transcripcion diapositivas
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FREDY ZEGARRA ARAGON
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DNA RNA PROTEINAS mRNA
rRNA tRNA
RE
PL
ICA
CIO
N
TRANSCRIPCION TRADUCCION
DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGIA MOLECULAR
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( PPi )n4 ( NTP )n
Mg2+
ARN
+ + +
ADN
( NMP )n
ADN
( NMP )n ( NMP ) n + 1
RNA Polimerasa5’ 3’
TRANSCRIPCION : REACCION GENERAL CATALIZADA POR LA RNA POLIMERASA
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RNA Polimerasa
5’
3’
RNA
DNA
5’ 3’
3’
5’ 3’
5’
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RBP 1
RBP 2
CTD
9 10
6
8
5
11
312Tipo α
Tipo ω
ADN
( 12 subunidades )
MODELO DE ESTRUCTURAS DE RNA POLIMERASAS BASADOS EN ANALISIS CRISTALOGRAFICOS
RNA POLIMERASA DE BACTERIAS
( procariote )
RNA POLIMERASA II DE LEVADURAS
( eucariote )
β
β ’
α I
α II
ω
ADNσCaja -10: TATAAT
Caja -35: TTGACA
Caja TATA
Caja CAAT
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N U C L E A R E S
I II III
Subunidades de alto Peso
Molecular
195 – 197 Kd 117 – 126
240 – 214 Kd 140
155 Kd 138
Subunidades de bajo Peso Molecular
Varias, entre 16 a 61 Kd
Varias, entre 16 a 41 Kd
Varias, entre 19 a 89 Kd 65 Kd
Formas Variables
2 a 3 tipos 3 a 4 tipos 2 a 4 tipos 1 tipo
RNA sintetizado
Nucleolo rRNA (28S, 18S y 5.8S)
HnRNA, mRNA ARN
viral SnARN
tRNA rRNA 5S
SnRNA
mt RNA
Inhibición por alfa amanitina
No Si (muy sensible)
Si (menos sensible)
No
MITOCONDRIAL
RNA POLIMERASAS DE EUCARIOTES
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SECUENCIAS PROMOTORAS Y REGULADORAS DE UN GEN DE LA CLASE II
P R O M O T O R
TATAGCCAATSDE
INTENSIFICADOR- 50 - 30 - 20 + 1 20 - 200- 150
3’ 5’ 3’ 5’
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Sitio de Inicio de la Transcripción
Pol II
TF II HTF II F
TF II E
TF II BTF II A
TBP
TF II D
TAFs
CRE Factores Generales de Transcripción
AGGTCA TGACCT.
HAT
CREB
Enhancer
Transcripción
GCCATCGGGC
Caja TATA: -25
Caja CAAT
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5’ 3’
3’ 5’
5’ 3’
ADN
Top : Codificante
botton
ARN (Transcripto)
TRANSCRIPCION EN PROCARIOTES
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A
RNA POLIMERASA
COMPLEJO CERRADO
Factor σ
Iniciación de la transcripción por unión de la RNA Polimerasa en el sitio de inicio.
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5’
3’
RNA
4 (NTP)n
(PPi)nC Elongación de la cadena de
RNA por adición de NTPs
Apertura de la doble hélice del ADN e Iniciación de la cadena de ARN con la unión de los primeros dos
Ribonucleósidos Trifosfatos
5’
3’
ARN POLIMERASA
RNA NACIENTE
B
Factor σ ( bacterias )
COMPLEJO ABIERTO
40 nucleótidos / Segundo
Nus A
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Rho
5’
3’
RNA
5’
3’RNA
RNA POLIMERASA
DNA
Terminación y liberación de la Polimerasa y el RNA completado dependiente de Rho
D
Rho
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C....G
C.…G
U.…A
C….G
G….C
G….C
A….U
A….U
A….U
U
U U
U
U – U – U – U – U – OH A – U – U
Secuencias desapareadas
de Us
Tallo rico en G + C
ESTRUCTURA DE TALLO – BUCLE DEL EXTREMO 3’ QUE INDICA TERMINACION DE UN RNA TRANSCRITO INDEPENDIENTE DE RHO
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5’
3’
RNA
5’
3’
RNA
PAUSA
ISOMERIZACION
Modelo de terminación de la transcripción independiente de rho ( ρ )
E
TERMINACION
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Intrones
HnRNA5’ 3’
mRNA
A A A A A A A A …….. A
5’ 3’
Cap
Cola de poli A
Añadido de Poli A
Añadido del Cap
IntronesExones
PROCESAMIENTO DE LOS mRNAs EUCARIOTICOS
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AGUAGG AGC C A 5’
3’
sn RNP U1
sn RNP U2
AGUAGG AG
sn RNP U1 sn RNP U2
snRNP U4/U6 + snRNP U5
U2 U1
U4 / U6
U5
A
snRNPs
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5’
RNASecuencia señal de
Poli-A en el RNA
Secuencia Señal de Poli-A en el DNA
P P P PP
CstFCPSF
Corte del RNA
AAAAAAA
AAAAAAAAAAAAAA
Poli-A Polimerasa (PAP)
CstF
CPSF
Proteína Unidora de Poli-A
Proteína Unidora de Poli-A Adicional
3’5’
5’
3’
3’
5’
5’
PAP
Figura Nº 4.15. Poliadenilación y Terminación de la síntesis de un mRNA eucariótico.
Dominio CTD
AAUAAA
Factor Específico de Corte y
Poliadenilación
Factor Estimulante de Corte
CTD
Dominio del extremo C-Terminal
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AAAAAAA
AAAAAAAAAAA
AA
Receptor de Transporte
nuclear
Proteína de unión al poli-A
Casquete 5’
Complejo del Poro Nuclear
NUCLEO CITOPLASMA
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AAAAAAAAAA …. A
AAAAAAAAAA …. A
TRANSCRIPCION
PROCESAMIENTO
ADN
Hn RNA
m RNA
m RNA
TRADUCCION (Síntesis Proteica)
NUCLEO CITOPLASMA
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rRNA 28 S 5.8 S rRNA 18 S
DNA
Pre-rRNA 45 S
TRANSCRIPCION POR LA RNA POLIMERASA I
Estructura de una unidad de transcripción de rRNA
Nucleolo: Cromosoma ---- GEN Organizador Nucleolar
“TANDEM”
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ESQUEMA DE LA TRANSCRIPCION Y PROCESAMIENTO DE LOS rRNAs EUCARIOTICOS
DNA
3’ 5’
28 S 18 S5.8 S Pre- rRNA 45 S
Pre – rRNA 32 S Pre – rRNA 20 S
rRNA 18 S
rRNA 28 S
rRNA 5.8 S
Transcripción y metilación
3’5’
28 S 18 S5.8 S
Pre- rRNA 41 S
RNA Polimerasa I
G E N D E D N A R I B O S O M A L
CORTE CORTE
CORTE
CORTE
CORTE
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RNA Polimerasa III
TF III A
TF III A
+1
+1
+47
+47
+96
+96
+121
+121
Contactos Proteína-Proteína entre TF III A y la RNA Polimerasa III
TRANSCRIPCION POR LA RNA POLIMERASA III
Factores de Transcripción para genes eucarióticos de la Clase III
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DNA INTRON
Transcripción
OH 3’ 5’ P – P – P – Endonucleasa Exonucleasa
RNAasa P
TRANSCRIPTO PRIMARIO
Intrón
Añadido de CCA – OH y modificaciones en el
extremo 3’
ESQUEMA PARA EL PROCESAMIENTO DE UN tRNA
EUCARIOTICO
RNA Polimerasa III
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Añadido de CCA – OH y modificaciones en el
extremo 3’
ESQUEMA PARA EL PROCESAMIENTO DE UN tRNA
EUCARIOTICO
Intrón
ACC
HO 3’
5’ P
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ACC
HO
3’
5’ P
tRNA MADURO
ELIMINACION DEL INTRON
ESQUEMA PARA EL PROCESAMIENTO DE UN tRNA
EUCARIOTICO
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INHIBIDORES DE LA TRANSCRIPCION
Actinomicina D
Acridina
Alfa amanitina
Rifampicina
EUCARIOTES RNAs (núcleo) Salida al citosol
(Procesamiento)
PROCARIOTES RNAs (procesamiento: Excepto mRNA)
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