the neonatal gut flora and vitamin k

1
! ! " ##$%& ! ! " (%&) ##$%& #*+ ,-.’ &&.’ ! (/0 &" / 1 2&+++3 41 4 5 6**7 89&,%896& 5 ( :’ 28)-*3 4; 4 < 8+97 6*8 5 1= 5 0> ## 5 ? 28)),3 4# @4 ’ < )+78%" ; > 28))&3 4; % @A B 97,%86 0 = C ; = # < 1 / ’ # / &" ? 0 # #’? 2# ’ ? 0’(3 / : = 2 # 0’(3 1 # / ’ / / ?D ’# / 1 ’ < > / ’ : / 1 5 1 /#E />? ? / C 0 ’ ( ( ? ( / 0 2(/03 ; 25 ( 8)-*3 2/ &+++3 ! 2; 8))&3 = ! 2CF # 8)-*3 B 6+G ,+G E )*G ? % 1 C 0 ’ ( ( ? 9 +%8 &%* 9 ? % H = ? 85 ’! 5# 5#%’? 2!3 2’! "3 2’3 ##$%& # &8 2BB>3 ##$%& (%&) % :?%8 F 2 ! ! &%* 696*G 8&-8G 2I++63 5 " " Reinforced Clostridial agar with Analine blue showing Bifidobacteria sp. as blue coloured colonies Rogosa agar with beige coloured colonies of Lactobacilli sp. Slanetz and Bartley agar with Enterococci sp. appearing as maroon coloured colonies Negative image of a Gram stain of Bifidobacteria bifidum showing their distinctive bone shaped structure Negative image of a Gram stain of Enterococcus faecium Negative image of a Gram stain of Lactobacilli sp. exhibiting bipolarity at the end of the rods 4 # # 9 &*+"G &-*G 2I++63 7 12 12 % Survival of Caco-2 Cells dosed with various concentrations of Phylloquinone 0 20 40 60 80 100 120 140 Cells Only 1 10 25 50 100 250 Ethanol Concentration of vita min K1 % Survival % Survival of Caco-2 Cellsdosed with variousconcentrationsof Menadione 0 20 40 60 80 100 120 Cels Only 1 10 25 50 100 250 Ethanol Concentration of Vitamin K3 in ug/ml % Survival Toxicity Studies Toxicity Studies % Survival of Caco-2 Cells dosed with various concentrations of Menaquinone 4 0 20 40 60 80 100 Cells Only 1 10 25 50 100 250 Ethanol Concentration of Vitamin K2 in ug/ml % Survival ! ! ##$%& (%&) ’ # *+ &&.’ ##$%& #*+ ,-.’ (%&) 11 11 # # 9 *""G 899+G 2I++"3 6 Transport Studies Transport Studies ! ! % ##$%& 9 # / H ! ! ! ! " 2? 63 8&,8+ %, J &+*8+ %, J BB> 10 10 $ % $ % & & ’ % () ’ % () 5# ’! 1 ! > 5# ’" 8 % % & & * ’ $% * ’ $% 5#%’? ,6), KL ! - 2,8,*3 KL 2,***3 KL ! - 9 Peak A + , + , ’ " - > B ’ 1 1 1 1 ’ ?F 1 > # 1 > # 3 [a] [b] [c]

Upload: gordon-cooke

Post on 12-Jun-2015

45 views

Category:

Education


1 download

DESCRIPTION

Poster presentation for INRA Conference in Clermont Ferand, France, 2004 on Gut flora of breast and formula fed babies and vitamin K production by bacteria

TRANSCRIPT

Page 1: The Neonatal Gut Flora and Vitamin K

����������������������� �������� �� ��� ��������� ��� ������� ����� �� ��� ���� ������� �� �� ���� � ����� ���������������������� ���� ������������ ��������� ���������������� �������� ����� ���� ���� �� ������ ���� � ��� ���� ���� ���� ���� ������� ������� �� ������� ��� ���������� ����� ������ ������ ������������� ��������������� ���������� ����� ��������������� ��������� ������� �� ���������� ����������������� ����� � ��������������� ��������� ������ ���� �������� �� ��� ���� �� ���������� ��� ������� �� ������� ������������� �������� ������� ������� ������ �������� ���� ����� ���������� ��������������� ���!������� ��� ��� !������� "� ���� ���� �� ������� ������ #�#$%&� ���� ��� ��� ������ � ���� ����� �������� '�� ������ ���� �� ������� ������� �������� ��� � � ���� �������� ���� ��� ���� ��������� ��� ��� ��� �� �� ���������� ��� �� ������ ��� ����� ��� ������ ������� ����������������� ������ � ������� ���!������� ������ !�������"� ����������������(�%&)� ���#�#$%&���������� ����� ������ ��� ������ ��� ����� ��� ����� ����� �#*+ � ���� � �� ,�-.'� ��� &�&.'�������������� ���� ����� ������������ � ������������� ����� ���� ������ ��������������!����������� ����� ���� � ����� �� �� �� ��� ��� ���� ���� ��� �������� ���� � ����� � ��� (/0�������� ������������������������&"���������

����������� / �� ���1��2&+++3�41������ �� �����4�����5 �����6**7�89&,%896&�� 5 ��� ��( �� � ��:'��28)-*3�4;�� ����������� ����4�<���� ��� ��� ������8+97�6*8�� 5����� 1=�� 5�� 0>�� ������� ##�� 5���� ?�� 28)),3� 4# �� ��� ����� ��� ��� ��� ������� ���@4�������'���� �<���� �)+78%"� ;��� ������ >�� 28))&3� 4;�� ���� �� ������ ���%�� ����� ������ �� ��� �� ����@A ��� ����� ���� ���B�����������97,%86

����0��� � �=���C�� � ���;�� �����=������#������<����1�� �� ���/��' ���#�������

����������������������� �����/�����&"����� ���

������������ ������������?���0��� �# ����#'?�2#���� �'������?���� ����0�'�(3��/���:�������=��� ��2 ��� �����#����� ���0�'�(3��1�� ��# ����/��' ���/� ����/��?����D��'�#� ���/��1�� ��'��� ���< ����>�����/��' ������: ����/��1����� ���

5����1 ����� ���/#E�� />? ���������������� ����?�������� ��� ��/��������� ���������C�� ����������������� ������������������������0 ���� �' ��������(����� �(����?������

������������������������

� ( ������ ����/��� ���������0�������2(/03���� ����� ���� ������� ����������������� �������;�� ������ ���� �� ���� ����� ��� ��������������������������������������������� ����������������������� 25 ��� ���( �� � ���8)-*3�� �� �������� �� ���� � ��� ��� ����� �� ��� ���� �� ����� ����� ���������������������� ������������������������������� �� ��������������� ���2/ �� ����&+++3��� �������������������� ��������������� ������������������������� ����� �� ���� ����� �� ��� ��� ��� ���� ���� �� � ������ ������!������������� ������������ ������2;����������8))&3��� =��� �� � �������� ��� ���� �� ��� ���� ����� �� ��� !��������2C��� ���F� ���#������8)-*3�� ��� ���� �������� ���� ������ ��� ��� ������� ����� �� ����� � ���� ���B������ ��6+G����� �������,+G��������E�� ���)*G����?� ���� �� ������������

���������������� ����������������� ���������� ������ ���� �������� ��������������� �� ����� ��� ���������� ������ ��%������������� ����� ��� �������� ���� ��� ���� �� ���������� � ����� � ��� �������� ������ ��� � ����������������� �� ��� ���������� ���� �� ����� �� ����� �� ��� ���� �� � ������ ��������� ���������������

11

��������������������������������������

� C �� � �� ��� ����� � ���� ���� �� ����� �� ���� ���� ���� �� ����0 ���� �' ��������(����� �(����?������ ������ ���������9��������� ��� ��� �������� ����� +%8� � �� ���� &%*� � �� ��� ��� 9� ����� ������� ����� ?������������%��� ������������������������ H������������� ����� ���� ���� ��� �� ���� ����� ���������� ��� ������ ���� ������ ��������� � ����=� ���� ���� ���� �������� ?������� ���������� ��� ���� ����� �������� ��� 85� ������� �������������������� ������������ ���������������������� � ��� � ���������� ��� ����� ���������������������������� ��� ���� ���� '�� !�������� ����� �������� ��� �5#� � ���� ��� ������ ������������� ������ �����������������5#%'?�� �� ����������������������� ��� ���� 2 ���!������3�� ����� ����� �����2'�� !�������"3� ���������������������2'�� �����3������ ��������������������������#�#$%&���� ���������� ����������� ���#�������� �������� ��� &8� � ��� ��� ���� ���� ����� ��� ��� ��� ����������� ������ �� ��������� � ������� � ������ ���� � ���� 2�BB>3������������������������������ ��������������� ���������� �������� ����� ��������� ��� ���� ������ ��� ���� �� � ������ ��� #�#$%&� ����� � ��� (�%&)� ���%����� � ��� ���������� ���������������:?�%8����� F������ �� �� ��

22

��������������������������������������������������������������������������������������

���������������������������������������������� ����!���� ����!��

������������� ������ ���������� ���� ����&%*�� ���������� ��� ������������� ������

������������69�6*G��� �� ����� ������� ��������� ��������� ����

���� ��������� ������������8&�-8G���

�� ����� ������� �����2�I+�+63�

55

����������������������"��������������������������������"����������

Reinforced Clostridial agar with Analine blue showing

Bifidobacteria sp. as blue

coloured colonies

Rogosa agar with beige coloured colonies of Lactobacilli sp.

Slanetz and Bartley agar with E nterococci sp. appearing as maroon

coloured colonies

Negative image of a Gram stain of B ifidobacteria bifidum

showing their distinctive bone shaped structure

Negative image of a Gram stain of Enterococcus faecium

Negative image of a Gram stain of Lactobacilli sp. exhibiting

bipolarity at the end of the rods

44

��������������������������������������������������������������������������������������

��������������������#����������������������������#��������

������������� ������ ���������� ���� ����9�������������� ��� �������������������� ������������

&*�+"G��� �� ����� ������� ��������� ��������� �������� ��������� ������������&�-*G��� �� ����� ������� �����2�I+�+63

77

1212

% Survival of Caco-2 Cells dosed with various concentrations of

Phylloquinone

0

20

40

60

80

100

120

140

Cells O

nly1 10 25 50 10

025

0

Ethan

ol

Concentration of vitamin K1

% S

urvi

val

% Survival of Caco-2 Cells dosed with various concentrations of Menadione

0

20

40

60

80

100

120

Cells

Only1 10 25 50

100

250

Etha

nol

Concentration of Vitamin K3 in ug/ml

% S

urviva

l

Toxicity StudiesToxicity Studies

% Survival of Caco-2 Cells dosed with various concentrations

of Menaquinone 4

0

20

40

60

80

100

Cells O

nly1 10 25 50 10

025

0

Etha

nol

Concentration of Vitamin K2 in ug/ml

% S

urvi

val

���!������� ������ !������������������������������������#�#$%&� ���(�%&)���������� ��'�� ������� �� ���#

*+� �����

&�&.'����#�#$%&����� ��� ���#*+�� �����,�-.'����(�%&)�

����

1111

��������������������������������������������������������������������������������������

��������������������#����������������������������#��������

������������� ������ ���������� ���� ����9�

������������� ��� �������� ����������

������������*�""G��� �� ����� ������� ��������� ��������� �������� ��������� ������������89�9+G��� �� ����� ������� �����2�I+�+"3

66 Transport StudiesTransport Studies

� ���!������� ��� ��� !������� ����� ����� ���� ��� ������ ������ ��� �� �������� � ���%����� � #�#$%&� ���� ��� ��� �

�����������9����������

� ���� �������������� ������������ �������������#����� ����/���������������������������H��������������������������������� ���� ���� ����������� ��� ��� ��� ����!������� ������ !������� ����� ��� �������� ��� ���� ����������� �������������������������

� '�� ������� ������ ���� ����� �� ���� �� ����!������� ������ !�������"�2?����63��� �� � �� � �����8�&,�8+

%, ��J�� ��� ��� � ��� � �� ��� � �� ������� ��� &�+*�8+ %, ��J�� ���� �� ��� � ��� ��� � �� ������� ����� ����� �� ������� ������ ����������� �����

� �BB>��� ����������������� ��������������������� �� ���������� ��� ���� ��������� ����� ������ ����� ����� �� �� ����� ����� ��� ����� ��� ���� ���� ����� ����� ������ ���� ����� ��� �������������

1010

���������$����%�������������$����%����

���������������&������������������������������&���������������

'��������%�����()�����'��������%�����()�����

���5#�� ����������������� �������������� ���

��������'�� !�������������������� �������1 ����� �

��� !��������� ������� ��>�� ��������5#�

� �����������'�"��� �� ���

88

���������%����������%������ �����������&���������� �����������&�������

����������*������'����������$%�����������*������'����������$%�

5#%'?��� �������� ������ �

������� �������������������� �� �������������� � ����� �� �� �����,6)�,�K L� ���� ������������ ���������� ����������

��� !�������-�������������� �������

������ ����2,8,�*3�K�L� ������ ��� ����2,**�*3�K�L����������� !�������-�

99

Peak A

'��������������������������'���������������������������������������+�������,����������������������+�������,���������

'��������"���� �����-� ���

������������� ��� >���� ��� �

����� ���������� � ���������

���� ������ ������ ����B�����'��������1����� �

���� ����� ���� 1 ����������1������������� �

�������������� ��� 1 ���� �����'���

���� ������ ���� ? ���F� ���1 ������� �

��������� �� ����>���������#������� ��� ��

������� ����1��

����� ���� ���� >���������#������� ��� �

33

[a]

[b] [c]