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7/28/2019 KSSHBC_2010_v43n5_437

http://slidepdf.com/reader/full/ksshbc2010v43n5437 1/8

한 한 한 , 43(5), 437-444, 2010Kor J Fish Aquat Sci 43(5), 437-444

한한 한한한한 Nannochloropsis oculata 한한한한한한한 ACE, α-glucosidase 한 한한한 한한

한한

한한한한한한한한한한한한한한한한한한한1한 Tatsuya Oda

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1

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2 한한한한한한 수 수 수 수한 한 한 한

ACE, α-Glucosidase and Cancer Cell GrowthInhibitory Activities of Extracts and Fractions

from Marine Microalgae, Nannochloropsis oculata

Seon-Heui Cha, Min-Joo Kim, Hye-Young Yang, Chang-Beum Jin,You-Jin Jeon1, Tatsuya Oda2 and Daekyung Kim*

Marine Bio Research Team, Korea Basic Science Institute (KBSI), Jeju 690-140, Korea1School of Marine Biomedical Sciences, Jeju National University, Jeju 690-756, Korea

2 Division of Biochemistry, Faculty of fisheries, Nagasaki University, Nagasaki 852-8521, Japan

Extracts of the marine microalgae Nannochloropsis oculata were obtained using 80% methanol (MeOH)and water. The 80% MeOH extract was further fractionated with n-hexane, chloroform, ethyl acetate(EtOAc), n-butanol (n-BuOH), and water to isolate the active fraction. Seven samples were prepared andtheir angiotensin

converting enzyme (ACE), α-glucosidase, and cancer cell growth inhibitory activities in vitro weredetermined.

The most profound ACE inhibitory activity was observed in the chloroform fraction, while the others hadmoderate effects. By contrast, greater α-glucosidase inhibitory activity was found in the EtOAc fraction,n-hexane fraction, and water extract of N. oculata. The antiproliferative effects of the extracts and fractionsagainst HL-60, U937, CT-26, and SK-Hep1 cancer cells were also determined. The n-BuOH fraction hadthe strongest antiproliferative effects on CT-26 cells in a time-dependant manner ( P <0.05). These resultssuggest that the extracts and fractions from N. oculata could be used as a potential functional food or as pharmaceutical ingredients.

Key words: Microalgae, Nannochloropsis oculata , Angiotensin converting enzyme (ACE), α-glucosidase, Cancer

Pendahuluan한한해해 한 한·수 한한한한수 한한한 한한한한 한한한 한한 한한 한한한 한한한 한한한 한한

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한한한한 한 한한한한한 한한한 수 한한한 한한수 15∼20%

한 한한한 한한한한, 한한한, 해해해한 한 해해한 한 한한한

한한 수 한한한한 한한한한. 한한 한한한한 한한한 한한한한 해해해한 한한한 수 수 수 한 한한한한 한한한한 한한수 한한한 수 한 해해한 한한 한한한 수 한수한 한한 한한한한한 한한한해해 해 해 해 해 수 수 한한 한한 한한한 한한한한 해 해 해 해 해 해 (Frohlich, 1982).

한한한 한한한 한한한한 angiotensin 한한 한수 (angiotensin convertingenzyme, ACE)한 한한 한한 protease 한한한 한한해 해 해해해한한 해해한 한한 (Miyoshi et al., 1991). AngiotensinⅠ 한 10 수 수 해해해

해 해해해 해해해해 해해해해해해 angiotensinogen 한 renin한해 해 해 해해 해 해 해해 해, 한한한 ACE한 한한한 C한한 수 dipeptide(His-Leu)한 해해해수 8한한 한 한 한 수한 한 수 한한한 한한 해해 한한한angiotensin Ⅱ 해해해해해 (Curtiss et al., 1978; Dzau, 2001). 한수수 한한한 angiotensin Ⅱ한 한한 해해해 해해해해해 해해해 해해해한, 해해해해해해해 aldesterone 해 해해해 해해해해 수 수 수 sodium 한 해해해 해해해해 해해해해해 한한한 한한. 한한

ACE 한 한한 한한, 해해 한한한 한한 해해 한한한 해해✽Corresponding author: d ki m @ k b s i.re .k r bradykinin한 수한한한 한한한한수한한한한 한한한한한 한한

437

mailto:[email protected]



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438 한한한한한한한한한한한한한한한한해해해한Tatsuya Oda한한한한

한 해해해해해 한한한 한한 (Cushman and Cheung, 1971;

Sealey and Larahg, 1990). 한한 한한 한한한 한한한한 ACE수

한한한한 한한한한한한 한한한한한 한한한 해해한 한한 ACE

한한수 수 한 alacepril, benazepril, captopril, cilazapril, enalapril,

fosinopril, lisinopril, moexipril, perindopril, quinapril,

ramipril,

tandolapril 한 zofenopril 한한 한한한한 한한 한한한 해해해 한 한 (Kato

and Suzuko, 1971; Atkinson and Rovertson, 1979,

Sawayama et al., 1990). 한한한 한한 한한 한한 한한 해해해수

한 한한한, 한한 한한 한 한수 한수 한수 수한한한 한한한해 해해해 (Ondetti,

1977) 한한 한 한한 한한한 해해해해해해

ACE 한한한한 한한 한 한한 한한한 해해해해 한한.

한한, ACE한 한한한 한한한수 수 수 한 수 한수 수 한한한한 한한한수 수 수 한한 한한 한수

수 수 한수수 수 한 captopril 한수

한한한 한한한 해해해해해해해해한한한, 한한 한한 한한

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한한한 해해해한 한한. 해해해한 한한한한 한한 한 해해한 수

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한한한한 한한 한한해해한, 한한한수한 한한수

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한. 한한 한한수수 수한한 한한한한, 한수

한한 한한수수 한한 한한수 한한수 한 한한 한한한 한한 한한한

해해해한 한한 한한한 한한한한한 한한한한 한한한, 한한 한 수 한한 수 한한한 수 수 한 한 한

한한 한한한수 한한수 수 한한

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한한 한한 한한 한한 한한한 한한해해한 한한한 한한한한한 한한수 한 한한한, 한한한수 한

한 해해한해해수수 ACE 한한수

한한 한한 한한한 한한한 한한 해해해해해 한한한한 한한

한 한한한 한한한 Nannochloropsis oculata한 한한 한한한 한한 한한한한.

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해해해해, 한한한, 해해해해해, 해해해해 한 한한 해해해해해해

해해 한한 해해해해해해해해한한 한한한한 해해해한

10%한 한 한한한 한한 한한한, 한 한한한 한한 해해한 한한한

한 한한 한한한한 (Woo et al., 1998; Choi et al., 2008; DeFronzo,

1992). 한 수 한한 한한 한한한한 한한수 한 α-glucosidase 한한 한한 한한 해해해

brush border 한 한한한한 한한 해해해해

해해해해 한 maltose, sucrose, glucoamylase 한 해해 α-glucosidase수 한수 한한한 한한한한한한 한한수한 한한수 한 수한수 한 한한한 한한한한, 한

한 한한한 한한한수한 한해해한

한 한한한 한한수수 한한 (Del Prato et al., 2007; Van de Laar et al.,

2009). 한한 α-glucosidase 한한한한한 acarbose,

voglibose 한한 한한한한 한한 한한수 한 한한한, 한한한 한수

수한 한한한한한 해해해한, 한한 한수 한한 한한한 한한 수 한 한한 한한한한 한한 한한한 해해

수 한한 (Tsujimoto et al.,

2008).

한 한, 해해해해 한한 해해해해 한한한 한한 해해해해해한한한 한한한 한·

한한한수 한한한한 한한한한 한한한 한한수

한 한한 해해해해해 한한한한 한한.

한한, doxorubicin한 paclitaxel (taxol) 한한 한한한한 수한한 한한 수한 한수 수

한한한 수한 한한한 한수 한한한 수한 한한 한 한 한한 수 한한수 한한한한 한한한 수한한한. 한수

한 수수

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한한한한 한한 한한한한. 해해해 해해해해 해해해해해해

(algae)한 한한 한수 수 한 한한한 수 한한한수 한한한 한해해한 한 해해해해한한. 한한,

해해해해해 해해해해해해해해해,

한 한한한한한한 한한한한 한한한한수 수 한한수 한 수 한한한,

한 수수한 한한 한한 해해해 한한 한한 한한한, 해해해해해 해해해해해해

1해해해해해해 한 한 한 한 한 해해한한 (Choi

et al., 2000). 한한한수수 한한한 한한한 한한 한한한 한한 한한 한한 한 한한한한한한수

한한한 한한한 한한한한 한한, 한한

한한한 해해, 수 한 한수 수 수 , 수 한한 수 수 한한한 한 한한한

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한한한수 수 한한한한한한한 한한한한한 해해해한한한 한 한한 한한 한한한한한 한한해해해해한 해해해해한 한한. 한

해해해해해 해해해 해해해 50% 한한한한 해해 한한, γ

-linolenic acid (GLA), phycocyanin, myxoxanthophyll,zeaxanthin 한 한한한한한 해해해해 한한한 해해 해해해해 한수 한한한한한한 해해해한 한한. 한한 한수 한한한 한한한 한 한한한 한한한한 한한한한한한 한한수 한한한 수 한한 한한 한한 한한.

한한한한 한한해 해해해 해해 한한한한 한한해해수 한한 한한 한한한 한한한한 한한 . 한 해 해 해 해 해 한 docosahexaenoic acid (DHA),eicosapentaenoic acid (EPA)한 한한 해해해해해한 한한한 (long-chain polyunsaturated fatty acids, LCPUFAs) 해 해해해 한한 한한. 한수 EPA한 20해해해해해 5해해2 수 한한 (20:5)한 한한 LCPUFA한한. 한수 한한한 Nannochloropsis, Nitzschia, Navicula, Porphyridium 한한EPA한 해해해한 한한 한 한한한 해해해 한한. EPA 수 한한한한 해해해해한

한한 한한한 한 한한한, EPA한 한한한 한수수 한한한한 한한한한 한 한 .

한한한 한한 한한한 한한한수 수 수 한한한 한한수 수 한 한한 한한한 한한한한 한한한, 한한한한한한 한 한 한 한 해해한 한 한한한 한한한 toxin수 한한 한 해해해 한한한 한

한 해해해해해해해한한.한 한한한한한 한 한한한한한 한한한 한한한 한한 한 한한 수한 한한한 한한한한 한수한한 한한

한한한수한 Nannochloropsis oculata한 한수 한한한한 수한한한 한한 한한 한한한 한한

한한

한 해해해해해.

한한 한 한한

한한

한한한한한 한한한 Dulbecco's Modified Eagle's Medium

(DMEM), Fetal bovine serum (FBS), penicillin-streptomycin 한

Trypsin-EDTA한 Gibco/BRL (Gaitherburg, MD, USA)한한 한한 한

수한. Bovine serum albumin (BSA), 3-(4,5-dimethylthiazol-

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Nannochloropsis oculata한 한한한한 439

2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), α-

glucosidase, p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside, DMSO

(dimethyl sulfoxide)

한 한 한한한 한한수 한한한수 한한한 Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO,

USA) 해해해해해해해. 한 한 한한한 한한한한

해해해해 해해해해해.

f /2-Si 한한한 한한 한 해해

한한 한한 1 L한 NaNO3 (75 mg), NaH2PO4한H2O (5 mg),

FeCl3한6H2O (3.15 mg), Na2한EDTA한2H2O (4.36 mg),

MnCl2한

4H2O (0.18 mg), CoCl2한6H2O (0.01 mg), CuSO4한5H2O (9.8

μg),

Na2MoO4한2H2O (6.3 μg), ZnSO4한7H2O (22 μg), B12 (0.5

μg),

biotin (0.5 μg), thiamine HCl (0.1 mg)한 한해해한 한한한한 한 한,

pH 8한 해해해한 121℃해해15 한한 해해해해한한한해해해해해 .

해해

f/2-Si 한한한 26℃, 60% 한한한 한한수 한수 , 한한한한 (50

μmol/m2/s) 한한 12한한 한한한한한한 해해해해해. 한 한, 해 해해해 한

한 해해해해f/2-Si한한 100 mL, 500 mL 한한한

한한 해해해해해.

한한 한 한한

한수 수 (3 L)한 한한한한 한한수 한 4℃, 4,500 rpm한수 30한

한 한한한한 한 한한. 한 3한 한한수 한 한 한수 한 해해수 한 한한 한 한한 수 한 한해해한 5

한수한 해해해한 한한한한 한한 30한

한 한한한 한한 한, 한한 해해해한 한한 한 한한수 한한. 한한한 한한 한한한 4한수한 80%

methanol (MeOH)한 한한수 한 한한

한 한 해해해해한한 해해해해 한 한 한 한 한 (rotary vacuum

evaporator, N-1000, EYELA, Japan)한 40℃한수 한수 한한수 한

한한 해해해해해. 한한한 MeOH 해해해해10 해해해 80%

MeOH한 해해한 n-hexane한 한한수 한 해해해해한한 n-hexane

한 80% MeOH 한한한 한수수 한한. 80% MeOH 한한 한한한해해한

chloroform한 한 한 한 한 해해 해해해해 해해해해해해

chloroform한 한 한 한한 한해해해한. 한 한 EtOAC 한 n-BuOH

한 한한한한한 한한 한한수 한한한한 한한수 한 한한 한한한 한 한한 해해해해해. 한

한한 해해해해 한한 80% MeOH,

n-hexane, chloroform, EtOAC, n-BuOH 한 한한 해해해한 수 해해해해

한 한 한 해해해해해 (Fig. 1).

ACE 한한 한한 한한

ACE 한한한한 한수 한한한 Cushman and Cheung (1971)한

한한한 한한 해해해해 해해해hippuryl-L-histidyl-L-leucine

(Hip-His-Leu)한 ACE한 해해해한 한한한 hippuric acid한 한수 수 한 한한한 한

한한 한 한. 해해한수한 300 mM NaCl (pH 8.35)

한 해해수 100 mM sodium borate buffer 한 5 mM Hip-His-Leu 한 한

한수 한한한한, 한한한 한한 한한80 μL한 한한수 한 37℃한

수 3한한 한해해수 한 ACE (100 mU/mL)한 20 μL한한 30한

한한 한 한 한 한 한 해해해. 한 한 한 한 한 한한 한 한 한 한 한한해해해한한 1 M

HCl 250 μL한 한해해해해한한한 한 한. 한한

Fig. 1. The scheme for solvent fraction of Nannochloropsis oculata.

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440 한한한한한한한한한한한한한한한한한한한한Tatsuya Oda한한한한

한한 한 hippuric acid 해해해해해 한한 1.7 mL ethyl acetate

(EtOAc)한 한한 한 한한 한한한한, 한한 한한수 한 한한 한한 (800 × g, 15한)수

한 해 해 해1 mL 한 microtube 한 한한한 한 40해해한 한 한 한 한 한

(VS802, Vision, Korea)한수 EtOAc한

한한 한한한 한 한한 1 mL 한 한 한 한 해해해한 한 한한 한. 한한

수 ACE 한한한한한 해해해한 228 nm한수 한한한한 해해해해,

한 한 한한 3한 한한 해해수 한한한 한 해해해한 해해해한 한한 한 한 한.

Alpha-glucosidase 한한한한 한한

Alpha-glucosidase 한한 한한한 Watanabe et al. (1997)한 한

한한 해해해해해해 , 한한한 한해해해 한 한한한 α-glucosidase

한 해해해해해, 해해해 p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside한

한한한 한 한. Alpha-glucosidase 한 0.2% BSA 한 0.02% NaN3한

해해해 100 mM phosphate buffer (pH 7.0)한 0.7 μg/mL한 한

해해해해해 한한 해해해해해해해해해 , p-nitrophenyl-α

-D-glucopyranoside 한 100 mM phosphate buffer (pH 7.0) 한 5

mM한 한한 한한수 한수 한한한한 한한 수 한한. DMSO한 한수

sample한 microplate 한 10 μL한 한해해해, 해해해해 한 DMSO

한 10 μL한 한한수 한한. Sample 한 한해해microplate한 한해 해해해 50

μL한 한한 한한 한한 한한, 5 한 한한 해해해해

한한한한 한한 microplate reader (Packard spectrocountTM

,

Meriden, CT, Austria) 한 405 nm한수 한한한한 한수 수 한한.

한한 한한 한수 한수 한 50 μL한 해해해한 5 한 한한 해해 한수 한한한한 한한 405 nm

한수 한한한한 한수 한한한. 한수 한한

한 한한한한한한한 한한한한한 한한 한한한한 한해해한한.

한 한 한한 3한 한한 해해수 한한한 한 해해해한 해해해 한 한한 한 한.

한 SPSS (SPSS Inc., Version 12.0) 한해해해한 한한수 한 한해해해해해해

한, 한 해해해해해 해해해해해 한한한한 P <0.05

해해한수 analysis of variance 한 Duncan's multiple range test 한 한한 한

한 한 한 한.

한한 한 한한

한해해한 한한한 한 ACE 한한 한한

해해한한 한한한한한한 한한수 한 한 한한 한수 한 15∼20%

한 해해한 해해해해, 한한한, 한한한한 한 한한 한한 한한한 한한 수 해해해한 한한한한 .

한한 한 한해해수한한 해해해한 한 한 한 한 한한한 한한한한 한 한 한 한 해해해 한 수

한한 한수 한

한한 한한한 해해해 한 한 한 한 한 한한한한한 해해해 해해

한한한한 해해해해해해 해해해해해해해해해해해한 한.

한 한한한수 한 한수 한한한한 N. oculata 한한수 한 한수 한 한 한한한한 ACE 한한

한한한 한한수 한 한 한한 , chloroform

해해해한 한한한한한 한한 한 한 한. 한 Hip-His-Leu한 해해 해해해해해 invitro해해해ACE 한 한 한 한 한 한 한 한한 한 , N.

oculata chloroform 해해해500 μg/mL 한 해해해해해해 한

60% 해해 해해해해 해해해해해. 한한 한한한 해해해해

n-hexane, chloroform, ethyl acetate (EtOAc) 한 n-buthanol

(n-BuOH) 한 한한한한한 한한 해해수 한 한한 n-hexane 해해 한 한 500 μg/mL한

한수 한한한수 한 40% 한 한한한한 한한한한 한 한한한한한한, 한한한 해해해한 한 한 수 한한

한수 한 30%,

한한한 수 한해해한 25%한 한한한한 한한 한한한 수한 한 한한

한, 한 한한 EtOAC 해해수 , n-BuOH 해해수 한 한한 수 한한

20% 해해해해해해한한 한한한한 한 한 한 한 한(Fig. 2).

한한 한수

한한한 DMEM 한한한 10% FBS, 100 units/ml penicillin 한

100 μg streptomycin한 한한수 한한 한수 수 한 한해해한 37℃

한한수 CO2 incubator (5% CO2)한수 한수 수 한한. 한한한 한수

한한한 80% 수 한 한한 phosphate-buffered saline (PBS, pH 7.4)

한한 한한한 한한한 한한한 한 0.25% trypsin-2.65 mM EDTA 한 한한수 한 한한

해해해해해 한 한 한2 해해해해해해해해.

한한 한한 한한

한한한한 해해해 한 해해해해HL60, U937, CT-26 한

SK-Hep1 한한한 한한한 한수 한 한한한 한수 수 한한한 한한한

10% FBS한 한한한한 한한 해해해한 1×105

cells/well한 한한한

96 well plate 한 해해해해해. 16 한 한 한 한 한 한 1% FBS 한 한수한한 한한

한한한 한수수 한 수한한 한한한한 한한 한한한

한 해해해 해해해해 해 한 한한한한 한한수 해해해해(500

μg/mL)한 해해해해0, 1, 2, 3한한한 해해해 해 MTT assay

한한 (Denizot and Lang, 1986) 한 한한수 한 한한한한 한한한한 한수 수 한한. 한 한한

한 3한 한한 한수 수 한한한 한 한한해해 해해해해 해해해해.

한한 한한

한한 한수 한수한 mean±SD 한한 한한한 한한. 해해한한한

Fig. 2. Angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitoryactivity of Nannochloropsis oculata extracts and fractions.

The results are presented as means±S.D. of threeindependentexperiments.

a,b,cValues having different superscripts are

significantly different at P <0.05.

수 한한한한 한 해해해 한 한한 한 한수 해해해 한 한수 한한한 한한한한 한한한 한한 한한수 한 한한한 한 한 10%한한한 한한 한한한한 한한 한한수 한수 한 한. Cha etal. (2006)한 한한한한 한한 한한 한한한 19한, 한한한 10한, 한한한26한한 해해 해해해해 한 한 한 해해해 한 한 해해해해 해해

한한한한 ( Myagropsis myagroides), 한한 (Shige sinicola), 한한한한

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( Petrospongium rugosum), 한 ( Hizikia fusiforme), 한한한

(Undaria pinnatifida), 해해해( Laminaria ochotensis) 해해해해

해해한 한 한 한한한, 해해해해해해 한한한 ( Enteromopha linza), 한

한한한 ( E. compressa) 한한, 해해해해해해 한한한

( Lithophyllum okamurai), 해해한한한 (Gracilaria textorii), 수

한 한 ( Ahnfeltiopsis flabelliformis), 해해해해해 ( Lomentaria

catenata), 해해해해해 ( Laurencia okamurae), 해해해해해

(Grateloupia lanceolate), 한한한한 (Gracilaria verrucosa) 한한

수 수한수 한한수 한 한한한 한한한. Athukoral and Jeon (2005)

한 해해 ( E. cava), 한 ( Ishige okamurai), 한 한 한 (Sargassum

fulvellum), 한한한한한한한한한 (S. horneri), 한한한한한 (S.

coreanum), 해해해 (S. thunbergii) 한 한한한 (Scytosiphon

lomentaria) 한 7한한 한한한 한 한한 한한해해해한 한한수한

한한한 해해해해해, 한 7 해해해해해해해해해해해 해해해

한한수한 한한한 한수수 한한한 한 한 한수 한한 한해해한 한한 한한한해해해한 한한한 한

한 한 한 한. 한한수 한 한 한 한한 한

한한한 수한수 한한수한 한 한 한 한수 한한한 수 수한한한한한

한한수 한 한 한한한 한한한한 한수 수한한 한해 해 해 한한.

해해한 한수 한수 한한 수 수 해해해 한 AEC 한한 한한 수 한 한 해해한한한 한한

한한한 해해해해한한한, 한 한 한 해해

한한한한한 한 한 한 한 한 한. 해해 한한 한한 한 한 한 한한한,

한한한 한 해해해한 해해해해수 한한한수 한한한수 한한 ACE

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ACE 한한수 수 한 한수 한한한 해해해한 한한 해해해해한 한한 한 한. 해해한한

수 한 한한 한

해해수 한 한수 ACE 한한 한한한 한수 한 한한 한한한 한한한

해해해해. N. oculata한 한한한

ACE한한 한 한 한 한 한한

chloroform한n-hexane 해해해해해해해해한한한 한한한한 한 한 해해수 해해 한 한

한한한 한한한한한 한한 수 한한 한한한

한한한 한 한 한 한 .

한한수 한 한한수 한 α-glucosidase 한한 한한

한 한 한 수 한한 한수 한한 한 α-glucosidase한 수 한한한 한 수 한 한한한 한한한

한한 해해해, 해해해한 해해한 해해해한

한한 한한 해해해해 해해해해해한한한 한한한 한 해해해해해해해 한 한

한 한. 해해해α-glucosidase 한한한한 한한한

brush border 한 한한수 한 해해한 한한한한한 한한한한한 한한

수 한 한한수 한한한수 한한 한 해해해해, 한한 수 수 한 한한해 해해, 한 한 한 한

한한한 한한 한 한 해해해해해 수 수 한 한 한

한한 한한한 한한한 한한 한 한 한 . 해해해해 α-glucosidase한

한한한한 acarbose 한 voglibose 한한 한한 한한 한 한. 한한 α

-glucosidase 한한한해해한한 한한한 한수 한 한한, 한한한한 한 해해해해한한 한 한

한한 해해해해해해 한한 해해해해

한한 한한 한수수 한 한, 해해 한 한한, 한한한한 한한한수 한해해해해해 한한한 한

한 한한 해해해 한 한 한 한 한.

한한 한한수 한 한 한한한수 한수 한한한한 N. oculata 한한

수 한 한 수 수 한 한한한한 α-glucosidase 한한 한 한한 한 한수 한 한 한 한 ,

EtOAc 해해해해 한한한한한 한한 한한 α

-glucosidase 한 한 한 한 한 한 한 한 한 한. 한 p-nitrophenyl-α

-D-glucopyranoside 한 해해해 해해해해 in vitro 해해해α

-glucosidase 한한한한 한한한한 한 한 , N. oculata EtOAc 한수 수 500

μg/mL한 해해한한한수 한 63% 한한 한한한한 수한한 한한. 수 한 한한한한한한한 n-

hexane, chloroform, EtOAc 한

n-BuOH 해해해해해해해해해해해해해해 n-hexane 해해해

한 수 한수 수 한 500 μg/mL한 한한 55% 한 48% 한 한한한한 한한한한한 한한한한한한,

한한한한한수 한 한한수 한한한수

40%, 한한한 n-BuOH 해해해한 한한 한한한 20% 해해해

해해해 해해한한한한 한한 한 한 한(Fig. 3).

Fig. 3. Alpha-glucosidase inhibitory activity of Nanno- chloropsis oculata extracts and fractions. Theresults are presented as means±S.D. of three independentexperiments.a,b,c

Values having different superscripts are significantlydifferent at P <0.05.

한수한한한한한한 한한한 한한한한 한한해 해한한한 수 한 한 한해해한한한 한한한 한한한해해한한한 한한한, 한한 한한 한 한한 한한 한한한 해해해해 한한한, 한한, 한

한한 한 한, 해해, 한한 한한 한한 해해 한 한 한 해해해 한한한 한 한 한 한 한해해한 한 한한한 한한한한 해해해해해 한한 해해해해 한한 한한 한한 한 한 한 한. 한 한한 한한한한 한 한한한수 한수 해해 한 한한수 한한수 한 한한한한 수 한한 한한 수 수 한한한해해해한한한 해해해 해해해해.

한한 한한한 한 한한한, 한 한 , 한수한한한 한 해해해한 한한 한수수 한한한한 한한한한한한 한한한한. 한한 한한한한수 한 aldose reductase한 해해해해해해해 한한한한한한한한 Lee et al. (2004)한 한한 한한한한 한 한한한 한한 해해해한 한한 수 in vivo 한한한한한 한한 한한한 한 한수 한한해해해한 한한한 한 한한한한 한 한. 한

수 , 한한한한 한한한한 해해해해 한한 한한한한 해해 수 한 한한한한 수 한 한한해해한한한 한 한한 한 한한한 한한 한한한 한한한, 해해, 해해해, 해해, 한

해해 해해 한 한한 한한 한한한 해해해해한한한한 한한한 한한 해해, 해해한한 한한한 한한수 한 해해해한 한한한 한한 한한 한한 한한 해해해해해해 . 한한한한한 한한 한한한 해해한 해 해해 한한한 한한 해해해해해해 해해해해한 한한 . 한 한 한 한 한 한 한수 한 N. oculata 한 수한한 α-glucosidase한한한한 한한 한한한한 한한 EtOAc 한수 수 한 한한수 한 한한한 한한한 한 한 EtOAc 한수 수 한수한 한한한한 한한한한한 한한 수 한한 한한한 한한한 한 한 한 한 .

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442 한한한한한한한한한한한한한한한한한한한한Tatsuya Oda한한한한

Fig. 4. Antiproliferative effect of Nannochloropsis oculata extracts and fraction on HL-60, U937, CT-26 and SK-Hep1

cell lines. The results are presented as means±S.D. of three independent experiments.

한한수 한 한한수 한 한한한한 한한 해해 한한

한한한한 한한수 한한한한 한한수한한 한한한한 한한 한한 수 한 한한한수 한한 한한 한한(Matsuda et al., 2010)한 한수 한 한 한한한 한한 (Qwak et al., 2006)해해한해해한 해해해한한 한 한. 수한 한한 한한한한 해해수 한한 한한수 한수 한한 수 한 한 한한수한 한한한 한한해해 한 한해해한 한수 한한한한 수 한 한한한수 한한 해해해한 한한한 한한한한, 해해한 한한한 한 한한한 한한수 수 한한한한 한수 수 한한 해해한 한한한해해 한 한.한수 한한 한한 한한 한수 한한한한 한한 한한수 한한 한한한한수 수 한한 한해해한 한한한 수한수 한한 한한한한 한한한수 한한한 한한한한 한한. 한한 해해해, 한한수 한한한 한해 해 한한한 수 수 한 수한한 한 한한한 수한한 한한한 한수 한한 한한 한한 한수 한한 한한한한 한한수 한한한 한한한수 한한 한한한 한한한 한수 한 한한한수 한해해한수 한한 한한 한한한, 한한수 수 한해해한한한한수한 한한 한 한 한한 한한한 한한 한한 한한수 한 한한수 한수 수 한 한한한 한한수 한수 한한 한한 수 한 한한 해해한한 (Reddy et al., 2003; Doll and Peto,1981; Sharma et al., 1994). 한한 한수 한수 한한 한수수 해해 한한한수 한한한 한한한 한수 한한수 한한한 한한한 한한한한 한한한 (Schwartsmann et al., 2001) 한한, 한한한한 한한한 해해 한수 수

한한한 한 한한한한한 한수한한 해해해 한 한 한한 해해 수 한한 한한 한 한 한 한 한 한

한 한한한 한한한한 한 한. 한한한한한 한 한한한한 carotinoids한 한수수 한 (Krinsky,

1991) 수한 한한한

한 한 한 한한한한 mycosporine-glycine 한 한 한 한 한 한한한

(Dunlap and Yamamoto, 1995), 한한한 수수 , 한한한 수 수 한한 한한수 한 한한.

해해한 한수한 수한한한수한한한수, 한한한

한 한한 phytochemicals한 한한한한한 한 한 한한한 한한한

한한한 해해해, 한한 한한한 해해 해해해 해해해해 한한한 한한 한한한

해해해해해해해 한한 한 한한 한한 한한한한

nitrosoamine 한한한 한한한한 한한한수 한한한 한 한한 한한한

수 한 한 한 한 한 한 한 한 한 한 한해해해해해 해해해 (Chiharu et al.,

1992). 한한한한 한한한 sulfated polysaccharide수

fucoidan한 한한 한한한 sarcoma-180, 수수한 한한한 L-1210,

해해 한한한 Meth-A, B-16 melanoma cell 한한한한 한한한한 한한한 한한한

한한 한한, 한 한 한 해해해해해해해해해해

sarcoma-180 cell한 해해해한 한 한 한 한 한 한 한 한 한(Ryu et

al., 1989).

한 한한한수 한수 한한한한 N. oculata 한한수 한 한수 수 한

4 한 한 한 한 한 한 해 해해 해 해해 한한한 해해해해해해 한한 한

한 한 한 N. oculata 해해해한 해해해해해해해해한한한

24, 48 한 72한한 한수수 한 MTT assay 한 해해해한 한한한한

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한한한한 한 한 한 한 한 한 , 한한한 해해해HL-60 (human

promyelocytic leukemia cell), U937 (human leukemic

monocyte

lymphoma cell) 한한한 한한한한 한한 한 한한 한, 수 한 한한 한 한 SK-Hep1

(human hepatocellular carcinoma cell)한 한한 한한

해해해해 한한한 한 한 한한한한한, 수 수 수 수 수 수 CT-26

(murine colon carcinoma cell)한 한 한한 한 한한한 한한 한한 한한한 한한 한한

한. 한한, n-BuOH 한수 수 수 한 한한한 한한한

한 한 34%한 한 66%한 한한한 한한한한한 한한 한한 한한

한한한 한한한한한. 한한 한 한한한수 한한 한 40%한 한한한 한한한한 한한한 한 한 한 한 한

(Fig. 4). N. oculata 한 한 한 한

한 한 한 한해해해해 한 한한 한한한 한한 한한 해해해 한 한

한한한한한 한한한한, 한 한한한 한 한 한n-BuOH 해해해해한 한한 한한 한 수 한한

한 한 한한한수 한한한한 한한한 한한

한 한한한 한한한한 한 한 한 해해해 해해해해해 한한 N.

oculata한 한 한한한한 해해해해해해 해해해해 해해해해해 해해 해해해해해해 한 한 한 한 해해해 한한한 한 한 한 한 .

한 한

한 한한한 해해해 한해해해한한한한 한한한한 한한한한 한 한한 한한한한한 한 한 한 한한해해해해해한한한한한 (JDC) 한 한 한 한 한해해해해해해, 해해한 한 한 한 한 한 .

한한 한 한

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2010한 10 한 1한 한한

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