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Spark® 10M イメージング機能付マルチモードプレートリーダー
Engineered with cellular assays in mind.Spark 10M アプリケーションと機能
細胞カウントおよび生存率測定
細胞イメージング New
細胞密度(コンフルエント)測定 New
細胞培養
蒸発防止
Lid LifterTM 蓋の自動取り外し
加温・攪拌機能付試薬分注
Te-CoolTM 冷却モジュール New
吸光測定、吸光スキャニング
核酸定量(吸光、蛍光)
核酸の純度測定
キュベットポート
蛍光強度測定(FI)
時間分解蛍光(TRF)
蛍光共鳴エネルギー転移(FRET)測定
時間分解 -蛍光共鳴エネルギー転移
(TR-FRET)測定
蛍光偏光測定
発光測定(フラッシュ&グロー)
Alpha Technology
発光スキャン
マルチカラー発光測定
(BRET1, BRET2 ™ , BRET3,
Chroma-GloTM )
SparkControlTM ソフトウェア
SparkControl MagellanTM
IQ/OQ サービス(QC Tool)
ConnectTM マイクロプレートスタッカー
A
NA
LYSIS
INCUB
AT
ION
P
RO
TE
CTION DETEC
TIO
N
Tecanの Cell Chipを最大 4 枚セットできるチップアダプター
SparkControlソフトウェアにより、複数のサンプルの平均値を自動算出
SparkControl ソフトウェアにより、ワンクリックで細胞生存率を測定
標識不要の細胞カウントと生存率測定
Spark 10Mの内蔵式セル カウンターが細胞のサイズを測定し、30秒以内でラベルフリーの細胞カウントと生存率測定を行います。
• 柔軟な領域選択による正確で再現性のある細胞カウント• ワンクリックで細胞の数、サイズや生存率を測定• 視覚的確認のためにセルの画像をエクスポート• 低濃度であっても高精度な細胞カウントが可能• Cell Chip(ディスポーザブル細胞カウント用チップ)によるレプリケート処理
Tecanはセルバイオロジー研究の現場で日々直面する課題を解決すべく、新しいプラットフォームとして Spark 10Mマルチ検出モードプレートリーダーを開発しました。
RANSCREENERT RANSCREENERR
T
www.be l l b rook l abs . com
Far Red FP validatedRANSCREENERT RANSCREENERT
www.be l l b rook l abs . com
Red FI validated
R
RANSCREENERT RANSCREENERR
TRed TR-FRET validated
www.be l l b rook l abs . com
02 SPARK 10M BROCHURE
Spark 10M マルチ検出モードマイクロプレートリーダーは、最先端の機能に、優れた使いやすさを組み合わせたプラットフォームです。多彩な機能と高い性能により、様々なアプリケーションに対応します。
蒸発防止
Humidity Casette はリザーバー部とリッドで構成されています。細胞増殖に均一性を持たせ、セルベースアッセイにおける再現性と信頼性の高いデータが得られます。蒸発防止用の特殊なプレートを用意する必要はありません。
自動リッドリフター
内蔵の Lid LifterTMでマイクロプレートのリッドの取り外しを自動で行うことで、吸光や蛍光・発光アッセイを簡便化します。実験中も手作業の介入なしで、試薬が分注できます。また CO2/O2交換と蒸発防止の機能にも優れ、長時間にわたるカイネティックアッセイも容易に行えます。
セルベースアッセイに最適
Gas Control Module(GCMTM)はプレートリーダー内の CO2とO2濃度の自動制御が可能な 2つの独立したガス導入口を備えています。
• 経時的な細胞培養環境を保持• 結果に悪影響を与えることなく細胞生存率を向上し、長時間のアッセイを実現• CO2/O2濃度を個々に調整することによりガスレベルと混合を最適化• 測定中でもソフトウェアによりリアルタイムのガス濃度調整が可能
Spark 10Mプレートリーダーに GCMを搭載した場合としない場合の細胞生存の比較
0
100
200
300
400
500
600
0 10 20 30 40 50 60time [h]
5000 cells / medium with FCS
■ Spark■ no GCM
cell g
rowt
h [%
]
加温・攪拌機能搭載 試薬ディスペンサー
インジェクター内の沈殿および塩形成を取り除くことによって一貫性のあるデータを生成します。加温・攪拌機能※は独立しており、化合物取り扱いの信頼性と再現性を高めると同時に生細胞の分注を可能にします。
※加温(20 ~ 42℃)/攪拌(50 ~ 1000rpm)
HeLa 細胞がさまざまな密度に増殖するとともにBCAアッセイによるタンパク質定量の値もこれに応じて増加している。
自動細胞イメージングと細胞密度測定
セルベースアッセイでは、信頼性を高めるためマイクロプレート上の各ウェルの測定結果を均一化する必要があります。その際に問題となるのは、細胞がウェル内でどの程度増殖しているのかを確認できないことです。Spark 10M にはマイクロプレートのウェル内の細胞密度を自動測定し、画像化する機能が搭載されました。これにより、ユーザーが設定した細胞密度に達するとシステムが自動的に特定の化合物を加えたり、GFP シグナルを測定したりできるため、結果の信頼性が高まります。
10%
70%
30%
90%
R = 0,98957
0102030405060708090
100
0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6
Con
fluen
ce %
BCA OD
03SPARK 10M BROCHURE
Spark 10Mの機能性と柔軟性
超高速 DNA定量
Spark 10Mの High Speed Monochromators(HSM)により核酸とタンパク質の定量において優れた精度を示します。
• UV(紫外)からNIR(近赤外)までの波長における性能とダイナミックレンジの向上• 波長領域 200 ~ 1000nmでのフルスペクトルスキャンが 5秒 /ウェル• 230と 260nmの波長正確度が向上したことによる高精度なDNA 定量• 直線性が高いOD領域(0 ~ 4 OD)による希釈、マニュアルピペッティグステップの削減
超高速吸光測定
Spark 10Mは、特許出願中 High Speed Monochromators(HSM)を用いてわずか5 秒で吸光スペクトルスキャンが可能です。ダイオード アレイのスピードとモノクロメーターの精度や柔軟性を、どちらをも損なうことなく提供します。
各種フォーマットに対応
Spark 10Mは一般的なANSI/SLAS 規格のマイクロプレートに対応します。また、キュベット、微量測定用 NanoQuant PlateTM、ディスポーザブル細胞カウント用チップCell ChipTM、細胞培養用フラスコ RoboFlask®に対応します。
蛍光測定 – Fusion Optics
Spark 10Mはフィルター式の感度、さらにモノクロメーター方式の柔軟性の両方を兼ね備えた初めてのプレートリーダーです。上方 / 下方蛍光測定において励起側または測定側でフィルター、およびモノクロメーターの 4つの組み合わせが可能です。
標準蛍光フィルターフィルター機能選択時、フィルターリストより励起側 6枚、測定側 6枚選択可能
測定励起
フィルターモノクロメーター
®
励起側フィルタースライド 測定側フィルタースライド
04 SPARK 10M BROCHURE
高性能の発光測定
Spark 10Mのマルチカラー発光オプションが測定を最適化します。3 種類のOD減衰フィルターによる9桁までのダイナミックレンジで、40 種類の選択可能なフィルターが BRET1、2、3、Chroma-Gloを含むあらゆる発光測定を可能にします。
3,62
1,58
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
Spark
Detection Limit
Spark temp. corr.
5.00
4.50
4.00
3.50
3.00
2.50
2.00
1.50
1.00
0.50
0.00Spark
検出限界
3.62
Spark 温度補正機能
[ng
/ml O
mn
ibe
ads]
1.58
高性能のAlpha Technology
Alpha TechnologyはAlphaScreen®、AphaLISA®、AlphaPlexTMから成る、生物学的相互作用を測定するためのビーズベースのアッセイテクノロジーです。Spark 10Mは励起用の高出力レーザー光源とウェル毎の温度補正機能のための IRセンサーが搭載されているのでAlpha アッセイにおける高感度、高均一性、直線性を実現します。SparkControlはAlphaScreen、AphaLISA AlphaPlex用に事前設定されたフィルターと、ユーザーにより選択可能なフィルター設定を選ぶことができます。
Connect マイクロプレートスタッカー
Connectは、1回のランで最高 50 枚までのマイクロプレートのバッチ処理を自動化できる多用途マイクロプレートスタッカーです。SparkControl Magellanソフトウェアに直接接続できるため、操作も簡単。ゲノミクスやプロテオミクス、創薬などの幅広いアプリケーションでスループットを向上します。
Connect の特長• 安定した動作と使いやすさ• 感光性サンプルを保護する遮光カバー付• 特定のプレートのマニュアル操作も可能• オプションのバーコードスキャナーを搭載すると、プレートの左右短辺を読み取り• スループットに応じて 30 枚または 50 枚用のプレートカセットを選択
マルチカラー発光と発光スキャニングによりアッセイの性能と柔軟性を向上
3
2.5
2
1.5
1
0.5
00
min5 10 15 20
% C
V 室温
28 °C
Te-Coolにより測定データの精度を向上
大半のプレートリーダーは、装置内部の最低温度を室温より数度高めに設定しています。そのため季節や地域によって温度が大きく異なることがあり、収集データにばらつきが生じかねません。また、マイクロプレート上で温度勾配が発生することにより、データが変動したり精度が損なわれる原因にもなります。
信頼性の高いデータを収集するには、温度の安定化が不可欠です。ルシフェラーゼアッセイなどで酵素反応を読み取る場合も、また温度依存性のAlphaアッセイや生体組織を使ったカイネティックアッセイの場合も、温度を正確に管理することが必要です。そこで、冷却モジュールTe-Coolにより特定の温度で長時間安定的にアッセイを行える環境を整えました。
Sparkの Te-Coolモジュールの最大の特徴は安定した結果が得られることです。正確な室温を設定する必要がなく、ソフトウェアがすべてを管理し、測定チャンバーを設定温度に保ちます。
平衡化した温度下でのアッセイは、良好な感度をもたらします。5分毎に 570nmで吸光測定した値で、Te-Coolで室温を保った場合と 28℃の場合を比較しました。
温度変化の影響を受けやすい酵素活性測定のうち、発光でのカイネティック測定の CV 値を表しました。
400
500
600
700
800
900
1.000
1.100
1.200
1.300
1.400
0 1 2 3 4 5 6
Lum
ines
cenc
e [R
LU]
CV=14,6
CV=7,7
CV=0,4
Time [min]
Ambient
Ambient +4 °C
Ambient +8 °C
05SPARK 10M BROCHURE
標準 OR
ルーチン作業を簡略化するために設計された SparkControlソフトウェアは、迅速でわかりやすい操作が特長です。また、タッチスクリーン仕様のインターフェースも搭載可能です。
下方蛍光測定
Tecan 独自の Optimal Read(OR)機能により各ウェルを多重測定することでCV値を大幅に抑えます。下方蛍光測定では、ウェル内およびウェル間の再現性が最大限に高まります。
Substrate
高解像度ウェルスキャン
各ウェルの細胞群の完全なデータを収集します。細胞の分布を見やすく画像表示し、選択した領域全体で平均値の算出も可能です。
環境条件の調整
SparkControlソフトウェアは、リーダー内部の温度(18℃ ~ 42℃)や CO2/O2
の濃度などのパラメーターを測定中でも簡単に調整できます。
ワークフロー作成
SparkControlソフトウェアにより、アッセイプロトコルに従って処理ステップをドラッグアンドドロップしてワークフローを容易に作成できます。また、ワークフローの保存や編集が可能です。
ワンクリックアプリケーション
ワークフローを円滑化し、サンプル調製から結果の解析までをこれまでになく短縮します。
高さ自動調整機能
上方蛍光測定と蛍光偏光測定の感度を高めデータの信頼性を大幅に向上させます。この機能は、使用するプレートサイズやサンプルの量、ウェルの形状に関わらず、最適な測定結果を提供します。
細胞密度測定機能
セルベースアッセイのワークフローを簡略化します。たとえばユーザーが細胞密度を設定すると、設定密度に達した細胞に化合物を加えるなどの操作が自動で行われ、細胞の毒性や増殖、タンパク質の発現などのアッセイの信頼性が高まります。
Substrate
SECONDMEASUREMENT
FIRSTMEASUREMENT
App
Labelleling Effi ciency
App
Cuvette
App
CellCounting
App
CellViability
App
Nucleic AcidQuantitation
06 SPARK 10M BROCHURE
カイネティック アッセイの自動 ゲイン調整
ダイナミック レンジの向上
蛍光測定の飽和状態を避けるために、ゲイン設定の自動調整により、カイネティックアッセイのデータ損失を防ぎます。異なるゲイン設定での測定値は、自動的に相互に関連付けられ、データセット全体の評価を可能にします。
SparkControl Magellan は機能性、簡便性、安全性を強化した一連のツールを提供します。
• EIA/ELISA、エンドポイント、カイネティックなどのマイクロプレートベースのアッセイに最適です。
• データ解析、検量線からミカエリス・メンテン式のようなカイネティックパラメーター計算まで迅速に行います。
• チュートリアルビデオや実例ファイルによる簡単操作
• プレート定義エディターによりプレート配列ファイルのカスタマイズが可能
SparkControl Magellanソフトウェアの一連の高機能
• 定性的および定量的 EIA 解析• 二点間、直線回帰、非直線回帰、多項式、キュービックスプライン、Akima、Logitlog、4および5パラメーターなど主要な検量線近似式に対応
• 希釈系列や ICx 計算• データのインポート/エクスポート機能やサンプル ID のインポート機能
• 勾配計算、オンセット(反応時間)、酵素カイネティックなどのカイネティックデータ解析
• スペクトル計算パッケージ:バックグラウンド補正、曲線円滑化、波長選択、ピーク特定および3Dスキャニング
SparkControl MagellanTMは様々な検出モードに対応するデータ整理・解析ソフトです。
SparkControl Magellan Tracker
SparkControl Magellan standardの利点を提供しつつ、電子記録や電子署名の機能があり、FDA規制 21 CFR Part11に準拠しています。
SparkControl Magellanは、勾配計算、オンセット及び酵素カイネティックを含む完全なカイネティックデータ解析を行うことができます。
SparkControl Magellanはすべての希釈系列と ICx計算を処理します。
Spark 10Mのダイナミックレンジの向上により低信号でさえも検出できます。この機能は測定の実行時にゲイン設定を自動調整し、感度について妥協することなく、低信号を検出することが出来ます。すべての結果は自動的に相関し、1つのデータセット内に表示されます。
7
07SPARK 10M BROCHURE
Spark 10M基本仕様
吸光光源 専用キセノンフラッシュランプ波長範囲 200~ 1000nm
モノクロメーターは 1nm毎に調整可ODレンジ 0~ 4 ODスキャン速度 200~ 1000nm ≦ 5秒(1nm step)波長正確度 <0.3nm波長再現性 ≦ 0.3nm正確度 260/230nm <0.08正確度 260/280nm <0.07再現性 @260nm <0.2%正確度 @260nm <0.5%検出限界(DNA) < 1ng/μ L蛍光 F=フィルター、M=モノクロメーター光源 専用キセノンフラッシュランプ波長範囲※ 励起 230~ 900nm
測定 280~ 900nmモノクロメーター(励起 /測定)は 1nm毎に調整可
波長正確度 励起< 1nm、測定< 2nm波長再現性 < 1nmオプティカルミラー 標準装備
50%ミラーダイクロイックミラー(510nm)
ウェル スキャニング 最大 100x 100ポイント最短測定時間 96ウェル(蛍光):≦ 13 秒
384ウェル(蛍光):≦ 30 秒検出限界 1)
上方 励起 F/測定 F ≦ 0.25 pM(≦ 25 amol/ウェル;100μ L)
励起 M/測定 Fまたは励起 F/測定 M
≦ 0.35 pM(≦ 35 amol/ウェル;100μ L)
励起 M/測定 M ≦ 0.50 pM(≦ 50 amol/ウェル;100μ L)下方 励起 F/測定 F ≦ 2.5 pM(≦ 0.5 fmol/ウェル;200μ L)
励起 M/測定 Fまたは励起 F/測定 M
≦ 3.5 pM(≦ 0.7 fmol/ウェル;200μ L)
励起 M/測定 M ≦ 4.0 pM(≦ 0.8 fmol/ウェル;200μ L)蛍光偏光波長範囲 300~ 850nm検出限界 2)
励起 F/測定 F ≦ 1.5 mP励起 M/測定 Fまたは励起 F/測定 M ≦ 2.5 mP励起 M/測定 M ≦ 3.0 mP
時間分解蛍光検出限界 3)
励起 F/測定 F ≦ 40.0 fM(≦ 4 amol/ウェル;100μ L)
励起 M/測定 Fまたは励起 F/測定 M ≦ 65.0 fM(≦ 6.5 amol/ウェル;100μ L)
励起 M/測定 M ≦ 100.0 fM(≦ 10 amol/ウェル;100μ L)
発光波長範囲 370~700 nm検出限界 グロー発光 ≦ 9 pM(≦ 225 amol/ウェル;25μ L)4)
フラッシュ発光 ≦ 218 fM(≦ 12 amol/ウェル;55μ L)5)
ダイナミックレンジ > 9桁マルチカラー発光 38スペクトルフィルター減衰フィルター OD1、OD2、OD3
AlphaScreen光源 高出力レーザーダイオード検出限界 ≦ 100 amol/ウェル bio-LCK-P;20μL6)
≦ 2.5 ng/mL Omnibeads;20μL 7)
均一性 ≦ 3.0%Z'値 ≧ 0.9最短測定時間 8) 96ウェル:≦ 1分
384ウェル:≦ 2分セルカウンティングサイズ 4~ 90μm正確度 ± 10%(10~ 30μm)再現性 < 10%(10~ 30μm)細胞濃度 1× 104~ 1× 107セル /mLイメージング速度(データ換算含む) < 30秒 /サンプルサンプル数 /ラン 8サンプルまでセルイメージング光源 高出力 LEDイメージングモード 明視野対物レンズ 4倍オートフォーカス レーザーベース分解能 1.3μm/ピクセルガスコントロールモジュール調整濃度 (CO2) 0.04~ 10%(Vol.)
(O2) 0.1~ 20.9%(Vol.)濃度正確度 (CO2) < 1.0%(Vol.)
(O2) <0.5%(Vol.)インジェクターシリンジサイズ 選択可能 0.5 mL、1 mLポンプ速度 100~ 300μ L/ 秒分注ボリューム 5~ 1000μ L 1μ Lステップ可変デッドボリューム ≦ 100 μ L正確度および精度 ≦ 0.5% at 450 μ L温度コントロール室温 + 4℃~ 42℃まで均一性 <0.5℃
Te-Cool冷却モジュール温度範囲 + 18~ 42℃冷却 室温より最大 12℃以下撹拌直線、回転、8の字回転(振幅 /スピード調整可)
仕様は予告なく変更する場合がございます。カタログに記載された性能値は工場試験時の平均実測値です。1)フルオレセイン 2)@1nMフルオレセイン 3)ユーロピウム 4)144-041 ATP検出キットSL(BioThema) 5)ENLITEN® ATPアッセイ システム(Promega) 6)PE# 6760620;P-Tyr-100 assay kit 7)PE# 6760626D;Omnibeads 8)温度補正含む
プレートフォーマット 6~ 384ウェル NanoQuant Plate、Cell Chip、キュベット、RoboFlask電源・消費電力 100-120/220-240V AC 50/60Hz 170VA本体寸法 /本体重量 494(W)× 395(H)× 557(D)mm 40 kgインジェクター搭載時の高さ /重量 455(H)mm 44kg~ 46.7 kg(最大)Te-Cool搭載時の高さ /重量 510(H)mm 50kg
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398454J v.3.0 April 2016