[lab] bioquímica - digestion de carbohidratos.pptx
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DIGESTION DE
CARBOHIDRATOS
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OBJETIVOS
Determinar la actividad enzimtica de la amilasa salivar deacuerdo al consumo del sustrato.
Comprobar que slo bajo ciertas condiciones las enzimasfuncionan ptimamente catalizando una reaccin enzimticacon su sustrato
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El pH de la saliva es cercano a laneutralidad, por lo que en elestmago esta enzima se inactivatotalmente, de tal suerte que loscarbohidratos no sufrenmodificaciones de importanciaaqu.
En el duodeno se vierte el jugopancratico que contiene entreotros muchos elementos, amilasapancretica, diastasa o amilopsina,y es muy parecida a la enzimasalival.
Para romper las ramificaciones -1,6-se necesita a la amilo-1-6-glucosidasa.
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ALMIDON + AMILASA GLUCOSA MALTOSA DEXTRINA
1 2 3 4Almidn Almidn Almidn Almidn
+ + +
Saliva Saliva Saliva
La reaccin enzimtica se evaluara por laobservacin del cambio de coloracin deintensidad del reconocimiento delalmidn por el lugol
Digestin del almidn por la AMILASA SALIVAR
Almidn + lugol =Complejo coloreado
I2
LUGOL
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PARTE EXPERIMENTAL
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Digestin del almidn por la AMILASA SALIVAR
TUBO (ml) 1 2 3 4 Almidn 1% 2 2 2 2
Buffer fosfato pH 6,6 1 1 1 0
HCL 0,3N 0 0 0 3,4
Suero fisiolgico 3 2,4 0 0 Agua destilada 0 0 2,4 0
Colocar en bao de Mara a 37C por 5 minutos. Agregar:
solucin de saliva 0 0,6 0,6 0,6 Colocar en bao de mara a 37C por 20 minutos
Pasado este tiempo preparar cuatro tubos ms de
acuerdo al esquema
ALMIDON + AMILASA GLUCOSA + MALTOSA + DEXTRINA
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TUBO (ml) 1 2 3 4
digestin tubo 1 0, 5 0 0 0 digestin tubo 2 0 0,5 0 0 digestin tubo 3 0 0 0,5 0 digestin tubo 4 0 0 0 0,5 HCL 0,05N 5 5 5 5
Solucin yodada 0,5 0,5 0,5 0,5 Dejar en reposo por 15 minutos. Leer alfotocolormetro con filtro rojo (660nm)
Digestin del almidn por la AMILASA SALIVAR
ALMIDON + AMILASA GLUCOSA + MALTOSA + DEXTRINA
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Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5
A b s
Digestin del almidn por la AMILASA SALIVAR
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