FACULTAD DE QUÍMICADEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA CLÍNICA(CLAVE 1807)

Licenciatura de QFB

Este material es exclusivamente para uso educativo y no de lucro

Laura Carmona SalazarRosalinda Velázquez Salgado

2017-II

FUNCIÓN RENAL

Producción de orina (Aprox. 1 ½ L diarios)

Regulación del equilibrio electrolítico

Regulación del movimiento y pérdida de agua a nivel celular, de forma concertada con la piel y los pulmones.piel y los pulmones.

Excreción de desechos metabólicos y de sustancias exógenas

Regulación de la presión sanguínea arterial

Producción de hormonas

Síntesis de nueva glucosa

ESTRUCTURACIÓN DE LA NEFRONA. La unidad funcional del riñón.

Capsula de Bowman

EN LA NEFRONA SUCEDEN CUATRO PROCESOS FUNDAMENTALES DEL RIÑÓN

1

1.Filtración2.Secreción tubular3.Resorción tubular4.Excreción

3

2

4

EN LA NEFRONA SUCEDEN CUATRO PROCESOS FUNDAMENTALES DEL RIÑÓN

PRUEBAS UTILIZADAS EN EL LABORATORIO CLÍNICO

• COMPUESTOS NITROGENADOS NO PROTEICOS

• PROTEÍNAS

UreaCreatinaCreatininaÁcido úricoAmoníaco

Aclaramiento/Depuración de creatinina

• ELECTRÓLITOS

• FISIOLOGÍA ÁCIDO-BÁSICADeterminación de pH y medición de gases

Na+, Cl-, K+, Ca2+ y Mg2+

FISIOLOGÍA DEL EQUILIBRIO ÁCIDO-BASE

• Al igual que otros componentes del líquido extracelular, la concentración de H+ se mantiene muy controlada.

• La concentración extracelular ronda los 40 nM• La concentración extracelular ronda los 40 nMaprox. Una millonésima parte de la concentración mM de Na+, K+, Cl- y HCO3

-

• Es crítico para mantener una función celular normal, debido a la reactividad de este ion.

FUNDAMENTO DE LA DETERMINACIÓN DEL pH

El pH es una medida de la concentración de protones en un medio acuosoSe define por la ecuación:

pH= -log [H+]En el laboratorio, la concentración de H+ de la sangre puede medirse mediante

un electrodo que lleva una membrana de vidrio que solo es permeable al H+. La difusión de los iones entre la sangre y el líquido del interior del electrodo genera un potencial eléctrico (Em) a través de la membrana que puede medirse.puede medirse.

La magnitud de este potencial es proporcional al logaritmo de la relación entre la concentración de H+ en cada uno de los compartimentos, según la ecuación de Nernst:

Em= 61 log [H+]e[H+]s

Los subíndices e y s, se refieren a los fluidos del electrodo y de la sangre, como la [H+] del electrodo es constante, el potencial solo depende del fluido problema

Simplificando Em= -log [H+]

PAPEL DEL SISTEMA AMORTIGUADOR BICARBONATO/DIÓXIDO DE CARBONO EN EL EQUILIBRIO ÁCIDO-BASE

El sistema amortiguador HCO3-/CO2 es central en elmantenimiento de del equilibrio ácido-básico, lo anterior se debea que pueden regularse de forma separada

El HCO3- por medio de cambios en la secreción renal de H+

PCO2 a través de cambios en la tasa de ventilación alveolar

La producción media diaria de PCO2 proviene del metabolismoglucídico y lipídico y alcanza los 15000 mmol de CO2 que podríareaccionar con agua para formar H2CO3 implicando unaimportante acidemia. Sin embargo, esto no sucede encondiciones normales y el CO2 se pierde por la vía respiratoria.

La mayor parte de los ácidos se van a eliminar como dióxido de carbono a través de los pulmones y el resto lo hace a pulmones y el resto lo hace a través de los riñones en forma de ácido titulable y iones amonio

CONTROL DE LA HOMEOSTASIS ÁCIDO-BÁSICA EN EL ORGANISMO

El organismo compensa la acidosis o alcalosis modificando la relación bicarbonato-ácido carbónico.

Donde el bicarbonato cambia dependiendo de su excreción o retención renal y los niveles de pCO2 dependen de la hipoventilación o hiperventilación de los pulmones.hipoventilación o hiperventilación de los pulmones.

Por tanto:

RIÑONES Y PULMONES CONTRIBUYEN AL CONTROL DEL EQUILIBRIO ÁCIDO-BÁSICO

ANÁLISIS CLÍNICO DE LAS AFECCIONES ÁCIDO-BÁSICAS

Se caracterizan por la evaluación de pH, pCO2, pO2 y bicarbonato.

La acidosis se caracteriza por reducción del bicarbonato (acidosis metabólica) y aumento de pCO2 (acidosis respiratoria)

La alcalosis se refiere al aumento de bicarbonato (alcalosis metabólica) y reducción de pCO2 (alcalosis respiratoria)2

Para la determinación del bicarbonato se miden los niveles de dióxido de carbono y para los niveles de ácido carbónico la pCO2.

Puede utilizar muestras de sangre venosa o arterial.Cuidar que el paciente este tranquilo para evitar la

hiperventilación, dando como resultado una alcalosis respiratoria.

GASOMETRÍAES UNA TÉCNICA DE MONITORIZACIÓN RESPIRATORIA INVASIVA QUE PERMITE, EN UNAMUESTRA DE SANGRE ARTERIAL, DETERMINAR EL pH, LAS PRESIONES ARTERIALESDE OXÍGENO Y DIÓXIDO DE CARBONO Y LA CONCENTRACIÓN DE BICARBONATO YDE OXÍGENO Y DIÓXIDO DE CARBONO Y LA CONCENTRACIÓN DE BICARBONATO YELECTRÓLITOS.

EL FUNDAMENTO DE LA GASOMETRÍA ES LA POTENCIOMETRÍA

La potenciometría es una técnica electroanalítica con la que se puede determinar laconcentración de una especie electroactiva en una disolución empleando un electrodo dereferencia (un electrodo con un potencial conocido y constante con el tiempo) yun electrodo de trabajo (un electrodo sensible a la especie electroactiva) yun potenciómetro.

Existen electrodos de trabajo de distinto tipo útiles para distintos cationes o aniones. Cadavez son más usados los electrodos selectivos de iones (ESI) o electrodos de membrana.

ELECTRODO = Sitio de interface metal-líquido = el metal y el electrolito interactúan paratransferir la carga eléctrica de uno a otro

ELECTRODO ION SELECTIVO Posee una membrana ion selectivaResponde al contacto con un determinadoion disuelto en la solución, y la diferenciade potencial generada a cada lado de lamembrana se utiliza para medir la

Existen dos tipos de conducción eléctrica: conductividad en metales, en los cuales laelectricidad es transportada por electrones, y conductividad en líquidos con ionesdisueltos (electrolitos), en donde la electricidad es transportada por los iones.

¿CÓMO FUNCIONA UN ELECTRODO?

membrana se utiliza para medir laconcentración del ion en la solución estudiada.

El electrodo ion selectivo debe estar inmerso en la solución acuosa que contiene el ion que se desea medir, y en la mismasolución estará también inmerso el electrodo de referencia. Para completar el circuito electroquímico, ambos electrodos seconectan a un mini voltímetro, muy sensible, usando cables especiales de baja interferencia. Cuando el ion a mediratraviesa la membrana ion selectiva del electrodo, debido al gradiente de concentración, genera una diferencia de potencialque es medida. A mayor diferencia de potencial generada, mayor es la concentración del ion en la solución.

ELECTRODOS IÓN SELECTIVOS

TIPOS DE ELECTRODOS DE IÓN SELECTIVO

Electrodos de membrana de vidrioRealizan la medición de la concentración del ión a través de una membrana de vidrio.El potencial que obtiene este electrodo resulta del intercambio catiónico y la movilidad de los mismos que producen una acumulación de carga en la interface vidrio-disolución.

Electrodos de estado sólidoEste tipo de electrodos cuenta con una membrana iónicamente conductora. Esta membrana se encuentra unida al cuerpo del electrodo y se compone de un material con superficie homogénea que hace una mínima retención de la muestra.

Electrodos de matriz sólida o líquidaLa membrana selectiva de este tipo de electrodos tiene un intercambiador de iones que está permanentemente fijo al cuerpo del electrodo y envuelto en un material plástico.La función principal de la membrana de los electrodos de matriz sólida o líquida es la separación de la disolución externa y la interna de la muestra.

Electrodos sensores a gasesElectrodos sensores a gasesLos electrodos sensores a gases utilizan una membrana permeable al gas. Cuentan con una capa amortiguadora delgada que atrapa el analito en forma de gas y lo convierte en alguna otra especie iónica que pueda ser medida con un potenciómetro.

Ventajas de los electrodos de ión selectivo:Las principales ventajas de realizar mediciones con electrodos de ión selectivo son:- Bajo costo- Facilidad de operación- Determinan la concentración de iones en soluciones acuosas- Extenso campo de aplicación- Manejan amplios rangos de concentración de iones- No se ven afectados por interferencias relativas al color de la solución- Pueden alcanzar niveles de exactitud de ± 2 o 3 % para algunos iones- Pueden medir iones positivos y negativos- Las soluciones acuosas en las que trabajan pueden tener un amplio rango de temperaturas

Electrodos ion selectivos Electrodos de gases

http://www.crisoninstruments.com/es/parametros/electrodos-ion-selectivo/electrodos-ise-indicadores/electrodos-ise-indicadores/electrodo-ise-de-calcio

http://www.hannaarg.com/folletos/catalogo_ise.pdf

El paciente ha de estar en reposo como mínimo unos 10 minutos, sentado o tumbado. Delo contrario, obtendremos unos valores erróneos en la PO2 arterial como consecuencia dela mayor demanda de oxígeno que tiene lugar en los tejidos tras realizar un esfuerzo.

El paciente ha de estar dentro de unas condiciones basales que no influyan en losresultados de la gasometría. Para ello, no ha de tomar ciertos medicamentos nihaber fumado el mismo día de la prueba.

Se ha de conocer la fracción de oxígeno del aire inspirado (FiO2). Generalmenteinspiramos aire con un 21% de oxígeno aproximadamente, pero algunos pacientes puedenestar siendo tratados con oxígeno hiperbárico (100% de oxígeno) o con cualquier otra

REQUISITOS PARA TOMA DE MUESTRA

estar siendo tratados con oxígeno hiperbárico (100% de oxígeno) o con cualquier otrafracción, lo que provocará cambios en la interpretación de los resultados.

La oximetría de pulso o pulsioximetría es la medición, no invasiva, del oxígeno transportadopor la hemoglobina en el interior de los vasos sanguíneos.

LA OXIMETRÍA COMO TÉCNICA ALTERNATIVA PARA MEDIR SATURACIÓN DE OXÍGENO

Cómo funciona

DATOS A OBTENER:Índice de saturación de oxígenoFrecuencia cardiacaCurva del pulso

Cómo funcionaEl color de la sangre varía dependiendo de lo saturada de oxígeno que se encuentre, debido alas propiedades ópticas del grupo hemo de la molécula de hemoglobina. Cuando la molécula dehemoglobina libera oxígeno pierde su color rosado, adquiriendo un tono más azulado y dejapasar menos la luz roja.Así pues el pulsioxímetro determina la saturación de oxígeno midiendoespectrofotométricamente el "grado" de azules de la sangre arterial y expresa esta "azulez" entérminos de saturación. Por lo tanto, miden la relación, en un intervalo de tiempo, entre lasdiferencias de absorción de las luces rojas e infrarroja. Esta relación se vincula directamente conla saturación de oxihemoglobina.

Valores normalesLa saturación de Oxígeno debe de ser mayor del 95%.