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Total IgE

For use on the IMMULITE®

and IMMULITE® 1000 systems

IMMULITE®/IMMULITE® 1000 Total IgE

2 IMMULITE/IMMULITE 1000 Total IgE (PILKIE-5, 2005-05-19)

English

Intended Use: For in vitro diagnostic usewith the IMMULITE and IMMULITE 1000Analyzers — for the quantitativemeasurement of total immunoglobulin typeE (IgE) in serum.Catalog Number: LKIE1 (100 tests),LKIE5 (500 tests)Test Code: TIE Color: VioletCDC Analyte Identifier Code: 2805CDC Test System Identifier Code: 10159CLIA Complexity Category: Moderate

Summary and ExplanationModern laboratory methods for allergytesting are based on discoveries regardingthe biology of allergy.4,5,7,9,10 Many allergiesare mediated by IgE immunoglobulins,which act as points of contact between theallergen and specialized cells. The IgEmolecules, which have a molecular massof approximately 200,000, bind to thesurface of mast cells and basophilicgranulocytes.2,3 Subsequent binding ofallergens to cell-bound IgE causes thesecells to release histamines and othervasoactive substances, thereby initiatingthe events which we recognize as anallergic reaction.10

In deciding on a course of therapy, it isimportant to distinguish between IgE-mediated and non-IgE-mediatedreactions.4, 7 Measurement of the totalcirculating IgE level, in conjunction withother supporting diagnostic information,can aid in making this diagnosis. Thesupporting information should includeappropriate tests for allergen-specific IgE.Measurement of the total circulating IgElevel may also be of value in the earlydetection of allergy in infants, and as ameans for predicting future atopicmanifestations.4,6,7

IgE levels normally show a slow increaseduring childhood, reaching adult levels inthe second decade of life.1,8 In general,the total IgE level increases with thenumber of allergies which a person hasand with the amount of exposure torelevant allergens.5,7

Significant elevations may be encounterednot only in sensitized individuals, but alsoin cases of IgE myeloma, pulmonaryaspergillosis, and during the active stageof parasitic infestations.4,5,7,9

Principle of the ProcedureIMMULITE/IMMULITE 1000 Total IgE is asolid-phase, chemiluminescentimmunometric assay.Incubation Cycles: 1 × 30 minutes.

Specimen CollectionThe use of an ultracentrifuge isrecommended to clear lipemic samples.Hemolyzed samples may indicatemistreatment of a specimen before receiptby the laboratory; hence the results shouldbe interpreted with caution.Centrifuging serum samples before acomplete clot forms may result in thepresence of fibrin. To prevent erroneousresults due to the presence of fibrin,ensure that complete clot formation hastaken place prior to centrifugation ofsamples. Some samples, particularlythose from patients receivinganticoagulant therapy, may requireincreased clotting time.Blood collection tubes from differentmanufacturers may yield differing values,depending on materials and additives,including gel or physical barriers, clotactivators and/or anticoagulants.IMMULITE/IMMULITE 1000 Total IgE hasnot been tested with all possible variationsof tube types.Volume Required: 5 µL serum. (Samplecup must contain at least 100 µL morethan the total volume required.)

Storage: 3 days at 2–8°C13,15 or6 months at –20°C.15

Warnings and PrecautionsFor in vitro diagnostic use.Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of inaccordance with applicable laws.Follow universal precautions, and handleall components as if capable oftransmitting infectious agents. Source

IMMULITE/IMMULITE 1000 Total IgE (PILKIE-5, 2005-05-19) 3

materials derived from human blood weretested and found nonreactive for syphilis;for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitisB surface antigen; and for antibodies tohepatitis C.

Sodium azide, at concentrations less than0.1 g/dL, has been added as apreservative. On disposal, flush with largevolumes of water to prevent the buildup ofpotentially explosive metal azides in leadand copper plumbing.Chemiluminescent Substrate: Avoidcontamination and exposure to directsunlight. (See insert.)Water: Use distilled or deionized water.

Materials SuppliedComponents are a matched set. Thebarcode labels are needed for the assay.

Total IgE Test Units (LIE1)Each barcode-labeled unit contains onebead coated with monoclonal mouse anti-IgE antibodies. Stable at 2–8°C untilexpiration date.LKIE1: 100 units. LKIE5: 500 units.

Allow the Test Unit bags to come to roomtemperature before opening. Open bycutting along the top edge, leaving theziplock ridge intact. Reseal the bags toprotect from moisture.

Total IgE Reagent Wedge (LIE2)With barcode. 7.5 mL alkalinephosphatase (bovine calf intestine)conjugated to polyclonal goat anti-IgEantibody in buffer, with preservative. Storecapped and refrigerated: stable at 2–8°Cuntil expiration date. Recommendedusage is within 30 days after openingwhen stored as indicated.LKIE1: 1 wedge. LKIE5: 5 wedges.

Total IgE Adjustors (LIEL, LIEH)Two vials (Low and High), 2 mL each, ofIgE in a nonhuman serum/buffer matrix,with preservative. Stable at 2–8°C for30 days after opening, or for 6 months(aliquotted) at –20°C.LKIE1: 1 set. LKIE5: 2 sets.

Kit ComponentsSupplied SeparatelyTotal IgE Sample Diluent (LIEZ)For the manual dilution of patient samples.

One vial 25 mL of an IgE-free nonhumanserum/buffer matrix, with preservative.Stable at 2–8°C for 30 days after opening,or for 6 months (aliquotted) at –20°C.LSUBX: Chemiluminescent SubstrateLPWS2: Probe Wash ModuleLKPM : Probe Cleaning KitLCHx-y: Sample Cup Holders (barcoded)LSCP: Sample Cups (disposable)LSCC: Sample Cup Caps (optional)IECM: Total IgE Control Module.Also RequiredSample transfer pipets, distilled ordeionized water, controls.

Assay ProcedureNote that for optimal performance, it isimportant to perform all routinemaintenance procedures as defined in theIMMULITE or IMMULITE 1000 Operator'sManual.

See the IMMULITE or IMMULITE 1000Operator's Manual for: preparation, setup,dilutions, adjustment, assay and qualitycontrol procedures.

Visually inspect each Test Unit for thepresence of a bead before loading it ontothe system.Recommended Adjustment Interval:2 weeks.

Quality Control Samples: Use controlsor sample pools with at least two levels(low and high) of Total IgE.

Expected ValuesA reference range study was performedusing the IMMULITE Total IgE assay onserum samples from nonatopic individuals.The results, tabulated below by age, are inaccord with the literature.14

Age (years)Median(IU/mL)

95%ile(IU/mL) n

0–1 6.6 29 15

1–2 10.1 49 34

2–3 12.9 45 29

3–9 14.4 52 106

Adult 20.4 87 48

Consider these limits as guidelines only.Each laboratory should establish its ownreference ranges.


LimitationsSerum total IgE levels for the majority ofindividuals with IgE-mediated disease canbe expected to be elevated compared tothe reference range for healthy adults.However, not all allergic patients exhibitelevated serum total IgE levels.11

Since not all atopic reactions are IgE-mediated, a total IgE result in thereference range should always beinterpreted in light of other clinicalobservations.Tests for allergen-specific IgE may clarifythe finding of an elevated total IgE result.Heterophilic antibodies in human serumcan react with the immunoglobulinsincluded in the assay components causinginterference with in vitro immunoassays.[See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinelyexposed to animals or animal serumproducts can demonstrate this type ofinterference potentially causing ananomalous result. These reagents havebeen formulated to minimize the risk ofinterference; however, potentialinteractions between rare sera and testcomponents can occur. For diagnosticpurposes, the results obtained from thisassay should always be used incombination with the clinical examination,patient medical history, and other findings.

Performance DataSee Tables and Graphs for datarepresentative of the assay's performance.Results are expressed in IU/mL.(Unless otherwise noted, all weregenerated on serum samples collected intubes without gel barriers or clot-promoting additives.)Conversion Factor:IU/mL × 2.4 → ng/mLCalibration Range: up to 2,000 IU/mL(2nd IRP 75/502)Analytical Sensitivity: 1.0 IU/mLHigh-Dose Hook Effect: none up to13,000 IU/mL.Intraassay Precision (Within-Run):Statistics were calculated for samplesfrom the results of 20 replicates in a singlerun. (See “Intraassay Precision” table.)

Interassay Precision (Run-to-Run):Statistics were calculated for samplesassayed in 16 different runs. (See“Interassay Precision” table.)Linearity: Samples were assayed undervarious dilutions. (See "Linearity" table forrepresentative data.) The results showthat the IMMULITE Total IgE kit maintainsgood linearity throughout its calibrationrange; but due to the heterogeneity ofcirculating IgE with different affinities,there may be a loss of dilutionalparallelism in certain patients.

Recovery: Samples spiked 1 to 19 withthree Total IgE solutions (780, 1,940 and3,950 IU/mL) were assayed. (See"Recovery" table for representative data.)

Specificity: The antibody is highly specificfor human IgE, exhibiting nocrossreactivity to other humanimmunoglobulin classes.

Bilirubin: Presence of bilirubin inconcentrations up to 200 mg/L has noeffect on results, within the precision of theassay.

Hemolysis: Presence of packed red bloodcells in concentrations up to 30 µL/mL hasno effect on results, within the precision ofthe assay.

Lipemia: Presence of triglycerides inconcentrations up to 3,000 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.

Method Comparison: The assay wascompared to DPC's Coat-A-Count TotalIgE IRMA on 196 samples. (Concentrationrange: approximately 4 to 775 IU/mL. Seegraph.) By linear regression:(IML) = 0.96 (Coat-A-Count IRMA) – 4.8 IU/mLr = 0.981

Means:133 IU/mL (IMMULITE)144 IU/mL (Coat-A-Count IRMA)

References1) Barbee RA, et al. Distribution of IgE in acommunity population sample: correlation withage, sex and allergen skin test reactivity. JAllergy Clin Immunol 1981;68:106–11. 2) GehaRS. Human IgE. J Allergy Clin Immunol1984;74:109–20. 3) Gordon RR, et al.Immunoglobulin E and the eczema-asthmasyndrome in early childhood. Lancet 1982;1:72–74. 4) Halpern GM. Markers of human allergicdisease. J Clin Immunoassay 1983


Jun;6(2):131–39. 5) Hamilton RG, Adkinson NF.Clinical laboratory methods in allergic disease.Lab Management 1983 Dec;21(12):37–50. 6)Hamilton RG, Adkinson NF. Quantitation ofallergen-specific IgE in serum using theradioallergosorbent test. J Clin Immunoassay1983 Jun;6(12):147–54. 7) Homberger HA,Yunginger JW. Laboratory testing in thediagnosis and management of allergic diseases.Clin Lab Annual 1983;2:351–88. 8) Kjellman N-IM, Johansson SGO, Roth A. Serum IgE levelsin healthy children. Clin Allergy 1976;6:51–59. 9)Mandy FF, Perelmutter L. Laboratorymeasurement of total human serum IgE. J ClinImmunoassay 1983 Jun;6(2):140–46. 10)Norman PS. The clinical significance of IgE.Hosp Pract 1975 Aug;10(8):41–9. 11) YungingerJW. Clinical significance of IgE. In: Middleton E,et al, editors. Allergy principles and practice. Vol2. 3rd ed. St. Louis: C.V. Mosby, 1988:849-60.12) National Committee for Clinical LaboratoryStandards. Procedures for the collection ofdiagnostic blood specimens by venipuncture;approved standard. 4th ed. NCCLS DocumentH3-A4, Wayne, PA: NCCLS, 1998. 13) BazaralM, Hamburger RN. Standardization and stabilityof immunoglobulin E (IgE). J Allerg Clin Immunol1972;49:189-91. 14) Nye L, Merrett TG, LandonJ, White RJ. A detailed investigation ofcirculating IgE levels in a normal population. ClinAllergy 1975;1:13-24. 15) Tietz NW, editor.Clinical guide to laboratory tests. 3rd ed.Philadelphia: WB Saunders, 1995:358.

Technical AssistanceIn the United States, contact DPC'sTechnical Services department.Tel: 800.372.1782 or 973.927.2828Fax: 973.927.4101. Outside the UnitedStates, contact your National Distributor.The Quality System of Diagnostic ProductsCorporation is registered to ISO 13485:2003.

Tables and Graphs

Intraassay Precision (IU/mL)

Mean1 SD2 CV3

1 49 2.6 5.3%

2 129 7.0 5.4%

3 348 22 6.3%

4 769 55 7.2%

5 1,236 127 10.3%

6 1,765 251 14.2%

Interassay Precision (IU/mL)

Mean1 SD2 CV3

1 46 3.5 7.6%

2 126 7.5 6.0%

3 327 20 6.1%

4 712 42 5.9%

5 1,081 130 12.0%

6 1,463 164 11.2%

Linearity (IU/mL)

Dilution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 8 in 85 203 — —

4 in 8 112 102 110%

2 in 8 62 51 122%

1 in 8 31 25 124%

2 8 in 8 410 — —

4 in 8 197 205 96%

2 in 8 112 103 109%

1 in 8 62 51 122%

3 8 in 8 1,324 — —

4 in 8 648 662 98%

2 in 8 344 331 104%

1 in 8 160 166 96%

4 8 in 8 1,644 — —

4 in 8 850 822 103%

2 in 8 377 411 92%

1 in 8 222 206 108%


Recovery (IU/mL)

Solution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 — 47 — —

A 77 84 92%

B 127 142 89%

C 226 243 93%

2 — 96 — —

A 126 130 97%

B 182 188 97%

C 252 289 87%

3 — 222 — —

A 255 250 102%

B 287 308 93%

C 362 409 89%

4 — 258 — —

A 262 284 92%

B 324 342 95%

C 440 443 99%

Method Comparison

Coat-A-Count Total IgE IRMA, IU/mL 0 200 400 600 800

IMM

ULI

TE T

otal

IgE

0

200

400

600

800

(IML) = 0.96 (CAC IRMA) – 4.8 IU/mLr = 0.981

Deutsch. Intraassay Precision: 1Mittelwert, 2S(Standardabweichung), 3CV (Variations-koeffizient). Interassay Precision: 1Mittelwert, 2S(Standardabweichung), 3CV (Variations-koeffizient). Linearity: 1Verdünnung, 2Beobachten(B), 3Erwarten (E), 4% B/E, 58 in 8. Recovery:1Lösung, 2Beobachten (B), 3Erwarten (E), 4% B/E.Method Comparison: Total IgE: Gesamt IgE.

Español. Intraassay Precision: 1Media, 2DS,3CV. Interassay Precision: 1Media, 2DS, 3CV.Linearity: 1Dilución, 2Observado (O), 3Esperado(E), 4%O/E, 58 en 8. Recovery: 1Solución,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E. MethodComparison: Total IgE: IgE Total.

Français. Intrraassay Precision: 1Moyenne,2SD, 3CV. Interassay Precision: 1Moyenne, 2SD,3CV. Linearity: 1Dilution, 2Observé (O), 3Attendu(A), 4%O/A, 58 dans 8. Recovery: 1Solution,2Observé (O), 3Attendu (A), 4%O/A. MethodComparison: Total IgE: IgE Totales.

Italiano. intraassay Precision: 1Media, 2SD(Deviazione Standard), 3CV (Coefficiente diVariazione). Interassay Precision: 1Media, 2SD(Deviazione Standard), 3CV (Coefficiente diVariazione). Linearity: 1Diluizione, 2Osservato(O), 3Atteso (A), 4%O/A, 58 in 8. Recovery:1Soluzione, 2Osservato (O), 3Atteso (A), 4%O/A.Method Comparison: Total IgE: IgE Totali.

Português. Intraassay Precision: 1Média,2Desvio padrão, 3Coeficiente de variação.Interassay Precision: 1Média, 2Desvio padrão,3Coeficiente de variação. Linearity: 1Diluição,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E, 58 em 8.Recovery: 1Solução, 2Observado (O), 3Esperado(E), 4%O/E. Method Comparison: Total IgE: IgETotal.

Deutsch

Gesamt IgEVerwendungszweck: Für die in vitro-Diagnostik unter Verwendung derIMMULITE und IMMULITE 1000 Systeme– zur quantitativen Messung vonImmunglobulin E (IgE) im Serum.Artikelnummern:LKIE1 (100 Tests)LKIE5 (500 Tests)Testcode: TIE Farbe: violett

Klinische RelevanzDie moderne Laboratoriumsdiagnostikallergischer Erkrankungen basiert auf derErkenntnis, daß Allergien häufig durchImmunglobulin E (IgE) vermittelt werden.IgE knüpft dabei den Kontakt zwischendem Allergen und spezialisierten Zellen.4,5,

7,9,10 Die IgE Moleküle haben einMolekulargewicht von circa 200 000 undbinden an die Oberfläche von Mastzellenund basophilen Granulozyten.2,3 Dieanschließende Bindung von Allergenen anzellgebundenes IgE veranlasst dieseZellen zur Ausschüttung von Histaminenund anderen vasoaktiven Substanzen. Sielösen so die als allergische Reaktionbekannten klinischen Symptome aus.10


Für eine Therapieentscheidung sind dieIgE-vermittelten von den nicht IgE-vermittelten Reaktionen zuunterscheiden.4,7 Dabei kann die Messungvon zirkulierendem Gesamt IgEzusammen mit zusätzlichen klinischenDaten die Diagnosestellung unterstützen.Weitere Informationen sollten auch denNachweis von allergen-spezifischem IgEbeinhalten. Die Gesamt IgE-Bestimmungkann auch die frühe Diagnose allergischerErkrankung bei Kindern und dieVorhersage künftiger atopischerManifestationen unterstützen.4,6,7

Der IgE Spiegel steigt in der Kindheitnormalerweise langsam an und erreichtden Konzentrationsbereich vonErwachsenen normalerweise innerhalbdes zweiten Lebensjahrzehnts.1,8 Imallgemeinen steigt der Gesamt IgESpiegel mit der Zahl allergischerManifestationen eines Patienten und mitder Häufigkeit der Exposition für einrelevantes Allergen.5,7

Ein deutlicher Anstieg des IgE ist nichtalleine auf sensibilisierte Personenbeschränkt, sondern findet sich auch beiPatienten mit Myelomen, pulmonarerAspergillose, und akutem Parasitenbefallbei denen vermehrt IgE produziertwird.4,5,7,9

MethodikIMMULITE/IMMULITE 1000 Gesamt IgEist ein Festphasen, Chemilumineszenzimmunometrischer Assay.Inkubationszyklen: 1 × 30 minuten.

ProbengewinnungDer Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zurKlärung von lipämischen Probenempfohlen.Bei hämolysierten Proben besteht dieMöglichkeit einer unsachgemäßenHandhabung vor Eintreffen im Labor,daher sind die Ergebnisse zurückhaltendzu interpretieren.

Die Zentrifugation der Serumproben vordem völligen Abschluss der Gerinnungkann zu Fibringerinnseln führen. Umfehlerhaften Analysenergebnissen infolgevon Gerinnseln vorzubeugen, istsicherzustellen, dass die Gerinnung vorder Zentrifugation der Proben vollständigabgeschlossen ist. Insbesondere Proben

von Patienten unter Antikoagulantien-therapie können eine verlängerteGerinnungszeit aufweisen.Blutentnahmeröhrchen von verschiedenenHerstellern können differierende Werteverursachen. Dies hängt von denverwendeten Materialien und Additiven(Gel oder physische Trennbarrieren,Gerinnungsaktivatoren und /oderAntikoagulantien) ab.IMMULITE/IMMULITE 1000 Gesamt IgEsind nicht mit allen möglichenRöhrchenvariationen ausgetestet worden.

Erforderliche Menge: 5 µl Serum.(Der Inhalt der Probenschale mussmindestens 100 µl über der erforderlichenGesamtmenge liegen.)

Lagerung: 3 Tage bei 2–8°C13,15 oder6 Monate bei –20°C.15

Hinweise undVorsichtsmaßnahmenZur In vitro-Diagnostik.

Reagenzien: Bei 2–8°C lagern. UnterEinhaltung der geltenden gesetzlichenVorschriften entsorgen.Die generell geltendenVorsichtsmaßnahmen sind einzuhaltenund alle Komponenten als potentiellinfektiös zu behandeln. Alle ausmenschlichem Blut gewonnenenMaterialien wurden auf Syphilis,Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2,Hepatitis-B-Oberflächenantigen undHepatitis-C-Antikörper untersucht und alsnegativ befundet.Bestimmten Komponenten wurdeNatriumazid (<0,1 g/dl) alsKonservierungsmittel hinzugefügt. Um dieBildung von explosiven Metallaziden inBlei- und Kupferrohren zu verhindern,sollten die Reagenzien nur zusammen mitgroßen Wassermengen in die Kanalisationgespült werden.Chemilumineszenz-Substrat:Kontamination und direkteSonneneinstrahlung vermeiden. SiehePackungsbeilage.Wasser: Destilliertes oder deionisiertesWasser verwenden.


Im Lieferumfang enthaltenDie Komponenten sind aufeinanderabgestimmt. Die Barcode-Etikettenwerden für den Assay benötigt.

Gesamt IgE- Testeinheiten (LIE1)Jede mit Barcode-Etikette verseheneEinheit enthält eine mit monoklonalemAnti- IgE -Mausantikörper beschichteteKugel. Bei 2–8°C bis zum Ablaufdatumhaltbar.LKIE1: 100 Testeinheiten.LKIE5: 500 Testeinheiten.Verpackte Testeinheiten vor dem Öffnenstehen lassen, bis sie Zimmertemperaturerreicht haben. Oben entlang der Kanteaufschneiden, ohne den Plastikverschlusszu beschädigen. Verpackungen wiederdicht verschließen, damit der Inhalttrocken bleibt.

Gesamt IgE-Reagenzbehälter (LIE2)Mit Barcode. 7,5 ml mit alkalischerPhosphatase (Rinderkalbsdarm)konjugierter IgE-Antikörper (polyklonal,Ziege), in Pufferlösung (mitKonservierungsmittel). Verschlossen undgekühlt aufbewahren: Bei 2–8°C bis zumVerfallsdatum haltbar. Bei entsprechenderLagerung beträgt die empfohleneAufbrauchsfrist nach dem Öffnen 30 Tage.LKIE1: 1 Behälter.LKIE5: 5 Behälter.

Gesamt IgE – Kalibratoren (LIEL, LIEH)Zwei Fläschchen (Low und High) à 2 mlmit IgE in einer nichthumanen Serum-/Puffermatrix, mit Konservierungsmittel.30 Tage nach dem Öffnen bei 2–8°C oder6 Monate bei –20°C haltbar.LKIE1: 1 Set.LKIE5: 2 Sets.

Separat erhältliche Testsystem-Komponenten

Gesamt IgE–Verdünnungspuffer (LIEZ)Zum manuellen Verdünnen derPatientenproben. Ein Fläschchen (25 ml)mit IgE-freier nichthumaner Serum-/Puffermatrix, mit Konservierungsmittel.30 Tage nach dem Öffnen bei 2–8°C oder6 Monate bei –20°C haltbar.LSUBX: Chemilumineszenz-SubstratLPWS2: PipettenwaschlösungLKPM: Pipettenreinigungsset

LCHx-y: Halterungen für dieProbenschalen (mit Barcodierung)LSCP: Probenschalen (Einwegartikel)LSCC: Verschlüsse für die Probenschalen(optional)IECM: Das IgE-Kontrollmodul

Ebenfalls benötigtTransferpipetten für die Proben;destilliertes bzw. deionisiertes Wasser;Kontrollen.

TestdurchführungFür eine optimale Funktion des Gerätes istunbedingt zu beachten, dass dieWartungen, wie im IMMULITE oderIMMULITE 1000-Handbuch beschrieben,regelmäßig durchgeführt werden.

Hinweise zur Vorbereitung, täglichenInbetriebnahme des Systems, derKalibrierung sowie Verfahren zur Test-und Qualitätskontrolle entnehmen Sie bittedem IMMULITE oder IMMULITE 1000-Handbuch.Überprüfen Sie jedes Testeinheit auf dasVorhandensein der Polystyrol-Kugel vordem Einsetzen in das Gerät.Empfohlenes Kalibrationsintervall:2 Wochen.Proben zur Qualitätskontrolle:Kontrollen oder Poolseren mit IgE inmindestens zwei Konzentrationen (niedrigund hoch) verwenden.

ReferenzwerteEine Referenzwerte-Studie wurde mit demIMMULITE Gesamt-IgE-Test unterVerwendung von Patientenproben nichtatopischer Probanden erstellt.14

Alter(Jahre)

Median(IU/ml)

95%ile(IU/ml) n

0–1 6,6 29 15

1–2 10,1 49 34

2–3 12,9 45 29

3–9 14,4 52 106

Adult 20,4 87 48

Diese Grenzwerte sind lediglich alsRichtlinien aufzufassen. Jedes Laborsollte seine eigenen Referenzbereicheetablieren.


Grenzen der MethodeFür die Mehrzahl an IgE-vermitteltenAllergien leidender Patienten sindSerumspiegel von Gesamt IgE oberhalbder Referenzbereiche gesunderProbanden zu erwarten, jedoch ist dieSerumkonzentrationen von Gesamt IgEnicht bei allen allergischen Patientenerhöht.11

Da nicht alle atopischen Reaktionen IgE-vermittelt sind, sollte ein Ergebnisinnerhalb der Referenzbereiche stets imKontext mit allen verfügbaren weiterenklinischen Daten interpretiert werden.

Bei erhöhtem Gesamt IgE kann derNachweis von allergen-spezifischem IgEnützliche Zusatzinformationen liefern.Heterophile Antikörper in Humanserenkönnen mit Immunglobulinen aus denAssaykomponenten reagieren undInterferenzerscheinungen innerhalb des invitro Immunoassays verursachen. (Clin.Chem. 1988:34:27-33) Proben vonPatienten, die häufig mit Tier- bzw.Tierserumprodukten zu tun haben, könnendie erwähnten Interferenzen verursachenund zu von der Norm abweichendenabnormalen anomalen Resultaten führen.Die verwendeten Reagenzien sind sokonzipiert, dass das Risiko einerInterferenz mit den zu messenden Probenminimiert ist. Dennoch können potentiellInteraktionen zwischen seltenen Serenund den Testkomponenten auftreten. Zudiagnostischen Zwecken sollten die mitdem Assay erhaltenen Ergebnisse immerin Kombination mit der klinischenUntersuchung, der Patientenanamneseund anderen Befunden gesehen werden.

LeistungsdatenSiehe Tabellen und Grafiken mitrepräsentativen Daten für den Assay. DieErgebnisse sind als IU/ml ausgedrückt.(Alle Daten wurden – sofern nicht andersangegeben – aus Serumproben inRöhrchen ohne Gelbarrieren odergerinnungsfördernde Zusätze gewonnen.)Umrechnungsfaktor:IU/ml × 2,4 → ng/mlMessbereich: Bis 2 000 IU/ml.(2nd IRP 75/502)Analytische Sensitivität: 1,0 IU/ml.

High-Dose-Hook-Effect:Bis 13 000 IU/ml keiner.

Präzision im einzelnen Testansatz(intraassay): Statisik aus einem einzelnenTestansatz mit 20 Einzelmessungen(siehe Tabelle „Intraassay Precision“).

Präzision zwischen Testansätzen(interassay): Statistik aus 16verschiedenen Testansätzen (sieheTabelle „Interassay Precision“).

Linearität: Die Proben wurden getestet,nachdem sie unterschiedlich hochverdünnt wurden. (Repräsentative Datenentnehmen Sie bitte der Tabelle„Linearity“.) Die gefunden Ergebnissezeigen, dass das Gesamt IgE IMMULITEeine gute Linearität im gesamten Bereichder Kalibration besitzt. Zu beachten istjedoch, dass aufgrund der Heterogenitätdes zirkulierenden IgE mitunterschiedlichen Affinitäten beivereinzelten Patienten ein Verlust derVerdünnungslinearität auftreten können.Wiederfindung: Die getesteten Probenwaren mit drei IgE-Lösungen 1:19 versetzt(780, 1 940 und 3 950 IU/ml).(Repräsentative Daten entnehmen Siebitte der Tabelle „Recovery“.)

Spezifität: Der Assay ist hochspezifischfür humanes IgE und zeigt keineKreuzreaktivität zu anderen humanenImmunoglobulinklassen.

Bilirubin: Bilirubin hat in Konzentrationenbis zu 200 mg/l keinen Einfluss auf dieErgebnisse, der größer als die Impräzisiondes Assays selbst ist.

Hämolyse: Erythrozytenkonzentratehaben in Konzentrationen bis zu 30 µl/mlkeinen Einfluss auf die Messung, dergrößer als die Impräzision des Assaysselbst ist.

Lipämie: Triglyceride haben inKonzentrationen bis zu 3 000 mg/dlkeinen Einfluss auf die Ergebnisse, dergrößer als die Impräzision des Assaysselbst ist.Methodenvergleich: Der Assay wurdeunter Verwendung von 196Patientenproben mit DPC's Coat-A-CountIgE Gesamt IRMA verglichen.(Konzentrationsbereich ca. 4–775 IU/ml.Siehe Grafik.) Durch lineare Regression:(IML) = 0,96 (Coat-A-Count IRMA) – 4,8 IU/mlr = 0,981


Mittelwert:133 IU/ml (IMMULITE)144 IU/ml (Coat-A-Count IRMA)

AnwendungsberatungBei Rückfragen wenden Sie sich bitte anIhre DPC Niederlassung.Das Qualitätssystem der Diagnostic ProductsCorporation ist nach ISO 13485:2003 registriert.

Español

IMMULITE IgE TotalUtilidad del análisis: Para su uso en eldiagnóstico in vitro con los analizadoresIMMULITE e IMMULITE 1000 — para lamedición cuantitativa inmunoglobulina E(IgE) en suero.Números de Catálogo: LKIE1 (100 tests),LKIE5 (500 tests)

Código del Test: TIECódigo de Color: Violeta

Resumen y Explicacióndel TestActuálmente los métodos para eldiagnóstico de la alergia, están basadosen que la mayoría de las alergias sonmediadas por inmunoglobulinas IgE, queactuan como punto de contacto entre elalergeno y celulas especializadas.4,5,7,9,10

Las IgE poseen un peso molecular deaproximadamente 200 000 Daltons y seunen a la superficie de mastocitos ygranulocitos basófilos.2,3 La unión de losalergenos a la IgE unida a la celulaprovoca que lancen al espacioextracelular histamina y otras sustanciasvasoactivas, iniciando así la cascada deefectos que puede dar lugar a la reacciónalergica.10

Para el seguimiento de la terapia, esimportante distinguir entre reacciónalergica mediada o no mediada por IgE.4,7

La determinación de los nivelescirculantes de IgE, junto con el resto depruebas del paciente, ayudará a ladeterminación de este diagnóstico. Elresto de pruebas podría incluir valorar lasapropiadas determinaciones de IgEespecificas de los alergenos, que por lahistoria clínica podrían ser responsables

del proceso alergico. La determinación delnivel de IgE total circulante es unimportante valor predictivo para ladetección precoz de alergia en niños, ypredecir futuras reacciones atópicas.4,6,7

Los niveles de IgE muestran normalmentebajos incrementos durante la infancia,elevandose en la segunda decada de lavida.1,8 En general, los niveles de IgE sevan incrementando con el numero dereacciones alergicas que la persona hatenido y con la concentración del alergenoal que ha sido expuesto.5,7

Elevaciones importantes de IgE total nosolo pueden ser encontradas en pacientessensibilizados por alergenos, tambienpuede darse en casos de mieloma IgE,aspergilosis pulmonar y periodos activosde ciertas infecciones por parasitos.4,5,7,9

Principio del TestIMMULITE/IMMULITE 1000 IgE Total esun ensayo inmunométricoquimioluminiscente en fase sólida.Ciclos de incubación: 1 × 30 minutos.

Recogida de la muestraSe recomienda el uso de unaultracentrífuga para aclarar las muestraslipémicas.

Las muestras hemolizadas podrían indicaruna mala manipulación de la muestraantes de ser recibida por el laboratorio; eneste caso, los resultados debeninterpretarse con precaución.La centrifugacion de las muestras desuero antes de que se forme el coagulopuede ocasionar la presencia de fibrina.Para evitar resultados erroneos debidos ala presencia de fibrina, asegurarse que seha formado el coagulo completamenteantes de centrifugar las muestras.Algunas muestras, particularmenteaquellas de pacientes sometidos a terapiaanticoagulante, pueden requerir mayortiempo de coagulacion.Los tubos para recoger sangre dedistintos fabricantes pueden producirvalores diferentes, dependiendo delmaterial del tubo y de los aditivos,incluyendo barreras de gel o barrerasfísicas, activadores de la coagulación y/oanticoagulantes. El IgE TotalIMMULITE/IMMULITE 1000 no ha sido


analizado con todos los distintos tipos detubos.

Volumen Requerido: 5 µl de suero. (Elrecipiente de la muestre debe contener,como mínimo, 100 µl más que el volumentotal requerido).

Conservación: 3 días a 2–8°C, 13,15 o6 meses a –20°C.15

Advertencias y PrecaucionesPara uso diagnóstico in vitroReactivos: Mantener a 2–8°C. Desecharde acuerdo con las normas aplicables.Siga las precauciones universales ymanipule todos los componentes como sifueran capaces de transmitir agentesinfecciosos. Los materiales derivados desangre humana han sido analizados y sonnegativos para sífilis; para anticuerposfrente al HIV 1 y 2; para el antígeno desuperficie de hepatitis B y para losanticuerpos de hepatitis C.

Se ha usado Azida sodica, enconcentraciones menores de 0,1 g/dl,como conservante. Para su eliminacion,lavar con grandes cantidades de aguapara evitar la constitucion de residuos deazidas metalicas, potencialmenteexplosivas, en las canerias de cobre yplomo.Substrato quimioluminiscente: Evitar lacontaminación y exposición a la luzdirecta del sol. (Ver el prospecto).Agua: Usar agua destilada o desionizada.

Materiales SuministradosLos componentes representan un juegocompleto. Las etiquetas de código debarras son necesarias para el ensayo.

Unidades de análisis de IgE Total (LIE1)Cada unidad etiquetada con código debarras contiene una bola recubierta deanticuerpos monoclonales murinos anti-IgE. Estable a 2–8°C hasta la fecha decaducidad.LKIE1: 100 unidades.LKIE5: 500 unidades.Espere a que las bolsas de las unidadesde análisis alcancen la temperaturaambiente antes de abrirlas. Ábralascortando por el extremo superior, dejandoel borde del cierre de cremallera intacto.Vuelva a cerrar las bolsas

herméticamente para protegerlas de lahumedad.

Vial de Reactivo de IgE Total (LIE2)Con código de barras. 7,5 ml de fosfatasaalcalina (de intestino de ternera)conjugada con anti-IgE policlonal de cabraen buffer, con conservante. Guardartapado y refrigerado: estable a 2–8°Chasta la fecha de caducidad. Serecomienda utilizarlo antes de que pasen30 días después de abrirlo cuando seguarda según lo indicado.LKIE1: 1 vial. LKIE5: 5 viales.

Ajustadores de IgE Total (LIEL, LIEH)Dos viales 2 ml (bajo y alto) de de IgE enuna matriz de suero no humano/tampón,con conservante. Estable a 2–8°C durante30 días después de abrise o estable a–20°C durante 6 meses.LKIE1: 1 juego.LKIE5: 2 juegos.

Componentes del kit que sesuministran por separadoDiluyente para muestras de IgE Total(LIEZ)Para la dilución manual de las muestrasde los pacientes. Un vial conteniendo25 ml de una matriz de suero nohumano/tampón libre de IgE, conconservante. Estable a 2–8°C durante30 días después de abrise o estable a–20°C durante 6 meses.LSUBX: Sustrato quimioluminiscenteLPWS2: Lavado de sondaLKPM: Kit de limpieza de sondaLCHx-y: Soportes de recipientes demuestras (con códigos de barras)LSCP: Recipientes de muestras(desechables)LSCC: Tapas para los recipientes demuestras (opcionales)IECM: Modulos controles de IgE Total.

También necesariosPipetas de transferencia de muestras;agua destilada o desionizada; controles.

EnsayoAviso: para obtener el funcionamientoóptimo, es importante realizar todos losprocedimientos del mantenimiento generalsegún lo definido en el manual del


operador de IMMULITE o IMMULITE1000.

Consulte el Manual del operador deIMMULITE o IMMULITE 1000 para: lapreparación, instalación, ajuste, ensayo yprocedimientos de control de calidad.

Inspeccionar visulamente cada unidad derección para asegurarse de que hay unabola antes de introducirla en el Sistema.Intervalo de ajuste recomendado:2 semanas.

Muestras de Control de calidad: Usecontroles o pools de muestrasro con dosniveles diferentes, como mínimo, de IgE(bajo y alto).

Valores esperadosLa siguiente tabla resume los resultadosde un estudio de rango de referencia paraIgE total, basado en muestras deindividuos sanos (disponible). El estudioutilizó un ensayo desarrolladopreviamente por DPC. Los resultados,tabulados por edades, están de acuerdocon la bibliografía.14

Edad(años)

Mediana(IU/ml)

95%til(IU/ml) n

0–1 6,6 29 15

1–2 10,1 49 34

2–3 12,9 45 29

3–9 14,4 52 106

Adult 20,4 87 48

Estos límites han de considerarse sólocomo una guía. Cada laboratorio deberáestablecer sus propios intervalos dereferencia.

LimitacionesLos niveles en suero de IgE total para lamayoría de los individuos con laenfermedad mediada por IgE semostraran elevados respecto a los rangosde referencia para la población sana. Apesar de ello, no todos los pacientesalergicos, muestran niveles altos de IgEtotal en suero.11

Esto es debido, a que no todas lasreacciones atopicas son mediadas porIgE, los resultados de la IgE total dentrode los rangos de referencia, deberían ser

siempre interpretados junto a otrosresultados clínicos.

Los tests para IgE alergeno especificapodrían clarificar los resultados elevadospara la IgE total.Los anticuerpos heterofílicos en el suerohumano pueden reaccionar con lasinmunoglobulinas de los componentes delensayo provocando interferencias con losinmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Las muestras de lospacientes que frecuentemente estánexpuestos a animales o a productosséricos animales pueden presentar estetipo de interferencia que potencialmenteocasione un resultado anómalo. Estosreactivos han sido formulados paraminimizar el riesgo de interferencia, noobstante, pueden darse interaccionesanómalas entre sueros conflictivos y loscomponentes del ensayo. Con fines dediagnóstico, los resultados obtenidos coneste ensayo siempre deben ser usados encombinación con el examen clínico, lahistoria médica del paciente y cualquierotro dato clínico relevante.

Características analíticasPara ver resultados representativos de lascualidades del ensayo, consulte las tablasy los gráficos. Los resultados se expresanen IU/ml. (A no ser que se indique locontrario, todos los resultados fuerongenerados en muestras de suerorecogidas en tubos sin geles oactivadores de la coagulación).

Factor de Conversión:IU/ml × 2,4 → ng/mlIntervalo de calibración: Hasta2 000 IU/ml (2nd IRP 75/502).Sensibilidad: 1,0 IU/ml.Efecto de gancho a altas dosis:Ninguno hasta 13 000 IU/ml.Precisión intraensayo (dentro de unatanda): Se han calculado datosestadísticos para las muestras a partir delos resultados de 20 replicados en unasola tanda. (Véase la tabla "IntraassayPrecision").Precisión intraensayo (dentro de unatanda): Se han calculado datosestadísticos para las muestras a partir de


los resultados de 16 replicados en unasola tanda. (Véase la tabla "InterassayPrecision").Linealidad: Las muestras fueronanalizadas en varias diluciones. (Ver latabla de “Linearity” para resultadosrepresentativos.) Los resultados muestranque el kit de IgE total IMMULITE mantieneuna buena linearidad en todo su rango decalibración; pero debido a laheterogenicidad de la IgE circulante, condiferentes afinidades, puede dar lugar auna pérdida del paralelismo en lasdiluciones de algunos pacientes.Recuperación: Se han analizado lasmuestras cargadas 1 a 19 con tressoluciones de IgE (780, 1 940 y3 950 IU/ml). (Ver la tabla "Recovery" pararesultados representativos).Especificidad: Los anticuerpos usadosen el procedimiento de IMMULITE IgETotal son muy específicos para IgEhumana, y no exhibe reactividad cruzadacon otras clases de inmunoglobulinashumanasBilirrubina: La presencia de bilirrubina,en concentraciones hasta 200 mg/l, notienen ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.Hemolisis: La presencia de eritrocitoshasta concentraciones de 30 µl/ml notiene efecto en los resultados, en loconcerniente a la precisión del ensayo.Lipemia: La presencia de triglicéridos, enconcentraciones hasta 3 000 mg/dl, notienen ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.Comparación de los métodos: Elensayo se ha comparado con el Coat-A-Count IgE Total IRMA de DPC en 196muestras de pacientes. (Intervalo deconcentración: aproximadamente 4 a775 IU/ml. Véase el gráfico). Por regresiónlineal:(IMMULITE) = 0,96 (Coat-A-Count IRMA) –4,8 IU/mlr = 0,981

Medias:133 IU/ml (IMMULITE)144 IU/ml (Coat-A-Count IRMA)

Asistencia técnicaContáctese con su Distribuidor Nacional.

El Sistema de Calidad de Diagnostic ProductsCorporation está registrado para laISO 13485:2003.

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IMMULITE IgE TotalesDomaine d'utilisation : dosage quantitatifdes immunoglobulines totales de type E(IgE) dans le sérum. Ce test est réservé àun usage diagnostique in vitro avecl'Analyseur IMMULITE et de IMMULITE1000.

Référence catalogue : LKIE1 (100 tests),LKIE5 (500 tests)

Code produit : TIECode couleur : Violet

IntroductionLes méthodes modernes de dosage enallergie sont basées sur la découverte durôle de médiateur, joué dans de nombreuxcas par les IgE, entre l'allergène et lescellules spécialisées.4,5,7,9,10 Les IgE,molécules de poids moléculaire d'environ200 000 Daltons, se fixent à la surfacedes mastocytes et des basophiles.2,3 Cescellules relarguent alors de l'histamine etd'autres composés vasoactifs provoquantl'apparition des symptômes de la réactionallergique.10

Lors d'un traitement, il est important dedifférencier une allergie médiée par lesIgE de celle d'un autre type.4,7 Le dosagedu taux d'IgE circulantes, associé àd'autres informations, permet de fairecette distinction. Ces autres informationsdoivent inclure les tests appropriés pourles IgE spécifiques de l'allergène. Ellepermet également la détection précoced'une allergie infantile. Le dosage du tauxdes IgE totales circulantes est égalementvalable pour la détection précoce del'allergie chez l'enfant et comme outilprédictif de futures manifestationsatopiques.4,6,7

Au cours de l'enfance, le taux d'IgEs'élève lentement jusqu'à un niveau qui sestabilise entre 10 et 20 ans.1,8 Pour unmême individu, le taux d'IgE totales est engénéral fonction du nombre d'allergies etde la quantité d'allergènes à laquellel'individu est exposé. 5,7


Les sujets non allergiques peuventégalement présenter des taux élevésd'IgE en cas de myélome, aspergillosepulmonaire ou infection parasitaire enphase aiguë.4,5,7,9

Principe du testIMMULITE/IMMULITE 1000 IgE Totalesest un dosage chimiluminescentimmunométrique, en phase solide.Cycles d'incubation : 1 × 30 minutes.

Recueil des échantillonsIl est recommandé de clarifier leséchantillons hyperlipémiques parultracentrifugation.

Des échantillons hémolysés peuvent êtrerévélateurs d'une préparation inadéquatedu prélèvement avant son envoi aulaboratoire ; il faudra donc interpréter lesrésultats avec prudence.La centrifugation des échantillonssériques avant la formation complète ducaillot peut entraîner la présence defibrine. Pour éviter les résultats erronésdûs à la présence de fibrine, s'assurer dela formation complète du caillot avant decentrifuger les échantillons. Certainséchantillons, en particulier ceux provenantde patients sous anti-coagulants, peuventnécessiter un temps plus long pour laformation du caillot.Des tubes pour prélèvements sanguinsprovenant de fabricants différents peuventdonner des résultats différents, selon lesmatériaux et additifs utilisés, y comprisgels ou barrières physiques, activateursde la coagulation et/ou anticoagulants. Lecoffret IgE totales IMMULITE/IMMULITE1000 n'a pas été testé sur tous les typesde tubes possibles.

Volume nécessaire : 5 µl de sérum.(L'unité-échantillon doit contenir au moins100 µl de plus que le volume totalnécessaire.)

Conditions de conservation : 3 jours à+2°C/+8°C13,15 ou jusqu'à 6 mois à-20°C.15

Précautions d'emploiRéservé à un usage diagnostique in vitro.

Réactifs : conserver les réactifs à +2/+8°C. Eliminer les déchets conformémentà la réglementation en vigueur.Respecter les précautions d'emploi etmanipuler tous les composants du coffretcomme des produits potentiellementinfectieux. Les réactifs dérivés de produitshumains et utilisés dans ce coffret ont subiun test sérologique pour la Syphilis et destests de dépistage pour les anticorps anti-VIH1 et 2, anti-HCV et pour l'antigène desurface de l'hépatite B, qui se sont tousavérés négatifs.

De l'azide de sodium à des concentrationsinférieures à 0,1 g/dl a été ajouté commeconservateur ; lors de l'élimination,l'évacuer avec de grandes quantités d'eaupour éviter une accumulation d'azidesmétalliques explosifs dans lescanalisations.

Substrat chimiluminescent : éviter lescontaminations et l'exposition directe à lalumière solaire (voir la fiche technique).Eau : utiliser uniquement de l'eau distilléeou désionisée.

Matériel fourniLes composants de la trousse ne peuventêtre utilisés que conjointement. Lesétiquettes à l'intérieur du coffret sontnécessaires au dosage.

Tests unitaires IgE totales (LIE1)Avec code-barre. Chaque unité-testcontient une bille revêtue d'anticorps anti-IgE monoclonaux murins. Stables à+2°C/+8°C jusqu'à la date de péremptioninscrite sur l'étiquette.LKIE1: 100 Unités. LKIE5: 500 Unités.Porter les sachets à température ambianteavant d'ouvrir. Ouvrir le sachet avec desciseaux en préservant le dispositif defermeture. Refermer les sachets pour lesprotéger de l'humidité.

Cartouche à réactif IgE totales (LIE2)Avec code-barre. 7,5 ml d'un anticorpsanti-IgE polyclonal de chèvre marqué à laphosphatase alcaline (intestins de veau)dans un tampon, avec un conservateur.Conserver bouché et réfrigéré : stable à+2°C/+8°C jusqu'à la date de péremption.A utiliser de préférence dans les 30 joursqui suivent l'ouverture, si les


recommandations de stockage sontrespectées.LKIE1: 1 cartouche. LKIE5: 5 cartouches.

Ajusteurs IgE totales (LIEL, LIEH)Deux flacons (“haut” et “bas”), 2 ml d'IgEdans une matrice de sérum non humain ettampon avec conservateur. Stables à+2°C/+8°C pendant 30 jours aprèsouverture ou 6 mois (aliquoté) à –20°C.LKIE 1: 1 jeu. LKIE 5: 2 jeux.

Composants du coffret fournisséparémentDiluant IMMULITE IgE totales (LIEZ)Pour la dilution manuelle des échantillonsde patients. Un flacon de 25 ml contenantune matrice sérum non humain / tamponsans IgE avec conservateur. Stable à+2°C/+8°C pendant 30 jours aprèsouverture ou 6 mois (aliquoté) à –20°C.

LSUBX: Substrat chimiluminescentLPWS2: Solution de lavageLKPM : Coffret de décontamination del'aiguille de prélèvementLCHx-y : Supports pour godetséchantillons (avec code-barre)LSCP : Godets échantillons (à usageunique)LSCC : Bouchons pour godetséchantillons (optionnel)IECM: Total IgE Control Module

Egalement requisPipettes pour le transfert des échantillons ;eau distillée ou désionisée ; contrôles.

Protocole de dosageNoter que pour des performancesoptimales, il est important de réalisertoutes les procédures de maintenance deroutine selon les instructions du Manueld'Utilisation IMMULITE ou de l'IMMULITE1000.

Se reporter au manuel d'utilisation del'IMMULITE ou de l'IMMULITE 1000.pour : la préparation, le démarrage dusystème, les ajustements, le dosage et lesprocédures de contrôle de qualité.Vérifier visuellement que chaque Unité-Test contient bien une bille avant de lacharger dans l'automate.

Intervalle d'ajustement recommandé :2 semaines.

Echantillons pour le contrôle de qualité :Utiliser des contrôles ou des pools desérums avec au moins deux niveaux deconcentration (faible ou élevé) d'IgEtotales.

Valeurs attenduesUne étude des valeurs de référence a étéréalisée avec la méthode IMMULITE IgEtotales sur des échantillons sériquesd'individus non atopiques. Les résultats,indiqués ci-dessous par tranche d'âge,sont en accord avec la littérature.14

Age (an)Médiane(UI/ml)

95ème percentile(UI/ml) n

0 – 1

1 – 2

2 – 3

3 – 9

adulte

6,6

10,5

12,9

14,4

20,4

29

49

45

52

87

15

34

29

106

48

Utiliser ces valeurs à titre indicatifuniquement. Chaque laboratoire devraétablir ses propres valeurs de référence.

LimitesLes taux d'IgE Totales sériques, pour lamajorité des individus présentant uneallergie IgE médiée, sont augmentéscomparativement au taux de référencemesuré chez des adultes sains. Toutefois,tous les patients allergiques n'ont pas destaux élevés d'IgE.11

Sachant que les manifestationsallergiques ne font pas toutes intervenirles IgE, un taux normal d'IgE doit toujoursêtre interprété en accord avec lesobservations cliniques.

Un taux élevé d'IgE Totales nécessite undosage plus précis d'IgE spécifiques.Les anticorps hétérophiles du sérumhumain peuvent réagir avec lesimmunoglobulines faisant partie descomposants du coffret et interférer avecles immunodosages in vitro. [Voir BoscatoLM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Les échantillonsprovenant de patients fréquemmentexposés aux animaux ou aux produitssériques d'origine animale peuventprésenter ce type d'interférence pouvantpotentiellement donner un résultat


anormal. Ces réactifs ont été mis au pointafin de minimiser le risque d'interférence,cependant des interactions potentiellesentre des sérums rares et les composantsdu test peuvent se produire. Dans un butdiagnostique, les résultats obtenus avecce dosage doivent toujours être utilisés enassociation avec un examen clinique,l'histoire médicale du patient et d'autresrésultats.

Performances du testConsulter les tableaux et graphiques pourobtenir les données représentatives desperformances du test. Les résultats sontdonnés en UI/ml. (En l'absence deprécision supplémentaire, tous lesrésultats ont été obtenus sur deséchantillons sériques prélevés sur tubessans gel, ni activateur de la coagulation).Facteur de conversion:UI/ml × 2,4 → ng/mlDomaine de mesure : jusqu'à2 000 UI/ml(OMS 2nd IRP 75/502).Sensibilité analytique : 1,0 UI/mlEffet-crochet :aucun jusqu'à 13 000 UI/ml.

Précision intra-essai : les valeurs ont étéétablies pour chacun des échantillons àpartir de 20 doublets dosés au cours d'unemême série. (Voir le tableau « IntraassayPrecision ».)Précision inter-dosage (entre plusieursséries) : inter-essais : les valeurs ont étéétablies pour chacun des échantillonsdosés dans 16 séries différentes. (Voir letableau « Interassay Precision ».)Linéarité : des échantillons ont été dosésà différentes concentrations. Les résultatsmontre que le test IMMULITE IgE totalesmaintient une bonne linéarité dansl'ensemble du domaine de mesure.Néanmoins, du fait de l'hétérogénéité desIgE circulantes et des éventuellesdifférences d'affinité vis à vis de celle-ci, ilpeut y avoir une perte de linéarité à ladilution chez certains patients. (Voir letableau « Linearity » pour des donnéesreprésentatives.)

Récupération: les échantillons testés ontété chargés dans un rapport de 1 à 19avec trois solutions d'IgE Totales (780,1 940 et 3 950 UI/ml). (Voir le tableau

« Recovery » pour des donnéesreprésentatives.)

Spécificité : Le test est hautementspécifique des IgE humaines et ne montreaucune réaction croisée avec les autresclasses d'immunoglobulines humaines

Bilirubine : La présence de bilirubine neprésente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 200 mg/l.

Hémolyse : La présence d'agrégatd'hématies jusqu'à une concentration de30 µl/ml, n'a aucun effet sur les résultatsquant à la précision du dosage.Lipémie : La présence de triglycérides neprésente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas3 000 mg/dl.

Comparaison de méthode: Le test a étécomparé au test Coat-A-Count IgE IRMAde DPC sur 196 échantillons (dont lesconcentrations allaient de 4 et 775 UI/ml.Voir le graphique). Par régression linéaire.(IML) = 0,96 (Coat-A-Count IRMA) – 4,8 UI/mlr = 0,981

Moyennes :133 UI/ml (IMMULITE)144 UI/ml (Coat-A-Count IRMA)

Assistance techniqueEn France distribué par DPC France 90bd National 92257 La Garenne-Colombes.Le système d'assurance qualité de DPC estcertifié ISO 13485 (2003).

Italiano

IgE TotaliUso: Ad uso diagnostico in vitro con gliAnalizzatori IMMULITE ed IMMULITE1000 — per la misurazione quantitativadelle immunoglobuline totali di classe E(IgE) nel siero.Codice: LKIE1 (100 test), LKIE5 (500 test)Codice del Test: TIE Colore: violetto


Riassunto e spiegazione delTestI metodi moderni adottati per i test allergicisono basati sulle scoperte legate allabiologia dell'allergia.4,5,7,9,10 Molte allergiesono mediate dalle immunoglobuline IgEche agiscono come punto di contatto tral'allergene e le cellule specializzate. Lemolecole IgE che hanno una massamolecolare di circa 200 000 dalton, silegano sulla superficie dei mastociti e suigranulociti basofili.2,3 Il conseguentelegame degli allergeni alle IgE legate allecellule provoca il rilascio in queste celluledi istamine o di altre sostanze vosoattive,iniziando così le reazioni che conosciamosotto il nome di allergiche.10

Prima di valutare la terapia da effettuare èbene distinguere tra reazioni IgE-mediatee non-IgE mediate.4, 7 La misurazione deilivelli totali di IgE in circolo, unitamente adaltre informazioni diagnostiche disupporto, può aiutare nell'effettuare ladiagnosi. Le informazioni di supportoincludono test appropriati per le IgEallergene specifiche. La misurazione deilivelli totali di IgE in circolo può essereutile nella diagnosi precoce di allergia neibambini e quale ausilio nel prevederefuture manifestazioni atopiche.4,6,7

I livelli di IgE normalmente presentano unacrescita lenta durante la fanciullezza, eraggiungono livelli da adulti nella secondaparte della vita.1,8 In generale, i livelli diIgE totali crescono con il numero diallergie che un individuo presenta e conl'entità dell'esposizione agli allergeni.5,7

Livelli elevati di IgE possono ancheriscontrarsi in pazienti non sensibilizzati,ma anche in casi di mieloma IgE,aspergillosi polmonare e durante la faseattiva di infezioni da parassiti.4,5,7,9

Principio del MetodoIMMULITE/IMMULITE 1000 IgE Totali èun dosaggio immunometrico inchemiluminescenza in fase solida.Cicli d'incubazione: 1 × 30 minuti.

Raccolta del CampioneSi consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifugaper schiarire i campioni lipemici.I campioni emolizzati posson indicare iltrattamento non idoneo del campione

prima dell'arrivo al laboratorio; per questomotivo, i risultati devono essereinterpretati con prudenza.La centrifugazione dei campioni del sieroprima che la coagulazione sia completapuò produrre fibrina. Per evitare risultatierrati dovuti alla presenza di fibrina,assicurarsi che il processo dicoagulazione sia completo prima dicentrifugare i campioni. Alcuni campioni,in modo particolare quelli di pazientisottoposti a terapia con anticoagulanti,possono richiedere tempi di coagulazionepiù lunghi.Provette per il prelievo di sangue diproduttori diversi possono dare valoridifferenti, a seconda dei materiali e degliadditivi usati, incluso gel o barriere fisiche,attivatori di coaguli e/o anticoagulanti.L'IMMULITE/IMMULITE 1000 IgE Totalinon é stato verificato con tutte le possibilivariazioni di tipi di provette.Volume richiesto: 5 µL di siero. (Il portacampioni deve contenere almeno100 µL più del volume totale richiesto).Conservazione: 3 giornia 2–8°C13,15 o6 mesi a –20°C.15

Avvertenze e PrecauzioniPer uso diagnostico in vitro.Reagenti: Conservare i reagenti a 2–8°C.Eliminare in conformità alle leggi vigenti.

Seguire le precauzioni generali emanipolare tutti i componenti come sefossero potenzialmente infetti. I materialiderivati dal sangue umano sono statitestati con esito negativo per la sifilide, glianticorpi anti-HIV 1 e 2, l'Antigene diSuperficie dell'Epatite B e gli anticorpiAnti-Epatite C.

E' stata aggiunta Sodio Azide aconcentrazioni inferiori a 0,1 g/dL comeconservante. Al momentodell'eliminazione, irrorare con molta acquaper evitare la formazione di azidimetalliche potenzialmente esplosive nelletubature di piombo e di rame.

Substrato Chemiluminescente: Evitarela contaminazione e l'esposizione alla lucesolare diretta. (Vedi metodica.)Acqua: Utilizzare solo acqua distillata odeionizzata.


Materiali FornitiI componenti costituiscono un unico set.Le etichette all'interno della confezionesono necessarie per eseguire i dosaggi.

Test Unit IgE Totali (LIE1)Ogni test unit con codice a barre contieneuna sferetta coattata con anticorpimonoclonali anti-IgE di topo. Stabile a 2–8°C fino alla data di scadenza.LKIE1: 100 unit. LKIE5: 500 unit.

Le buste delle test unit devono essereportate a temperatura ambiente prima dell'apertura. Aprire tagliando lungo il bordosuperiore, lasciando intatta la chiusuraermetica. Risigillare le buste perproteggere le sferette dall'umidità.

Porta Reagente IgE Totali (LIE2)con codice a barre. 7,5 mL di fosfatasialcalina (intestino di vitello) coniugata conun anticorpo policlonale di capra anti-IgEin un tampone, con conservanti.Conservare chiuso nel frigorifero: stabile a2–8°C fino alla data di scadenza. Siconsiglia di utilizzare il prodotto entro 30giorni dall'apertura se conservato nellamaniera indicata.LKIE1: 1 porta reagente.LKIE5: 5 porta reagenti.

Calibratori IgE Totali (LIEL, LIEH)Due flaconi (Basso ed Alto), contenenti2 mL di siero non umano in un tampone,con conservanti. Stabile a 2–8°C per30 giorni dopo l'apertura, o per 6 mesi(aliquotato) a –20°C.LKIE1: 1 set. LKIE5: 2 set.

Componenti del kit fornitiseparatamenteDiluente IgE Totali (LIEZ)Per la diluzione manuale dei campioni deipazienti. Un flacone 25 mL di una matricedi siero non umano priva di IgE in untampon, con conservanti. Stabile a 2–8°Cper 30 giorni dopo l'apertura, o per 6 mesi(aliquotato) a –20°C.LSUBX: Substrato ChemiluminescenteLPWS2: Tampone di lavaggio dell'AgoLKPM: Kit di Pulizia dell'AgoLCHx-y: Tubi porta campioni (con codicea barre)LSCP: Porta campioni (monouso)LSCC: Coperchi per porta campioni(opzionali)

IECM: Controllo IgE TotaliMateriali richiestiPipette per la dispensazione dei campioni;acqua distillata o deionizzata.

Procedura del DosaggioAttenzione: per avere prestazioni ottimali,è importante effettuare le procedure dimanutenzione di routine cosiccomedefinito nel Manuale dell'Operatoredell'IMMULITE o IMMULITE 1000Vedere il manuale dell'operatoreIMMULITE o IMMULITE 1000 per: lapreparazione, la messa a punto, laregolazione, la prova ed i procedimenti peril controllo della qualità.Controllate ogni test unit verificando lapresenza della sferetta prima di caricarlasullo strumento.Intervallo di Calibrazione Consigliato:2 settimane.Controllo di Qualità: Utilizzare controlli opool di sieri con almeno due livelli (alto ebasso) di IgE Totali.

Valori AttesiE' stato condotto uno studio per trovare ilrange di riferimento utilizzando il dosaggioIMMULITE IgE totali nei campioni di sierodi individui non-atopici. I risultati, tabulatidi seguito secondo l'età, sono conformi aquanto riportato in letteratura.14

Età (anni)centrale(IU/mL)

95%ile(IU/mL) n

0–1 6,6 29 15

1–2 10,1 49 34

2–3 12,9 45 29

3–9 14,4 52 106

Adulti 20,4 87 48

Considerare questi limiti soltanto comelinee guida. Ogni laboratorio dovrebbestabilire le proprie gamme di riferimento.

LimitazioniI livelli sierici di IgE totali per la maggiorparte degli individui con malattie IgEmediate possono presentarsi elevatirispetto al range di riferimento per individuiadulti sani. Tuttavia, non tutti i pazientiallergici presentano livelli sierici elevati diIgE totali.11


Poichè non tutte le reazioni atopiche sonoIgE mediate, un risultati di IgE totali nelrange di riferimento deve sempre essereinterpretato alla luce di altre osservazionicliniche.

I test per le IgE allergene specifiche puòchiarire il perchè di un risultato elevato perle IgE totali.Gli anticorpi eterofili presenti nel sieroumano possono reagire con leimmunoglobuline presenti nellecomponenti del dosaggio provocandoun'interferenza con i dosaggi in vitro. [VediBoscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Campioni di pazienti routinariamenteesposti agli animali o a prodotti derivati dasiero di animali possono presentarequesto tipo di interferenza causapotenziale di risultati anomali. Questireagenti sono stati formulati perminimizzare il rischio di interferenze,tuttavia, possono verificarsi interazionipotenziali tra sieri rari e componenti deltest. A scopo diagnostico, i risultati ottenutida questo dosaggio devono sempreessere utilizzati unitamente all'esameclinico, all'anamnesi del paziente e adaltre indagini di laboratorio.

Prestazioni del DosaggioVedi tavole e grafici per datirappresentativi. I risultati sono indicatiin IU/mL. (Laddove non diversamentespecificato, tutti i dati sono stati generatida campioni di siero raccolti in provettesenza gel separatore o additivi chefavoriscano la formazione di coaguli.)Fattore di Conversione:IU/mL × 2,4 → ng/mLRange di calibrazione: Fino a2 000 IU/mL [2nd IRP 75/502].Sensibilità analitica: 1,0 IU/mLEffetto gancio per dosi elevate: Nessuneffetto fino a 13 000 IU/mL

Precisione intra-dosaggio (All'internodella stessa seduta ): Sono statecalcolate statistiche per campioni dairisultati di 20 replicati in un'unica seduta(Vedi la Tabella “Intraassay Precision”).Precisione inter-dosaggio (Da unaseduta all'altra): Sono state calcolatestatistiche per campioni dai risultati di 16

sedute diverse. (Vedi la Tabella“Interassay Precision”).

Linearità: Sono stati dosati campioni invarie forme diluite. I risultati mostrano cheil kit IgE Totali IMMULITE mantengonouna buona linearità lungo tutto il range dicalibrazione; ma a causa dell'eterogeneitàdelle IgE in circolo con affinità diverse, cipuò essere una perdita di parallelismo allediluizioni in alcuni pazienti. (Vedi laTabella "Linearity" per datirappresentantivi.)Recupero: Sono stati dosati campioni1:19 ai quali sono state aggiunte tresoluzioni IgE Totali (780, 1 940 e3 950 IU/mL). (Vedi la Tabella "Recovery"per dati rappresentantivi.)

Specificità: Il dosaggio è estremamentespecifico per le IgE umane e non presentacrossreattività con altre classi diimmunoglobuline umane.

Bilirubina: La presenza di bilirubina inconcentrazioni fino a 200 mg/L non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Emolisi: La presenza di globuli rossiimpaccati in concentrazioni fino a30 µL/mL non ha effetto sui risultati entro ilrange di precisione del dosaggio.

Lipemia: La presenza di trigliceridi inconcentrazioni fino a 3 000 mg/dL non hanessun Effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Confronto di Metodi: Il dosaggio è statocomparato al dosaggio delle IgE TotaliCoat-A-Count IRMA della DPC su 196campioni di pazienti. (Range diconcentrazione: da 4 fino a 775 IU/mL.Vedi grafico.) Con regressione lineare:(IML) = 0,96 (Coat-A-Count IRMA) – 4,8 IU/mLr = 0,981

Valore medio:133 IU/mL (IMMULITE)144 IU/mL (Coat-A-Count IRMA)

Assistenza TecnicaAll'estero: Si prega di contattare il proprioDistributore DPC Nazionale.Il Sistema Qualità della Diagnostic ProductsCorporation è certificato secondo le normeISO 13485:2003.


Português

IgE TotalUtilização: Uso no diagnóstico in vitro nosanalisadores IMMULITE e IMMULITE1000 — para a detecção quantitativa deImunoglobulinas Específicas (IgE) Total,no soro.

Números de catálogo: LKIE1 (100 testes),LKIE5 (500 testes)Código do teste: TIECor: Violeta

Sumário e explicação do testeOs métodos laboratoriais modernos detestes de alergias envolvemconhecimentos biológicos dealergias.4,5,7,9,10 Muitas das alergias sãomediadas por imunoglobulinas IgE, queas quais funcionam como o ponto decontacto entre os alergénios e célulasespecializadas. As moléculas de IgETotal, caracterizadas por uma massamolecular de aproximadamente 200 000,ligam-se à superfície dos mastócidos egranócilos basofilíacos.2,3 Comoconsequência desta ligação há libertaçãode histaminas e outras substânciasvasoactivas, que iniciam o processo dereacção alérgica.10

Na decisão terapêutica, é importantedistinguir entre reacções alérgicasmediadas e não mediadas pela IgE.4, 7 Aquantificação da IgE total circulante emconjunto com outras informaçõespermitem auxiliar diagnóstico. Ainformações auxiliares devem incluirtestes de IgE específica. Em crianças,elevadas concentrações de IgE totalcirculam podem permitir detectarprecocemente alergias na infância bemcomo futuras manifestações atópicas.4,6,7

Durante a infância, os níveis normais deIgE total aumentam ligeiramente,atingindo valores adultos na segundadécada de vida.1,8 De uma forma geral, osníveis de IgE total aumentam não só como número de alergias que se tenha, mastambém com a exposição aos alergéniosrelevantes.5,7

Aumentos significativos podem serencontrados em indivíduos sensibilizados,

em casos de mieloma IgE, aspergilosespulmunares e durante o periodo do cicloactivo de parasitas infestados.4,5,7,9

Princípio do procedimentoIMMULITE/IMMULITE 1000 IgE Totali èun dosaggio immunometrico inchemiluminescenza in fase solida.Ciclos de incubação: 1 × 30 minutos.

ColheitaRecomenda-se o uso de uma ultracentrífuga para clarear amostraslipémicas.Amostras hemolisadas podem indicartratamento incorrecto de uma amostraantes do envio para o laboratório; portantoos resultados devem ser interpretadoscom cuidado.A centrifugação de amostras de soroantes da formação completa do coágulopode resultar na presença de fibrina. Paraprevenir resultados errados devido àpresença de fibrina, certifique-se que aformação do coágulo foi completa antesda centrifugação das amostras. Algumasamostras, em especial as de doentes querecebem terapia anticoagulante podemrequerer um maior tempo de formação docoágulo.

Os tubos para colheita sanguínea dediferentes fabricantes, podem originardiferentes valores, dependendo dosmateriais e aditivos, incluíndo gel oubarreiras fisicas, activadores do coáguloe/ou anti coagulantes. IMMULITE /IMMULITE 1000 IgE Total não foramainda testados com todas as possiveisvariações originadas pelos tipos de tubos.Volume de amostra: 5 µl soro. (a cuvetede amostra tem um volume morto de100 µl)

Estabilidade: 3 dias a 2–8°C,13,15 ou6 meses a –20°C.15

PrecauçõesPara uso de diagnóstico in vitro.Reagentes: Manter a 2–8°C. Elimine deacordo com as normas aplicadas.Manipule com as devidas precauçõestodos os materiais capazes de transmitirdoenças infecciosas. As matérias primasobtidas de soro humano foram testadas,


dando resultados negativos para a sífilis,para os anticorpos do vírus daimunodeficiência humana (HIV) 1 e 2;para o antigénio de superfície da hepatiteB (HBsAg) e para os anticorpos do vírusda hepatite C.Azida de sódio foi adicionada comoconservante; para evitar acumulações deazidas metálicas explosivas emcanalizações de cobre e alumínio, osreagentes devem ser rejeitados no esgotoapenas se estiverem diluídos e foremlavados com grandes volumes de água.

Substrato quimioluminescente: Evitecontaminação e exposição à luz directa(ver bula).Água: Utilize água destilada oudesionizada.

Materiais fornecidosOs componentes formam um conjunto unoe indivisível. As etiquetas no interior dascaixas são necessárias para o ensaio.

Unidades de Teste de IgE Total (LIE1)Cada unidade identificada com código debarras contém uma pérola revestida comanticorpos monoclonais de rato anti-IgE.Estável até à expiração do prazo devalidade à temperatura de 2–8°C.LKIE1: 100 unidades.LKIE5: 500 unidades.

Permita que as bolsas de Unidade deTeste fiquem à temperatura ambienteantes de as abrir. Abra cortando pelaborda superior, mantendo o fecho intacto.Sele novamente as bolsas para protegercontra a humidade.

Embalagem de reagentes de IgE Total(LIE2)Com código de barras. Contém 7,5 mL defosfatase alcalina (de intestino bovino)conjugada com anticorpo policlonal decoelho anti-IgE, tamponizada, comconservante. Armazene tapado erefrigerado: Estável até à data deexpiração a 2–8°C. Recomenda-se autilização até 30 dias após aberto quandoarmazenado de acordo com asindicações.LKIE1: 1 embalagem.LKIE5: 5 embalagens.

Ajustes de IgE Total (LIEL, LIEH)Contém dois frascos (nível alto e baixo)cada um contendo 2 ml de numa matriznão humana de soro/tampão, comconservante. Estável, após a abertura,durante 30 dias a 2–8°C, ou por 6 meses(aliquotado) a –20°C.LKIE1: 1 conjunto. LKIE5: 2 conjuntos.

Componentes do kit fornecidosseparadamenteDiluente de amostra para IgE Total(LIEZ)Para a diluição manual de amostras dedoentes. Um frasco com 25 ml de IgE-livrede soro não-humano em tampão, comconservante. Estável, após a abertura,durante 30 dias a 2–8°C, ou por 6 meses(aliquotado) a –20°C.LSUBX: Substrato quiomioluminescenteLPWS2: Solução de lavagemLKPM: Kit de limpeza do pipetadorLCHx-y: ) Suportes de Cuvetes deAmostra (com código de barras)LSCP: Cuvetes de Amostra (descartáveis)LSCC: Tampa de Cuvetes de Amostra(opcional )IECM: Módulo de controlo de IgE Total

Também necessárioPipetas de transferência de amostra; águadestilada ou desionizada.

Procedimento de doseamentoTêr em atenção que para obter umdesempenho óptimo, é importanteefectuar todos os procedimentos demanutenção de rotina conforme definidono Manual de Operador do IMMULITE ouIMMULITE 1000.Consulte o Manual do Operador deIMMULITE ou IMMULITE 1000 para parainstruções sobre preparação, ajuste,doseamento e procedimentos de controlode qualidade.Confirme a presença da esfera em cadaUnidade de Teste antes de a colocar nosistema.

Intervalo entre ajustes aconselhável:2 semanas.Amostras de controlo de qualidade:utilize controlos ou "pools" com, pelomenos, dois níveis (alto e baixo) de IgETotal.


Valores de ReferênciaRealizou-se um estudo com amostras deindíviduos não atópicos para determinaros valores de referência de IgE Total parao ensaio IMMULITE Total IgE. Osresultados são apresentados por idadesna tabela abaixo.14

Idade(anos)

Mediano(IU/mL)

95%ile(IU/mL) n

0–1 6,6 29 15

1–2 10,1 49 34

2–3 12,9 45 29

3–9 14,4 52 106

Adultos 20,4 87 48

Considere estes limites apenas comodirectrizes. Cada laboratório deveestabelecer os seus próprios valores dereferência.

LimitaçõesÉ de esperar que os valores de IgE Totalde indíviduos com desordens mediadaspor IgE sejam mais elevados que os deindíviduos saudáveis.Contudo, nem todosos pacientes alérgicos têm níveis de IgEtotal no soro elevadas.11

Nem todas as reacções atópicas sãomediadas por IgE, pelo que os resultadosde IgE totais obtidos devem serinterpretados conjuntamente com outrasobservações clínicas.Os testes de IgE específica auxiliam naclarificação de resultados elevados de IgEtotal.Os anticorpos heterófilicos no sorohumano podem reagir com asimunoglobulinas presentes no ensaio,causando interferência com osimunoensaios in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Amostras de doentesexpostas em rotina a produtos ou sorosde animais podem demonstrar este tipode interferência, potencial causador deresultados anómalos. Estes reagentesforam formulados para minimizar o riscode interferência, contudo podem ocorrerpotenciais interacções entre soros (raros)e componentes do teste. Para fins dediagnóstico, os resultados obtidos nesteensaio devem ser sempre analisados em

combinação com o exame clínico, históriade medicação do doente e outrosachados que possam correlacionar.

Características do ensaioVer tabelas e gráficos para dadosrepresentativos da performance dodoseamento. Os resultados sãoapresentados em IU/mL. Salvo referênciaem contrário, todos os dados provêm deamostras de soro colhidas em tubos semanticoagulantes, barreiras de gel ouaditivos promotores da coagulação.Factor de conversão:IU/mL × 2,4 → ng/mLCalibração: Até 2 000 IU/mL[2nd IRP 75/502].Sensibilidade Analítica: 1,0 IU/mL

Efeito Hook de Alta Dose: nenhum até13 000 IU/mLPrecisão Intra-ensaio (no mesmoensaio): Efectuou-se um estudoestatístico com base nos resultadosobtidos num mesmo ensaio, com 20réplicas de cada amostra.(Ver a tabela de“Intraassay Precision”)

Precisão Inter-ensaio (Ensaio aensaio): Efectuou-se um estudoestatístico com base nos resultadosobtidos para as mesmas amostras em 16ensaios diferentes.(Ver a tabela de“Interassay Precision”).Linearidade: As amostras foramdoseadas sob vários níveis de diluição.(Ver a tabela de "Linearity" para dadosrepresentativos.) Os resultados mostramque o IMMULITE IgE Total mantém umaboa linearidade na gama de calibração;mas devido à heterogenidade das IgEcirculantes com diferentes afinidades,pode haver perda de paralelismo emalgumas diluições de amostras.Recuperação: Antes do doseamento,foram adicionadas às amostras, narelação de 1:19, três soluções a IgE total(780, 1 940 e 3 950 IU/mL). (Ver tabela de"Recovery")Especificidade: O doseamento éespecífico para a IgE humana e nãoapresenta reactividade cruzada comoutras classes da imunoglobulinahumana.


Bilirrubina: A presença de bilirrubina emconcentrações até 200 mg/L não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.Hemolise: A Presença de eritrocitos emconcentrações até 30 µL/mL não temefeito no resultado, dentro da precisão doensaio.Lipémia: A presença de trigliceridos iemconcentrações até 3 000 mg/dL não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.Comparação de métodos: Odoseamento foi comparado com o IgETotal Coat-A-Count IRMA da DPC em 196amostras de doentes. (Zona de trabalho:aproximadamente 4 a 775 IU/mL. Vergráfico.) Regressão linear:(IML) = 0,96 (Coat-A-Count IRMA) – 4,8 IU/mLr = 0,981

Médias:133 IU/mL (IMMULITE)144 IU/mL (Coat-A-Count IRMA)

Assistência Técnica:Por favor contacte o seu DistribuidorNacional.O Sistema de Qualidade da Diagnostic ProductsCorporation está registado sob ISO 13485:2003.

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