdova, Julio, Autor. \ III. Liévano Morales, Jahicela, Autor

L.C. QH323.2 S26 2017 Elaboró: Esmeralda Cobos Jiménez

Universidad JuárezAutónoma de Tabasco

Dr. José Manuel Piña GutiérrezRector

Dra. Dora María Frías MárquezSecretaria de Servicios Académicos

MC Raúl Guzmán LeónSecretario de Investigación, Posgrado y

VinculaciónM.A. Rubicel Cruz Romero

Secretario de Servicios AdministrativosL.C.P. Elena Ocaña rodríguez

Secretaria de Finanzas

Esta obra fue dictaminada por el Consejo Editorial Divisional de Ciencias Agropecuarias de la UJAT, mediante el sistema de pares ciegos, con el apoyo de árbitros de diferentes Instituciones y dependencias públicas nacionales y extranjeras.

Primera edición, 2017

D. R. © Universidad Juárez Autónoma de Tabasco Av. Universidad s/n, Zona de la Cultura Col. Magisterial, C. P. 86040 Villahermosa, Centro, Tabasco. www.ujat.mx

Las denominaciones empleadas y la forma en que aparecen presentados los datos que contiene no implican, de parte de la UJAT, juicio alguno sobre la delimitación de fronteras o límites y la mención de empresas o productos de fabricantes en particular, estén o no patentados; no implica que la UJAT los apruebe o recomiende de preferencia a otros de naturaleza similar que no se mencionan. Aunque la UJAT fomenta la reproducción y difusión parcial o total del material contenido, queda prohibida su reproducción total sin contar previamente con la autorización expresa y por escrito del titular, en términos de la Ley Federal de Derechos de Autor. Su uso para fines no comerciales se autorizará de forma gratuita previa solicitud. La reproducción para la reventa u otros fines comerciales, incluidos fines educativos, podría estar sujeta a pago de derechos o tarifas.

ISBN: 978-607-606-424-5

Revisión de la edición: Iris Antonina Sánchez González.Responsable de la edición: Julio Cámara Córdova.Corrección de estilo, diseño gráfico (maquetado) y diseño de portada: Ricardo Cámara Córdova. Diagrama, compilado y hecho en Villahermosa, Tabasco, México.

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Manual de bioseguridad en laboratorios docentes demicrobiología en Ciencias Agropecuarias

Índice

ReconocimientoIntroducción

Tipos de riesgo en el laboratorioRiesgo físicoRiesgo químicoRiesgo biológicoRiesgo humanoRiesgo biológico en los laboratorios de microbiología

BioseguridadLa bioseguridad como disciplina científicaPrincipios de la bioseguridad

Técnicas y prácticas correctas de laboratorioEquipos de seguridadDiseño adecuado de las instalaciones de laboratorio

Clasificación de agentes biologicos de importancia humana en base al riesgo

Niveles de bioseguridadCámaras de seguridad biológicaEmbalaje y transporte de muestrasOrganización de la bioseguridad

Normas de laboratorio para el nivel de riesgo (I y II)

CitasAcerca de los autores

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Reconocimiento

La corrección de estilo y el diseño gráfico (maquetado) de esta publicación fueron financiadas con recursos del Programa de Fortalecimiento de la Calidad Educativa, PFCE, 2016-2017, ejercicio fiscal 2016: Objetivo OP/PFCE-2016-27MSU0018V-04-01: Consolidar el desarrollo de los Cuerpos Académicos En Consolidación y mantener el Consolidado, así como el fortalecimiento de la Planta Académica, la Meta Académica 1: Apoyar al incremento del 4% de los Profesores de Tiempo Completo con Perfil Deseable y a los PTC adscritos al SIN para apoyar el desarrollo de los Cuerpos Académicos Consolidados y En Consolidación, así como el fortalecimiento de la Planta Académica durante 2016 y 2017 y la Acción 1.4: Apoyar la publicación de dos libros técnicos y científicos arbitrados y con ISBN, Rubro1: Revisión de estilo de libro técnico o científico producto del trabajo colegiado de Cuerpo Académico o Profesores de Tiempo Completo y 2: Diseño gráfico (maquetado) de libro técnico o científico producto del trabajo colegiado de Cuerpo Académico o Profesores de Tiempo Completo.

Los autoresVillahermosa, Tabasco, México.

dd de noviembre de 2017.

1


En los laboratorios médicos veterinarios y biológicos, se realizan trabajos muy diferentes que implican gran número de riesgos de diversa índole para el trabajador, el personal cercano al mismo, y para la comunidad en su conjunto. En general, las causas que provocan un determinado daño no obedecen a un solo factor sino a la interacción de varios de ellos; para evitarlos, existen una serie de medidas que previenen o limitan los accidentes y otros riesgos relativos al trabajo de laboratorio1, 2 (Fernández y De la Cruz, 1986; Cedial y Villamil, 2004).

El daño, al igual que la enfermedad, requiere de un hospedero susceptible, un reservorio ambiental y un agente productor de la enfermedad. La interrelación de estos 3 factores determina la ocurrencia o no de afecciones. En este sentido, el aislamiento o contención como medio necesario para preservar la esterilidad de los cultivos de microorganismos y células, es un requisito reconocido por los científicos desde hace años, pero sólo cuando comenzaron a aparecer casos de infecciones contraídas en el laboratorio, se prestó atención a la protección personal.

Introducción

2


Algunos investigadores, han elaborado aspectos teóricos acerca de las formas de energía o riesgo y su modo de acción directa o indirecta; los cuales, orientan sobre la forma de intervenir positivamente para evitar el daño individual o comunitario. En cualquier caso, el hecho más importante es la preservación de la salud.

Es también relevante reconocer, que los accidentes y enfermedades relacionadas con el trabajo no son inevitables; por lo que como en todo fenómeno, existe una correlación de causa efecto. En este sentido, el estudio y reconocimiento de las causas permiten eliminar las fuentes de infección del peligro, o por lo menos, limitarlas en la mayor medida posible3, 4 (Meza y Benítez, 2010; NOM-007-SSA3-2011).

En los últimos 25 años, el número de personas empleadas en los laboratorios médicos y biológicos se ha incrementado considerablemente5 (Harrington, 1973); ello ha hecho posible, aumentar la preocupación por los riesgos de infección entre el personal de laboratorio e intensificar las exigencias con respecto a los niveles de bioseguridad 6 (Pérez y Crespo, 2014).

En virtud de lo anterior, el presente manual sugiere un conjunto de normas que se deberán aplicar en los laboratorios de microbiología, para los niveles de riesgo I y II. Con ello, se espera aportar al cuidado en el uso de laboratorios y disminuir los factores de riesgos inherentes a los mismos.

Queremos dejar constancia de que las fotografías que ilustran este modesto aporte, fueron obtenidas en el Centro de Diagnóstico e Investigación en Salud Animal del Estado de Chihuahua (CEDISACH). Allí la primera autora, ha realizado estancias académicas para asesorar, capacitar y adiestrar a su personal técnico.

3


El riesgo -definido terminológicamente-, es la contingencia o proximidad de un daño. En consecuencia, por ser el hombre el objeto de nuestro interés, nos ocupa el riesgo para su salud e integridad en un tipo particular de ambiente laboral.

Los agentes físicos y químicos se cuentan entre los que más frecuentemente someten al individuo a riesgos potenciales y reales. Otros tipos de riesgos no menos importantes, están constituidos por los agentes biológicos; entre los cuales, los causantes de patología infecciosa son los más frecuentes y peligrosos. El hombre, con su conducta y organización laboral, puede constituir también una condición riesgosa. Los riesgos físicos, químicos y humanos, pueden ser importantes por el daño directo que sean capaces de causar por sí mismos, así como también porque quiebren o venzan las barreras de contención biológica, originando en tales circunstancias un riesgo biológico7, 8 (NOM-056-ZOO-1995; OIE, 2004).

Tipos de riesgoen el laboratorio

4


Riesgo físico

Los agentes físicos, mecánicos, térmicos, eléctricos, radiaciones y otros, pueden resultar en un daño considerable o mortal para el ser humano. Por ende los agentes mecánicos, se agrupan en: objetos que interfieren con el movimiento, objetos en movimiento, objetos sometidos a diferencias de presiones, entre otros; el riesgo térmico, puede deberse a la acción de altas o de bajas temperaturas y actuar tanto por mecanismos directos (quemaduras por calor o frío), o como indirectos (hipertermia o hipotermia).

Por su parte, el riesgo eléctrico en el laboratorio incluye la posibilidad de “shock”, fuego y actuar como fuente de ignición para vapores y gases inflamables. Las radiaciones ionizantes son las que presentan un mayor potencial de riesgo (radiaciones nucleares, rayos X, etc.) y sus fuentes generalmente son los isótopos radioactivos, los aparatos de rayos X y microscopio electrónico. No obstante, otras fuentes de radiaciones no ionizantes pueden significar también un riesgo, por ejemplo: el láser, la luz Ultravioleta, etcétera.

Figura 1. Riesgo de contaminación en el diagnóstico bacteriológico.

5


Riesgo químico

Las propiedades físico-químicas y tóxicas de algunas sustancias las hacen poseer características inflamables, explosivas, corrosivas, irritantes, narcóticas, venenosas, mutagénicas, carcinogénicas o teratogénicas, lo que puede tener efecto deletéreo sobre el hombre. Algunas sustancias químicas presentan inclusive, varios tipos de riesgos a la vez. Las sustancias tóxicas y altamente tóxicas (venenosas) pueden actuar por ingestión, por inhalación, o por contacto con la piel y/o mucosas.

El término corrosivo se utiliza para aquellas sustancias químicas capaces de destruir los tejidos vivos, mientras que como irritantes se consideran aquellas capaces de provocar una reacción inflamatoria local sin afección severa del tejido. Otras son “sensibilizantes”, y tienen la posibilidad de desencadenar reacciones alérgicas.

Otro grupo de sustancias químicas riesgosas, está constituido por aquellas capaces de ser sensibles al “choque” y provocar explosiones. Además, aquellas sustancias que de ponerse en contacto pueden reaccionar como puestos explosivos o altamente tóxicos, se denominan reactivos químicos incompatibles9 (Stanchi, 2010).

Figura 2. Riesgo físico. Muchos

reactivos químicos que se usan en

los laboratorios son inflamables.

Figura 3. Algunas sustancias

químicas pueden ser inflamables,

corrosivas, irritantes, etc.

6


Figura 4. Los organismos contaminantes se pueden extender al medio

ambiente, de ahí el uso de cabinas de seguridad.

Riesgo biológico

El riesgo biológico comprende a todos los riesgos que puede depender de la acción negativa de un organismo vivo o sus productos sobre cualquier ente. En lo relativo a la Bioseguridad, es el riesgo derivado de la manipulación o exposición a agentes patógenos infecciosos que puede tener como consecuencia la infección de la persona expuesta, con o sin manifestaciones de enfermedad10, 11 (Fernández, 1987; Varela, 2011).

La infección en personal de laboratorio depende básicamente de la interacción de 4 factores:

• Extensión de la contaminación: volumen o concentración de microorganismos involucrados y área contaminada.

• Vía de infección: percutánea, por ingestión, por inhalación, ocular (por la mucosa conjuntiva) o por fómites (vía secundaria).

• Virulencia del microorganismo.• Susceptibilidad del hospedero: estado inmunitario.

7


Riesgo humano

Existe un grupo de riesgo fundamental constituido por factores humanos, los que pueden incrementar considerablemente el riesgo de los otros factores, y estar relacionados con las actitudes y habilidades para el trabajo; estos son: el estado físico y psicológico del trabajador, su capacidad intelectual y entrenamiento laboral, así como con la organización general del laboratorio. También, la habilidad auditiva, la agudeza visual, la fortaleza y la movilidad, constituyen algunos de los factores fisiológicos que pueden afectar la susceptibilidad de un individuo al daño.

De igual forma, pueden existir variaciones temporales en el estado físico y psicológico, tales como la fatiga, la enfermedad, y el uso de medicamentos que pueden provocar reacciones lentas, dificultad para la concentración y para la percepción de los riesgos.

Como ejemplo de dos tipos de riesgo extremo, de posible ocurrencia entre el personal de laboratorio, se tienen el físico y el psicológico. A continuación, se presentan los resultados de dos informes publicados por12 Harrington (1980) sobre sus observaciones en Gran Bretaña:

• Los accidentes de laboratorio que dan como resultado ulceraciones son frecuentes entre el personal de laboratorio; uno de cada cuatro trabajadores de laboratorio sufrió heridas en un año de estudios prospectivos.

• Estudios de mortalidad entre patólogos sugirieron que el suicidio por envenenamiento era una causa común de muerte; el acceso laboral a compuestos químicos letales fue el factor que posiblemente explique la alta proporción de suicidios por envenenamiento, comparada con la población general.

8


Los ejemplos anteriores muestran que el personal de los laboratorios médicos veterinarios, médicos humanos y biológicos, está sujeto a gran cantidad de riesgos de peligrosidad variable y de causas multivariadas; en las que intervienen varios factores, tales como: la responsabilidad individual del trabajador y las responsabilidades colectiva y administrativa, desempeñan funciones preponderantes o coadyuvantes en su existencia.

Los trabajadores del laboratorio están sometidos también a un gran número de riesgos, cuando como parte de su labor deben trabajar en colectas de muestras y otras actividades que se desarrollan fuera del laboratorio, pero relacionadas con su ocupación. En estos casos, el hecho de que pueden ocurrir fenómenos imprevisibles hacen aún más difícil la evaluación de los riesgos posibles, y el poder tomar medidas de seguridad para tales contingencias13 (Meoño-Sánchez, 2017).

Además, está el riesgo individual para el personal de laboratorio que en algunas ocasiones puede existir un riesgo comunitario o más o menos importante, cuando se produce la contaminación ambiental con isótopos radioactivos, productos químicos o agentes biológicos de importancia médica, veterinaria o fitosanitaria; pudiendo provocarse un verdadero desastre ecológico, de consecuencias para la salud y/o económicas insospechadas.

Figura 5. Uso de cabinas de

seguridad para evitar riesgo

humano.

9


Riesgo biológico en laboratorios microbiológicos

En el presente apartado, se insistirá fundamentalmente en el riesgo biológico causado por agentes patógenos infecciosos, a los que resultan expuestos los trabajadores de los laboratorios médicos, veterinarios y biológicos y en especial, del laboratorio microbiológico en su labor cotidiana14 (Cobos et al.,2015).

Los laboratorios de microbiología tienen carácter especial, porque el trabajo se realiza en un medio que puede ser potencialmente peligroso para las personas que trabajan, o se encuentran cerca de ellos.

Entre las causas más frecuentes de infecciones en el personal de laboratorio, se encuentran: accidentes de trabajo, negligencias e inobservancias de reglamentos al manipular agentes infecciosos, y no disponer de los medios adecuados de protección y personal inadecuadamente entrenado 15 (Cedial y Villamil, 2004).

Con la mayoría de los agentes patógenos, el riesgo de infección es mayor para el personal que trabaja directamente con ellos; pero existe también, cierto riesgo para el personal que indirectamente se relaciona con éstos e incluso para la comunidad donde se encuentra enclavado el laboratorio.

• En un informe de16 Wedum (1975), se señala la ocurrencia de casos de Tifoidea, Cólera, Brucelosis y Tétanos, asociados al trabajo de laboratorio, desde principios del pasado siglo.Estudios realizados por 17, 18 Pike y Sulkin (1965) y Pike (1976), mostraron que las infecciones bacterianas y virales más comúnmente asociadas al trabajo de laboratorio fueron: la Brucelosis, la Tifoidea, la Tularemía, la Tuberculosis, Hepatitis y la Encefalomielitis

10


Equina Venezolana, pero sólo en unos pocos casos se asociaron con accidentes de laboratorio reconocidos; el resto de ellos, no se confirmó la Fuente de Infección y sólo fue posible establecer que la persona infectada había trabajado con el agente en cuestión.

• En el caso de los Arbovirus la exposición a aerosoles infecciosos se ha considerado la fuente de Infección más común; mientras que para el virus de la Hepatitis el mayor riesgo está representado por la manipulación de los productos patológicos de los pacientes o portadores (principalmente sangre y/o sueros).

• Diferentes estudios documentados por el riesgo potencial de adquisición de infecciones de laboratorio con algunos agentes, sobre la base de la prevalencia e incidencia de casos en el personal de laboratorio, que entre la población, mientras que el riesgo de contraer Tuberculosis es también 5 veces mayor entre los primeros que entre los segundos12 (Harrington, 1980).

• Algunos agentes patógenos considerados como de muy alto riesgo presentan una situación especial, ya que su infectividad se mantiene aún en la sangre y tejidos de vertebrados asintomáticos naturalmente infectados, por lo cual puede transmitirse la enfermedad a los manipuladores de estos animales aparentemente sanos y de sus productos, como ocurrió con la Enfermedad de Marburgo aparecida en 196719 (Martín, 1973).

• En ocasiones, el peligro de infección por estos agentes traspasa los límites del laboratorio que directamente trabaja con ellos, en grandes cantidades o altas concentraciones o que manipula animales vertebrados naturalmente o experimentalmente infectados. Tal es el caso de los brotes nosocomiales de Fiebre de Lacsa

11


ocurridos en 1969-1970 en Nigeria Central, que afectaron principalmente al personal médico y paramédico que atendió a dichos pacientes y a otras personas que se encontraban hospitalizadas en ese momento20, 21 (White, 1972; Nonath, 1974).

Entre las Fuentes de Infecciones en el laboratorio, los accidentes son responsables de alrededor del 17% de ellas. Los accidentes más frecuentes son aquellos que involucran el uso de jeringuillas y agujas, los derrames de aerosoles, que en conjunto abarcan aproximadamente el 50% de los mismos18 (Pike, 1976).

Muchos procedimientos habituales de laboratorio, tales como el pipeteo vigoroso, centrifugación, la apertura de cultivos liofilizados, la cosecha a partir de animales o huevos embrionados inoculados, agitación de tubos de cultivo, homogenización, etc., son también capaces de generar aerosoles que pueden producir contaminación de las superficies e inclusive expandirse a otras áreas con la posibilidad de infectar a muchas personas.

La tendencia de los tipos de microorganismos proporcio-nalmente involucrados en infecciones de laboratorio desde la década del 20 hasta los años 70 del pasado siglo ha sido de disminución de infecciones causadas por bacterias una elevación progresiva de las infecciones causadas en primer lugar por virus y en segundo lugar por hongos, la cual puede estar relacionado con el desarrollo histórico de la Microbiología.

En un estudio estadístico de infecciones de laboratorios de investigación y diagnóstico18 (Pike, 1976) se observó que éstas se producían más frecuentemente en laboratorios de investigación (59%) y diagnóstico (17%) aunque también ocurrían con menor frecuencia en laboratorios educacionales (2,7%) y de producción de biopreparados

12


(3,4%); en otros laboratorios no especificados se producían con una frecuencia de un 18%22 (Llerena y Zabaleta, 2014)

Figura 6. Para que los microrganismos presentes en las muestras no

contamine el medio exterior, se usan estos equipos de seguridad.

13


La bioseguridad como disciplina científica

La Bioseguridad se ocupa de la prevención del riesgo biológico en personas y/o animales directa o indirectamente expuestas al mismo, producto del trabajo o de la manipulación de agentes infecciosos.

Las medidas de bioseguridad recomendadas para los laboratorios que trabajan con gér-menes patógenos tienen en consideración el riesgo biológico y los otros tipos de riesgo y por tanto están encaminados a la seguridad en general, aunque con énfasis particular en las medidas de seguridad biológicas.

Principios de la bioseguridad

La bioseguridad consta de tres principios o elementos básicos para garantizar el aislamiento o “contención” adecuada de los agentes biológicos.

Técnicas y prácticas correctas de laboratorio

Es el elemento más importante para la bioseguridad y tiene el mayor peso en la prevención eficiente del riesgo biológico;

Bioseguridad

14


no obstante tiene que suplementarse apropiadamente con los otros 2 elementos o principios.

Las recomendaciones en cuanto a requerimientos del trabajo con agentes biológicos pueden encontrarse en varios materiales publicados23, 24, 26 (OMS, 1983; Centers for Diseases Control, 1988; OIE, 2004) y recogen los procedimientos básicos de trabajo, prácticas de higiene personal y conducta que debe observar el personal de laboratorio en relación con su trabajo.

Un aspecto de principal importancia es que el personal esté debidamente entrenado para el trabajo en condiciones seguras.

Equipos de seguridad

A los equipos de seguridad se les denomina también barreras primarias ya que constituyen la barrera directa entre el personal y el material infeccioso.

Estos equipos incluyen a los gabinetes de seguridad biológicos y otros equipos para protección como son: instrumentos de pipeteo, copas de seguridad para centrífugas, etc.

Los equipos de protección personal (guantes, botas, batas, máscaras respiratorias o faciales, etc.) también son considerados barreras primarias.

Diseño adecuado de las instalaciones de laboratorio

A las instalaciones de laboratorio se les denomina barreras secundarias, las cuales fungen como protección del posible escape de agentes infecciosos.

15


En general existen dos niveles de diseño o tipos de laboratorio23, 26 (OMS, 1983, 2005):

1. El laboratorio básico, para agentes en grupos de riesgo I y II. Es un laboratorio convencional que satisface los requisitos mínimos indispensables para el trabajo con gérmenes patógenos.

2. El laboratorio de aislamiento, seguridad o contención; para agentes en grupos de riesgo III. Es un laboratorio con técnicas y prácticas de laboratorio, equipos de seguridad y facilidades de laboratorio apropiadas para el riesgo que representan los agentes infecciosos que se manipulen en estos lugares.

Figura 7. Personal

trabajando con barreras

directas entre él y el

material infeccioso.

Figura 8.

Representación de un

diseño de laboratorio

para agentes del grupo

de riesgo III.

16


Criterios adicionales a tener en cuenta al definir el nivel de bioseguridad para trabajar un agente dado, son los volúmenes y concentraciones del agente en cuestión, así como la utilización de modelos experimentales “in vivo”; los grandes volúmenes o altas concentraciones de microorganismos, así como la inoculación en animales, frecuentemente elevan los requerimientos de bioseguridad necesarios para el trabajo.

17


Se han establecido 4 grupos de riesgo en orden creciente de peligrosidad:

• GRUPO I. Agentes con bajo riesgo para el individuo y la comunidad.

• GRUPO II. Agentes con moderado riesgo individual y riesgo comunitario limitado.

• GRUPO III. Agentes con alto riesgo individual y bajo riesgo para la comunidad.

• GRUPO IV. Agentes con alto riesgo para el individuo y la comunidad.

Entre los elementos a considerar para clasificar a los agentes biológicos según el riesgo están:

• Capacidad patógena del agente en infecciones naturales o de laboratorio.

• Modos de trasmisión y rango hospedero.

• Disponibilidad de medidas de prevención eficaces.

• Disponibilidad de tratamiento eficaz.• Endemismo o exotismo del agente.• Experiencia de trabajo con el agente.

Clasificación de agentes biológicos de importancia humana en base al riego

18


Los riesgos atribuibles a ciertos biológicos varían según los países, de manera que un agente patógeno, que es importante en una parte del mundo, puede serlo menos en otra.

19


Los niveles de Bioseguridad recomendados para los diferentes tipos de riesgo considerados para los agentes infecciosos, conjuntado las recomendaciones de la23, 27 OMS (1983) y los CDC-NIH (1984) se han integrado en el Cuadro 1.

Como se puede apreciar, las prácticas y medios de contención se incrementan proporcionalmente a medida que aumenta el nivel de riesgo de los patógenos considerados.

Cámaras de seguridad biológica

Existen tres tipos de cámaras de seguridad biológica:

• CLASE III: Garantiza aislamiento físico del operador con respecto al material con que trabaja. La entrada y la salida del aire están provistas de filtros HEPA, el trabajo se efectúa a través de troneras con guantes finos y el material se introduce y se retira por una abertura sellable. Este es el único tipo de cámara de seguridad biológica realmente satisfactorio para trabajos que implican gran riesgo, pero es costoso.

Niveles de bioseguridad

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× CLASE II: Son cámaras con flujo laminar de aire y acceso abierto, la barrera de aire circulante protege al operador al abrir la cámara. A través de un filtro HEPA sale de la cámara una cantidad de aire igual a la de la barrera de aire. La protección es menos completa en este tipo de cámaras y, si se usan con descuido, puede producirse contaminación cruzada. No obstante, es más conveniente usar estas cámaras que las de la clase III.

Figura 9. Personal

trabajando en una

cámara de seguridad

Clase III28.(Recuperado de: http://www.

hwkessel.com.pe/productos/

cabinas-de-flujo-laminar)

Figura 10. Cabina de

seguridad Clase II29.(Recuperado de: http://www.

telstar-lifesciences.com)

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• CLASE III: Se recomiendan estas cámaras como último recurso. La protección se basa en una rápida corriente de aire que entra en la cámara al abrirla y sale a través de un filtro HEPA.

Es preciso probar las cámaras de seguridad biológica cuando se instalen y, luego, a intervalos regulares. Para su empleo se deben seguir estrictamente las instrucciones del fabricante.

Cuando se trabaja en cámaras de las CLASES I o II, el personal debe usar guantes largos, en las cámaras de la CLASE III, los guantes están integrados a la unidad.

En la mayoría de las cámaras es rápida la circulación del aire. Las bacterias en el exterior de las pipetas, las gotas en el extremo o el simple procedimiento de verter una suspensión de un recipiente a otro pueden dar lugar a que se formen aerosoles que contaminaran materiales que se encuentren en el flujo descendente del aire. En consecuencia, es preciso vaciar y desinfectar concienzudamente la cámara antes de cada nueva operación. Solo deben permanecer en la cámara los materiales necesarios para la operación en marcha, que se colocaran en cada extremo, alejados de la corriente de salida de aire.

Se recomienda no usar mecheros de Bunsen en las cámaras de seguridad biológica, ya que pueden alterar el flujo del aire y existe el riesgo de que se deterioren los filtros. Son más convenientes los incineradores de asas microbiológicas, pero son preferibles las asas desechables.Los dispositivos de llenado de pipetas requieren mención especial, es frecuente que funcionen mal y dejen caer gotas. Es preciso evitar que tengan hebras de algodón. Cuando se pipetean suspensiones virulentas, es conveniente trabajar sobre un paño humedecido con desinfectante que, una vez usado, se puede someter a la acción del autoclave.

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Embalaje y transporte de muestras

Nos vamos a referir a muestras para el cultivo bacteriológico. La persona que reúne las muestras debe tomar precauciones para protegerse y eliminar eficientemente los restos de muestras cuando no se embala la totalidad de estas para envío. Es preciso adoptar medidas de asepsia y esterilizar los instrumentos después de usarlos.El embalaje de sustancias y muestras infectadas consta de tres capas:

a). Un recipiente primario, donde se coloca la muestra, b). Un recipiente secundario que contiene material

absorbente entre su superficie externa y el recipiente primario, en cantidad suficiente para absorber todo el líquido en caso de fugas y,

c). Una envoltura exterior para proteger el recipiente secundario de factores externos (por ejemplo deterioro físico y agua) durante el transporte.

Es importante colocar, bien adherido en el exterior del recipiente secundario un formulario de datos relativos a la muestra, así como material informativo que permita identificarla o describirla. Se debe enviar por separado al laboratorio receptor otro ejemplar del formulario.

Antes de enviar muestras fuera del país, es preciso contar con la autorización del laboratorio receptor y con toda la documentación y las instrucciones necesarias.

Organización de la Bioseguridad

Resulta necesario que exista una organización y medidas apropiadas que garanticen la seguridad del personal de los laboratorios y de los que le rodean.

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Garantizar la bioseguridad en los laboratorios médicos veterinarios no puede ser una labor individual, espontánea o anárquica, es preciso que exista una organización de seguridad que evalúe todos los tipos de riesgo en un laboratorio y acorde con las recomendaciones hechas por los comités de expertos, controle y garantice el cumplimiento de las medidas de seguridad para el trabajo en esos lugares. Debe enfatizarse que los 2 aspectos más importantes para garantizar la seguridad en un laboratorio son: la observación estricta de las normas técnicas y de seguridad de éste y el entrenamiento de los trabajadores; el equipamiento y las facilidades de laboratorio brindan barreras de contención adicionales eficaces y muy importantes, pero la primera y más importante barrera es la disciplina y habilidad del personal que labora en esos lugares.

Se ha señalado en algunas publicaciones23 (OMS, 1983), que la responsabilidad principal por toda la seguridad compete a las máximas autoridades administrativas y técnico-científicas de las instituciones encargadas de estas investigaciones médico veterinarias. En los centros o instituciones con gran cantidad de trabajo microbiológico es esencial que exista un responsable de seguridad a tiempo completo, en el cual el director podrá delegar sus funciones aunque mantenga su responsabilidad. También se ha recomendado en estos centros y/o lugares la formación de un comité de bioseguridad que debe recomendar la política y el programa de seguridad al director de la institución, formular y revisar las prácticas de seguridad en el área de su competencia, periódica y sistemáticamente se realizan reuniones de comités de expertos en cuestiones de bioseguridad que actualicen la información existente y dicten la política y recomendaciones con respecto a la seguridad de los laboratorios.

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El nivel de información, de sensibilidad y de acción que se logre entre todos aquellos que de una forma u otra tienen que ver con el trabajo en los laboratorios médicos veterinarios, determinarán el éxito en la implementación de las medidas de seguridad y su eficiencia en la prevención y limitación de los efectos perjudiciales.

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Como resultado de la revisión de literatura, se enlistan a continuación normas de uso obligatorio que se deberán aplicar en los laboratorios de diagnóstico veterinario para los niveles de riesgo I y II, principalmente cuando están enfocados a la docencia y la investigación; y con ello, disminuir los factores de riesgo que están implícitos. A saber, las normas propuestas en este manual son:

1. Entre todas las medidas de seguridad, la fundamental es la realización meticulosa de cada técnica, pues ninguna medida puede sustituir el orden y cuidado con que se trabaja.

2. No se permitirá pipetear con la boca.

3. En la zona de trabajo del laboratorio no se permitirá al personal comer, beber, fumar, guardar alimentos ni aplicar cosméticos.

4. Habrá que mantener el laboratorio limpio y aseado, retirando del mismo cualquier material que no tenga relación con el trabajo.

5. La superficie de trabajo se descontaminará al menos una vez al día y en caso de derrame de

Normas de laboratorio parael nivel de riesgo (I-II)

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sustancias potencialmente peligrosas, más de una vez.

6. Los miembros del personal de trabajo se lavarán y desinfectarán las manos después de haber manipulado material infeccioso, así como al abandonar el laboratorio.

7. Todos los procedimientos técnicos se practicarán de manera que se eviten e impidan en lo posible la formación de aerosoles.

8. Todos los líquidos y sólidos contaminados se descontaminarán antes de eliminarlos o de volver a ser utilizados, los materiales contaminados que se esterilicen o incineren fuera del laboratorio, deberán introducirse en recipientes resistentes e impermeables que se cerrarán herméticamente antes de sacarlos del laboratorio.

9. En el laboratorio se utilizarán en todo momento batas, uniformes u otras prendas de vestir apropiadas.

10. Siempre que sea necesario proteger los ojos y la cara de salpicaduras o impactos mediantes gafas de seguridad y protección, pantallas faciales u otro dispositivo de protección.

11. Sólo se autorizará el paso a la zona de trabajo del laboratorio a las personas que hayan sido informadas sobre los posibles riesgos y satisfagan cualquier requisito que se exija para entrar que eviten riesgos de contaminación y/o infección.

12. Durante el trabajo se mantendrá la puerta cerrada en el laboratorio.

13. No se permitirá la entrada de niños en la zona de trabajo del laboratorio.

14. Debe existir un programa de lucha contra insectos y roedores.

15. No se permitirá la entrada al laboratorio de animales, ni la libre circulación de personas que no tengan relación con el trabajo.

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16. No se permitirá conversar mientras se manipule material infeccioso.

17. Habrán de utilizarse guantes en todos los trabajos que entrañen un contacto accidental o directo con sangre, material infeccioso o animales infectados. Los guantes deben quitarse asépticamente y esterilizarse en autoclave con otros deshechos del laboratorio antes de proceder a su eliminación. Si no se dispone de guantes para un solo uso, se utilizarán guantes reutilizables, limpiándolos y desinfectándolos después de haberlos usado y antes de volver a ser utilizados.

18. Todos los derramamientos, accidentes y exposiciones reales potenciales de material infeccioso se notificarán al director del laboratorio con el fin de que adopte las medidas correspondientes de protección y/o corrección. Habrá que llevar un protocolo escrito de estos episodios y prever una evaluación, una vigilancia y un tratamiento adecuado.

19. De todos los miembros del personal del laboratorio, así como el personal encargado de la limpieza y esterilización, se tomará y conservarán muestras de suero sanguíneo para utilizarlo con fines de referencia. Cada cierto tiempo se podrán tomar otras muestras de suero en función de los agentes manipulados o de la marcha de la instalación.

20. El director o responsable del laboratorio se ocupará de que el personal reciba una formación apropiada sobre seguridad e higiene en el laboratorio.

21. Habrá que confeccionar un manual de seguridad en el que se identifiquen los riesgos reales y potenciales y se indiquen las prácticas o procedimientos adecuados para reducir al mínimo o eliminar tales riesgos.

22. Al personal se le informará sobre la existencia de riesgos especiales y se les pedirá que observen

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las instrucciones prácticas y procedimientos establecidos.

23. Hay que prever espacio suficiente para aplicar con toda seguridad los métodos de laboratorio.

24. Debe existir una iluminación suficiente para toda clase de actividades, evitando los reflejos molestos.

25. Las superficies de las mesas deberán ser impermeables al agua y resistentes a la acción de los desinfectantes, ácidos, álcalis, disolventes orgánicos y el calor moderado.

26. Debe reservarse espacio suficiente para guardar los artículos de uso inmediato, evitando así su acumulación desordenada sobre las mesas de trabajo y en los pasillos.

27. Fuera de la zona de trabajo deben haber locales para guardar la ropa de calle y los objetos personales, así como para comer y beber.

28. Si el laboratorio presenta ventanas y es posible abrirlas, éstas deben estar cubiertas con malla.

29. Los autoclaves y esterilizadores destinados al tratamiento de desechos sólidos necesita una instalación y unos servicios especialmente adaptados y/o construidos.

30. Deben reforzarse las puertas, proteger las ventanas y limitar el número de llaves de circulación, con el objeto de mejorar la seguridad del laboratorio ante cualquier acto de vandalismo.

31. Hay que hacer un lugar para almacenar en condiciones de seguridad los solventes, materiales radioactivos y gases comprimidos. Deben observarse las normas para reactivos incompatibles, así como tener equipo de extracción de vapores.

32. El empleo de jeringas y agujas hipodérmicas está restringido a la inyección parenteral y la aspiración de líquidos de los animales de laboratorio y de los frascos con cápsula de goma perforable.

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33. La recepción y envió de muestras conteniendo productos patológicos y materiales infecciosos se efectuará con arreglos a las normas existentes al respecto.

34. A las trabajadoras del laboratorio qu estén embarazadas, se les informará de los riesgos que supone para el feto la exposición profesional a ciertos agentes patógenos que pueden causar daños al embarazo. Las medidas concretas que se adopten para proteger al feto, dependerán de los microorganismos causantes de la exposición.

35. Se utilizarán cámaras o gabinetes de seguridad biológica siempre que se manejen agentes infecciosos en las siguientes condiciones:a) Con agentes de grupo de riesgo III.b) Cuando apliquen procedimientos con grandes

posibilidades de producir aerosoles peligrosos.c) Cuando se manejen concentraciones elevadas o

grandes cantidades de agentes infecciosos.d) Cuando se manejen muestras biológicas

desconocidas potencialmente peligrosas. En este caso además se extremarán al máximo todas las medidas de seguridad.

36. Como regla general debe desarrollarse el trabajo en parejas, en virtud de la cual ningún individuo debe trabajar sólo en el interior del laboratorio.

37. En las puertas de los laboratorios debe figurar la señal de peligro para riesgo biológico. En los laboratorios en los cuales se trabajó con materiales radioactivos debe colocarse además en la puerta la señal de peligro para materiales radioactivos.

38. Los refrigeradores, congeladores y neveras de hielo seco se deben inspeccionar, limpiar a fondo y descongelar a fondo periódicamente para eliminar todos los tubos, ampollas, etc. con un contenido peligroso que pueden haberse roto durante el almacenamiento. Durante la limpieza deben utilizarse guantes de goma.

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39. Todos los materiales, en especial si son infecciosos o tóxicos, que se almacenen en refrigeradores o congeladores debe llevar etiquetas con el nombre científico del material, la fecha de almacenamiento y el nombre persona o el número o identificación de la muestra, así como la identificación de quien lo almacena. No deben guardarse nunca soluciones inflamables en refrigeradores que presenten algún riesgo de explosión.

40. Todos los equipos deben tener de forma visible la guía de uso del equipo.

41. Los equipos que se empleen a determinada temperatura deben tener la bitácora de control de temperatura, así como la bitácora de uso de cada uno de los equipos.

42. Los trabajadores del laboratorio que sufran de algún proceso de inmunodeficiencias o que estén enfermos, no deberán manipular muestras o cultivos de agentes infecciosos.

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Citas

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Iris AntoninaSánchez González

Graduada como Doctora en Medicina Veterinaria, en la Universidad Central “Martha Abreu”, Villa Clara, CUBA; tiene una Maestría en el Estudio de Patología e Histoquímica, en el Institu-to de Medicina Veterinaria, Sección de Agricultura de Cuba, 1970 y otra en Bacte-riología General y Especial,

del Instituto de Medicina Veterinaria, Sección de Agricul-tura de Cuba, 1976.

Ha realizado diferentes misiones interna-cionalistas como Asesora en las ramas de la Patología y Bacteriología como: República Socialista de Vietnam, 1975, en el Laboratorio Central de Brno, Checoeslovaquia, 1987; en las especialidades de Tuberculosis y Brucelosis en el Centro Panamericano de Zoonosis, OPS, Argentina, 1987; como Profesional Asociada en el Centro Pana-mericano de Zoonosis, OPS, Argentina 1990-1991. Profesional contratada “First Research Coordination Meeting” de la FAO/OIEA, Brasil, 1991. Contrato “Second Research Coordination Meeting” de la FAO/OIEA, Colombia, 1992.

Acerca delos autores

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Alrededor de unas 20 publicaciones en la Revista Cubana de Ciencias Veterinarias. Ha trabajado en unos 40 Temas de Investigación. Trabajos realizados en diferentes Laboratorios de Diagnóstico Veterinario, Cuba 1966-1998. Laboratorios de Diagnóstico Veterinario en México, 1998-2003. Profesor Investigador en la Universidad Juárez Autónoma de Tabasco 2003-20013.

Ha realizado Asesorías y Cursos de Capacitación en el Laboratorio de Diagnóstico Veterinario de Chihuahua 2006, 2007, 2008 y 2012. Asesoría y Capacitación en el Laboratorio de Patología Animal de Tabasco, 2006, 2007 y 2009. Certificada por el Consejo Nacional de Educación de la Medicina Veterinaria y Zootecnia de los Bovinos. Período 2009-2014. Profesor en la Maestría impartida en la División Académica de Ciencias Veterinarias, UJAT en las materias de Bacteriología, Inmunología, Bioquímica, entre otras, en diferentes períodos.

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JulioCámara-Córdova

Ingeniero Agrónomo espe-cialista en Agricultura Tro-pical (1985) por el Colegio Superior de Agricultura Tro-pical, H. Cárdenas, Tabasco, México; Ph.D. de las Ciencias Biológicas con especialidad en Edafología (1995) por la Facultad de Ciencias del Sue-lo de la Universidad Estatal

de Moscú “M.V. Lomonósov”, Moscú, Federación Rusa. Ser-vidor público municipal (Director de Desarrollo y del DIF en Cunduacán, Tab.; Director de Desarrollo en Cárdenas, Tab.) y estatal (Sría. del Desarrollo y Sría. de Desarrollo Agrope-cuario, Forestal y Pesca del Gobierno del Estado de Tabasco), Director fundador del Área de Ciencias Agrícolas de la Uni-versidad Popular de la Chontalpa, integrande del grupo de expertos que creó la Universidad Intercultural del Estado de Tabasco y líder del equipo que diseñó la licenciatura en De-sarrollo Rural; Profesor–Investigador y actual coordinador de Investigación y Posgrado en la División Académica de Cien-cias Agropecuarias de la Universidad Juárez Autónoma de Tabasco; Miembro del Sistema Estatal de Investigadores de Tabasco del Consejo de Ciencia y Tecnología del Estado de Tabasco y ostenta el Perfil Deseable del Programa de Desa-rrollo del Perfil Docente de la Secretaría de Educación Públi-ca. Fue Tecnólogo en PRAXIS Ingeniería Ambiental, S. de R. L. Ha participado o dirigido investigaciones científicas y cuenta con numerosas publicaciones (artículos, capítulos y libros) científicas, técnicas y de divulgación. Áreas de interés: Agri-cultura Tropical, Edafología Tropical, Medio Físico, Desarrollo Sostenible, Sistema Global de Posicionamiento, Recepción Remota y Sistemas de información geográfica, Interculturar-lidad y Seguridad Alimentaria.

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Cand. Dra. Jahicela Liévano Morales

Candidata a Doctora en Pla-neación Estratégica y Direc-ción de Tecnología, Maestría en Gestión de Tecnologías de la Información, y Licen-ciada en Informática Admi-nistrativa. Profesora-Inves-tigadora adscrita a la Divi-sión Académica de Ciencias Agropecuarias en la Univer-sidad Juárez Autónoma de

Tabasco impartiendo asignaturas relacionadas con la for-mación emprendedora y la administración agropecuaria, e integrante de la Comisión Divisional de Emprendedores. Integrante del Comité Institucional de Evaluación para el Encuentro de Jóvenes hacia la Investigación, formando parte del Área de Ciencias Sociales y Económicas. Miembro activo de la Red Nacional e Internacional de Profesionales en Administración de Agronegocios y Disciplinas Afines (RENAIPAA) y de la Sociedad Mexicana de Administración Agropecuaria (SOMEXAA). Ha sido ponente en eventos in-ternacionales en temas sobre emprendimiento, y la vincu-lación universidad-sociedad-empresa. Ha participado en publicaciones nacionales e internacionales relacionadas con emprendimiento social y su impacto y formación en la educación superior.


Se terminó de diagramar y compilar el seis de noviembre de 2017 en la Coordinación de Investigación y Posgrado de la División

Académica de Ciencias Agropecuarias de la UJAT.Km 25 de la carr. fed. 195, tramo Villahermosa-

Teapa. Ra. La Huasteca, 2ª sección, C.P. 86298,Centro, Tabasco, México.

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ÁNGEL RAMOS SÁNCHEZ

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