manual clinico veterinario esc veterinaria unan león

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Centro Veterinario de Diagnóstico e Investigación CEVEDI

Escuela de Medicina Veterinaria UNAN – LEON

Junio, 2010

MANUAL DE LABORATORIO CLÍNICO VETERINARIO

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE NICARAGUA LEÓN

UNAN LEÓN

Escuela Medicina Veterinaria

Centro Veterinario de Diagnóstico e Investigación

CEVEDI

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CONTENIDO PÁGINAS

PORTADA 1

INDICE 2

AUTORES 4

UNIDAD I: SANGRE 5

Introducción 5

Hematopoyesis 7

Eritropoyesis 7

Rubriblasto 8

Prorubricito 8

Rubricito 8

Metarrubricito 9

Reticulocito 9

Eritrocitos Maduros 10

Anormalidades de los eritrocitos 10

Rouleaux 10

Aglutinación 11

Policromasia 12

Anisocitosis 12

Hipocromia 13

Poiquilocitosis 13

Equinocitos 14

Acantocitos 14

Queratocitos 15

Estomacitos 16

Leptocitos 16

Dacriocitos 17

Cuerpos de Howell-Jolly 17

Cuerpos de Heinz 18

Alteraciones de los eritrocitos 19

Anemias 19

Clasificación de las Anemias 19

Anemias Regenerativas 19

Anemias por pérdida de sangre 19

Anemias hemolíticas 20

Anemias No Regeneraticas 20

Anemias por Hemoparásitos 21

Babesiosis 21

Anaplasmosis 21

Erliquiosis 22

Tripanosomiasis 24

Anemia Macrocítica Hipocrómica 24

Anemia Normocítica Normocrómica 24

Anemia Microcítica Hipocrómica 24

Análisis Sanguíneo 25

Finalidad de los análisis clínicos 25

Recogida de la muestra 25

Métodos para tomar una muestra de sangre completa 26

Transporte de la muestra de sangre al laboratorio 27

Examen Hematológico 28

Glóbulos Blancos

Métodos de Tinción

Observación de las células sanguíneas 29

3



Determinación de Hematocrito 30

Determinación de Hemoglobina 30

Leucograma 31

Frotis Sanguíneo 32

Diferencial Leucocitario 32

UNIDAD II: ORINA: Aparato Urinario 34

La Orina 35

Métodos de recogida de la orina 35

Directamente 35

Por Paracentesis 36

Sondeo o Cateterismo 36

Características de la orina 38

Examen físico de la orina 38

Color 38

Viscosidad 43

Volumen 43

Peso específico o densidad 44

Examen químico 46

Técnicas para la determinación del pH urinario 47

Proteínas 47

Glucosa 52

Cuerpos cetónicos 54

Pigmentos biliares 55

Bilirrubina 55

Urobilinógeno en orina 57

Ácidos y sales biliares 59

Nitrito urinario 60

Mioglobina 63

Examen Sedimento Urinario 63

Estructuras organizadas 64

Estructura no organizada 70

Artefactos y materiales extraños 73

UNIDAD III: LABORATORIO CLÍNICO PARASITOLÓGICO 74

Introducción 74

Examen frotis directo 75

Método de flotación (sheather) 76

Método de mac master modificado 79

Técnica de sedimentación (boray) 84

Técnicas de tinción para hemoparásitos 89

Tinción de Giemsa 90

UNIDAD IV: RASPADO DE PIEL PARA DETECCIÓN DE ECTOPARÁSITOS 93

Introducción 93

Sarna psoróptica 93

Sarna sarcóptica 95

Sarna demodécica 95

Sarna otodécica 96

Sarna knemidococica 97

Raspado 100

Piel y tejido celular subcutáneo 103

Lesiones traumáticas 111

Neoplasias cutáneas 119

Técnicas de raspado de piel para detección de ectoparásitos 127

Anexos 131

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Autores: MSc. José Luis Bonilla, DMV.

Profesor Principal, Microbiología e Inmunología Veterinaria Dpto. Sanidad Animal

Director CEVEDI Escuela de Medicina Veterinaria

UNAN – LEON

Dr. Daniel Morales Arancibia Profesor Principal, Patología Quirúrgica Veterinaria

Dpto. Sanidad Animal Sub-Director Escuela de Medicina Veterinaria

UNAN – LEON

Dr. William Jirón Toruño Profesor Principal, Patología Veterinaria

Dpto. Sanidad Animal Director Escuela de Medicina Veterinaria

UNAN – LEON

Dr. Luis Alberto Salgado Joven Investigador

Centro Veterinario de Diagnóstico e Investigación (CEVEDI) Escuela de Medicina Veterinaria

UNAN – LEON

Colaboradores:

Dra. Vanessa Rivas Lara Ayudante de Cátedra


UNAN – LEON

Lic. Byron Flores Somarriba, MSc. Bioanálisis Clínico y Microbiología


UNAN – LEON

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Análisis Sanguíneo

Es la aplicación, de los métodos químicos empleados en el laboratorio para el diagnostico,

control, tratamiento y prevención de enfermedades. La Biopatología Clínica Veterinaria

es la encargada de la realización de los diferentes análisis clínico e interpretación de los

resultados.

La anamnesis muchas veces facilita el diagnóstico, pero el uso del laboratorio permite

ratificar o rectificar, ese diagnóstico.

Finalidad de los análisis clínicos.

Complementan los datos que el dueño o cuidador del animal ha dado y los obtenidos tras

la exploración del animal, permite determinar la gravedad de un proceso, lo que obliga a

modificar o reforzar un tratamiento.

La Biopatología clínica proporciona datos interesantes sobre la evolución de un proceso

morboso o sobre la respuesta del enfermo al tratamiento.

Recogida de la muestra.

Se debe considerar la especie animal, el temperamento, la facilidad para acceder al vaso

sanguíneo, entre otras. Se debe diferenciar el tipo de muestra que se toma si es para

análisis de sangre completa (con anticoagulante) o para suero sanguíneo (sin

anticoagulante).

Métodos para tomar una muestra de sangre completa.

1. Se selecciona el vaso sanguíneo donde se realizara la toma de muestra de

acuerdo a la especie que se esté trabajando.

Especie Vasos sanguíneos para la obtención de la muestra

Bovinos Vena yugular, vena coxígea y vena mamaria

Equinos Yugular, vena de la espuela.

Caninos Vena Yugular, Cefálica, safena y femoral

Porcinos Vena cava anterior, vena marginal de la oreja

Ovinos y caprinos Vena yugular, cefálica y safena.

Conejos Vena marginal de la oreja, punción cardiaca

Felinos Vena yugular, cefálica, safena.

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Aves Vena yugular, vena safena y punción cardiaca.

2. Se procede a realizar la antisepsia (rasurado o desplumado, lavado o embrocado)

de la región. Se hace un torniquete.

3. Se aplica un agente antiséptico (alcohol) para observar mejor el vaso sanguíneo.

4. Se procede a realizar la punción del vaso sanguíneo y la extracción de la muestra

de sangre, tratando de no formar hematoma en el punto de punción para obtener

una buena muestra.

La cantidad de muestra necesaria para los diferentes estudios de forma general es de

3ml de sangre para realizar un análisis completo de la sangre en las diferentes especies.

Cada muestra debe de rotularse para permitir su identificación posterior.

Transporte de la muestra de sangre al laboratorio.

1. Procurar no exponer la muestra de sangre de forma directa a los rayos solares ya

que producen destrucción de los eritrocitos.

2. No realizar movimientos rápidos ni continuos con la muestra de sangre ya que

originan lisis de los eritrocitos.

3. Las muestras deben transportarse rápidamente al laboratorio para evitar posibles

alteraciones en el análisis de la misma.

Funciones de la sangre:

Transporte: metabólicos, hormonas, y substrato

Defensiva e inmunológica

Hemostasia: mecanismo frente a la pérdida de sangre

Mantenimiento de la presión osmótica y coloidosmótica

Homeostasis calórica

Composición:

Células hemática: glóbulos rojos y glóbulos blancos

Plasma sanguíneo: agua, electrolito, proteínas plasmáticas, nutrientes, sustancias

de desecho, hormonas y enzimas.

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El estudio de la sangre es importante para detectar trastornos de esta, enfermedades

generales y orgánicas, que pueden resultar de interés diagnóstico y pronóstico.

Examen Hematológico.

El análisis que se realiza en las muestras sanguíneas consta de varias etapas como:

Evaluación del Hematocrito. Representa la prueba más valiosa en las situaciones de

Anemias

Evaluación de la serie blanca

Recuento de glóbulos blancos: Método Manual (hemocitómetro) y método automático

(contador celular).

Recuento diferencial de glóbulos blancos:

Granulocitos: neutrófilos, eosinófilos, basófilos

Agranulocitos: linfocitos y monocitos

Métodos de tinción:

Tinción Giemsa

Tinción May Grunwald Giensa

Tinción Panóptico rápido

Tinción de Wright

Determinación de Hematocrito (Hto)

Procedimiento:

1. Para el llenado de los capilares (75 mm x 1.0 mm), se mezcla suavemente la

sangre, se coloca el capilar horizontalmente.

2. Se lleva la sangre hasta unas ¾ partes y se sella uno de sus extremos con

plastilina.

3. Se coloca el capilar en la centrífuga, con el lado sellado hacia el exterior.

4. Se centrifuga 5 minutos (10000 – 13000 rpm).

5. La lectura se realiza en el lector específico.

6. El resultado se da en porcentaje (%).

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Leucograma

Procedimiento:

1. Colocar 400 µl de solución diluyente de leucocitos en un tubo de ensayo (10 mm x

75 mm).

2. Verter 20 µl de sangre.

3. Mezclar vigorosamente.

4. Llenar la cámara de Neubauer y realizar el conteo

El cálculo se realiza de la siguiente manera: leucocitos/µl = leucocitos x 10 x 20

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Frotis sanguíneo

Procedimiento:

1. Portaobjetos libre de grasa.

2. Mezclar la sangre para obtener una buena homogenización.

3. Con el portaobjetos que servirá de extensor, tome una pequeña gota y colóquela

en el extremo.

4. Esparza la gota uniformemente, formando una línea a lo largo del portaobjetos.

5. Tratando de obtener un ángulo de 45º, con un movimiento rápido y firme se desliza

el portaobjeto extensor.

6. Se debe dejar secar a temperatura ambiente en posición horizontal.

7. Visualizar tres zonas de mayor a menor densidad.

8. Colocar colorante sobre el frotis ya seco, cantidad suficiente para que lo cubra.

9. Mantener en reposo 1 minuto.

10. Adicionar, sin eliminar el colorante, una cantidad igual de solución tampón.

11. Mezclar soplando hasta formar una capa metálica en la superficie.

12. Mantener por 12 minutos.

13. Lavar suavemente con agua y secar al aire libre.

Observación de las células sanguíneas

Procedimiento:

1. Colocar el frotis de sangre en el microscopio, con el lente de bajo poder (10X).

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2. Analizar el frotis en si totalidad, observando la coloración y distribución de las

células, tratando de ubicar las tres zonas del extendido (cabeza, cuerpo y cola).

3. Posicionarse en la zona adecuada del frotis, utilizando el lente de 40X.

4. Colocar una gotita de aceite de inmersión y el lente de inmersión (100X).

5. Proceder a observar las células sanguíneas y diferenciarlas entre ellas.

Diferencial leucocitario

Procedimiento:

1. Al observar el frotis se debe escoger la zona donde las células muestran

individualidad total.

2. Realizar el conteo de las 100 células, marcando en el contador cada tipo celular

observado.

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Hematopoyesis

Eritropoyesis

Los eritrocitos son producidos por división mitótica y maduración a partir de los

rubriblastos, Prorubricito, Rubricito Basofilo, Rubricito Policromatico, Rubricito

Ortocromático, Meta Rubricito, Reticulocito y Eritrocito maduro. Cada rubriblasto puede

dividirse de 3-4 veces y con ello dar origen de 8-16 células maduras. Conforme van

madurándose, las células se hacen más pequeñas, su núcleo se condensa y su

citoplasma cambia de azul oscuro a rojo naranja (Ortocromático).

A continuación se describen las diferentes etapas de la eritropoyesis y las características

morfológicas de cada una de ellas.

Rubriblasto.

Se considera la fase más inmadura de la serie, su núcleo es redondo con bordes, la

cromatina es granular y presenta uno o dos nucléolos. El citoplasma es Basofilico y forma

un anillo delgado alrededor del núcleo. Esta etapa tiene la relación núcleo-citoplasma más

grande de la serie eritroide.

Prorubricito

Presenta núcleo redondo, con irregularidades en los bordes nucleares, el núcleolo por lo

general no es percibido, el citoplasma es ligeramente menos intenso.

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Medicina Veterinaria

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Rubricito

El núcleo es pequeño, el citoplasma es azul (Basofilico) o azul naranja (policromatofilico)

o rojo naranja (ortocromático). La mitosis se presenta en las etapas tempranas del

Rubricito, pero cesa en etapas posteriores.

Metarrubricito

Su núcleo es extremadamente picnotico y muy oscuro, sin poderse distinguir la

cromatina. El citoplasma puede ser Basofilico, policromatofilico o bien ortocromático.

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Se presentan en la eritroleucemia (M6a),

leucemia eritroide (M6b) y en la enfermedad

hemolítica del recién nacido.

Se presentan en la eritroleucemia (M6a), leucemia eritroide (M6b), en la

enfermedad hemolítica del recién nacido, en la leucemia mieloide crónica, en

las anemias hemolíticas, en la talasemia y en la leucemia falciforme.

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Reticulocitos

Son eritrocitos no nucleados que presentan gránulos o redes de gránulos.

Eritrocitos Maduros

Es la última etapa del desarrollo de estas células. Se tiñen de color rojo naranja y

presentan variaciones en estructuras en las diferentes especies, los eritrocitos de los

mamíferos son anuclados, mientras que en el resto de los vertebrados presentan células

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Se presentan en la eritroleucemia (M6a),

leucemia eritroide (M6b), en la enfermedad

hemolítica del recién nacido, en la leucemia

mieloide crónica, en la talasemia y en la

leucemia falciforme.

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nucleadas. Los eritrocitos bicóncavos son característicos de las especies domesticas

(perros, gatos, vaca, caballo, ovejas y cabras). Las células de los bovinos y caprinos

presentan protuberancia (equinocitos). En los camélidos (camello, alpaca y llama) los

eritrocitos tienen forma elíptica, en los equinos se agrupan formando hileras que

asemejan pilas de monedas y en las aves, peces y reptiles son nucleados.

Anormalidades de los eritrocitos

Rouleaux

Adhesión de los eritrocitos, dando la imagen de pilas de monedas. El incremento en la

concentración de fibrinógeno y de globulinas, los procesos inflamatorios y las

enfermedades linfoproliferativas potencia su formación. Los eritrocitos de las

preparaciones de sangre de los caballos, gatos y cerdos sanos, con frecuencia presentan

Rouleaux, pero en otras especies deben de considerarse como un hallazgo anormal.

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Eritrocitos en forma de pilas de moneda

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Aglutinación

Es la agregación de eritrocitos en grupos celulares, es producida por la presencia de

inmunoglobulinas (IgM) unidas a la superficie del eritrocito. También se origina cuando se

suministran altas dosis de heparina no fraccionada como tratamiento en los caballos.

Policromacia

Presencia de eritrocitos de color rojo oscuro, estos son Reticulocitos que se tiñen de color

rojo azul por la presencia de hemoglobina, ribosoma y poliribosoma. Se observa en raras

ocasiones en perros y cerdos sanos, no se observa en forma normal en los bovinos,

ovejas, cabras y caballos.

La presencia de esta alteración se da en anemias regenerativas debido a que cuando el

grado de anemia es severo los Reticulocitos pueden ser liberados a la sangre.

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Anisocitosis

Variación en el diámetro de los eritrocitos en los frotis de sangre. Se observa con mayor

frecuencia en bovinos. Se presenta cuando hay deficiencia de hierro o cuando un gran

número de células más grandes de lo normal son producidas como los Reticulocitos. Se

presenta en anemias regenerativas, puede presentarse en anemias no regenerativas

como consecuencia de la diseritropoyesis.

Hipocromía

Presencia de eritrocitos con disminución en la concentración de hemoglobina y palidez

central aumentada. Se observa en anemias por deficiencias de hierro, resultante de la

disminución en la concentración de hemoglobina dentro de las células.

Poiquilocitosis

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UNAN-LEON Medicina Veterinaria

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Describe la presencia de eritrocitos de formas anormales, esta puede estar presente en

cabras sanas y en bovinos jóvenes. La anemia por deficiencia severa de hierro en perros

y rumiantes puede exhibir poiquilocitosis pronunciada.

Equinocitos

Son eritrocitos espiculados en los cuales las

espículas son espaciadas y de un tamaño similar.

Por lo general son artefactos que se forman por la sobre dosificación de EDTA, mala

realización del frotis sanguíneo o prolongado almacenamiento de las muestras de sangre

antes de realizar la preparación. En perros suelen formarse tras la exposición a venenos

de serpientes, en animales urémicos, posterior a transfusiones de sangre almacenada o

en deficiencia de la enzima piruvato cinasa en perros con glomerulonefritis y neoplasias

(linfomas, hemangiosarcoma, tumor de células sebáceas y carcinomas). En equinos se

presentan tras ejercicio extenuante, tratamiento con furosamida y enfermedades

sistémicas.

Acantocitos

Eritrocitos con irregularidades espaciadas y tamaño variable de las espículas. Esta se

presenta cuando la membrana tiene exceso de colesterol, han sido reconocidos en

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Se presentan en las siguientes condiciones:

Anemias hipocrómicas

Cáncer metastático óseo

Síndrome mieloproliferativo.

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animales con enfermedades hepáticas, tras problemas de neoplasias

(hemangiosarcoma), CID y glomerulonefritis.

Queratocitos

Son eritrocitos que contienen o que parecen que tienen una vesícula. Se localizan en un

extremo de la célula, se han reconocido en diferentes alteraciones como: anemia por

deficiencia de hierro, enfermedades hepáticas.

Estomacitos

Son eritrocitos que presentan elongaciones del área de palidez central. Normalmente se

presentan cuando el contenido de agua de los eritrocitos se incrementa.

Los Acantocitos se diferencian de los equinocitos (células que también

muestran espículas) es que estas son más irregulares y puntiagudas.

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Leptocitos

Estas células son delgadas y con incremento en el tamaño de la membrana. Pueden

presentarse de dos formas: los codocitos (células en tiro al blanco) presentan forma de

campana que exhiben una densidad central. Los knizocitos dan la impresión de presentar

una barra central de hemoglobina, ambos se presentan cuando hay problemas de

anemias regenerativas, por deficiencias de hierro y rara vez en insuficiencias hepáticas.

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Dacriocitos

Los eritrocitos tienen forma de lágrima con un extremo elongado. Son eritrocitos

anormales presentes en deficiencias de hierro en rumiantes y en perros con

glomerulonefritis y esplenomegalias.

Cuerpos de Howell-Jolly

Son remanentes nucleares pequeños y esféricos presentes en los eritrocitos, asociados

con anemias regenerativas, pueden estar presentes en animales que son tratados con

glucocorticoides o vincristina.

Cuerpos de Heinz

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Son agregados de precipitado de hemoglobina que se unen a la superficie interna de la

membrana de los eritrocitos. Aparecen teñidos de color azul luminoso o como inclusiones

oscuras. Suelen presentarse en grandes cantidades en casos de anemias, en gatos con

diabetes mellitus, hipertiroidismo y linfomas. En rumiante se observan cuando hay

deficiencia de selenio, intoxicaciones por cobre y zinc.

Anemias

Es la más frecuente de las alteraciones de los eritrocitos y produce varios signos clínicos

como: debilidad, letargo, fatiga, palidez, ictericia y hemorragias en mucosas.

Las tres causas básicas de anemias son:

Reducción de la producción de la medula ósea de eritrocitos.

Perdidas de sangre como sucede en las hemorragias.

Destrucción de eritrocitos como sucede en las hemolisis

Clasificación de las Anemias

Anemias Regenerativas

Una anemia es regenerativa por la presencia de anormalidades morfológicas entre las

que se encuentren la presencia de Reticulocitos como característica representativa de la

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regeneración. Se presenta en anemias hemolíticas, hemorragias internas, neoplasias que

sangran y perdidas de sangre recientes sin llegar a presentarse la deficiencia de hierro.

Anemias por pérdidas de sangre

En los perros se presenta cuando existe perdidas de sangre, ya sea al exterior o al interior

de cavidades presentes en el organismo. Si la anemia es aguda no existen evidencias de

regeneración, se trata de una anemia Normocitica Normocromica. Si la pérdida se

prolonga, se constituirá en anemia Microcitica Hipocromica.

Generalmente cuando los valores de proteínas se disminuyen es una pérdida de sangre al

exterior y cuando es al interior no existen cambios.

Anemias Hemolíticas

Este tipo de anemia produce cambios regenerativos importantes. Es necesario llevar a

cabo una cuidadosa observación del frotis, a fin de poder detectar la causa de la anemia,

como podrían ser: Hemoparasitos, cuerpos de Heinz o procesos inmunomediados.

Las anemias hemolíticas se deben de diferenciar en intravasculares y extravasculares. La

hemolisis extravascular es realizada por los macrófagos en el bazo, hígado y medula

ósea. Mientras que la intravascular son con más frecuencia agudas, entre otras causas

tenemos: destrucción mediada por complemento, anemia hemolítica autoinmune y la

anemia con cuerpos de Heinz.

Anemias no Regenerativas

El acercamiento a este tipo se inicia al detectar pancitopenia, lo cual nos indica una

enfermedad de la medula ósea, que a su vez es confirmado mediante aspirado óseo. La

anemia Normocitica Normocromica es la más frecuente de las anemias no regenerativas.

Dentro de las causas de este tipo de anemia tenemos:

Inflamaciones Crónicas.

Alteraciones en los factores de la coagulación y en el metabolismo de los lípidos

en el hígado.

Problemas de Mielofibrosis de la medula ósea.

Hipotiroidismo.

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Hipoadrenocorticismo.

Anemias por Hemopárasito

Babesiosis

La Babesiosis es transmitida por garrapatas y causada por distintos agentes del genero

babesia, se caracteriza por penetrar en los glóbulos rojos y destruirlos. Se observa

mediante extendidos de sangre periférica en forma de trébol en el interior de los

eritrocitos. Una vez que invade y se multiplica en el interior de los hematíes, estos son

destruidos en cantidades variables, esta alta destrucción origina un descenso en la

cantidad de glóbulos rojos. Esta destrucción origina una anemia regenerativa, ictericia y

hemoglobinuria.

Anaplasmosis

Es una bacteria perteneciente a la familia Rickettsiaceas genero Anaplasma, pero es

considerada un parasito intracelular, debido a que se localiza en el interior de la célula, no

produce destrucción de los eritrocitos sino que este penetra en el eritrocito causando

invaginación de la membrana citoplasmática y subsecuentemente la formación de una

vacuola, en el corpúsculo inicial se reproduce y forma una inclusión quedándose en el

interior del eritrocito sin destruirlo, se puede localizar en el centro (anaplasma centralis) o

en la periferia (anaplasma marginale).

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El mecanismo de la anemia por Anaplasmosis tiene como causa fundamental la supresión

de la actividad de la medula ósea eritropoyetica por afectación de fracciones toxicas del

anaplasma, esto ocasiona una supresión en el ciclo vital de la producción de los

eritrocitos.

Erliquiosis

La Erliquiosis canina es una enfermedad infecto-contagiosa de curso

agudo, subclínico o crónico. Esta enfermedad afecta a perros y es

transmitida por la mordida de la garrapata.

Los síntomas varían de acuerdo a la raza, las enfermedades

concurrentes posibles, la etapa de la enfermedad, la edad y a las diferencias de

patogenicidad de la cepa.

La raza más susceptible es el Pastor Alemán ya que una

vez afectados pueden incluso llegar a morir.

Los síntomas generalmente son inespecíficos, pero dentro

de los más comunes están: depresión, letargo, pérdida de

peso, sangrados especialmente por la nariz, linfadenopatía (agrandamiento de los

ganglios linfáticos), problemas respiratorios, uveítis, mucosas pálidas, anorexia (no quiere

comer), inflamación de las articulaciones, fiebre, edema de las extremidades,

convulsiones.

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Tripanosomiasis

Es una enfermedad severa que afecta a una gran variedad de animales vertebrados

incluyendo al ser humano y es causada por hemoparásitos, protozoarios flagelados

pertenecientes al género Tripanosoma. Estos parásitos causan una enfermedad crónica

donde los animales afectados exhiben anemia severa, pérdida de peso, alteraciones

reproductivas, anorexia y muerte, con parasitemias bajas, difíciles de detectar por

métodos parasitológico convencionales.

Anemia Macrocitica Hipocromica

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Medicina Veterinaria UNAN-LEON


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Son del tipo regenerativo, los eritrocitos que se presentan son hipocromicos, ya que no

terminaron la síntesis de hemoglobina y la hemoglobina presente se encuentra en un

volumen celular mayor.

Anemia Normocitica Normocromica

Son anemias no regenerativas como la que se presentan en las inflamaciones crónicas

con presencia de eritrocitos maduros y escasa presencia de Reticulocitos. Las anemias

que se deben a hemorragias y a hemolisis, o que son recientes, tanto como para no

evidenciar respuesta regenerativa de la medula ósea pertenecen a la misma clasificación

y se les conoce como pre regenerativas.

Anemia Microcitica Hipocromica

Se deben entre otra causa a la deficiencia de hierro que impide la adecuada producción

de hemoglobina. Los eritrocitos son pequeños e insuficientemente hemoglobinizados.

Este tipo en los perros se presenta en la deficiencia de vitamina B12.

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UNIDAD II: ORINA

EL APARATO URINARIO

Su función principal es eliminar los productos de desecho que resultan del metabolismo

de los alimentos. Consta de dos partes: los riñones (órganos excretores) y las vías de

excreción.

Los riñones elaboran la orina formada a expensas de productos de desecho proteínicos,

de elementos sulfurados, hormonales y de sustancias tóxicas, además regula el volumen

del plasma sanguíneo, del agua, del equilibrio osmótico, el balance tónico, contribuye a

regular el equilibrio acido básico y segrega renina (sustancia que interviene en la

hipertensión arterial)

Las vías de excreción trasladan la orina al exterior, se componen por los uréteres, la

vejiga urinaria y la uretra.

La nefrona es la unidad secretora del riñón, es un tubo largo revestido por epitelio

secretor. La nefrona se compone de las siguientes partes: el corpúsculo renal o de

Malpighi, el tubo contorneado proximal, las ramas descendente y ascendente del asa de

Henle y el tubo contorneado distal que se une al conducto colector.

En la arteria aferente se sitúan un grupo de

células denominadas células

Yuxtaglomerulares, estas tienen función

secretora que elaboran la renina,

sustancia que interviene activamente en

la hipertensión arterial. Además se excreta la creatinina que sirve para valorar la función

renal.

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LA ORINA:

La orina debe recogerse en asépticamente, la muestra se debe de tomar por la mañana

porque contiene la concentración máxima de todos los constituyentes y porque es la más

estandarizada.

Se debe usar la fracción intermedia de la micción ya que la primera puede contener

células epiteliales, bacterias, moco y cuerpos extraños procedentes de los genitales

externos.

Los exámenes validos son aquellos realizados no más de dos horas de la toma de

muestra.

Métodos de recogida de la orina:

DIRECTAMENTE

Durante el curso de la micción, se recogerá a mitad de la micción

En perros se puede favorecer dándole de beber abundante cantidad de agua dos horas

antes de sacarle al exterior para que orine.

POR PARACENTESIS

Se realiza insertando una aguja en la vejiga de la orina a través de la pared abdominal,

precedido de un buen rasurado del pelo, lavado y desinfección. Para realizar este

procedimiento se debe de situar el animal en decúbito lateral y después localizar la vejiga

con la mano izquierda, con la mano derecha se introduce la aguja a través de la pared

abdominal en dirección cráneo caudal. El punto de punción se haya aproximadamente a

un través de dedo de la ultima mama inguinal.

RECOGIDA DE ORINA DE 24 HORAS

Los fines de este método son:

Evaluar el volumen de orina de un animal durante 24 horas

Determinar la eliminación de algún metabolito.

Para verificar el estado de la función renal en la eliminación de algún fármaco.

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SONDEO O CATETERISMO

Técnica del sondaje

Limpiar y desinfectar el meato urinario, mediante soluciones antisépticas y lavar las

manos del clínico

Usar sondas estériles sin lubrificar (conservadas en soluciones antisépticas). Hay que

tener cuidado porque la sonda puede transportar bacterias que invadan el tracto urinario

Recoger la orina sobre recipientes estériles

Perro

Se prefieren las sondas de nylon flexibles. Los diámetros son variables en dependencia

del tamaño del animal (2, 2.6, 3)

Perra

Utilizaremos sondas metálicas rectas o con ligeras curvatura en la punta de 2mm x 30 cm

Usar especulo vaginal estéril para separar los labios de la vulva y paredes de la vagina

Foco luminoso

Se deben tener las siguientes precauciones:

No con fundir el orificio uretral con la fosa del clítoris, nunca se forzara, en caso de que

haya dificultades en el sondaje, para evitar producir heridas y hemorragias

Gato

Se utilizaran sondas de 1 o 1,3mm de diámetro

Gata

Generalmente requiere anestesia general o relajante. Se pueden usar anestésicos locales

en forma de spray sobre la vulva

Caballo

Es preciso exteriorizar el pene del saco prepucial.las drogas ataráxicas provocan

relajación de la músculos retractores del pene, se pueden usar sedantes. Se utilizaran

catéteres de plástico de 8 a 10mm de diámetro x 1 metro de longitud

Yegua

Se puede usar catéter metálico de 40 cm de longitud y el especulo correspondiente

29



Vaca

Debe tenerse el cuidado de no confundir el orificio uretral con el divertículo vaginal

suburetral; para ello se introducirá una mano en la vagina y se localizara el divertículo

introduciendo un dedo en el, después trataremos de localizar el orificio de la uretra e

introduciremos el catéter, que iremos dirigiendo hacia dichos orificios.

Toro y novillo

Se precisan sondas de dos mm de diámetro por 100 cm de longitud. También se utilizaran

drogas ataráxicas que bloqueen el nervio pudendo y que relajen los músculos retractores

del pene, facilitando asi la salida del mismo y el desenroscamiento de la curvatura

sigmoidea. Los catéteres normalmente son de polietileno con extremos redondeados

Oveja

La presencia de un diverticulo suburetral hace virtualmente imposible dirigir el catéter

hacia la uretra

Verraco

No se puede cateterizar por la imposibilidad de extraer el pene

Cerda

Introduciremos el catéter ayudándonos con los dedos índices y medio. Localizaremos la

fosa prepucial con el dedo índice y con el medio el orificio uretreal..

CARACTERÍSTICAS DE LA ORINA

La orina es un liquido orgánico de desecho elaborado por el riñón durante su función

como reguladores del medio interno.

Examen de la orina

Cuando se recogen muestras de orina para análisis deben anotarse los siguientes datos:

Especie, raza, edad y sexo del animal

Nombre y dirección del propietario

Fecha, hora y método de recogida

Tipo de conservante utilizado, en su caso

En el laboratorio se anotaran los siguientes datos: Fecha y hora de realización del

examen

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Los exámenes que se pueden llevar a cabo son los siguientes:

- Examen físico

- Examen químico

- Examen del sedimento urinario

- Examen bacteriológico, tóxico y otros que no corresponden al laboratorio de

patología general (biopatología)

EXAMEN FÍSICO DE LA ORINA

Color

Es generalmente amarillo claro debido a la presencia del pigmento urocromo , pequeñas

cantidades de uroeritrina y urobilina. Las distintas tonalidades que puede adoptar estará

en función de las variaciones en la concentración de la orina. En el caballo puede mostrar

hasta un color semejante a lechada de azufre o a cerveza debido a la abundancia de

carbonatos de cal.

La orina puede tener casi cualquier color y estos cambios de coloración no son siempre

indicativos de anormalidad pues el color puede ser el resultado de

- Un proceso patológico

- Presencia de una droga o sus metabolitos

- Determinados alimentos

Para tener una aproximación de cuál puede ser la causa de un color anómalo en la orina,

será necesario tener información acerca de:

- Antecedentes de la ingestión de alimentos

- Antecedentes de la ingestión de drogas

- Saber si el cambio de color es transitorio

Otras Variaciones del Color

Orinas incoloras

En las grandes diuresis por mercuriales

En la diabetes insípida (densidad baja)

En la diabetes mellitus (densidad alta)

En la insuficiencia renal avanzada

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Después de taquicardias paroxísticas

Orinas amarillas intensas

Ictericia de cualquier origen en sus comienzos (después evoluciona a rojo

parduzco y más tarde a tono verdoso o negro)

Anemia perniciosa

Anemia hemolítica

Tras terapéuticas con: flavinas, acido pícrico, furadantina, riboflavina, etc.

Orina roja o rosada

En las oligurias febriles infecciosas: orina cargada o encendida

En las oligurias de las insuficiencias cardiacas congestivas

En las hematurias

Después de la ingestión de: piramidon, xantoína, etc.

Porfirinurias en relación con: intoxicación por plomo

Anemia perniciosa

Anemia hemolítica

Ingestión copiosa de remolacha, setas, etc.

Orina parda (cerveza negra)

Ictericia parenquimatosa y mecánica

Hematurias por glomerulonefritis aguda

Ruibardo, sen y otros purgantes si la orina es acida

En instilaciones de argirol

En las methemoglobinurias: intoxicación por clorato de potasio, nitritos, anilinas,

etc

Orina negruzca

Melanosarcoma y otros tumores melánicos

En la alcaptonuria o alteración del metabolismo de la tirosina (se elimina acido

hemogentinisico).

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En ciertas hematurias graves.

En intoxicación por acido fenico.

En la fiebre hemoglobinurica del paludismo.

Orina lechosa

En la quiluria.

En lipurias masivas (hiperlipemia esencial o hiperlipemia sintomática, diabetes

graves, pancreatitis crónica, nefrosis lipoidea).

Piurias marcadas.

Orina verdosa o azulada

Ictericias antiguas.

Intoxicaciones por timol.

Ingestión de xantoinas si la orina es acida.

En la eliminación de azul de metileno.

Infecciones por B piociánico

Orina turbia

En todas las piurias

En las fosfaturias (aunque sea normal la cantidad de fosfatos el ph alcalino los

precipita)

Orinas fermentadas

Transparencia

Transparencia normal

- En carnívoros es clara y transparente

- En equinos es turbia y opaca (por la cantidad de carbonato cálcico en suspensión)

- En rumiantes es transparente.

Transparencia anormal

Transparente y clara: en toda poliuria y en équidos con orina ácida.

Turbia: en carnívoros, rumiantes y cerdos: indica anormalidad. En équidos, si el

enturbiamiento no es debido a carbonato cálcico siempre patológica.

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Causas de turbidez

- Fermentación amoniacal producida en vías urinarias (precipitan masas cristalinas

de fosfato, carbonatos y fosfatos triples).

- Moco, exudado o pus procedente de procesos inflamatorios de las vías urinarias y

órganos genitales que comunican con ellos.

- Pielonefritis bacterianas (aparecen masas espesas gelatinosas en orina).

- Nefritis y nefrosis intensas (enturbiamiento en forma de hilos-cilindros).

- Enfermedades inflamatorias del riñón y vías urinarias, debido a la presencia de

bacterias mezclada con sangre.

- Tras reposo o invasión de bacterias procedentes del medio ambiente.

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- Presencia de células procedentes del riñón y vejiga.

- Existencia de abundantes eritrocitos (pierde transparencia y aparece tonalidad

lacada).

- Presencia de leucocitos (se observa turbidez blanco lechosa con sedimento)

- Grasa (aspecto lechoso)

- Exceso de solutos inorgánicos.

- Uratos amorfos.

Viscosidad: se debe a la mayor o menor presencia de sustancias coloidales, la

consistencia anormal se produce como consecuencia de residuos procedentes de

reacciones inflamatorias del aparato urinario.

Olor: La orina recientemente excretada tiene un olor particular para cada especie animal:

Perro y gato: Olor fuerte, más bien desagradable a caldo de carne.

Equidos: olor aromático fuerte.

Rumiantes: olor aromático menos fuerte.

Suidos: Olor fuerte y desagradable.

Entre los olores anormales tenemos:

Amoniacal: en cistitis y otros procesos inflamatorios de vías urinarias

Fétido: consecuencia de la presencia de abundante pus.

Pútrido: cuando hay destrucción de los tejidos.

Olor a frutas maduras: en la cetosis de la vaca, gestación patológica, diabetes

glucosúrica, ascaridiasis de terneros y corderos.

Olor a ciertos medicamentos: Acido fénico, alcanfor, aceite de trementina.

VOLUMEN: La cantidad de orina excretada por los riñones depende de:

Presión hidrostática con que filtran los glomérulos,

Presión oncótica de las albuminas del plasma sanguíneo.

Cantidad de sangre que circula por el riñón en la unidad de tiempo.

Capacidad funcional de los epitelios renales.

Resistencia de las vías urinarias eferentes.

Factores que afectan el volumen de la orina:

a) Cantidad de líquido ingerido por el animal.

b) Temperatura y condiciones ambientales.

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c) Tipo de dieta.

d) Tamaño corporal del animal.

e) Actividad del animal.

Poliuria: Se define como la formación y eliminación de grandes cantidades de orina.

Puede ser fisiológica y patológica.

Oliguria: Es la disminución de la capacidad renal para formar orina o para eliminarla del

organismo.

Anuria: La falta total de emisión de orina, se presenta en obstrucciones uretrales o

ureterales bilaterales y en la rotura de vejiga de la orina.

PESO ESPECÍFICO O DENSIDAD:

El peso especifico de la orina expresa la cantidad que tiene el riñón para concentrar y

diluir el filtrado glomerular. Se determina por:

Refractometría:

El índice de la refracción es la relación del valor de la velocidad de la luz en el aire con el

de la velocidad de la luz en solución. Esta relación varia directamente con el numero de

partículas disueltas en la orina.

Con un urodensitómetro:

Hidrómetro de diseño especial que flota alto en orina concentrada y baja en orina diluida.

Está calibrado con una escala de 1000 a 1060.

EXAMEN QUIMICO

pH: está influenciado por la composición del alimento y el metabolismo del animal.

Equidos y rumiantes excretan una orina alcalina; carnívoros orina acida; suidos tienen

una orina acida cuando la dieta contiene grandes cantidades de proteínas y cereales, y

orina alcalina cuando se alimentan de con hidratos de carbono.

Técnicas para la determinación del pH urinario:

1. Mediante pH metro con electrodo de vidrio, método muy exacto.

2. Mediante Papeles absorbentes, indicadores ácido-básicos que toman color

diferente según el pH de la orina

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3. Mediante tiras indicadoras que llevan almohadillas correspondiente al pH, estas

contienen una combinación de indicadores rojo metilo y azul de bromotimol que

producen una serie de colores desde anaranjado (pH 5) hasta verde y azul (pH 9).

Aciduria:

En acidosis metabólicas y respiratorias.

Medicación acidificante.

Diarreas graves.

Dietas excesivamente ricas en proteínas.

Procesos de adelgazamiento

Tras esfuerzo o fatiga excesiva

Alcaluria:

En alcalosis sistémicas.

Fisiológicamente, en herbívoros que ingieren dietas vegetales.

Retraso en el examen de las muestras y conservación de las mismas.

Infecciones en el tracto urinario asociados con presencia de microorganismo que

transforman la urea en amoniaco y bicarbonato.

La orina alcalina contribuye a formación de cálculos de carbonato cálcico, fosfato

cálcico y fosfato amonicomagnesico.

Proteínas

En condiciones normales, la orina no contiene sustancias protéicas, al menos en

cantidades suficientes para ponerlas de manifiesto con las técnica analíticas de rutina.

Las que se pueden encontrar con mayor frecuencia son las que proceden del plasma

sanguíneo y constituyen una mezcla de albúminas y globulinas.

La importancia diagnóstica de las distintas proteínas es diferente, por orden de

importancia podemos dividirlas en:

- Proteínas verdaderas: son las proteínas coagulables o hemáticas (albúmina,

globulinas, fibrinógeno).

- Falsas proteínas: entre las que se encuentran:

Derivados de hidrólisis de las proteínas (albumosas, proteosas, peptosas).

Proteínas específicas (albumina de Bence-Jones).

Otras proteínas: seudoalbumina, albumina espermáticas, nucleoalbúminas,

mucoproteínas.

La presencia de albúmina o cualquier otra de estas proteínas en orina es un índice de

alteración orgánica; sin embargo, las hembras pueden presentar una ligera albuminuria

37



fisiológica durante el periodo estral o en momentos de la gestación próximos al parto.

También es fisiológica la proteinuria de los primeros días de vida de los animales.

Clasificación de las proteinurias en función de su origen

1. Proteinurias renales glomerulares

2. Proteinuria renal tubular:

3. Proteinurias no renales

4. Proteinurias de origen ajeno al aparato urinario

Clasificación de las proteinurias en función de su intensidad

Proteinuria marcada: se excretan unos 4 gr./día. Es típica en síndrome nefrótico.

Proteinuria moderada: de 0.4 a 4 gr./día de excreción proteíca. Aparece en la mayor

parte de las enfermedades renales.

Proteinurias mínimas: de unos 0.5 gr./ día. Aparecen en:

Podemos encontrar proteinurias funcionales o fisiológicas que son a consecuencia de

vasoconstricción renal. Son proteinurias benignas con escasa eliminación proteica

transitoria, que generalmente no se acompañan de sedimento urinario, pueden aparecer

en las siguientes situaciones:

- Tras esfuerzos intensos y continuos.

- En estados febriles.

- Tras crisis vegetativa (cólico, estrés, miedo)

- Tras convulsiones.

- En dietas excesivas ricas en proteínas.

- Exposiciones bruscas al calor o al frío.

Técnicas para la determinación de proteinurias:

1. Mediante tiras reactivas

2. Prueba de calor

¿cómo podemos diferenciar la turbidez de origen proteico de la de origen salino?

1. Aclarar la orina turbia por centrifugación

2. Añadir de 2-3 gotas de Ac. acético al 50% (v/v).

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3. Colocar aproximadamente 3 ml de orina turbia en un tubo de ensayo y otros 3 ml

en otro tubo que guardaremos como testigo.

4. Calentar al tubo hasta la ebullición moviéndolo continuamente sobre la llama para

evitar proyecciones del líquido.

5. Evaluar la turbidez usando un fondo negro y comparando con la orina testigo.

Al comparar observaremos:

- Que no se ha formado turbidez (reacción negativa o no hay proteínas).

- Que si se forma turbidez. En este caso añadiremos 4-6 gotas de acido al 30% o 4-

6 gotas de acido nítrico al 1/3.

Tras añadir el acido observaremos:

No desaparece la turbidez: albumina verdadera.

Si desaparece la turbidez:

- Desaparece y se forman burbujas, señalamos la presencia de carbonatos

- Desaparece la turbidez sin formar burbujas, es debido a la presencia de fosfatos.

3. Prueba de ácido sulfosalicílico:

Se basa en el principio de que el ácido precipita a las proteínas de forma irreversibles

4. Prueba de Heller:

Basada en la propiedad que tienen los ácidos fuertes de coagular las proteínas.

5. Método cuantitativo de DHOMMEE:

Utiliza ácido tricloroacético, ácido cítrico, y ácido pícrico.

6. Determinación de la proteína de BENCE-JONES

Esta proteína está constituida por globulinas. Se observa en procesos de mieloma

múltiples y amiloidosis generalizada y se diferencia de otros tipos de proteinurias porque

coagula de 45-60° C , disolviéndose si calentamos hasta ebullición.

7. Método cuantitativo de ESBASH

Mediante albuminómetro de Esbash.

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Glucosa: es el azúcar que se busca en la orina, aunque pueden existir otros hidratos de

carbono de importancia diagnóstica. La glucosa se filtra en libremente por glomérulo y

entra en la parte proximal del túbulo, donde un sistema de transporte activo especifico

reabsorbe y devuelve circulación. Casi toda la glucosa es reabsorbida del filtrado túbulo-

proximal y muy poca pasa a la orina, pero en algunos casos la concentración de la

glucosa puede exceder la capacidad del sistema de transporte tubular y entonces la

glucosa pasa a la orina. Esto ocurre:

1- Cuando el nivel de glucosa plasmática es excepcionalmente elevado.

2- Cuando la capacidad de reabsorción del mecanismo tubular está deteriorada.

La presencia de cantidades detectables de glucosa en orina se conoce indistintamente

como glicosuria o glucosuria.

Causas de glucosurias

Fisiológicas

Situaciones que estimulan la producción de epinefrina y liberación de

glucocorticoides: ejercicios violentos, miedo, estado de shock.

Alimentación excesivamente rica en carbohidratos

Aumento de la liberación de glucosa a partir del glucógeno hepático

Hiperglucemia consecutiva a la inyección de glucocorticoides, epinefrina,

soluciones de dextrosa.

Patológicas

Procesos renales

En algunos casos de nefritis.

En la enterotoxemia de la oveja por Cl. Perfringens.

Tras la administración de grandes dosis de vit.C.

De origen toxico o medicamentoso.

Procesos extrarrenales

Diabetes Mellitus.

Estado de pancreatitis que conlleva a la disminución en la producción y liberación

de insulina.

Hipertiroidismo.

Enfermedades hepáticas crónicas.

Entre las técnicas para determinación de la glucosa:

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1- Las basadas en la reacción de la glucosa-oxidasa

2- Las basadas en las propiedades reductoras de la glucosa

Cuerpos cetónicos: son metabolitos intermedios en el proceso normal del catabolismo

lipídicos. Su presencia en la orina es consecuencia de dos situaciones:

1- Aumento de de la cetogénesis debido a:

Alteraciones en el metabolismo intermediario de las grasas.

Ingestión de proteínas ricas en aminoácidos cetogeneticos.

Falta de aporte suficiente de hidratos de carbono con la ración.

2- Disminución de la cetolosis hepática.

En condiciones fisiológicas, en orina existen pequeñas cantidades de cuerpos cetónicos,

pero tan mínimas que no se detectan con los métodos corrientes de análisis, su presencia

en el diagnóstico debe de considerarse como anormal.

Determinación de cuerpos cetónicos

1. Utilizando el reactivo de Gerhart (cloruro férrico al 10%) que reacciona únicamente

con el ácido acetatico. Este es un método poco sensible e inespecífico, por tanto

poco recomendable.

2. Reacciones connitroprusiato, es de quince a veinte veces más sensible para el

ácido acetatico que para la acetona, pero reacciona con ambos para producir un

color purpura en medio alcalino.

Situaciones en las que aparece cetonuria

- Diabetes mellitus: en la que está dañado el metabolismo de la glucosa.

- En bovinos que padecen cetosis después de un periodo de inanición por falta de

consumo de alimentos

- Hipofunción de la corteza suprarrenal.

- Toxemia de gestación en óvinos.

Pigmentos biliares

Bajo este término se incluyen una serie de sustancia, las más importantes son:

bilirrubina, biliverdina, urobilinógeno, urobilina y estercobilinógeno.

Bilirrubina

Cuando la ruta de salida está deteriorada (obstrucción del conducto biliar, debido a

cálculos o tumores, o bien obstrucción intrahepáticas debida a hinchazón de células

dañadas), la bilirrubina conjugada refluye nuevamente al torrente circulatorio.El

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descubrimiento de bilirrubina en orina indica un nivel sérico elevado de la forma directa

que se asocia a trastornos obstructivos hepáticos.

Determinación de bilirrubina en orina:

1. Prueba de agitación (Prueba presuntiva)

Si se forma espuma amarilla que perdura es positiva a presencia de pigmentos biliares.

2. Prueba con tiras reactivas de inmersión (semicuantitativas).

3. Tabletas ICTOTEST (Ames). Constituyen una prueba más sensible que las tiras de

inmersión. Su sensibilidad es de 0.05-0.1 mg/100ml.

Se dejan caer 5 gotas de orina sobre el papel de amianto, de manera que la

bilirrubina se absorba en superficie.

Se coloca una tableta ICTOTEST en la parte húmeda del papel.

Ponemos dos gotas de agua en la tableta.

Si hay bilirrubina, en 30 segundos, se observará cambio desde azul a purpura.

4. Prueba de Fouchet (test de gota de Harrison).

5. Reacción de Gmelin:

Situaciones en las que aparece bilirrubina en orina:

- Estasis biliar.

- Trastorno del parénquima hepático.

- Obstrucción de las vías biliares por tumores, parásitos o cálculos.

- Anemias hemolíticas cuando está dañado el hígado.

Consideraciones a tener en cuenta según las diferentes especies animales:

Carnívoros

En estados fisiológicos, febriles o como consecuencia de inanición pueden dar test

débilmente positivos.

Bóvidos

La interpretación de la bilirrubina en esta especie debe de ser muy cuidadosa atendiendo

a la anamnesis del animal en cuestión, pues se ha comprobado que solo un 60% de los

bóvidos que padecen hepatopatía evidencian bilirrubina en sus orinas.

Urobilinógeno en orina

Una cantidad muy pequeña de urobilinógeno pasa a sangre y por ser hidrosoluble se

excreta a través del riñon; por ello siempre encontraremos en la orina trazas de

urobilinógeno.

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Determinación de urobilinógeno en la orina:

1. Mediante tiras de inmersión (método semicuantitativo).

2. Test cualitativo de Ehrlich

Basado en que el urobilinógeno reacciona con el paradimetil-aminobenzaldehido en

solución clorhídrica dando intenso color rojo permanente.

3. Método de Wallace-Diamod (basado en la misma prueba de Ehrlich)

4. Test cualitativo de Schlessiger (se utiliza una solución saturada acetato de zinc en

etanol).

5. Métodos cuantitativos

Las tiras reactivas ya indicadas.

Test de Watson (reactivo Ehrlich y lectura espectrofotometrica).

Situaciones en las que interesa investigar urobilinógeno en orina:

Es normal la presencia de cantidades muy pequeñas de este pigmento en orina e indicará

que el conducto biliar está abierto:

Especies Cantidades normales

Equidos 0.5 – 2.2 mg/dl

Bóvidos 0.5 – 2.0 mg/dl

Perro 0.2 – 1.6 mg/dl

Cerdo 0.9 – 3.1 mg/dl

Significado Patológico:

Ausencia de urobilinógeno en orina

- Obstrucción completa del conducto biliar.

- Como consecuencia de la terapia con antibióticos debido a la disminución de la

acción bacteriana sobre la bilirrubina a nivel intestinal.

- Diuresis asociadas a procesos renales crónicos en los que hay dilución de los

niveles de urobilinógeno.

- En perros envenenados con tetracloruro de carbono.

Aumento de urobilinógeno en orina:

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- En procesos hemolíticos en los que aumenta el urobilinógeno eliminado por el

riñón (anemia hemolítica, anemia perniciosa).

- Cuando hay reducción funcional de la masa hepáticos en los que disminuye la

capacidad del hígado para eliminar el urobilinógeno.

DIAGNOSTICO DIFERENCIAL SEGÚN LOS NIVELES DE BILIRRUBINAS Y

UROBILINOGENO EN DISTINTOS ESTADOS PATOLOGICOS

Urobilinogeno en orina Bilirrubina en orina

Individuo normal Normal Negativo

Enfermo hemolítico Elevado Negativo

Enfermo hepático Elevado Negativo

Obstrucción biliar Bajo Positivo

Ácidos y sales biliares

Las sales biliares, el ácido glicocólico y el ácido taurocólico, generalmente solo aparecen

en orina cuando esta contiene pigmentos biliares.

La presencia de ácidos y sales biliares da a la orina dos características:

- Disminuye la tensión superficial y favorece la producción de espuma al agitar.

- La caída al fondo del recipiente que contiene la orina, de sustancias no miscibles

con ella y que se pueden añadir en forma de polvo.

Nitrito urinario

La presencia de nitritos en orina puede utilizarse para indicar la existencia de bacterias (E.

coli, Proteus, Klebsiella, Enterobacter, corinebacterium y salmonella reducen el nitrato a

nitrito; enterococus, Staphylococus y pseudomonas son formadores parciales de nitrito).

Dan falsos positivos: las orinas que llevan mucho tiempo recolectadas.

Dan falsos negativos: ácido ascórbicos a altas dosis y antibióticos.

Determinación de nitritos urinarios:

Mediante tiras reactivas las cuales son producidas por numerosas casas comerciales.

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Sangre y pigmentos hemáticos

La presencia de sangre o hemoglobina libre en orina es siempre patológica y recibe

nombres distintos según se trate de uno u otro elemento:

Hematuria: Presencia de sangre total en orina.

Hemoglobinuria: Presencia de pigmento hemático libre en la orina.

Determinación de hematíes, hemoglobina o mioglobinas en orina:

Es normal encontrar unas cuantas células hemáticas en orina (5/µ), considerándose

como microhematuria fisiológica, pero si aparecen más células por campo, a altos

aumentos, indican hemorragia, inflamación, necrosis, traumas o neoplasias.

Análisis para detectar la presencia de sangre o pigmentos sanguíneos, los clasificamos

en:

1- Examen microscópico: Se centrifuga la orina y se hace un frotis del sedimento con

el fin de observar los hematíes.

2- Examen espectroscópico: anotando las bandas de absorción de la muestra de

orina y comparando las observaciones con tablas de referencia a fin de identificar

la hemoglobinas o sus derivados.

3- Análisis químico: Es la forma más fácil para diferenciar si se trata de uno u otro

pigmento:

- Centrifugamos una parte de orina y comparamos el sobrenadante con otra

parte alícuota de orina sin centrifugar.

El sobrenadante de la muestra con hemoglobinuria o mioglobinuria

permanecerá del mismo color que la alícuota sin centrifugar.

El sobrenadante de la muestra con hematuria tendrá menor tono o será

normal en color.

- Test de solubilidad de mioglobinas para diferenciarla de la hemoglobina:

Ajustar el pH de la orina a 7.5 - 8.0 con NaOH.

Añadir 2.8 grs de sulfato amoníaco a 5 ml de orina y disolver mezclando.

Centrifugar o filtrar la mezcla.

Si el centrifugado o filtrado tiene un color anormal, existe mioglobinas en la

muestra de orina. Si el color es normal, entonces se tratará de

hemoglobina.

- La comparación del aspecto del plasma nos sirve para diferenciar una

hemoglobinuria de una mioglobinuria.

- Mediantes tiras reactivas que fabrican en diferentes laboratorios .

Situaciones y causas de hematuria y hemoglobinurias:

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La hematuria no es un indicador muy específico de que exista enfermedad en el tracto

urinario. Una vez que se ha demostrado que si existe, hay que localizar la fuente, que

puede ser renal o extra renal y ello se interpreta teniendo en cuenta otros hallazgos

del sedimento urinario.

Hematurias renales:

Glomerulonefritis aguda y lesión tubular intensa.

Nefritis agudas y purulentas.

Pielonefritis y pielitis.

Traumatismo a nivel renal.

Litiasis renales.

Neoplasias renales.

Infarto renal

Hematurias extrarrenales:

De origen uretral(traumatismo, litiasis)

De origen prostático (tumores y prostatitis)

De origen vesical: son hematurias que aparecen al final de la micción

(traumatismo, litiasis, pólipos vesicales, cistitis agudas, cáncer de vejiga).

De origen ureteral: La causa más frecuente es la migración de cálculos a lo largo

de uréter.

Parásitos (sioctophyma renal y Capillaria plica).

Traumatismo iatrogénico (cateterización y palpación de la vejiga y del riñon).

Hematuria enzootica bovina.

Inflamación o tumores del tracto genital.

Estro.

Traumatismo a nivel del tracto genital.

Las hemoglobinurias suelen ir ligadas siempre a un aumento de la concentración de

hemoglobina plasmática. Casi siempre relacionadas con enfermedades prerrenales que

producen hemólisis intravascular. Las hemoglobinurias vienen a ser la expresión de una

enfermedad general mientras que las hematurias están relacionadas con alguna

alteración localizada o generalizada del aparato urinario.

Situaciones en las que podemos encontrar hemoglobinurias:

- Reacciones frente a transfusiones.

- Anemias hemolíticas (anemia infecciosa equina, leptospirosis, babesiosis,

enfermedad hemolítica del recién nacido, agentes tóxicos como nabos silvestres,

anaplasmosis, epirotrozoonosis, hemoglobinuria bacilar, hemoglobinuria bacilar,

hemoglobinuria postpartum).

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- Ciertas neoplasias.

- Enfermedad autoinmunes

- Intoxicaciones por fenotiacinas.

Mioglobina

La mioglobina es un pigmento de peso molecular menor que la hemoglobina y por tanto

atraviesa fácilmente los filtros renales. Es relativamente rara en los animales, pero puede

aparecer en las siguientes situaciones:

Mioglobinuria paralitica equina (azoturia).

Distrofia muscular enzootica de terneros y corderos (la orina no se colorea

intensamente porque los músculos no tienen suficiente mioglobina cuando los

animales son jóvenes).

Aplastamiento y cirugía que dañe el tejido muscular.

Crisis epilépticas.

Ejercicio muy intenso.

Enfermedades víricas.

Este tipo de procesos provocan un síndrome clínico que se manifiesta por la presencia

de: mioglobina, creatinina, creatinakinasa, potasio y fosfato inorgánico en el torrente

circulatorio.

El procedimiento adecuado para la determinación de mioglobinuria es por

inmunodifusión.

Examen Sedimento Urinario

El examen del sedimento urinario se hace para detectar la presencia de elementos

figurados y partículas microscópicas en la orina.

Se pueden apreciar cristales que pueden ser consecuencia de saturación de la orina con

productos excretorios de alguna perturbación metabólica o de alguna droga. Los cilindros,

conglomerados alargados de material proteico, son casi siempre significativos. También

se pueden apreciar desechos y materias amorfas en cantidades variables sin ninguna

significación clínica.

Lo más importante del análisis del sedimento no es identificar cristales ni otros elementos

de desecho sin importancia, sino tener un buen conocimiento de lo que no es fisiológico.

Preparación del sedimento

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Lo normal es hacer una centrifugación previa de la orina, ya que una orina sin centrifugar

es apta para visualizar células pero no para detectar cilindros.

Método a seguir en una preparación <<en fresco>>:

1- Recoger la orina de forma adecuada.

2- Mezclar bien la muestra y pasar 10 ml de orina a un tubo de centrifugación

cónico.

3- Centrifugar a 1000 – 1500 r.p.m. durante 5 minutos.

4- Descartar el sobrenadante.

5- Re suspender y mezclar el sedimento con la pequeña cantidad de

sobrenadante, mediante ligeros golpes con los dedos.

6- Si se desea, se puede añadir aquí el colorante.

7- Colocamos aquí una gota de sedimento sobre una lamina portaobjetos para

microscopio y colocamos un cubre sobre ella. La gota no debe de ser

demasiado grande y debe de evitarse la formación de burbujas.

8- Examinar la preparación antes de que se produzca evaporación.

9- Examinar el portaobjetos primero con objetivo de pequeños aumentos (10x) en

un área limpia. Después reducimos la intensidad de la luz al máximo o

utilizmos varios campos en busca de cilindros. Al final enfocamos con la lente

de de aumento (40 x, 100 ó más).

Normalmente no es necesario teñir para identificar los componentes del sedimento,

aunque a veces pueden utilizarse las tinciones de Leishman o Gram para ayudar a

diferenciar glóbulos blancos o bacterias.

Examen del sedimento

El examen del sedimento lo podemos agrupar en tres grandes apartados:

I. Estructuras organizadas

Células de descamación: La presencia de células epiteliales puede detectarse en

orinas completamente normales debido al proceso continuo de descamación

fisiológica que sufre todo epitelio.

Su presencia es patológica cuando existe un gran número debido a irritaciones por:

- Microorganismos

- Productos químicos (de acción irritante, casuística o alérgica).

- Cuerpos extraños (Cálculos, sondas, catéteres).

- Procesos degenerativos (presencia de células anormales).

- Procesos invasivos destructivos.

48



Células de epitelio columnar o cuboide: revisten el área anatómica que va desde la

capsula de la nefrona hasta los tubos colectores, pasando por los túbulos proximales y

distales.Aparecen en situaciones patológicas como: Glomerulonefritis, Pielonefritis,

Pielonefritis, esclerosis renal y amiloidosis.

Células de epitelio de transición: recubren cálices, pelvis renal, uréteres, vejiga y uretra.

Constan de tres capas: basales, intermedias y células superficiales.

Células del epitelio escamoso: Tapizan algunas zonas de la vejiga, uretra y vagina de la

zona superficial. Son polimorfas, grandes de perfiles irregulares y núcleos pequeños.

Aparecen en procesos tipo cistitis, uretritis, vaginitis.

Otros tipos de células de descamación:

- Células de origen prostático.

- Células de las vesículas seminales.

- Células histiocitarias.

- Células malignas.

Células hemáticas:

Hematíes: Aparecen como formas circular, bicóncava, no tienen núcleos, y refractan un

poco de luz, su coloración en orinas normales es amarillo-verdosa; en orinas hipertónicas

tienen aspecto irregular, estrellado; por el contrario en orinas de poca densidad aparecen

dilatadas de forma globosa.

Es fisiológico encontrar de 3-5 hematíes por campo; más de cinco se considera como

patológico.

El origen de los hematíes contenidos en un sedimento urinario puede venir dado por:

a) Factores extrínsecos:

- Proceso invasivo-destructivos.

- Afectando al sistema excretor (tumores retroperitoneales y tumores

endometriales).

b) Factores intrínsecos:

- Causas nefrológicas: macro hematurias, microhematuria (glomerulonefritis,

púrpuras, lupus eritematoso y Pielonefritis).

- Causas urológicas: Infecciones (tuberculosis, cistitis), Invasivas ( tumores),

litiasis, Obstructivas (adenoma prostático), congestivas (prostatitis).

Leucocitos

49



Son células redondeadas mono o polinucleadas de tamaño intermedio entre los hematíes

y las células epiteliales.

Los leucocitos pueden pasar activa o pasivamente a la orina:

Activamente: Son granulocitos morfonucleares y su presencia es debido a procesos

fagocitarios, llegando mediante diapédesis entre las células tubulares del epitelio a la

orina, o bien a través de las lesiones producidas por el agente agresor.

Pasivamente: Se observa en aquellas situaciones en las que existe un proceso invasivo

que afecta al sistema vascular y produce rotura de las paredes de los vasos del sistemas

urinario (intersticio)o vecino a él (yuxtarrenal, yuxtavesical…). En este caso predominan

los granulocitos polinucleares, pero puede haber otro tipo de leucocitos.

Una variación de los leucocitos son los piocitos: granulocitos polinucleares que han

efectuado la fagocitosis.

Es normal que aparezcan 2-3 leucocitos en los machos y hasta 7 leucocitos por campo

en las hembras. Cualquier cifra superior se puede considerar como Piura. Aparecen en

las siguientes situaciones:

- En infecciones acompañadas de bacterias (si además se aprecian cilindros el

origen estará en una infección renal).

- Infecciones tuberculosas: cuando aparecen piurias sin bacterias y las orinas son

ácidas.

- Tumores renales o de las vías (uro epitelial).

- Síndrome nefrótico y glomerulonefritis.

Cuando la Piura es abundante la orina aparece turbia y muestra aspecto lechoso, pero

este mismo aspecto presenta la fosfaturia.

Espermatozoides

Tienen características morfológicas inconfundibles con una cabeza pequeña ovalada

seguida de una larga cola móvil. No tiene ninguna significación patológica.

Cilindros

Son formaciones de proteínas y mucopolisacáridos que se forman a nivel del asa de

Henle, tubos contorneados distales y tubos colectores. El tamaño y la morfología están en

función de su origen.

Causas de la formación de cilindros son:

50



Por descamación celular de los túbulos, que suministrarían el material de la matriz y

cuando estas células degenerasen se producirían cilindros granulares gruesos y

evolucionarían a cilindros granulomatoso finos y éstos a cilindros céreos.

Precipitaciones de mucoproteína dentro de los túbulos debido a que, a estos niveles, la

concentración de orina es máxima y la acidez también es importante. Las precipitaciones

produce un gel capaz de atrapar restos celulares. La granulosidad se atribuye a la

agregación de proteínas séricas y no a la rotura celular.

Cuando se aprecian cilindros en el sedimento, la tasa de proteína en orina esta

aumentada. La presencia de proteína en el filtrado glomerular tiene como consecuencia

inmediata la existencia de un daño en el glomérulo, cuyos poros de la membrana basal se

hallan alterados. Cualquier enfermedad renal que afecte al tamaño o permeabilidad de

estos poros tendrá como consecuencia la perdida de proteínas plasmáticas al filtrado

glomerular.

Cualquier lesión mínima llevará a la consecuencia de pérdida de albúminas (proteína

sérica abundante) y con ello a la posibilidad de formación de cilindros. Conforme avanza

la enfermedad la afectación del proceso es mayor produciéndose el progresivo de

proteínas de mayor peso molecular: alfa- 2 globulina y alfa 1 lipoproteínas, beta-

lipoproteinas. Esto conducirá a cilindros de caracteres microscópicos distintos que nos

dará idea del grado evolutivo de la enfermedad.

La presencia de cilindros expresa siempre congestión e irritación a nivel renal y los hay de

muy diversos tipos:

1. Cilindros hialinos: contienen únicamente proteínas y mucopolisacáridos, son

homogéneos, semitransparentes e incoloros. Todos los demás cilindros tienen una

matriz hialina en la que se insertan otros materiales. Para visualizar es mejor

campo oscuro.

2. Cilindros gránulos-hialinos: son cilindros hialinos que llevan además granulaciones

en superficie de origen variado (minerales, células degeneradas, etc.). Tienen la

misma interpretación fisiopatológica que los cilindros hialinos.

3. Cilindros granulomatosos: contienen granulaciones cubriendo todo el cilindro.

Pueden ser una evolución por degeneración de los cilindros epiteliales,

mucoproteína, material adiposo. Aparecen en trastornos crónicos del riñón (nefritis

intersticial crónica) e insuficiencia renal en el perro.

4. Cilindros bacterianos: Formados por fibras de microglobulinas con bacterias y

leucocitos. Clínicamente significa Pielonefritis.

5. Cilindros leucocitarios: Son acúmulos de leucocitos que se forman a nivel de la

vejiga o uréteres.

51



6. Cilindros epiteliales: Son estructuras cilíndricas que tienen en su interior células

desprendidas del epitelio tubular en los que pueden observarse los núcleos.

Clínicamente aparecen en nefritis aguda, síndrome de hipertensión prolongada e

ingestión de veneno (fosforo, tetra cloruro de carbono, cloruro mercúrico).

7. Cilindros Hemáticos: Se trata de cilindros hialinos que han absorbido en su

superficie hematíes. La presencia de cilindros hemáticos y/o leucocitarios permite

deducir que estas células proceden del parénquima renal. Aparecen clínicamente

en enfermedades renales a nivel glomerular (glomerulonefritis) y procesos

invasivos intersticiales (tumor renal, litiasis).

8. Cilindros granulo-lípidos: Son cilindros hialinos que han absorbido granulaciones

de naturaleza lipidica, que les dan aspectos de cuerpos refractiles. Para

identificarlos se utiliza el microscopio de contraste de fase o tinción de Sudán-III.

Clínicamente aparece en diabetes Mellitus en perros, nefrosis e hiperlipemias o

hipercolesterinemias.

9. Cilindros céreos: Son cilindros formados por la coagulación de beta-lipoproteínas.

Son grisáceas y de aspecto opaco. Clínicamente indican lesiones crónicas en los

túbulos renales, degeneración amiloide y formas muy graves de glomerulonefritis y

Pielonefritis.

10. Cilindroides: son formaciones parecidas a los cilindros pero más largos y finos.

Microorganismos

La orina puede contener un amplio número de microorganismos que pueden indicar o un

proceso patológico propio del tracto urinario o una contaminación ambiental.

1- Bacterias: aparecen como diminutas partículas que presentan movimiento

brozniano o rectilíneo. Clínicamente solo interesan si aparecen en cantidad

abundante. Los procesos clínicos en los que pueden aparecer son: Infecciones

vaginales (cistitis, Pielonefritis) e infecciones en el tracto genital.

2- Hongos: Solo tienen importancia diagnóstica las levaduras, que aparecen como

elementos redondeados semejantes a los hematíes pero incoloro. Para

distinguirlos se hace tinción de Gram. Las levadura se encuentran en la piel,

membranas mucosas, (vagina), y tracto intestinal, por tanto, su presencia en orina

puede deberse a una contaminación de contacto.

3- Protozoos: de importancia clínica son las Trichomonas (tienen aspectos piriformes

de tamaño algo mayor que los leucocitos). Los demás indican contaminación fecal

(Entamoeba, Giardias).

4- Parásitos: con más frecuencia encontramos las Capillarias plica (verme vesical del

perro y del gato), Dyctophyma renale (en el riñon del perro) y Stephanorus

dentatus (en el riñon del cerdo). Los demás géneros que podamos encontrar,

suelen indicar contaminación fecal.

52



Restos fecales: contaminan orina y aparecen en el sedimento estructuras de origen

fecal tales como:

- Fibras musculares procedentes de la digestión de los alimentos cárnicos. Son

de color amarillo con estriaciones.

- Fibras y tráqueas vegetales: se trata de la celulosa indigestible.

- Células vegetales como membranas citoplasmáticas gruesas y vacuolas muy

evidentes.

- Pelos y apéndices vegetales: alargados, afilados, formados por una fila de

células de paredes gruesas.

- Gránulos de almidón.

II- Estructura no organizada

La identificación del tipo de cristales se hace comúnmente a través de su morfología, pero

aparecen dudas en muchas ocasiones, por lo que debemos proceder a pruebas de

solubilidad características.

Elementos mineraloides: Raramente tienen significación clínica. En general se forman

precipitaciones de sales excretadas cuando la orina se retiene en la vejiga o en el vaso de

recolección. La concentración urinaria, el pH y el cambio de temperatura favorecen la

formación de los cristales.

Compuesto de predominio acido: Agrupa a todas aquellas sustancias cuya fase de

cristalización o precipitación ocurre exclusiva o predominantemente a pH inferior a 7.

a) Oxalatos cálcicos monohidratados y di-hidratados: Se pueden presentar en varias

formas: octaedros, o sobres de carta. Son insolubles en ácido acético y soluble en

ácidos minerales. Pueden aparecer en orinas normales, si aparecen en gran

numero podemos pensar en la existencia de diabetes Mellitus o enfermedades

hepáticas, cardiacas o pulmonares.

b) Acido úrico: La morfología es muy variable: prisma, rombo, roseta o fusiforme.

Se disuelven por acción de hidróxido de sodio, pero no con el acido acético ni con

el clorhídrico.Se depositan con el frio y se disuelven al calentar por encima de los

60°C. Clínicamente aparecen asociados a los siguientes procesos: nefritis crónica,

cuadros urémicos y procesos febriles agudos.

c) Uratos amorfos: son sales potásicas, cálcicas, magnesemicas y amónicas del

ácido úrico. Todas, salvo las sales de ácido úrico, son de hábitat ácido. Cristalizan

en forma de agujas o estrellas y aparecen al microscopio con aspecto de un

precipitado amorfo coloreado de amarillo parduzco debido a la absorción de

pigmentos urinarios. Son solubles por el calor y al NaOH e insolubles en ácido.

Pueden confundirse raramente con acúmulos de hematíes y leucocitos.

53



d) Sulfamidas: tienen forma de cristalización semejante a los uratos de sodio y ácido

úrico, pero las sulfamidas son solubles con acetona, mientras que éstos no.

e) Otros compuestos:

- Cristales de tirosina: con morfología de pequeñas aguja ya que se agrupas en

haces estrellado, muy refrigerantes a la luz polarizada.

- Cristales de leucina: Tienen aspecto de glóbulos redondeados con estriaciones

inferiores. La presencia de cristales de tiroxinas o leucinas indica enfermedad

hepática grave, o error congénito que afecta a estos aminoácidos.

- Cristales de ácidos hipúricos: tienen aspecto de prisma aciculares de color

amarillo. Se pueden confundir con cristales de uratos mono- sódicos.

- Cristales de bilirrubina: tienen aspecto de prismas aciculares de color pardo-

rojizo. Son solubles en clororofoma.

Compuestos de predominio básico:

a) Fosfocarbonatos (hidroxiapatia y carboxiapatita): Tienen aspecto semejante a los

precipitados de uratos, y se diferencian porque los fosfocarbonatos tienen hábitat

alcalino, no son nunca coloreados (los uratos se presentan frecuentemente color

amarillo-pardo) y porque son insolubles al calor y muy solubles en ácidos (al revés

que los uratos).

b) Fosfato cálcico: se puede presentar en formas esterales (de roseta a estrella) y en

forma de laminas. Se disuelven en ácido acético diluido.

c) Fosfato amónico- magnésicos estruvita o fosfato triple. Es el cristal más

pleomorfico de todo los existentes en un sedimento urinario. Su aparición en el

sedimento indica la existencia de un proceso infeccioso del tracto urinario debido a

gérmenes urolíticos. Las formas de presentación de los fosfatos amónico-

magnésicos pueden ser variables, pero las más típicas son las de forma prisma

rómbico (tapa de ataúd) y hojas de helecho.

d) Carbonato cálcico: cristaliza en tres formas: romboédrica, hexagonal y

ortorrómbica (las dos últimas propias de los rumiantes, que llegan a formar

concreciones frecuentemente). Es un compuesto normal de la orina de los

herbívoros, de reacción alcalina, donde aparece formando esferas amarillentas

con dibujo radiado, esferas dobles, esferas pequeñas, forma de maza, forma de

palillo. Se disuelven en ácido acético con desprendimiento de CO2.

e) Urato amónico: Aparece formando gránulos redondeados con o sin espícula,

fuertemente estriados a partir de un punto central (radios de bicicleta) que en

presencia de ácidos, desprende olor amoniacal. Presenta un aspecto coloreado

amarillo parduzco debido a la inclusión de pigmentos urinarios en los cristales.

Precipitan con el frío y se disuelven con el calor.

Compuestos anfóteros: Agrupa a todas las sustancias cuya fase de cristalización o

precipitación se encuentra en orinas con un margen que va desde pH 6 - 6.5 a 7.5 – 8.

54



a) Cistina: Aparece cristalizad en forma de laminas hexagonales, incoloras y

transparentes. Cristales de este tipo se encuentran muy raramente en el

sedimento urinario. Si aparece nos indican incapacidad de reabsorción tubular de

este aminoácido, o un defecto enzimático congénito que imposibilita su correcta

utilización.

b) Colesterina: Aparece formando placas rectangulares o romboideas, transparente e

irregulares. No se encuentra en orinas normales. Su presencia suele indicar

obstrucción abdominal o torácica del drenaje linfático retrógrado (causado por

tumor intra-abdominal, aneurisma aórtico o filariosis) o bien rotura de vasos

linfáticos a nivel de la pelvis renal (causado por tumores invasivos o procesos

infecciosos acompañados de litiasis como pielitis, nefritis y cistitis). Son cristales

solubles en éter, alcohol y cloroformo e insolubles en agua, ácidos y álcalis.

c) Creatinina: son cristales de morfología rectangular semejante a los de acido úrico,

pero ésta aparece en medios anfóteros y se disuelve en los ácidos. La creatinina

es un metabolito endógeno procedente de la destrucción del músculo, por lo que

este proceso estará aumentado en las distrofias musculares, miositis difusa y

cristalizará cuando se excrete en grandes cantidades por la orina.

d) Compuestos medicamentoso: Como la aspirina que cristaliza en forma de prisma

rectangular o acicular y al fenotiacinas que cristaliza en forma prismática diversa.

Gránulos o filamentos orgánicos

Gránulos de grasa: Bajo esta denominación se incluyen:

a) Gotas de grasa: Constituida en su mayoría de vaselina y parafina. Carecen de

significación clínica. Tienen morfología redondeada, son incoloras y muy

refrigerantes, aparecen como consecuencia de la utilización de catéteres

lubrificados y empleo de recipientes sucios para la recogida de la orina.

b) Corpúsculos lipídicos: Compuestos por alfa-1 y beta-lipoproteínas, normalmente

agregadas a cilindros, leucocitos o células epiteliales. La morfología es

redondeada y son de tamaño menor que las gotas de grasa, incoloras y

transparentes, se pueden confundir con los hematíes (para diferenciarlos haremos

una tinción con Sudan III, especificas de grasas). Su presencia en el sedimento da

una idea del grado de alteración del glomérulo. Aparecen en metamorfosis grasa

de los túbulos renales, obesidad, diabetes, hipotiroidismo y dietas excesivamente

grasas.

c) Esteres de ácido graso: Gránulos de tamaño semejante al de los leucocitos que

acompañan en ocasiones a la cristaluria del colesterol. Tiene morfología de cruz

de malta.

Gránulos amiláceos: son semejantes a los hematíes pero no tiene significación patológica.

Para diferenciarlos podemos utilizar cualquier sustancia que actúe lisando hematíes.

55



Mucinas: es una secreción del uroepitelio y de las glándulas anexas y tiene acción

lubrificadora. Aparece en orina en pequeñas cantidades. El aspecto que da el microscopio

es el de un una serie de líneas imprecisas, borrosas que se extienden en todas las

direcciones y dan la sensación de no poder enfocar bien.

Gránulos de almidón: Son normalmente contaminante externos. El aspecto que tiene al

microscopio de luz ordinaria es de gránulos redondeados, ovalados o poliédricos del

tamaño de un leucocito. Para diferenciarlos de otras estructuras adicionaremos unas

gotas de lugol, mediante las cuales los gránulos de almidón se teñirán de color violeta.

I. Artefactos y materiales extraños

Son todos aquellos elementos o estructuras totalmente ajenos a la orina y que

además no presentan un valor ni significado patológico reconocido ni el tracto urinario

ni en el organismo.Los principales orígenes de estos artefactos están:

a) En los frascos de recogida: Polen, cabellos, mohos y algas.

b) Artefactos propios del animal objeto de análisis: pelos, hilos de algodón, fibras

sintéticas, esmegma y polvos secantes (talco).

c) Artefactos propios del medio ambiente: ceniza, carbonilla, caspa..

Artefactos de la propia observación: partículas de vidrio, gotas de aire, portaobjeto con

rayadura.

56



UNIDAD III: LABORATORIO CLÍNICO PARASITOLÓGICO

INTRODUCCIÓN

El examen coproparasitario, es un conjunto de técnicas diagnósticas que constituyen la

indicación metodológica para la identificación de la mayoría de las enteroparasitosis. Su

eficacia y sensibilidad para establecer un diagnóstico correcto dependen de la adecuada

indicación y preparación de la muestra, los datos clínicos y antecedentes de interés que

sean aportados al laboratorio y de su correcta y completa ejecución con examen directo

microscópico, enriquecimiento y examen macroscópico final.

Debe tenerse en cuenta, para efectuar con éxito el examen coproparasitario, la adecuada

obtención de tres muestras mínimas de materia fecal, debidamente obtenidas mediante:

preparación del paciente, correcta preparación del material y cronograma de obtención.

Una muestra correcta de materia fecal para el examen coproparasitario debe ser

suficiente (más de 50 g), reciente (preservarla a 4ºC y aplicar conservadores en plazos

mayores), correctamente rotulada (nombre del paciente y fecha de emisión), en frasco de

vidrio o plástico transparente, limpio, seco y de boca ancha con tapa rosca y sin mezcla

de orina (para evitar deterioro del parásito o dificultades para extender frotis de

coloración).

El cronograma de obtención del material debe considerar que: muestras únicas solo

permiten diagnósticos positivos en 60% de las materias con parásitos; los parásitos

(protozoarios y helmintos) tienen ciclos de eliminación de huevos y quistes con períodos

negativos para la presencia de los mismos en las materias fecales; existen diversos

esquemas sobre la secuencia de las muestras recolectables.

Los esquemas de recolección más empleados indican tres muestras en días alternos,

colectadas según lo anteriormente expresado.

En el diagnóstico parasicológico se pueden aplicar:

Métodos Cualitativos; donde se detecta la presencia o ausencia de determinado parásito, ejemplo: Frotis directo.

Métodos Cuantitativos; determina la cantidad, realizando un conteo de huevos de parásitos por gramo de heces, ejemplo: Mac Master modificado.

57



EXAMEN FROTIS DIRECTO:

PRINCIPIO Y TECNICA:

Consiste en colocar en una lamina(portaobjeto) una gota de solución salina fisiológica y

agregar 1 ó 2 grs de materia fecal. Luego se coloca una gota de lugol y se realiza el

mismo procedimiento. Se coloca un cubre objeto y se observa al microscopio se mezclan

las soluciones separadamente con las heces, se coloca un cubre-objeto en cada mezcla y

se observa al microscopio. La muestra con solución salina permite observar el movimiento

de ciertos parásitos que es característico para determinadas especies, mientras que la

muestra con lugol tiñe las estructuras internas de quistes o trofozoitos de parásitos, lo cual

permite una mejor identificación.

VENTAJAS:

Es una técnica sencilla y rápida de realizar. No hay distorsión de parásitos si la solución salina isotónica es usada con

diluyente. Es la única manera de ver trofozoítos vivos. Útil para examinar heces de aves y reptiles pequeños.

DESVENTAJAS:

Puede perder parásitos si la concentración es baja o si hay muchos cuerpos extraños o grasa presente.

Heces, semillas y otros desechos pueden dificultar la aposición de las láminas. Pueden tomar un largo tiempo para su examinación.

58



MÉTODO DE FLOTACIÓN (SHEATHER):

PRINCIPIO:

Se basa en la flotación de quistes, ooquistes y huevos de parásitos en una solución de

azúcar que posee mayor densidad que ellos. Esta técnica es útil para la concentración de

quistes y ooquistes de protozoos y huevos de helmintos y se usa como método

preferencial en el diagnóstico de los coccidios: Cryptosporidium, Cyclospora, Isospora,

etc.

APLICACIÓN: Esta es una buena técnica a usar en un estudio inicial para establecer cual

grupo de parásitos está presente.

VENTAJAS:

El procedimiento de flotación es el más común en huevos de helmintos y ooquistes de coccidias.

Las soluciones son baratas. Hay pocos cuerpos extraños para obstaculizar la visión del parásito.

DESVENTAJAS:

El procedimiento de flotación no detecta huevos de tremátodos, ni huevos de gusanos planos.

Distorsiona quistes de Giardias. Toma más tiempo si las muestras no son centrifugadas. Es inadecuado para muestras fecales grasosas.

MATERIALES:

2 Beakers (150 ml). 1 Tamiz (colador pequeño). 1 Espátula. 1 Caja petri.

59



1 Cámara de Borrel de 50 a 70 ml (cilindro liso). 1 portaobjeto grande (5 cm x 7 cm), cubreobjetos. Solución hipersaturada de azúcar refinada (1235 gravedad específica). Heces. Microscopio.

Preparación de la solución hipersaturada de azúcar:

-1 kilo de azúcar refinada. -1 litro de agua. -0.5 ml fenol. -Calentar y agitar

TÉCNICA:

1. Colocar en un Beakers aproximadamente 4 gramos de heces y mezclar con un poco de solución hipersaturada de azúcar y macerar con la espátula hasta lograr una solución homogénea.

2. Agregar 70 ml de solución hipersaturada de azúcar y se tamiza a otro beakers.

3. Se llena la cámara de Borrel hasta que se forme una convexidad. 4. Se coloca encima el portaobjeto evitando formar burbujas y se deja en

reposo 20 minutos. 5. Se voltea el portaobjeto procurando no derramar lo adherido a él. 6. Se observa al microscopio (10X).

1.) 2.)

60



3.) 4.)

5.)

6.)

61



MÉTODO DE MAC MASTER MODIFICADO:

PRINCIPIO:

Es una técnica cuantitativa para determinar el número de huevos presentes por gramo de

heces (h. p. g.). Una solución es usada para separar los huevos de la materia fecal, para

luego depositarse en una cámara de conteo (Mac Master) con dos compartimientos.

APLICACIÓN:

Esta técnica puede ser usada para

proveer una cantidad estimada

de huevos producidos por nematodos, cestodos y coccidios. Su uso para cuantificar

niveles de infección es limitado por el factor de excreción de huevos.

VENTAJAS:

Cuantifica el número de huevos estimado por gramo de heces. Cuantifica huevos de nematodos, céstodos y coccidios.

DESVENTAJAS:

En el caso de retraso entre el procesamiento y el conteo, el número de huevos puede disminuir.

En caso de retraso entre el procesamiento y el conteo, los huevos pueden cambiar su apariencia.

MATERIALES:

2 Beakers (150 ml). 1 tamiz (colador pequeño). 1 espátula. 1 gotero. 1 cámara de Mac Master. 1 balanza. 1 probeta (50 ml). Solución hipersaturada de azúcar (58 ml). Heces. Microscopio.

62



TÉCNICA:

1. Se colocan 4 gramos de heces (bovinos y equinos) o 2 gramos de heces (porcinos, ovinos y caprinos) en un beakers.

2. Macerar las heces con 28 ml de solución hipersaturada de azúcar en el primer beakers hasta lograr una solución homogénea.

3. Se colocan 30 ml de solución hipersaturada de azúcar en el primer beakers y se tamiza al otro.

4. Se agita el filtrado con el gotero y se procede a llenar la cámara. 5. Esperar por lo menos 2 minutos para que los huevos de los parásitos floten hacia

la superficie interna superior de las celdas de la cámara. 6. Se realiza el conteo en el microscopio.

1.)

2.)

63



3.)

4.)

64



5.)

6.)

CONTEO:

Si se pesan 4 gramos de heces la dilución final será de 1 gramo en 15 ml de solución

hipersaturada de azúcar. Se desea saber cuántas veces cabe 0.30 ml en 15 ml, lo que da

50. Por tanto, la cantidad de huevos contados en ambas celdas de la cámara se deberá

multiplicar por 50 y así se obtiene el número de h. p. g.

65



TÉCNICA DE SEDIMENTACIÓN (BORAY)

INTRODUCCIÓN

Los trofozoítos, quistes, ooquistes, larvas y huevos, pueden concentrarse por diversos

procedimientos, lo cual permite corroborar el hallazgo del método directo y conocer la

intensidad del enteroparasitismo. Estos procedimientos de concentración pueden ser:

flotación, sedimentación, o por combinación de ambos métodos. La elección de cada

procedimiento dependerá de las facilidades del laboratorio, el adiestramiento del personal,

la procedencia de la muestra (zona geográfica), el conocimiento de la prevalencia de los

parásitos (zona costeña, andina y selvática o área rural o urbana), y la especie del

parásito que se desea investigar (1, 2).

PRINCIPIO:

Se basa en la gravidez que presentan todas las formas parasitarias para sedimentar

espontáneamente en un medio menos denso y adecuado como la solución fisiológica (1, 2,

3).

VENTAJAS:

Es útil para la detección de ooquistes, trofozoítos de protozoarios, huevos y larvas de helmintos.

Útil para la detección de huevos de tremátodos. Es la mejor técnica para fijar muestras en formalina y para heces con alto

contenido en grasa.

DESVENTAJAS:

Es más difícil de realizar que otras técnicas. Hay más cuerpos extraños en la preparación que en la técnica de flotación, lo

cual podría tomar más tiempo.

APLICACIÓN:

Este es un procedimiento para evaluar la presencia de infecciones de tremátodos. Esta es

únicamente ejecutada cuando tales infecciones son sospechadas (de hallazgos

posmorten previo sobre otros animales en el hato), y no es ejecutada rutinariamente. El

procedimiento puede ser usado para detectar huevos de Fasciola y Paramphistomum (3).

66



MATERIALES:

1. 1 Beakers. 2. 1 Tamiz (colador pequeño). 3. 1 Espátula. 4. 1 copa de Sedimentación. 5. 1 Pipeta o gotero. 6. portaobjetos y cubreobjetos. 7. Agua. 8. Azul de Metileno en solución acuosa al 1%. 9. Heces. 10. Microscopio.

PROCEDIMIENTO:

1. Se colocan de 2-4 gramos de heces en el Beakers. 2. Se macera hasta diluir la muestra. 3. Se pasa por el tamiz a la copa de sedimentación y llenar con agua hasta 1 cm

aproximadamente del borde de la copa. 4. Dejar en reposo 15 minutos. 5. Decantar el sobrenadante y llenar nuevamente. 6. Dejar en reposo 15 minutos y luego decantar. 7. Se repite este proceso hasta obtener un sobrenadante limpio. 8. Transferir el sedimento a una placa petri. 9. Colocar una gota de sedimento en un portaobjeto. 10. Colocar 1-2 gotas de Azul de Metileno al sedimento y colocar el cubreobjeto. 11. Observar al microscopio.

El Azul de metileno, tiñe los detritos o restos que hay en el sedimento y brinda un

excelente contraste para detectar los huevos de los parásitos.

1.) 2.)

67



3.) 4.) 5.)

7.) 8.)

68



9.)

10.)

11.)

69



TÉCNICAS DE TINCIÓN PARA HEMOPARÁSITOS

Estas técnicas se emplean para ver la morfología de los protozoos en estudio, de forma

que permitan una clara identificación para poder individualizar sus estructuras específicas

y hacer la diferenciación de especies. También puede ser utilizada en la detección de las

diferentes formas parásitas en que se presentan Babesia spp. y Anaplasma marginale

dentro de los eritrocitos de la muestra de sangre de bovino previamente infectado en fase

aguda.

PRINCIPIO

Los núcleos se teñirán en diferentes tonos de púrpura. El citoplasma se teñirá en diferentes tonos de azul a rosa claro. El citoplasma de algunas células puede presentar gránulos finos de rojizos a lila (7).

APLICACIÓN

Las soluciones de Giemsa se utilizan en la tinción de frotis de sangre o de médula ósea y

son par uso diagnóstico in vitro. La tinción de Giemsa es una solución tamponada de

tiazina-eosinato, que se utiliza para dar a las células sanguíneas una coloración similar a

la del producto descrito por Giemsa. Puede utilizarse separadamente o en combinación

con la tinción de May-Grünwald (7).

70



Este procedimiento también tiene aplicación en laboratorios de prueba en materia zoosanitaria que realizan el diagnóstico directo de hemoparásitos.

VENTAJAS

Se pueden observar parásitos (protozoarios) dentro y fuera de las células sanguíneas.

Es rápida y sencilla.

DESVENTAJAS

La presencia de parásitos puede no ser constante.

PROCEDIMIENTO

A partir de la muestra de sangre con anticoagulante se elabora un frotis:

Frotis delgado: 1. Utilizar portaobjetos limpios y secos (mantener en alcohol y éter). 2. Se coloca una gota de sangre en el extremo de una laminilla. 3. Con otra laminilla en posición inclinada, colocada en ángulo de 35 grados

se hace correr hacia el otro extremo. 4. Al obtener un frotis fino y homogéneo secar inmediatamente al aire y se fija

en alcohol metílico absoluto. 5. Para ello la laminilla se coloca de cara hacia arriba y se cubre con el

alcohol esperando a que se evapore. 6. Posteriormente se aplica la técnica de tinción deseada Giemsa o Wright (8).

Frotis de gota gruesa: 1. Utilizar portaobjetos limpios y secos, identificar claramente en uno de los

extremos con el número de animal y fecha. 2. Colocar en el centro una gota de sangre, mediante un movimiento de

rotación formar una película de l cm. de diámetro con ayuda de un palillo. 3. Secar al aire o al calor a 50-60 grados centígrados. 4. Teñir con Giemsa o Wright (8).

Tinción de Giemsa (8)

1.- Diluir 1:1 el colorante con solución amortiguadora 15 minutos antes de utilizarlo.

2.- Fijar los frotis en metanol absoluto durante 5 minutos. Secar al aire. 3.- Cubrir completamente el frotis con el colorante diluido durante 8 minutos, formándose

una película metálica.

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4.- Lavar vigorosamente con agua corriente.

5.- Dejar secar.

6.- Observar al microscopio con objetivo de inmersión.

RESULTADOS

En las muestras de sangre observadas, se lograron identificar tripomastigotes de

Tripanosoma cruzi.

Además se identificaron parásitos de Leishmania Infantum en un corte de tejido de riñón

de Hanster.

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