UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA CELULAR Y DE TEJIDOS I

Practica 3: Extraccin e identificacin de carbohidratos de reserva en animales y plantas

Equipo: 5 Grupo: 2451Integrantes: Garca Rodrguez Omar Hernndez Tinajero Mariana Mota Cordero Juan Antonio

Mircoles 18 de marzo del 2015Objetivos Analizar la importancia biolgica de los carbohidratos de reserva. Extraer polisacridos de muestras diferentes. Identificar a estos con la prueba de lugol y Benedict, antes y despus de su hidrolisis.

Resultados

Experimento 1

Despus de realizar el tratamiento previo del hgado y dejndolo reposar durante 24 hrs en el refrigerador, se decanto el lquido y se centrifugo el sedimento a 2000 rpm durante 5 min, se separo el precipitado y se dejo secar, inmediatamente se disolvi una cantidad de glucgeno en 4 mL de agua destilada, se tomaron dos muestras de 0.5 mL de esta solucin y se realizaron las pruebas de lugol y benedict utilizando 2 gotas en cada caso para la prueba de lugol se obtuvo una coloracin negro-verdosa lo cual indicaba una prueba positiva, y la reaccin de benedict fue un color azul claro dando un resultado negativo.

Posteriormente se procedi a realizar la hidrolisis para la cual se agrego 3 gotas de HCl en dos tubos con la muestra y se dejo calentar a ebullicin en bao mara durante 15 min. Despus se neutralizo con una solucin concentrada de NaOH y se realizaron las pruebas en las cuales para lugol dio una coloracin un tanto caf-rojiza teniendo un resultado negativo mientras que para la prueba de benedict se obtuvo un coloracin azul muy clara para obtener un resultado negativo.

Experimento 2

Se cort un pedazo de papa y para la prueba de presencia de almidn se le agregaron dos gotas de lugol, las cuales dieron una coloracin entre verdosa y negra.Experimento 3

Usando los 0.5 mL de extracto de arroz en cada tubo antes de la hidrolisis se agregaron 2 gotas de lugol en uno y 2 gotas de reactivo de Benedict en el otro, en el caso del reactivo de benedict se tuvo una coloracin azul clara lo cual indicaba un resultado negativo, mientras que en la prueba de lugol se obtuvo una coloracin negra-verdosa mostrando un resultado positivo.

Posteriormente de realizo la hidrolisis con 2 mL del extracto de arroz y se agregaron para esto 3 gotas de HCl en cada tubo y se calent en bao mara por 15 min, al terminar se dejo enfriar y se neutralizo con una solucin de NaOH de sodio concentrado y se procedi a hacer las prueba de lugol y benedict las cuales tuvieron resultados negativo para lugol y positivo para benedict.

Anlisis de resultadosLa solucin de Benedict es de color azul claro porque contiene sulfato de cobre. Cuando se mezcla y se calienta con un azcar,si ese azcar tiene electrones libres para donar, el cobre acepta estos electrones y se reduce, con lo cual se vuelve marrn anaranjado la llamamos azcar reductor.El colorque danlos polisacridoscon ellugol (solucinde I2y de IK) se debe a que el I2ocupa espacios vacos en las hlices de la cadena de unidades de glucosa, el lugol da con el almidn color azul verdoso y con glucgeno rojo caoba.

Con el glucgeno antes de la hidrlisis dio positivo al lugol y negativo a Benedict, despus de la hidrlisis dio positivo a lugol y negativo a Benedict por lo que el glucgeno no es un azcar reductor.La prueba de lugol en una rodaja de papa dio positivo por lo que hay presencia de almidn.En la prueba con arroz antes de la hidrlisis dio positivo para lugol y negativo a Benedict y despus de la hidrlisis dio negativo a lugol y positivo a Benedict por lo que el almidn en hidrlisis es capaz de donar electrones y reducir al cobre.

ConclusionesAl llevar a cabo las pruebas se pudo observar en cada una de las muestras el carbohidrato presente, en el caso del hgado de la rata (glucgeno) con la prueba de lugol indico positivo, mientras que el Benedict dio negativo, con la hidrlisis dio negativo para ambas pruebas. Para el caso de la papa al agregarle el lugol dio positivo lo cual muestra la presencia de almidn. Para la muestra de arroz en la prueba de Benedict dio negativo (no tena azcar con grupo reductor), mientras que el lugol mostro un resultado positivo (muestra la presencia del polisacrido). Despus de la hidrlisis del arroz se mostraron resultados diferentes en el caso de Benedict dio positivo y para el lugol dio negativo.Con esta prctica aprendimos pruebas para identificar los carbohidratos presentes en animales y plantas y cul es su fundamento para saber cundo utilizar cada una de las pruebas