fes, transferrina e is

8/17/2019 FeS, Transferrina e Is

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Determinación deDeterminación de

Hierro sérico yHierro sérico yTransferrina como CTFFeTransferrina como CTFFe



05/05/1605/05/16 T. Haydée Zúñiga CáceresT. Haydée Zúñiga Cáceres 22

Fundamentos del métodoFundamentos del método

El Fe séricoEl Fe sérico se libera de su unión con suse libera de su unión con su

ro!e"na !ransor!adora esec"#ica$ laro!e"na !ransor!adora esec"#ica$ la

!rans#errina$ en bu##er succina!o de H %$&!rans#errina$ en bu##er succina!o de H %$&

y en cia de un reduc!or$ el ác.y en cia de un reduc!or$ el ác.

'erca!oacé!ico. (uego reacciona con el'erca!oacé!ico. (uego reacciona con el

reac!i)o de color$ iridil bis*#enil !ria+inareac!i)o de color$ iridil bis*#enil !ria+ina

sul#ona!o ,-T dando un co'leo colorsul#ona!o ,-T dando un co'leo color'agen!a$ ue se 'ide a 560 n'.'agen!a$ ue se 'ide a 560 n'.



05/05/1605/05/16 T. Haydée Zúñiga CáceresT. Haydée Zúñiga Cáceres %%

Fundamentos del métodoFundamentos del método

La transferrina se determ. x su activ.fsiológica de captar Fe (III) a pH mayorque 7,2 donde la transerrina se satura enpcia de Fe (III) en exceso. !l remanente de

Fe (III) no ligado se elimina totalmente porcoprecipitación con car"onato demagnesio.!l #ierro unido a la transerrina se li"era ydetermina colorim$tricamente seg%n lat$cnica de Fer-color o Fer-color AA.&a cantidad de 'ranserrina se expresa

como los microgramos de Fe (III) con queest saturada.




Reactivos provistosReactivos provistos

A. Reactivo A:A. Reactivo A: bu##er succina!o 0$25 'ol/( arabu##er succina!o 0$25 'ol/( ara

H %$&.H %$&.

B. Reactivo B:B. Reactivo B: a'olla au!orro'iblea'olla au!orro'ible

con!eniendo ácido 'erca!oacé!ico al &0 4con!eniendo ácido 'erca!oacé!ico al &0 4,reduc!or.,reduc!or.

C. Reactivo C:C. Reactivo C: solución es!abili+ada de iridilsolución es!abili+ada de iridil

bis*#enil !ria+ina sul#ona!o ,-T 50 ''ol/l.bis*#enil !ria+ina sul#ona!o ,-T 50 ''ol/l.S. Standard:S. Standard: solución de iones e ,solución de iones e ,

eui)alen!e a 100eui)alen!e a 100 77g/d(.g/d(.




SATURACIÓN DE LA TRANSFERRINA:SATURACIÓN DE LA TRANSFERRINA:

SUERSUER !"# mL!"# mL

So$%ción Sat%ranteSo$%ción Sat%rante !"# mL!"# mL

&e'c$ar y de(ar # min a )* +C"&e'c$ar y de(ar # min a )* +C"

Con dosificador , - medida a$ ras deCon dosificador , - medida a$ ras deAdsor.enteAdsor.ente

Ta/ar y a0itar 1i0orosa y $on0it%dina$mTa/ar y a0itar 1i0orosa y $on0it%dina$m

2 # min2 # min

Centrif%0ar -# min a 3 !!! r/mCentrif%0ar -# min a 3 !!! r/m

Determ" Fe sérico en e$ So.renadante4Determ" Fe sérico en e$ So.renadante4




HIERR S5RIC

IERR S5RIC

CTFF

TFF

BlBl STST DD TT

Agua bidestilada Agua bidestilada 0.5 mL0.5 mL

StandarStandar-!!

!!

%06dL

06dL

0.5 mL0.5 mL

SUEROSUERO 0.5 mL0.5 mL Sobrenadante*Sobrenadante*

0.5 mL0.5 mL

Buffer/RedutorBuffer/Redutor ! mL! mL ! mL! mL ! mL! mL ! mL! mL

Mezclar.Mezclar. &eer la "s del tu"o * y ' (+l de uero +)&eer la "s del tu"o * y ' (+l de uero +)vs agua a -/vs agua a -/ ηηmm

AbsAbsB SueB Sue AbsAbs

B SobB Sob

Reat "BTSReat "BTS # gt.# gt. # gt.# gt. # gt.# gt. # gt.# gt.

Mezclar. Leer a los 15 min a 560 ηm vs agua.Mezclar. Leer a los 15 min a 560 ηm vs agua.



05/05/1605/05/16 T. Haydée Zúñiga CáceresT. Haydée Zúñiga Cáceres &&

Valores teóricosValores teóricos

Fe sérico:Fe sérico:

Ho'bres8 65 a 1&5Ho'bres8 65 a 1&5 77g/d( ,11$6*%1$%g/d( ,11$6*%1$%

77'ol/('ol/(9ueres8 50 a 1&09ueres8 50 a 1&0 77g/d( ,:*%0$3g/d( ,:*%0$3 77'ol/('ol/(



05/05/1605/05/16 T. Haydée Zúñiga CáceresT. Haydée Zúñiga Cáceres ;;

Valores de ReferenciaValores de Referencia

Transferrina y Saturación deTransferrina y Saturación de

TransferrinaTransferrina en ersonas nor'ales8en ersonas nor'ales8

Trans#errina ,TC8 250*300 ug/d(.Trans#errina ,TC8 250*300 ug/d(.a!uración de la Trans#errina8 20*55 4.a!uración de la Trans#errina8 20*55 4.

<eco'endación8 c/labora!orio debe<eco'endación8 c/labora!orio debees!ablecer sus roios =<.es!ablecer sus roios =<.



05/05/1605/05/16 T. Haydée Zúñiga CáceresT. Haydée Zúñiga Cáceres ::

!"# $ %&# '(dl

&# $ %)# '(dl

Fe Sérico * %## CTTFe ! + saturación

,-# $ -# '(dl ,) $ & +

FeS

Capacidad Total de

Transporte de Fe /CTTFe0

a!acLi"reFi#ac.

Fe




Relaciones de FeS1 C2FFe y CTFFe en diversas

condiciones cl3nicas

0

50

100

150

200

250

%00

%50

300

350

500

$ormal %e defi.$ormal %e defi. %inal #nfei&n%inal #nfei&n 'emo('emo( $efrosis Talasemia )$efrosis Talasemia ) emba(emba( #nflama.#nflama. roma(roma( $erosis$erosis e+e+

ra,o -alignid tosisra,o -alignid tosis "orfiria "orfiria

FeS$ LFFe % &FFe en diversascondiciones cl'nicas

fes, transferrina e is

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