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PRESENTA: Bio. Exp. Sara Beatriz Herrera Sols. A novel DNA gyrase inhibitor rescues Escherichia coli dnaAcos mutant cells from lethal hyperinitiation. Line Johnsen, Christoph Weigel, Jens von Kries, Mona Meller y Kristen Skarstad.

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Introduccin. DnaA Es una protena clave para el inicio de la replicacin en E. coli y otras bacterias. Reconoce secuencias especficas de DNA en OriC, donde se une y promueve la apertura de la doble cadena.

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Topoisomerasa II, DNA girasa y la topoisomerasa IV, cambian el estado topolgico del ADN. Tienen un alto grado de similitud en su secuencia. Usan energa a partir de la hidrlisis del ATP. Topoisomerasa II, DNA girasa y la topoisomerasa IV, cambian el estado topolgico del ADN. Tienen un alto grado de similitud en su secuencia. Usan energa a partir de la hidrlisis del ATP. Sper enrollamiento () Para iniciacin de la replicacin y transcripcin del DNA. Sper enrollamiento () Para iniciacin de la replicacin y transcripcin del DNA.

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La DnaA, es considerada como un nuevo blanco para nuevos antibiticos, debido a que est altamente conservada en las bacterias. La cepa dnaAcos, SF53, fue desarrollada con el proposito de evaluar los inhibidores de la DnaA. La mutante condicional dnaA219, crece normalmente a 42 C, pero muere a 30 C, debido sobreiniciacinde la replicacin por actividaad de la protena DnaA. La DnaA, es considerada como un nuevo blanco para nuevos antibiticos, debido a que est altamente conservada en las bacterias. La cepa dnaAcos, SF53, fue desarrollada con el proposito de evaluar los inhibidores de la DnaA. La mutante condicional dnaA219, crece normalmente a 42 C, pero muere a 30 C, debido sobreiniciacinde la replicacin por actividaad de la protena DnaA.

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Compuesto Efecto FluoroquinolonasDNA girasa y Topoisomerasa IV. QuinolonasDNA girasa y Topoisomerasa. CumarinasInhiben la actividad ATPasa de la DNA girasa y topoisomerasa IV. Compuestos que actan a nivel de las Topoisomerasas.

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Objetivo: Mtodo. Buscar nuevos compuestos con actividad antibacteriana. Se utiliz la cepa de deteccin SF53 (desarrollada previamente) para detectar los inhibidores de la protena DnaA. Cepa no viable a 30 C, debido a la sobreiniciacin. S los compuestos son viables es probable que causen parcial o completa inhibicin de la funcin de la DnaA. Cepa SF53. Se estudiaron compuestos que dieron positivo para crecimiento, en ensayos especficos para protenas de replicacin. Se determino la actividad de la DNA girasa purificada.

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Cepas bacterianas: Compuestos utilizados con actividad antibacteriana:

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Resultados. Efecto de varias concentraciones de S143 y su anlogo sobre el crecimiento de SF53.

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Efecto de S143 y sus anlogos sobre el crecimiento de E. coli silvestre. Efecto de S143 y sus anlogos. Efecto de S143 a diferentes []s

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. Efecto de S143 en el crecimiento de clulas sin DnaA Inhibidores de la girasa

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Efecto de S143 sobre el crecimiento de la cepa con sobreexpresin de DNA girasa Efecto de S143sobre el crecimiento de E. coli con susceptibilidad decrementada por fluroroquinonas y cumarinas.

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RESULTADOSCONCLUSIN La benzazepina (S143), dio positivo para la prueba. Pero no acta directamente sobre la DnaA, pero posiblemente acta a nivel de la DNA girasa. Las benzazepinas no han sido reportadas como inhibidores de la girasa. Esta prueba con SF53, permite identificar compuestos que sean inhibidores de protenas de la replicacin. Con las clulas SF53, se descubri un nuevo inhibidor de la DNA girasa.