transcription factor decoy for activator protein-1 (ap-1) inhibits high glucose- and angiotensin...

8

Click here to load reader

Upload: i-k

Post on 22-Aug-2016

215 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Transcription factor decoy for activator protein-1 (AP-1) inhibits high glucose- and angiotensin II-induced type 1 plasminogen activator inhibitor (PAI-1) gene expression in cultured

��� ���� �� ���� ������ ������� �� �������� �� ��������� ���� �������� ��������� ��������� ���� ������� ���� ����������� ������ ��� �������� ����

������ �������� � ����������� � ���� ������������� �� �� �������� ������ ��������� � �������� �� ��� ��� ���������� !"#$��% �&�'�� "#$�� ����� ���� ������ ��� �������� � ��� ������������������ �� ��� ��� !��"#% ��� �� �������� � ����� ��� �������� �������� � ����������� �'�� ����� ������� �� ��� ��� �������� �� ������ �� ������� ���������� ��� ���� ����� ����� �� �������� ������ ���� �(� )�� *� � ���� ��� �� ������� $$!#� $$%� ���� ��� ��� �� � ���� � ��+� ��� �� ������� ������ � ����������������� ��� ��������������������� ������������� ��������� ����� ����,������� �� ����� ������ ���� ����� ����!-./0% ��1����� *�� ��� ��� ������� ��������� �������� ����� �,������� �� ������� � �� � ����� � #� $$ ��� �� ��� ���� ����� ���������� 2��

3������ �� !411�% &&5 '���'41

����������� ���� � �� �� ������ �� ���� ������ ����������� ����� � ��� ���� ���� �������� � �� � �������� ������� ������� ������� � � ��� ���� �� ����� � ������������� ��� ����� � ����� ������� ���� ����4� ��������4� ��������� ���������� ���� ���&� �������&� �������&

� $�������� �� /����� .����� 6������ 7�� ������ .�� � /������� ��� �� 6���4 3� ���� � 8��� ������� .����� 8������� .�� � /������� ����� 7�� ������� .����� 9����� 3��������� � $������� /������� 7�� ������ � 7���� .�� � /������� .���� 6���& 3��������� � $������� /������� 6������ 7�� ������ .�� � /������� ��� �� 6���

� .���� ���-���� 411�

������

������ ������ /������� ������ ������� ������ ������� ��� �� ������� $$ !#� $$%� ��������� �������� �� ��� ��� ���������� ������� ��� �,�������� �� ����� ������ ���� ����� ����� ��������� ������ ��� ��������� ���� ����� ������� ���#� $$ ��������� ����� ��� �,������� ���� � ���� ��� �������� !#"��% ������ ��������� ��� :� � ������� ��� ��� � #"�� �� ����� ��� �,������� �� ����� ������ ���� ��������� ����� �� � �� ���� ��� #� $$ �������������� � �������������� ���������� ���� ��� ��,��������� !��� �3;%��������� #�� ��� ������ � ��� ��� ��� ������������ �� � ���� ��� #� $$ ��������� ��� ��� ������� �3;� ��� �� � ��������� ����3;� ������� �� #"�� ��� ���� ��� ������� �� ����� �,�������� �� �� � ���� ��� #� $$ ��� �� ��������� ���

�������� �� ��� ���� ��� �3; !� < 1�1= �� < 1�1�%� ��� ������� �� ����� �,������� �� �� � ���� ��� #� $$ ���� � #"�� ����� ��� ��� �������� �� ������ �������� � ������ #�� ��� ������� � ��� ���� �� ������� � ������ �� � ���� ������������ ���� �� � ���� ��� #� $$ ��� ���������� �������� �� �������� 0 !� "60 ��������%��� ��������� �� �������� !� ������ ������� ��������������%�� ������ ������������� �� ���� ����� ���� ���� �� � ���� ��� #� $$ ��������� ����� �,����������� � #"�� ������ ������ .� ��� ���������� �����#"�� ��� ���� �� ��� �� � ���� ��� #� $$��� ��� ������� � "60 ��� ����� ����� ���� �������� �� �������� ��� �� #"�� �� ����� �,���������3������ �� !411�% &&5 '���'41�

� ����� 3�� �3;� ����� ��������� ��� ����������� !#"��%� ������� �� ��� ��� �����������

2��� ��5 4' ; ����� 4111 ��� �� �� ���� ���5 44 9������411�

� ����� ����� ��� �� $�6�>��� /�3�� "�3�� 3��������� �$������� /������� 6������ 7�� ������ .�� � /��������)& 3� ��� �3� � 9� �8�� ��� � '11�'�4� 6����������5 ��������?������������� ���� ��� #"��� #�� ��� ������ �@ "#$��� ���� � �������� �� ��� ��� ��������@ *-./0� ����� ������ ��������� ���@ #� $$� �� ������� $$@ 3�� �3;� �������������� �� ��,���������@ /��� ��������� ����3;@ *8� �� � ����@ ;8� ����� ����@ *-9� ���� � ��������� ���� � 9�����

Page 2: Transcription factor decoy for activator protein-1 (AP-1) inhibits high glucose- and angiotensin II-induced type 1 plasminogen activator inhibitor (PAI-1) gene expression in cultured

��� ������� �� � �������� ���� �� � ���� ��� #� $$ ��� ��� ��� ��� ��� �������� !#"��%� � ��� ������������ ����� �� � �������������� ��� �������������������� ������ ��4��&�� ��� #"�� ����,�������� � ������ � ������� � 9�� ������� �� ���������� � 9�� ��� A� �������� �� ������ ����,������� � ����� ���� ���� ������� ���������������� ��� �������������� ��=� �B�� ��� ������� � ��� ����� ��� ��� ������ ��� ������ �#"������� ������ ����� ��'� �(��

:� �������� ��������C�� ���� �� � ���� ���#� $$ ��������� ����� ��� �,������� ��� �������� ���� � ��� #"�� ������ ����� �� ��� ����� �������� � ���� ���� ���������� �� ���� � ��� ������� �� ��,��������� !�3;% ���������� �������� ���������� � ���������� ���������������3; �� � ��� ���� ������ �� ��� ��� �� � �������������� ��� ��� ��� ���� ���������� � ������� ��D����� ���� � �����D���� ��������� � ��� �,������� ��)�4��� :� �,������ ������� ����� � ����������� � #� $$������� ������� ������� ��� �,������� �� ����� -./0 �� ���������� ���������� � � ���������� ���� ��� �3;�

� ����� ��� � ���

���� �������� *���� -./0 ���� ��� ����� ��� ����� ������ � ����� ������ ������� ��������� ���� ���� ������������ ����� ������ ������ ��� ��� �� 3� ��� /���������� !��� �� 6���%� ��� -./0 ���� ������� �� 3�����E� ������� F� ��E� ������ !3/F/� 8��� 8���� $������;�G�� 7.#% ������� 41H ����� � ��� ����� !8��%� ��������� � -./0 ��� ��������C�� �� ����� � ������� �������� ������������ ������ ������ ��������� !.� ����#������ .�� >���� /�� 7.#%�

#���� ������ (1 � )1H ������� �� �11��� ������������ -./0 ���� ����� ���� �� �� 4& � �� ���������� ������� ��� ���� ���+���� � ������ � ���� ����� ���������� !3/F/ ������� 4H ����� ��� =�= ���I� �� �����% � � �� � ���� ������ !3/F/ ������� 4H ������ ��� 44 ���I� �� ����%� � �,����� ��� ����� � #� $$� �11 ���I� #� $$ ��� ����� � ��� ������ ��� ��������� �� ����� ���� ������� 0���� ���� ���� ������� �� ������� ������ �,������ � 2;# �,������ �� �������� ������

�� ���� � ! �����" �#$� �� �� �� �� ���� ����������� � ��%������ # 3;# ���� �� ����� ����� ��� �������� �� 2��"02 � 2;# ��� -./0 ���� ��� �� �������� �������� #�#8##��00#08#8�#08#0#�00�88##0��80� ��� #�#88#�00000�0�8#88�00#0��0#8��0�00 � ��� ����� ����� ��� ��D����� 2� ���� ������������ ��� ��� � 1�4 � 2;# �� ��� ������� � � ���I���������� ������� 41 ���I� ;�"� �1 ���I� �������������=1 ���I� �2$.� �* (��� '= ���I� 60�� � ���I� / 0�4� ����1 7 � 2���� �� � � �� �'J0� ��� "02 ������ ��,���� �������� ��1 ���I� � ��� �������� �1H 2� ��,� �1 ���I��2$.� �* (��� =1 ���I� 60�� � ���I� / 0�4� 1�11�H �������� 4�1 ���I� ;�" ��� 1�1= 7I�� #������D !"������F����0����� ;������ 0���� 7.#%� ��� "02 ������� ����)&J0 K �1 �� =) J0 K 4 ���� '4J0 K �1 �� �� &1 ����� ��� � ���� ����������� "02 ����� ��� ���� ��� �L�������� 6.

!.����� ��� $��� >� 9���� 0������ 7.#% ���� ��� F2$ �L��*$ ��������� ��D����� ���� ���� ������� �� ��� =E ����� ��� ������� ��1��

$ ����� �� � ��������� ��� ������������ ����� ���� ��������� ��� �������� ���� �������� �� ����� ������ ��������� ���� ����4"��0�" ���� � ����� ������ �������� ���!#�������� #���� �� *�� ���� $���� 7.#%� #���� ��� �������� ������� ��� ������������ ����� ���� �������� � � ;#"�=���� !"�������� 7������� .�����%� ���� 2;# �� �������� �������� ��� �,������ �� 2;���� 2;# �,������ ���!M�� ��� *������ 8������%� ��� ��� ���� � ���� 2;#��� ������� � � �H ������������� ���� �� ��� ������������ � ���� ��������� ��� ���� �������� ��� �������C�� ��F,����� *�� ������ �� B=J0 �� 4 � ���� � ������������3;# ���� ��� ������ ����� � ��� �����������E� ������������ ��� �������� ��� �,���� � N���� ���� �� 4& �&( �� ��� ��� �2;# �,������� ��� D��������� ���� ������������ ��������� >���� ���������� ���� ������C�� ���� ���( � �2;# 3;# �����

����������� ! �������� ����� �� ����� � ������� ��� �������� "#$�� ������ ��� ������� ����� �������� ������ ���������� ������� �� �� B11 � �� �1 ��� ��� ����� �� �41 J0�$��������� �� "#$�� ��� ������ �� ���� �� ��C��� ����������� ��� !L���� 7���� .�����%�

��������� � ! ��� � &#$� ��� ��D����� � ��� ������������� �������������� �3; � ����� ��� #"�� ������ ������� ��� ��������� �3; ���� �� ���� ����� ���� �������� ����� ����� ������� �41�5 ���� ��� �3; !������� ���D����� ��� ����������%� =E�#80��8�8#8�0#8#�#80���E� �E��08##0#0�0#8�0��08#�=E@ ������������ �3;� =E�#80��8��%��0#8##80���E� �E��08##0%%�'#8�0��08#�=E� ��� �3;� ���� ��������� �� 4 �� ����� ��� ����������� �������� ��� (1J0 �4=J0�

(����� � ����� � ������ ��!� ����� �(�)��� ;����� �,��������� �������� ��� -./0 �� �������� ��� ������ ���� ����� ���������� �44�� L������� (1 � )1H ������� -./0 ���� �� �11��� ������ �� ����� � �� � ���� ���������� ���� ������ ���� ���� �� "L. ��� ���������� ���� ���� �� ���C�� �� &11 �� � ����� ������ #!�1 ���I� *F"F.� �1 ���I� 60�� 1�� ���I� F3�#�� ���I� 3��� 1�= ���I� "/.A� �1 � I�� �������� ����1 � I�� ���������% ��� �������� �� �� �� �= ���� #����4= �� � ;"�&1 ���������� ��� �� ����� ��� ���� � ������� L !41 ���I� *F"F.� 1�& ��I� ;�0�� � ���I� F3�#�� ���I� 3�� ��� � ���I� "/.A%� ��� ������� �� ���4�111 � �� �1 ���� #���� ������� ����� ��� �������������� ������ �� ������ �,����� ��� ��� ����� � ������������ ��� �������� ���� � ������ ����� ��� !L��2���2������ 0������ 7.#%� ��� 3;# ����� ��� �� ������ ��� ���� ��� ��������� ��� �3;� ���� ���������� ������� ���� ����4"�#�" ��� �& ����������� �������#���� ��� �������� � �4"��������� �3; ���� �������� � �;#"�= ����� ��� �������3;# ������ ������ ������ �� �� ����������� �� 41 ��� �� � ���� � 41 ������ ������ ��,���� ������� B � � ������ �,������11 � I�� ��� �$5�0� �1 ���I� �2$.I*0� !�* '�=%�=1 ���I� ;�0�� 1�= ���I� F3�#� 1�= ���I� 3���� ���I� / 0�4� &H ����� ��� B1111 �� �4"��������������� 3;#� #���� ��������� ��� ������� ���� ������� &H ���� � ������������ ��� �� 1�= K �2$.�������F3�# ������ ��� ���� ��� �� �=1 - �� 4 �� ��� ��� ��������� ��� ������C�� �� ������� ������ A� ��������

9� 3�#�� �� ���5 $�������� � "#$�� �� #"�� ���'�&

Page 3: Transcription factor decoy for activator protein-1 (AP-1) inhibits high glucose- and angiotensin II-induced type 1 plasminogen activator inhibitor (PAI-1) gene expression in cultured

�������� ��� �,���������� ������� ���� ��������� �,������� ��� ���������� ������� �3; ��� ����� � ��� ������� ��,���� �� =1���� � �11���� ���� �,��� �������� ������ �,���� ��� ������

��������� � ! ��������������� ���� ! *���� �+,*����� �� ���� ��� *-9�#-F ������� ���� �������� �� ����������� ����� �4��� L������� ��������� ����������������������������� !3�"F%� ���������������� !�"0%� ����� �������� !�.��% ��� ����������������� !�".% ���� ��,�� �� � ����� ���� � =15����5����5����5�1� ��� ����� ��,���� ��� ��������� � ��� ����� � � ����� �� ��� �� � ������� ��� ���������� ��� �������� �� 411 �� ������� ���� ������ !L..@��' ���I� ;�0�� =�& ���I� 60�� �1 ���I� �2$.�*0�� �*'�B% ������� ��� �3;� >������ ���� �������� �� ������� ��� ���������� "������� *-9 !O ������% ��� ����� ���� ��7- ���������� �� � ��� +��� ����� ���� ��� ������ ���������� ��� ��,�� ���� *-9 �� � ���� ���� � 4 �� L..� �����,���� ��� �������� �� &J0 �� = ��� ��� ���� �� �1 ������� ����� ������ �� �'J0� A��� *-9 ��� ��� �� ��� ���*-9�������� �� ����� ������� ������� ������� �������� �� ����� � ��� ����� ������� ��� ������ �� ����

%����!���� � ! -�%���������� &#$� ��� ,)��� 0���� ���� ��� �� 4 ������ ������ � (1H �������� A������� 411 ��� *-9������� ����, ���� A$�0��������� ���� ����3; ��� �������� �� = ��� �� &J0 ��� �� �1 ��� �� �'J0�.������ >�����#/$;F !>��� ����� ���� 2� �����/��� 7.#%5 A$�0��������� ���� ��� �3; !�11 ���I�%��� ����� � ��� ����� �������� ����� ��� ��,���� � >������#/$;F� ����� � ��� �����������E� ��������� ������� ���� �������� �� �= ��� �� �' J0� ����� ����� ��� �� � ����� ������ ���� =H ��� ������ ��� ���� ���� ���������� � 0�4 �������� 0���� ���� ��,�� ���� �H ���������������� �� �� 4 � � ���� ����� ����������� #���� ������ � ������� ���� �,������ �� ��������� �������

.���!����� ������ ��� ����� ��������� ������ ��� �������� ���� �� 3�� 2����� !;�� G�� 7�� ������� ;�G�� 7.#%�4&�� "������� ��� ��� �3; ���� ����������� ��� ������ -./0 �� ��� *-9������� ������ �� ��� ��� ���������������� 4 K �1= ���� ���� �������� ��� ��� ��,����������� ����� 411 �� � ��� *-9������� ����, ��� ������������ ��� ��� ����� ������ ��� �� ��� ������� ����.-��� �� !"��� �� /������ :���� 7.#% ��� ��������������� ��� ���� ������� � ����� ��� ���������� ���������#� &( � ����� ����������� ���� ���� ��� ����� � �,����� ������������ �,�������� ��� ���� ���� ������ ���� ���� "L.��� ���� ��������� �� 4=1 �� � � N 0��� 0������ >���� 2��� ��� !"��� �� 7.#%� ��� ������� ���� �,������ �� �� ����������� ��� ��������� ��� ����

)���������� ��������� 2������ ��� �,������� �� ����� P .F/�#������� � ������ ���� � �����D���� 3����E� ���� ������� � ��������� ��� �� ������� � ���������� �� ����������������� # � ���� � ���� ���� 1�1= ��� �������� ������������� �� �������� #�� �,��������� ���� ������ �� �� ���������� ������

! ����

(!!��� ! �� ���� �� ��� ��� �� � ���� ���� ��� ���� �����" �/������ �� :� ��������� �,������ �������� ��������� ���� #� $$ ����� � � ������������ �� �������� ������� �� ��� 3;# ������ ��� ��� � ���

����������� ���� #"�� ����� ����� ��� �� � ����� �������� #� �,������ ������� �� �� � ����� �� ��������� �������� #"�� ������ ��� ��� !������,������� B11H% �� ������ � ������� ������� ���� !A� ��� � < 1�1�%� .��������� #� $$��� �������� #"�� 3;# ������ ��� ��� �� � ������������� ������� ��� �� ��� ���� ������� �� ������ ���� ��������� ��� �� ��� ���� ��������� �� � ���� !A� ��#� � < 1�1�%� :� ��� �,��������� ����� � #� $$ � ����� ��� �,������� ���������� � �� � ���� �������� ��� �� � ���������� �� ��������� �������� ����� �2;# �,�������� �� ������ � ��� ����� ���� ������!A� �4� � < 1�1�%� �� ���� ��� ������� � #� $$ ����� ������� ���� �� � ���� ����� �� ������ ������ � #� $$ ��� �� � ���� � ����� �2;#�,������� �� � ������������� ������ !A� �4# ���L� � < 1�1�%� 0�������� ���� ��� �2;# �,���������� � ���� �� ���� �� #� $$ �������� ��� ���������� � "#$�� ������ �� ��� �������� ����������� !A� �40� � < 1�1�%�

9� 3�#�� �� ���5 $�������� � "#$�� �� #"�� ��� '�=

������� �� #"�� 3;# ������ ��� ��� �� ����� -./0 �� ��������� �� � �� ������� ����� ������ ������� �,����� � � ������� ������ ���� �,�������� ��� �������� ����� ����� !;8�-./0 ������� ���� ����� ����@ *8� -./0 ����������� �� � ����� 0��������� �� ���� ����%� � F���� ��� � ���� � #� $$ � #"�� ��� ���� M����������� �F/.# ������� �,������� �� ��� ����� P .F/ � ����� ������������ �,���������� Q� < 1�1� ������ � ;8� ���R� 0 1�1� ������ � *8

Page 4: Transcription factor decoy for activator protein-1 (AP-1) inhibits high glucose- and angiotensin II-induced type 1 plasminogen activator inhibitor (PAI-1) gene expression in cultured

(!!��� ! �� ����" ��� � &#$ � �����" �/������ ������ �� ���� �� � ����� �� � ��� �� ��������� ��8� �� ��� ������ ���� #"�� ��� ����� �,����������� � �� �� ���C�� ����� ��� #� $$ � �� � ����� �������� �� ������� ���� #� $$ �� �� ���������� ����� ��� �,������� ���� � ��� #"�� �����,� � �� � ���� ���������� �� ���������� ������� ��� �3; !�11 ���I� � �11 ���I�% ���-./0 ���������� ���� #� $$ ���� ��� *-9�������� ������ :� ����� ������ ��� �������� ����������� ��� ���� ��� �3; ��� �����-./0 ���� ���� ����� ����� >�����#/$;F����������� � � ��������� !A$�0%��������� ������� �3; ���� ��� *-9������� ����� ��������� �� ���� ��������� !A� ��%� ������� ������� ������� � �� �� '4 � ����� ����������� $� ������� ������ �= ��� �,����� � A$�0��������� ���� �3; ��

������ !�11 ���I�% ���� >�����#/$;F� ������� ��������� ��� �� ���� ��� ����� �� ���� ��� ��� *-9������� ����� � �������� ������� ��� �3; ��� ����� -./0 �� ��� ���������� � ��� �,���������� ���������� � ��� ���� ���� �3; �� ��� *-9������� ����� �� ������������������� ��� #"�� ��� ��� ������ �� �� � ������� � ������������� ������ !A� �&%� $� �������� ���������� �� #"�� ��� ��� ������ �� #� $$ ��� ������������ �� ��� ���� ��� �3; �� ������ � ���������� ��� �3; !� < 1�1�%�

:� ������� �� ���� ���� ��� ����� � ��� ���� ���� �3; ��������� � ����� ��� �,�������� #����� � ��� ������� �� #"�� ��� ���� ����������� ������� ��� �3; ��������� ��� ����� ��� �,�������� ������ �� ������ ��� �� � ���� ������!� < 1�1=% � �� #� $$ !� < 1�1�%� ������� ��� ���������� ��� �3; ��� �� ����� ����� �,�������!A� �=#� L%� ��� "#$�� ������ ���������� ������� �������� �� ��� ���������� � ��� ���� ����3; !A� �=0� � < 1�1= � � < 1�1�%� � ������� ������ ��� �� ������ � ����� �,������� ���� � ���#"�� ����,� �� ����������� � ����� ��������������� ��� �� ���� ��� �3; ��� �����-./0 ��� ������� ���� ���� ������ �� � ���� �#� $$� ��������� ���� �� � ���� �������� ����������� ��� ��� �� ������ � ��� ����� ���������� !A� �B� � < 1�1�%� #� �,������ ��� �������

9� 3�#�� �� ���5 $�������� � "#$�� �� #"�� ���'�B

������ !� F���� � �� � ���� � #� $$ � ��� ���� � �������� ��� �� ����� -./0� ������� ������� ������ ��������� �� ����� !;8� -./0 ������� ���� ����� ����@*8� -./0 ������� ���� �� � ����@ 0��������� ������ ����%� � F���� � �� � ���� � #� $$ � ������2;# �� ����� -./0� 2������ ��� ��� ����� P .F/ ��� � ����������� �,���������� Q� 0 1�1� ������ � ;8���� R� 0 1�1� ������ � *8� ! F���� � �� � ���� �#� $$ � "#$�� ��������� �� ��� �������� ������ ������ -./0 �� �������� �� F>$.#� -����� ��� ����� P.F/ � �� � ����������� �,���������� Q� 0 1�1� ������ �;8� ��� R� 0 1�1� ������ � *8

����"� A�������� ������ � ����� -./0 ����� ����������� � A$�0��������� ���� ��� �3; ���� ������ ���*-9������� ����� � >�����#/$;F� 2����������� ���� ����� !S �11% � ��� ����������� � A$�0����������3; ��� ��� ��������� �,���������� �� 4� � ��� T �� 4 �� ���� ����� ����������

Page 5: Transcription factor decoy for activator protein-1 (AP-1) inhibits high glucose- and angiotensin II-induced type 1 plasminogen activator inhibitor (PAI-1) gene expression in cultured

�� ��������� ��� ��� ���� ���� �� � ���� ��� ��������� �� ������� ��� �3; �� � ������������������� !� < 1�1�%� .��������� ��� ���� ��� �3;���� �� ��� ��������� ��� �3;� �������� ���������� �� ��������� ��� ��� ���������� �� ����������� ���� �� � ���� ��� #� $$ !� < 1�1�%� ��������� ������ ��� ���� �� � ���� ��� #� $$ ���������� ����� �,������� ���� � #"���

(!!��� ! � �1� ��� ��� ���� 2����� ������ � � �������� ���� � ������ ��� �� ��� ���������� ��������������� � #"�� ��� ���� �� �� � ���� � #� $$� ���� ���� ������� ���� � ������ "60 ����������������� 0 !�11 ���I�%� � � ������� ������ ���������� �������� !� ���I�%� 0�������� 0 ������������� ��� ��� ���� � #"�� ��� ��� ������ �� ������� �� � ���� � ����������� � �� � ����

��� #� $$ !A� �'� � < 1�1�%� �� ��� ���� ����� ��������� ��� ��������� �������� ��� ��� ���� � #"������� ��� ���� ��������

"��������

���� ����� ����������� ���� �� � ���� ��� #� $$��������� ����� ��� �,������� �� ����� -./0��������� ���� ��� ��� �� ��� ������� ��1� ��� ��������� ���� �&� '� 4=�4(�� #� "#$�� �� �������� ��� � ��+� �������� � ������� �� ��� ����� ���������� � ������ "#$�� ���������� �� ����������� ����������� ��� ���� ��������� � ��������� ��� �� ������� � ������������ �&� '� 4=�� ������ � ����� ��� �� ���� � ������� � ����� �� ��� ��� ����� �������� $� �� ����� ��� ����� � �� � ���� ��� #� $$ � ����� ��� �,������� �� ������� �� ���� ������ ��� �,����� ��� �,������ �

9� 3�#�� �� ���5 $�������� � "#$�� �� #"�� ��� '�'

����#�� �� F���� � ��� ���� ��� �3; � #"�� 3;#������ ��� ��� �� ����� -./0� � ������ �,����� � � ������� ����� ��� -./0 ���������� ���� ��� ���� ����3;� ���� �,�������� ��� �������� ����� ����� !;8� -./0������� ���� ����� ����@ *8� -./0 ������� ���� �� � ����@ 3��� -./0 ���������� ���� �11 ���I� � �11���I� !S �% ���� ��� �3;@ /$.� -./0 ���������� ����� ��������� ��� �3;@ �� #"��� ������ ����%��F����� ����� ��� �3; � #"�� ��� ��� ������ �� �� � ����� � #� $$� M����������� � F/.# ������� �,��������� ��� ����� P .F/ � ����� ����������� �,����������Q� 0 1�1� ������ � ;8� QQ � 0 1�1=� QQQ � 0 1�1� � *8 �*8 U #� $$

����$� !� F���� � ��� ���� ��� �3; � ��� ���� ������ ��� �� ����� -./0 !;8� -./0 ������� ���� ������ ����@ *8� -./0 ������� ���� �� � ����@ 3���-./0 ���������� ���� �11 ���I� � �11 ���I� !S �% ������� �3;@ /$.� -./0 ���������� ���� � ��������� ���� �3;%� � ������ ������� ������ �������� �� ������� F���� � ��� ���� ��� �3; � ����� �2;# �������� �� � ���� � #� $$ �� ����� -./0� 2������ ��� �������� P .F/ � �� � ����������� �,���������� Q� 0 1�1������� � ;8� QQ� 0 1�1=� QQQ� 0 1�1� � *8 � *8 U #� $$� ! F���� � ��� ���� ��� �3; � "#$�� ����������� ��� �������� ������ � ����� -./0 �� �������� ��F>$.#� -����� ��� ����� P .F/ � ��� ����������� �,����������� Q� 0 1�1� ������ � ;8� QQ� 0 1�1=� QQQ� 0 1�1� �*8 � *8 U #� $$

Page 6: Transcription factor decoy for activator protein-1 (AP-1) inhibits high glucose- and angiotensin II-induced type 1 plasminogen activator inhibitor (PAI-1) gene expression in cultured

����������� ��� �������� ��������� ����� �������A����� ������� ��� ������ � ������ ����� ������ ������������ ������� ��� ����� � �� � ���� ���#� $$ � "#$�� ������� �� ���� ����� ��������� ������ ���������� ���� � ������ ��� �� ���� ��� ������� � ��"#� ���� �� ��� ��� �������������� ��� ��� ��� � ������������

��� ��������� � #� $$ ���� �� �� �� ��������� ��� ���������� �� ��� ���� ��� ����� ��������� ���������� � #� $$ �� ������� "��������������� � #� $$ �������� �� ��������������� ��� �� ����������� ��D��� ����� ������ ���� ������� � �� B�B P 1�= ��� =�4 P 4�( !��� �1�&�=4�4% ���I� ������� ��� �4)� �1�� *�� ��� �������� ���� ���� ��� ��� ��������� � #� $$������ ��� ������ �������� .��� ��� ��� ����������� � #� $$ �� �� �� �� ��� ���� �������� ����������� ��� � ��� ���������������� ������������ �� ������� ��� ��������� � ��,������ ������ ������2;# �,��������

$� ��� ���� ��������C�� ���� �� ������� �� ������������� ,����� � ������ ����� � ��� ��� �� ����� ��� ���������� ��������� �������� ���� ������������ ��� �������� ��4�� #���� � ���� ���������� ����� ���� ����� �� ������������� ������� ������������ ��� ��������� ������ �� ��� �������� ������������� ,����� � ������� #"�� �� �� � ��� ������������ ����� ��������� �� ��� ������� ���, ��������� �&�� #�� ��� ������ � ��� ���� ��������� ��������������� �� ������ � � ���� ��� � � ���� ��� � �� �� ������� ����������� ��������� ������ ����������� ��� ���� ����� $� -./0� ,����� �>3>� *4�4� ��� ��� ����� ���,������ ����� &������,��4������� �� � ���� ���� � ������� #"���,������� � 3;# ������ ��� ��� ��=��'�� $� �������� ���������� � �� ���� ��� �3;� ��� �� �

��������� ��� �3;� ������ ��� ��������� ������2;# �,������� ��� ������ �������� 0������������ � ��� ���� ��� �3; ���� ��� ����� ������� ������ ��� �������� �������� ����������,�������� ����� �� ���� ������ ��� ���� #"�� ������� �� �� � ���� � #� $$ �� ������ ����� ��� �,������� ��� ��������

:� ���� � ��� ��� �3; ������ � � ��������� �������� � ��� #"�� ����, � ����� ��� �,��������� $� ������� ������� ���� ��� �� �������������� ����� ����������� !0#�% �,������� ��� ������ �� � ���� ���� � ����� ��� ���� ������������ ����� ��(� �(�&1�� ���� ������ �� D����������� ��� �� �� �� �� ������ ��� ��� ���� ����� ������� �� ��� ���� ����� ��� ���������� ����������� ��� �3;� ���� �� �� ����� �� ����� ������� ��� �� � ����� ������������� �� �������� ���������� � � ��� �3; ��������� ���� #"�� ������ ���� ��D���� ������� �� ��� ��������

9� 3�#�� �� ���5 $�������� � "#$�� �� #"�� ���'�(

����%� F���� � ���� ��� �3; ���������� � ����� ������� ��� ��� !;8� -./0 ������� ���� ����� ����@*8� -./0 ������� ���� �� � ����@ 3��� -./0 ����������� ���� �11 ���I� � �11 ���I� !S �% ���� ��� �3;@/$.� -./0 ���������� ���� � ��������� ��� �3;%���� ������� ���� �,������ �� �� ���������� ��� ��� ��� ���������� ��� ���� -����� ��� ����� P .F/ � ��, ������������,��������� ����� ������C���� � �� ���������� ��� ����Q� 0 1�1� ������ � ;8� QQ� 0 1�1� ������ � *8� ���QQQ� 0 1�1� ������ � *8 U #� $$

����&�� �� F���� � "60 ��� ������� ������ �������� �#"�� ��� ���� � ������ �,����� � � �� ����� ����� ���-./0 ������� ���� � "60 ��� � ������� ������ ������������� �,�������� ��� �������� ����� ����� !;8� -./0 �������� ���� ����� ����@ *8� -./0 ������� ���� �� � �����@ U 0� -./0 ������� ���� � ������ "60 ��������� ��������� 0 !�11 ���I�%@ U 8� -./0 ������� ���� � ������� ��������������� �������� !� ���I�%@ U #$$� -./0 ������� ���� �11���I� #� $$@ 0��������� �� ���� ����%� � M������������ � F/.# ������� �,������� �� ��� ����� P .F/ � ���������������� �,���������� Q� 0 1�1� ������ � ;8�QQ� 0 1�1� ������ � *8� ��� QQQ� 0 1�1� ������ �*8 U #� $$

Page 7: Transcription factor decoy for activator protein-1 (AP-1) inhibits high glucose- and angiotensin II-induced type 1 plasminogen activator inhibitor (PAI-1) gene expression in cultured

��� � ��� �������� �������� ���������� ������ ���� ��� �� � ����������� ��� ��� ��� ��������������� ���� ��� �����D���� �������� � ����,�������� $� ����� �� ����� ��� ��� ���� ��������� ������ � ��� �3;� �� ����� ������ �� ��������������� ��������� ���� �� �� �� ������ ����� ���� ����������� �����

��� ����� �� ���� ��������� ���� ��� �� ������������� ������ ������� �� ���� ��� #"�� ���� ����� .� ���� ��� ��� ������� �� � ���� ������ � ����������� � #� $$������� ��� ����� #"�� �� ��������� � "60 ���I� ������� �������&�� &4�� :� ��� ��� ���� #"�� ��� ���� �� �������� � ���� � #� $$ �� �������� ������ �� "60 ���� ���� ��� ��������� �� ������� ������� ����� �� ������ ��� ��� ��� ��� �� �� � �� �� �������� #"�� ��� ���� ��� ������� ������� ��� �������� ��������� ��� �������� ��� ����� �� �����

$� ������� ���� ����� ���� ���� �� � ������� #� $$ ��������� ����� ��� �,������� ��� ������� ������� ���� � #"�� ������ ������ $��������� � #"�� ��� ��� ���� � ����������� ���� ���� �3; ������ ��� �������� ��� ��� �,���������� ������� � "#$��� ����� ������ � ��� ��������� � � ������ ������������ � ��� ���� ������� ���� ������ ��������

��2� 3����������� ���� ����� ��� �������� �� � ���� ������ $�������� �� /����� 8������� 6������ 7�� ������.�� � /������ !)'��% ��� �� � ���� ��� ��� 6���*����� 4� 2V3 ��+��� /������� � *����� V :������� 2������� � 6��� !*/"�))�/�1(�111&%�

! � � �� �

�� 6������� #.� :����� 9*� -������� "� /����� L0� >�����>/L� 0��������� #2 !�))�% F � �� ������� ������ ������ ������ ������� �� �������� ��������� #� 9 /�� )1�.���� 4#�5 =B.�B�.

4� 7������� /$9� ;������� >6� .������ �� -��������� F�"����� !�))1% =����� ������� � ����������� ������������� �� ������� � ������ ���� ������ ������� �� ��� ��������������� �� ��������� ������� �� ��������������������� ������� ��� ��������� ���+���� 0�������� (45�4'��B�

�� L��� /9� 0����� �� #� �� >���� ": �� ��� !4111% $�������� � �������� ��� ���� � ����������� � ������� ��������������� � ���������� *���������� �=5 �1�(��1&4

&� .���������� 9� .����� /.� 6���� /2 �� ��� !�))4% $�������� ���� � ������� �� ��� ��� �������� ��� �,�������� �� ����������� ����� ��������� "� ;��� #�� .�7.# ()5 B))(�'114

=� "�� 6#� ����� 8*� >���� /8 �� ��� !4111% #�������� � ��� �������� ���� ���������� �������� �� ���A����� ��� ������� ��������� 0�������� �1�54B&�4B)

B� ������� *� 6����� G� /��������� * �� ��� !�))(% 2����������� ������� ���������� ������ ��� ����������� ������� ������������ *���������� ��5 �4���4'

'� .���������� 9� >������ 39 !�))�% "������ �� ��� ���� ���������� ������ 0���� �� /�� �5 ))��14

(� ;��� �6� 6������ 69� .������� 39� .��� LF !�))�%#� �������� � ��������� � ������� �� ��� ��� ��������� ������ �� �������� ���������� ���� �� ���� ������ ���������� �� ��� ������������ #��������� �������5 �(44��(4(

)� 0������ /� #� ���� .� $����� 8 �� ��� !�))&% .���������� � "#$�� �,������� �� ���������� ���� �� ������� ������ ���� ����� ����� #��������� ����� �&5(�=�(4�

�1� A����� F"� ;������ 9/� #���� >"� 6�� 8> !�))=% #�� ������� $$ ������ ������� �� ��� ��� ���������� ����4 �,������� �� ������ ���������� ��� ���� ���������� 9 0��� $� ��� )=5 ��=����B4

��� A����� F"� N�� "� $� ��� �� .���� �� 6������� /� 6�� 8> !�))B% 2�� � ������ ������ 0 �� ����� ��� #� ��������� $$������� ������� �� ��� ��� �������� �,��������� 0����� ;����� ��(5 �(1��('

�4� ;�����+�� 2� .�� .� L�� :� G������ 66-� ;����� 9 !�)))%#� ������� $$ �� ����� �� ������ ���� ����� ��������� �� � ���� �������� *���������� ��5 �'(��(&

��� :����� :#� 0�� A8 !�))(% 3;# ������ � ��� ����������� �� �������� �� ����� ����� ��� ���� ������� ���� � ���� ����������� 6����� $�� =�5 ��'4���(�

�&� 6��� .� 6��� $� /�C�� � �� ��� !�))'% #� ������� $$���������� �9�� ;*4��������� ������ �� ������� ����������� � ������� ����� 0�� 2�� (15 ��)��&B

�=� 6���� / !�))=% ��� �� ������ � #"�� ��� ��� �� ���� ������ ���� ������ �������� 9 L�� 0��� 4'15�B&(���B&(B

�B� :������� #9� 3� �� 29 !�))B% ����������� ���� #"���� ������ �� ��� ������ ���� ������ ������ �� ������������� �������� 9 /� /�� '&5 =()�B1'

�'� 0��� GM� .� /� :���� 22� *� M� 0 �� �� 9:� -�� ���� 3F !�))(% .�� ����� ������� ��� ���� � ��� �������� �� ��� ��� ���������� ������ �� ���� �� ���������� ����� ����� 9 L�� 0��� 4'�5 (44=�(4��

�(� 6���� /2� 0������� .#� O��� ��� #9� >������ 39!�))�% $����������� � �� ������ ��D����� �� ��� ����� ������� �� ��� ��� �������� ��� ������� � ����������� ���� ���� �� 9 L�� 0��� 4BB54�1&(�4�1=4

�)� L�������� #� .�� ������ 2#� O��� >� ;���� 89 !�))1%2� ������ � ��� �,������� ���� �������������������������� �� ���������� .���� 4=15 ))'��111

41� /������� 2� 8����� 8*� *����� /� 6����� G� � ������ �� 3C�� -9 !�))(% 2�� � #"�� ����, �� �� �������$$��������� ���������� ���� ������ �,������� ��� ���� � ���� ����� ����5 7��� ��� ������� ����� #"�� ������ ����� L���� L����� 2�� 0����4&�5 �B���B'

4�� .��� G� /������� 2� .�C��� 6 �� ��� !�))'% # � �� ������� � �� �������� ������� ���� �� � ���������� ��� ������� W���E � ����� ;A�L ������ ����� 0��������)B5 4(1�4(=

44� #������ A/� L���� 2� 6�� ��� 2F �� ��� !�)()% 0����������� �� ������� ��� �� 8����� "�������� #�������� ��� :�����$���������� ;�� G��

4�� .���� G� /������ ;� ;���� G� /�� /� #��� 6� 6������ G !�))'% 3� ������� ��� ��������C���� � ������������ �+� ���� ���� *-9 !.����� ����%5 2����������� � ����� ����� �� �� ��� ��� �� � ��� ���������*�� 8��� ���� (5 4����4�&�

4&� #�� /� *����� 98� /��C 0;� ;���� $� >������ 39� 2������ 3L !�))&% #� ����� �� ���������� ���� ���������� ���� ���������� ���� � ������� �� ��� ��� ����������� ���������������� ������� #��� L���� 4�B54'B�4(&

9� 3�#�� �� ���5 $�������� � "#$�� �� #"�� ��� '�)

Page 8: Transcription factor decoy for activator protein-1 (AP-1) inhibits high glucose- and angiotensin II-induced type 1 plasminogen activator inhibitor (PAI-1) gene expression in cultured

4=� 9�����-� �� $� #����� /0� -� �� " !�))�% $������� ������� ������� �� ��� ��� ���������� �� ���� # ����������� ������� ������� ��������� ��� �������������� 3������� �� �&5 &='�&B4

4B� "��� /� "���� L/� #������� /*� #���� ��� :L� :��������� 93� A���� 03 !4111% ���������� �������� �#0F ��������� ��� ���� �������������� � ��� � �� ��������� ���� ���� 4 ��������� 3������� 0��� 4�5 (((�()4

4'� "���� 9.� 0�C�� 9"� /����� 26/ �� ��� !�)()% $��������� �� ������� � ����� ��C��� ��� ��� ��������� ������������ ����� ������ ��+���� .���� 4&=5 �(B��((

4(� * ���� L9� G�� 9L !4111% ��� *�"F ������ 2������������� ���� ������ ����� ��� ������ F ��� ��� 0�� �0��� 9 /�� B'5 4('�4)�

4)� *������ 6� 8����� 3� 7� �� �� L���� 0� >�� 2F !�)((%/���������� ��� ��������C���� � �� ������� ���������� ������� 0��� 0��� �&5 �1&B��1=�

�1� .��� 3� 2������� L� *��� * �� ��� !�))4% 3���� ����������� ��� ������� � ����� � �� ������� $$ �� ������ �,������ �������� ���� � �� ���������� ������ ��������0��� 0��� �(5 �)B���)B'

��� .������� *� $� ����� �� 92� *���� #� �� ��� !�))4% F ������ �� ������������� ��� ���� � ����� �� �������� �� �2;# �,������� �� ���� ������ �,��������������� �������� 9 0��� $� ��� )15 �=4���=4)

�4� 6���� 0� /����� 2/ !�)))% �,����� � ������ �� � �� ������ � ��� �,������� �� ��� ���������� 0��������2�� (=5 '=��'BB

��� :������ "8� L���� F2 !�))'% #���,������ ���,��� ������� ����������� ������ ��� ������������ #� "�������(5 &1��&4�

�&� .�� G� ������� >: !�))B% 2��, �� ������ � �������������� ��� ����� A��� 2��� L�� /�� 4�5 ��=��&(

�=� #��� /"� 6����� L� F������ "� �� ��� !�))=% �,���C�� >3>������ ����������� ���� ��� ��� �������� �������������� ���� � ������ �����6L �� ����� ������ ��������� ����� #��������� ����� -�� L�� �=5 �=(&��=)1

�B� 2� 8;� L��� L0 !�))4% #�� � ,� �� ������ ��������� ������ ���� ����� ��� ���� ��� ����� ����,�������� 0�� 2�� '15 =)��=))

�'� 2��� 9� 2� 8;� >� A �� ��� !�))(% $������ � ��� �������� ����� ��� ���� �� ��� ����� ���,������ ������ &�����,��4�������� 0�������� )'5 �1'���1'(

�(� #��� 9� 8������ �� 9� L��� "9� 2������� *9� 6������ !�))B% 2�� � �9�� ��� ��,���� ����� �4����������������������!"/#%�������� � �������� �� ��� �� ������� � ����� ��� "/#����������� ������� ������ ������������� ��� �,������� �� *F"84� F�� 9 L����4&�5 �)��&14

�)� :����������� 32� *����� :F� L�������� 99 !�))�% /�������� ���������� ���� ��������������� �������� �� ������ �,������� � ��� ������� �� ��� ��� �������������� ��� �� *��84 ����� 9 L�� 0��� 4BB5 �1)4���11

&1� 6������ *� ������ �� 2�� #� 7� �� "� 0���������� >�#�������� "# !�))&% # ��� ������� ������� ��������� ������������ ������ � ����� ������ ��� ������� ������� ������� �� ��� ��� �������� ��� �,������� ������� ������ �������� ����� F�� 9 L���� 4415B��'&

&�� :����� :#� 0�� A8 !�))(% 3;# ������ � ��� ����������� �� �������� �� ����� ����� ��� ���� ������� ���� � ���� ����������� 6����� $�� =�5 ��'4���(�

&4� ������ 6� ;��� ;� ������ ;� �� ��� !�))(% /������� ��� ������� $$��������� �� ������ � ��������� ��� ����� ������ ���� ����� ���� 9 L�� 0��� 4'�54B&('�4B&)B

9� 3�#�� �� ���5 $�������� � "#$�� �� #"�� ���'41