us 20110274736

7/25/2019 Us 20110274736

1/13

US 20110274736A1

( 1 9 ) United S t a t e s

( 1 2 ) Patent Application Publication ( 1 0 )

P u b .

N o . : US

2 0 1 1 / 0 2 7 4 7 3 6 A 1

A l k h e d h a i r y e t

a l .

( 4 3 ) P u b . D a t e : NOV. 1 0 , 2011

( 5 4 )

( 7 5 )

( 7 3 )

( 2 1 )

( 2 2 )

METHODS FOR

PRODUCING

SILVER

NANOPARTICLES

I n v e n t o r s :

A s s i g n e e :

A p p l .

N o . :

F i l e d :

A b d u l a z i z A . A l k h e d h a i r y ,

R i y a d h

( S A ) ;

J a v e d

M u s a r r a t ,

R i y a d h

( S A )

K i n g S a u d U n i v e r s i t y ,

R i y a d h

( S A )

1 2 / 7 7 6 , 4 2 5

May 0 , 2 0 1 0

P u b l i c a t io n C l a s si ? c at i o n

( 5 1 )

I n t . C l .

A 0 1 N 5 / 0 8 ( 2 0 0 6 . 0 1 )

A 0 1P

/ 0 0 ( 2 0 0 6 . 0 1 )

A 0 1 N 9 / 1 6 ( 2 0 0 6 . 0 1 )

C22B 1 1 / 0 0 ( 2 0 0 6 . 0 1 )

C22C / 0 6 ( 2 0 0 6 . 0 1 )

( 5 2 ) US.

l .

. . . . . . . . . . . .

424/409;

75/711;

420/501;

424/618

( 5 7 )

ABSTRACT

Methods f o r

p r o d u c i n g

s i l v e r n a n o p a r t i c l e s

a r e

d e s c r i b e d . I n

o n e a s p e c t , a

l i q u i d

s o l u t i o n

i s p r e p a r e d

t h a t c o n t a i n s p h e n a

z i n e - l - c a r b o x y l i c a c i d . S i l v e r m e t a l s a l t

i s

added o

t h e s o l u

t i o n

t o

p r o d u c e

m u l t i p l e s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s .

7/25/2019 Us 20110274736

2/13

P a t e n t

A p p l i c a t i o n

P u b l i c a t i o n N o v .

1 0 ,

2 0 1 1 S h e e t 1

0 f 8 US

2 0 1 1 / 0 2 7 4 7 3 6

A 1

1 0 0

P r e p a r e

A o l u t i o n

o f

B a c t e r i a

Pseudomonas \

a e r u g i n o s a s t r a i n N J - 1 0 1

and L u r i a - B e r t a n i B r o t h

( W h i c h i s

M o d i f i e d

w i t h 1.5 G l u c o s e

a n d

1

mM

t r y p t o p h a n )

l

1 0 2

M a i n t a i n t h e S o l u t i o n a t

28C

Under Constant

\

A g i t a t i o n

1 0 6

R e c o v e r

t h e

S u p e r n a t a n t th r o u g h

C e n t r i f u g a t i o n

\

and F i l t e r i n g J

l

A c i d i f y

t h e

R e c o v e r e d

S u p e r n a t a n t To

A c h i e v e

A

H \

o f 2 . 0 U s i n g H C l

1

x

Add An E q u a l

Volume o f benzene To t h e S u p e r n a t a n t

l

T h e R e s u l t i n g S o l u t i o n

i s

E v a p o r a t e d T o O b t a i n

PCA

( p h e n a z i n e - 1 - c a r b o x y l i c

a c i d ) C r y s t a l s

l

D i s s o l v e t h e

PCA

r y s t a l s I n D e i o n i z e d

W a t e r

)

l

16

x { F i l t e r h e S o l u t i o n ( P C A C r y s t a l s

+ D e i o n i z e d

W a t e r ) )

1 1 8

_\(

A d d

S i l v e r

M e t a l

S a l t

T o

t h e S o l u t i o n

a n d

I n c u b a t e

)

108

1 1 0

112

114

F i g .

1

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3/13

P a t e n t



1 0 ,

2 0 1 1 S h e e t

2 0 f 8 US

2 0 1 1 / 0 2 7 4 7 3 6

A 1

200

[

2 0 2 P r e p a r e a S o l u t i o n o f

PCA

r y s t a l s , D e i o n i z e d Water?

a n d

S i l v e r

M e t a l S a l t

( F i g . 1 )

l

204 \

\ { H a r v e s t

u l t i p l e S i l v e r

N a n o p a r t i c l e s

f r o m t h e

S o l u t i o n

2 0 6 \

l l

/ - 0 a

mbed

the Multiple Silver

Distribute

the Multiple

Silver

N a n o p a r t i c l e s I n A

e g i o n

To N a n o p a r t i c l e s I n t o An O b j e c t

I n h i b i t Growth o f o r Compound To n h i b i t

Growth of

MicroOrganisms

n

M i c r o O r g a n i s m s I n

t h a t

R e g i o n

t h a t

O b j e c t

o r

Compound

F i g . 2

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4/13

P a t e n t



1 0 ,

2 0 1 1 S h e e t

3

0 f

8 US

2 0 1 1 / 0 2 7 4 7 3 6

A 1

b s w b a m e

W a v e h a n g t h { W m }

7/25/2019 Us 20110274736

5/13

P a t e n t



1 0 ,

2 0 1 1 S h e e t 4

0 f 8 US

2 0 1 1 / 0 2 7 4 7 3 6

A 1

E ,

N

s m

35

I E @

F i g _

4

7/25/2019 Us 20110274736

6/13

P a t e n t



1 0 ,

2 0 1 1 S h e e t

5 0 f 8 US

2 0 1 1 / 0 2 7 4 7 3 6

A 1

h i w i i m n w

am: am

W a w ? a n g t h

{ m m }

7/25/2019 Us 20110274736

7/13

P a t e n t



1 0 ,

2 0 1 1 S h e e t

6

0 f

8 US

2 0 1 1 / 0 2 7 4 7 3 6

A 1

7/25/2019 Us 20110274736

8/13

P a t e n t



1 0 ,

2 0 1 1 S h e e t 7

0 f 8 US

2 0 1 1 / 0 2 7 4 7 3 6

A 1

{m} - 1 l : n

I

3 3 6 3

m a x } 5 5 3 ; ; mm

7/25/2019 Us 20110274736

9/13

P a t e n t



1 0 ,

2 0 1 1 S h e e t

8

0 f

8 US

2 0 1 1 / 0 2 7 4 7 3 6

A 1

{ m

g; a

h

a ?

a ;

b e :

i i

I i

'

3 3 3 : 4 9 3 }

w? mi

? i m i a i m g i h { m m }

F i g .

8

7/25/2019 Us 20110274736

10/13

US 011/0274736

A 1

METHODSFORPRODUCINGSILVER

NANOPARTICLES

BACKGROUND

[ 0 0 0 1 ]

S i l v e r n a n o p a r t i c l e s

h a v e

a va r i e t y o f m e d i c a l a n d

t e c h n o l o g i c a l

a p p l i c a t i o n s ,

s u c h as a n t i b a c t e r i a l a n d a n t i f u n

g a l

a g e n t s , s e m i c o n d u c t o r s , a n d c a t a l y s t s i n

c h e m i c a l

r e a c

t i o n s .

Many

x i s t i n g m e t h o d s f o r p r o d u c i n g s i l v e r

n a n o p a r

ticles a r e

e x p e n s i v e

and

u s e h a r s h c h e m i c a l s

t h a t pose

e n v i r o n m e n t a l and e a l t h r i s k s t o

i n d i v i d u a l s

r e s p o n s i b l e f o r

s t o r i n g

a n d

h a n d l i n g t h e

c h e m i c a l s .

[ 0 0 0 2 ] O t h e r e xi s t i n g

m e t h o d s

f o r

p r o d u c i n g

s i l v e r

n a n o

p a r t i c l e s

r e q u i r e s i g n i ? c a n t

t i m e , e n e r g y , h i g h - p r e s s u r e

e n v i

r o n m e n t s ,

a n d p e c i a l i Z e d e q u i p m e n t o c o m p l e t e h e p r o d u c

t i o n p r o c e s s .

The

a s s o c i a t e d

risks and

e x p e n s e s , t h e r e f o r e ,

r e d u c e

t h e

c o m m e r c i a l f e a s i b i l i t y

o f p r o d u c in g

s i l v e r

n a n o

p a r t i c l e s u s i n g t h e s e e x i s t i n g m e t h o d s .

SUMMARY

[ 0 0 0 3 ] The d e s c r i b e d m e t h o d s r e l a t e to t h e p r o d u c t i o n o f

s i l v e r n a n o p a r t i c l e s .

Example

m e t h o d s i n c l u d e

p r e p a r i n g a

l i q u i d s o l u t i o n c o n t a i n i n g

p h e n a Z i n e - l - c a r b o x y l i c

a c i d .

S i l

v e r m e t a l s a l t i s

added

o

t h e l i q u i d

s o l u t i o n ,

Which e s u l t s i n

the p r o d u c t i o n

o f

m u l t i p l e

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s When m a i n

t a i n e d

at a p p r o x i m a t e l y

2 8 C .

i n

a d a r k e n v i r o n m e n t .

[ 0 0 0 4 ] T h i s Summary s p r o v i d e d t o i n t r o d u c e a

s e l e c t i o n

of

c o n c e p t s i n a s i m p l i ? e d form t h a t a r e f u r t h e r

d e s c r i b e d

b e l o W i n t h e D e t a i l e d D e s c r i p t i o n . T h i s Summary i s n o t

i n t e n d e d

t o i d e n t i f y k e y f e a t u r e s o r

e s s e n t i a l

f e a t u r e s o f t h e

claimed

s u b j e c t m a t t er ,

nor s

i t

i n t e n d e d

t o

be used

s

an a i d

i n d e t e r m i n i n g t h e s c o p e o f t h e

c l a i m e d s u b j e c t m a t te r .

BRI EF

DESCRIPTIONOFTHEDRAWINGS

[ 0 0 0 5 ] I n

t h e F i g u r e s , t h e l e f t - m o s t

d i g i t

o f

a

c o m p o n e n t

r e f e r e n c e

number

d e nt i ? e s t h e p a r t i c u l a r

F i g u r e

i n W h i c h t h e

component

? rst

a p p e a r s .

[ 0 0 0 6 ]

F I G .

1 s h o W s a n e x a m p l e

p r o c e d u r e

f o r

p r o d u c i n g

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s ,

a c c o r d i n g

t o o n e e m b o d i m e n t .

[ 0 0 0 7 ]

F I G . 2

s h o W s a n e x a m p l e

p r o c e d u r e f o r i n h i b i t i n g

m i c r o o r g a n i s m g r o W t h , a c c o r d i n g t o o n e e m b o d i m e n t .

[ 0 0 0 8 ] F I G . 3 s h o W s

a n

e x a m p l e U V - V i s i b l e a b s o r p t i o n

s p e c t r a

f o r

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s p r o d u c e d a c c o r d i n g t o t h e

p r o c e d u r e

o f F I G . 1 .

[ 0 0 0 9 ] F I G . 4 s h o W s a n e x a m p l e p a t t e r n r e p r e s e n t i n g t h e

c r y s t a l l i n e n a t u r e o f

the

s i l v e r n a n o p a r t i c l e s p r o d u c e d

a c c o r d i n g

t o

t h e

p r o c e d u r e

o f

F I G . 1 .

[ 0 0 1 0 ]

F I G .

5

s h o W s e x a m p l e

e f ? c i e n c i e s o f v a r i o u s

meth

o d s

o f p r o d u c i n g

s i l v e r


[ 0 0 1 1 ]

F I G . 6

s h o W s m u l t i p l e s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s p r o d u c e d

a c c o r d i n g

t o

t h e

p r o c e d u r e o f F I G .

1 .

[ 0 0 1 2 ] F I G . 7 s h o W s

a n

e x a m p l e U V - V i s i b l e a b s o r p t i o n

s p e c t r a f o r s i l v e r n a n o p a r t i c l e s p r o d u c e d b y

p h e n a Z i n e - l

c a r b o x a m i d e .

[ 0 0 1 3 ] F I G . 8

s h o W s

a n

e x a m p l e

c o m p a r i s o n o f t h e p r o d u c

t i o n

o f s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s

u s i n g p h e n a Z i n e - l - c a r b o x y l i c

a c i d

( l i n e

a )

a n d p h e n a Z i n e - l - c a r b o x a m i d e ( l i n e

b ) .

DETAILED

DESCRIPTION

OvervieW

[ 0 0 1 4 ] The m e t h o d s d e s c r i b e d h e r e i n r e l a t e t o t h e p r o d u c

t i o n o f s i l v e r


f o r u s e

i n a n t i m i c r o b i a l

and

t h e r

a p p l i c a t i o n s . T h e s e m e t h o d s p r o d u c e

W a t e r - s o l u b l e

s i l v e r

N o v .

1 0 ,

2 0 1 1


t h a t a r e s t a b l e a n d

c a p a b l e

o f

b e i n g

s t o r e d

f o r

s i x

months

o r

l o n g e r .

The

methods

d i s c u s s e d h e r e i n

p r o d u c e


i n

a manner h a t

i s

l e s s c o m p l i c a t e d t h a n

t h e e x i s t i n g

methods

d i s c u s s e d a b o v e , a n d t h a t u s e s f e W e r

h a r s h ( a n d e n v i r o n m e n t a l l y h a r m f u l ) c h e m i c a l s t h a n t h o s e

e x i s t i n g

m e t h o d s .

T h e s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s p r o d u c e d a c c o r d

i n g to t h e

p r o c e d u r e s d i s c u s s ed

h e r e i n

a r e

u s e f u l

in

a

v a r i e t y

o f

a p p l i c a t i o n s , i n c l u d i n g a n t i m i c r o b i a l


a n t i

f u n g a l a p p l i c a t i o n s ,

s e m i c o n d u c t o r

a p p l i c a t i o n s , s e n s o r

d e s i g n


s i l v e r i nk s f o r

p r i n t a b l e e l e c t r o n i c

t e c h

n o l o g i e s ,

a u t o m o t i v e a p p l i c a t i o n s , a e r o s p a c e a p p l i c a t i o n s ,

n a n o ? l t e r s , n a n o b i o s e n s o r s , a n d c a t a l y s t s

i n c h e m i c a l

r e a c

t i o n s .

[ 0 0 1 5 ]

A

p e c i ? c

p r o c e d u r e f o r p r o d u c i n g

s i l v e r

n a n o p a r

t i c l e s u s e s a

r e d o x - a c t i v e

phenaZine m e t a b o l i t e combined

W i t h s i l v e r m e t a l s a l t .

The e d o x - a c t i v e

p h e n a Z i n e

m e t a b o l i t e

i s a b a c t e r i a l m e t a b o l i te o b t a i n e d by o r g a n i c e x t r a c t i o n o f a

b a c t e r i a l c u l t u r e s u p e r n a t a n t .

T h i s

b a c t e r i a l

m e t a b o l i t e

r e p l a c e s t h e u s e o f h a r s h c h e m i c a l s f o u n d i n many e x i s t i n g

p r o c e d u r e s f o r c r e a t i n g s i l v e r n a n o p a r t i c l e s . I n a p a r t i c u l a r

i m p l e m e n t a t i o n

o f h e p r o c e d u r e ,

t h e r e d o x - a c t i v e

p h e n a Z i n e

m e t a b o l i t e

i s

p h e n a Z i n e - l - c a r b o x y l i c a c i d

( P C A ) p r o d u c e d

by

a c t e r i a

Pseudomonas e r u g i n o s a s t r a i n NJ-lOl

The

PCA

c r y s t a l s a r e d i s s o l v e d

i n

d e i o n i Z e d W a t e r ,

to Which s i l v e r

m e t a l

s a l t

i s a d d e d o p r o d u c e

i l v e r

n a n o p a r t i c l e s . The

e s u l t

i n g

s o l u t i o n

p r o d u c e s s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s i n a

e l a t i v e l y

s h o r t

p e r i o d

o f

t i m e ( e . g . ,

tWo

o u r s ) a n d s m a i n t a i n e d

t

a n

ambi

e n t t e m p e r a t u r e . M u l t i p l e s i l v e r n a n o p a r t i c l e s a r e h a r v e s t e d

f r o m h e s o l u t i o n , f o r e x a m p l e , b y f r e e Z e - d r y i n g t h e s o l u t i o n .

E x e m p l a r y

P r o c e d u r e s

F o r P r o d u c in g S i l v e r N a n o p a r t i c l e s

[ 0 0 1 6 ] F I G . 1 s h o W s

a n

e x a m p l e p r o c e d u r e 1 0 0 f o r

p r o d u c

i n g

s i l v e r n a n o p a r t i c l e s ,

a c c o r d i n g t o

o n e e m b o d i m e n t .

The

s i l v e r


c r e a t e d

u s i n g t h i s p r o c e d u r e a r e W a t e r

s o l u b l e

a n d

s t a b l e ,

s u c h

t h a t

t h e

s i l v e r


r e m a i n

s t a b l e d u r i n g s t o r a g e f o r t l e a s t s i x months n a c o l l o i d a l state

and

o r at least a

y e a r i n

a c r y s t a l l i n e

poWdered

t a t e .

[ 0 0 1 7 ] P r o c e d u r e 1 0 0 b e g i n s b y p r e p a r i n g a s o l u t i o n o f

b a c t e r i a

Pseudomonas a e r u g i n o s a s t r a i n N J - l O l

a n d

L u r i a

B e r t a n i

b r o t h ( b l o c k

1 0 2 ) .

P s e u d o m o n a s

a e r u g i n o s a

s t r a i n

N J - l O l i s a n a t u r a l l y

o c c u r r i n g

b a c t e r i a . L u r i a - B e r t a n i

b r o t h

i s

a n u t r i t i o n a l l y r i c h l i q u i d medium

u s e d

to groW v a r i o u s

t y p e s

o f

b a c t e r i a . L u r i a - B e r t a n i b r o t h i s a l s o commonly

r e f e r r e d t o

a s

L u r i a b r o t h o r lysogeny

b r o t h .

The L u r i a

B e r t a n i

b r o t h

i s modi?ed

i t h

1.5 l u c o s e

a n d

1 mM r y p

t o p h a n .

T r y p t o p h a n

i s

a n amino

a c i d

t h a t

o c c u r s

i n p r o t e i n s .

The

l u c o s e

i s a d d e d t o a c c e l e r a t e b a c t e r i a g r o W t h . The r y p

t o p h a n s u s e d

f o r f e e d b a c k i n h i b i t i o n

o f

t s oWn

y n t h e s i s

v i a

A n t h r a n i l a t e s y n t h a s e

I ,

W h i c h

f a c i l i t a t e s the

sy n thesis

o f

PC A

i a A n t h r a n i l a t e s y n t h a s e I p a t h W a y u s i n g A n t h r an i l a t e

a s

a s u b s t r a t e . The s o l u t i o n i s maintained t a temperature of

a p p r o x i m a t e l y 2 8 C .

u n d e r

c o n s t a n t g i t a t i o n ( b l o c k

0 4 ) . I n

o t h e r i m p l e m e n t a t i o n s , t h e

t e m p e r a t u r e i s m a i n t a i n e d i n

t h e

r a n g e o f a p p r o x i m a t e l y 2 8 C . t o 3 7 C . I n a p a r t i c u l a r

embodiment, t h e s o l u t i o n i s m a i n t a i n e d

a t

t h e a m b i e n t

tem

p e r a t u r e o f a

l a b o r a t o r y ,

p r o d u c t i o n f a c i l i t y , o r s i m i l a r e n v i

r o n m e n t , u n d e r c o n s t a n t a g i t a t i o n .

[ 0 0 1 8 ] The e x t s t e p i n p r o c e d u r e 1 0 0 r e c o v e r s

t h e

s u p e r

n a t a n t f r o m t h e s o l u t i o n t h r o u g h c e n t r i f u g a t i o n

a n d

? l t e r i n g

( b l o c k 1 0 6 ) . T h e s u p e r n a t a n t

i s t h e l i q u i d

p o r t i o n

o f h e s o l u

t i o n a b o v e t h e s e d i m e n t o r s e t t l e d p r e c i p i t a t e . I n

h i s

e x a m p l e ,

t h e s u p e r n a t a n t e x h i b i t s a

g r e e n c o l o r . The

c e n t r i f u g a t i o n

p r o c e s s

i s p e r f o r m e d

a t 5 0 0 0

rpm

( r e v o l u t i o n s

p e r m i n u t e )

a n d

the

? l t e r i n g

i s

p e r f o r m e d u s i n g

a

0 . 4 5 um

(pm s 1 0 ' 6

7/25/2019 Us 20110274736

11/13

US 011/0274736

A 1

m e t e r s ) ? l t e r . The r e c o v e r e d s u p e r n a t a n t

i s

a c i d i ? e d to

a c h i e v e a

pH

o f a p p r o x i m a t el y 2 . 0 u s i n g c o n c e n t r a te d HCl

( h y d r o g e n

c h l o r i d e ) ,

b l o c k

1 0 8 .

N e x t , a n

e q u a l v o l u m e

o f

benzene s added o t h e s u p e r n a t a n t ( b l o c k 1 1 0 ) t o c r e a t e a 1

:

1

r a t i o

( v o l u m e )

o f b e n z e n e

t o

s u p e r n a t a n t . I n a

p a r t i c u l a r

e m b o d i m e n t , the b e n z e n e i s HPLC h i g h - p e r f o r m a n c e

l i q u i d

c h r o m a t o g r a p h y ) g r a d e

b e n z e n e .

T h e s u p e r n a t a n t a n d t h e

b e n z e n e

a r e

mixed h o r o u g h l y u s i n g

a s e p a r a t i n g f u n n e l .

The

r e s u l t i n g s o l u t i o n i s e v a p o r a t e d t o o b t a i n m u l t i p l e PCA

( p h e n a z i n e - l - c a r b o x y l i c a c i d ) c r y s t a l s

( b l o c k

1 1 2 ) .

I n a

p a r

t i c u l a r

e x a m p l e , a p p r o x i m a t e l y

2 0

m g m i l l i g r a m s ) o f PCA

c r y s t a l s

a r e produced

from

s u p e r n a t a n t h a v i n g a volume

f

a p p r o x i m a t e l y

5 0 0 m l ( m i l l i l i t e r s ) .

[ 0 0 1 9 ]

T h e PCA r y s t a l s p r o d u c e d f r o m

t h e

e v a p o r a t i o n

p r o c e s s a r e d i s s o l v e d i n

d e i o n i z e d

W a t e r ( b l o c k 1 1 4 ) . I n t h e

a b o v e e x a m p l e

o f a p p r o x i m a t e l y

2 0 m g

f P C A

r y s t a l s ,

t h e

P C A r y s t a l s are d i s s o l v e d n a p p r o x i m a t e l y 1 00 1 1 ( [ 1 1

i s

1 0 ' 6

l i t e r s ) o f d e i o n i z e d W a t e r . The s o l u t i o n

o f

PCA r y s t a l s a n d

d e i o n i z e d

W a t e r

t h e n

s

? l t e r e d

( b l o c k

1 1 6 )

t h r o u g h

a 0 . 4 5 pm

? l t e r .

F i n a l l y ,

s i l v e r

m e t a l

s a l t

i s

added

t o

t h e s o l u t i o n

and

i n c u b a t e d

( b l o c k

1 1 8 ) f o r a p e r i o d o f


t W o

h o u r s a t a t e m p e r a t u r e o f a p p r o x i m a t e l y 2 8

C .

I n a p a r t i c u l a r

i m p l e m e n t a t i o n , t h e s o l u t i o n i s i n c u b a t e d i n a d a r k e n v i r o n

m e n t .

A

u a n t i t y o f s i l v e r m e t a l s a l t i s added o t h e s o l u t i o n to

p r o d u c e a s i l v e r m e t a l s a l t c o n c e n t r a t i o n o f 1 0 ' 3 M

a l s o

r e f e r r e d t o

a s 1

mM) n t h e s o l u t i o n . I n

one

embodiment of

p r o c e d u r e 1 0 0 , t h e s i l v e r m e t a l s a l t

a d d e d

t o t h e s o l u t i o n i s

AgNO3.

The PCA n t h e so l u t i o n W i t h t h e s i l v e r n a n o p a r t i c l e s

a c t s a s a s t a b i l i z e r f o r t h e s i l v e r n a n o p a r t i c l e s by

p r o v i d i n g

e l e c t r o s t a t i c

a n d

s t e r i c

r e p u l s i o n . T h e

s t a b i l i z a t i o n p r o v i d e d

b y

t h e

PC A r e v e n t s

t h e n a n o p a r t i c l e s

f r o m c o m b i n i n g W i t h

each t h e r t o

form g g r e g a t e s ,

Which o u l d

c o n t i n u e

to groW

a n d g r a d u a l l y s e t t l e o u t o f s u s p e n s i o n .

[ 0 0 2 0 ] The d e s c r i b e d p r o c e d u r e p r o v i d e s

a n

e f ? c i e n t b i o

l o g i c a l s y s t e m f o r the i n v i t r o sy n thesis o f

t a b l e

a n d dis p ers

i b l e

s i l v e r


T h e

p r o c e d u r e i s e n v i r o n m e n t a l l y

f r i e n d l y

a n d

c a n b e s c a l e d u p W a r d s f o r c o m m e r c i a l

a p p l i c a

t i o n s .

U s i n g

the d e s c r i b e d

p r o c e d u r e , a p p r o x i m a t e l y

1 8 m g o

20 mg f PCA s p r o d u c e d by a 5 0 0

ml

c u l t u r e ,

Which

r o

d u c e s ap p r o x i m a t e l y

1 6 0

mg f i l v e r n a n o p a r t i c l e s p e r l i t e r

o f

1 mM

gNO3

o l u t i o n . The a v e r a g e s i z e

o f s i l v e r nano

p a r t i c l e s

p r o d u c e d

u s i n g

t h e

p r o c e d u r e s d e s c r i b e d

h e r e i n i s

10 nm

o

38 nm nanometers).

[ 0 0 2 1 ] I n a n o t h e r e m b o d i m e n t , a d i f f e r e n t p h e n a z i n e

d e r i v a t i v e , p h e n a z i n e - 1 - c a r b o x a m i d e ( P C N ) s u s e d i n p l a c e

o f PCA.

I n

t h i s embodiment,

t h e PCN

s

e x t r a c t e d

from

b a c t e r i a l s t r a i n Pseudomonas a e r u g i n o s a s t r a i n

N J - l O l .

I n

t h i s

e m b o d i m e n t ,

t h e

a v e r a g e s i z e o f s i l v e r


produced

s 14 nm

o 39

nm.

[ 0 0 2 2 ]

F I G . 2 s h o W s a n e x a m p l e

p r o c e d u r e

200 f o r i n h i b

i t i n g

m i c r o o r g a n i s m

g r o W t h , a c c o r d i n g t o o n e e m b o d i me n t .

T h i s

p r o c e d u r e

b e g i n s

b y

p r e p a r i n g a

s o l u t i o n

o f P C A rys

t a l s , d e i o n i z e d W a t e r , a n d s i l v e r m e t a l s a l t ( b l o c k 2 0 2 ) , as

d i s c u s s e d

above i t h

r e s p e c t

to F I G . 1 .

M u l t i p l e

s i l v e r

nano

p a r t i c l e s

a r e h a r v e s t e d f r o m

t h a t

s o l u t i o n ( b l o c k 2 0 4 ) b y

f r e e z e - d r y i n g

the s o l u t i o n . The a r v e s t e d s i l v e r n a n o p a r t i c l e s

a r e c a p a b l e o f n h i b i t i n g

m i c r o o r g a n i s m g r o W t h

( e . g . ,

i n h i b

i t i n g

g r o W t h o f

b a c t e r i a o r f u n g u s )

i n

a v a r i e t y o f e n v i r o n

m e n t s .

I n

o n e

a p p l i c a t i o n , m u l t i p l e sil ver n a n o p a r t i c l e s

a r e

d i s t r i b u t e d

i n a

p a r t i c u l a r

r e g i o n t o i n h i b i t

g r o W t h

o f m i c r o

o r g a n i s m s

i n t h a t

r e g i o n ( b l o c k 2 0 6 ) .

F o r

e x a m p l e , s i l v e r


a p p l i e d

o

a m e d i c a l b a n d a g e c a n

n h i b i t

g r o W t h

o f i c r o o r g a n i s m s

on

h e s u r f a c e

o f

t h e

m e d i c a l

b a n d a g e and

any r e a s

t h a t come

n c o n t a c t

W i t h

t h e b a n d a g e .

A

a r t i c u l a r

N o v .

1 0 ,

2 0 1 1

r e g i o n may

b e o f a n y

s i z e and s h a p e , and

may

i n c l u d e a

s u r f a c e , an

b j e c t ,

a compound, o r o t h e r e l e m e n t .

[ 0 0 2 3 ] I n

a n o t h e r p p l i c a t i o n ,

m u l t i p l e

s i l v e r


a r e

embedded

n t o an

b j e c t

o r compound o i n h i b i t groWth of

m i c r o o r g a n i s m s

i n

( o r

u p o n )

t h a t

o b j e c t

o r

c o m p o u n d

( b l o c k

2 0 8 ) .

F o r

e x a m p l e , s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s embedded

i n t o a

medical i n s t r u m e n t

o r s t o r a g e c o n t a i n e r

can

i n h i b i t t h e

g r o W t h

o f m i c r o o r g a n i s m s

on

t h e s u r f a c e o f t h e

m e d i c a l

i n s t r u m e n t o r

i n

t h e s t o r a g e c o n t a i n e r .

[ 0 0 2 4 ]

T h e s i l v e r


p r o c e d u r e s d i s c u s s e d

h e r e i n a r e

e f f e c t i v e a n t i m i c r o b i a l s f o r

i n h i b i t i n g t h e g r o W t h o f v a r i o u s b a c t e r i a l a n d

f u n g a l

s t r a i n s ,

s u c h a s S h i g e l l a , S t r e p t o c o c c u s a u r e u s ,

C i t r o b a c l o r ,

E s c h e r i

c h i a c o l i , Pseudomonas a e r u g i n o s a ,

B a c i l l u s s u b l i l i s ,

Can

d i d a

a l b i c a n s , and Fusarium

o x y s p o r u m .

[ 0 0 2 5 ]

As d i s c u s s e d a b o v e , F I G . 2 shoWs

an embodiment

o f a p r o c e d u r e f o r i n h i b i t i n g m i c r o o r g a n i s m

g r o W t h

u s i n g

s i l v e r


A l t e r n a t e u s e s

o f


may

t i l i z e

s i m i l a r

p r o c e d u r e s t o h a r v e s t

a n d

d i s t r i b u t e o r

o t h e r W i s e a p p l y )

s i l v e r


i n

a

v a r i e t y

o f

a p p l i c a

t i o n s . A d d i t i o n a l l y , h a r v e s t e d

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s c a n b e

s t o r e d

f o r

a v a r i e t y o f f u t u r e

u s e s .

The

s i l v e r


p r o d u c e d u s i n g the p r o c e d u r e s d i s c u s s ed h e r e i n r e m a i n t a b l e

d u r i n g s t o r a g e f o r a t l e a s t s i x months i n a c o l l o i d a l state and

f o r at least

a y e a r i n a

c r y s t a l l i n e poWdered t a t e .

[ 0 0 2 6 ]

F I G .

3


U V - V i s i b l e

a b s o r p t i o n

s p e c t r a

f o r

s i l v e r


p r o c e d u r e o f F I G .

1 .

The

g r a p h

shoWn

n

F I G . 3 d e p i c t s

t h e

g r o W t h o f h e s u r f a c e

p l a s m o n

r e s o n a n c e ( S P R ) p e a k o f

i l v e r


W i t h t i m e - d e p e n d e n t r e d u c t i o n

o f

i l v e r m e t a l

i o n s .

I n

F I G . 3 , l i n e

a r e p r e s e n t s


tWo h o u r s ,

l i n e

b r e p r e s e n t s a p p r o x i m a t e l y 2 4 h o u r s , l i n e c r e p r e s e n t s

a p p r o x i m a t e l y 4 8

h o u r s ,

a n d

i n e d r e pr e s e nt s


72

h o u r s .

The SPR s an i m p o r t a n t p r o p e r t y o f c e r t a i n sil ver


b y

r e ? e c t i n g t h e f r e q u e n c y a t W h i c h c o n d u c

t i o n

e l e c t r o n s os c illate and

s c a t t e r / a b s o r b

t h e i n c i d e n t e l e c

t r o m a g n e t i c W a v e s . M e t a l s s u c h

a s

A u ,

A g ,

C u ,

a n d a l k a l i n e

m e t a l s , W i t h f r e e c o n d u c t i o n

e l e c t r o n s , h a v e

plasmon r e s o

nance i n t h e v i s i b l e

s p e c t r u m . The

enhancement of h e SPR

p e a k s ( a s shoWn i n F I G . 3 ) W i t h i n c r e a s e d r e a c t i o n t i m e

s u g g e s t s

a n i n c r e a s e i n t h e number f a n o p a r t i c l e s p r o d u c e d

over

time.

[ 0 0 2 7 ]

F I G . 4 s h o W s a n e x a m p l e p a t t e r n r e p r e s e n t i n g t h e

c r y s t a l l i n e n a t u r e o f h e s i l v e r


a c c o r d i n g o

o n e

e m b o d i m e n t . T h e s i l v e r n a n o p a r t i c l e s

p r o d u c e d

a c c o r d i n g t o

t h e p r o c e d u r e s d i s c u s s ed h e r e i n

W e r e

a n a l y z e d u s i n g

CuKa

r a d i a t i o n ( 7 : 1 5 4 0 5 6 A)

n t h e

r a n g e

o f

202080 t 4 0

k e V . A

i n g l e

a b s o r p t i o n

p e a k

a t 4 2 0 nm

a n d

s h a r p

X - r a y

d i f f r a c t i o n

(XRD) b a n d s

( a s shoWn

n

F I G .

4 ) con?rm t h e

f o r m a t i o n

o f s i l v e r


i n s i n g l e - p h a s e

h e x a g o n a l

c r y s t a l

s y m m e t r y .

I n

t h i s

e x a m p l e ,

the

p a r t i c l e s i z e

i s

e s t i

m a t e d

u s i n g

t h e S c h e r r e r

e q u a t i o n

D : 0 . 9 MB o s 0 , W h e r e

i s

t h e

W a v e l e n g t h o f

t h e

X - r a y ,

B

i s

t h e

b r o a d e n i n g o f t h e

d i f f r a c t i o n l i n e

measured

t h a l f o f

t s

ma x i mu m

n t e n s i t y i n

r a d i a n s ,

a n d 0 i s the B r a g g s d i f f r a c t i o n a n g l e . The

i f f r a c

t i o n s

a t 3 8 . 5 , 4 4 ,

6 4 . 5 ,

a n d

7 2 c a n b e i n d e x e d t o t h e ( 1 1 1 ) ,

( 2 0 0 ) , ( 2 2 0 ) ,

a n d

3 1

1 )

p l a n e s

o f

h e

f a c e - c e n t e r e d

c u b i c ( f c c )

s i l v e r , r e s p e c t i v e l y . The XRD a t t e r n i nd i c a t e s t h a t

t h e

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s f o r m e d by t h e r e d u c t i o n o f

Ag+

i o n s a r e c r y s

t a l l i n e i n n a t u r e .

The

a r t i c l e s i z e i s

e s t i m a t e d

t o b e

a p p r o x i

m a t e l y 3 2

nm, a s e d o n t h e

i n e

W i d t h o f h e

( 1

1

1 ) XRD

e a k .

[ 0 0 2 8 ]

F I G .

5 s h o W s e x a m p l e e f ? c i e n c i e s o f v a r i o u s meth

o d s f o r

p r o d u c i n g

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s . As

l l u s t r a t e d i n F I G .

5 , the e f ? c i e n c y

o f

p r o d u c i n g

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s W i t h PC A

7/25/2019 Us 20110274736

12/13

US 011/0274736

A 1

( l i n e c ) i s

s i g n i ? c a n t l y

b e t t e r t h a n t h e f u n g a l ( l i n e a ) a n d

b a cterial

( l i n e b )

e x tracts b a s e d

on h e

SPR

e a k

i n te n sity

a t

420 nm, Which i n d i c a t e s

t h e

amount

o f

sil ver


T h e t r a n s m i s s i o n

e l e c t r o n

m i c r o s c o p y (TEM) a n a l y s i s o f

P C A - b a s e d

i l v e r


W a s

p e r f o r m e d

b y

d r o p - c o a t

i n g o f t h e n a n o p a r t i c l e s s o l u t i o n on c a r b o n - c o a t e d c o p p e r

TEM r i d s ( 4 0 p . m > < 4 0 um

mesh

i Z e ) . TEM e a s u r e m e n t s

Wer e performed s i n g a n e l e c t r o n

m i c r o s c o p e

o p e r a t e d a t an

a c c e l e r a t i n g

v o l t a g e

o f 1 0 0

k V . A e p r e s e n t a t i v e

TEM

m a g e

r e c o r d e d

from t h e

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e

?lm

d e p o s i t e d on a

c a r b o n - c o a t e d

c o p p e r TEM

r i d

i s shoWn n F I G . 6 .

[ 0 0 2 9 ]

The i m a g e o f F I G . 6 s h o W s t h e i n d i v i d u a l

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s o f v a r y i n g m o r p h o l o g y i n the s i Z e r a n g e o f . 5

nm

o

3 6 . 8 nm.

The s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s shoWn

i n

FIG. 6

a p p e a r t o b e

m o n o d i s p e r s e d

W i t h n o s i g n i ? c a n t a g g r e g a t i o n ,

W h i c h

i nd i c a t e s

t h e s t a b i l i t y

o f

t h e

s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s upon

i n t e r a c t i o n

W i t h PCA.

T h i s

i s

c o n s i s t e n t

W i t h

t h e U V - V i s i b l e

s p e c t r o s c o p y measurements shoWn i n F I G S .

3

and 5 ,

and

r e a ? i r m s t h e c h a r a c t e r i s t i c o f

W e l l - d i s p e r s e d s i l v e r

n a n o p a r

t i c l e s r e s u l t i n g f r o m t h e

p r o c e d u r e s d i s c u s s e d h e r e i n .

[ 0 0 3 0 ] The i l v e r

n a n o p a r t i c l e s W e r e

a l s o e x a m i n e d u s i n g

a n

a t o m i c f o r c e

m i c r o s c o p e (AFM) r u n n i n g

i n n o n - c o n t a c t

t a p p i n g m o d e . C h a r a c t e r i z a t i o n

W a s

p e r f o r m e d b y o b s e r v i n g

p a t t e r n s o n t h e s u r f a c e

t o p o g r a p h y

a n d b y s t u d y i n g

d a t a p r o

v i d e d b y the AFM. a p p i n g

mode

m a g i n g

W a s

i m p l e m e n t e d

i n a m b i e n t i r by s c i l l a t i n g

t h e

c a n t i l e v e r a s s e m b l y t

o r

n e a r

t h e

c a n t i l e v e r s r e s o n a n t

f r e q u e n c y

u s i n g

a

p i e Z o e l e c t r i c c r y s

t a l . The o p o g r a p h i c a l

i m a g e s

W e r e o b t a i n e d

i n

t a p p i n g mode

a t a resonance r e q u e n c y of 18

kHZ.

The a v e r a g e s i Z e of h e

s i l v e r n a n o p a r t i c l e s Was determined o be 38 nm, based onuse

o f

h e

WSxM

o f t W a r e a p p l i c a t i o n . TheWSxM p p l i c a t i o n

p e r f o r m s d a t a

a c q u i s i t i o n

a n d p r o c e s s i n g

i n s c a n n i n g

p r o b e

m i c r o s c o p y ( S P M ) , a n d i s a va i l a b l e f r o m N a n o t e c

E l e c

tr o n ica S . L .

i n

M a d r i d , S p a i n .

[ 0 0 3 1 ] F I G . 7 s h o W s a n e x a m p l e U V - V i s i b l e a b s o r p t i o n

s p e c t r a

f o r

s i l v e r


p r o d u c e d

b y

p h e n a Z i n e - 1

c a r b o x a m i d e

(PCN)

n s t e a d o f PCA.

The

i n e s

shoWn

n F I G .

7

r e p r e s e n t

t i m e o f i n c u b a t i o n : l i n e

a

i s a p p r o x i m a t e l y

1 5

m i n u t e s , l i n e

b i s a p p r o x i m a t e l y

3 0 m i n u t e s , l i n e

c i s

a p p r o x i

m a t e l y o n e h o u r ,

and i n e d s a p p r o x i m a t e l y tWo h o u r s .

[ 0 0 3 2 ] F I G . 8


c o m p a r i s o n o f t h e p r o d u c

t i o n o f i l v e r n a n o p a r t i c l e s u s i n g PCA

l i n e

a )

a n d PCN

l i n e

b ) . As shoWn i n F I G .

8 ,

PCN r o d u c e s s l i g h t l y more i l v e r

n a n o p a r t i c l e s t h a n m e t h o d s u s i n g

P C A .

T h e c o m p a r i s o n

s h o W n n

t h i s

? g u r e r e p r e s e n t s s i l v e r

n a n o p a r t i c l e

p r o d u c t i o n

a f t e r a p p r o x i m a t e l y tWo h o u r s o f i n c u b a t i o n .

EXAMPLE

[ 0 0 3 3 ] T h i s

e x a m p l e

p r o d u c e s

s i l v e r


i n a n

a q u e o u s

medium

s i n g p h e n a Z i n e - 1 - c a r b o x y l i c a c i d ( P C A )

p r o d u c e d

b y

b a c t e r i a

P s e u d o m o n a s

a e r u g i n o s a

s t r a i n

NJ-101.

The

a c t e r i a

Were

maintained

on u t r i e n t agar l a n t s .

Upon c h i e v i n g b a c t e r i a l g r o W t h

i n

L u r i a - B e r t a n i b r o t h ( p H

7 . 2 )

a t

3 7 C . f o r 1 8

h o u r s , t h e

s l a n t s

Were

p r e p a r e d and

p r e s e r v e d t 1 0

C . ,

a n d c r y o p r e s e r v e d

as

g l y c e r o l

c u l t u r e s

a t

200

C .

[ 0 0 3 4 ] S t a r t i n g m a t e r i a l Was o b t a i n e d f r o m l a t e l o g p h a s e

c u l t u r e s a f t e r 24 h o u r s o f

i n c u b a t i o n

a t 2 8 0 C . B a c t e r i a l b i o

mass

Was groWn

i n

a

1000

ml

Erlenmeyer ?ask

c o n t a i n i n g

5 0 0 ml f

u r i a - B e r t a n i b r o t h

(pH . 2

+ / 0 . 2 ) ,

modi?ed

i t h

1 . 5 % g l u c o s e a n d

1

mM

r y p t o p h a n .

The

acterial b i o m a s s

Was maintained

t

280 C .

and o n s t a n t l y

a g i t a t e d

on a

r o t a r y

s h a k e r a t 200 rpm f o r 48 h o u r s . The b a c t e r i a l biomass Was

s e p a r a t e d f r o m

the

c u l t u r e

b r o t h

a t d i f f e r e n t t i m e p e r i o d s b y

N o v .

1 0 ,

2 0 1 1

c e n t r i f u g a t i o n a t 5000

rpm

f o r 1 0 m i n u t e s a t 2 0 0

C .

The

s u p e r n a t a n t ( 5 0 0 m l ) Was a c i d i ? e d

W i t h c o n c e n t r a t e d

HCl o

a c h i e v e a

pH f 2 . 0 .

HPLC

r a d e benZene

Was

added

in t h e

volume a t i o o f 1 : 1 a n d mixed h o r o u g h l y .

The

i x t u r e

t h e n

Was

c e n t r i f u g e d

a t 5000

rpm

o r

1 5 m i n u t e s .

The

o p o r g a n i c

p h a s e W a s p o o l e d a n d e v a p o r a t e d t o

d r y n e s s .

[ 0 0 3 5 ] The d r i e d y e l l o W

e x t r a c t e d m a t e r i a l

Was d i s s o l v e d

i n d e i o n i Z e d

M i l l i

Q a t e r t o

o b t a i n

a y e l l o W

c o l o r e d

PCA

s o l u t i o n . A d d i t i o n o f 100

1 1

o f PCA o l u t i o n

to

100 ml o f

mM

g N O 3 o l u t i o n i n a

500 ml

r l e n m e y e r ? a s k

r e s u l t e d

i n

a c o l o r c h a n g e f r o m

y e l l o W t o

r e d d i s h - b r o W n , Which i s

i n d i c a t i v e

o f

i n s t a n t s i l v e r n a n o p a r t i c l e s y n t h e s i s .

The

r e a c

t i o n Was e l a t i v e l y f a s t d u r i n g t h e

? rst

t W o h o u r s ,

t h e n

g r a d u

a l l y s l o W e d a n d

a t t a i ne d e q u i l i b r i u m

a f t e r 7 2

h o u r s .

[ 0 0 3 6 ] The e d o x

p o t e n t i a l

o f t h e PCA as a s s e s s e d u s i n g

c y c l i c v o l t a m e t r y . A t r e g u l a r

t i m e p o i n t s ,

a l i q u o t s o f 1

m l

Were

c o l l e c t e d and monitored f o r

S u r f a c e

Plasmon

Reso

nance o f s i l v e r n a n o p a r t i c l e s .

The

r e d d i s h - b r o W n

aqueous

s o l u t i o n

Was r e e Z e - d r i e d ,

a n d t h e

r e s u l t i n g

poWder f

i l v e r


Was

s t o r e d a t room

t e m p e r a t u r e .

The

poWder

s a m p l e s W e r e

a n a l y Z e d

b y U V - V i s i b l e s p e c t o p h o t o m e t r y ,

X - r a y d i f f r a c t i o n

( X R D ) ,

t r a n s m i s s i o n

e l e c t r o n m i c r o s c o p y

( T E M ) ,

a n d a t o m i c

f o r c e m i c r o s c o p y .

EXAMPLE

[ 0 0 3 7 ]

T h i s

e x a m p l e p r o d u c e s s i l v e r n a n o p a r t i c l e s i n a n

a q u e o u s medium

s i n g p h e n a Z i n e - 1 - c a r b o x y l i c acid

( P C A )

p r o d u c e d b y b a c t e r i a P s e u d o m o n a s

a e r u g i n o s a s t r a i n

N J - 1 0 1 . T h i s

e x a m p l e

u s e d

b a c t e r i a l

c u l t u r i n g s i m i l a r

t o

Example

,

d i s c u s s e d a b o v e . B a c t e r i a l b i o m a s s

i s

groWn n a

5 0 0 ml

E r l e n m e y e r ? a s k

c o n t a i n i n g 1 0 0 ml o f L u r i a b r o t h

With o n t i n u o u s s h a k in g on r o t a r y

s h a k e r

at

200

rpm

o r

48

h o u r s a t 2 8 0 C .

The

biomass Was s e p a r a t e d from

t h e

c u l t u r e

b r o t h by

c e n t r i f u g a t i o n

a t 3000 rpm o r 1 0 m i n u t e s

a t

2 0 0

C .

The

s u p e r n a t a n t

( 1 0 0

m l )

Was

t r e a t e d

W i t h

a 1

mM

g N O 3

s o l u t i o n in a

500

ml

Erlenmeyer ?ask f o r 72 h o u r s W i t h

c o n s t a n t s t i r r i n g .

[ 0 0 3 8 ]

The

c o l o r

o f t h e

a q u e o u s

medium c h a n g e d f r o m

p a l e y e l l o W t o r e d d i s h - b r o W n a f t e r t W o h o u r s , a n d t h e

c o l o r

i n t e n s i t y

i n c r e a s e d f o r

a

t i m e p e r i o d

up o

7 2

h o u r s .

At

e g u l a r

t i m e

p o i n t s ,

a l i q u o t s

o f

ml

Were o l l e c t e d

a n d

m o n i t o r e d f o r

S u r f a c e Plasmon

e s o n a n c e

o f i l v e r


A f t e r 4 8

h o u r s , t h e

r e d di s h - b r o W n a q u e o u s

s o l u t i o n

Was r e e Z e - d r i e d ,

a n d t h e r e s u l t i n g

poWder f i l v e r


Was

s t o r e d t

room

t e m p e r a t u r e . T h e p o W d e r

s a m p l e s W e r e a n a l y Z e d b y

X - r a y

d i f f r a c t i o n ( X R D ) ,

t r a n s m i s s i o n

e l e c t r o n m i c r o s c o p y

( T E M ) ,

a n d a t o m i c f o r c e

m i c r o s c o p y .

The

a n t i m i c r o b i a l

a c t i v i t y Was

e t e r m i n e d t n e u t r a l

pH s i n g t h e a g a r

d i f f u s i o n

m e t h o d .

C o n c l u s i o n

[ 0 0 3 9 ] A l t h o u g h

the m e t h o d s o r

p r o d u c i n g s i l v e r

n a n o p a r

t i c l e s

h a v e

b e e n d e s c r i b e d i n l a n g u a g e s p e c i ? c t o s t r u c t u r a l

f e a t u r e s a n d /

r

m e t h o d o l o g i c a l

o p e r a t i o n s o r a c t i o n s ,

i t i s

u n d e r s t o o d h a t the i m p l e m e n t a t i o n s d e ? n e d n t h e

a p p e n d e d

c l a i m s a r e n o t

n e c e s s a r i l y l i m i t e d t o t h e s p e c i ? c

f e a t u r e s o r

a c t i o n s d e s c r i b e d . R a t h e r , t h e s p e c i ? c e a t u r e s a n d o p e r a t i o n s

o f

p r o d u c i n g s i l v e r n a n o p a r t i c l e s

a r e

d i s c l o s e d

a s

e x e m p l a r y

f o r m s

o f

i m p l e m e n t i n g

t h e

c l a i m e d

s u b j e c t m a t t e r .

1 . A ethod f r o d u c i n g s i l v e r n a n o p a r t i c l e s ,

t h e

method

c o m p r i s i n g :

p r e p a r i n g a l i q u i d s o l u t i o n c o n t a i n i n g p h e n a Z i n e - 1 - c a r

b o x y l i c a c i d ;

a n d

7/25/2019 Us 20110274736

13/13

US 011/0274736

A 1

a d d i n g

s i l v e r m e t a l s a l t t o t h e l i q u i d s o l u t i o n t o p r o d u c e a

p l u r a l i t y

o f i l v e r


2 . A

ethod

s r e c i t e d i n c l a i m 1 f u r t h e r c o m p r i s i n g

i n c u

b a t i n g

t h e

c o m b i n e d s i l v e r

m e t a l s a l t

a n d l i q u i d so l u t i o n

f o r


tWo

h o u r s

a t


C .

3 .

A

ethod s

r e c i t e d

i n c l a i m 1

f u r t h e r c o m p r i s i n g

i n c u

b a t i n g

t h e combined i l v e r m e t a l s a l t a n d l i q u i d s o l u t i o n a t


C . i n a

d a r k e n v i r o n m e n t .

4 . A

ethod a s r e c i t e d

i n

c l a i m

1 Wherein h e s i l v e r

m e t a l

s a l t

i s

AgNO3.

5 . A

ethod

a s r e c i t e d i n c l a i m 1 Wherein a d d i n g s i l v e r

m e t a l

s a l t i n c l u d e s a d d i n g a q u a n t i t y

o f i l v e r m e t a l

s a l t

t o

t h e

l i q u i d s o l u t i o n t h a t

p r o d u c e s

a s i l v e r

m e t a l

s a l t

c o n c e n t r a t i o n

o f 1 0 - 3

M

n

t h e

l i q u i d

s o l u t i o n .

6 . A

ethod

a s r e c i t e d i n c l a i m 1 Wherein

p r e p a r i n g

t h e

l i q u i d s o l u t i o n i n c l u d e s :

p r e p a r i n g a ? r s t s o l u t i o n o f

a c t e r i a

Pseudomonas a e r u g i

nosa s t r a i n NJ-101 and u r i a - B e r t a n i b r o t h ;

r e c o v e r i n g

t h e

s u p e r n a t a n t f r o m

t h e

? r s t s o l u t i o n ;

a c i d i f y i n g t h e s u p e r n a t a n t ;

a d d i n g

b e n Z e n e t o t h e s u p e r n a t a n t ; e v a p o r a t i n g t h e s u p e r

n a t a n t

t o

o b t a i n

p h e n a Z i n e - 1 - c a r b o x y l i c

a c i d c r y s t a l s ;

and

d i s s o l v i n g

t h e

p h e n a Z i n e - 1 - c a r b o x y l i c a c i d

c r y s t a l s

i n

deioniZed

a t e r .

7 . A

ethod

s r e c i t e d i n c l a i m

6

f u r t h e r c o m p r i s i n g ? l t e r

i n g

the

s o l u t i o n o f


a c i d c r y s t a l s a n d

deioniZed

a t e r .

8 . A ethod s r e c i t e d

i n

c l a i m

1

f u r t h e r c o m p r i s i n g

f r e e Z e

d r y i n g the l i q u i d

s o l u t i o n

t o h a r v e s t t h e p l u r a l i t y o f s i l v e r


9 . A ethod a s r e c i t e d i n

c l a i m

1 Wherein t h e method s

performed

t

a n a m b i e n t

t e m p e r a t u r e .

1 0 . A

ethod

a s

r e c i t e d

i n

c l a i m

1 Wherein t h e s i l v e r

n a n o p a r t i c l e s a r e

W a t e r - s o l u b l e

s i l v e r


1 1 . S i l v e r

n a n o p a r t i c l e s p r o d u c e d

b y

t h e

m e t h o d

o f

c l a i m

1 .

N o v .

1 0 ,

2 0 1 1

1 2 . A method o f

p r o d u c i n g

s i l v e r n a n o p a r t i c l e s ,

t h e

m e t h o d

c o m p r i s i n g :

p r e p a r i n g

a l i q u i d s o l u t i o n c o n t a i n i n g a r e d o x - a c t i v e

p h e n a Z i n e m e t a b o l i t e ;

a d d i n g

s i l v e r

m e t a l

s a l t

t o

t h e

l i q u i d s o l u t i o n ;

a n d

i n c u b a t i n g

t h e l i q u i d s o l u t i o n

t a n a m b i e n t t e m p e r a t u r e

t o

p r o d u c e a p l u r a l i t y o f i l v e r n a n o p a r t i c l e s .

1 3 . A ethod

a s

r e c i t e d

i n c l a i m 1 2

Wherein t h e redox

a c t i v e p h e n a Z i n e m e t a b o l i t e i s


a c i d .

1 4 . A ethod

a s r e c i t e d i n c l a i m 1 2

Wherein t h e redox

a c t i v e

p h e n a Z i n e

m e t a b o l i t e i s p h e n a Z i n e - 1 - c a r b o x a m i d e .

1 5 .

A ethod a s r e c i t e d i n c l a i m 1 2

Wherein t h e

redox

a c t i v e

p h e n a Z i n e

m e t a b o l i t e i s

p r o d u c e d from a b a c t e r i a .

1 6 .

A ethod s r e c i t e d

i n

c l a i m 15

Wherein h e

b a c t e r i a i s

P s e u d o m o n a s a e r u g i n o s a s t r a i n

N J - 1 0 1 .

1 7 . A

ethod

a s r e c i t e d i n c l a i m 1 2 Wherein a d d i n g s i l v e r

m e t a l

s a l t i n c l u d e s a d d i n g

a

q u a n t i t y o f

i l v e r m e t a l

s a l t

t o

t h e

l i q u i d s o l u t i o n t h a t

p r o d u c e s

a

s i l v e r m e t a l

s a l t

c o n c e n t r a t i o n

o f 1 0 ' 3

M

n t h e l i q u i d s o l u t i o n .

1 8 .

A

ethod as

r e c i t e d i n

c l a i m

1 2 f u r t h e r c o m p r i s i n g

f r e e z e - d r y i n g t h e

l i q u i d

s o l u t i o n t o h a r v e s t t h e p l u r a l i t y o f

s i l v e r


1 9 .

S i l v e r n a n o p a r t i c l e s p r o d u c e d

b y

t h e m e t h o d o f

c l a i m

1 2 .

2 0 .

A e t h o d

o f

i n h i b i t i n g

m i c r o o r g a n i s m

g r o W t h ,

t h e

m e t h o d c o m p r i s i n g :

p r e p a r i n g

a

l i q u i d

s o l u t i o n

c o n t a i n i n g p h e n a Z i n e - 1 - c a r

b o x y l i c

a c i d ;

a d d i n g

s i l v e r m e t a l s a l t t o t h e l i q u i d s o l u t i o n to p r o d u c e a

p l u r a l i t y

o f i l v e r

n a n o p a r t i c l e s ;

h a r v e s t i n g

t h e p l u r a l i t y o f

i l v e r

n a n o p a r t i c l e s ; a n d

d i s t r i b u t i n g a t l e a s t a p o r t i o n o f t h e h a r v e s t e d

s i l v e r nano

p a r t i c l e s

i n

a r e g i o n

t o

i n h i b i t

m i c r o o r g a n i s m g r o W t h

i n

t h a t

r e g i o n .

2 1 .

A ethod s

r e c i t e d

i n

c l a i m 20 Wherein i s t r i b u t i n g

at

l e a s t a p o r t i o n o f t h e h a r v e s t e d s i l v e r n a n o p a r t i cl e s i n c l u d e s

e m b e d d i n g

s i l v e r


i n t o

a n

o b j e c t .

* * * * *

us 20110274736

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