mikrobiologi-analitik

8/17/2019 mikrobiologi-analitik

1/14

SOAL-SOAL dan PEMBAHASAN MIKROBIOLOGI ANALITIK

1. Quiz I1. Untuk menganalisis secara mikrobiologi suatu bahan, faktor dan

tahapan apa saja yang menentukan? Terangkan dan jelaskan dengan

rinci!2. Untuk melengkapi analisis tersebut diatas, faktor –faktor apa saja yang

harus dilakukan?. ebutkan pengelompokan bakteri berdasarkan "ergey#s manual of

istematic of "acteriology!$. "erdasarkan pengelompokan diatas berikan keterangan

pengelompokan E.coli dan sertakan uji%uji apa yang dilakukan sampai

mendapatkan E.coli!

&a'aban (

1. )aktor%faktor yang harus diperhatikan yang pertama adalah asal%usul

bahan dan jenis bahan. *enting sekali dalam menganalisis suatu

bahan secara mikrobiologi mengetahui asal dari bahan tsb. &ika suatu

cuplikan siketahui asalnya dapat disimpulkan secara umum jenis m.o

yang ada dibahan tsb dan dapat mempermudah dalam analisis,

sedangkan utk jenis bahan+cuplikan maka dengan mengetahui jenis

dan kriteria dari bahan tersebut dapat diketahui metode analisis yangsesuai agar diperoleh hasil analisis yg akurat.Untuk melengkapi analisis tersebut (a. eteksi ( penentuan kehadiran kelompok+jenis mikroorganisme

yang ada dalam suatu bahan tanpa memperhitungkan jumlahnya

per gram atau per ml bahanb. Total count ( menghitung jumlah mikroba tanpa menentukan

jenisnya+familinyac. -dentikasi ( menentukan nama mikroba dalam suatu bahan baik

secara lengkap ataupun tidak

d. /numerasi ( menghitung jumlah jenis+kelompok mikroba per gr atauper ml bahan

2. )aktor%faktor yang mempengaruhi keberhasilan analisis (a. &enis dan sifat bahan ( kita harus mengetahui jenis dan sifat

bahan tersebut, hal ini dilakukan untuk mencegah terjadinya

kerusakan pada bahan. engan membuat jenis dan sifat bahan

maka keberhasilan analisis akan besar.b. Tujuan dari penggunaan ( 0ita harus mengetahui apa

tujuan+dipakai untuk apa bahan tersebut. engan mengetahui

tujuan dari penggunaan bahan maka dapat ditentukan analisis

yang dilakukan sampai tahap apa.


2/14

. *engelompokan bakteri beradasarkan bergey#s(erob

ram 345 anaerob6occus aerob

6o( streptococcus gram 3%5 anaeroberob

ram 345 anaerobbatang aerob

"akteribentuk

6o( bacillus gram 3%5 anaerob

erobram 345 anaerob

piral aerobgram 3%5 anaerob

0el.khusus bakteri meluncur"akteri dgn struktur tambahan)otototrof oksigen

noksigen

"erdasarkan bergey#s, bakteri dibagi menjadi $ bagian besar menurutbentuknya yaitu berbentuk bola 3coccus5, berbentuk batang 3bacill5,berbentuk spiral dan kelompok khusus didalam tiap kelompok bakteridibagi menjadi dua sub%kelompok berdasarkan proses pe'arnaan gramyaitu gram 345 dan 3%5. ub bab tersebut dibagi lagi menjadi 2berdasarkan sifatnya pada oksigen yaitu aerob dan anaerob. "akterikelompok khusus yaitu kelompok bakteri yg bentuknya tdk masuk dalamketiga golongan tsb.

2. Quiz I

1. ebutkan dan jelaskan tahapan%tahapan yang harus dilakukan pada

saat akan menganalisis bahan secara mikrobiologi!erta sebutkan

faktor%faktor yang mempengaruhi keberhasilan analisis!2. &elaskan latar belakang dari pe'arnaan mikroba!. pa yang dimaksud(

a. hort'a7e lengthb. 8ligodinamikc. U9T

d. 9TT


3/14

&a'aban(

1. Tahapan%tahapan yang harus dilakukan pada saat akan menganalisis

bahan secara mikrobiologi (a. eteksi ( penentuan kehadiran kelompok+jenis

mikroorganisme yang ada dalam suatu bahan tanpa

memperhitungkan jumlahnya per gram atau per ml bahanb. Total count ( menghitung jumlah mikroba tanpa menentukan

jenisnya+familinyac. -dentikasi ( menentukan nama mikroba dalam suatu bahan

baik secara lengkap ataupun tidakd. /numerasi ( menghitung jumlah jenis+kelompok mikroba per

gr atau per ml bahan

)aktor%faktor yang mempengaruhi keberhasilan analisis (

a. &enis dan sifat bahan ( kita harus mengetahui jenis dan sifat bahan

tersebut, hal ini dilakukan untuk mencegah terjadinya kerusakan

pada bahan. engan membuat jenis dan sifat bahan makakeberhasilan analisis akan besar.

b. Tujuan dari penggunaan ( 0ita harus mengetahui apa tujuan+dipakai

untuk apa bahan tersebut. engan mengetahui tujuan dari

penggunaan bahan maka dapat ditentukan analisis yang dilakukan

sampai tahap apa.2. :atar belakang ( Umumnya bakteri memiliki sifat tembus

pandang+tembus cahaya karena tidak memiliki pigmen atau 'arna,

sehingga untuk melihat bentuk dan sifat bakteri lebih sulit karena

tidak terlihat, maka untuk mempermudah melihat bakteri dilakukanpe'arnaan. Tujuan pe'arnaan ( % Untuk melihat bentuk jasad ( etelah bakteri di'arnai kita dapat

melihat bentuk dan jasad dari bakteri% Untuk memperjelas ukuran ( Umumnya bakteri berukuran kecil,

setelah bakteri di'arnai barulah kita mengetahui ukuran bakteri

tersebut% Untuk melihat struktur luar dan dalam sel ( etelah bakteri di'arnai

kita dapat melihat struktur luar sel bakteri dan jika memungkinkan kita

dapat melihat struktur dalamnya


4/14

% Untuk mengetahui reaksi terhadap pe'arna ( bakteri yang diberi ;at

'arna, biasanya ;at 'arna tersebut akan bereaksi dengan isi sel,

dengan adanya reaksi tersebut kita dapat mengetahui sifat dan

karakteristik dari bakteri tersebut.. . % :ong'a7e length ( sterilisasi dengan sinar radiasi yang

menggunakan panjanggelombang antara


5/14

1=*@3>ost *robable @umber5 dengan

rinci! 3ingat!bukan cara kerja52. Terangkan dengan jelas dan singkat mengenai(

a. *lasmolisisb. :arutan @a6l


6/14

1. Tahap%tahap analisis mikrobiologi pada air buangan (a. Total count ( bakteri,jamur,algab. eteksi dan enumerasi ( bakteri patogen, bakteri pemecah

selulosa, penyebab korosi, penghasil toksinc. T*6

d. &*T ( "akteri coli umum dan coli fekale. -*" ( -ndeks *encemar biologisf. "ergey#s manual eterminati7e of "acteriology

*ada tahapan analisis ini yang pertama dilakukan adalah total count

terhadap bakteri,jamur,alga. >ikroorganisme ini dihitung, setelah itu

dilakukan deteksi dan enumerasi terhadap bakteri%bakteri seperti

pemecah selulosa, penyebab korosi, penghasil toksin, dll. eteksi ini

dilakukan penentuan kehadiran terhadap mikroorganisme. etelah

dideteksi kemudian dilakukan enumerasi yaitu menghitung jumlah

mikroba organisme tersebut per ml nya. Untuk menghitungnya

kemudian dilakukan T*6 yaitu menghitung jumlah koloni yang dibiakan

pada suatu media dica'an kemudian dilakukan &*T untuk menghitung

lebih detailnya dgn uji dugaan, uji konrmasi dan uji lengkap. elain

menghitung jumlah mikroorganisme juga bisa dilakukan dengan

menentukan nilai -*" dari air buangan. emua prosedur tsb tetap

mengacu pada bergey#s manual determinati7e of "acteriology.

Tahap%tahap analisis makanan(

a. Total count ( "akteri, ragi, jamurb. eteksi dan enumerasi ( bakteri,ragi,jamurc. &*T ( bakteri coli

%"ergey#s manual determinati7e of bacteriology% -6>) 3International Comission Microbiological Spesifcation or

ood5

:angkah pertama dilakukan total count terhadap bakteri, ragi, jamur

dalam makanan. etelah itu untuk lebih spesiknya dilakukan

deteksi+penentuan kehadiran terhadap bakteri patogen, dll. erta

dilakukan enumerasi dengan melakukan &*T dengan tahap uji dugaan,uji konrmasi dan uji lengkap serta analisis tetap mengacu pada

"ergey#s dan -6>).

2. >etode *6 3tandard *late 6ount5 atau T*6 adalah metode untuk

menghitung jumlah mikroba dengan menanam mikroba kedalam

suatu media, dengan perlakuan inkubasi pada 'aktu dan suhu

tertentu, bakteri+mikroba akan tumbuh dan berkembang biak

membentuk koloni yang dapat dilihat dan dihitung langsung tanpa

menggunakan mikroskop. T*6+*6 dilakukan pada ca'an petri dimana

mikroba dapat dibiakan baik dengan cara digesek langsung maupun


7/14

secara tuang menuang. *ada metode T*6 ca'an yang dihitung jumlah

koloni harus diantara


8/14

*. Quiz II

1. Terangkan dengan jelas apa yang dimaksud dengan mikroba indikator?

"erikan contoh dan ujinya!2. pa yang dimaksud dengan uji fosfat?sebutkan prosedur untuk

melakukan uji tersebut!. "eberapa bakteri dapat menghasilkan asam dan gas, tunjukan bah'a

Lactobacillus sp. apat menghasilkan asam dan gas dengan

menggunakan "ergey#s >anual!

&a'aban(

1. >ikroba indikator adalah suatu jenis+golongan mikroba yang ada

dalam suatu bahan dengan jumlah diatas ambang batas, biasanya jika

suatu jenis mikroba berada dalam suatu bahan dengan bahan tersebutbisa dinyatakan tercemar. 6ontohnya ( Escherichia coli. 6ontoh ujinya

ada tahap yaitu(a. Tahap pendugaan ( masukan lactose broth dan 1< m: sampel

kedalam tab.reaksi dan masukan juga dalam tab.durham dalam

posisi terbalik, kedalam tab.reaksi lain masukan lactose broth dan 1

m: sampel kedalam tab.reaksi dan masukan juga dalam

tab.durham dalam posisi terbalik, kedalam tab.reaksi lain masukan

lactose broth dan


9/14

b. Tahap penetapan( masukan media />" kedalam aca'an steril,

tunggu hingga memadat kemudian inokulasikan dari tiap tabung yg

positif kedalam ca'an, inkubasi 2D2$ jam kemudian amatic. Tahap kelengkapan ( masukan lactose broth kedalam tab. Feaksi

dan tab. urham, kemudian sterilisasi dan inokulasikan biakan dari

ca'an ke dalam tab.reaksi, dan inkubasikan 2D2$ jam, amati tab.

yang positif 0emudian di tabung reaksi lain masukan media @ kemudian

inokulasikan biakan dari ca'an pada tahap 2 ke media @,

kemudian inkubasi 2D2$ jam3 2 tab disuhu


10/14

1. Staphylococcus aureus adalah mikroba patogen yang terdapat

biasanya pada kulit yang luka atau air susu yang terkontaminasi.

ambarkan diagram alir identikasi mikroba tsb berdasarkan bergey#s

manual!juga sebutkan analisis yang dilakukan!serta "agaimana cara

menghitung koloninya?2. ebutkan faktor%faktor penting dalam menganalisis mikrobiologi

makanan!jelaskan ja'aban anda!

&a'aban (

1. "erdasarkan bergey#sram stain

ram positif gram negatif

6occi "acil

round inclusters and tetrads

Uji katalase

9asil positif hasil negatif

)ermentase manitol

9asil positif hasil negatif

Staphylococcus aureus

"erdasarkan bergeys uji yang dilakukan adalah( pertama yang

dilakukan terlebih dahulu P,a&naan. *e'arnaan haruslah

menghasilkan gram positif yang berbentuk bulat. etelah dipastikan

bakteri gram positif dan berbentuk bulat, maka dilakukan Uji

Ka%aa$. Uji katalase ini haruslah menghasilkan hasil yang positif.

etelah dilakukan Uji n%a$ #ani%/0 dimana hasil positif dari

uji fermentase manitol ini adalah positif Staphylococcus aureus.

"erdasarkan uji cemaran ( analisis yang dilakukan adalah hal yang

pertama dilakukan metode TP. imana dibuat pengenceran 1


11/14

bulat ber'arna biru 3karena gram positif 5 yang bergerombol atau

sendiri. etelah itu dilakuka uji a%aa$ dimana bakteri dipindahkan

ke media dan ditambah koagulase plasma kelinci yang mengandung

/T, Staphylococus aureus akan menghasilkan positif pada uji inidimana akan terjadi gumpalan.

2. )aktor penting dalam menganalisis mikrobiologi makanan(a. 0andungan yang ada didalamnya( seperti protein, lemak,

karbohidratb. 0emungkinan jenis mikroba yang tumbuh( misal ragi, jamur, bakteri

bahkan bakteri penyebab keracunan yaitu Clostridiumc. *arameter dan cuan yang digunakan(misalnya parameter yang

digunakan adalah @-, range tumbuhnya koloni yang

diperbolehkan, dll. an juga misalnya acuan yang digunakan

adalah -6>) atau bergey#s manual.

4. UAS (Ujian A"i& S#$%&'

1. ebutkan dengan jelas perbedaan antara /sei "iologis dengan Uji

6emaran >ikroba.2. ambarkan diagram alir untuk menguji adanya bakteri Salmonella

typhosa didalam air susu!"erdasarkan informasi yang diperoleh air

susu tersebut sudah dipasteurisasi

5. UAS (Ujian A"i& S#$%&'

1. &elaskan apa yang dimaksud dengan eksotoksin dan endotoksin!2. &elaskan apa yang dimaksud dengan ood-borne disease. pa yang dimaksud dengan uji hidrolisis hipurat, terangkan dengan

jelas!$. &elaskan bah'a pada makanan 3misal protein5 tidak terbebas dari

pengaruh kehadiran mikroba. Uraikan jenis degradasi apa saja yang

mungkin terjadi. ebutkan uji apa yang dapat dilakukan!

&a'aban(


12/14

1. /ksotoksin ( Toksin bakteri yang akan keluar dari tubuh bakteri pada

saat hidup, bersifat termolabil, toksiistasnya menurun+hilang apabila

disimpan lama, tidak tahan pada suhu tinggi, larut dalam air/ndotoksin ( toksin yang berada didalam sel bakteri, dan akan keluar

apabila m.o tsb sudah mati, toksisitasnya G


13/14

1. ebutkan dan jelaskan diagram alir cara menguji Shigella sp. >enurut

"ergey#s >anual dan sebutkan analisis+uji yang dilakukan!dan

sebutkan urutan medianya!2. pa yang dimaksud uji fosfatase?jelaskan!. ebutkan karakteristik dan persiapan sampel yang harus dipersiapkan

sebelum dianaliisis!3"erikan hanya = contoh saja!5

&a'aban(

1.5Uji yg dilakukan adalah uji oksidase, uji fermentase lactose, uji indole,

uji urease, dekarboksilase.Urutan media ( media umum 3pe'arnaan gram, oksidase test5, media

pengaya3fermentase lactose, indole5, media selektif 3urease,

dekarboksilase52.5 Uji fosfatase adalah uji yang dilakukan pada susu yang telah

dipasteurisasi dimana uji ini digunakan untuk mengetahui apakahpasteurisasi yang dilakukan pada susu telah sempurna+berhasil atau

tidak. ilakukan uji fosfatase karena pada susu terdapat $ en;im yaitu

en;im lipase, en;im katalase,en;im peroksidase, dan en;im posfatase.

/n;im lipase dan katalase merupakan en;im yang bisa rusak apabila

pada suhu aka untuk mengeceknya

dapat dilakukan uji posfatase, caranya susu yang telah dipasteurisasi

ditambahkan disodium fenol posfat dan ;at folin kemudian

diinkubasikan selama 2$%$H jam, apabila terbentuk 'arna biru artinya

posfatase masih ada dalam susu sehingga proses pasteurisasi belum

sempurna, tetapi jika tdk terbentuk 'arna biru artinya susu telah

sempurna mengalami pasteurisasi dan tidak ada en;im posfatase

didalamnya.

5 a. ampel harus representatif b. ampel yang beku+mudah rusak dianalisis paling lama G jam.

c. ampel beku sebelum dianalisis dilelehkan terlebih dahulu sebelumdiuji dengan menyimpannya pada lemari pada suhu $=o6 selama 1=menit.

d. ampel beku yang mudah leleh tdk perlu dilelehkan terlebih dahulutetapi langsung dianalisis

e. pabila sampel telah diterima harus segera dianalisis

f. ampel yang telah digunakan untuk beberapa pengujian harusdicuplikan terlebih dahulu


14/14

g. ampel dalam t'adah+kemasan plastik dapat disimpan pada suhukamar

h. 9arus menjamin sampel tidak mengalami perubahan dan sebisamungkin sampel tidak boleh terkontaminasi bahan atau mikroba lain

mikrobiologi-analitik

Documents