noack alergeni tehnike testiranja 29.9.2011

Noack & Co Aktiengesellschaft AUSTRIA BULGARIA CROATIA CZECH REPUBLIC HUNGARY POLAND ROMANIA SERBIA SLOVAKIA SLOVENIA

Alergeni

tehnike testiranja u proizvodnji i laboratoriju

praktina primjena rapid 3D gluten testa

Podravka, 29.09.2011.


NOACK & Co je meunarodna tehnika marketinka tvrtka, specijalizirana za distribuciju i implementaciju inovativnih proizvoda i novih tehnologija na

podrujima:

Tko smo mi...

Agro Food dijagnostika

Veterinarska dijagnostika

Analitiki instrumenti

Veterinarski lijekovi

Aditivi za stonu hranu


Pria o uspjehu... 1980 osnovan NOACK u vicarskoj, predstavnitva u Austriji

1989 NOACK Maarska.

1990 NOACK Poland Sp.z.o.o. i NOACK Croatia (predstavnitva)

1991 NOACK eka, NOACK Slovaka i NOACK Rumunjska.

1992 NOACK Bugarska.

1998 Otkup - NOACK Austrija - nezavisno

dioniko drutvo

2006 NOACK Hrvatska d.o.o.

2008 SAFEED Rusija

2009 NOACK & Co South East d.o.o; Srbija


Struktura tvrtke

NOACK & CO

AG Be

NOACK PL Varava

NOACK CZ Prag

NOACK H Budimpeta

NOACK South East

Novi Sad

NOACK BG Sofija

NOACK RO Bukuret

NOACK HR Zagreb

NOACK SK Bratislava

105 visoko obrazovanih ljudi za Vau podrku!


NOACK Teritorij

Veliko podruje - 253 mil. ljudi -18.219.339 km2


Misija...

Trdicija izvrsnosti

iroki asortiman proizvoda

Long term supplier relation = stable supply chain

Usluga klju uspjeha

Postavljanje viih standarada

Poveanje produktivnosti

Veza kupac - strunjak

Povjerljiv odnos sa klijentima

Strunost klju uspjeha


Profil dobavljaa

Analytical

Instruments

3M (A)

Advanced Instruments (USA)

Delta Instruments (NL)

NIR-Online (D)

Q-Interline (DK)

Zeutec (D)

Veterinary

Diagnostics

BioChek (NL/UK)

Coris Bioconcept

(B)

ID VET (F)

Ingenasa (E)

LSI (F)

Prionics (CH)

Animal Health

Andersen (E)

Animal Feed

Biochem (D)

Borregaard LignoTech (N)

Celtic Sea Minerals (IRL)

CJ Europe GmbH (ID)

Danisco Animal Nutrition (DK)

Dr. Pieper (D)

Format (D)

Garant (A)

Hamlet Protein (DK)

Kemira (SF)

Kemira ChemSolutions (NL)

Likra (A)

Miavit (D)

Nutrifeed (NL)

Nutrion (E)

Suomen Rehu (SF)

Tekpro (UK)

Volac (NL)

Agro-Food

Diagnostics

Biokar (F)

3M (A)

CDR-Mediared (I)

Europroxima (NL)

Immunolab (D)

Ingenasa (E)

Lab. Hormonology (B)

LabRobot (DK)

Megazyme (IRL)

Mller & Schmelz (D)

Neogen Europe (UK)

Orion (SF)

Unisensor (B)


Agro-Food Dijagnostika

Koncept Mikrobiologija

Klasine podloge (dehidrirane i gotove) Dodaci i peptoni Alternativne metode

Kontrola higijene Kontaktne ploice za povrine i tekuine Brisevi na bazi proteina Brisevi na bazi ATP-a

Kemijske analize Mikotoksini Ostaci lijekova GMO Vitamini

Patvorenje hrane Identifikacija vrste (meso, mlijeko)

Alergeni Enzimatske analize

eeri, alkohol, kiseline... Oprema

itai Luminometar

Orion

Diagnostica


Na dobavlja:

ELISA dijagnostiki testovi za analizu hrane

Mikotoksini

Agriscreen

Veratox

Reveal

Proteini/Alergeni

Kikiriki, ljenjak, badem, jaja, mlijeko, histamin, soja, gluten

Animalne bjelanevine vrste mesa,mesno-kotano brano u stonoj hrani

Patogeni Salmonella,E.coli;Listeria

GMO

Cry9C, CP4

Imuno-afinitetne kolone (mikotoksini ;GMO )

www.neogen.com


to je preosjetljivost na hranu

Sve vrste pretjeranih reakcija organizma na hranu

alergije i intolerancija

Intolerancija proizlazi iz neprobavljivosti ili

neresorbcije hrane ili neke komponente u hrani

ne ukljuuje imunoloki sustav

posljedica su nedostatka enzima ili reakcija na neke

prirodne toksine spojeve u namirnici

farmakoloke reakcije


to je alergija ?

nepravilno funkcioniranje imunolokog sustava

imunoloki sustav prepoznaje neki sastojak hrane kao tetan

sudjelovanje IgE antitijela (imunoglobulin E)

oslobaanje histamina, prostaglandina

trenutne ili nekoliko sati nakon dodira sa alergenom

6-8 % djece i 2-4 % odraslih


Kako lijeiti alergije ?

Nema lijeka

Cilj lijeenja je izbjegavati odreene namirnice

Primjereno oznaavanje namirnica

Kontrola oznaavanja

Oznaavanje je zakonski odreeno


Zakonske osnove za oznaavanje alergena

ZAKON O HRANI (NN 46/07,NN 55/11)

PRAVILNIK O HRANI BEZ GLUTENA ( NN 83/2010)

PRAVILNIK O OZNAAVANJU ,REKLAMIRANJU I PREZENTIRANJU HRANE

( NN 63/11, NN 79/11)

HR RASFF


Namirnice koje se moraju oznaavati kao alergeni Big 8 * itarice koje sadre gluten (penica, ra, jeam, zob, pir, kamut ili njihovi hibridi te proizvodi od istih) * rakovi i proizvodi od rakova

* jaja i proizvodi od jaja

* riba i proizvodi od riba

* kikiriki i proizvodi od kikirikija

* soja i proizvodi od soje

* mlijeko i proizvodi od mlijeka (ukljuujui i laktozu) * kotuniavo - oraasto voe - ne odnosi se na kokosov orah ili pine nut pinjoli oraasti plodovi bora * celer i proizvodi od celera

* goruica i proizvodi od goruice * sjeme sezama i proizvodi od sjemena sezama

* sumporni dioksid i sulfiti u koncentraciji veoj od 10 mg/kg ili 10 mg/l izraeni kao SO2.


Novi smjerovi EU-VITAL

EU-VITAL European Voluntary Incidental Trace alergen Labelling

definira postupke proizvoaa sukladno prisutnim nivoima alergena

level 1 =white ,labelling not required

level 2 =blue,labelling required contain traces of...

level 3=red ,labelling required contains as ingridients ...

Predloeni postupci temelje preporukama Europske i meunarodne

grupe znanstvenih experata iz podruja utjecaja alergena na zdravlje

slini koncepti primjenjuju se u vicarskoj i Japanu , Australija ,

Novi Zeland


Novi smjerovi EU-VITAL

ukljuuje alergene prema smjernicama 2007/68/EC and 2000/13/EC

Jedinice su izraene kao ukupni protein alergena /ukupna hrana [ppm]

alergen LOAELs(mg total protein)

Milk 0.36-3.6 LOAEL= lowest observed adverse effect level :lowest dose/

Egg 0.13-1.0 concentracion of an allergenic food component,found

Soy 88-522 by clinical trails,that produces an adverse effect on

Fish 1-100 allergenic individuals

Peanut 0.25-10

Tree nuts 0.02-7.5

Sesame analog peanut

Crustances analog peanut www.eu-vital.org

Gluten 20-100


Upravljanje rizikom

procjenjivanje vjerojatnosti unakrsne kontaminacije u svakom od koraka proizvodnog

procesa (odabir sirovina do prodaje gotovih proizvoda)

uvoenje upravljanja alergenima = proirenje postojee DPP

uposlenici

pakiranje

upravljanje

alergenima

sirovine i

lanac nabave

proizvodni prostori,

oprema i postupci

ienje

razvoj novih

proizvoda i

reformulacije


Elementi PKA A. razvoj proizvoda: koncepcija proizvoda , formuliranje, izvor sirovina

B. sirovine: specifikacija ,audit dobavljaa ,dostavna vozila ,skladina

oprema

C. proizvodni proces: posue,ostali alati i oprema ,namjenske linije &

skladita ,praina i kontrola zraka

D. planiranje: HACCP plan ,proizvodi bez alergena prvi u proizv.

potpuna sanitacija nakon proizvoda sa alergenima

E. sanitacija: dokumentacija i verifikacija ienja

F. testiranje: sirovine,poluproizvodi,povrat,brisevi,ispirna voda ,prve

serije proizvoda ,reklamacije


Kada koristiti testove za alergene A. Za istraivanje tzv. cross-kontaminacije u industriji:

zbog neadekvatnog ienja zbog sirovina koje se koriste u proizvodnji zbog postupaka proizvodnje u industriji

B. Za validaciju tzv. plana kontrole alergena, ukoliko takav postoji u industriji (ACP)

C. Za provjeru SSOP-a i dobre proizvoake prakse (GMP-a)


PREPORUENE KONTROLNE TOKE ZA VALIDACIJU STRATEGIJE KONTROLE ALERGENA

a. ienje sve povrine koje dolaze u kontakt sa alergenima posue za transport alati za ienje alati za uzimanje uzoraka tijekom proizvodnje prve serije proizvoda (push-through) povrat/lom zavrna ispirna voda

b. sastojci i sirovine svaki sastojak deriviran iz sirovine koja sadri aleregne ili je bio u moguem kontaktu

sa alergenom

sve prirodne i umjetne arome, zaini i aditivi koji mogu sadravati alergene ili su mogli biti u kontaktu s njima

svaki prethodno netestirani proizvod kojemu je promijenjena formulacija

c. gotovi i poluproizvodi prva serija nakon koritenja linije za proizvodnju proizvoda koji sadre alergene proizvodi koje se deklarira sa moe sadravati kako bi se potvrdila opravdanost

deklariranja

odgovor na reklamaciju kupaca svi poluproizvodi sa linije nakon proizvodnje proizvoda koji sadre alergene supstance


Metode detekcije

U proizvodnji

ATP: dobar pokazatelj higijenskog statusa i istoe

indirektan rezultat ne potvruje prisustvo proteina (alergena)

ne korelira sa specifinim testovima (ELISA)

Testovi za detekciju ostataka proteina :u obliku brisa za detekciju

ostataka proteina, ukljuujui potencijalno alergene proteinske rezidue

(jaje,mlijeko 10-20 g ,kikiriki 25-50 g ,gluten, soja,badem 20-40 g )

ELISA imunokromatografija Reveal 3 D

mikrojaice Alert


Metode detekcije Analitike metode

IMUNOLOKE METODE Kvalitativne Kvantitativne

Latreal flow- imunokromatogafija ELISA

Imunobloting

imunoelektroforeza

DNA bazirane metode Kvalitativne Kvantitativne

qPCR ( real time polymerase chain reaction )

OSTALE

Biokemijske ( enzimatski testovi )

Mass spectroscopy


Neogen proizvodi za kontrolu alergena

Alert Qualitative (screening) S-ELISA assay

Kikiriki Jaja Mlijeko Badem Gluten Soja

Rapid Reveal 3D single-step lateral flow immuno-chromatographic assay

Badem Gluten Ljenjak koljke Kazein Jaja Kikiriki Soja

Veratox Quantitative S-ELISA assay

Kikiriki Jaja Mlijeko Ljenjak Badem Gluten Histamin Soja Mustard

Biokits Quantitives S-ELISA

Badem Kazein Jaja Gluten Kikiriki Ljenjak Sezam Soja

Orah koljke


Neogen Alert

ELISA test, vizualno oitavanje, na osnovi razlike u boji uzorka i kontrole (5 ppm za badem, jaje, mlijeko, kikiriki;

10 ppm za gliadin)

procjena pozitivno/negativno nakon 30 minuta Jednostavni za uporabu Rezultati za 30 min Za testiranje sirovina, konanog proizvoda i obrisaka

Sastav kita: ekstrakcijski pufer, poznata kontrola , reagensi i

materijal potreban za 20 testova


Neogen Alert


Rapid Reveal 3 D

Kontrola na licu mjesta Visoke specifinosti & osjetljivosti Jednostavni za uporabu iroke primjene : kontrola sirovine,poluproizvoda i konanog proizvoda obrisci radnih povrina ispirci CIP validacija programa upravljanja alergenima Reveal 3D predstavlja on-site i real-time kontrolu uspostavljenih planova upravljanja alergenima u proizvodnji od primitka sirovine do isporuke gotovog proizvoda


Veratox Potpuno kvantitativni rezultati iz

koritenje tzv. sendvi ELISA oblika.

Potreban je ita mikro jaica i

multikanalna pipeta.

Do 90 minuta ukupnog vremena

testiranja.

Analiza do 38 uzoraka po testu.

Mogu se testirati sirovine i proizvod u

bilo kojoj fazi u proizvodnji te takoer

brisevi iz okolia nakon provedenog

CIP postupka .

Limit / raspon kvantifikacije Kontrole Matriks Detekcija

Vrijeme testiranja

Br. testova u kitu

BADEM VERATOX Quantitative Almond Allergen Test

2,5 - 25 ppm 0, 2.5, 5, 10, 25 ppm

Prehrambeni proizvodi StatFax reader >30 48

JAJA

VERATOX Quantitative Egg Allergen Test

2,5 - 25 ppm 0, 2.5, 5, 10, 25 ppm

Prehrambeni proizvodi kao tjestenina, umaci za salate, mjeavine za kolae i sladoledi.

StatFax reader >30 48

GLIADIN VERATOX Quantitative Gliadin Test 5 - 50 ppm 0, 5, 10, 20, 50 ppm

CIP-ispirci, gotovi proizvodi


GLIADIN VERATOX Quantitative Gliadin R5 Test

2.5 - 40 ppm 0, 2.5, 5, 10, 20, 40 ppm

CIP-ispirci, gotovi proizvodi


HISTAMIN VERATOX Quantitative Histamine Test

2,5 - 50 ppm 0, 2.5, 5, 10, 20, 50 ppm

Scombroid species of fish, such as tuna, bluefish, mahi-mahi.


KIKIRIKI

VERATOX Quantitative Peanut Allergen Test

2,5 - 25 ppm 0, 2.5, 5, 10, 25 ppm.

Prehrambeni proizvodi (keksi, krekeri, okolada, sladoled, itarice).


LJENJAK

VERATOX Quantitative Hazelnut Allergen Test

2,5 - 25 ppm 0, 2.5, 5, 10, 25 ppm

Prehrambeni proizvodi kao keksi, okolada, sladoled, itarica . StatFax reader >30 48

MLIJEKO

VERATOX Total Milk Allergen Quantitative Test

2,5 - 25 ppm 0, 2.5, 5, 10, 25 ppm

Hrana npr. Sokovi, mjeavine za kolae, keksi, umaci i sorbet.


SOYA

VERATOX Quantitative Soy Flour Allergen Test

2,5 - 25 ppm 0, 2.5, 5, 10, 25 ppm

Prehrambeni proizvodi kao keksi, krekeri, okolada, sladoled, itarice.



Veartox

Gliadin R5 Ljenjak Jaja Milk Mustard

Reproducibility %

-intraassay 0.98 >0.98 >0.98 >0.98

Crossreactivity NO NO NO NO canola,reapseed

Stability (month) >6 >6 >8 >6 >6


Veratox


Veartox


Biokit

Novi proizvodi u Neogen portfoliu za

ispitivanje alergena :

BLG, Kazein ,sesam,koljke, orah

Direktna S- ELISA

Vrlo visoke osjetljivosti

Format 48 i 96 testova (duplikat i kontrole )

Trajanje testa sa ekstrakcijom 2-5 h


Praktina primjena 3D gluten testa


Visually

Clean ?

Specific Allergen

Test to Verify

Allergen Clean ?

Manufacture

Food

Yes

IN-PROCESS CLEANING VALIDATION

Possible Control Points:

1. Visual inspection 2. Environmental monitoring of

production equipment

and/or rinse water to verify effective cleaning

3. Testing Final product to

ensure allergen levels below thresholds

No

Yes

Specific

Allergen Test

to Verify

2.

1.

2.

No

Re-Clean

3. Please note: Procedures used for cleaning should always be validated and

re-validated if there are any changes


Rapid Reveal 3 D

kada nije potrebano utvrditi tonu koncentraciju te je samo potrebno utvrditi da li je alergen prisutan u proizvodu ili nije

kao metoda za odreivanje rizika u proizvodnji.

kao metoda za potvrdu stanja prije poetka proizvodnje, kada je mogua neposredna korektivna aktivnost

kao dio sanitacijskog SOP-a

kada su prostor u laboratoriju i oprema limitirajui faktori

kada su brzina i jednostavnost provedbe testa odluujui.


Rapid Reveal 3 D 1. Detkcija 8 najvanijih alergena u hrani 2. Test format: jednostavan za rukovanje , tri linije detekcije 3. Dizajniran za uporabu na licu mjesta, uroni i testiraj , nema potrebe za nikakvom opremom 4. Sastav kita:ekstrakcijski pufer, test,bris ( sve za 10 uzoraka ) 5. Limiti detekcije :parts per million (g/g) 6. Uzorci : hrana i obrisci povrina 7. Vrijeme testiranja :


Rapid Reveal 3 D granice detekcije zavisne su od vrste matriksa- za svaki matriks potrebna

validacija

Reveal 3D testovi najuinkovitiji su za testiranje prehrambenih poluproizvoda, gotovih proizvoda i obrisaka radnih povrina

* Granice detekcije Reveal 3-D Tests

Reveal 3-

D 1ppm 5ppm 10ppm 20ppm >50ppm

Gluten Biscuit Baby Formula Dark Chocolate

Kazein Chocolate Cake Margarine Red wine

Ljenjak Milk chocolate Breakfast cereal Dark chocolate

Kikiriki Chocolate coated

roll

Praline crispy bite

bar Chicken Nugget

Badem Dark Chocolate Yoghurt Tomato Sauce

koljke Vegetable Oil Mayonnaise Minced White Fish

Jaja Margarine /

Dark Chocolate Fish Cakes Ice-cream

Soja Pork Sausage Margarine Ice-cream


Uzorkovanje

Sirovine, poluproizvodi ,konani proizvod:

500 g promjeati 50 g samljeti odvojiti

CIP ispirci ( 10 ml) 0.25 ml

Obrisci radnih povrina,opreme:

nakon ienja prije proizvodnje

posebni brisevi i ekstrakcijski

pripremiti ekstrakcijsku otopinu(PBS) ili koristiti ve pripremljenu otopinu

uzorkovanje unakrsnim potezima 10x10 cm

PBS bufer+uzorak = extrakt

Proper Swabbing

Techniques

Swab area = 4 X 4

16 square inches

4

Proper Swabbing Technique:

a) Pressure so that there is a slight

bend in the swab shaft.

b) Area: 4 x 4 from corner to corner in cross hatch pattern.

c) Rotate swab 360 to cover entire tip.


Postupak

1.priprema reagensa ( ostaviti na sobnoj temperaturi 30 min)

2.uzimanje uzorka 3.dodatak pufer 4. promijeati 5. testiranje

6.oitati nakon 5 min

No line at O, faint orJ JAKO POZITIVNO nema linije na O

POZITIVNO linija iznad T (det.limit)

NEGATIVNO nema linije na T

linija kontrole C uvijek mora biti vidljiva


Zakljuak

ELISA je trenutno najprimjenjivija metoda u ispitivanju alergena

Jednostavna brza jeftina

Rapid Reveal test za proizvodnju-detekcija on site analiza

ELISA Veratox,Biokit -laboratorijska analiza za potvrdu i

potpunu sigurnost konanog proizvoda


Mi ne prodajemo samo proizvode

Mi nudimo rjeenja!

Hvala na Panji! Gordana Roi,dr.vet.med.

NOACK d.o.o. Zagreb

Vodovodna 20a

10000 Zagreb www.noackgroup.com

noack alergeni tehnike testiranja 29.9.2011

Documents