dna recombinante - [depa] departamento de...
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La tecnología de DNA recombinante genera herramientas para estudiar los genes y sus productos
Insertar en vector de expresión
Transformar E. coli u otro hospedero
Deducir secuencia de aminoácidos
Preparar péptidos sintéticos
Preparar anticuerpos específicos para una proteína
Secuencia de aminoácidos
Anticuerpo específico
Sintetizar sonda específica
Escrutinio de una biblioteca de DNA por Southern blot
Escrutinio de una biblioteca de expresión por Western blot
Plásmidos de expresión
Caracteristicas adicionales: - Promotor regulable - Terminador de la transcripcion - Sitio de reconocimiento por el ribosoma
Métodos de transfección Permeabilización química de las membranas Electroporación Liposomas
Vectores
Vectores derivados de virus animales SV40 Retrovirus Vacuna Vectores mixtos
Métodos de selección
Detección de actividades enzimáticas Resistencia a inhibidores Resistencia a antibióticos
Integración dirigida
Clonación en células animales
El resto de características de los vectores de expresión son similares
Promotor del gen X Gen reportero
5’UTR X 3’UTR X
Construcción de Reporteros