inhibitory effect of acetic acid on aspergillus flavus

10
Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) 2018 ISSN-1813-1646 233 Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus Growth and Kojic Acid and Aflatoxin B1 Production in Stored Corn Radwan Ali Qassim * and Salah Omar Ahmad Food Sciences Dept.- College of Agric. & Forestry- Mosul University ABSTRACT Key words: Aspergillus flavus , Acetic acid , Kojic acid , Aflatoxin B1 ,Corn . Article History Received: 14/02/2014 Accepted: 26/02/2018 Available online: 30/06/2018 The aim of this work was to study the effect of acetic acid on growing of local isolate of Aspergillus flavus which contaminated stored corn and on produced the kojic acid and aflatoxin B1 , The acid were added with 0.5 , 1 , 3 , and 5 % compared with other control treatment of no added acids to stored corn . Samples were stored in closed room and the temperature was measured each month. Moisture percrnt , pH value, total count of fungus and concentration of kojic acid and Aflatoxin B1 in all treatments at the beginning and at the end of the month were measured . Results indicated that moisture content did not significantly change through different treatments with different concentration added of acid and at three different period of storage, The moisture percent in corn was ranged between 17.0 to 18.25 % . pH values were decreased in corn with added of acid, The value was decreased from 6.7 at the beginning of the storage to lowest level ( 3.64 ). Growth of A.flavus was inhibited and its count was decreased in corn of treatment with the above acid comparing with control treatment , The total count was ranged between 0.75 0.95 × 10 4 CFU / g when acid added with 0.5 % and this less than the number which found in control treatment , The growth of fungus decreased by 100% in case of addition of 1 , 3 and 5 % of acetic acid . Production of kojic acid and aflatoxin B1 by A.flavus in stored corn inhibited with addition of acetic acid , The concentration of the two substances ranged between 11.6 13.3 g / Kg and 29.5 47.5 μg / kg , respectively after using the acid with 0.5% , and this less than the levels in control treatment. Addition of acetic acid with 1% or above inhibited the production kojic acid and aflatoxin B1 by A.flavus complete . التأثيرطي لحامض التثبيي نمو الفطرخليك ف ألAspergillus flavus وإنتاجف جك وسم أمض الكو حا1 B في الذرة المخزنةن علي قاسم رضوا عمر أحمدح وص علوم قسمغذية ا اق / العرموصلمعة اللغابات / جا اعة واية الزر / كلصة الخلمفتاحية:ت اكلما الطي، حامضير التثبي التأثيك، الفطرخل الAspergillus flavus وجك، سممض الك ، حا.ف امست ا: 14 / 2 / 2014 قبول ال: 26 / 2 / 2018 كان اسة هدف الدر في محاولةلفطرية لة محلك في نمو عزلخليمض الرف على تأثير حا التعAspergillus flavus ف جك وسم أمض الكوتاج كل من حا اء وإن ة الصفرلذروثة لمل ال1 B اكيزلحامض بتر إذ أضيف ا0.5 و1 و3 و5 ه وجرىلحامض أعة من المقارنملة اا خلت معات الذرة فيمش عينا الى الوسط جري% ارةت الحرل درجا قياس معدادي وتمعتي ارة الجو ا جة حر فة مغلقة وبدرث أشهر في غر التخزين لمدة ثلفطري لكلد الني والعد قم الهيدروجي بة والرلرطو قدرت النسب المئوية ل أشهر الخزن وكل شهر من ل وتركيزف جك وسم امض الكو كل من حا1 B ر منه.د نهاية كل شه وعن بداية الخزنة فيمختلفت العام في المء بإضافةمختلفة سوات العام بين الم ختلف معنويا اء لم ي ة الصفرلذرئج أن المحتوى الرطوبي للنتا بينت ا اث ، فقد ترد الخزن الثل مدلحامض أو خ اكيز مختلفة من ا ترة إلى ادنىعامل الرطوبة الم وحت نسبوده وبلغ حد3.64 اد الفطر انخفضت أعدA.flavus معاملةة بالحامض بالقياس مععامل بعد الم معنوياكلي ماد ال اوح العد نة إذ ترلمقار ا بين0.75 0.95 × 4 10 خليكافة حامض أل / غم عند إض و. ت . م بتركيز0.5 لمقارنةملة ان معا هو يقل ع و% نسبةلسابق ب نمو الفطر ا فيما ثبط100 ستعمال عند ا% * Corresponding Author: Food Sciences Dept.- College of Agric. & Forestry- Mosul University- IRAQ.

Upload: others

Post on 10-Jun-2022

5 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

233

Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus Growth and Kojic Acid and Aflatoxin B1

Production in Stored Corn

Radwan Ali Qassim* and Salah Omar Ahmad

Food Sciences Dept.- College of Agric. & Forestry- Mosul University ABSTRACT

Key words:

Aspergillus flavus ,

Acetic acid , Kojic acid

, Aflatoxin B1 ,Corn .

Article History

Received: 14/02/2014

Accepted: 26/02/2018 Available online:

30/06/2018

The aim of this work was to study the effect of acetic acid on growing of local

isolate of Aspergillus flavus which contaminated stored corn and on produced the

kojic acid and aflatoxin B1 , The acid were added with 0.5 , 1 , 3 , and 5 % compared

with other control treatment of no added acids to stored corn . Samples were stored

in closed room and the temperature was measured each month. Moisture percrnt ,

pH value, total count of fungus and concentration of kojic acid and Aflatoxin B1 in

all treatments at the beginning and at the end of the month were measured . Results

indicated that moisture content did not significantly change through different

treatments with different concentration added of acid and at three different period

of storage, The moisture percent in corn was ranged between 17.0 to 18.25 % . pH

values were decreased in corn with added of acid, The value was decreased from

6.7 at the beginning of the storage to lowest level ( 3.64 ). Growth of A.flavus was inhibited and its count was decreased in corn of treatment

with the above acid comparing with control treatment , The total count was ranged

between 0.75 – 0.95 × 104 CFU / g when acid added with 0.5 % and this less than

the number which found in control treatment , The growth of fungus decreased by

100% in case of addition of 1 , 3 and 5 % of acetic acid . Production of kojic acid

and aflatoxin B1 by A.flavus in stored corn inhibited with addition of acetic acid ,

The concentration of the two substances ranged between 11.6 – 13.3 g / Kg and

29.5 – 47.5 µg / kg , respectively after using the acid with 0.5% , and this less than

the levels in control treatment. Addition of acetic acid with 1% or above inhibited

the production kojic acid and aflatoxin B1 by A.flavus complete .

في الذرة 1Bحامض الكوجك وسم ألافلا وإنتاج Aspergillus flavus ألخليك في نمو الفطر التثبيطي لحامضالتأثير المخزنة

وصلاح عمر أحمد رضوان علي قاسم / كلية الزراعة والغابات / جامعة الموصل / العراق الأغذيةقسم علوم

الخلاصة الكلمات المفتاحية:

التأثير التثبيطي، حامض Aspergillusالخليك، الفطر

flavus حامض الكوجك، سم ، الافلا.

14/2/2014: الاستلام 26/2/2018: القبول

Aspergillusالتعرف على تأثير حامض الخليك في نمو عزلة محلية للفطر في محاولة هدف الدراسة كان

flavus 1الملوثة للذرة الصفراء وإنتاج كل من حامض الكوجك وسم ألأفلاB إذ أضيف الحامض بتراكيز% الى الوسط جريش عينات الذرة فيما خلت معاملة المقارنة من الحامض أعلاه وجرى 5و 3و 1و 0.5

التخزين لمدة ثلاث أشهر في غرفة مغلقة وبدرجة حرارة الجو الاعتيادي وتم قياس معدل درجات الحرارة وتركيز لكل شهر من أشهر الخزن وقدرت النسب المئوية للرطوبة والرقم الهيدروجيني والعدد الكلي للفطر

في المعاملات المختلفة في بداية الخزن وعند نهاية كل شهر منه. 1Bكل من حامض الكوجك وسم الافلا بينت النتائج أن المحتوى الرطوبي للذرة الصفراء لم يختلف معنوياً بين المعاملات المختلفة سواء بإضافة

وحت نسب الرطوبة المعاملة إلى ادنى تراكيز مختلفة من الحامض أو خلال مدد الخزن الثلاث ، فقد ترامعنوياً بعد المعاملة بالحامض بالقياس مع معاملة A.flavusانخفضت أعداد الفطر 3.64حدوده وبلغ

و. ت . م / غم عند إضافة حامض ألخليك 410 × 0.95 –0.75 بين المقارنة إذ تراوح العدد الكلي ما% عند استعمال 100فيما ثبط نمو الفطر السابق بنسبة % وهو يقل عن معاملة المقارنة 0.5بتركيز

* Corresponding Author: Food Sciences Dept.- College of Agric. & Forestry- Mosul University- IRAQ.

Page 2: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

234

1B% من الحامض . حصل تثبيط لإنتاج كل من حامض الكوجك وسم ألأفلا 5و 3و 1التراكيز بوساطة الفطر السابق في الذرة المخزنة والمعاملة بحامض ألخليك فقد تراوحت تراكيزهما على التوالي ،

% من حامض 0.5/ كغم عند استعمال التركيز مايكرو غرام 47.5 – 29.5غم / كغم و 13.3 – 11.6ألخليك وهو يقل عما حصل في معاملة المقارنة ، في حين أن زيادة تركيز الحامض المضاف إلى أكثر

% أدى إلى إحداث تثبيط تام لإنتاج المادتين من قبل الفطر أعلاه. 1من

:المقدمة

ب والبذور الزيتية كالحنطة والذرة والرز والشعير وفستق الحقل وفول الصويا وغيرها من تعد المحاصيل الزراعية وخاصة الحبو إن الذرة الصفراء وصحته وديمومة حياته .سان المحاصيل الأساسية في حياة البشر إذ ترتبط هذه المحاصيل بصورة مباشرة بغذاء الإن

ازداد الاهتمام بزراعتها من قبل المزارع حيثمن المحاصيل الزراعية المهمة في العالم بصورة عامة وفي العراق بصورة خاصة من المحاصيل فهي تعدالعراقي وذلك للأهمية الاقتصادية الزراعية لهذا المحصول وللحاجة الماسة إليها في الاستخدامات المختلفة ،

نسان أو تدخل في صناعة أغذية الإفطار الحبوبية كما أنها مصدر ي لها مردود اقتصادي عالي كونها تستخدم كغذاء مباشر للإالت. ) MC Williamsمهم للزيت وتتميز الذرة بارتفاع قيمتها الغذائية وخاصة محتواها العالي من حامض اللايسين الأساسي والنشا )

تتعرض المحاصيل الزراعية للتلوث ( 2007وآخرون ، shanumضير الأعلاف الحيوانية )في تحبالإضافة إلى أنها تدخل ، للأجناس المنتجة للسموم ومن ذلك التلوث ( 2005بالفطريات خلال عمليات الإنتاج والحصاد والخزن ) الطحلي وآخرون ،

و Sp Penicillium. و .Trichoderma spو .Aspergillus spلأجناس المنتجة للسموم خاصة بالأنواع التابعة لAlternaria sp. وغيرها وأن عددا من انواع الفطريات التابعة للجنسAspergillus وجدت ملوثة للمحاصيل الزراعية المخزونة

1B ،2B ،1G ،2G، وتعد هذه من الانواع المنتجة للسموم خاصة سموم الافلا A.parasiticusو A.flavusخاصة (Lugauskas ، 2006وأخرون .)

هذه تعد مسببة للسرطان ومثبطة للجهاز المناعي وذات ة بتراكيز عالية من سموم الافلا بينت الدراسات أن الذرة وجدت ملوث فان الى سموم الافلا أضافة( .Petchkongtaew ،2008الملوثة بها ) الأغذية استهلاكالانسان عند تأثيرات خطيرة في صحة

( اذ يفرز هذا المركب بواسطة انواعا من Kojic acidالفطريات الملوثة للذرة قد تفرز متايضات اخرى خاصة حامض الكوجك ) ( ، ويحصل ذلك 2011وأخرون ، Ana Paula) وغيرها A.parasiticusو A.flavusو A.oryzeaالفطريات مثل

مختلفة تأثيراتعند نمو هذه الفطريات في الذرة المخزنة عند توفر درجات الحرارة والرطوبة والظروف البيئية المناسبة ، ولهذا المركب ن جهة اخرى ان اذ صنف من قبل بعض الباحثين على انه احد انواع السموم الفطرية ولوحظ انه سبب تثبيط لأنزيم التايروسينيز وم

الحيوي اعتمد على تركيزه المضاف تأثيرهحامض الكوجك عد من المضافات الغذائية ومضاد للأكسدة والاورام والاحياء المجهرية وان ( . Chang ،2009و 2006وأخرون ، Motoو Blumenthal ،2004او المتواجد في الاغذية )

العضوية وهي بذلك تعد مواد حافظة للأغذية خاصة للعديد من المركبات تأثير مثبط لنمو الفطريات خاصة الأحماض كفاءة عالية في تثبيط نمو الاحماض العضوية عدد من( لاحظا أن 1999) Briankhusو Higginsقام بها المخزنة ، في دراسة

، وبصورة عامة حصل تثبيط لفطريات الجنس A.flavusالفطريات ووجدا أن التراكيز العالية من حامض ألخليك ثبطت نمو الفطر Aspergillus 0.35 عند المعاملة بالحامض بتركيز % 100بحامض الخليك بنسبة%.

وإفراز كل من حامض A.flavus هدف الدراسة الحالية هو التعرف على تأثير عدة تراكيز من حامض ألخليك في نمو الفطر في الذرة الصفراء المخزنة لمدة ثلاث أشهر. 1Bالكوجك وسم ألأفلا

Page 3: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

235

:مواد البحث وطرائقه

الهيئة العامة لفحص ( مصدرها 5018المستخدمة في الدراسة صنف ) بحوث تركيبي Zea maysالذرة الصفراء -الذرة الصفراء: وتصديق البذور فرع كركوك ، وعند الاختبار تم التأكد من خلوها من كل من حامض الكوجك وسموم الأفلا.

من مصادر مختلفة Aspergillus flavusالحصول على عدة عزلات محلية للفطر تم -الفطر : –( وتم الفحص والتشخيص في كلية الزراعة والغابات بجامعة الموصل 1988) Pittو Klick ما ذكرهإذ شخصت العزلات وفق

قسم وقاية النبات ، بعدئذ جرت عمليات إعادة زرعها A.flavusعزلات الفطر فقد نميت B1وتنشيطها لغرض اختبارها للتبين من قدرة كل عزلة على إنتاج حامض الكوجك وسم الافلا

Potato Dextroseدكستروز ) –اجار البطاطا في وسط

(Agar (PDA) مل معقمة وبعد تلقيح الدورق بالعزلة تم التحضين بدرجة حرارة 250هندي المنشأ المائل في دوارق زجاجية سعة سبورات أيام ، ثم حضر معلق ال 7لمدة 5م28

وآخرون Harrigan) ما ذكرهلكل عزلة بعدئذ جرى عد السبورات بطريقة الإطباق المصبوبة وفق الابواغ ( وجمع المعلق السبوري ) ،1976.)

جرى اختبار عزلة للفطر السابق على انتاج كل من حامض -: B 1 قدرة العزلات على انتاج حامض الكوجك وسم الافلا اختبارساعة جرى 1غم جريش الذرة وبعد الترطيب لمدة 25مل تحوي 250وذلك بتحضير دوارق زجاجية سعة 1Bالكوجك وسم الافلا

6 10 ×1مل من المعلق السبوري لكل عزلة ) أحتوى تقريبا 1التخلص من الماء الزائد ومن ثم عقمت الدوارق وبردت ولقحت بـ . 1Bأيام وجرى تقدير كل من حامض الكوجك وسم الافلا 7م لمدة 5 28سبورة / مل ( ، حضنت الدوارق بدرجة حرارة

غم / دورق ، وعدلت نسبة 100مل بواقع 250حضرت عينات جريش الذرة ووزعت في دوارق زجاجية سعة -: اعداد العينات % تقريبا .18الرطوبة لتصبح

5و 3و 1و 0.5جريش الذرة الصفراء وبتراكيز ) تم اضافة حامض الخليك الى الدوارق الحاوية على -اضافة حامض الخليك :% ( فيما خلت معاملة المقارنة من الحامض وقد خففت الكميات المحسوبة من الحامض وبالتراكيز المدروسة بماء مقطر معقم

التي جرى ضبط ساخن وقد أخذ بنظر الاعتبار كمية الماء المضافة مع الحامض كمحلول الى العينات اذ حسب مع نسبة الرطوبة الذرة عليها حسابيا .

و.ت.م 4 10 × 1لقحت الدوارق الزجاجية الحاوية على جريش الذرة بالمعلق السبوري للفطر ) بواقع -اضافة معلق العزلة والخزن :أشهر ، بدرجة حرارة الجو الاعتيادية وجرى تقدير كل من النسبة المئوية للرطوبة 3و 2و 1غم ذرة ( رجت الدوارق وخزنت لمدة /

في كافة المعاملات وذلك في بداية التجربة وبعد كل مدة B1وأعداد الفطر والرقم الهيدروجيني وتركيز حامض الكوجك وسم الافلا ، وتم قياس درجة حرارة المخزن يوميا وحسب معدل 20/2/2014ان بداية التجربة ) بداية الخزن ( كانت في من مدد الخزن علما

درجات الحرارة لكل شهر من الخزن . الاختبارات:

(.AOAC ،1980في ) ما جاءقدرت النسبة المئوية للرطوبة وفق -تقدير الرطوبة : (.AOAC ،1980في ) ما جاءم الهيدروجيني وفق تم قياس الرق تقدير الرقم الهيدروجيني :

( Tiaga ،2009و Suleiman) ما ذكرهقدر العدد الكلي للفطر في المعاملات وفق -: A. flavusالعدد الكلي للفطر ما ذكرملغم / لتر وحسب 200بواقع Chloramphenicol( مضافا اليه PDAدكستروز ) –وسط أجار البطاطا باستخدام

(Pitt وHocking ،1997) والكلورومفينيكول مصدره شركةBRAWN من مل1ثم نقل 10-3الهندية . اذا حضر تخيف لحد

Page 4: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

236

أيام اذ جرى عد 4لمدة هم 28مكررين لكل نموذج ومن ثم التحضين بدرجة حرارة لاخير الى طبق بتري معقمة بواقعالتخفيف ا التخفيف.نامية ثم ضربت في مقلوب لمستعمرات الا

غم منها في دورق زجاجي سعة 5وضع A.flavus: بعد مزج عينات الذرة الصفراء التي نمى عليها الفطر تقدير حامض الكوجكدقيقة ورشحت من خلال ورق 30ورجت جيدا لمدة 10 /1مل ماء مقطر ساخن للحصول على تخفيف 45وأضيف اليها مل 250

مل من 1( أذ اخذ Bently ،1957الطريقة اللونية لغرض تقدير حامض الكوجك ) استخدام، تم 40رقم Whatmanترشيح 3Fecl (0,2 مل من كلوريد الحديديك 0,2مولاري وأضيف اليه 0,1مل حامض الهيدروكلوريك 2,5التخفيف أعلاه ومزج مع

500وعلى طول موجي المنشأألماني APELمن نوع Spectrometerمولاري ( في أنابيب اختبار رجت جيدا وقرات بجهاز (. 1 في الشكل رقم ) ما موضحنانوميتر وقدرت كمية حامض الكوجك باستخدام طريقة المنحى القياسي لهذا الحامض ووفق

من كل من عينات الذرة الصفراء وفستق الحقل وفق الطريقة الذي ذكرها 1Bجرى استخلاص سم الافلا : 1B تقدير سم الافلا Samarajeewa (1984 اذ جرى استخلاص سم الافلا .)1B ( ثم رسبت المواد 70%من المعاملات باستخدام الاسيتون المائي )

الايثر الكحولي ومن ثم استخلص ازيل الدهن باستعمال ها% خلات الرصاص ، بعد10غير الذائبة والبروتينات باستخدام محلول غم 250مل باستخدام الكلوروفورم ولمرتين اذ جمعت طبقة الكلوروفورم السفلية في دورق زجاجي سعة 250السم في قمع فصل سعة

وجمع الراشح 40رقم Whatmanالنحاس لقصر الوان العينة اذ رج الدورق جيدا ثم رشح من خلال ورقة ترشيح كربوناتيحوي باستخدام 1Bجرى فصل سم الافلا في مكان مظلم الى اليوم التالي مل ثم جففت طبقة الكلوروفورم تماما بتركها100بيكر سعة في

السليكا وتم الفصل بهلام ملم مطلية 0.25(. بسمك Thin Layer Chromatography( )TLCالرقيقة ) الطبقة الكروماتوكرافيسم شخصو TLC(. بعد ذلك جففت طبقة ال Jones ،1972) 3: 97وروفورم : ميثانول والتطوير باستخدام محلول تطوير كل

Page 5: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

237

جهاز باستخدامالامريكية وذلك تحت الاشعة فوق البنفسجية Veratox بالمقارنة مع السم القياسي مصدره شركة 1Bالافلا Chromato. Vue C.75 Uv/ Visible مصدره شركةUVP 1الامريكية . تم قشط بقع سم الافلاB واذابتها في الميثانول وتمت

362 اليابانية عند طول موجي Appleمصدره شركة Spectrophotometerبجهاز المطياف الضوئي الامتصاص القراءة (.Nisibitt ) 1965و Nabney نانوميتر وفق الطريقة التي ذكرها 420و

Aflatoxin Mg / 5 ml = 𝑫 .𝑴.𝟏𝟎𝟔

𝑬.𝟐𝟎𝟎.(𝟎.𝟓).𝑳

D نانوميتر 420القراءة على طول موجي -نانوميتر 362= الامتصاص لقراءة المطياف على طول موجي M 1= الوزن الجزئي للسم ويساوي لسم الافلاB 312

E 1= معامل امتصاص السم ولسم الافلاB =22000 L = ملم 10= سمك الخلية

:النتائج والمناقشة

:معدل درجات حرارة الخزن حصل ارتفاع في معدل درجات حرارة غرفة 20/5/2014 غايةول 20/2/2014من الذي بدأ خلال خزن الذرة الصفراء

م 29.5وارتفع خلال فترة الخزن الى 5م19.5الخزن أذ ان المعدل في الشهر الاول وصل الى النسب المئوية لرطوبة الذرة الصفراء المخزنة المعاملة بحامض الخليك :

( لم يلاحظ وجود 2) الشكل من حامض الخليك خلال خزن الذرة الصفراء لمدة ثلاثة أشهر وبوجود تراكيز مختلفةمما ( بين المعاملات وكذلك مع معاملة المقارنة رغم ان هناك فروقا حسابية بسيطة بين المعاملات P ≤ 0.05فروق معنوية )

لم تؤد الى تغيير معنوي 2014أيار / 20شباط ولغاية 20من اعتبارايعطي دلالة على ان درجات الحرارة خلال أشهر الخزن .الذرة الصفراء المخزنةكافة عينات في النسب المئوية للرطوبة في

الخليك بحامض المعاملة المخزنة الصفراء الذرة لرطوبة المئوية النسب -: 2رقم الشكل

Page 6: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

238

الرقم الهيدروجيني للذرة الصفراء المخزنة المعاملة بحامض الخليك :( في الرقم الهيدروجيني للذرة الصفراء بعد اضافة تراكيز ≥P 0.05معنوية ) افروق ( يتضح ان هناك3الشكل )من

6.7 )في هذا الرقم نسبة الى معاملة المقارنة وبداية الخزن انخفاضأذ حصل عدة من حامض الخليك خلال أشهر الخزن ، وهذا الرقم أنخفض بزيادة تركيز حامض الخليك المضاف ليصل ( المستعملة في الدراسة ء وهو الرقم الهيدروجيني للذرة الصفرا

بعد ثلاث أشهر 3.64الادنى % وخلال أشهر الخزن الثلاث أذ بلغ حده 5الى أدنى مستوياته وذلك عند اضافة الحامض بتركيز من الخزن وهذا يعد طبيعيا" أذ ان أضافة الحامض كان مؤثرا" في خفض الرقم الهيدروجيني للذرة الصفراء خاصة عند أضافته

ويؤثر A.flavusمما لاشك فيه فان هذا الانخفاض المعنوي في الرقم الهيدروجيني يعد مؤثرا في نمو الفطر % 5و 3بتركيز ( الذين أوضحوا ان حامض الخليك ثبط نمو وفعالية عدة 2012وأخرون ) Pelaesته على افراز السموم وكما أشار في قدر

الحامض . بتأثيروان خفض الرقم الهيدروجيني A.flavus سلالات للفطر

الخليك بحامض المعاملة المخزنة الصفراء للذرة الهيدروجيني الرقم: 3الشكل رقم

في الذرة الصفراء المعاملة بحامض الخليك : A.flavusالعدد الكلي للفطر

هو اليها حامض الخليك وكما ةفي الذرة الصفراء المخزنة والمضاف المتواجدة A.flavusحصل تباين في اعداد الفطر المعاملات التي اضيف اليها حامض الخليك ( حصل بين ≥P 0.05) ( والتباين المعنوي 4 شكلال)من وضح ماعداد الفطر تدرجت بالزيادة من ن أ ذ إمعاملة المقارنة وهذه الاخيرة كان الفرق المعنوي فيها واضحا بين مدد الخزن ، عينات و

10 × 59.4 اذ بلغ العدد من الخزن (أشهر 3) و.ت.م / غم ( لتصل حدها الاعلى بعد 4 10 ×1) بداية التجربة % 18.13 – 17.75 ما بينو.ت.م / غم وهذه الزيادة في اعداد الفطر بسبب وجود محتوى رطوبي ملائم للنمو تراوح 4

اضافة الى خلو المعاملات من حامض ( 3 شكل) ال 6.40 – 6.09 ما بين وصل الى( ورقم هيدروجيني مناسب 2 شكل) البين التراكيز المستخدمة في الدراسة A.flavusفي العدد الكلي للفطر تفاوت معنوي ودرجات حرارة ملائمة ، لم يلاحظ ايالخليك

1 التي اضيف فيها حامض الخليك وان نتائج الجدول أظهرت ان اضافة الحامض بتراكيز وكذلك في مدة خزن المعاملاتواضح الخليك تأثيراً الى تثبيط نمو الفطر بصورة تامة ولكافة اشهر الخزن . مما يعطي دلالة على ان لحامض ى% اد5 و 3و

Page 7: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

239

Sholbergوالمدد المستخدمة في الدراسة ومن الممكن ان يعزى ذلك وكما اشار باستخدام التراكيزفي منع نمو هذا الفطر الميكروبية ويؤثرفي الرقم الهيدروجيني فان له سمية تجاه الخلايا تأثيرهالى بالإضافة( الى ان لحامض الخليك 1998وأخرون )

. يض عبر هذه الاغشية المجهرية وبالتالي يعيق عملية نقل مواد الا للأحياءفي الاغشية الخلوية قاتل ومثبط لنمو معظم أنواع تأثير( الذين وجدوا ان حامض الخليك له 2000وأخرون ) Morsy ما ذكرههذه النتائج تتفق مع

منع انبات سبورات هذه الفطريات .الفطريات الشائعة والملوثة للمحاصيل الزراعية وخاصة الحبوب كما انه ي

(غم/ م.ت.و 4 01×1) الخليك بحامض المعاملة الصفراء للذرة A.flavus الكلي العدد: 4الشكل رقم

تركيز حامض الكوجك في الذرة الصفراء المخزنة المعاملة بحامض الخليك :

( في تركيز حامض الكوجك المنتج ≥P 0.05حصل تفاوت معنوي ) ( 5شكل ال)خلال خزن الذرة الصفراء وكما يوضح خاصة بين المعاملات التي اضيف فيها حامض الخليك ومعاملة المقارنة ، اذ ان الفطر انتج حامض A.flavusبواسطة الفطر

تركيز المنتج منه بعدئذ ليصل حده الاعلى وازداد غم /كغم بعد شهر من خزن الذرة في معاملة المقارنة 66.5الكوجك بتركيز ( مع توفر 3شكل غم / كغم ولعل نمو الفطر في هذه المعاملة وزيادة اعداده ) ال 72.3أشهر من الخزن اذ وصل الى 3بعد

يادة الى ز A.flavus( حفز الفطر ، على التوالي 4و 3و 2الاشكال ) ودرجة حرارة ملائم محتوى رطوبي ورقم هيدروجيني % 0.5 افراز حامض الكوجك مع تقدم مدة الخزن . حصل انخفاض معنوي عند معاملة الذرة الصفراء بحامض الخليك بتركيز

( عند اضافة حامض الخليك %100. ثبط انتاج الحامض تماما ) ولم يلاحظ في هذا التركيز فرق معنوي مع اطالة مدة الخزن التي وللأسباب A. flavusتأثير المثبط لحامض الخليك في ايقاف نمو وفعالية الفطر % وهذا يعود الى 5و 3و 1بتراكيز

متايضاتها وإفراز A.flavusجرى ذكرها عند مناقشة العدد الكلي للفطر أعلاه ، ان التثبيط العالي لحامض الخليك لنمو الفطر من أكثر المواد الحافظة والمضادة لمجموعة من الفطريات ( الذين وجدوا ان حامض الخليك يعد2010) Jainو Pundirأكدها

وغيرها. .Mucor spو A.flavusخاصة

Page 8: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

240

(كغم/غم) الخليك بحامض المعاملة المخزنة الصفراء للذرة الكوجك حامض تركيز: 5 الشكل رقم

في الذرة الصفراء المخزنة المعاملة بحامض الخليك : 1Bسم الافلا تركيز

معاملة ان يبين ( 6 شكل ال)الاغذية المخزنة ، ه فيعند نمو A.flavusتعد سموم الافلا احدى متايضات الفطر بسبب 1B( في تراكيز سم الافلا P≥ 0.05) % لم يحدث تغيير معنوي 5و 3و 1الذرة الصفراء بحامض الخليك بتراكيز

التراكيز اعلاه من حامض الخليك وهذه اختلفت معنويا عن المعاملة التي اضيفت بتأثيرهذا السم لإفراز( %100التثبيط التام )مايكرو غرام / كغم كما اختلفت 47.5-29.5بتراكيز تراوحت بين 1B% اذ انتج الفطر سم الافلا 0.5فيها الحامض بتركيز

بحدوده العليا 1Bوافراز سم الافلا A.flavus فطر معاملات اضافة حامض الخليك مع معاملة المقارنة التي حصلت فيها نمو للمايكرو غرام / كغم وقد يعود سبب ذلك الى عدم وجود الحامض المثبط لنمو الفطر وملائمة 246 - 151 ما بينتركيزه اذ تراوح

على التوالي ( . 4و 3و 2شكال م الافلا )الادرجات الحرارة والمحتوى الرطوبي والرقم الهيدروجيني لنمو الفطر وافراز سمو % لم يحدث فرق معنوي بين الاشهر الثلاث وهذا يخالف 0.5فيما يتعلق بإطالة مدة التخزين فانه عند اضافة الحامض بتركيز

معاملة المقارنة التي تفاوتت فيها تركيز السم بآطاله مدة خزن الذرة الصفراء ومن الممكن ان يعزى هذا الى التأثير الفاعل لحامض خفض% او 1زيد عن ز تبتراكيخاصة عند اضافة الحامض 1Bوافراز سم الافلا الخليك في احداث تثبيط تام لنمو الفطر

الافلا وافراز سموم A.flavus% . ان لهذا الحامض تأثير مثبط لنمو الفطر 0.5وافراز هذا السم عند اضافته بتركيز نمو الوان نسب التثبيط لاحظوا ان لحامض الخليك تأثير مثبط لإفراز سموم الافلا الذين ( 2009) وأخرون Shekhar وجد وكما

% وذلك بحسب التراكيز المضافة من الحامض .68زاد عن

Page 9: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

241

كغم/مايكروغرام) الخليك بحامض المعاملة المخزنة الصفراء للذرة 1Bالافلا تركيز : 6 الشكل رقم

:المصادر

في حبوب الذرة الصفراء في سورية ، كلية العلوم ، المفرزة لها( . دراسة الافلاتوكسينات والفطريات 2004الطحلي ، عبد الواحد ) سورية. –جامعة دمشق

A.O.A.C. (1980). Official methods of analysis. 13th ed. Association of analytical chemists,

Washington, D.C.USA

Ana Paula, D.R.; A.S.Carvalho; A.S.Santos; C.A.Alves; J.L.M.Nascimento and E.O.Silval (2011).

Kojic acid, asecondary metabolite from Aspergillus sp. Acts as an inducer of macrophage

activation. Cell Biol. Int. 35: 335-343.

Bennet, J.W. and Klich, M. (2003). Mycotoxins. Clinical Microbiology Reviews. 16: 479-516.

Bently, R.(1957). Preparation and analysis of kojic acid. Methods Enzymol. 3: 238241.

Blumenthal, C.Z. (2004). Production of toxic metabolites in Aspergillus niger, Aspergillus

oryzae and Trichoderma reesei: justification of mycotoxin testing in food grade enzyme

preparation derived from the three fungi. Regulat. Toxicol and Pharmacol., 39: 214-228.

Chang, T. (2009). An updated review of tyrosinase inhibitors. Int. J. Mole. Scien. 10(6) :2440-

2475.

Harrigan, F.; M.C.Cance and E.Margaret (1976). Laboratory Methods in food and dairy

microbiology. Academic press. London. U. K.

Higgins and Brinkhaus , (1999). Efficacy of several organic acid against molds. J. Applied Poultry.

Res. 8, 480-487.

Jones, B.D. (1972). Methods of aflatoxin analysis, Tropical products insititute, Report G 70 London

P. 58,

Klick ,M.A. and J.I. Pitt (1988). The theory and practice of distinguishing species of the

Aspergillus flavus group. Plenum Press, New York. : 211-220.

Lugaukas , A.; A. Railiene and V . Raudoniene (2006) . Toxic micromycetes in raw material during

its processing , Ann. Agric. Environ . Med . 13 : 147 – 161.

Lanyasunya, T. P.; L. W. Wamae; H. H. Musa; O. Olowofeso and I. K. Lokwaleput (2005).

The risk of mycotoxins contamination of dairy feed and milk on small holder dairy farms

in kenya, Pakistsn J. of Nutrition. 4 (3) :162-169.

Page 10: Inhibitory Effect of Acetic Acid on Aspergillus flavus

Tikrit Journal for Agricultural Sciences Vol. ( 18 ) No.( 2 ) – 2018

ISSN-1813-1646

242

Mc Williams, M.(2005). Experimental Food Laboratory Manual for Foods: experimental perspective.

prentic. Hall. USA . Mirocha, C. J.; S. V. Pathre and C. M. Christensen (1980). Mycotoxins, Advance in Cereal Science

and Technology. 3:159-225.

Morsy, A.A.; F.Abd-EL-Kareem and M.A.Abd-Alla (2000). Effect of acetic acid fumigation on

common storage fungi of some grains. Egypt. J. Phytopathol., 28: 95-106.

Moto, M.; Mori, T.; Okamura, M.; Kashida, Y. and K. Mitsumori (2006). Absence of liver tumor-

initiating activity of kojic acid in mice. Arch. Toxicol. J. 80 : 299-304.

Moubashar, H.; S. I. Abdal-Hafez ; F.T. EL-Hissy and S. K. Hassan (1980). Effect of temperature

and moisture content on Egyption peanut seed – borne fungi. Mycopath., 70 : 49-54.

Nabney. J. and B. F. Nesbitt (1965). A spectrophotometeric method for determining the aflatoxin.

Analyst, 90: 155-160.

Pelaez, A.M.L.; C.A.S.Catano; E.A.Yepes; R.R.Villarroel; G.L.Antoni and L.Giannuzi (2012).

Inhibitory activity of lactic and acetic acid on Aspergillus flavus growth for food

preservation. Food Control, 24(1-2): 177-183.

Petchkongkaew, A. (2008). Reduction of mycotoxin contamination level duting soybean

fermentation. ph. D. thesis Food Techno. Univ. , pp 212. Thailand.

Pitt, J. I. and A. D. Hocking ( 1985 ). Fungi and Food spoilage springer.

Pundir, R.K. and P. Jain (2010). Screening for antifungal activity of commercially available

chemical food preservatives. Intern. J. Pharmac. Sci. Rev. and Res., 5 (2): 25-27.

Samarajeewa, V. (1984). Aflatoxin contamination in peanuts. J. of Nation. Agric. Sci. of Ceylon

21: 21-30.

SAS Version Statistical Analysis System (2007). SAS Institute Inc. Cary NC.

Shanum, S.A.; T. Yagoob ; S. Sadal ; M. Hussain ; M. Jabber ; H. N. of varion feed stuffs for live stock production using in vitro gas method . Pakistan Vet.

J. , 27 (3) : 129-133 . Shekhar, M.; S. Singh; A. A. A. Khan and S. Kumar (2009). Efficacy of inorganic salts and

organic acid against colony growth of Aspergillus flavus and their use to control aflatoxin level

in post harvest maize. Intern. J. Food Safety , 11 : 4-10.

Sholberg, P. L.; P. J. Delaguis and A. L. Moyls (1998). Use of acetic acid fumigation to reduce

the potential for decay in harvest crops. Recent. Res. Devel. in plant Pathol. , 2 : 31 – 41.

Suleiman, M.N. and A.Taiga (2009). Efficacy of aqueous extracts of neem and sharf for the control

of fungi associated with mild and unmilled stored rice grains. In 5th proceeding of the

Humboldt kellog Annual. Agric. Conference, pp: 71-73.