prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/regulacija biohemijskih... · cor...
TRANSCRIPT
![Page 1: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/1.jpg)
Prenos signala posredovan jedarnim receptorima
Regulacija biohemijskih procesa (školska 2019/2020.)
(Predavanje br. 7)
dr Milan R. Nikolić, docent
![Page 2: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/2.jpg)
Be careful about reading health books.
You may die of a misprint.
Budite oprezni kada čitate knjige o zdravlju.
Možete umreti zbog štamparske greške.
Mark Twain (Samuel Langhorne Clemens)
(1835 – 1910)
![Page 3: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/3.jpg)
Signaling receptors
Intracellular (nuclear)
Surface
Ion-channel
G protein-linked (GPCR)
Enzyme-linked
Receptor with guanylyl cyclases
Receptor with tyrosine kinases
Receptor without enzyme activity
Receptor with tyrosine phosphatases
Receptor with Ser/Thr kinases
![Page 4: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/4.jpg)
Tri velike klase receptora na površini ćelije
Timescale: msec
Timescale: sec
Timescale: min
Next time!
![Page 5: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/5.jpg)
Sadržaj predavanja
Steroidni vs. peptidni hormoni
Testosteron kao prototipski steroidni hormon (prvi glasnik)
Lokalizacija i struktura nuklearnih receptora
Opšti mehanizam aktivacije nuklearnih receptora
Kako nuklearni receptori iniciraju transkripciju?
Uloge hormon regulatornih elemenata i "heat-shock proteina"
Interakcije nuklearnih receptora sa drugim signalnim putevima
Regulacija prenošenja signala preko jedarnih receptora
Nuklearni receptori kao farmakološke mete
![Page 6: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/6.jpg)
Višestruki koraci tokom
prenošenja signala
Apoptoza, opstanak, diferencijacija itd.
Signal = “prvi glasnik”
“drugi glasnik”
![Page 7: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/7.jpg)
Steroidni vs. proteinski hormoni
Peptidni hormoni Steroidi
Polu-život u cirkulaciji kratak dugačak
Brzina delovanja brzo sporo
Trajanje efekata kratko dugačko
Lokalizacija receptora u ćeliji membrana unutar
Post-receptorna regulacija izražena niska
Amplifikacija signala visoka niska
![Page 8: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/8.jpg)
Prirodni ligandi nuklearnih receptora
Lipofilni endokrini hormoni: a) steroidni hormoni (androgeni, estrogeni, gestrogeni, glukokortikoidi i mineralokortikoidi)
b) derivati aminokiselina (tiroksin)
c) derivati vitamina A (9-cis retinoidna kiselina) i vitamina D
d) derivati masnih kiselina (prostaglandini, leukotrieni, tromboksani...)
![Page 9: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/9.jpg)
Koje hormone proizvode ove "žlezde su unutrašnjim lučenjem"?
![Page 10: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/10.jpg)
Osa hipotalamus-hipofiza je esencijalna za aktivnost endokrinog sistema
![Page 11: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/11.jpg)
Testosteron (T): kralj hormona!
![Page 12: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/12.jpg)
![Page 13: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/13.jpg)
Biosinteza i metabolizam steroidnih hormona
T secretion rate: 5 mg/day
![Page 14: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/14.jpg)
Bog Zevs (T:AR)
(T/E2:AR/ER)
(DHT:AR)
(DHT:AR)
(E2:ER) T- Testosteron DHT- Dihidrotestosteron E2- Estradiol AR- Androgeni receptor ER- Estrogeni receptor
![Page 15: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/15.jpg)
Receptori za testosteron u mozgu (snažan uticaj na mišljenje i način delanja)
(hipotalamus: fiziološke potrebe, nagoni, hormoni...)
(limbički sistem): memorija, agresija, emocije, zabava...)
(kora velikog mozga): viši intelektualni procesi, sveobuhvatna kontrola)
Kulturološke razlike!
![Page 16: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/16.jpg)
Najvažniji seksualni organ je MOZAK (tzv. b-tačka)
• T povećava libido kod oba pola !!!
• Sezonske i cirkadijalne promene u nivou T
Koordinacija seksualne želje
i aktivnosti!
Nivo testesterona, brak i vernost
![Page 17: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/17.jpg)
![Page 18: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/18.jpg)
"testosterone-boosting super foods"
Non-optimal testosterone level
![Page 19: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/19.jpg)
Anabolički efekti androgena (suprafiziološke koncentracije)
Mogući štetni (reverzibilni) efekti: • Ginokomastija • Atrofija testisa • Hepatotoksičnost (17-α-derivata) • Aktivacija koagulacionog sistema • Hipertofija miokarda
Efekti zavise od doze, pola i težine atlete,
trajanja ciklusa i unosa drugih supstanci.
Novo: Ligandrol (SARM)
Nandrolon (19-norT)
Winstrol (DHT derivat)
SAD: Klasa III kontrolisanih supstanci
Zabranjeni od 1974. g. (WADA)
![Page 20: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/20.jpg)
The benefits of testosterone replacement-therapy for men and women
![Page 21: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/21.jpg)
Opšti mehanizam odgovora na lipofilni signal
Transkripcija
Translacija
Citosol
Jedro
Nuklearna
ovojnica
Plazmina
membrana
Hormon putem krvi dolazi do ciljne ćelije.
Ulazak u ćeliju difuzijom kroz plazminu membranu.
Vezivanje hormona za receptor unutar ćelije uzrokuje aktivaciju i
dimerizaciju receptora.
Kompleks ulazi u jedro.
Njegovim vezivanjem za regulatorne elemente, dolazi do promene u
genskoj ekspresiji.
Promena sadržaja proteina u ćeliji.
Unutar-ćelijski
receptor
Promoter Ciljni gen “Hormone
response
element”
Ćiljna
ćelija
Steroidni hormon
NB: transportni proteini
![Page 22: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/22.jpg)
HSA (humani serum albumin) • Relativno mali, neglikozilovani protein (66500 Da) • Najzastupljeniji (oko 50%) protein krvne plazme • Polu-život u cirkulaciji 18-21 dan
• Osnovne fiziološke uloge:
Održavanje koloidnog osmotskog pritiska
Puferska uloga u održanju kiselo-bazne ravnoteže
Transport nepolarnih fizioloških supstanci i lekova
Antioksidans: Cys34
SBHG: Sex binding hormone globuline
![Page 23: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/23.jpg)
Nuklearni receptori (NR)
• Transkripcioni regulatori (promene u genskoj ekspresiji) • Aktiviraju se vezivanjem liganda (hormona) • Lokalizovani u citoplazmi i jedru ciljnih ćelija • Prirodni ligandi su mali liposolubilni signalni molekuli
Genomski (spori) efekti
Negenomski (brzi) efekti /uticaj hormona na druge signalne puteve u ćeliji/
Dugoročno prilagođavanje na promene u spoljašnjoj sredini i promene povezane sa razvićem!
Poremećaji u ovim procesima vode u patologije!
![Page 24: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/24.jpg)
Klasifikacija i struktura nuklearnih receptora Tri podfamilije: Tip 1 - receptori za steroidne hormone: GR, MR, PR, ER i AR
Tip 2 - receptori za tiroidne hormone (T3R), retinoidnu kiselinu (RAR), vitamin D (D3R), derivate masnih kiselina itd. Tip 3 - orphan (‘siročići‘) receptori: nisu otkriveni prirodni ligandi
Modularna struktura - 3 glavna domena: LBD, ligand binding domain (C-terminalni deo) DBD, DNA binding domain (centralni deo) NTD, N-terminalni domain (najvarijabilniji)
Više pod-domena: H, hinge ili vezni region (signal za nuklearnu translokaciju) AF-1 i AF-2, activation function (regrutovanje regulatora transkripcije) Zn-fingers (dimerizacija receptora, vezivanje za DNK) CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora)
(AF-1 i AF-2)
![Page 25: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/25.jpg)
Strukturna organizacija nuklearnih receptora
Izuzetna fleksibilnost strukture: različita konformaciona stanja!
![Page 26: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/26.jpg)
Domen za vezivanje liganda (E)
Tri uloge: vezivanje liganda, dimerizacija, regulacija transkripcije
12 α-heliksa (H1-H12) Velika konformaciona promena
(menja hidrofilna površina H12 u jezgru AF-2)
Ligand se smešta u (veliki) hidrofobni džep
(hidrofobni efekat i H-veze)
![Page 27: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/27.jpg)
Domen za vezivanje za DNK (C)
Evolutivno najočuvaniji: 70-80 aminokiselina Dva konzervirana C4 'Zn-fingers' strukturna motiva: • prema N-terminalu (P-Box); za veliku brazdu DNK ← interakcije sa HRE • prema C-terminalu (D-Box) ← dimerizacija receptora
NR vezuju za HRE kao homo (tip 1) ili hetero (tip 2) dimeri !!!
HRE, hormon response elements
(specifične nukleotidne sekvence, unutar promotora gena: 'pojačivači')
Dve kopije heksamerne sekvence!
Specifičnost određena: a) tipom sekvence; b) orijentacijom dva heksamera; c) rastojanjem između heksamera (1-5 bp).
![Page 28: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/28.jpg)
'Krajevi' nuklearnih receptora
F: variabilni C-terminus (bez specifične funkcije)
A/B: varijabilni; AF-1 subdomen (N-terminus, posreduje u aktiviranju transkripcije na način nezavisan od prisustva liganda: fosforilacija* i vezivanje transkripcionih ko-aktivatora)
* MAPK, PI3K, Akt, c-Src (Tyr)...
![Page 29: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/29.jpg)
Signalni put: tip I nuklearnih receptora
U odsustvu steroidnih hormona, nuklearni receptori su u citosolu ASOSOVANI sa ‘inhibitornim' heat-shock proteinima (HSP) u dinamičke multiproteinske komplekse
● aktivacija receptora vezivanjem hormona:
HSP disosuju, uz 'razotkrivanje' signala
za jedarnu translokaciju
● dimerizacija receptora u jedru ili citosolu; vezivanje
za DNK (via HRE); regrutovanje proteina i aktiviranje transkripcije
HSP čaperoni: stabilizuju određene konformacije i pomažu translokaciju
![Page 30: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/30.jpg)
Citosolna aktivacija receptora za steroidne hormone
H
H H
dimerizacija
H H
Transkripcija gena HRE ciljni gen
5’ flanking region
Hsp90 H(hormon)
hsp70
p60
R Hsp70
H
homodimeri, palindromska sekvenca
Veoma čvrsto vezivanje H: KD~10-9 M
Hsp90 operates with a number of co-chaperones,
including Hsp70 and Hop (Hsp90 organizing protein,
also known as p60), to orchestrate the ATP-dependent
maturation of many client proteins.
![Page 31: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/31.jpg)
When the native states of proteins (N) become unstable under heat stress, sHSPs passively protect cells against potentially deleterious aggregates by remodeling their oligomeric landscapes. Both increased dissociation of dimeric subunits and a shift to higher oligomeric structures are accompanied by higher affinity for unfolded client molecules (U). The resulting hetero-oligomeric sSHP:client complexes agglomerate into an array of co-aggregates that can be recovered by disaggregating Hsp chaperone teams.
Proteini toplotnog stresa ("molekulski sunđeri prirode")
Crystal structures of heat shock protein 90 (HSP90) dimers
![Page 32: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/32.jpg)
Molekulski mehanizam delovanja testosterona
Normal function of the androgen receptor (AR). Testosterone (T) enters the cell and, if 5-α-reductase is present, in men ca. 5% is converted into more potent androgen dihydrotestone (DHT). DHT has two to three times greater receptor affinity than T. Upon steroid binding, the AR undergoes a conformational change and releases heat-shock proteins (hsps). Phosphorylation (P) occurs before or after steroid binding. The AR translocates to the nucleus where dimerization, DNA binding, and the recruitment of co-activators occur. Target genes are transcribed (mRNA) and translated into proteins.
![Page 33: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/33.jpg)
Signalni put: tip II nuklearnih receptora U odsustvu hormona, receptori NISU ASOSOVANI sa HSP, već su u
jedru vezani (preko HRE) za DNK i regrutuju represorne ko-transkripcione faktore.
Aktivacija receptora vezivanjem hormona: konformaciona promena izlaže AF-2 (LBD) za regrutovanje transkripcionih koaktivatora.
heterodimeri (RAR/RXR ili D3R/RXR)
(glava-rep orjentisani dimeri)
Veoma čvrsto vezivanje: KD~10-9M
![Page 34: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/34.jpg)
Aktivacija nuklearnih receptora
![Page 35: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/35.jpg)
Signalni put: receptori 'siročici'
● Često monomeri (NGFI-B) & aktivni i bez prisustva liganda ● Bioaktivni lipidi kao prekursorni/signalni molekuli
NGFI-B=Nerve growth factor IB
![Page 36: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/36.jpg)
Transkripciona regulacija
Kako? Direktne interakcije receptora sa brojnim (desetine) tkivno specifičnim proteinima*
1. Hormonalna aktivacija ciljnog gena: modifikacija strukture hromatina (modifikacija histona i remodelovanje nukleozoma)
● transkripcioni koaktivatori (preko AF-2: SRC-1/NCoA-1 familija [steroid receptor coactivator 1 / nuclear receptor coactivator 1]
2. Represija ciljnog gena u odsustvu hormona: T3R i RAR vezuju, preko coR, transkripcione korepresore: SMRT/NcoR
[silencing mediator for retinoid and thyroid hormone receptors/ nuclear receptor corepressor]
LxxLL-interakcije sa koaktivatorima i korepresorima
(dinamička i kombinatorna priroda)
* Kao transkripcioni regulatori “regrutuju” druge proteine (komponente medijatornog kompleksa, transkripcioni koaktivatori i korepresori); vremenska i tkivno-specifična dimenzija!
a
d
e
g
b
c
f
L
L
L
![Page 37: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/37.jpg)
Genomic effects of glucocorticoids include trans-activation and trans-repression
doi:10.1038/ncprheum0898
Abbreviations: AP1, activator protein 1; cGCR, cytosolic glucocorticoid receptor; COX-2, cyclooxygenase 2; GRE, glucocorticoid response element; IκB, inhibitor of NFκB; IFN-γ, interferon γ; IL, interleukin; NF-AT, nuclear factor of activated T cells; NFκB, nuclear factor κB; STAT5, signal transducer and activator of transcription 5; TF, transcription factor; TNF, tumor necrosis factor; VEGF, vascular endothelial growth factor.
![Page 38: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/38.jpg)
Željeni anti-inflamatorni i imuno-supresivni efekti glukokortikoida: selektivni agonisti, aktivirani GR vezuje za NF-κB (represivni transkripcioni regulator) umesto za DNK!
Ligand specifičan za gen i tkivo!
NF-κB=nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells
![Page 39: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/39.jpg)
Regulacija signalnih puteva posredovanim
nuklearnim receptorima
Kontroliše trajanje i amplituda efekta hormona na ekspresiju gena!
1. Koncentracija hormona
2. Kovalentna modifikacija receptora (ER; AF-1 fosforilacija Ser118 (MAPK) –> aktivacija i bez vezivanja liganda)
3. Aktivnost transkripcionih koregulatora
4. Interakcije sa drugim transkripcionim regulatorima (složeni promotori: recipročni antagonizam GR i NFκB)
5. Proteolitična degradacija receptora (u proteozomima, nakon ubikvitinacije)
Ubikvitin: mali regulatorni protein
![Page 40: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/40.jpg)
Negenomske uloge nuklearnih receptora (komunikacija sa drugim signalnim putevima)
Efekti izvan jedra i/ili aktivacija nezavisna od sopstvenog liganda
Fiziološki efekti steroidnih hormona koji ne zavise od transkripcije: ● Primanje signala iz drugog signalnog puta
● Prenošenje signala na drugi signalni put
Promene u aktivnosti jonskih kanala i premeabilnosti membrana
Vezivanje 'hormona' za GPCR (Gi i Go)
Interakcija NR sa regulatornim elementima drugih puteva
Detaljno proučeni negenomski efekti estrogena
i glukokortikoida (klinički značaj)
![Page 41: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/41.jpg)
Notice the relationship of the G-proteins, G protein receptor (GPCR) to the ion channel and the MAP kinase pathway. These pathways play an important role in fast cellular responses known as non-genomic signaling. The sex hormone binding globulin receptor (SHBGR) also uses the G-protein to stimulate the cyclic-AMP pathways which supply energy to many other fast acting pathways.
![Page 42: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/42.jpg)
Farmakološka regulacija patofizioloških procesa
Tamoksifen blokira delovanje estrogena u tkivu dojke
(Kancer dojke je najčešći maligni tumor kod žena u Srbiji)
![Page 43: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/43.jpg)
Expression patterns of ERs
• ERα – breast – uterus – cervix – vagina – brain regions
• ERβ – ovary – prostate, testis – spleen, thymus – lung – hypothalamus, other brain regions
Knockout phenotype: female sterility, no mammary gland development, obesity, male sterility, testicular degeneration ect.
Knockout phenotype: male-fertile, female-reduced fertility, ovarian dysfunction, vascular problems/ develop hypertension as they age
Estrogen receptor (ER) ligands can act through multiple mechanisms:
(1) classical ligand dependent induction thru an ERE (2) indirect ligand dependent induction by interaction with AP1
or perhaps other DNA bound transcription factors (3) ligand-dependent interactions with Src kinase in the
cytoplasm and the activation of MAP kinase signaling
![Page 44: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/44.jpg)
Plejotropni efekti delovanja steroidnih hormona!
doi: 10.1038/nri1748
![Page 45: Prenos signala posredovan jedarnim receptorimamnikolic/Regulacija biohemijskih... · CoR (regrutovanje transkripcionih ko-regulatora) (AF-1 i AF-2) Strukturna organizacija nuklearnih](https://reader036.vdocument.in/reader036/viewer/2022070805/5f0379b47e708231d4094dd0/html5/thumbnails/45.jpg)
Popularna nauka