delphinidin inhibits endothelial cell proliferation and cell cycle progression through a transient...

7

Click here to load reader

Upload: sophie-martin

Post on 14-Sep-2016

215 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Delphinidin inhibits endothelial cell proliferation and cell cycle progression through a transient activation of ERK-1/-2

����������� ������ �������� � ���� �������� ��� �� ���� ���������������� ������ � ����� ��� ��� �� ��������

������ � ���� � ��� ��� � ���� � !� "� ��� �������� � # ����� $���� ����� �� %

����������� �� �� �������� ��� ����������� ���������� �� ������������� ��� ���� ����� ������� �� ���������

��!������ "��� �������� �� ����� �� ���� #� $�� %���& ���'���� �����

�������� &' $���� �''�( ������ �& )���� �''�

��������

�����#������� � ������ � �� ���*� � ��� ���� �� ����� �� ���� ��� #��� ������ �� ���+ �� � ����� ���� � ���� ��� �� �����

� ��� � ���� � #��� ���#� � � �� �� ��� ������ �� ��, -��� ���� * � �#�� � ��.�� �� ����� �� ������������ � �� ����

���������� �������� � �� �� �� �� ����� ���� �� ����� ���� �������� � ����� /0$�"�1 �������� ���, ����������� ������� ����#�

�� � ���� � ���������# ���*� � ����������� 0$�"� �������� ���, -��� ���������� ��� ����� �� ������������ �� �������� � �������

� ��� ���� ���������� �� ����� �2��� � �* � �� �� ������ �� *�� ����������� �� ���� ����������� � ���+��� �� ���� ����� �� 3'�3�

�� ��, �����#���� ����������� �� ���� ����� ����������� �� ����� �� *�� �� #���� ��� �� �� #������� ���� ���� � ��������

� �� ��, -��� �������� ������2�������� �� � �������� �� ���4$ ��"��� �� ��*���2�������� �� � � �� ������ ��, 5� ����������� ��

���������� ��� ����� �� ����������� # � � �� �#��� ��� �� ��������� �� �� 6�� �������#�� �� � ���� �� ������������� ��

�#�� �����#�� ��� �� � ����,

� �''� �������� ������� 5��, $�� ����� ��������,

(� )����* $����� ����( �������� � ���� �������� ���( "��� �����( ��������( " ��������

� ���� ������

$����� ���� �� ���� �� �� ����������� � ��

*����� ���� � �� ���� �� ���� � ������, 5� ���� �������

������� � * � ���*� � ���� ��#������ # � � ��

����� ��� ���.�� � ������ �� � ����� � �������� �

�������� �� ���+ �� � ����� ���� � ���� ���� � ����������

�����7 ## ��� �� ���#��������� ��������� 8�9, -��

�2 � #��� ���#/�1 � *���� ��� � � � �� ��� � ���

������ �� � # � � ��� �� � ���� ���� � ��������

���� �������� ��� �� #��� ���� �#�� ���� ��� ���� ��

����������� 8�:;9, -��� � �� ��� ��� ������� �

�� ����� �� ���� �2���� �������� ����� �2�� ��� ��

��*������� ����������� ������ �� ��� ����� ����

�� ���� � *�� �� ����� �2��� /<)1 ����� ��� � �* �

8=:>9, ����������� �� ���������� �������� � �� �����

�� ����� ���, ?������� ������ ���# ��� � �� ��� � ��

��� ��� ���*� � ����������� ������ � ���������#�

�������� ��� 2 � ����� 8@9, -��� ���� ������� ��

�� ���� �� ����������� � ��#�� � <) ���������

������ � ����� �� �� �������� � ����#� ������������

�� �� ����2�� � ������� 8A9, 5� ������� ����������� � �

��� ������� ������� � ����� �� ���*� �� ��# �

�#�� ���� ���� � ������ ��� �� ������# � ���*��� ���

������� ��*���� # ���� ���� � �� �� 8B9, -���� �������

����� # � �������� ���#����� �� �� �� ��#����� ��

���* �� ���#����������,

C���� ����������� � � �� �������� � ����� ���# ���

��# �� 6�������� ���* ��* ������� � � �� � ����

�������� � 8�'9, )��� ��� �������� � ������� � ��#��

���� �������� � ����� � ����� �������� � �� ���# ��*

���� ������� � ������� � ���� ����������� 8��9,

$������ �������� ��� �� � ���� � �������� � ����� �� ��

����� � ���� �� ���# � ������� � ��������� ���� �

�#������ �������#�� �� *���� �� ���� 8��9� ������

������ �������� ��� �� ����6��� ����������� �� �����

�� � ������� � ��������� ���� � ������������� �� �#��

0�����#�� � ?� �# ������ @= /�''&1 @@B:@>=

'''@��B=��'��D : ��� ���� # �� � �''� �������� ������� 5��, $�� ����� ��������,

?55E � ' ' ' @ � � B = � / ' � 1 ' � = @ A �F

%"������������ ����, -��,E �&&�&�B'��;�;��;=(� 2E �&&�&�B'��;�;&��&,+���� �������* � ��G�� �# ,���� ��,�� /�, $���� ����� �� 1,

,--��!�����* 0$�"�� ����� ���� �������� � �����( <)� �����

�2���( H�3 � � ���� � ���������# ���*� � ���( ��<)�� �������� �

<)����� ��( 8" ��9� �������� ���� � ����#( ��<$� ���������� �������(

-C<��� ��#�� � ���2����������� � ����� ���#��� �� �C-? ���+����

� �����,

Page 2: Delphinidin inhibits endothelial cell proliferation and cell cycle progression through a transient activation of ERK-1/-2

���# ��� 8��9, -���� � �� �������� � �� � � �

����� ��� �������� � ���� �������� ��� �� ���� ���� ��

�! ��� # � ����� �� ���������# ���#� ���� *���� ��

���� ���#�� ������������ � ��� ������ � �� 6��

����������� �� # �� �� �#�� ���*� 8�&��;9, -���������

����� ��� �� �������� � ���� �������� ��� # � � �

���� ��� ��� ����� ����� ��� �� �� #�� �� ��� ��

� ����� ���� � ���� ��� �� � �����,

I�#��� ��� �� �� � ���� � ���������#� �� �� ��#�

�� #� ���� �� ����������� � �������� �� ��J���� �

.�� ����� � �������� � ����#��� �� ���� ����� ����,

4� �������� ������� �� �� ������ �� ����������� ��

�������� ���� ���� ����� ����������� �� ��� �� ���� ����

� �* �� �� ������� ����� ���� �������� � �����

/0$�"�1, 4� ����� � ����������� ������� �� ����#�

�� � ���� � �������� � ���*� � ��� /H�3 1��������

�������� � ���� �������� ��� � �������� �����������

������ 3'�3� � � �� �� �� �� ���� �����, -��� ���

�������� ��� ����� �� ����������� �� ���������� �� ��

<) � �* � � ��6����� �� ��� ��� �� ��������

� �* �, �����#���� ������ �� ����������� �� ����

����� ����������� ���� �� #�� *�� ������������

�������� � ����� ����� ��� �� ���� �� ������ �2��������

�� �� #������� ���� ���� � �������� � �� ��, 5������

����������� �� #�� ������� ������2�������� �� � ����

����� �� ���4$ ��"��� �� ��*���2�������� �� � � ��

������ ��,

� ��������� �� ����� �

$.&. ���� ������� ��������

0$�"� *��� ���*� � �������� ���������� 8A9, 0���7��

����� *��� ������� &>� �� =K ")� #������� �� �� ���

7 �+� /<���1 ����� �� *�� ��� 5 ���� ��� /','@ #��#�1

�� #�2��� �� ���� �� I #L� �� /�E�� ���1 ��� ���

��� �'K �� � ����� ����# / 0�1� � #� ����� #����

�'' #��#� ��� ���� ������� /�'' C�#� ���������� ��

�'' C�#� �����#����1� �,= ���#� �����!��� �� �' ��H� #�� " /0��4�� +��1, "������ *��� ���� �� � .��

� �� ���, �� *����� ��� ����� *��� ��������� ��

@' ## ?��� ������ /<���1,

$.$. ���� /���0������ ����

0$�"� *��� ������ �� B@�*��� �� �� �� �� *�� ��� 5

���� ��� /','@ #��#�1 ��* ������ � ���� ��� �

�������� ������ �� �2����#�� /&''' ����� ��� *���1, ���

����� ��� �� ���� ����� *��� ������ � �������� ���

�; �� �� ����� �� 0�� *���� * � ���.���� � ���#��

� � ����� �� 3'�3� �� ��, 0$�"� *��� ��� ���� �� �;�

;A �� >� �� *�� �� �2����#�� � #����# ��� ����� �K

0�, "��� ��#�� * � ����#���� � ������#���� �� �

����� "���-��� B@ $M����� )�� ������� "��� ?������� ���

$�� � ���# ?��#�� ,

$.�. ���� � ��� ���� ��

0$�"� *��� ������ �� &= ## ?��� ������ /<���1

B'�''' ����� ��� *��� �� � � ������ #����#, ��� �����

��� �� ���� ����� *��� ������ � �������� ��# ��

����� �� 0� ��� �; ��, 3��*� ������ 0$�"� *���

��#�� �� *�� �K 0����� ����� #����# ���� �� ��

�� �������� �� ����������� ������ �A ��, -��� ������ ��

���� ��� � � ��� ������ � ���� ����� ����� �� �#�

������ ��� ��#���� ���� ����� ������, $��� �� #���

����� *��� .2�� �� >'K �� ��� ������ �� � � �� ;�,"���� *��� * ���� �� I �+L� � ���� � � ������� �����

������������ �� ������� ��� ����� ��� 5 �< �� $

/',� #��#�1 �� *��� ���� �� ��� �' #�� &>�, ?��������# ������ /?5� ',= #��#�1 * � ��� ���� �� � #�

���� *��� ���*�� � � �� &' #�� �� �� � �+ ���#

�#��� ��� ����� 7�* ���#��� � ����� ����� "����

M��� ���* �� /0���� ���+�����1,

$.�. 1������ -��� ���� ��

$��� �� #��� ����� *��� � ������ �� ����� ��� � ��

�� �'' �� �� �������� ����� ����� /�� #�E =' -���� �='

< "�� A ��"��� = ��-$� ',= �3-$� �'' < � � �����#

����� � � �� � ?�� ������#���� *�� �K -���� F�

�'' �� �' ���#� �� �������� �������� �� ���� ��1,

$��� 6� ��.� ��� � �� 0� ����� #����� =' �� ����

���� * � ����������� �� � �##��L� ������ ��� � �� �� >

�� ��K ���:?$3�, 0��� *��� ����� *�� ��<)� /��

�'''1� � �������� /���'�'''1� � � /���'''1� ���������

� ����������� /���'�'''1� ������ �� /���='1� ���4$ ��

"��� /���='1� �����*�� � �� ������ ���� ����2�� �������

J�� �� ����� /��='�'''1, 0��� *��� �� �� *��

��� ���� ���#���#��������� �� ���� ��� �' #�� ��

�2����� � "��F������ .�#� /��� +1, ��#� *��� �� ����

�� ������#���� � ����� * � �� ��!�� �� �� �� �����

�# ��� ����� ����� 5# ������� �� 0� ;,'� ���* ��

/��E��***,���������,��#1, ������ *��� �2������� �

�� ������ �� �� ������ � ����� ��, � � �2�������� ��

������ �����, -�� � #��� �� ���� * � ����.�� � � �����

#�#� ��� *�� ?���� � ��� �� #��� � �+� �� ������

��� � *�� �� ��� /��='�'''1 /� �� ���*�1,

$.2. ��������� ���� ��

������ �� �2������� � #� �� ��� �� < ��� � �

�2����#���, $� ����� �� � �� ��� /$<)H$1 �� ��� ����

�����L� ���� *��� ���� ��� � ���� � � ����� *��

� � '�'= ���� ���������� �����.� �,

$.%. �������

-�� �����*��� �� ���� *��� ����E ����������� ��������

/�2� �����N��1� H�3 /"��� ������1� ?�BA'=B /-�����1�

���������� ������� /���# 1� C'��@ /" ������#1, -��

�����*��� ������� *��� ����E �������� � ����� �2���

@>' �. ����� �� ��. 3 #�������� ���������� %2 4$���5 %%67%�2

Page 3: Delphinidin inhibits endothelial cell proliferation and cell cycle progression through a transient activation of ERK-1/-2

���� �� /��<)�1� � �������� �� ������ �� /����� &� �����

��B> �� ����� �"��@� ������������ 0� 0����������1� � �

/����� �$��'� C�� � 0�����������1� ��������� ���

�������� �� �� ��� /����� �$?��O-� ���# 1�

���4$ ��"��� /����� "��B� � � "��! 0�����������1

�� ������ ���� ����2�� �� /I�?1����J�� �� �����

/?��#�� 1,

� �������

�.&. 8��/���� ������� ������ ��� 9+: �������

/���0������ �0 #,+��

?����#�� �� ������ ���*�� � ����������� * � �� �

������ �� ������� ���� �� �#���������� # ���� � �

0$�"� �������� ���, -�� ����� �� ����������� * � # 2�

�# � �'�� ��� �� >� �� �� �� #�� ��� �� ������� �

��� �� �� ���� ��� ������� ����������� /�� ���*�1,

I�*����� ��� �� �����*��� ������� ����������� * � ����

�'�� ���� # 2�# ��� ���� ������� ��� � ���#��

���������#��������� ��� 2 ��� �� � ���� ����� 8@9�

�� ����� �� �� 8" ��9 �� �������� � ����� 8A9� �� ��������� �� �������� � ����� � ��� ������� 8�=9 �� ��

�������� �� ������# � ���*��� ��� ������� �� ��# �

���� � �����# ���� ���� $;&� 8B9, $� ������ �� �� ��, ��

�2������ �� 0$�"� � �'�� ��� ����������� ������ >� ��

������� �����.� � �������� �� � � �������� � ����

�������� ��� �� �� �������� �K 0� /�,�, �A� �K ������

���� < � �@� ��, �1,

5��� ��� �� 0$�"� *�� =' ���#� H�3 � �������

�#� �������� ����� �� �� �������� � ���� �������� ���

*�� # 2�# � �� �=� >K ���� �� ���� ��� >� �� ��

�� #��, -�� ��#�� ��� ����� �� H�3 * � ��#������

�������� � ����������� /< � ��� ��, �1,

��, �, ����������� �#� ��� �������� ��� �� 0$�"�, "���� *��� �2����� �

����� ������ #����# /��� ����� �K 0�1� �'�� ��� ����������� /���1 ��

=' ���#� �� H�3 ���� �� �� ��#�� ��� *�� �����������, H ���� ��

�� #� �� ��� �� �� �2����#���, ?������� ��� � � * � ����#���� �

����� �� �� ������ �, /��1 � � '�'� �� /���1 � � '�''� �������� ���

�������� � ������,

��, �, ����������� �#� ��� ���� ����� ����������� �� 0$�"�, "���� *��� �2����� � ����� ������ #����# /��� ����� �K 0�1 �� �'�� ��� �� �����������

������ �A �� �� �� �� � ����� �� �� ������ �, /$1 �������� ��� ���#���� �������� ���*��� ����� �� �� 3'�3�� � �� 3��� �� ��� �� �� ���� �����, /01

I����� #� ���* �� ������ �� �� ����� �� �� 3'�3�� � �� 3��� �� ��� ����#���� � ���* ���#���� � �����, /��1 � � '�'� �� /���1 � � '�''�

�������� ��� �������� � ������,

�. ����� �� ��. 3 #�������� ���������� %2 4$���5 %%67%�2 @>�

Page 4: Delphinidin inhibits endothelial cell proliferation and cell cycle progression through a transient activation of ERK-1/-2

�.$. 8��/���� �/��� ���� � ��� /�������� ������

-���'� :&3� ��������

-� ������� � *����� ������������������� ���� ���*�

�������� #��� � ��� �� � ��� ���� �� ���� ������ ��

����� �� ����������� �� ���� ����� ��������� * �

�� �� ��, "��#���� ���.�� ���*�� / ��, �$1 �

����������� ������� � ���#�� ��� �� 0$�"� �� 3'�

3� �� �� ����� �� *�� ��#������ �� �� � �� ��

*���� � ��� ��� �� �� � �� �� �� �� ���� �����,

I����� #� ���*�� � ����� �� �� &>�B� �'�=K �� �����

�� 3'�3� �� �����#� � �������� �� @>�;� B�& ��

�A�=� ���'K� �� ����� �� � �� 3���� �����������

/< � >� ��, �01, 5 ������ � ���� � �� ��� ���

�� ���� ����� ����������� ������� � ���������� * �

���������� �� ������� �������� �� 0$�"�

/��&� '�@ �� &��� '�AK ������� �� ������ �� ����

����������� �� ������ ������������ < � >1, -�� � �+ ��

������� �������� � ����������� �� 0$�"� � � ���

���������� ��� ������� ����� -C<�� �� � �� � ��

� ���& ����� #� ����#��� 8�=9,

�.�. 8��/���� ��-�� #,+�� /���0������ ������

�;����/������ ��� +�(�&3�$ '�������/������

/���)� �

<) �� �$? +�� ���� ������ ��� ��������� � �* ��

� �� ��� ���*� � �� � ���� �� �� ����� ��� ��

�������� � ���� �������� ��� 8�@��>9,

-�� ����������� <)����� �� �������� ����������

������� /��<$� �'' ��1 � � �� ����� �� �������� � ����

�������� ��� �� ��� �� #����� �� �������� ����� ��

����������� /< � >� ��, &1, 5����� � ������ *��� �������

*�� ����� ����������� <)����� �� ����������������

�� ������#���� ���� /�'' �� �'' ��� �� ���*�1,

-������ � �������� � �* �� �� #�� �� ����� *��

�� �����.� ������� �� ������� � �* �� C'��@

/�' ��1� ������� ��� *���� � � � �� ����� �

������ � ��� ������� �� ���������� ��� ����� �� ����

�������� /< � B� ��, ;$1, ��#�� � ������ *��� �������

*�� ����� �����.� ������� �� ������� � �* ��

?�BA'=B /�� ���*�1,

5� ����� � ���.�# �� �������#�� �� �� ��������

� �* � �� �� ���������� ��� ����� �� ������������

�#� ������ �� �������� ��� ��� � � ��� ������� �

*����� ��, $� ���*� �� ��, ;0� ����������� ��� ��

�������� ��� �' #�� �� ��#�� ���� � � �����.� ���

������� � � �������� ����� �� @ �� �; �� ��

��#�� ��� /< � &� ��, ;01, �� ���� ����������� � ����

� ��� �������� ����� ��� ;A �� >� �� �� #���,

-���� ������ ������ � � ��� ��� ��� �� ��������

# � �� � ������ ���� ��� �� ���������� ��� ����� ��

����������� �� 0$�"�,

��, &, ����������� ����� 0$�"� �������� ��� ������ <)�����������

� �* �, 0$�"� *��� �2����� � ����� �'�� ��� �� ������������ �'' ����<$ �� ��#�� ��� �� ����������� �� ��<$, H ���� �� ��

#� �� ��� �� ����� �2����#���, ?������� ��� � � * � ����#���� �

����� �� �� ������ �, /��1 � � '�'� �������� ��� �������� � ������,

��, ;, ����������� ����� 0$�"� �������� ��� ������ �$? +�� ���

�������� � �* �, /$1 0$�"� *��� �2����� � ����� �'�� ��� ��

������������ �' �� C'��@ �� ����������� ���� C�'�@, ?������� ��� � �

* � ����#���� � ����� �� �� ������ �, I����� #� ���* �� ������ ��

�� �������� ��� ������� � ����������� �� ����� �� �� �������� �� ��

��������, H ���� �� �� #� �� ��� �� ���� �2����#���, ?������� ���

� � * � ����#���� � ����� �� �� ������ �, /��1 � � '�'� �������� ���

�������� � ������, /01 4����� �� �� ���������������� �� 0$�"�

�2����� � ����� ������ #����# /��� ����� �K 0�1 �� �'�� ��� ��

����������� ������ ����� �� �#�, I����� #� ���* ������#���� � �����

�� ���������������� �2��������, � �������� �� #� �� ��� �� &:��

��� � � �2����#���, /�1 � � '�'= �������� ��� �������� � ������,

@>� �. ����� �� ��. 3 #�������� ���������� %2 4$���5 %%67%�2

Page 5: Delphinidin inhibits endothelial cell proliferation and cell cycle progression through a transient activation of ERK-1/-2

�.�. 8��/���� ������� ��� �</������ �0 ��� ���

������ �� �!����</������ �0 ��!�����&

4� ��� ������� �� �� �2�������� �� *� �������

�#���� �� �� �� ���# �� � �������� � �� �� �� ��

#������� ���� �� � � �� � �������� 8�A9, 4����� ��

� ����� ���*�� � �� #�� �� 0$�"� ������ �; �� *��

����������� ������� �����.� � �������� �� � � �2�����

���� ���# &@�;� >�BK /< � ;� ��, =$1,

"���������� �� #�� �� 0$�"� *�� �����������

������� �#� �������� ����� �� �� � �������� �2�����

���� ���� ;;�=� �'�� �� B&�>� �'�AK �; �� ;A ��

�� #��� ����������� /< � &:�=� ��, =01,

�.2. 8��/���� ����� � ��)���������� �0 � ��� 8&

�</������ ��� �� �!����</������ �0 /$&1, &3�/&

4� ��� ������� �� ����� �� ����������� �� #�� ��

�� ����� ��� �� �� �2�������� �� ��� �� �� # J�� ������

���� ��� �� 3��� � ������ � *����� ����� ���4$ ��

"��� �� ������ ��, $� ����� ���� ��� � ���� ��� ��

0$�"� *�� ����������� ������ �; ��� ������� � ����� ��

�� ���4$ ��"��� �2�������� /�A�A� ��@K� < � &� ��, ="1�

�� �����.� � �������� �� ������ �� �2��������

/>B�B� >�>K �� �������� ��, ������ ������ < � &�

��, =�1, -�� �������� ����� �� ����������� �� ������

�� �2�������� � � ��� ��� ������ � ����� /�A� '�BK ��

�������� ��, ������ ����� ��� � �� �� ��#�� ��� �

������������ < � &� �� ���*�1,

� ����������

-�� ������ ���� * � �������� � �� *����� �������

������ ���������� ������ �� ��# � ���� # � �2��

� ������������ �� ���#��������� ���������, I���

*� ������� � ����������� ������ �� ����#� ��

H�3 �������� �������� ��� �� 0$�"�� � ���� �����

����������� ���� �� 3'�3� �� ��, -�� ���������� ���

����� * � ���������� �� �� <) � �* � � * � ����

����� � �� ��� ��� �� �������� � �* �, 4� ���

������� ��� ���� �� �� #������� ���� � � ��������

��7���� � � �������� �� � � �2��������� � �����

�2�������� �� � ��������� � �������� �� ���4$ ��"���

�2�������� �� .� ��� �� ��*������� ��� �� ������ ��,

$�������� �� ���������� ��� ������ �� �����������

�������� ����� � #��� ���#� ��� ��������� �� � �����

� ���� � ���� ��� �� � ������ �� *���� �������� � ����

��, =, ����������� #���� � ���� ���� � �������� � �� �� #��������, 0$�"� *��� �2����� � ����� ������ #����# /��� ����� �K 0�1 �� �'�� ��� ��

����������� ������ �; �� �� *����� ���� � ���� � �� �2�������� �� /$1 � �� /01 � ��������� /"1 ���4$ ��"���� �� /�1 ������ ��, I����� #� ���*

������#���� � ����� �� ������ �2��������, � �������� �� #� �� ��� �� &:�= ��� � � �2����#���, /�1 � � '�'= �� /��1 � � '�'� �������� ���

�������� � ������,

�. ����� �� ��. 3 #�������� ���������� %2 4$���5 %%67%�2 @>&

Page 6: Delphinidin inhibits endothelial cell proliferation and cell cycle progression through a transient activation of ERK-1/-2

�������� ��� � ���� ������������ �� 6�� �������#��

����� �� ����� �� �#�� #� � ���,

$� ���� ��� � 7�* ���#���� �� ���������� ���

����� �� ����������� �� ����� �� *�� � ���#�� ���

�� ����� �� 3'�3� �� �� �� �� �����, 0�� ��� ���� * � ��

�������� �� ������� �������� ������ �� #�� ��

0$�"� � ��� ��#������ �� ������� ���#�� ��� ��

3'�3� ��7���� �����.� ����� �� ����������� �� ���� �����

����������� � ��� � � ����� �� �� ���� ��#�� ��� �

�������, 4� �������� ��������!�� � �� ��������

��� ��� ��������� �� ����������� �� � �� ��� ��� �� � ��

#���� ��� �� ���� ���� � �� �� �������� �� ���� �����

����������� �� �������� ���,

$������ ����� � ��������� ��� ���� ���������

���*� � ���� *���� �� ������ �� ����#� �� +��*� �

������ ���� �������� ��� � ��� ��� �������� � �* �

8�B9� ���� +�� ��� # � ��� �2�� ���� ���*� ��������

��������� � �������� ������� � ����+� �� ��, 8�>9, -����

����� ������� � �� ���������� ��� ����� �� ������

����� �� ������� �� �������� �� �����.� �������� �� ���

� �* �, 5� ����� ��� *�� ���� .������� �������� ��

����#�������� 0$�"� �������� ��� � ����������� ��

� ��� ������� �� �������� �� C'��@, 5 ������ � ����

� C'��@ ���� ������� ���� � � �� ����� ��

�������� � ���� �������� ��� ��������� � � �����.� ���

������� �� ���������� ��� ����� �� �����������, �����

���������� ������� �� ��� ��� �� �������� ����

�' #�� � �� ������ �#� �2������� ��� � �* �

# � �� � ��������� ���� �� �������� 0$�"� �������� �

���,

�������� *� � �� ������� � ����������� � � ��� �

�������� � �* � �������� �� � ������2�������� �� ��

<)� �2�������� �� ���� � �������� �� 0$�"� � ���

������� 8�=9, $���� ���� � ����� �� �� ��<)� �2��������

� � ��� ������� � � �� � ����� ���� �������� ���

8�'9� *� ������� ���� � <) ���� �� �������� ������

���� �� ���������� ��� ����� �� �����������, -�� ������

��#�� �� <) �� �������� � ����� �������� ��� � � ��� ��

��� ������� �� �������� �� H�3 �� ��� ��� ? 8�����9,

5� ����� ��� *�� ���� ������� ��� ������ ������ �

�� <) � �* �� ��� �� ����� � ����# �� �����������

������ � ������� ���������� 8@9� �� � �������� ���

���, -���� �������� �� <) � �* � ��# �+� �� ���

�������� ��� ����� �� ����������� �� ���� �� � <)�

���������� ���������� ��� � �* � �� �����������,

-���� ������ ��� ���� ���� �������� ��*���� # ����

��� �������� ��� ��� � ����������� �� 0$�"�, )�

��� � ��� �������� � �* � �� ���+�� � ������2��������

�� ��<)� �� ��� <) ��������� �� �� ��� ������

����� �� ���������� 8�=9� �� �� ���� � �� ��������

������������ �� <) �� �������� ��� �� ���������� ���

�� ��� ��#�����,

5� �������� � ������ ������#���.�� ���� ���� #��������

���� � ������+� +�� ���� I�� �� �������� � <)����� ��

�� �$? +�� ���� �� ������� �� *���� � ���� � #�#�

� ��� 8�&9, -�� ����� ���� ���� �� � ������ � #���

#�#��� *�� ���� ���� #�������� �� �� � ���� �� ��� �

��� 8�&9, �����# � �� ��*��+��� 8�A��;9 � �� ����

������� ���*� � �� �������� �� � ��������

�2�������� ���+� ���� �������� ��� � ������� ��������

�� � ���������� ���� ���� � �� �� �� <5I�&-& �����,

-��� ��� ��� ����� ��� ����� �� � �������� �� �������� �

��� * � ��� ������� �� �������� � ����� 8�=9, 5� �����

� ��� *�� ��� ����� *� ����� � �� #�� �� ����� *��

����������� ������� ��*������� ��� �� � � �2��������

�� � �������� �� � �������� �2��������, 5 ������ �

���� � �� ��� ���� �2�������� �� � �������� * �

������� �#� *���� ����������� � ��� ����� ���

� � ����� ��� �������� ��� ��� /�,�, �; ��1, -����

������ ������ � �������� � ���� �������� ��� #���

� ����� �� �� ��6���� � # ����, -���� ��������

��� ��� � ������ �� �������� �� � ��� � �� *���� �

��� ���� �2�������� �� � �������� ��+ �� �� � � � ��

�� �� ����� ��� �� �������� � ���� �������� ���, I�*�����

������ ������ �� ������ � ��� ������ �� �� �������

���+ �*��� �������� �� � �������� �2���������, <�����

������� ����������� � � #���� � �� �������� �����

�� � � �� � �������� �2��������� �� 0$�"�,

�� ��� �� ��+ ������ �� � �� �� ������ �� ���� �����

�� ������� �� � �� ������� �� � #��� �� ������ +�� ��

��#����� �� � ���� ������ �� ��+ �� �� ������ �

��� ��� � ����� �� ������ 8�@9, C���� ���# � ������

����� ���� ��#���2�� �� ��� �� �����.� ����� ��

������ ������ �� ����� *���� ������ �� ����������� ��

����� ������ �������� �� ��� �� ���� �����, ������ ��

����������� �� ���� ������ �� ��+:������ ��#���2�� ��

������� !� �� ������ � �+�� /�������� �� ��+1 ���� �

�� "���+�� � #��� �� ������� 8�>9, 4� ������� �� ��

����� �� ����������� �� ���� ����� ����� ��� #��������

���� ��� �� 3� �� �� �� ������ �� 3��� � ������, -��

������ ���*�� � ����������� ������� �����.� � ���

����� ��� �� ���4$ ��"��� �2�������� �� �� # ��

����� �� �� ������ �� �2��������� �� # J�� ������ ���� �

��� �� 3��� � ������, 5������� �� ���� ����� �����������

������ �� �������� �� �=& �� ���"���+�� � � ���

������� � � ����� ������ �� �� �������� �� � ����

����� 8�>��A��B9, 5 # � � ������� � �����������

������ � ���������� �� � �������� # � ���� ��

����� ��� ��#������ �� ���� ����� ���� � ���4$ ��"���

�� ��������, ����� ��� �� ���� ����� ��� #��������

�� �� � ���� ����� ����������� ���� �� 3'�3� �� �� ��

��� �������� �� 0$�"� �������� ���,

5� ����������� ����������� �2��� ���������� ��� �����

�� � � �� H�3 �������� �������� ��� �� 0$�"�, -���

���.�� � ������� �� ����������� # � � �� �#��� ���

�� ������������� �� *���� �������� ��� �� � �#��� �

����#�� � �� ������������ �� 6�� �������#�� ��

� ����, $� �������� ��� �� ��� # J�� ��� �� ��������

����� � � � � ���� � �#�� �����#�� ��� �� ���*�,

-��������� ���� ������ ���� ��� �������� � �� �����

� ����������� # � � ����� � � ���� ���#��������

��� ���,

@>; �. ����� �� ��. 3 #�������� ���������� %2 4$���5 %%67%�2

Page 7: Delphinidin inhibits endothelial cell proliferation and cell cycle progression through a transient activation of ERK-1/-2

�������� ������

-��� *��+ �� �������� � ��� ��� �� � ��� �''� /�,

$���� ����� �� 1 �� $���� /���#�� � ���1, �, � ���

�� �, �� �� �� �������� �� ����*���� ���# ��

PP ��� ��� ���� � ��������� ��Q��� ��LL �� �� PP�����

��Q���� �� ����� �� " ����LL� �����������, -�� ����� ��

�� ���� � ��, �,", � �RQ��! ��� ��� ���� �� 7�* ����

#���� � ����� �� ��� � ����� �� ���� �� # �������,

����������

8�9 �������� S� �� � �� �* #� "� -���� ����� -", -�� ������ �� �� �

�� ������� �� # ## �� � �����E �#���� ���� ��� ���� ## ���� �� �

���� ��� �� � ����, ?� �# ��� ��� �'''(=�E@>&:>=�,

8�9 < � �� I� � � +� �� ��� I� I � $� � � -, 5������� ����� ��

����������� ���# ��� ��# #������� �� ��# � ����� ���# I-�

�'A' ��� �������� �� ����, ?� � ��� �BBA(@;E��@:B,

8&9 "��� �� �� � M� 0����� �� ��� � $�4 ��F� I���� -"� -� � ��� �

� �!��+��*��! T, ������ �� �� �� ������ �� ��� �� �� #� ����

�� ���� �� ������� ������� �2��������� ���� ����� ����������� ��

������� �� ���� � � ���� ���� �����, "��� ?����� �''�(&;E�B&:&';,

8;9 ���� -� ?�������� $+ � �� 0��� �� � �+� �� $��������! I�4 � �

�� ����� �� �� ���*������� �, � �������� ��� ���������� ������

��� �� ���� �������� ��� �� �� ���� �����������, " ���� ���

�BB>(=>E�B�@:��,

8=9 <�� O� � ����+� -� ���� $� ? �+�� �, $���2�� � ������� ��

��#��� � � ���� �2� � �� �� ����� ������E ������������ �� ���

���� �� ��� ��������, S $���� ��� "��# �''�(='E�@@:>�,

8@9 $���� #������ �� � ����� "� I ��$�������� 3� ������ $� $���

�� 0���! $� ����� S"� $���� ����� �� �, < �� � ��� �� �����

�������� ��#������ � ��� ���������#��������� � ����� 2 ��� ��

� ��� ��� �� , S <�� �BBA(��AE�&�;:&&,

8>9 ����# � S�� ? �+�� 555 "� �� �� ?���# � S$� ��� 0� 5� ��� H� �� +

��� 5 �� � ��� ��� S�, ����� �� ������� �� *���� J���� ���#

������ �� ��� ����� �� ��� ������� �� ��� ��� ����� �2���

���� ��, "����� ��� �''�(�'&E�>B�:A,

8A9 � ��� �� $���� #������ �� - +�� �� $���� ����� �� �, ���

*��� ����������� ����� �� � ����# �� ����� ���� �������� � �����E

��� � ������ � ���� ����� � �* �� �� ���� � ����� �2��� �������

���, 0� S ?� �# ��� �''�(�&=E�=>B:A>,

8B9 ������ �� ��#�����4�� ��C� 3 �� � �� ���$������ ��� �+��,

-�� ����� ������ �� ����� �� ����������� �� ���� �������� ��

�� ������# � ���*��� ��� �������, S $���� ��� "��# �''�(;BE

B=A:@�,

8�'9 ����+ #� S, H ���� � �+ � ��� ����� �� ��� ��� � ����,

" ���� �� � ��� ��� �BB'(BE�@>:A�,

8��9 ��� � 4, ���� ���#� �� �����������, < ��� �BB>(&A@E@>�:;,

8��9 ��+# � S� ����� O, $�����������, S 0��� "��# �BB�(�@>E�'B&�:;,

8�&9 ��" ��� �S� ����� 5�� -��#���� ��� S���� �� ������ <S� 0���

?�� < ���� $�� 0������ <?, $����������� �� �� ������������

� ���� �� 6��E � ����� ��� �*��� ��#��# ����� �� �� 6��

#���������, S H �� ���� �BBB(&'E�@�:A,

8�;9 " �#���� ?� S �� ��, $����������� �� � ���� �� ���� ���� ���,

< ��� �'''(;'>E�;B:=>,

8�=9 � ��� �� 3� ����� 3� � �RQ��! �"� $���� ����� �� �, $���

������ ���� �� � ����� ���� ������������ �� #��� �� ��

�������3�? ����� �� �� <) �������� � �* �, -���# I �#��

�''�(A@/�����1E;;@,

8�@9 � �"� ������ $� ������� I� � ��+ $0, 5������� �� �������� � ����

�������� ��� �� 3 �������� ��������� #���� ��� � �����

�2���, S "��� 0�����# �BB@(@&E��=:&;,

8�>9 ����+� �� 0 ���� �� 4 �� ��� � �� $, $��� ��� �� ��+����+� ��

� ������� ����� ��� �=& ������ ������ # � ����� ��� ��� �2�����

���� ����� �� *�� ������ ������������ � ����� ���*� ��������

�� I��3� �����, "��� ���� � �''�(�;E��=:��,

8�A9 �����# � S$� "�� "� ��� $� S� I� 5+�!� -� )+ #�� -� ���! ���

��� �� �?, " �������#��� �� ����� ��� �� ���� ���� ���� �� �;��

;; �$? +�� �� � �� �� �� ����, $ ���� ��� �� � ��������� ��������

��# ��, �0� �� �BBA(;�AE�'=:��,

8�B9 S���� ��� � ���� 5S� - �� *�+� $�, 5������� �� �� ���� �����������

�� �� �������� ��������� ���� ����� �$ ��B�@� � �� ��� �� #��� ��

������ ?�" �� �$?�, 0�����# 0������ ��� "�##��

�BBA(�;BE��A:�&,

8�'9 "��� �� � �# 3� ������ �� "��*�� ��4 ��� C, )����2�������� ��

��# � �������� � ����� �2��� ���� �� �� � � ���� � �#��� #�����

����� �� �� ��������J���� � ���� ����, "��� ��� �BBA(A�EA@�:>',

8��9 ��������� �� "� �� "I� ����� � S3� 3� ���� IS� ���� � T���� �,

<���� �2��� #��� �� #������� ����� �� H�3 �� ����� �� ����� �

���������#, $# S ?������ �BB@(�>'EI;��:=,

8��9 T���� �� ��������� �� � ���� �� $#����� �� 3� ���� IS� � ��� "$�

3����� ?� ���� , <���� �2��� #��� �� ����������� �� ���� ��

�������� � ���� ���*� �� #��� ��� �� ���� ���#��� � ��� ���

?, S "��� 5���� �BB;(B;E�'&@:;;,

8�&9 �# � �S� 3� � 3$� ��<���� �$� ���� 4"� �����# � S$� �������

?�� )+ #�� -� ��� �� �?, " �������� ��6����������� ��# ���� ��

���� � � ��������, ��� "��� 0��� �BBB(��E>�AB:&';,

8�;9 �����# � S$� 4�+��� ""� O ��� � �� ���� ��� )+ #�� -� ��� ��

�?, ����#�� � �2�������� �� � �������� �� ��������� ��� � ���

���#�� ����� ��� �� ����� ������������� ���*�, S 0��� "��#

�BB>(�>�E�@&>;:A�,

8�=9 ��� S� � ! �� 0� - �� �� -��# �05�4 �� S$� ��� ���?, $�����������

��� ��� �� �������� ��������� ��� ����� � � �������� �2��������

�� � ���� � ���# ��� �� � ���� � �������� � �����, $�����������

�������� ���+ � ���� � �������� � ���*� � ����������� ��*��

����� ��� �� � ��������, S 0��� "��# �BBB(�>;E�=>A�:=,

8�@9 S �+� -� 4������ �$, "��������� ������ �� �� * ��# �, < ���

�BB@(&A�E@;&:;,

8�>9 ����� S� ����� S�, 5������� �� # ## �� � 3� ���������������

+�� ���, 3���� ��� �BB=(BE��;B:@&,

8�A9 3 �� � � H����� �� ��� S� " ��!! � � �+ ?3� T�� �� ?����� �3�

��� �� �?, " �������� �2�������� ��� ����� ����� �� ���� �����

����������� � �������� 3/'1�3/�1 ���� �� �=&����/4$ ��

"���1��������� #��� ���#, ��� 0��� "��� �''�(��E���B:;;,

8�B9 $� �* � ��� - ���� 4�� "������ �H� "������ )0� � �+ 3�, -��

�=& ��*��+, S 0��� "��# �BBA(�>&E�:;,

�. ����� �� ��. 3 #�������� ���������� %2 4$���5 %%67%�2 @>=