Il sistema immunitario Il sistema immunitario di di DicentrarchusDicentrarchus labraxlabrax
…. e non solo…. e non solo
LymphoidLymphoid OrgansOrgans of Teleostsof Teleosts
trunk kidney
TeleostsTeleosts havehave innate and innate and acquiredacquireddefencesdefences
DIFESE INNATE:DIFESE INNATE:
-- PeptidiPeptidi antibattericiantibatterici-- ComplementoComplemento-- LisozimaLisozima, , TransferrinaTransferrina-- Produzione di ROSProduzione di ROS-- FagocitosiFagocitosi-- IFNIFNαα
Rapide (1 s-10 min), aspecifiche, senza memoria
Attivate da stimolanti (es. glucani)
Inibite da stress
DIFESE DIFESE ACQUISITE:ACQUISITE:
-- AnticorpiAnticorpi-- OpsonineOpsonine/Complemento/Complemento-- Linfociti killer e Linfociti killer e helperhelper antigeneantigene--specificispecifici-- Produzione di Produzione di citochinecitochine e fattori e fattori solubilisolubili
Ritardate (da ore a giorni), specifiche, con memori
Attivate da stimolanti (adiuvanti, probiotici)
Inibite da stress
Cosa sappiamo delle difese immunitarie dei Cosa sappiamo delle difese immunitarie dei teleosteiteleostei in in acquacolturaacquacoltura??
11-- Il sistema immunitario risponde, in quanto stimolando con un anIl sistema immunitario risponde, in quanto stimolando con un antigene o vaccintigene o vaccingenetica si possono misurare, dopo un certo tempo, anticorpi cirgenetica si possono misurare, dopo un certo tempo, anticorpi circolanti specifici colanti specifici (casi a parte: (casi a parte: CodCod, , HaddokHaddok, , IcefishIcefish).).
22-- Il sistema immunitario può essere modulato positivamente da Il sistema immunitario può essere modulato positivamente da immunostimolanimmunostimolantimmunoadiuvantiimmunoadiuvanti, , probioticiprobiotici; negativamente da condizioni di stress ambientale.; negativamente da condizioni di stress ambientale.
33-- Si può effettuare vaccinazione propedeutica Si può effettuare vaccinazione propedeutica massivamassiva e preventiva in età giovane preventiva in età giovan
44-- La vaccinazione terapeutica ha poco effetto nel rallentare gli La vaccinazione terapeutica ha poco effetto nel rallentare gli outbreaksoutbreaks
55-- Alcuni patogeni sono ormai Alcuni patogeni sono ormai ubiquitariubiquitari e, quindi, opportunisti.e, quindi, opportunisti.
66-- Nonostante le somiglianze, e’ difficile applicare le conoscenzeNonostante le somiglianze, e’ difficile applicare le conoscenze immunologicheimmunologichemammiferi ai mammiferi ai TeleosteiTeleostei, e fra questi , e fra questi puo’puo’ essere difficile da specie a specie.essere difficile da specie a specie.
Futuro: vaccini polivalenti, modulazione positiva, parchi riprodFuturo: vaccini polivalenti, modulazione positiva, parchi riproduttori geneticameuttori geneticamenselezionati.selezionati.
Metodi con i quali si studia il sistema immunitario
Cellulari Molecolari
Proliferazioni “in vitro” in Proliferazioni “in vitro” in risposta a stimoli “allo” e risposta a stimoli “allo” e “xeno”“xeno”Misurazione di anticorpi prodotti “in Misurazione di anticorpi prodotti “in vivo” e “in vitro”vivo” e “in vitro”
Attività antibatterica e antiviraleAttività antibatterica e antivirale
CitotossicitàCitotossicità e “e “killingkilling””
Determinazioni delle concentrazioni Determinazioni delle concentrazioni leucocitarieleucocitarie
Metodi con i quali si studia il sistema immunitario
MolecolariMolecolariCellulari
Presenza di espressione Presenza di espressione genica (RTgenica (RT--PCR e PCR e qRTqRT--
PCRPCR))Determinazione dell’antigene(i) Determinazione dell’antigene(i) riconosciuto(i)riconosciuto(i)
Clonaggio di geni di interesseClonaggio di geni di interesse
Espressione di proteine Espressione di proteine ricombinantiricombinanti
Espressione dei geni di Espressione dei geni di interesseinteresse
TrasfezioneTrasfezione di geni di di geni di interesseinteresse
Analisi extraAnalisi extra-- ed ed intracellulariintracellulari delle interazioni delle interazioni ligandoligando--recettorerecettore
Lab of Lab of AnimalAnimal BiotechnologyBiotechnology: :
CellularCellular and and molecularmolecular markersmarkers availableavailable forfor seasea bassbass
MabMab antianti-- thymocytesthymocytes and and peripheralperipheral T T cellscells
MabMab antianti-- immunoglobulinsimmunoglobulins and and BB--cellscells
MabMab antianti-- complementcomplement (C3)(C3)
MolecularMolecular probesprobes forfor::
ILIL--11ββ, IL, IL--10, CD8a, 10, CD8a, TT--cellcell receptorreceptor((VbVb, Va), , Va), ImmunoglobulinImmunoglobulin ((IgLCIgLC), ),
MHCI, MHCII, IFN, CiclooxygenaseMHCI, MHCII, IFN, Ciclooxygenase--2 2 , , MxMx
ContinuousContinuous embryonicembryonic cellcell line line (DLEC)(DLEC)
RiboprobesRiboprobes forfor “in “in situsitu” ” hybridisationhybridisation
ProtocolsProtocols forfor::
LeucocyteLeucocyte purificationpurification, , leucocyteleucocytestainingstaining, , cellcell proliferationproliferation, , secondsecond
messengersmessengers detection, detection, transfectiontransfection, , immunoenzymaticimmunoenzymatic analysisanalysis, , fishfish
vaccination…vaccination…....
In progress:In progress:
EST EST librarieslibraries fromfrom fishfish challengedchallenged
withwith variousvarious pathogenspathogens,,
MicroarrayMicroarray chip(s)chip(s)
SeaSea bassbass isis, at , at presentpresent, the , the onlyonly marine teleomarine teleo
speciesspecies forfor whichwhich allall thesethese markersmarkers are are avaiavail
IMMUNITA’ UMORALEIMMUNITA’ UMORALE
Produzione di anticorpi specifici “in Produzione di anticorpi specifici “in vivo”vivo”
Produzione di anticorpi specifici “in Produzione di anticorpi specifici “in vitro”vitro”
B-cell
BcR
Ag
The binding of an antigen isenough to activate B lymphocytesfor somatic ricombination of BcRand for antibody secretion
Test the Test the efficiencyefficiency of a of a stimulantstimulant(e.g. a vaccine) through (e.g. a vaccine) through BB--cellcell
activitiesactivities
Rationale: B-cells from immunised fish shouldproduce antigen-specific antibodies and maintaina memory for the antigen.Methods: ELISA and “In vitro” production of specific antibody by HK
leucocytes.
BB--cellcellactivitiesactivitiesBB--cellcellactivitiesactivities
IMMUNITA’ UMORALE “in vivo”IMMUNITA’ UMORALE “in vivo”
Antigene sintetico: Antigene sintetico: apteneaptene (DNP) e molecola (DNP) e molecola carriercarrier (KLH)
0
0,5
1
1,5
2
2,5
3
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1Log reciprocal serum dilution
Abs.
492
nm
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1Log reciprocal serum dilution
Abs.
492
nm
DNPDNP--KLHKLH KLHKLH
(KLH)
ELISA di Anticorpi specifici antiELISA di Anticorpi specifici anti--DNPDNP--KLH e KLH nel KLH e KLH nel siero di pesci immunizzati per via siero di pesci immunizzati per via intraperitonealeintraperitoneale (30 (30
giorni).giorni).
Risposta antibatterica “in vivo”Risposta antibatterica “in vivo”
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
0,35
0,4
0,45
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1 4,4 4,7 5 5,3Log reciprocal serum dilution
A492
nm
Pre-immune
Immune
ELISA di Anticorpi specifici anti-Vibrio nel siero di pesci dopo 20 giorni di immunizzazione i.p., senza richiamo
Risposta antibatterica “in vivo”Risposta antibatterica “in vivo”
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
1,4
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1 4,4 4,7 5 5,3log reciprocal serum dilution
Abs
492
nm
ImmunePre-immune
Pesci di 2 g
ELISA di Anticorpi specifici anti-Vibrio nel siero di pesci immunizzati un anno prima con vaccino commerciale per
immersioneIl siero di questo gruppo di animali è capace di agglutinare “inIl siero di questo gruppo di animali è capace di agglutinare “invitro” vitro” VibrioVibrio anguillarumanguillarum vitalevitale
RISPOSTA ANTIBATTERICA “in vivo”RISPOSTA ANTIBATTERICA “in vivo”La vaccinazione per immersione contro La vaccinazione per immersione contro PhotobacteriumPhotobacterium damselaedamselae
richiede un richiamo dopo 20 giornirichiede un richiamo dopo 20 giorni
P. damselae, 64 days (30 days after boosting)
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1Log reciprocal serum dilution
Abs.
492
nm
preimmune
immune
Pesci di 100 g
ELISA di Anticorpi specifici antiELISA di Anticorpi specifici anti--P. P. damselaedamselae nel siero di pesci nel siero di pesci immunizzati.immunizzati.
RISPOSTA ANTIBATTERICA “in vivo”, effetto di RISPOSTA ANTIBATTERICA “in vivo”, effetto di immunoadiuvanteimmunoadiuvante: : E.coliE.coli LTK63 ricombinanteLTK63 ricombinante
a
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1
b
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1
c
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1
2121 49 (28*)49 (28*) 70 (49*)70 (49*)
Pesci di 1,5 gcontrol Phda Phda + LTK63
ELISA assay.ELISA assay.ELISA assay on pooled sera of young sea bass (1.5 G) vaccinatedELISA assay on pooled sera of young sea bass (1.5 G) vaccinated against against PhotobacteriumPhotobacterium damselaedamselae baba
tested at day 21 (a), 49 (b), and 70 (c) after vaccination. Conttested at day 21 (a), 49 (b), and 70 (c) after vaccination. Control fish= black bars, vaccinated fish = emptyrol fish= black bars, vaccinated fish = empty
LTK63LTK63--treated fish = grey bars. Xtreated fish = grey bars. X--axis is the log of reciprocal serum dilution.axis is the log of reciprocal serum dilution.
RISPOSTA “in vivo”, effetto di RISPOSTA “in vivo”, effetto di immunoadiuvanteimmunoadiuvante: (IL: (IL--11ββ ricombinante)ricombinante)
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1Log rec. serum dilution
Abs
492
nm
P BS
P BS +Vibrio
P BS +Vibrio+IL-1be t a
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
2 2,3 2,6 2,9 3,2 3,5 3,8 4,1Log rec. serum dilution
Abs
492
nm
PBS
PBS+VibrioP BS +Vibrio+IL-1-be t a
Immunizzazione intraperitoneale
ELISA dopo 30 giorni
Pesci di 150 g
ELISA dopo 60 giorni
RISPOSTA “in vivo”, effetto di RISPOSTA “in vivo”, effetto di probioticiprobiotici
Espressione COX-2/actina
0
0,2
0,40,6
0,8
1
1,2
1,41,6
1,8
2
control pro-car1 pro-car2
CO
X-2,
esp
ress
ione
rela
tiva
RT-PCR su RNA estrattoda cellule di intestino
Cellule a 51 dph(cellule/mm2)
Controllo Pro-carrier 1 ∆%
EGC 19 ± 6 19 ± 3 0Linfociti T 1158 ± 149 1252 ± 274 + 8
Cellule a 74 dph(cellule/mm2)
Controllo Pro-carrier 1 ∆% Pro-carrier 2
EGC 163 ± 221880 ± 95Linfociti T
∆%
108 ± 28 235 ± 31* + 118 + 511374 ± 192 2814 ± 576* + 105 + 37
* p<0.05
Analisi immunoistochimica quantitativa
Pesci di 50 g
RISPOSTA “in vivo”, effetto di RISPOSTA “in vivo”, effetto di CpGCpG--nucleotidinucleotidi
RISPOSTA “in vivo”, effetto di RISPOSTA “in vivo”, effetto di immunostimolantiimmunostimolantiPesci di 50 g15 giorni di trattamento
complementoHSP 70
HSP 70lisozima
RISPOSTA “in vivo”, effetto di RISPOSTA “in vivo”, effetto di immunostimolantiimmunostimolanti45 giorni di trattamento
complemento
lisozima
Proteina totale sierica
Pesci di 50 g
RISPOSTA “in vivo”, effetto di RISPOSTA “in vivo”, effetto di immunostimolantiimmunostimolanti
Conta dei linfociti B e linfocitiT tramite analisi citofluorimetrica
Pesci di 50 g
Intestino B-cells
PBL B-cells
Intestino T-cells
PBL T-cells
Effetto “in vivo”: concentrazione di ossigeno Effetto “in vivo”: concentrazione di ossigeno discioltodisciolto
0
1
2
3
4
5
6
7
8
normossia iperossia0
5
10
15
20
25
30
35
normossia iperossia
2211
Quantità di immunoglobuline totali Quantità di immunoglobuline totali sierichesierichein spigola (1) e sarago in spigola (1) e sarago pizzutopizzuto (2) determinate tramite ELISA(2) determinate tramite ELISA
Effetto “in vivo”: concentrazione di ossigeno Effetto “in vivo”: concentrazione di ossigeno disciolto disciolto sulla conta sulla conta linfocitarialinfocitaria
Linfociti T (%)Linfociti T (%) Linfociti B (%)Linfociti B (%)
normossianormossia iperossiaiperossia normossianormossia iperossiaiperossia
------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
timotimo 264264 726726 aaaaaa 78***78*** 54.5**54.5**
renerene 9898 8484 8686 367***367***,,aaaaaa
milzamilza 138138 9292 212*212* 308***308***,a,a
intestinointestino 119119 552552 aaaaaa 109109 22***22***,a,a
branchiebranchie 25142514 70137013 aaaaaa 76**76** 61***61***
sanguesangue 8585 3232 10101010 109109
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------LL’’analisi statistica del T di analisi statistica del T di StudentStudent per dati non appaiati (a due code) risulta: significativamente per dati non appaiati (a due code) risulta: significativamente
differente da cellule positive per DLT15 (***) P<0.001; (**) P<0differente da cellule positive per DLT15 (***) P<0.001; (**) P<0.01, (*) P<0.05; .01, (*) P<0.05;
da da normossigenatinormossigenati ((aaaaaa) P<0.001; () P<0.001; (aaaa) P<0.01, () P<0.01, (aa) P<0.05.) P<0.05.
DLT15= antiDLT15= anti--linfociti T; DLIg3= antilinfociti T; DLIg3= anti--linfociti B.linfociti B.
RISPOSTA ANTICORPALE“in vitro”RISPOSTA ANTICORPALE“in vitro”
vitro
RISPOSTA ANTIBATTERICA “in vitro”RISPOSTA ANTIBATTERICA “in vitro”ImmersionImmersion--vaccinationvaccination againstagainst PhotobacteriumPhotobacterium damselaedamselae
and and immunoadjuvanticityimmunoadjuvanticity of E. coli rLTK63 of E. coli rLTK63
a
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
21 40 70
b
0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
21 40 70
HKHK GillsGills
control Phda Phda + LTK63
“In vitro” production of anti-Phda immunoglobulins.
Head kidney and gill leucocytes at indicated days incubated withHead kidney and gill leucocytes at indicated days incubated with the immunisation antigen the immunisation antigen ((PhotobacteriumPhotobacterium damselaedamselae bacterinbacterin) adsorbed onto plastic for 48 hours at 18 ) adsorbed onto plastic for 48 hours at 18 °°C. Cells were then C. Cells were then
removed and specific antibody detected by ELISA. removed and specific antibody detected by ELISA.
IMMUNITA’ UMORALE “in vitro”IMMUNITA’ UMORALE “in vitro”
Produzione di anticorpi specifici anti: P.damselae da leucociti di branchie e rene cefalico
"In vitro" Ig, P. damselae
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
0,3
Gills pre Gills post HK pre HK post
Abs.
492
nm
64 days after boosting
IMMUNITA’ CELLULAREIMMUNITA’ CELLULARE
T-cell
TcR
CD4-8
APC
MHC
AgTT--cellcell
activitiesactivities
Activation of T-cell populations triggersomatic ricombination of TcR, T-cells proliferation
and cytokine production
Profilo linfocitario
DLT15= T-cellsDLIg3= B-cells
Linfociti T (%)Linfociti T (%) Linfociti B (%)Linfociti B (%)
normossianormossia iperossiaiperossia normossianormossia iperossiaiperossia
----------------------------------------------------------------------------------------------------
timotimo 264264 726726
--------------------------------------------------aaaaaa 78***78*** 54.5**54.5**
renerene 9898 8484 8686 367367******,,aaaaaa
milzamilza 138138 9292 212*212* 308308******,a,a
intestinointestino 119119 552552 aaaaaa 109109 22***22***,a,a
branchiebranchie 25142514 70137013 aaaaaa 76**76** 61***61***
sanguesangue 8585 3232 10101010 109109
----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
Questa distribuzione è correlabile allo “uptake” dell’antigene?
AbundanceAbundance of of TT--cellscells in the intestinein the intestine
TT--cellscells
BB--cells
T-lymphocytes in the gut
0
20
40
60
80
100
120
anterior middle posterior
relativ
e ce
ll nu
mbe
r
T-cellsEpithelial cells
cells
MayMay thisthis bebe importantimportant forfor oraloral vaccinationvaccination??
Relative density of T-immunoreactive cells in seabass lymphoid organs (quantitative immunocytochemistry)
0100200300400500600700800900
1000
28 35 41 49 56 70 86
days post-hatching
num
ber o
f cel
ls/1
0000
mic
ron2
0
5
10
15
20
25
30
35
28 35 41 49 56 70 86
days post-hatching
num
ber o
f cel
ls/1
0000
mic
ron2
0
1
2
3
4
5
6
7
8
28 35 41 49 56 70 86
days post-hatching
num
ber o
f cel
ls/1
0000
mic
ron2
0
1
2
3
4
5
6
28 35 41 49 56 70
days post-hatching
num
ber o
f cel
ls/1
0000
mic
ron2
thymus
intestine
kidney
spleen
Relative density of B-immunoreactive cells in seabass lymphoid organs during development
00,10,20,30,40,50,60,70,80,9
1
28 35 41 49 56 70 86
days post-hatching
num
ber o
f cel
ls/1
0000
mic
ron2
thymus
0
0,51
1,5
22,5
3
3,54
4,5
28 35 41 49 56 70 86
days post-hatching
num
ber o
f cel
ls/1
0000
mic
ron2
0
0,5
1
1,5
2
2,5
28 35 41 49 56 70 86
days post-hatching
num
ber o
f cel
ls/1
0000
mic
ron2
kidney
spleen
0
0,2
0,4
0,6
0,8
1
1,2
28 35 41 49 56 70 86
days post-hatching
num
ber o
f cel
ls/1
0000
mic
ron2
intestine
CON QUESTI DATI POSSIAMO AFFERMARECON QUESTI DATI POSSIAMO AFFERMARECHE CHE DICENTRARCHUS LABRAXDICENTRARCHUS LABRAX E’ E’
IMMUNOLOGICAMENTE COMPETENTEIMMUNOLOGICAMENTE COMPETENTEA 3 MESI DI A 3 MESI DI ETA’ETA’
InterleukinInterleukin--10: 10: anan importantimportant regulatorregulator of immune of immune responsrespons
TT--cellcellMHCI MHCII
CytotoxicityCytotoxicity HelperHelper activityactivity
Th1 Th2
IFNγ IL-10
activationactivation deactivationdeactivation
CD8 CD4
BB--cellscells and and TT--cellscells can can bebe immunopurifiedimmunopurified withwith mAbmAb
PurifiedPurified BB--cellscells havehave ananenhancedenhanced proliferativeproliferative
capabilitycapability
0
1
2
3
4
5
6
leucocytes DLIg3-purified
Prol
ifera
tion
inde
x (a
rbitr
ary
units
)
HK leucocytes from Vibrio-immunised fishincubated “in vitro” with antigen.
ATP- luminescence assay
A A typicaltypical TT--cellcell activityactivityThe oneThe one--way way mixedmixed leucocyteleucocyte reactionreaction (MLR)(MLR)
Stimulator PBL (inactivated byirradiation or mitomycin)
EffectorPBL 1
Blood
PBL
Effector PBL 2Effector PBL …n° 25Effector / Stimulator ratio = 5:1
““in vitro” MLRin vitro” MLR
Metodo di indagine: Metodo di indagine: AlloreazioneAlloreazione di PBL contro di PBL contro PBL irradiati (MLR). Conta PBL irradiati (MLR). Conta linfocitarialinfocitaria tramite FACStramite FACS
*
a
0
5
10
15
20
25
30
0 2 4Weeks
Perc
ent o
f pos
itive
cells
b
0
5
10
15
20
25
30
0 2 4Weeks
Perc
ent o
f pos
itive
cells
Control PBL MLR
B cells= Empty barsT cells = solid bars
B cells= Empty barsT cells = solid bars
FlowFlow cytometriccytometric analysisanalysis of MLRof MLR
DMEM
PBL MLR
2 2 weeksweeks MLR: MLR: effectseffects of of cyclosporincyclosporin--AA (5 (5 µµg/ml)g/ml)cyclosporin A is known in mammals to inhibit T-cell activities through the depression of T-cells growth factors production, by preventing activation of transcription factors involved
in cytokine expression.
0
2
4
6
8
10
12
14
Control MLR MLR + Cs A
CytotoxicityCytotoxicity assayassay of MLR of MLR culturescultures
4 days
ATPATP--basedbased luminometricluminometricassayassay
PBL andPBL andMLRMLR SAFSAF--1 1 fibroblastsfibroblasts
((fromfrom seasea breambream))
% % cellcell viabilityviability = (E+T) = (E+T) –– E / T x 100E / T x 100
RationaleRationale: target (: target (damageddamaged) ) cellscells shouldshould havehave lesslessintracellularintracellular ATPATPAdvantageAdvantage: : effectoreffector cellscells maymay bebe removedremoved easilyeasily
E T
E+T
XenogeneicXenogeneic reactionreaction (PBL on (PBL on mitomycinmitomycin--treatedtreated SAFSAF--1 1 cellscells))
Assay: IIF and flow cytometry with mAb DLIg3 and DLT15
Xenoreaction B-cells: 4 days
0
5
10
15
20
25
30
control xeno
Perc
ent p
ositi
ve c
ells
in P
BL ANOVA test, p=0.016
Xenoreaction T-cells, 4 days
0123456789
10
control xeno
Perc
ent p
ositi
ve c
ells
in P
BL ANOVA test, p=0.013
Cytotoxicity in xenoreaction at 4 days
0
50
100
150
200
20;1 10;1 5;1 1;1E:T ratio
perc
ent t
arge
t sur
viva
l
E = PBL T = SAF-1 cells
Assay: luminometric determinationof intracellular ATP
NN--endend
CC--endend
NN--endend
CC--endend
OncorhynchusOncorhynchus mykissmykiss ILIL--11
DicentrarchusDicentrarchus labraxlabrax ILIL--11
bb--bulgebulge looploop
bb--bulgebulge looploop
FishFishimmunopharmacologyimmunopharmacology
C-end
N-end
Dominio III
Dominio II
Dominio I
IL-1
IL-1R
Trout IL-1 receptor (Il-1RI)
Trout IL-1 bound to Il-1RI
A A syntheticsynthetic peptidepeptide derivedderivedfromfrom the the bulgebulge looploop hashas goodgoodimmunoadjuvantimmunoadjuvant activityactivity
TOO EXPENSIVE, AT PRESENT,TOO EXPENSIVE, AT PRESENT,FOR APPLICATION FOR APPLICATION IN FISH FARMINGIN FISH FARMING
SIXTH FRAMEWORK PROGRAMMEPRIORITY 5FOOD QUALITY AND SAFETY
SIXTH FRAMEWORK PROGRAMMEPRIORITY 5FOOD QUALITY AND SAFETY
Improved immunity of aquacultured animals(IMAQUANIM)
Disease modelsVaccination
ImmunostimulationChallenge
Stress
Previously characterised defense gene elements
New genes related to immune defensemechanisms
Genomics of immunity- Qualitative and quantitative assays for gene expression - Functional analysis
Differential displaySubtractive hybridisationMicroarray
Homology cloning
Platform for better disease protection- Gene array assays for quantitative and qualitative determination of immuno competance and vaccine efficacy.- Assays for determination of pathogen-related immunological status
Immune response analysesHistological studies
New vaccinestrategies
Antibodies to Key molecules
AntibodyResponseassays
Immuno-Stimulants
WP2.2-2.3
WP2.4
WP3.2
WP10.1
WPs1-2
WP3.1+3.3
WP4.1-12.1
WP3.2+ WP13.1
Contributo alla divulgazione in acquacoltura:
LA RICERCA SCIENTIFICA INNOVATIVA IN ACQUACOLTURA: LA GENOMICA PER IL MANTENIMENTO DELLA SALUTE DELLE SPECIE ALLEVA
Elisa Randelli, Daniela Casani, Francesco Buonocore, Giuseppe Scapigliati
Bollettino API, in stampa, 2006
RINGRAZIAMENTIRINGRAZIAMENTI
Lab di Biotecnologie AnimalLab di Biotecnologie AnimalUnivUniv. Della . Della TusciaTuscia, VT, VT
ScottishScottish FishFish ImmunologyImmunologyResearchResearch CentreCentre, Aberdeen , Aberdeen University, UKUniversity, UK
ICRAM, RomaICRAM, Roma
M.I.P.AM.I.P.A, 4C, 5C, 4C, 5C
EU 5FP FISHAID EU 5FP FISHAID EU 6 FP IMAQUANIMEU 6 FP IMAQUANIM
Nuova Azzurro, Nuova Azzurro, CivitavecchiaCivitavecchia