modulo 5

PPrriimmeerr CCuurrssoo AArrggeennttiinnoo ddee PPrreevveenncciinn yy CCoonnttrrooll ddee IInnffeecccciioonneess HHoossppiittaallaarriiaass

PPoorr IInntteerrnneett

AUTORES

DDrr.. GGuuiilllleerrmmoo RR LLoossssaa Mdico Especialista Jerarquizado en Infectologa Master en Microbiologa Clnica y Sanitaria Director del Instituto Nacional de Epidemiologa Jefe del Programa de Prevencin y Control de Infecciones Hospitalarias DDrraa.. DDiiaannaa GGmmeezz

Bacteriloga Jefa de la Seccin Bacteriologa del INE.

DDrraa.. JJuuaannaa VVaaiirreettttii Mdica Especialista en Neonatologa Programa de Prevencin y Control de IH del INE

LLiicc.. NNoorrmmaa PPeerraallttaa Lic. en Enfermera Docente Universitaria Programa de Prevencin y Control de IH del INE

EEnnff.. IIllddaa TTeelloo Enfermera del INE. Programa de Prevencin y Control de IH del INE COLABORADORES MMaabbeell CClleemmeennttee MMaarrcceelloo CCrrddoobbaa

P R O G R A M A N A C IO N A L D E

P R E V E N C I O N Y C O N T R O L D E

IN F E C C IO N E S H O S P IT A L A R IA S

I. N . E .

[email protected]

Ministerio de Salud Secretara de Polticas, Regulacin y

Relaciones Sanitarias

ADMINISTRACION NACIONAL DE LABORATORIOS E INSTITUTOS DE SALUD

"Dr. CARLOS G. MALBRAN"

INSTITUTO NACIONAL DE EPIDEMILOGA Dr. Juan H. Jara

Ministerio de Salud

Secretara de Polticas, Regulacin y Relaciones Sanitarias Administracin Nacional de Laboratorios en Institutos de Salud

Instituto Nacional de Epidemiologa "Dr. Juan H. Jara" Programa de Prevencin y Control de Infecciones Hospitalarias

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Rol del Laboratorio de Microbiologa en Infecciones Hospitalarias:

Algunos Conceptos Bsicos

Indice

La microbiologa ............................................................................................. 3 - Flora microbiana ............................................................................................ 3 - Importancia de la biota .................................................................................. 4 - Flora habitual ........................................................................................... 5 - Flora de las vas respiratorias .................................................................. 6 - Flora habitual de la boca .......................................................................... 7 - Encas, alvolos dentarios y criptas amigdalinas ..................................... 7

- Flora normal del tracto gastrointestinal ................................................... 8 - Flora normal del ojo ................................................................................. 9 - Flora normas del odo ............................................................................... 9 - Flora normal del aparato urinario ............................................................. 9 - Flora normal de la vagina ......................................................................... 10 Laboratorio de microbiologa - Introduccin.................................................... 11 - Toma de muestra ....................................................................................... 11 - Seleccin de muestra ................................................................................ 12 - Conservacin de muestras .......................................................................... 14 Muestras clnicas para investigacin de infecciones a travs del cultivo ......... 15 Ejemplos de tomas de muestras ms importantes en I.H. 17 Diagnstico micolgico .................................................................................... 23 Obtencin de muestras para estudio virolgico ................................................. 25 Normatizacin de toma, envo y traslado de muestras de sangre ...................... 26 Normas de bioseguridad .................................................................................... 28 Vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos . 30 Bibliografa ... 31 Anexo I Datos que deben consignarse con el envo de cepas o especmenes ... 32 Anexo II - Formulario para solicitud de toma de muestra .................................. 33

- Postulados de Koch ..................................................................................... 34

- Postulados de Falkow .................................................................................. 34

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a Microbiologa La microbiologa es una ciencia nueva, la existencia de microorganismos vivos fue avizorada tericamente por muy pocos en el pasado y fue imposible su desarrollo sin un correlato cientfico experimental. En realidad su fundacin como ciencia real no proviene de ninguna abstraccin terica sino de la necesidad de resolver problemas prcticos, en la mayora de los casos generados por la presin de la revolucin industrial y/o problemas poltico-econmicos de salud (humana, animal y vegetal) que deban resolver los gobiernos. Estos fueron fundamentalmente presionados por la incipiente industrializacin de las fermentaciones (cervezas, vinos, panificacin, lcteos) y la necesidad de control de las grandes plagas de plantas, animales y humanos. La poca de oro de la fundacin de la microbiologa como ciencia se inicia en los albores de 1850. Si bien como ya dijimos el estudio de los procesos fermentativos y el rol etiolgico de los microorganismos en la patologa fueron los motores del desarrollo, tambin hubo investigadores que comenzaron estudios bsicos para definir qu eran los microorganismos. Desde principios del siglo XX, se realizaron estudios sobre los aspectos energticos y fisiolgicos de las bacterias. Fueron muchos menos los cientficos ocupados por los aspectos bsicos de los microorganismos, que aquellos que se volcaron al descubrimiento de nuevos patgenos de humanos, animales y de plantas. A partir de 1940 un grupo de investigadores, con una fuerte formacin en el rea de la fsica, tomaron los modelos microbiolgicos para investigar los problemas abstractos de la gentica y los mecanismos bsicos de la vida misma. Este movimiento se gener sin otra presin aparente que la del conocimiento cientfico, fundando un nuevo mbito de la ciencia: la Biologa Molecular. La evolucin de la biologa molecular, con una fuerte raz microbiolgica, ha desembocado en la aplicacin de tcnicas de recombinacin gentica que han conmovido los lmites biolgicos de las especies (bacterias, plantas y animales transgnicos) generando una nueva revolucin industrial.

FLORA MICROBIANA El medio donde vivimos es un ambiente poblado de microorganismos. El hombre sano y normal, desde el momento de su nacimiento y a lo largo de toda su vida alojar miles de especies de bacterias y, en menor nmero, a otros seres vivos (hongos, virus protozoos) en diferentes sitios de su organismo. De este modo la interaccin hombre-microorganismo es permanente, y dicha interaccin puede resultar indiferente, beneficiosa o perjudicial.

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No existe ninguna regla establecida para dividir a los microorganismos del hombre en categoras definidas, pero los microbilogos los han enmarcado en dos grandes grupos, uno perteneciente a los microorganismos que son capaces de convivir con el hombre y que habitualmente no causan perjuicio y otro que comprende a los microorganismos responsables de desencadenar enfermedad, denominados patgenos primarios o estrictos. El trmino flora microbiana normal se utiliza para designar a aquellos microorganismos que habitan normalmente en los individuos sanos, sin provocar invasin. Tambin se denomina flora indgena, autctona o nativa del hombre. La microflora nativa, indgena o autctona no es estable a lo largo de la vida como consecuencia del desarrollo anatmico y fisiolgico. La edad del husped, el requerimiento alimenticio, la temperatura corporal, la acidez, la disponibilidad de oxgeno, el pH de la zona, la influencia ejercida por otros microorganismos, la disponibilidad de elementos nutritivos, el estado inmunolgico del husped, el ambiente, son algunos de los factores que determinan el nmero y tipo de flora presente en diferentes sitios del organismo. Los microorganismos de la flora normal pueden dividirse de acuerdo con su permanencia en dos grandes grupos: a) Flora invariable o residente que est compuesta por tipos relativamente fijos de

microorganismos en sitios determinados y que por si alguna razn desaparece (empleo de antimicrobianos, por ejemplo) se restituye con bastante rapidez.

b) Flora transitoria constituida por grmenes no patgenos o potencialmente

patgenos que permanecen sobre la superficie corporal o mucosas durante horas, das o meses. Provienen del ambiente y slo cobran significacin cuando la flora permanente desaparece aprovechando la situacin para proliferar y, en algunas circunstancias, invadir y ser responsables de producir enfermedad.

IMPORTANCIA DE LA BIOTA NORMAL

La flora indgena desempea un importante papel pues puede prevenir, por medio de un conjunto de acciones, ciertas enfermedades bacterianas. Este conjunto de acciones se conoce con el nombre de Antagonismo Bacteriano suprime el crecimiento de otras bacterias y hasta de hongos potencialmente patgenos al competir por los nutrientes esenciales y al producir ciertas sustancias inhibidoras, las cuales son bien especficas, denominadas genricamente bacteriocinas. Ejemplos de ellas son: colicinas, elaboradas por E.coli; klebosanas, sintetizada por el gnero Klebsiella; marscecinas producida por Serratia marscesens; pesticina, sintetizada por Y. pestis, etc.

Queda demostrado luego del tratamiento con antimicrobianos de amplio espectro; que la flora normal del tubo digestivo puede ser reemplazada por ciertos

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hongos (gnero Cndida) o estafilococos que habitualmente estn inhibidos en su crecimiento dando lugar a la aparicin de disbacteriosis. El sinergismo bacteriano posibilita el desarrollo de algunas bacterias patgenas en ciertas zonas del organismo en las que no podran, por s solas, crecer. La ayuda que pueden prestarse las bacterias se vincula con hechos como compartir sustancias metablicamente indispensables, enzimas, etc. Ciertas bacterias nativas, sobre todo las residentes en el tubo digestivo, pueden producir endotoxinas responsables de provocar ciertos grados de toxemia en huspedes susceptibles (hipersensibilidad). En ciertas circunstancias, la microflora normal puede por s sola producir patologa, debido a que los microorganismos pueden ser introducidos en los tejidos o al torrente sanguneo o bien pasar de su localizacin habitual, donde se comportan inofensivamente, a otro sitio del organismo donde pueden ocasionar diferentes tipos y grados de enfermedad, de acuerdo con el lugar de localizacin y estado inmunitario del husped. Cuando por alguna razn la inmunidad del husped se ve alterada y sobreviene una infeccin seguida de enfermedad, se denomina, en general, infeccin oportunista, que puede acaecer tambin como resultado de distintos factores iatrognicos y nosocomiales. Si bien stas pueden resultar del ingreso de microorganismos del medio ambiente, dadas las circunstancias antes mencionadas, lo habitual es que el individuo presente enfermedad a partir de su propia flora normal y en este caso reciben el nombre genrico de infecciones endgenas. Flora normal de la piel (103 a 104 microorganismos por cm2, en zonas hmedas puede llegar hasta 10 6 microorganismos por cm2)

Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas Cocos: Bacilos: Hongos - Stapylococcus epidermidis - Coliformes -Cndida albicans - Stapylococcus aureus - Proteus - Cryptococcus - Sarcinas - Acinetobacter - Pityrosporum orbiculare - Micrococcus Bacterias Acido Alcohol - Streptococcus hemolticos Resistentes - Streptococcus hemolticos Micobacterias (conducto auditivo - Enterococos externo, regin axilar y genital) - Peptostreptococcus

Flora habitual

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Bacilos: - Difteroides - Bacillus subtilis - Propionobacterium En el recin nacido: (flora transitoria adquirida por el pasaje a travs del canal del parto) - Lactobacillus acidophilus - Streptococcus sp. - Micrococcus

- Coliformes

a) Conductos nasales b) Nasofaringe

Bacterias grampositivas Bacterias grampositivas Cocos: Cocos: - Staphylococcus epidermidis - Streptococcus viridans - Streptococcus hemolticos - Streptococcus hemolticos - Stapylococcus aureus - Staphylococcus sp. - Streptococcus hemolticos - Streptococcus pneumoniae. - Streptococcus viridans - Streptococcus hemolticos Bacilos: Bacilos: - Difteroides - Difteroides Bacterias gramnegativas Bacterias gramnegativas Cocos: Cocos: - Neisseria meningitidis (10% de la poblacin) - Neisseria sp. - Neisseria sp.(10-15% de la poblacin) - Neisseria meningitidis (15% pobl.) Bacilos: Bacilos: - Haemophilus influenzae (5-10% de la po- - Haemophilus influenzae blacin) - Haemophilus parainfluenzae - Klebsiella sp. - Pseudomonas aeruginosa - Enterobacter sp. - Proteus sp. - Acinetobacter - Bacteroides Otros

- Mycoplasma pneumoniae c) Trquea, bronquios y senos: normalmente son estriles.

Flora normal de las vas respiratorias

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Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas Cocos: Cocos: - Streptococcus hemolticos - Branhamella catarrhalis - Staphylococcus epidermidis - Neisseria mucosa - Streptococcus penumoniae - Veillonella - Streptococcus hemolticos Bacilos: - Streptococcus hemolticos (no grupo A) - Haemophilus hemolyticus - Streptococcus salivarius - Coliformes - Streptococcus sanguis - Fusobacterium - Streptococcus mutans - Eikenella corrodens - Micrococcus - Bacteroides - Peptostreptococcus - Leptotrichia bucalis Bacilos: Otros - Difteroides - Treponemas sp. - Actinomyces israelii Hongos - Candida albicans - Geotrichum Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas Cocos: Bacilos: - Micrococcus (anaerobios) - Vibrio sp. - Peptostreptococcus - Fusobacterias Otros - Treponema microdentium En el recin nacido - Micrococcus - Streptococcus sp. - Staphylococcus sp. - Coliformes - Lactobacillus acidophilus Difteroides Hongos - Levaduras

Flora habitual de la boca

Encas, alvelos dentarios y criptas amigdalinas

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a) Esfago b) Estmago Bacterias deglutidas por la saliva y alimentos Habitualmente libre de grmenes Estos ingresan con los alimentos - Sarcinas c) Duodeno - Lactobacillus acidophillus - Lactobacillus Hongos - Streptococcus sp. - Levaduras - Levaduras Intestino grueso (2 a 4x10 11 bacterias/g de d) Ileon inferior materia fecal seca) Bacterias grampositivas Bacterias grampositivas Cocos: Cocos: - Streptococcus viridans - Enterococcus - Veillonella - Staphylococcus sp. - Streptococcus faecalis Bacilos: - Staphylococcus sp. - Difteroides Bacilos: - Lactobacillus sp. - Lactobacillus sp. - Clostridium perfringens - Clostridium tetani - Actynomices Bacterias gramnegativas - Costridium sp. Bacilos: - Bacillus subtilis - Escherichia coli (ocasionalmente) - Eubacterium - Bifidobacterium Bacterias gramnegativas Bacilos: - Coliformes - Proteus - Pseudomonas - Bacteroides

- fusobacterias Hgado, vescula biliar y peritoneo Otros Zonas estriles - Borrelia - Espiroquetas - Hongos - Candida - Geotrichum - Cryptococcus - Penicillium - Aspergillus Flora normal de lactantes alimentados Flora normal de lactantes alimentados a pecho a mamadera - Bifidobacterium - Lactobacillus acidophilus - Enterococcus (escasos) - Coliformes

Flora normal del tracto gastrointestinal

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- Coliformes (escasos) - Enterococcus - Staphylococcus (escasos) - Bacillus sp. - Clostridium sp.

Meconio Generalmente estril Bacterias grampositivas - Staphylococcus epidermidis Cocos: - Difteroides - Staphylococcus epidermidis - Bacillus sp. - Micrococcus - Peptococcus y Peptostreptococcus - Streptococcus hemolticos Otros Bacterias gramnegativas - Hongos saprfitos Cocos: - Neisseria sp. - Moraxella Otros - Hongos saprfitos

Por lo general es estril. Sin embargo, pueden recuperarse

de la orina normal contaminantes de uretra y zonas vecinas.

Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas Cocos: Bacilos: - Sataphylococcis epidermidis - Coliformes - Enterococcus - Proteus - Streptococcus y hemolticos Hongos Bacilos: - Levaduras - Difteroides Otros - Lactobacillus sp. - Mycoplasmas sp. - Bacillus

Flora normal del ojo Flora normal del odo

Flora normal del aparato urinario

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Recin nacida: Veinticuatro horas a tres das: Tres das a algunas semanas: - Estril - Staphylococcus sp. - Lactobacillus acidophilus - Enterococos

- Difteroides - Mycobacterium smegmatis

Prepber: - Micrococcus - Streptococcus y hemolticos - Coliformes - Difteroides Adulta: Embarazo: - Lactobacillus acidophilus Aumentan durante este perodo - Staphylococcus epidermidis Lactobacillus, Levaduras, Staphylococcus - Streptococcus y hemolticos epidermidis, Streptococcus agalactiae - Bacteroides (20% de las mujeres). - E.coli - Difteroides - Levaduras - Peptostreptococcus - Neisseria sp. - Listeria sp. - Clostridium sp. - Mycobacterium tuberculomatis Flora normal del tero Flora normal del esmegma - Habitualmente estril - Mycobacterium smegmatis Flora normal de L.C.R., sangre y tejidos profundos - Estril

La significacin de un aislamiento de laboratorio estar ntimamente relacionada con la bacteria aislada y el sitio de donde se recuper. Es de vital importancia la toma de muestra correctamente efectuada, su tratamiento y su transporte para poder afirmar si los microorganismos all aislados forman parte o no de la flora normal o, en caso de zonas estriles, descartar o no la posible contaminacin. Recordar:

Es imprescindible el conocimiento de la flora habitual, para evitar lacontaminacin de las muestras con esos microorganismos de piel y mucosas, cuyocultivo induce a confusiones, dificultando el diagnstico y tratamiento. Muestras no representativas, mal recogidas o inapropiadamente transportadasy almacenados, y/o datos incompletos o errneos, pueden alterar o confundir eldiagnstico

Flora normal de vagina

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aboratorio de Microbiologa

INTRODUCCION El propsito del laboratorio de Microbiologa es aislar e identificar el agente etiolgico de la infeccin y establecer un perfil antibitico que permita una terapia apropiada. En los ltimos aos se han desarrollado tcnicas moleculares, que han renovado la Microbiologa, su accesibilidad y aplicabilidad no es uniforme. Para la mayora de las bacterias y hongos, el cultivo en medios artificiales, la identificacin por pruebas bioqumicas y la sensibilidad a antimicrobianos, sigue siendo el mtodo de eleccin para el diagnstico microbiolgico. En tanto que para muchos virus y bacterias intracelulares obligadas se cumplimenta, combinando los cultivos celulares con tcnicas serolgicas. TOMA DE MUESTRA Consideraciones generales El xito de un examen microbiolgico se juega desde el momento de la recoleccin de la muestra. De nada vale la mejor y ms actualizada tcnica frente a un material que no ha sido tomado en el momento oportuno, del sitio ms representativo, con los elementos adecuados y mal conservado. Es por ello que la relacin entre el laboratorio y el personal mdico y de enfermera debe ser muy estrecha. Es funcin del laboratorio la redaccin y divulgacin de las Normas de seleccin y recoleccin de las muestras, su almacenamiento y transporte. El mdico debe ofrecer todos los datos y presunciones clnicas, ya que stos junto con las caractersticas de la lesin, el aspecto microscpico del material, el examen en fresco y por coloracin, facilitan la planificacin de esquemas dirigidos, seleccionando y ampliando los medios de cultivo, tiempo, temperatura y atmsfera de incubacin, lo cual favorece una pronta identificacin del agente causal. La importancia del personal de enfermera reside en ser quien muchas veces de las instrucciones, prepara al paciente y/o recolecta la muestra. Para manejar adecuadamente las muestras biolgicas, debe conocerse el tratamiento especfico que requiere cada una.

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Es muy importante concienciar al personal encargado de la recogida de muestras de la importancia de dicha labor, e insistir en que sigan rigurosamente los protocolos especficos, para cada muestra. SELECCION DE LA MUESTRA Es indispensable que las muestras biolgicas que van a ser analizadas en el laboratorio de microbiologa sean seleccionadas cuidadosamente antes de proceder a su extraccin. Consideraciones Generales Conceptos Bsicos de la Muestra:

1. Preparar el sitio para evitar contaminantes de piel y mucosas. 2. Obtener material del verdadero sitio de la lesin con un mnimo de contaminacin. 3. Establecer el perodo ptimo. 4. Obtener la suficiente cantidad de muestras. 5. Utilizar dispositivos de recoleccin y medios de transporte adecuados. 6. Obtener la muestra, en lo posible, antes de la administracin de antimicrobianos. 7. Rotular correctamente. 8. Enviar lo antes posible. 9. Examinar estado de la muestra al recibirla.

Consideraciones Especficas De la orden: - Paciente: nombre, sexo, edad, sala y cama, direccin, historia clnica - Mdico: nombre, domicilio y telfono - Material: tipo, fecha y hora de extraccin - Informacin clnica: diagnstico y tratamiento Del medio: - Ambulatorio u hospitalizado - Reinternaciones o derivaciones de otros centros De la tcnica: - Momento de la toma (antibiticos, anestsicos tpicos, etc.) - Toma del material

La frecuencia con la cual son aislados contaminantes mide la calidad de la recoleccin de la muestra"

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- Almacenamiento y transporte de la muestra - Demoras en el procesamiento - Seleccin de medios de cultivo - Errores de interpretacin De la recepcin: Muestras que deben recibirse durante las 24 hs:

- Lquidos de puncin - Vlvulas de derivacin de hidrocefalia - Vlvulas cardacas - Lesiones abiertas o cerradas de piel y partes blandas - Coprocultivos e investigacin de Vibrio cholerae - Farngeos e Investigacin de C. diphteriae - Bsqueda de Clostridium de gangrena gaseosa, etc. Muestras en las cuales puedan establecerse horarios de recepcin: - Lquidos de drenaje - Biopsias - Urocultivo - Esputo y aspiraciones bronquiales Muestras que deben entregarse en forma inmediata a su extraccin:

- Cepillado bronquial con catter protegido - Lavado broncoalveolar - Sangre para lisis-centrifugacin - Lquido cefalorraqudeo - Biopsia para investigacin de Helicobacter pylori - Investigacin de Clostridium difficile - Investigacin de Corynebacterium diphteriae - Ulceras de crnea - Muestras para investigacin de gangrena gaseosa - Primer chorro miccional - Lavado gstrico para Bsqueda de Mycobacterias

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CONSERVACION DE MUESTRAS a) Bacteriologa General

Estufa y/o Bao 35C 9 Hemocultivo Temperatura ambiente 9 Lquidos de puncin 9 Materiales para investigacin anaerobios (TAB) 9 Primer chorro miccional 9 Muestras en medios de transporte:

lesiones abiertas 9 Hisopados y/o punciones de lesiones cerradas 9 Exudados vaginales y uretrales 9 Oticos 9 Coprocultivos

Heladera 9 Punta de catter 9 Orina (chorro medio-Suprapbica-de Sonda) 9 Esputo 9 Aspirado bronquial 9 Materia fecal sin medio de transporte

9 Biopsia (excepto investigacin H. pylori) 9 Costras y quemaduras sin medio de transporte b) Mycobacterias

Temperatura ambiente 9 Frotis para M. leprae

Heladera 9 Todas las muestras 9 Agregar 1 cc. de Agua destilada (no Solucin Fisiolgica) a: Hisopado larngeo Biopsias Piezas de ciruga 9 Neutralizar Lavado gstrico c) Micologa

Estufa y/o bao 35C 9 Hemocultivo

Temperatura ambiente 9 Muestras de piel y faneras

Heladera 9 Esputo 9 Lquidos de puncin 9 Materia fecal 9 Orina 9 Biopsias 9 Hisopados 9 Sangre para serologa

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uestras Clnicas para Investigacin de

Infecciones a travs del cultivo

A) Vas areas superiores:

Exudado faringeo Secreciones nasofarngeas Hisopado tico Puncin timpnica

B) Vas areas inferiores:

1) Con tcnicas no invasivas: Esputo Aspirado traqueal

2) Con tcnicas invasiva:

a) A travs de la va area Puncin transtraqueal (PTT)

Broncoaspirado (BAS) Cepillado bronquial con catter protegido (CP) Lavado broncoalveolar (BAL)

Biopsia transbronquial

b) Por va percutnea: Puncin transtorcica Biopsia pulmonar

3) Otras tcnicas:

Hemocultivo Puncin pleural Suero Orina

Hemocultivo Retrocultivo o hemocultivo central Catteres Vlvulas cardacas Puncin Pericrdica

Material de abscesos Coprocultivo Hisopado rectal Lquido duodenal Bsqueda de Microoroganismos especiales (Clostridium difficile)

MM DD

EE LL AA

PP AARRAA T

T OO

RREE SS

PP IIRRAA T

T OORR I

I OO

CCAA R

RDD

II OO--

VV A

A SSCC

UULL AA

RRAA P

P AARR

AA TT OO

DD

II GGEE S

S TTII VV

OO

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Urocultivo por chorro medio Puncin de sonda vesical Puncin suprapblica

Exudado uretral Exudado vaginal Primer chorro miccional Hisopado de lesiones Aspirado de lesiones

Exudado conjuntival Ulcera de crnea Material de infecciones intraoculares

Lesiones cerradas de piel y partes blandas Lesiones abiertas Costras y quemaduras Biopsias Lquidos de drenaje Bsqueda de microorganismos especiales

Lquido cefalorraqudeo Material de abscesos cerebrales Vlvulas derivacin ventrculo atrial y ventrculo peritoneal

Pacientes: la muestra necesaria segn la zona afectada Ambiente Personal

DDEE L

L TT RR

AA CC

TT OO

UURR

II NNAA R

R II OO

GG

EE NN

II TTAA L

L EESS

OO

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CCAA S

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AA LL

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SS PP II

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II AASS

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EJEMPLOS DE TOMAS DE MUESTRAS MS IMPORTANTES EN INFECCIONES HOSPITALARIAS

HEMOCULTIVO - CATETERES Y OTROS

HEMOCULTIVOS (SANGRE) Elementos necesarios: - Delantal o camisoln, barbijo y guantes descartables - Jeringas y agujas estriles, descartables - Gasa estril - Iodo podivona al 10% u otro desinfectante efectivo - Alcohol 70o - Frascos para la recoleccin de la muestra - Agua, jabn y lavandina - Bolsita para transporte - Descartador de agujas y bolsa de residuos Instrucciones: Actividades previas: - Preparar todos los elementos necesarios y revisar la orden - Lavarse las manos con agua y jabn y secarse con gasa estril o toalla descartable - Quitar la tapa protectora del frasco y desinfectar con iodo povidona - Lavar la piel del paciente con agua y jabn y secar con gasa estril (variante: desinfectar con alcohol 70o) - Colocar el lazo, palpar la vena a punzar - Desinfectar la piel con iodo povidona, con movimientos circulares del centro hacia afuera NO VOLVER A PALPAR LA VENA Toma de muestra: El operador antes de comenzar la tarea deber colocarse camisoln, barbijo y guantes Punzar la vena seleccionada y extraer sangre, la cantidad depender del tipo de frasco

a utilizar, en general se usa en dilucin al 10%. SI SE PIERDE LA VENA DEBE DESINFECTARSE NUEVAMENTE LA PIEL. UNA VEZ SELECCIONADA LA NUEVA VENA USAR JERINGA Y AGUJAS NUEVAS Inclinar el frasco antes de colocar la sangre para evitar reflujo Inocular la sangre y homogeneizar por rotacin para evitar la coagulacin Descartar el material utilizado, desinfectar sector con lavandina, quitarse guantes y

barbijo y colocar todo en la bolsa de residuos Rotular la muestra y colocarla en la bolsa de transporte Remitir al laboratorio

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OPTIMIZAR LA MUESTRA: Al ingreso:

Se toman dos o tres muestras, con intervalos segn el cuadro clnico, por ej.: cuando la bacteriemia es continua el intervalo ser de una hora, cuando es transitoria recoger preferentemente antes del pico febril. En casos agudos y antes de medicar tomar dos o tres muestras con intervalos de 15 minutos. Si ha recibido antibiticos tomar la muestra en el valle (previo a siguiente dosis) o antes de rotar la medicacin. Durante la internacin: Dos o tres muestras cuando: empeoramiento del cuadro clnico - sospecha de infeccin intrahospitalarias - antes de rotar el tratamiento emprico - 48-72 hs. despus de terminado el esquema y con germen aislado 3) Pacientes con catter: - Control del catter: una muestra a travs del mismo - Sospecha de Infeccin: una muestra a travs del catter y una perifrica En pediatra se extraen 5 cc. La primera muestra inmediatamente antes de administrar el antibitico (valle). La segunda muestra despus de administrar el antibitico, el momento depende de la va de administracin, si es EV o IM a los 15 minutos y oral a los 90 minutos. Rotular ambas muestras, indicando la secuencia. NOTA: en caso de recibir ms de un antibitico, debern coincidir en un momento del da y all se efectuar la toma.

CATETERES Elementos necesarios: - Delantal o camisoln, guantes y barbijo descartable - Tubos estriles con tapa a rosca - Pinza y tijeras estriles - Gasa estril - Iodo povidona 10% u otro desinfectante efectivo - Alcohol 70 - Bolsa de transporte Instrucciones: Desinfectar la piel con iodo povidona durante un minuto. Retirar las conexiones del catter Con pinza estril retirar el catter y cortar el extremo distal aproximadamente 3 cm.

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Colocarlo en el tubo, rotularlo, colocarlo en la bolsa de transporte para ser enviado al laboratorio

Descartar los elementos y desinfectar el sector NOTA: cuando se retire ms de un catter colocarlos en tubos diferentes e indicar su ubicacin.

RETROCULTIVO

Se toman 5 ml. de sangre a travs del catter (retrocultivo) y 5 ml. de sangre de una vena perifrica para cultivo cuantitativo. Colocarlos en tubos estriles heparinizados por separados. Enviar de inmediato para su procesamiento conservndolo a temperatura ambiente hasta su cultivo. CONEXION DE CATETER Y SISTEMA DE INFUSION Realizar el hisopado del interior del dispositivo que conecta el catter con el sistema de perfusin. Enviar en tubo seco y procesar de inmediato.

VALVULAS CARDIACAS Colocarlas en forma asptica en un frasco de boca ancha y colocar unas gotas de SF estril, para que no se seque. Remitir inmediatamente al laboratorio. INVESTIGACION DE ANAEROBIOS: Las mejores muestras son las obtenidas de cavidades cerradas a travs de tejidos no

contaminados. La puncin debe realizarse con las precauciones de asepsia de todas las punciones.

Una vez cargada la jeringa, se extraen las burbujas de aire y muy cuidadosamente se introduce parte del material, aproximadamente 2 cc. en el recipiente de transporte tipo TAB y se remite al laboratorio inmediatamente.

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MUESTRAS ANAEROBICAS

MUESTRAS

APTAS INADECUADAS

OCULARES P. HUMORES HISOPADO CONJUNTIVAL

VIAS AEREAS SUPERIORES

P. SENOS P. OIDO MEDIO P. PARAFARINGEA

HISOPADO SECRECION NASAL HISOPADO OTICO HISOPADO FAUCIAL

VIAS AEREAS INFERIORES

CEPILLO ENVAINADO PROTEGIDO P. PULMONAR P. PLEURAL

ESPUTO SECRECION TRAQUEAL SEC. BRONQUIAL L.B.A.

VIAS URINARIAS P. SUPRAPUBICA ORINA CHORRO MEDIO P. SONDA VESICAL

PIEL Y PARTES BLANDAS

P. ABSCESOS P. CELULITIS BIOPSIAS

HISOPADO PIEL HISOPADO FISTULA DRENAJES

TUBO DIGESTIVO

(MAT. FECAL: C.DIFFICILE CULTIVO Y TOXINA)

CONT. GASTRICO HISOP. RECTAL/ANAL MAT. FECAL

TOCO-

GINECOLOGICAS

RESTOS FETALES R.PLACENTARIOS

HISOPADO VAGINAL

LIQUIDOS

NORMALMENTE ESTERILES

TODOS

P.: PUNCION L.B.A.: LAVADO BRONCO-ALVEOLAR P.T.T.: PUNCION TRANSTRAQUEAL

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DE PUNCIONES- BIOPSIAS- PARTES BLANDAS

BIOPSIAS Si la lesin es grande o hay mltiples lesiones, obtener distintos especmenes, colocados en recipientes estriles, perfectamente rotulados. Debe remitirse una porcin de la pared del absceso adems del pus. Enviar inmediatamente e indicar en la orden las investigaciones que se solicitan y las prioridades si la muestra es escasa. NO AGREGAR FIJADORES NI CONSERVADORES

LIQUIDOS DE PUNCION La toma de muestra la realiza el mdico con tcnica asptica. Efectuada la puncin, el material es colocado en tubos estriles con tres gotas de heparina para evitar su coagulacin. Remitir inmediatamente al laboratorio. NO COLOCAR EN HELADERA. En el caso de LCR si es posible no usar heparina.

INFECCIONES PURULENTAS Elementos necesarios:

- Hisopos estriles - Solucin fisiolgica estril - Jeringas y agujas estriles - Tubos limpios y estriles 1) Lesiones cerradas de piel y partes blandas (Erisipela, celulitis) Recoger la muestra por PUNCION previa asepsia. Si se trata de flictenas o ampollas lavar la piel con SF estril y punzar, si fluye material tomarlo, si no fluye inyectar 0,2-0,5 ml. de SF estril y aspirar. Colocar en tubo estril y remitirlo al laboratorio. En caso de bsqueda de anaerobios o demoras en envo o procesamiento debe colocarse en un medio de transporte y dejar a temperatura ambiente. 2) Lesiones abiertas (Heridas, traumatismos) Lavar con SF estril para arrastrar la flora transitoria y tomar la muestra con hisopo y/o jeringa. Enviar de inmediato o colocar en medio de transporte.

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COSTRAS Y QUEMADURAS

Siendo el examen histolgico por biopsia de la herida el mtodo ms seguro y confiable tanto para diferenciar la simple colonizacin microbiana de tejidos no viables de la infeccin invasora de tejido viable, como para establecer el diagnstico de infeccin invasora de la quemadura. La biopsia debera tomarse del rea que muestre hallazgos ms marcados de la infeccin de la quemadura y debe incluir adems reas de tejido sano adyacente a la escara, tomando una muestra de lenticular de 500 mg. (incluir tejido subcutneo viable bajo la quemadura) usando bistur. Si para este procedimiento se va a usar anestesia local, el agente anestsico se inyecta en la periferia del sitio de biopsia para evitar la distorsin de la morfologa del tejido. La mitad de la muestra debe ser cultivada buscando identificar el agente y su sensibilidad a los antibiticos. La otra mitad es procesada para estudio histopatolgico utilizando una tcnica por congelamiento en menos de 30 minutos entre 3 o 4 horas por otros mtodos. Tcnicas para cultivo:

- Limpiar superficie con alcohol 70% isoproplico. - Obtencin biopsia con bistur. - Transporte en tubo estril. - Sumergir en alcohol, secar y flamear el espcimen - Colocar en agar tioglicato en dilucin 1:10. - El espcimen se homogeiniza y se hacen diluciones progresiva en el

tioglicolato. - Cada dilucin es colocada en un medio nutriente (agar sangre). - Incubacin - Tipificacin del germen por las tcnicas habituales.

VALVULAS DE DERIVACION DE HIDROCEFALIA

Colocar en frasco estril y remitir de inmediato al laboratorio.

PROTESIS OSTEOARTICULARES Realizar cultivo de lquido sinovial o material seo. Remitir rpidamente al

laboratorio. PUNCION ARTICULAR, PERICARDICA, PERITONEAL

Desinfectar con alcohol y una solucin de iodopovidona al 10%. Realizar aspiracin percutnea con jeringa. Expulsar el aire de la jeringa e inocular la muestra dentro de un sistema de transporte anaerbico. Tambin se colocar una parte la muestra en un tubo estril con tapa a rosca.

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iagnstico Micolgico El diagnstico de una micosis profunda se puede establecer generalmente por el anlisis del esputo u otros materiales, aunque a veces este tipo de investigaciones (examen directo, cultivo, etc.) permanece negativo y la enfermedad es revelada por una sintomatologa ms o menos caracterstica, acompaada o no de signos radiolgicos y pruebas inmunolgicas positivas (serologas, intradermorreacciones, etc.). ESPUTO:

La toma de muestra se hace de la misma manera que para grmenes comunes. Se recogern como mnimo dos expectoraciones, por la contaminacin ambiental.

BRONCOASPIRACION:

Cuando el paciente no puede emitir la muestra en forma espontnea, puede utilizarse esta tcnica usando broncoscopio o fibroscopio estril. Colocando el material aspirado en frasco estril.

PUNCION TRANSTRAQUEAL:

De emplearse esta tcnica debe informarse al laboratorista, ya que la muestra obtenida por este mtodo requiere ciertas variantes en su procesamiento.

EN TODOS LOS CASOS DE LAS MUESTRAS QUE SE DETALLAN A CONTINUACION SEGUIR LAS INSTRUCCIONES DETALLADAS EN GERMENES COMUNES Y MICOBACTERIAS.

LIQUIDOS DE PUNCION:

Sangre para Lisis-centrifugacin, Lquido cefalorraqudeo, Lquido de puncin pleural y otros.

5) ORINAS: Chorro medio, suprapbica, etc. 6) EXUDADO VAGINAL 7) MATERIAL DE EXERESIS Y BIOPSIAS EN GENERAL 8) INFECCIONES PURULENTAS:

El material purulento se toma con hisopos, jeringas o pipetas estriles, si las lesiones son ulcerosas de piel o mucosas, se limpia con SF estril y con bistur se recoge el material, raspando los bordes de la lesin.

9) MATERIA FECAL:

Para conteo de Cndida o Mucormicosis, se recolecta en frasco estril una cucharada de materia fecal seleccionando las zonas purulentas o sanguinolentas. Cerrar perfectamente el recipiente y remitir al laboratorio o conservar en heladera.

DD

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10) PIEL Y FANERAS: Se higieniza localmente con agua y jabn y en caso necesario se desengrasa con alcohol isoproplico con la ayuda de gasa o algodn. Se toma la muestra con bistur, lanceta o pinza, especialmente de los bordes de la lesin, los pelos rotos y las uas. Se envan al laboratorio en pequeos frascos de vidrio estril, entre porta y cubreobjetos o en sobre hechos con papel limpio (preferentemente blanco).

11) SANGRE PARA ESTUDIOS INMUNOSEROLOGICOS:

Extraer 8-10 cc. de sangre sin anticoagulante. Quitar la aguja y descargar la sangre en tubo estril, deslizando suavemente el mbolo de la jeringa para evitar hemlisis.

Remitir al laboratorio, donde se separa el suero y puede conservarse refrigerado. Se pueden agregar conservadores. Momento de solicitud examen micolgico: Cuando se informan dos baciloscopas negativas, antes o despus del tratamiento especfico. Cuando se informan dos esputos con flora bacteriana normal o grmenes que no son responsables, segn criterio mdico. Cuando al paciente le fue diagnosticada una micosis y se realizan pruebas de control. En casos graves se pueden exceptuar las recomendaciones anteriores e informar al microbilogo la importancia de tal circunstancia.

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DIAGNOSTICO VIROLOGICO MUESTRAS BIOLOGICAS (*) PARA ESTUDIO SEGUN SINDROME CLINICO

O SISTEMA AFECTADO Y AGENTES ETIOLOGICOS MAS COMUNES (*) En negrita las muestras ms tiles para cada estudio

SINDROME CLINICO y/o

SISTEMA AFECTADO

AGENTES

MAS COMUNES

MUESTRAS

BIOLOGICAS

ADENOVIRUS ANF, SUERO ENTEROVIRUS MF, HF, SUERO EPSTEIN-BARR

HERPES HUMANO 6 PARVOVIRUS B19

SUERO

RUBEOLA SUERO

EXANTEMATICO MORBILIFORME

SARAMPION SUERO, ANF, ORINA HERPES HV, SUERO

EXANTEMATICO VESICULAR VARICELA-ZOSTER SUERO, HV

CITOMEGALOVIRUS SANGRE, ORINA, SUERO

DE MADRE E HIJO HIV SUERO, SANGRE

HERPES SIMPLEX

SUERO DE MADRE E HIJO, HISOPADO

CERVICOVAGINAL DE MADRE, LCR DEL HIJO

VARICELA-ZOSTER SUERO, HV HEPATITIS B

PARVOVIRUS B19 RUBEOLA

SUERO

CONGENITAS Y PERINATALES

CITOMEGALOVIRUS ORINA, H DE LESIONES

PAPILOMA VIRUS H CERVICOVAGINAL

TEJIDOS CEPILLADO URETRAL TRACTO GENITAL HERPES SIMPLEX

HV, TEJIDO

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ormatizacin de Toma, Envo y Traslado de la Muestra de Sangre

Toma de muestra - Enfermo en ayunas durante un mnimo de 8 horas - Extraccin de sangre con material descartable - Separar el suero sobrenadante. Debe excluirse suero lipmico o con hemlisis intensa - Envasar en recipiente de cierre hermtico con rtulo identificatorio y fecha de extraccin escrito con lpiz. Conservacin: Si el suero es procesado in situ y dentro de las 48 hs. se conserva en heladera a temperatura entre 2 y 8 C; pero si es derivado, congelar y transportar en recipientes trmicos apropiados con material refrigerante. La cantidad de suero enviado no debe ser menor de 2 ml., guardar una alicuota en freezer. Se debe completar la Ficha para el Laboratorio como requisito previo, que justifique el estudio, de lo contrario no se dar curso al pedido. Dicha ficha debe insertarse entre el recipiente externo y el recipiente trmico. El envase transportador ser enviado por personal debidamente acreditado y caratulado con el sello, smbolo y rtulo de sustancia infecciosa, fecha, posicin del envase, telfono del destinatario y remitente. Identificacin de la muestra (Ejemplo) Debern indicarse con letras maysculas la inicial de/los apellido/s y nombre/s y a continuacin la fecha de nacimiento colocando los dos dgitos correspondientes al da, mes y ao.

ENVIO, CONSERVACION Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS DE LOS RECIPIENTES:

El laboratorio deber disponer de recipientes apropiados para colocar los diferentes materiales:

Tubos de vidrio o plstico limpios y estriles

NN

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Tubos de vidrio o plstico con hisopos estriles Recipientes de boca ancha Frascos de hemocultivo Recipientes con medio de transporte: Cary Blair Stuart Tipo TAB para anaerobios NOTA: no remitir muestras en jeringas

Es preferible el procesamiento inmediato del material, an la siembra al lado del paciente como en lceras de crnea. De no ser posible, es necesaria la conservacin para lo cual existen una serie de requisitos de medios y temperaturas para evitar la prdida de microorganismos.

En el caso de lquidos de puncin, biopsias y otras muestras importantes, se debe avisar al laboratorio para que haya alguien disponible que lo procese de inmediato, sobre todo cuando la cantidad es muy escasa.

Los recipientes deben mantenerse en posicin vertical con el tapn hacia arriba, para evitar la contaminacin o derrame del material. Ningn antimicrobiano, antisptico o conservador debe entrar en contacto con la muestra.

Las muestras, correctamente rotuladas, se remitirn en condiciones que eviten la contaminacin exterior de los envases y evitando derrames. Es conveniente colocarlas en bolsas de polietileno, cerradas.

Se adjuntar la solicitud con todos los datos requeridos en letra

legible y por fuera de la bolsa de transporte. Con respecto a los horarios cada Laboratorio lo establecer de acuerdo a sus disponibilidades pero sin olvidar la urgencia de ciertas muestras.

DDEE L

L TT

RRAA

NNSS P

P OO

RRTT E

E

DDEE

LLAA

CCOO

NNSS E

E RRVV

AACC

II OONN

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ormas de Bioseguridad

La manipulacin, el transporte y el envo de muestras indebidamente embaladas entraan un riesgo de infeccin para todas las personas que intervienen directamente o entran en contacto con cualquier parte del proceso. La manipulacin incorrecta dentro del laboratorio pone en peligro no solo a los trabajadores inmediatamente afectados sino tambin al personal administrativo o de secretaria y a otros auxiliares. El transporte de muestras entre laboratorios e instituciones extiende el riesgo al pblico y al personal de los servicios de transporte y de correos.

Transporte de muestras: Normas Generales

1. Los recipientes para las muestras deben ser de plstico o vidrio irrompible y hermticos. Es preferible que estn provistos de tapn de rosca.

2. Una vez cerrado y sellado el recipiente, debe limpiarse con desinfectante - solucin de hipoclorito con 0,1% de cloro libre (1 g/litro, 1000 ppm)- y debe secarse.

3. Cuando se recibe una muestra, antes de abrir el recipiente es preciso limpiarlo con desinfectante, como se acaba de sealar.

4. Dentro de la institucin sanitaria y del laboratorio, los recipientes de muestras se colocarn en gradillas para mantenerlos en posicin vertical. Las gradillas se transportarn a sus vez en recipientes hermticos de plstico o metal que retengan las fugas o derrames accidentales.

5. Los recipientes de muestras en gradillas que se transporten desde los puntos de recogida sobre el terreno o de un laboratorio a otro en vehculos controlados por los laboratorios, deben colocarse en cajas estancas de plstico o metal con tapas seguras y que cierren bien.

6. En las zonas que no dispongan de un suministro elctrico fiable, puede ser necesario transportar y almacenar las muestras en tanques de nitrgeno lquido con tiempos de conservacin largos.

Acarreo de muestras por los medios de transporte pblicos El Comit de Expertos de las Naciones Unidas en Transporte de Mercancas Peligrosas, la Asociacin de Transporte Areo Internacional (IATA), la Unin Postal Universal (UPU), la Organizacin de Aviacin Civil Internacional (OACI) y la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) han formulado normas para el acarreo de muestras por correo, va area y otros medios de transporte comunes, las cuales pueden resumirse como sigue:

NN TT R

RAA

NNSS

PPOO

RRTT E

E DD

EE MM

UUEE S

S TTRR

AASS

-- NN

OORR

MMAA S

S GG

EE NNEE RR

AA LL EE

SS

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1. La muestra se colocar en un receptculo estanco de vidrio o plstico de buena calidad, el cual se cerrar hermticamente para impedir fugas. Los tapones de rosca o de presin, como los corchos, se sujetarn con alambre, cinta adhesiva u otro material seguro.

2. El recipiente de la muestra (receptculo primario) se envolver en material absorbente (por ej.: toallas de papel o de tela, algodn hidrfilo, guata de celulosa) en cantidad suficiente para absorber todo el lquido en caso de derrame.

3. El recipiente de la muestra bien envuelto se colocar en un recipiente resistente y estanco (receptculo secundario) pueden ponerse en este varias muestras envueltas. Hay que usar material absorbente (adems del mencionado en el prrafo 2) en cantidad suficiente para rellenar los huecos que queden entre los recipientes de muestras.

4. El receptculo secundario se embalar con material bastante slido para proteger el contenido de posibles daos durante el traslado.

5. Antes de despachar las muestras, el remitente, el transportista y el laboratorio destinatario, habrn hecho los trmites necesarios para el envo, la recogida, etc.

6. Todos los formularios con datos sobre las muestras, cartas y otra informacin impresa que sirva para identificarlas o describirlas irn pegados por la parte exterior del receptculo secundario.

7. Hay que observar todas las normas nacionales e internacionales de envo y transporte.

RECUERDE

Cuando se enve una muestra fuera del laboratorio, debentomarse precauciones especiales para mantenerla en ptimascondiciones durante su transporte, as como para evitar la rotura desu envase, con el consiguiente riesgo de contaminacin.

AACC

AARR

RREE O

O DD

EE MM

UUEE S

S TT RR

AASS

PPOO

RR LL

OOSS

MMEE D

DII OO

SS DD

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TT RR

AANN

SS PP O

ORR

TT EE

PP

BBLL II

CCOO

SS

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Vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos

Red WHONET Argentina: Perodo 1994-1998

Marcelo Galas, Alejandra Corso, Marta Tokumoto, Uiana Guelfand * y Alicia Rossi La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) ha desarrollado un programa de vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos denominado WHONET. Uno de los principales objetivos es facilitar los estudios de prevalencia de la resistencia bacteriana en cada unidad hospitalaria. La creacin de redes de laboratorio permite vigilar la diseminacin de los distintos perfiles de resistencia. Utilizando un programa informtico nico para el tratamiento de datos es posible establecer tendencias regionales, detectar resistencias inusuales y aportar bases nacionales para el uso de antimicrobianos. En Argentina el ServicioAntimicrobianos (ATB) perteneciente al Departamento de Bacteriologa del Instituto Nacional de Enfermedades Infecciosas (INEI) ANLIS "Dr. C. G. Malbrn" ha convocado a la formacin de una red de laboratorios que originalmente estaba compuesta por centros de la Capital Federal pero que a partir de 1994 se ha extendido a la mayor parte del territorio nacional. Actualmente participan 33 centros hospitalarios representativos de las diferentes regiones del pas (ver mapa). Esta red permite obtener datos a nivel nacional y constituye un verdadero sistema de vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos.

Estos laboratorios estn integrados al programa nacional de control de calidad externo en Bacteriologa organizado por el INEI y el Ministerio de Salud y Accin Social de la Provincia de Buenos Aires. La coordinacin es realizada por el Servicio ATB del Departamento de Bacteriologa del I.NEI ANLIS "Dr. Carlos G. Malbrn" con el apoyo de un Comit Colaborador formado por reconocidos microbilogos. Este programa remite a los participantes dos encuestas al ao, cada una con tres aislamientos bacterianos, que deben ser caracterizados bioqumicamente y determinada su sensibilidad a los antimicrobianos; luego cada participante recibe un anlisis de los resultados de la encuesta, con las posibles fuentes de error correspondientes, se remiten adems recomendaciones internacionales actualizadas para la interpretacin de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos y boletines de actualizacin bibliogrfica en espaol sobre temas de microbiologa clnica.

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Lectura Recomendada Diagnstico Microbiolgico Clnico: Mdulo 1 - Federacin Bioqumica de la Provincia de Santa Fe Manual de Procedimientos y Control de Calidad - Marcelo Galas - Paola Ceriana Servicio Antimicrobianos - Departamento Bacteriologa - INEI - ANLIS "Carlos G. Malbrn" Manual de Procedimientos de laboratorio para recoleccin, conservacin y transporte de muestras para diagnstico microbiolgico. Jorge Malaespina, Hayde Dominguez, Beatriz Guerrero, Leonora Kozubsky, et al. 1997.

ibliografa

Basualdo J. A., Coto C:E:, De Torres A. - Microbiologa Biomdica - Ed. Atlante Ao 1996

Balows A., Llausler Jr., et al (cols) 1991. Manual of clinical microbiology 5Th ed. American Society for microbiology. Washington D.C. Delgato Iribarren A., Menchero Pieto S., Ed. Interamericana - Mc Graw - Hill - 1994 Dejawetz E., Melnick J, Adelberg E.- Microbiologa Mdica 14 Edicin - Editorial Manuel Moturno - 1992 Diagnstico Microbiolgico Clnico: Mdulo 1 - Federacin Bioqumica de la Provincia de Santa Fe Instructivo para el envo de muestras y materiales infecciosos - Departamento de Bacteriologa - INEI - ANLIS "Carlos G. Malbrn" - Buenos Aires, Ao 2000 Manual de Procedimientos y Control de Calidad - Marcelo Galas - Paola Ceriana Servicio Antimicrobianos - Departamento Bacteriologa - INEI - ANLIS "Carlos G. Malbrn" Manual de Procedimientos de laboratorio para recoleccin, conservacin y transporte de muestras para diagnstico microbiolgico. Jorge Malaespina, Hayde Dominguez, Beatriz Guerrero, Leonora Kozubsky, et al. 1997.

Vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos - Red WHONET Argentina: Perodo 1994-1998 - Marcelo Galas, Alejandra Corso, Marta Tokumoto, Uiana Guelfand * y Alicia Rossi Zinsser - Microbiologa - Ed. Mdica Panamericana - 1994

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ANEXO 1

DATOS QUE DEBEN CONSIGNARSE CON EL ENVIO DE CEPAS O ESPECIMENES

Institucin que remite ....................................................................................................................................

Direccin........................................................................................................................................................

Tel .............................................................................. Fax ...........................................................................

E-mail ............................................................................................................................................................

Nombre del responsable del envo ................................................................................................................

Profesional a quien debe enviarse el resultado .............................................................................................

Origen: Humano Animal Alimento Otros Humano Nombre del paciente / N Muestra ...............................................................................................................

Edad .................................................................. Fecha de inicio de los sntomas ............/............../..........

Breve resumen del cuadro clnico ................................................................................................................

.......................................................................................................................................................................

Tratamiento suministrado (antibitico y tiempo de duracin) .......................................................................

.......................................................................................................................................................................

Tipo de muestra Aislamiento Especimen Cul .....................................................................

Sospecha de brote Si No Intrahospitalario Comunidad Animal N Muestra ...................................................................................................................................................

Especie ........................................................................................................................................................

Sano Enfermo Especificar ...............................................................

Tipo de muestra Aislamiento Especimen Cul ..................................................................

Sospecha de brote Si No Alimento N Muestra ....................................................................................................................................................

Tipo de muestra Aislamiento Especimen Cul ..................................................................

Sospecha de brote Si No

Otros (aclarar cules) ..................................................................................................................................

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Tipo de muestra Aislamiento Especimen Cul .................................................................. ANEXO 2

FORMULARIO PARA SOLICITUD DE TOMA DE MUESTRA

Fecha:........................... Apellido y Nombres ................................................................................................... Edad .............. Sexo: M..... F...... H. Cl. N .................................... Ambulatorio .................. Internado ................. Sala ................... Cama .................... Material .................................................................................................................... Estudios solicitados: Bacteriolgico ..................... Micolgico ........................ Virolgico ........................... Serolgico ....................... Otros .............................................................................. Mtodos: Directo ................ Cultivo ................... Antibiograma .................................. Otros ........................................................................................................

Antecedentes:

Estudios anteriores: SI NO Tratamiento Antibitico: SI NO Cul:............................ Otros:................................................................................................

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Postulados de Koch 1. La bacteria se encontrar en todos los casos de la enfermedad.

2. La bacteria se aislar de las lesiones de la persona infectada y se mantendr en cultivo puro. 3. El cultivo puro, inoculado en un hombre voluntario o en un animal de experimentacin susceptible, debe reproducir la enfermedad. 4. La misma bacteria se aislar en cultivo puro del animal o humano voluntariamente infectado.

Postulados de Falkow 1. El gen estar en las bacterias causantes de enfermedad y

no estar en las avirulentas. Si se encuentra, se podra mutar a formas menos virulentas o no expresarse.

2. La eliminacin del gen de la cepa virulenta reduce su virulencia. La introduccin del gen clonado en una cepa avirulenta la volver virulenta. 3. Se podr demostrar que la bacteria expresa el gen en animales o voluntarios humanos en algn punto del proceso infeccioso. 4. Los anticuerpos contra el producto codificado por el gen sern protectores, o en el caso de que la respuesta sea mediada por clulas, el producto dar lugar a inmunidad protectora.

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modulo 5

Documents

flora normal

flora habitual

flora normas

flora microbiana

jara programa de prevencin

control de ih

malbran instituto nacional

r ia s