B A B I
TINJATJAN PUSTAXA
M i .. kPERPUSTAK \AN
’UNIVERSIJV.S Al R.L \' 'GGA'S u R -S u Y ,\
Cholesterol dalam darah ( j*
Cholesterol. s
Rumus bangunannyay w ,, Ha M:
i \ K i'C H
*6x4 C H 3
C *3*•7
Rumus molekulnya : c27Hi|60
Berat molekul : 386,67
Tltlk leburnya S 145° - ISO0C*
Sifat-sifat flsik dan kimia :
Merupakan serbuk halus/granul-granul halus, warna
putih agak kekuningari, tidak berbau*,
Kelarutan s tak larut dalam air
alkohol : 1 : 100
larut dalam ; aceton, hexana*
kholoroform eter* ethyl asetat,
minyak tumbuh-tumbuhan*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Dalam plasma darah hampir semua leraak terikat de-
ngan protein dan membentuk lipoprotein yang larut dalam
air*;
Dengan bentuk inilah lemak utama plasma darah seperti :
cholesterol*trigleserida,phospolipida diangkut dan be-
redar keseluruh tubuh (11)
Lemak-lemak didalam darah terdiri dari ( 2 ) :
a* cholesterol : * 20% terdiri dari
free cholesterol : «= 30%esterified cholesterol: * 70%
b. trigliserida : ± 35%
c* phospolipida : * k5%
d* asam lemak
Dari susunan tersebut diatas yang selalu berubah kadar-
nya adalah cholesterol dan trigleserida.
Total cholesterol dalam darah normal antara 1,3 -
1tkk mg/ml darah*
Perbandingan antara free cholesterol dan esterified
cholesterol didalam darah == /*.:!•
Sedangkan didalam cerum atau plasma perbandingan anta -
free cholesterol dan esterified cholesterol = 1:3 •
Harga total kadar cholesterol dalam tubuh akan -
meningkat pada (15) •
keadaan dimana didapatkan kenaikan salah satu
atau lebih lemak darah ( hyperlipemia );
hyper ( ) lipoproteinemla.
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
nephrosis ; diabetes mellitus.
Sedangkan harga total cholesterol dalam tutouh akan me-
nurun pada keadaan :
hOTerthyroidism dan hepatic disease*
2*Metoda_Eemerytsaan_kadar_total_cholesterol_dalam_se-
ru m *
Untuk menentukan kadar total cholesterol dalam se-
rum ada berbagai macam prosedur (3*6,7,10,14*16,20 )
dan pada umumnya akan melalui fase-fase analisa sbb:
Ifekstraksi
2:saponifikasi
3sisolasi
4:penentuan titik akhir*
Banyak dari cara analisa untuk pemeriksaan kadar cho -
lesterol total dalam serum tidak mempergunakan seluruh
analisa yang disebut diatas*
Pemeriksaan kadar total cholesterol dalam serum -
paling sering dilakukan secara spektrofotometri dengan
mempergunakan metoda reaksi warna Liebermann Burchar d*
Kemudian pada akhir-akhir ini telah mulai dipakai me -
toda reaksi warna Besi(III)Chlorida dalam lingkungan -
H SO pekat*
a#SsS2 2 (4* 6,7,8 * 15) *
Pemeriksaan kadar cholesterol dalam serum dari-*
metoda ini pertama kali dikemukakan oleh Liebermann -
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
pada tahun 1885 yaitu mereaksikan cholesterol dengan
asam asetat anhidrida dalam suasana H^SO^ pekat,war-
na yang timbul yaitu merah violet sampai biru kohi -
jauan*
Kemudian oleh Burchard reaksi ini disempumakan
dimana cholesterol dilarutkan dalam chloroform*
Perkembangan metoda ini dikembangkan dengan leblh lu-
as serta dimodifikasi sedemikian rupa*
©ari modifikasi metoda Liebermann Burchard banyak -
berdasarkan pada ekstraksi cholesterol dan masih di-
bagi lagi, dalam beberapa macam prosedur-prosedur*
Kemudian berkembang lebih lanjut dan pada * /
akhir-akhir ini populair pemeriksaan secara langsung
pada serum*
Reaksi v/ama Liebermann Burchard kompleks dan-
dipengaruhi* oleh ( 7 ‘) s
l:Konsentrasi p P©^at yang digunakan
2:Pelarut-pelarut yang dipergunakan,
3*VJaktu selama reaksi •
/ Kandungan air dan asam asetat didalam asam-
asetat anhidrida *
5:Temperatur yang diperlukan selama reaksi -
berlangsung «
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
xo
Untuk mendapatkan nilai absosbsi yang baik para *
penyelidik memberi batasan pada panjang gelombang yang *
di pakai untuk pentuan kadar total Cholesterol dalam se-
rum, diantaranya pada panjang gelombang : 430 mu, 5i|0 mu
610 mu* 630 mu*
b. Metoda Besi ( III ) Ohlorada ( 2*JmI Q U I Z >2Q)
Penentuan kadar Cholesterol dalam serum dari me*
toda ini pertama kali dikemukakan oleh Lipschits pada *
tahuri 1907 dan kemudian pada tahun 1953 metoda Ini baru
di publikasi oleh Zlatkls , Zak, Boyle.
Cara dari slatkio dan kawan-kawan tersebut pemerlk
saan penentuan kadar Cholesterolnya dalam serum secara -
langsung tanpa ekstraksi dan presipitasi dari protein ~
serum*
prinsip reaksinya I
Berdasarkan reaksi warna yang terjadi antara cho-
lesterol yang dl selidiki dengan pereaksi Besi -*
( III ) Chloride dalam suasana H SO pekat» dlma~
na warna ungu yang timbul absorbsinya di baca pada
alat spektofotometer pada panjang gelombang t *■
560 mu*
Kemudian cara tersebut dimodifikasi dan dlkembang
kan lebih lanjut oleh para penyelidik yaitu :f
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
XX
X* Diekstaksi dengan pelarut organik :
Pelarut organiknya i metanol
etanol*
Pelarut organik campuran t
etanol - aseton*
etanol - eter*
etanol - ethyl asetat dan -
lain-‘lain*
2* Dilokuken cara pemeriksaan secara tidak langsung-
penentuen kadar cholesterol dalam seruni yaitu di-
lakukan presipitasi protein seruni dengan asara ase
tat.atau larutan Besi ( III ) Chlorida dalam asam
asetat,*
Miselnya : cara dari Henly*
cara dari 2ak*B*
3* Dengan melalui ion exchange resin kemudian dieks*
traksi-dengan polarut organik campuran khloroform
dan metanol*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
tu METODA KHKTA■ w w w w m i w i B i m » ’
• fkhanjsenelitian $
Sobagai bahon penolitian uatuk mengetahui -
apakah notoda Llebomann Burchard dan motoda Beci *
(lll)Chlorida aceuracyCkotopatannya) baik/tidak isa*>
ka dtipak&i norm kontrol «
Selanjutnya aobasai bafcan ponclition pcne -
srlkaaan kadar total cbolootorol daXannooruH paclen*
(pondorlta) dongan me&nfHaaeing notoda toroobufc a-
daloh Gojap©l*sanpel darl pcnderita-ponderita yang •
ceaorlkoakan darahnya dllabaratoriua Patologi Eli -
nils R.S*Dr.Sootono Surabaya untuk ditentukan kadar-
cfcoleoterolnya •
Pengambilan darah dilakukan oloh para nodio labors-
torlura torcobut pada pagl hari dlaona pondcrlta da-
les* keadaan ptiasa 10-12 $ m ecbDlucinya tidak aakan.
Alat yang diporgunokan adalah dicpooablo oyringo *
buatan bopong *
Sotelah penganbilan colocai , darnh did!arakan pada «
tmporatur kanar solanc 1-2 jan sehingga ©orumnya <*■
ncnltjah *
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Apabila keadaannya pemisahan serum kurang baik maka
dipusingkan dahulu selama kurang lebih 5 menit pa -9
da kecepatan 300° rpm setelah serumnya diambil.
Untuk mendapatkan hasil precision(ketelitian)
yang baik maka memilih serum-serum yang mengandung-
kadar cholesterol dengan variasi yang bermacam
macam.
2:Pemeriksaan_kadar a
Pemeriksaan terhadap serum kontrol yang tersedia -
dengan masing-masing metoda dilakukan 3X pemerlk -
saan*
Sedangkan untuk pemeriksaan terhadap serum pasien -
(penderita) dengan masing-masing metoda dilakukan -
tiap sampel serum pasien 2X pemeriksaan,serum pasi-
en yang diperiksa 30 sampel*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
3 «a. mem erd-fesa aril Kaaar total cholesterol dal am serum
dengan metoda Liebermann Burchard ( & )*
Prinsip sDengan metoda ini adalah berdasarkan reaksi warna
yang terjadi antara cholesterol yang diselidiki dengan -
pereaksi-pereaksinya dimana warna coklat hljau yang timbul
absorbsinya dibaca pada alafc spektrofotometer.
Metoda ini pemeriksaannya secara langsung artinya
bahwa penentuan kadar total cholesterol dilakukan tenpa-
ekstraksi atau presipitasi dari protein serum*
3* b* Alat yang dipergunakan*
Coleman apsktrofotometer, Junior spektofotometer-
model 6/35* ?
Mikro pipet, pipet volume, buret, tabung reaksi, water -
bath*
3* c* Pembuatan reagenala dengan mempergunakan reagen -r
kit Cholesterol Iferckoteat n*
Larutan reagensia cholesterol t
6*33 mraole/L Asam Asetat anhidrida di dalam Asam-
Asetat glasial*
Larutan standard cholesterol : 300 mg/100 ml*
Dibuat dari 5
Cholesterol 300 mg dilarutkan dalam Ethyl Acetat*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
50 til fica clhciai cfccolut 19 cijfcc iGicj caoertm
Ccac-n eeriest 11 cl Ccn ctbyl ccctaft cxr cl -
1C3 cl *
3 * a » S ^ ^ j U O ^ r ; r i U ^ *
C£EDJZ3$S^ *
E c ^ i G 3 j ^ m i 2 3 f e a *
Ccrun CScltcica Ccnc^ cclcpattia 1 fcr^Ara 'lipid . CC3fcr0i*> yeas tcrccaici Ccac^a 5*0 cl ccaaUCcstS» Icta ccq^ap cc~ ~ cX fccsocra tcc^crct^? tr^or-
ccloa JO cc=ats*fcc=3£lca ccrtn tested tAco catah
etpcrlhca fccirr cioXcctcrolcyn.
f c & t g s & U K a a ^ a s a a f e a 1Pipet» Coc cilao iApct 0#02 cl oasr) totrol c.:ca! x3Cdcn tv.Lu^c rc±~3. tcrtata^#tt^:i^!±r3 l^cstca rccc"« d o c—olcctcrol cctscnjci 1,0 ol •
CoCdcb 50 ccnlt totdSSca lcrct dcdca tctac 0,£D *■
cl 0^^pclc.t*lx=s£lC3 ncratio « 1 :1 0 cr.tc? tcth rcic* tcr^crr.fcr? tr^cr cdcsa 9 ccaifc £ca I—cc*i c r;cS> t r a -
ces#
a.c±ca K i c a 15 ncolfc IrnadScn ftier. n&lci cfc=a?fci -
nyo prjfla clct cc^troffotcdcCer Cc-Z- c=len »tciso CIO esi*
r i p e * C c a c ^ a c i l a e o d o e i 0 »C2 c l l a r a t c s c t c z i r r d c t o -
lcotc?oi c^caKra fleln fccfcaa tci'5atc3*6c:txj^n la -
niters rcncc=do ctolc~tcrol ccfcjiyJj lf0 ol •
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Setelah 30 menit tambahkan lewat dinding tabung 0,20 ml-
H SO pekat, kemudian masulrkan dalam water bath pada tem -
peratur kamar selama 5 menit dan kocok sempal homogen*
fl&amkan selama 15 ajeȣt kemudian jbaca'.'hilai /abcorbsinya-
pada alat spektrofotometer dengan panjang golombang
610 mu# i
J&SSgfeSL*
Pipet dengan mikro pipet 0,02 ml aqu&dest masukkan dalam
dalam tabung reaksi tertutup,tambahkan larutan reagensia
cholester&l sebanyak 1,0 ml •
Setelah 30 menit tambahkan lewat dinding tabung 0,20 ml •*
H-pSO pekat-kemudian masukkan dalam water bath pada tempe-
ratur kamar selama 5 menit dan kocok sanpai homogen *1
Diamkan selama 15 menit kemudian baca nilai absorbsinya **
pada alat apektrofotometer dengan panjang gelombang
610 mu *
3* e • Prosedur'pemeriksaan kadar total cholesterol dalam
serum snmpel i
Cara pelaksanaannya pemeriksaan kadar total cholesterol *f
dalam serum sompel pasien oesual dengan cara no#3* d* -
diatas*
4* a «Pemeriksaan kadar total'cholesterol dalam serum de-a w — M i i m u m t m » » » # « « m m w M w n n w i i w i i i i f c u i i m i i i « ■ » « ■ » « — w w t w B a -
ng an metoda Besi(IlI)Chlorida ( 19 ) «O ® • • • W t ^ W
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
17
Dengan metode ini berdasarkan reaksi warna yang -
terjadi antara cholesterol yang diselidiki dengan pereak
sl-pereaksinya dimana warna ungu yang timbul absorbsinya
dibaca pada alat spektrofotometer*
Metoda ini pemeriksaannya secara tidak langsung -
artinya bahwa penentuan kadar total cholesterol dengan -
dilakukan ekstraksi atau presipitasi dari protein serum#
k* b* Alat yang dipergunakan :
Coleman spektrofotometer* junior spektrofotometer
model 6/35$ beker gelas, pengaduk» corong, tabung reaksi»
gelas ukur, alat pemusing# labuukur#
4# e« Pembuatan reaaensla t
Pembuatan larutan standard cholesterol t 0
Tibang telifci ceholesterol murni 100 mg, 250 mg,-
300 mg, 3 0 mg, 400 mg* masing-masing Istrutksn dengan -
asam asetat gloeial secukupnya kampai larut» pindahkan -
ke dalam labu ukur 100 ml kemudian tambahkan gsam asetat
glasial sampai garis tanda.
Dari larutan-larutan standard tersebut buat larut
an standard dengan konsentrasl 50 mg per 100 ml* 200 mg*
per 100 ml» 150 mg per 100 ml dengan penambahan asam ase
tat glaaial sampai 100 ml*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
18
Pembuatan pemakaian larutan standard Chloleaterol t
Pipet 10.0 ml masing-masing larutan standard eho- lesterol tersebut dlatas tambahkan masing-masing 8,5 ml*
larutan Besi ( 111 ) Chlorida dan encorkan dengan asam *
asetat glasial sampai 100 ml*
Pembuatan larutan Beal ( 111 ) Chlorida t
Timbang dengan tellti 0,8i|0 g Ferri Chlorida 6lL>0
( Pe Cl^ 6 H^O ), pindahkan kedalam labu ukur 100 ml de~
ngan pertolongan asam asetat glasial secukupnya kemuclan
ditambahkan Asam Asetat glasial sampai garis tanda*
Pembuatan larutan presipitat Besi ( III ) Chlorida *
Larutan Besi ( 111 ) Chlorida di encerkan dengan-
asam asetat glasial dengan perbandingan 1 t 10*
Pembuatan larutan blangko Besi ( III ) Chlorida
8,5 ml larutan Besi ( 111 ) Chlorida di encerkan*
dengan asam esetat glasial sampai 100 ml*
Pembuatan larutan UaCl 0*9 % ( B/v ) i
Timbang 0,900 g NaCl, pindahkan ke dalam labu ukur
100 ml dengan pertolongan aquadest secukupnya kemudian *
di tambah aquadest sampai tanda*
Hg30^ pekat*
k» d* Pembuatan kurva absorbal terhadap pan.jang gelom -
bang*
Pipet Ojl ml larutan standard 100 mg cholesterol-
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
19
per 100 ml larutan masukkan dalam rabung reaksi tertutup
tambahkan larutan presipitat Besi ( III ) Chlorida sam *
pai 4 ml kemudian pusingkan selama 2*3 menit*
Pindahkan filtratnya sebanyak 3 ml ke tabung reaksi lain
nya kemudian tambahkan 2 ml I^SO^ pekat kocok sampai -
homogen*
Sebagai blangko di gunakan larutan blangko Besi -
( XXX ) Chlorida dan dikerjakan sesuai cara tersebut di*
atas* Kemudian baca nilai absorbsinya pada panjang gelom
bang $00 mu, 510 mu* 520 mu, 530 mu, 540 mu# 55° mu, 560
mu, 5?0 mu, 580 mu, 590 mu, 600 mu, 610 mu*
Dengan cara yang sama seperti diatas ditentukan -
juga nilai absorbsi pada konsentrasi 200 mg Gholesterol-
per 100 ml larutan dan 300 mg cholesterol per 100 ml la»
rutan*
Buat grafik dengan nilai absorbsl sebagai ordinat dan -
panjang gelombang sebagai absis*
4* ©* Pembuatan kurva baku i
Pipet 0*1 ml pemakaian larutan standard 50 mg «
aholeaterol per 100 ml larutan, masukkan dalam rabung re
aksi tertutup* Tambahkan larutan presipitat Besi ( XXX )
Chlorida sampai 4 ml, kemudian1 tambahkan 0,1 ml lar&tan
ftaCl 0,9# b/v kocok sampai homogen*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
20
P$j&££ca JLcraCo tcrcetat cct ry; h 5 cl to
pccfccA 3UAo*bc=a£ka tcofcJs ca H cl C-p^pc^t £ 3 fcoecS CC3 i fcSDSCra *cctrc l cicsi: 3 Icratca tlcac^D Dx±(2H)C2lo»rlCa C'3 C2fcr?Jc!xa cccad Cca cpz c>ru fccrcctat CJcfccs# Cbsa rJLlrA ctcartclnyo pcdn dr.t or^Scofotc^ctcff Ccac^a
Dcnjoa cciC3fcc2Q 5S3 ca *
Ecac a ccsa ycaa cica t cr1 nilci ofcscsfcdcya -fcc&ra Icratca c^Cira cbolcctcr.l Cc^c.n fcrrx-t,.ci -
ICC^a ei^lcctcrcl do? IC3 cl icsafecni Lr=sc2fc£cc& X£^> £ 3 ^ i J S ^ j P ^ l S J ^ l £ £ = a c ^ o l c c t c r o l p c f f 1 C D d l o
jrotcn .Ci t cziSiii Cetera cilcl ctecrfci cotx^i ccdcuft toa * Ixaccatrccl cefc^r± ctdo ■
k* i •,53sttZ2tJzz2&^5LizfaUjafc^jr^sscssj^&a
csaajtafegft*
f i c s a c ^ w ^ n J r r A s a *
Ccnn cadk^xa Coen cclcrtiticn 1 L&cld Csatcolycao tcrccdc Ccacra 3*0 cl c acbidestilcta (xrc ff ca « pci fcsssc i pc£a tcr crr-ta? ccloa 53 tX3it»tcaa -files cc=tn tr trci c&cy cafc±s <a. c;fes o fcrlccto * roJwc.
Pi ot 0#1 cl ccixi) t33tool trc3££23 C.lr > tc.t-.oj -
rcctd tcrtata^f c:csl±r» C 2I 0 fcafcrc rcc£c$ Gcrcctaft * Icratcn rrcc3c3.fc.-6 CxMXXX) CilcriCa c r ci. <> cl* to -
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
cciicn Lcct-i txnccsa cclor, £»
5 cc=at*
Pir^^rs ieratcc^ra tkscctst cctr-ry.?? S rl tetc.t=2c rccirA ?riQ#rxt^ClLa tcsfcl&ca C rl D;jC^rx! :t Ccs*lr;cc!j ccr ciL
Cctrc tSc Js cac=id 3 lrrati.3 £1 *3 CccatrC2)OlcrOto Ccs CSbcs-Scbca cccri cc^c=3 cc^o fccscctafc
CScCco *
lisa did. ctc^teSoya pc£a clct cjc^trofcicrxtc? «
Cc2C2* I?caica3 cdot'.n3 553 cs •
Gc£=s t o tc l cidcctcrol CcltD ccr=3 tested fccrcctat
0:~t aiperaixn Ccnc-3 pctenjti fcsra bcis Cescct^fc
Cictes*
<>» -
C^£3J33E3J13SL'
Cera ixldrx3ix2ara pc=cratr^c3 fcicr totci eSdo
tcsd Crlo ccrtn crz d pcdcs cccucl Ccac > c~rc-G0» 4 • £• dctcs»
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
fi®»G3Q urafccrt
£:ewMtcotn
m 110 *• 7.C& n&U
e ( 5 a f i CO ) .
c
tacp toia
<y,3Aiiafc paOc. tatKt X
ffiaiSL I
P£23iSBlIia® BfiSflU CC®/® ©QMSEJm
* BBSSli DAE*ijjiaatLMMHWia^nai &
* #
G
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
23
ias-c^dv*
Ccac J txr cad o rcccca bit rC£clcctcrcl*
rtcrc&ctcct0
Ccrrj cc^rci r^C Circr22m t £3 erred, C-a *tic? <x~jci d^crllxn t C S •Cc op CoSlJI ctdcctcrcl Cdtcn ccraa rc~cl a
a 550 cc/j.c3 cx £.te?9teS ctcnC sfl lerotea
C:. aicyo C-5L,fc CUlhnt pu±3 Ccbd ft cctxxr.i,-
fccrSIrjfc •
caci n
a**j& d: J3~:c;“ cr£*D cr,zr.s gx^3 ly* t n err: c ^ n . era r.rr::r. ttrr ~:.rn c m ' . D»o ooo»-oojj a- jo )dc *• . ot . >e', . ' ooo
Ccrjti, rczcratccm Fo^~rn rm:xs rsrcicci2
___...— j ^ i ___. s f c a ___ .il.,.:.gL
1 152 « 3 s , £3
/3 sac jut 3 , C3
3 CGI C23 t> 15
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
eassisga;
Sampel Pemeriksaan I mg $
Pemeriksaan II Big #
Deviasi= a
Deviasi^
k 16l{. 159 5 25
5 15k 157 3 9
6 228 226 2 k
7 216 211 5 25
8 i so 151* 1* 16
9 301 305 k 16
10 270 271 1 1
11 235 230 5 25
12 250 25i* k 16
13 120 121* k 16
Ik 322 326 k 16
15 178 181 3 1$
16 219 222 A 9
17 165 169 4 16
18 33*4- 339 5 25
19 131». 137 3 9
20 292 Z9k 2 k
21 22? 22k 3 9
22 181 185 k 16
23 168 162 6 36
2b 301 305 k 16
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
; mm m m Mmmmmmmmmmm »*
Pesesihccxn. fcsesSJssssn dcvXuA covlcd £Iteefi) »<«=#> o d B' a2
23 ITS 173i S 9i m « S
<«j i 16
27 a o ; 206 1 « ! M£3 u o m i. 1 1
i 102 ' m h ; ft30 £46 9 . £5
m b 115
a o 3»?6
r»2* 475
0 D o
XI.
32
® 2,01
C B » £,01 BtP$
Pc»be4csn tcvbcoar e , 6
Pcrfco&nen *ate.*jrntce 3#76 o£C«
£&£:Skg££S&J&&
a * G S 3 2 ^ J t & S £ 3 .
m- *
Kcdlnya fiilihat pedo tcfccCt III cobsc-'i*’
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
26
TABEL III
HASIL PENGAK4TAN NILAI ABSORBSI TERHADAP PANJAWG
GELOMBAJTG DARI METODA BESl { III ) CHLGHIDA
PanjangGelombang
Nilai Absorbs!100 mg/100 ml 200 mg/100 ml c c 3 H O H
500 0,195 0,l).60 o#5io
510 0,215 0,1*68 0,665
520 0,230 0, 75, 0*705
530 0,235 0,1*80 0,715
5^0 0,245 0,11.97 0,7 5
550 0,252 0,512 0,762
560 0,2I).0 0,1*92 0,722
570 0,22:5 0,1*57 0,690
580 0,195 0,392 0,614.0
590 0,165 0,327 0,580
600 0,lij-0 0,267 0,510
610 0,120 0J230 Q,i|.60
Bila data-data pada tabel III di gainbarkan sebagai
kurva absorbs! dengan nilai absorbsi aobagai ordinat dan
panjang geloxnbang sebagai abals, akan terlihat seperti *
gambar 1•
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
27
Pada gambar I tersebut akan temp.ak bahwa hasil -
penguatan nilai absorbs! terhadap panjang gelombang me-
nurut metoda Besi ( III } Chlorida mempunyai panjang ge-
lombang t 550 aw*
b* Pembuatan kurva baku.
Kurva baku dibuat dengan pembacaac nilai absorbs!
pada bermacam-macam konsentrasi*
Pembacaan nilai absorbs! di lakukan pada panjang gelom -
bang maksimum 550 mu*
Hasil-hasil pengamatan pembacaan nilai absorbs! dengan *
bermacam-macam konsentrasi dapat dilihat pada tabel IV -
sebagai berikut *
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Kurva &lloi abgorbci* terhadap punjcai*; k’clcuubnai,; ■ Cholesterol, konoontrao^ 100 mg/100- ml| 200 tn&/ 100 ui; 300 mg/ 100 ml ‘ :
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
29
T ABEL IV
HASIL PENGAMATAN NILAI ABSORBSI TBRHABAF KONSENTRASI
MEBtJROT METODA BESI ( III ) CHLORIDA
fSBf
Konsentrasi per 100 ml
Nilai Abs6rbsiI II III Rata-rata
50 mg 0,120 0,124 0*122 0*122
100 mg 0*248 0,252 0,253 0,251
150 mg0*380 0*376 0*384 0,380
200 mg 0,512 0,510 0,508 0,510
250 mg 0*640 0,635 0,645 0*640
300 mg0#?62 0,765 0,768 0,765
350 mg 0*915 0*916 0,917 0*916
400 mg0,990 0,985 0,995 0,990
Bila data-data tabel IV di gambarkaa sebagai kurva
absosbsi terhadap konsentrasi» dengan nilai absorbs! se-
bagai ordinat dan konsentrasi sebagai absls dapat dilihat
pada gambar II*
Pada gambar II akan terlihat bahwa Cholesterol •
dalam a sara asetat glaslal memenuh! Eukura Beer Lambert -
pada konsentrasi 50 mg/lOO ml larutan sampai 350 mg/100 ml
larutan# dan pada konsentrasi 400 mg/ 100 ml larutan mu-
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
30
Ml terjadi panyiisponean <3ari Hulcura Beer-frimb©rt*
G. Pfcrhitunasm odanvo korelael llnialr { pearnon ) ~
mt&m tedar dengan absorbo! ♦Untufc mnkeua ini perlu 61 buat tobol «ebecni berikut ( Xi
hat Mlam&ii berikut }«TABKL V
& m m m m n n aw mmei am lOUEMsmssi
XOTGM ABSGRBSl PAHA SEBIffa0FC»<J8t££a£
r ~ r ~(ottffflgltei)
E»S
P T ' 0'(absorbs!)
X2 *2 XX
so 0,152 2500 0,0148 6,1
100 0*251 10000 0,0630 25,1
150 0*380 22500 0,U44 57
200 0*510 40000 0,2601 log
250 0,640 68f00 0,4096 160
300 0*765 90000 0,5652 289*5
350 0*916 122500 0,8390 380,6
KX*140C m«$§m B&^SSOOOO B¥2c=2,3161 «*«900,3
HomiG yang dipa&ei edelab aebag&i berifcut tn/ajf -
r ® ----- -I—---:--- -----I/ n % 2 - «&)2i/ & «y? • (Ey)s
r * Koefflaler. korolasi.
x ** JCoBSQTitroGi dftlom
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
i AJIUM ABSOR&St
31
M *
o*pqo
o,eop
o#?qo
OjfiOO
0 ,5 0 0
0,400
0*30?
0,^00
0,100
0 s p l c j 1 5 3 2 5 0 5 0 0 5 5 0 400
I&cucatruji rux/100 nl ■ - tobarilS
Iftinru ulld ahacu’bKt terfca&Jp koiutril tiurl Cholesterol* paOa jpanjL^ij colcubuna * 550 era*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
32
X = absorbs!*
n = banyeJmya sampel, or = koeffisien determinasi*
Maka didapat harga
r * 0*9999»
jadl harga koeffisien korelasl » 1
Interpretesi dari perhitungan korolasi dimana di dapat -
kan harga r = 1 tersebut perlu di perhatikan raasalah ke~
rnaknaannya apakah korelasl tersebut di dapat karena faktor
kebetulan ( tidak bermakna ) ataukah bermakna*
Penyelesaian tersebut dapat dilihat melalui pera -
bacaan pada tabel*
Dengan melihat tabel apabila harga r > r dalam tabel sesu
ai dengan degrees o f freedom yang bersangkutan maka harga
r tersebut bermakna* sebaliknya r < dari pada r dalam-
tabel maka harga r tersebut tak bermakna*
Menurut tabel r dengan 7 pengamatan t
« degree of freedom - n - 2
*= S maka r tabel « 0,75*
Jadi harga r tersebut bermakna oleh karena r > r tabel-
maka dapat disimpulkan bahwa antara kedua varlabel yaitu
konsentrasi dengan absorbsinya mempunyai korelasi linialr
secara bermakna*
Koeffisien determinasi r = 1 berarti bahwa 100 % dari -
fiata-data y6ng ada mempunyai hubungan linier.
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
33
2* Persamaan g a rIs regress! llniair.
Karena hal-hal tersebut diatas untuk mendapatkan*
tltik-titik yang terletak pada garis lurus maka digunakan
persamaan garis regress! dimulai dari konsentrasi 50 mg/
10© ml larutan sampai 350 mg/100 ml larutan*
Persamaan garis regresl sebagai berikut S
y *S ax 4 b
a = koeffisien regresfci yang menunjukkan arah -
peningkatan atau penurunan harga y persatu**
an x*
a « + maka harga y meningkat pada kenalkkan x
y absorbs! x « konsentrasi (mg)E ( x - 5r /(y - f \
a «= ...i'"»..— ' i ■■■ ..E ( x - x ) &
Untuk maksud diatas perlu dibuat tabel sebagai berikut :
TABEL V I
DATA UNTUK MENTOStm PERSAKAAK GARIS REC-RESSI
PADA SPEKTH 0P0T0METRI
X y x-X
rrssssssttgasasiscg
7~f (x-x)(y-y)2
{ X * * )
50 0,122 - 150 - 0,39 58*5 22500
100 0,251 - 100 - 0,26126,1 10000
150 0,380 * 50 - 0,132 6,6 2500
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
34
a & x>& (o-S) <H?) (n *->*
COO 0*530 0 -0»UJG 0 0cw 0,C^0 «3o,m 0»t> CS >SZJ 0,705 103 0*LS3 £5*3 10220
5^ 0#UC.1£)60*6 i:SJ0
0 o c^> t:(c-S>(p$) «&SS*9V L(&S)a C
ncz&A i o cOgCacsa
& c£#C&2
l'crcrrxz.3 c~rio rc^cxl tcrcctat Cc~c.t dtuiia jt=0»C:Cj£«0»012
Pcia ccsc:~4x3 cxlo rccpccdl tcrecfcifc &«“
vj Ixia Cocro nJAt A ctcsftei ccfccA crdtx.S d.2 t,^cc=tr.rl-
cc^cl ctdLo Crn C"X.t CHitct pcia CX3to? X2S#
c* -
ISS*
^crc: IrstxrslcffD cc^tggsn^ja CcaCcSX11
Ccrcu rctc-r^Co c!x3.cctcrol (S) o 1£3 cdJ#
L-2C0 CC^CEitCLUl O no * ICO C£J
o (0 6 i. CU )*
Ccics? tci 1 c~-2cc6crcl era Crrst GLtr.t 'j Cco ; v> rclibct tar*
va fcJrj Cira gcrcrrri; c ^ c rcc-'cc L <rd;;S »jr— 1*1 *
Dilakukan tiga kali ?3X). pct;cr2£ccO C.n fe'CoSnyj C jzt d-
lifcift t:;tea as cctzj.1 t-^*-jtii
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
t e a n t
UfiSIt PEHtlSOBGAW KADAR M CHOLESTEROL m'M SEHJM
. K0H5R0I. DABI fSETQDA 8ESZ<I1I) CHLOHm
Scapol 1 i hosilnjra 9 .IJjS isg*
Saspd a I hooUaya e Ik? og$
Sarapel 3 s � hnoiluya a 143 mg%
liaoil rafcn-rata » 1^6 r e%
«# g ^ s ^ a a s j s ^ - j o ^ . s & o l s g t o r o i ^ ^ ^ ^ •
S S 9 A *
Kadar total cholesterol dapat dlttitung dcngen noXlhct*
su m &sk« dari pssssasaan gorle ragroeal aiatan pads -
geaafear I.IS*.Tinp ccsspol Sllakuktm : Z X pejsorikcaan *Saftpel yoBg diporikea g 30 fsorapol *
Haeilnya .dapat. dillftot ®ada tabel s VOX scbagol bozl-
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
36
Kui'Vi.. luUi U.ix'i iwa^u.n ya-'ic ro reaal
X a* Ut Cru£{*^X— 0«0X^»
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
37
TABEL mi
HASIL PBRHIfUHGAN SADAH fOtfAL CHOLESTEROL DALAM SERUM
DAH1 METODA BBSI (III ) CHLORIDA.
tewpet
9 �» <�» « » M -M 4» «
Pemeriksaan 1 Pemeriksaan II® rag %
Deviasi Deviasi2=a5
1 127 130 3 9
2 307 315 6 6ll
3 205 19? a 6U
it 157 159 2f c
S 157 1M 10 100
6 217 22k ? 1*9
7 206 210 k 16
a lit? 150 3 9
9 297 291*. 3 9
10 270 26k 6 36
11 219 22k 5 25
12 2i*.0 2k5 5 25
13 121 115 6 36
14 316 312 6 36
IS 163 1?0 ? *4-9
16 212 209 5 25
17 1 161 169 3 6k
18 331 325 it 16
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Sampel
«%
Pemeriksaan I *= mg %
Pemeriksaan IX = mg %
Deviasi = d
Deviasi2e
19 129 124 5 25
20 288 291 7 49
21 217 222 5 25
22 180 182 2 4
23 155 160 5 25
24 294 300 6 36
25 167 174 7 49
26 117 119 2 4
27 210 207 3 9
28 144 147 3 9
29 174 179 5 25
30 233
tsasasssssiascassastsss :
2^0
ssscssb
8 64
° = V2i E d = Uj.6 E d2<= 844
d = 4*86* 3*75
Hasilnya sebagai berikut :
3 D = 3,75
Perbedaan rata*rata « 4#86 mg %»
Perbedaan terbefea» * X0 mg %*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Analisa ha&il*haoil yang didapat dari dua motoda «Ilf W i n w u m < ■ i ^ g T T i i i i ) w f c ^ p i — m s m W W — i d » M w y n g » » » » » m b i > > b i » m u m M t i H W
1* Basil pengematan darl dua motoda torhadap go *
rip kontrol *In 3* M»«* wMm o»*» an •» w
Sorum kontrol torccbut menpunyai liarga rata -
rata cholesterol (5) & 138 rag##
Rango pcmorikeaan » 110*166 rag% <g * 2SD) *
§ ^ i ^ 9 5 s ^ M ^ ! A ^ 5 s £ e . t e - i ^ 2 & 2 £ 5 s s s . § y > s s 1 i a ! : 3“ I P • • « V Z I P n v l V l T ^ a V U f f t 4V B V V V V C 9B C V • ■ * • • • ■ V ^ b W ■ ■ f c T V *
Berdasarkan perhitungan pada tabol I t
har&a r&ta«rafca cholesterol (x) a 14 4 mg& «
I l ^ . B E S ® g t s M S £ l . g g S 2 ^Berdasarkan perliitungan pate tctbol \SX*
harga rata-rafca choloefcerol (3) « 1 6 isg% *
Harga rata-rata poEiorlkoaan macing *►
making motoda tersebut mondokati harga rata*-
rata dari oarum kontroldan Juga mGmenii&i m m
#£C peincrikaaan * maka kodua motoda torcebut-
accuraey<kcfcepafcannya) baik .
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
pegSsltt»3&* s fla tefcct if i
,ica?cD: etsEfera sotA&A p0&= %6i tySJ *
EspfioeaipJtoi» pcrtiitttncciti pedn tabs! 'Wilt
ilczcT' ctcMora m&Lsei «SB= s*?5 nc «'Stefio ata Stc&fiord Itevicei (G o }r«r fesEl ncfccfia -
UflbaRMsES lofeili fcccil CzrX cctoSa JScclttll)
C62.cr5.c2i'. ceto r.otodo Mfctoiosim Dardi'-.i’t’ Ixtcliti»
cssya iotfflb. fcoAU flei&ntvga cotOfla JtoGl{ni)C2xie?2,«
£a a '
. 2 . b » i i ^ s j i » j s s i s
044 £ sdtttd: dindseM iiftttth eeUlirjt opzfcaii. eflo/tificit pcr'oe-fccn yrac tacaJase cnteisa cotofia I4.ebc-ir.rna »
IMWsmM d-c cctosc. Ecci C 111) (ftlci'iCr. tercctat • O&tah cefeo&a tersebut <4®c*ycHBt&c» :peat 3a#e$a tcbcl ‘'t" aesfeeiteci «
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Jadi dengan maksud mempergunakan analisa Paired *
n t " teat tersebut hasil-hasil dari metoda Liebermann -■
Burchard dan metoda Besi ( III ) Chlorida apakah ada per
bedaan yang bermakna/tidak bermakna*
Untuk maksud tersebut dfepat dilihat pada tabel -
XX sebagai berikut :
TABEL XX
HASIL RATA-RATA TIAP SAMPEIi SERUM DARI DUA METODA
C£SS£SS 7=22=
Harga rata- rata metoda
L#B.
Harga rata* rate metoda
Deviasi = d
Deviasi2 = d2
132,s 128,5 4 16
318,5 311 7,5 56,25
203 201 2 4
161,5 158,5 3 9
155*5 152 3,5 12,35
227 220,5 6,5 42.55
213,5 208 4*5 20,25
152 148,5 3,5 12,25
303 295,5 4.5 56,25
270,5 267 3*5 12,25
232,5 221,5 11 121
252 242,5 9,5 90,25
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Harga rata* rata raetoda
L.B*
=2=ess=s:=5:s=e=e52£=ss=:
Harga rata- rata-xnefcoda PeCX*3
Deviasi= a.
Deviasi=
122 118 k 16
321». 315 9 81
179*5 166,5 13 169
220,5 211,5 9 81
336,5 328 8,5 72,25
135,5 126,5 9 81
293 289,5 ' 3,5 12,25
225,5 219,5 6 36
183 181 2 k
165 157,5 7,5 56,25
303 297 6 36
171).» 5 170,5 16
123 116 5 25
208 208,5 0,5 0,25 •
1M.5 345,5 2 1*
183 176,5 6,5 42,25
21*3.5' 236 7,5 56,25
167 165 2 If
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Hasil-hasil tabel IX t
Harga rata-rata metoda Liebermann Burchard s 211,85mg$«
Harga rata-rata metoda Besi (XXX) Chlorida : 206,15
Deviasi rata*rata « d S 5# 7 *ng$.
E d2 il2liif,S rag$*
n t 30
Ruamm yan& dipergunakan :
' . J L - V h S 2 . = E * 2p2P * f
- n d2 n * 1
Keterangan s
d s beda rata-rata
n ; jumlah pasangan
S t Pooled variance variabel d.X r
Po,05 ; level of signifigant “ kemaknaan alpha*
Hasllnva sebagal berikut *
s P * 9» 30
Sp = 3.04t _ J U U j o 6
3*04 ' 10*26«Menurut tabel t distribusi t
degree of freedom « n - 1 » 29
uji 2 pihak Po»05 tabel = 2*0 5
Hasil n t n parhitungan } n t n Po,05 tabel*
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan
Kesimpulannya�tm ! ■ » i i f ! ! ■ ♦ > ^ — — « w — i f a W M »
Perbedaan ter jadi secara bermakna pada ■*
Harga rata-rata metoda Liebermann Burchard
a 211*85 mg#»
Harga rata-rata metoda Besi(III)Chlorida
= 206»15 /
kk
ADLN - Airlangga Digital Library Network
Skripsi Pemeriksaan Kadar Total Cholesterol dalam Serum dengan metoda Lieberman... Muchlis Darmawan