manual leica sp2 revision - usf health

16
LMW Ente Thin M co C Th m Syst 1. T S s 2. T d 3. T if 4. S d t O t W Microscop er you nam ngs to chec Make sure th overslips. Fi heck the obj here are 40x microscope. tem StartTurn on the Scanner Lase switches. Turn on the c desktop as L Turn on the f you look at Start the LCS doubleclicki the desktop. On the popu the Personal py Lab : Lei M me, the da ck before s at your sam ixed samples jectives. The x and 63x OI If oil immer up. microscope er HeNec a computere MWUser. Mercury Arc t fluorescent S program by ing the LCS i up starting w l and click ica SP2 Manual fo te, the tim startup. ple slides ar s need to be e 10x and 20 L immersion sion objectiv controllerb nd PC/Stand e and log on c lamp Powe tly labeled s y con on window pane butt or Leica S me in and t re clean and e sealed with 0x objectives n objectives, ves have oil b and the dd to the er Supplyf, amples. el, select ton. Page 1 SP2 Confo time out in sealed. Use h nail polish. s are DRY ob , and a 63x W on them, wi , ocal Micro n the user e Windex an . bjectives, and WATER imm ipe the lens oscope log book. nd cotton ba d should NEV ersion objec gently only d c `7/ lls or Kimwip VER have oi ctive also on with lens pa b d /7/2014 pes to clean l on them! n this aper. f e

Upload: others

Post on 16-Jan-2022

1 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

LMW

Ente Thin  M

co

CThm

 

Syst1. T

Ss

2. Td

3. Tif

4. SdtO

t

W Microscop

er you nam

ngs to chec

Make sure thoverslips.  Fi

heck the objhere are 40xmicroscope.  

tem Start‐Turn on the 

Scanner Laseswitches.   

Turn on the cdesktop as L

Turn on the f you look atStart the LCSdouble‐clickithe desktop.On the pop‐u

the Personal

py Lab : Lei

M

me, the da

ck before s

at your samixed samples

jectives. Thex and 63x OIIf oil immer

up. microscope 

er HeNec a

computereMW‐User.  

Mercury Arct fluorescentS program bying the LCS i  up starting w

l and click 

ica SP2

Manual fo

te, the tim

start‐up. 

ple slides ars need to be

e 10x and 20L immersionsion objectiv

controllerb

nd PC/Stand

e and log on 

c lamp Powetly labeled sy con on 

window pane

 butt

or Leica S

me in and t

re clean and e sealed with

0x objectivesn objectives,ves have oil 

b and the 

dd 

to the 

er Supplyf,amples.    

el, select 

ton.

           

Page 1

SP2 Confo 

time out in

sealed.  Useh nail polish.

s are DRY ob, and a 63x Won them, wi

ocal Micro

n the user 

e Windex an.  

bjectives, andWATER immipe the lens 

oscope 

log book. 

nd cotton ba

d should NEVersion objecgently only 

dc

`7/

lls or Kimwip

VER have oictive also onwith lens pa

b

d

/7/2014

pes to clean

l on them!  n this aper.   

f

e

LMWOvev

Uposhou 

W Microscopview of Leic

n LCS prograuld appear p

order to 

With Forfor publis    

 

py Lab : Leia Confocal S

am start, theressed.  

samobtain corre

rmat   bshing and pr

ica SP2 Software (LC

e basic image

Click the

Click themple (It is imect scale bar

button, selecresentation)

CS) 

e acquisition

e Beam 

e Obj  bportant to mr values).  

ct the image.   

Page 2

n menu will 

button to

button and smatch the se

e format (def

appear.  The

o display the

select the obelection with

fault is 512x

e Beam Path

bjective youh the objecti

x512 pixel, w

`7/

h Setting as a

 will use to iive you are u

which is most

/7/2014

 button 

appeared. 

image your using in 

tly suitable 

LMWBasi

Brigh1. P

ct 

2. F

h

tV 

3. S

s

bot 

4. F

fBit 

5. Um

bP 

6. Wfm

7. Feoaokoo

     

W Microscopic Operatio

ht‐field viewPlace your sacoverslip (prtoward the o

For bright‐fie

halogen lam

toward you aVIS position 

Start with low

specimen.  P

by hand.  Thof the objectthe panel). 

Focus on to t

f (upper anButton to brt away from

Use the Finemovement c

button h (SPlease DO N

With most cefocus to youmode.  For P

Condenser R

For using oil expose the leoil or water oapplication tobjective unknob to gradoccasionallyobjective. Th

py Lab : Leion of Leica

wing: ample slide oeferably #1.objective.  

eld viewing, 

p light by tu

and turn the(Note: make

w magnifica

Place the des

e readout ptive (Note: o

the sample b

nd lower) andring the objem the sample

e focus knobcan be set fro

2 is recommOT press th

ells or tissuer sample witPhase Contra

Ring i to se

or water imens by turninon the objectools!).  Turntil the oil jusdually bring yy to make suhis can dama

ica SP2 a DM IRE2 

on the stage5 thickness)

turn on the 

rning the wh

e VIS/SCAN se sure to swi

tion objectiv

sired objecti

anel e at thother inform

by moving th

d the Fine Foective close te.  

 g to fine tuom S0 (very 

mended for me LEARN, CH

e samples stath a fluorescast mode wit

elect PH1 (fo

mersion lenng the turrective (be carn the objectist spreads ouyour samplere that you age the obje

Inverted M

e holder with) facing dow

microscope

heel b switch c toitch back to 

ves (10X or 2

ve in positio

he front of thation is not 

he objective

ocus Knob gto the sampl

une focusingfine) to S3 (

most cases). HANGE, or 

ained with flcence mode th 10x or 20

or 10x) or PH

ns, lower thet half way byeful not to tve turret baut as it contae into focus. are not pusective lens a

Page 3Microsocp

h n 

o Scan positio

20X) first to 

on by turning

he scope shocorrect due 

e with the Co

g. Push the le or the low

g. The extencoarse) by p

  buttons.

luorescent d(see below)x objectives

H2 (for 20x). 

e objective tuy hand, and ouch the lenck in positioacts the slide Check yourhing up the and your sam

pe. 

on for confoc

focus onto y

g the lens tu

ows the z‐poto malfunct

oarse Focus

upper Coarswer button to

t of the finepressing the 

dye, you cou) or Phase Cos, turn the 

  

urret slightlyplace a dropns directly won and raise e.  Use find fr slide slide with tmple! 

g

cal laser scan

your 

urret d osition tion of 

Buttons 

se o bring 

 STEP 

uld easily ontrast 

y, p of with the focus 

the 

b

`7/

e

nning, see b

d

/7/2014

h

i

elow)  

e

c

f

LMWFluoYou usingmicrand  1. P

ss

lb

2. Tt

3. E

M

V

4. Ws

F5. P

r

 Set To tu

(

(

(

((

W Microscoprescent viewcan check yog the mercuroscope has red fluoresc

Press either scope to choset in place a

ight can be bbutton (The 

Turn the VIStransmitted Examine the

MAG is at 1x

VIS and push

When you arshut off the 

Filter buttonPush the dowready for las

ting up fo

urn on the la1) Turn on o

not needand stabon until y

2) Argon lasexcitatio

switch b

knob c key d toposition 

with the sufficient

(3) Melles G

green bu

(4) He/Ne (6(5) Diode UV

g and tu

py Lab : Leiwing: our sample try lamp illumfilter sets focence (N2.1)

the left or rioose the filteand is used f

blocked (clo“closed” ligh

‐SCAN switcbright‐field  sample thro

x. If not, cha

hing the upp

re ready to smercury arc

nj to select wn PORTS ber scanning.

or Confoc

aser(s);  only the lased more than ilize, so it is you know yoser (for 458,n line): Turn

b and check 

is set to MIN

o “ON”, and and release 

LEVEL knobt).  Griot yellow 

utton e for a

633 nm) laseV laser 405 n

urn the key h

ica SP2

to see if youmination andor viewing DA.  

ight Filter buer (FLUO) setfor laser con

sed) or emitht should be

ch 1! to Scanlight, if neceough the eye

nge it by pus

per MAG but

scan your sa lamp light t

Scan positioutton to sele.

cal Laser 

ers you will ua minute ornot necessaou need them, 476, 488, an on the red if the Level 

N.  Then, tur

then turn futhe key.  Ad

b c (usually 

DPSS (561 n

a few secon

er: turn the Hnm: Turn on

h to I posit

ur fluorescend the appropAPI (A), gree

utton j on t.  “Scan” pofocal scanni

tted by presse off for fluor

n position toessary. epieces. (Ma

shing the up

tton1# to sel

mple with lato prevent b

on. ect SIDE and

Scanning

use. They dor so to warmry to turn thm.  nd 514 nm Laser Ar/Ar

Ar/ArKr leve

rn the left Ar

urther to “STdjust the lase

9 o’clock po

nm) laser:  pu

ds and relea

He/Ne 633 k the red pow

ion.

Page 4

nce labeling wpriate filter sen fluorescen

the front of osition has nng.  The fluo

sing the Shurescent view

o block the 

ake sure tha

pper PORTS 

lect 1x) aser, close thleaching you

d push the d

g. 

o  up hem 

rKr 

el 

r/ArKr 

TART” er power 

osition is 

ush the

ase. keyf to ONwer button

c

g

works by sets.  The nce (I3) 

the no filter orescent 

utter 1) wing.).

t PORTS is in

button 1@ to

he SHUTTERur sample.  P

own MAG b

.

e

d

g

j

1@

n VIS and 

o select 

R1) to Push the 

button to sel

b

`7/

j

ect UV. Now

/7/2014

1!

f

h

1)

1#

w you are 

LMWLCS I

1. F

f(

e

dcl 

2. Y

go

3. P 

W MicroscopImaging pro

First, select t

fluorescent lLeica Factor

emission det

dichroic beacan adjust thevel as nece

You can also

grey scale byon the windo

Press Mode 

py Lab : Leiogram settin

the appropri

abels you usry setting) b

tector band‐

m splitter1!he range andessary.  

 change the 

y clicking theow screen (N

button 

ica SP2 g 

iate laser lin

sed on your y double clic

‐widthj, act

, and excitatd position of

color schem

e pseudo‐coNote: the co

to select Sc

es and set u

sample fromcking. This w

tivate the pr

tion laser waf detector ba

me of individ

lor selectorlor informat

can Mode (d

1)

1!

Page 5

up detectors

m the drop‐dwill automat

roper detect

avelength anandwidth an

ual images i

1# associatetion will be s

default is XYZ

1@

 for the 

down L listitically set up

tor (PMTs)1)

nd [email protected] the laser p

into any colo

ed with eachsaved with im

Z). 

j

1#

i p the 

), 

.  You power 

or or 

h PMT mage files w

i

`7/

when saved).

/7/2014

   

LMW

4. Pp

5. P

ki 

6. PSm

7. O

(a)  T(b)  Z

re

(c)  Pinu

knrawsaand

la

W Microscop

Press Formaparameters (

Press Z‐scan 

knob 1$ to ms used with 

Press ContinStop button)monitor.  

Remote Con

Optimize the

The z‐positio

Zoom factor esolution, bu

PMT1, 2, 3, Tncrease the snder 600 V)

nob counterange of the Pwindow in thaturating thend PMT offsarkest pixels

aser power b

P

py Lab : Lei

t , and (defaults are

button 

move the objthe Galvo st

nuous ).  An image 

ntrol Knobs 

e images by 

on (focusing)

(ZOOM knout also will b

Trans and Smsignal intens.  To decreas

rclockwise.  PMT for optree differene PMT will aet such thats are just ab

bar1@ on the

seudocolor 

ica SP2

Speed e 512x512 fo

and select

jective for fotage adaptor

 button tor images, d

adjusting pa

) within the s

ob 1%): Defaubleach the sa

mart Offset sity of each fse backgrou

With Q LUT imal image qt LUT modesppear blue at the brighteove the zero

e menu wind

   

1^

 buttons to ormat and 40

t z‐Wide in o

ocusing (Defr).  

to start scandepending o

arameters in

specimen (Z

ult is 1; increample faster

knobs 1^: Tufluorescent and signal, cl

button quality can bs; pseudocoand pixels west pixels areo value (a so

dow if neces

Page 6

select these00Hz scan sp

order to use 

fault is z‐Gal

nning (it will on the numb

cluding;  

Z‐POS knob1$

easing zoom r! 

urn PMT knoand transmiick the mou

 in the Expbe obtained.lor> Hi‐Lo>m

which are blae just under tme green pi

ssary).  

         Hi‐Lo

e peed). 

Z POS 

vo, which 

become ber of active 

$).

will magnify

obs to increassion imagese over a ch

periment live.  Every clickmonochromeck (0 value) the saturatioixels). (Adjus

 

1%

Galv

detectors, w

y the image 

ase the dete channel (Nohannel to sel

e view windking this butte. In the Hi‐Lappear greeon (a few blst Laser pow

 

1$

`7/

vo stage ada

will appear o

and improv

ector sensitivote: Keep thect it and tu

dow, a full dyton changesLo mode, pixen.  Adjust thue pixels) anwer by dragg

   monoch

/7/2014

aptor

on the right 

e the 

vity so to he PMT leveurn Offset 

ynamic  the view xels he PMT gainnd the ging the 

hrome 

 

LMW

C

S View

Spssfc

Cbtt

Tvcs

Oomi

Dcmt

Lct

Acqu

P4n

Tbs

W Microscop

Click the Sto

Save button 

wing Images

Single buttoputs up full screen of selected fluorescent channel.  

Ch 1, 2, 3, 4 buttons– actthe channel the screen.  

Tiled buttonviews up to 3channels simultaneou

Ovl button –overlays (memultiple chanto one.  

Display buttochange the magnificatiothe  screen  i

Lut button‐ ocolor look‐uptable.  

uiring Single

Press Single 400Hz).  Thenoise and im

To use averabutton and sstarting poin

py Lab : Lei

p button

and put a sp

.  

n– 

tivate on 

– 3 

sly. 

– erge) nnels 

on‐ 

n of mage. 

open p 

e Optical Sec

Scan button resulting im

mprove the si

aging, click eselect the nunt).  Then, cli

ica SP2

again

pecific name

ction Image.

n to acquire mage may disignal‐to‐nois

ither Li.A umber of lineick the Singl

 to stop scan

e for later us

an image bysplay backgrse ratio. 

(line avees (or framee Scan butto

Page 7

nning. (You c

se).

y a single lasround noise.

eraging, recos) to be aveon. 

can save the

er scanning .  Image ave

ommended) raged (4 line

e current pa

 

at a scanninraging is a p

or Avere or frame a

`7/

rameter set

ng speed (noprocess to de

 (frame avveraging is a

/7/2014

ting with 

ormally ecrease this 

eraging) a good 

LMW A

haC

I

W MicroscopAfter scannin

hard drive wand type theComputer cr

f you want t

py Lab : Leing, the imag

with the Savee file name. (rash or powe

to create a n

ica SP2 ge will be sav

e button on t(Note: All ther outage w

new folder fo

ved in the di

the top mene images (as

will result in 

or a new set 

Page 8rectory (tem

nu icon panes *.tiff) will bloss of unsa

of images, c

mporarily in 

elbe saved undaved data! SA

click New ico

the RAM).  S

der the saveAVE FREQU

on on the m

`7/Save the dat

ed Leica file (ENTLY!! enu panel.

/7/2014 ta to the 

, (as *.lei)). 

LMWSequThis four transthe efluorsampsimpand Howfluorappethrolaserprodsampcollelaserwaysdepe To sc1. C

fGFsPt

 2. S

faant

3. CSssis 

W Microscopuential Scanconfocal michannels (3smission) simexcitation anrophores areples stainedply requires madjustment 

wever, often rophore mayear into the ugh) or can r lines (crossduce false sigple should becting one flur line at any s to set up sending on fl

can sequentChoose the bfor your fluoGFP and DsRFITC‐TRITC frset laser linePMTs for simtwo colors. 

Set up a confluorophore activating anand the PMTnm laser powthe PMT2 Ac

 

Click Save buSetting paneset up as youseq”).  Click On the User ssetting name

py Lab : Leining Mode croscopy ca fluorescencmultaneouslnd emission e well separawith differemanipulatioof the detecexcitation oy cause the erange of anobe induced s‐talk), both gnals. To avobe scanned suorophore sgiven time. sequential scuorescence 

tially the sambeam settingrophores (foRED) by selecrom the preses, dichroic mmultaneous i

dition for on(i.e. FITC) bynd adjusting T (i.e. decreawer to 0% anctive box).   

uttonb on tel and type aur own settinOK and the set list (U in fe). 

ica SP2

n detect up ce and 1 y as long as spectra of ated.  Imaginent dyes thun of laser poctor bandwidf one emission to other (bleedby neighborof which oid these, thequentially signal with o There are tcan mode of your sam

mple withoug parameteor example, cting the Leiset list). It wmirror, and maging of th

ne y only the laser levase the 561 nd uncheck 

he Beam Paa name for thng (i.e. “GFPsetting will bfront of the 

to 

all 

ng of s ower dth.  

d‐ring

he by ne two 

mple.

ut need to usr 

ca will 

he 

vel 

ath his P‐be 

Page 9

se 405 nm UUV laser (forr example, n

`7/

no DAPI stain

/7/2014

ning) : 

b

LMW4. R

c

5. CB

SwastS

6. KlsYa

ew

 7. S

Sdc

                       

W MicroscopRepeat the scheck box an

Click the SeqBeam Path S

Sequential swill appear. Aacquisition sselecting it frthen click AdSequential s

 

Keep the scaines”.  Do noscan settingsYou can saveacquisition s

e in the Seqwindow. 

Start the acqSingle Scan odepending ocondition. 

py Lab : Leisame procesnd lower 488

q button Setting wind

can settingsAdd the fluoetting one arom the Usedd button in can settings

an moded aot close the s window.  e this sequenettings by Sa

quential sca

quisition by cor Series buton your imag

ica SP2 s for the oth8 laser level 

in the ow.  The 

s windowc orophore at a time by er list and the s window.  

t “between Sequential 

ntial ave button 

n settings 

clicking tton ging 

her fluorophto 0%), and 

e

Page 10ore (i.e. TRITsave the co

TC)(Make sundition as a

ure to unchenother setti

c

`7/eck the PMT1ng (i.e. “DsR

c

d

/7/2014 1 Active RED‐seq”).  

LMWTo scDue sequcontneedan exDAP1. F

4wSb

2. WPl

3. SoS(

4. Nt4oaPn

5. Soag

6. C“

s7. S

MtP

8. Cac

9. TiSr

W Microscopcan sequentto the hardwuential scanntaining UV dyds a differenxample of spI and FITC.  For setting u405 only fromwill make UVStart scanninbutton. While scanniPMT1 knob aaser power Stop scanninof line averaSave the settfor exampleNext, doublethe Leica pre488 nm laseroff UV laser aand adjust thPMT2 knob anm laser powStop scanninof line averaabove.  Savegreen”.  

Click Seq but“training blu

setting from Select betweMode  drop‐the  Line‐AveParameter li

Click Seriesacquire sequcapturing.  To  find  a  nemage, closeSettings winregion of int

py Lab : Leitially the samware for UV ning of a speye (i.e. DAPInt configuratpecimen sta

p DAPI, doum the Leica V laser and Png by clicking

ing, adjust thand Offset kif necessaryng and selectging with thting as descre “training ble click on L‐4eset list and r and PMT2 and PMT1.  he image quand Offset kwer if necessng and selectging with Li. the setting 

tton  ane” and “trai

the User (Ueen  frames ‐down  list  aerage  box st. 

 buttuential image

ew  region  fe the Sequendow. Doublerest. 

ica SP2 mple with nelaser, 

ecimen  or Hoechst)ion.  Here isined with 

ble click L‐preset list.  PMT1 activeg Continous

he image winob (and ).  t the numbee Li.A buttoribed above lue”).  488DD from it will make active and tStart scanniality with nob (and 48sary).   t the numbe.A. button asas “training 

nd add ning green” 

) list.  from  the 

and  check from  the 

on to e 

or  a  new ntial Scan e‐click on o

eed to use 4

) s 

It .  

th 

er n.  

urn ng 

88 

er s 

ne of the se

Page 11405 nm UV la

etting you cr

aser (DAPI s

reated. Click

staining): 

k Continuou

`7/

s button an

/7/2014

d find a neww 

LMW

10. O

s

W Microscop

Once you fin

sequential im

py Lab : Lei

nd a region, s

maging with 

ica SP2

stop scannin

Series 

ng. Click Seq

button.

Page 12

button  to bring up the seque

`7/

ential setting

/7/2014

g and acquiree 

LMW AcqZ‐sermak1. T

p

2. Tc

3. C4. (

n5. C6. S

as(CSca

7. C

u

“Z

8. WwitCppWvs

W Microscop

uiring Z‐serries allows aing 3D imagTo set the z rposition of y

Turn Z‐POS iclick Begin bClick Stop buoptional) Clnumber of oClick Sect buSelecting Othand spacing sections. Ent~1 µm for 6Calculate buSection. It wcalculate theaccording thChoose the n

using Li. A. b

“Series” buttZ‐series stacWith series bwindow, youndividual sethe sections Choose Maxprojection) oprojection). With Sect. Bvisualize crosspecimen.  

py Lab : Lei

ies images.  acquisition oes.  range, pressour sample 

n opposite dutton (pressutton to stopick Series buptical sectioutton to selehers brings u(step size) bter a desired3x objectivetton next toill automatice # of sectione Step size. number of a

button  

ton  k imaging. buttons in thu can view thctions or prointo one 2D

x. (maximumor Avg. (aver

utton, you css‐section of

ica SP2

f optical sec

s Continuousand click En

direction (closed).  p scanning. utton to cheons.  ct the predeup a z‐configbetween d step size e) and click  the # cally ns Press OK. veraging 

and click 

to begin 

he viewer he oject all D image. m pixel rage pixel 

can f the 

ctions throug

s button, turd button (it 

ockwise) to f

ck the thickn

etermined nuguration win

Page 13

gh the certai

rn Z‐POS knowill appear 

focus on a d

ness of the z

umber of opndow to det

in volume of

ob in countepressed).  

eeper regio

z‐series and 

ptical sectionermine the n

f your samp

erclockwise t

n of the spe

determine t

n, or to selecnumber of s

`7/

le that can b

to focus ont

cimen and 

the 

ct Others…sections 

/7/2014

be used for 

o a specific z 

LMW AcquTimeinter 1. T

ssxT

2. C

twpta

3. Ceootpr

eFC

4. C5. C (Optinter

To in

W Microscop

uiring Time Se series allowrest. The tim

To set obtainseries imageselect scan Mxyt. It will acTime button

.  Click Time bu

 to opetime‐lapse sewindow and parameters sthe time inteand the numCheck one ofenter the deother two paon keyboardthe value forparameter. (right, check “

enter 5 sec fFrames. EnteComplete TimClick Apply bClick Series b

tion) Click onrest changes

ncrease the s

py Lab : Lei

Series imagews time‐lapsme‐lapse ima

n time‐s, Mode as ctivate s

utton

en the etting set the such as erval betweember of framf three parasired numbearameters H, which will r the checke(for example“Complete T

or T and 10er key will came as total tbutton.  button to sta

n Aver or Li.s or move fa

signal, use s

ica SP2

es. se imaging oages can be s

en frames es.  meters and ers into the it Enter key calculate d e shown in Time” and 

00 for alculate the time of 8min

art the time‐

A. button toster than sca

lower scan s

f live samplesaved as mu

n 15s.) 

‐lapse series

o set the numanning spee

speed by clic

Page 14

es to study tltiple Tiff file

s acquisition

mber of avered, averaging

cking Speed

the changes es and AVI fi

raging per frg will genera

and dynamiiles for playi

rame. Note: ate distorted

 butt

`7/

ics of your oing in movie

If your objed or ghost im

ton. 

Seof

/7/2014

object of  programs. 

ct of mages.        

Set time interval

et the numbef frames

er

LMWProcchanimagpres

   1. A

2. C3. C

Tw

4. FPc

5. S

W Microscopcessing and ennel image isge processinentation).  

Adjust image

Click the DispClick on the To>Experimewill export to

Selection

Selection

All (snap 

For time seriPrev, Last).  can also visuSave the *.le

py Lab : Leiexporting ims saved in twg such as br

es and put a

play buttonimage you went>Selectioo a new ima

n (raw): expo

n (snapshot)

pshot): expor

ies, you can For Z‐series,alize the croei folder file 

ica SP2 mages:  The wo tiff files ‐‐ightness‐con

nnotations y

 and sewant to expoon (raw)/Selge file. 

ort the curre

): export the

rt all the scr

go through , Max or Avgoss‐section owhenever yo

original imag‐ one for eacntrast enhan

you want, su

elect 1:1 to dort and rightlection (snap

ent selected

e current sele

een images

or play the tg buttons prof the specimou add new 

Page 15ges are savech channel. ncement and

uch as scale 

display imag‐click on thepshot)/All (s

 image only 

ected screen

with annota

time lapse mrojects the dmen with Secimages. 

ed as single tYou can savd merging ch

bar. 

ge in exact pe mouse to bsnaphot).  S

(no annotat

n image with

ations. 

movie with seifferent sectct. button.

tiff files; for ve a current hannels (use

ixel dimensibring the conSelect one of

tions include

h all annotat

equence buttions into a p

`7/example a tscreen imageful for powe

on.  ntext menu;f these optio

ed). 

tions. 

ttons (First, projected 2D

/7/2014 wo‐color ge after erpoint 

 Send ons and it 

Next, Play, D image. Youu 

LMWSavinThis unsawind SinceimagCD/D ShutPleas

123

456

W Microscopng Images.  is a very imaved data! SAdow. Select D

e the storagge acquisitioDVD disks.  

t‐down Procse enter you1. Clean the2. Close the3. Copy you

automat4. Log off th5. If there i6. If you are

1) Turn o 

2)  Minim 3)  Aroun

level, turmin to co

min, turn 4) For the633 laser

key f toposition. 5)  Turn tGriot DPSby pushin

(red) g  6)  For 40

turn the off positithen turn

red butto 

7)  Exit w

Ar/Kr e 

py Lab : Lei

portant for AVE FREQUED drive and 

e memory inon, all user fi

cedure ur time of usee oil from the LCS prograur data files tic backup athe computes someone we the last us

off the mercu

mize the pow

nd 3 min afte

rn the key dool down th

n off the red

e He/Ne r, turn the 

o off  

the Melles SS laser off ng the OFF 

button. 

05 nm laser,

key h to ion and n off the 

on i.  

windows and

with the red

ica SP2

your effort ENTLY!!  To susers folder

n the compules will be d

e in the log be objectivesm.  to a flash dr present.  r (not turninwho wants tser of the da

ury lampb. 

wer of the Ar

er minimizin

d to “off” ane Ar/Kr lase

 button e s

 

 shut down 

d buttons. Fi

and data.  Csave the imar. Create you

uter will be feleted after 

book and nos only with le

ive or CD. U

ng off the coto use, leaveay:  

 

r/ArKr level c

ng the Ar/ArK

d wait for 1er.  After 10 

switch. 

the power f

nally, turn o

1!

Page 16

Computer craging data fiur folder, ren

illed up quictwo weeks.

ote any probens paper (n

sers are resp

mputer) ande the instrum

c for >3min

Kr 

or PC stand

off the micro

i

rash or poweles, click “Saname the Ex

ckly and this  Be sure to c

lems and sunot Kimwipe

ponsible for

d turn off thement ON. 

n before tur

j, the Scan

oscope contr

c

h

er outage wiave” button xperiment# a

 lack of hardcopy your fil

uggestions due). Clean the 

r their own f

e microscop

rning it off.  

nner/Laser H

roller 1!. 

c

d

e

`7/

ill result in loat the top oand save.  

d drive spaceles to a flash

uring your timicroscope

iles, as there

pe control bo

HeNe 1), and

f

g

j1)

/7/2014

oss of of the 

e prevents h memory or

ime. e and stage.

e is no 

ox.  

d the Laser 

b

g

j