BAB III METODOLOGI PERCOBAAN

3.1 Alat dan Bahan

a. Alat

Tabung reaksi

- gelas ukur

Pipet tetes

- ball pipet

Pipet Mohrn 10 ml

Botol Semprot

Gelas kimia 250 ml

Thermometer

Spektrofotometer

Kuvet

Penangas Labu ukur 100 mL

b. Bahan

Kacang Hijua (CuSO4.5H2O) 7,5 gram

Aquades

Pereaksi Somogy-Nelson

Iod 2% Etanol 95% NaOH 3 N Glukosa standart Natrium karbonat anhidrat

natrium bikarbonat

natrium sulfat anhidrat

HCl pekat3.2 Langkah Kerja

3.2.1. Preparasi Bahan

1. Pembuatan Pereaksi Somogy-Nelson

a) Nelson A Natrium karbonat anhidrat12,5 gram, garam rochelle 12,5 gram, natrium bikarbonat 10 gram, natrium sulfat anhidrat 100 gram dilarutkan dalam 500 mL akuades. b) Nelson B

(CuSO4.5H2O) 7,5 gram dan HCL pekat 1 tetes dilarutkan dalam 50 mL akuades

c) Reagen Nelson

Dicampurkan 25 bagian reagen nelson A dengan 1 bagian nelson B. Pencampuran dilakukan ketika reagen akan digunakan.3.2.2. Preparasi sampelBiji :

1. Biji kacang hijau ditimbang 100 gram

2. Hancurkan dengan miling

3. Larutkan dalam air, pisahkan antara padatan dengan koloid4. Koloid di pisahkan dengan kertas saring.

5. Timbang berat padatan, berat endapan kolid

6. Larutan diuji dengan pereaksi nelson

Biji setelah direndapan :

1. Biji kacang hijau ditimbang 100 gram

2. Hancurkan dengan miling

3. Larutkan dalam air, pisahkan antara padatan dan koloid

4. Koloid di pisahkan dengan kertas saring.

5. Timbang berat padatan, berat endapan kolid

6. Larutan diuji dengan pereaksi nelson

Kecambah umur 3 hari

1. Biji kacang hijau ditimbang 100 gram

2. Hancurkan dengan miling

3. Larutkan dalam air, pisahkan antara padatan dan koloid

4. Koloid di pisahkan dengan kertas saring.

5. Timbang berat padatan, berat endapan kolid

6. Larutan diuji dengan pereaksi nelson

Kecambah umur 6 hari

1. Kecambah ditimbang

2. Kecambah yang tumbuh, pisahkan bagian-bagian kecambah yaitu bakal akar, bakal daun/ hipokotil (bakal batang) dan keping biji3. Masing-masing bagian ditimbang

4. Masing-masing dihaluskan dan selanjutnya pisahkan dengan cara menyaring dengan kertas saring

5. Filtratnya analisa kandungan karbohidratnya.

6. Bagian tidak lolos timbang selanjutnya hidrolisa dengan HCl 6 M selama 3 jam

7. Hasil hidrolisa uji dengan nelson berapa kadar gula reduksi hasil hidrolisa.

8. Pengujian karbohidratNoSumber variasiPengujianPerlakuan

1Sambel 1mlamilum--------------------------------------------------------Jodin

2Sampel 1 ml+ 1 ml Aqudest0.5 ml Benedict Panaskan

3Sampel 1 ml+ 1 ml aquadest0,5 ml SelwanoffPanaskan

4Sampel 1 ml+ 1 ml aquadest0, 5 ml BarfoetPanaskan

5Sampel 1 ml+ .25 mL HCl 6NPanaskanSetelah dingin + 0,25 ml NaOH 6 N+ Benedict 0,5 mlPanaskan

6Sampel 1 ml+ .25 mL HCl 6NPanaskanSetelah dingin + 0,25 ml NaOH 6 N+ Seliwanoff 0,5 mlPanaskan

7Sampel 1 ml+ .25 mL HCl 6NPanaskanSetelah dingin + 0,25 ml NaOH 6 N+ barfoet 0,5 mlPanaskan

8Glukosa 1 ml 0.1 mol+ .25 mL HCl 6NPanaskanSetelah dingin + 0,25 ml NaOH 6 N+ Benedict 0,5 mlPanaskan

9Fruktosa 1 ml 0.1mol+ .25 mL HCl 6NPanaskanSetelah dingin + 0,25 ml NaOH 6 N+ Benedict 0,5 mlPanaskan

10Selulosa 1 ml 0.,1 mol+ .25 mL HCl 6NPanaskanSetelah dingin + 0,25 ml NaOH 6 N+ Benedict 0,5 mlPanaskan

11Glukosa 1 ml 0,1 mol+ benedict 1 mlPanaskan

12Fruktosa 1ml 0,1 mol+ selivonof 1 ml Panaskan

12 perlakuan diatas dibuat volume yang sama, metoda sebagai berikut:

12 tabung reaksi diatas diletakan berderet, kemudian permukaan larutan dibuat sama dengan cara ditambahkan aquadest sampai permukaan larutan ke duabelas sama tinggi . Kemudian difoto dan diulang minimal ada ada 3 kali pengambilan gambar.Cara pengambilan gambar sebagai berikut:Tabung yang berisi larutan yang telah diuji (hasil uji) diletakan berderet, selajutnya dibuat kotak sehingga larutan terletak dalam kotak seperti pada gambar. Ambil gambarnya dan dihitung intensitas cahanya adalag yang terletak dalam kotak.

Foto yang dihasilkan, dikonversi menjadi digital. Nilai digital masing2 perlakuan dirata2, Selanjutnya dibandingkan