laboratorio en reumatología
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Laboratorio en reumatología. Adolfo Pacheco Salazar Servicio de Reumatología, Hospital Calderón Guardia. Aspectos a abordar. Reactantes de fase aguda Sistema del complemento Factor reumatoide, Péptido cíclico citrulinado HLA-B27 Anticuerpos antinucleares - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
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Laboratorio en reumatología
Adolfo Pacheco SalazarServicio de Reumatología, Hospital Calderón Guardia
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Aspectos a abordar Reactantes de fase aguda
Sistema del complemento
Factor reumatoide, Péptido cíclico citrulinado
HLA-B27
Anticuerpos antinucleares
Anticuerpos contra el citoplasma de los neutrófilos
Líquido sinovial
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Reactantes de fase aguda
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Reactantes de fase aguda Inflamación
Respuesta local a la lesión de los tejidos
Respuesta de fase aguda Alteraciones sistémicas y metabólicas producto
del estímulo inflamatorio Participantes en la respuesta inmune innata
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Proteínas plasmáticas de fase aguda
Principales
Proteínas C reactiva
Amiloide A sérico
Moderadas
Fibrinógeno
Haptoglobina
Menores
Complemento C3
Negativas
Albúmina
Transferrina
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Proteína C reactiva, amiloide A sérico Proteínas plasmáticas de origen hepático
Síntesis estimulada por citoquinas inflamatorias, IL-6 principal inductor
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Proteína C reactiva
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Cambios en la concentración de PCR Estímulo inflamatorio agudo
6 horas, supera límite normal 48 horas, pico
Ausencia de estímulo inflamatorio Descenso rápido, semivida de 18 horas
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Valores de PCRElevación leve (<1 mg/dl)
Elevación moderada (1-10 mg/dl)
Elevación notable (>10 mg/dl)
Ejercicio intensoIVRS, gingivitisEmbarazoCrisis convulsivasResistencia a la insulinaObesidad
Infarto agudo al miocardioNeoplasias malignasPancreatitisInfección de mucosasEnfermedades del colágeno
Infección bacterianaTrauma severoVasculitis sistémica
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Amiloide A sérico Función no está clara
Respuesta a estímulo inflamatorio Aumento en pocas horas Elevación supera a la de PCR
No hay pruebas fiables de uso generalizado Información escasa sobre valores esperados
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Velocidad de eritrosedimentación Proceso
Sangre anticoagulada en un tubo vertical
Velocidad a la que descienden eritrocitos
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Medición indirecta del aumento de proteínas de fase aguda
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Técnica de Westergren
Límites normales
Menores de 50 años <15 mm/h varones <20 mm/h mujeres
Mayores de 50 años <20 mm/h varones <30 mm/h mujeres
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Causas de elevación de VES
Edad Embarazo Anemia Obesidad Diabetes mellitus Insuficiencia renal
Infección Malignidad Enfermedad del
colágeno Inflamación
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Sistema del complemento
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Funciones
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Medición del complemento
C4 (mg/dl) C3 (mg/dl) Interpretación
16-40 100-180 Rango normal
40 200 Respuesta de fase aguda
10 80 Activación de la vía clásica
30 50 Activación de la vía alternativa
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Factor reumatoide
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Factor reumatoide
Anticuerpo contra el fragmento cristalizable de la IgG
IgA, IgM, IgG
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Enfermedades asociadas con el FR
Enfermedades del colágeno
AR LES, esclerosis sistémica, EMTC, Sjögren
Infecciones virales VIH, mononucleosis, hepatitis, vacunación
Infecciones parasitarias Tripanosomiasis, malaria, esquistosomiasis, filariasis
Infecciones bacterianas crónicas
Tuberculosis, lepra, sífilis, brucelosis, endocarditis bacteriana subaguda, salmonelosis
Neoplasias Enfermedades linfoproliferativas
Estados hiperglobulinémicos
Púrpura hipergammaglobulinémica, crioglobulinemia, enfermedad hepática crónica, sarcoidosis, enfermedades pulmonares crónicas
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FR en artritis reumatoide Prueba de aglutinación con látex
70% positividad
Nefelometría 80% positividad
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Nefelometría
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Valores
Diluciones Unidades internacionales
< 1:20 normal 1:20-1:80 dudoso > 1:80 positivo
< 14 normal 14-40 dudoso > 40 positivo
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Papel fisiológico del FR IgM Durante la respuesta inmune secundaria
FR IgM en superficie de células B Unión a complejos inmunes facilita presentación
antigénica
FR IgM secretado Eliminación de inmunocomplejos
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Anticuerpos contra Péptidos cíclicos citrulinados
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Descubrimiento Anticuerpos contra queratina
Descritos por primera vez en década 1970 Antígeno primario filagrina
Citrulina Epítopo de la filagrina al cual se unen los
anticuerpos Citrulina se forma por modificación enzimática del
aminoácido arginina
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Artritis reumatoide
Determinación de anti-PCC
Sensibilidad 70% Especificidad 98%
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Título de Anti-PCC
Unidades < 19 negativo 20-39 positivo débil 40-59 positivo moderado > 60 positivo fuerte
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HLA-B27
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HLA, antígenos leucocitarios humanos
Glucoproteínas codificadas por el MHC
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Complejo principal de histocompatibilidad
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HLA-B27 en espondiloartropatías
Enfermedad Frecuencia en caucásicos (%)
Espondilitis anquilosante 90
Artritis reactiva 70
Artritis enteropática 50
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Anticuerpos antinucleares
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Métodos de detección
Inmunofluorescencia
Suero a varias diluciones con células sustrato
IgG antihumana con fluoresceína
Título ≥1:40 es positivo
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Ensayo de inmunoabsorción ligado a enzima
1. Sueros en pocillos recubiertos por antígenos diana
2. Anticuerpo antiinmunoglobulina humana conjugado con enzima
3. Sustrato enzimático
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Patología Pacientes con ANA (%)
Lupus eritematoso sistémico 99-100
Lupus inducido por fármacos 100
Enfermedad mixta del tejido conectivo 100
Esclerosis sistémica 97
Polimiositis/ dermatomiositis 40-80
Síndrome de Sjögren 48-96
Artritis reumatoide 30-50
Síndrome antifosfolípido 40-50
Familiares de pacientes con enfermedades inmunes
5-25
Sano ≥1:40 20-30
Sano ≥1:80 10-12
Sano ≥1:160 5
Sano ≥1:320 3
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Otras enfermedades que presentan ANA
Patología Pacientes con ANA (%)
Hepatitis autoinmune 100
Esclerosis múltiple 25
Púrpura trombocitopénica idiopática 10-30
Enfermedad tiroidea 30-50
Enfermedades infecciosas Muy variable
Neoplasias malignas Muy variable
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Especificidad Patrón de inmunofluorescencia
Asociaciones
Nuclear asociada a cromatina
ds-DNA Anillo, homogéneo LES
Histonas Anillo, homogéneo Lupus por medicamentos
Centrómero Moteado Esclerosis sistémica limitada
Nuclear, del aparato de splicing
Sm Moteado LES
U1 sn RNP Moteado EMTC
Nuclear, otras ribonucleoproteínas
Ro/SS-A, La/SS-B Moteado Sjögren, LES, lupus cutáneo subagudo, lupus neonatal
Nucleolares
Topoisomerasa I (Scl-70)
Homogéneo, nucleolar Esclerosis sistémica difusa
Citoplásmicas
Histidil tRNA sintetasa (Jo-1)
Homogéneo Polimiositis, dermatomiositis
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Antígenos nucleares extraíbles (ENA)
Extraíbles Inmunodifusión
Sm Sn RNP Ro La Topoisomerasa I tRNA sintetasas
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Anticuerpos contra el citoplasma de los neutrófilos
(ANCA)
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ANCA Inmunofluorescencia
c-ANCA citoplásmico p-ANCA peinuclear
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Vasculitis
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Antígenos c-ANCA
Proteinasa 3 Asociación con Granulomatosis de Wegener Responsable del 90% de patrones citoplásmicos
p-ANCA Mieloperoxidasa
Asociación con Poliangiitis Microscópica, Churg-Strauss Responsable del 10% de patrones perinucleares
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Líquido sinovial
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Líquido sinovial
Ultrafiltrado del plasma Síntesis local de proteínas
Solutos (urea, uratos, creatinina)
Proteínas plasmáticas
Lubricina, Hialuronato
Inmunoglobulinas, citocinas
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Análisis del líquido sinovial Aspecto macroscópico
Recuento de leucocitos
Composición bioquímica
Presencia de cristales
Tinción de Gram, cultivo
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Tipos de líquido sinovial
Característica Normal No inflamatorio Inflamatorio Séptico
Aspecto Transparente Transparente Traslúcido Traslúcido a turbio
Viscosidad Alta Alta Baja Baja
Leucocitos por mm3
<200 200-2000 2000-50000 >50000
% PMN <10% <10% Variable , cristales >90
>90
Entidades - Artrosis, trauma Artritis reumatoide, espondiloartropatías, artritis por cristales
Artritis séptica
Artritis por cristales•Gota, forma de aguja, urato monosódico monohidratado, birrefringencia negativa intensa•Pseudogota, cristales romboidales de pirofosfato cálcico, birrefringencia positiva débil
Líquido hemorrágico•Hemartrosis
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Coágulo de mucina
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Anemia de enfermedad crónica
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Causa: Citocinas inflamatorias
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Anemia de enfermedad crónica Anemia normocítica-normocrómica
Hemoglobina >10 g/dl
Índices férricos Sideremia baja Capacidad de fijación de hierro disminuida Saturación de transferrina disminuida Ferritina sérica normal o aumentada (3x el basal)