vaccinium myrtillus l.: une plante médicinale à
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Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agraveanthocyanosides
Olivia Maillefert
To cite this versionOlivia Maillefert Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides Sciences phar-maceutiques 2010 dumas-00593157
UNIVERSITE JOSEPH FOURIER
FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE
Anneacutee 2010 Ndeg
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
THESE
PRESENTEE POUR LrsquoOBTENTION DU TITRE DE DOCTEUR EN PHARMACIE
DIPLOcircME DrsquoETAT
OLIVIA MAILLEFERT
Neacutee le 13 Feacutevrier 1982 A Chambeacutery
THESE SOUTENUE PUBLIQUEMENT A LA FACULTE DE PHARMACIE DE
GRENOBLE
Le 19 Mai 2010
DEVANT LE JURY COMPOSE DE
Preacutesident du jury M KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences
en Botanique
Membres
Mr CHOVELON Michel Docteur en pharmacie
Mr CORJON Gilles Docteur en pharmacie
UNIVERSITE JOSEPH FOURIER
FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE
Anneacutee 2010 Ndeg
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
THESE
PRESENTEE POUR LrsquoOBTENTION DU TITRE DE DOCTEUR EN PHARMACIE
DIPLOcircME DrsquoETAT
OLIVIA MAILLEFERT
Neacutee le 13 Feacutevrier 1982 A Chambeacutery
THESE SOUTENUE PUBLIQUEMENT A LA FACULTE DE PHARMACIE DE
GRENOBLE
Le 19 Mai 2010
DEVANT LE JURY COMPOSE DE
Preacutesident du jury M KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences
en Botanique
Membres
Mr CHOVELON Michel Docteur en pharmacie
Mr CORJON Gilles Docteur en pharmacie
REMERCIEMENTS
A Monsieur Serge Krivobok
Merci de tout mon cœur pour votre soutien et votre aide dans la reacutealisation de ce travail Vous
mrsquoavez offert votre temps et vos encouragements et ccedila je ne lrsquooublierai jamais
A Monsieur Michel Chovelon
Merci drsquoavoir donneacute de votre temps et de faire partie de mon jury
A Monsieur Gilles Corjon
Je vous remercie drsquoavoir accepteacute si geacuteneacutereusement de faire partie de mon jury
A Monsieur et Madame Berendsen
Je vous remercie pour votre compreacutehension et votre gentillesse
A mes parents
Merci drsquoavoir toujours eacuteteacute lagrave pour moi de mrsquoavoir soutenue dans les moments difficiles Jrsquoai
beaucoup de chance de vous avoir Je vous aime
A mes grands-parents
Que dire si ce nrsquoest que je vous aime
A toute ma famille
Vous comptez tellement pour moi
A mes amis
Merci pour tous ces fous rires et tous les bons moments que nous avons partageacutes Vous avez
toujours eacuteteacute lagrave dans les moments de joie et de peine
A Fabien
Tu es mon avenir et je souhaite de tout cœur qursquoil soit magnifique
A mon grand-pegravere Roger
Jrsquoaurai tant voulu que tu sois lagrave aujourdrsquohui Tu es preacutesent dans mon cœur je pense agrave toi
chaque jour Tu me manques
TABLE DES MATIERES
Liste des tableaux p1
Liste des figures p2
Liste des abreacuteviations p3
Glossaire p4
Introduction et historique p6
Premiegravere partie Botanique de Vaccinium myrtillus L p7
I Classification botanique de la myrtille p8
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees p8
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium p10
3 Vaccinium myrtillus L ou myrtille sauvage p10
31 Description botanique p10
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille p13
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium p13
41 Vaccinium uliginosum L p13
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo p14
43 Vaccinium macrocarpon L p16
II Culture reacutecolte et production des myrtilles p17
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques p17
11 pH du sol p17
12 Conditions climatiques p17
13 Besoins en eau p17
2 Reacutecolte des myrtilles p18
21 Date et mode de reacutecolte p18
3 Production des myrtilles p19
31 Production mondiale p19
32 Production europeacuteenne p19
33 Production franccedilaise p19
4 Post-reacutecolte p20
41 Conservation p20
42 Conditionnement p20
Deuxiegraveme partie Composition chimique de Vaccinium myrtillus L p21
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus p22
1 Identification macroscopique et microscopique p22
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus p22
21 Composition chimique des feuilles p22
22 Composition chimique des fruits p23
II Anthocyanosides p24
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes p24
2 Structure des anthocyanosides p25
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides p26
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides p27
41 Extraction p27
42 Seacuteparation et identification p27
43 Dosage des anthocyanosides p27
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p28
51 Composition en anthocyanosides p28
52 Donneacutees quantitatives p29
53 Donneacutees qualitatives p29
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus p29
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p30
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus p34
1 Acides pheacutenoliques p34
2 Tanins p34
3 Flavonols p35
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans V myrtillus p35
Troisiegraveme partie Inteacuterecircts theacuterapeutiques de Vaccinium myrtillus L p36
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire p37
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur p37
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire p37
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires p39
2 Activiteacute vasoprotectrice p40
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique p40
22 Action sur la reacutesistance capillaire p41
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme p41
24 Action antiatheacuterogegravenique p42
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice p42
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA) p43
5 Action sur lrsquoangiogenegravese p44
II Action de Vaccinium myrtillus dans le stress oxydant p45
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes p45
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p46
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides p46
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma p47
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides p47
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces reacuteactives
azoteacutees p48
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique p49
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines p50
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie p51
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie p51
32 Etudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques p51
4 Effet de Vaccinium myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives
et le vieillissement p53
41 Effets sur un stress eacutemotionnel p53
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication
du stress oxydant p54
5 Effet de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB p56
51 Effets drsquoune exposition solaire p56
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires p56
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire p57
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes p57
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire p58
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge p59
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus p61
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant
un stress oxydant p61
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus p62
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer p62
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus p63
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine p65
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases p66
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes p66
42 Etude de Teller et coll (2009) p66
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision p67
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale p68
2 Eacutetude chez des sujets myopes p69
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004) p70
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique p72
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes p72
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete p73
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine p73
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques p74
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac p74
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique p74
2 Action sur Helicobacter pylori p76
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus p76
1 Action antibacteacuterienne p76
VIII Toxicologie p77
1 Effets indeacutesirables p77
2 Doses leacutetales 50 (DL50) p78
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus p79
Quatriegraveme partie Utilisations de Vaccinium myrtillus L p80
I Utilisations alimentaires p81
1 Utilisations culinaires p81
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire p81
II Utilisations pharmaceutiques p82
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille p83
11 Meacutedicaments allopathiques p83
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques p84
13 Compleacutements alimentaires p85
Conclusion p87
Bibliographie p89
Liste des Annexes p98
Annexe I p99
Annexe II p101
Annexe III p104
Annexe IV p107
1
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
2
LISTE DES FIGURES
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme
3
LISTE DES ABREVIATIONS
AA allyl alcool
ADP adeacutenosine diphosphate
AMPc adeacutenosine monophosphate cyclique
DMLA deacutegeacuteneacuterescence maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge
ECA enzyme de conversion de lrsquoangiotensine
EDRF endothelium-derived relaxing factorfacteur relaxant deacuteriveacute lrsquoendotheacutelium
ERO espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
GAGs glycosaminoglycanes
GSH glutathion
H2O2 peroxyde drsquohydrogegravene
IC50 Inhibitory Concentration 50concentration inhibitrice agrave 50
IEC inhibiteur de lrsquoenzyme de conversion
IGF insulin-like growth factor
LDLs low-density lipoproteins lipoproteacuteines de basse densiteacute
MDA malondialdeacutehyde
NO monoxyde drsquoazote radicalaire
O2- anion superoxyde
OH radical hydroxyle
PGI2-like prostacyclin-like
PLCγ phospholipase Cγ
RTK reacutecepteur agrave activiteacute tyrosine kinase
tBH tert-butylhydroperoxyde
TBRAs thiobarbituric acid reactive substancessubstances reacuteagissant avec lrsquoacide
thiobarbiturique
UV ultraviolet
VEGF vascular endothelial growth factorfacteur de croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire
XOD xanthine oxydase
4
GLOSSAIRE
Termes botaniques
Actinomorphe se dit dune fleur preacutesentant une symeacutetrie axiale
Adneacute soudeacute ou attacheacute agrave sapplique agrave des organes diffeacuterents comme par exemple des
eacutetamines adneacutees au peacuterianthe
Aneacutemogame qualifie le mode de feacutecondation des plantes dans lequel le pollen est porteacute par
le vent
Anthegravere partie de leacutetamine habituellement porteacutee par le filet contenant le pollen celui-ci
est libeacutereacute lorsque souvre cette terminaison renfleacutee sous forme de petit sac oblong
geacuteneacuteralement jaune et double
Campanuleacute se dit dune fleur en forme de cloche
Capiteacute termineacute en tecircte arrondie
Carpelles organe femelle Lensemble des carpelles forme le pistil (ou gyneacuteceacutee)
Dialypeacutetale dont les peacutetales sont indeacutependants les uns des autres
Hermaphrodite plante portant des organes floraux macircle et femelle
Infundibuliforme se dit dune fleur dont la corolle est en forme dentonnoir
Ligneux se dit des veacutegeacutetaux formant du bois arbres et arbustes mais aussi un certain
nombre de plantes grimpantes
Lobeacute se dit dun organe comme feuille ou peacutetale eacutechancreacute mais sans division complegravete
Loculicide qui souvre en se fendant longitudinalement le long de la nervure dorsale de
chaque loge
Marcotte organe veacutegeacutetal aeacuterien qui srsquoenterre et srsquoenracine avant de se seacuteparer (ou drsquoecirctre
seacutepareacute) de la plante megravere
Peacuterianthe ensemble des piegraveces florales non sexueacutees dune fleur
Septicide qualifie un fruit qui souvre en se fendant longitudinalement au niveau des
cloisons (septums) et seacuteparant ainsi les carpelles
Stomate structure foliaire organiseacutee ayant des meacutecanismes drsquoouverture reacuteversibles
permettant les eacutechanges gazeux
5
Teacutenuinucelleacute se dit dun ovule contenant un nucelle peu deacuteveloppeacute (dans les groupes
eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Uniteacutegumenteacute se dit dun ovule ayant une seule enveloppe autour du nucelle (dans les
groupes eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Urceacuteoleacutee corolle en forme de tube dilateacute agrave la base et reacutetreacutecit au sommet
Zygomorphe se dit dune plante preacutesentant une symeacutetrie par rapport agrave un plan
Autres
Astheacutenopie fatigue de loeil surtout lors daccommodation soutenue et qui provoque des
signes dirritation une sensation de brucirclure et des maux de tecircte
Meacutesopique Caracteacuteristique visuelle du systegraveme oculaire utilisant agrave la fois bacirctonnets et cocircnes
pour interpreacuteter une scegravene visuelle dont lintensiteacute lumineuse est comprise entre celle du jour
et de la nuit (creacutepusculaire)
Reacutetinite pigmentaire maladie heacutereacuteditaire deacutegeacuteneacuterative des cellules visuelles reacuteceptrices de
la lumiegravere (cocircnes et bacirctonnets)
Sensibiliteacute au contraste elle est baseacutee sur la capaciteacute du systegraveme visuel agrave deacutetecter des
diffeacuterences de luminances donc de deacuteterminer lexistence de bords entre surfaces
homogegravenes
Scotopique vision nocturne se basant principalement sur linformation capteacutee par les
bacirctonnets
6
Introduction et historique
Dans une socieacuteteacute ougrave la phytotheacuterapie connait un engouement croissant voulant se rapprocher
au plus pregraves du laquo naturel raquo la connaissance des plantes aux vertus theacuterapeutiques est de plus
en plus rechercheacutee La myrtille sauvage ou Vaccinium myrtillus L appartient agrave la famille des
Ericaceacutees elle est lrsquoune des plantes centrales faisant partie de la liste des plantes meacutedicinales
inscrites agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition (liste A) et dont le fuit (sec et frais) fait
lrsquoobjet drsquoune monographie agrave la Pharmacopeacutee europeacuteenne (6egraveme
eacutedition) Lrsquoeacutetymologie du
genre Vaccinium est incertaine il deacuteriverait du nom latin vacca pour vache car la plante eacutetait
volontiers brouteacutee par les bovins mais pour drsquoautres du nom bacca pour baie (43) Le terme
myrtillus provient de la ressemblance avec les feuilles et les fruits du myrte (Myrtus
communis L) V myrtillus empreinte divers noms vernaculaires (airelle airelle noire airelle
anguleuse bluet brimbelle raisin des bois raisin de bruyegraverehellip) Les deacutesignations anglaises
pour la baie de myrtille sont bilberry fruit blueberry whortleberry pour les feuilles bilberry
leaf huckleberry leaf (67)
Ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques sont utiliseacutees dans la meacutedecine populaire depuis fort
longtemps Dioscoride est le premier agrave vanter les bienfaits de la myrtille dans le traitement de
la dysenterie Puis au XVIegraveme
siegravecle une religieuse et mystique allemande Sainte Hildegarde
de Bingen preacuteconisait la plante pour provoquer faciliter ou augmenter les regravegles (20)
Depuis de nombreuses proprieacuteteacutes sont attribueacutees au myrtillier en fonction de la partie de
plante utiliseacutee On utilisait les baies pour ses proprieacuteteacutes astringentes toniques antiseptiques
dans le traitement de la diarrheacutee des heacutemorroiumldes des inflammations gastro-intestinaleshellip
quant aux feuilles elles eacutetaient surtout utiliseacutees pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes (43)
Lrsquoameacutelioration de la vision nocturne par la myrtille a eacuteteacute rapporteacutee par les pilotes de la British
Royal Air Force qui en consommaient quotidiennement Certains usages precircteacutes agrave la myrtille
ont eacuteteacute valideacutes et figure dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la
monographie de la Commission E allemande (ces usages seront citeacutes dans cette thegravese) La
myrtille fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vivo in vitro et de quelques eacutetudes cliniques
(dans des domaines meacutedicaux varieacutes) dont certaines posent des interrogations Ses utilisations
sont diverses on lrsquoemploie en cuisine (pacirctisseries confitures vin vinaigrehellip) dans
lrsquoindustrie et dans le domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments agrave base de
myrtille et des compliments alimentaires
7
Premiegravere partie
Botanique de Vaccinium myrtillus L
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L (70)
8
I Classification botanique de la myrtille
Le taxon des Spermatophytes ou plantes agrave graines est constitueacute de deux clades les
Gymnospermes ou plantes agrave ovules nus et les Angiospermes ou plantes agrave ovaires
La myrtille (ou myrtillier) appartient agrave lrsquoembranchement des Angiospermes se distinguant des
Gymnospermes par plusieurs caractegraveres dont trois fondamentaux
- les organes reproducteurs se groupent en fleurs bisexueacutees
- les carpelles entourent complegravetement les ovules et se transforment apregraves
feacutecondation en fruit
- le gameacutetophyte femelle situeacute dans lrsquoovule nommeacute sac embryonnaire est le siegravege
drsquoune double feacutecondation lrsquoune donnant lrsquoembryon lrsquoautre conduisant agrave lrsquoalbumen (tissu de
reacuteserve des graines agrave 3n chromosomes)
Selon la classification systeacutematique la myrtille fait partie de la classe des Asteacuterideacutees
(Eudicots agrave peacutetales et carpelles soudeacutes) constitueacutee drsquoenviron 67000 espegraveces on distingue les
Asteacuterideacutees basales et les Euasteacuterideacutees I et II Les Asteacuterideacutees basales ont deux ordres fregraveres
les Ericales et les Cornales (25)
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees (22) (25) (30)
Lrsquoordre des Ericales dont le nom vient drsquoErica pour bruyegravere comprend 7000 espegraveces
reacuteparties en 24 familles dont celle des Ericaceacutees auxquelles appartient la myrtille Cette
famille est reacutepartie dans le monde entier mais avec une preacutefeacuterence geacuteographique pour les
reacutegions tempeacutereacutees ou froides voire mecircme les hautes montagnes De faccedilon geacuteneacuterale elle
regroupe des arbres des arbustes et des lianes aux caracteacuteristiques suivantes (Figure 2)
- des feuilles alternes simples entiegraveres agrave denteacutees-serreacutees dont les bords du limbe
peuvent se replier sur eux-mecircmes afin de proteacuteger les stomates porteacutes par la face infeacuterieure
de la transpiration Chez certaines Ericaceacutees les feuilles sont plates et coriaces ce qui leur
procure une reacutesistance agrave la seacutecheresse
- des fleurs le plus souvent hermaphrodites geacuteneacuteralement plus ou moins pendantes
actinomorphes agrave leacutegegraverement zygomorphes
- quatre ou cinq seacutepales libres agrave leacutegegraverement soudeacutes
les mots suivis de ce symbole ont leur deacutefinition dans le glossaire
9
- quatre ou cinq peacutetales soudeacutees constituant une corolle cylindrique ou urceacuteoleacutee
campanuleacutee ou infundibuliforme parfois dialypeacutetale Chez certains genres aneacutemogames
le peacuterianthe nrsquoest constitueacute que de deux ou trois seacutepales et peacutetales ou trois agrave quatre peacutetales
- huit agrave dix eacutetamines reacuteduites agrave deux ou trois chez les espegraveces aneacutemogames
- le filet des eacutetamines est libre ou adneacute agrave la corolle voire mecircme soudeacute Quelques fois
il peut y avoir une paire drsquoappendices en eacuteperon dresseacute srsquoinseacuterant agrave proximiteacute ou agrave lrsquoendroit
mecircme ougrave se trouve lrsquoanthegravere
- lrsquoanthegravere est constitueacute drsquoune ou de deux loges srsquoouvrant par deux pores libeacuterant les
grains de pollen habituellement disposeacutes en teacutetrades
- les carpelles sont au nombre de deux agrave dix agrave ovaire supegravere ou infegravere comme chez la
myrtille (crsquoest-agrave-dire que lrsquoovaire peut se souder agrave la coupe florale)
- un style avec souvent un creux agrave lrsquointeacuterieur
- un stigmate capiteacute ou faiblement lobeacute
- un ou plusieurs ovules par loge uniteacutegumenteacutes ou teacutenuinucelleacutes
- enfin le fruit peut ecirctre une capsule septicide ou loculicide une drupe agrave plusieurs
noyaux ou une baie comme chez la myrtille
4 ou 5 seacutepales agrave soudure ou adnation variable
4 ou 5 peacutetales soudeacutes
Soudure ou adnation variable
Ovaire infegravere
Ovaire supegravere Type de fruit
Symeacutetrie radiaire () 2 agrave 10 carpelles soudeacutees
ou 4 agrave 10 eacutetamines
Symeacutetrie bilateacuterale (X) Etamines adneacutees aux peacutetales
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees (30)
10
La famille des Ericaceacutees regroupe plusieurs genres et espegraveces dont le nombre varie selon la
litteacuterature de 70 agrave 130 genres et de 2000 agrave 3400 espegraveces Cette famille comprend
- des plantes alimentaires comme Vaccinium myrtillus L (myrtille) Vaccinium
uliginosum L (airelle des marais) Gaultheria procumbens L (theacute du Canada qui fournit le
salicylate de meacutethyle)hellip
- des plantes meacutedicinales comme V myrtillus Ledum palustre L (leacutedon des marais)
Calluna vulgaris L (bruyegravere callune)hellip
- des plantes utiliseacutees pour lrsquoobtention du bois comme Erica arborea L (fabrication
des pipes)
- de nombreuses espegraveces ornementales dans les genres Arbutus (arbousier) Erica
(bruyegravere) Rhododendron (azaleacutee)hellip
La famille des Ericaceacutees est constitueacutee de quatre sous-familles dont les Vaccinioiumldeacutees qui
englobent le genre Vaccinium
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium (22)
Le genre Vaccinium se caracteacuterise par plusieurs particulariteacutes botaniques
- des tiges drsquoaspect contourneacute conseacutequence drsquoune croissance tregraves lente
- des feuilles coriaces plates reacutesistantes agrave la seacutecheresse
- des anthegraveres srsquoouvrant par deux pores souvent munis de deux appendices dresseacutes en
forme de cornes
- un ovaire composeacute de cinq carpelles fermeacutes
- un fruit repreacutesenteacute par une capsule
Ce genre est lui-mecircme constitueacute drsquoenviron 150 espegraveces auquel fait partie la myrtille
Les myrtilles drsquoEurope regroupent deux espegraveces de myrtilles
- V uliginosum L
- V myrtillus L
3 Vaccinum myrtillus L ou myrtille sauvage
31 Description botanique (22) (67)
Le myrtillier (Vaccinum myrtillus L) est un sous-arbrisseau vivace atteignant 20 agrave 60 cm de
hauteur agrave tige verte dresseacutee cylindrique rigide et agrave rameaux vert pacircle anguleux aileacutes dans
leur longueur et plus ou moins grecircles Cette tige est recouverte drsquoune eacutecorce ligneuse sans
poil ni stipule ni latex ni vrille
11
Les racines souterraines sont nombreuses et forment un lacis tregraves serreacute proche du sol avec des
racines adventives La plante se perpeacutetue soit par ramification des tiges souterraines soit par
des bourgeons prenant naissance sur les racines elle est dite plante sociale car elle se
marcotte naturellement
Les feuilles (Figure 3) vert pacircle sont petites (1 agrave 2 cm voire 2 agrave 3 cm selon la litteacuterature)
alternes de forme oblongue agrave ovale agrave pointe fine et allongeacutee Le bord du limbe est finement
denteleacute avec des nervures opposeacutees Ces feuilles sont courtement peacutetioleacutees avec un peacutetiole
(tige portant la feuille) recourbeacute vers le bas Les feuilles prennent une belle couleur rouge-
cuivre en automne Elles sont caduques et reacuteapparaissent au printemps
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus (75)
Les fleurs de couleur blanc roseacute rouge pacircle agrave verdacirctre ont une corolle pendante comportant
quatre ou cinq peacutetales soudeacutes entre eux sur une grande longueur et formant un tube globuleux
agrave lobes courts Elles sont solitaires ou regroupeacutees par deux porteacutees par un peacutedoncule courbeacute
Les seacutepales tregraves petits verts sont soudeacutes agrave la corolle (Figure 4) La floraison a lieu en mai-
juin
12
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus (72)
Le fruit est une baie globuleuse de la taille drsquoun petit pois (diamegravetre variant de 4 agrave 8 mm)
bleu noir agrave maturiteacute cette baie preacutesente parfois des restes de style agrave la base et peut ecirctre
surmonteacutee du calice agrave son sommet formant un disque entoureacute drsquoun faible rebord (Figure 5)
On peut apercevoir agrave la base de la baie la cicatrice du peacutedoncule Le meacutesocarpe est charnu
constitueacute de 4 ou 5 petites loges contenant de multiples petites graines brillantes brun-rouge
La baie mucircrit jusqursquoen en juillet-aoucirct voire septembre
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus (72)
Si le fruit est frais la saveur est douce sucreacutee et leacutegegraverement aciduleacutee voire mecircme astringente
Le fruit sec par contre a une saveur aigre-douce leacutegegraverement astringente En ce qui concerne
les organes reproducteurs lrsquoovaire infegravere est soudeacute agrave la coupe florale Les eacutetamines eacutegales
entre elles deacutepassent la dizaine en nombre elles sont complegravetement libres soudeacutees au
reacuteceptacle elles peuvent ecirctre soit disposeacutees en plusieurs verticilles soit nrsquoavoir aucune
position bien deacutefinie
13
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille (67)
Vaccinium myrtillus est une myrtille sauvage tregraves peu cultiveacutee originaire drsquoEurope du Nord et
Centrale abondant dans les bois clairsemeacutes et les bruyegraveres sur les sols siliceux de montagne
En France on la trouve dans la plupart des massifs montagneux entre 400 et 2500 megravetres
drsquoaltitude (Figure 6)
Leacutegende
Preacutesent
Zone geacuteographique non renseigneacutee
Preacutesence non signaleacutee
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France (81)
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium
41 Vaccinium uliginosum L (22)
Vaccinium uliginosum L nommeacute myrtille de loup ou myrtille des marais se situe
principalement aux bords des marais dans les tourbiegraveres les landes et les bois humides On le
trouve en Dauphineacute dans le Jura les Pyreacuteneacuteeshellip et en Savoie jusqursquoagrave 2000 megravetres et plus
Crsquoest un buisson bas agrave moyen agrave tiges et rameaux arrondis dans leur longueur Ses feuilles
vert-pacircle au dessus nervureacutees au-dessous ne persistent pas en hiver Les fleurs (Figure 7)
sont disposeacutees en grappe de mai agrave juillet
14
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum (72)
Le fruit (Figure 8) drsquoun diamegravetre drsquoenviron 6 mm est bleu-noir pruineux donnant un jus
incolore et agrave chair blanche Sa saveur est fade et sucreacutee Il mucircrit en juillet-aoucirct voire mecircme
jusqursquoen septembre
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum (72)
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo (61)
Ce sont des myrtilles drsquoorigine ameacutericaine dont lrsquoimplantation a eacuteteacute faite essentiellement agrave
partir de Vaccinium corymbosum L (myrtillier geacuteant ou arbustif) Celui-ci est un arbuste
pouvant atteindre 25 megravetres de hauteur drsquoougrave son nom Il est reacutesistant au froid Ses
inflorescences forment un corymbe ougrave le nombre de fleurs par corymbe varie beaucoup
(Figure 9) La baie (Figure 10) est de couleur bleue recouvert de pruine qui masque une chair
blanche
15
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum (79)
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo (79)
La floraison apparait de mars agrave fin mai et dure plusieurs semaines Les feuilles (Figure 11)
prennent une belle coloration en automne ce qui en fait une magnifique plante deacutecorative
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum (79)
16
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage la myrtille drsquoorigine ameacutericaine a un fruit plus gros et
plus sucreacute Cette derniegravere a une pulpe non coloreacutee Plusieurs varieacuteteacutes existent classeacutees en
fonction de lrsquoeacutepoque de maturiteacute
- les varieacuteteacutes preacutecoces comme le Bluetta lrsquoEarlibluehellip
- les varieacuteteacutes demi-preacutecoces comme le Patriot le Collinshellip
- les varieacuteteacutes demi-saison comme le Bluejay le Bluecrophellip
- les varieacuteteacutes demi-tardives comme le Berkeley le Jerseyhellip
- les varieacuteteacutes tregraves tardives comme le Darrow lrsquoElliothellip
43 Vaccinium macrocarpon L (4)
Vaccinium macrocarpon Ait ou canneberge drsquoAmeacuterique (Figure 12) reacutesistant agrave de fortes
geleacutees de moins 35degC et plus est un arbrisseau ressemblant agrave la myrtille sa croissance est
lente Son fruit est une baie aciduleacutee utiliseacutee dans la preacutevention des reacutecidives drsquoinfections
urinaires car elle contient des moleacutecules anti-adheacutesines des fimbriae drsquoEscherichia coli
(bacteacuterie intestinale pouvant ecirctre la cause drsquoinfection urinaire)
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits (83)
Drsquoautres espegraveces de Vaccinium se rencontrent sur le continent ameacutericain comme
- Vaccinium angustifolium Ait (Bleuet nain) qui est un buisson bas infeacuterieur agrave 50 cm
reacutesistant au froid
- Vaccinium ashei Reade qui est un buisson haut (3 agrave 6 megravetres) reacutesistant agrave la
seacutecheresse
Il ya beaucoup drsquoautre espegraveces de Vaccinium que nous ne citerons pas ici
17
II Culture reacutecolte et production des myrtilles
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques
Comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment la myrtille de culture est diffeacuterente de la myrtille
sauvage exigeant des conditions optimales pour une bonne production
11 pH du sol (49) (61)
Le sol doit ecirctre acide et mecircme tregraves acide pour permettre une croissance et un deacuteveloppement
normal ainsi qursquoune bonne reacuteussite de culture pH compris entre 4 et 5 voire 4 agrave 52 selon la
litteacuterature Or ce type de sol nrsquoest pas freacutequent en France Le pH optimum est de 48 Si le pH
deacutepasse 55 les plantes sont chlorotiques et il faut soit diminuer le pH soit renoncer agrave une
telle culture Les sols humides doivent ecirctre eacuteviteacutes car les racines sont tregraves sensibles agrave
lrsquoasphyxie et le deacuteveloppement du systegraveme racinaire est limiteacute
12 Conditions climatiques (49) (61)
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage qui croit dans les landes et les sous-bois humides de
demi-montagne ougrave elle vit en colonie vers 1000 megravetres drsquoaltitude le myrtillier cultiveacute est une
plante de plaine et de faible altitude qui preacutefegravere les endroits ensoleilleacutes Ainsi une exposition
sud ou sud-ouest est conseilleacutee mais il faut faire attention agrave la seacutecheresse En raison des
risques de geleacutees printaniegraveres il faut eacuteviter les lisiegraveres de bois ou la profondeur des valleacutees
Cette plante peut ecirctre eacutegalement cultiveacutee en demi-montagne agrave une altitude comprise entre 600
et 800 megravetres Reacutesistante au froid elle peut supporter de basses tempeacuteratures jusqursquoagrave -30degC
Bien qursquoau cours de la floraison les fleurs peuvent supporter des tempeacuteratures neacutegatives (-
5degC) il faut faire attention car les deacutegacircts peuvent ecirctre tregraves importants surtout sur les varieacuteteacutes
sensibles Agrave lrsquoopposeacute le myrtillier craint la seacutecheresse en eacuteteacute et les vents secs
13 Besoins en eau (49) (61)
La myrtille cultiveacutee aime la proximiteacute de la surface de la nappe phreacuteatique mais craint les
excegraves en eau Ses besoins sont limiteacutes mais permanents tout le long de sa peacuteriode de vie (au
moins 1000 mm drsquoeau durant lrsquoeacuteteacute) Ceci peut srsquoexpliquer par le deacuteveloppement tregraves
superficiel de son systegraveme racinaire et lrsquoabsence de poils absorbants En Lorraine par
exemple le systegraveme drsquoirrigation est le laquo goutte agrave goutte raquo localiseacute permettant drsquoapporter les
doses neacutecessaires en eau et de limiter la contamination fongique Les besoins en eau par
semaine sont de 20 mm
18
Ainsi il faudra tenir compte de ces exigences pour choisir la meilleure exposition possible
2 Reacutecolte des myrtilles
21 Date et mode de reacutecolte (49) (22)
La croissance de la plante eacutetant lente la reacutecolte peut deacutebuter la 2egraveme
anneacutee apregraves la plantation
La production augmente reacuteguliegraverement jusqursquoagrave la 8egraveme
ou la 9egraveme
anneacutee en rapport avec le
deacuteveloppement veacutegeacutetatif La date de reacutecolte deacutepend beaucoup de la varieacuteteacute de lrsquoaltitude des
tempeacuteratures printaniegraveres et du mode de reacutecolte Elle srsquoeacutetend de mai agrave fin septembre voire mi-
juin pour les varieacuteteacutes les plus preacutecoces et fin septembre pour les varieacuteteacutes les plus tardives La
reacutecolte deacutebute lorsque 20 des baies sont mucircres En effet si la reacutecolte se fait trop tocirct les
fruits ne sont pas mucircres et seront de mauvaise qualiteacute En geacuteneacuteral la reacutecolte dure de 3 agrave 5
semaines avec plusieurs passages successifs (un ou plusieurs par semaine) pour une mecircme
varieacuteteacute au fur et agrave mesure de la maturation des fruits
La reacutecolte de la myrtille cultiveacutee se fait manuellement directement dans les barquettes pour
eacuteviter drsquoabicircmer les fruits avec une manipulation suppleacutementaire Ceci est diffeacuterent pour la
myrtille sauvage ougrave la reacutecolte se fait agrave lrsquoaide drsquoun instrument que lrsquoon nomme laquo peigne raquo
(Figure 13) dont il existe divers modegraveles (en bois ou en fer) constitueacutes drsquoune grille permettant
drsquoarracher vite et en quantiteacutes importantes les baies en les emprisonnant entre les dents
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages (78)
19
3 Production des myrtilles
31 Production mondiale (61)
Les Etats-Unis sont les premiers producteurs mondiaux de myrtilles suivis du Canada Ces
pays produisent deux types de myrtille des myrtilles sauvages appartenant majoritairement agrave
lrsquoespegravece Vaccinium angustifolium qui se rapproche de la myrtille europeacuteenne comme nous
lrsquoavons vu dans le chapitre preacuteceacutedent Son deacuteboucheacute est principalement la congeacutelation et la
transformation dont une partie est exporteacutee en Europe
Les myrtilles cultiveacutees aux USA sont principalement composeacutees de
- Vaccinium corymbosum
- des hybrides entre V corymbosum et V angustifolium
- des hybrides entre V ashei et V corymbosum
Ces myrtilles cultiveacutees sont commercialiseacutees majoritairement sur le marcheacute inteacuterieur et un
faible tonnage est exporteacute en Europe et surtout en Australie
En Europe de lrsquoEst et en Scandinavie la cueillette des myrtilles sauvages pour le commerce
ou lrsquoautoconsommation nrsquoest pas neacutegligeable
32 Production europeacuteenne (22) (61)
Crsquoest lrsquoAllemagne qui deacutetient les plus grandes surfaces de myrtilles cultiveacutees suivie par la
France et les Pays-Bas Elles sont aussi cultiveacutees en Italie et au Portugal mais de faccedilon moins
importante
Dans les pays scandinaves la production est principalement constitueacutee de V myrtillus Il faut
noter que des quantiteacutes non neacutegligeables de reacutecolte sont le fait de cueillettes reacutealiseacutees par des
laquo pillards raquo des cultivateurs et enfin par des voyageurs des particuliers ou des touristes qui
consomment les myrtilles sur place pour leur plaisir
33 Production franccedilaise (22) (61)
En France les Landes constituent la premiegravere zone de production des myrtilles cultiveacutees
suivies du Val de Loire du Limousin de la Sologne et des Vosges La majoriteacute des myrtilles
cultiveacutees au niveau national (1300 agrave 1500 tonnesan) est destineacutee pour 95 des tonnages au
marcheacute du frais et est exporteacutee vers lrsquoAllemagne ougrave la consommation y est plus importante
qursquoen France vers la Suisse la Grande-Bretagne lrsquoItaliehellip et en importe de Suegravede du
Canada de Pologne et de Roumanie
En ce qui concerne les myrtilles sauvages 1500 agrave 2000 tonnes sont reacutecolteacutees en France La
principale zone de production est lrsquoArdegraveche suivie du Massif central et des Vosges Cette
20
reacutecolte se fait au peigne par des personnes cueilleurs agriculteurs qui ont un laquo droit de
cueillette raquo La majoriteacute des myrtilles sauvages reacutecolteacutees est destineacutee agrave la transformation en
geleacutees confitureshellippar des ateliers drsquoexploitation ou par des entreprises proches des sites de
production Une faible quantiteacute est destineacutee agrave la vente sur les marcheacutes ou agrave des grossistes pour
la restauration et les eacutepiceries fines
Les statistiques de 2001 ont reacutecapituleacute une production mondiale drsquoenviron 190000 tonnes
(1000 tonnes pour la France) avec pregraves de 38000 hectares cultiveacutes aux Etats-Unis et au
Canada
4 Post-reacutecolte
41 Conservation (49) (61)
Une fois les myrtilles reacutecolteacutees elles doivent ecirctre placeacutees dans une chambre froide pour
garder toutes ses qualiteacutes Lrsquoideacuteal pour conserver le fruit intact pendant une dizaine de jours
est de le stocker entre 8 et 10degC Il gardera alors son parfum lrsquoarocircme en sera mecircme
deacuteveloppeacute Si on veut le conserver plus longtemps il faut le soumettre agrave des tempeacuteratures plus
basses En effet la congeacutelation est un bon proceacutedeacute de conservation pour ce fruit
42 Conditionnement (61)
Le conditionnement que lrsquoon retrouve le plus souvent est la barquette en plastique fermeacutee par
un couvercle perforeacute Ainsi les myrtilles peuvent ecirctre conserveacutees selon les conditions deacutefinies
preacuteceacutedemment
Le temps de stockage est ameacutelioreacute par lrsquoutilisation de films en polypropylegravene semi-
permeacuteables qui maintiennent le fruit sous atmosphegravere modifieacutee Ces films peuvent apregraves
sortie du froid ecirctre gardeacutes durant seulement 24 heures car au-delagrave il peut y avoir des risques
de deacuteveloppement de pourritures
21
Deuxiegraveme partie
Composition chimique
de Vaccinium myrtillus L
22
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus 1 Identification macroscopique et microscopique (43) (67)
Du point de vue macroscopique les feuilles de V myrtillus sont alternes caduques ovales agrave
elliptiques pointues courtement peacutetioleacutees et finement denteleacutees Le bord de la feuille preacutesente
des poils seacutecreacuteteurs peacutedicelleacutes agrave lrsquoextreacutemiteacute de chaque dent quelques fois briseacutes
Du point de vue microscopique la feuille preacutesente des stomates paracytiques des poils agrave
parois eacutepaisses sur la face supeacuterieure des grandes nervures des poils seacutecreacuteteurs et des rangeacutees
de cellules agrave cristaux sur la nervure principale
Du point de vue macroscopique le fruit est une baie globuleuse drsquoun noir violaceacutee nettement
deacuteprimeacutee au sommet de la taille drsquoun petit pois Cet examen doit se faire sur une baie intacte
crsquoest-agrave-dire ni attaqueacutee par des insectes ni moisie De plus elle doit ecirctre molle car elle
devient cassante si elle est stockeacutee de faccedilon prolongeacutee
Lrsquoexamen microscopique est surtout caracteacuteriseacute par la preacutesence de cellules agrave cristaux du
meacutesocarpe et de lrsquoendocarpe Le fruit frais broyeacute ou la poudre de fruit sec met en eacutevidence la
preacutesence de macles de cristaux drsquooxalate de calcium des amas de cellules scleacutereuses de
couleur rose violaceacute agrave parois canaliculeacutees et des fragments jaune-brun du teacutegument seacuteminal agrave
paroi en forme de fer agrave cheval
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus
21 Composition chimique des feuilles (11) (67)
Celle-ci renferme des tanins cateacutechiques (08 agrave 67) des cateacutechols (eacutepicateacutechol
gallocateacutechol eacutepigallocateacutecholhellip) jusqursquoagrave 10 des proanthocyanidines (dimegraveres du cateacutechol
et drsquoeacutepicateacutechol) des flavonoiumldes (heacuteteacuterosides du querceacutetol rhamnoglucosyl- arabinosyl- et
glucuronyl-querceacutetol ainsi que des heacuteteacuterosides de kaempfeacuterol astragaloside) des iridoiumldes
des acides-pheacutenols surtout des acides chlorogeacuteniques et enfin des traces drsquoalcaloiumldes
quinolizidiniques comme la myrtine et lrsquoeacutepimyrtine
La bibliographie ancienne cite la preacutesence drsquoarbutoside et drsquohydroquinone qui ne sont
preacutesents qursquoagrave lrsquoeacutetat de trace voire totalement absent Ceci peut srsquoexpliquer soit par la preacutesence
de chimiotypes soit par une contamination des lots par des espegraveces proches qui ont le mecircme
habitat eacutecologique comme Vaccinium vitis-idaea L ou Vaccinium x intermedium Ruthe
(hybride entre V myrtillus et V vitis-idaea) dans lesquels on retrouve de lrsquoarbutoside de
lrsquohydroquinone libre et du pyroside (6-O-meacutethylarbutoside)
Enfin la feuille contient de faccedilon importante du chrome et du manganegravese
23
22 Composition chimique des fruits (11) (67)
Le fruit de la myrtille est riche en eau (jusqursquoagrave 90) en oligosaccharides (3 agrave 7) et en
acides organiques (acide malique citrique et quinique) Il contient des tanins essentiellement
des tanins cateacutechiques des proanthocyanidols (dimegravere de cateacutechol et drsquoeacutepicateacutechol) une
quinzaine drsquoheacuteteacuterosides les anthocyanosides qui sont des O-glucosides des O-galactosides et
des O-arabinosides en C-3 du cyanidol peacuteonidol delphinidol malvidol et peacutetunidol des
flavonoiumldes (heacuteteacuterosides de querceacutetol et kaempfeacuterol) des flavan-3-ols monomegraveres (cateacutechol et
eacutepicateacutechol)
Enfin on retrouve drsquoautres constituants comme les acides chlorogeacuteniques cafeacuteylquiniques
des acides pheacutenols et des pectines Les iridoiumldes quant agrave eux ne sont preacutesents que dans les
fruits immatures
24
II Anthocyanosides
Avant drsquoentrer dans les deacutetails il est important de connaitre les principaux groupes de
composeacutes phytochimiques que lrsquoon retrouve dans la plupart des fruits et des leacutegumes
(Tableau I)
Familles Classes Sous-classes
Polypheacutenols Flavonoiumldes - anthocyanidines
- flavones
-flavanols
- flavanones
- flavonols
- isoflavones
- tanins
acides pheacutenoliques - hydroxycinnamates
- hydroxybenzoates
non-flavonoiumldes - stilbegravenes
- coumarines
- lignans
Terpegravenes - caroteacutenoiumldes
- monoterpegravenes
Composeacutes soufreacutes - allyl sulfides
- isothiocyanates
Saponines - triterpeacutenoiumldes
- steacuteroiumldes
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes (7)
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes
Le terme anthocyane du grec laquo anthos raquo (signifiant fleur) et laquo kyanos raquo (bleu) est utiliseacute pour
deacutesigner la substance responsable de la coloration du bleuet Ce terme srsquoapplique agrave un groupe
de pigments qui donnent la coloration rouge rose mauve pourpre bleue et violette de la
plupart des fleurs et des fruits Ces pigments existent sous deux formes soit la forme
heacuteteacuteroside (anthocyanosides ou laquo anthocyanins raquo en anglais) soit sous la forme geacutenine
correspondante (anthocyanidols ou laquo anthocyanidins raquo en anglais) On connait environ 400
25
anthocyanosides qui sont preacutesents chez tous les Angiospermes agrave lrsquoexception des
Caryophyllales ougrave seule la famille des Caryophyllaceacutees et des Molluginaceacutees en contiennent
En effet leur preacutesence chez les Gymnospermes est rare Comme nous lrsquoavons vu les
anthocyanes sont responsables de la couleur des fleurs et des fruits mais peuvent eacutegalement
coloreacutes les bracteacutees les feuilles les peacutetioles les racines voire mecircme les bulbes comme dans
lrsquooignon rouge Cependant ce sont dans les fruits que leur concentration est la plus eacuteleveacutee Ils
srsquoaccumulent dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques sous forme de solution et de faccedilon
moins freacutequente sous forme drsquoanthocyanoplastes (11) Selon Szajdek et coll (58) les parois
cellulaires et la chair ne contiennent presque pas drsquoanthocyanosides
2 Structure des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont les pigments les plus importants des plantes visibles par lrsquoœil
humain Ils appartiennent agrave une large classe de composeacutes pheacutenoliques que lrsquoon appelle les
flavonoiumldes Ce sont des glycosides des deacuteriveacutes polyhydroxy et polymethoxy du 2-
pheacutenylbenzopyrylium plus communeacutement appeleacutes cation flavylium
Les diffeacuterences existant entre les anthocyanosides individuels sont lieacutees au nombre de groupe
hydroxyl agrave la nature et agrave la position drsquoattachement des sucres agrave la moleacutecule ainsi qursquoau
nombre et agrave la nature des acides aliphatiques ou aromatiques des sucres attacheacutes agrave la
moleacutecule Dix sept anthocyanosides et leurs aglycones naturellement preacutesents dans les plantes
sont connus Cependant seulement six geacutenines sont les plus freacutequentes (voire quasiment
universelles) dans les plantes supeacuterieures Il srsquoagit du cyanidol (50) du peacutelargonidol (12)
du peacuteonidol (12) du delphinidol (12) du peacutetunidol (7) et du malvidol (7) (Figure 14)
Les glycosides de trois anthocyanidines non meacutethyleacutes les plus largement reacutepandus dans la
nature sont la delphinidine la cyanidine et la peacutelargonidine Ils sont preacutesents dans 80 des
feuilles pigmenteacutees 69 des fruits et 50 des fleurs respectivement (33)
Dans les baies les anthocyanosides sont retrouveacutes sont la forme de mono di ou triglycosides
ougrave les reacutesidus glycosides sont principalement lieacutes agrave C-3 et moins freacutequemment agrave C-5 ou C-7
Les sucres les plus courants sont le glucose le galactose le rhamnose lrsquoarabinose le rutinose
le sambubiose et le sophorose De plus les glycosides des anthocyanosides sont souvent
acyleacutes par des acides comme les acides p-coumarique cafeacuteique feacuterulique et moins
couramment par les acides p-hydroxybenzoiumlque malonique ou aceacutetique (58)
26
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines (65)
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont des pigments solubles dans lrsquoeau ils sont instables agrave la lumiegravere agrave
la tempeacuterature et agrave lrsquooxygegravene Ils agissent en rapport au cation flavylium qui est agrave la fois un
diacide faible et un bon eacutelectrophile Agrave pH tregraves acide (lt agrave 3) la forme cationique coloreacutee en
rouge est stable Agrave pH moins acide (entre 4 et 6) la moleacutecule perd deux protons donnant une
moleacutecule neutre ou ioniseacutee devenant une forme quinonoiumlde coloreacutee en bleu et stabiliseacutee par
reacutesonnance Lrsquohydratation de la moleacutecule conduit agrave la formation drsquoune laquo pseudo-base raquo
carbinolique incolore et si le pH augmente la moleacutecule se transforme en pheacutenate (forme
ioniseacutee) la structure anthocyanique eacutetant deacutetruite Ainsi les anthocyanosides en milieu neutre
ou tregraves peu acide perdent leur coloration Or dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques le
pH est tregraves rarement infeacuterieur agrave 3 Sa coloration dans le milieu vivant peut donc srsquoexpliquer
par trois meacutecanismes qui permettent une protection ou une stabilisation de la moleacutecule
- soit un meacutecanisme par lequel les acides acylant les sucres forment un laquo sandwich raquo
autour de la geacutenine permettant une copigmentation intramoleacuteculaire
- soit par une auto-copigmentation se traduisant par lrsquoempilement intermoleacuteculaire
drsquoanthocyanosides se proteacutegeant les uns avec les autres
- soit par une copigmentation avec les flavonoiumldes (11)
27
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides
41 Extraction
Les anthocyanosides sont solubles dans les solvants polaires et lrsquoextraction agrave partir des plantes
est reacutealiseacutee en utilisant du meacutethanol qui contient de faibles quantiteacutes drsquoacide chlorhydrique ou
drsquoacide formique Il est preacutefeacuterable drsquoutiliser des acides plus faibles comme lrsquoacide aceacutetique
tartrique ou citrique des acides volatils ou travailler en milieu neutre et agrave basse tempeacuterature
pour empecirccher la deacutesacylation des anthocyanosides
Lrsquoaceacutetone peut aussi ecirctre utiliseacutee pour lrsquoextraction des anthocyanosides de plusieurs plantes
Par rapport au meacutethanol acidifieacute lrsquousage de ce solvant a lrsquoavantage drsquoecirctre une technique plus
efficace et reproductible
Lrsquoextraction en phase solide peut ecirctre utiliseacutee pour la purification initiale des extraits crus
drsquoanthocyanosides (33)
42 Seacuteparation et identification
Pour la seacuteparation et lrsquoanalyse de la structure des anthocyanosides lrsquoutilisation de la
chromatographie liquide coupleacutee agrave la spectromeacutetrie de masse permet de combiner la
seacuteparation de la chromatographie liquide avec la sensibiliteacute et la seacutelectiviteacute de la spectromeacutetrie
de masse (33) Drsquoautres meacutethodes chromatographiques peuvent ecirctre utiliseacutees pour leur
seacuteparation comme les colonnes de polyamide de polyvinylpyrrolidone les reacutesines
eacutechangeuses drsquoions la chromatographie sur couche mince preacuteparative sur cellulose (10)
Lrsquoanalyse des plantes agrave anthocyanosides peut ecirctre reacutealiseacutee par la chromatographie liquide
associeacutee agrave un deacutetecteur agrave barrettes de diodes Cette analyse peut ecirctre faite par lrsquoeacutelectrophoregravese
capillaire qui selon Szajdek et coll (58) est une meacutethode avec une tregraves bonne sensibiliteacute une
haute reacutesolution coupleacutee agrave une basse consommation drsquoeacutechantillon et enfin un moindre
laquo gaspillage raquo des solvants utiliseacutes
Drsquoautres meacutethodes plus perfectionneacutees ne peuvent ecirctre utiliseacutees que par des laboratoires de
recherche
43 Dosage des anthocyanosides
Le dosage se fait par spectrophotomeacutetrie aux longueurs drsquoonde des maximums drsquoabsorption
des anthocyanosides (λ = 520 nm) Il peut ecirctre fait sur une solution alcoolique acide ou sur un
jus acidifieacute Dans tout les cas il faut le faire en milieu tregraves dilueacute pour empecirccher les moleacutecules
drsquoanthocyanosides de srsquoassocier les unes avec les autres (11)
28
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
51 Composition en anthocyanosides
Les baies de V myrtillus contiennent environ quinze anthocyanosides ces heacuteteacuterosides sont
des O-glucosides des O-galactosides et des O-arabinosides en C-3 du cyanidol du peacuteonidol
du delphinidol du malvidol et du peacutetunidol (Figure 15)
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus (14)
29
52 Donneacutees quantitatives
Vaccinum myrtillus contient une quantiteacute importante drsquoanthocyanosides (300 agrave
698 mg100 g) Lrsquoeacutequipe de Prior et coll (50) a montreacute que la quantiteacute drsquoanthocyanosides
augmente avec la maturiteacute du fruit lors de la reacutecolte
Burdulis et coll (12) ont eacutetudieacute la diversiteacute des anthocyanosides du fruit de V myrtillus dans
diffeacuterents pays comme la Lituanie la Suegravede la Russie et la Bieacutelorussie ainsi que dans
diffeacuterentes reacutegions de Lituanie comme Šilutė Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees en
anthocyanosides ont eacuteteacute retrouveacutees dans les baies ramasseacutees en Russie et en Suegravede Ces
reacutesultats sont lieacutes agrave la cueillette tardive des baies et agrave lrsquoemplacement plus au nord des
cultures en effet les baies eacutetaient plus mucircres et avaient donc une plus haute contenance en
anthocyanosides Par contre la quantiteacute en Beacuteliorussie et en Lituanie est similaire
53 Donneacutees qualitatives
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Burdulis et coll (12) ont observeacute que lrsquoanalyse
chromatographique ne reacutevegravele pas de diffeacuterence dans la composition qualitative des
anthocyanosides Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees sont repreacutesenteacutees par la cyanidine (quantiteacute
moyenne de 53 ngml) suivie de la delphinidine et la peacutetunidine en quantiteacute 25 fois plus
faible que la cyanidine et pour terminer la malvidine et la peacuteonidine en quantiteacute encore plus
faible En Suegravede seule la malvidine a eacuteteacute retrouveacutee en plus grande quantiteacute parmi tous les
anthocyanosides (15 fois plus eacuteleveacutee que celle de la peacutetunidine et la delphinidine)
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus
Riihinen et coll (53) ont eacutetudieacute la distribution des composeacutes pheacutenoliques dans les diffeacuterents
organes de V myrtillus et drsquoun hybride entre le V corymbosum et V augustifolium
Ainsi les anthocyanosides sont preacutesents dans la pulpe et la peau des fruits de V myrtillus
constituant 2 du poids frais de la peau de la baie cela indique que lrsquoextraction du jus agrave
partir de la peau pourrait ecirctre une source riche drsquoanthocyanosides Les feuilles rouges des
myrtilles ont de faibles quantiteacutes drsquoanthocyanosides et ne contiennent que des glycosides de
cyanidine alors que les fruits contiennent les cinq types drsquoanthocyanosides (delphinidine
cyanidine peacuteonidine peacutetunidine et malvidine-glycosides) Les feuilles sont donc des sources
moins inteacuteressantes pour lrsquoutilisation nutraceutique et pharmaceutique que les fruits
30
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
Des eacutetudes ont eacuteteacute reacutealiseacutees sur la pharmacocineacutetique des anthocyanosides agrave partir drsquoun
produit commercial le Myrtocyanreg Celui-ci est un extrait hautement purifieacute de baies de
Vaccinum myrtillus dans lequel les anthocyanosides sont les composants actifs les plus
importants (36)
Lorsque lrsquoextrait est injecteacute chez le rat par voie intraveineuse ou parenteacuterale aux doses de 20-
40 mgkg ou 25 mgkg respectivement les anthocyanosides disparaissent de la circulation
sanguine et sont distribueacutes rapidement dans les tissus Lrsquoeacutelimination se fait de faccedilon
preacutedominante par les urines (25-30) 24 heures apregraves lrsquoadministration et une plus faible
quantiteacute est eacutelimineacutee via la bile (15-20)
Le Myrtocyanreg
injecteacute par voie intrapeacuteritonale agrave la dose de 200 mgkg montre que les
anthocyanosides ont une affiniteacute particuliegravere pour certains tissus notamment les tissus reacutenaux
et cutaneacutes dans ces tissus les anthocyanosides y demeurent plus longtemps que dans le
plasma Cette observation pourrait expliquer leur effet biologique agrave long terme
Lrsquoadministration orale de Myrtocyanreg
agrave la dose de 400 mgkg chez le rat montre que les
anthocyanosides sont rapidement absorbeacutes par le tractus gastro-intestinal et atteignent un pic
plasmatique quinze minutes apregraves lrsquoadministration Par contre ils ne demeurent pas
longtemps dans le sang car aucune concentration ne peut ecirctre mesureacutee apregraves deux heures Par
voie orale environ 4 des anthocyanosides sont eacutelimineacutes par la bile apregraves 24 heures
En conclusion par voie orale la biodisponibiliteacute faible des anthocyanosides peut ecirctre due agrave
une forte meacutetabolisation heacutepatique en meacutetabolites non deacutetectables par la meacutethode analytique
Le pic plasmatique de 2-3 microgml drsquoanthocyanosides non modifieacutes pourrait ecirctre suffisant pour
garantir les effets biologiques des anthocyanosides apregraves une administration orale Enfin des
tests in vitro ont reporteacute une activiteacute des anthocyanosides agrave des concentrations de 2 agrave 7 microgml
(43)
En 2006 Ichiyanagi et coll (28) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute et la distribution dans les tissus
drsquoun autre extrait de V myrtillus (Bilberon 25reg
constitueacutes de 25 anthocyanosides) administreacute
oralement ou par voie intraveineuse agrave des rats
Pour rappel les aglycones sont de cinq types la cyanidine la delphinidine la peacutetunidine la
peacuteonidine et la malvidine
Seules la malvidine la peacuteonidine et la peacutetunidine sont des structures aglycones meacutethyleacutes ces
anthocyanidines sont glycosyleacutees pour former les anthocyanosides qui repreacutesentent une
structure beaucoup plus stable Trois sortes de sucres sont rattacheacutees agrave la structure le
glucose le galactose et lrsquoarabinose
31
Ainsi le niveau plasmatique de chaque anthocyanoside est eacutevalueacute par chromatographie
liquide haute performance Lrsquoeacutetude montre clairement que lrsquoabsorption le meacutetabolisme et
lrsquoeacutelimination sont diffeacuterents pour chaque anthocyanoside Ichiyanagi et coll (27) ont calculeacute
le rapport C15dose deacutefini par la concentration plasmatique de chaque anthocyanoside quinze
minutes apregraves administration orale diviseacutee par sa concentration initiale dans lrsquoextrait de
Bilberon 25reg
(soit le rapport C15dose) La comparaison de ces rapports a montreacute que pour les
anthocyanosides posseacutedant le mecircme aglycone les galactosides ont un rapport C15dose plus
important suivi des glucosides et des arabinosides agrave lrsquoexception de la malvidine La
diffeacuterence est significative entre les anthocyanosides glucosides et galactosides Par contre
lorsque les anthocyanosides portant le mecircme sucre sont compareacutes les glycosides de cyanidine
et delphidine preacutesentent des valeurs plus eacuteleveacutees que les glycosides de malvidine et
peacutetunidine alors que la peacuteonidine 3-O-β-D-galactoside affiche les valeurs les plus hautes
parmi tous les anthocyanosides
En conclusion les niveaux plasmatiques deacutependent de plusieurs facteurs tels que lrsquoabsorption
gastro-intestinale le taux de distribution dans les tissus et leur excreacutetion via les urines et la
bile
La demi-vie est eacutevalueacutee par administration intraveineuse de lrsquoextrait pour les
anthocyanosides portant le mecircme sucre les demi-vies de la delphinidine et de la cyanidine
sont plus eacuteleveacutees que leurs analogues O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacuteonidine et la
peacutetunidine Par contre lorsque les auteurs comparent les sucres porteacutes par le mecircme aglycone
aucune diffeacuterence significative nrsquoest observeacutee entre les galactosides et les glucosides mais les
arabinosides affichent des valeurs plus faibles Seule la malvidine ne preacutesente pas de
diffeacuterence significative entre galactoside et arabinoside compareacutee aux autres anthocyanidines
Ichiyanagi et coll (28) ont eacutevalueacute la biodisponibiliteacute de chaque anthocyanoside Celle-ci varie
de 061 agrave 182 et elle est de 093 dans le meacutelange de lrsquoextrait Bilberon 25reg
Ainsi la
biodisponibiliteacute des anthocyanosides O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacutetunidine et la
peacuteonidine est plus eacuteleveacutee que la delphinidine et la cyanidine particuliegraverement pour les
galactosides (diffeacuterence significative entre la cyanidine et la peacuteonidine galactoside et entre la
delphinidine et la peacutetunidine arabinoside) Cependant les biodisponibiliteacutes des glycosides de
peacutetunidine sont plus eacuteleveacutees que celles des glycosides de malvidine mecircme si la malvidine est
lrsquoanalogue O-meacutethyl de la peacutetunidine-glycoside Ainsi la biodisponibiliteacute importante des
glycosides de peacutetunidine pourraient ecirctre expliqueacutee par une absorption gastro-intestinale
prolongeacutee De plus lrsquoexceptionnelle forte biodisponibiliteacute de la peacuteonidine 3-O-β-D-
galactoside traduirait une absorption gastro-intestinale plus efficace Lorsque les auteurs
32
comparent la biodisponibiliteacute entre les anthocyanosides sur la base du type de sucre attacheacute agrave
la structure les galactosides preacutesentent la plus haute valeur suivis des arabinosides puis des
glucosides qui preacutesentent les valeurs les plus basses (agrave lrsquoexception de la delphinidine et de la
malvidine)
Ces eacutetudes sur le meacutetabolisme et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides montrent que les
anthocyanosides majoritairement retrouveacutes dans lrsquourine et la bile sont les glycosides de
peacuteonidine et malvidine crsquoest-agrave-dire des anthocyanosides O-meacutethyleacutes Les pourcentages des
anthocyanosides dans les urines et la bile durant les quatre premiegraveres heures apregraves
administration intraveineuse sont seulement de 308 et 134 respectivement suggeacuterant une
meacutetabolisation ou une accumulation des anthocyanosides dans les tissus La quantiteacute et la
nature des anthocyanosides dans le foie et les reins diffegraverent de ceux du meacutelange Bilberon
25reg
indiquant une meacutetabolisation heacutepatique et reacutenale De plus lrsquoapparition de nouveaux pics
montreacutes par la chromatographie liquide haute performance souligne la preacutesence de
meacutetabolites drsquoanthocyanosides
En ce qui concerne la distribution dans les tissus les auteurs ont montreacute qursquoapregraves 15 minutes
drsquoune administration orale de lrsquoextrait de V myrtillus les anthocyanosides retrouveacutes
majoritairement dans les reins et le foie sont des glycosides de peacuteonidine et de malvidine les
anthocyanosides deacutetecteacutes sont des glucosides et galactosides de peacuteonidine malvidine et
peacutetunidine des meacutetabolites 4rsquo-O-meacutethyl de cyanidine delphinidine et peacutetunidine 3-O-β-D-
glucoside ou galactoside alors que les arabinosides ne sont pas deacutetecteacutes agrave lrsquoexception du 4rsquo-
O-meacutethyl delphinidine 3-O-α-L-arabinoside Les meacutetabolites comme les glucosides-
glucuronides de cyanidine et de delphinidine sont aussi preacutesents dans les tissus
particuliegraverement au niveau reacutenal
Apregraves administration intraveineuse les glycosides de cyanidine et delphinidine sont preacutesents agrave
lrsquoeacutetat de traces dans les tissus
Pour conclure plusieurs points ont pu ecirctre eacutetablis et clarifieacutes premiegraverement tous les
anthocyanosides de lrsquoextrait atteignent leur niveau plasmatique maximum en 15 agrave 30 minutes
apregraves administration orale soulignant une absorption efficace au niveau de lrsquoestomac et de
lrsquointestin grecircle Cette absorption deacutepend du type de sucre attacheacute agrave lrsquoaglycone les galactosides
eacutetant par exemple plus efficacement absorbeacutes que les arabinosides Deuxiegravemement la
biodisponibiliteacute deacutepend de plusieurs facteurs comme le meacutetabolisme lrsquohydrophobiciteacute du
cycle B de lrsquoaglycone et le type de sucre attacheacute agrave la structure De plus la synergie entre
anthocyanosides eux-mecircmes ou anthocyanosides avec drsquoautres composants preacutesents dans
lrsquoextrait peuvent moduler lrsquoabsorption au niveau du tractus gastro-intestinal
33
Sakakibara et coll (54) ont eacutetudieacute la distribution et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides chez la
souris apregraves une administration orale de 100 mgkg de poids corporel de V myrtillus
Les anthocyanosides absorbeacutes sous leur forme initiale ou meacutethoxyleacutee quinze minutes apregraves
une administration orale sont eacutelimineacutes via les urines dans les vingt quatre heures La totaliteacute
des anthocyanosides atteignent une concentration plasmatique maximale drsquoenviron 12 microM
quinze minutes apregraves administration orale puis cette concentration diminue brusquement Les
glycosides de malvidine pourraient ecirctre les anthocyanosides majoritaires dans des conditions
physiologiques en effet les anthocyanosides meacutethoxyleacutes ont des proprieacuteteacutes leur permettant
de demeurer dans lrsquoorganisme apregraves absorption De plus les glycosides de delphinidine et
cyanidine subissent une meacutethylation pouvant donner les glycosides de peacuteonidine et malvidine
par conseacutequent les anthocyanosides meacutethoxyleacutes peuvent ecirctre produits par la conversion
drsquoautres anthocyanosides eacutegalement absorbeacutes
Lrsquoexcreacutetion urinaire des anthocyanosides apregraves administration de 500 mgkg de poids corporel
de lrsquoextrait de V myrtillus a montreacute que les anthocyanosides sont eacutelimineacutes dans lrsquourine dans
les six premiegraveres heures apregraves administration orale De faibles quantiteacutes sont eacutelimineacutees entre 6
et 24 heures dont un unique pic drsquoexcreacutetion entre 6 et 12 heures Les quantiteacutes
drsquoanthocyanosides excreacuteteacutees dans lrsquourine dans les 24 heures suivant lrsquoadministration sont
faibles et ne repreacutesentent que 188 des anthocyanosides totaux ingeacutereacutes Par conseacutequent
quelque soit les quantiteacutes drsquoextrait administreacutees les anthocyanosides absorbeacutes par le corps
sont excreacuteteacutes par voie urinaire en 24 heures
Lrsquoeacutetude de la distribution des antocyanosides dans les organes a eacuteteacute reacutealiseacutee sur des souris
ayant une alimentation contenant 05 des anthocyanosides de V myrtillus durant 2
semaines Ce sont les glycosides de malvidine (surtout le 3-glucoside et 3-galactoside de
malvidine) les anthocyanosides majoritairement preacutesents dans des organes tels que le foie les
reins les testicules et les poumons Lrsquoeacutetude de Sakakibara et coll (54) est la premiegravere agrave avoir
montreacute la preacutesence des anthocyanosides dans les testicules de souris
Les auteurs montrent aussi que le foie est sucircrement lrsquoorgane cible des anthocyanosides car
515 y sont localiseacutes Par contre les anthocyanosides nrsquoont pas eacuteteacute deacutetecteacutes dans la rate le
thymus le cœur les muscles le cerveau la graisse blanche ou les yeux
Chez lrsquohomme la plupart des eacutetudes montrent une faible biodisponibiliteacute des anthocyanosides
(faible taux drsquoexcreacutetion) (3)
Cooke et coll en 2006 (18) ont deacutemontreacute la preacutesence dans lrsquourine drsquoanthocyanosides sous
forme inchangeacutee et de glucuronides drsquoanthocyanidines (meacutetabolites) apregraves une administration
orale de Mirtoselectreg
La preacutesence de glucuronides drsquoanthocyanidines dans lrsquourine suggegravere
34
une transformation des anthocyanosides en leurs deacuteriveacutes non glycosyleacutes lesquels subiront
plus tard une biotransformation Les anthocyanidines sont suspecteacutees pour avoir une meilleure
activiteacute biologique que leurs preacutecurseurs glycosyleacutes
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus
1 Acides pheacutenoliques
Les acides pheacutenoliques dans les fruits des baies sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique et benzoiumlque Le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide benzoiumlque inclus les acides p-
hydroxybenzoiumlque salicylique gallique et ellagique Dans le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique on trouve les acides p-coumarique cafeacuteique et feacuterulique Les deacuteriveacutes drsquoacide
hydroxycinnamique sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide cafeacuteique comme les acides
chlorogeacutenique et neacuteochlorogeacutenique Dans Vaccinum myrtillus des quantiteacutes significatives
drsquoacides p-coumarique et feacuterulique sont retrouveacutees Lrsquoacide hydroxycinnamique se trouve
dans tous les organes de la myrtille mais les quantiteacutes les plus importantes sont retrouveacutees
dans les feuilles il est le principal composeacute pheacutenolique du rhizome Cet acide
hydroxycinnamique joue un rocircle dans la protection de la plante vis-agrave-vis drsquoagents pathogegravenes
et drsquoautres facteurs de stress comme une radiation solaire intense une basse tempeacuterature ou
une blessure (58)
2 Tanins
Les tanins sont des composeacutes pheacutenoliques hydrosolubles importants dans les fruits des baies
Ils sont de deux types
- les tanins hydrolysables (oligo- ou polyesters drsquoun sucre et drsquoun nombre variant de
moleacutecules drsquoacide-pheacutenol) Le sucre est le plus souvent le glucose et lrsquoacide-pheacutenol est soit
lrsquoacide hexahydroxydipheacutenique et ses deacuteriveacutes drsquooxydation pour les tanins ellagiques soit
lrsquoacide gallique dans le cas des tanins galliques
- les tanins non hydrolysables condenseacutes sont des polymegraveres flavaniques constitueacutes
drsquouniteacutes flavan-3-ols lieacutees entre elles par des liaisons carbone-carbone On les appelle
eacutegalement les proanthocyanidols qui en milieu acide et agrave chaud donnent des anthocyanidols
(11)
Les tanins donnent le goucirct aux tartes et sont responsables du changement de couleur des fruits
et des produits deacuteriveacutes des fruits Le goucirct des tartes reacutesulte de lrsquointeraction entre les tanins et
les reacutecepteurs gustatifs de la bouche De plus les tanins stabilisent les anthocyanosides
35
preacutesents en quantiteacute importante dans le fuit de la myrtille en se liant agrave eux pour former des
copolymegraveres (58)
Dans V myrtillus les feuilles vertes et rouges sont les meilleures sources de procyanidines
Leurs proportions dans les feuilles sont drsquoenviron 7 du poids sec il conviendrait donc
drsquoapporter un inteacuterecirct aux feuilles qui actuellement lors de la reacutecolte et du traitement des
fruits constituent des deacutechets alors que ce sont des parties de la plante riche en
proanthocyanidines connus pour leurs activiteacutes antimicrobiennes et antioxydantes (53)
3 Flavonols
Les flavanols sont repreacutesenteacutes par la querceacutetine la myriceacutetine le kaempfeacuterol et
lrsquoisorhamneacutetine abondants dans les plantes alimentaires comme lrsquooignon le theacute les pommes
et les baies
Le fruit de V myrtillus contient de faccedilon preacutedominante de la querceacutetine eacutegalement preacutesent
avec le kaempfeacuterol dans les feuilles Cependant leur proportion est plus importante dans les
feuilles rouges que dans les feuilles vertes car les radiations solaires augmentent leur quantiteacute
(on peut supposer un rocircle dans la photoprotection) (58)
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans Vaccinium myrtillus
Les stilbegravenes sont un groupe de composants qui inclut notamment le resveacuteratrol retrouveacute
initialement dans les grappes de raisin De petites quantiteacutes de trans-resveacuteratrol ont eacuteteacute
retrouveacutees dans les baies et notamment dans la myrtille (de lrsquoordre de 678 microgg) Cette plante
contient eacutegalement de petites quantiteacutes de caroteacutenoiumldes (58)
Autres ces composeacutes pheacutenoliques la myrtille est eacutegalement constitueacutee drsquoun ensemble de
micro- et macronutriments reacutepertorieacute dans la table de composition nutritionnelle des aliments
du Ciqual (centre drsquoinformation sur la qualiteacute des aliments) 2008 de lrsquoAfssa (71) (Annexe I)
36
Troisiegraveme partie
Inteacuterecircts theacuterapeutiques
de Vaccinium myrtillus L
37
En Europe les baies et les feuilles de myrtille ont largement eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine
populaire les baies pour leurs proprieacuteteacutes astringentes toniques et antiseptiques dans le
traitement de la diarrheacutee la dysenterie (maladie infectieuse du cocirclon) les heacutemorroiumldes les
inflammations gastro-intestinales et les infections buccales (stomatites aphtes muguet des
enfants) Elles sont eacutegalement utiliseacutees pour les deacutesordres urinaires Quant aux feuilles elles
eacutetaient particuliegraverement utiliseacutees dans le diabegravete gracircce agrave leurs proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
En application locale une infusion ou une deacutecoction de feuilles de myrtilles eacutetaient utiliseacutees
lors drsquoinflammations oculaires buccales drsquoinfections cutaneacutees et dans les brucirclures
Agrave partir du XVIIIegraveme
des herboristes utilisaient la baie de myrtille dans des preacuteparations pour
traiter certaines maladies intestinales incluant la fiegravevre typhoiumlde elle eacutetait aussi utiliseacutee dans
les infections buccales cutaneacutees urinaires dans la goutte et le rhumatisme (43) Les usages
valideacutes par la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la Commission E seront
deacuteveloppeacutes dans la derniegravere partie de cette thegravese
La myrtille inteacuteresse encore actuellement les scientifiques et fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes
in vitro et in vivo elle est aussi preacutesente dans quelques eacutetudes cliniques Certaines de ces
eacutetudes seront reacutepertorieacutees dans les chapitres qui vont suivre
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire
En 1990 Morazzoni et coll (44) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vivo et in vitro drsquoun complexe
drsquoanthocyanosides de V myrtillus dont le nom deacuteposeacute est Myrtocyanreg
(contenant environ
38 drsquoanthocyanosides) sur lrsquoactiviteacute plaquettaire en comparaison avec drsquoautres anti-
agreacutegants plaquettaires comme lrsquoacide aceacutetylsalicylique le dipyridamole et la ticlopidine
Lrsquoeacutetude in vitro sur plasma de lapin montre un effet inhibiteur de V myrtillus sur lrsquoagreacutegation
plaquettaire induite par lrsquoadeacutenosine diphosphate (ADP) le collagegravene et lrsquoarachidonate de
sodium (sel drsquoacide arachidonique) cette inhibition est fonction de la concentration en
anthocynosides Cette activiteacute est comparable agrave celle du dipyridamole mais est moins efficace
que celle de lrsquoacide aceacutetylsalicylique Toutefois les anthocyanosides de la myrtille et le
dipyridamole sont tous les deux efficaces pour inhiber lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par
lrsquoADP exogegravene alors que lrsquoacide aceacutetylsalicylique nrsquoa pas montreacute drsquoactiviteacute Lrsquoeffet anti-
agreacutegant plaquettaire des anthocyanosides de V myrtillus perdure apregraves certaines
manipulations chimiques et physiques comme lrsquoeacutebullition pendant cinq minutes le chauffage
38
pendant trente minutes agrave 56degC la digestion agrave la trypsine et lrsquoincubation en preacutesence
drsquoadeacutenosine phosphate
Lrsquoaction in vitro des anthocyanosides de V myrtillus sur la circulation sanguine chez le rat
montre une inhibition de lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP de maniegravere dose-
deacutependante et par voie arteacuterielle
In vivo lrsquoadministration orale du complexe anthocyanosidique de V myrtillus agrave une
concentration variant de 5 agrave 400 mgkg chez le rat montre une augmentation du temps de
saignement Cette activiteacute du complexe perdure pendant 24 heures (mecircme observation avec
lrsquoassociation acide aceacutetylsalicylique-dipyridamole) et le temps de saignement retourne agrave des
valeurs normales apregraves 48 heures Par contre cette augmentation du temps de saignement nrsquoa
pas donneacute drsquoeffet ni sur lrsquoheacutematocrite ni sur les voies intrinsegraveques et extrinsegraveques de la
coagulation sanguine
Lrsquoadministration orale de 400 mgkg du complexe anthocyanosidique de myrtille agrave des souris
deux heures avant lrsquoeacutetude diminue lrsquoadheacutesion plaquettaire cette action eacutetant similaire agrave celle
observeacutee avec 100 mgkg de ticlopidine administreacutes dans les mecircmes conditions
expeacuterimentales
Morazzoni et coll (44) ont eacutegalement eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vitro drsquoun produit composeacute des trois
principaux anthocyanosides (malvidine 3-O-glucoside cyanidine 3-O-glucoside et
delphinidine 3-O-glucoside) trouveacutes dans lrsquoextrait Myrtocyanreg
afin de comprendre leur
impact sur lrsquoeffet anti-agreacutegant Ce meacutelange montre la mecircme activiteacute inhibitrice sur
lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP le collagegravene et lrsquoarachidonate de sodium que
lrsquoextrait Myrtocyanreg
Notons que les anthocyanosides du produit reconstitueacute sont retrouveacutes
avec le mecircme ratio que ceux de lrsquoextrait
Une eacutetude clinique incluant 30 patients en bonne santeacute avec une agreacutegation plaquettaire
normale a deacutemontreacute la capaciteacute drsquoanthocyanosides de myrtille Myrtocyanreg
administreacute
pendant 30 et 60 jours agrave la dose de 480 mgjour seul ou en association avec lrsquoacide ascorbique
(3 gjour) agrave reacuteduire lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par le collagegravene ou lrsquoADP La meilleure
activiteacute est deacutetenue par Myrtocyanreg
seul ou associeacute agrave lrsquoacide ascorbique compareacutee agrave la
vitamine C seule (5)
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus riche en anthocyanosides a montreacute une forte inhibition
de lrsquoagreacutegation plaquettaire dans des expeacuteriences in vivo et in vitro sans interfeacuterer avec les
facteurs plasmatiques Lrsquoactiviteacute des trois principaux anthocyanosides de lrsquoextrait Myrtocyanreg
a permis de mettre en eacutevidence leur forte implication dans lrsquoeffet anti-agreacutegant plaquettaire
De plus lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans lrsquoinhibition plaquettaire est
39
lrsquoaugmentation des niveaux drsquoadeacutenosine monophosphate cyclique (AMP cyclique) soit par
stimulation de lrsquoadeacutenylate cyclase soit par inhibition de lrsquoAMP cyclique-phosphodiesteacuterase
Or il a eacuteteacute observeacute que les aglycones de lrsquoextrait Myrtocyanreg
sont des inhibiteurs potentiels
de lrsquoAMP cyclique- phosphodiesteacuterase de plusieurs tissus Ce meacutecanisme nrsquoest pas le seul car
un autre a eacuteteacute proposeacute il concernerait les anthocyanidines (principalement la delphinidine et
la cyanidine) qui affecteraient les fonctions plaquettaires par leur action antioxydante cette
action se ferait en interfeacuterant avec les processus membranaires cellulaires incluant les eacutetapes
initiales plaquettaires et la production des prostaglandines des cellules endotheacuteliales
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires
Les anthocyanosides de V myrtillus (Myrtocyanreg
) sont couramment utiliseacutes comme agents
vasoprotecteurs inhibant lrsquoagreacutegation plaquettaire et la formation de thrombus De plus il a
eacuteteacute montreacute que les anthocyanosides de myrtille administreacutes per os (100 mgkg pc) reacuteduisent
la reacuteponse contractile du muscle lisse vasculaire et montrent une activiteacute prostacycline-like
(PGI2-like) (45) Cette eacutetude est en accord avec celle de Bettini et coll (9) qui ont montreacute que
les anthocyanosides de V myrtillus ont un effet relaxant in vitro pouvant ecirctre meacutedieacute par la
stimulation de la synthegravese de prostaglandines vasodilatatrices dans les vaisseaux sanguins
En conclusion agrave lrsquoinverse de lrsquoacide aceacutetylsalicylique qui in vivo reacuteduit la production
arteacuterielle de PGI2 en agissant comme un inhibiteur de la synthegravese des prostaglandines les
anthocyanosides de V myrtillus stimulent la production drsquoune substance PGI2-like par le tissu
vasculaire
Les anthocyanosides de myrtille comme drsquoautres bioflavonoiumldes srsquoopposent agrave la contraction
de plusieurs types de muscles lisses en reacuteponse agrave des agents varieacutes comme lrsquoangiotensine II la
seacuterotonine le baryum lrsquohistamine ou lrsquoaceacutetylcholine En effet lrsquoaceacutetylcholine agrave des
concentrations variant de 1 agrave 2 ngml induit une relaxation dans toutes les preacuteparations alors
qursquoagrave hautes concentrations elle induit une contraction (9)
Bettini et coll (9) ont rechercheacute eacutegalement lrsquoeffet vasodilatateur du complexe dans les
preacuteparations traiteacutees avec du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration du facteur
relaxant deacuteriveacute de lrsquoendotheacutelium (EDRF ou endothelium-derived relaxing factor) qui est une
substance vasodilatatrice
Le Myrtocyanreg agrave une concentration entre 50 et 200 microgml reacuteduit la reacuteponse contractile des
artegraveres coronaires agrave lrsquoaceacutetylcholine cette activiteacute est drsquoautant plus marqueacutee lorsque lrsquoacide
ascorbique est ajouteacute (100-300 microgml) Mais cet effet est diminueacute en preacutesence drsquoindomeacutetacine
ou drsquoaceacutetylsalicylate de lysine connus pour ecirctre des inhibiteurs de la cyclo-oxygeacutenase A des
40
concentrations entre 1 et 2 microgml ces deux substances nrsquoaffectent pas la diminution du tonus
induite par Myrtocyanreg alors qursquoagrave des concentrations plus eacuteleveacutees elles le reacuteduisent sans
toutefois lrsquoabolir complegravetement mecircme aux plus fortes concentrations
Une autre expeacuterience de cette eacutetude consiste agrave traiter les segments des artegraveres coronaires avec
du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration de lrsquoEDRF Selon la concentration le
bleu de meacutethylegravene a plusieurs effets entre 1 et 8 microgml il ne modifie pas le tonus des
preacuteparations entre 8 et 18 microgml il ne provoque qursquoune lente augmentation du tonus de
plusieurs preacuteparations alors qursquoentre 18 et 24 microgml il induit une reacuteelle augmentation du
tonus des artegraveres coronaires suivie drsquoune relaxation assez marqueacutee Lrsquoeffet des
anthocyanosides de Vaccinum myrtillus a eacuteteacute eacutetudieacute apregraves disparition de lrsquoeffet du bleu de
meacutethylegravene son effet relaxant perdure partiellement malgreacute le preacute-traitement au bleu de
meacutethylegravene
En conclusion lrsquoeffet vasodilatateur de Myrtocyanreg
deacutepend agrave la fois de la libeacuteration des
prostacyclines mais aussi drsquoune faciliteacute agrave libeacuterer lrsquoEDRF les prostacyclines et lrsquoEDRF sont
probablement les meacutediateurs fonctionnels des anthocyanosides de V myrtillus
2 Activiteacute vasoprotectrice
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique
Une preacuteparation drsquoanthocyanosides de V myrtillus eacutequivalant agrave 25 drsquoanthocyanosides
administreacutee par voie intrapeacuteritoneacuteale ou per os agrave des lapins montre une reacuteduction de la
permeacuteabiliteacute capillaire de la peau (augmentant avec le temps) preacutealablement stimuleacutee par le
chloroforme lrsquohistamine ou la bradykinine (36)
Jonadet et coll (29) ont compareacute sur des rats lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides
extraits de Vitis vinifera L de V myrtillus (Difrarelreg
) et de Pinus maritimus (appeleacute
maintenant Pinus pinaster Aiton) Ainsi lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides est
par ordre deacutecroissant la suivante anthocyanosides de Vitis vinifera gt anthocyanosides de V
myrtillus gt proanthocyanosides de Pinus maritimus Les auteurs soulignent que les
anthocyanosides agissent agrave travers une activiteacute anti-proteacuteasique deacutemontreacutee in vitro En effet
ils ont montreacute que les anthocyanosides des extraits preacutealablement citeacutes possegravedent des activiteacutes
inhibitrices vis-agrave-vis drsquoenzymes proteacuteolytiques comme lrsquoeacutelastase laquelle peut intervenir dans
la deacutegradation du tissu conjonctif des fibres eacutelastiques et jouerait un rocircle dans des affections
pathologiques comme lrsquoatheacuteroscleacuterose lrsquoemphysegraveme pulmonaire et lrsquoarthrite rhumatoiumlde Les
anthocyanosides apportent cette activiteacute anti-proteacuteasique en inhibant la libeacuteration des peptides
41
vasoactifs En effet lrsquoune des causes de lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire est
lrsquointervention de meacutediateurs chimiques comme lrsquohistamine la 5-hydroxytryptamine et les
kinines Enfin Jonadet et coll (29) ont reporteacute une activiteacute anti-trypsique et anti-
chymotrypsique (proteacuteases digestives) des substances pharmacologiques des extraits eacutetudieacutes
22 Action sur la reacutesistance capillaire
Lietti et coll (36) ont deacutemontreacute dans une expeacuterience lrsquointeacuterecirct des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus sur la reacutesistance vasculaire Pour cela ils les administrent par voie
intrapeacuteritoneacuteale agrave des rats preacutealablement alimenteacutes pendant 4 semaines avec une alimentation
deacuteficitaire en facteur P induisant ainsi une fragiliteacute capillaire Apregraves mesure agrave plusieurs
heures de la reacutesistance capillaire les reacutesultats montrent une eacuteleacutevation remarquable de la
reacutesistance capillaire de la peau induite par les anthocyanosides de V myrtillus Lrsquoactiviteacute est
maximale 4 heures apregraves le traitement et ne change pas apregraves 6 heures Cette activiteacute est
compareacutee avec celle de la rutine (substance de la famille des bioflavonoiumldes) laquelle montre
un effet comparable agrave 200 mgkg mais qui agrave 100 mgkg nrsquoest presque plus efficace
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Lietti et coll (36) ont montreacute que lrsquoadministration
des anthocyanosides de V myrtillus dans la patte de rats par voie intraveineuse et par voie
orale respectivement 15 et 60 minutes preacuteceacutedant lrsquoinjection de carrageacutenine (substance
induisant un œdegraveme) entraicircne une diminution de lrsquoœdegraveme formeacutee de maniegravere dose-
deacutependante En effet lrsquoutilisation de 200 mgkg de preacuteparation est plus efficace que 50 mgkg
sur le volume de lrsquoœdegraveme La dose de 200 mgkg permet une reacuteduction de lrsquoœdegraveme agrave 45
Lrsquoapplication topique de la preacuteparation 60 secondes suivant lrsquoinjection de carrageacutenine induit
eacutegalement une reacuteduction du volume de lrsquoœdegraveme agrave 39 Cette eacutetude montre lrsquoaction anti-
inflammatoire de V myrtillus
Les eacutetudes in vivo reacutealiseacutees sur des animaux montrent que les anthocyanosides de V myrtillus
sont vasoprotecteurs ils inhibent lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire augmentent la
reacutesistance vasculaire et reacuteduisent le volume de lrsquoœdegraveme de maniegravere dose-deacutependante et ses
activiteacutes perdurent dans le temps De plus ils sont plus efficaces que la rutine ou la
meacutepyramine (substance antiseacuterotoninergique et antihistaminergique) Enfin les
anthocyanidines restent longtemps dans les tissus de la peau riche en collagegravene et en
mucopolysaccharides Crsquoest pourquoi il serait inteacuteressant de mettre en place des expeacuteriences
42
pour eacutetudier la relation entre ces substances et les anthocyanosides afin de voir si ce lien
pourrait expliquer lrsquoactiviteacute pharmacologique exerceacutee sur les vaisseaux sanguins (36)
24 Action antiatheacuterogegravenique
En 2009 une eacutetude meneacutee par Mauray et coll (41) a deacutemontreacute qursquoune suppleacutementation
alimentaire avec des extraits de V myrtillus limitait la progression des leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques dans un modegravele de souris deacuteficitaire en apolipoproteacuteine E Lrsquoaction
inhibitrice du deacuteveloppement de la plaque atheacuteromateuse est indeacutependante des modifications
du statut antioxydant plasmatique des marqueurs biologiques du stress oxydant et du profil
lipidique suggeacuterant lrsquoimplication drsquoautres meacutecanismes drsquoactions (peut-ecirctre lrsquoaction anti-
inflammatoire) De plus des deux extraits utiliseacutes (lrsquoun riche en anthocyanosides extraits de
myrtilles non traiteacutees et le deuxiegraveme extraits de myrtilles fermenteacutees par des levures) la
meilleure activiteacute antiatheacuterogegravene est deacutetenue par lrsquoextrait de myrtilles fermenteacutees suggeacuterant la
formation par la fermentation de nouveaux composeacutes avec des proprieacuteteacutes beacuteneacutefiques pour la
santeacute les pigments polymeacuteriques deacuteriveacutes des anthocyanosides atteacutenueraient mieux les leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques que les anthocyanosides de lrsquoextrait non traiteacute En effet lors de la
fermentation les anthocyanosides se condensent avec drsquoautres composeacutes preacutesents dans le fruit
de la myrtille Il reste alors agrave deacuteterminer les composeacutes responsables de lrsquoeffet observeacute et les
meacutecanismes drsquoaction impliqueacutes
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice
Des reacutesultats pharmacologiques prometteurs des extraits de fruits de V myrtillus issus
drsquoeacutetudes cliniques encouragent leur utilisation chez lrsquohomme dans le traitement des maladies
vasculaires peacuteripheacuteriques pouvant associer fragiliteacute capillaire alteacuteration de la permeacuteabiliteacute et
insuffisances veineuses chroniques des membres infeacuterieurs Drsquoautres eacutetudes cliniques ont
montreacute lrsquoefficaciteacute de la myrtille dans les symptocircmes cliniques post-opeacuteratoires
Ainsi les anthocyanosides de V myrtillus (480 mg par voie orale pendant 30 jours) ont
montreacute leur capaciteacute agrave diminuer les symptocircmes subjectifs (douleur parestheacutesiehellip) et objectifs
(œdegraveme des membres pheacutenomegravenes dyschromiques de la peauhellip) de patients atteints du
syndrome variqueux des membres infeacuterieurs tout comme les patients souffrant de fragiliteacute
capillaire ougrave une administration orale drsquoanthocyanosides de V myrtillus (160-800 mgjour)
reacuteduit les symptocircmes cliniques drsquoune reacutesistance capillaire diminueacutee (peacuteteacutechies contusion
sang feacutecal occulte) (43)
43
Lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille Myrtocyanreg (480 mgjour pendant 30 agrave 180 jours) a eacuteteacute
deacutemontreacutee dans des eacutetudes porteacutees sur des patients diabeacutetiques dyslipideacutemiques souffrant de
maladies secondaires agrave une stase des membres infeacuterieurs comme le syndrome preacute-variqueux
les varices essentielles le syndrome post-phleacutebitique et plusieurs maladies vasculaires
atheacuteroscleacuterotiques (43) Une eacutetude double-aveugle et controcircleacutee par placebo incluant 47
patients atteints de deacutesordres vasculaires drsquoorigine varieacutee a deacutemontreacute la capaciteacute de
Myrtocyanreg agrave reacuteduire les symptocircmes subjectifs et objectifs de la pathologie (diminution de la
douleur de la parestheacutesie de lrsquoœdegraveme et de la mobilisation des extreacutemiteacutes des doigts chez les
patients avec syndrome de Raynaud) Une eacutetude meneacutee sur 568 patients souffrants
drsquoinsuffisance veineuse des membres infeacuterieurs a montreacute la capaciteacute des anthocyanosides agrave
faire disparaitre les symptocircmes et agrave ameacuteliorer la microcirculation et le drainage lymphatique
(43)
Lrsquoefficaciteacute de la myrtille (320 mgjour pendant 60 agrave 90 jours) a mecircme eacuteteacute deacutemontreacutee chez 54
femmes enceintes souffrant de phleacutebite secondaire agrave stase veineuse (diminution de la douleur
de lrsquoœdegraveme de la fragiliteacute capillairehellip) et des patients avec bronchite chronique et
asthmatique (reacuteduction par lrsquoextrait de V myrtillus agrave 480 mgjour pendant 10 agrave 30 jours des
modifications microcirculatoires induites par la corticotheacuterapie) (43)
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA)
Pour rappel lrsquoECA (dipeptidylcarboxypeptidase) est une enzyme impliqueacutee dans le systegraveme
reacutenine-angiotensine (lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans la reacutegulation de la pression
arteacuterielle) permettant la conversion de lrsquoangiotensine I inactive en angiotensine II active Cette
derniegravere est capable drsquoaugmenter la pression sanguine et la pression de perfusion reacutenale les
inhibiteurs de lrsquoECA (IEC) constituent alors la premiegravere ligne de traitement pour
lrsquohypertension arteacuterielle et lrsquoinsuffisance cardiaque Les deux sites actifs de lrsquoACE
contiennent un atome de Zn2+
et les IEC sont capables de se lier agrave cet atome (47)
Personn et coll (47) ont rapporteacute dans une eacutetude in vitro la proprieacuteteacute drsquoun extrait de V
myrtillus agrave inhiber lrsquoECA peut-ecirctre par sa capaciteacute agrave cheacutelater des ions meacutetaux comme Zn2+
ou
Fe2+
cette inhibition eacutetant plus forte que les anthocyanidines combineacutees ou seacutepareacutees
deacutemontre lrsquoimplication drsquoautres composeacutes de la plante dans cette action En effet V myrtillus
ne contient pas seulement des anthocyanosides et anthocyanidines mais aussi de la querceacutetine
(flavonol) du stilbegravene resveacuteratrol des acides feacuterulique et coumarique Crsquoest la composition
speacutecifique de la plante qui semble ecirctre agrave lrsquoorigine de lrsquoeffet observeacute
44
Par conseacutequent le lien entre V myrtillus et lrsquoECA pourrait expliquer les effets
pharmacologiques de la plante sur la circulation cette plante pouvant ecirctre alors utiliseacutee en
preacutevention des maladies cardiovasculaires
5 Action sur lrsquoangiogenegravese
Lrsquoangiogenegravese se deacutefinit comme la formation de nouveaux vaisseaux sanguins agrave partir de
vaisseaux preacuteexistants (neacuteovascularisation) Elle est indispensable dans de nombreux
processus physiologiques comme le deacuteveloppement embryonnaire lrsquoimplantation du placenta
mais peut aussi contribuer agrave des processus pathologiques comme la croissance des tumeurs et
le deacuteveloppement des meacutetastases Lrsquoangiogenegravese se fait par plusieurs eacutetapes qui se trouvent
ecirctre les mecircmes dans lrsquoensemble des processus
- activation des cellules endotheacuteliales
- deacutegradation de la membrane basale et de la matrice extra-cellulaire
- migration orienteacutee des cellules endotheacuteliales
- prolifeacuteration cellulaire
- diffeacuterenciation des cellules endotheacuteliales en une structure de type capillaire pour
former une structure vasculaire permettant le deacuteveloppement des tissus
Lrsquoangiogenegravese est controcircleacutee par plusieurs facteurs inducteurs ou inhibiteurs dont le facteur de
croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire (VEGF ou vascular endothelial growth factor)
reacutegulateur cleacute de lrsquoangiogenegravese (73)
En 2007 Matsunaga et coll (40) ont eacutetudieacute in vitro lrsquoaction de V myrtillus sur lrsquoangiogenegravese
plus preacuteciseacutement sur la formation des tubules vasculaires la prolifeacuteration et la migration des
cellules ainsi que leur action sur la phosphorylation de proteacuteines kinases comme ERK 12
(laquo extra-cellular signal-regulated kinase raquo ou kinase reacuteguleacutee par le signal extra-cellulaire)
phospholipase Cγ et Akt (constitueacutes de trois enzymes appartenant agrave la famille des proteacuteines
kinases) induite par le VEGF Lrsquoeacutetude deacutemontre les effets inhibiteurs des extraits de myrtille
sur les paramegravetres de lrsquoangiogenegravese sur des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales
humaines co-cultiveacutees avec des fibroblastes Ainsi entre 1 et 30 microgml-1
lrsquoextrait de
Vaccinum myrtillus inhibe significativement la surface des tubules vasculaires la longueur
lrsquoenchevecirctrement des tubules et le nombre de reacuteseaux formeacutes A 3 microgml-1
ou plus lrsquoextrait
reacuteduit lrsquoensemble des paramegravetres de lrsquoangiogenegravese
Lrsquoextrait inhibe la prolifeacuteration (inhibition significative agrave 3 microgml-1
) et la migration
(inhibition significative agrave 10 et 30 microgml-1
) des cellules induites par VEGF-A de maniegravere
dose-deacutependante ceci ne se voyant qursquoen preacutesence du facteur de croissance
45
La phosphorylation des proteacuteines kinases comme ERK 12 est important dans la prolifeacuteration
des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales humaines et celle de Akt est une eacutetape
importante dans la prolifeacuteration et la migration de ces cellules
Les auteurs deacutemontrent la capaciteacute de V myrtillus agrave inhiber lrsquoaugmentation de la
phosphorylation de ces deux proteacuteines kinases mais pas la phosphorylation de la PLCγ
indiquant que lrsquoextrait agit en aval de celle-ci dans la cascade de signalisation induite par le
VEGF
Lrsquoeacutetude in vivo mise en place par Matsunaga et coll (39) chez la souris a permis de montrer
lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoextrait de V myrtillus dans la formation de reacuteseaux neacuteovasculaires dans
la reacutetinopathie induite par oxygegravene
II Action de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes
Un radical libre est une espegravece chimique qui possegravede un eacutelectron ceacutelibataire sur sa couche
peacuteripheacuterique Les radicaux libres qui interviennent dans le stress oxydant ont un eacutelectron
ceacutelibataire centreacute sur un atome drsquooxygegravene On les nomme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
(ERO) Plusieurs ERO existent comme le radical superoxyde le radical perhydroxyle (forme
protoneacutee du superoxyde) le radical hydroxyle le radical peroxyle et le radical alkoxyle Les
radicaux ne sont pas seulement formeacutes au cours des pheacutenomegravenes de stress oxydant mais
eacutegalement lors du meacutetabolisme normal de lrsquooxygegravene in vivo mecircme si ils ne sont geacuteneacutereacutes
qursquoen faible quantiteacute En effet crsquoest au niveau de la chaine respiratoire de la mitochondrie ougrave
85 de lrsquooxygegravene sont meacutetaboliseacutes que se produit la reacuteduction complegravete par 4 eacutelectrons de la
moleacutecule drsquoO2 conduisant agrave la formation drsquoeau La reacuteduction de la moleacutecule ne peut se faire
que par lrsquoenchainement de plusieurs eacutetapes donnant naissance agrave des intermeacutediaires reacuteduits de
lrsquooxygegravene La reacuteduction monoeacutelectronique de lrsquooxygegravene consommeacute au niveau
mitochondriale fournit lrsquoanion superoxyde (O2-) qui est une espegravece toxique Mais des
enzymes antioxydantes comme les superoxydes dismutases vont reacuteguler lrsquoanion superoxyde
en catalysant leur dismutation et en produisant le peroxyde drsquohydrogegravene (H2O2) Ce dernier
nrsquoest pas un radical libre mais une moleacutecule posseacutedant tous ses eacutelectrons apparieacutes Cependant
dans des reacuteactions in vivo comme la reacuteaction de Fenton et en preacutesence de cations meacutetalliques
comme Fe2+
ou Cu+ le H2O2 devient toxique en donnant les radicaux libres les plus neacutefastes
du stress oxydant que sont les radicaux hydroxyles (OH) De mecircme que le radical
superoxyde le peroxyde drsquohydrogegravene est reacuteguleacute in vivo par des systegravemes antioxydants comme
46
la catalase qui acceacutelegravere sa dismutation ou la glutathion peroxydase qui catalyse sa reacuteduction
par le glutathion
Ainsi le radical O2- le H2O2 et le radical OH forment les ERO (beaucoup plus reacuteactives que
lrsquooxygegravene) Cependant drsquoautres espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene existent comme les radicaux
peroxyles (RO2) les hydroperoxydes (RO2H) et les radicaux alkoxyles (RO)
Ces ERO tregraves reacuteactifs peuvent endommager les proteacuteines les lipides les glucides et les
acides nucleacuteiques par des reacuteactions drsquooxydation A cocircteacute des ERO il existe le monoxyde
drsquoazote radicalaire NO pouvant avoir des effets deacuteleacutetegraveres en reacuteagissant lors drsquoun stress
oxydant avec lrsquoO2-
pour former le peroxynitrite (ONOO-) tregraves reacuteactif et capable
drsquoendommager les proteacuteines les lipides et les acides nucleacuteiques On parle alors de stress
nitrosant
Crsquoest pourquoi il existe des systegravemes de deacutefense dans lrsquoorganisme (antioxydants) comme les
systegravemes de deacutefense enzymatique (superoxyde dismutase catalase glutathion
peroxydaseshellip) Toutefois le stress oxydant peut ecirctre important et les systegravemes de deacutefenses
deacutepasseacutes drsquoougrave la survenue ou lrsquoaggravation de pathologies comme lrsquoatheacuteroscleacuterose le diabegravete
sucreacute lrsquoischeacutemie ceacutereacutebrale le cancerhellip(21)
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides
Les anthocyanosides comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment sont des colorants
naturellement preacutesents dans les fleurs les fruits (particuliegraverement dans les baies) et les
leacutegumes Ce sont des pigments responsables de la couleur comme lrsquoorange le rouge le
bleuhellip Ils peuvent jouer plusieurs rocircles (attirer les insectes pour la pollinisation et la
dispersion des graines ou contribuer agrave la reacutesistance des plantes vis-agrave-vis drsquoattaques
exteacuterieures) Pour rappel les anthocyanosides sont des glycosides ou des acylglycosides des
anthocyanidines (les formes aglycones) Ils ont une structure de base flavylium et des
substitutions hydroxyles ou meacutethoxyles De plus ils sont tous O-glycosyleacutes avec diffeacuterents
sucres dont la preacutevalence est dans lrsquoordre deacutecroissant le glucose le rhamnose le xylose le
galactose lrsquoarabinose et le fructose Les anthocyanosides les plus preacutedominants sont des 3- ou
35-glycosyleacutes Quand le nombre de sucre augmente on observe une alternance sucre et
liaisons laquo acyl raquo De nombreuses eacutetudes ont reporteacute les effets positifs des anthocyanosides
dont certaines seront deacutecrites dans cette thegravese Certains de leurs effets sont attribueacutes agrave leurs
proprieacuteteacutes antioxydantes (64)
47
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma
En 2006 Talaveacutera et coll (59) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus (Antho 50reg
) et leur potentiel antioxydant sur le plasma de rats alimenteacutes
avec Antho 50reg pendant 8 jours Lrsquoeacutetude a montreacute une augmentation du statut antioxydant
plasmatique par cette administration mecircme si la biodisponibiliteacute eacutevalueacutee par excreacutetion
urinaire est basse Mais la chimie des anthocyanosides est complexe ceux-ci pourraient
subir une conversion en formes moins coloreacutees agrave cause de leur instabiliteacute agrave pH physiologique
ou meacutetaboliseacutes en composeacutes encore inconnus Quoiqursquoil en soit une consommation
quotidienne en anthocyanosides a un effet positif sur la capaciteacute antioxydant du plasma
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides
Lrsquoessai ORAC (oxygen radical absorbance capacity ou capaciteacute drsquoabsorbance du radical
oxygegravene) est une mesure standardiseacutee du pouvoir antiradicalaire de substances pures ou en
meacutelange Apregraves extraction des principes actifs dans un meacutelange eau-eacutethanol pour les
moleacutecules hydrosolubles et eacutethanol pour les moleacutecules lipophiles le test par
spectrofluorimeacutetrie consiste en la mesure de la protection exerceacutee par la moleacutecule contre
lrsquooxydation de la fluoresceacuteine par un radical libre et stable le AAPH (22-azobis(2-
amidinopropane) dihydrochloride) Les reacutesultats sont ensuite exprimeacutes par rapport au pouvoir
antioxydant exerceacute par une moleacutecule de reacutefeacuterence le Trolox (eacutequivalent hydrosoluble de la
vitamine E) rameneacute par le poids (en gramme) du produit que lrsquoon teste (75)
La valeur ORAC de la myrtille (446 micromol Troloxg de poids frais) est plus eacuteleveacutee que celle
drsquoautres baies (Figure 16) (58)
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies (58)
48
En 1997 Wang et coll (64) ont eacutevalueacute la capaciteacute antioxydante drsquoanthocyanidines communs
comme les aglycones de delphinidine cyanidine peacutelargonidine malvidine peacuteonidine et leurs
deacuteriveacutes glycosyleacutes Pour cela ils utilisent lrsquoessai ORAC avec geacuteneacuterateur de radical peroxyl
(ROO) Ainsi lrsquoeacutetude deacutemontre que les anthocyanidines posseacutedant la mecircme hydroxylation
sur le cycle A et C et une seule hydroxylation sur le cycle B comme la peacutelargonidine la
malvidine et la peacuteonidine ont une plus basse valeur ORAC que les anthocyanidines
dihydroxyleacutees sur le cycle B (3rsquo 4rsquo-di-OH) comme la cyanidine Les groupes hydroxyls en
position 3rsquo et 4rsquo du cycle B constituent un facteur important dans le pouvant antioxydant
seule la delphinidine eacutechappe agrave cette regravegle (plusieurs hydroxylations sur le cycle B mais
valeur ORAC plus faible) Mecircme si dans certains flavonoiumldes le nombre de groupes
hydroxyls augmentent la capaciteacute antioxydante ceci nrsquoest pas constateacute pour les
anthocyanosides ougrave la peacutelargonidine la cyanidine et la delphinide ayant 4 5 et 6 groupes
hydroxyls respectivement ont des valeurs ORAC respectives de 154 224 et 181 De plus la
glycosylation peut avoir aussi un effet sur lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides Elle
peut diminuer augmenter ou nrsquoavoir aucun effet sur le pouvoir antiradicalaire Par exemple
la 3-glycosylation du cycle C de la cyanidine augmente lrsquoactiviteacute ORAC pour le glucose et le
rhamnose mais la diminue pour le galactose Ainsi lrsquoordre deacutecroissant de lrsquoactiviteacute ORAC
pour la cyanidine est le suivant cyanidine 3-glucoside gt cyanidine 3-rhamnoside gt cyanidine
gt cyanidine 3-galactoside Mecircme lrsquoorientation du groupe hydroxyl affecte le pouvoir
antioxydant contre le radical peroxyl De plus lrsquoefficaciteacute drsquoun antioxydant agrave pieacuteger les
radicaux libres deacutepend aussi de sa capaciteacute agrave former un radical lui-mecircme stable Enfin le
classement des antioxydants par leur valeur ORAC deacutepend aussi de lrsquooxydant du radical libre
utiliseacute et de la meacutethode chimique employeacutee
Ainsi cette eacutetude a montreacute le fort pouvoir antioxydant des anthocyanosides ceux-ci sont
donc de bons candidats pour la preacutevention et le traitement de maladies mecircme si drsquoautres
eacutetudes sont neacutecessaires pour eacutelucider leur impact sur la santeacute humaine
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces
reacuteactives azoteacutees
Lrsquooxyde nitrique ou monoxyde drsquoazote radicalaire (NO) est un meacutediateur important
participant agrave des reacuteactions physiologiques dans les organismes vivants comme le
meacutetabolisme eacutenergeacutetique mitochondrial ou la transduction de signaux Cependant le NO peut
reacuteagir rapidement avec lrsquoO2- et former le peroxynitrite (ONOO
-) un fort oxydant tregraves reacuteactif
pouvant reacuteagir avec des moleacutecules biologiques comme les proteacuteines ou les acides nucleacuteiques
49
LrsquoONOO- participe agrave la formation de nitro-tyrosine dans les proteacuteines et agrave lrsquooxydation des
lipoproteacuteines de basse densiteacute responsable de la formation de plaques drsquoatheacuterome Les
radicaux NO sont geacuteneacutereacutes de faccedilon constitutive dans le cerveau sous des conditions
physiologiques LrsquoONOO- peut ecirctre lrsquoune des causes de deacutesordres ceacutereacutebraux (accidents
vasculaires ceacutereacutebraux ou maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie drsquoAlzheimer) (27)
En 2004 Ichiyanagi et coll (27) ont compareacute les reacuteactiviteacutes de 20 anthocyanosides extraits de
Vaccinum myrtillus contre les espegraveces reacuteactives azoteacutees et oxygeacuteneacutees Lrsquoextrait utiliseacute dans
lrsquoeacutetude est le Bilberon 25reg
(extrait pur sous forme de poudre provenant de V myrtillus)
Comme lrsquoantioxydant de reacutefeacuterence la (+)-cateacutechine les anthocyanosides ont la capaciteacute de
pieacuteger les radicaux libres comme le radical OH mais ont une reacuteactiviteacute 20 fois plus hautes
que celui-ci contre lrsquoO2- De plus la reacuteactiviteacute contre le radical OH nrsquoest pas tregraves sensible agrave
la diversiteacute structurale des anthocyanosides alors qursquoelle lrsquoest pour lrsquoO2- Dans lrsquoeacutetude de
Ichiyanagi et coll (27) lrsquoactiviteacute contre le NO est presque la mecircme entre tous les
anthocyanosides eacutetant tregraves peu sensible aux diversiteacutes structurales (les groupes hydroxyls
libres sur le cycle B de la moleacutecule de base ou lrsquoimportance de la meacutethylation de ces groupes
ne contribueraient pas aux reacuteactiviteacutes des anthocyanosides contre les radicaux NO et OH)
Parmi tous les anthocyanosides ce sont les glycosides (position 3) de delphinidine qui
reacuteagissent le plus contre les radicaux NO et ONOO- (reacuteactiviteacute 6 et 3 fois plus hautes que les
anthocyanosides et la (+)-cateacutechine respectivement) les autres anthocyanosides ayant une
reacuteactiviteacute comparable entre eux contre NO et lrsquoONOO-
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique
Les lipoproteacuteines de basse densiteacute (LDLs ou low-density lipoproteins) oxydeacutees par des
radicaux libres et des pro-oxydants ont plusieurs effets biologiques neacutefastes comme le
deacuteclenchement drsquoeacutevegravenements cellulaires conduisant agrave la formation et la progression de la
plaque atheacuteroscleacutereuse (21)
Laplaud et coll (34) ont eacutetudieacute lrsquoaction antioxydante drsquoun extrait de Vaccinum myrtillus sur
les LDLs Lrsquoeacutetude deacutemontre la diminution de tous les paramegravetres eacutevalueacutes lors de lrsquooxydation
des LDLs par cet extrait En effet la myrtille est capable de ralentir la formation de diegravenes
conjugueacutes de retarder la production de lipoperoxydes et de malondialdeacutehyde (indicateurs de
la peroxydation lipidique) et de diminuer la charge eacutelectrique nette des lipoproteacuteines
Enfin V myrtillus serait plus efficace que lacide ascorbique ou lrsquohydroxytoluegravene butyleacute
(BHT) pour diminuer la peroxydation lipidique des LDLs
50
En 1998 Martiacuten-Aragoacuten et coll (38) ont eacutetudieacute in vitro la capaciteacute drsquoun extrait complexe
drsquoanthocyanoside de V myrtillus agrave inhiber la peroxydation lipidique et agrave pieacuteger les ERO
comme les radicaux OH et O2- Lrsquoeacutetude deacutemontre un effet antiperoxydant de lrsquoextrait
(concentration-deacutependante) la concentration capable drsquoinhiber 50 de la peroxydation
lipidique (IC50 ou concentration inhibitrice 50) eacutetant de 5028 microgmL Sa capaciteacute agrave pieacuteger le
radical OH est faible (deacutetectable agrave partir de 50 microgmL) alors que sa reacuteactiviteacute contre le
radical O2- est forte
(observeacutee agrave toutes les concentrations testeacutees avec une valeur drsquoIC50 de
moins de 25 microgmL)
En conclusion la myrtille pourrait par son activiteacute antiperoxydative contribuer agrave la protection
vis-agrave-vis de lrsquoatheacuteroscleacuterose
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines
Viljanen et coll (63) ont compareacute lrsquoinhibition de lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines entre
les composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus avec ceux drsquoautres baies comme Rubus idaeus L
(framboisier) Vaccinium vitis-idaea L (airelle rouge) et Ribes nigrum L (cassis) Les
composeacutes pheacutenoliques sont repreacutesenteacutes par des anthocyanosides des ellagitanins et des
proanthocyanidines Lrsquoeacutetude deacutemontre que V myrtillus et Rubus idaeus possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante parmi la totaliteacute des baies eacutetudieacutees contre lrsquooxydation des
proteacuteines (cette oxydation eacutetant mesureacutee par la perte de la fluorescence au tryptophane et la
formation de proteacuteines carbonyles) Vaccinium myrtillus et V vitis-idaea possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante vis-agrave-vis de lrsquooxydation des lipides suivis par Ribes nigrum et
Rubus idaeus (cette oxydation est mesureacutee par lrsquoanalyse drsquohexanal de diegravenes conjugueacutes et
drsquohydroperoxydes) Dans la myrtille et le cassis ce sont les anthocyanosides qui contribuent agrave
la majoriteacute de lrsquoeffet antioxydant par inhibition de la formation des proteacuteines carbonyles et
drsquohexanal (hexanaldehyde) Cette activiteacute antioxydante des anthocyanosides et des
proanthocyanidines est dose-deacutependante ce qui nrsquoest pas le cas pour les autres composeacutes
pheacutenoliques Lrsquoeffet antioxydant des composeacutes pheacutenoliques des baies est plus prononceacute
contre lrsquooxydation des lipides particuliegraverement lrsquoinhibition du composeacute hexanal que celle des
proteacuteines Lrsquoinhibition des composeacutes aldeacutehydes des lipides reacutesulte en geacuteneacuteral de lrsquoinhibition
de la formation de deacuteriveacutes carbonyls conseacutequence drsquoune diminution de lrsquointeraction lipide-
proteacuteine
51
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie
Le foie est lrsquoorgane central du meacutetabolisme des composeacutes exogegravenes et endogegravenes il est donc
lrsquoorgane cible de lrsquoaction des xeacutenobiotiques et de leurs meacutetabolites Les eacutetudes sur les
heacutepatocytes sont importantes car ces cellules repreacutesentent 65 du parenchyme du foie et ils
assurent presque toutes les fonctions de cet organe Les heacutepatocytes ont un appareil de Golgi
distinct et de nombreuses mitochondries Malheureusement ils peuvent ecirctre soumis agrave un
stress oxydant Les eacutetudes faites agrave ce jour ont utiliseacute des toxines expeacuterimentales varieacutees afin
drsquoeacutetudier les effets cytoprotecteurs de substances comme lrsquoextrait de V myrtillus Dans les
eacutetudes qui vont suivre deux toxines sont employeacutees Le tert ndashbutyl hydroperoxyde (tBH) et
lrsquoallyl-alcool (2-propen-1-ol) Le tBH peut induire un stress oxydant aux cellules agrave travers des
radicaux (radical hydroxyl peroxyl drsquohydrogegravene et alkoxyl se formant lors de sa
deacutecomposition) Le tBH est la cause de plusieurs dommages comme la rupture des
membranes cellulaires lrsquoinduction de la peroxydation lipidique (responsable
drsquoatheacuteroscleacuterose) la fuite drsquoenzymes agrave travers lrsquoespace extracellulaire lrsquooxydation du
glutathion et lrsquoalkylation de macromoleacutecules cellulaires Lrsquoallyl-alcool (AA) est une toxine
qui agit indirectement agrave travers ses meacutetabolites Il est oxydeacute dans les cellules en acroleacuteine
sous lrsquoaction de lrsquoalcool deacuteshydrogeacutenase cytosolique Lrsquoacroleacuteine est capable de former un
produit avec le glutathion reacuteduit (GSH) et drsquoautres biomoleacutecules Elle induit aussi la
peroxydation lipidique catalyseacutee par les ions Fe(II) (62)
32 Eacutetudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques
En 2007 Valentovaacute et coll (62) ont utiliseacute un extrait de Vaccinum myrtillus (contenant 25
drsquoanthocyanosides) pour eacutevaluer son effet contre une leacutesion oxydative dans des cultures
primaires drsquoheacutepatocytes de rat induite par tBH et AA Jusqursquoagrave preacutesent lrsquoactiviteacute
cytoprotectrice de la myrtille contre une leacutesion oxydative nrsquoeacutetait pas documenteacutee
Lrsquoeacutetude a deacutemontreacute lrsquoactiviteacute protectrice dose-deacutependante de la plante vis-agrave-vis de leacutesions
oxydatives dans ces cultures cellulaires avec une protection maximale de 5116 contre les
dommages occasionneacutes par AA De plus les auteurs ont montreacute la capaciteacute de lrsquoextrait agrave
pieacuteger les radicaux DPPH (dipheacutenylpicrylhydrazyl) et O2-
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus montre des effets cytoprotecteurs agrave 100 et 500 microgmL
dans le test au MTT (sel de teacutetrazolium permettant une numeacuteration rapide des cellules
vivantes) Lrsquoextrait protegravege les heacutepatocytes de la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase et de la
formation des produits de la lipoperoxydation (TBARS repreacutesentant les substances reacuteagissant
52
avec lrsquoacide thiobarbiturique et permettant une premiegravere approche de la peroxydation
lipidique) Lrsquoimportante reacuteactiviteacute dans lrsquoeacutetude est sucircrement due agrave la dureacutee plus importante du
temps drsquoincubation dans le meacutelange reacuteactionnel Les effets observeacutes dans lrsquoeacutetude de
Valentovaacute et coll (62) montre que la capaciteacute cytoprotectrice de V myrtillus vis-agrave-vis des
heacutepatocytes de rat est probablement due aux proprieacuteteacutes antioxydantes de ses constituants
principaux (les anthocyanosides) Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude soutien lrsquoutilisation de la
myrtille dans les compleacutements alimentaires pour preacutevenir les maladies chroniques associeacutees
au stress oxydant
En 2008 Bao et coll (6) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun extrait de V myrtillus
commercialiseacute (contenant 4204 drsquoanthocyanosides) vis-agrave-vis drsquoun dommage du foie de
souris induit par un stress Ce stress est provoqueacute par lrsquoenfermement des souris dans une cage
meacutetallique pendant 18 heures provoquant un dommage heacutepatique avec augmentation des
enzymes heacutepatiques (alanine aminotransfeacuterase) du niveau de malondialdeacutehyde (MDA) du
monoxyde drsquoazote de la xanthine oxydase (XOD) et de la peroxydation lipidique avec un
deacuteseacutequilibre de la balance oxydants-antioxydants et la diminution de GSH de la vitamine C
et de la valeur ORAC Or lrsquoadministration orale de plusieurs dosages drsquoextrait de V
myrtillus pendant 5 jours preacuteceacutedant lrsquoinduction drsquoun stress chez la souris diminue le niveau
drsquoalanine aminotransfeacuterase (agrave 200 mgkgjour drsquoextrait) augmente les niveaux de GSH (50
100 et 200 mgkgjour drsquoextrait) et diminue significativement les niveaux de XOD et de NO
(agrave des concentrations de 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait)
De plus lrsquoextrait de myrtille agrave 200 mgkgjour pourrait supprimer et renverser le niveau de
MDA heacutepatique et plasmatique agrave un niveau comparable agrave celui du groupe controcircle (non
soumis au stress) La mecircme chose est observeacutee avec 200 mgkg jour de vitamine C (autre
antioxydant) Enfin le niveau ORAC est augmenteacute par 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait de V
myrtillus
Bao et coll (6) avaient deacutejagrave mis en eacutevidence lrsquoeffet protecteur du rein drsquoun extrait de V
myrtillus vis-agrave-vis drsquoun stress oxydant induit par KBrO3
En conclusion la myrtille pourrait preacutevenir les dommages heacutepatiques causeacutes par un stress
oxydant gracircce agrave ses proprieacuteteacutes antioxydantes
53
4 Effet de Vaccinim myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives et le
vieillissement
41 Effets sur un stress eacutemotionnel
Il a eacuteteacute mis en eacutevidence que le stress psychologique joue un rocircle significatif dans la
pathogenegravese de cancers et peut ecirctre associeacute avec une augmentation des produits issus de
lrsquooxydation et de leurs dommages sur les tissus
Le stress oxydant participe agrave lrsquoeacutetiologie de maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie
drsquoAlzheimer et la maladie de Parkinson En effet le stress eacutemotionnel peut affecter le systegraveme
nerveux central dans lequel se trouve notamment les neurones dopaminergiques qui
produisent la dopamine un neurotransmetteur du groupe des cateacutecholamines preacutecurseur de la
noradreacutenaline jouant un rocircle fondamentale dans le cerveau (controcircle de la motriciteacute) utiliseacute
en theacuterapeutique pour son action stimulante sur le systegraveme cardiovasculaire Les neurones
dopaminergiques sont localiseacutes dans certaines reacutegions ceacutereacutebrales comme lrsquohypothalamus le
locus niger et les corps strieacutes Ainsi la rupture de la transmission dopaminergique affecte
lrsquoactiviteacute comportementale Une baisse du niveau de dopamine dans certaines reacutegions
ceacutereacutebrales peut induire une perte des certains fonctions cognitives comme la meacutemoire
lrsquoattention la reacutesolution de problegraveme le mouvement la reacuteponse eacutemotionnelle et la capaciteacute
eacutemotionnelle agrave ressentir le plaisir ou la douleur
De plus les ERO induites par un stress sont connues pour ecirctre responsables de la
peroxydation lipidique et de lrsquooxydation des proteacuteines avec formation de proteacuteines
carbonyles Ainsi des eacutetudes ont deacutemontreacute que la modification de proteacuteines intracellulaires
comme certaines enzymes cleacutes et proteacuteines structurales peuvent mener agrave la deacutegeacuteneacuteration
neurofibrillaire des neurones menant agrave la maladie drsquoAlzheimer une autre maladie
neurodeacutegeacuteneacuterative (1) (52)
En 2008 Rahman et coll (52) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun meacutelange
drsquoanthocyanosides de Vaccinum myrtillus administreacute oralement agrave des souris soumis agrave un
stress oxydant ceacutereacutebral provoqueacute par la coupure des moustaches En effet le retrait des
moustaches augmente la formation de proteacuteines carbonyles et induit la peroxydation lipidique
dans le cerveau le cœur le rein et le foie Le niveau des marqueurs de lrsquooxydation diffegraverent
en fonction des reacutegions ceacutereacutebrales De mecircme le niveau de dopamine est alteacutereacute dans le cortex
ceacutereacutebral et le meacutesenceacutephale Les moustaches de souris jouent un rocircle tregraves important dans le
sens et la motriciteacute et la contribution sensorielle est directement lieacutee aux neurones moteurs
54
controcirclant leur activiteacute locomotrice Crsquoest pourquoi le retrait des moustaches a de graves
conseacutequences puisqursquoil affecte lrsquoactiviteacute locomotrice induisant anxieacuteteacute et hyper-locomotion
Ce stress oxydant induit par un stress psychologique augmente les niveaux de marqueurs
biologiques comme les proteacuteines carbonyles et les TBARS dans certains organes et reacutegions
ceacutereacutebrales (cœur reins foie meacutesenceacutephale cortex et ceacutereacutebellum) Or lrsquoadministration des
anthocyanosides de V myrtillus des souris diminue la peroxydation lipidique dans tous les
tissus reacuteduit lrsquooxydation des proteacuteines dans les reins le foie le meacutesenceacutephale et le cortex
ceacutereacutebral de faccedilon notable et diminue eacutegalement les niveaux de proteacuteines carbonyles et de
TBARS
Enfin lrsquoadministration de myrtille supprime les modifications (induites par le stress
psychologique) des niveaux de dopamine et de ses meacutetabolites (ces modifications pouvant
provoquer des maladies deacutegeacuteneacuteratives comme la maladie de Parkinson)
Cependant cette eacutetude ne peut pas conclure sur la capaciteacute des anthocyanosides de V
myrtillus agrave franchir la barriegravere heacutemato-enceacutephalique et agrave y exercer leur action antioxydante
Les principales formes retrouveacutees dans le foie et les reins sont des meacutetabolites meacutethyleacutes des
anthocyanosides et drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour prouver le lien entre ces meacutetabolites
meacutethyleacutes et la neuroprotection observeacutee dans lrsquoeacutetude
En conclusion cette eacutetude suggegravere que les anthocyanosides peuvent ecirctre utiles dans la
protection et le traitement des maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives associeacutees agrave un stress oxydant
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication du stress oxydant
Le dommage oxydant a depuis longtemps eacuteteacute proposeacute pour ecirctre en partie responsable de
plusieurs deacutesordres lieacutes agrave lrsquoacircge De plus plusieurs eacutetudes ont confirmeacute lrsquoaccumulation des
marqueurs biologiques du stress oxydant (augmentation de lrsquooxydation des lipides et des
proteacuteines dans les cerveaux de mammifegraveres acircgeacutes) Les pertes de la fonction ceacutereacutebrale avec le
vieillissement pourraient ecirctre associeacutees agrave une leacutesion oxydante des biomoleacutecules dans certaines
reacutegions ceacutereacutebrales et un niveau augmenteacute de peroxydes lipidiques observeacute dans des reacutegions
du cerveau impliqueacutees dans les fonctions de meacutemoire et drsquoapprentissage De plus les auteurs
ont deacutemontreacute lrsquoassociation des alteacuterations des fonctions ceacutereacutebrales cognitives avec des
modifications du systegraveme cardiovasculaire comme lrsquoaugmentation de la pression sanguine
(impliqueacutee dans lrsquoacceacuteleacuteration du vieillissement des vaisseaux les alteacuterations des fonctions
ceacutereacutebrales et le deacuteveloppement de lrsquoatheacuteroscleacuterose) (32)
Kolosova et coll (32) utilisent pour leur eacutetude deux souches de rats La souche OXYS qui est
une souche aux traits heacuteriteacutes de vieillissement acceacuteleacutereacute et une haute sensitiviteacute au stress
55
oxydant par rapport agrave une autre souche la souche Wistar Les rats OXYS ont une espeacuterance
de vie plus courte et deacuteveloppent plus preacutecocement des deacutesordres pathologiques lieacutes agrave lrsquoacircge
semblables agrave ceux observeacutes chez lrsquohumain comme lrsquoosteacuteoporose lrsquohypertension arteacuterielle
de ce fait le comportement de jeunes rats OXYS est semblable agrave celui des rats Wistar acircgeacutes
Lrsquoobjectif de leur eacutetude eacutetait de veacuterifier srsquoil existe un lien entre le vieillissement ceacutereacutebral et les
marqueurs du stress oxydant chez les rats OXYS pour rechercher lrsquoefficaciteacute drsquoune
suppleacutementation agrave long terme drsquoantioxydants dans la preacutevention de lrsquoapparition de deacuteficits
cognitifs comme les deacuteficits drsquoapprentissage et de meacutemoire
Les diffeacuterents paramegravetres de stress oxydant dans ces deux souches de rats sont eacutevalueacutes
(peroxydation lipidique niveau de proteacuteines carbonyles niveau de MDA activiteacute de
superoxyde dismutase (SOD) de niveau de GSH et quantiteacute drsquoα-tocopheacuterol)
Lrsquoeacutetude deacutemontre qursquoune suppleacutementation agrave long terme avec un extrait de V myrtillus
preacutevient la manifestation exteacuterieure du vieillissement des deux souches de rats (lrsquoextrait
augmente le poids des souris) Chez les rats OXYS lrsquoextrait de myrtille diminue
- la peroxydation lipidique
- lrsquoactiviteacute SOD dans le cerveau (en jouant un rocircle protecteur vis-agrave-vis du stress
oxydant)
- et le niveau de MDA dans le cerveau
La myrtille preacutevient aussi chez les rats OXYS
- les deacuteficits de meacutemoire et drsquoapprentissage plus efficacement que la vitamine E (autre
antioxydant)
- la deacuteteacuterioration de la fonction mitochondriale (autre cause de seacutenescence acceacuteleacutereacutee)
De plus V myrtillus a la capaciteacute de preacutevenir les mutations induites par les ERO lesquels
srsquoaccumulent avec lrsquoacircge dans la mitochondrie menant agrave un dysfonctionnement
mitochondriale Ce mecircme meacutecanisme pourrait ecirctre impliqueacute dans lrsquoeffet positif exerceacute par la
myrtille sur la meacutemoire des rats OXYS Ainsi la preacutevention des deacuteficits cognitifs
comportementaux avec des antioxydants peuvent montrer le rocircle du stress oxydant dans ces
processus mecircme si drsquoautres meacutecanismes peuvent jouer un rocircle dans cette capaciteacute de
preacutevention des composeacutes
En conclusion Vaccinum myrtillus atteacutenue les deacuteficits cognitifs chez les rats OXYS
apportant la preuve du rocircle theacuterapeutique de cette plante Cependant les meacutecanismes par
lesquels cet antioxydant agit pour exercer une neuroprotection in vivo et le reacuteel impact du
stress oxydant et de ses marqueurs biologiques sur les deacuteficits cognitifs des rats OXYS
doivent encore ecirctre eacutetudieacutes
56
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB
51 Effets drsquoune exposition solaire
Une exposition prolongeacutee aux ultraviolets (UV) durant le sport ou drsquoautres activiteacutes est un
facteur de risque de plusieurs maladies de la peau comme le cancer cutaneacute La deacutepleacutetion de la
couche drsquoozone protectrice entraicircne une quantiteacute plus importante des rayons UV atteignant la
surface planeacutetaire et exerccedilant des effets neacutefastes Les UVB sont largement absorbeacutes mais
moins peacuteneacutetrants que les UVA atteignant particuliegraverement la couche cellulaire de lrsquoeacutepiderme
basal Les UVB sont plus geacutenotoxiques et environ 1000 fois plus capables de provoquer un
coup de soleil que les UVA Ainsi le coup de soleil lrsquoeacuterythegraveme et lrsquoœdegraveme sont des
manifestations de lrsquoexposition aux UVB Lrsquoabsorption des photons UVB megravenent agrave des
dislocations de lrsquoADN et agrave la formation de photoproduits dimegraveriques de pyrimidine De plus
ils interagissent directement avec les acides amineacutes aromatiques notamment le tryptophane et
la tyrosine (inclus dans les proteacuteines) pouvant alors alteacuterer les fonctions de celles-ci Les UVB
altegraverent indirectement les macromoleacutecules ils geacutenegraverent la production de radicaux libres
comme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote induisant lrsquooxydation des proteacuteines
des lipides et de lrsquoADN Ces produits oxydeacutes (hydroperoxydes lipidiques proteacuteines
carbonyles et 8-hydroxydeacuteoxyguanosine) sont impliqueacutes dans le deacutebut des cancers cutaneacutes
Les UVB diminuent aussi les antioxydants de la peau responsable drsquoune baisse de la
protection vis-agrave-vis des radicaux libres Ils participent aux pheacutenomegravenes de processus
inflammatoire de la peau incluant une cascade drsquoeacutevegravenements comme lrsquoinfiltration de
leucocytes sanguins inflammatoires (macrophages et neutrophiles) lrsquoaugmentation de la
production des prostaglandines comme conseacutequence de lrsquoaugmentation de la peroxydation
lipidique la libeacuteration du fateur TNFα (tumour necrosis factor alpha ou facteur de neacutecrose
tumoral) le NFκB (nuclear factor κB ou facteur nucleacuteaire κB) des cytokines pro-
inflammatoires comme les interleukines (IL-1α IL-1β IL-6 IL-8 IL-12) qui en retour
augmentent la production des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote Un deacutefaut de
reacuteparation des leacutesions de lrsquoADN et les effets neacutefastes des UVB du soleil sont agrave lrsquoorigine des
cancers cutaneacutes Crsquoest pourquoi des meacutecanismes de protection de la peau ou une atteacutenuation
de la quantiteacute drsquoUVB atteignant et peacuteneacutetrant la peau peuvent ecirctre des strateacutegies efficaces dans
la preacutevention des dommages occasionneacutes par le soleil (57)
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires
Svobodovaacute et coll (57) Ont eacutetudieacute la capaciteacute des fractions pheacutenoliques des fruits de Lonicera
caerulea L (chegravevrefeuille bleu) et de V myrtillus en preacute et post-traitement sur les dommages
57
oxydants des keacuteratinocytes HaCaT humains induits par un simulateur de radiations solaires
(UVB) Plusieurs paramegravetres sont eacutetudieacutes et seuls les reacutesultats concernant V myrtillus sont
rapporteacutes dans cette thegravese Cette plante a plusieurs effets
- elle augmente le nombre de cellules viables
- diminue significativement la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase de maniegravere dose
deacutependante
- augmente de faccedilon dose-deacutependante la prolifeacuteration cellulaire (prolifeacuteration reacuteduite
par les UVB)
- preacutevient la formation et reacuteduit significativement la cassure simple brin de lrsquoADN
- diminue la caspase-3 (meacutediateur de lrsquoexeacutecution de la mort cellulaire apoptotique)
- diminue la caspase-9 de maniegravere dose-deacutependante (meacutediateurs de lrsquoexeacutecution de la
mort cellulaire apoptotique)
- preacutevient la formation des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote avec
eacutelimination excellente en post-traitement
- et diminue de maniegravere dose-deacutependante la production drsquoIL6
Cependant on remarque que cette protection deacutecline leacutegegraverement agrave des concentrations plus
hautes srsquoexpliquant par un effet pro-oxydant des polypheacutenols dans les cellules irradieacutees ougrave la
balance oxydantsantioxydants est deacuteseacutequilibreacutee
En conclusion V myrtillus pourrait ecirctre un bon candidat pour la fabrication de preacuteparations
dermatologiques protectrices agrave large spectre ou dans des preacuteparations apregraves-soleil Pour cela
des eacutetudes futures sont neacutecessaires pour eacutetudier la biodisponibiliteacute des composants exclure
les toxiques eacuteventuels ou les effets photoxiques et confirmer lrsquoeffet photoprotecteur in vivo
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes
Chez lrsquohomme la reacutetine (Figure 17) est une membrane photosensible qui tapisse la face
interne de lrsquoœil elle est constitueacutee de plusieurs types de cellules formant trois couches
superposeacutees qui sont de lrsquoarriegravere vers lrsquoavant de lrsquoœil
- les cellules photoreacuteceptrices constitueacutees de cocircnes et de bacirctonnets
- les cellules bipolaires
- les cellules ganglionnaires
Sa face posteacuterieure est en contact avec la choroiumlde par lrsquointermeacutediaire de lrsquoeacutepitheacutelium
pigmentaire et sa face anteacuterieure avec le corps vitreacute Les cellules de la reacutetine transforment les
58
influx nerveux en impulsions nerveuses qui gagnent les fibres nerveuses du nerf optique
permettant le transport des informations visuelles jusqursquoau cerveau (1)
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme (77)
La reacutetine est situeacutee dans un environnement tregraves oxygeacuteneacute pouvant subir des dommages induits
par le stress oxydant (les radicaux libres peuvent oxyder les lipides des photoreacutecepteurs) (23)
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire
Dutot et coll (23) ont eacutetudieacute les effets cytoprotecteurs drsquoun extrait en poudre de V myrtillus
(contenant 10 de proanthocyanidols et 10 drsquoanthocyanidines) sur le stress oxydant
appliqueacute aux cellules reacutetiniennes humaines dans un systegraveme in vitro Lrsquoextrait de V myrtillus
est incubeacute (005 et 01) pendant 15 minutes ou 24 heures sur une ligneacutee de cellules de
lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute reacutetinien Puis un stress oxydant induit par le tBHP est appliqueacute
pendant une heure sur ces cellules Les diffeacuterents paramegravetres des dommages du stress oxydant
sont eacutevalueacutes comme les modifications du meacutetabolisme cellulaire la formation des ERO la
formation drsquoO2-et lrsquoapoptose mitochondriale
Les reacutesultats sur ces diffeacuterents paramegravetres sont reacutesumeacutes dans les tableaux II agrave V
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
baisse induite par le tBHP Aucun effet cytoprotecteur
Incubation 24 heures Blocage de lrsquoeffet du tBHP sur le meacutetabolisme cellulaire
59
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Une concentration faible drsquoextrait (005) nrsquoa pas drsquoeffet sur une peacuteriode courte drsquoincubation
(15 minutes) par contre crsquoest le cas pour une peacuteriode plus longue (24 heures) cette
concentration est capable drsquoavoir des effets cytoprotecteurs V myrtillus pourrait ecirctre capable
de stimuler les deacutefenses antioxydantes de lrsquoorganisme mais des eacutetudes compleacutementaires sont
neacutecessaires pour confirmer cette hypothegravese
Enfin lrsquoeacutetude a montreacute que lorsque lrsquoextrait diminue le stress oxydant et lrsquoapoptose
mitochondriale elle restaure aussi la viabiliteacute cellulaire Par contre srsquoil nrsquoy a pas drsquoeffet sur le
stress oxydant il nrsquoy en a pas non plus sur la viabiliteacute cellulaire
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge
Lors du vieillissement et dans certaines maladies oculaires (comme la deacutegeacuteneacuterescence
maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge ougrave le stress oxydant est fortement impliqueacute) des pigments
autofluorescents constitueacutes par des deacutepocircts de lipofuchsine (pigment jaune-brun constitueacutee de
deacutebris moleacuteculaires) peuvent srsquoaccumuler dans les cellules eacutepitheacuteliales du pigment reacutetinien
La lipofuchsine peut absorber la lumiegravere bleue et geacuteneacuterer des photoproduits toxiques
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
surproduction drsquoERO Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution du stress oxydant
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
production drsquoO2-
Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Reacuteduction de la production drsquoO2-
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Inhibition significative de
lrsquoapoptose mitochondriale Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution de lrsquoapoptose mitochondriale
60
perturbant le fonctionnement cellulaire crsquoest donc un geacuteneacuterateur de radicaux lieacutes agrave la
lumiegravere Un composant de reacutetinoiumlde majeur de la lipofuchsine est lrsquoA2E (bis reacutetinoiumlde de
pyridinium deacuteriveacute de reacutetinal et de phosphatidyl eacutethanolamine) il contribue agrave
lrsquoautofluorescence de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute agrave lrsquoinhibition de fonctions cellulaires
essentielles au deacuteclenchement de la mort par apoptose des cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute
et agrave lrsquoabsorption de la lumiegravere bleue aggravant les leacutesions cellulaires (79) A2E lors de
lrsquoirradiation par la lumiegravere bleue subit une photooxydation en geacuteneacuterant de lrsquooxygegravene
singulet celui-ci reacuteagit en retour avec le fluorophore geacuteneacuterant des eacutepoxydes au niveau des
doubles liaisons carbone-carbone Les A2E-eacutepoxydes peuvent alors induire de graves leacutesions
agrave lrsquoADN (une des cibles des eacutevegravenements photodynamiques par interaction lumiegravere bleue-
A2E) pouvant srsquoaccumuler avec lrsquoacircge ougrave un deacuteclin des meacutecanismes de reacuteparation des bases
de lrsquoADN oxydeacutees a eacuteteacute reconnu (56)
Les antioxydants pourraient avoir un rocircle important dans la preacutevention des leacutesions oxydatives
sur les macromoleacutecules comme les bases de lrsquoADN et la deacutegeacuteneacuterescence de la maculaire lieacutee agrave
lrsquoacircge (DMLA) Crsquoest pourquoi Vaccinum myrtillus (par ses proprieacuteteacutes antioxydantes) a fait
lrsquoobjet drsquoeacutetudes montrant sa capaciteacute agrave preacutevenir certaines maladies oculaires causes majeurs
de ceacuteciteacute et de deacuteteacuterioration de lrsquoacuiteacute visuelle chez les personnes acircgeacutees
En 2003 Sparrow et coll (56) ont deacutemontreacute dans une eacutetude in vitro la capaciteacute drsquoun extrait
de V myrtillus agrave inhiber lrsquoeacutepoxydation drsquoA2E par capture de lrsquooxygegravene singulet gracircce agrave sa
richesse en anthocyanosides antioxydants
Dans une eacutetude in vivo utilisant une souche de rats avec seacutenescence acceacuteleacutereacutee (rats OXYS)
Fursova et coll (24) ont deacutemontreacute qursquoune alimentation suppleacutementeacutee agrave long terme avec un
extrait de V myrtillus pouvait ecirctre efficace dans la preacutevention de la DMLA et de la cataracte
seacutenile deux maladies dont les dommages ont eacuteteacute attribueacutees aux radicaux libres
La surreacutegulation des proteacuteines de stress est un moyen de protection contre des conditions
deacuteleacutetegraveres comme le stress oxydant Ainsi Milbury et coll (42) ont deacutemontreacute in vitro la
capaciteacute des anthocyanosides et drsquoautres composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus agrave surreacuteguler
les enzymes de deacutefense du stress oxydant comme lrsquohegraveme oxygeacutenase-1 (HO-1) et la glutathion
S-transfeacuterase (GST) dans des cultures de cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmentaire reacutetinien humain
Agrave cocircteacute du stress oxydant des facteurs vasculaires peuvent ecirctre impliqueacutes dans les maladies
oculaires comme le glaucome la DMLA ou la reacutetinopathie diabeacutetique Comme nous lrsquoavons
vu dans le premier chapitre de cette partie Personn et coll (46) ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoun
extrait de V myrtillus agrave inhiber lrsquoECA cet effet pourrait ecirctre une explication aux effets
observeacutes de la plante sur la vision
61
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus
Un stress oxydant peut laquo srsquoattaquer raquo aux neurotransmetteurs entrainant leur oxydation Ainsi
les neurotransmetteurs comme la dopamine et son meacutetabolite neurotoxique la 6-
hydroxydopamine peuvent subir une oxydation geacuteneacuterant H2O2 et des ERO Dans les neurones
et drsquoautres cellules ce stress oxydant peut ecirctre amplifieacute par le relargage du cytochrome c
(composant essentiel de la chaine respiratoire mitochondriale participant au transfert
drsquoeacutelectrons) localiseacute dans la membrane interne de la mitochondrie dans le cytoplasme ce
relargage induit toute une cascade de reacuteactions aboutissant agrave lrsquoactivation de caspases
(proteacuteines directement lieacutees agrave lrsquoapoptose) pouvant ecirctre fortement preacutejudiciable pour les
meacutetabolites de la dopamine La perte de lrsquointeacutegriteacute mitochondriale observeacutee dans des maladies
neurodeacutegeacuteneacuteratives peut contribuer aussi agrave des niveaux relargueacutes de cytochrome c au-dessus
de la normale (68)
Yao et coll (68) ont montreacute in vitro la capaciteacute drsquoune preacuteparation riche en anthocyanosides
composeacutee de V myrtillus V corymbosum et V oxycoccus L et des anthocyanosides purifieacutes agrave
inhiber lrsquooxydation de la 6-hydoxydopamine augmenteacutee par le cytochrome c Parmi les trois
espegraveces eacutetudieacutees les extraits de V myrtillus apparaissent pour ecirctre plus efficaces dans cette
activiteacute que les deux autres espegraveces ou que les anthocyanosides purifieacutes pouvant srsquoexpliquer
par une plus grande richesse en anthocyanosidesanthocyanidines particuliegraverement la
cyanidine et delphinidine La composition en querceacutetine et agrave moindre degreacute en myriceacutetine
nrsquoont pas de rocircle dans lrsquoactiviteacute antioxydante la preacutesence de querceacutetine est mecircme
inversement correacuteleacutee avec lrsquoeffet antioxydant Lrsquoeffet inhibiteur observeacute est principalement ducirc
agrave lrsquoeffet antioxydant des anthocyanosides
Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent la forte activiteacute des anthocyanosides vis-agrave-vis des
reacuteactions neurotoxiques potentielles et suggegraverent lrsquoimportance de mettre au point des eacutetudes in
vivo dans le but de deacutemontrer des effets neuro- et mitochondrio-protecteurs de ces
phytochimiques particuliegraverement dans la maladie de Parkinson et drsquoautres maladies
impliquant un dysfonctionnement mitochondriale
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant un
stress oxydant
Une ischeacutemie-reperfusion entraine de nombreuses alteacuterations microvasculaires comme une
augmentation des leucocytes adheacuterant agrave la paroi des vaisseaux veineux une diminution de la
longueur des capillaires perfuseacutes menant agrave une diminution du nombre de capillaires
62
fonctionnels une perte de lrsquointeacutegriteacute endotheacuteliale une augmentation de la permeacuteabiliteacute
capillaire (relargage de proteacuteases comme lrsquoeacutelastase et la collageacutenase avec formation drsquoœdegraveme)
et des modifications du diamegravetre des arteacuterioles (modification de la balance vosodilatation-
vasoconstriction au profit drsquoune vasoconstriction ) Les leucocytes jouent un rocircle fondamental
dans lrsquoischeacutemie-reperfusion en srsquoaccumulant dans les tissus ils provoquent lrsquoocclusion
intravasculaire ainsi que le relargage de cytokines pro-inflammatoires et des meacutetabolites
deacuteriveacutes de lrsquooxygegravene En effet les ERO ont eacuteteacute fortement impliqueacutees dans ces deacutesordres
microcirculatoires elles altegraverent entre autre lrsquointeacutegriteacute de la paroi des vaisseaux et entrainent
une augmentation de la permeacuteabiliteacute en post-capillaire et dans les veines collectrices de
lrsquoabajoue drsquohamster De plus les ERO provenant des leucocytes ou non peuvent induire une
contraction des arteacuterioles (8)
En 1995 Bertuglia et coll (8) ont eacutetudieacute les effets des anthocyanosides de V myrtillus sur
lrsquoischeacutemie-reperfusion provoqueacutee sur lrsquoabajoue drsquohamster entrainant les deacutesordres
microcirculatoires citeacutes preacuteceacutedemment Lrsquoeacutetude montre qursquoune administration orale
drsquoanthocyanosides de V myrtillus suite agrave ces dommages permet une protection de la paroi des
vaisseaux gracircce agrave leur action antioxydante une reacuteduction du nombre de leucocytes adheacuterant agrave
la paroi veineuse (proteacutegeant les tissus de lrsquoischeacutemie-reperfusion et preacutevenant la formation de
meacutediateurs inflammatoires) une diminution de la permeacuteabiliteacute capillaire par son activiteacute anti-
proteacuteasique la plante peut ecirctre eacutegalement un modulateur important du tonus des arteacuterioles en
controcirclant la freacutequence et lrsquoamplitude la vasomotion (modification du calibre vasculaire)
permettant une ameacutelioration de la perfusion capillaire (inhibition de la vasoconstriction par les
ERO)
Cette eacutetude est importante drsquoune part pour montrer le rocircle des radicaux libres deacuteriveacutes de
lrsquooxygegravene dans les deacutesordres microcirculatoires et drsquoautre part pour deacutemontrer les effets
beacuteneacutefiques de V myrtillus agrave restaurer les diffeacuterents paramegravetres notamment par son action
antioxydante
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer
Wang et coll (65) ont reporteacute les reacutesultats des eacutetudes qui ont permis de mettre en eacutevidence les
activiteacutes anticarcinogeacuteniques des anthocyanosides et des extraits riches en anthocyanosides
dans des modegraveles de cultures cellulaires in vitro et dans des systegravemes in vivo de modegraveles
tumoraux chez lrsquoanimal Lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides est due agrave leur structure
63
pheacutenolique en donnant un eacutelectron aux radicaux ceux-ci devenant stables (eacutelectrons
apparieacutes) En effet les anthocyanosides sont capables comme nous lrsquoavons vu
preacuteceacutedemment de pieacuteger directement les ERO drsquoaugmenter la valeur ORAC des cellules de
stimuler lrsquoexpression de la phase II de deacutetoxification des enzymes de reacuteduire la formation des
sous-produits de lrsquoADN de diminuer la peroxydation lipidique drsquoinhiber la mutagenegravese
induite par des carcinogegravenes ou des toxines et de reacuteduire la prolifeacuteration cellulaire en
modulant les voies de transduction du signal Ils sont capables eacutegalement de cheacutelater les
meacutetaux et de se lier directement aux proteacuteines Lrsquoactiviteacute antioxydante est principalement due
aux groupes hydroxyles des anthocyanosides en position 3 du cycle C et en position 3rsquo 4rsquo et
5rsquo du cycle B de leur structure de base Enfin il a eacuteteacute montreacute que les aglycones
drsquoanthocyanidines ont une activiteacute antioxydante plus importante que leurs homologues
glycosyleacutes et cette activiteacute diminue quand le nombre de sucres augmente
Mecircme si les eacutetudes expeacuterimentales ont deacutemontreacute lrsquoactiviteacute anticancer des anthocyanosides les
eacutetudes eacutepideacutemiologiques nrsquoont pas montreacute lrsquoactiviteacute protectrice de la consommation
drsquoanthocyanosides vis-agrave-vis du risque de cancer humain et leur activiteacute antioxydante reste
encore questionnable De plus les quantiteacutes drsquoanthocyanosides neacutecessaires pour observer un
effet in vitro sont importantes par rapport aux quantiteacutes retrouveacutees dans le plasma humain in
vivo Crsquoest pourquoi des eacutetudes sont neacutecessaires pour deacutevelopper des solutions qui
permettraient drsquoaugmenter lrsquoabsorption des anthocyanosides etou leurs meacutetabolites
permettant ainsi lrsquoutilisation optimale des anthocyanosides dans la preacutevention de cancer chez
lrsquohomme particuliegraverement dans les tissus autres que le tractus gastro-intestinal et la peau
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus
Katsube et coll (31) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute anticarcinogeacutenique dans un systegraveme in vitro de dix
baies comestibles et particuliegraverement celle de V myrtillus Lrsquoactiviteacute de la myrtille est testeacutee
sur deux ligneacutees cellulaires diffeacuterentes les cellules leuceacutemiques humaines HL60 et les
cellules carcinomateuses du cocirclon HCT116 Lrsquoeacutetude deacutemontre que lrsquoextrait de V myrtillus est
le plus efficace parmi les dix extraits eacutethanoliques de baies pour inhiber la croissance de ces
ligneacutees cellulaires Toutes les concentrations testeacutees inhibent la croissance des cellules HL60
lors des deux peacuteriodes drsquoincubation (24 et 48 heures) alors que lrsquoinhibition de la croissance
des HCT116 nrsquoest observeacutee que pour des intervalles speacutecifiques de concentrations De plus
lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus induit des niveaux significatifs drsquoapoptose dans les
cellules HL60 mais pas dans les cellules HCT116
64
Ce sont les anthocyanosides qui sont responsables de lrsquoinhibition de la croissance des cellules
canceacutereuses HL60 et HCT116 induisant eacutegalement lrsquoapoptose des cellules HL60
Les anthocyanosides de V myrtillus plus particuliegraverement les glycosides de delphinidine et
malvidine induisent lrsquoinhibition de la croissance des cellules de la leuceacutemie humaine HL60
par induction de lrsquoapoptose et mecircme si lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus et certains
anthocyanosides inhibent la croissance des cellules carcinomateuses du cocirclon humain
(HCT116) ces cellules sont toutefois moins sensibles agrave lrsquoapoptose que les autres ligneacutees en
se reacutefeacuterant agrave drsquoautres donneacutees on pourrait suggeacuterer un blocage de la voie drsquoinduction de
lrsquoapoptose des cellules HCT116
Lrsquoinhibition de la croissance par les baies nrsquoest toutefois pas speacutecifique aux cellules
canceacutereuses En conclusion une consommation reacuteguliegravere de baies pourrait maintenir des
niveaux drsquoanthocyanosides dans le plasma Ces baies sont des aliments fonctionnels
prometteurs dans la preacutevention du risque de cancer gracircce agrave leurs effets multiples comme
lrsquoinduction de lrsquoapoptose lrsquoactiviteacute antioxydante et drsquoautres effets anticanceacutereux
En 2004 Zhao et coll (69) ont eacutetudieacute les effets de trois extraits riches en anthocyanosides
Vitis vinifera (Vigne rouge) V myrtillus L et Aronia melanocarpa E (Aronie noire) sur les
cellules canceacutereuses du cocirclon HT-29 et les cellules non tumorigeacuteniques du cocirclon NCM460
Lrsquoeacutetude deacutemontre lrsquoinhibition de la croissance des cellules HT-29 par V myrtillus agrave faibles
concentrations tandis que lrsquoeffet est pauvre sur les cellules NCM460 Cependant une peacuteriode
longue drsquoincubation (72 heures) montre un effet de la myrtille sur la croissance des cellules
NCM460 V myrtillus a une activiteacute importante peut-ecirctre gracircce agrave la cyanidine reporteacutee pour
ecirctre un inhibiteur efficace de la croissance des cellules canceacutereuses coloniques
Dans cette eacutetude la croissance des cellules du colon est inhibeacutee alors que les conditions de pH
et de tempeacuterature ne sont pas optimum pour la stabiliteacute des anthocyanosides Les formes
actives responsables des effets observeacutes pourraient ecirctre dues aux produits de deacutegradation des
anthocyanosides
En conclusion cette eacutetude deacutemontre que des extraits riches en anthocyanosides et notamment
V myrtillus sont capables drsquoinhiber la croissance des cellules canceacutereuses du colon HT-29 agrave
plus basse concentration et agrave des peacuteriodes drsquoincubation plus courtes que la croissance des
cellules non tumorigeacuteniques NCM460 du colon Il reste toutefois agrave deacuteterminer quels sont les
composeacutes des extraits veacuteritablement responsables des effets observeacutes
65
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine
En 2006 Cooke et coll (18) ont eacutetudieacute les effets drsquoun meacutelange drsquoanthocyanosides de V
myrtillus (Mirtoselectreg) et de cyanidine-3-glucoside ou C3G (anthocyanoside le plus
abondant de lrsquoalimentation) sur le deacuteveloppement drsquoadeacutenome intestinal sur souris ApcMin
alimenteacutees pendant 12 semaines avec ces extraits Les souris ApcMin
constituent un modegravele
geacuteneacutetique de polypose adeacutenomateuse familiale humaine Cette maladie autosomique
dominante de lrsquohomme est caracteacuteriseacutee par le deacuteveloppement spontaneacute drsquoune centaine de
polypes colorectaux pouvant se transformer en carcinomes
Les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent que les deux extraits utiliseacutes diminuent le nombre
drsquoadeacutenomes drsquoune maniegravere dose-deacutependante (agrave la plus haute concentration lrsquoinhibition la plus
importante est observeacutee pour la cyanidine-3-glucoside) Les anthocyanosides sont retrouveacutes
dans le plasma agrave la limite de la deacutetection analytique et sont retrouveacutes agrave des niveaux
quantifiables dans lrsquointestin et lrsquourine Les principales formes preacutesentes dans lrsquointestin et
lrsquourine sont des anthocyanosides glucuronides et des meacutetabolites meacutethyleacutes Enfin les
anthocyanosides sont retrouveacutes dans drsquoautres tissus que lrsquointestin
En conclusion la dose eacutequivalente de Mirtoselectreg
chez lrsquohumain est contenue dans environ
740 grammes de baies de V myrtillus suggeacuterant que la dose efficace de lrsquoextrait chez la
souris ApcMin
pourrait ecirctre traduite en une dose importante (mais non impossible) chez
lrsquohumain De plus les glycosides de malvidine sont les anthocyanosides laquo survivants raquo les
mieux sous forme inchangeacutee dans lrsquointestin leur structure eacutetant moins apte agrave subir les
reacuteactions de conjugaison que celle drsquoautres anthocyanosides Lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides
in vivo pourrait ecirctre due au moins en partie agrave leur hydrolyse en anthocyanidines La preacutesence
transitoire des anthocyanidines apregraves hydrolyse de leurs preacutecurseurs glycosyleacutes et leur
transformation par conjugaison meacutetabolique pourraient expliquer lrsquoefficaciteacute de C3G ou du
Mirtoselectreg Le niveau drsquoanthocyanosides agrave la dose efficace chez la souris Apc
Min est bas
dans la circulation systeacutemique mais deacutetectable et mesurable dans le tractus gastro-intestinal et
lrsquourine
Ainsi lrsquoabsence drsquoeffets indeacutesirables des anthocyanosides et leur efficaciteacute dans la reacuteduction
du deacuteveloppement de lrsquoadeacutenome en font de bons candidats pour le deacuteveloppement clinique
66
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes
Les reacutecepteurs agrave lrsquoactiviteacute tyrosine kinase sont des moleacutecules transmembranaires constitueacutees
drsquoun site reacutecepteur sur lequel se lie un ligand (localiseacute sur la face extracellulaire) et un site
tyrosine kinase (sur la face interne) Ces reacutecepteurs ont en plus un site de phosphorylation Le
site tyrosine kinase (constituant une famille drsquoenzymes) est normalement inactif mais peut
srsquoactiver par phosphorylation de la tyrosine Le meacutecanisme drsquoactivation du site tyrosine
kinase ne se fait pas par passage drsquoinformations depuis le site de reconnaissance du ligand
jusqursquoagrave lrsquointeacuterieur de la cellule mais par la liaison du ligand sur deux reacutecepteurs pouvant se
rapprocher et se phosphoryler mutuellement Les reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase jouent
un rocircle crucial dans la carcinogenegravese et la progression tumorale Des exemples importants de
reacutecepteurs agrave tyrosine kinase comportent la famille ErbB incluant le facteur de croissance
eacutepidermique (EGFR ErbB1) et les reacutecepteurs ErbB2-4 lrsquoIGFR1 (insulin-like growth factor
receptor 1) et les VEGFR-2 et VEGFR-3 (vascular endothelial growth factor receptors) ErbB
et IGF sont des reacutecepteurs agrave tyrosine kinase surexprimeacutes dans certains types tumoraux
reacutesultant dans des modifications de la signalisation cellulaire impliqueacutees dans la croissance
cellulaire et la diffeacuterentiation Les reacutecepteurs VEGF sont des modulateurs de lrsquoangiogenegravese et
de la lymphangiogenegravese Crsquoest pourquoi lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs agrave tyrosine
kinase peut ecirctre une theacuterapeutique inteacuteressante (84)
42 Eacutetude de Teller et coll (2009)
Teller et coll (60) ont eacutetudieacute les effets de deux extraits standardiseacutes Mirtocyanreg
(extrait de V
myrtillus et Oenocyaninreg
(extrait de raisins) sur lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs tyrosine kinases
(RTKs) Seuls les reacutesultats concernant V myrtillus seront rapporteacutes dans cette thegravese
Lrsquoinhibition des RTK est eacutevalueacutee en utilisant une activiteacute kinase recombinante dans un
systegraveme de cellules libres et en deacuteterminant lrsquoautophosphorylation induit par le ligand dans
des cellules carcinomateuses de la vulve E431 et dans des cellules endotheacuteliales aortiques
porcines exprimant soit VEGFR-2 soit VEGFR-3 La capaciteacute des extraits riches en
anthocyanosides agrave modifier lrsquoactiviteacute des RTK est compareacutee agrave leur capaciteacute agrave moduler la
croissance des cellules
Les deux extraits inhibent lrsquoactiviteacute drsquoune varieacuteteacute de RTKs dans le systegraveme de cellules libres
(activiteacute kinase des domaines kinases recombinants) et dans les cellules vivantes (reacutecepteur
intact autophosphorylation induite par ligand) Par contre lrsquoautophosphorylation du reacutecepteur
des cellules intactes neacutecessitent des concentrations 10 agrave 50 fois plus hautes que celles
67
neacutecessaires pour lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute kinase recombinante dans le systegraveme de cellules
libres Cette diffeacuterence pourrait srsquoexpliquer par un accegraves pauvre des glycosides aux domaines
kinases recombinants
De plus les deux extraits inhibent davantage les kinases associeacutees avec EGFR et le VEGFR-2
que les kinases associeacutees avec ErbB-2 VEGFR-3 et IGF1R De plus les extraits preacutesentent
peu de speacutecificiteacute entre les membres des reacutecepteurs de la famille ErbB Mecircme si les extraits
riches en anthocyanosides inhibent lrsquoactiviteacute des RTKs peu drsquoeffets ont eacuteteacute montreacutes sur la
croissance des cellules Ceci pourrait ecirctre ducirc soit agrave la faible stabiliteacute des anthocyanosides dans
le milieu de culture soit agrave la preacutesence drsquoautres voies moleacuteculaires que les RTKs ces voies ne
seraient pas affecteacutees par les extraits riches en anthocyanosides et auraient la capaciteacute de
promouvoir la croissance et la survie cellulaire elles pourraient ainsi compenser lrsquoinhibition
des RTKs
Lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoactiviteacute des RTKs nrsquoest pas ducirc aux composants individuels des
extraits en effet V myrtillus contient un ensemble de composeacutes polypheacutenoliques ainsi que
des constituants inconnus Les cateacutechines flavonols et procyanidines preacutesents dans les
extraits en quantiteacutes plus basses que les anthocyanosides ont montreacute dans drsquoautres eacutetudes des
effets inhibiteurs des RTKs Mais la basse biodisponibiliteacute de ces extraits doit ecirctre prise en
compte pour lrsquoeacutevaluation de leurs effets physiologiques
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision
Les extraits de V myrtillus ont eacuteteacute utiliseacutes depuis 1964 dans les affections ophtalmiques et
dans les deacutesordres de la microcirculation Des eacutetudes anciennes ont rapporteacute les effets de
preacuteparations agrave base du fruit de V myrtillus dans lrsquoacuiteacute visuelle en lumiegravere sombre dans la
vision nocturne chez les sujets ne preacutesentant pas de troubles de la vision chez les patients
avec un problegraveme significatif de vision en lumiegravere vive les patients atteints de DMLA de
reacutetinopathie diabeacutetique drsquoinflammation reacutetinienne de reacutetinite pigmentaire (V myrtillus
associeacute au β-carotegravene) et enfin chez les patients avec myopie progressive Drsquoautres eacutetudes ont
rechercheacute les effets de V myrtillus sur la formation de la cataracte chez des patients souffrant
de cataracte corticale seacutenile (extrait pris en association avec la vitamine E) Cependant
lrsquohypothegravese drsquoun effet de V myrtillus sur la vision est tregraves controverseacutee certaines eacutetudes
rapportent des reacutesultats neacutegatifs (35)
Durant la seconde guerre mondiale les pilotes de la British Royal Air force avaient deacutejagrave
rapporteacute une ameacutelioration de lrsquoacuiteacute visuelle apregraves consommation de confitures de myrtilles
68
Cependant durant cette mecircme peacuteriode la technologie du radar a eacuteteacute introduite en Grande-
Bretagne pour la deacutefense aeacuterienne et des eacutetudes ulteacuterieures nrsquoont pas supporteacute lrsquohypothegravese
drsquoune ameacutelioration de la vision nocturne et de la sensibiliteacute au contraste nocturne par la
suppleacutementation en V myrtillus Le systegraveme de radar et non V myrtillus pourrait alors ecirctre la
cause du succegraves de la Royal Air Force (66)
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale
Des eacutetudes ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoextraits de Vaccinum myrtillus seuls ou associeacutes agrave du
β-carotegravene et de la vitamine E (chez des patients avec ou sans deacutesordre oculaire) agrave ameacuteliorer
la vision nocturne agrave induire une adaptation agrave lrsquoobscuriteacute et une restauration de lrsquoacuiteacute
visuelle (suite agrave une exposition agrave une lumiegravere vive ou un flash) plus rapides (42) Drsquoautres
eacutetudes ont montreacute lrsquoefficaciteacute des extraits anthocyanosidiques de myrtille agrave ameacuteliorer la vision
nocturne et lrsquoajustement agrave lrsquoobscuriteacute chez des controcircleurs aeacuteriens des pilotes drsquoavion des
conducteurs de voiture et de camion (43)
Agrave lrsquoopposeacute drsquoautres eacutetudes ne precirctent pas agrave la myrtille des proprieacuteteacutes sur la vision Crsquoest le
cas notamment de lrsquoeacutetude en 2000 de Muth et coll (46) ils ont rechercheacute les effets de V
myrtillus sur lrsquoacuiteacute visuelle nocturne et la sensibiliteacute au contraste nocturne Leur eacutetude est
randomiseacutee double-aveugle et controcircleacutee par placebo Les sujets inclus dans lrsquoeacutetude sont des
hommes jeunes preacutesentant une bonne vision Un groupe reccediloit 160 mg drsquoextrait de V
myrtillus et lrsquoautre groupe un placebo trois fois par jour pendant 21 jours Apregraves un mois
sans traitement le test reprend pendant 3 semaines en inversant les groupes (les sujets ayant
eu le placebo ont maintenant les capsules de V myrtillus et vice versa) Les reacutesultats montrent
qursquoil nrsquoy a pas de diffeacuterences entre les mesures de la moyenne de lrsquoacuiteacute visuelle nocturne
chez les sujets soumis au traitement par V myrtillus et ceux soumis au placebo De mecircme
lrsquoexamen de la derniegravere acuiteacute visuelle durant le traitement actif et celui durant le placebo ne
reacutevegravelent pas de diffeacuterences dans lrsquoacuiteacute visuelle nocturne Le mecircme reacutesultat neacutegatif est
constateacute pour la sensibiliteacute au contraste nocturne
En conclusion cette eacutetude nrsquoapporte pas de reacutesultats positifs sur lrsquoeffet de V myrtillus sur les
deux paramegravetres mesureacutes mecircme si lrsquoextrait est pris agrave haute dose et pendant une dureacutee
significative
Une critique de lrsquoeacutetude de Muth et coll (46) pourrait ecirctre faite sur la population limiteacutee
utiliseacutee peu de sujets ont eacuteteacute inclus dans lrsquoeacutetude et ceux-ci eacutetaient tous des hommes jeunes
avec une bonne vision Il est vrai que deux de ces sujets avaient une moyenne drsquoacuiteacute
69
visuelle nocturne et une sensibiliteacute au contraste nocturne en dessous des autres sujets or
mecircme chez ces sujets aucune diffeacuterence de mesure nrsquoa eacuteteacute enregistreacutee
Cette eacutetude pose de nouveau des doutes sur lrsquoutilisation de la myrtille dans des formes
couramment disponibles et aux doses recommandeacutees comme suppleacutementation efficace pour
lrsquoameacutelioration de la vision nocturne dans une cateacutegorie de sujets preacutesentant une bonne vision
et essentiellement une vision nocturne normale
2 Eacutetude chez des sujets myopes
Une eacutetude a montreacute qursquoune association drsquoanthocyanosides de V myrtillus avec vitamine E et
β-carotegravene ameacuteliorait le champ visuel de patients atteints de myopie aussi bien lors drsquoun
traitement court que long De mecircme il a eacuteteacute deacutemontreacute une efficaciteacute de lrsquoassociation
drsquoanthocyanosides de myrtille avec le reacutetinol sur la sensibiliteacute de la reacutetine de patients myopes
dans 32 des 42 yeux examineacutes (43)
En 2005 Lee et coll (35) ont mis au point une eacutetude randomiseacutee double-aveugle controcircleacutee
par placebo impliquant 60 sujets avec astheacutenopie et myopie basse agrave modeacutereacutee avec erreurs
reacutefractaires entre -1 et -8 dioptres au niveau des deux yeux Lrsquoobjectif de lrsquoeacutetude est de
deacuteterminer lrsquoeffet de lrsquoadministration drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides purifieacutes agrave hautes doses
de V myrtillus sur la fonction visuelle nocturne et les symptocircmes cliniques chez ces sujets de
mecircme acircge et de sensibiliteacute au contraste similaire Ainsi 30 sujets ont reccedilu des comprimeacutes de
100 mg de traitement contenant 85 drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides et les 30 autres sujets
des comprimeacutes placebo deux fois par jours pendant 4 semaines La fonction visuelle nocturne
est eacutevalueacutee par le test de sensibiliteacute au contraste (test objectif) et les symptocircmes cliniques par
un questionnaire rempli par les sujets (test subjectif) avant et apregraves le traitement Ainsi les
reacutesultats baseacutes sur lrsquoanalyse du questionnaire montrent qursquoagrave la suite des 4 semaines de
traitement les sujets traiteacutes par anthocyanosides ont preacutesenteacute une ameacutelioration des symptocircmes
(meilleurs que le groupe placebo) De plus le groupe anthocyanoside a montreacute une sensibiliteacute
au contraste ameacutelioreacutee agrave chaque cycle par degreacute alors qursquoaucune ameacutelioration nrsquoa eacuteteacute
constateacutee dans le groupe placebo
Des eacutetudes anciennes ont reporteacutes une ameacutelioration de la fonction visuelle nocturne chez des
sujets normaux prenant des anthocyanosides alors que des eacutetudes plus reacutecentes nrsquoont montreacute
aucun effet sur la vision nocturne par administration orale simple ou multiple drsquooligomegraveres
drsquoanthocyanosides (35) Ces discordances de reacutesultats pourraient ecirctre causeacutees par des
diffeacuterences dans le choix des sujets les meacutethodes drsquoeacutevaluation de la vision nocturne ainsi que
la concentration et la dose drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides utiliseacutees Alors que des eacutetudes ne
70
montrent pas drsquoeffets des oligomegraveres drsquoanthocyanosides chez les sujets normaux drsquoautres
eacutetudes deacutemontrent lrsquoefficaciteacute de ceux-ci chez les sujets avec myopie ou heacutemeacuteralopie
(diminution anormale de la vision dans lrsquoobscuriteacute)
Dans lrsquoeacutetude de Lee et coll (35) les conditions sont diffeacuterentes de celles que lrsquoon peut trouver
dans drsquoautres eacutetudes qui ont pu ecirctre faites en termes de dose de dureacutee et de type de sujets En
effet une haute dose drsquooligomegraveres anthocyanosides (concentreacutes agrave 85 gracircce au processus de
fermentation speacutecifique) est administreacutee pendant une plus longue peacuteriode compareacutee aux autres
eacutetudes De plus les sujets utiliseacutes englobent des personnes avec myopie astheacutenopie et une
sensitiviteacute au contraste meacutesopique diminueacutee alors que drsquoautres eacutetudes utilisent des sujets
normaux
En conclusion cette eacutetude montre que les anthocyanosides peuvent ameacuteliorer les symptocircmes
subjectifs et les reacutesultats de la moyenne de la sensibiliteacute au contraste chez des sujets
preacutesentant myopie et astheacutenopie Mais drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour rechercher la
dose optimale de V myrtillus la dureacutee de traitement neacutecessaire la dureacutee de lrsquoeffet apregraves
lrsquoarrecirct du traitement et lrsquoapplication de ce traitement en clinique chez des patients avec des
maladies oculaires comme la reacutetinite pigmentaire le glaucome et la reacutetinopathie diabeacutetique
connus pour reacuteduire la vision nocturne
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004)
Canter et coll (13) ont proceacutedeacute agrave une meacuteta-analyse des eacutetudes faites concernant lrsquoeffet des
anthocyanosides de V myrtillus sur la vision nocturne
Des 30 eacutetudes trouveacutees par les auteurs avec des reacutesultats se reacutefeacuterant agrave la vision dans des
conditions de lumiegravere reacuteduites 12 eacutetudes sont des eacutetudes controcircleacutees par placebo Les 4 eacutetudes
les plus reacutecentes sont des eacutetudes controcircleacutees randomiseacutees et rapportent des reacutesultats neacutegatifs
La 5egraveme
eacutetude controcircleacutee randomiseacutee et les 7 eacutetudes controcircleacutees non randomiseacutees rapportent des
reacutesultats positifs dans lrsquoameacutelioration de la vision en lumiegravere reacuteduite Les reacutesultats neacutegatifs sont
associeacutes avec une plus grande rigueur dans la meacutethodologie mais aussi des doses plus basses
et des extraits provenant de sources geacuteographiques distincts pouvant diffeacuterer dans la
composition en anthocyanosides De plus dans 11 des 12 eacutetudes les sujets utiliseacutes sont des
sujets en bonne santeacute avec une vision moyenne normale voire au-dessus de la normale Ainsi
les eacutetudes cliniques les plus rigoureuses ne supportent pas lrsquohypothegravese drsquoune ameacutelioration de
la vision nocturne chez les sujets en bonne santeacute par les anthocyanosides de V myrtillus
Cependant lrsquoassociation entre rigueur meacutethodologique publication reacutecente reacutesultat neacutegatif
est confondu avec plusieurs facteurs de confusion qui peuvent biaiser les eacutetudes comme la
71
dose les diffeacuterentes variations geacuteographiques modifiant la composition des extraits et le type
de sujets inclus dans les eacutetudes De plus les meacutethodes mises en place pour obtenir et
interpreacuteter les eacutelectroreacutetinogrammes employeacutees dans les eacutetudes plus anciennes diffegraverent des
proceacutedures standardiseacutees utiliseacutees maintenant
Lorsque lrsquoanalyse des facteurs de confusion est faite une association entre les reacutesultats
positifs et lrsquoutilisation de plus hautes doses en anthocyanosides de V myrtillus est mise en
eacutevidence De plus la composition phytochimique des extraits diffegraverent selon la geacuteographie
des plantes de Myrtillier Les reacutesultats positifs sont souvent associeacutes avec des eacutetudes utilisant
des extraits provenant drsquoItalie ou de France La quantiteacute des anthocyanosides de la myrtille
(constituants les plus actifs) varient en fonction du cycle de vie des plantes en reacuteponse agrave des
facteurs de stress et des signaux de lrsquoenvironnement Ainsi avec le mucircrissement la quantiteacute
des anthocyanosides augmente alors que celle des proanthocyanidines diminue Crsquoest
pourquoi agrave cause des diffeacuterences geacuteographiques une standardisation drsquoune quantiteacute en
pourcentage fixe drsquoextrait est une proceacutedure insuffisante pour garantir une composition
identique et une activiteacute pharmacologique Lors des eacutetudes drsquoautres composants peuvent ecirctre
ajouteacutes avec les anthocyanosides de mytille comme le β-carotegravene (un deacuteficit est connu pour
ecirctre lieacute agrave une alteacuteration de la vision nocturne) Lrsquoeffet confondant du β-carotegravene dans
certaines eacutetudes ne peut ecirctre correctement eacutevalueacute sans connaitre le statut nutritionnel des
sujets Dans cette meacuteta-analyse 5 eacutetudes utilisent dans le traitement actif du β-carotegravene Une
eacutetude ne montre pas de diffeacuterences dans lrsquointerpreacutetation de lrsquoeacutelectroreacutetinogramme des sujets
traiteacutes avec lrsquoextrait de V myrtillus avec ou sans β-carotegravene et 3 eacutetudes reacutealiseacutees dans les
anneacutees 1940 montrent que le β-carotegravene nrsquoa pas drsquoeffet sur lrsquoadaptation nocturne quand il est
administreacute seul
En conclusion des eacutetudes rigoureuses sur les effets des extraits de V myrtillus vis-agrave-vis de
sujets souffrant drsquoune alteacuteration de la vision nocturne due agrave des conditions pathologiques
oculaires sont neacutecessaires Cependant la preacutesence drsquoeacutetude plus faibles dans la meacutethodologie
le teacutemoignage des eacutetudes animales les eacutetudes des anthocyanosides syntheacutetiques (la cyanidine
syntheacutetique utiliseacutee dans des eacutetudes controcircleacutees par placebo dans les anneacutees 1970 et 1980 a
montreacute une ameacutelioration de la vision nocturne chez des sujets en bonne santeacute et souffrant
drsquoune varieacuteteacute de deacutesordres ophtalmologiques) une eacutetude controcircleacutee randomiseacutee de Ribes
nigrum montrant un effet positif sur le seuil drsquoadaptation nocturne pourraient justifier des
eacutetudes compleacutementaires sur les anthocyanosides de myrtille chez des sujets preacutesentant une
alteacuteration de la vision nocturne
72
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique
La reacutetinopathie diabeacutetique est une complication agrave long terme du diabegravete qui se traduit par une
deacutegeacuteneacuterescence des capillaires irrigant la reacutetine La maladie se manifeste par des
microaneacutevrysmes qui sont de petites dilatations de la paroi des capillaires (preacutesence de petits
points rouges drsquoheacutemorragies et drsquoapparition drsquoexsudatshellip) Dans des formes eacutevolueacutees une
baisse de la vision peut survenir (1) La neacuteovascularisation est la principale modification
rencontreacutee dans la reacutetinopathie diabeacutetique reacutesultant drsquoune interaction avec des cytokines et
des facteurs de croissance pouvant ecirctre responsables de lrsquoangiogenegravese comme dans le cancer
Or VEGF joue un rocircle dans la neacuteovascularisation reacutetinienne mecircme si son rocircle exact dans la
survenue preacutecoce de la pathologie nrsquoest pas encore entiegraverement compris (16)
En 2005 une eacutetude meneacutee par Chung et coll (16) a deacutemontreacute la capaciteacute de Vaccinium
myrtilus a diminueacute le glucose sanguin plasmatique et agrave reacuteduire le pourcentage de surface de
vascularisation reacutetinien chez des rats diabeacutetiques compliqueacute drsquoune reacutetinopathie diabeacutetique
ces pathologies eacutetant induites par la streptozocine Cependant pas drsquoeffet est constateacute sur le
VEGF (16)
Une eacutetude clinique a deacutemontreacute lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides de V myrtillus (administration
orale de 480 mgjour pendant 180 jours) sur les manifestations de la reacutetinopathie diabeacutetique
notamment la reacuteduction voire la disparition des heacutemorragies reacutetiniennes chez des patients
diabeacutetiques (diabegravete type 2) et souffrant drsquoune reacutetinopathie non prolifeacuterative (43)
Lrsquoameacutelioration significative des examens ophtalmoscopiques et angiographiques apregraves
traitement avec 320 mg de Myrtocyanreg
pendant 30 jours a eacuteteacute montreacutee chez 77 agrave 92 des 40
patients inclus dans lrsquoeacutetude et souffrant de diabegravete et de reacutetinopathie hypertensive (43)
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes
Lrsquoeacutepitheacutelium de la surface oculaire joue le rocircle fondamental de barriegravere empecircchant lrsquoentreacutee de
substances nocives dans la corneacutee et maintenant lrsquointeacutegriteacute de la surface oculaire La
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes permet la reacutegeacuteneacuteration du tissu pour
maintenir le rocircle protecteur de la corneacutee et la cicatrisation Crsquoest pourquoi le cycle cellulaire
est tregraves important Au niveau de ces cellules des glycosaminoglycanes (GAGs glucides de
lrsquoorganisme localiseacutes dans le mucus les seacutecreacutetions digestives et le tissu conjonctif) sulfateacutes
sont produits par les trois types de cellules de la corneacutee (cellules eacutepitheacuteliales endotheacuteliales et
les fibroblastes) Les GAGs de lrsquoeacutepitheacutelium corneacuteen peuvent moduler le comportement
cellulaire comme lrsquoadheacutesion la migrationhellip et jouent donc un rocircle important pour la
73
cicatrisation corneacuteenne Lrsquoun des GAGs est lrsquoacide hyaluronique substance de la matrice
extra-cellulaire jouant plusieurs rocircles notamment dans la lubrification lrsquohydratation de la
matrice corneacuteenne et lrsquohomeacuteostasie Il pourrait aussi ameacuteliorer la santeacute de la surface oculaire
et reacuteduire la pression intraoculaire lors de la pose chirurgicale drsquoun implant oculaire (55)
Song et coll (55) ont reacutecemment eacutetudieacute les effets drsquoun extrait de V myrtillus sur le cycle la
croissance cellulaire lrsquoexpression des GAGs et de lrsquoacide hyaluronique dans un modegravele in
vitro de cellules eacutepitheacuteliales limbales corneacuteennes humaines Les reacutesultats deacutemontrent
lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille et ses anthocyanosides agrave promouvoir la division et la
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteenne sans aucune toxiciteacute cellulaire et agrave
augmenter la quantiteacute totale de GAGs sans modifications significatives de lrsquoacide
hyaluronique Lrsquoextrait de myrtille peut alors ecirctre beacuteneacutefique pour la reacutegeacuteneacuteration
physiologique et lrsquohomeacuteostasie
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete
Helmstaumldter (26) a reacutepertorieacute les substances antidiabeacutetiques utiliseacutees avant la deacutecouverte de
lrsquoinsuline Parmi toutes les plantes V myrtillus est celle la plus freacutequemment retrouveacutee dans
les preacuteparations antidiabeacutetiques commerciales au XXegraveme
siegravecle Les feuilles pourraient ecirctre la
partie de plante la plus utiliseacutee Une preacuteparation tregraves commune eacutetait le laquo Pilulae Myrtilli
Jasper raquo (1912) chacun contenant 012 grammes drsquoextraits de feuilles mais cette preacuteparation
nrsquoeacutetait mentionneacutee qursquooccasionnellement dans les traiteacutes scientifiques et seulement quelques
recherches ont eacuteteacute retrouveacutees
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine
Petlevski et coll (48) ont eacutetudieacute les effets drsquoune preacuteparation agrave base de plantes antidiabeacutetiques
comprenant la feuille de V myrtillus et drsquoautres plantes breveteacutee sous le numeacutero No P-
9801091 disponible sur le marcheacute Croate Deux extraits un extrait eacutethanolique (extrait 1) et
non eacutethanolique (extrait 2) sont administreacutes agrave des souris (NOD) non obegraveses rendues
diabeacutetiques par lrsquoalloxane (deacuteriveacute pyrimidique produisant chez lrsquoanimal une neacutecrose des
cellules β des icirclots de Langerhans)
Lrsquoeacutetude deacutemontre que les extraits 1 et 2 diminuent le glucose sanguin de 10 et 20
respectivement de la valeur initiale des souris NOD controcircles (sans traitement) Lrsquoeffet de
lrsquoextrait 2 est donc beaucoup plus marqueacute il est compareacute agrave un antidiabeacutetique de reacutefeacuterence
(acarbose) Les reacutesultats montrent que lrsquoextrait diminue significativement le niveau de glucose
74
sanguin alors que la diminution par lrsquoacarbose nrsquoest pas significative La mecircme chose est
observeacutee pour le niveau de fructosamine dans le sang
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques
Le diabegravete est une maladie souvent associeacutee agrave des deacutesordres meacutetaboliques comme une
hypertriglyceacuterideacutemie Lrsquoinsuline joue un rocircle essentiel dans le meacutetabolisme des lipoproteacuteines
Chez la plupart des patients atteints de diabegravete type 1 (insulino-deacutependant)
lrsquohypertriglyceacuterideacutemie est induit par une moindre activiteacute de la lipase lipoproteacuteique (enzyme
permettant lrsquohydrolyse des triglyceacuterides des lipoproteacuteines plasmatiques) deacutependante de
lrsquoinsuline
Une eacutetude meneacutee en 1996 par Cignarella et coll (17) a montreacute que lrsquoadministration orale
(pendant 4 jours) drsquoun extrait hydro-alcoolique seacutecheacute de feuilles de V myrtillus agrave des rats
rendus diabeacutetiques par streptozocine pouvait diminuer le niveau de glucose plasmatique par
environ 26 et le niveau de triglyceacuterides plasmatiques par 39 Ainsi lrsquoextrait de myrtille
expose une activiteacute hypolipideacutemiante dose-deacutependante chez les rats en stimulant le
catabolisme des lipoproteacuteines riches en triglyceacuterides probablement sous des conditions en
deacuteficits drsquoinsuline Par contre agrave lrsquoopposeacute du ciprofibrate (une moleacutecule de reacutefeacuterence dans le
traitement de lrsquohypertriglyceacuterideacutemie) lrsquoextrait de V myrtillus ne preacutevient pas la formation de
thrombus veineux chez ces rats diabeacutetiques
Ces eacutetudes in vivo ont montreacute lrsquoaction hypoglyceacutemiante de V myrtillus une fois les
constituants isoleacutes cette plante agrave usage traditionnel pourrait eacutegalement attirer lrsquoattention sur le
traitement de certains deacutesordres du meacutetabolisme lipidique
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique
Borrelli et coll (10) ont listeacute les agents phytogeacuteniques utiliseacutes comme remegravedes des ulcegraveres
gastriques Des reacutesultats ont deacutemontreacute lrsquoaction significative de V myrtillus dans la preacutevention
et le traitement des ulcegraveres Certaines eacutetudes ont montreacute ses effets protecteurs dans des ulcegraveres
induits par ligature du pylore par la reacuteserpine ou la pheacutenylbutazone ougrave le traitement avec les
anthocyanosides de V myrtillus a eacuteteacute donneacute avant ou pendant la formation de lrsquoulcegravere La
myrtille exerce un effet anti-ulcegravere en partie par une augmentation du mucus dans la paroi de
lrsquoestomac (ameacuteliorant lrsquoefficaciteacute de la barriegravere formeacutee par ce mucus) et peut influencer la
biosynthegravese des mucopolysaccharides
75
Magistretti et coll (37) montrent qursquoun extrait drsquoanthocyanosides de Vaccinium myrtillus
possegravede une action anti-ulcegravere inteacuteressante dans divers modegraveles expeacuterimentaux De ces
reacutesultats les auteurs ont voulu trouver les composants de Vaccinium myrtillus responsables de
cette action Or cette plante comme nous le savons est riche en anthocyanosides et
anthocyanidines (aglycones respectifs) Cela explique pourquoi les auteurs ont eacutetudieacute les
effets sur lrsquoulcegravere aigu et chronique chez des rats drsquoune anthocyanidine la cyanidine ou 3 5
7-trihydroxy-2-(34-dihydroxypheacutenyl)-1-benzopyrylium chloride (IdB 1027) Les reacutesultats
montrent les effets drsquoIdB 1027 suivants
- reacuteduction de lrsquoulcegravere gastrique induit par la ligature du pylore de faccedilon non dose-
deacutependante
- inhibition de lrsquoulcegravere de stress
- protection de lrsquoestomac de lrsquoulcegravere induit par pheacutenylbutazone
- reacuteduction de la seacuteveacuteriteacute de lrsquoulcegravere induit par indomeacutetacine de faccedilon dose-
deacutependante
- inhibe significativement lrsquoulceacuteration gastrique induit par reacuteserpine
- protection significative mais pas dose-deacutependante contre les leacutesions induites par
lrsquoeacutethanol
- inhibe significativement et de faccedilon dose-deacutependante lrsquoulcegravere induit par histamine
- et reacuteduction significative les leacutesions induites par acide aceacutetique
En conclusion lrsquoIdB 1027 est capable de reacuteduire ou mecircme drsquoinhiber les ulcegraveres induits par de
nombreux facteurs comme la ligature du pylore les AINS Les meacutecanismes par lesquels un
meacutedicament augmente les deacutefenses de la muqueuse gastrique sont varieacutes cela peut ecirctre une
influence sur la seacutecreacutetion et les proprieacuteteacutes physicochimiques du mucus ou une stimulation de
la reacutegeacuteneacuteration cellulaire une influence sur la microcirculation de la muqueuse la seacutecreacutetion
de bicarbonate la protection contre les dommages induits par les radicaux libres ou
lrsquoaugmentation de lrsquoAMP cyclique Ainsi lrsquoIdB 1027 peut agir par une combinaison de
certains de ces meacutecanismes comme une augmentation de la seacutecreacutetion de mucus (sans effet
anti-seacutecreacutetoire gastrique) dans des conditions physiologiques normales et dans des conditions
de deacutefense alteacutereacutees la stimulation de la reacutegeacuteneacuteration cellulaire montreacutee par son activiteacute contre
lrsquoulcegravere induit par acide aceacutetique lrsquoameacutelioration de la microcirculation de la muqueuse
montreacutee par son activiteacute contre lrsquoulcegravere geacuteneacutereacute par lrsquohistamine De plus lrsquoIdB 1027 est un
antioxydant et les anthocyanidines sont des inhibiteurs efficaces de lrsquoAMPc-
phosphodiesteacuterase dans des tissus varieacutes ce qui pourrait contribuer agrave lrsquoactiviteacute
pharmacologique observeacute
76
En conclusion les effets deacutemontreacutes dans les modegraveles drsquoanimaux lrsquoabsence de toxiciteacute et
lrsquoexcellente toleacuterance font de cette moleacutecule un bon candidat dans des eacutetudes cliniques
comme agent antiulcegravereux
2 Action sur Helicobacter pylori
Le traitement contre Helicobacter pylori est la plupart du temps constitueacute de deux
antibiotiques et drsquoun inhibiteur de la pompe agrave protons comme lrsquoomeacuteprazole par exemple Or
le problegraveme qui se pose est lrsquoapparition drsquoune reacutesistance aux antibiotiques De plus la bacteacuterie
peut intervenir dans la production des radicaux libres de lrsquooxygegravene augmentant davantage le
stress oxydant et ses dommages au niveau gastrique Une augmentation de la peroxydation
lipidique et un dommage agrave lrsquoADN au niveau des tissus gastriques sont alors observeacutes Par
conseacutequent des antioxydants naturels comme les anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
pourraient servir comme outil theacuterapeutique pour reacuteduire le stress oxydant induit par
Helicobacter pylori (15)
Chatterjee et coll (15) ont eacutetudieacute les effets de diffeacuterents extraits de baies sur Helicobacter
pylori avec ou sans clarithromycine in vitro ainsi que la sensibiliteacute de la bacteacuterie agrave la
clarithromycine Plusieurs baies sont eacutetudieacutees comme la myrtille sauvage (Vaccinium
myrtillus) lrsquoairelle la canneberge la fraise la framboise le sureau et Optiberryreg (un
meacutelange de ces six baies) Cette eacutetude a montreacute que tous les extraits aux concentrations
testeacutees inhibent la croissance de maniegravere dose-deacutependante de H pylori avec une efficaciteacute
supeacuterieure pour Optiberryreg Crsquoest la premiegravere eacutetude montrant lrsquoinhibition de H pylori par des
extraits de baies et notamment V myrtillus lequel preacutesente une meilleure activiteacute que la
fraise la framboise et la canneberge en particulier pour des basses concentrations Enfin un
effet inhibiteur suppleacutementaire est obtenu avec lrsquoajout de la clarithromycine associeacutee aux
extraits de baies agrave toutes les concentrations testeacutees
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus
1 Action antibacteacuterienne
Une eacutetude meneacutee en 2005 par Puupponen-Pimiauml et coll (51) a montreacute lrsquoactiviteacute
antibacteacuterienne de plusieurs baies nordiques incluant V myrtillus Les reacutesultats rapporteacutes
dans cette thegravese ne se reacutefegraverent qursquoagrave la myrtille et sont reacutesumeacutes dans le tableau suivant
77
Listeria
monocytogenes
E-991205
Salmonella
enterica sv
thyphimurium
E-981151
Staphylococcus
aureus E-70045
Lactobacillus
rhamnosus
E-96666
Temps
drsquoincubation 12h 24h 12h 24h 12h 24h 12h 24h
2 mgmL-1
- - + - ++ ++ - -
10 mgmL-1
- - +++ + +++++ +++++ - -
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
(Leacutegende C concentration de la baie de myrtille - pas drsquoeffets inhibiteurs + nombre de
bacteacuteries viables diffegraverent de 10-5 times 101 par rapport au controcircle ++ nombre de bacteacuteries viables
diffegraverent de 5 times 101-5 times 102 par rapport au controcircle +++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 102-5 times 103 par rapport au controcircle ++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 103-5 times 104
par rapport au controcircle +++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de plus 5 times 104 par rapport au
controcircle)
Les reacutesultats deacutemontrent lrsquoactiviteacute antimicrobienne de la myrtille lyophiliseacutee sur les bacteacuteries
Salmonella et Staphylococcus augmente de maniegravere concentration-deacutependante Par contre la
myrtille nrsquoa aucune activiteacute vis-agrave-vis de Listeria et Lactobacillus
Les composeacutes pheacutenoliques ne sont responsables que partiellement de lrsquoinhibition de la
croissance des bacteacuteries Salmonella les effets antimicrobiens eacutetant probablement deacutetenus par
drsquoautres composeacutes comme les acides organiques
Les baies et notamment V myrtillus pourraient ecirctre utiliseacutees dans les aliments fonctionnels et
dans lrsquoindustrie pharmaceutique en tant qursquoagents antimicrobiens
Ainsi la myrtille utiliseacutee traditionnellement est preacutesente dans de nombreuses eacutetudes qui ont
deacutemontreacute ses multiples actions dans des domaines meacutedicaux varieacutes et des pathologies diverses
comme lrsquoinsuffisance veineuse lrsquoatheacuteroscleacuterose le cancer le diabegravete les deacutesordres
oculaireshellip Par ailleurs son action antioxydante attire lrsquoattention des scientifiques et il serait
favorable drsquoentreprendre des eacutetudes cliniques
VIII Toxicologie
1 Effets indeacutesirables
Dans les eacutetudes cliniques sur les extraits de V myrtillus reacutepertorieacutees par Marazzoni et coll en
1996 (43) aucun effet indeacutesirable nrsquoa eacuteteacute observeacute mecircme lors drsquoeacutetudes ougrave le traitement aux
78
extraits de V myrtillus est pris sur une longue peacuteriode Cependant la plupart des eacutetudes
nrsquoincluaient qursquoun petit nombre de patients Une eacutetude de surveillance post-marketing a inclus
2295 sujets prenant 160 mg de Myrtocyanreg
deux fois par jour pendant 1-2 mois pour des
pathologies diverses (insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs fragiliteacute capillaire
modifications de la microcirculation reacutetinienne ou heacutemorroiumldes) Cette eacutetude a montreacute que
seuls 94 sujets ont reporteacute des effets indeacutesirables surtout lieacutes agrave la peau au tractus gastro-
intestinal et au systegraveme nerveux Une eacutetude non-controcircleacutee incluant des femmes enceintes avec
insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs et en crise heacutemorroiumldaire montre qursquoune
administration drsquoun extrait de myrtille (80 ou 160 mg) deux ou trois par jour pendant trois
mois nrsquoentraicircnait pas drsquoeffets indeacutesirables Mais en preacutesence de peu drsquoeacutetudes toxicologiques et
drsquoune seacutecuriteacute de la myrtille non eacutetablie lrsquoutilisation de la myrtille chez la femme enceinte et
allaitante devrait ecirctre proscrite
2 Doses leacutetales 50 (DL50)
Les donneacutees toxicologiques indiquent une DL50 pour le Myrtocyanreg drsquoenviron 2 gkg chez
les souris et les rats Chez le chien des doses uniques de 3 gkg nrsquoentraicircnent pas drsquoeffets
indeacutesirables si ce nrsquoest une coloration plus fonceacutee des urines et fegraveces Une administration
orale quotidienne drsquoextrait de V myrtillus agrave des doses de 125 agrave 500 mgkg et 80 agrave 320 mgk
respectivement agrave des rats et des chiens pendant 6 mois nrsquoentrainent ni mortaliteacute ni toxiciteacute
Les eacutetudes pharmacocineacutetiques reacutealiseacutees chez des rats ont deacutemontreacute une eacutelimination rapide
des anthocyanosides de myrtille dans les deux heures suivant une administration orale (5) Il
est eacutetablit dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) que si les parties de
mytille utiliseacutees pour les phytomeacutedicaments est une poudre de fruit frais ou sec ou de feuille
le dossier laquo abreacutegeacute raquo de lrsquoAMM doit preacutesenter une eacutetude toxicologique alleacutegeacutee celle-ci
nrsquoeacutetant pas indispensable pour certaines formes galeacuteniques agrave base de myrtille (tisane extrait
aqueux teinture extrait hydro-alcoolique) La monographie de la Commission E allemande
preacutecise que si la baie de myrtille est atoxique la feuille quant agrave elle peut induire des
intoxications chroniques en cas de doses eacuteleveacutees ou drsquousage prolongeacute Les premiers
symptocircmes chez lrsquoanimal se traduisent par une aneacutemie une cachexie un ictegravere un eacutetat
drsquoexcitation aiguumle et des perturbations du tonus pouvant agrave terme ecirctre fatale apregraves une
administration chronique de 15 gkgjour Ces symptocircmes ressembleraient agrave ceux preacutesents
dans lrsquointoxication par lrsquohydroquinone ce dipheacutenol nrsquoest pourtant pas preacutesent dans la feuille
de myrtille La Commission E par prudence ne justifie pas lrsquoutilisation de la feuille dans un
but theacuterapeutique face agrave ces risques La Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament quant agrave
79
elle ne demande un essai toxicologique que pour la poudre de feuille mais pas pour les
extraits (quelque soit le titre) (11) De ce fait drsquoautres eacutetudes toxicologiques seraient
neacutecessaires
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus
Mecircme si aucune contre-indication nrsquoest mentionneacutee dans la litteacuterature il convient toutefois de
consideacuterer un risque potentiel drsquointeraction entre les preacuteparations agrave base de myrtille et drsquoautres
produits meacutedicinaux ayant des effets similaires ou opposeacutes agrave ceux de la myrtille Des eacutetudes
preacutecliniques par exemple ont montreacute que les extraits de V myrtillus avaient un effet anti-
agreacutegant et pouvaient augmenter le temps de saignement (5) Une surveillance devrait ecirctre
apporteacutee lors drsquoassociation entre les speacutecialiteacutes agrave base de myrtille et les meacutedicaments
antiagreacutegants ou anticoagulants mecircme si aucune interaction nrsquoa eacuteteacute rapporteacutee Enfin comme
nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment lrsquoutilisation de speacutecialiteacutes agrave base de myrtille est deacuteconseilleacutee
chez la femme enceinte ou allaitante (5)
80
QUATRIEME PARTIE
UTILISATIONS DE VACCINIUM
MYRTILLUS L
81
I Utilisations alimentaires de Vaccinium myrtillus
La myrtille est avant tout un fruit tregraves appreacutecieacute par les consommateurs pour ses proprieacuteteacutes
gustatives et sa valeur nutritive
1 Utilisations culinaires
Les promeneurs friands des baies de myrtille les consomment sur place ou chez eux Il est
important de laver les baies avant leur consommation car lrsquohomme risque drsquoecirctre toucheacute par
lrsquoeacutechinococcose multiloculaire Cette maladie parasitaire est une cestodose qui seacutevit dans
lrsquoheacutemisphegravere Nord le Massif central lrsquoEst de la France et la Suisse Le renard et autres
canideacutes (chiens) se contaminent eux-mecircmes en mangeant des rongeurs sauvages parasiteacutes
(campagnoleshellip) ils deacuteposent alors des selles contenant des œufs de teacutenia sur le sol
lrsquohomme srsquoinfeste en mangeant les myrtilles proches du sol La maladie se caracteacuterise par le
deacuteveloppement de la larve de teacutenia dans le foie y formant de nombreux alveacuteoles Les
symptocircmes principaux sont douleur sourde amaigrissement et ictegravere (1)
Utiliseacutees en cuisine les myrtilles font lrsquoobjet de nombreuses recettes culinaires Elles sont
utiliseacutees pour accommoder les viandes leur apportant une saveur aciduleacutee Des charcutiers les
ajoutent mecircme agrave leurs saucissons pour les rendre plus moelleux
Les myrtilles sont souvent retrouveacutees dans de nombreuses pacirctisseries (sableacutes citronneacutes cakes
brioches tartes tartelettes puddings vacherins souffleacutes et glaceacutes coulis de fruits rouges
sorbets glaceshellip)
Les baies peuvent aussi ecirctre utiliseacutees pour la preacuteparation de confiture geleacutee et compote
Certains agriculteurs-reacutecolteurs vendent les myrtilles en confiture sur les marcheacutes locaux
Enfin on retrouve des boissons agrave base de myrtilles (jus de fruit nectar sirop liqueur vin et
vinaigre) (22)
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire
Les proprieacuteteacutes tinctoriales des anthocyanes de myrtille sont utiliseacutees dans lrsquoindustrie
alimentaire comme colorant sous la codification E 163 Gracircce agrave leur tregraves faible toxiciteacute il nrsquoy
aucune quantiteacute maximale speacutecifieacutee (quantum satis) ni dose journaliegravere acceptable Malgreacute
leurs proprieacuteteacutes tinctoriales les anthocyanes sont peu utiliseacutees dans lrsquoindustrie alimentaire agrave
cause de leur instabiliteacute (perte ou changement de couleur) en preacutesence de certains facteurs
physico-chimiques de lrsquoenvironnement comme le pH la tempeacuterature et la lumiegravere De plus
82
drsquoautres problegravemes srsquoajoutent agrave leur utilisation comme leur reacuteaction avec le dioxyde de soufre
(substance utiliseacutee pour la conservation drsquoaliments) leur faible solubiliteacute dans lrsquoeau et leur
preacutecipitation formant des complexes avec les proteacuteines Crsquoest pourquoi des proceacutedeacutes ont eacuteteacute
rechercheacutes pour augmenter leur stabiliteacute comme lrsquoutilisation drsquohydrocolloiumldes comme
lrsquoalginate de sodium et un surfactant ionique comme le laurylsulfate de sodium (3)
II Utilisations pharmaceutiques
Pour rappel la liste des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition
comporte deux parties (2)
La LISTE A laquo Plantes meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement raquo et la LISTE B laquo Plantes
meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement en lrsquoeacutetat ou sous forme de preacuteparation dont les effets
indeacutesirables potentiels sont supeacuterieurs au beacuteneacutefice theacuterapeutique attendu raquo
La myrtille appartient agrave la liste A des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition mais nrsquoy fait lrsquoobjet drsquoaucune monographie Agrave la Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition le fruit frais et sec de myrtille font lrsquoobjet drsquoune monographie (Annexe II et III
respectivement) En France certaines indications theacuterapeutiques selon la partie de plante
utiliseacutee sont revendiqueacutees dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) Ainsi
on retrouve les indications suivantes
- pour le fruit (frais ou sec) et la feuille par voie orale ou en usage locale
traditionnellement utiliseacute dans les manifestations subjectives de lrsquoinsuffisance veineuse telles
que jambes lourdes et dans la symptomatologie heacutemorroiumldaire
Il y a drsquoautres indications theacuterapeutiques possibles comme
- pour le fruit (frais ou sec) par voie orale traditionnellement utiliseacute comme
traitement adjuvant de la composante douloureuse des troubles fonctionnels digestifs
- pour le fruit frais (voie orale ou usage local) traitement symptomatique des
troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire tels que ecchymoses peacuteteacutechies
- pour la feuille et le fruit sec (voie orale) traitement symptomatique des diarrheacutees
leacutegegraveres
La Commission E allemande preacutecise dans la monographie (1987) que le fruit de myrtille est
eacutegalement utiliseacute pour le traitement des diarrheacutees aigueumls et pour lrsquoinflammation locale
modeacutereacutee des muqueuses de la caviteacute buccale Le fruit seacutecheacute est utiliseacute agrave la dose de 20 agrave 60 g
par jour en deacutecoction par voie orale pour le traitement de la diarrheacutee chez lrsquoadulte
83
Ainsi les extraits riches en anthocyanosides des fruits de la myrtille peuvent entrer dans la
composition de meacutedicaments utiliseacutes pour traiter les manifestations fonctionnelles de
lrsquoinsuffisance veinolymphatique la symptomatologie des troubles fonctionnels de la fragiliteacute
capillaire et les troubles de la vision meacutesopique et scotopique (11)
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille
11 Meacutedicaments allopathiques (82)
Laboratoire LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRARELreg 100 (comprimeacute enrobeacute bleu clair conditionnement de 20 comprimeacutes)
Meacutedicament vasculoprotecteur drsquoautorisation de mise sur le marcheacute (AMM) ndeg
3400930311714 (1987 reacuteviseacute le 24082005) Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Crsquoest une speacutecialiteacute pharmaceutique associant 100 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de V
myrtillus et 5 mg de β-carotegravene avec comme indications
laquo - Traitement dappoint des manifestations fonctionnelles de linsuffisance veinolymphatique
(jambes lourdes douleurs impatiences du primodecubitus)
- Traitement symptomatique dappoint des troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire
- Traitement dappoint des baisses dacuiteacute et troubles du champ visuel preacutesumeacutes dorigine
vasculaire raquo
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
DIFRARELreg E (comprimeacute enrobeacute blanc)
Meacutedicament ophtalmique agrave viseacute vasculoprotectrice drsquoAMM ndeg3400930311592 (196597
reacuteviseacute le 28022006) pour le conditionnement de 26 comprimeacutes et ndeg3400937701068 (2006)
pour le conditionnement de 60 comprimeacutes Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Cette speacutecialiteacute pharmaceutique associe 50 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de myrtille et
50 mg drsquoα-tocopheacuterol avec comme indication les troubles de la vision meacutesopique scotopique
(heacutemeacuteralopie) et la myopie
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
84
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques
LABORATOIRE BOIRON
Ce laboratoire homeacuteopathique commercialise la teinture megravere de V myrtillus et des dilutions
homeacuteopathiques
Agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise la myrtille a une monographie speacutecifique intituleacutee laquo Vaccinium
myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Annexe IV)
LABORATOIRE LEHNING
DIACUREreg (conditionnement de 60 geacutelules) drsquoAMM ndeg 3232544
Meacutedicament homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale Il est
constitueacute de lrsquoassociation suivante
- Taraxacum pulveacuteriseacute (H) (Pissenlit) 40 mg
- Berberis vulgaris (H) D3 (Epine-vinette) 40 mg
- Juglans regia pulveacuteriseacute (H) (Noyer) 120 mg
- Achillea millefolium (H) D2 (Achilleacutee millefeuille) 40 mg
- Vaccinium myrtillus folium pulveacuteriseacute (H) (feuille de myrtille) 80 mg
- Erythrea centaurium pulveacuteriseacute (H) (Petite centaureacutee) 40 mg
- Natrum phosphoricum (H) D3 40 mg
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute pour les polysurcharges
meacutetaboliques (facilite lrsquoeacutelimination des deacutechets meacutetaboliques) et notamment comme
traitement divers du diabegravete la feuille de myrtille y est utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes
hypoglyceacutemiantes
La posologie est de 1 agrave 2 geacutelules 3 fois par jour en dehors des repas en cure de 1 agrave 2 mois
(82)
DIABENEreg (solution buvable flacon de 30 mL) drsquoAMM ndeg 3030349 est un meacutedicament
homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale
Il est constitueacute de lrsquoassociation suivante Alchemilla vulgaris D3 Kreosotum D4
Strychninum nitricum D4 Arsenicum album D4 Adrenalinum D6 Belladonna D4 Syzygium
jambolanum D2 Vaccinium myrtillus D2 Taraxacum D3 Natrum phosphoricum D3
Helonias dioica D2
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute dans les polysurcharges
meacutetaboliques comme traitement divers de lrsquoobeacutesiteacute
85
La posologie est de 30 gouttes 3 fois par jour de preacutefeacuterence en dehors des repas (82)
13 Compleacutements alimentaires
LABORATOIRE MERCK
BION 3 SENIORreg (conditionnement de 30 ou 60 comprimeacutes)
Compleacutement alimentaire constitueacute de 3 probiotiques 12 vitamines 8 oligo-eacuteleacutements et 3
extraits veacutegeacutetaux (100 microg de luteacuteine extraits de 20 mg de ginseng et 1 mg de myrtille) Il est
preacuteconiseacute en cas de sphegravere ORL fragiliseacutee de deacutefenses naturelles affaiblies et pour mieux
faire face aux rythmes de vie actuels alimentation deacuteseacutequilibreacutee stress surmenage La
posologie est de 1 comprimeacute par jour en cure de 30 ou 60 jours (82)
RICHELETreg ANTI-AGE VISION (conditionnement de 30 comprimeacutes)
Crsquoest un compleacutement alimentaire composeacute de luteacuteine 105 mg drsquoextrait de myrtille des
vitamines B1 B2 et B6 A C E et du seacuteleacutenium La myrtille est utiliseacutee dans ce produit pour
ameacuteliorer la microcirculation sanguine de lrsquoœil et assurer le bon fonctionnement de ses
constituants La posologie est de 1 comprimeacute par jour pendant 3 mois agrave renouveler
peacuteriodiquement (82)
LABORATOIRE LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRAVISIONreg ANTI-VIEILLISSEMENT
Compleacutement alimentaire agrave viseacutee oculaire comprenant des vitamines (vitamine C et E) des
oligo-eacuteleacutements (Zn et Se) des pigments maculaires (luteacuteine extrait de maiumls dont
zeacuteaxanthine) du DHA (ω3) des huiles de poisson et un extrait sec de myrtille doseacute agrave 100 mg
(pour 2 geacutelules) Sur la notice du meacutedicament on trouve les indictions suivantes laquo il est
conseilleacute pour corriger les effets neacutefastes au niveau oculaire des deacuteficits antioxydants en
acides gras essentiels et en pigments maculaires raquo La posologie est de 1 geacutelule 2 fois par jour
(notice du compleacutement alimentaire)
LABORATOIRE ARKOPHARMA
Ce laboratoire pharmaceutique fabrique des geacutelules contenant de la poudre totale microniseacutee
Aujourdrsquohui seule la baie de myrtille est commercialiseacutee par le laboratoire Arkopharma
86
Les Arkogeacutelules de myrtille (baie) sont indiqueacutees dans la diarrheacutee la colite et lrsquoameacutelioration
de la vision nocturne (Brochure Arkopharma)
La myrtille est preacutesente dans beaucoup drsquoautres compleacutements alimentaires que nous ne
citerons pas ici
89
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98
LISTE DES ANNEXES
ANNEXE I Table de composition nutritionnelle Ciqual 2008 de lrsquoAffsa
ANNEXE II Monographie du fruit frais de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE III Monographie du fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE IV laquo Vaccinium myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Pharmacopeacutee
franccedilaise Xegraveme eacutedition)
99
ANNEXE I
TABLE DE COMPOSITION
NUTRITIONNELLE CIQUAL 2008 DE
LrsquoAFSSA
100
Myrtille fraicircche (teneurs pour 100 grammes drsquoaliment comestible)
Leacutegende du code confiance
Echelle de fiabiliteacute de A agrave D A correspondant aux donneacutees les plus fiables
Nom des constituants Uniteacute Teneur
moyenne Min Max Nb eacutechantillons
Source des
donneacutees
Code
confiance
Energie kJ 213 - - - C
Energie kcal 50 - - - C
Energie eacutetiquetage kJ 213 - - - C
Energie eacutetiquetage kcal 50 - - - C
Eau g 838 834 8421 2 760
743 C
Proteacuteines g 074 - - - C
Proteacuteines brutes (N x 625) g 074 - - 1 743 C
Glucides g 10 - - - C
Sucres g 996 - - 1 743 C
Amidon g 003 - - 1 743 C
Polyols totaux g 0 - - - D
Fibres alimentaires g 24 - - 1 743 C
Lipides g 033 - - 1 743 C
AG satureacutes g 0028 - - 1 743 C
AG monoinsatureacutes g 0047 - - 1 743 C
AG polyinsatureacutes g 0146 - - 1 743 C
Cholesteacuterol mg 0 - - 1 690 C
Alcool (eacutethanol) g 0 - - 1 690 C
Acides organiques g 137 - - - 723 C
Sodium mg 1 - - 1 743 C
Magneacutesium mg 6 - - 1 743 C
Phosphore mg 12 - - 1 743 C
Potassium mg 77 - - 1 743 C
Calcium mg 6 - - 1 743 C
Manganegravese mg 0336 - - 1 743 C
Fer total mg 028 - - 1 743 C
Cuivre mg 0057 - - 1 743 C
Zinc mg 016 - - 1 743 C
Seacuteleacutenium microg 01 - - 1 743 C
Iode microg 05 - - 1 573 D
Reacutetinol microg 0 - - 1 743 C
Becircta-carotegravene microg 32 - - 1 743 C
Vitamine D microg 0 - - 1 445 C
Activiteacute vitaminique E (en
eacutequivalents alpha-tocopheacuterol) mg 1 - - 1 497 C
Vitamine C mg 97 - - 1 743 C
Vitamine B1 ou Thiamine mg 0037 - - 1 743 C
Vitamine B2 ou Riboflavine mg 0041 - - 1 743 C
Vitamine B3 ou PP ou
Niacine mg 0418 - - 1 743 C
Vitamine B5 ou Acide
pantotheacutenique mg 0124 - - 1 743 C
Vitamine B6 ou Pyridoxine mg 0052 - - 1 743 C
Vitamine B9 ou Folates
totaux microg 6 - - 1 743 C
Vitamine B12 ou
Cobalamines microg 0 - - 1 743 C
101
ANNEXE II
MONOGRAPHIE DU FRUIT FRAIS
DE VACCINIUM MYRTILLUS L
(Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
102
Myrtille (fruit frais de)
Myrtilli fructus recens
DEacuteFINITION
Fruit mucircr frais ou congeleacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 030 pour cent drsquoanthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-
O-glucoside (chrysantheacutemine C21H21ClO11 Mr 4848) (drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur sucreacutee un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit frais de myrtille est une baie bleu-noir globuleuse drsquoenviron 5 mm de diamegravetre Il
comporte agrave la base une cicatrice ou rarement un fragment de peacutedoncule Le sommet aplati
est surmonteacute par les restes du style persistant et du calice qui forme un repli circulaire Dans
le meacutesocarpe violaceacute et juteux 4 agrave 5 loges renferment de nombreuses petites graines ovoiumldes
brunes
B Le fruit frais de myrtille broyeacute est rouge violaceacute Examinez-le au microscope en utilisant
de la solution drsquohydrate de chloral R Il preacutesente des cellules scleacutereuses rose violaceacute agrave paroi
eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en amas provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des
fragments drsquoeacutepicarpe brun-rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie
des fragments jaune-brun du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave
paroi preacutesentant des eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles de cristaux
drsquooxalate de calcium
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 5 g de drogue reacutecemment broyeacutee ajoutez 20 ml de meacutethanol R
Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
103
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge violaceacute
Chrysantheacutemine une bande rouge violaceacute Une bande principale rouge violaceacute
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge violaceacute
mdash plusieurs bandes bleu violaceacute
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Cendres totales (2416) maximum 06 pour cent
Perte agrave la dessiccation (2232) 800 pour cent agrave 900 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave 105 degC
sur 5000 g de drogue reacutecemment broyeacutee
DOSAGE
Broyez extemporaneacutement 50 g de drogue A environ 500 g de drogue broyeacutee exactement
peseacutes ajoutez 95 ml de meacutethanol R Agitez meacutecaniquement pendant 30 min Filtrez dans une
fiole jaugeacutee de 1000 ml lavez le filtre et compleacutetez au volume avec du meacutethanol R Diluez
cette solution au 150 dans une solution drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le
meacutethanol R
Mesurez lrsquoabsorbance (2225) de la solution obtenue agrave 528 nm en prenant une solution
drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le meacutethanol R comme liquide de
compensation
Calculez la teneur pour cent en anthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-O-
glucoside agrave lrsquoaide de lrsquoexpression suivante
718 = absorbance speacutecifique du chlorure de cyanidine 3-O-glucoside agrave 528 nm
A = absorbance agrave 528 nm
M = Masse de la prise drsquoessai en grammes
CONSERVATION
Lorsque le fruit frais de myrtille est congeleacute conservez-le agrave une tempeacuterature infeacuterieure ou
eacutegale agrave minus 18degC
104
ANNEXE III
MONOGRAPHIE DU FRUIT MUcircR
SECHE DE VACCINIUM MYRTILLUS
L
(Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
105
Fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 10 pour cent de tanins exprimeacutes en pyrogallol (C6H6O3 Mr 1261)
(drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur douce un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit sec de myrtille est une baie bleu-noir ratatineacutee subglobuleuse de 5 mm environ de
diamegravetre avec une cicatrice agrave la base Le sommet est surmonteacute par les restes du style et le
calice persistant qui forme un repli circulaire Le meacutesocarpe violet intense et charnu renferme
de nombreuses petites graines ovoiumldes brunes
B Reacuteduisez le fruit sec de myrtille en poudre (355) (2912) La poudre est brun-violet
Examinez au microscope en utilisant de la solution drsquohydrate de chloral R La poudre
preacutesente des cellules scleacutereuses rose-violet agrave paroi eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en
amas et provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des fragments drsquoeacutepicarpe coloreacutes en brun-
rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie des fragments jaune-brun
du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave paroi preacutesentant des
eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles et des prismes de cristaux drsquooxalate de
calcium de diffeacuterente taille
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 2 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912) ajoutez 20 ml de
meacutethanol R Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
106
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge-violet de faible intensiteacute
Chrysantheacutemine une bande rouge- violet Une bande principale rouge-violet
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge-violet
mdash plusieurs bandes bleu-violet
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Perte agrave la dessiccation (2232) au maximum 120 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave
105 degC pendant 2 h sur 1000 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute
Cendres totales (2416) au maximum 50 pour cent
DOSAGE
Effectuez la deacutetermination des tanins dans les drogues veacutegeacutetales (2814) Utilisez 1500 g de
fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912)
107
ANNEXE IV
laquo VACCINIUM MYRTILLUS
POUR
PREPARATIONS
HOMEOPATHIQUES raquo
(Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition)
108
109
110
111
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
REacuteSUMEacute
Vaccinium myrtillus Linneacute ou myrtille sauvage est un sous-arbrisseau de la famille des
Ericaceacutees On la retrouve dans le nord et le centre de lrsquoEurope en Asie et en Ameacuterique
Boreacuteale En France la myrtille est commune dans la plupart des montagnes entre 400 et 2500
megravetres drsquoaltitude Elle est diffeacuterente de la myrtille cultiveacutee ou Vaccinium corymbosum L Son
fruit est une baie bleu-noir globuleuse agrave saveur sucreacutee et aciduleacutee V myrtillus L renferme de
nombreux composeacutes pheacutenoliques dont les anthocyanosides ceux-ci sont principalement
retrouveacutes dans la peau et la pulpe du fruit de la myrtille ils sont agrave lrsquoorigine de la plupart de
ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques mecircme si drsquoautres composeacutes participeraient agrave lrsquoaction beacuteneacutefique
de la myrtille
V myrtillus L est une plante meacutedicinale inscrite sur la liste A de la Pharmacopeacutee franccedilaise
Xegraveme
eacutedition Le fruit (frais et sec) de la myrtille fait lrsquoobjet drsquoune monographie dans la
Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition Les proprieacuteteacutes theacuterapeutiques des feuilles et des fruits
de V myrtillus L ont eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine populaire les fleurs pour leurs
proprieacuteteacutes toniques astringentes antiseptiques dans le traitement de la diarrheacutee de la
dysenterie quant agrave la feuille elle eacutetait surtout utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
Certaines indications sont valideacutees et figurent dans la Note explicative de lrsquoAgence du
meacutedicament de 1998 et la Commission E allemande Si la baie est atoxique la feuille
preacutesenterait un risque drsquointoxication lieacute agrave des fortes doses ou agrave une utilisation chronique
La myrtille a fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vitro in vivo et quelques eacutetudes cliniques
ayant montreacute une faible biodisponibiliteacute (surtout chez lrsquohomme) mais des effets beacuteneacutefiques
dans le domaine vasculaire dans certaines pathologies ougrave le stress oxydant est impliqueacute
(cancer maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives DMLAhellip) cette activiteacute reste agrave ecirctre prouveacutee chez
lrsquohomme Quant aux eacutetudes cliniques concernant lrsquoaction de la myrtille sur la vision (surtout
nocturne) elles restent controverseacutees mais des eacutetudes in vitro reacutecentes ont montreacute ses effets
beacuteneacutefiques sur la reacutegeacuteneacuteration des cellules corneacuteennes Enfin outre son emploi en cuisine la
myrtille est utiliseacutee dans lrsquoindustrie pour ses anthocyanes aux proprieacuteteacutes tinctoriales et dans le
domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments et des compleacutements alimentaires
agrave base de myrtille pour diverses indications (traitement de la fragiliteacute capillaire de
lrsquoinsuffisance veineuse et dans les troubles de la vision meacutesopique et scotopique)
MOTS-CLEFS Vaccinium myrtillus - Myrtille - anthocyanosides - phytotheacuterapie - stress
oxydant
THESE SOUTENUE LE 19 MAI 2010
Par Olivia Maillefert
86 rue des Ecoles
73230 St Alban Leysse
COMPOSITION DU JURY
Preacutesident du jury
Mr KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences en Botanique
Membres du jury
Mr CORJON Gilles Docteur en Pharmacie
Mr CHOVELON Michel Docteur en Pharmacie
- 1ere pagepdf
- table des matiegraverespdf
- thegravese myrtille olivia paginationpdf
- Derniere pagepdf
-
UNIVERSITE JOSEPH FOURIER
FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE
Anneacutee 2010 Ndeg
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
THESE
PRESENTEE POUR LrsquoOBTENTION DU TITRE DE DOCTEUR EN PHARMACIE
DIPLOcircME DrsquoETAT
OLIVIA MAILLEFERT
Neacutee le 13 Feacutevrier 1982 A Chambeacutery
THESE SOUTENUE PUBLIQUEMENT A LA FACULTE DE PHARMACIE DE
GRENOBLE
Le 19 Mai 2010
DEVANT LE JURY COMPOSE DE
Preacutesident du jury M KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences
en Botanique
Membres
Mr CHOVELON Michel Docteur en pharmacie
Mr CORJON Gilles Docteur en pharmacie
UNIVERSITE JOSEPH FOURIER
FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE
Anneacutee 2010 Ndeg
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
THESE
PRESENTEE POUR LrsquoOBTENTION DU TITRE DE DOCTEUR EN PHARMACIE
DIPLOcircME DrsquoETAT
OLIVIA MAILLEFERT
Neacutee le 13 Feacutevrier 1982 A Chambeacutery
THESE SOUTENUE PUBLIQUEMENT A LA FACULTE DE PHARMACIE DE
GRENOBLE
Le 19 Mai 2010
DEVANT LE JURY COMPOSE DE
Preacutesident du jury M KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences
en Botanique
Membres
Mr CHOVELON Michel Docteur en pharmacie
Mr CORJON Gilles Docteur en pharmacie
REMERCIEMENTS
A Monsieur Serge Krivobok
Merci de tout mon cœur pour votre soutien et votre aide dans la reacutealisation de ce travail Vous
mrsquoavez offert votre temps et vos encouragements et ccedila je ne lrsquooublierai jamais
A Monsieur Michel Chovelon
Merci drsquoavoir donneacute de votre temps et de faire partie de mon jury
A Monsieur Gilles Corjon
Je vous remercie drsquoavoir accepteacute si geacuteneacutereusement de faire partie de mon jury
A Monsieur et Madame Berendsen
Je vous remercie pour votre compreacutehension et votre gentillesse
A mes parents
Merci drsquoavoir toujours eacuteteacute lagrave pour moi de mrsquoavoir soutenue dans les moments difficiles Jrsquoai
beaucoup de chance de vous avoir Je vous aime
A mes grands-parents
Que dire si ce nrsquoest que je vous aime
A toute ma famille
Vous comptez tellement pour moi
A mes amis
Merci pour tous ces fous rires et tous les bons moments que nous avons partageacutes Vous avez
toujours eacuteteacute lagrave dans les moments de joie et de peine
A Fabien
Tu es mon avenir et je souhaite de tout cœur qursquoil soit magnifique
A mon grand-pegravere Roger
Jrsquoaurai tant voulu que tu sois lagrave aujourdrsquohui Tu es preacutesent dans mon cœur je pense agrave toi
chaque jour Tu me manques
TABLE DES MATIERES
Liste des tableaux p1
Liste des figures p2
Liste des abreacuteviations p3
Glossaire p4
Introduction et historique p6
Premiegravere partie Botanique de Vaccinium myrtillus L p7
I Classification botanique de la myrtille p8
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees p8
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium p10
3 Vaccinium myrtillus L ou myrtille sauvage p10
31 Description botanique p10
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille p13
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium p13
41 Vaccinium uliginosum L p13
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo p14
43 Vaccinium macrocarpon L p16
II Culture reacutecolte et production des myrtilles p17
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques p17
11 pH du sol p17
12 Conditions climatiques p17
13 Besoins en eau p17
2 Reacutecolte des myrtilles p18
21 Date et mode de reacutecolte p18
3 Production des myrtilles p19
31 Production mondiale p19
32 Production europeacuteenne p19
33 Production franccedilaise p19
4 Post-reacutecolte p20
41 Conservation p20
42 Conditionnement p20
Deuxiegraveme partie Composition chimique de Vaccinium myrtillus L p21
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus p22
1 Identification macroscopique et microscopique p22
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus p22
21 Composition chimique des feuilles p22
22 Composition chimique des fruits p23
II Anthocyanosides p24
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes p24
2 Structure des anthocyanosides p25
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides p26
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides p27
41 Extraction p27
42 Seacuteparation et identification p27
43 Dosage des anthocyanosides p27
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p28
51 Composition en anthocyanosides p28
52 Donneacutees quantitatives p29
53 Donneacutees qualitatives p29
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus p29
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p30
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus p34
1 Acides pheacutenoliques p34
2 Tanins p34
3 Flavonols p35
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans V myrtillus p35
Troisiegraveme partie Inteacuterecircts theacuterapeutiques de Vaccinium myrtillus L p36
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire p37
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur p37
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire p37
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires p39
2 Activiteacute vasoprotectrice p40
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique p40
22 Action sur la reacutesistance capillaire p41
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme p41
24 Action antiatheacuterogegravenique p42
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice p42
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA) p43
5 Action sur lrsquoangiogenegravese p44
II Action de Vaccinium myrtillus dans le stress oxydant p45
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes p45
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p46
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides p46
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma p47
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides p47
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces reacuteactives
azoteacutees p48
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique p49
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines p50
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie p51
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie p51
32 Etudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques p51
4 Effet de Vaccinium myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives
et le vieillissement p53
41 Effets sur un stress eacutemotionnel p53
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication
du stress oxydant p54
5 Effet de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB p56
51 Effets drsquoune exposition solaire p56
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires p56
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire p57
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes p57
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire p58
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge p59
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus p61
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant
un stress oxydant p61
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus p62
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer p62
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus p63
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine p65
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases p66
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes p66
42 Etude de Teller et coll (2009) p66
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision p67
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale p68
2 Eacutetude chez des sujets myopes p69
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004) p70
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique p72
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes p72
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete p73
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine p73
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques p74
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac p74
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique p74
2 Action sur Helicobacter pylori p76
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus p76
1 Action antibacteacuterienne p76
VIII Toxicologie p77
1 Effets indeacutesirables p77
2 Doses leacutetales 50 (DL50) p78
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus p79
Quatriegraveme partie Utilisations de Vaccinium myrtillus L p80
I Utilisations alimentaires p81
1 Utilisations culinaires p81
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire p81
II Utilisations pharmaceutiques p82
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille p83
11 Meacutedicaments allopathiques p83
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques p84
13 Compleacutements alimentaires p85
Conclusion p87
Bibliographie p89
Liste des Annexes p98
Annexe I p99
Annexe II p101
Annexe III p104
Annexe IV p107
1
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
2
LISTE DES FIGURES
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme
3
LISTE DES ABREVIATIONS
AA allyl alcool
ADP adeacutenosine diphosphate
AMPc adeacutenosine monophosphate cyclique
DMLA deacutegeacuteneacuterescence maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge
ECA enzyme de conversion de lrsquoangiotensine
EDRF endothelium-derived relaxing factorfacteur relaxant deacuteriveacute lrsquoendotheacutelium
ERO espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
GAGs glycosaminoglycanes
GSH glutathion
H2O2 peroxyde drsquohydrogegravene
IC50 Inhibitory Concentration 50concentration inhibitrice agrave 50
IEC inhibiteur de lrsquoenzyme de conversion
IGF insulin-like growth factor
LDLs low-density lipoproteins lipoproteacuteines de basse densiteacute
MDA malondialdeacutehyde
NO monoxyde drsquoazote radicalaire
O2- anion superoxyde
OH radical hydroxyle
PGI2-like prostacyclin-like
PLCγ phospholipase Cγ
RTK reacutecepteur agrave activiteacute tyrosine kinase
tBH tert-butylhydroperoxyde
TBRAs thiobarbituric acid reactive substancessubstances reacuteagissant avec lrsquoacide
thiobarbiturique
UV ultraviolet
VEGF vascular endothelial growth factorfacteur de croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire
XOD xanthine oxydase
4
GLOSSAIRE
Termes botaniques
Actinomorphe se dit dune fleur preacutesentant une symeacutetrie axiale
Adneacute soudeacute ou attacheacute agrave sapplique agrave des organes diffeacuterents comme par exemple des
eacutetamines adneacutees au peacuterianthe
Aneacutemogame qualifie le mode de feacutecondation des plantes dans lequel le pollen est porteacute par
le vent
Anthegravere partie de leacutetamine habituellement porteacutee par le filet contenant le pollen celui-ci
est libeacutereacute lorsque souvre cette terminaison renfleacutee sous forme de petit sac oblong
geacuteneacuteralement jaune et double
Campanuleacute se dit dune fleur en forme de cloche
Capiteacute termineacute en tecircte arrondie
Carpelles organe femelle Lensemble des carpelles forme le pistil (ou gyneacuteceacutee)
Dialypeacutetale dont les peacutetales sont indeacutependants les uns des autres
Hermaphrodite plante portant des organes floraux macircle et femelle
Infundibuliforme se dit dune fleur dont la corolle est en forme dentonnoir
Ligneux se dit des veacutegeacutetaux formant du bois arbres et arbustes mais aussi un certain
nombre de plantes grimpantes
Lobeacute se dit dun organe comme feuille ou peacutetale eacutechancreacute mais sans division complegravete
Loculicide qui souvre en se fendant longitudinalement le long de la nervure dorsale de
chaque loge
Marcotte organe veacutegeacutetal aeacuterien qui srsquoenterre et srsquoenracine avant de se seacuteparer (ou drsquoecirctre
seacutepareacute) de la plante megravere
Peacuterianthe ensemble des piegraveces florales non sexueacutees dune fleur
Septicide qualifie un fruit qui souvre en se fendant longitudinalement au niveau des
cloisons (septums) et seacuteparant ainsi les carpelles
Stomate structure foliaire organiseacutee ayant des meacutecanismes drsquoouverture reacuteversibles
permettant les eacutechanges gazeux
5
Teacutenuinucelleacute se dit dun ovule contenant un nucelle peu deacuteveloppeacute (dans les groupes
eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Uniteacutegumenteacute se dit dun ovule ayant une seule enveloppe autour du nucelle (dans les
groupes eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Urceacuteoleacutee corolle en forme de tube dilateacute agrave la base et reacutetreacutecit au sommet
Zygomorphe se dit dune plante preacutesentant une symeacutetrie par rapport agrave un plan
Autres
Astheacutenopie fatigue de loeil surtout lors daccommodation soutenue et qui provoque des
signes dirritation une sensation de brucirclure et des maux de tecircte
Meacutesopique Caracteacuteristique visuelle du systegraveme oculaire utilisant agrave la fois bacirctonnets et cocircnes
pour interpreacuteter une scegravene visuelle dont lintensiteacute lumineuse est comprise entre celle du jour
et de la nuit (creacutepusculaire)
Reacutetinite pigmentaire maladie heacutereacuteditaire deacutegeacuteneacuterative des cellules visuelles reacuteceptrices de
la lumiegravere (cocircnes et bacirctonnets)
Sensibiliteacute au contraste elle est baseacutee sur la capaciteacute du systegraveme visuel agrave deacutetecter des
diffeacuterences de luminances donc de deacuteterminer lexistence de bords entre surfaces
homogegravenes
Scotopique vision nocturne se basant principalement sur linformation capteacutee par les
bacirctonnets
6
Introduction et historique
Dans une socieacuteteacute ougrave la phytotheacuterapie connait un engouement croissant voulant se rapprocher
au plus pregraves du laquo naturel raquo la connaissance des plantes aux vertus theacuterapeutiques est de plus
en plus rechercheacutee La myrtille sauvage ou Vaccinium myrtillus L appartient agrave la famille des
Ericaceacutees elle est lrsquoune des plantes centrales faisant partie de la liste des plantes meacutedicinales
inscrites agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition (liste A) et dont le fuit (sec et frais) fait
lrsquoobjet drsquoune monographie agrave la Pharmacopeacutee europeacuteenne (6egraveme
eacutedition) Lrsquoeacutetymologie du
genre Vaccinium est incertaine il deacuteriverait du nom latin vacca pour vache car la plante eacutetait
volontiers brouteacutee par les bovins mais pour drsquoautres du nom bacca pour baie (43) Le terme
myrtillus provient de la ressemblance avec les feuilles et les fruits du myrte (Myrtus
communis L) V myrtillus empreinte divers noms vernaculaires (airelle airelle noire airelle
anguleuse bluet brimbelle raisin des bois raisin de bruyegraverehellip) Les deacutesignations anglaises
pour la baie de myrtille sont bilberry fruit blueberry whortleberry pour les feuilles bilberry
leaf huckleberry leaf (67)
Ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques sont utiliseacutees dans la meacutedecine populaire depuis fort
longtemps Dioscoride est le premier agrave vanter les bienfaits de la myrtille dans le traitement de
la dysenterie Puis au XVIegraveme
siegravecle une religieuse et mystique allemande Sainte Hildegarde
de Bingen preacuteconisait la plante pour provoquer faciliter ou augmenter les regravegles (20)
Depuis de nombreuses proprieacuteteacutes sont attribueacutees au myrtillier en fonction de la partie de
plante utiliseacutee On utilisait les baies pour ses proprieacuteteacutes astringentes toniques antiseptiques
dans le traitement de la diarrheacutee des heacutemorroiumldes des inflammations gastro-intestinaleshellip
quant aux feuilles elles eacutetaient surtout utiliseacutees pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes (43)
Lrsquoameacutelioration de la vision nocturne par la myrtille a eacuteteacute rapporteacutee par les pilotes de la British
Royal Air Force qui en consommaient quotidiennement Certains usages precircteacutes agrave la myrtille
ont eacuteteacute valideacutes et figure dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la
monographie de la Commission E allemande (ces usages seront citeacutes dans cette thegravese) La
myrtille fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vivo in vitro et de quelques eacutetudes cliniques
(dans des domaines meacutedicaux varieacutes) dont certaines posent des interrogations Ses utilisations
sont diverses on lrsquoemploie en cuisine (pacirctisseries confitures vin vinaigrehellip) dans
lrsquoindustrie et dans le domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments agrave base de
myrtille et des compliments alimentaires
7
Premiegravere partie
Botanique de Vaccinium myrtillus L
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L (70)
8
I Classification botanique de la myrtille
Le taxon des Spermatophytes ou plantes agrave graines est constitueacute de deux clades les
Gymnospermes ou plantes agrave ovules nus et les Angiospermes ou plantes agrave ovaires
La myrtille (ou myrtillier) appartient agrave lrsquoembranchement des Angiospermes se distinguant des
Gymnospermes par plusieurs caractegraveres dont trois fondamentaux
- les organes reproducteurs se groupent en fleurs bisexueacutees
- les carpelles entourent complegravetement les ovules et se transforment apregraves
feacutecondation en fruit
- le gameacutetophyte femelle situeacute dans lrsquoovule nommeacute sac embryonnaire est le siegravege
drsquoune double feacutecondation lrsquoune donnant lrsquoembryon lrsquoautre conduisant agrave lrsquoalbumen (tissu de
reacuteserve des graines agrave 3n chromosomes)
Selon la classification systeacutematique la myrtille fait partie de la classe des Asteacuterideacutees
(Eudicots agrave peacutetales et carpelles soudeacutes) constitueacutee drsquoenviron 67000 espegraveces on distingue les
Asteacuterideacutees basales et les Euasteacuterideacutees I et II Les Asteacuterideacutees basales ont deux ordres fregraveres
les Ericales et les Cornales (25)
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees (22) (25) (30)
Lrsquoordre des Ericales dont le nom vient drsquoErica pour bruyegravere comprend 7000 espegraveces
reacuteparties en 24 familles dont celle des Ericaceacutees auxquelles appartient la myrtille Cette
famille est reacutepartie dans le monde entier mais avec une preacutefeacuterence geacuteographique pour les
reacutegions tempeacutereacutees ou froides voire mecircme les hautes montagnes De faccedilon geacuteneacuterale elle
regroupe des arbres des arbustes et des lianes aux caracteacuteristiques suivantes (Figure 2)
- des feuilles alternes simples entiegraveres agrave denteacutees-serreacutees dont les bords du limbe
peuvent se replier sur eux-mecircmes afin de proteacuteger les stomates porteacutes par la face infeacuterieure
de la transpiration Chez certaines Ericaceacutees les feuilles sont plates et coriaces ce qui leur
procure une reacutesistance agrave la seacutecheresse
- des fleurs le plus souvent hermaphrodites geacuteneacuteralement plus ou moins pendantes
actinomorphes agrave leacutegegraverement zygomorphes
- quatre ou cinq seacutepales libres agrave leacutegegraverement soudeacutes
les mots suivis de ce symbole ont leur deacutefinition dans le glossaire
9
- quatre ou cinq peacutetales soudeacutees constituant une corolle cylindrique ou urceacuteoleacutee
campanuleacutee ou infundibuliforme parfois dialypeacutetale Chez certains genres aneacutemogames
le peacuterianthe nrsquoest constitueacute que de deux ou trois seacutepales et peacutetales ou trois agrave quatre peacutetales
- huit agrave dix eacutetamines reacuteduites agrave deux ou trois chez les espegraveces aneacutemogames
- le filet des eacutetamines est libre ou adneacute agrave la corolle voire mecircme soudeacute Quelques fois
il peut y avoir une paire drsquoappendices en eacuteperon dresseacute srsquoinseacuterant agrave proximiteacute ou agrave lrsquoendroit
mecircme ougrave se trouve lrsquoanthegravere
- lrsquoanthegravere est constitueacute drsquoune ou de deux loges srsquoouvrant par deux pores libeacuterant les
grains de pollen habituellement disposeacutes en teacutetrades
- les carpelles sont au nombre de deux agrave dix agrave ovaire supegravere ou infegravere comme chez la
myrtille (crsquoest-agrave-dire que lrsquoovaire peut se souder agrave la coupe florale)
- un style avec souvent un creux agrave lrsquointeacuterieur
- un stigmate capiteacute ou faiblement lobeacute
- un ou plusieurs ovules par loge uniteacutegumenteacutes ou teacutenuinucelleacutes
- enfin le fruit peut ecirctre une capsule septicide ou loculicide une drupe agrave plusieurs
noyaux ou une baie comme chez la myrtille
4 ou 5 seacutepales agrave soudure ou adnation variable
4 ou 5 peacutetales soudeacutes
Soudure ou adnation variable
Ovaire infegravere
Ovaire supegravere Type de fruit
Symeacutetrie radiaire () 2 agrave 10 carpelles soudeacutees
ou 4 agrave 10 eacutetamines
Symeacutetrie bilateacuterale (X) Etamines adneacutees aux peacutetales
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees (30)
10
La famille des Ericaceacutees regroupe plusieurs genres et espegraveces dont le nombre varie selon la
litteacuterature de 70 agrave 130 genres et de 2000 agrave 3400 espegraveces Cette famille comprend
- des plantes alimentaires comme Vaccinium myrtillus L (myrtille) Vaccinium
uliginosum L (airelle des marais) Gaultheria procumbens L (theacute du Canada qui fournit le
salicylate de meacutethyle)hellip
- des plantes meacutedicinales comme V myrtillus Ledum palustre L (leacutedon des marais)
Calluna vulgaris L (bruyegravere callune)hellip
- des plantes utiliseacutees pour lrsquoobtention du bois comme Erica arborea L (fabrication
des pipes)
- de nombreuses espegraveces ornementales dans les genres Arbutus (arbousier) Erica
(bruyegravere) Rhododendron (azaleacutee)hellip
La famille des Ericaceacutees est constitueacutee de quatre sous-familles dont les Vaccinioiumldeacutees qui
englobent le genre Vaccinium
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium (22)
Le genre Vaccinium se caracteacuterise par plusieurs particulariteacutes botaniques
- des tiges drsquoaspect contourneacute conseacutequence drsquoune croissance tregraves lente
- des feuilles coriaces plates reacutesistantes agrave la seacutecheresse
- des anthegraveres srsquoouvrant par deux pores souvent munis de deux appendices dresseacutes en
forme de cornes
- un ovaire composeacute de cinq carpelles fermeacutes
- un fruit repreacutesenteacute par une capsule
Ce genre est lui-mecircme constitueacute drsquoenviron 150 espegraveces auquel fait partie la myrtille
Les myrtilles drsquoEurope regroupent deux espegraveces de myrtilles
- V uliginosum L
- V myrtillus L
3 Vaccinum myrtillus L ou myrtille sauvage
31 Description botanique (22) (67)
Le myrtillier (Vaccinum myrtillus L) est un sous-arbrisseau vivace atteignant 20 agrave 60 cm de
hauteur agrave tige verte dresseacutee cylindrique rigide et agrave rameaux vert pacircle anguleux aileacutes dans
leur longueur et plus ou moins grecircles Cette tige est recouverte drsquoune eacutecorce ligneuse sans
poil ni stipule ni latex ni vrille
11
Les racines souterraines sont nombreuses et forment un lacis tregraves serreacute proche du sol avec des
racines adventives La plante se perpeacutetue soit par ramification des tiges souterraines soit par
des bourgeons prenant naissance sur les racines elle est dite plante sociale car elle se
marcotte naturellement
Les feuilles (Figure 3) vert pacircle sont petites (1 agrave 2 cm voire 2 agrave 3 cm selon la litteacuterature)
alternes de forme oblongue agrave ovale agrave pointe fine et allongeacutee Le bord du limbe est finement
denteleacute avec des nervures opposeacutees Ces feuilles sont courtement peacutetioleacutees avec un peacutetiole
(tige portant la feuille) recourbeacute vers le bas Les feuilles prennent une belle couleur rouge-
cuivre en automne Elles sont caduques et reacuteapparaissent au printemps
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus (75)
Les fleurs de couleur blanc roseacute rouge pacircle agrave verdacirctre ont une corolle pendante comportant
quatre ou cinq peacutetales soudeacutes entre eux sur une grande longueur et formant un tube globuleux
agrave lobes courts Elles sont solitaires ou regroupeacutees par deux porteacutees par un peacutedoncule courbeacute
Les seacutepales tregraves petits verts sont soudeacutes agrave la corolle (Figure 4) La floraison a lieu en mai-
juin
12
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus (72)
Le fruit est une baie globuleuse de la taille drsquoun petit pois (diamegravetre variant de 4 agrave 8 mm)
bleu noir agrave maturiteacute cette baie preacutesente parfois des restes de style agrave la base et peut ecirctre
surmonteacutee du calice agrave son sommet formant un disque entoureacute drsquoun faible rebord (Figure 5)
On peut apercevoir agrave la base de la baie la cicatrice du peacutedoncule Le meacutesocarpe est charnu
constitueacute de 4 ou 5 petites loges contenant de multiples petites graines brillantes brun-rouge
La baie mucircrit jusqursquoen en juillet-aoucirct voire septembre
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus (72)
Si le fruit est frais la saveur est douce sucreacutee et leacutegegraverement aciduleacutee voire mecircme astringente
Le fruit sec par contre a une saveur aigre-douce leacutegegraverement astringente En ce qui concerne
les organes reproducteurs lrsquoovaire infegravere est soudeacute agrave la coupe florale Les eacutetamines eacutegales
entre elles deacutepassent la dizaine en nombre elles sont complegravetement libres soudeacutees au
reacuteceptacle elles peuvent ecirctre soit disposeacutees en plusieurs verticilles soit nrsquoavoir aucune
position bien deacutefinie
13
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille (67)
Vaccinium myrtillus est une myrtille sauvage tregraves peu cultiveacutee originaire drsquoEurope du Nord et
Centrale abondant dans les bois clairsemeacutes et les bruyegraveres sur les sols siliceux de montagne
En France on la trouve dans la plupart des massifs montagneux entre 400 et 2500 megravetres
drsquoaltitude (Figure 6)
Leacutegende
Preacutesent
Zone geacuteographique non renseigneacutee
Preacutesence non signaleacutee
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France (81)
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium
41 Vaccinium uliginosum L (22)
Vaccinium uliginosum L nommeacute myrtille de loup ou myrtille des marais se situe
principalement aux bords des marais dans les tourbiegraveres les landes et les bois humides On le
trouve en Dauphineacute dans le Jura les Pyreacuteneacuteeshellip et en Savoie jusqursquoagrave 2000 megravetres et plus
Crsquoest un buisson bas agrave moyen agrave tiges et rameaux arrondis dans leur longueur Ses feuilles
vert-pacircle au dessus nervureacutees au-dessous ne persistent pas en hiver Les fleurs (Figure 7)
sont disposeacutees en grappe de mai agrave juillet
14
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum (72)
Le fruit (Figure 8) drsquoun diamegravetre drsquoenviron 6 mm est bleu-noir pruineux donnant un jus
incolore et agrave chair blanche Sa saveur est fade et sucreacutee Il mucircrit en juillet-aoucirct voire mecircme
jusqursquoen septembre
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum (72)
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo (61)
Ce sont des myrtilles drsquoorigine ameacutericaine dont lrsquoimplantation a eacuteteacute faite essentiellement agrave
partir de Vaccinium corymbosum L (myrtillier geacuteant ou arbustif) Celui-ci est un arbuste
pouvant atteindre 25 megravetres de hauteur drsquoougrave son nom Il est reacutesistant au froid Ses
inflorescences forment un corymbe ougrave le nombre de fleurs par corymbe varie beaucoup
(Figure 9) La baie (Figure 10) est de couleur bleue recouvert de pruine qui masque une chair
blanche
15
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum (79)
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo (79)
La floraison apparait de mars agrave fin mai et dure plusieurs semaines Les feuilles (Figure 11)
prennent une belle coloration en automne ce qui en fait une magnifique plante deacutecorative
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum (79)
16
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage la myrtille drsquoorigine ameacutericaine a un fruit plus gros et
plus sucreacute Cette derniegravere a une pulpe non coloreacutee Plusieurs varieacuteteacutes existent classeacutees en
fonction de lrsquoeacutepoque de maturiteacute
- les varieacuteteacutes preacutecoces comme le Bluetta lrsquoEarlibluehellip
- les varieacuteteacutes demi-preacutecoces comme le Patriot le Collinshellip
- les varieacuteteacutes demi-saison comme le Bluejay le Bluecrophellip
- les varieacuteteacutes demi-tardives comme le Berkeley le Jerseyhellip
- les varieacuteteacutes tregraves tardives comme le Darrow lrsquoElliothellip
43 Vaccinium macrocarpon L (4)
Vaccinium macrocarpon Ait ou canneberge drsquoAmeacuterique (Figure 12) reacutesistant agrave de fortes
geleacutees de moins 35degC et plus est un arbrisseau ressemblant agrave la myrtille sa croissance est
lente Son fruit est une baie aciduleacutee utiliseacutee dans la preacutevention des reacutecidives drsquoinfections
urinaires car elle contient des moleacutecules anti-adheacutesines des fimbriae drsquoEscherichia coli
(bacteacuterie intestinale pouvant ecirctre la cause drsquoinfection urinaire)
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits (83)
Drsquoautres espegraveces de Vaccinium se rencontrent sur le continent ameacutericain comme
- Vaccinium angustifolium Ait (Bleuet nain) qui est un buisson bas infeacuterieur agrave 50 cm
reacutesistant au froid
- Vaccinium ashei Reade qui est un buisson haut (3 agrave 6 megravetres) reacutesistant agrave la
seacutecheresse
Il ya beaucoup drsquoautre espegraveces de Vaccinium que nous ne citerons pas ici
17
II Culture reacutecolte et production des myrtilles
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques
Comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment la myrtille de culture est diffeacuterente de la myrtille
sauvage exigeant des conditions optimales pour une bonne production
11 pH du sol (49) (61)
Le sol doit ecirctre acide et mecircme tregraves acide pour permettre une croissance et un deacuteveloppement
normal ainsi qursquoune bonne reacuteussite de culture pH compris entre 4 et 5 voire 4 agrave 52 selon la
litteacuterature Or ce type de sol nrsquoest pas freacutequent en France Le pH optimum est de 48 Si le pH
deacutepasse 55 les plantes sont chlorotiques et il faut soit diminuer le pH soit renoncer agrave une
telle culture Les sols humides doivent ecirctre eacuteviteacutes car les racines sont tregraves sensibles agrave
lrsquoasphyxie et le deacuteveloppement du systegraveme racinaire est limiteacute
12 Conditions climatiques (49) (61)
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage qui croit dans les landes et les sous-bois humides de
demi-montagne ougrave elle vit en colonie vers 1000 megravetres drsquoaltitude le myrtillier cultiveacute est une
plante de plaine et de faible altitude qui preacutefegravere les endroits ensoleilleacutes Ainsi une exposition
sud ou sud-ouest est conseilleacutee mais il faut faire attention agrave la seacutecheresse En raison des
risques de geleacutees printaniegraveres il faut eacuteviter les lisiegraveres de bois ou la profondeur des valleacutees
Cette plante peut ecirctre eacutegalement cultiveacutee en demi-montagne agrave une altitude comprise entre 600
et 800 megravetres Reacutesistante au froid elle peut supporter de basses tempeacuteratures jusqursquoagrave -30degC
Bien qursquoau cours de la floraison les fleurs peuvent supporter des tempeacuteratures neacutegatives (-
5degC) il faut faire attention car les deacutegacircts peuvent ecirctre tregraves importants surtout sur les varieacuteteacutes
sensibles Agrave lrsquoopposeacute le myrtillier craint la seacutecheresse en eacuteteacute et les vents secs
13 Besoins en eau (49) (61)
La myrtille cultiveacutee aime la proximiteacute de la surface de la nappe phreacuteatique mais craint les
excegraves en eau Ses besoins sont limiteacutes mais permanents tout le long de sa peacuteriode de vie (au
moins 1000 mm drsquoeau durant lrsquoeacuteteacute) Ceci peut srsquoexpliquer par le deacuteveloppement tregraves
superficiel de son systegraveme racinaire et lrsquoabsence de poils absorbants En Lorraine par
exemple le systegraveme drsquoirrigation est le laquo goutte agrave goutte raquo localiseacute permettant drsquoapporter les
doses neacutecessaires en eau et de limiter la contamination fongique Les besoins en eau par
semaine sont de 20 mm
18
Ainsi il faudra tenir compte de ces exigences pour choisir la meilleure exposition possible
2 Reacutecolte des myrtilles
21 Date et mode de reacutecolte (49) (22)
La croissance de la plante eacutetant lente la reacutecolte peut deacutebuter la 2egraveme
anneacutee apregraves la plantation
La production augmente reacuteguliegraverement jusqursquoagrave la 8egraveme
ou la 9egraveme
anneacutee en rapport avec le
deacuteveloppement veacutegeacutetatif La date de reacutecolte deacutepend beaucoup de la varieacuteteacute de lrsquoaltitude des
tempeacuteratures printaniegraveres et du mode de reacutecolte Elle srsquoeacutetend de mai agrave fin septembre voire mi-
juin pour les varieacuteteacutes les plus preacutecoces et fin septembre pour les varieacuteteacutes les plus tardives La
reacutecolte deacutebute lorsque 20 des baies sont mucircres En effet si la reacutecolte se fait trop tocirct les
fruits ne sont pas mucircres et seront de mauvaise qualiteacute En geacuteneacuteral la reacutecolte dure de 3 agrave 5
semaines avec plusieurs passages successifs (un ou plusieurs par semaine) pour une mecircme
varieacuteteacute au fur et agrave mesure de la maturation des fruits
La reacutecolte de la myrtille cultiveacutee se fait manuellement directement dans les barquettes pour
eacuteviter drsquoabicircmer les fruits avec une manipulation suppleacutementaire Ceci est diffeacuterent pour la
myrtille sauvage ougrave la reacutecolte se fait agrave lrsquoaide drsquoun instrument que lrsquoon nomme laquo peigne raquo
(Figure 13) dont il existe divers modegraveles (en bois ou en fer) constitueacutes drsquoune grille permettant
drsquoarracher vite et en quantiteacutes importantes les baies en les emprisonnant entre les dents
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages (78)
19
3 Production des myrtilles
31 Production mondiale (61)
Les Etats-Unis sont les premiers producteurs mondiaux de myrtilles suivis du Canada Ces
pays produisent deux types de myrtille des myrtilles sauvages appartenant majoritairement agrave
lrsquoespegravece Vaccinium angustifolium qui se rapproche de la myrtille europeacuteenne comme nous
lrsquoavons vu dans le chapitre preacuteceacutedent Son deacuteboucheacute est principalement la congeacutelation et la
transformation dont une partie est exporteacutee en Europe
Les myrtilles cultiveacutees aux USA sont principalement composeacutees de
- Vaccinium corymbosum
- des hybrides entre V corymbosum et V angustifolium
- des hybrides entre V ashei et V corymbosum
Ces myrtilles cultiveacutees sont commercialiseacutees majoritairement sur le marcheacute inteacuterieur et un
faible tonnage est exporteacute en Europe et surtout en Australie
En Europe de lrsquoEst et en Scandinavie la cueillette des myrtilles sauvages pour le commerce
ou lrsquoautoconsommation nrsquoest pas neacutegligeable
32 Production europeacuteenne (22) (61)
Crsquoest lrsquoAllemagne qui deacutetient les plus grandes surfaces de myrtilles cultiveacutees suivie par la
France et les Pays-Bas Elles sont aussi cultiveacutees en Italie et au Portugal mais de faccedilon moins
importante
Dans les pays scandinaves la production est principalement constitueacutee de V myrtillus Il faut
noter que des quantiteacutes non neacutegligeables de reacutecolte sont le fait de cueillettes reacutealiseacutees par des
laquo pillards raquo des cultivateurs et enfin par des voyageurs des particuliers ou des touristes qui
consomment les myrtilles sur place pour leur plaisir
33 Production franccedilaise (22) (61)
En France les Landes constituent la premiegravere zone de production des myrtilles cultiveacutees
suivies du Val de Loire du Limousin de la Sologne et des Vosges La majoriteacute des myrtilles
cultiveacutees au niveau national (1300 agrave 1500 tonnesan) est destineacutee pour 95 des tonnages au
marcheacute du frais et est exporteacutee vers lrsquoAllemagne ougrave la consommation y est plus importante
qursquoen France vers la Suisse la Grande-Bretagne lrsquoItaliehellip et en importe de Suegravede du
Canada de Pologne et de Roumanie
En ce qui concerne les myrtilles sauvages 1500 agrave 2000 tonnes sont reacutecolteacutees en France La
principale zone de production est lrsquoArdegraveche suivie du Massif central et des Vosges Cette
20
reacutecolte se fait au peigne par des personnes cueilleurs agriculteurs qui ont un laquo droit de
cueillette raquo La majoriteacute des myrtilles sauvages reacutecolteacutees est destineacutee agrave la transformation en
geleacutees confitureshellippar des ateliers drsquoexploitation ou par des entreprises proches des sites de
production Une faible quantiteacute est destineacutee agrave la vente sur les marcheacutes ou agrave des grossistes pour
la restauration et les eacutepiceries fines
Les statistiques de 2001 ont reacutecapituleacute une production mondiale drsquoenviron 190000 tonnes
(1000 tonnes pour la France) avec pregraves de 38000 hectares cultiveacutes aux Etats-Unis et au
Canada
4 Post-reacutecolte
41 Conservation (49) (61)
Une fois les myrtilles reacutecolteacutees elles doivent ecirctre placeacutees dans une chambre froide pour
garder toutes ses qualiteacutes Lrsquoideacuteal pour conserver le fruit intact pendant une dizaine de jours
est de le stocker entre 8 et 10degC Il gardera alors son parfum lrsquoarocircme en sera mecircme
deacuteveloppeacute Si on veut le conserver plus longtemps il faut le soumettre agrave des tempeacuteratures plus
basses En effet la congeacutelation est un bon proceacutedeacute de conservation pour ce fruit
42 Conditionnement (61)
Le conditionnement que lrsquoon retrouve le plus souvent est la barquette en plastique fermeacutee par
un couvercle perforeacute Ainsi les myrtilles peuvent ecirctre conserveacutees selon les conditions deacutefinies
preacuteceacutedemment
Le temps de stockage est ameacutelioreacute par lrsquoutilisation de films en polypropylegravene semi-
permeacuteables qui maintiennent le fruit sous atmosphegravere modifieacutee Ces films peuvent apregraves
sortie du froid ecirctre gardeacutes durant seulement 24 heures car au-delagrave il peut y avoir des risques
de deacuteveloppement de pourritures
21
Deuxiegraveme partie
Composition chimique
de Vaccinium myrtillus L
22
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus 1 Identification macroscopique et microscopique (43) (67)
Du point de vue macroscopique les feuilles de V myrtillus sont alternes caduques ovales agrave
elliptiques pointues courtement peacutetioleacutees et finement denteleacutees Le bord de la feuille preacutesente
des poils seacutecreacuteteurs peacutedicelleacutes agrave lrsquoextreacutemiteacute de chaque dent quelques fois briseacutes
Du point de vue microscopique la feuille preacutesente des stomates paracytiques des poils agrave
parois eacutepaisses sur la face supeacuterieure des grandes nervures des poils seacutecreacuteteurs et des rangeacutees
de cellules agrave cristaux sur la nervure principale
Du point de vue macroscopique le fruit est une baie globuleuse drsquoun noir violaceacutee nettement
deacuteprimeacutee au sommet de la taille drsquoun petit pois Cet examen doit se faire sur une baie intacte
crsquoest-agrave-dire ni attaqueacutee par des insectes ni moisie De plus elle doit ecirctre molle car elle
devient cassante si elle est stockeacutee de faccedilon prolongeacutee
Lrsquoexamen microscopique est surtout caracteacuteriseacute par la preacutesence de cellules agrave cristaux du
meacutesocarpe et de lrsquoendocarpe Le fruit frais broyeacute ou la poudre de fruit sec met en eacutevidence la
preacutesence de macles de cristaux drsquooxalate de calcium des amas de cellules scleacutereuses de
couleur rose violaceacute agrave parois canaliculeacutees et des fragments jaune-brun du teacutegument seacuteminal agrave
paroi en forme de fer agrave cheval
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus
21 Composition chimique des feuilles (11) (67)
Celle-ci renferme des tanins cateacutechiques (08 agrave 67) des cateacutechols (eacutepicateacutechol
gallocateacutechol eacutepigallocateacutecholhellip) jusqursquoagrave 10 des proanthocyanidines (dimegraveres du cateacutechol
et drsquoeacutepicateacutechol) des flavonoiumldes (heacuteteacuterosides du querceacutetol rhamnoglucosyl- arabinosyl- et
glucuronyl-querceacutetol ainsi que des heacuteteacuterosides de kaempfeacuterol astragaloside) des iridoiumldes
des acides-pheacutenols surtout des acides chlorogeacuteniques et enfin des traces drsquoalcaloiumldes
quinolizidiniques comme la myrtine et lrsquoeacutepimyrtine
La bibliographie ancienne cite la preacutesence drsquoarbutoside et drsquohydroquinone qui ne sont
preacutesents qursquoagrave lrsquoeacutetat de trace voire totalement absent Ceci peut srsquoexpliquer soit par la preacutesence
de chimiotypes soit par une contamination des lots par des espegraveces proches qui ont le mecircme
habitat eacutecologique comme Vaccinium vitis-idaea L ou Vaccinium x intermedium Ruthe
(hybride entre V myrtillus et V vitis-idaea) dans lesquels on retrouve de lrsquoarbutoside de
lrsquohydroquinone libre et du pyroside (6-O-meacutethylarbutoside)
Enfin la feuille contient de faccedilon importante du chrome et du manganegravese
23
22 Composition chimique des fruits (11) (67)
Le fruit de la myrtille est riche en eau (jusqursquoagrave 90) en oligosaccharides (3 agrave 7) et en
acides organiques (acide malique citrique et quinique) Il contient des tanins essentiellement
des tanins cateacutechiques des proanthocyanidols (dimegravere de cateacutechol et drsquoeacutepicateacutechol) une
quinzaine drsquoheacuteteacuterosides les anthocyanosides qui sont des O-glucosides des O-galactosides et
des O-arabinosides en C-3 du cyanidol peacuteonidol delphinidol malvidol et peacutetunidol des
flavonoiumldes (heacuteteacuterosides de querceacutetol et kaempfeacuterol) des flavan-3-ols monomegraveres (cateacutechol et
eacutepicateacutechol)
Enfin on retrouve drsquoautres constituants comme les acides chlorogeacuteniques cafeacuteylquiniques
des acides pheacutenols et des pectines Les iridoiumldes quant agrave eux ne sont preacutesents que dans les
fruits immatures
24
II Anthocyanosides
Avant drsquoentrer dans les deacutetails il est important de connaitre les principaux groupes de
composeacutes phytochimiques que lrsquoon retrouve dans la plupart des fruits et des leacutegumes
(Tableau I)
Familles Classes Sous-classes
Polypheacutenols Flavonoiumldes - anthocyanidines
- flavones
-flavanols
- flavanones
- flavonols
- isoflavones
- tanins
acides pheacutenoliques - hydroxycinnamates
- hydroxybenzoates
non-flavonoiumldes - stilbegravenes
- coumarines
- lignans
Terpegravenes - caroteacutenoiumldes
- monoterpegravenes
Composeacutes soufreacutes - allyl sulfides
- isothiocyanates
Saponines - triterpeacutenoiumldes
- steacuteroiumldes
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes (7)
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes
Le terme anthocyane du grec laquo anthos raquo (signifiant fleur) et laquo kyanos raquo (bleu) est utiliseacute pour
deacutesigner la substance responsable de la coloration du bleuet Ce terme srsquoapplique agrave un groupe
de pigments qui donnent la coloration rouge rose mauve pourpre bleue et violette de la
plupart des fleurs et des fruits Ces pigments existent sous deux formes soit la forme
heacuteteacuteroside (anthocyanosides ou laquo anthocyanins raquo en anglais) soit sous la forme geacutenine
correspondante (anthocyanidols ou laquo anthocyanidins raquo en anglais) On connait environ 400
25
anthocyanosides qui sont preacutesents chez tous les Angiospermes agrave lrsquoexception des
Caryophyllales ougrave seule la famille des Caryophyllaceacutees et des Molluginaceacutees en contiennent
En effet leur preacutesence chez les Gymnospermes est rare Comme nous lrsquoavons vu les
anthocyanes sont responsables de la couleur des fleurs et des fruits mais peuvent eacutegalement
coloreacutes les bracteacutees les feuilles les peacutetioles les racines voire mecircme les bulbes comme dans
lrsquooignon rouge Cependant ce sont dans les fruits que leur concentration est la plus eacuteleveacutee Ils
srsquoaccumulent dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques sous forme de solution et de faccedilon
moins freacutequente sous forme drsquoanthocyanoplastes (11) Selon Szajdek et coll (58) les parois
cellulaires et la chair ne contiennent presque pas drsquoanthocyanosides
2 Structure des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont les pigments les plus importants des plantes visibles par lrsquoœil
humain Ils appartiennent agrave une large classe de composeacutes pheacutenoliques que lrsquoon appelle les
flavonoiumldes Ce sont des glycosides des deacuteriveacutes polyhydroxy et polymethoxy du 2-
pheacutenylbenzopyrylium plus communeacutement appeleacutes cation flavylium
Les diffeacuterences existant entre les anthocyanosides individuels sont lieacutees au nombre de groupe
hydroxyl agrave la nature et agrave la position drsquoattachement des sucres agrave la moleacutecule ainsi qursquoau
nombre et agrave la nature des acides aliphatiques ou aromatiques des sucres attacheacutes agrave la
moleacutecule Dix sept anthocyanosides et leurs aglycones naturellement preacutesents dans les plantes
sont connus Cependant seulement six geacutenines sont les plus freacutequentes (voire quasiment
universelles) dans les plantes supeacuterieures Il srsquoagit du cyanidol (50) du peacutelargonidol (12)
du peacuteonidol (12) du delphinidol (12) du peacutetunidol (7) et du malvidol (7) (Figure 14)
Les glycosides de trois anthocyanidines non meacutethyleacutes les plus largement reacutepandus dans la
nature sont la delphinidine la cyanidine et la peacutelargonidine Ils sont preacutesents dans 80 des
feuilles pigmenteacutees 69 des fruits et 50 des fleurs respectivement (33)
Dans les baies les anthocyanosides sont retrouveacutes sont la forme de mono di ou triglycosides
ougrave les reacutesidus glycosides sont principalement lieacutes agrave C-3 et moins freacutequemment agrave C-5 ou C-7
Les sucres les plus courants sont le glucose le galactose le rhamnose lrsquoarabinose le rutinose
le sambubiose et le sophorose De plus les glycosides des anthocyanosides sont souvent
acyleacutes par des acides comme les acides p-coumarique cafeacuteique feacuterulique et moins
couramment par les acides p-hydroxybenzoiumlque malonique ou aceacutetique (58)
26
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines (65)
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont des pigments solubles dans lrsquoeau ils sont instables agrave la lumiegravere agrave
la tempeacuterature et agrave lrsquooxygegravene Ils agissent en rapport au cation flavylium qui est agrave la fois un
diacide faible et un bon eacutelectrophile Agrave pH tregraves acide (lt agrave 3) la forme cationique coloreacutee en
rouge est stable Agrave pH moins acide (entre 4 et 6) la moleacutecule perd deux protons donnant une
moleacutecule neutre ou ioniseacutee devenant une forme quinonoiumlde coloreacutee en bleu et stabiliseacutee par
reacutesonnance Lrsquohydratation de la moleacutecule conduit agrave la formation drsquoune laquo pseudo-base raquo
carbinolique incolore et si le pH augmente la moleacutecule se transforme en pheacutenate (forme
ioniseacutee) la structure anthocyanique eacutetant deacutetruite Ainsi les anthocyanosides en milieu neutre
ou tregraves peu acide perdent leur coloration Or dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques le
pH est tregraves rarement infeacuterieur agrave 3 Sa coloration dans le milieu vivant peut donc srsquoexpliquer
par trois meacutecanismes qui permettent une protection ou une stabilisation de la moleacutecule
- soit un meacutecanisme par lequel les acides acylant les sucres forment un laquo sandwich raquo
autour de la geacutenine permettant une copigmentation intramoleacuteculaire
- soit par une auto-copigmentation se traduisant par lrsquoempilement intermoleacuteculaire
drsquoanthocyanosides se proteacutegeant les uns avec les autres
- soit par une copigmentation avec les flavonoiumldes (11)
27
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides
41 Extraction
Les anthocyanosides sont solubles dans les solvants polaires et lrsquoextraction agrave partir des plantes
est reacutealiseacutee en utilisant du meacutethanol qui contient de faibles quantiteacutes drsquoacide chlorhydrique ou
drsquoacide formique Il est preacutefeacuterable drsquoutiliser des acides plus faibles comme lrsquoacide aceacutetique
tartrique ou citrique des acides volatils ou travailler en milieu neutre et agrave basse tempeacuterature
pour empecirccher la deacutesacylation des anthocyanosides
Lrsquoaceacutetone peut aussi ecirctre utiliseacutee pour lrsquoextraction des anthocyanosides de plusieurs plantes
Par rapport au meacutethanol acidifieacute lrsquousage de ce solvant a lrsquoavantage drsquoecirctre une technique plus
efficace et reproductible
Lrsquoextraction en phase solide peut ecirctre utiliseacutee pour la purification initiale des extraits crus
drsquoanthocyanosides (33)
42 Seacuteparation et identification
Pour la seacuteparation et lrsquoanalyse de la structure des anthocyanosides lrsquoutilisation de la
chromatographie liquide coupleacutee agrave la spectromeacutetrie de masse permet de combiner la
seacuteparation de la chromatographie liquide avec la sensibiliteacute et la seacutelectiviteacute de la spectromeacutetrie
de masse (33) Drsquoautres meacutethodes chromatographiques peuvent ecirctre utiliseacutees pour leur
seacuteparation comme les colonnes de polyamide de polyvinylpyrrolidone les reacutesines
eacutechangeuses drsquoions la chromatographie sur couche mince preacuteparative sur cellulose (10)
Lrsquoanalyse des plantes agrave anthocyanosides peut ecirctre reacutealiseacutee par la chromatographie liquide
associeacutee agrave un deacutetecteur agrave barrettes de diodes Cette analyse peut ecirctre faite par lrsquoeacutelectrophoregravese
capillaire qui selon Szajdek et coll (58) est une meacutethode avec une tregraves bonne sensibiliteacute une
haute reacutesolution coupleacutee agrave une basse consommation drsquoeacutechantillon et enfin un moindre
laquo gaspillage raquo des solvants utiliseacutes
Drsquoautres meacutethodes plus perfectionneacutees ne peuvent ecirctre utiliseacutees que par des laboratoires de
recherche
43 Dosage des anthocyanosides
Le dosage se fait par spectrophotomeacutetrie aux longueurs drsquoonde des maximums drsquoabsorption
des anthocyanosides (λ = 520 nm) Il peut ecirctre fait sur une solution alcoolique acide ou sur un
jus acidifieacute Dans tout les cas il faut le faire en milieu tregraves dilueacute pour empecirccher les moleacutecules
drsquoanthocyanosides de srsquoassocier les unes avec les autres (11)
28
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
51 Composition en anthocyanosides
Les baies de V myrtillus contiennent environ quinze anthocyanosides ces heacuteteacuterosides sont
des O-glucosides des O-galactosides et des O-arabinosides en C-3 du cyanidol du peacuteonidol
du delphinidol du malvidol et du peacutetunidol (Figure 15)
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus (14)
29
52 Donneacutees quantitatives
Vaccinum myrtillus contient une quantiteacute importante drsquoanthocyanosides (300 agrave
698 mg100 g) Lrsquoeacutequipe de Prior et coll (50) a montreacute que la quantiteacute drsquoanthocyanosides
augmente avec la maturiteacute du fruit lors de la reacutecolte
Burdulis et coll (12) ont eacutetudieacute la diversiteacute des anthocyanosides du fruit de V myrtillus dans
diffeacuterents pays comme la Lituanie la Suegravede la Russie et la Bieacutelorussie ainsi que dans
diffeacuterentes reacutegions de Lituanie comme Šilutė Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees en
anthocyanosides ont eacuteteacute retrouveacutees dans les baies ramasseacutees en Russie et en Suegravede Ces
reacutesultats sont lieacutes agrave la cueillette tardive des baies et agrave lrsquoemplacement plus au nord des
cultures en effet les baies eacutetaient plus mucircres et avaient donc une plus haute contenance en
anthocyanosides Par contre la quantiteacute en Beacuteliorussie et en Lituanie est similaire
53 Donneacutees qualitatives
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Burdulis et coll (12) ont observeacute que lrsquoanalyse
chromatographique ne reacutevegravele pas de diffeacuterence dans la composition qualitative des
anthocyanosides Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees sont repreacutesenteacutees par la cyanidine (quantiteacute
moyenne de 53 ngml) suivie de la delphinidine et la peacutetunidine en quantiteacute 25 fois plus
faible que la cyanidine et pour terminer la malvidine et la peacuteonidine en quantiteacute encore plus
faible En Suegravede seule la malvidine a eacuteteacute retrouveacutee en plus grande quantiteacute parmi tous les
anthocyanosides (15 fois plus eacuteleveacutee que celle de la peacutetunidine et la delphinidine)
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus
Riihinen et coll (53) ont eacutetudieacute la distribution des composeacutes pheacutenoliques dans les diffeacuterents
organes de V myrtillus et drsquoun hybride entre le V corymbosum et V augustifolium
Ainsi les anthocyanosides sont preacutesents dans la pulpe et la peau des fruits de V myrtillus
constituant 2 du poids frais de la peau de la baie cela indique que lrsquoextraction du jus agrave
partir de la peau pourrait ecirctre une source riche drsquoanthocyanosides Les feuilles rouges des
myrtilles ont de faibles quantiteacutes drsquoanthocyanosides et ne contiennent que des glycosides de
cyanidine alors que les fruits contiennent les cinq types drsquoanthocyanosides (delphinidine
cyanidine peacuteonidine peacutetunidine et malvidine-glycosides) Les feuilles sont donc des sources
moins inteacuteressantes pour lrsquoutilisation nutraceutique et pharmaceutique que les fruits
30
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
Des eacutetudes ont eacuteteacute reacutealiseacutees sur la pharmacocineacutetique des anthocyanosides agrave partir drsquoun
produit commercial le Myrtocyanreg Celui-ci est un extrait hautement purifieacute de baies de
Vaccinum myrtillus dans lequel les anthocyanosides sont les composants actifs les plus
importants (36)
Lorsque lrsquoextrait est injecteacute chez le rat par voie intraveineuse ou parenteacuterale aux doses de 20-
40 mgkg ou 25 mgkg respectivement les anthocyanosides disparaissent de la circulation
sanguine et sont distribueacutes rapidement dans les tissus Lrsquoeacutelimination se fait de faccedilon
preacutedominante par les urines (25-30) 24 heures apregraves lrsquoadministration et une plus faible
quantiteacute est eacutelimineacutee via la bile (15-20)
Le Myrtocyanreg
injecteacute par voie intrapeacuteritonale agrave la dose de 200 mgkg montre que les
anthocyanosides ont une affiniteacute particuliegravere pour certains tissus notamment les tissus reacutenaux
et cutaneacutes dans ces tissus les anthocyanosides y demeurent plus longtemps que dans le
plasma Cette observation pourrait expliquer leur effet biologique agrave long terme
Lrsquoadministration orale de Myrtocyanreg
agrave la dose de 400 mgkg chez le rat montre que les
anthocyanosides sont rapidement absorbeacutes par le tractus gastro-intestinal et atteignent un pic
plasmatique quinze minutes apregraves lrsquoadministration Par contre ils ne demeurent pas
longtemps dans le sang car aucune concentration ne peut ecirctre mesureacutee apregraves deux heures Par
voie orale environ 4 des anthocyanosides sont eacutelimineacutes par la bile apregraves 24 heures
En conclusion par voie orale la biodisponibiliteacute faible des anthocyanosides peut ecirctre due agrave
une forte meacutetabolisation heacutepatique en meacutetabolites non deacutetectables par la meacutethode analytique
Le pic plasmatique de 2-3 microgml drsquoanthocyanosides non modifieacutes pourrait ecirctre suffisant pour
garantir les effets biologiques des anthocyanosides apregraves une administration orale Enfin des
tests in vitro ont reporteacute une activiteacute des anthocyanosides agrave des concentrations de 2 agrave 7 microgml
(43)
En 2006 Ichiyanagi et coll (28) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute et la distribution dans les tissus
drsquoun autre extrait de V myrtillus (Bilberon 25reg
constitueacutes de 25 anthocyanosides) administreacute
oralement ou par voie intraveineuse agrave des rats
Pour rappel les aglycones sont de cinq types la cyanidine la delphinidine la peacutetunidine la
peacuteonidine et la malvidine
Seules la malvidine la peacuteonidine et la peacutetunidine sont des structures aglycones meacutethyleacutes ces
anthocyanidines sont glycosyleacutees pour former les anthocyanosides qui repreacutesentent une
structure beaucoup plus stable Trois sortes de sucres sont rattacheacutees agrave la structure le
glucose le galactose et lrsquoarabinose
31
Ainsi le niveau plasmatique de chaque anthocyanoside est eacutevalueacute par chromatographie
liquide haute performance Lrsquoeacutetude montre clairement que lrsquoabsorption le meacutetabolisme et
lrsquoeacutelimination sont diffeacuterents pour chaque anthocyanoside Ichiyanagi et coll (27) ont calculeacute
le rapport C15dose deacutefini par la concentration plasmatique de chaque anthocyanoside quinze
minutes apregraves administration orale diviseacutee par sa concentration initiale dans lrsquoextrait de
Bilberon 25reg
(soit le rapport C15dose) La comparaison de ces rapports a montreacute que pour les
anthocyanosides posseacutedant le mecircme aglycone les galactosides ont un rapport C15dose plus
important suivi des glucosides et des arabinosides agrave lrsquoexception de la malvidine La
diffeacuterence est significative entre les anthocyanosides glucosides et galactosides Par contre
lorsque les anthocyanosides portant le mecircme sucre sont compareacutes les glycosides de cyanidine
et delphidine preacutesentent des valeurs plus eacuteleveacutees que les glycosides de malvidine et
peacutetunidine alors que la peacuteonidine 3-O-β-D-galactoside affiche les valeurs les plus hautes
parmi tous les anthocyanosides
En conclusion les niveaux plasmatiques deacutependent de plusieurs facteurs tels que lrsquoabsorption
gastro-intestinale le taux de distribution dans les tissus et leur excreacutetion via les urines et la
bile
La demi-vie est eacutevalueacutee par administration intraveineuse de lrsquoextrait pour les
anthocyanosides portant le mecircme sucre les demi-vies de la delphinidine et de la cyanidine
sont plus eacuteleveacutees que leurs analogues O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacuteonidine et la
peacutetunidine Par contre lorsque les auteurs comparent les sucres porteacutes par le mecircme aglycone
aucune diffeacuterence significative nrsquoest observeacutee entre les galactosides et les glucosides mais les
arabinosides affichent des valeurs plus faibles Seule la malvidine ne preacutesente pas de
diffeacuterence significative entre galactoside et arabinoside compareacutee aux autres anthocyanidines
Ichiyanagi et coll (28) ont eacutevalueacute la biodisponibiliteacute de chaque anthocyanoside Celle-ci varie
de 061 agrave 182 et elle est de 093 dans le meacutelange de lrsquoextrait Bilberon 25reg
Ainsi la
biodisponibiliteacute des anthocyanosides O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacutetunidine et la
peacuteonidine est plus eacuteleveacutee que la delphinidine et la cyanidine particuliegraverement pour les
galactosides (diffeacuterence significative entre la cyanidine et la peacuteonidine galactoside et entre la
delphinidine et la peacutetunidine arabinoside) Cependant les biodisponibiliteacutes des glycosides de
peacutetunidine sont plus eacuteleveacutees que celles des glycosides de malvidine mecircme si la malvidine est
lrsquoanalogue O-meacutethyl de la peacutetunidine-glycoside Ainsi la biodisponibiliteacute importante des
glycosides de peacutetunidine pourraient ecirctre expliqueacutee par une absorption gastro-intestinale
prolongeacutee De plus lrsquoexceptionnelle forte biodisponibiliteacute de la peacuteonidine 3-O-β-D-
galactoside traduirait une absorption gastro-intestinale plus efficace Lorsque les auteurs
32
comparent la biodisponibiliteacute entre les anthocyanosides sur la base du type de sucre attacheacute agrave
la structure les galactosides preacutesentent la plus haute valeur suivis des arabinosides puis des
glucosides qui preacutesentent les valeurs les plus basses (agrave lrsquoexception de la delphinidine et de la
malvidine)
Ces eacutetudes sur le meacutetabolisme et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides montrent que les
anthocyanosides majoritairement retrouveacutes dans lrsquourine et la bile sont les glycosides de
peacuteonidine et malvidine crsquoest-agrave-dire des anthocyanosides O-meacutethyleacutes Les pourcentages des
anthocyanosides dans les urines et la bile durant les quatre premiegraveres heures apregraves
administration intraveineuse sont seulement de 308 et 134 respectivement suggeacuterant une
meacutetabolisation ou une accumulation des anthocyanosides dans les tissus La quantiteacute et la
nature des anthocyanosides dans le foie et les reins diffegraverent de ceux du meacutelange Bilberon
25reg
indiquant une meacutetabolisation heacutepatique et reacutenale De plus lrsquoapparition de nouveaux pics
montreacutes par la chromatographie liquide haute performance souligne la preacutesence de
meacutetabolites drsquoanthocyanosides
En ce qui concerne la distribution dans les tissus les auteurs ont montreacute qursquoapregraves 15 minutes
drsquoune administration orale de lrsquoextrait de V myrtillus les anthocyanosides retrouveacutes
majoritairement dans les reins et le foie sont des glycosides de peacuteonidine et de malvidine les
anthocyanosides deacutetecteacutes sont des glucosides et galactosides de peacuteonidine malvidine et
peacutetunidine des meacutetabolites 4rsquo-O-meacutethyl de cyanidine delphinidine et peacutetunidine 3-O-β-D-
glucoside ou galactoside alors que les arabinosides ne sont pas deacutetecteacutes agrave lrsquoexception du 4rsquo-
O-meacutethyl delphinidine 3-O-α-L-arabinoside Les meacutetabolites comme les glucosides-
glucuronides de cyanidine et de delphinidine sont aussi preacutesents dans les tissus
particuliegraverement au niveau reacutenal
Apregraves administration intraveineuse les glycosides de cyanidine et delphinidine sont preacutesents agrave
lrsquoeacutetat de traces dans les tissus
Pour conclure plusieurs points ont pu ecirctre eacutetablis et clarifieacutes premiegraverement tous les
anthocyanosides de lrsquoextrait atteignent leur niveau plasmatique maximum en 15 agrave 30 minutes
apregraves administration orale soulignant une absorption efficace au niveau de lrsquoestomac et de
lrsquointestin grecircle Cette absorption deacutepend du type de sucre attacheacute agrave lrsquoaglycone les galactosides
eacutetant par exemple plus efficacement absorbeacutes que les arabinosides Deuxiegravemement la
biodisponibiliteacute deacutepend de plusieurs facteurs comme le meacutetabolisme lrsquohydrophobiciteacute du
cycle B de lrsquoaglycone et le type de sucre attacheacute agrave la structure De plus la synergie entre
anthocyanosides eux-mecircmes ou anthocyanosides avec drsquoautres composants preacutesents dans
lrsquoextrait peuvent moduler lrsquoabsorption au niveau du tractus gastro-intestinal
33
Sakakibara et coll (54) ont eacutetudieacute la distribution et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides chez la
souris apregraves une administration orale de 100 mgkg de poids corporel de V myrtillus
Les anthocyanosides absorbeacutes sous leur forme initiale ou meacutethoxyleacutee quinze minutes apregraves
une administration orale sont eacutelimineacutes via les urines dans les vingt quatre heures La totaliteacute
des anthocyanosides atteignent une concentration plasmatique maximale drsquoenviron 12 microM
quinze minutes apregraves administration orale puis cette concentration diminue brusquement Les
glycosides de malvidine pourraient ecirctre les anthocyanosides majoritaires dans des conditions
physiologiques en effet les anthocyanosides meacutethoxyleacutes ont des proprieacuteteacutes leur permettant
de demeurer dans lrsquoorganisme apregraves absorption De plus les glycosides de delphinidine et
cyanidine subissent une meacutethylation pouvant donner les glycosides de peacuteonidine et malvidine
par conseacutequent les anthocyanosides meacutethoxyleacutes peuvent ecirctre produits par la conversion
drsquoautres anthocyanosides eacutegalement absorbeacutes
Lrsquoexcreacutetion urinaire des anthocyanosides apregraves administration de 500 mgkg de poids corporel
de lrsquoextrait de V myrtillus a montreacute que les anthocyanosides sont eacutelimineacutes dans lrsquourine dans
les six premiegraveres heures apregraves administration orale De faibles quantiteacutes sont eacutelimineacutees entre 6
et 24 heures dont un unique pic drsquoexcreacutetion entre 6 et 12 heures Les quantiteacutes
drsquoanthocyanosides excreacuteteacutees dans lrsquourine dans les 24 heures suivant lrsquoadministration sont
faibles et ne repreacutesentent que 188 des anthocyanosides totaux ingeacutereacutes Par conseacutequent
quelque soit les quantiteacutes drsquoextrait administreacutees les anthocyanosides absorbeacutes par le corps
sont excreacuteteacutes par voie urinaire en 24 heures
Lrsquoeacutetude de la distribution des antocyanosides dans les organes a eacuteteacute reacutealiseacutee sur des souris
ayant une alimentation contenant 05 des anthocyanosides de V myrtillus durant 2
semaines Ce sont les glycosides de malvidine (surtout le 3-glucoside et 3-galactoside de
malvidine) les anthocyanosides majoritairement preacutesents dans des organes tels que le foie les
reins les testicules et les poumons Lrsquoeacutetude de Sakakibara et coll (54) est la premiegravere agrave avoir
montreacute la preacutesence des anthocyanosides dans les testicules de souris
Les auteurs montrent aussi que le foie est sucircrement lrsquoorgane cible des anthocyanosides car
515 y sont localiseacutes Par contre les anthocyanosides nrsquoont pas eacuteteacute deacutetecteacutes dans la rate le
thymus le cœur les muscles le cerveau la graisse blanche ou les yeux
Chez lrsquohomme la plupart des eacutetudes montrent une faible biodisponibiliteacute des anthocyanosides
(faible taux drsquoexcreacutetion) (3)
Cooke et coll en 2006 (18) ont deacutemontreacute la preacutesence dans lrsquourine drsquoanthocyanosides sous
forme inchangeacutee et de glucuronides drsquoanthocyanidines (meacutetabolites) apregraves une administration
orale de Mirtoselectreg
La preacutesence de glucuronides drsquoanthocyanidines dans lrsquourine suggegravere
34
une transformation des anthocyanosides en leurs deacuteriveacutes non glycosyleacutes lesquels subiront
plus tard une biotransformation Les anthocyanidines sont suspecteacutees pour avoir une meilleure
activiteacute biologique que leurs preacutecurseurs glycosyleacutes
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus
1 Acides pheacutenoliques
Les acides pheacutenoliques dans les fruits des baies sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique et benzoiumlque Le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide benzoiumlque inclus les acides p-
hydroxybenzoiumlque salicylique gallique et ellagique Dans le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique on trouve les acides p-coumarique cafeacuteique et feacuterulique Les deacuteriveacutes drsquoacide
hydroxycinnamique sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide cafeacuteique comme les acides
chlorogeacutenique et neacuteochlorogeacutenique Dans Vaccinum myrtillus des quantiteacutes significatives
drsquoacides p-coumarique et feacuterulique sont retrouveacutees Lrsquoacide hydroxycinnamique se trouve
dans tous les organes de la myrtille mais les quantiteacutes les plus importantes sont retrouveacutees
dans les feuilles il est le principal composeacute pheacutenolique du rhizome Cet acide
hydroxycinnamique joue un rocircle dans la protection de la plante vis-agrave-vis drsquoagents pathogegravenes
et drsquoautres facteurs de stress comme une radiation solaire intense une basse tempeacuterature ou
une blessure (58)
2 Tanins
Les tanins sont des composeacutes pheacutenoliques hydrosolubles importants dans les fruits des baies
Ils sont de deux types
- les tanins hydrolysables (oligo- ou polyesters drsquoun sucre et drsquoun nombre variant de
moleacutecules drsquoacide-pheacutenol) Le sucre est le plus souvent le glucose et lrsquoacide-pheacutenol est soit
lrsquoacide hexahydroxydipheacutenique et ses deacuteriveacutes drsquooxydation pour les tanins ellagiques soit
lrsquoacide gallique dans le cas des tanins galliques
- les tanins non hydrolysables condenseacutes sont des polymegraveres flavaniques constitueacutes
drsquouniteacutes flavan-3-ols lieacutees entre elles par des liaisons carbone-carbone On les appelle
eacutegalement les proanthocyanidols qui en milieu acide et agrave chaud donnent des anthocyanidols
(11)
Les tanins donnent le goucirct aux tartes et sont responsables du changement de couleur des fruits
et des produits deacuteriveacutes des fruits Le goucirct des tartes reacutesulte de lrsquointeraction entre les tanins et
les reacutecepteurs gustatifs de la bouche De plus les tanins stabilisent les anthocyanosides
35
preacutesents en quantiteacute importante dans le fuit de la myrtille en se liant agrave eux pour former des
copolymegraveres (58)
Dans V myrtillus les feuilles vertes et rouges sont les meilleures sources de procyanidines
Leurs proportions dans les feuilles sont drsquoenviron 7 du poids sec il conviendrait donc
drsquoapporter un inteacuterecirct aux feuilles qui actuellement lors de la reacutecolte et du traitement des
fruits constituent des deacutechets alors que ce sont des parties de la plante riche en
proanthocyanidines connus pour leurs activiteacutes antimicrobiennes et antioxydantes (53)
3 Flavonols
Les flavanols sont repreacutesenteacutes par la querceacutetine la myriceacutetine le kaempfeacuterol et
lrsquoisorhamneacutetine abondants dans les plantes alimentaires comme lrsquooignon le theacute les pommes
et les baies
Le fruit de V myrtillus contient de faccedilon preacutedominante de la querceacutetine eacutegalement preacutesent
avec le kaempfeacuterol dans les feuilles Cependant leur proportion est plus importante dans les
feuilles rouges que dans les feuilles vertes car les radiations solaires augmentent leur quantiteacute
(on peut supposer un rocircle dans la photoprotection) (58)
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans Vaccinium myrtillus
Les stilbegravenes sont un groupe de composants qui inclut notamment le resveacuteratrol retrouveacute
initialement dans les grappes de raisin De petites quantiteacutes de trans-resveacuteratrol ont eacuteteacute
retrouveacutees dans les baies et notamment dans la myrtille (de lrsquoordre de 678 microgg) Cette plante
contient eacutegalement de petites quantiteacutes de caroteacutenoiumldes (58)
Autres ces composeacutes pheacutenoliques la myrtille est eacutegalement constitueacutee drsquoun ensemble de
micro- et macronutriments reacutepertorieacute dans la table de composition nutritionnelle des aliments
du Ciqual (centre drsquoinformation sur la qualiteacute des aliments) 2008 de lrsquoAfssa (71) (Annexe I)
36
Troisiegraveme partie
Inteacuterecircts theacuterapeutiques
de Vaccinium myrtillus L
37
En Europe les baies et les feuilles de myrtille ont largement eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine
populaire les baies pour leurs proprieacuteteacutes astringentes toniques et antiseptiques dans le
traitement de la diarrheacutee la dysenterie (maladie infectieuse du cocirclon) les heacutemorroiumldes les
inflammations gastro-intestinales et les infections buccales (stomatites aphtes muguet des
enfants) Elles sont eacutegalement utiliseacutees pour les deacutesordres urinaires Quant aux feuilles elles
eacutetaient particuliegraverement utiliseacutees dans le diabegravete gracircce agrave leurs proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
En application locale une infusion ou une deacutecoction de feuilles de myrtilles eacutetaient utiliseacutees
lors drsquoinflammations oculaires buccales drsquoinfections cutaneacutees et dans les brucirclures
Agrave partir du XVIIIegraveme
des herboristes utilisaient la baie de myrtille dans des preacuteparations pour
traiter certaines maladies intestinales incluant la fiegravevre typhoiumlde elle eacutetait aussi utiliseacutee dans
les infections buccales cutaneacutees urinaires dans la goutte et le rhumatisme (43) Les usages
valideacutes par la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la Commission E seront
deacuteveloppeacutes dans la derniegravere partie de cette thegravese
La myrtille inteacuteresse encore actuellement les scientifiques et fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes
in vitro et in vivo elle est aussi preacutesente dans quelques eacutetudes cliniques Certaines de ces
eacutetudes seront reacutepertorieacutees dans les chapitres qui vont suivre
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire
En 1990 Morazzoni et coll (44) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vivo et in vitro drsquoun complexe
drsquoanthocyanosides de V myrtillus dont le nom deacuteposeacute est Myrtocyanreg
(contenant environ
38 drsquoanthocyanosides) sur lrsquoactiviteacute plaquettaire en comparaison avec drsquoautres anti-
agreacutegants plaquettaires comme lrsquoacide aceacutetylsalicylique le dipyridamole et la ticlopidine
Lrsquoeacutetude in vitro sur plasma de lapin montre un effet inhibiteur de V myrtillus sur lrsquoagreacutegation
plaquettaire induite par lrsquoadeacutenosine diphosphate (ADP) le collagegravene et lrsquoarachidonate de
sodium (sel drsquoacide arachidonique) cette inhibition est fonction de la concentration en
anthocynosides Cette activiteacute est comparable agrave celle du dipyridamole mais est moins efficace
que celle de lrsquoacide aceacutetylsalicylique Toutefois les anthocyanosides de la myrtille et le
dipyridamole sont tous les deux efficaces pour inhiber lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par
lrsquoADP exogegravene alors que lrsquoacide aceacutetylsalicylique nrsquoa pas montreacute drsquoactiviteacute Lrsquoeffet anti-
agreacutegant plaquettaire des anthocyanosides de V myrtillus perdure apregraves certaines
manipulations chimiques et physiques comme lrsquoeacutebullition pendant cinq minutes le chauffage
38
pendant trente minutes agrave 56degC la digestion agrave la trypsine et lrsquoincubation en preacutesence
drsquoadeacutenosine phosphate
Lrsquoaction in vitro des anthocyanosides de V myrtillus sur la circulation sanguine chez le rat
montre une inhibition de lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP de maniegravere dose-
deacutependante et par voie arteacuterielle
In vivo lrsquoadministration orale du complexe anthocyanosidique de V myrtillus agrave une
concentration variant de 5 agrave 400 mgkg chez le rat montre une augmentation du temps de
saignement Cette activiteacute du complexe perdure pendant 24 heures (mecircme observation avec
lrsquoassociation acide aceacutetylsalicylique-dipyridamole) et le temps de saignement retourne agrave des
valeurs normales apregraves 48 heures Par contre cette augmentation du temps de saignement nrsquoa
pas donneacute drsquoeffet ni sur lrsquoheacutematocrite ni sur les voies intrinsegraveques et extrinsegraveques de la
coagulation sanguine
Lrsquoadministration orale de 400 mgkg du complexe anthocyanosidique de myrtille agrave des souris
deux heures avant lrsquoeacutetude diminue lrsquoadheacutesion plaquettaire cette action eacutetant similaire agrave celle
observeacutee avec 100 mgkg de ticlopidine administreacutes dans les mecircmes conditions
expeacuterimentales
Morazzoni et coll (44) ont eacutegalement eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vitro drsquoun produit composeacute des trois
principaux anthocyanosides (malvidine 3-O-glucoside cyanidine 3-O-glucoside et
delphinidine 3-O-glucoside) trouveacutes dans lrsquoextrait Myrtocyanreg
afin de comprendre leur
impact sur lrsquoeffet anti-agreacutegant Ce meacutelange montre la mecircme activiteacute inhibitrice sur
lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP le collagegravene et lrsquoarachidonate de sodium que
lrsquoextrait Myrtocyanreg
Notons que les anthocyanosides du produit reconstitueacute sont retrouveacutes
avec le mecircme ratio que ceux de lrsquoextrait
Une eacutetude clinique incluant 30 patients en bonne santeacute avec une agreacutegation plaquettaire
normale a deacutemontreacute la capaciteacute drsquoanthocyanosides de myrtille Myrtocyanreg
administreacute
pendant 30 et 60 jours agrave la dose de 480 mgjour seul ou en association avec lrsquoacide ascorbique
(3 gjour) agrave reacuteduire lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par le collagegravene ou lrsquoADP La meilleure
activiteacute est deacutetenue par Myrtocyanreg
seul ou associeacute agrave lrsquoacide ascorbique compareacutee agrave la
vitamine C seule (5)
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus riche en anthocyanosides a montreacute une forte inhibition
de lrsquoagreacutegation plaquettaire dans des expeacuteriences in vivo et in vitro sans interfeacuterer avec les
facteurs plasmatiques Lrsquoactiviteacute des trois principaux anthocyanosides de lrsquoextrait Myrtocyanreg
a permis de mettre en eacutevidence leur forte implication dans lrsquoeffet anti-agreacutegant plaquettaire
De plus lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans lrsquoinhibition plaquettaire est
39
lrsquoaugmentation des niveaux drsquoadeacutenosine monophosphate cyclique (AMP cyclique) soit par
stimulation de lrsquoadeacutenylate cyclase soit par inhibition de lrsquoAMP cyclique-phosphodiesteacuterase
Or il a eacuteteacute observeacute que les aglycones de lrsquoextrait Myrtocyanreg
sont des inhibiteurs potentiels
de lrsquoAMP cyclique- phosphodiesteacuterase de plusieurs tissus Ce meacutecanisme nrsquoest pas le seul car
un autre a eacuteteacute proposeacute il concernerait les anthocyanidines (principalement la delphinidine et
la cyanidine) qui affecteraient les fonctions plaquettaires par leur action antioxydante cette
action se ferait en interfeacuterant avec les processus membranaires cellulaires incluant les eacutetapes
initiales plaquettaires et la production des prostaglandines des cellules endotheacuteliales
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires
Les anthocyanosides de V myrtillus (Myrtocyanreg
) sont couramment utiliseacutes comme agents
vasoprotecteurs inhibant lrsquoagreacutegation plaquettaire et la formation de thrombus De plus il a
eacuteteacute montreacute que les anthocyanosides de myrtille administreacutes per os (100 mgkg pc) reacuteduisent
la reacuteponse contractile du muscle lisse vasculaire et montrent une activiteacute prostacycline-like
(PGI2-like) (45) Cette eacutetude est en accord avec celle de Bettini et coll (9) qui ont montreacute que
les anthocyanosides de V myrtillus ont un effet relaxant in vitro pouvant ecirctre meacutedieacute par la
stimulation de la synthegravese de prostaglandines vasodilatatrices dans les vaisseaux sanguins
En conclusion agrave lrsquoinverse de lrsquoacide aceacutetylsalicylique qui in vivo reacuteduit la production
arteacuterielle de PGI2 en agissant comme un inhibiteur de la synthegravese des prostaglandines les
anthocyanosides de V myrtillus stimulent la production drsquoune substance PGI2-like par le tissu
vasculaire
Les anthocyanosides de myrtille comme drsquoautres bioflavonoiumldes srsquoopposent agrave la contraction
de plusieurs types de muscles lisses en reacuteponse agrave des agents varieacutes comme lrsquoangiotensine II la
seacuterotonine le baryum lrsquohistamine ou lrsquoaceacutetylcholine En effet lrsquoaceacutetylcholine agrave des
concentrations variant de 1 agrave 2 ngml induit une relaxation dans toutes les preacuteparations alors
qursquoagrave hautes concentrations elle induit une contraction (9)
Bettini et coll (9) ont rechercheacute eacutegalement lrsquoeffet vasodilatateur du complexe dans les
preacuteparations traiteacutees avec du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration du facteur
relaxant deacuteriveacute de lrsquoendotheacutelium (EDRF ou endothelium-derived relaxing factor) qui est une
substance vasodilatatrice
Le Myrtocyanreg agrave une concentration entre 50 et 200 microgml reacuteduit la reacuteponse contractile des
artegraveres coronaires agrave lrsquoaceacutetylcholine cette activiteacute est drsquoautant plus marqueacutee lorsque lrsquoacide
ascorbique est ajouteacute (100-300 microgml) Mais cet effet est diminueacute en preacutesence drsquoindomeacutetacine
ou drsquoaceacutetylsalicylate de lysine connus pour ecirctre des inhibiteurs de la cyclo-oxygeacutenase A des
40
concentrations entre 1 et 2 microgml ces deux substances nrsquoaffectent pas la diminution du tonus
induite par Myrtocyanreg alors qursquoagrave des concentrations plus eacuteleveacutees elles le reacuteduisent sans
toutefois lrsquoabolir complegravetement mecircme aux plus fortes concentrations
Une autre expeacuterience de cette eacutetude consiste agrave traiter les segments des artegraveres coronaires avec
du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration de lrsquoEDRF Selon la concentration le
bleu de meacutethylegravene a plusieurs effets entre 1 et 8 microgml il ne modifie pas le tonus des
preacuteparations entre 8 et 18 microgml il ne provoque qursquoune lente augmentation du tonus de
plusieurs preacuteparations alors qursquoentre 18 et 24 microgml il induit une reacuteelle augmentation du
tonus des artegraveres coronaires suivie drsquoune relaxation assez marqueacutee Lrsquoeffet des
anthocyanosides de Vaccinum myrtillus a eacuteteacute eacutetudieacute apregraves disparition de lrsquoeffet du bleu de
meacutethylegravene son effet relaxant perdure partiellement malgreacute le preacute-traitement au bleu de
meacutethylegravene
En conclusion lrsquoeffet vasodilatateur de Myrtocyanreg
deacutepend agrave la fois de la libeacuteration des
prostacyclines mais aussi drsquoune faciliteacute agrave libeacuterer lrsquoEDRF les prostacyclines et lrsquoEDRF sont
probablement les meacutediateurs fonctionnels des anthocyanosides de V myrtillus
2 Activiteacute vasoprotectrice
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique
Une preacuteparation drsquoanthocyanosides de V myrtillus eacutequivalant agrave 25 drsquoanthocyanosides
administreacutee par voie intrapeacuteritoneacuteale ou per os agrave des lapins montre une reacuteduction de la
permeacuteabiliteacute capillaire de la peau (augmentant avec le temps) preacutealablement stimuleacutee par le
chloroforme lrsquohistamine ou la bradykinine (36)
Jonadet et coll (29) ont compareacute sur des rats lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides
extraits de Vitis vinifera L de V myrtillus (Difrarelreg
) et de Pinus maritimus (appeleacute
maintenant Pinus pinaster Aiton) Ainsi lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides est
par ordre deacutecroissant la suivante anthocyanosides de Vitis vinifera gt anthocyanosides de V
myrtillus gt proanthocyanosides de Pinus maritimus Les auteurs soulignent que les
anthocyanosides agissent agrave travers une activiteacute anti-proteacuteasique deacutemontreacutee in vitro En effet
ils ont montreacute que les anthocyanosides des extraits preacutealablement citeacutes possegravedent des activiteacutes
inhibitrices vis-agrave-vis drsquoenzymes proteacuteolytiques comme lrsquoeacutelastase laquelle peut intervenir dans
la deacutegradation du tissu conjonctif des fibres eacutelastiques et jouerait un rocircle dans des affections
pathologiques comme lrsquoatheacuteroscleacuterose lrsquoemphysegraveme pulmonaire et lrsquoarthrite rhumatoiumlde Les
anthocyanosides apportent cette activiteacute anti-proteacuteasique en inhibant la libeacuteration des peptides
41
vasoactifs En effet lrsquoune des causes de lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire est
lrsquointervention de meacutediateurs chimiques comme lrsquohistamine la 5-hydroxytryptamine et les
kinines Enfin Jonadet et coll (29) ont reporteacute une activiteacute anti-trypsique et anti-
chymotrypsique (proteacuteases digestives) des substances pharmacologiques des extraits eacutetudieacutes
22 Action sur la reacutesistance capillaire
Lietti et coll (36) ont deacutemontreacute dans une expeacuterience lrsquointeacuterecirct des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus sur la reacutesistance vasculaire Pour cela ils les administrent par voie
intrapeacuteritoneacuteale agrave des rats preacutealablement alimenteacutes pendant 4 semaines avec une alimentation
deacuteficitaire en facteur P induisant ainsi une fragiliteacute capillaire Apregraves mesure agrave plusieurs
heures de la reacutesistance capillaire les reacutesultats montrent une eacuteleacutevation remarquable de la
reacutesistance capillaire de la peau induite par les anthocyanosides de V myrtillus Lrsquoactiviteacute est
maximale 4 heures apregraves le traitement et ne change pas apregraves 6 heures Cette activiteacute est
compareacutee avec celle de la rutine (substance de la famille des bioflavonoiumldes) laquelle montre
un effet comparable agrave 200 mgkg mais qui agrave 100 mgkg nrsquoest presque plus efficace
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Lietti et coll (36) ont montreacute que lrsquoadministration
des anthocyanosides de V myrtillus dans la patte de rats par voie intraveineuse et par voie
orale respectivement 15 et 60 minutes preacuteceacutedant lrsquoinjection de carrageacutenine (substance
induisant un œdegraveme) entraicircne une diminution de lrsquoœdegraveme formeacutee de maniegravere dose-
deacutependante En effet lrsquoutilisation de 200 mgkg de preacuteparation est plus efficace que 50 mgkg
sur le volume de lrsquoœdegraveme La dose de 200 mgkg permet une reacuteduction de lrsquoœdegraveme agrave 45
Lrsquoapplication topique de la preacuteparation 60 secondes suivant lrsquoinjection de carrageacutenine induit
eacutegalement une reacuteduction du volume de lrsquoœdegraveme agrave 39 Cette eacutetude montre lrsquoaction anti-
inflammatoire de V myrtillus
Les eacutetudes in vivo reacutealiseacutees sur des animaux montrent que les anthocyanosides de V myrtillus
sont vasoprotecteurs ils inhibent lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire augmentent la
reacutesistance vasculaire et reacuteduisent le volume de lrsquoœdegraveme de maniegravere dose-deacutependante et ses
activiteacutes perdurent dans le temps De plus ils sont plus efficaces que la rutine ou la
meacutepyramine (substance antiseacuterotoninergique et antihistaminergique) Enfin les
anthocyanidines restent longtemps dans les tissus de la peau riche en collagegravene et en
mucopolysaccharides Crsquoest pourquoi il serait inteacuteressant de mettre en place des expeacuteriences
42
pour eacutetudier la relation entre ces substances et les anthocyanosides afin de voir si ce lien
pourrait expliquer lrsquoactiviteacute pharmacologique exerceacutee sur les vaisseaux sanguins (36)
24 Action antiatheacuterogegravenique
En 2009 une eacutetude meneacutee par Mauray et coll (41) a deacutemontreacute qursquoune suppleacutementation
alimentaire avec des extraits de V myrtillus limitait la progression des leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques dans un modegravele de souris deacuteficitaire en apolipoproteacuteine E Lrsquoaction
inhibitrice du deacuteveloppement de la plaque atheacuteromateuse est indeacutependante des modifications
du statut antioxydant plasmatique des marqueurs biologiques du stress oxydant et du profil
lipidique suggeacuterant lrsquoimplication drsquoautres meacutecanismes drsquoactions (peut-ecirctre lrsquoaction anti-
inflammatoire) De plus des deux extraits utiliseacutes (lrsquoun riche en anthocyanosides extraits de
myrtilles non traiteacutees et le deuxiegraveme extraits de myrtilles fermenteacutees par des levures) la
meilleure activiteacute antiatheacuterogegravene est deacutetenue par lrsquoextrait de myrtilles fermenteacutees suggeacuterant la
formation par la fermentation de nouveaux composeacutes avec des proprieacuteteacutes beacuteneacutefiques pour la
santeacute les pigments polymeacuteriques deacuteriveacutes des anthocyanosides atteacutenueraient mieux les leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques que les anthocyanosides de lrsquoextrait non traiteacute En effet lors de la
fermentation les anthocyanosides se condensent avec drsquoautres composeacutes preacutesents dans le fruit
de la myrtille Il reste alors agrave deacuteterminer les composeacutes responsables de lrsquoeffet observeacute et les
meacutecanismes drsquoaction impliqueacutes
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice
Des reacutesultats pharmacologiques prometteurs des extraits de fruits de V myrtillus issus
drsquoeacutetudes cliniques encouragent leur utilisation chez lrsquohomme dans le traitement des maladies
vasculaires peacuteripheacuteriques pouvant associer fragiliteacute capillaire alteacuteration de la permeacuteabiliteacute et
insuffisances veineuses chroniques des membres infeacuterieurs Drsquoautres eacutetudes cliniques ont
montreacute lrsquoefficaciteacute de la myrtille dans les symptocircmes cliniques post-opeacuteratoires
Ainsi les anthocyanosides de V myrtillus (480 mg par voie orale pendant 30 jours) ont
montreacute leur capaciteacute agrave diminuer les symptocircmes subjectifs (douleur parestheacutesiehellip) et objectifs
(œdegraveme des membres pheacutenomegravenes dyschromiques de la peauhellip) de patients atteints du
syndrome variqueux des membres infeacuterieurs tout comme les patients souffrant de fragiliteacute
capillaire ougrave une administration orale drsquoanthocyanosides de V myrtillus (160-800 mgjour)
reacuteduit les symptocircmes cliniques drsquoune reacutesistance capillaire diminueacutee (peacuteteacutechies contusion
sang feacutecal occulte) (43)
43
Lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille Myrtocyanreg (480 mgjour pendant 30 agrave 180 jours) a eacuteteacute
deacutemontreacutee dans des eacutetudes porteacutees sur des patients diabeacutetiques dyslipideacutemiques souffrant de
maladies secondaires agrave une stase des membres infeacuterieurs comme le syndrome preacute-variqueux
les varices essentielles le syndrome post-phleacutebitique et plusieurs maladies vasculaires
atheacuteroscleacuterotiques (43) Une eacutetude double-aveugle et controcircleacutee par placebo incluant 47
patients atteints de deacutesordres vasculaires drsquoorigine varieacutee a deacutemontreacute la capaciteacute de
Myrtocyanreg agrave reacuteduire les symptocircmes subjectifs et objectifs de la pathologie (diminution de la
douleur de la parestheacutesie de lrsquoœdegraveme et de la mobilisation des extreacutemiteacutes des doigts chez les
patients avec syndrome de Raynaud) Une eacutetude meneacutee sur 568 patients souffrants
drsquoinsuffisance veineuse des membres infeacuterieurs a montreacute la capaciteacute des anthocyanosides agrave
faire disparaitre les symptocircmes et agrave ameacuteliorer la microcirculation et le drainage lymphatique
(43)
Lrsquoefficaciteacute de la myrtille (320 mgjour pendant 60 agrave 90 jours) a mecircme eacuteteacute deacutemontreacutee chez 54
femmes enceintes souffrant de phleacutebite secondaire agrave stase veineuse (diminution de la douleur
de lrsquoœdegraveme de la fragiliteacute capillairehellip) et des patients avec bronchite chronique et
asthmatique (reacuteduction par lrsquoextrait de V myrtillus agrave 480 mgjour pendant 10 agrave 30 jours des
modifications microcirculatoires induites par la corticotheacuterapie) (43)
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA)
Pour rappel lrsquoECA (dipeptidylcarboxypeptidase) est une enzyme impliqueacutee dans le systegraveme
reacutenine-angiotensine (lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans la reacutegulation de la pression
arteacuterielle) permettant la conversion de lrsquoangiotensine I inactive en angiotensine II active Cette
derniegravere est capable drsquoaugmenter la pression sanguine et la pression de perfusion reacutenale les
inhibiteurs de lrsquoECA (IEC) constituent alors la premiegravere ligne de traitement pour
lrsquohypertension arteacuterielle et lrsquoinsuffisance cardiaque Les deux sites actifs de lrsquoACE
contiennent un atome de Zn2+
et les IEC sont capables de se lier agrave cet atome (47)
Personn et coll (47) ont rapporteacute dans une eacutetude in vitro la proprieacuteteacute drsquoun extrait de V
myrtillus agrave inhiber lrsquoECA peut-ecirctre par sa capaciteacute agrave cheacutelater des ions meacutetaux comme Zn2+
ou
Fe2+
cette inhibition eacutetant plus forte que les anthocyanidines combineacutees ou seacutepareacutees
deacutemontre lrsquoimplication drsquoautres composeacutes de la plante dans cette action En effet V myrtillus
ne contient pas seulement des anthocyanosides et anthocyanidines mais aussi de la querceacutetine
(flavonol) du stilbegravene resveacuteratrol des acides feacuterulique et coumarique Crsquoest la composition
speacutecifique de la plante qui semble ecirctre agrave lrsquoorigine de lrsquoeffet observeacute
44
Par conseacutequent le lien entre V myrtillus et lrsquoECA pourrait expliquer les effets
pharmacologiques de la plante sur la circulation cette plante pouvant ecirctre alors utiliseacutee en
preacutevention des maladies cardiovasculaires
5 Action sur lrsquoangiogenegravese
Lrsquoangiogenegravese se deacutefinit comme la formation de nouveaux vaisseaux sanguins agrave partir de
vaisseaux preacuteexistants (neacuteovascularisation) Elle est indispensable dans de nombreux
processus physiologiques comme le deacuteveloppement embryonnaire lrsquoimplantation du placenta
mais peut aussi contribuer agrave des processus pathologiques comme la croissance des tumeurs et
le deacuteveloppement des meacutetastases Lrsquoangiogenegravese se fait par plusieurs eacutetapes qui se trouvent
ecirctre les mecircmes dans lrsquoensemble des processus
- activation des cellules endotheacuteliales
- deacutegradation de la membrane basale et de la matrice extra-cellulaire
- migration orienteacutee des cellules endotheacuteliales
- prolifeacuteration cellulaire
- diffeacuterenciation des cellules endotheacuteliales en une structure de type capillaire pour
former une structure vasculaire permettant le deacuteveloppement des tissus
Lrsquoangiogenegravese est controcircleacutee par plusieurs facteurs inducteurs ou inhibiteurs dont le facteur de
croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire (VEGF ou vascular endothelial growth factor)
reacutegulateur cleacute de lrsquoangiogenegravese (73)
En 2007 Matsunaga et coll (40) ont eacutetudieacute in vitro lrsquoaction de V myrtillus sur lrsquoangiogenegravese
plus preacuteciseacutement sur la formation des tubules vasculaires la prolifeacuteration et la migration des
cellules ainsi que leur action sur la phosphorylation de proteacuteines kinases comme ERK 12
(laquo extra-cellular signal-regulated kinase raquo ou kinase reacuteguleacutee par le signal extra-cellulaire)
phospholipase Cγ et Akt (constitueacutes de trois enzymes appartenant agrave la famille des proteacuteines
kinases) induite par le VEGF Lrsquoeacutetude deacutemontre les effets inhibiteurs des extraits de myrtille
sur les paramegravetres de lrsquoangiogenegravese sur des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales
humaines co-cultiveacutees avec des fibroblastes Ainsi entre 1 et 30 microgml-1
lrsquoextrait de
Vaccinum myrtillus inhibe significativement la surface des tubules vasculaires la longueur
lrsquoenchevecirctrement des tubules et le nombre de reacuteseaux formeacutes A 3 microgml-1
ou plus lrsquoextrait
reacuteduit lrsquoensemble des paramegravetres de lrsquoangiogenegravese
Lrsquoextrait inhibe la prolifeacuteration (inhibition significative agrave 3 microgml-1
) et la migration
(inhibition significative agrave 10 et 30 microgml-1
) des cellules induites par VEGF-A de maniegravere
dose-deacutependante ceci ne se voyant qursquoen preacutesence du facteur de croissance
45
La phosphorylation des proteacuteines kinases comme ERK 12 est important dans la prolifeacuteration
des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales humaines et celle de Akt est une eacutetape
importante dans la prolifeacuteration et la migration de ces cellules
Les auteurs deacutemontrent la capaciteacute de V myrtillus agrave inhiber lrsquoaugmentation de la
phosphorylation de ces deux proteacuteines kinases mais pas la phosphorylation de la PLCγ
indiquant que lrsquoextrait agit en aval de celle-ci dans la cascade de signalisation induite par le
VEGF
Lrsquoeacutetude in vivo mise en place par Matsunaga et coll (39) chez la souris a permis de montrer
lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoextrait de V myrtillus dans la formation de reacuteseaux neacuteovasculaires dans
la reacutetinopathie induite par oxygegravene
II Action de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes
Un radical libre est une espegravece chimique qui possegravede un eacutelectron ceacutelibataire sur sa couche
peacuteripheacuterique Les radicaux libres qui interviennent dans le stress oxydant ont un eacutelectron
ceacutelibataire centreacute sur un atome drsquooxygegravene On les nomme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
(ERO) Plusieurs ERO existent comme le radical superoxyde le radical perhydroxyle (forme
protoneacutee du superoxyde) le radical hydroxyle le radical peroxyle et le radical alkoxyle Les
radicaux ne sont pas seulement formeacutes au cours des pheacutenomegravenes de stress oxydant mais
eacutegalement lors du meacutetabolisme normal de lrsquooxygegravene in vivo mecircme si ils ne sont geacuteneacutereacutes
qursquoen faible quantiteacute En effet crsquoest au niveau de la chaine respiratoire de la mitochondrie ougrave
85 de lrsquooxygegravene sont meacutetaboliseacutes que se produit la reacuteduction complegravete par 4 eacutelectrons de la
moleacutecule drsquoO2 conduisant agrave la formation drsquoeau La reacuteduction de la moleacutecule ne peut se faire
que par lrsquoenchainement de plusieurs eacutetapes donnant naissance agrave des intermeacutediaires reacuteduits de
lrsquooxygegravene La reacuteduction monoeacutelectronique de lrsquooxygegravene consommeacute au niveau
mitochondriale fournit lrsquoanion superoxyde (O2-) qui est une espegravece toxique Mais des
enzymes antioxydantes comme les superoxydes dismutases vont reacuteguler lrsquoanion superoxyde
en catalysant leur dismutation et en produisant le peroxyde drsquohydrogegravene (H2O2) Ce dernier
nrsquoest pas un radical libre mais une moleacutecule posseacutedant tous ses eacutelectrons apparieacutes Cependant
dans des reacuteactions in vivo comme la reacuteaction de Fenton et en preacutesence de cations meacutetalliques
comme Fe2+
ou Cu+ le H2O2 devient toxique en donnant les radicaux libres les plus neacutefastes
du stress oxydant que sont les radicaux hydroxyles (OH) De mecircme que le radical
superoxyde le peroxyde drsquohydrogegravene est reacuteguleacute in vivo par des systegravemes antioxydants comme
46
la catalase qui acceacutelegravere sa dismutation ou la glutathion peroxydase qui catalyse sa reacuteduction
par le glutathion
Ainsi le radical O2- le H2O2 et le radical OH forment les ERO (beaucoup plus reacuteactives que
lrsquooxygegravene) Cependant drsquoautres espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene existent comme les radicaux
peroxyles (RO2) les hydroperoxydes (RO2H) et les radicaux alkoxyles (RO)
Ces ERO tregraves reacuteactifs peuvent endommager les proteacuteines les lipides les glucides et les
acides nucleacuteiques par des reacuteactions drsquooxydation A cocircteacute des ERO il existe le monoxyde
drsquoazote radicalaire NO pouvant avoir des effets deacuteleacutetegraveres en reacuteagissant lors drsquoun stress
oxydant avec lrsquoO2-
pour former le peroxynitrite (ONOO-) tregraves reacuteactif et capable
drsquoendommager les proteacuteines les lipides et les acides nucleacuteiques On parle alors de stress
nitrosant
Crsquoest pourquoi il existe des systegravemes de deacutefense dans lrsquoorganisme (antioxydants) comme les
systegravemes de deacutefense enzymatique (superoxyde dismutase catalase glutathion
peroxydaseshellip) Toutefois le stress oxydant peut ecirctre important et les systegravemes de deacutefenses
deacutepasseacutes drsquoougrave la survenue ou lrsquoaggravation de pathologies comme lrsquoatheacuteroscleacuterose le diabegravete
sucreacute lrsquoischeacutemie ceacutereacutebrale le cancerhellip(21)
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides
Les anthocyanosides comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment sont des colorants
naturellement preacutesents dans les fleurs les fruits (particuliegraverement dans les baies) et les
leacutegumes Ce sont des pigments responsables de la couleur comme lrsquoorange le rouge le
bleuhellip Ils peuvent jouer plusieurs rocircles (attirer les insectes pour la pollinisation et la
dispersion des graines ou contribuer agrave la reacutesistance des plantes vis-agrave-vis drsquoattaques
exteacuterieures) Pour rappel les anthocyanosides sont des glycosides ou des acylglycosides des
anthocyanidines (les formes aglycones) Ils ont une structure de base flavylium et des
substitutions hydroxyles ou meacutethoxyles De plus ils sont tous O-glycosyleacutes avec diffeacuterents
sucres dont la preacutevalence est dans lrsquoordre deacutecroissant le glucose le rhamnose le xylose le
galactose lrsquoarabinose et le fructose Les anthocyanosides les plus preacutedominants sont des 3- ou
35-glycosyleacutes Quand le nombre de sucre augmente on observe une alternance sucre et
liaisons laquo acyl raquo De nombreuses eacutetudes ont reporteacute les effets positifs des anthocyanosides
dont certaines seront deacutecrites dans cette thegravese Certains de leurs effets sont attribueacutes agrave leurs
proprieacuteteacutes antioxydantes (64)
47
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma
En 2006 Talaveacutera et coll (59) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus (Antho 50reg
) et leur potentiel antioxydant sur le plasma de rats alimenteacutes
avec Antho 50reg pendant 8 jours Lrsquoeacutetude a montreacute une augmentation du statut antioxydant
plasmatique par cette administration mecircme si la biodisponibiliteacute eacutevalueacutee par excreacutetion
urinaire est basse Mais la chimie des anthocyanosides est complexe ceux-ci pourraient
subir une conversion en formes moins coloreacutees agrave cause de leur instabiliteacute agrave pH physiologique
ou meacutetaboliseacutes en composeacutes encore inconnus Quoiqursquoil en soit une consommation
quotidienne en anthocyanosides a un effet positif sur la capaciteacute antioxydant du plasma
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides
Lrsquoessai ORAC (oxygen radical absorbance capacity ou capaciteacute drsquoabsorbance du radical
oxygegravene) est une mesure standardiseacutee du pouvoir antiradicalaire de substances pures ou en
meacutelange Apregraves extraction des principes actifs dans un meacutelange eau-eacutethanol pour les
moleacutecules hydrosolubles et eacutethanol pour les moleacutecules lipophiles le test par
spectrofluorimeacutetrie consiste en la mesure de la protection exerceacutee par la moleacutecule contre
lrsquooxydation de la fluoresceacuteine par un radical libre et stable le AAPH (22-azobis(2-
amidinopropane) dihydrochloride) Les reacutesultats sont ensuite exprimeacutes par rapport au pouvoir
antioxydant exerceacute par une moleacutecule de reacutefeacuterence le Trolox (eacutequivalent hydrosoluble de la
vitamine E) rameneacute par le poids (en gramme) du produit que lrsquoon teste (75)
La valeur ORAC de la myrtille (446 micromol Troloxg de poids frais) est plus eacuteleveacutee que celle
drsquoautres baies (Figure 16) (58)
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies (58)
48
En 1997 Wang et coll (64) ont eacutevalueacute la capaciteacute antioxydante drsquoanthocyanidines communs
comme les aglycones de delphinidine cyanidine peacutelargonidine malvidine peacuteonidine et leurs
deacuteriveacutes glycosyleacutes Pour cela ils utilisent lrsquoessai ORAC avec geacuteneacuterateur de radical peroxyl
(ROO) Ainsi lrsquoeacutetude deacutemontre que les anthocyanidines posseacutedant la mecircme hydroxylation
sur le cycle A et C et une seule hydroxylation sur le cycle B comme la peacutelargonidine la
malvidine et la peacuteonidine ont une plus basse valeur ORAC que les anthocyanidines
dihydroxyleacutees sur le cycle B (3rsquo 4rsquo-di-OH) comme la cyanidine Les groupes hydroxyls en
position 3rsquo et 4rsquo du cycle B constituent un facteur important dans le pouvant antioxydant
seule la delphinidine eacutechappe agrave cette regravegle (plusieurs hydroxylations sur le cycle B mais
valeur ORAC plus faible) Mecircme si dans certains flavonoiumldes le nombre de groupes
hydroxyls augmentent la capaciteacute antioxydante ceci nrsquoest pas constateacute pour les
anthocyanosides ougrave la peacutelargonidine la cyanidine et la delphinide ayant 4 5 et 6 groupes
hydroxyls respectivement ont des valeurs ORAC respectives de 154 224 et 181 De plus la
glycosylation peut avoir aussi un effet sur lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides Elle
peut diminuer augmenter ou nrsquoavoir aucun effet sur le pouvoir antiradicalaire Par exemple
la 3-glycosylation du cycle C de la cyanidine augmente lrsquoactiviteacute ORAC pour le glucose et le
rhamnose mais la diminue pour le galactose Ainsi lrsquoordre deacutecroissant de lrsquoactiviteacute ORAC
pour la cyanidine est le suivant cyanidine 3-glucoside gt cyanidine 3-rhamnoside gt cyanidine
gt cyanidine 3-galactoside Mecircme lrsquoorientation du groupe hydroxyl affecte le pouvoir
antioxydant contre le radical peroxyl De plus lrsquoefficaciteacute drsquoun antioxydant agrave pieacuteger les
radicaux libres deacutepend aussi de sa capaciteacute agrave former un radical lui-mecircme stable Enfin le
classement des antioxydants par leur valeur ORAC deacutepend aussi de lrsquooxydant du radical libre
utiliseacute et de la meacutethode chimique employeacutee
Ainsi cette eacutetude a montreacute le fort pouvoir antioxydant des anthocyanosides ceux-ci sont
donc de bons candidats pour la preacutevention et le traitement de maladies mecircme si drsquoautres
eacutetudes sont neacutecessaires pour eacutelucider leur impact sur la santeacute humaine
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces
reacuteactives azoteacutees
Lrsquooxyde nitrique ou monoxyde drsquoazote radicalaire (NO) est un meacutediateur important
participant agrave des reacuteactions physiologiques dans les organismes vivants comme le
meacutetabolisme eacutenergeacutetique mitochondrial ou la transduction de signaux Cependant le NO peut
reacuteagir rapidement avec lrsquoO2- et former le peroxynitrite (ONOO
-) un fort oxydant tregraves reacuteactif
pouvant reacuteagir avec des moleacutecules biologiques comme les proteacuteines ou les acides nucleacuteiques
49
LrsquoONOO- participe agrave la formation de nitro-tyrosine dans les proteacuteines et agrave lrsquooxydation des
lipoproteacuteines de basse densiteacute responsable de la formation de plaques drsquoatheacuterome Les
radicaux NO sont geacuteneacutereacutes de faccedilon constitutive dans le cerveau sous des conditions
physiologiques LrsquoONOO- peut ecirctre lrsquoune des causes de deacutesordres ceacutereacutebraux (accidents
vasculaires ceacutereacutebraux ou maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie drsquoAlzheimer) (27)
En 2004 Ichiyanagi et coll (27) ont compareacute les reacuteactiviteacutes de 20 anthocyanosides extraits de
Vaccinum myrtillus contre les espegraveces reacuteactives azoteacutees et oxygeacuteneacutees Lrsquoextrait utiliseacute dans
lrsquoeacutetude est le Bilberon 25reg
(extrait pur sous forme de poudre provenant de V myrtillus)
Comme lrsquoantioxydant de reacutefeacuterence la (+)-cateacutechine les anthocyanosides ont la capaciteacute de
pieacuteger les radicaux libres comme le radical OH mais ont une reacuteactiviteacute 20 fois plus hautes
que celui-ci contre lrsquoO2- De plus la reacuteactiviteacute contre le radical OH nrsquoest pas tregraves sensible agrave
la diversiteacute structurale des anthocyanosides alors qursquoelle lrsquoest pour lrsquoO2- Dans lrsquoeacutetude de
Ichiyanagi et coll (27) lrsquoactiviteacute contre le NO est presque la mecircme entre tous les
anthocyanosides eacutetant tregraves peu sensible aux diversiteacutes structurales (les groupes hydroxyls
libres sur le cycle B de la moleacutecule de base ou lrsquoimportance de la meacutethylation de ces groupes
ne contribueraient pas aux reacuteactiviteacutes des anthocyanosides contre les radicaux NO et OH)
Parmi tous les anthocyanosides ce sont les glycosides (position 3) de delphinidine qui
reacuteagissent le plus contre les radicaux NO et ONOO- (reacuteactiviteacute 6 et 3 fois plus hautes que les
anthocyanosides et la (+)-cateacutechine respectivement) les autres anthocyanosides ayant une
reacuteactiviteacute comparable entre eux contre NO et lrsquoONOO-
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique
Les lipoproteacuteines de basse densiteacute (LDLs ou low-density lipoproteins) oxydeacutees par des
radicaux libres et des pro-oxydants ont plusieurs effets biologiques neacutefastes comme le
deacuteclenchement drsquoeacutevegravenements cellulaires conduisant agrave la formation et la progression de la
plaque atheacuteroscleacutereuse (21)
Laplaud et coll (34) ont eacutetudieacute lrsquoaction antioxydante drsquoun extrait de Vaccinum myrtillus sur
les LDLs Lrsquoeacutetude deacutemontre la diminution de tous les paramegravetres eacutevalueacutes lors de lrsquooxydation
des LDLs par cet extrait En effet la myrtille est capable de ralentir la formation de diegravenes
conjugueacutes de retarder la production de lipoperoxydes et de malondialdeacutehyde (indicateurs de
la peroxydation lipidique) et de diminuer la charge eacutelectrique nette des lipoproteacuteines
Enfin V myrtillus serait plus efficace que lacide ascorbique ou lrsquohydroxytoluegravene butyleacute
(BHT) pour diminuer la peroxydation lipidique des LDLs
50
En 1998 Martiacuten-Aragoacuten et coll (38) ont eacutetudieacute in vitro la capaciteacute drsquoun extrait complexe
drsquoanthocyanoside de V myrtillus agrave inhiber la peroxydation lipidique et agrave pieacuteger les ERO
comme les radicaux OH et O2- Lrsquoeacutetude deacutemontre un effet antiperoxydant de lrsquoextrait
(concentration-deacutependante) la concentration capable drsquoinhiber 50 de la peroxydation
lipidique (IC50 ou concentration inhibitrice 50) eacutetant de 5028 microgmL Sa capaciteacute agrave pieacuteger le
radical OH est faible (deacutetectable agrave partir de 50 microgmL) alors que sa reacuteactiviteacute contre le
radical O2- est forte
(observeacutee agrave toutes les concentrations testeacutees avec une valeur drsquoIC50 de
moins de 25 microgmL)
En conclusion la myrtille pourrait par son activiteacute antiperoxydative contribuer agrave la protection
vis-agrave-vis de lrsquoatheacuteroscleacuterose
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines
Viljanen et coll (63) ont compareacute lrsquoinhibition de lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines entre
les composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus avec ceux drsquoautres baies comme Rubus idaeus L
(framboisier) Vaccinium vitis-idaea L (airelle rouge) et Ribes nigrum L (cassis) Les
composeacutes pheacutenoliques sont repreacutesenteacutes par des anthocyanosides des ellagitanins et des
proanthocyanidines Lrsquoeacutetude deacutemontre que V myrtillus et Rubus idaeus possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante parmi la totaliteacute des baies eacutetudieacutees contre lrsquooxydation des
proteacuteines (cette oxydation eacutetant mesureacutee par la perte de la fluorescence au tryptophane et la
formation de proteacuteines carbonyles) Vaccinium myrtillus et V vitis-idaea possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante vis-agrave-vis de lrsquooxydation des lipides suivis par Ribes nigrum et
Rubus idaeus (cette oxydation est mesureacutee par lrsquoanalyse drsquohexanal de diegravenes conjugueacutes et
drsquohydroperoxydes) Dans la myrtille et le cassis ce sont les anthocyanosides qui contribuent agrave
la majoriteacute de lrsquoeffet antioxydant par inhibition de la formation des proteacuteines carbonyles et
drsquohexanal (hexanaldehyde) Cette activiteacute antioxydante des anthocyanosides et des
proanthocyanidines est dose-deacutependante ce qui nrsquoest pas le cas pour les autres composeacutes
pheacutenoliques Lrsquoeffet antioxydant des composeacutes pheacutenoliques des baies est plus prononceacute
contre lrsquooxydation des lipides particuliegraverement lrsquoinhibition du composeacute hexanal que celle des
proteacuteines Lrsquoinhibition des composeacutes aldeacutehydes des lipides reacutesulte en geacuteneacuteral de lrsquoinhibition
de la formation de deacuteriveacutes carbonyls conseacutequence drsquoune diminution de lrsquointeraction lipide-
proteacuteine
51
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie
Le foie est lrsquoorgane central du meacutetabolisme des composeacutes exogegravenes et endogegravenes il est donc
lrsquoorgane cible de lrsquoaction des xeacutenobiotiques et de leurs meacutetabolites Les eacutetudes sur les
heacutepatocytes sont importantes car ces cellules repreacutesentent 65 du parenchyme du foie et ils
assurent presque toutes les fonctions de cet organe Les heacutepatocytes ont un appareil de Golgi
distinct et de nombreuses mitochondries Malheureusement ils peuvent ecirctre soumis agrave un
stress oxydant Les eacutetudes faites agrave ce jour ont utiliseacute des toxines expeacuterimentales varieacutees afin
drsquoeacutetudier les effets cytoprotecteurs de substances comme lrsquoextrait de V myrtillus Dans les
eacutetudes qui vont suivre deux toxines sont employeacutees Le tert ndashbutyl hydroperoxyde (tBH) et
lrsquoallyl-alcool (2-propen-1-ol) Le tBH peut induire un stress oxydant aux cellules agrave travers des
radicaux (radical hydroxyl peroxyl drsquohydrogegravene et alkoxyl se formant lors de sa
deacutecomposition) Le tBH est la cause de plusieurs dommages comme la rupture des
membranes cellulaires lrsquoinduction de la peroxydation lipidique (responsable
drsquoatheacuteroscleacuterose) la fuite drsquoenzymes agrave travers lrsquoespace extracellulaire lrsquooxydation du
glutathion et lrsquoalkylation de macromoleacutecules cellulaires Lrsquoallyl-alcool (AA) est une toxine
qui agit indirectement agrave travers ses meacutetabolites Il est oxydeacute dans les cellules en acroleacuteine
sous lrsquoaction de lrsquoalcool deacuteshydrogeacutenase cytosolique Lrsquoacroleacuteine est capable de former un
produit avec le glutathion reacuteduit (GSH) et drsquoautres biomoleacutecules Elle induit aussi la
peroxydation lipidique catalyseacutee par les ions Fe(II) (62)
32 Eacutetudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques
En 2007 Valentovaacute et coll (62) ont utiliseacute un extrait de Vaccinum myrtillus (contenant 25
drsquoanthocyanosides) pour eacutevaluer son effet contre une leacutesion oxydative dans des cultures
primaires drsquoheacutepatocytes de rat induite par tBH et AA Jusqursquoagrave preacutesent lrsquoactiviteacute
cytoprotectrice de la myrtille contre une leacutesion oxydative nrsquoeacutetait pas documenteacutee
Lrsquoeacutetude a deacutemontreacute lrsquoactiviteacute protectrice dose-deacutependante de la plante vis-agrave-vis de leacutesions
oxydatives dans ces cultures cellulaires avec une protection maximale de 5116 contre les
dommages occasionneacutes par AA De plus les auteurs ont montreacute la capaciteacute de lrsquoextrait agrave
pieacuteger les radicaux DPPH (dipheacutenylpicrylhydrazyl) et O2-
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus montre des effets cytoprotecteurs agrave 100 et 500 microgmL
dans le test au MTT (sel de teacutetrazolium permettant une numeacuteration rapide des cellules
vivantes) Lrsquoextrait protegravege les heacutepatocytes de la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase et de la
formation des produits de la lipoperoxydation (TBARS repreacutesentant les substances reacuteagissant
52
avec lrsquoacide thiobarbiturique et permettant une premiegravere approche de la peroxydation
lipidique) Lrsquoimportante reacuteactiviteacute dans lrsquoeacutetude est sucircrement due agrave la dureacutee plus importante du
temps drsquoincubation dans le meacutelange reacuteactionnel Les effets observeacutes dans lrsquoeacutetude de
Valentovaacute et coll (62) montre que la capaciteacute cytoprotectrice de V myrtillus vis-agrave-vis des
heacutepatocytes de rat est probablement due aux proprieacuteteacutes antioxydantes de ses constituants
principaux (les anthocyanosides) Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude soutien lrsquoutilisation de la
myrtille dans les compleacutements alimentaires pour preacutevenir les maladies chroniques associeacutees
au stress oxydant
En 2008 Bao et coll (6) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun extrait de V myrtillus
commercialiseacute (contenant 4204 drsquoanthocyanosides) vis-agrave-vis drsquoun dommage du foie de
souris induit par un stress Ce stress est provoqueacute par lrsquoenfermement des souris dans une cage
meacutetallique pendant 18 heures provoquant un dommage heacutepatique avec augmentation des
enzymes heacutepatiques (alanine aminotransfeacuterase) du niveau de malondialdeacutehyde (MDA) du
monoxyde drsquoazote de la xanthine oxydase (XOD) et de la peroxydation lipidique avec un
deacuteseacutequilibre de la balance oxydants-antioxydants et la diminution de GSH de la vitamine C
et de la valeur ORAC Or lrsquoadministration orale de plusieurs dosages drsquoextrait de V
myrtillus pendant 5 jours preacuteceacutedant lrsquoinduction drsquoun stress chez la souris diminue le niveau
drsquoalanine aminotransfeacuterase (agrave 200 mgkgjour drsquoextrait) augmente les niveaux de GSH (50
100 et 200 mgkgjour drsquoextrait) et diminue significativement les niveaux de XOD et de NO
(agrave des concentrations de 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait)
De plus lrsquoextrait de myrtille agrave 200 mgkgjour pourrait supprimer et renverser le niveau de
MDA heacutepatique et plasmatique agrave un niveau comparable agrave celui du groupe controcircle (non
soumis au stress) La mecircme chose est observeacutee avec 200 mgkg jour de vitamine C (autre
antioxydant) Enfin le niveau ORAC est augmenteacute par 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait de V
myrtillus
Bao et coll (6) avaient deacutejagrave mis en eacutevidence lrsquoeffet protecteur du rein drsquoun extrait de V
myrtillus vis-agrave-vis drsquoun stress oxydant induit par KBrO3
En conclusion la myrtille pourrait preacutevenir les dommages heacutepatiques causeacutes par un stress
oxydant gracircce agrave ses proprieacuteteacutes antioxydantes
53
4 Effet de Vaccinim myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives et le
vieillissement
41 Effets sur un stress eacutemotionnel
Il a eacuteteacute mis en eacutevidence que le stress psychologique joue un rocircle significatif dans la
pathogenegravese de cancers et peut ecirctre associeacute avec une augmentation des produits issus de
lrsquooxydation et de leurs dommages sur les tissus
Le stress oxydant participe agrave lrsquoeacutetiologie de maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie
drsquoAlzheimer et la maladie de Parkinson En effet le stress eacutemotionnel peut affecter le systegraveme
nerveux central dans lequel se trouve notamment les neurones dopaminergiques qui
produisent la dopamine un neurotransmetteur du groupe des cateacutecholamines preacutecurseur de la
noradreacutenaline jouant un rocircle fondamentale dans le cerveau (controcircle de la motriciteacute) utiliseacute
en theacuterapeutique pour son action stimulante sur le systegraveme cardiovasculaire Les neurones
dopaminergiques sont localiseacutes dans certaines reacutegions ceacutereacutebrales comme lrsquohypothalamus le
locus niger et les corps strieacutes Ainsi la rupture de la transmission dopaminergique affecte
lrsquoactiviteacute comportementale Une baisse du niveau de dopamine dans certaines reacutegions
ceacutereacutebrales peut induire une perte des certains fonctions cognitives comme la meacutemoire
lrsquoattention la reacutesolution de problegraveme le mouvement la reacuteponse eacutemotionnelle et la capaciteacute
eacutemotionnelle agrave ressentir le plaisir ou la douleur
De plus les ERO induites par un stress sont connues pour ecirctre responsables de la
peroxydation lipidique et de lrsquooxydation des proteacuteines avec formation de proteacuteines
carbonyles Ainsi des eacutetudes ont deacutemontreacute que la modification de proteacuteines intracellulaires
comme certaines enzymes cleacutes et proteacuteines structurales peuvent mener agrave la deacutegeacuteneacuteration
neurofibrillaire des neurones menant agrave la maladie drsquoAlzheimer une autre maladie
neurodeacutegeacuteneacuterative (1) (52)
En 2008 Rahman et coll (52) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun meacutelange
drsquoanthocyanosides de Vaccinum myrtillus administreacute oralement agrave des souris soumis agrave un
stress oxydant ceacutereacutebral provoqueacute par la coupure des moustaches En effet le retrait des
moustaches augmente la formation de proteacuteines carbonyles et induit la peroxydation lipidique
dans le cerveau le cœur le rein et le foie Le niveau des marqueurs de lrsquooxydation diffegraverent
en fonction des reacutegions ceacutereacutebrales De mecircme le niveau de dopamine est alteacutereacute dans le cortex
ceacutereacutebral et le meacutesenceacutephale Les moustaches de souris jouent un rocircle tregraves important dans le
sens et la motriciteacute et la contribution sensorielle est directement lieacutee aux neurones moteurs
54
controcirclant leur activiteacute locomotrice Crsquoest pourquoi le retrait des moustaches a de graves
conseacutequences puisqursquoil affecte lrsquoactiviteacute locomotrice induisant anxieacuteteacute et hyper-locomotion
Ce stress oxydant induit par un stress psychologique augmente les niveaux de marqueurs
biologiques comme les proteacuteines carbonyles et les TBARS dans certains organes et reacutegions
ceacutereacutebrales (cœur reins foie meacutesenceacutephale cortex et ceacutereacutebellum) Or lrsquoadministration des
anthocyanosides de V myrtillus des souris diminue la peroxydation lipidique dans tous les
tissus reacuteduit lrsquooxydation des proteacuteines dans les reins le foie le meacutesenceacutephale et le cortex
ceacutereacutebral de faccedilon notable et diminue eacutegalement les niveaux de proteacuteines carbonyles et de
TBARS
Enfin lrsquoadministration de myrtille supprime les modifications (induites par le stress
psychologique) des niveaux de dopamine et de ses meacutetabolites (ces modifications pouvant
provoquer des maladies deacutegeacuteneacuteratives comme la maladie de Parkinson)
Cependant cette eacutetude ne peut pas conclure sur la capaciteacute des anthocyanosides de V
myrtillus agrave franchir la barriegravere heacutemato-enceacutephalique et agrave y exercer leur action antioxydante
Les principales formes retrouveacutees dans le foie et les reins sont des meacutetabolites meacutethyleacutes des
anthocyanosides et drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour prouver le lien entre ces meacutetabolites
meacutethyleacutes et la neuroprotection observeacutee dans lrsquoeacutetude
En conclusion cette eacutetude suggegravere que les anthocyanosides peuvent ecirctre utiles dans la
protection et le traitement des maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives associeacutees agrave un stress oxydant
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication du stress oxydant
Le dommage oxydant a depuis longtemps eacuteteacute proposeacute pour ecirctre en partie responsable de
plusieurs deacutesordres lieacutes agrave lrsquoacircge De plus plusieurs eacutetudes ont confirmeacute lrsquoaccumulation des
marqueurs biologiques du stress oxydant (augmentation de lrsquooxydation des lipides et des
proteacuteines dans les cerveaux de mammifegraveres acircgeacutes) Les pertes de la fonction ceacutereacutebrale avec le
vieillissement pourraient ecirctre associeacutees agrave une leacutesion oxydante des biomoleacutecules dans certaines
reacutegions ceacutereacutebrales et un niveau augmenteacute de peroxydes lipidiques observeacute dans des reacutegions
du cerveau impliqueacutees dans les fonctions de meacutemoire et drsquoapprentissage De plus les auteurs
ont deacutemontreacute lrsquoassociation des alteacuterations des fonctions ceacutereacutebrales cognitives avec des
modifications du systegraveme cardiovasculaire comme lrsquoaugmentation de la pression sanguine
(impliqueacutee dans lrsquoacceacuteleacuteration du vieillissement des vaisseaux les alteacuterations des fonctions
ceacutereacutebrales et le deacuteveloppement de lrsquoatheacuteroscleacuterose) (32)
Kolosova et coll (32) utilisent pour leur eacutetude deux souches de rats La souche OXYS qui est
une souche aux traits heacuteriteacutes de vieillissement acceacuteleacutereacute et une haute sensitiviteacute au stress
55
oxydant par rapport agrave une autre souche la souche Wistar Les rats OXYS ont une espeacuterance
de vie plus courte et deacuteveloppent plus preacutecocement des deacutesordres pathologiques lieacutes agrave lrsquoacircge
semblables agrave ceux observeacutes chez lrsquohumain comme lrsquoosteacuteoporose lrsquohypertension arteacuterielle
de ce fait le comportement de jeunes rats OXYS est semblable agrave celui des rats Wistar acircgeacutes
Lrsquoobjectif de leur eacutetude eacutetait de veacuterifier srsquoil existe un lien entre le vieillissement ceacutereacutebral et les
marqueurs du stress oxydant chez les rats OXYS pour rechercher lrsquoefficaciteacute drsquoune
suppleacutementation agrave long terme drsquoantioxydants dans la preacutevention de lrsquoapparition de deacuteficits
cognitifs comme les deacuteficits drsquoapprentissage et de meacutemoire
Les diffeacuterents paramegravetres de stress oxydant dans ces deux souches de rats sont eacutevalueacutes
(peroxydation lipidique niveau de proteacuteines carbonyles niveau de MDA activiteacute de
superoxyde dismutase (SOD) de niveau de GSH et quantiteacute drsquoα-tocopheacuterol)
Lrsquoeacutetude deacutemontre qursquoune suppleacutementation agrave long terme avec un extrait de V myrtillus
preacutevient la manifestation exteacuterieure du vieillissement des deux souches de rats (lrsquoextrait
augmente le poids des souris) Chez les rats OXYS lrsquoextrait de myrtille diminue
- la peroxydation lipidique
- lrsquoactiviteacute SOD dans le cerveau (en jouant un rocircle protecteur vis-agrave-vis du stress
oxydant)
- et le niveau de MDA dans le cerveau
La myrtille preacutevient aussi chez les rats OXYS
- les deacuteficits de meacutemoire et drsquoapprentissage plus efficacement que la vitamine E (autre
antioxydant)
- la deacuteteacuterioration de la fonction mitochondriale (autre cause de seacutenescence acceacuteleacutereacutee)
De plus V myrtillus a la capaciteacute de preacutevenir les mutations induites par les ERO lesquels
srsquoaccumulent avec lrsquoacircge dans la mitochondrie menant agrave un dysfonctionnement
mitochondriale Ce mecircme meacutecanisme pourrait ecirctre impliqueacute dans lrsquoeffet positif exerceacute par la
myrtille sur la meacutemoire des rats OXYS Ainsi la preacutevention des deacuteficits cognitifs
comportementaux avec des antioxydants peuvent montrer le rocircle du stress oxydant dans ces
processus mecircme si drsquoautres meacutecanismes peuvent jouer un rocircle dans cette capaciteacute de
preacutevention des composeacutes
En conclusion Vaccinum myrtillus atteacutenue les deacuteficits cognitifs chez les rats OXYS
apportant la preuve du rocircle theacuterapeutique de cette plante Cependant les meacutecanismes par
lesquels cet antioxydant agit pour exercer une neuroprotection in vivo et le reacuteel impact du
stress oxydant et de ses marqueurs biologiques sur les deacuteficits cognitifs des rats OXYS
doivent encore ecirctre eacutetudieacutes
56
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB
51 Effets drsquoune exposition solaire
Une exposition prolongeacutee aux ultraviolets (UV) durant le sport ou drsquoautres activiteacutes est un
facteur de risque de plusieurs maladies de la peau comme le cancer cutaneacute La deacutepleacutetion de la
couche drsquoozone protectrice entraicircne une quantiteacute plus importante des rayons UV atteignant la
surface planeacutetaire et exerccedilant des effets neacutefastes Les UVB sont largement absorbeacutes mais
moins peacuteneacutetrants que les UVA atteignant particuliegraverement la couche cellulaire de lrsquoeacutepiderme
basal Les UVB sont plus geacutenotoxiques et environ 1000 fois plus capables de provoquer un
coup de soleil que les UVA Ainsi le coup de soleil lrsquoeacuterythegraveme et lrsquoœdegraveme sont des
manifestations de lrsquoexposition aux UVB Lrsquoabsorption des photons UVB megravenent agrave des
dislocations de lrsquoADN et agrave la formation de photoproduits dimegraveriques de pyrimidine De plus
ils interagissent directement avec les acides amineacutes aromatiques notamment le tryptophane et
la tyrosine (inclus dans les proteacuteines) pouvant alors alteacuterer les fonctions de celles-ci Les UVB
altegraverent indirectement les macromoleacutecules ils geacutenegraverent la production de radicaux libres
comme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote induisant lrsquooxydation des proteacuteines
des lipides et de lrsquoADN Ces produits oxydeacutes (hydroperoxydes lipidiques proteacuteines
carbonyles et 8-hydroxydeacuteoxyguanosine) sont impliqueacutes dans le deacutebut des cancers cutaneacutes
Les UVB diminuent aussi les antioxydants de la peau responsable drsquoune baisse de la
protection vis-agrave-vis des radicaux libres Ils participent aux pheacutenomegravenes de processus
inflammatoire de la peau incluant une cascade drsquoeacutevegravenements comme lrsquoinfiltration de
leucocytes sanguins inflammatoires (macrophages et neutrophiles) lrsquoaugmentation de la
production des prostaglandines comme conseacutequence de lrsquoaugmentation de la peroxydation
lipidique la libeacuteration du fateur TNFα (tumour necrosis factor alpha ou facteur de neacutecrose
tumoral) le NFκB (nuclear factor κB ou facteur nucleacuteaire κB) des cytokines pro-
inflammatoires comme les interleukines (IL-1α IL-1β IL-6 IL-8 IL-12) qui en retour
augmentent la production des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote Un deacutefaut de
reacuteparation des leacutesions de lrsquoADN et les effets neacutefastes des UVB du soleil sont agrave lrsquoorigine des
cancers cutaneacutes Crsquoest pourquoi des meacutecanismes de protection de la peau ou une atteacutenuation
de la quantiteacute drsquoUVB atteignant et peacuteneacutetrant la peau peuvent ecirctre des strateacutegies efficaces dans
la preacutevention des dommages occasionneacutes par le soleil (57)
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires
Svobodovaacute et coll (57) Ont eacutetudieacute la capaciteacute des fractions pheacutenoliques des fruits de Lonicera
caerulea L (chegravevrefeuille bleu) et de V myrtillus en preacute et post-traitement sur les dommages
57
oxydants des keacuteratinocytes HaCaT humains induits par un simulateur de radiations solaires
(UVB) Plusieurs paramegravetres sont eacutetudieacutes et seuls les reacutesultats concernant V myrtillus sont
rapporteacutes dans cette thegravese Cette plante a plusieurs effets
- elle augmente le nombre de cellules viables
- diminue significativement la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase de maniegravere dose
deacutependante
- augmente de faccedilon dose-deacutependante la prolifeacuteration cellulaire (prolifeacuteration reacuteduite
par les UVB)
- preacutevient la formation et reacuteduit significativement la cassure simple brin de lrsquoADN
- diminue la caspase-3 (meacutediateur de lrsquoexeacutecution de la mort cellulaire apoptotique)
- diminue la caspase-9 de maniegravere dose-deacutependante (meacutediateurs de lrsquoexeacutecution de la
mort cellulaire apoptotique)
- preacutevient la formation des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote avec
eacutelimination excellente en post-traitement
- et diminue de maniegravere dose-deacutependante la production drsquoIL6
Cependant on remarque que cette protection deacutecline leacutegegraverement agrave des concentrations plus
hautes srsquoexpliquant par un effet pro-oxydant des polypheacutenols dans les cellules irradieacutees ougrave la
balance oxydantsantioxydants est deacuteseacutequilibreacutee
En conclusion V myrtillus pourrait ecirctre un bon candidat pour la fabrication de preacuteparations
dermatologiques protectrices agrave large spectre ou dans des preacuteparations apregraves-soleil Pour cela
des eacutetudes futures sont neacutecessaires pour eacutetudier la biodisponibiliteacute des composants exclure
les toxiques eacuteventuels ou les effets photoxiques et confirmer lrsquoeffet photoprotecteur in vivo
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes
Chez lrsquohomme la reacutetine (Figure 17) est une membrane photosensible qui tapisse la face
interne de lrsquoœil elle est constitueacutee de plusieurs types de cellules formant trois couches
superposeacutees qui sont de lrsquoarriegravere vers lrsquoavant de lrsquoœil
- les cellules photoreacuteceptrices constitueacutees de cocircnes et de bacirctonnets
- les cellules bipolaires
- les cellules ganglionnaires
Sa face posteacuterieure est en contact avec la choroiumlde par lrsquointermeacutediaire de lrsquoeacutepitheacutelium
pigmentaire et sa face anteacuterieure avec le corps vitreacute Les cellules de la reacutetine transforment les
58
influx nerveux en impulsions nerveuses qui gagnent les fibres nerveuses du nerf optique
permettant le transport des informations visuelles jusqursquoau cerveau (1)
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme (77)
La reacutetine est situeacutee dans un environnement tregraves oxygeacuteneacute pouvant subir des dommages induits
par le stress oxydant (les radicaux libres peuvent oxyder les lipides des photoreacutecepteurs) (23)
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire
Dutot et coll (23) ont eacutetudieacute les effets cytoprotecteurs drsquoun extrait en poudre de V myrtillus
(contenant 10 de proanthocyanidols et 10 drsquoanthocyanidines) sur le stress oxydant
appliqueacute aux cellules reacutetiniennes humaines dans un systegraveme in vitro Lrsquoextrait de V myrtillus
est incubeacute (005 et 01) pendant 15 minutes ou 24 heures sur une ligneacutee de cellules de
lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute reacutetinien Puis un stress oxydant induit par le tBHP est appliqueacute
pendant une heure sur ces cellules Les diffeacuterents paramegravetres des dommages du stress oxydant
sont eacutevalueacutes comme les modifications du meacutetabolisme cellulaire la formation des ERO la
formation drsquoO2-et lrsquoapoptose mitochondriale
Les reacutesultats sur ces diffeacuterents paramegravetres sont reacutesumeacutes dans les tableaux II agrave V
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
baisse induite par le tBHP Aucun effet cytoprotecteur
Incubation 24 heures Blocage de lrsquoeffet du tBHP sur le meacutetabolisme cellulaire
59
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Une concentration faible drsquoextrait (005) nrsquoa pas drsquoeffet sur une peacuteriode courte drsquoincubation
(15 minutes) par contre crsquoest le cas pour une peacuteriode plus longue (24 heures) cette
concentration est capable drsquoavoir des effets cytoprotecteurs V myrtillus pourrait ecirctre capable
de stimuler les deacutefenses antioxydantes de lrsquoorganisme mais des eacutetudes compleacutementaires sont
neacutecessaires pour confirmer cette hypothegravese
Enfin lrsquoeacutetude a montreacute que lorsque lrsquoextrait diminue le stress oxydant et lrsquoapoptose
mitochondriale elle restaure aussi la viabiliteacute cellulaire Par contre srsquoil nrsquoy a pas drsquoeffet sur le
stress oxydant il nrsquoy en a pas non plus sur la viabiliteacute cellulaire
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge
Lors du vieillissement et dans certaines maladies oculaires (comme la deacutegeacuteneacuterescence
maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge ougrave le stress oxydant est fortement impliqueacute) des pigments
autofluorescents constitueacutes par des deacutepocircts de lipofuchsine (pigment jaune-brun constitueacutee de
deacutebris moleacuteculaires) peuvent srsquoaccumuler dans les cellules eacutepitheacuteliales du pigment reacutetinien
La lipofuchsine peut absorber la lumiegravere bleue et geacuteneacuterer des photoproduits toxiques
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
surproduction drsquoERO Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution du stress oxydant
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
production drsquoO2-
Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Reacuteduction de la production drsquoO2-
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Inhibition significative de
lrsquoapoptose mitochondriale Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution de lrsquoapoptose mitochondriale
60
perturbant le fonctionnement cellulaire crsquoest donc un geacuteneacuterateur de radicaux lieacutes agrave la
lumiegravere Un composant de reacutetinoiumlde majeur de la lipofuchsine est lrsquoA2E (bis reacutetinoiumlde de
pyridinium deacuteriveacute de reacutetinal et de phosphatidyl eacutethanolamine) il contribue agrave
lrsquoautofluorescence de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute agrave lrsquoinhibition de fonctions cellulaires
essentielles au deacuteclenchement de la mort par apoptose des cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute
et agrave lrsquoabsorption de la lumiegravere bleue aggravant les leacutesions cellulaires (79) A2E lors de
lrsquoirradiation par la lumiegravere bleue subit une photooxydation en geacuteneacuterant de lrsquooxygegravene
singulet celui-ci reacuteagit en retour avec le fluorophore geacuteneacuterant des eacutepoxydes au niveau des
doubles liaisons carbone-carbone Les A2E-eacutepoxydes peuvent alors induire de graves leacutesions
agrave lrsquoADN (une des cibles des eacutevegravenements photodynamiques par interaction lumiegravere bleue-
A2E) pouvant srsquoaccumuler avec lrsquoacircge ougrave un deacuteclin des meacutecanismes de reacuteparation des bases
de lrsquoADN oxydeacutees a eacuteteacute reconnu (56)
Les antioxydants pourraient avoir un rocircle important dans la preacutevention des leacutesions oxydatives
sur les macromoleacutecules comme les bases de lrsquoADN et la deacutegeacuteneacuterescence de la maculaire lieacutee agrave
lrsquoacircge (DMLA) Crsquoest pourquoi Vaccinum myrtillus (par ses proprieacuteteacutes antioxydantes) a fait
lrsquoobjet drsquoeacutetudes montrant sa capaciteacute agrave preacutevenir certaines maladies oculaires causes majeurs
de ceacuteciteacute et de deacuteteacuterioration de lrsquoacuiteacute visuelle chez les personnes acircgeacutees
En 2003 Sparrow et coll (56) ont deacutemontreacute dans une eacutetude in vitro la capaciteacute drsquoun extrait
de V myrtillus agrave inhiber lrsquoeacutepoxydation drsquoA2E par capture de lrsquooxygegravene singulet gracircce agrave sa
richesse en anthocyanosides antioxydants
Dans une eacutetude in vivo utilisant une souche de rats avec seacutenescence acceacuteleacutereacutee (rats OXYS)
Fursova et coll (24) ont deacutemontreacute qursquoune alimentation suppleacutementeacutee agrave long terme avec un
extrait de V myrtillus pouvait ecirctre efficace dans la preacutevention de la DMLA et de la cataracte
seacutenile deux maladies dont les dommages ont eacuteteacute attribueacutees aux radicaux libres
La surreacutegulation des proteacuteines de stress est un moyen de protection contre des conditions
deacuteleacutetegraveres comme le stress oxydant Ainsi Milbury et coll (42) ont deacutemontreacute in vitro la
capaciteacute des anthocyanosides et drsquoautres composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus agrave surreacuteguler
les enzymes de deacutefense du stress oxydant comme lrsquohegraveme oxygeacutenase-1 (HO-1) et la glutathion
S-transfeacuterase (GST) dans des cultures de cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmentaire reacutetinien humain
Agrave cocircteacute du stress oxydant des facteurs vasculaires peuvent ecirctre impliqueacutes dans les maladies
oculaires comme le glaucome la DMLA ou la reacutetinopathie diabeacutetique Comme nous lrsquoavons
vu dans le premier chapitre de cette partie Personn et coll (46) ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoun
extrait de V myrtillus agrave inhiber lrsquoECA cet effet pourrait ecirctre une explication aux effets
observeacutes de la plante sur la vision
61
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus
Un stress oxydant peut laquo srsquoattaquer raquo aux neurotransmetteurs entrainant leur oxydation Ainsi
les neurotransmetteurs comme la dopamine et son meacutetabolite neurotoxique la 6-
hydroxydopamine peuvent subir une oxydation geacuteneacuterant H2O2 et des ERO Dans les neurones
et drsquoautres cellules ce stress oxydant peut ecirctre amplifieacute par le relargage du cytochrome c
(composant essentiel de la chaine respiratoire mitochondriale participant au transfert
drsquoeacutelectrons) localiseacute dans la membrane interne de la mitochondrie dans le cytoplasme ce
relargage induit toute une cascade de reacuteactions aboutissant agrave lrsquoactivation de caspases
(proteacuteines directement lieacutees agrave lrsquoapoptose) pouvant ecirctre fortement preacutejudiciable pour les
meacutetabolites de la dopamine La perte de lrsquointeacutegriteacute mitochondriale observeacutee dans des maladies
neurodeacutegeacuteneacuteratives peut contribuer aussi agrave des niveaux relargueacutes de cytochrome c au-dessus
de la normale (68)
Yao et coll (68) ont montreacute in vitro la capaciteacute drsquoune preacuteparation riche en anthocyanosides
composeacutee de V myrtillus V corymbosum et V oxycoccus L et des anthocyanosides purifieacutes agrave
inhiber lrsquooxydation de la 6-hydoxydopamine augmenteacutee par le cytochrome c Parmi les trois
espegraveces eacutetudieacutees les extraits de V myrtillus apparaissent pour ecirctre plus efficaces dans cette
activiteacute que les deux autres espegraveces ou que les anthocyanosides purifieacutes pouvant srsquoexpliquer
par une plus grande richesse en anthocyanosidesanthocyanidines particuliegraverement la
cyanidine et delphinidine La composition en querceacutetine et agrave moindre degreacute en myriceacutetine
nrsquoont pas de rocircle dans lrsquoactiviteacute antioxydante la preacutesence de querceacutetine est mecircme
inversement correacuteleacutee avec lrsquoeffet antioxydant Lrsquoeffet inhibiteur observeacute est principalement ducirc
agrave lrsquoeffet antioxydant des anthocyanosides
Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent la forte activiteacute des anthocyanosides vis-agrave-vis des
reacuteactions neurotoxiques potentielles et suggegraverent lrsquoimportance de mettre au point des eacutetudes in
vivo dans le but de deacutemontrer des effets neuro- et mitochondrio-protecteurs de ces
phytochimiques particuliegraverement dans la maladie de Parkinson et drsquoautres maladies
impliquant un dysfonctionnement mitochondriale
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant un
stress oxydant
Une ischeacutemie-reperfusion entraine de nombreuses alteacuterations microvasculaires comme une
augmentation des leucocytes adheacuterant agrave la paroi des vaisseaux veineux une diminution de la
longueur des capillaires perfuseacutes menant agrave une diminution du nombre de capillaires
62
fonctionnels une perte de lrsquointeacutegriteacute endotheacuteliale une augmentation de la permeacuteabiliteacute
capillaire (relargage de proteacuteases comme lrsquoeacutelastase et la collageacutenase avec formation drsquoœdegraveme)
et des modifications du diamegravetre des arteacuterioles (modification de la balance vosodilatation-
vasoconstriction au profit drsquoune vasoconstriction ) Les leucocytes jouent un rocircle fondamental
dans lrsquoischeacutemie-reperfusion en srsquoaccumulant dans les tissus ils provoquent lrsquoocclusion
intravasculaire ainsi que le relargage de cytokines pro-inflammatoires et des meacutetabolites
deacuteriveacutes de lrsquooxygegravene En effet les ERO ont eacuteteacute fortement impliqueacutees dans ces deacutesordres
microcirculatoires elles altegraverent entre autre lrsquointeacutegriteacute de la paroi des vaisseaux et entrainent
une augmentation de la permeacuteabiliteacute en post-capillaire et dans les veines collectrices de
lrsquoabajoue drsquohamster De plus les ERO provenant des leucocytes ou non peuvent induire une
contraction des arteacuterioles (8)
En 1995 Bertuglia et coll (8) ont eacutetudieacute les effets des anthocyanosides de V myrtillus sur
lrsquoischeacutemie-reperfusion provoqueacutee sur lrsquoabajoue drsquohamster entrainant les deacutesordres
microcirculatoires citeacutes preacuteceacutedemment Lrsquoeacutetude montre qursquoune administration orale
drsquoanthocyanosides de V myrtillus suite agrave ces dommages permet une protection de la paroi des
vaisseaux gracircce agrave leur action antioxydante une reacuteduction du nombre de leucocytes adheacuterant agrave
la paroi veineuse (proteacutegeant les tissus de lrsquoischeacutemie-reperfusion et preacutevenant la formation de
meacutediateurs inflammatoires) une diminution de la permeacuteabiliteacute capillaire par son activiteacute anti-
proteacuteasique la plante peut ecirctre eacutegalement un modulateur important du tonus des arteacuterioles en
controcirclant la freacutequence et lrsquoamplitude la vasomotion (modification du calibre vasculaire)
permettant une ameacutelioration de la perfusion capillaire (inhibition de la vasoconstriction par les
ERO)
Cette eacutetude est importante drsquoune part pour montrer le rocircle des radicaux libres deacuteriveacutes de
lrsquooxygegravene dans les deacutesordres microcirculatoires et drsquoautre part pour deacutemontrer les effets
beacuteneacutefiques de V myrtillus agrave restaurer les diffeacuterents paramegravetres notamment par son action
antioxydante
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer
Wang et coll (65) ont reporteacute les reacutesultats des eacutetudes qui ont permis de mettre en eacutevidence les
activiteacutes anticarcinogeacuteniques des anthocyanosides et des extraits riches en anthocyanosides
dans des modegraveles de cultures cellulaires in vitro et dans des systegravemes in vivo de modegraveles
tumoraux chez lrsquoanimal Lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides est due agrave leur structure
63
pheacutenolique en donnant un eacutelectron aux radicaux ceux-ci devenant stables (eacutelectrons
apparieacutes) En effet les anthocyanosides sont capables comme nous lrsquoavons vu
preacuteceacutedemment de pieacuteger directement les ERO drsquoaugmenter la valeur ORAC des cellules de
stimuler lrsquoexpression de la phase II de deacutetoxification des enzymes de reacuteduire la formation des
sous-produits de lrsquoADN de diminuer la peroxydation lipidique drsquoinhiber la mutagenegravese
induite par des carcinogegravenes ou des toxines et de reacuteduire la prolifeacuteration cellulaire en
modulant les voies de transduction du signal Ils sont capables eacutegalement de cheacutelater les
meacutetaux et de se lier directement aux proteacuteines Lrsquoactiviteacute antioxydante est principalement due
aux groupes hydroxyles des anthocyanosides en position 3 du cycle C et en position 3rsquo 4rsquo et
5rsquo du cycle B de leur structure de base Enfin il a eacuteteacute montreacute que les aglycones
drsquoanthocyanidines ont une activiteacute antioxydante plus importante que leurs homologues
glycosyleacutes et cette activiteacute diminue quand le nombre de sucres augmente
Mecircme si les eacutetudes expeacuterimentales ont deacutemontreacute lrsquoactiviteacute anticancer des anthocyanosides les
eacutetudes eacutepideacutemiologiques nrsquoont pas montreacute lrsquoactiviteacute protectrice de la consommation
drsquoanthocyanosides vis-agrave-vis du risque de cancer humain et leur activiteacute antioxydante reste
encore questionnable De plus les quantiteacutes drsquoanthocyanosides neacutecessaires pour observer un
effet in vitro sont importantes par rapport aux quantiteacutes retrouveacutees dans le plasma humain in
vivo Crsquoest pourquoi des eacutetudes sont neacutecessaires pour deacutevelopper des solutions qui
permettraient drsquoaugmenter lrsquoabsorption des anthocyanosides etou leurs meacutetabolites
permettant ainsi lrsquoutilisation optimale des anthocyanosides dans la preacutevention de cancer chez
lrsquohomme particuliegraverement dans les tissus autres que le tractus gastro-intestinal et la peau
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus
Katsube et coll (31) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute anticarcinogeacutenique dans un systegraveme in vitro de dix
baies comestibles et particuliegraverement celle de V myrtillus Lrsquoactiviteacute de la myrtille est testeacutee
sur deux ligneacutees cellulaires diffeacuterentes les cellules leuceacutemiques humaines HL60 et les
cellules carcinomateuses du cocirclon HCT116 Lrsquoeacutetude deacutemontre que lrsquoextrait de V myrtillus est
le plus efficace parmi les dix extraits eacutethanoliques de baies pour inhiber la croissance de ces
ligneacutees cellulaires Toutes les concentrations testeacutees inhibent la croissance des cellules HL60
lors des deux peacuteriodes drsquoincubation (24 et 48 heures) alors que lrsquoinhibition de la croissance
des HCT116 nrsquoest observeacutee que pour des intervalles speacutecifiques de concentrations De plus
lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus induit des niveaux significatifs drsquoapoptose dans les
cellules HL60 mais pas dans les cellules HCT116
64
Ce sont les anthocyanosides qui sont responsables de lrsquoinhibition de la croissance des cellules
canceacutereuses HL60 et HCT116 induisant eacutegalement lrsquoapoptose des cellules HL60
Les anthocyanosides de V myrtillus plus particuliegraverement les glycosides de delphinidine et
malvidine induisent lrsquoinhibition de la croissance des cellules de la leuceacutemie humaine HL60
par induction de lrsquoapoptose et mecircme si lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus et certains
anthocyanosides inhibent la croissance des cellules carcinomateuses du cocirclon humain
(HCT116) ces cellules sont toutefois moins sensibles agrave lrsquoapoptose que les autres ligneacutees en
se reacutefeacuterant agrave drsquoautres donneacutees on pourrait suggeacuterer un blocage de la voie drsquoinduction de
lrsquoapoptose des cellules HCT116
Lrsquoinhibition de la croissance par les baies nrsquoest toutefois pas speacutecifique aux cellules
canceacutereuses En conclusion une consommation reacuteguliegravere de baies pourrait maintenir des
niveaux drsquoanthocyanosides dans le plasma Ces baies sont des aliments fonctionnels
prometteurs dans la preacutevention du risque de cancer gracircce agrave leurs effets multiples comme
lrsquoinduction de lrsquoapoptose lrsquoactiviteacute antioxydante et drsquoautres effets anticanceacutereux
En 2004 Zhao et coll (69) ont eacutetudieacute les effets de trois extraits riches en anthocyanosides
Vitis vinifera (Vigne rouge) V myrtillus L et Aronia melanocarpa E (Aronie noire) sur les
cellules canceacutereuses du cocirclon HT-29 et les cellules non tumorigeacuteniques du cocirclon NCM460
Lrsquoeacutetude deacutemontre lrsquoinhibition de la croissance des cellules HT-29 par V myrtillus agrave faibles
concentrations tandis que lrsquoeffet est pauvre sur les cellules NCM460 Cependant une peacuteriode
longue drsquoincubation (72 heures) montre un effet de la myrtille sur la croissance des cellules
NCM460 V myrtillus a une activiteacute importante peut-ecirctre gracircce agrave la cyanidine reporteacutee pour
ecirctre un inhibiteur efficace de la croissance des cellules canceacutereuses coloniques
Dans cette eacutetude la croissance des cellules du colon est inhibeacutee alors que les conditions de pH
et de tempeacuterature ne sont pas optimum pour la stabiliteacute des anthocyanosides Les formes
actives responsables des effets observeacutes pourraient ecirctre dues aux produits de deacutegradation des
anthocyanosides
En conclusion cette eacutetude deacutemontre que des extraits riches en anthocyanosides et notamment
V myrtillus sont capables drsquoinhiber la croissance des cellules canceacutereuses du colon HT-29 agrave
plus basse concentration et agrave des peacuteriodes drsquoincubation plus courtes que la croissance des
cellules non tumorigeacuteniques NCM460 du colon Il reste toutefois agrave deacuteterminer quels sont les
composeacutes des extraits veacuteritablement responsables des effets observeacutes
65
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine
En 2006 Cooke et coll (18) ont eacutetudieacute les effets drsquoun meacutelange drsquoanthocyanosides de V
myrtillus (Mirtoselectreg) et de cyanidine-3-glucoside ou C3G (anthocyanoside le plus
abondant de lrsquoalimentation) sur le deacuteveloppement drsquoadeacutenome intestinal sur souris ApcMin
alimenteacutees pendant 12 semaines avec ces extraits Les souris ApcMin
constituent un modegravele
geacuteneacutetique de polypose adeacutenomateuse familiale humaine Cette maladie autosomique
dominante de lrsquohomme est caracteacuteriseacutee par le deacuteveloppement spontaneacute drsquoune centaine de
polypes colorectaux pouvant se transformer en carcinomes
Les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent que les deux extraits utiliseacutes diminuent le nombre
drsquoadeacutenomes drsquoune maniegravere dose-deacutependante (agrave la plus haute concentration lrsquoinhibition la plus
importante est observeacutee pour la cyanidine-3-glucoside) Les anthocyanosides sont retrouveacutes
dans le plasma agrave la limite de la deacutetection analytique et sont retrouveacutes agrave des niveaux
quantifiables dans lrsquointestin et lrsquourine Les principales formes preacutesentes dans lrsquointestin et
lrsquourine sont des anthocyanosides glucuronides et des meacutetabolites meacutethyleacutes Enfin les
anthocyanosides sont retrouveacutes dans drsquoautres tissus que lrsquointestin
En conclusion la dose eacutequivalente de Mirtoselectreg
chez lrsquohumain est contenue dans environ
740 grammes de baies de V myrtillus suggeacuterant que la dose efficace de lrsquoextrait chez la
souris ApcMin
pourrait ecirctre traduite en une dose importante (mais non impossible) chez
lrsquohumain De plus les glycosides de malvidine sont les anthocyanosides laquo survivants raquo les
mieux sous forme inchangeacutee dans lrsquointestin leur structure eacutetant moins apte agrave subir les
reacuteactions de conjugaison que celle drsquoautres anthocyanosides Lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides
in vivo pourrait ecirctre due au moins en partie agrave leur hydrolyse en anthocyanidines La preacutesence
transitoire des anthocyanidines apregraves hydrolyse de leurs preacutecurseurs glycosyleacutes et leur
transformation par conjugaison meacutetabolique pourraient expliquer lrsquoefficaciteacute de C3G ou du
Mirtoselectreg Le niveau drsquoanthocyanosides agrave la dose efficace chez la souris Apc
Min est bas
dans la circulation systeacutemique mais deacutetectable et mesurable dans le tractus gastro-intestinal et
lrsquourine
Ainsi lrsquoabsence drsquoeffets indeacutesirables des anthocyanosides et leur efficaciteacute dans la reacuteduction
du deacuteveloppement de lrsquoadeacutenome en font de bons candidats pour le deacuteveloppement clinique
66
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes
Les reacutecepteurs agrave lrsquoactiviteacute tyrosine kinase sont des moleacutecules transmembranaires constitueacutees
drsquoun site reacutecepteur sur lequel se lie un ligand (localiseacute sur la face extracellulaire) et un site
tyrosine kinase (sur la face interne) Ces reacutecepteurs ont en plus un site de phosphorylation Le
site tyrosine kinase (constituant une famille drsquoenzymes) est normalement inactif mais peut
srsquoactiver par phosphorylation de la tyrosine Le meacutecanisme drsquoactivation du site tyrosine
kinase ne se fait pas par passage drsquoinformations depuis le site de reconnaissance du ligand
jusqursquoagrave lrsquointeacuterieur de la cellule mais par la liaison du ligand sur deux reacutecepteurs pouvant se
rapprocher et se phosphoryler mutuellement Les reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase jouent
un rocircle crucial dans la carcinogenegravese et la progression tumorale Des exemples importants de
reacutecepteurs agrave tyrosine kinase comportent la famille ErbB incluant le facteur de croissance
eacutepidermique (EGFR ErbB1) et les reacutecepteurs ErbB2-4 lrsquoIGFR1 (insulin-like growth factor
receptor 1) et les VEGFR-2 et VEGFR-3 (vascular endothelial growth factor receptors) ErbB
et IGF sont des reacutecepteurs agrave tyrosine kinase surexprimeacutes dans certains types tumoraux
reacutesultant dans des modifications de la signalisation cellulaire impliqueacutees dans la croissance
cellulaire et la diffeacuterentiation Les reacutecepteurs VEGF sont des modulateurs de lrsquoangiogenegravese et
de la lymphangiogenegravese Crsquoest pourquoi lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs agrave tyrosine
kinase peut ecirctre une theacuterapeutique inteacuteressante (84)
42 Eacutetude de Teller et coll (2009)
Teller et coll (60) ont eacutetudieacute les effets de deux extraits standardiseacutes Mirtocyanreg
(extrait de V
myrtillus et Oenocyaninreg
(extrait de raisins) sur lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs tyrosine kinases
(RTKs) Seuls les reacutesultats concernant V myrtillus seront rapporteacutes dans cette thegravese
Lrsquoinhibition des RTK est eacutevalueacutee en utilisant une activiteacute kinase recombinante dans un
systegraveme de cellules libres et en deacuteterminant lrsquoautophosphorylation induit par le ligand dans
des cellules carcinomateuses de la vulve E431 et dans des cellules endotheacuteliales aortiques
porcines exprimant soit VEGFR-2 soit VEGFR-3 La capaciteacute des extraits riches en
anthocyanosides agrave modifier lrsquoactiviteacute des RTK est compareacutee agrave leur capaciteacute agrave moduler la
croissance des cellules
Les deux extraits inhibent lrsquoactiviteacute drsquoune varieacuteteacute de RTKs dans le systegraveme de cellules libres
(activiteacute kinase des domaines kinases recombinants) et dans les cellules vivantes (reacutecepteur
intact autophosphorylation induite par ligand) Par contre lrsquoautophosphorylation du reacutecepteur
des cellules intactes neacutecessitent des concentrations 10 agrave 50 fois plus hautes que celles
67
neacutecessaires pour lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute kinase recombinante dans le systegraveme de cellules
libres Cette diffeacuterence pourrait srsquoexpliquer par un accegraves pauvre des glycosides aux domaines
kinases recombinants
De plus les deux extraits inhibent davantage les kinases associeacutees avec EGFR et le VEGFR-2
que les kinases associeacutees avec ErbB-2 VEGFR-3 et IGF1R De plus les extraits preacutesentent
peu de speacutecificiteacute entre les membres des reacutecepteurs de la famille ErbB Mecircme si les extraits
riches en anthocyanosides inhibent lrsquoactiviteacute des RTKs peu drsquoeffets ont eacuteteacute montreacutes sur la
croissance des cellules Ceci pourrait ecirctre ducirc soit agrave la faible stabiliteacute des anthocyanosides dans
le milieu de culture soit agrave la preacutesence drsquoautres voies moleacuteculaires que les RTKs ces voies ne
seraient pas affecteacutees par les extraits riches en anthocyanosides et auraient la capaciteacute de
promouvoir la croissance et la survie cellulaire elles pourraient ainsi compenser lrsquoinhibition
des RTKs
Lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoactiviteacute des RTKs nrsquoest pas ducirc aux composants individuels des
extraits en effet V myrtillus contient un ensemble de composeacutes polypheacutenoliques ainsi que
des constituants inconnus Les cateacutechines flavonols et procyanidines preacutesents dans les
extraits en quantiteacutes plus basses que les anthocyanosides ont montreacute dans drsquoautres eacutetudes des
effets inhibiteurs des RTKs Mais la basse biodisponibiliteacute de ces extraits doit ecirctre prise en
compte pour lrsquoeacutevaluation de leurs effets physiologiques
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision
Les extraits de V myrtillus ont eacuteteacute utiliseacutes depuis 1964 dans les affections ophtalmiques et
dans les deacutesordres de la microcirculation Des eacutetudes anciennes ont rapporteacute les effets de
preacuteparations agrave base du fruit de V myrtillus dans lrsquoacuiteacute visuelle en lumiegravere sombre dans la
vision nocturne chez les sujets ne preacutesentant pas de troubles de la vision chez les patients
avec un problegraveme significatif de vision en lumiegravere vive les patients atteints de DMLA de
reacutetinopathie diabeacutetique drsquoinflammation reacutetinienne de reacutetinite pigmentaire (V myrtillus
associeacute au β-carotegravene) et enfin chez les patients avec myopie progressive Drsquoautres eacutetudes ont
rechercheacute les effets de V myrtillus sur la formation de la cataracte chez des patients souffrant
de cataracte corticale seacutenile (extrait pris en association avec la vitamine E) Cependant
lrsquohypothegravese drsquoun effet de V myrtillus sur la vision est tregraves controverseacutee certaines eacutetudes
rapportent des reacutesultats neacutegatifs (35)
Durant la seconde guerre mondiale les pilotes de la British Royal Air force avaient deacutejagrave
rapporteacute une ameacutelioration de lrsquoacuiteacute visuelle apregraves consommation de confitures de myrtilles
68
Cependant durant cette mecircme peacuteriode la technologie du radar a eacuteteacute introduite en Grande-
Bretagne pour la deacutefense aeacuterienne et des eacutetudes ulteacuterieures nrsquoont pas supporteacute lrsquohypothegravese
drsquoune ameacutelioration de la vision nocturne et de la sensibiliteacute au contraste nocturne par la
suppleacutementation en V myrtillus Le systegraveme de radar et non V myrtillus pourrait alors ecirctre la
cause du succegraves de la Royal Air Force (66)
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale
Des eacutetudes ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoextraits de Vaccinum myrtillus seuls ou associeacutes agrave du
β-carotegravene et de la vitamine E (chez des patients avec ou sans deacutesordre oculaire) agrave ameacuteliorer
la vision nocturne agrave induire une adaptation agrave lrsquoobscuriteacute et une restauration de lrsquoacuiteacute
visuelle (suite agrave une exposition agrave une lumiegravere vive ou un flash) plus rapides (42) Drsquoautres
eacutetudes ont montreacute lrsquoefficaciteacute des extraits anthocyanosidiques de myrtille agrave ameacuteliorer la vision
nocturne et lrsquoajustement agrave lrsquoobscuriteacute chez des controcircleurs aeacuteriens des pilotes drsquoavion des
conducteurs de voiture et de camion (43)
Agrave lrsquoopposeacute drsquoautres eacutetudes ne precirctent pas agrave la myrtille des proprieacuteteacutes sur la vision Crsquoest le
cas notamment de lrsquoeacutetude en 2000 de Muth et coll (46) ils ont rechercheacute les effets de V
myrtillus sur lrsquoacuiteacute visuelle nocturne et la sensibiliteacute au contraste nocturne Leur eacutetude est
randomiseacutee double-aveugle et controcircleacutee par placebo Les sujets inclus dans lrsquoeacutetude sont des
hommes jeunes preacutesentant une bonne vision Un groupe reccediloit 160 mg drsquoextrait de V
myrtillus et lrsquoautre groupe un placebo trois fois par jour pendant 21 jours Apregraves un mois
sans traitement le test reprend pendant 3 semaines en inversant les groupes (les sujets ayant
eu le placebo ont maintenant les capsules de V myrtillus et vice versa) Les reacutesultats montrent
qursquoil nrsquoy a pas de diffeacuterences entre les mesures de la moyenne de lrsquoacuiteacute visuelle nocturne
chez les sujets soumis au traitement par V myrtillus et ceux soumis au placebo De mecircme
lrsquoexamen de la derniegravere acuiteacute visuelle durant le traitement actif et celui durant le placebo ne
reacutevegravelent pas de diffeacuterences dans lrsquoacuiteacute visuelle nocturne Le mecircme reacutesultat neacutegatif est
constateacute pour la sensibiliteacute au contraste nocturne
En conclusion cette eacutetude nrsquoapporte pas de reacutesultats positifs sur lrsquoeffet de V myrtillus sur les
deux paramegravetres mesureacutes mecircme si lrsquoextrait est pris agrave haute dose et pendant une dureacutee
significative
Une critique de lrsquoeacutetude de Muth et coll (46) pourrait ecirctre faite sur la population limiteacutee
utiliseacutee peu de sujets ont eacuteteacute inclus dans lrsquoeacutetude et ceux-ci eacutetaient tous des hommes jeunes
avec une bonne vision Il est vrai que deux de ces sujets avaient une moyenne drsquoacuiteacute
69
visuelle nocturne et une sensibiliteacute au contraste nocturne en dessous des autres sujets or
mecircme chez ces sujets aucune diffeacuterence de mesure nrsquoa eacuteteacute enregistreacutee
Cette eacutetude pose de nouveau des doutes sur lrsquoutilisation de la myrtille dans des formes
couramment disponibles et aux doses recommandeacutees comme suppleacutementation efficace pour
lrsquoameacutelioration de la vision nocturne dans une cateacutegorie de sujets preacutesentant une bonne vision
et essentiellement une vision nocturne normale
2 Eacutetude chez des sujets myopes
Une eacutetude a montreacute qursquoune association drsquoanthocyanosides de V myrtillus avec vitamine E et
β-carotegravene ameacuteliorait le champ visuel de patients atteints de myopie aussi bien lors drsquoun
traitement court que long De mecircme il a eacuteteacute deacutemontreacute une efficaciteacute de lrsquoassociation
drsquoanthocyanosides de myrtille avec le reacutetinol sur la sensibiliteacute de la reacutetine de patients myopes
dans 32 des 42 yeux examineacutes (43)
En 2005 Lee et coll (35) ont mis au point une eacutetude randomiseacutee double-aveugle controcircleacutee
par placebo impliquant 60 sujets avec astheacutenopie et myopie basse agrave modeacutereacutee avec erreurs
reacutefractaires entre -1 et -8 dioptres au niveau des deux yeux Lrsquoobjectif de lrsquoeacutetude est de
deacuteterminer lrsquoeffet de lrsquoadministration drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides purifieacutes agrave hautes doses
de V myrtillus sur la fonction visuelle nocturne et les symptocircmes cliniques chez ces sujets de
mecircme acircge et de sensibiliteacute au contraste similaire Ainsi 30 sujets ont reccedilu des comprimeacutes de
100 mg de traitement contenant 85 drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides et les 30 autres sujets
des comprimeacutes placebo deux fois par jours pendant 4 semaines La fonction visuelle nocturne
est eacutevalueacutee par le test de sensibiliteacute au contraste (test objectif) et les symptocircmes cliniques par
un questionnaire rempli par les sujets (test subjectif) avant et apregraves le traitement Ainsi les
reacutesultats baseacutes sur lrsquoanalyse du questionnaire montrent qursquoagrave la suite des 4 semaines de
traitement les sujets traiteacutes par anthocyanosides ont preacutesenteacute une ameacutelioration des symptocircmes
(meilleurs que le groupe placebo) De plus le groupe anthocyanoside a montreacute une sensibiliteacute
au contraste ameacutelioreacutee agrave chaque cycle par degreacute alors qursquoaucune ameacutelioration nrsquoa eacuteteacute
constateacutee dans le groupe placebo
Des eacutetudes anciennes ont reporteacutes une ameacutelioration de la fonction visuelle nocturne chez des
sujets normaux prenant des anthocyanosides alors que des eacutetudes plus reacutecentes nrsquoont montreacute
aucun effet sur la vision nocturne par administration orale simple ou multiple drsquooligomegraveres
drsquoanthocyanosides (35) Ces discordances de reacutesultats pourraient ecirctre causeacutees par des
diffeacuterences dans le choix des sujets les meacutethodes drsquoeacutevaluation de la vision nocturne ainsi que
la concentration et la dose drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides utiliseacutees Alors que des eacutetudes ne
70
montrent pas drsquoeffets des oligomegraveres drsquoanthocyanosides chez les sujets normaux drsquoautres
eacutetudes deacutemontrent lrsquoefficaciteacute de ceux-ci chez les sujets avec myopie ou heacutemeacuteralopie
(diminution anormale de la vision dans lrsquoobscuriteacute)
Dans lrsquoeacutetude de Lee et coll (35) les conditions sont diffeacuterentes de celles que lrsquoon peut trouver
dans drsquoautres eacutetudes qui ont pu ecirctre faites en termes de dose de dureacutee et de type de sujets En
effet une haute dose drsquooligomegraveres anthocyanosides (concentreacutes agrave 85 gracircce au processus de
fermentation speacutecifique) est administreacutee pendant une plus longue peacuteriode compareacutee aux autres
eacutetudes De plus les sujets utiliseacutes englobent des personnes avec myopie astheacutenopie et une
sensitiviteacute au contraste meacutesopique diminueacutee alors que drsquoautres eacutetudes utilisent des sujets
normaux
En conclusion cette eacutetude montre que les anthocyanosides peuvent ameacuteliorer les symptocircmes
subjectifs et les reacutesultats de la moyenne de la sensibiliteacute au contraste chez des sujets
preacutesentant myopie et astheacutenopie Mais drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour rechercher la
dose optimale de V myrtillus la dureacutee de traitement neacutecessaire la dureacutee de lrsquoeffet apregraves
lrsquoarrecirct du traitement et lrsquoapplication de ce traitement en clinique chez des patients avec des
maladies oculaires comme la reacutetinite pigmentaire le glaucome et la reacutetinopathie diabeacutetique
connus pour reacuteduire la vision nocturne
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004)
Canter et coll (13) ont proceacutedeacute agrave une meacuteta-analyse des eacutetudes faites concernant lrsquoeffet des
anthocyanosides de V myrtillus sur la vision nocturne
Des 30 eacutetudes trouveacutees par les auteurs avec des reacutesultats se reacutefeacuterant agrave la vision dans des
conditions de lumiegravere reacuteduites 12 eacutetudes sont des eacutetudes controcircleacutees par placebo Les 4 eacutetudes
les plus reacutecentes sont des eacutetudes controcircleacutees randomiseacutees et rapportent des reacutesultats neacutegatifs
La 5egraveme
eacutetude controcircleacutee randomiseacutee et les 7 eacutetudes controcircleacutees non randomiseacutees rapportent des
reacutesultats positifs dans lrsquoameacutelioration de la vision en lumiegravere reacuteduite Les reacutesultats neacutegatifs sont
associeacutes avec une plus grande rigueur dans la meacutethodologie mais aussi des doses plus basses
et des extraits provenant de sources geacuteographiques distincts pouvant diffeacuterer dans la
composition en anthocyanosides De plus dans 11 des 12 eacutetudes les sujets utiliseacutes sont des
sujets en bonne santeacute avec une vision moyenne normale voire au-dessus de la normale Ainsi
les eacutetudes cliniques les plus rigoureuses ne supportent pas lrsquohypothegravese drsquoune ameacutelioration de
la vision nocturne chez les sujets en bonne santeacute par les anthocyanosides de V myrtillus
Cependant lrsquoassociation entre rigueur meacutethodologique publication reacutecente reacutesultat neacutegatif
est confondu avec plusieurs facteurs de confusion qui peuvent biaiser les eacutetudes comme la
71
dose les diffeacuterentes variations geacuteographiques modifiant la composition des extraits et le type
de sujets inclus dans les eacutetudes De plus les meacutethodes mises en place pour obtenir et
interpreacuteter les eacutelectroreacutetinogrammes employeacutees dans les eacutetudes plus anciennes diffegraverent des
proceacutedures standardiseacutees utiliseacutees maintenant
Lorsque lrsquoanalyse des facteurs de confusion est faite une association entre les reacutesultats
positifs et lrsquoutilisation de plus hautes doses en anthocyanosides de V myrtillus est mise en
eacutevidence De plus la composition phytochimique des extraits diffegraverent selon la geacuteographie
des plantes de Myrtillier Les reacutesultats positifs sont souvent associeacutes avec des eacutetudes utilisant
des extraits provenant drsquoItalie ou de France La quantiteacute des anthocyanosides de la myrtille
(constituants les plus actifs) varient en fonction du cycle de vie des plantes en reacuteponse agrave des
facteurs de stress et des signaux de lrsquoenvironnement Ainsi avec le mucircrissement la quantiteacute
des anthocyanosides augmente alors que celle des proanthocyanidines diminue Crsquoest
pourquoi agrave cause des diffeacuterences geacuteographiques une standardisation drsquoune quantiteacute en
pourcentage fixe drsquoextrait est une proceacutedure insuffisante pour garantir une composition
identique et une activiteacute pharmacologique Lors des eacutetudes drsquoautres composants peuvent ecirctre
ajouteacutes avec les anthocyanosides de mytille comme le β-carotegravene (un deacuteficit est connu pour
ecirctre lieacute agrave une alteacuteration de la vision nocturne) Lrsquoeffet confondant du β-carotegravene dans
certaines eacutetudes ne peut ecirctre correctement eacutevalueacute sans connaitre le statut nutritionnel des
sujets Dans cette meacuteta-analyse 5 eacutetudes utilisent dans le traitement actif du β-carotegravene Une
eacutetude ne montre pas de diffeacuterences dans lrsquointerpreacutetation de lrsquoeacutelectroreacutetinogramme des sujets
traiteacutes avec lrsquoextrait de V myrtillus avec ou sans β-carotegravene et 3 eacutetudes reacutealiseacutees dans les
anneacutees 1940 montrent que le β-carotegravene nrsquoa pas drsquoeffet sur lrsquoadaptation nocturne quand il est
administreacute seul
En conclusion des eacutetudes rigoureuses sur les effets des extraits de V myrtillus vis-agrave-vis de
sujets souffrant drsquoune alteacuteration de la vision nocturne due agrave des conditions pathologiques
oculaires sont neacutecessaires Cependant la preacutesence drsquoeacutetude plus faibles dans la meacutethodologie
le teacutemoignage des eacutetudes animales les eacutetudes des anthocyanosides syntheacutetiques (la cyanidine
syntheacutetique utiliseacutee dans des eacutetudes controcircleacutees par placebo dans les anneacutees 1970 et 1980 a
montreacute une ameacutelioration de la vision nocturne chez des sujets en bonne santeacute et souffrant
drsquoune varieacuteteacute de deacutesordres ophtalmologiques) une eacutetude controcircleacutee randomiseacutee de Ribes
nigrum montrant un effet positif sur le seuil drsquoadaptation nocturne pourraient justifier des
eacutetudes compleacutementaires sur les anthocyanosides de myrtille chez des sujets preacutesentant une
alteacuteration de la vision nocturne
72
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique
La reacutetinopathie diabeacutetique est une complication agrave long terme du diabegravete qui se traduit par une
deacutegeacuteneacuterescence des capillaires irrigant la reacutetine La maladie se manifeste par des
microaneacutevrysmes qui sont de petites dilatations de la paroi des capillaires (preacutesence de petits
points rouges drsquoheacutemorragies et drsquoapparition drsquoexsudatshellip) Dans des formes eacutevolueacutees une
baisse de la vision peut survenir (1) La neacuteovascularisation est la principale modification
rencontreacutee dans la reacutetinopathie diabeacutetique reacutesultant drsquoune interaction avec des cytokines et
des facteurs de croissance pouvant ecirctre responsables de lrsquoangiogenegravese comme dans le cancer
Or VEGF joue un rocircle dans la neacuteovascularisation reacutetinienne mecircme si son rocircle exact dans la
survenue preacutecoce de la pathologie nrsquoest pas encore entiegraverement compris (16)
En 2005 une eacutetude meneacutee par Chung et coll (16) a deacutemontreacute la capaciteacute de Vaccinium
myrtilus a diminueacute le glucose sanguin plasmatique et agrave reacuteduire le pourcentage de surface de
vascularisation reacutetinien chez des rats diabeacutetiques compliqueacute drsquoune reacutetinopathie diabeacutetique
ces pathologies eacutetant induites par la streptozocine Cependant pas drsquoeffet est constateacute sur le
VEGF (16)
Une eacutetude clinique a deacutemontreacute lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides de V myrtillus (administration
orale de 480 mgjour pendant 180 jours) sur les manifestations de la reacutetinopathie diabeacutetique
notamment la reacuteduction voire la disparition des heacutemorragies reacutetiniennes chez des patients
diabeacutetiques (diabegravete type 2) et souffrant drsquoune reacutetinopathie non prolifeacuterative (43)
Lrsquoameacutelioration significative des examens ophtalmoscopiques et angiographiques apregraves
traitement avec 320 mg de Myrtocyanreg
pendant 30 jours a eacuteteacute montreacutee chez 77 agrave 92 des 40
patients inclus dans lrsquoeacutetude et souffrant de diabegravete et de reacutetinopathie hypertensive (43)
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes
Lrsquoeacutepitheacutelium de la surface oculaire joue le rocircle fondamental de barriegravere empecircchant lrsquoentreacutee de
substances nocives dans la corneacutee et maintenant lrsquointeacutegriteacute de la surface oculaire La
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes permet la reacutegeacuteneacuteration du tissu pour
maintenir le rocircle protecteur de la corneacutee et la cicatrisation Crsquoest pourquoi le cycle cellulaire
est tregraves important Au niveau de ces cellules des glycosaminoglycanes (GAGs glucides de
lrsquoorganisme localiseacutes dans le mucus les seacutecreacutetions digestives et le tissu conjonctif) sulfateacutes
sont produits par les trois types de cellules de la corneacutee (cellules eacutepitheacuteliales endotheacuteliales et
les fibroblastes) Les GAGs de lrsquoeacutepitheacutelium corneacuteen peuvent moduler le comportement
cellulaire comme lrsquoadheacutesion la migrationhellip et jouent donc un rocircle important pour la
73
cicatrisation corneacuteenne Lrsquoun des GAGs est lrsquoacide hyaluronique substance de la matrice
extra-cellulaire jouant plusieurs rocircles notamment dans la lubrification lrsquohydratation de la
matrice corneacuteenne et lrsquohomeacuteostasie Il pourrait aussi ameacuteliorer la santeacute de la surface oculaire
et reacuteduire la pression intraoculaire lors de la pose chirurgicale drsquoun implant oculaire (55)
Song et coll (55) ont reacutecemment eacutetudieacute les effets drsquoun extrait de V myrtillus sur le cycle la
croissance cellulaire lrsquoexpression des GAGs et de lrsquoacide hyaluronique dans un modegravele in
vitro de cellules eacutepitheacuteliales limbales corneacuteennes humaines Les reacutesultats deacutemontrent
lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille et ses anthocyanosides agrave promouvoir la division et la
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteenne sans aucune toxiciteacute cellulaire et agrave
augmenter la quantiteacute totale de GAGs sans modifications significatives de lrsquoacide
hyaluronique Lrsquoextrait de myrtille peut alors ecirctre beacuteneacutefique pour la reacutegeacuteneacuteration
physiologique et lrsquohomeacuteostasie
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete
Helmstaumldter (26) a reacutepertorieacute les substances antidiabeacutetiques utiliseacutees avant la deacutecouverte de
lrsquoinsuline Parmi toutes les plantes V myrtillus est celle la plus freacutequemment retrouveacutee dans
les preacuteparations antidiabeacutetiques commerciales au XXegraveme
siegravecle Les feuilles pourraient ecirctre la
partie de plante la plus utiliseacutee Une preacuteparation tregraves commune eacutetait le laquo Pilulae Myrtilli
Jasper raquo (1912) chacun contenant 012 grammes drsquoextraits de feuilles mais cette preacuteparation
nrsquoeacutetait mentionneacutee qursquooccasionnellement dans les traiteacutes scientifiques et seulement quelques
recherches ont eacuteteacute retrouveacutees
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine
Petlevski et coll (48) ont eacutetudieacute les effets drsquoune preacuteparation agrave base de plantes antidiabeacutetiques
comprenant la feuille de V myrtillus et drsquoautres plantes breveteacutee sous le numeacutero No P-
9801091 disponible sur le marcheacute Croate Deux extraits un extrait eacutethanolique (extrait 1) et
non eacutethanolique (extrait 2) sont administreacutes agrave des souris (NOD) non obegraveses rendues
diabeacutetiques par lrsquoalloxane (deacuteriveacute pyrimidique produisant chez lrsquoanimal une neacutecrose des
cellules β des icirclots de Langerhans)
Lrsquoeacutetude deacutemontre que les extraits 1 et 2 diminuent le glucose sanguin de 10 et 20
respectivement de la valeur initiale des souris NOD controcircles (sans traitement) Lrsquoeffet de
lrsquoextrait 2 est donc beaucoup plus marqueacute il est compareacute agrave un antidiabeacutetique de reacutefeacuterence
(acarbose) Les reacutesultats montrent que lrsquoextrait diminue significativement le niveau de glucose
74
sanguin alors que la diminution par lrsquoacarbose nrsquoest pas significative La mecircme chose est
observeacutee pour le niveau de fructosamine dans le sang
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques
Le diabegravete est une maladie souvent associeacutee agrave des deacutesordres meacutetaboliques comme une
hypertriglyceacuterideacutemie Lrsquoinsuline joue un rocircle essentiel dans le meacutetabolisme des lipoproteacuteines
Chez la plupart des patients atteints de diabegravete type 1 (insulino-deacutependant)
lrsquohypertriglyceacuterideacutemie est induit par une moindre activiteacute de la lipase lipoproteacuteique (enzyme
permettant lrsquohydrolyse des triglyceacuterides des lipoproteacuteines plasmatiques) deacutependante de
lrsquoinsuline
Une eacutetude meneacutee en 1996 par Cignarella et coll (17) a montreacute que lrsquoadministration orale
(pendant 4 jours) drsquoun extrait hydro-alcoolique seacutecheacute de feuilles de V myrtillus agrave des rats
rendus diabeacutetiques par streptozocine pouvait diminuer le niveau de glucose plasmatique par
environ 26 et le niveau de triglyceacuterides plasmatiques par 39 Ainsi lrsquoextrait de myrtille
expose une activiteacute hypolipideacutemiante dose-deacutependante chez les rats en stimulant le
catabolisme des lipoproteacuteines riches en triglyceacuterides probablement sous des conditions en
deacuteficits drsquoinsuline Par contre agrave lrsquoopposeacute du ciprofibrate (une moleacutecule de reacutefeacuterence dans le
traitement de lrsquohypertriglyceacuterideacutemie) lrsquoextrait de V myrtillus ne preacutevient pas la formation de
thrombus veineux chez ces rats diabeacutetiques
Ces eacutetudes in vivo ont montreacute lrsquoaction hypoglyceacutemiante de V myrtillus une fois les
constituants isoleacutes cette plante agrave usage traditionnel pourrait eacutegalement attirer lrsquoattention sur le
traitement de certains deacutesordres du meacutetabolisme lipidique
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique
Borrelli et coll (10) ont listeacute les agents phytogeacuteniques utiliseacutes comme remegravedes des ulcegraveres
gastriques Des reacutesultats ont deacutemontreacute lrsquoaction significative de V myrtillus dans la preacutevention
et le traitement des ulcegraveres Certaines eacutetudes ont montreacute ses effets protecteurs dans des ulcegraveres
induits par ligature du pylore par la reacuteserpine ou la pheacutenylbutazone ougrave le traitement avec les
anthocyanosides de V myrtillus a eacuteteacute donneacute avant ou pendant la formation de lrsquoulcegravere La
myrtille exerce un effet anti-ulcegravere en partie par une augmentation du mucus dans la paroi de
lrsquoestomac (ameacuteliorant lrsquoefficaciteacute de la barriegravere formeacutee par ce mucus) et peut influencer la
biosynthegravese des mucopolysaccharides
75
Magistretti et coll (37) montrent qursquoun extrait drsquoanthocyanosides de Vaccinium myrtillus
possegravede une action anti-ulcegravere inteacuteressante dans divers modegraveles expeacuterimentaux De ces
reacutesultats les auteurs ont voulu trouver les composants de Vaccinium myrtillus responsables de
cette action Or cette plante comme nous le savons est riche en anthocyanosides et
anthocyanidines (aglycones respectifs) Cela explique pourquoi les auteurs ont eacutetudieacute les
effets sur lrsquoulcegravere aigu et chronique chez des rats drsquoune anthocyanidine la cyanidine ou 3 5
7-trihydroxy-2-(34-dihydroxypheacutenyl)-1-benzopyrylium chloride (IdB 1027) Les reacutesultats
montrent les effets drsquoIdB 1027 suivants
- reacuteduction de lrsquoulcegravere gastrique induit par la ligature du pylore de faccedilon non dose-
deacutependante
- inhibition de lrsquoulcegravere de stress
- protection de lrsquoestomac de lrsquoulcegravere induit par pheacutenylbutazone
- reacuteduction de la seacuteveacuteriteacute de lrsquoulcegravere induit par indomeacutetacine de faccedilon dose-
deacutependante
- inhibe significativement lrsquoulceacuteration gastrique induit par reacuteserpine
- protection significative mais pas dose-deacutependante contre les leacutesions induites par
lrsquoeacutethanol
- inhibe significativement et de faccedilon dose-deacutependante lrsquoulcegravere induit par histamine
- et reacuteduction significative les leacutesions induites par acide aceacutetique
En conclusion lrsquoIdB 1027 est capable de reacuteduire ou mecircme drsquoinhiber les ulcegraveres induits par de
nombreux facteurs comme la ligature du pylore les AINS Les meacutecanismes par lesquels un
meacutedicament augmente les deacutefenses de la muqueuse gastrique sont varieacutes cela peut ecirctre une
influence sur la seacutecreacutetion et les proprieacuteteacutes physicochimiques du mucus ou une stimulation de
la reacutegeacuteneacuteration cellulaire une influence sur la microcirculation de la muqueuse la seacutecreacutetion
de bicarbonate la protection contre les dommages induits par les radicaux libres ou
lrsquoaugmentation de lrsquoAMP cyclique Ainsi lrsquoIdB 1027 peut agir par une combinaison de
certains de ces meacutecanismes comme une augmentation de la seacutecreacutetion de mucus (sans effet
anti-seacutecreacutetoire gastrique) dans des conditions physiologiques normales et dans des conditions
de deacutefense alteacutereacutees la stimulation de la reacutegeacuteneacuteration cellulaire montreacutee par son activiteacute contre
lrsquoulcegravere induit par acide aceacutetique lrsquoameacutelioration de la microcirculation de la muqueuse
montreacutee par son activiteacute contre lrsquoulcegravere geacuteneacutereacute par lrsquohistamine De plus lrsquoIdB 1027 est un
antioxydant et les anthocyanidines sont des inhibiteurs efficaces de lrsquoAMPc-
phosphodiesteacuterase dans des tissus varieacutes ce qui pourrait contribuer agrave lrsquoactiviteacute
pharmacologique observeacute
76
En conclusion les effets deacutemontreacutes dans les modegraveles drsquoanimaux lrsquoabsence de toxiciteacute et
lrsquoexcellente toleacuterance font de cette moleacutecule un bon candidat dans des eacutetudes cliniques
comme agent antiulcegravereux
2 Action sur Helicobacter pylori
Le traitement contre Helicobacter pylori est la plupart du temps constitueacute de deux
antibiotiques et drsquoun inhibiteur de la pompe agrave protons comme lrsquoomeacuteprazole par exemple Or
le problegraveme qui se pose est lrsquoapparition drsquoune reacutesistance aux antibiotiques De plus la bacteacuterie
peut intervenir dans la production des radicaux libres de lrsquooxygegravene augmentant davantage le
stress oxydant et ses dommages au niveau gastrique Une augmentation de la peroxydation
lipidique et un dommage agrave lrsquoADN au niveau des tissus gastriques sont alors observeacutes Par
conseacutequent des antioxydants naturels comme les anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
pourraient servir comme outil theacuterapeutique pour reacuteduire le stress oxydant induit par
Helicobacter pylori (15)
Chatterjee et coll (15) ont eacutetudieacute les effets de diffeacuterents extraits de baies sur Helicobacter
pylori avec ou sans clarithromycine in vitro ainsi que la sensibiliteacute de la bacteacuterie agrave la
clarithromycine Plusieurs baies sont eacutetudieacutees comme la myrtille sauvage (Vaccinium
myrtillus) lrsquoairelle la canneberge la fraise la framboise le sureau et Optiberryreg (un
meacutelange de ces six baies) Cette eacutetude a montreacute que tous les extraits aux concentrations
testeacutees inhibent la croissance de maniegravere dose-deacutependante de H pylori avec une efficaciteacute
supeacuterieure pour Optiberryreg Crsquoest la premiegravere eacutetude montrant lrsquoinhibition de H pylori par des
extraits de baies et notamment V myrtillus lequel preacutesente une meilleure activiteacute que la
fraise la framboise et la canneberge en particulier pour des basses concentrations Enfin un
effet inhibiteur suppleacutementaire est obtenu avec lrsquoajout de la clarithromycine associeacutee aux
extraits de baies agrave toutes les concentrations testeacutees
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus
1 Action antibacteacuterienne
Une eacutetude meneacutee en 2005 par Puupponen-Pimiauml et coll (51) a montreacute lrsquoactiviteacute
antibacteacuterienne de plusieurs baies nordiques incluant V myrtillus Les reacutesultats rapporteacutes
dans cette thegravese ne se reacutefegraverent qursquoagrave la myrtille et sont reacutesumeacutes dans le tableau suivant
77
Listeria
monocytogenes
E-991205
Salmonella
enterica sv
thyphimurium
E-981151
Staphylococcus
aureus E-70045
Lactobacillus
rhamnosus
E-96666
Temps
drsquoincubation 12h 24h 12h 24h 12h 24h 12h 24h
2 mgmL-1
- - + - ++ ++ - -
10 mgmL-1
- - +++ + +++++ +++++ - -
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
(Leacutegende C concentration de la baie de myrtille - pas drsquoeffets inhibiteurs + nombre de
bacteacuteries viables diffegraverent de 10-5 times 101 par rapport au controcircle ++ nombre de bacteacuteries viables
diffegraverent de 5 times 101-5 times 102 par rapport au controcircle +++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 102-5 times 103 par rapport au controcircle ++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 103-5 times 104
par rapport au controcircle +++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de plus 5 times 104 par rapport au
controcircle)
Les reacutesultats deacutemontrent lrsquoactiviteacute antimicrobienne de la myrtille lyophiliseacutee sur les bacteacuteries
Salmonella et Staphylococcus augmente de maniegravere concentration-deacutependante Par contre la
myrtille nrsquoa aucune activiteacute vis-agrave-vis de Listeria et Lactobacillus
Les composeacutes pheacutenoliques ne sont responsables que partiellement de lrsquoinhibition de la
croissance des bacteacuteries Salmonella les effets antimicrobiens eacutetant probablement deacutetenus par
drsquoautres composeacutes comme les acides organiques
Les baies et notamment V myrtillus pourraient ecirctre utiliseacutees dans les aliments fonctionnels et
dans lrsquoindustrie pharmaceutique en tant qursquoagents antimicrobiens
Ainsi la myrtille utiliseacutee traditionnellement est preacutesente dans de nombreuses eacutetudes qui ont
deacutemontreacute ses multiples actions dans des domaines meacutedicaux varieacutes et des pathologies diverses
comme lrsquoinsuffisance veineuse lrsquoatheacuteroscleacuterose le cancer le diabegravete les deacutesordres
oculaireshellip Par ailleurs son action antioxydante attire lrsquoattention des scientifiques et il serait
favorable drsquoentreprendre des eacutetudes cliniques
VIII Toxicologie
1 Effets indeacutesirables
Dans les eacutetudes cliniques sur les extraits de V myrtillus reacutepertorieacutees par Marazzoni et coll en
1996 (43) aucun effet indeacutesirable nrsquoa eacuteteacute observeacute mecircme lors drsquoeacutetudes ougrave le traitement aux
78
extraits de V myrtillus est pris sur une longue peacuteriode Cependant la plupart des eacutetudes
nrsquoincluaient qursquoun petit nombre de patients Une eacutetude de surveillance post-marketing a inclus
2295 sujets prenant 160 mg de Myrtocyanreg
deux fois par jour pendant 1-2 mois pour des
pathologies diverses (insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs fragiliteacute capillaire
modifications de la microcirculation reacutetinienne ou heacutemorroiumldes) Cette eacutetude a montreacute que
seuls 94 sujets ont reporteacute des effets indeacutesirables surtout lieacutes agrave la peau au tractus gastro-
intestinal et au systegraveme nerveux Une eacutetude non-controcircleacutee incluant des femmes enceintes avec
insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs et en crise heacutemorroiumldaire montre qursquoune
administration drsquoun extrait de myrtille (80 ou 160 mg) deux ou trois par jour pendant trois
mois nrsquoentraicircnait pas drsquoeffets indeacutesirables Mais en preacutesence de peu drsquoeacutetudes toxicologiques et
drsquoune seacutecuriteacute de la myrtille non eacutetablie lrsquoutilisation de la myrtille chez la femme enceinte et
allaitante devrait ecirctre proscrite
2 Doses leacutetales 50 (DL50)
Les donneacutees toxicologiques indiquent une DL50 pour le Myrtocyanreg drsquoenviron 2 gkg chez
les souris et les rats Chez le chien des doses uniques de 3 gkg nrsquoentraicircnent pas drsquoeffets
indeacutesirables si ce nrsquoest une coloration plus fonceacutee des urines et fegraveces Une administration
orale quotidienne drsquoextrait de V myrtillus agrave des doses de 125 agrave 500 mgkg et 80 agrave 320 mgk
respectivement agrave des rats et des chiens pendant 6 mois nrsquoentrainent ni mortaliteacute ni toxiciteacute
Les eacutetudes pharmacocineacutetiques reacutealiseacutees chez des rats ont deacutemontreacute une eacutelimination rapide
des anthocyanosides de myrtille dans les deux heures suivant une administration orale (5) Il
est eacutetablit dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) que si les parties de
mytille utiliseacutees pour les phytomeacutedicaments est une poudre de fruit frais ou sec ou de feuille
le dossier laquo abreacutegeacute raquo de lrsquoAMM doit preacutesenter une eacutetude toxicologique alleacutegeacutee celle-ci
nrsquoeacutetant pas indispensable pour certaines formes galeacuteniques agrave base de myrtille (tisane extrait
aqueux teinture extrait hydro-alcoolique) La monographie de la Commission E allemande
preacutecise que si la baie de myrtille est atoxique la feuille quant agrave elle peut induire des
intoxications chroniques en cas de doses eacuteleveacutees ou drsquousage prolongeacute Les premiers
symptocircmes chez lrsquoanimal se traduisent par une aneacutemie une cachexie un ictegravere un eacutetat
drsquoexcitation aiguumle et des perturbations du tonus pouvant agrave terme ecirctre fatale apregraves une
administration chronique de 15 gkgjour Ces symptocircmes ressembleraient agrave ceux preacutesents
dans lrsquointoxication par lrsquohydroquinone ce dipheacutenol nrsquoest pourtant pas preacutesent dans la feuille
de myrtille La Commission E par prudence ne justifie pas lrsquoutilisation de la feuille dans un
but theacuterapeutique face agrave ces risques La Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament quant agrave
79
elle ne demande un essai toxicologique que pour la poudre de feuille mais pas pour les
extraits (quelque soit le titre) (11) De ce fait drsquoautres eacutetudes toxicologiques seraient
neacutecessaires
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus
Mecircme si aucune contre-indication nrsquoest mentionneacutee dans la litteacuterature il convient toutefois de
consideacuterer un risque potentiel drsquointeraction entre les preacuteparations agrave base de myrtille et drsquoautres
produits meacutedicinaux ayant des effets similaires ou opposeacutes agrave ceux de la myrtille Des eacutetudes
preacutecliniques par exemple ont montreacute que les extraits de V myrtillus avaient un effet anti-
agreacutegant et pouvaient augmenter le temps de saignement (5) Une surveillance devrait ecirctre
apporteacutee lors drsquoassociation entre les speacutecialiteacutes agrave base de myrtille et les meacutedicaments
antiagreacutegants ou anticoagulants mecircme si aucune interaction nrsquoa eacuteteacute rapporteacutee Enfin comme
nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment lrsquoutilisation de speacutecialiteacutes agrave base de myrtille est deacuteconseilleacutee
chez la femme enceinte ou allaitante (5)
80
QUATRIEME PARTIE
UTILISATIONS DE VACCINIUM
MYRTILLUS L
81
I Utilisations alimentaires de Vaccinium myrtillus
La myrtille est avant tout un fruit tregraves appreacutecieacute par les consommateurs pour ses proprieacuteteacutes
gustatives et sa valeur nutritive
1 Utilisations culinaires
Les promeneurs friands des baies de myrtille les consomment sur place ou chez eux Il est
important de laver les baies avant leur consommation car lrsquohomme risque drsquoecirctre toucheacute par
lrsquoeacutechinococcose multiloculaire Cette maladie parasitaire est une cestodose qui seacutevit dans
lrsquoheacutemisphegravere Nord le Massif central lrsquoEst de la France et la Suisse Le renard et autres
canideacutes (chiens) se contaminent eux-mecircmes en mangeant des rongeurs sauvages parasiteacutes
(campagnoleshellip) ils deacuteposent alors des selles contenant des œufs de teacutenia sur le sol
lrsquohomme srsquoinfeste en mangeant les myrtilles proches du sol La maladie se caracteacuterise par le
deacuteveloppement de la larve de teacutenia dans le foie y formant de nombreux alveacuteoles Les
symptocircmes principaux sont douleur sourde amaigrissement et ictegravere (1)
Utiliseacutees en cuisine les myrtilles font lrsquoobjet de nombreuses recettes culinaires Elles sont
utiliseacutees pour accommoder les viandes leur apportant une saveur aciduleacutee Des charcutiers les
ajoutent mecircme agrave leurs saucissons pour les rendre plus moelleux
Les myrtilles sont souvent retrouveacutees dans de nombreuses pacirctisseries (sableacutes citronneacutes cakes
brioches tartes tartelettes puddings vacherins souffleacutes et glaceacutes coulis de fruits rouges
sorbets glaceshellip)
Les baies peuvent aussi ecirctre utiliseacutees pour la preacuteparation de confiture geleacutee et compote
Certains agriculteurs-reacutecolteurs vendent les myrtilles en confiture sur les marcheacutes locaux
Enfin on retrouve des boissons agrave base de myrtilles (jus de fruit nectar sirop liqueur vin et
vinaigre) (22)
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire
Les proprieacuteteacutes tinctoriales des anthocyanes de myrtille sont utiliseacutees dans lrsquoindustrie
alimentaire comme colorant sous la codification E 163 Gracircce agrave leur tregraves faible toxiciteacute il nrsquoy
aucune quantiteacute maximale speacutecifieacutee (quantum satis) ni dose journaliegravere acceptable Malgreacute
leurs proprieacuteteacutes tinctoriales les anthocyanes sont peu utiliseacutees dans lrsquoindustrie alimentaire agrave
cause de leur instabiliteacute (perte ou changement de couleur) en preacutesence de certains facteurs
physico-chimiques de lrsquoenvironnement comme le pH la tempeacuterature et la lumiegravere De plus
82
drsquoautres problegravemes srsquoajoutent agrave leur utilisation comme leur reacuteaction avec le dioxyde de soufre
(substance utiliseacutee pour la conservation drsquoaliments) leur faible solubiliteacute dans lrsquoeau et leur
preacutecipitation formant des complexes avec les proteacuteines Crsquoest pourquoi des proceacutedeacutes ont eacuteteacute
rechercheacutes pour augmenter leur stabiliteacute comme lrsquoutilisation drsquohydrocolloiumldes comme
lrsquoalginate de sodium et un surfactant ionique comme le laurylsulfate de sodium (3)
II Utilisations pharmaceutiques
Pour rappel la liste des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition
comporte deux parties (2)
La LISTE A laquo Plantes meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement raquo et la LISTE B laquo Plantes
meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement en lrsquoeacutetat ou sous forme de preacuteparation dont les effets
indeacutesirables potentiels sont supeacuterieurs au beacuteneacutefice theacuterapeutique attendu raquo
La myrtille appartient agrave la liste A des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition mais nrsquoy fait lrsquoobjet drsquoaucune monographie Agrave la Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition le fruit frais et sec de myrtille font lrsquoobjet drsquoune monographie (Annexe II et III
respectivement) En France certaines indications theacuterapeutiques selon la partie de plante
utiliseacutee sont revendiqueacutees dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) Ainsi
on retrouve les indications suivantes
- pour le fruit (frais ou sec) et la feuille par voie orale ou en usage locale
traditionnellement utiliseacute dans les manifestations subjectives de lrsquoinsuffisance veineuse telles
que jambes lourdes et dans la symptomatologie heacutemorroiumldaire
Il y a drsquoautres indications theacuterapeutiques possibles comme
- pour le fruit (frais ou sec) par voie orale traditionnellement utiliseacute comme
traitement adjuvant de la composante douloureuse des troubles fonctionnels digestifs
- pour le fruit frais (voie orale ou usage local) traitement symptomatique des
troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire tels que ecchymoses peacuteteacutechies
- pour la feuille et le fruit sec (voie orale) traitement symptomatique des diarrheacutees
leacutegegraveres
La Commission E allemande preacutecise dans la monographie (1987) que le fruit de myrtille est
eacutegalement utiliseacute pour le traitement des diarrheacutees aigueumls et pour lrsquoinflammation locale
modeacutereacutee des muqueuses de la caviteacute buccale Le fruit seacutecheacute est utiliseacute agrave la dose de 20 agrave 60 g
par jour en deacutecoction par voie orale pour le traitement de la diarrheacutee chez lrsquoadulte
83
Ainsi les extraits riches en anthocyanosides des fruits de la myrtille peuvent entrer dans la
composition de meacutedicaments utiliseacutes pour traiter les manifestations fonctionnelles de
lrsquoinsuffisance veinolymphatique la symptomatologie des troubles fonctionnels de la fragiliteacute
capillaire et les troubles de la vision meacutesopique et scotopique (11)
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille
11 Meacutedicaments allopathiques (82)
Laboratoire LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRARELreg 100 (comprimeacute enrobeacute bleu clair conditionnement de 20 comprimeacutes)
Meacutedicament vasculoprotecteur drsquoautorisation de mise sur le marcheacute (AMM) ndeg
3400930311714 (1987 reacuteviseacute le 24082005) Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Crsquoest une speacutecialiteacute pharmaceutique associant 100 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de V
myrtillus et 5 mg de β-carotegravene avec comme indications
laquo - Traitement dappoint des manifestations fonctionnelles de linsuffisance veinolymphatique
(jambes lourdes douleurs impatiences du primodecubitus)
- Traitement symptomatique dappoint des troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire
- Traitement dappoint des baisses dacuiteacute et troubles du champ visuel preacutesumeacutes dorigine
vasculaire raquo
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
DIFRARELreg E (comprimeacute enrobeacute blanc)
Meacutedicament ophtalmique agrave viseacute vasculoprotectrice drsquoAMM ndeg3400930311592 (196597
reacuteviseacute le 28022006) pour le conditionnement de 26 comprimeacutes et ndeg3400937701068 (2006)
pour le conditionnement de 60 comprimeacutes Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Cette speacutecialiteacute pharmaceutique associe 50 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de myrtille et
50 mg drsquoα-tocopheacuterol avec comme indication les troubles de la vision meacutesopique scotopique
(heacutemeacuteralopie) et la myopie
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
84
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques
LABORATOIRE BOIRON
Ce laboratoire homeacuteopathique commercialise la teinture megravere de V myrtillus et des dilutions
homeacuteopathiques
Agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise la myrtille a une monographie speacutecifique intituleacutee laquo Vaccinium
myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Annexe IV)
LABORATOIRE LEHNING
DIACUREreg (conditionnement de 60 geacutelules) drsquoAMM ndeg 3232544
Meacutedicament homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale Il est
constitueacute de lrsquoassociation suivante
- Taraxacum pulveacuteriseacute (H) (Pissenlit) 40 mg
- Berberis vulgaris (H) D3 (Epine-vinette) 40 mg
- Juglans regia pulveacuteriseacute (H) (Noyer) 120 mg
- Achillea millefolium (H) D2 (Achilleacutee millefeuille) 40 mg
- Vaccinium myrtillus folium pulveacuteriseacute (H) (feuille de myrtille) 80 mg
- Erythrea centaurium pulveacuteriseacute (H) (Petite centaureacutee) 40 mg
- Natrum phosphoricum (H) D3 40 mg
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute pour les polysurcharges
meacutetaboliques (facilite lrsquoeacutelimination des deacutechets meacutetaboliques) et notamment comme
traitement divers du diabegravete la feuille de myrtille y est utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes
hypoglyceacutemiantes
La posologie est de 1 agrave 2 geacutelules 3 fois par jour en dehors des repas en cure de 1 agrave 2 mois
(82)
DIABENEreg (solution buvable flacon de 30 mL) drsquoAMM ndeg 3030349 est un meacutedicament
homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale
Il est constitueacute de lrsquoassociation suivante Alchemilla vulgaris D3 Kreosotum D4
Strychninum nitricum D4 Arsenicum album D4 Adrenalinum D6 Belladonna D4 Syzygium
jambolanum D2 Vaccinium myrtillus D2 Taraxacum D3 Natrum phosphoricum D3
Helonias dioica D2
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute dans les polysurcharges
meacutetaboliques comme traitement divers de lrsquoobeacutesiteacute
85
La posologie est de 30 gouttes 3 fois par jour de preacutefeacuterence en dehors des repas (82)
13 Compleacutements alimentaires
LABORATOIRE MERCK
BION 3 SENIORreg (conditionnement de 30 ou 60 comprimeacutes)
Compleacutement alimentaire constitueacute de 3 probiotiques 12 vitamines 8 oligo-eacuteleacutements et 3
extraits veacutegeacutetaux (100 microg de luteacuteine extraits de 20 mg de ginseng et 1 mg de myrtille) Il est
preacuteconiseacute en cas de sphegravere ORL fragiliseacutee de deacutefenses naturelles affaiblies et pour mieux
faire face aux rythmes de vie actuels alimentation deacuteseacutequilibreacutee stress surmenage La
posologie est de 1 comprimeacute par jour en cure de 30 ou 60 jours (82)
RICHELETreg ANTI-AGE VISION (conditionnement de 30 comprimeacutes)
Crsquoest un compleacutement alimentaire composeacute de luteacuteine 105 mg drsquoextrait de myrtille des
vitamines B1 B2 et B6 A C E et du seacuteleacutenium La myrtille est utiliseacutee dans ce produit pour
ameacuteliorer la microcirculation sanguine de lrsquoœil et assurer le bon fonctionnement de ses
constituants La posologie est de 1 comprimeacute par jour pendant 3 mois agrave renouveler
peacuteriodiquement (82)
LABORATOIRE LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRAVISIONreg ANTI-VIEILLISSEMENT
Compleacutement alimentaire agrave viseacutee oculaire comprenant des vitamines (vitamine C et E) des
oligo-eacuteleacutements (Zn et Se) des pigments maculaires (luteacuteine extrait de maiumls dont
zeacuteaxanthine) du DHA (ω3) des huiles de poisson et un extrait sec de myrtille doseacute agrave 100 mg
(pour 2 geacutelules) Sur la notice du meacutedicament on trouve les indictions suivantes laquo il est
conseilleacute pour corriger les effets neacutefastes au niveau oculaire des deacuteficits antioxydants en
acides gras essentiels et en pigments maculaires raquo La posologie est de 1 geacutelule 2 fois par jour
(notice du compleacutement alimentaire)
LABORATOIRE ARKOPHARMA
Ce laboratoire pharmaceutique fabrique des geacutelules contenant de la poudre totale microniseacutee
Aujourdrsquohui seule la baie de myrtille est commercialiseacutee par le laboratoire Arkopharma
86
Les Arkogeacutelules de myrtille (baie) sont indiqueacutees dans la diarrheacutee la colite et lrsquoameacutelioration
de la vision nocturne (Brochure Arkopharma)
La myrtille est preacutesente dans beaucoup drsquoautres compleacutements alimentaires que nous ne
citerons pas ici
89
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98
LISTE DES ANNEXES
ANNEXE I Table de composition nutritionnelle Ciqual 2008 de lrsquoAffsa
ANNEXE II Monographie du fruit frais de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE III Monographie du fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE IV laquo Vaccinium myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Pharmacopeacutee
franccedilaise Xegraveme eacutedition)
99
ANNEXE I
TABLE DE COMPOSITION
NUTRITIONNELLE CIQUAL 2008 DE
LrsquoAFSSA
100
Myrtille fraicircche (teneurs pour 100 grammes drsquoaliment comestible)
Leacutegende du code confiance
Echelle de fiabiliteacute de A agrave D A correspondant aux donneacutees les plus fiables
Nom des constituants Uniteacute Teneur
moyenne Min Max Nb eacutechantillons
Source des
donneacutees
Code
confiance
Energie kJ 213 - - - C
Energie kcal 50 - - - C
Energie eacutetiquetage kJ 213 - - - C
Energie eacutetiquetage kcal 50 - - - C
Eau g 838 834 8421 2 760
743 C
Proteacuteines g 074 - - - C
Proteacuteines brutes (N x 625) g 074 - - 1 743 C
Glucides g 10 - - - C
Sucres g 996 - - 1 743 C
Amidon g 003 - - 1 743 C
Polyols totaux g 0 - - - D
Fibres alimentaires g 24 - - 1 743 C
Lipides g 033 - - 1 743 C
AG satureacutes g 0028 - - 1 743 C
AG monoinsatureacutes g 0047 - - 1 743 C
AG polyinsatureacutes g 0146 - - 1 743 C
Cholesteacuterol mg 0 - - 1 690 C
Alcool (eacutethanol) g 0 - - 1 690 C
Acides organiques g 137 - - - 723 C
Sodium mg 1 - - 1 743 C
Magneacutesium mg 6 - - 1 743 C
Phosphore mg 12 - - 1 743 C
Potassium mg 77 - - 1 743 C
Calcium mg 6 - - 1 743 C
Manganegravese mg 0336 - - 1 743 C
Fer total mg 028 - - 1 743 C
Cuivre mg 0057 - - 1 743 C
Zinc mg 016 - - 1 743 C
Seacuteleacutenium microg 01 - - 1 743 C
Iode microg 05 - - 1 573 D
Reacutetinol microg 0 - - 1 743 C
Becircta-carotegravene microg 32 - - 1 743 C
Vitamine D microg 0 - - 1 445 C
Activiteacute vitaminique E (en
eacutequivalents alpha-tocopheacuterol) mg 1 - - 1 497 C
Vitamine C mg 97 - - 1 743 C
Vitamine B1 ou Thiamine mg 0037 - - 1 743 C
Vitamine B2 ou Riboflavine mg 0041 - - 1 743 C
Vitamine B3 ou PP ou
Niacine mg 0418 - - 1 743 C
Vitamine B5 ou Acide
pantotheacutenique mg 0124 - - 1 743 C
Vitamine B6 ou Pyridoxine mg 0052 - - 1 743 C
Vitamine B9 ou Folates
totaux microg 6 - - 1 743 C
Vitamine B12 ou
Cobalamines microg 0 - - 1 743 C
101
ANNEXE II
MONOGRAPHIE DU FRUIT FRAIS
DE VACCINIUM MYRTILLUS L
(Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
102
Myrtille (fruit frais de)
Myrtilli fructus recens
DEacuteFINITION
Fruit mucircr frais ou congeleacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 030 pour cent drsquoanthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-
O-glucoside (chrysantheacutemine C21H21ClO11 Mr 4848) (drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur sucreacutee un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit frais de myrtille est une baie bleu-noir globuleuse drsquoenviron 5 mm de diamegravetre Il
comporte agrave la base une cicatrice ou rarement un fragment de peacutedoncule Le sommet aplati
est surmonteacute par les restes du style persistant et du calice qui forme un repli circulaire Dans
le meacutesocarpe violaceacute et juteux 4 agrave 5 loges renferment de nombreuses petites graines ovoiumldes
brunes
B Le fruit frais de myrtille broyeacute est rouge violaceacute Examinez-le au microscope en utilisant
de la solution drsquohydrate de chloral R Il preacutesente des cellules scleacutereuses rose violaceacute agrave paroi
eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en amas provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des
fragments drsquoeacutepicarpe brun-rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie
des fragments jaune-brun du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave
paroi preacutesentant des eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles de cristaux
drsquooxalate de calcium
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 5 g de drogue reacutecemment broyeacutee ajoutez 20 ml de meacutethanol R
Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
103
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge violaceacute
Chrysantheacutemine une bande rouge violaceacute Une bande principale rouge violaceacute
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge violaceacute
mdash plusieurs bandes bleu violaceacute
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Cendres totales (2416) maximum 06 pour cent
Perte agrave la dessiccation (2232) 800 pour cent agrave 900 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave 105 degC
sur 5000 g de drogue reacutecemment broyeacutee
DOSAGE
Broyez extemporaneacutement 50 g de drogue A environ 500 g de drogue broyeacutee exactement
peseacutes ajoutez 95 ml de meacutethanol R Agitez meacutecaniquement pendant 30 min Filtrez dans une
fiole jaugeacutee de 1000 ml lavez le filtre et compleacutetez au volume avec du meacutethanol R Diluez
cette solution au 150 dans une solution drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le
meacutethanol R
Mesurez lrsquoabsorbance (2225) de la solution obtenue agrave 528 nm en prenant une solution
drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le meacutethanol R comme liquide de
compensation
Calculez la teneur pour cent en anthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-O-
glucoside agrave lrsquoaide de lrsquoexpression suivante
718 = absorbance speacutecifique du chlorure de cyanidine 3-O-glucoside agrave 528 nm
A = absorbance agrave 528 nm
M = Masse de la prise drsquoessai en grammes
CONSERVATION
Lorsque le fruit frais de myrtille est congeleacute conservez-le agrave une tempeacuterature infeacuterieure ou
eacutegale agrave minus 18degC
104
ANNEXE III
MONOGRAPHIE DU FRUIT MUcircR
SECHE DE VACCINIUM MYRTILLUS
L
(Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
105
Fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 10 pour cent de tanins exprimeacutes en pyrogallol (C6H6O3 Mr 1261)
(drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur douce un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit sec de myrtille est une baie bleu-noir ratatineacutee subglobuleuse de 5 mm environ de
diamegravetre avec une cicatrice agrave la base Le sommet est surmonteacute par les restes du style et le
calice persistant qui forme un repli circulaire Le meacutesocarpe violet intense et charnu renferme
de nombreuses petites graines ovoiumldes brunes
B Reacuteduisez le fruit sec de myrtille en poudre (355) (2912) La poudre est brun-violet
Examinez au microscope en utilisant de la solution drsquohydrate de chloral R La poudre
preacutesente des cellules scleacutereuses rose-violet agrave paroi eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en
amas et provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des fragments drsquoeacutepicarpe coloreacutes en brun-
rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie des fragments jaune-brun
du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave paroi preacutesentant des
eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles et des prismes de cristaux drsquooxalate de
calcium de diffeacuterente taille
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 2 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912) ajoutez 20 ml de
meacutethanol R Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
106
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge-violet de faible intensiteacute
Chrysantheacutemine une bande rouge- violet Une bande principale rouge-violet
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge-violet
mdash plusieurs bandes bleu-violet
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Perte agrave la dessiccation (2232) au maximum 120 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave
105 degC pendant 2 h sur 1000 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute
Cendres totales (2416) au maximum 50 pour cent
DOSAGE
Effectuez la deacutetermination des tanins dans les drogues veacutegeacutetales (2814) Utilisez 1500 g de
fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912)
107
ANNEXE IV
laquo VACCINIUM MYRTILLUS
POUR
PREPARATIONS
HOMEOPATHIQUES raquo
(Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition)
108
109
110
111
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
REacuteSUMEacute
Vaccinium myrtillus Linneacute ou myrtille sauvage est un sous-arbrisseau de la famille des
Ericaceacutees On la retrouve dans le nord et le centre de lrsquoEurope en Asie et en Ameacuterique
Boreacuteale En France la myrtille est commune dans la plupart des montagnes entre 400 et 2500
megravetres drsquoaltitude Elle est diffeacuterente de la myrtille cultiveacutee ou Vaccinium corymbosum L Son
fruit est une baie bleu-noir globuleuse agrave saveur sucreacutee et aciduleacutee V myrtillus L renferme de
nombreux composeacutes pheacutenoliques dont les anthocyanosides ceux-ci sont principalement
retrouveacutes dans la peau et la pulpe du fruit de la myrtille ils sont agrave lrsquoorigine de la plupart de
ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques mecircme si drsquoautres composeacutes participeraient agrave lrsquoaction beacuteneacutefique
de la myrtille
V myrtillus L est une plante meacutedicinale inscrite sur la liste A de la Pharmacopeacutee franccedilaise
Xegraveme
eacutedition Le fruit (frais et sec) de la myrtille fait lrsquoobjet drsquoune monographie dans la
Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition Les proprieacuteteacutes theacuterapeutiques des feuilles et des fruits
de V myrtillus L ont eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine populaire les fleurs pour leurs
proprieacuteteacutes toniques astringentes antiseptiques dans le traitement de la diarrheacutee de la
dysenterie quant agrave la feuille elle eacutetait surtout utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
Certaines indications sont valideacutees et figurent dans la Note explicative de lrsquoAgence du
meacutedicament de 1998 et la Commission E allemande Si la baie est atoxique la feuille
preacutesenterait un risque drsquointoxication lieacute agrave des fortes doses ou agrave une utilisation chronique
La myrtille a fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vitro in vivo et quelques eacutetudes cliniques
ayant montreacute une faible biodisponibiliteacute (surtout chez lrsquohomme) mais des effets beacuteneacutefiques
dans le domaine vasculaire dans certaines pathologies ougrave le stress oxydant est impliqueacute
(cancer maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives DMLAhellip) cette activiteacute reste agrave ecirctre prouveacutee chez
lrsquohomme Quant aux eacutetudes cliniques concernant lrsquoaction de la myrtille sur la vision (surtout
nocturne) elles restent controverseacutees mais des eacutetudes in vitro reacutecentes ont montreacute ses effets
beacuteneacutefiques sur la reacutegeacuteneacuteration des cellules corneacuteennes Enfin outre son emploi en cuisine la
myrtille est utiliseacutee dans lrsquoindustrie pour ses anthocyanes aux proprieacuteteacutes tinctoriales et dans le
domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments et des compleacutements alimentaires
agrave base de myrtille pour diverses indications (traitement de la fragiliteacute capillaire de
lrsquoinsuffisance veineuse et dans les troubles de la vision meacutesopique et scotopique)
MOTS-CLEFS Vaccinium myrtillus - Myrtille - anthocyanosides - phytotheacuterapie - stress
oxydant
THESE SOUTENUE LE 19 MAI 2010
Par Olivia Maillefert
86 rue des Ecoles
73230 St Alban Leysse
COMPOSITION DU JURY
Preacutesident du jury
Mr KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences en Botanique
Membres du jury
Mr CORJON Gilles Docteur en Pharmacie
Mr CHOVELON Michel Docteur en Pharmacie
- 1ere pagepdf
- table des matiegraverespdf
- thegravese myrtille olivia paginationpdf
- Derniere pagepdf
-
UNIVERSITE JOSEPH FOURIER
FACULTE DE PHARMACIE DE GRENOBLE
Anneacutee 2010 Ndeg
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
THESE
PRESENTEE POUR LrsquoOBTENTION DU TITRE DE DOCTEUR EN PHARMACIE
DIPLOcircME DrsquoETAT
OLIVIA MAILLEFERT
Neacutee le 13 Feacutevrier 1982 A Chambeacutery
THESE SOUTENUE PUBLIQUEMENT A LA FACULTE DE PHARMACIE DE
GRENOBLE
Le 19 Mai 2010
DEVANT LE JURY COMPOSE DE
Preacutesident du jury M KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences
en Botanique
Membres
Mr CHOVELON Michel Docteur en pharmacie
Mr CORJON Gilles Docteur en pharmacie
REMERCIEMENTS
A Monsieur Serge Krivobok
Merci de tout mon cœur pour votre soutien et votre aide dans la reacutealisation de ce travail Vous
mrsquoavez offert votre temps et vos encouragements et ccedila je ne lrsquooublierai jamais
A Monsieur Michel Chovelon
Merci drsquoavoir donneacute de votre temps et de faire partie de mon jury
A Monsieur Gilles Corjon
Je vous remercie drsquoavoir accepteacute si geacuteneacutereusement de faire partie de mon jury
A Monsieur et Madame Berendsen
Je vous remercie pour votre compreacutehension et votre gentillesse
A mes parents
Merci drsquoavoir toujours eacuteteacute lagrave pour moi de mrsquoavoir soutenue dans les moments difficiles Jrsquoai
beaucoup de chance de vous avoir Je vous aime
A mes grands-parents
Que dire si ce nrsquoest que je vous aime
A toute ma famille
Vous comptez tellement pour moi
A mes amis
Merci pour tous ces fous rires et tous les bons moments que nous avons partageacutes Vous avez
toujours eacuteteacute lagrave dans les moments de joie et de peine
A Fabien
Tu es mon avenir et je souhaite de tout cœur qursquoil soit magnifique
A mon grand-pegravere Roger
Jrsquoaurai tant voulu que tu sois lagrave aujourdrsquohui Tu es preacutesent dans mon cœur je pense agrave toi
chaque jour Tu me manques
TABLE DES MATIERES
Liste des tableaux p1
Liste des figures p2
Liste des abreacuteviations p3
Glossaire p4
Introduction et historique p6
Premiegravere partie Botanique de Vaccinium myrtillus L p7
I Classification botanique de la myrtille p8
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees p8
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium p10
3 Vaccinium myrtillus L ou myrtille sauvage p10
31 Description botanique p10
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille p13
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium p13
41 Vaccinium uliginosum L p13
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo p14
43 Vaccinium macrocarpon L p16
II Culture reacutecolte et production des myrtilles p17
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques p17
11 pH du sol p17
12 Conditions climatiques p17
13 Besoins en eau p17
2 Reacutecolte des myrtilles p18
21 Date et mode de reacutecolte p18
3 Production des myrtilles p19
31 Production mondiale p19
32 Production europeacuteenne p19
33 Production franccedilaise p19
4 Post-reacutecolte p20
41 Conservation p20
42 Conditionnement p20
Deuxiegraveme partie Composition chimique de Vaccinium myrtillus L p21
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus p22
1 Identification macroscopique et microscopique p22
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus p22
21 Composition chimique des feuilles p22
22 Composition chimique des fruits p23
II Anthocyanosides p24
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes p24
2 Structure des anthocyanosides p25
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides p26
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides p27
41 Extraction p27
42 Seacuteparation et identification p27
43 Dosage des anthocyanosides p27
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p28
51 Composition en anthocyanosides p28
52 Donneacutees quantitatives p29
53 Donneacutees qualitatives p29
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus p29
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p30
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus p34
1 Acides pheacutenoliques p34
2 Tanins p34
3 Flavonols p35
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans V myrtillus p35
Troisiegraveme partie Inteacuterecircts theacuterapeutiques de Vaccinium myrtillus L p36
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire p37
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur p37
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire p37
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires p39
2 Activiteacute vasoprotectrice p40
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique p40
22 Action sur la reacutesistance capillaire p41
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme p41
24 Action antiatheacuterogegravenique p42
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice p42
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA) p43
5 Action sur lrsquoangiogenegravese p44
II Action de Vaccinium myrtillus dans le stress oxydant p45
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes p45
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p46
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides p46
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma p47
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides p47
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces reacuteactives
azoteacutees p48
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique p49
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines p50
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie p51
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie p51
32 Etudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques p51
4 Effet de Vaccinium myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives
et le vieillissement p53
41 Effets sur un stress eacutemotionnel p53
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication
du stress oxydant p54
5 Effet de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB p56
51 Effets drsquoune exposition solaire p56
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires p56
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire p57
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes p57
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire p58
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge p59
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus p61
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant
un stress oxydant p61
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus p62
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer p62
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus p63
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine p65
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases p66
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes p66
42 Etude de Teller et coll (2009) p66
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision p67
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale p68
2 Eacutetude chez des sujets myopes p69
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004) p70
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique p72
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes p72
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete p73
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine p73
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques p74
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac p74
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique p74
2 Action sur Helicobacter pylori p76
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus p76
1 Action antibacteacuterienne p76
VIII Toxicologie p77
1 Effets indeacutesirables p77
2 Doses leacutetales 50 (DL50) p78
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus p79
Quatriegraveme partie Utilisations de Vaccinium myrtillus L p80
I Utilisations alimentaires p81
1 Utilisations culinaires p81
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire p81
II Utilisations pharmaceutiques p82
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille p83
11 Meacutedicaments allopathiques p83
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques p84
13 Compleacutements alimentaires p85
Conclusion p87
Bibliographie p89
Liste des Annexes p98
Annexe I p99
Annexe II p101
Annexe III p104
Annexe IV p107
1
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
2
LISTE DES FIGURES
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme
3
LISTE DES ABREVIATIONS
AA allyl alcool
ADP adeacutenosine diphosphate
AMPc adeacutenosine monophosphate cyclique
DMLA deacutegeacuteneacuterescence maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge
ECA enzyme de conversion de lrsquoangiotensine
EDRF endothelium-derived relaxing factorfacteur relaxant deacuteriveacute lrsquoendotheacutelium
ERO espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
GAGs glycosaminoglycanes
GSH glutathion
H2O2 peroxyde drsquohydrogegravene
IC50 Inhibitory Concentration 50concentration inhibitrice agrave 50
IEC inhibiteur de lrsquoenzyme de conversion
IGF insulin-like growth factor
LDLs low-density lipoproteins lipoproteacuteines de basse densiteacute
MDA malondialdeacutehyde
NO monoxyde drsquoazote radicalaire
O2- anion superoxyde
OH radical hydroxyle
PGI2-like prostacyclin-like
PLCγ phospholipase Cγ
RTK reacutecepteur agrave activiteacute tyrosine kinase
tBH tert-butylhydroperoxyde
TBRAs thiobarbituric acid reactive substancessubstances reacuteagissant avec lrsquoacide
thiobarbiturique
UV ultraviolet
VEGF vascular endothelial growth factorfacteur de croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire
XOD xanthine oxydase
4
GLOSSAIRE
Termes botaniques
Actinomorphe se dit dune fleur preacutesentant une symeacutetrie axiale
Adneacute soudeacute ou attacheacute agrave sapplique agrave des organes diffeacuterents comme par exemple des
eacutetamines adneacutees au peacuterianthe
Aneacutemogame qualifie le mode de feacutecondation des plantes dans lequel le pollen est porteacute par
le vent
Anthegravere partie de leacutetamine habituellement porteacutee par le filet contenant le pollen celui-ci
est libeacutereacute lorsque souvre cette terminaison renfleacutee sous forme de petit sac oblong
geacuteneacuteralement jaune et double
Campanuleacute se dit dune fleur en forme de cloche
Capiteacute termineacute en tecircte arrondie
Carpelles organe femelle Lensemble des carpelles forme le pistil (ou gyneacuteceacutee)
Dialypeacutetale dont les peacutetales sont indeacutependants les uns des autres
Hermaphrodite plante portant des organes floraux macircle et femelle
Infundibuliforme se dit dune fleur dont la corolle est en forme dentonnoir
Ligneux se dit des veacutegeacutetaux formant du bois arbres et arbustes mais aussi un certain
nombre de plantes grimpantes
Lobeacute se dit dun organe comme feuille ou peacutetale eacutechancreacute mais sans division complegravete
Loculicide qui souvre en se fendant longitudinalement le long de la nervure dorsale de
chaque loge
Marcotte organe veacutegeacutetal aeacuterien qui srsquoenterre et srsquoenracine avant de se seacuteparer (ou drsquoecirctre
seacutepareacute) de la plante megravere
Peacuterianthe ensemble des piegraveces florales non sexueacutees dune fleur
Septicide qualifie un fruit qui souvre en se fendant longitudinalement au niveau des
cloisons (septums) et seacuteparant ainsi les carpelles
Stomate structure foliaire organiseacutee ayant des meacutecanismes drsquoouverture reacuteversibles
permettant les eacutechanges gazeux
5
Teacutenuinucelleacute se dit dun ovule contenant un nucelle peu deacuteveloppeacute (dans les groupes
eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Uniteacutegumenteacute se dit dun ovule ayant une seule enveloppe autour du nucelle (dans les
groupes eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Urceacuteoleacutee corolle en forme de tube dilateacute agrave la base et reacutetreacutecit au sommet
Zygomorphe se dit dune plante preacutesentant une symeacutetrie par rapport agrave un plan
Autres
Astheacutenopie fatigue de loeil surtout lors daccommodation soutenue et qui provoque des
signes dirritation une sensation de brucirclure et des maux de tecircte
Meacutesopique Caracteacuteristique visuelle du systegraveme oculaire utilisant agrave la fois bacirctonnets et cocircnes
pour interpreacuteter une scegravene visuelle dont lintensiteacute lumineuse est comprise entre celle du jour
et de la nuit (creacutepusculaire)
Reacutetinite pigmentaire maladie heacutereacuteditaire deacutegeacuteneacuterative des cellules visuelles reacuteceptrices de
la lumiegravere (cocircnes et bacirctonnets)
Sensibiliteacute au contraste elle est baseacutee sur la capaciteacute du systegraveme visuel agrave deacutetecter des
diffeacuterences de luminances donc de deacuteterminer lexistence de bords entre surfaces
homogegravenes
Scotopique vision nocturne se basant principalement sur linformation capteacutee par les
bacirctonnets
6
Introduction et historique
Dans une socieacuteteacute ougrave la phytotheacuterapie connait un engouement croissant voulant se rapprocher
au plus pregraves du laquo naturel raquo la connaissance des plantes aux vertus theacuterapeutiques est de plus
en plus rechercheacutee La myrtille sauvage ou Vaccinium myrtillus L appartient agrave la famille des
Ericaceacutees elle est lrsquoune des plantes centrales faisant partie de la liste des plantes meacutedicinales
inscrites agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition (liste A) et dont le fuit (sec et frais) fait
lrsquoobjet drsquoune monographie agrave la Pharmacopeacutee europeacuteenne (6egraveme
eacutedition) Lrsquoeacutetymologie du
genre Vaccinium est incertaine il deacuteriverait du nom latin vacca pour vache car la plante eacutetait
volontiers brouteacutee par les bovins mais pour drsquoautres du nom bacca pour baie (43) Le terme
myrtillus provient de la ressemblance avec les feuilles et les fruits du myrte (Myrtus
communis L) V myrtillus empreinte divers noms vernaculaires (airelle airelle noire airelle
anguleuse bluet brimbelle raisin des bois raisin de bruyegraverehellip) Les deacutesignations anglaises
pour la baie de myrtille sont bilberry fruit blueberry whortleberry pour les feuilles bilberry
leaf huckleberry leaf (67)
Ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques sont utiliseacutees dans la meacutedecine populaire depuis fort
longtemps Dioscoride est le premier agrave vanter les bienfaits de la myrtille dans le traitement de
la dysenterie Puis au XVIegraveme
siegravecle une religieuse et mystique allemande Sainte Hildegarde
de Bingen preacuteconisait la plante pour provoquer faciliter ou augmenter les regravegles (20)
Depuis de nombreuses proprieacuteteacutes sont attribueacutees au myrtillier en fonction de la partie de
plante utiliseacutee On utilisait les baies pour ses proprieacuteteacutes astringentes toniques antiseptiques
dans le traitement de la diarrheacutee des heacutemorroiumldes des inflammations gastro-intestinaleshellip
quant aux feuilles elles eacutetaient surtout utiliseacutees pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes (43)
Lrsquoameacutelioration de la vision nocturne par la myrtille a eacuteteacute rapporteacutee par les pilotes de la British
Royal Air Force qui en consommaient quotidiennement Certains usages precircteacutes agrave la myrtille
ont eacuteteacute valideacutes et figure dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la
monographie de la Commission E allemande (ces usages seront citeacutes dans cette thegravese) La
myrtille fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vivo in vitro et de quelques eacutetudes cliniques
(dans des domaines meacutedicaux varieacutes) dont certaines posent des interrogations Ses utilisations
sont diverses on lrsquoemploie en cuisine (pacirctisseries confitures vin vinaigrehellip) dans
lrsquoindustrie et dans le domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments agrave base de
myrtille et des compliments alimentaires
7
Premiegravere partie
Botanique de Vaccinium myrtillus L
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L (70)
8
I Classification botanique de la myrtille
Le taxon des Spermatophytes ou plantes agrave graines est constitueacute de deux clades les
Gymnospermes ou plantes agrave ovules nus et les Angiospermes ou plantes agrave ovaires
La myrtille (ou myrtillier) appartient agrave lrsquoembranchement des Angiospermes se distinguant des
Gymnospermes par plusieurs caractegraveres dont trois fondamentaux
- les organes reproducteurs se groupent en fleurs bisexueacutees
- les carpelles entourent complegravetement les ovules et se transforment apregraves
feacutecondation en fruit
- le gameacutetophyte femelle situeacute dans lrsquoovule nommeacute sac embryonnaire est le siegravege
drsquoune double feacutecondation lrsquoune donnant lrsquoembryon lrsquoautre conduisant agrave lrsquoalbumen (tissu de
reacuteserve des graines agrave 3n chromosomes)
Selon la classification systeacutematique la myrtille fait partie de la classe des Asteacuterideacutees
(Eudicots agrave peacutetales et carpelles soudeacutes) constitueacutee drsquoenviron 67000 espegraveces on distingue les
Asteacuterideacutees basales et les Euasteacuterideacutees I et II Les Asteacuterideacutees basales ont deux ordres fregraveres
les Ericales et les Cornales (25)
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees (22) (25) (30)
Lrsquoordre des Ericales dont le nom vient drsquoErica pour bruyegravere comprend 7000 espegraveces
reacuteparties en 24 familles dont celle des Ericaceacutees auxquelles appartient la myrtille Cette
famille est reacutepartie dans le monde entier mais avec une preacutefeacuterence geacuteographique pour les
reacutegions tempeacutereacutees ou froides voire mecircme les hautes montagnes De faccedilon geacuteneacuterale elle
regroupe des arbres des arbustes et des lianes aux caracteacuteristiques suivantes (Figure 2)
- des feuilles alternes simples entiegraveres agrave denteacutees-serreacutees dont les bords du limbe
peuvent se replier sur eux-mecircmes afin de proteacuteger les stomates porteacutes par la face infeacuterieure
de la transpiration Chez certaines Ericaceacutees les feuilles sont plates et coriaces ce qui leur
procure une reacutesistance agrave la seacutecheresse
- des fleurs le plus souvent hermaphrodites geacuteneacuteralement plus ou moins pendantes
actinomorphes agrave leacutegegraverement zygomorphes
- quatre ou cinq seacutepales libres agrave leacutegegraverement soudeacutes
les mots suivis de ce symbole ont leur deacutefinition dans le glossaire
9
- quatre ou cinq peacutetales soudeacutees constituant une corolle cylindrique ou urceacuteoleacutee
campanuleacutee ou infundibuliforme parfois dialypeacutetale Chez certains genres aneacutemogames
le peacuterianthe nrsquoest constitueacute que de deux ou trois seacutepales et peacutetales ou trois agrave quatre peacutetales
- huit agrave dix eacutetamines reacuteduites agrave deux ou trois chez les espegraveces aneacutemogames
- le filet des eacutetamines est libre ou adneacute agrave la corolle voire mecircme soudeacute Quelques fois
il peut y avoir une paire drsquoappendices en eacuteperon dresseacute srsquoinseacuterant agrave proximiteacute ou agrave lrsquoendroit
mecircme ougrave se trouve lrsquoanthegravere
- lrsquoanthegravere est constitueacute drsquoune ou de deux loges srsquoouvrant par deux pores libeacuterant les
grains de pollen habituellement disposeacutes en teacutetrades
- les carpelles sont au nombre de deux agrave dix agrave ovaire supegravere ou infegravere comme chez la
myrtille (crsquoest-agrave-dire que lrsquoovaire peut se souder agrave la coupe florale)
- un style avec souvent un creux agrave lrsquointeacuterieur
- un stigmate capiteacute ou faiblement lobeacute
- un ou plusieurs ovules par loge uniteacutegumenteacutes ou teacutenuinucelleacutes
- enfin le fruit peut ecirctre une capsule septicide ou loculicide une drupe agrave plusieurs
noyaux ou une baie comme chez la myrtille
4 ou 5 seacutepales agrave soudure ou adnation variable
4 ou 5 peacutetales soudeacutes
Soudure ou adnation variable
Ovaire infegravere
Ovaire supegravere Type de fruit
Symeacutetrie radiaire () 2 agrave 10 carpelles soudeacutees
ou 4 agrave 10 eacutetamines
Symeacutetrie bilateacuterale (X) Etamines adneacutees aux peacutetales
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees (30)
10
La famille des Ericaceacutees regroupe plusieurs genres et espegraveces dont le nombre varie selon la
litteacuterature de 70 agrave 130 genres et de 2000 agrave 3400 espegraveces Cette famille comprend
- des plantes alimentaires comme Vaccinium myrtillus L (myrtille) Vaccinium
uliginosum L (airelle des marais) Gaultheria procumbens L (theacute du Canada qui fournit le
salicylate de meacutethyle)hellip
- des plantes meacutedicinales comme V myrtillus Ledum palustre L (leacutedon des marais)
Calluna vulgaris L (bruyegravere callune)hellip
- des plantes utiliseacutees pour lrsquoobtention du bois comme Erica arborea L (fabrication
des pipes)
- de nombreuses espegraveces ornementales dans les genres Arbutus (arbousier) Erica
(bruyegravere) Rhododendron (azaleacutee)hellip
La famille des Ericaceacutees est constitueacutee de quatre sous-familles dont les Vaccinioiumldeacutees qui
englobent le genre Vaccinium
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium (22)
Le genre Vaccinium se caracteacuterise par plusieurs particulariteacutes botaniques
- des tiges drsquoaspect contourneacute conseacutequence drsquoune croissance tregraves lente
- des feuilles coriaces plates reacutesistantes agrave la seacutecheresse
- des anthegraveres srsquoouvrant par deux pores souvent munis de deux appendices dresseacutes en
forme de cornes
- un ovaire composeacute de cinq carpelles fermeacutes
- un fruit repreacutesenteacute par une capsule
Ce genre est lui-mecircme constitueacute drsquoenviron 150 espegraveces auquel fait partie la myrtille
Les myrtilles drsquoEurope regroupent deux espegraveces de myrtilles
- V uliginosum L
- V myrtillus L
3 Vaccinum myrtillus L ou myrtille sauvage
31 Description botanique (22) (67)
Le myrtillier (Vaccinum myrtillus L) est un sous-arbrisseau vivace atteignant 20 agrave 60 cm de
hauteur agrave tige verte dresseacutee cylindrique rigide et agrave rameaux vert pacircle anguleux aileacutes dans
leur longueur et plus ou moins grecircles Cette tige est recouverte drsquoune eacutecorce ligneuse sans
poil ni stipule ni latex ni vrille
11
Les racines souterraines sont nombreuses et forment un lacis tregraves serreacute proche du sol avec des
racines adventives La plante se perpeacutetue soit par ramification des tiges souterraines soit par
des bourgeons prenant naissance sur les racines elle est dite plante sociale car elle se
marcotte naturellement
Les feuilles (Figure 3) vert pacircle sont petites (1 agrave 2 cm voire 2 agrave 3 cm selon la litteacuterature)
alternes de forme oblongue agrave ovale agrave pointe fine et allongeacutee Le bord du limbe est finement
denteleacute avec des nervures opposeacutees Ces feuilles sont courtement peacutetioleacutees avec un peacutetiole
(tige portant la feuille) recourbeacute vers le bas Les feuilles prennent une belle couleur rouge-
cuivre en automne Elles sont caduques et reacuteapparaissent au printemps
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus (75)
Les fleurs de couleur blanc roseacute rouge pacircle agrave verdacirctre ont une corolle pendante comportant
quatre ou cinq peacutetales soudeacutes entre eux sur une grande longueur et formant un tube globuleux
agrave lobes courts Elles sont solitaires ou regroupeacutees par deux porteacutees par un peacutedoncule courbeacute
Les seacutepales tregraves petits verts sont soudeacutes agrave la corolle (Figure 4) La floraison a lieu en mai-
juin
12
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus (72)
Le fruit est une baie globuleuse de la taille drsquoun petit pois (diamegravetre variant de 4 agrave 8 mm)
bleu noir agrave maturiteacute cette baie preacutesente parfois des restes de style agrave la base et peut ecirctre
surmonteacutee du calice agrave son sommet formant un disque entoureacute drsquoun faible rebord (Figure 5)
On peut apercevoir agrave la base de la baie la cicatrice du peacutedoncule Le meacutesocarpe est charnu
constitueacute de 4 ou 5 petites loges contenant de multiples petites graines brillantes brun-rouge
La baie mucircrit jusqursquoen en juillet-aoucirct voire septembre
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus (72)
Si le fruit est frais la saveur est douce sucreacutee et leacutegegraverement aciduleacutee voire mecircme astringente
Le fruit sec par contre a une saveur aigre-douce leacutegegraverement astringente En ce qui concerne
les organes reproducteurs lrsquoovaire infegravere est soudeacute agrave la coupe florale Les eacutetamines eacutegales
entre elles deacutepassent la dizaine en nombre elles sont complegravetement libres soudeacutees au
reacuteceptacle elles peuvent ecirctre soit disposeacutees en plusieurs verticilles soit nrsquoavoir aucune
position bien deacutefinie
13
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille (67)
Vaccinium myrtillus est une myrtille sauvage tregraves peu cultiveacutee originaire drsquoEurope du Nord et
Centrale abondant dans les bois clairsemeacutes et les bruyegraveres sur les sols siliceux de montagne
En France on la trouve dans la plupart des massifs montagneux entre 400 et 2500 megravetres
drsquoaltitude (Figure 6)
Leacutegende
Preacutesent
Zone geacuteographique non renseigneacutee
Preacutesence non signaleacutee
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France (81)
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium
41 Vaccinium uliginosum L (22)
Vaccinium uliginosum L nommeacute myrtille de loup ou myrtille des marais se situe
principalement aux bords des marais dans les tourbiegraveres les landes et les bois humides On le
trouve en Dauphineacute dans le Jura les Pyreacuteneacuteeshellip et en Savoie jusqursquoagrave 2000 megravetres et plus
Crsquoest un buisson bas agrave moyen agrave tiges et rameaux arrondis dans leur longueur Ses feuilles
vert-pacircle au dessus nervureacutees au-dessous ne persistent pas en hiver Les fleurs (Figure 7)
sont disposeacutees en grappe de mai agrave juillet
14
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum (72)
Le fruit (Figure 8) drsquoun diamegravetre drsquoenviron 6 mm est bleu-noir pruineux donnant un jus
incolore et agrave chair blanche Sa saveur est fade et sucreacutee Il mucircrit en juillet-aoucirct voire mecircme
jusqursquoen septembre
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum (72)
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo (61)
Ce sont des myrtilles drsquoorigine ameacutericaine dont lrsquoimplantation a eacuteteacute faite essentiellement agrave
partir de Vaccinium corymbosum L (myrtillier geacuteant ou arbustif) Celui-ci est un arbuste
pouvant atteindre 25 megravetres de hauteur drsquoougrave son nom Il est reacutesistant au froid Ses
inflorescences forment un corymbe ougrave le nombre de fleurs par corymbe varie beaucoup
(Figure 9) La baie (Figure 10) est de couleur bleue recouvert de pruine qui masque une chair
blanche
15
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum (79)
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo (79)
La floraison apparait de mars agrave fin mai et dure plusieurs semaines Les feuilles (Figure 11)
prennent une belle coloration en automne ce qui en fait une magnifique plante deacutecorative
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum (79)
16
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage la myrtille drsquoorigine ameacutericaine a un fruit plus gros et
plus sucreacute Cette derniegravere a une pulpe non coloreacutee Plusieurs varieacuteteacutes existent classeacutees en
fonction de lrsquoeacutepoque de maturiteacute
- les varieacuteteacutes preacutecoces comme le Bluetta lrsquoEarlibluehellip
- les varieacuteteacutes demi-preacutecoces comme le Patriot le Collinshellip
- les varieacuteteacutes demi-saison comme le Bluejay le Bluecrophellip
- les varieacuteteacutes demi-tardives comme le Berkeley le Jerseyhellip
- les varieacuteteacutes tregraves tardives comme le Darrow lrsquoElliothellip
43 Vaccinium macrocarpon L (4)
Vaccinium macrocarpon Ait ou canneberge drsquoAmeacuterique (Figure 12) reacutesistant agrave de fortes
geleacutees de moins 35degC et plus est un arbrisseau ressemblant agrave la myrtille sa croissance est
lente Son fruit est une baie aciduleacutee utiliseacutee dans la preacutevention des reacutecidives drsquoinfections
urinaires car elle contient des moleacutecules anti-adheacutesines des fimbriae drsquoEscherichia coli
(bacteacuterie intestinale pouvant ecirctre la cause drsquoinfection urinaire)
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits (83)
Drsquoautres espegraveces de Vaccinium se rencontrent sur le continent ameacutericain comme
- Vaccinium angustifolium Ait (Bleuet nain) qui est un buisson bas infeacuterieur agrave 50 cm
reacutesistant au froid
- Vaccinium ashei Reade qui est un buisson haut (3 agrave 6 megravetres) reacutesistant agrave la
seacutecheresse
Il ya beaucoup drsquoautre espegraveces de Vaccinium que nous ne citerons pas ici
17
II Culture reacutecolte et production des myrtilles
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques
Comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment la myrtille de culture est diffeacuterente de la myrtille
sauvage exigeant des conditions optimales pour une bonne production
11 pH du sol (49) (61)
Le sol doit ecirctre acide et mecircme tregraves acide pour permettre une croissance et un deacuteveloppement
normal ainsi qursquoune bonne reacuteussite de culture pH compris entre 4 et 5 voire 4 agrave 52 selon la
litteacuterature Or ce type de sol nrsquoest pas freacutequent en France Le pH optimum est de 48 Si le pH
deacutepasse 55 les plantes sont chlorotiques et il faut soit diminuer le pH soit renoncer agrave une
telle culture Les sols humides doivent ecirctre eacuteviteacutes car les racines sont tregraves sensibles agrave
lrsquoasphyxie et le deacuteveloppement du systegraveme racinaire est limiteacute
12 Conditions climatiques (49) (61)
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage qui croit dans les landes et les sous-bois humides de
demi-montagne ougrave elle vit en colonie vers 1000 megravetres drsquoaltitude le myrtillier cultiveacute est une
plante de plaine et de faible altitude qui preacutefegravere les endroits ensoleilleacutes Ainsi une exposition
sud ou sud-ouest est conseilleacutee mais il faut faire attention agrave la seacutecheresse En raison des
risques de geleacutees printaniegraveres il faut eacuteviter les lisiegraveres de bois ou la profondeur des valleacutees
Cette plante peut ecirctre eacutegalement cultiveacutee en demi-montagne agrave une altitude comprise entre 600
et 800 megravetres Reacutesistante au froid elle peut supporter de basses tempeacuteratures jusqursquoagrave -30degC
Bien qursquoau cours de la floraison les fleurs peuvent supporter des tempeacuteratures neacutegatives (-
5degC) il faut faire attention car les deacutegacircts peuvent ecirctre tregraves importants surtout sur les varieacuteteacutes
sensibles Agrave lrsquoopposeacute le myrtillier craint la seacutecheresse en eacuteteacute et les vents secs
13 Besoins en eau (49) (61)
La myrtille cultiveacutee aime la proximiteacute de la surface de la nappe phreacuteatique mais craint les
excegraves en eau Ses besoins sont limiteacutes mais permanents tout le long de sa peacuteriode de vie (au
moins 1000 mm drsquoeau durant lrsquoeacuteteacute) Ceci peut srsquoexpliquer par le deacuteveloppement tregraves
superficiel de son systegraveme racinaire et lrsquoabsence de poils absorbants En Lorraine par
exemple le systegraveme drsquoirrigation est le laquo goutte agrave goutte raquo localiseacute permettant drsquoapporter les
doses neacutecessaires en eau et de limiter la contamination fongique Les besoins en eau par
semaine sont de 20 mm
18
Ainsi il faudra tenir compte de ces exigences pour choisir la meilleure exposition possible
2 Reacutecolte des myrtilles
21 Date et mode de reacutecolte (49) (22)
La croissance de la plante eacutetant lente la reacutecolte peut deacutebuter la 2egraveme
anneacutee apregraves la plantation
La production augmente reacuteguliegraverement jusqursquoagrave la 8egraveme
ou la 9egraveme
anneacutee en rapport avec le
deacuteveloppement veacutegeacutetatif La date de reacutecolte deacutepend beaucoup de la varieacuteteacute de lrsquoaltitude des
tempeacuteratures printaniegraveres et du mode de reacutecolte Elle srsquoeacutetend de mai agrave fin septembre voire mi-
juin pour les varieacuteteacutes les plus preacutecoces et fin septembre pour les varieacuteteacutes les plus tardives La
reacutecolte deacutebute lorsque 20 des baies sont mucircres En effet si la reacutecolte se fait trop tocirct les
fruits ne sont pas mucircres et seront de mauvaise qualiteacute En geacuteneacuteral la reacutecolte dure de 3 agrave 5
semaines avec plusieurs passages successifs (un ou plusieurs par semaine) pour une mecircme
varieacuteteacute au fur et agrave mesure de la maturation des fruits
La reacutecolte de la myrtille cultiveacutee se fait manuellement directement dans les barquettes pour
eacuteviter drsquoabicircmer les fruits avec une manipulation suppleacutementaire Ceci est diffeacuterent pour la
myrtille sauvage ougrave la reacutecolte se fait agrave lrsquoaide drsquoun instrument que lrsquoon nomme laquo peigne raquo
(Figure 13) dont il existe divers modegraveles (en bois ou en fer) constitueacutes drsquoune grille permettant
drsquoarracher vite et en quantiteacutes importantes les baies en les emprisonnant entre les dents
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages (78)
19
3 Production des myrtilles
31 Production mondiale (61)
Les Etats-Unis sont les premiers producteurs mondiaux de myrtilles suivis du Canada Ces
pays produisent deux types de myrtille des myrtilles sauvages appartenant majoritairement agrave
lrsquoespegravece Vaccinium angustifolium qui se rapproche de la myrtille europeacuteenne comme nous
lrsquoavons vu dans le chapitre preacuteceacutedent Son deacuteboucheacute est principalement la congeacutelation et la
transformation dont une partie est exporteacutee en Europe
Les myrtilles cultiveacutees aux USA sont principalement composeacutees de
- Vaccinium corymbosum
- des hybrides entre V corymbosum et V angustifolium
- des hybrides entre V ashei et V corymbosum
Ces myrtilles cultiveacutees sont commercialiseacutees majoritairement sur le marcheacute inteacuterieur et un
faible tonnage est exporteacute en Europe et surtout en Australie
En Europe de lrsquoEst et en Scandinavie la cueillette des myrtilles sauvages pour le commerce
ou lrsquoautoconsommation nrsquoest pas neacutegligeable
32 Production europeacuteenne (22) (61)
Crsquoest lrsquoAllemagne qui deacutetient les plus grandes surfaces de myrtilles cultiveacutees suivie par la
France et les Pays-Bas Elles sont aussi cultiveacutees en Italie et au Portugal mais de faccedilon moins
importante
Dans les pays scandinaves la production est principalement constitueacutee de V myrtillus Il faut
noter que des quantiteacutes non neacutegligeables de reacutecolte sont le fait de cueillettes reacutealiseacutees par des
laquo pillards raquo des cultivateurs et enfin par des voyageurs des particuliers ou des touristes qui
consomment les myrtilles sur place pour leur plaisir
33 Production franccedilaise (22) (61)
En France les Landes constituent la premiegravere zone de production des myrtilles cultiveacutees
suivies du Val de Loire du Limousin de la Sologne et des Vosges La majoriteacute des myrtilles
cultiveacutees au niveau national (1300 agrave 1500 tonnesan) est destineacutee pour 95 des tonnages au
marcheacute du frais et est exporteacutee vers lrsquoAllemagne ougrave la consommation y est plus importante
qursquoen France vers la Suisse la Grande-Bretagne lrsquoItaliehellip et en importe de Suegravede du
Canada de Pologne et de Roumanie
En ce qui concerne les myrtilles sauvages 1500 agrave 2000 tonnes sont reacutecolteacutees en France La
principale zone de production est lrsquoArdegraveche suivie du Massif central et des Vosges Cette
20
reacutecolte se fait au peigne par des personnes cueilleurs agriculteurs qui ont un laquo droit de
cueillette raquo La majoriteacute des myrtilles sauvages reacutecolteacutees est destineacutee agrave la transformation en
geleacutees confitureshellippar des ateliers drsquoexploitation ou par des entreprises proches des sites de
production Une faible quantiteacute est destineacutee agrave la vente sur les marcheacutes ou agrave des grossistes pour
la restauration et les eacutepiceries fines
Les statistiques de 2001 ont reacutecapituleacute une production mondiale drsquoenviron 190000 tonnes
(1000 tonnes pour la France) avec pregraves de 38000 hectares cultiveacutes aux Etats-Unis et au
Canada
4 Post-reacutecolte
41 Conservation (49) (61)
Une fois les myrtilles reacutecolteacutees elles doivent ecirctre placeacutees dans une chambre froide pour
garder toutes ses qualiteacutes Lrsquoideacuteal pour conserver le fruit intact pendant une dizaine de jours
est de le stocker entre 8 et 10degC Il gardera alors son parfum lrsquoarocircme en sera mecircme
deacuteveloppeacute Si on veut le conserver plus longtemps il faut le soumettre agrave des tempeacuteratures plus
basses En effet la congeacutelation est un bon proceacutedeacute de conservation pour ce fruit
42 Conditionnement (61)
Le conditionnement que lrsquoon retrouve le plus souvent est la barquette en plastique fermeacutee par
un couvercle perforeacute Ainsi les myrtilles peuvent ecirctre conserveacutees selon les conditions deacutefinies
preacuteceacutedemment
Le temps de stockage est ameacutelioreacute par lrsquoutilisation de films en polypropylegravene semi-
permeacuteables qui maintiennent le fruit sous atmosphegravere modifieacutee Ces films peuvent apregraves
sortie du froid ecirctre gardeacutes durant seulement 24 heures car au-delagrave il peut y avoir des risques
de deacuteveloppement de pourritures
21
Deuxiegraveme partie
Composition chimique
de Vaccinium myrtillus L
22
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus 1 Identification macroscopique et microscopique (43) (67)
Du point de vue macroscopique les feuilles de V myrtillus sont alternes caduques ovales agrave
elliptiques pointues courtement peacutetioleacutees et finement denteleacutees Le bord de la feuille preacutesente
des poils seacutecreacuteteurs peacutedicelleacutes agrave lrsquoextreacutemiteacute de chaque dent quelques fois briseacutes
Du point de vue microscopique la feuille preacutesente des stomates paracytiques des poils agrave
parois eacutepaisses sur la face supeacuterieure des grandes nervures des poils seacutecreacuteteurs et des rangeacutees
de cellules agrave cristaux sur la nervure principale
Du point de vue macroscopique le fruit est une baie globuleuse drsquoun noir violaceacutee nettement
deacuteprimeacutee au sommet de la taille drsquoun petit pois Cet examen doit se faire sur une baie intacte
crsquoest-agrave-dire ni attaqueacutee par des insectes ni moisie De plus elle doit ecirctre molle car elle
devient cassante si elle est stockeacutee de faccedilon prolongeacutee
Lrsquoexamen microscopique est surtout caracteacuteriseacute par la preacutesence de cellules agrave cristaux du
meacutesocarpe et de lrsquoendocarpe Le fruit frais broyeacute ou la poudre de fruit sec met en eacutevidence la
preacutesence de macles de cristaux drsquooxalate de calcium des amas de cellules scleacutereuses de
couleur rose violaceacute agrave parois canaliculeacutees et des fragments jaune-brun du teacutegument seacuteminal agrave
paroi en forme de fer agrave cheval
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus
21 Composition chimique des feuilles (11) (67)
Celle-ci renferme des tanins cateacutechiques (08 agrave 67) des cateacutechols (eacutepicateacutechol
gallocateacutechol eacutepigallocateacutecholhellip) jusqursquoagrave 10 des proanthocyanidines (dimegraveres du cateacutechol
et drsquoeacutepicateacutechol) des flavonoiumldes (heacuteteacuterosides du querceacutetol rhamnoglucosyl- arabinosyl- et
glucuronyl-querceacutetol ainsi que des heacuteteacuterosides de kaempfeacuterol astragaloside) des iridoiumldes
des acides-pheacutenols surtout des acides chlorogeacuteniques et enfin des traces drsquoalcaloiumldes
quinolizidiniques comme la myrtine et lrsquoeacutepimyrtine
La bibliographie ancienne cite la preacutesence drsquoarbutoside et drsquohydroquinone qui ne sont
preacutesents qursquoagrave lrsquoeacutetat de trace voire totalement absent Ceci peut srsquoexpliquer soit par la preacutesence
de chimiotypes soit par une contamination des lots par des espegraveces proches qui ont le mecircme
habitat eacutecologique comme Vaccinium vitis-idaea L ou Vaccinium x intermedium Ruthe
(hybride entre V myrtillus et V vitis-idaea) dans lesquels on retrouve de lrsquoarbutoside de
lrsquohydroquinone libre et du pyroside (6-O-meacutethylarbutoside)
Enfin la feuille contient de faccedilon importante du chrome et du manganegravese
23
22 Composition chimique des fruits (11) (67)
Le fruit de la myrtille est riche en eau (jusqursquoagrave 90) en oligosaccharides (3 agrave 7) et en
acides organiques (acide malique citrique et quinique) Il contient des tanins essentiellement
des tanins cateacutechiques des proanthocyanidols (dimegravere de cateacutechol et drsquoeacutepicateacutechol) une
quinzaine drsquoheacuteteacuterosides les anthocyanosides qui sont des O-glucosides des O-galactosides et
des O-arabinosides en C-3 du cyanidol peacuteonidol delphinidol malvidol et peacutetunidol des
flavonoiumldes (heacuteteacuterosides de querceacutetol et kaempfeacuterol) des flavan-3-ols monomegraveres (cateacutechol et
eacutepicateacutechol)
Enfin on retrouve drsquoautres constituants comme les acides chlorogeacuteniques cafeacuteylquiniques
des acides pheacutenols et des pectines Les iridoiumldes quant agrave eux ne sont preacutesents que dans les
fruits immatures
24
II Anthocyanosides
Avant drsquoentrer dans les deacutetails il est important de connaitre les principaux groupes de
composeacutes phytochimiques que lrsquoon retrouve dans la plupart des fruits et des leacutegumes
(Tableau I)
Familles Classes Sous-classes
Polypheacutenols Flavonoiumldes - anthocyanidines
- flavones
-flavanols
- flavanones
- flavonols
- isoflavones
- tanins
acides pheacutenoliques - hydroxycinnamates
- hydroxybenzoates
non-flavonoiumldes - stilbegravenes
- coumarines
- lignans
Terpegravenes - caroteacutenoiumldes
- monoterpegravenes
Composeacutes soufreacutes - allyl sulfides
- isothiocyanates
Saponines - triterpeacutenoiumldes
- steacuteroiumldes
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes (7)
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes
Le terme anthocyane du grec laquo anthos raquo (signifiant fleur) et laquo kyanos raquo (bleu) est utiliseacute pour
deacutesigner la substance responsable de la coloration du bleuet Ce terme srsquoapplique agrave un groupe
de pigments qui donnent la coloration rouge rose mauve pourpre bleue et violette de la
plupart des fleurs et des fruits Ces pigments existent sous deux formes soit la forme
heacuteteacuteroside (anthocyanosides ou laquo anthocyanins raquo en anglais) soit sous la forme geacutenine
correspondante (anthocyanidols ou laquo anthocyanidins raquo en anglais) On connait environ 400
25
anthocyanosides qui sont preacutesents chez tous les Angiospermes agrave lrsquoexception des
Caryophyllales ougrave seule la famille des Caryophyllaceacutees et des Molluginaceacutees en contiennent
En effet leur preacutesence chez les Gymnospermes est rare Comme nous lrsquoavons vu les
anthocyanes sont responsables de la couleur des fleurs et des fruits mais peuvent eacutegalement
coloreacutes les bracteacutees les feuilles les peacutetioles les racines voire mecircme les bulbes comme dans
lrsquooignon rouge Cependant ce sont dans les fruits que leur concentration est la plus eacuteleveacutee Ils
srsquoaccumulent dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques sous forme de solution et de faccedilon
moins freacutequente sous forme drsquoanthocyanoplastes (11) Selon Szajdek et coll (58) les parois
cellulaires et la chair ne contiennent presque pas drsquoanthocyanosides
2 Structure des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont les pigments les plus importants des plantes visibles par lrsquoœil
humain Ils appartiennent agrave une large classe de composeacutes pheacutenoliques que lrsquoon appelle les
flavonoiumldes Ce sont des glycosides des deacuteriveacutes polyhydroxy et polymethoxy du 2-
pheacutenylbenzopyrylium plus communeacutement appeleacutes cation flavylium
Les diffeacuterences existant entre les anthocyanosides individuels sont lieacutees au nombre de groupe
hydroxyl agrave la nature et agrave la position drsquoattachement des sucres agrave la moleacutecule ainsi qursquoau
nombre et agrave la nature des acides aliphatiques ou aromatiques des sucres attacheacutes agrave la
moleacutecule Dix sept anthocyanosides et leurs aglycones naturellement preacutesents dans les plantes
sont connus Cependant seulement six geacutenines sont les plus freacutequentes (voire quasiment
universelles) dans les plantes supeacuterieures Il srsquoagit du cyanidol (50) du peacutelargonidol (12)
du peacuteonidol (12) du delphinidol (12) du peacutetunidol (7) et du malvidol (7) (Figure 14)
Les glycosides de trois anthocyanidines non meacutethyleacutes les plus largement reacutepandus dans la
nature sont la delphinidine la cyanidine et la peacutelargonidine Ils sont preacutesents dans 80 des
feuilles pigmenteacutees 69 des fruits et 50 des fleurs respectivement (33)
Dans les baies les anthocyanosides sont retrouveacutes sont la forme de mono di ou triglycosides
ougrave les reacutesidus glycosides sont principalement lieacutes agrave C-3 et moins freacutequemment agrave C-5 ou C-7
Les sucres les plus courants sont le glucose le galactose le rhamnose lrsquoarabinose le rutinose
le sambubiose et le sophorose De plus les glycosides des anthocyanosides sont souvent
acyleacutes par des acides comme les acides p-coumarique cafeacuteique feacuterulique et moins
couramment par les acides p-hydroxybenzoiumlque malonique ou aceacutetique (58)
26
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines (65)
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont des pigments solubles dans lrsquoeau ils sont instables agrave la lumiegravere agrave
la tempeacuterature et agrave lrsquooxygegravene Ils agissent en rapport au cation flavylium qui est agrave la fois un
diacide faible et un bon eacutelectrophile Agrave pH tregraves acide (lt agrave 3) la forme cationique coloreacutee en
rouge est stable Agrave pH moins acide (entre 4 et 6) la moleacutecule perd deux protons donnant une
moleacutecule neutre ou ioniseacutee devenant une forme quinonoiumlde coloreacutee en bleu et stabiliseacutee par
reacutesonnance Lrsquohydratation de la moleacutecule conduit agrave la formation drsquoune laquo pseudo-base raquo
carbinolique incolore et si le pH augmente la moleacutecule se transforme en pheacutenate (forme
ioniseacutee) la structure anthocyanique eacutetant deacutetruite Ainsi les anthocyanosides en milieu neutre
ou tregraves peu acide perdent leur coloration Or dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques le
pH est tregraves rarement infeacuterieur agrave 3 Sa coloration dans le milieu vivant peut donc srsquoexpliquer
par trois meacutecanismes qui permettent une protection ou une stabilisation de la moleacutecule
- soit un meacutecanisme par lequel les acides acylant les sucres forment un laquo sandwich raquo
autour de la geacutenine permettant une copigmentation intramoleacuteculaire
- soit par une auto-copigmentation se traduisant par lrsquoempilement intermoleacuteculaire
drsquoanthocyanosides se proteacutegeant les uns avec les autres
- soit par une copigmentation avec les flavonoiumldes (11)
27
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides
41 Extraction
Les anthocyanosides sont solubles dans les solvants polaires et lrsquoextraction agrave partir des plantes
est reacutealiseacutee en utilisant du meacutethanol qui contient de faibles quantiteacutes drsquoacide chlorhydrique ou
drsquoacide formique Il est preacutefeacuterable drsquoutiliser des acides plus faibles comme lrsquoacide aceacutetique
tartrique ou citrique des acides volatils ou travailler en milieu neutre et agrave basse tempeacuterature
pour empecirccher la deacutesacylation des anthocyanosides
Lrsquoaceacutetone peut aussi ecirctre utiliseacutee pour lrsquoextraction des anthocyanosides de plusieurs plantes
Par rapport au meacutethanol acidifieacute lrsquousage de ce solvant a lrsquoavantage drsquoecirctre une technique plus
efficace et reproductible
Lrsquoextraction en phase solide peut ecirctre utiliseacutee pour la purification initiale des extraits crus
drsquoanthocyanosides (33)
42 Seacuteparation et identification
Pour la seacuteparation et lrsquoanalyse de la structure des anthocyanosides lrsquoutilisation de la
chromatographie liquide coupleacutee agrave la spectromeacutetrie de masse permet de combiner la
seacuteparation de la chromatographie liquide avec la sensibiliteacute et la seacutelectiviteacute de la spectromeacutetrie
de masse (33) Drsquoautres meacutethodes chromatographiques peuvent ecirctre utiliseacutees pour leur
seacuteparation comme les colonnes de polyamide de polyvinylpyrrolidone les reacutesines
eacutechangeuses drsquoions la chromatographie sur couche mince preacuteparative sur cellulose (10)
Lrsquoanalyse des plantes agrave anthocyanosides peut ecirctre reacutealiseacutee par la chromatographie liquide
associeacutee agrave un deacutetecteur agrave barrettes de diodes Cette analyse peut ecirctre faite par lrsquoeacutelectrophoregravese
capillaire qui selon Szajdek et coll (58) est une meacutethode avec une tregraves bonne sensibiliteacute une
haute reacutesolution coupleacutee agrave une basse consommation drsquoeacutechantillon et enfin un moindre
laquo gaspillage raquo des solvants utiliseacutes
Drsquoautres meacutethodes plus perfectionneacutees ne peuvent ecirctre utiliseacutees que par des laboratoires de
recherche
43 Dosage des anthocyanosides
Le dosage se fait par spectrophotomeacutetrie aux longueurs drsquoonde des maximums drsquoabsorption
des anthocyanosides (λ = 520 nm) Il peut ecirctre fait sur une solution alcoolique acide ou sur un
jus acidifieacute Dans tout les cas il faut le faire en milieu tregraves dilueacute pour empecirccher les moleacutecules
drsquoanthocyanosides de srsquoassocier les unes avec les autres (11)
28
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
51 Composition en anthocyanosides
Les baies de V myrtillus contiennent environ quinze anthocyanosides ces heacuteteacuterosides sont
des O-glucosides des O-galactosides et des O-arabinosides en C-3 du cyanidol du peacuteonidol
du delphinidol du malvidol et du peacutetunidol (Figure 15)
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus (14)
29
52 Donneacutees quantitatives
Vaccinum myrtillus contient une quantiteacute importante drsquoanthocyanosides (300 agrave
698 mg100 g) Lrsquoeacutequipe de Prior et coll (50) a montreacute que la quantiteacute drsquoanthocyanosides
augmente avec la maturiteacute du fruit lors de la reacutecolte
Burdulis et coll (12) ont eacutetudieacute la diversiteacute des anthocyanosides du fruit de V myrtillus dans
diffeacuterents pays comme la Lituanie la Suegravede la Russie et la Bieacutelorussie ainsi que dans
diffeacuterentes reacutegions de Lituanie comme Šilutė Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees en
anthocyanosides ont eacuteteacute retrouveacutees dans les baies ramasseacutees en Russie et en Suegravede Ces
reacutesultats sont lieacutes agrave la cueillette tardive des baies et agrave lrsquoemplacement plus au nord des
cultures en effet les baies eacutetaient plus mucircres et avaient donc une plus haute contenance en
anthocyanosides Par contre la quantiteacute en Beacuteliorussie et en Lituanie est similaire
53 Donneacutees qualitatives
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Burdulis et coll (12) ont observeacute que lrsquoanalyse
chromatographique ne reacutevegravele pas de diffeacuterence dans la composition qualitative des
anthocyanosides Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees sont repreacutesenteacutees par la cyanidine (quantiteacute
moyenne de 53 ngml) suivie de la delphinidine et la peacutetunidine en quantiteacute 25 fois plus
faible que la cyanidine et pour terminer la malvidine et la peacuteonidine en quantiteacute encore plus
faible En Suegravede seule la malvidine a eacuteteacute retrouveacutee en plus grande quantiteacute parmi tous les
anthocyanosides (15 fois plus eacuteleveacutee que celle de la peacutetunidine et la delphinidine)
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus
Riihinen et coll (53) ont eacutetudieacute la distribution des composeacutes pheacutenoliques dans les diffeacuterents
organes de V myrtillus et drsquoun hybride entre le V corymbosum et V augustifolium
Ainsi les anthocyanosides sont preacutesents dans la pulpe et la peau des fruits de V myrtillus
constituant 2 du poids frais de la peau de la baie cela indique que lrsquoextraction du jus agrave
partir de la peau pourrait ecirctre une source riche drsquoanthocyanosides Les feuilles rouges des
myrtilles ont de faibles quantiteacutes drsquoanthocyanosides et ne contiennent que des glycosides de
cyanidine alors que les fruits contiennent les cinq types drsquoanthocyanosides (delphinidine
cyanidine peacuteonidine peacutetunidine et malvidine-glycosides) Les feuilles sont donc des sources
moins inteacuteressantes pour lrsquoutilisation nutraceutique et pharmaceutique que les fruits
30
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
Des eacutetudes ont eacuteteacute reacutealiseacutees sur la pharmacocineacutetique des anthocyanosides agrave partir drsquoun
produit commercial le Myrtocyanreg Celui-ci est un extrait hautement purifieacute de baies de
Vaccinum myrtillus dans lequel les anthocyanosides sont les composants actifs les plus
importants (36)
Lorsque lrsquoextrait est injecteacute chez le rat par voie intraveineuse ou parenteacuterale aux doses de 20-
40 mgkg ou 25 mgkg respectivement les anthocyanosides disparaissent de la circulation
sanguine et sont distribueacutes rapidement dans les tissus Lrsquoeacutelimination se fait de faccedilon
preacutedominante par les urines (25-30) 24 heures apregraves lrsquoadministration et une plus faible
quantiteacute est eacutelimineacutee via la bile (15-20)
Le Myrtocyanreg
injecteacute par voie intrapeacuteritonale agrave la dose de 200 mgkg montre que les
anthocyanosides ont une affiniteacute particuliegravere pour certains tissus notamment les tissus reacutenaux
et cutaneacutes dans ces tissus les anthocyanosides y demeurent plus longtemps que dans le
plasma Cette observation pourrait expliquer leur effet biologique agrave long terme
Lrsquoadministration orale de Myrtocyanreg
agrave la dose de 400 mgkg chez le rat montre que les
anthocyanosides sont rapidement absorbeacutes par le tractus gastro-intestinal et atteignent un pic
plasmatique quinze minutes apregraves lrsquoadministration Par contre ils ne demeurent pas
longtemps dans le sang car aucune concentration ne peut ecirctre mesureacutee apregraves deux heures Par
voie orale environ 4 des anthocyanosides sont eacutelimineacutes par la bile apregraves 24 heures
En conclusion par voie orale la biodisponibiliteacute faible des anthocyanosides peut ecirctre due agrave
une forte meacutetabolisation heacutepatique en meacutetabolites non deacutetectables par la meacutethode analytique
Le pic plasmatique de 2-3 microgml drsquoanthocyanosides non modifieacutes pourrait ecirctre suffisant pour
garantir les effets biologiques des anthocyanosides apregraves une administration orale Enfin des
tests in vitro ont reporteacute une activiteacute des anthocyanosides agrave des concentrations de 2 agrave 7 microgml
(43)
En 2006 Ichiyanagi et coll (28) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute et la distribution dans les tissus
drsquoun autre extrait de V myrtillus (Bilberon 25reg
constitueacutes de 25 anthocyanosides) administreacute
oralement ou par voie intraveineuse agrave des rats
Pour rappel les aglycones sont de cinq types la cyanidine la delphinidine la peacutetunidine la
peacuteonidine et la malvidine
Seules la malvidine la peacuteonidine et la peacutetunidine sont des structures aglycones meacutethyleacutes ces
anthocyanidines sont glycosyleacutees pour former les anthocyanosides qui repreacutesentent une
structure beaucoup plus stable Trois sortes de sucres sont rattacheacutees agrave la structure le
glucose le galactose et lrsquoarabinose
31
Ainsi le niveau plasmatique de chaque anthocyanoside est eacutevalueacute par chromatographie
liquide haute performance Lrsquoeacutetude montre clairement que lrsquoabsorption le meacutetabolisme et
lrsquoeacutelimination sont diffeacuterents pour chaque anthocyanoside Ichiyanagi et coll (27) ont calculeacute
le rapport C15dose deacutefini par la concentration plasmatique de chaque anthocyanoside quinze
minutes apregraves administration orale diviseacutee par sa concentration initiale dans lrsquoextrait de
Bilberon 25reg
(soit le rapport C15dose) La comparaison de ces rapports a montreacute que pour les
anthocyanosides posseacutedant le mecircme aglycone les galactosides ont un rapport C15dose plus
important suivi des glucosides et des arabinosides agrave lrsquoexception de la malvidine La
diffeacuterence est significative entre les anthocyanosides glucosides et galactosides Par contre
lorsque les anthocyanosides portant le mecircme sucre sont compareacutes les glycosides de cyanidine
et delphidine preacutesentent des valeurs plus eacuteleveacutees que les glycosides de malvidine et
peacutetunidine alors que la peacuteonidine 3-O-β-D-galactoside affiche les valeurs les plus hautes
parmi tous les anthocyanosides
En conclusion les niveaux plasmatiques deacutependent de plusieurs facteurs tels que lrsquoabsorption
gastro-intestinale le taux de distribution dans les tissus et leur excreacutetion via les urines et la
bile
La demi-vie est eacutevalueacutee par administration intraveineuse de lrsquoextrait pour les
anthocyanosides portant le mecircme sucre les demi-vies de la delphinidine et de la cyanidine
sont plus eacuteleveacutees que leurs analogues O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacuteonidine et la
peacutetunidine Par contre lorsque les auteurs comparent les sucres porteacutes par le mecircme aglycone
aucune diffeacuterence significative nrsquoest observeacutee entre les galactosides et les glucosides mais les
arabinosides affichent des valeurs plus faibles Seule la malvidine ne preacutesente pas de
diffeacuterence significative entre galactoside et arabinoside compareacutee aux autres anthocyanidines
Ichiyanagi et coll (28) ont eacutevalueacute la biodisponibiliteacute de chaque anthocyanoside Celle-ci varie
de 061 agrave 182 et elle est de 093 dans le meacutelange de lrsquoextrait Bilberon 25reg
Ainsi la
biodisponibiliteacute des anthocyanosides O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacutetunidine et la
peacuteonidine est plus eacuteleveacutee que la delphinidine et la cyanidine particuliegraverement pour les
galactosides (diffeacuterence significative entre la cyanidine et la peacuteonidine galactoside et entre la
delphinidine et la peacutetunidine arabinoside) Cependant les biodisponibiliteacutes des glycosides de
peacutetunidine sont plus eacuteleveacutees que celles des glycosides de malvidine mecircme si la malvidine est
lrsquoanalogue O-meacutethyl de la peacutetunidine-glycoside Ainsi la biodisponibiliteacute importante des
glycosides de peacutetunidine pourraient ecirctre expliqueacutee par une absorption gastro-intestinale
prolongeacutee De plus lrsquoexceptionnelle forte biodisponibiliteacute de la peacuteonidine 3-O-β-D-
galactoside traduirait une absorption gastro-intestinale plus efficace Lorsque les auteurs
32
comparent la biodisponibiliteacute entre les anthocyanosides sur la base du type de sucre attacheacute agrave
la structure les galactosides preacutesentent la plus haute valeur suivis des arabinosides puis des
glucosides qui preacutesentent les valeurs les plus basses (agrave lrsquoexception de la delphinidine et de la
malvidine)
Ces eacutetudes sur le meacutetabolisme et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides montrent que les
anthocyanosides majoritairement retrouveacutes dans lrsquourine et la bile sont les glycosides de
peacuteonidine et malvidine crsquoest-agrave-dire des anthocyanosides O-meacutethyleacutes Les pourcentages des
anthocyanosides dans les urines et la bile durant les quatre premiegraveres heures apregraves
administration intraveineuse sont seulement de 308 et 134 respectivement suggeacuterant une
meacutetabolisation ou une accumulation des anthocyanosides dans les tissus La quantiteacute et la
nature des anthocyanosides dans le foie et les reins diffegraverent de ceux du meacutelange Bilberon
25reg
indiquant une meacutetabolisation heacutepatique et reacutenale De plus lrsquoapparition de nouveaux pics
montreacutes par la chromatographie liquide haute performance souligne la preacutesence de
meacutetabolites drsquoanthocyanosides
En ce qui concerne la distribution dans les tissus les auteurs ont montreacute qursquoapregraves 15 minutes
drsquoune administration orale de lrsquoextrait de V myrtillus les anthocyanosides retrouveacutes
majoritairement dans les reins et le foie sont des glycosides de peacuteonidine et de malvidine les
anthocyanosides deacutetecteacutes sont des glucosides et galactosides de peacuteonidine malvidine et
peacutetunidine des meacutetabolites 4rsquo-O-meacutethyl de cyanidine delphinidine et peacutetunidine 3-O-β-D-
glucoside ou galactoside alors que les arabinosides ne sont pas deacutetecteacutes agrave lrsquoexception du 4rsquo-
O-meacutethyl delphinidine 3-O-α-L-arabinoside Les meacutetabolites comme les glucosides-
glucuronides de cyanidine et de delphinidine sont aussi preacutesents dans les tissus
particuliegraverement au niveau reacutenal
Apregraves administration intraveineuse les glycosides de cyanidine et delphinidine sont preacutesents agrave
lrsquoeacutetat de traces dans les tissus
Pour conclure plusieurs points ont pu ecirctre eacutetablis et clarifieacutes premiegraverement tous les
anthocyanosides de lrsquoextrait atteignent leur niveau plasmatique maximum en 15 agrave 30 minutes
apregraves administration orale soulignant une absorption efficace au niveau de lrsquoestomac et de
lrsquointestin grecircle Cette absorption deacutepend du type de sucre attacheacute agrave lrsquoaglycone les galactosides
eacutetant par exemple plus efficacement absorbeacutes que les arabinosides Deuxiegravemement la
biodisponibiliteacute deacutepend de plusieurs facteurs comme le meacutetabolisme lrsquohydrophobiciteacute du
cycle B de lrsquoaglycone et le type de sucre attacheacute agrave la structure De plus la synergie entre
anthocyanosides eux-mecircmes ou anthocyanosides avec drsquoautres composants preacutesents dans
lrsquoextrait peuvent moduler lrsquoabsorption au niveau du tractus gastro-intestinal
33
Sakakibara et coll (54) ont eacutetudieacute la distribution et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides chez la
souris apregraves une administration orale de 100 mgkg de poids corporel de V myrtillus
Les anthocyanosides absorbeacutes sous leur forme initiale ou meacutethoxyleacutee quinze minutes apregraves
une administration orale sont eacutelimineacutes via les urines dans les vingt quatre heures La totaliteacute
des anthocyanosides atteignent une concentration plasmatique maximale drsquoenviron 12 microM
quinze minutes apregraves administration orale puis cette concentration diminue brusquement Les
glycosides de malvidine pourraient ecirctre les anthocyanosides majoritaires dans des conditions
physiologiques en effet les anthocyanosides meacutethoxyleacutes ont des proprieacuteteacutes leur permettant
de demeurer dans lrsquoorganisme apregraves absorption De plus les glycosides de delphinidine et
cyanidine subissent une meacutethylation pouvant donner les glycosides de peacuteonidine et malvidine
par conseacutequent les anthocyanosides meacutethoxyleacutes peuvent ecirctre produits par la conversion
drsquoautres anthocyanosides eacutegalement absorbeacutes
Lrsquoexcreacutetion urinaire des anthocyanosides apregraves administration de 500 mgkg de poids corporel
de lrsquoextrait de V myrtillus a montreacute que les anthocyanosides sont eacutelimineacutes dans lrsquourine dans
les six premiegraveres heures apregraves administration orale De faibles quantiteacutes sont eacutelimineacutees entre 6
et 24 heures dont un unique pic drsquoexcreacutetion entre 6 et 12 heures Les quantiteacutes
drsquoanthocyanosides excreacuteteacutees dans lrsquourine dans les 24 heures suivant lrsquoadministration sont
faibles et ne repreacutesentent que 188 des anthocyanosides totaux ingeacutereacutes Par conseacutequent
quelque soit les quantiteacutes drsquoextrait administreacutees les anthocyanosides absorbeacutes par le corps
sont excreacuteteacutes par voie urinaire en 24 heures
Lrsquoeacutetude de la distribution des antocyanosides dans les organes a eacuteteacute reacutealiseacutee sur des souris
ayant une alimentation contenant 05 des anthocyanosides de V myrtillus durant 2
semaines Ce sont les glycosides de malvidine (surtout le 3-glucoside et 3-galactoside de
malvidine) les anthocyanosides majoritairement preacutesents dans des organes tels que le foie les
reins les testicules et les poumons Lrsquoeacutetude de Sakakibara et coll (54) est la premiegravere agrave avoir
montreacute la preacutesence des anthocyanosides dans les testicules de souris
Les auteurs montrent aussi que le foie est sucircrement lrsquoorgane cible des anthocyanosides car
515 y sont localiseacutes Par contre les anthocyanosides nrsquoont pas eacuteteacute deacutetecteacutes dans la rate le
thymus le cœur les muscles le cerveau la graisse blanche ou les yeux
Chez lrsquohomme la plupart des eacutetudes montrent une faible biodisponibiliteacute des anthocyanosides
(faible taux drsquoexcreacutetion) (3)
Cooke et coll en 2006 (18) ont deacutemontreacute la preacutesence dans lrsquourine drsquoanthocyanosides sous
forme inchangeacutee et de glucuronides drsquoanthocyanidines (meacutetabolites) apregraves une administration
orale de Mirtoselectreg
La preacutesence de glucuronides drsquoanthocyanidines dans lrsquourine suggegravere
34
une transformation des anthocyanosides en leurs deacuteriveacutes non glycosyleacutes lesquels subiront
plus tard une biotransformation Les anthocyanidines sont suspecteacutees pour avoir une meilleure
activiteacute biologique que leurs preacutecurseurs glycosyleacutes
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus
1 Acides pheacutenoliques
Les acides pheacutenoliques dans les fruits des baies sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique et benzoiumlque Le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide benzoiumlque inclus les acides p-
hydroxybenzoiumlque salicylique gallique et ellagique Dans le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique on trouve les acides p-coumarique cafeacuteique et feacuterulique Les deacuteriveacutes drsquoacide
hydroxycinnamique sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide cafeacuteique comme les acides
chlorogeacutenique et neacuteochlorogeacutenique Dans Vaccinum myrtillus des quantiteacutes significatives
drsquoacides p-coumarique et feacuterulique sont retrouveacutees Lrsquoacide hydroxycinnamique se trouve
dans tous les organes de la myrtille mais les quantiteacutes les plus importantes sont retrouveacutees
dans les feuilles il est le principal composeacute pheacutenolique du rhizome Cet acide
hydroxycinnamique joue un rocircle dans la protection de la plante vis-agrave-vis drsquoagents pathogegravenes
et drsquoautres facteurs de stress comme une radiation solaire intense une basse tempeacuterature ou
une blessure (58)
2 Tanins
Les tanins sont des composeacutes pheacutenoliques hydrosolubles importants dans les fruits des baies
Ils sont de deux types
- les tanins hydrolysables (oligo- ou polyesters drsquoun sucre et drsquoun nombre variant de
moleacutecules drsquoacide-pheacutenol) Le sucre est le plus souvent le glucose et lrsquoacide-pheacutenol est soit
lrsquoacide hexahydroxydipheacutenique et ses deacuteriveacutes drsquooxydation pour les tanins ellagiques soit
lrsquoacide gallique dans le cas des tanins galliques
- les tanins non hydrolysables condenseacutes sont des polymegraveres flavaniques constitueacutes
drsquouniteacutes flavan-3-ols lieacutees entre elles par des liaisons carbone-carbone On les appelle
eacutegalement les proanthocyanidols qui en milieu acide et agrave chaud donnent des anthocyanidols
(11)
Les tanins donnent le goucirct aux tartes et sont responsables du changement de couleur des fruits
et des produits deacuteriveacutes des fruits Le goucirct des tartes reacutesulte de lrsquointeraction entre les tanins et
les reacutecepteurs gustatifs de la bouche De plus les tanins stabilisent les anthocyanosides
35
preacutesents en quantiteacute importante dans le fuit de la myrtille en se liant agrave eux pour former des
copolymegraveres (58)
Dans V myrtillus les feuilles vertes et rouges sont les meilleures sources de procyanidines
Leurs proportions dans les feuilles sont drsquoenviron 7 du poids sec il conviendrait donc
drsquoapporter un inteacuterecirct aux feuilles qui actuellement lors de la reacutecolte et du traitement des
fruits constituent des deacutechets alors que ce sont des parties de la plante riche en
proanthocyanidines connus pour leurs activiteacutes antimicrobiennes et antioxydantes (53)
3 Flavonols
Les flavanols sont repreacutesenteacutes par la querceacutetine la myriceacutetine le kaempfeacuterol et
lrsquoisorhamneacutetine abondants dans les plantes alimentaires comme lrsquooignon le theacute les pommes
et les baies
Le fruit de V myrtillus contient de faccedilon preacutedominante de la querceacutetine eacutegalement preacutesent
avec le kaempfeacuterol dans les feuilles Cependant leur proportion est plus importante dans les
feuilles rouges que dans les feuilles vertes car les radiations solaires augmentent leur quantiteacute
(on peut supposer un rocircle dans la photoprotection) (58)
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans Vaccinium myrtillus
Les stilbegravenes sont un groupe de composants qui inclut notamment le resveacuteratrol retrouveacute
initialement dans les grappes de raisin De petites quantiteacutes de trans-resveacuteratrol ont eacuteteacute
retrouveacutees dans les baies et notamment dans la myrtille (de lrsquoordre de 678 microgg) Cette plante
contient eacutegalement de petites quantiteacutes de caroteacutenoiumldes (58)
Autres ces composeacutes pheacutenoliques la myrtille est eacutegalement constitueacutee drsquoun ensemble de
micro- et macronutriments reacutepertorieacute dans la table de composition nutritionnelle des aliments
du Ciqual (centre drsquoinformation sur la qualiteacute des aliments) 2008 de lrsquoAfssa (71) (Annexe I)
36
Troisiegraveme partie
Inteacuterecircts theacuterapeutiques
de Vaccinium myrtillus L
37
En Europe les baies et les feuilles de myrtille ont largement eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine
populaire les baies pour leurs proprieacuteteacutes astringentes toniques et antiseptiques dans le
traitement de la diarrheacutee la dysenterie (maladie infectieuse du cocirclon) les heacutemorroiumldes les
inflammations gastro-intestinales et les infections buccales (stomatites aphtes muguet des
enfants) Elles sont eacutegalement utiliseacutees pour les deacutesordres urinaires Quant aux feuilles elles
eacutetaient particuliegraverement utiliseacutees dans le diabegravete gracircce agrave leurs proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
En application locale une infusion ou une deacutecoction de feuilles de myrtilles eacutetaient utiliseacutees
lors drsquoinflammations oculaires buccales drsquoinfections cutaneacutees et dans les brucirclures
Agrave partir du XVIIIegraveme
des herboristes utilisaient la baie de myrtille dans des preacuteparations pour
traiter certaines maladies intestinales incluant la fiegravevre typhoiumlde elle eacutetait aussi utiliseacutee dans
les infections buccales cutaneacutees urinaires dans la goutte et le rhumatisme (43) Les usages
valideacutes par la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la Commission E seront
deacuteveloppeacutes dans la derniegravere partie de cette thegravese
La myrtille inteacuteresse encore actuellement les scientifiques et fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes
in vitro et in vivo elle est aussi preacutesente dans quelques eacutetudes cliniques Certaines de ces
eacutetudes seront reacutepertorieacutees dans les chapitres qui vont suivre
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire
En 1990 Morazzoni et coll (44) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vivo et in vitro drsquoun complexe
drsquoanthocyanosides de V myrtillus dont le nom deacuteposeacute est Myrtocyanreg
(contenant environ
38 drsquoanthocyanosides) sur lrsquoactiviteacute plaquettaire en comparaison avec drsquoautres anti-
agreacutegants plaquettaires comme lrsquoacide aceacutetylsalicylique le dipyridamole et la ticlopidine
Lrsquoeacutetude in vitro sur plasma de lapin montre un effet inhibiteur de V myrtillus sur lrsquoagreacutegation
plaquettaire induite par lrsquoadeacutenosine diphosphate (ADP) le collagegravene et lrsquoarachidonate de
sodium (sel drsquoacide arachidonique) cette inhibition est fonction de la concentration en
anthocynosides Cette activiteacute est comparable agrave celle du dipyridamole mais est moins efficace
que celle de lrsquoacide aceacutetylsalicylique Toutefois les anthocyanosides de la myrtille et le
dipyridamole sont tous les deux efficaces pour inhiber lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par
lrsquoADP exogegravene alors que lrsquoacide aceacutetylsalicylique nrsquoa pas montreacute drsquoactiviteacute Lrsquoeffet anti-
agreacutegant plaquettaire des anthocyanosides de V myrtillus perdure apregraves certaines
manipulations chimiques et physiques comme lrsquoeacutebullition pendant cinq minutes le chauffage
38
pendant trente minutes agrave 56degC la digestion agrave la trypsine et lrsquoincubation en preacutesence
drsquoadeacutenosine phosphate
Lrsquoaction in vitro des anthocyanosides de V myrtillus sur la circulation sanguine chez le rat
montre une inhibition de lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP de maniegravere dose-
deacutependante et par voie arteacuterielle
In vivo lrsquoadministration orale du complexe anthocyanosidique de V myrtillus agrave une
concentration variant de 5 agrave 400 mgkg chez le rat montre une augmentation du temps de
saignement Cette activiteacute du complexe perdure pendant 24 heures (mecircme observation avec
lrsquoassociation acide aceacutetylsalicylique-dipyridamole) et le temps de saignement retourne agrave des
valeurs normales apregraves 48 heures Par contre cette augmentation du temps de saignement nrsquoa
pas donneacute drsquoeffet ni sur lrsquoheacutematocrite ni sur les voies intrinsegraveques et extrinsegraveques de la
coagulation sanguine
Lrsquoadministration orale de 400 mgkg du complexe anthocyanosidique de myrtille agrave des souris
deux heures avant lrsquoeacutetude diminue lrsquoadheacutesion plaquettaire cette action eacutetant similaire agrave celle
observeacutee avec 100 mgkg de ticlopidine administreacutes dans les mecircmes conditions
expeacuterimentales
Morazzoni et coll (44) ont eacutegalement eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vitro drsquoun produit composeacute des trois
principaux anthocyanosides (malvidine 3-O-glucoside cyanidine 3-O-glucoside et
delphinidine 3-O-glucoside) trouveacutes dans lrsquoextrait Myrtocyanreg
afin de comprendre leur
impact sur lrsquoeffet anti-agreacutegant Ce meacutelange montre la mecircme activiteacute inhibitrice sur
lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP le collagegravene et lrsquoarachidonate de sodium que
lrsquoextrait Myrtocyanreg
Notons que les anthocyanosides du produit reconstitueacute sont retrouveacutes
avec le mecircme ratio que ceux de lrsquoextrait
Une eacutetude clinique incluant 30 patients en bonne santeacute avec une agreacutegation plaquettaire
normale a deacutemontreacute la capaciteacute drsquoanthocyanosides de myrtille Myrtocyanreg
administreacute
pendant 30 et 60 jours agrave la dose de 480 mgjour seul ou en association avec lrsquoacide ascorbique
(3 gjour) agrave reacuteduire lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par le collagegravene ou lrsquoADP La meilleure
activiteacute est deacutetenue par Myrtocyanreg
seul ou associeacute agrave lrsquoacide ascorbique compareacutee agrave la
vitamine C seule (5)
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus riche en anthocyanosides a montreacute une forte inhibition
de lrsquoagreacutegation plaquettaire dans des expeacuteriences in vivo et in vitro sans interfeacuterer avec les
facteurs plasmatiques Lrsquoactiviteacute des trois principaux anthocyanosides de lrsquoextrait Myrtocyanreg
a permis de mettre en eacutevidence leur forte implication dans lrsquoeffet anti-agreacutegant plaquettaire
De plus lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans lrsquoinhibition plaquettaire est
39
lrsquoaugmentation des niveaux drsquoadeacutenosine monophosphate cyclique (AMP cyclique) soit par
stimulation de lrsquoadeacutenylate cyclase soit par inhibition de lrsquoAMP cyclique-phosphodiesteacuterase
Or il a eacuteteacute observeacute que les aglycones de lrsquoextrait Myrtocyanreg
sont des inhibiteurs potentiels
de lrsquoAMP cyclique- phosphodiesteacuterase de plusieurs tissus Ce meacutecanisme nrsquoest pas le seul car
un autre a eacuteteacute proposeacute il concernerait les anthocyanidines (principalement la delphinidine et
la cyanidine) qui affecteraient les fonctions plaquettaires par leur action antioxydante cette
action se ferait en interfeacuterant avec les processus membranaires cellulaires incluant les eacutetapes
initiales plaquettaires et la production des prostaglandines des cellules endotheacuteliales
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires
Les anthocyanosides de V myrtillus (Myrtocyanreg
) sont couramment utiliseacutes comme agents
vasoprotecteurs inhibant lrsquoagreacutegation plaquettaire et la formation de thrombus De plus il a
eacuteteacute montreacute que les anthocyanosides de myrtille administreacutes per os (100 mgkg pc) reacuteduisent
la reacuteponse contractile du muscle lisse vasculaire et montrent une activiteacute prostacycline-like
(PGI2-like) (45) Cette eacutetude est en accord avec celle de Bettini et coll (9) qui ont montreacute que
les anthocyanosides de V myrtillus ont un effet relaxant in vitro pouvant ecirctre meacutedieacute par la
stimulation de la synthegravese de prostaglandines vasodilatatrices dans les vaisseaux sanguins
En conclusion agrave lrsquoinverse de lrsquoacide aceacutetylsalicylique qui in vivo reacuteduit la production
arteacuterielle de PGI2 en agissant comme un inhibiteur de la synthegravese des prostaglandines les
anthocyanosides de V myrtillus stimulent la production drsquoune substance PGI2-like par le tissu
vasculaire
Les anthocyanosides de myrtille comme drsquoautres bioflavonoiumldes srsquoopposent agrave la contraction
de plusieurs types de muscles lisses en reacuteponse agrave des agents varieacutes comme lrsquoangiotensine II la
seacuterotonine le baryum lrsquohistamine ou lrsquoaceacutetylcholine En effet lrsquoaceacutetylcholine agrave des
concentrations variant de 1 agrave 2 ngml induit une relaxation dans toutes les preacuteparations alors
qursquoagrave hautes concentrations elle induit une contraction (9)
Bettini et coll (9) ont rechercheacute eacutegalement lrsquoeffet vasodilatateur du complexe dans les
preacuteparations traiteacutees avec du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration du facteur
relaxant deacuteriveacute de lrsquoendotheacutelium (EDRF ou endothelium-derived relaxing factor) qui est une
substance vasodilatatrice
Le Myrtocyanreg agrave une concentration entre 50 et 200 microgml reacuteduit la reacuteponse contractile des
artegraveres coronaires agrave lrsquoaceacutetylcholine cette activiteacute est drsquoautant plus marqueacutee lorsque lrsquoacide
ascorbique est ajouteacute (100-300 microgml) Mais cet effet est diminueacute en preacutesence drsquoindomeacutetacine
ou drsquoaceacutetylsalicylate de lysine connus pour ecirctre des inhibiteurs de la cyclo-oxygeacutenase A des
40
concentrations entre 1 et 2 microgml ces deux substances nrsquoaffectent pas la diminution du tonus
induite par Myrtocyanreg alors qursquoagrave des concentrations plus eacuteleveacutees elles le reacuteduisent sans
toutefois lrsquoabolir complegravetement mecircme aux plus fortes concentrations
Une autre expeacuterience de cette eacutetude consiste agrave traiter les segments des artegraveres coronaires avec
du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration de lrsquoEDRF Selon la concentration le
bleu de meacutethylegravene a plusieurs effets entre 1 et 8 microgml il ne modifie pas le tonus des
preacuteparations entre 8 et 18 microgml il ne provoque qursquoune lente augmentation du tonus de
plusieurs preacuteparations alors qursquoentre 18 et 24 microgml il induit une reacuteelle augmentation du
tonus des artegraveres coronaires suivie drsquoune relaxation assez marqueacutee Lrsquoeffet des
anthocyanosides de Vaccinum myrtillus a eacuteteacute eacutetudieacute apregraves disparition de lrsquoeffet du bleu de
meacutethylegravene son effet relaxant perdure partiellement malgreacute le preacute-traitement au bleu de
meacutethylegravene
En conclusion lrsquoeffet vasodilatateur de Myrtocyanreg
deacutepend agrave la fois de la libeacuteration des
prostacyclines mais aussi drsquoune faciliteacute agrave libeacuterer lrsquoEDRF les prostacyclines et lrsquoEDRF sont
probablement les meacutediateurs fonctionnels des anthocyanosides de V myrtillus
2 Activiteacute vasoprotectrice
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique
Une preacuteparation drsquoanthocyanosides de V myrtillus eacutequivalant agrave 25 drsquoanthocyanosides
administreacutee par voie intrapeacuteritoneacuteale ou per os agrave des lapins montre une reacuteduction de la
permeacuteabiliteacute capillaire de la peau (augmentant avec le temps) preacutealablement stimuleacutee par le
chloroforme lrsquohistamine ou la bradykinine (36)
Jonadet et coll (29) ont compareacute sur des rats lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides
extraits de Vitis vinifera L de V myrtillus (Difrarelreg
) et de Pinus maritimus (appeleacute
maintenant Pinus pinaster Aiton) Ainsi lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides est
par ordre deacutecroissant la suivante anthocyanosides de Vitis vinifera gt anthocyanosides de V
myrtillus gt proanthocyanosides de Pinus maritimus Les auteurs soulignent que les
anthocyanosides agissent agrave travers une activiteacute anti-proteacuteasique deacutemontreacutee in vitro En effet
ils ont montreacute que les anthocyanosides des extraits preacutealablement citeacutes possegravedent des activiteacutes
inhibitrices vis-agrave-vis drsquoenzymes proteacuteolytiques comme lrsquoeacutelastase laquelle peut intervenir dans
la deacutegradation du tissu conjonctif des fibres eacutelastiques et jouerait un rocircle dans des affections
pathologiques comme lrsquoatheacuteroscleacuterose lrsquoemphysegraveme pulmonaire et lrsquoarthrite rhumatoiumlde Les
anthocyanosides apportent cette activiteacute anti-proteacuteasique en inhibant la libeacuteration des peptides
41
vasoactifs En effet lrsquoune des causes de lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire est
lrsquointervention de meacutediateurs chimiques comme lrsquohistamine la 5-hydroxytryptamine et les
kinines Enfin Jonadet et coll (29) ont reporteacute une activiteacute anti-trypsique et anti-
chymotrypsique (proteacuteases digestives) des substances pharmacologiques des extraits eacutetudieacutes
22 Action sur la reacutesistance capillaire
Lietti et coll (36) ont deacutemontreacute dans une expeacuterience lrsquointeacuterecirct des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus sur la reacutesistance vasculaire Pour cela ils les administrent par voie
intrapeacuteritoneacuteale agrave des rats preacutealablement alimenteacutes pendant 4 semaines avec une alimentation
deacuteficitaire en facteur P induisant ainsi une fragiliteacute capillaire Apregraves mesure agrave plusieurs
heures de la reacutesistance capillaire les reacutesultats montrent une eacuteleacutevation remarquable de la
reacutesistance capillaire de la peau induite par les anthocyanosides de V myrtillus Lrsquoactiviteacute est
maximale 4 heures apregraves le traitement et ne change pas apregraves 6 heures Cette activiteacute est
compareacutee avec celle de la rutine (substance de la famille des bioflavonoiumldes) laquelle montre
un effet comparable agrave 200 mgkg mais qui agrave 100 mgkg nrsquoest presque plus efficace
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Lietti et coll (36) ont montreacute que lrsquoadministration
des anthocyanosides de V myrtillus dans la patte de rats par voie intraveineuse et par voie
orale respectivement 15 et 60 minutes preacuteceacutedant lrsquoinjection de carrageacutenine (substance
induisant un œdegraveme) entraicircne une diminution de lrsquoœdegraveme formeacutee de maniegravere dose-
deacutependante En effet lrsquoutilisation de 200 mgkg de preacuteparation est plus efficace que 50 mgkg
sur le volume de lrsquoœdegraveme La dose de 200 mgkg permet une reacuteduction de lrsquoœdegraveme agrave 45
Lrsquoapplication topique de la preacuteparation 60 secondes suivant lrsquoinjection de carrageacutenine induit
eacutegalement une reacuteduction du volume de lrsquoœdegraveme agrave 39 Cette eacutetude montre lrsquoaction anti-
inflammatoire de V myrtillus
Les eacutetudes in vivo reacutealiseacutees sur des animaux montrent que les anthocyanosides de V myrtillus
sont vasoprotecteurs ils inhibent lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire augmentent la
reacutesistance vasculaire et reacuteduisent le volume de lrsquoœdegraveme de maniegravere dose-deacutependante et ses
activiteacutes perdurent dans le temps De plus ils sont plus efficaces que la rutine ou la
meacutepyramine (substance antiseacuterotoninergique et antihistaminergique) Enfin les
anthocyanidines restent longtemps dans les tissus de la peau riche en collagegravene et en
mucopolysaccharides Crsquoest pourquoi il serait inteacuteressant de mettre en place des expeacuteriences
42
pour eacutetudier la relation entre ces substances et les anthocyanosides afin de voir si ce lien
pourrait expliquer lrsquoactiviteacute pharmacologique exerceacutee sur les vaisseaux sanguins (36)
24 Action antiatheacuterogegravenique
En 2009 une eacutetude meneacutee par Mauray et coll (41) a deacutemontreacute qursquoune suppleacutementation
alimentaire avec des extraits de V myrtillus limitait la progression des leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques dans un modegravele de souris deacuteficitaire en apolipoproteacuteine E Lrsquoaction
inhibitrice du deacuteveloppement de la plaque atheacuteromateuse est indeacutependante des modifications
du statut antioxydant plasmatique des marqueurs biologiques du stress oxydant et du profil
lipidique suggeacuterant lrsquoimplication drsquoautres meacutecanismes drsquoactions (peut-ecirctre lrsquoaction anti-
inflammatoire) De plus des deux extraits utiliseacutes (lrsquoun riche en anthocyanosides extraits de
myrtilles non traiteacutees et le deuxiegraveme extraits de myrtilles fermenteacutees par des levures) la
meilleure activiteacute antiatheacuterogegravene est deacutetenue par lrsquoextrait de myrtilles fermenteacutees suggeacuterant la
formation par la fermentation de nouveaux composeacutes avec des proprieacuteteacutes beacuteneacutefiques pour la
santeacute les pigments polymeacuteriques deacuteriveacutes des anthocyanosides atteacutenueraient mieux les leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques que les anthocyanosides de lrsquoextrait non traiteacute En effet lors de la
fermentation les anthocyanosides se condensent avec drsquoautres composeacutes preacutesents dans le fruit
de la myrtille Il reste alors agrave deacuteterminer les composeacutes responsables de lrsquoeffet observeacute et les
meacutecanismes drsquoaction impliqueacutes
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice
Des reacutesultats pharmacologiques prometteurs des extraits de fruits de V myrtillus issus
drsquoeacutetudes cliniques encouragent leur utilisation chez lrsquohomme dans le traitement des maladies
vasculaires peacuteripheacuteriques pouvant associer fragiliteacute capillaire alteacuteration de la permeacuteabiliteacute et
insuffisances veineuses chroniques des membres infeacuterieurs Drsquoautres eacutetudes cliniques ont
montreacute lrsquoefficaciteacute de la myrtille dans les symptocircmes cliniques post-opeacuteratoires
Ainsi les anthocyanosides de V myrtillus (480 mg par voie orale pendant 30 jours) ont
montreacute leur capaciteacute agrave diminuer les symptocircmes subjectifs (douleur parestheacutesiehellip) et objectifs
(œdegraveme des membres pheacutenomegravenes dyschromiques de la peauhellip) de patients atteints du
syndrome variqueux des membres infeacuterieurs tout comme les patients souffrant de fragiliteacute
capillaire ougrave une administration orale drsquoanthocyanosides de V myrtillus (160-800 mgjour)
reacuteduit les symptocircmes cliniques drsquoune reacutesistance capillaire diminueacutee (peacuteteacutechies contusion
sang feacutecal occulte) (43)
43
Lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille Myrtocyanreg (480 mgjour pendant 30 agrave 180 jours) a eacuteteacute
deacutemontreacutee dans des eacutetudes porteacutees sur des patients diabeacutetiques dyslipideacutemiques souffrant de
maladies secondaires agrave une stase des membres infeacuterieurs comme le syndrome preacute-variqueux
les varices essentielles le syndrome post-phleacutebitique et plusieurs maladies vasculaires
atheacuteroscleacuterotiques (43) Une eacutetude double-aveugle et controcircleacutee par placebo incluant 47
patients atteints de deacutesordres vasculaires drsquoorigine varieacutee a deacutemontreacute la capaciteacute de
Myrtocyanreg agrave reacuteduire les symptocircmes subjectifs et objectifs de la pathologie (diminution de la
douleur de la parestheacutesie de lrsquoœdegraveme et de la mobilisation des extreacutemiteacutes des doigts chez les
patients avec syndrome de Raynaud) Une eacutetude meneacutee sur 568 patients souffrants
drsquoinsuffisance veineuse des membres infeacuterieurs a montreacute la capaciteacute des anthocyanosides agrave
faire disparaitre les symptocircmes et agrave ameacuteliorer la microcirculation et le drainage lymphatique
(43)
Lrsquoefficaciteacute de la myrtille (320 mgjour pendant 60 agrave 90 jours) a mecircme eacuteteacute deacutemontreacutee chez 54
femmes enceintes souffrant de phleacutebite secondaire agrave stase veineuse (diminution de la douleur
de lrsquoœdegraveme de la fragiliteacute capillairehellip) et des patients avec bronchite chronique et
asthmatique (reacuteduction par lrsquoextrait de V myrtillus agrave 480 mgjour pendant 10 agrave 30 jours des
modifications microcirculatoires induites par la corticotheacuterapie) (43)
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA)
Pour rappel lrsquoECA (dipeptidylcarboxypeptidase) est une enzyme impliqueacutee dans le systegraveme
reacutenine-angiotensine (lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans la reacutegulation de la pression
arteacuterielle) permettant la conversion de lrsquoangiotensine I inactive en angiotensine II active Cette
derniegravere est capable drsquoaugmenter la pression sanguine et la pression de perfusion reacutenale les
inhibiteurs de lrsquoECA (IEC) constituent alors la premiegravere ligne de traitement pour
lrsquohypertension arteacuterielle et lrsquoinsuffisance cardiaque Les deux sites actifs de lrsquoACE
contiennent un atome de Zn2+
et les IEC sont capables de se lier agrave cet atome (47)
Personn et coll (47) ont rapporteacute dans une eacutetude in vitro la proprieacuteteacute drsquoun extrait de V
myrtillus agrave inhiber lrsquoECA peut-ecirctre par sa capaciteacute agrave cheacutelater des ions meacutetaux comme Zn2+
ou
Fe2+
cette inhibition eacutetant plus forte que les anthocyanidines combineacutees ou seacutepareacutees
deacutemontre lrsquoimplication drsquoautres composeacutes de la plante dans cette action En effet V myrtillus
ne contient pas seulement des anthocyanosides et anthocyanidines mais aussi de la querceacutetine
(flavonol) du stilbegravene resveacuteratrol des acides feacuterulique et coumarique Crsquoest la composition
speacutecifique de la plante qui semble ecirctre agrave lrsquoorigine de lrsquoeffet observeacute
44
Par conseacutequent le lien entre V myrtillus et lrsquoECA pourrait expliquer les effets
pharmacologiques de la plante sur la circulation cette plante pouvant ecirctre alors utiliseacutee en
preacutevention des maladies cardiovasculaires
5 Action sur lrsquoangiogenegravese
Lrsquoangiogenegravese se deacutefinit comme la formation de nouveaux vaisseaux sanguins agrave partir de
vaisseaux preacuteexistants (neacuteovascularisation) Elle est indispensable dans de nombreux
processus physiologiques comme le deacuteveloppement embryonnaire lrsquoimplantation du placenta
mais peut aussi contribuer agrave des processus pathologiques comme la croissance des tumeurs et
le deacuteveloppement des meacutetastases Lrsquoangiogenegravese se fait par plusieurs eacutetapes qui se trouvent
ecirctre les mecircmes dans lrsquoensemble des processus
- activation des cellules endotheacuteliales
- deacutegradation de la membrane basale et de la matrice extra-cellulaire
- migration orienteacutee des cellules endotheacuteliales
- prolifeacuteration cellulaire
- diffeacuterenciation des cellules endotheacuteliales en une structure de type capillaire pour
former une structure vasculaire permettant le deacuteveloppement des tissus
Lrsquoangiogenegravese est controcircleacutee par plusieurs facteurs inducteurs ou inhibiteurs dont le facteur de
croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire (VEGF ou vascular endothelial growth factor)
reacutegulateur cleacute de lrsquoangiogenegravese (73)
En 2007 Matsunaga et coll (40) ont eacutetudieacute in vitro lrsquoaction de V myrtillus sur lrsquoangiogenegravese
plus preacuteciseacutement sur la formation des tubules vasculaires la prolifeacuteration et la migration des
cellules ainsi que leur action sur la phosphorylation de proteacuteines kinases comme ERK 12
(laquo extra-cellular signal-regulated kinase raquo ou kinase reacuteguleacutee par le signal extra-cellulaire)
phospholipase Cγ et Akt (constitueacutes de trois enzymes appartenant agrave la famille des proteacuteines
kinases) induite par le VEGF Lrsquoeacutetude deacutemontre les effets inhibiteurs des extraits de myrtille
sur les paramegravetres de lrsquoangiogenegravese sur des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales
humaines co-cultiveacutees avec des fibroblastes Ainsi entre 1 et 30 microgml-1
lrsquoextrait de
Vaccinum myrtillus inhibe significativement la surface des tubules vasculaires la longueur
lrsquoenchevecirctrement des tubules et le nombre de reacuteseaux formeacutes A 3 microgml-1
ou plus lrsquoextrait
reacuteduit lrsquoensemble des paramegravetres de lrsquoangiogenegravese
Lrsquoextrait inhibe la prolifeacuteration (inhibition significative agrave 3 microgml-1
) et la migration
(inhibition significative agrave 10 et 30 microgml-1
) des cellules induites par VEGF-A de maniegravere
dose-deacutependante ceci ne se voyant qursquoen preacutesence du facteur de croissance
45
La phosphorylation des proteacuteines kinases comme ERK 12 est important dans la prolifeacuteration
des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales humaines et celle de Akt est une eacutetape
importante dans la prolifeacuteration et la migration de ces cellules
Les auteurs deacutemontrent la capaciteacute de V myrtillus agrave inhiber lrsquoaugmentation de la
phosphorylation de ces deux proteacuteines kinases mais pas la phosphorylation de la PLCγ
indiquant que lrsquoextrait agit en aval de celle-ci dans la cascade de signalisation induite par le
VEGF
Lrsquoeacutetude in vivo mise en place par Matsunaga et coll (39) chez la souris a permis de montrer
lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoextrait de V myrtillus dans la formation de reacuteseaux neacuteovasculaires dans
la reacutetinopathie induite par oxygegravene
II Action de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes
Un radical libre est une espegravece chimique qui possegravede un eacutelectron ceacutelibataire sur sa couche
peacuteripheacuterique Les radicaux libres qui interviennent dans le stress oxydant ont un eacutelectron
ceacutelibataire centreacute sur un atome drsquooxygegravene On les nomme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
(ERO) Plusieurs ERO existent comme le radical superoxyde le radical perhydroxyle (forme
protoneacutee du superoxyde) le radical hydroxyle le radical peroxyle et le radical alkoxyle Les
radicaux ne sont pas seulement formeacutes au cours des pheacutenomegravenes de stress oxydant mais
eacutegalement lors du meacutetabolisme normal de lrsquooxygegravene in vivo mecircme si ils ne sont geacuteneacutereacutes
qursquoen faible quantiteacute En effet crsquoest au niveau de la chaine respiratoire de la mitochondrie ougrave
85 de lrsquooxygegravene sont meacutetaboliseacutes que se produit la reacuteduction complegravete par 4 eacutelectrons de la
moleacutecule drsquoO2 conduisant agrave la formation drsquoeau La reacuteduction de la moleacutecule ne peut se faire
que par lrsquoenchainement de plusieurs eacutetapes donnant naissance agrave des intermeacutediaires reacuteduits de
lrsquooxygegravene La reacuteduction monoeacutelectronique de lrsquooxygegravene consommeacute au niveau
mitochondriale fournit lrsquoanion superoxyde (O2-) qui est une espegravece toxique Mais des
enzymes antioxydantes comme les superoxydes dismutases vont reacuteguler lrsquoanion superoxyde
en catalysant leur dismutation et en produisant le peroxyde drsquohydrogegravene (H2O2) Ce dernier
nrsquoest pas un radical libre mais une moleacutecule posseacutedant tous ses eacutelectrons apparieacutes Cependant
dans des reacuteactions in vivo comme la reacuteaction de Fenton et en preacutesence de cations meacutetalliques
comme Fe2+
ou Cu+ le H2O2 devient toxique en donnant les radicaux libres les plus neacutefastes
du stress oxydant que sont les radicaux hydroxyles (OH) De mecircme que le radical
superoxyde le peroxyde drsquohydrogegravene est reacuteguleacute in vivo par des systegravemes antioxydants comme
46
la catalase qui acceacutelegravere sa dismutation ou la glutathion peroxydase qui catalyse sa reacuteduction
par le glutathion
Ainsi le radical O2- le H2O2 et le radical OH forment les ERO (beaucoup plus reacuteactives que
lrsquooxygegravene) Cependant drsquoautres espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene existent comme les radicaux
peroxyles (RO2) les hydroperoxydes (RO2H) et les radicaux alkoxyles (RO)
Ces ERO tregraves reacuteactifs peuvent endommager les proteacuteines les lipides les glucides et les
acides nucleacuteiques par des reacuteactions drsquooxydation A cocircteacute des ERO il existe le monoxyde
drsquoazote radicalaire NO pouvant avoir des effets deacuteleacutetegraveres en reacuteagissant lors drsquoun stress
oxydant avec lrsquoO2-
pour former le peroxynitrite (ONOO-) tregraves reacuteactif et capable
drsquoendommager les proteacuteines les lipides et les acides nucleacuteiques On parle alors de stress
nitrosant
Crsquoest pourquoi il existe des systegravemes de deacutefense dans lrsquoorganisme (antioxydants) comme les
systegravemes de deacutefense enzymatique (superoxyde dismutase catalase glutathion
peroxydaseshellip) Toutefois le stress oxydant peut ecirctre important et les systegravemes de deacutefenses
deacutepasseacutes drsquoougrave la survenue ou lrsquoaggravation de pathologies comme lrsquoatheacuteroscleacuterose le diabegravete
sucreacute lrsquoischeacutemie ceacutereacutebrale le cancerhellip(21)
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides
Les anthocyanosides comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment sont des colorants
naturellement preacutesents dans les fleurs les fruits (particuliegraverement dans les baies) et les
leacutegumes Ce sont des pigments responsables de la couleur comme lrsquoorange le rouge le
bleuhellip Ils peuvent jouer plusieurs rocircles (attirer les insectes pour la pollinisation et la
dispersion des graines ou contribuer agrave la reacutesistance des plantes vis-agrave-vis drsquoattaques
exteacuterieures) Pour rappel les anthocyanosides sont des glycosides ou des acylglycosides des
anthocyanidines (les formes aglycones) Ils ont une structure de base flavylium et des
substitutions hydroxyles ou meacutethoxyles De plus ils sont tous O-glycosyleacutes avec diffeacuterents
sucres dont la preacutevalence est dans lrsquoordre deacutecroissant le glucose le rhamnose le xylose le
galactose lrsquoarabinose et le fructose Les anthocyanosides les plus preacutedominants sont des 3- ou
35-glycosyleacutes Quand le nombre de sucre augmente on observe une alternance sucre et
liaisons laquo acyl raquo De nombreuses eacutetudes ont reporteacute les effets positifs des anthocyanosides
dont certaines seront deacutecrites dans cette thegravese Certains de leurs effets sont attribueacutes agrave leurs
proprieacuteteacutes antioxydantes (64)
47
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma
En 2006 Talaveacutera et coll (59) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus (Antho 50reg
) et leur potentiel antioxydant sur le plasma de rats alimenteacutes
avec Antho 50reg pendant 8 jours Lrsquoeacutetude a montreacute une augmentation du statut antioxydant
plasmatique par cette administration mecircme si la biodisponibiliteacute eacutevalueacutee par excreacutetion
urinaire est basse Mais la chimie des anthocyanosides est complexe ceux-ci pourraient
subir une conversion en formes moins coloreacutees agrave cause de leur instabiliteacute agrave pH physiologique
ou meacutetaboliseacutes en composeacutes encore inconnus Quoiqursquoil en soit une consommation
quotidienne en anthocyanosides a un effet positif sur la capaciteacute antioxydant du plasma
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides
Lrsquoessai ORAC (oxygen radical absorbance capacity ou capaciteacute drsquoabsorbance du radical
oxygegravene) est une mesure standardiseacutee du pouvoir antiradicalaire de substances pures ou en
meacutelange Apregraves extraction des principes actifs dans un meacutelange eau-eacutethanol pour les
moleacutecules hydrosolubles et eacutethanol pour les moleacutecules lipophiles le test par
spectrofluorimeacutetrie consiste en la mesure de la protection exerceacutee par la moleacutecule contre
lrsquooxydation de la fluoresceacuteine par un radical libre et stable le AAPH (22-azobis(2-
amidinopropane) dihydrochloride) Les reacutesultats sont ensuite exprimeacutes par rapport au pouvoir
antioxydant exerceacute par une moleacutecule de reacutefeacuterence le Trolox (eacutequivalent hydrosoluble de la
vitamine E) rameneacute par le poids (en gramme) du produit que lrsquoon teste (75)
La valeur ORAC de la myrtille (446 micromol Troloxg de poids frais) est plus eacuteleveacutee que celle
drsquoautres baies (Figure 16) (58)
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies (58)
48
En 1997 Wang et coll (64) ont eacutevalueacute la capaciteacute antioxydante drsquoanthocyanidines communs
comme les aglycones de delphinidine cyanidine peacutelargonidine malvidine peacuteonidine et leurs
deacuteriveacutes glycosyleacutes Pour cela ils utilisent lrsquoessai ORAC avec geacuteneacuterateur de radical peroxyl
(ROO) Ainsi lrsquoeacutetude deacutemontre que les anthocyanidines posseacutedant la mecircme hydroxylation
sur le cycle A et C et une seule hydroxylation sur le cycle B comme la peacutelargonidine la
malvidine et la peacuteonidine ont une plus basse valeur ORAC que les anthocyanidines
dihydroxyleacutees sur le cycle B (3rsquo 4rsquo-di-OH) comme la cyanidine Les groupes hydroxyls en
position 3rsquo et 4rsquo du cycle B constituent un facteur important dans le pouvant antioxydant
seule la delphinidine eacutechappe agrave cette regravegle (plusieurs hydroxylations sur le cycle B mais
valeur ORAC plus faible) Mecircme si dans certains flavonoiumldes le nombre de groupes
hydroxyls augmentent la capaciteacute antioxydante ceci nrsquoest pas constateacute pour les
anthocyanosides ougrave la peacutelargonidine la cyanidine et la delphinide ayant 4 5 et 6 groupes
hydroxyls respectivement ont des valeurs ORAC respectives de 154 224 et 181 De plus la
glycosylation peut avoir aussi un effet sur lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides Elle
peut diminuer augmenter ou nrsquoavoir aucun effet sur le pouvoir antiradicalaire Par exemple
la 3-glycosylation du cycle C de la cyanidine augmente lrsquoactiviteacute ORAC pour le glucose et le
rhamnose mais la diminue pour le galactose Ainsi lrsquoordre deacutecroissant de lrsquoactiviteacute ORAC
pour la cyanidine est le suivant cyanidine 3-glucoside gt cyanidine 3-rhamnoside gt cyanidine
gt cyanidine 3-galactoside Mecircme lrsquoorientation du groupe hydroxyl affecte le pouvoir
antioxydant contre le radical peroxyl De plus lrsquoefficaciteacute drsquoun antioxydant agrave pieacuteger les
radicaux libres deacutepend aussi de sa capaciteacute agrave former un radical lui-mecircme stable Enfin le
classement des antioxydants par leur valeur ORAC deacutepend aussi de lrsquooxydant du radical libre
utiliseacute et de la meacutethode chimique employeacutee
Ainsi cette eacutetude a montreacute le fort pouvoir antioxydant des anthocyanosides ceux-ci sont
donc de bons candidats pour la preacutevention et le traitement de maladies mecircme si drsquoautres
eacutetudes sont neacutecessaires pour eacutelucider leur impact sur la santeacute humaine
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces
reacuteactives azoteacutees
Lrsquooxyde nitrique ou monoxyde drsquoazote radicalaire (NO) est un meacutediateur important
participant agrave des reacuteactions physiologiques dans les organismes vivants comme le
meacutetabolisme eacutenergeacutetique mitochondrial ou la transduction de signaux Cependant le NO peut
reacuteagir rapidement avec lrsquoO2- et former le peroxynitrite (ONOO
-) un fort oxydant tregraves reacuteactif
pouvant reacuteagir avec des moleacutecules biologiques comme les proteacuteines ou les acides nucleacuteiques
49
LrsquoONOO- participe agrave la formation de nitro-tyrosine dans les proteacuteines et agrave lrsquooxydation des
lipoproteacuteines de basse densiteacute responsable de la formation de plaques drsquoatheacuterome Les
radicaux NO sont geacuteneacutereacutes de faccedilon constitutive dans le cerveau sous des conditions
physiologiques LrsquoONOO- peut ecirctre lrsquoune des causes de deacutesordres ceacutereacutebraux (accidents
vasculaires ceacutereacutebraux ou maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie drsquoAlzheimer) (27)
En 2004 Ichiyanagi et coll (27) ont compareacute les reacuteactiviteacutes de 20 anthocyanosides extraits de
Vaccinum myrtillus contre les espegraveces reacuteactives azoteacutees et oxygeacuteneacutees Lrsquoextrait utiliseacute dans
lrsquoeacutetude est le Bilberon 25reg
(extrait pur sous forme de poudre provenant de V myrtillus)
Comme lrsquoantioxydant de reacutefeacuterence la (+)-cateacutechine les anthocyanosides ont la capaciteacute de
pieacuteger les radicaux libres comme le radical OH mais ont une reacuteactiviteacute 20 fois plus hautes
que celui-ci contre lrsquoO2- De plus la reacuteactiviteacute contre le radical OH nrsquoest pas tregraves sensible agrave
la diversiteacute structurale des anthocyanosides alors qursquoelle lrsquoest pour lrsquoO2- Dans lrsquoeacutetude de
Ichiyanagi et coll (27) lrsquoactiviteacute contre le NO est presque la mecircme entre tous les
anthocyanosides eacutetant tregraves peu sensible aux diversiteacutes structurales (les groupes hydroxyls
libres sur le cycle B de la moleacutecule de base ou lrsquoimportance de la meacutethylation de ces groupes
ne contribueraient pas aux reacuteactiviteacutes des anthocyanosides contre les radicaux NO et OH)
Parmi tous les anthocyanosides ce sont les glycosides (position 3) de delphinidine qui
reacuteagissent le plus contre les radicaux NO et ONOO- (reacuteactiviteacute 6 et 3 fois plus hautes que les
anthocyanosides et la (+)-cateacutechine respectivement) les autres anthocyanosides ayant une
reacuteactiviteacute comparable entre eux contre NO et lrsquoONOO-
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique
Les lipoproteacuteines de basse densiteacute (LDLs ou low-density lipoproteins) oxydeacutees par des
radicaux libres et des pro-oxydants ont plusieurs effets biologiques neacutefastes comme le
deacuteclenchement drsquoeacutevegravenements cellulaires conduisant agrave la formation et la progression de la
plaque atheacuteroscleacutereuse (21)
Laplaud et coll (34) ont eacutetudieacute lrsquoaction antioxydante drsquoun extrait de Vaccinum myrtillus sur
les LDLs Lrsquoeacutetude deacutemontre la diminution de tous les paramegravetres eacutevalueacutes lors de lrsquooxydation
des LDLs par cet extrait En effet la myrtille est capable de ralentir la formation de diegravenes
conjugueacutes de retarder la production de lipoperoxydes et de malondialdeacutehyde (indicateurs de
la peroxydation lipidique) et de diminuer la charge eacutelectrique nette des lipoproteacuteines
Enfin V myrtillus serait plus efficace que lacide ascorbique ou lrsquohydroxytoluegravene butyleacute
(BHT) pour diminuer la peroxydation lipidique des LDLs
50
En 1998 Martiacuten-Aragoacuten et coll (38) ont eacutetudieacute in vitro la capaciteacute drsquoun extrait complexe
drsquoanthocyanoside de V myrtillus agrave inhiber la peroxydation lipidique et agrave pieacuteger les ERO
comme les radicaux OH et O2- Lrsquoeacutetude deacutemontre un effet antiperoxydant de lrsquoextrait
(concentration-deacutependante) la concentration capable drsquoinhiber 50 de la peroxydation
lipidique (IC50 ou concentration inhibitrice 50) eacutetant de 5028 microgmL Sa capaciteacute agrave pieacuteger le
radical OH est faible (deacutetectable agrave partir de 50 microgmL) alors que sa reacuteactiviteacute contre le
radical O2- est forte
(observeacutee agrave toutes les concentrations testeacutees avec une valeur drsquoIC50 de
moins de 25 microgmL)
En conclusion la myrtille pourrait par son activiteacute antiperoxydative contribuer agrave la protection
vis-agrave-vis de lrsquoatheacuteroscleacuterose
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines
Viljanen et coll (63) ont compareacute lrsquoinhibition de lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines entre
les composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus avec ceux drsquoautres baies comme Rubus idaeus L
(framboisier) Vaccinium vitis-idaea L (airelle rouge) et Ribes nigrum L (cassis) Les
composeacutes pheacutenoliques sont repreacutesenteacutes par des anthocyanosides des ellagitanins et des
proanthocyanidines Lrsquoeacutetude deacutemontre que V myrtillus et Rubus idaeus possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante parmi la totaliteacute des baies eacutetudieacutees contre lrsquooxydation des
proteacuteines (cette oxydation eacutetant mesureacutee par la perte de la fluorescence au tryptophane et la
formation de proteacuteines carbonyles) Vaccinium myrtillus et V vitis-idaea possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante vis-agrave-vis de lrsquooxydation des lipides suivis par Ribes nigrum et
Rubus idaeus (cette oxydation est mesureacutee par lrsquoanalyse drsquohexanal de diegravenes conjugueacutes et
drsquohydroperoxydes) Dans la myrtille et le cassis ce sont les anthocyanosides qui contribuent agrave
la majoriteacute de lrsquoeffet antioxydant par inhibition de la formation des proteacuteines carbonyles et
drsquohexanal (hexanaldehyde) Cette activiteacute antioxydante des anthocyanosides et des
proanthocyanidines est dose-deacutependante ce qui nrsquoest pas le cas pour les autres composeacutes
pheacutenoliques Lrsquoeffet antioxydant des composeacutes pheacutenoliques des baies est plus prononceacute
contre lrsquooxydation des lipides particuliegraverement lrsquoinhibition du composeacute hexanal que celle des
proteacuteines Lrsquoinhibition des composeacutes aldeacutehydes des lipides reacutesulte en geacuteneacuteral de lrsquoinhibition
de la formation de deacuteriveacutes carbonyls conseacutequence drsquoune diminution de lrsquointeraction lipide-
proteacuteine
51
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie
Le foie est lrsquoorgane central du meacutetabolisme des composeacutes exogegravenes et endogegravenes il est donc
lrsquoorgane cible de lrsquoaction des xeacutenobiotiques et de leurs meacutetabolites Les eacutetudes sur les
heacutepatocytes sont importantes car ces cellules repreacutesentent 65 du parenchyme du foie et ils
assurent presque toutes les fonctions de cet organe Les heacutepatocytes ont un appareil de Golgi
distinct et de nombreuses mitochondries Malheureusement ils peuvent ecirctre soumis agrave un
stress oxydant Les eacutetudes faites agrave ce jour ont utiliseacute des toxines expeacuterimentales varieacutees afin
drsquoeacutetudier les effets cytoprotecteurs de substances comme lrsquoextrait de V myrtillus Dans les
eacutetudes qui vont suivre deux toxines sont employeacutees Le tert ndashbutyl hydroperoxyde (tBH) et
lrsquoallyl-alcool (2-propen-1-ol) Le tBH peut induire un stress oxydant aux cellules agrave travers des
radicaux (radical hydroxyl peroxyl drsquohydrogegravene et alkoxyl se formant lors de sa
deacutecomposition) Le tBH est la cause de plusieurs dommages comme la rupture des
membranes cellulaires lrsquoinduction de la peroxydation lipidique (responsable
drsquoatheacuteroscleacuterose) la fuite drsquoenzymes agrave travers lrsquoespace extracellulaire lrsquooxydation du
glutathion et lrsquoalkylation de macromoleacutecules cellulaires Lrsquoallyl-alcool (AA) est une toxine
qui agit indirectement agrave travers ses meacutetabolites Il est oxydeacute dans les cellules en acroleacuteine
sous lrsquoaction de lrsquoalcool deacuteshydrogeacutenase cytosolique Lrsquoacroleacuteine est capable de former un
produit avec le glutathion reacuteduit (GSH) et drsquoautres biomoleacutecules Elle induit aussi la
peroxydation lipidique catalyseacutee par les ions Fe(II) (62)
32 Eacutetudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques
En 2007 Valentovaacute et coll (62) ont utiliseacute un extrait de Vaccinum myrtillus (contenant 25
drsquoanthocyanosides) pour eacutevaluer son effet contre une leacutesion oxydative dans des cultures
primaires drsquoheacutepatocytes de rat induite par tBH et AA Jusqursquoagrave preacutesent lrsquoactiviteacute
cytoprotectrice de la myrtille contre une leacutesion oxydative nrsquoeacutetait pas documenteacutee
Lrsquoeacutetude a deacutemontreacute lrsquoactiviteacute protectrice dose-deacutependante de la plante vis-agrave-vis de leacutesions
oxydatives dans ces cultures cellulaires avec une protection maximale de 5116 contre les
dommages occasionneacutes par AA De plus les auteurs ont montreacute la capaciteacute de lrsquoextrait agrave
pieacuteger les radicaux DPPH (dipheacutenylpicrylhydrazyl) et O2-
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus montre des effets cytoprotecteurs agrave 100 et 500 microgmL
dans le test au MTT (sel de teacutetrazolium permettant une numeacuteration rapide des cellules
vivantes) Lrsquoextrait protegravege les heacutepatocytes de la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase et de la
formation des produits de la lipoperoxydation (TBARS repreacutesentant les substances reacuteagissant
52
avec lrsquoacide thiobarbiturique et permettant une premiegravere approche de la peroxydation
lipidique) Lrsquoimportante reacuteactiviteacute dans lrsquoeacutetude est sucircrement due agrave la dureacutee plus importante du
temps drsquoincubation dans le meacutelange reacuteactionnel Les effets observeacutes dans lrsquoeacutetude de
Valentovaacute et coll (62) montre que la capaciteacute cytoprotectrice de V myrtillus vis-agrave-vis des
heacutepatocytes de rat est probablement due aux proprieacuteteacutes antioxydantes de ses constituants
principaux (les anthocyanosides) Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude soutien lrsquoutilisation de la
myrtille dans les compleacutements alimentaires pour preacutevenir les maladies chroniques associeacutees
au stress oxydant
En 2008 Bao et coll (6) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun extrait de V myrtillus
commercialiseacute (contenant 4204 drsquoanthocyanosides) vis-agrave-vis drsquoun dommage du foie de
souris induit par un stress Ce stress est provoqueacute par lrsquoenfermement des souris dans une cage
meacutetallique pendant 18 heures provoquant un dommage heacutepatique avec augmentation des
enzymes heacutepatiques (alanine aminotransfeacuterase) du niveau de malondialdeacutehyde (MDA) du
monoxyde drsquoazote de la xanthine oxydase (XOD) et de la peroxydation lipidique avec un
deacuteseacutequilibre de la balance oxydants-antioxydants et la diminution de GSH de la vitamine C
et de la valeur ORAC Or lrsquoadministration orale de plusieurs dosages drsquoextrait de V
myrtillus pendant 5 jours preacuteceacutedant lrsquoinduction drsquoun stress chez la souris diminue le niveau
drsquoalanine aminotransfeacuterase (agrave 200 mgkgjour drsquoextrait) augmente les niveaux de GSH (50
100 et 200 mgkgjour drsquoextrait) et diminue significativement les niveaux de XOD et de NO
(agrave des concentrations de 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait)
De plus lrsquoextrait de myrtille agrave 200 mgkgjour pourrait supprimer et renverser le niveau de
MDA heacutepatique et plasmatique agrave un niveau comparable agrave celui du groupe controcircle (non
soumis au stress) La mecircme chose est observeacutee avec 200 mgkg jour de vitamine C (autre
antioxydant) Enfin le niveau ORAC est augmenteacute par 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait de V
myrtillus
Bao et coll (6) avaient deacutejagrave mis en eacutevidence lrsquoeffet protecteur du rein drsquoun extrait de V
myrtillus vis-agrave-vis drsquoun stress oxydant induit par KBrO3
En conclusion la myrtille pourrait preacutevenir les dommages heacutepatiques causeacutes par un stress
oxydant gracircce agrave ses proprieacuteteacutes antioxydantes
53
4 Effet de Vaccinim myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives et le
vieillissement
41 Effets sur un stress eacutemotionnel
Il a eacuteteacute mis en eacutevidence que le stress psychologique joue un rocircle significatif dans la
pathogenegravese de cancers et peut ecirctre associeacute avec une augmentation des produits issus de
lrsquooxydation et de leurs dommages sur les tissus
Le stress oxydant participe agrave lrsquoeacutetiologie de maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie
drsquoAlzheimer et la maladie de Parkinson En effet le stress eacutemotionnel peut affecter le systegraveme
nerveux central dans lequel se trouve notamment les neurones dopaminergiques qui
produisent la dopamine un neurotransmetteur du groupe des cateacutecholamines preacutecurseur de la
noradreacutenaline jouant un rocircle fondamentale dans le cerveau (controcircle de la motriciteacute) utiliseacute
en theacuterapeutique pour son action stimulante sur le systegraveme cardiovasculaire Les neurones
dopaminergiques sont localiseacutes dans certaines reacutegions ceacutereacutebrales comme lrsquohypothalamus le
locus niger et les corps strieacutes Ainsi la rupture de la transmission dopaminergique affecte
lrsquoactiviteacute comportementale Une baisse du niveau de dopamine dans certaines reacutegions
ceacutereacutebrales peut induire une perte des certains fonctions cognitives comme la meacutemoire
lrsquoattention la reacutesolution de problegraveme le mouvement la reacuteponse eacutemotionnelle et la capaciteacute
eacutemotionnelle agrave ressentir le plaisir ou la douleur
De plus les ERO induites par un stress sont connues pour ecirctre responsables de la
peroxydation lipidique et de lrsquooxydation des proteacuteines avec formation de proteacuteines
carbonyles Ainsi des eacutetudes ont deacutemontreacute que la modification de proteacuteines intracellulaires
comme certaines enzymes cleacutes et proteacuteines structurales peuvent mener agrave la deacutegeacuteneacuteration
neurofibrillaire des neurones menant agrave la maladie drsquoAlzheimer une autre maladie
neurodeacutegeacuteneacuterative (1) (52)
En 2008 Rahman et coll (52) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun meacutelange
drsquoanthocyanosides de Vaccinum myrtillus administreacute oralement agrave des souris soumis agrave un
stress oxydant ceacutereacutebral provoqueacute par la coupure des moustaches En effet le retrait des
moustaches augmente la formation de proteacuteines carbonyles et induit la peroxydation lipidique
dans le cerveau le cœur le rein et le foie Le niveau des marqueurs de lrsquooxydation diffegraverent
en fonction des reacutegions ceacutereacutebrales De mecircme le niveau de dopamine est alteacutereacute dans le cortex
ceacutereacutebral et le meacutesenceacutephale Les moustaches de souris jouent un rocircle tregraves important dans le
sens et la motriciteacute et la contribution sensorielle est directement lieacutee aux neurones moteurs
54
controcirclant leur activiteacute locomotrice Crsquoest pourquoi le retrait des moustaches a de graves
conseacutequences puisqursquoil affecte lrsquoactiviteacute locomotrice induisant anxieacuteteacute et hyper-locomotion
Ce stress oxydant induit par un stress psychologique augmente les niveaux de marqueurs
biologiques comme les proteacuteines carbonyles et les TBARS dans certains organes et reacutegions
ceacutereacutebrales (cœur reins foie meacutesenceacutephale cortex et ceacutereacutebellum) Or lrsquoadministration des
anthocyanosides de V myrtillus des souris diminue la peroxydation lipidique dans tous les
tissus reacuteduit lrsquooxydation des proteacuteines dans les reins le foie le meacutesenceacutephale et le cortex
ceacutereacutebral de faccedilon notable et diminue eacutegalement les niveaux de proteacuteines carbonyles et de
TBARS
Enfin lrsquoadministration de myrtille supprime les modifications (induites par le stress
psychologique) des niveaux de dopamine et de ses meacutetabolites (ces modifications pouvant
provoquer des maladies deacutegeacuteneacuteratives comme la maladie de Parkinson)
Cependant cette eacutetude ne peut pas conclure sur la capaciteacute des anthocyanosides de V
myrtillus agrave franchir la barriegravere heacutemato-enceacutephalique et agrave y exercer leur action antioxydante
Les principales formes retrouveacutees dans le foie et les reins sont des meacutetabolites meacutethyleacutes des
anthocyanosides et drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour prouver le lien entre ces meacutetabolites
meacutethyleacutes et la neuroprotection observeacutee dans lrsquoeacutetude
En conclusion cette eacutetude suggegravere que les anthocyanosides peuvent ecirctre utiles dans la
protection et le traitement des maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives associeacutees agrave un stress oxydant
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication du stress oxydant
Le dommage oxydant a depuis longtemps eacuteteacute proposeacute pour ecirctre en partie responsable de
plusieurs deacutesordres lieacutes agrave lrsquoacircge De plus plusieurs eacutetudes ont confirmeacute lrsquoaccumulation des
marqueurs biologiques du stress oxydant (augmentation de lrsquooxydation des lipides et des
proteacuteines dans les cerveaux de mammifegraveres acircgeacutes) Les pertes de la fonction ceacutereacutebrale avec le
vieillissement pourraient ecirctre associeacutees agrave une leacutesion oxydante des biomoleacutecules dans certaines
reacutegions ceacutereacutebrales et un niveau augmenteacute de peroxydes lipidiques observeacute dans des reacutegions
du cerveau impliqueacutees dans les fonctions de meacutemoire et drsquoapprentissage De plus les auteurs
ont deacutemontreacute lrsquoassociation des alteacuterations des fonctions ceacutereacutebrales cognitives avec des
modifications du systegraveme cardiovasculaire comme lrsquoaugmentation de la pression sanguine
(impliqueacutee dans lrsquoacceacuteleacuteration du vieillissement des vaisseaux les alteacuterations des fonctions
ceacutereacutebrales et le deacuteveloppement de lrsquoatheacuteroscleacuterose) (32)
Kolosova et coll (32) utilisent pour leur eacutetude deux souches de rats La souche OXYS qui est
une souche aux traits heacuteriteacutes de vieillissement acceacuteleacutereacute et une haute sensitiviteacute au stress
55
oxydant par rapport agrave une autre souche la souche Wistar Les rats OXYS ont une espeacuterance
de vie plus courte et deacuteveloppent plus preacutecocement des deacutesordres pathologiques lieacutes agrave lrsquoacircge
semblables agrave ceux observeacutes chez lrsquohumain comme lrsquoosteacuteoporose lrsquohypertension arteacuterielle
de ce fait le comportement de jeunes rats OXYS est semblable agrave celui des rats Wistar acircgeacutes
Lrsquoobjectif de leur eacutetude eacutetait de veacuterifier srsquoil existe un lien entre le vieillissement ceacutereacutebral et les
marqueurs du stress oxydant chez les rats OXYS pour rechercher lrsquoefficaciteacute drsquoune
suppleacutementation agrave long terme drsquoantioxydants dans la preacutevention de lrsquoapparition de deacuteficits
cognitifs comme les deacuteficits drsquoapprentissage et de meacutemoire
Les diffeacuterents paramegravetres de stress oxydant dans ces deux souches de rats sont eacutevalueacutes
(peroxydation lipidique niveau de proteacuteines carbonyles niveau de MDA activiteacute de
superoxyde dismutase (SOD) de niveau de GSH et quantiteacute drsquoα-tocopheacuterol)
Lrsquoeacutetude deacutemontre qursquoune suppleacutementation agrave long terme avec un extrait de V myrtillus
preacutevient la manifestation exteacuterieure du vieillissement des deux souches de rats (lrsquoextrait
augmente le poids des souris) Chez les rats OXYS lrsquoextrait de myrtille diminue
- la peroxydation lipidique
- lrsquoactiviteacute SOD dans le cerveau (en jouant un rocircle protecteur vis-agrave-vis du stress
oxydant)
- et le niveau de MDA dans le cerveau
La myrtille preacutevient aussi chez les rats OXYS
- les deacuteficits de meacutemoire et drsquoapprentissage plus efficacement que la vitamine E (autre
antioxydant)
- la deacuteteacuterioration de la fonction mitochondriale (autre cause de seacutenescence acceacuteleacutereacutee)
De plus V myrtillus a la capaciteacute de preacutevenir les mutations induites par les ERO lesquels
srsquoaccumulent avec lrsquoacircge dans la mitochondrie menant agrave un dysfonctionnement
mitochondriale Ce mecircme meacutecanisme pourrait ecirctre impliqueacute dans lrsquoeffet positif exerceacute par la
myrtille sur la meacutemoire des rats OXYS Ainsi la preacutevention des deacuteficits cognitifs
comportementaux avec des antioxydants peuvent montrer le rocircle du stress oxydant dans ces
processus mecircme si drsquoautres meacutecanismes peuvent jouer un rocircle dans cette capaciteacute de
preacutevention des composeacutes
En conclusion Vaccinum myrtillus atteacutenue les deacuteficits cognitifs chez les rats OXYS
apportant la preuve du rocircle theacuterapeutique de cette plante Cependant les meacutecanismes par
lesquels cet antioxydant agit pour exercer une neuroprotection in vivo et le reacuteel impact du
stress oxydant et de ses marqueurs biologiques sur les deacuteficits cognitifs des rats OXYS
doivent encore ecirctre eacutetudieacutes
56
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB
51 Effets drsquoune exposition solaire
Une exposition prolongeacutee aux ultraviolets (UV) durant le sport ou drsquoautres activiteacutes est un
facteur de risque de plusieurs maladies de la peau comme le cancer cutaneacute La deacutepleacutetion de la
couche drsquoozone protectrice entraicircne une quantiteacute plus importante des rayons UV atteignant la
surface planeacutetaire et exerccedilant des effets neacutefastes Les UVB sont largement absorbeacutes mais
moins peacuteneacutetrants que les UVA atteignant particuliegraverement la couche cellulaire de lrsquoeacutepiderme
basal Les UVB sont plus geacutenotoxiques et environ 1000 fois plus capables de provoquer un
coup de soleil que les UVA Ainsi le coup de soleil lrsquoeacuterythegraveme et lrsquoœdegraveme sont des
manifestations de lrsquoexposition aux UVB Lrsquoabsorption des photons UVB megravenent agrave des
dislocations de lrsquoADN et agrave la formation de photoproduits dimegraveriques de pyrimidine De plus
ils interagissent directement avec les acides amineacutes aromatiques notamment le tryptophane et
la tyrosine (inclus dans les proteacuteines) pouvant alors alteacuterer les fonctions de celles-ci Les UVB
altegraverent indirectement les macromoleacutecules ils geacutenegraverent la production de radicaux libres
comme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote induisant lrsquooxydation des proteacuteines
des lipides et de lrsquoADN Ces produits oxydeacutes (hydroperoxydes lipidiques proteacuteines
carbonyles et 8-hydroxydeacuteoxyguanosine) sont impliqueacutes dans le deacutebut des cancers cutaneacutes
Les UVB diminuent aussi les antioxydants de la peau responsable drsquoune baisse de la
protection vis-agrave-vis des radicaux libres Ils participent aux pheacutenomegravenes de processus
inflammatoire de la peau incluant une cascade drsquoeacutevegravenements comme lrsquoinfiltration de
leucocytes sanguins inflammatoires (macrophages et neutrophiles) lrsquoaugmentation de la
production des prostaglandines comme conseacutequence de lrsquoaugmentation de la peroxydation
lipidique la libeacuteration du fateur TNFα (tumour necrosis factor alpha ou facteur de neacutecrose
tumoral) le NFκB (nuclear factor κB ou facteur nucleacuteaire κB) des cytokines pro-
inflammatoires comme les interleukines (IL-1α IL-1β IL-6 IL-8 IL-12) qui en retour
augmentent la production des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote Un deacutefaut de
reacuteparation des leacutesions de lrsquoADN et les effets neacutefastes des UVB du soleil sont agrave lrsquoorigine des
cancers cutaneacutes Crsquoest pourquoi des meacutecanismes de protection de la peau ou une atteacutenuation
de la quantiteacute drsquoUVB atteignant et peacuteneacutetrant la peau peuvent ecirctre des strateacutegies efficaces dans
la preacutevention des dommages occasionneacutes par le soleil (57)
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires
Svobodovaacute et coll (57) Ont eacutetudieacute la capaciteacute des fractions pheacutenoliques des fruits de Lonicera
caerulea L (chegravevrefeuille bleu) et de V myrtillus en preacute et post-traitement sur les dommages
57
oxydants des keacuteratinocytes HaCaT humains induits par un simulateur de radiations solaires
(UVB) Plusieurs paramegravetres sont eacutetudieacutes et seuls les reacutesultats concernant V myrtillus sont
rapporteacutes dans cette thegravese Cette plante a plusieurs effets
- elle augmente le nombre de cellules viables
- diminue significativement la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase de maniegravere dose
deacutependante
- augmente de faccedilon dose-deacutependante la prolifeacuteration cellulaire (prolifeacuteration reacuteduite
par les UVB)
- preacutevient la formation et reacuteduit significativement la cassure simple brin de lrsquoADN
- diminue la caspase-3 (meacutediateur de lrsquoexeacutecution de la mort cellulaire apoptotique)
- diminue la caspase-9 de maniegravere dose-deacutependante (meacutediateurs de lrsquoexeacutecution de la
mort cellulaire apoptotique)
- preacutevient la formation des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote avec
eacutelimination excellente en post-traitement
- et diminue de maniegravere dose-deacutependante la production drsquoIL6
Cependant on remarque que cette protection deacutecline leacutegegraverement agrave des concentrations plus
hautes srsquoexpliquant par un effet pro-oxydant des polypheacutenols dans les cellules irradieacutees ougrave la
balance oxydantsantioxydants est deacuteseacutequilibreacutee
En conclusion V myrtillus pourrait ecirctre un bon candidat pour la fabrication de preacuteparations
dermatologiques protectrices agrave large spectre ou dans des preacuteparations apregraves-soleil Pour cela
des eacutetudes futures sont neacutecessaires pour eacutetudier la biodisponibiliteacute des composants exclure
les toxiques eacuteventuels ou les effets photoxiques et confirmer lrsquoeffet photoprotecteur in vivo
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes
Chez lrsquohomme la reacutetine (Figure 17) est une membrane photosensible qui tapisse la face
interne de lrsquoœil elle est constitueacutee de plusieurs types de cellules formant trois couches
superposeacutees qui sont de lrsquoarriegravere vers lrsquoavant de lrsquoœil
- les cellules photoreacuteceptrices constitueacutees de cocircnes et de bacirctonnets
- les cellules bipolaires
- les cellules ganglionnaires
Sa face posteacuterieure est en contact avec la choroiumlde par lrsquointermeacutediaire de lrsquoeacutepitheacutelium
pigmentaire et sa face anteacuterieure avec le corps vitreacute Les cellules de la reacutetine transforment les
58
influx nerveux en impulsions nerveuses qui gagnent les fibres nerveuses du nerf optique
permettant le transport des informations visuelles jusqursquoau cerveau (1)
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme (77)
La reacutetine est situeacutee dans un environnement tregraves oxygeacuteneacute pouvant subir des dommages induits
par le stress oxydant (les radicaux libres peuvent oxyder les lipides des photoreacutecepteurs) (23)
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire
Dutot et coll (23) ont eacutetudieacute les effets cytoprotecteurs drsquoun extrait en poudre de V myrtillus
(contenant 10 de proanthocyanidols et 10 drsquoanthocyanidines) sur le stress oxydant
appliqueacute aux cellules reacutetiniennes humaines dans un systegraveme in vitro Lrsquoextrait de V myrtillus
est incubeacute (005 et 01) pendant 15 minutes ou 24 heures sur une ligneacutee de cellules de
lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute reacutetinien Puis un stress oxydant induit par le tBHP est appliqueacute
pendant une heure sur ces cellules Les diffeacuterents paramegravetres des dommages du stress oxydant
sont eacutevalueacutes comme les modifications du meacutetabolisme cellulaire la formation des ERO la
formation drsquoO2-et lrsquoapoptose mitochondriale
Les reacutesultats sur ces diffeacuterents paramegravetres sont reacutesumeacutes dans les tableaux II agrave V
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
baisse induite par le tBHP Aucun effet cytoprotecteur
Incubation 24 heures Blocage de lrsquoeffet du tBHP sur le meacutetabolisme cellulaire
59
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Une concentration faible drsquoextrait (005) nrsquoa pas drsquoeffet sur une peacuteriode courte drsquoincubation
(15 minutes) par contre crsquoest le cas pour une peacuteriode plus longue (24 heures) cette
concentration est capable drsquoavoir des effets cytoprotecteurs V myrtillus pourrait ecirctre capable
de stimuler les deacutefenses antioxydantes de lrsquoorganisme mais des eacutetudes compleacutementaires sont
neacutecessaires pour confirmer cette hypothegravese
Enfin lrsquoeacutetude a montreacute que lorsque lrsquoextrait diminue le stress oxydant et lrsquoapoptose
mitochondriale elle restaure aussi la viabiliteacute cellulaire Par contre srsquoil nrsquoy a pas drsquoeffet sur le
stress oxydant il nrsquoy en a pas non plus sur la viabiliteacute cellulaire
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge
Lors du vieillissement et dans certaines maladies oculaires (comme la deacutegeacuteneacuterescence
maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge ougrave le stress oxydant est fortement impliqueacute) des pigments
autofluorescents constitueacutes par des deacutepocircts de lipofuchsine (pigment jaune-brun constitueacutee de
deacutebris moleacuteculaires) peuvent srsquoaccumuler dans les cellules eacutepitheacuteliales du pigment reacutetinien
La lipofuchsine peut absorber la lumiegravere bleue et geacuteneacuterer des photoproduits toxiques
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
surproduction drsquoERO Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution du stress oxydant
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
production drsquoO2-
Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Reacuteduction de la production drsquoO2-
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Inhibition significative de
lrsquoapoptose mitochondriale Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution de lrsquoapoptose mitochondriale
60
perturbant le fonctionnement cellulaire crsquoest donc un geacuteneacuterateur de radicaux lieacutes agrave la
lumiegravere Un composant de reacutetinoiumlde majeur de la lipofuchsine est lrsquoA2E (bis reacutetinoiumlde de
pyridinium deacuteriveacute de reacutetinal et de phosphatidyl eacutethanolamine) il contribue agrave
lrsquoautofluorescence de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute agrave lrsquoinhibition de fonctions cellulaires
essentielles au deacuteclenchement de la mort par apoptose des cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute
et agrave lrsquoabsorption de la lumiegravere bleue aggravant les leacutesions cellulaires (79) A2E lors de
lrsquoirradiation par la lumiegravere bleue subit une photooxydation en geacuteneacuterant de lrsquooxygegravene
singulet celui-ci reacuteagit en retour avec le fluorophore geacuteneacuterant des eacutepoxydes au niveau des
doubles liaisons carbone-carbone Les A2E-eacutepoxydes peuvent alors induire de graves leacutesions
agrave lrsquoADN (une des cibles des eacutevegravenements photodynamiques par interaction lumiegravere bleue-
A2E) pouvant srsquoaccumuler avec lrsquoacircge ougrave un deacuteclin des meacutecanismes de reacuteparation des bases
de lrsquoADN oxydeacutees a eacuteteacute reconnu (56)
Les antioxydants pourraient avoir un rocircle important dans la preacutevention des leacutesions oxydatives
sur les macromoleacutecules comme les bases de lrsquoADN et la deacutegeacuteneacuterescence de la maculaire lieacutee agrave
lrsquoacircge (DMLA) Crsquoest pourquoi Vaccinum myrtillus (par ses proprieacuteteacutes antioxydantes) a fait
lrsquoobjet drsquoeacutetudes montrant sa capaciteacute agrave preacutevenir certaines maladies oculaires causes majeurs
de ceacuteciteacute et de deacuteteacuterioration de lrsquoacuiteacute visuelle chez les personnes acircgeacutees
En 2003 Sparrow et coll (56) ont deacutemontreacute dans une eacutetude in vitro la capaciteacute drsquoun extrait
de V myrtillus agrave inhiber lrsquoeacutepoxydation drsquoA2E par capture de lrsquooxygegravene singulet gracircce agrave sa
richesse en anthocyanosides antioxydants
Dans une eacutetude in vivo utilisant une souche de rats avec seacutenescence acceacuteleacutereacutee (rats OXYS)
Fursova et coll (24) ont deacutemontreacute qursquoune alimentation suppleacutementeacutee agrave long terme avec un
extrait de V myrtillus pouvait ecirctre efficace dans la preacutevention de la DMLA et de la cataracte
seacutenile deux maladies dont les dommages ont eacuteteacute attribueacutees aux radicaux libres
La surreacutegulation des proteacuteines de stress est un moyen de protection contre des conditions
deacuteleacutetegraveres comme le stress oxydant Ainsi Milbury et coll (42) ont deacutemontreacute in vitro la
capaciteacute des anthocyanosides et drsquoautres composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus agrave surreacuteguler
les enzymes de deacutefense du stress oxydant comme lrsquohegraveme oxygeacutenase-1 (HO-1) et la glutathion
S-transfeacuterase (GST) dans des cultures de cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmentaire reacutetinien humain
Agrave cocircteacute du stress oxydant des facteurs vasculaires peuvent ecirctre impliqueacutes dans les maladies
oculaires comme le glaucome la DMLA ou la reacutetinopathie diabeacutetique Comme nous lrsquoavons
vu dans le premier chapitre de cette partie Personn et coll (46) ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoun
extrait de V myrtillus agrave inhiber lrsquoECA cet effet pourrait ecirctre une explication aux effets
observeacutes de la plante sur la vision
61
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus
Un stress oxydant peut laquo srsquoattaquer raquo aux neurotransmetteurs entrainant leur oxydation Ainsi
les neurotransmetteurs comme la dopamine et son meacutetabolite neurotoxique la 6-
hydroxydopamine peuvent subir une oxydation geacuteneacuterant H2O2 et des ERO Dans les neurones
et drsquoautres cellules ce stress oxydant peut ecirctre amplifieacute par le relargage du cytochrome c
(composant essentiel de la chaine respiratoire mitochondriale participant au transfert
drsquoeacutelectrons) localiseacute dans la membrane interne de la mitochondrie dans le cytoplasme ce
relargage induit toute une cascade de reacuteactions aboutissant agrave lrsquoactivation de caspases
(proteacuteines directement lieacutees agrave lrsquoapoptose) pouvant ecirctre fortement preacutejudiciable pour les
meacutetabolites de la dopamine La perte de lrsquointeacutegriteacute mitochondriale observeacutee dans des maladies
neurodeacutegeacuteneacuteratives peut contribuer aussi agrave des niveaux relargueacutes de cytochrome c au-dessus
de la normale (68)
Yao et coll (68) ont montreacute in vitro la capaciteacute drsquoune preacuteparation riche en anthocyanosides
composeacutee de V myrtillus V corymbosum et V oxycoccus L et des anthocyanosides purifieacutes agrave
inhiber lrsquooxydation de la 6-hydoxydopamine augmenteacutee par le cytochrome c Parmi les trois
espegraveces eacutetudieacutees les extraits de V myrtillus apparaissent pour ecirctre plus efficaces dans cette
activiteacute que les deux autres espegraveces ou que les anthocyanosides purifieacutes pouvant srsquoexpliquer
par une plus grande richesse en anthocyanosidesanthocyanidines particuliegraverement la
cyanidine et delphinidine La composition en querceacutetine et agrave moindre degreacute en myriceacutetine
nrsquoont pas de rocircle dans lrsquoactiviteacute antioxydante la preacutesence de querceacutetine est mecircme
inversement correacuteleacutee avec lrsquoeffet antioxydant Lrsquoeffet inhibiteur observeacute est principalement ducirc
agrave lrsquoeffet antioxydant des anthocyanosides
Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent la forte activiteacute des anthocyanosides vis-agrave-vis des
reacuteactions neurotoxiques potentielles et suggegraverent lrsquoimportance de mettre au point des eacutetudes in
vivo dans le but de deacutemontrer des effets neuro- et mitochondrio-protecteurs de ces
phytochimiques particuliegraverement dans la maladie de Parkinson et drsquoautres maladies
impliquant un dysfonctionnement mitochondriale
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant un
stress oxydant
Une ischeacutemie-reperfusion entraine de nombreuses alteacuterations microvasculaires comme une
augmentation des leucocytes adheacuterant agrave la paroi des vaisseaux veineux une diminution de la
longueur des capillaires perfuseacutes menant agrave une diminution du nombre de capillaires
62
fonctionnels une perte de lrsquointeacutegriteacute endotheacuteliale une augmentation de la permeacuteabiliteacute
capillaire (relargage de proteacuteases comme lrsquoeacutelastase et la collageacutenase avec formation drsquoœdegraveme)
et des modifications du diamegravetre des arteacuterioles (modification de la balance vosodilatation-
vasoconstriction au profit drsquoune vasoconstriction ) Les leucocytes jouent un rocircle fondamental
dans lrsquoischeacutemie-reperfusion en srsquoaccumulant dans les tissus ils provoquent lrsquoocclusion
intravasculaire ainsi que le relargage de cytokines pro-inflammatoires et des meacutetabolites
deacuteriveacutes de lrsquooxygegravene En effet les ERO ont eacuteteacute fortement impliqueacutees dans ces deacutesordres
microcirculatoires elles altegraverent entre autre lrsquointeacutegriteacute de la paroi des vaisseaux et entrainent
une augmentation de la permeacuteabiliteacute en post-capillaire et dans les veines collectrices de
lrsquoabajoue drsquohamster De plus les ERO provenant des leucocytes ou non peuvent induire une
contraction des arteacuterioles (8)
En 1995 Bertuglia et coll (8) ont eacutetudieacute les effets des anthocyanosides de V myrtillus sur
lrsquoischeacutemie-reperfusion provoqueacutee sur lrsquoabajoue drsquohamster entrainant les deacutesordres
microcirculatoires citeacutes preacuteceacutedemment Lrsquoeacutetude montre qursquoune administration orale
drsquoanthocyanosides de V myrtillus suite agrave ces dommages permet une protection de la paroi des
vaisseaux gracircce agrave leur action antioxydante une reacuteduction du nombre de leucocytes adheacuterant agrave
la paroi veineuse (proteacutegeant les tissus de lrsquoischeacutemie-reperfusion et preacutevenant la formation de
meacutediateurs inflammatoires) une diminution de la permeacuteabiliteacute capillaire par son activiteacute anti-
proteacuteasique la plante peut ecirctre eacutegalement un modulateur important du tonus des arteacuterioles en
controcirclant la freacutequence et lrsquoamplitude la vasomotion (modification du calibre vasculaire)
permettant une ameacutelioration de la perfusion capillaire (inhibition de la vasoconstriction par les
ERO)
Cette eacutetude est importante drsquoune part pour montrer le rocircle des radicaux libres deacuteriveacutes de
lrsquooxygegravene dans les deacutesordres microcirculatoires et drsquoautre part pour deacutemontrer les effets
beacuteneacutefiques de V myrtillus agrave restaurer les diffeacuterents paramegravetres notamment par son action
antioxydante
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer
Wang et coll (65) ont reporteacute les reacutesultats des eacutetudes qui ont permis de mettre en eacutevidence les
activiteacutes anticarcinogeacuteniques des anthocyanosides et des extraits riches en anthocyanosides
dans des modegraveles de cultures cellulaires in vitro et dans des systegravemes in vivo de modegraveles
tumoraux chez lrsquoanimal Lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides est due agrave leur structure
63
pheacutenolique en donnant un eacutelectron aux radicaux ceux-ci devenant stables (eacutelectrons
apparieacutes) En effet les anthocyanosides sont capables comme nous lrsquoavons vu
preacuteceacutedemment de pieacuteger directement les ERO drsquoaugmenter la valeur ORAC des cellules de
stimuler lrsquoexpression de la phase II de deacutetoxification des enzymes de reacuteduire la formation des
sous-produits de lrsquoADN de diminuer la peroxydation lipidique drsquoinhiber la mutagenegravese
induite par des carcinogegravenes ou des toxines et de reacuteduire la prolifeacuteration cellulaire en
modulant les voies de transduction du signal Ils sont capables eacutegalement de cheacutelater les
meacutetaux et de se lier directement aux proteacuteines Lrsquoactiviteacute antioxydante est principalement due
aux groupes hydroxyles des anthocyanosides en position 3 du cycle C et en position 3rsquo 4rsquo et
5rsquo du cycle B de leur structure de base Enfin il a eacuteteacute montreacute que les aglycones
drsquoanthocyanidines ont une activiteacute antioxydante plus importante que leurs homologues
glycosyleacutes et cette activiteacute diminue quand le nombre de sucres augmente
Mecircme si les eacutetudes expeacuterimentales ont deacutemontreacute lrsquoactiviteacute anticancer des anthocyanosides les
eacutetudes eacutepideacutemiologiques nrsquoont pas montreacute lrsquoactiviteacute protectrice de la consommation
drsquoanthocyanosides vis-agrave-vis du risque de cancer humain et leur activiteacute antioxydante reste
encore questionnable De plus les quantiteacutes drsquoanthocyanosides neacutecessaires pour observer un
effet in vitro sont importantes par rapport aux quantiteacutes retrouveacutees dans le plasma humain in
vivo Crsquoest pourquoi des eacutetudes sont neacutecessaires pour deacutevelopper des solutions qui
permettraient drsquoaugmenter lrsquoabsorption des anthocyanosides etou leurs meacutetabolites
permettant ainsi lrsquoutilisation optimale des anthocyanosides dans la preacutevention de cancer chez
lrsquohomme particuliegraverement dans les tissus autres que le tractus gastro-intestinal et la peau
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus
Katsube et coll (31) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute anticarcinogeacutenique dans un systegraveme in vitro de dix
baies comestibles et particuliegraverement celle de V myrtillus Lrsquoactiviteacute de la myrtille est testeacutee
sur deux ligneacutees cellulaires diffeacuterentes les cellules leuceacutemiques humaines HL60 et les
cellules carcinomateuses du cocirclon HCT116 Lrsquoeacutetude deacutemontre que lrsquoextrait de V myrtillus est
le plus efficace parmi les dix extraits eacutethanoliques de baies pour inhiber la croissance de ces
ligneacutees cellulaires Toutes les concentrations testeacutees inhibent la croissance des cellules HL60
lors des deux peacuteriodes drsquoincubation (24 et 48 heures) alors que lrsquoinhibition de la croissance
des HCT116 nrsquoest observeacutee que pour des intervalles speacutecifiques de concentrations De plus
lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus induit des niveaux significatifs drsquoapoptose dans les
cellules HL60 mais pas dans les cellules HCT116
64
Ce sont les anthocyanosides qui sont responsables de lrsquoinhibition de la croissance des cellules
canceacutereuses HL60 et HCT116 induisant eacutegalement lrsquoapoptose des cellules HL60
Les anthocyanosides de V myrtillus plus particuliegraverement les glycosides de delphinidine et
malvidine induisent lrsquoinhibition de la croissance des cellules de la leuceacutemie humaine HL60
par induction de lrsquoapoptose et mecircme si lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus et certains
anthocyanosides inhibent la croissance des cellules carcinomateuses du cocirclon humain
(HCT116) ces cellules sont toutefois moins sensibles agrave lrsquoapoptose que les autres ligneacutees en
se reacutefeacuterant agrave drsquoautres donneacutees on pourrait suggeacuterer un blocage de la voie drsquoinduction de
lrsquoapoptose des cellules HCT116
Lrsquoinhibition de la croissance par les baies nrsquoest toutefois pas speacutecifique aux cellules
canceacutereuses En conclusion une consommation reacuteguliegravere de baies pourrait maintenir des
niveaux drsquoanthocyanosides dans le plasma Ces baies sont des aliments fonctionnels
prometteurs dans la preacutevention du risque de cancer gracircce agrave leurs effets multiples comme
lrsquoinduction de lrsquoapoptose lrsquoactiviteacute antioxydante et drsquoautres effets anticanceacutereux
En 2004 Zhao et coll (69) ont eacutetudieacute les effets de trois extraits riches en anthocyanosides
Vitis vinifera (Vigne rouge) V myrtillus L et Aronia melanocarpa E (Aronie noire) sur les
cellules canceacutereuses du cocirclon HT-29 et les cellules non tumorigeacuteniques du cocirclon NCM460
Lrsquoeacutetude deacutemontre lrsquoinhibition de la croissance des cellules HT-29 par V myrtillus agrave faibles
concentrations tandis que lrsquoeffet est pauvre sur les cellules NCM460 Cependant une peacuteriode
longue drsquoincubation (72 heures) montre un effet de la myrtille sur la croissance des cellules
NCM460 V myrtillus a une activiteacute importante peut-ecirctre gracircce agrave la cyanidine reporteacutee pour
ecirctre un inhibiteur efficace de la croissance des cellules canceacutereuses coloniques
Dans cette eacutetude la croissance des cellules du colon est inhibeacutee alors que les conditions de pH
et de tempeacuterature ne sont pas optimum pour la stabiliteacute des anthocyanosides Les formes
actives responsables des effets observeacutes pourraient ecirctre dues aux produits de deacutegradation des
anthocyanosides
En conclusion cette eacutetude deacutemontre que des extraits riches en anthocyanosides et notamment
V myrtillus sont capables drsquoinhiber la croissance des cellules canceacutereuses du colon HT-29 agrave
plus basse concentration et agrave des peacuteriodes drsquoincubation plus courtes que la croissance des
cellules non tumorigeacuteniques NCM460 du colon Il reste toutefois agrave deacuteterminer quels sont les
composeacutes des extraits veacuteritablement responsables des effets observeacutes
65
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine
En 2006 Cooke et coll (18) ont eacutetudieacute les effets drsquoun meacutelange drsquoanthocyanosides de V
myrtillus (Mirtoselectreg) et de cyanidine-3-glucoside ou C3G (anthocyanoside le plus
abondant de lrsquoalimentation) sur le deacuteveloppement drsquoadeacutenome intestinal sur souris ApcMin
alimenteacutees pendant 12 semaines avec ces extraits Les souris ApcMin
constituent un modegravele
geacuteneacutetique de polypose adeacutenomateuse familiale humaine Cette maladie autosomique
dominante de lrsquohomme est caracteacuteriseacutee par le deacuteveloppement spontaneacute drsquoune centaine de
polypes colorectaux pouvant se transformer en carcinomes
Les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent que les deux extraits utiliseacutes diminuent le nombre
drsquoadeacutenomes drsquoune maniegravere dose-deacutependante (agrave la plus haute concentration lrsquoinhibition la plus
importante est observeacutee pour la cyanidine-3-glucoside) Les anthocyanosides sont retrouveacutes
dans le plasma agrave la limite de la deacutetection analytique et sont retrouveacutes agrave des niveaux
quantifiables dans lrsquointestin et lrsquourine Les principales formes preacutesentes dans lrsquointestin et
lrsquourine sont des anthocyanosides glucuronides et des meacutetabolites meacutethyleacutes Enfin les
anthocyanosides sont retrouveacutes dans drsquoautres tissus que lrsquointestin
En conclusion la dose eacutequivalente de Mirtoselectreg
chez lrsquohumain est contenue dans environ
740 grammes de baies de V myrtillus suggeacuterant que la dose efficace de lrsquoextrait chez la
souris ApcMin
pourrait ecirctre traduite en une dose importante (mais non impossible) chez
lrsquohumain De plus les glycosides de malvidine sont les anthocyanosides laquo survivants raquo les
mieux sous forme inchangeacutee dans lrsquointestin leur structure eacutetant moins apte agrave subir les
reacuteactions de conjugaison que celle drsquoautres anthocyanosides Lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides
in vivo pourrait ecirctre due au moins en partie agrave leur hydrolyse en anthocyanidines La preacutesence
transitoire des anthocyanidines apregraves hydrolyse de leurs preacutecurseurs glycosyleacutes et leur
transformation par conjugaison meacutetabolique pourraient expliquer lrsquoefficaciteacute de C3G ou du
Mirtoselectreg Le niveau drsquoanthocyanosides agrave la dose efficace chez la souris Apc
Min est bas
dans la circulation systeacutemique mais deacutetectable et mesurable dans le tractus gastro-intestinal et
lrsquourine
Ainsi lrsquoabsence drsquoeffets indeacutesirables des anthocyanosides et leur efficaciteacute dans la reacuteduction
du deacuteveloppement de lrsquoadeacutenome en font de bons candidats pour le deacuteveloppement clinique
66
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes
Les reacutecepteurs agrave lrsquoactiviteacute tyrosine kinase sont des moleacutecules transmembranaires constitueacutees
drsquoun site reacutecepteur sur lequel se lie un ligand (localiseacute sur la face extracellulaire) et un site
tyrosine kinase (sur la face interne) Ces reacutecepteurs ont en plus un site de phosphorylation Le
site tyrosine kinase (constituant une famille drsquoenzymes) est normalement inactif mais peut
srsquoactiver par phosphorylation de la tyrosine Le meacutecanisme drsquoactivation du site tyrosine
kinase ne se fait pas par passage drsquoinformations depuis le site de reconnaissance du ligand
jusqursquoagrave lrsquointeacuterieur de la cellule mais par la liaison du ligand sur deux reacutecepteurs pouvant se
rapprocher et se phosphoryler mutuellement Les reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase jouent
un rocircle crucial dans la carcinogenegravese et la progression tumorale Des exemples importants de
reacutecepteurs agrave tyrosine kinase comportent la famille ErbB incluant le facteur de croissance
eacutepidermique (EGFR ErbB1) et les reacutecepteurs ErbB2-4 lrsquoIGFR1 (insulin-like growth factor
receptor 1) et les VEGFR-2 et VEGFR-3 (vascular endothelial growth factor receptors) ErbB
et IGF sont des reacutecepteurs agrave tyrosine kinase surexprimeacutes dans certains types tumoraux
reacutesultant dans des modifications de la signalisation cellulaire impliqueacutees dans la croissance
cellulaire et la diffeacuterentiation Les reacutecepteurs VEGF sont des modulateurs de lrsquoangiogenegravese et
de la lymphangiogenegravese Crsquoest pourquoi lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs agrave tyrosine
kinase peut ecirctre une theacuterapeutique inteacuteressante (84)
42 Eacutetude de Teller et coll (2009)
Teller et coll (60) ont eacutetudieacute les effets de deux extraits standardiseacutes Mirtocyanreg
(extrait de V
myrtillus et Oenocyaninreg
(extrait de raisins) sur lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs tyrosine kinases
(RTKs) Seuls les reacutesultats concernant V myrtillus seront rapporteacutes dans cette thegravese
Lrsquoinhibition des RTK est eacutevalueacutee en utilisant une activiteacute kinase recombinante dans un
systegraveme de cellules libres et en deacuteterminant lrsquoautophosphorylation induit par le ligand dans
des cellules carcinomateuses de la vulve E431 et dans des cellules endotheacuteliales aortiques
porcines exprimant soit VEGFR-2 soit VEGFR-3 La capaciteacute des extraits riches en
anthocyanosides agrave modifier lrsquoactiviteacute des RTK est compareacutee agrave leur capaciteacute agrave moduler la
croissance des cellules
Les deux extraits inhibent lrsquoactiviteacute drsquoune varieacuteteacute de RTKs dans le systegraveme de cellules libres
(activiteacute kinase des domaines kinases recombinants) et dans les cellules vivantes (reacutecepteur
intact autophosphorylation induite par ligand) Par contre lrsquoautophosphorylation du reacutecepteur
des cellules intactes neacutecessitent des concentrations 10 agrave 50 fois plus hautes que celles
67
neacutecessaires pour lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute kinase recombinante dans le systegraveme de cellules
libres Cette diffeacuterence pourrait srsquoexpliquer par un accegraves pauvre des glycosides aux domaines
kinases recombinants
De plus les deux extraits inhibent davantage les kinases associeacutees avec EGFR et le VEGFR-2
que les kinases associeacutees avec ErbB-2 VEGFR-3 et IGF1R De plus les extraits preacutesentent
peu de speacutecificiteacute entre les membres des reacutecepteurs de la famille ErbB Mecircme si les extraits
riches en anthocyanosides inhibent lrsquoactiviteacute des RTKs peu drsquoeffets ont eacuteteacute montreacutes sur la
croissance des cellules Ceci pourrait ecirctre ducirc soit agrave la faible stabiliteacute des anthocyanosides dans
le milieu de culture soit agrave la preacutesence drsquoautres voies moleacuteculaires que les RTKs ces voies ne
seraient pas affecteacutees par les extraits riches en anthocyanosides et auraient la capaciteacute de
promouvoir la croissance et la survie cellulaire elles pourraient ainsi compenser lrsquoinhibition
des RTKs
Lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoactiviteacute des RTKs nrsquoest pas ducirc aux composants individuels des
extraits en effet V myrtillus contient un ensemble de composeacutes polypheacutenoliques ainsi que
des constituants inconnus Les cateacutechines flavonols et procyanidines preacutesents dans les
extraits en quantiteacutes plus basses que les anthocyanosides ont montreacute dans drsquoautres eacutetudes des
effets inhibiteurs des RTKs Mais la basse biodisponibiliteacute de ces extraits doit ecirctre prise en
compte pour lrsquoeacutevaluation de leurs effets physiologiques
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision
Les extraits de V myrtillus ont eacuteteacute utiliseacutes depuis 1964 dans les affections ophtalmiques et
dans les deacutesordres de la microcirculation Des eacutetudes anciennes ont rapporteacute les effets de
preacuteparations agrave base du fruit de V myrtillus dans lrsquoacuiteacute visuelle en lumiegravere sombre dans la
vision nocturne chez les sujets ne preacutesentant pas de troubles de la vision chez les patients
avec un problegraveme significatif de vision en lumiegravere vive les patients atteints de DMLA de
reacutetinopathie diabeacutetique drsquoinflammation reacutetinienne de reacutetinite pigmentaire (V myrtillus
associeacute au β-carotegravene) et enfin chez les patients avec myopie progressive Drsquoautres eacutetudes ont
rechercheacute les effets de V myrtillus sur la formation de la cataracte chez des patients souffrant
de cataracte corticale seacutenile (extrait pris en association avec la vitamine E) Cependant
lrsquohypothegravese drsquoun effet de V myrtillus sur la vision est tregraves controverseacutee certaines eacutetudes
rapportent des reacutesultats neacutegatifs (35)
Durant la seconde guerre mondiale les pilotes de la British Royal Air force avaient deacutejagrave
rapporteacute une ameacutelioration de lrsquoacuiteacute visuelle apregraves consommation de confitures de myrtilles
68
Cependant durant cette mecircme peacuteriode la technologie du radar a eacuteteacute introduite en Grande-
Bretagne pour la deacutefense aeacuterienne et des eacutetudes ulteacuterieures nrsquoont pas supporteacute lrsquohypothegravese
drsquoune ameacutelioration de la vision nocturne et de la sensibiliteacute au contraste nocturne par la
suppleacutementation en V myrtillus Le systegraveme de radar et non V myrtillus pourrait alors ecirctre la
cause du succegraves de la Royal Air Force (66)
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale
Des eacutetudes ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoextraits de Vaccinum myrtillus seuls ou associeacutes agrave du
β-carotegravene et de la vitamine E (chez des patients avec ou sans deacutesordre oculaire) agrave ameacuteliorer
la vision nocturne agrave induire une adaptation agrave lrsquoobscuriteacute et une restauration de lrsquoacuiteacute
visuelle (suite agrave une exposition agrave une lumiegravere vive ou un flash) plus rapides (42) Drsquoautres
eacutetudes ont montreacute lrsquoefficaciteacute des extraits anthocyanosidiques de myrtille agrave ameacuteliorer la vision
nocturne et lrsquoajustement agrave lrsquoobscuriteacute chez des controcircleurs aeacuteriens des pilotes drsquoavion des
conducteurs de voiture et de camion (43)
Agrave lrsquoopposeacute drsquoautres eacutetudes ne precirctent pas agrave la myrtille des proprieacuteteacutes sur la vision Crsquoest le
cas notamment de lrsquoeacutetude en 2000 de Muth et coll (46) ils ont rechercheacute les effets de V
myrtillus sur lrsquoacuiteacute visuelle nocturne et la sensibiliteacute au contraste nocturne Leur eacutetude est
randomiseacutee double-aveugle et controcircleacutee par placebo Les sujets inclus dans lrsquoeacutetude sont des
hommes jeunes preacutesentant une bonne vision Un groupe reccediloit 160 mg drsquoextrait de V
myrtillus et lrsquoautre groupe un placebo trois fois par jour pendant 21 jours Apregraves un mois
sans traitement le test reprend pendant 3 semaines en inversant les groupes (les sujets ayant
eu le placebo ont maintenant les capsules de V myrtillus et vice versa) Les reacutesultats montrent
qursquoil nrsquoy a pas de diffeacuterences entre les mesures de la moyenne de lrsquoacuiteacute visuelle nocturne
chez les sujets soumis au traitement par V myrtillus et ceux soumis au placebo De mecircme
lrsquoexamen de la derniegravere acuiteacute visuelle durant le traitement actif et celui durant le placebo ne
reacutevegravelent pas de diffeacuterences dans lrsquoacuiteacute visuelle nocturne Le mecircme reacutesultat neacutegatif est
constateacute pour la sensibiliteacute au contraste nocturne
En conclusion cette eacutetude nrsquoapporte pas de reacutesultats positifs sur lrsquoeffet de V myrtillus sur les
deux paramegravetres mesureacutes mecircme si lrsquoextrait est pris agrave haute dose et pendant une dureacutee
significative
Une critique de lrsquoeacutetude de Muth et coll (46) pourrait ecirctre faite sur la population limiteacutee
utiliseacutee peu de sujets ont eacuteteacute inclus dans lrsquoeacutetude et ceux-ci eacutetaient tous des hommes jeunes
avec une bonne vision Il est vrai que deux de ces sujets avaient une moyenne drsquoacuiteacute
69
visuelle nocturne et une sensibiliteacute au contraste nocturne en dessous des autres sujets or
mecircme chez ces sujets aucune diffeacuterence de mesure nrsquoa eacuteteacute enregistreacutee
Cette eacutetude pose de nouveau des doutes sur lrsquoutilisation de la myrtille dans des formes
couramment disponibles et aux doses recommandeacutees comme suppleacutementation efficace pour
lrsquoameacutelioration de la vision nocturne dans une cateacutegorie de sujets preacutesentant une bonne vision
et essentiellement une vision nocturne normale
2 Eacutetude chez des sujets myopes
Une eacutetude a montreacute qursquoune association drsquoanthocyanosides de V myrtillus avec vitamine E et
β-carotegravene ameacuteliorait le champ visuel de patients atteints de myopie aussi bien lors drsquoun
traitement court que long De mecircme il a eacuteteacute deacutemontreacute une efficaciteacute de lrsquoassociation
drsquoanthocyanosides de myrtille avec le reacutetinol sur la sensibiliteacute de la reacutetine de patients myopes
dans 32 des 42 yeux examineacutes (43)
En 2005 Lee et coll (35) ont mis au point une eacutetude randomiseacutee double-aveugle controcircleacutee
par placebo impliquant 60 sujets avec astheacutenopie et myopie basse agrave modeacutereacutee avec erreurs
reacutefractaires entre -1 et -8 dioptres au niveau des deux yeux Lrsquoobjectif de lrsquoeacutetude est de
deacuteterminer lrsquoeffet de lrsquoadministration drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides purifieacutes agrave hautes doses
de V myrtillus sur la fonction visuelle nocturne et les symptocircmes cliniques chez ces sujets de
mecircme acircge et de sensibiliteacute au contraste similaire Ainsi 30 sujets ont reccedilu des comprimeacutes de
100 mg de traitement contenant 85 drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides et les 30 autres sujets
des comprimeacutes placebo deux fois par jours pendant 4 semaines La fonction visuelle nocturne
est eacutevalueacutee par le test de sensibiliteacute au contraste (test objectif) et les symptocircmes cliniques par
un questionnaire rempli par les sujets (test subjectif) avant et apregraves le traitement Ainsi les
reacutesultats baseacutes sur lrsquoanalyse du questionnaire montrent qursquoagrave la suite des 4 semaines de
traitement les sujets traiteacutes par anthocyanosides ont preacutesenteacute une ameacutelioration des symptocircmes
(meilleurs que le groupe placebo) De plus le groupe anthocyanoside a montreacute une sensibiliteacute
au contraste ameacutelioreacutee agrave chaque cycle par degreacute alors qursquoaucune ameacutelioration nrsquoa eacuteteacute
constateacutee dans le groupe placebo
Des eacutetudes anciennes ont reporteacutes une ameacutelioration de la fonction visuelle nocturne chez des
sujets normaux prenant des anthocyanosides alors que des eacutetudes plus reacutecentes nrsquoont montreacute
aucun effet sur la vision nocturne par administration orale simple ou multiple drsquooligomegraveres
drsquoanthocyanosides (35) Ces discordances de reacutesultats pourraient ecirctre causeacutees par des
diffeacuterences dans le choix des sujets les meacutethodes drsquoeacutevaluation de la vision nocturne ainsi que
la concentration et la dose drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides utiliseacutees Alors que des eacutetudes ne
70
montrent pas drsquoeffets des oligomegraveres drsquoanthocyanosides chez les sujets normaux drsquoautres
eacutetudes deacutemontrent lrsquoefficaciteacute de ceux-ci chez les sujets avec myopie ou heacutemeacuteralopie
(diminution anormale de la vision dans lrsquoobscuriteacute)
Dans lrsquoeacutetude de Lee et coll (35) les conditions sont diffeacuterentes de celles que lrsquoon peut trouver
dans drsquoautres eacutetudes qui ont pu ecirctre faites en termes de dose de dureacutee et de type de sujets En
effet une haute dose drsquooligomegraveres anthocyanosides (concentreacutes agrave 85 gracircce au processus de
fermentation speacutecifique) est administreacutee pendant une plus longue peacuteriode compareacutee aux autres
eacutetudes De plus les sujets utiliseacutes englobent des personnes avec myopie astheacutenopie et une
sensitiviteacute au contraste meacutesopique diminueacutee alors que drsquoautres eacutetudes utilisent des sujets
normaux
En conclusion cette eacutetude montre que les anthocyanosides peuvent ameacuteliorer les symptocircmes
subjectifs et les reacutesultats de la moyenne de la sensibiliteacute au contraste chez des sujets
preacutesentant myopie et astheacutenopie Mais drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour rechercher la
dose optimale de V myrtillus la dureacutee de traitement neacutecessaire la dureacutee de lrsquoeffet apregraves
lrsquoarrecirct du traitement et lrsquoapplication de ce traitement en clinique chez des patients avec des
maladies oculaires comme la reacutetinite pigmentaire le glaucome et la reacutetinopathie diabeacutetique
connus pour reacuteduire la vision nocturne
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004)
Canter et coll (13) ont proceacutedeacute agrave une meacuteta-analyse des eacutetudes faites concernant lrsquoeffet des
anthocyanosides de V myrtillus sur la vision nocturne
Des 30 eacutetudes trouveacutees par les auteurs avec des reacutesultats se reacutefeacuterant agrave la vision dans des
conditions de lumiegravere reacuteduites 12 eacutetudes sont des eacutetudes controcircleacutees par placebo Les 4 eacutetudes
les plus reacutecentes sont des eacutetudes controcircleacutees randomiseacutees et rapportent des reacutesultats neacutegatifs
La 5egraveme
eacutetude controcircleacutee randomiseacutee et les 7 eacutetudes controcircleacutees non randomiseacutees rapportent des
reacutesultats positifs dans lrsquoameacutelioration de la vision en lumiegravere reacuteduite Les reacutesultats neacutegatifs sont
associeacutes avec une plus grande rigueur dans la meacutethodologie mais aussi des doses plus basses
et des extraits provenant de sources geacuteographiques distincts pouvant diffeacuterer dans la
composition en anthocyanosides De plus dans 11 des 12 eacutetudes les sujets utiliseacutes sont des
sujets en bonne santeacute avec une vision moyenne normale voire au-dessus de la normale Ainsi
les eacutetudes cliniques les plus rigoureuses ne supportent pas lrsquohypothegravese drsquoune ameacutelioration de
la vision nocturne chez les sujets en bonne santeacute par les anthocyanosides de V myrtillus
Cependant lrsquoassociation entre rigueur meacutethodologique publication reacutecente reacutesultat neacutegatif
est confondu avec plusieurs facteurs de confusion qui peuvent biaiser les eacutetudes comme la
71
dose les diffeacuterentes variations geacuteographiques modifiant la composition des extraits et le type
de sujets inclus dans les eacutetudes De plus les meacutethodes mises en place pour obtenir et
interpreacuteter les eacutelectroreacutetinogrammes employeacutees dans les eacutetudes plus anciennes diffegraverent des
proceacutedures standardiseacutees utiliseacutees maintenant
Lorsque lrsquoanalyse des facteurs de confusion est faite une association entre les reacutesultats
positifs et lrsquoutilisation de plus hautes doses en anthocyanosides de V myrtillus est mise en
eacutevidence De plus la composition phytochimique des extraits diffegraverent selon la geacuteographie
des plantes de Myrtillier Les reacutesultats positifs sont souvent associeacutes avec des eacutetudes utilisant
des extraits provenant drsquoItalie ou de France La quantiteacute des anthocyanosides de la myrtille
(constituants les plus actifs) varient en fonction du cycle de vie des plantes en reacuteponse agrave des
facteurs de stress et des signaux de lrsquoenvironnement Ainsi avec le mucircrissement la quantiteacute
des anthocyanosides augmente alors que celle des proanthocyanidines diminue Crsquoest
pourquoi agrave cause des diffeacuterences geacuteographiques une standardisation drsquoune quantiteacute en
pourcentage fixe drsquoextrait est une proceacutedure insuffisante pour garantir une composition
identique et une activiteacute pharmacologique Lors des eacutetudes drsquoautres composants peuvent ecirctre
ajouteacutes avec les anthocyanosides de mytille comme le β-carotegravene (un deacuteficit est connu pour
ecirctre lieacute agrave une alteacuteration de la vision nocturne) Lrsquoeffet confondant du β-carotegravene dans
certaines eacutetudes ne peut ecirctre correctement eacutevalueacute sans connaitre le statut nutritionnel des
sujets Dans cette meacuteta-analyse 5 eacutetudes utilisent dans le traitement actif du β-carotegravene Une
eacutetude ne montre pas de diffeacuterences dans lrsquointerpreacutetation de lrsquoeacutelectroreacutetinogramme des sujets
traiteacutes avec lrsquoextrait de V myrtillus avec ou sans β-carotegravene et 3 eacutetudes reacutealiseacutees dans les
anneacutees 1940 montrent que le β-carotegravene nrsquoa pas drsquoeffet sur lrsquoadaptation nocturne quand il est
administreacute seul
En conclusion des eacutetudes rigoureuses sur les effets des extraits de V myrtillus vis-agrave-vis de
sujets souffrant drsquoune alteacuteration de la vision nocturne due agrave des conditions pathologiques
oculaires sont neacutecessaires Cependant la preacutesence drsquoeacutetude plus faibles dans la meacutethodologie
le teacutemoignage des eacutetudes animales les eacutetudes des anthocyanosides syntheacutetiques (la cyanidine
syntheacutetique utiliseacutee dans des eacutetudes controcircleacutees par placebo dans les anneacutees 1970 et 1980 a
montreacute une ameacutelioration de la vision nocturne chez des sujets en bonne santeacute et souffrant
drsquoune varieacuteteacute de deacutesordres ophtalmologiques) une eacutetude controcircleacutee randomiseacutee de Ribes
nigrum montrant un effet positif sur le seuil drsquoadaptation nocturne pourraient justifier des
eacutetudes compleacutementaires sur les anthocyanosides de myrtille chez des sujets preacutesentant une
alteacuteration de la vision nocturne
72
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique
La reacutetinopathie diabeacutetique est une complication agrave long terme du diabegravete qui se traduit par une
deacutegeacuteneacuterescence des capillaires irrigant la reacutetine La maladie se manifeste par des
microaneacutevrysmes qui sont de petites dilatations de la paroi des capillaires (preacutesence de petits
points rouges drsquoheacutemorragies et drsquoapparition drsquoexsudatshellip) Dans des formes eacutevolueacutees une
baisse de la vision peut survenir (1) La neacuteovascularisation est la principale modification
rencontreacutee dans la reacutetinopathie diabeacutetique reacutesultant drsquoune interaction avec des cytokines et
des facteurs de croissance pouvant ecirctre responsables de lrsquoangiogenegravese comme dans le cancer
Or VEGF joue un rocircle dans la neacuteovascularisation reacutetinienne mecircme si son rocircle exact dans la
survenue preacutecoce de la pathologie nrsquoest pas encore entiegraverement compris (16)
En 2005 une eacutetude meneacutee par Chung et coll (16) a deacutemontreacute la capaciteacute de Vaccinium
myrtilus a diminueacute le glucose sanguin plasmatique et agrave reacuteduire le pourcentage de surface de
vascularisation reacutetinien chez des rats diabeacutetiques compliqueacute drsquoune reacutetinopathie diabeacutetique
ces pathologies eacutetant induites par la streptozocine Cependant pas drsquoeffet est constateacute sur le
VEGF (16)
Une eacutetude clinique a deacutemontreacute lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides de V myrtillus (administration
orale de 480 mgjour pendant 180 jours) sur les manifestations de la reacutetinopathie diabeacutetique
notamment la reacuteduction voire la disparition des heacutemorragies reacutetiniennes chez des patients
diabeacutetiques (diabegravete type 2) et souffrant drsquoune reacutetinopathie non prolifeacuterative (43)
Lrsquoameacutelioration significative des examens ophtalmoscopiques et angiographiques apregraves
traitement avec 320 mg de Myrtocyanreg
pendant 30 jours a eacuteteacute montreacutee chez 77 agrave 92 des 40
patients inclus dans lrsquoeacutetude et souffrant de diabegravete et de reacutetinopathie hypertensive (43)
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes
Lrsquoeacutepitheacutelium de la surface oculaire joue le rocircle fondamental de barriegravere empecircchant lrsquoentreacutee de
substances nocives dans la corneacutee et maintenant lrsquointeacutegriteacute de la surface oculaire La
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes permet la reacutegeacuteneacuteration du tissu pour
maintenir le rocircle protecteur de la corneacutee et la cicatrisation Crsquoest pourquoi le cycle cellulaire
est tregraves important Au niveau de ces cellules des glycosaminoglycanes (GAGs glucides de
lrsquoorganisme localiseacutes dans le mucus les seacutecreacutetions digestives et le tissu conjonctif) sulfateacutes
sont produits par les trois types de cellules de la corneacutee (cellules eacutepitheacuteliales endotheacuteliales et
les fibroblastes) Les GAGs de lrsquoeacutepitheacutelium corneacuteen peuvent moduler le comportement
cellulaire comme lrsquoadheacutesion la migrationhellip et jouent donc un rocircle important pour la
73
cicatrisation corneacuteenne Lrsquoun des GAGs est lrsquoacide hyaluronique substance de la matrice
extra-cellulaire jouant plusieurs rocircles notamment dans la lubrification lrsquohydratation de la
matrice corneacuteenne et lrsquohomeacuteostasie Il pourrait aussi ameacuteliorer la santeacute de la surface oculaire
et reacuteduire la pression intraoculaire lors de la pose chirurgicale drsquoun implant oculaire (55)
Song et coll (55) ont reacutecemment eacutetudieacute les effets drsquoun extrait de V myrtillus sur le cycle la
croissance cellulaire lrsquoexpression des GAGs et de lrsquoacide hyaluronique dans un modegravele in
vitro de cellules eacutepitheacuteliales limbales corneacuteennes humaines Les reacutesultats deacutemontrent
lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille et ses anthocyanosides agrave promouvoir la division et la
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteenne sans aucune toxiciteacute cellulaire et agrave
augmenter la quantiteacute totale de GAGs sans modifications significatives de lrsquoacide
hyaluronique Lrsquoextrait de myrtille peut alors ecirctre beacuteneacutefique pour la reacutegeacuteneacuteration
physiologique et lrsquohomeacuteostasie
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete
Helmstaumldter (26) a reacutepertorieacute les substances antidiabeacutetiques utiliseacutees avant la deacutecouverte de
lrsquoinsuline Parmi toutes les plantes V myrtillus est celle la plus freacutequemment retrouveacutee dans
les preacuteparations antidiabeacutetiques commerciales au XXegraveme
siegravecle Les feuilles pourraient ecirctre la
partie de plante la plus utiliseacutee Une preacuteparation tregraves commune eacutetait le laquo Pilulae Myrtilli
Jasper raquo (1912) chacun contenant 012 grammes drsquoextraits de feuilles mais cette preacuteparation
nrsquoeacutetait mentionneacutee qursquooccasionnellement dans les traiteacutes scientifiques et seulement quelques
recherches ont eacuteteacute retrouveacutees
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine
Petlevski et coll (48) ont eacutetudieacute les effets drsquoune preacuteparation agrave base de plantes antidiabeacutetiques
comprenant la feuille de V myrtillus et drsquoautres plantes breveteacutee sous le numeacutero No P-
9801091 disponible sur le marcheacute Croate Deux extraits un extrait eacutethanolique (extrait 1) et
non eacutethanolique (extrait 2) sont administreacutes agrave des souris (NOD) non obegraveses rendues
diabeacutetiques par lrsquoalloxane (deacuteriveacute pyrimidique produisant chez lrsquoanimal une neacutecrose des
cellules β des icirclots de Langerhans)
Lrsquoeacutetude deacutemontre que les extraits 1 et 2 diminuent le glucose sanguin de 10 et 20
respectivement de la valeur initiale des souris NOD controcircles (sans traitement) Lrsquoeffet de
lrsquoextrait 2 est donc beaucoup plus marqueacute il est compareacute agrave un antidiabeacutetique de reacutefeacuterence
(acarbose) Les reacutesultats montrent que lrsquoextrait diminue significativement le niveau de glucose
74
sanguin alors que la diminution par lrsquoacarbose nrsquoest pas significative La mecircme chose est
observeacutee pour le niveau de fructosamine dans le sang
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques
Le diabegravete est une maladie souvent associeacutee agrave des deacutesordres meacutetaboliques comme une
hypertriglyceacuterideacutemie Lrsquoinsuline joue un rocircle essentiel dans le meacutetabolisme des lipoproteacuteines
Chez la plupart des patients atteints de diabegravete type 1 (insulino-deacutependant)
lrsquohypertriglyceacuterideacutemie est induit par une moindre activiteacute de la lipase lipoproteacuteique (enzyme
permettant lrsquohydrolyse des triglyceacuterides des lipoproteacuteines plasmatiques) deacutependante de
lrsquoinsuline
Une eacutetude meneacutee en 1996 par Cignarella et coll (17) a montreacute que lrsquoadministration orale
(pendant 4 jours) drsquoun extrait hydro-alcoolique seacutecheacute de feuilles de V myrtillus agrave des rats
rendus diabeacutetiques par streptozocine pouvait diminuer le niveau de glucose plasmatique par
environ 26 et le niveau de triglyceacuterides plasmatiques par 39 Ainsi lrsquoextrait de myrtille
expose une activiteacute hypolipideacutemiante dose-deacutependante chez les rats en stimulant le
catabolisme des lipoproteacuteines riches en triglyceacuterides probablement sous des conditions en
deacuteficits drsquoinsuline Par contre agrave lrsquoopposeacute du ciprofibrate (une moleacutecule de reacutefeacuterence dans le
traitement de lrsquohypertriglyceacuterideacutemie) lrsquoextrait de V myrtillus ne preacutevient pas la formation de
thrombus veineux chez ces rats diabeacutetiques
Ces eacutetudes in vivo ont montreacute lrsquoaction hypoglyceacutemiante de V myrtillus une fois les
constituants isoleacutes cette plante agrave usage traditionnel pourrait eacutegalement attirer lrsquoattention sur le
traitement de certains deacutesordres du meacutetabolisme lipidique
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique
Borrelli et coll (10) ont listeacute les agents phytogeacuteniques utiliseacutes comme remegravedes des ulcegraveres
gastriques Des reacutesultats ont deacutemontreacute lrsquoaction significative de V myrtillus dans la preacutevention
et le traitement des ulcegraveres Certaines eacutetudes ont montreacute ses effets protecteurs dans des ulcegraveres
induits par ligature du pylore par la reacuteserpine ou la pheacutenylbutazone ougrave le traitement avec les
anthocyanosides de V myrtillus a eacuteteacute donneacute avant ou pendant la formation de lrsquoulcegravere La
myrtille exerce un effet anti-ulcegravere en partie par une augmentation du mucus dans la paroi de
lrsquoestomac (ameacuteliorant lrsquoefficaciteacute de la barriegravere formeacutee par ce mucus) et peut influencer la
biosynthegravese des mucopolysaccharides
75
Magistretti et coll (37) montrent qursquoun extrait drsquoanthocyanosides de Vaccinium myrtillus
possegravede une action anti-ulcegravere inteacuteressante dans divers modegraveles expeacuterimentaux De ces
reacutesultats les auteurs ont voulu trouver les composants de Vaccinium myrtillus responsables de
cette action Or cette plante comme nous le savons est riche en anthocyanosides et
anthocyanidines (aglycones respectifs) Cela explique pourquoi les auteurs ont eacutetudieacute les
effets sur lrsquoulcegravere aigu et chronique chez des rats drsquoune anthocyanidine la cyanidine ou 3 5
7-trihydroxy-2-(34-dihydroxypheacutenyl)-1-benzopyrylium chloride (IdB 1027) Les reacutesultats
montrent les effets drsquoIdB 1027 suivants
- reacuteduction de lrsquoulcegravere gastrique induit par la ligature du pylore de faccedilon non dose-
deacutependante
- inhibition de lrsquoulcegravere de stress
- protection de lrsquoestomac de lrsquoulcegravere induit par pheacutenylbutazone
- reacuteduction de la seacuteveacuteriteacute de lrsquoulcegravere induit par indomeacutetacine de faccedilon dose-
deacutependante
- inhibe significativement lrsquoulceacuteration gastrique induit par reacuteserpine
- protection significative mais pas dose-deacutependante contre les leacutesions induites par
lrsquoeacutethanol
- inhibe significativement et de faccedilon dose-deacutependante lrsquoulcegravere induit par histamine
- et reacuteduction significative les leacutesions induites par acide aceacutetique
En conclusion lrsquoIdB 1027 est capable de reacuteduire ou mecircme drsquoinhiber les ulcegraveres induits par de
nombreux facteurs comme la ligature du pylore les AINS Les meacutecanismes par lesquels un
meacutedicament augmente les deacutefenses de la muqueuse gastrique sont varieacutes cela peut ecirctre une
influence sur la seacutecreacutetion et les proprieacuteteacutes physicochimiques du mucus ou une stimulation de
la reacutegeacuteneacuteration cellulaire une influence sur la microcirculation de la muqueuse la seacutecreacutetion
de bicarbonate la protection contre les dommages induits par les radicaux libres ou
lrsquoaugmentation de lrsquoAMP cyclique Ainsi lrsquoIdB 1027 peut agir par une combinaison de
certains de ces meacutecanismes comme une augmentation de la seacutecreacutetion de mucus (sans effet
anti-seacutecreacutetoire gastrique) dans des conditions physiologiques normales et dans des conditions
de deacutefense alteacutereacutees la stimulation de la reacutegeacuteneacuteration cellulaire montreacutee par son activiteacute contre
lrsquoulcegravere induit par acide aceacutetique lrsquoameacutelioration de la microcirculation de la muqueuse
montreacutee par son activiteacute contre lrsquoulcegravere geacuteneacutereacute par lrsquohistamine De plus lrsquoIdB 1027 est un
antioxydant et les anthocyanidines sont des inhibiteurs efficaces de lrsquoAMPc-
phosphodiesteacuterase dans des tissus varieacutes ce qui pourrait contribuer agrave lrsquoactiviteacute
pharmacologique observeacute
76
En conclusion les effets deacutemontreacutes dans les modegraveles drsquoanimaux lrsquoabsence de toxiciteacute et
lrsquoexcellente toleacuterance font de cette moleacutecule un bon candidat dans des eacutetudes cliniques
comme agent antiulcegravereux
2 Action sur Helicobacter pylori
Le traitement contre Helicobacter pylori est la plupart du temps constitueacute de deux
antibiotiques et drsquoun inhibiteur de la pompe agrave protons comme lrsquoomeacuteprazole par exemple Or
le problegraveme qui se pose est lrsquoapparition drsquoune reacutesistance aux antibiotiques De plus la bacteacuterie
peut intervenir dans la production des radicaux libres de lrsquooxygegravene augmentant davantage le
stress oxydant et ses dommages au niveau gastrique Une augmentation de la peroxydation
lipidique et un dommage agrave lrsquoADN au niveau des tissus gastriques sont alors observeacutes Par
conseacutequent des antioxydants naturels comme les anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
pourraient servir comme outil theacuterapeutique pour reacuteduire le stress oxydant induit par
Helicobacter pylori (15)
Chatterjee et coll (15) ont eacutetudieacute les effets de diffeacuterents extraits de baies sur Helicobacter
pylori avec ou sans clarithromycine in vitro ainsi que la sensibiliteacute de la bacteacuterie agrave la
clarithromycine Plusieurs baies sont eacutetudieacutees comme la myrtille sauvage (Vaccinium
myrtillus) lrsquoairelle la canneberge la fraise la framboise le sureau et Optiberryreg (un
meacutelange de ces six baies) Cette eacutetude a montreacute que tous les extraits aux concentrations
testeacutees inhibent la croissance de maniegravere dose-deacutependante de H pylori avec une efficaciteacute
supeacuterieure pour Optiberryreg Crsquoest la premiegravere eacutetude montrant lrsquoinhibition de H pylori par des
extraits de baies et notamment V myrtillus lequel preacutesente une meilleure activiteacute que la
fraise la framboise et la canneberge en particulier pour des basses concentrations Enfin un
effet inhibiteur suppleacutementaire est obtenu avec lrsquoajout de la clarithromycine associeacutee aux
extraits de baies agrave toutes les concentrations testeacutees
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus
1 Action antibacteacuterienne
Une eacutetude meneacutee en 2005 par Puupponen-Pimiauml et coll (51) a montreacute lrsquoactiviteacute
antibacteacuterienne de plusieurs baies nordiques incluant V myrtillus Les reacutesultats rapporteacutes
dans cette thegravese ne se reacutefegraverent qursquoagrave la myrtille et sont reacutesumeacutes dans le tableau suivant
77
Listeria
monocytogenes
E-991205
Salmonella
enterica sv
thyphimurium
E-981151
Staphylococcus
aureus E-70045
Lactobacillus
rhamnosus
E-96666
Temps
drsquoincubation 12h 24h 12h 24h 12h 24h 12h 24h
2 mgmL-1
- - + - ++ ++ - -
10 mgmL-1
- - +++ + +++++ +++++ - -
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
(Leacutegende C concentration de la baie de myrtille - pas drsquoeffets inhibiteurs + nombre de
bacteacuteries viables diffegraverent de 10-5 times 101 par rapport au controcircle ++ nombre de bacteacuteries viables
diffegraverent de 5 times 101-5 times 102 par rapport au controcircle +++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 102-5 times 103 par rapport au controcircle ++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 103-5 times 104
par rapport au controcircle +++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de plus 5 times 104 par rapport au
controcircle)
Les reacutesultats deacutemontrent lrsquoactiviteacute antimicrobienne de la myrtille lyophiliseacutee sur les bacteacuteries
Salmonella et Staphylococcus augmente de maniegravere concentration-deacutependante Par contre la
myrtille nrsquoa aucune activiteacute vis-agrave-vis de Listeria et Lactobacillus
Les composeacutes pheacutenoliques ne sont responsables que partiellement de lrsquoinhibition de la
croissance des bacteacuteries Salmonella les effets antimicrobiens eacutetant probablement deacutetenus par
drsquoautres composeacutes comme les acides organiques
Les baies et notamment V myrtillus pourraient ecirctre utiliseacutees dans les aliments fonctionnels et
dans lrsquoindustrie pharmaceutique en tant qursquoagents antimicrobiens
Ainsi la myrtille utiliseacutee traditionnellement est preacutesente dans de nombreuses eacutetudes qui ont
deacutemontreacute ses multiples actions dans des domaines meacutedicaux varieacutes et des pathologies diverses
comme lrsquoinsuffisance veineuse lrsquoatheacuteroscleacuterose le cancer le diabegravete les deacutesordres
oculaireshellip Par ailleurs son action antioxydante attire lrsquoattention des scientifiques et il serait
favorable drsquoentreprendre des eacutetudes cliniques
VIII Toxicologie
1 Effets indeacutesirables
Dans les eacutetudes cliniques sur les extraits de V myrtillus reacutepertorieacutees par Marazzoni et coll en
1996 (43) aucun effet indeacutesirable nrsquoa eacuteteacute observeacute mecircme lors drsquoeacutetudes ougrave le traitement aux
78
extraits de V myrtillus est pris sur une longue peacuteriode Cependant la plupart des eacutetudes
nrsquoincluaient qursquoun petit nombre de patients Une eacutetude de surveillance post-marketing a inclus
2295 sujets prenant 160 mg de Myrtocyanreg
deux fois par jour pendant 1-2 mois pour des
pathologies diverses (insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs fragiliteacute capillaire
modifications de la microcirculation reacutetinienne ou heacutemorroiumldes) Cette eacutetude a montreacute que
seuls 94 sujets ont reporteacute des effets indeacutesirables surtout lieacutes agrave la peau au tractus gastro-
intestinal et au systegraveme nerveux Une eacutetude non-controcircleacutee incluant des femmes enceintes avec
insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs et en crise heacutemorroiumldaire montre qursquoune
administration drsquoun extrait de myrtille (80 ou 160 mg) deux ou trois par jour pendant trois
mois nrsquoentraicircnait pas drsquoeffets indeacutesirables Mais en preacutesence de peu drsquoeacutetudes toxicologiques et
drsquoune seacutecuriteacute de la myrtille non eacutetablie lrsquoutilisation de la myrtille chez la femme enceinte et
allaitante devrait ecirctre proscrite
2 Doses leacutetales 50 (DL50)
Les donneacutees toxicologiques indiquent une DL50 pour le Myrtocyanreg drsquoenviron 2 gkg chez
les souris et les rats Chez le chien des doses uniques de 3 gkg nrsquoentraicircnent pas drsquoeffets
indeacutesirables si ce nrsquoest une coloration plus fonceacutee des urines et fegraveces Une administration
orale quotidienne drsquoextrait de V myrtillus agrave des doses de 125 agrave 500 mgkg et 80 agrave 320 mgk
respectivement agrave des rats et des chiens pendant 6 mois nrsquoentrainent ni mortaliteacute ni toxiciteacute
Les eacutetudes pharmacocineacutetiques reacutealiseacutees chez des rats ont deacutemontreacute une eacutelimination rapide
des anthocyanosides de myrtille dans les deux heures suivant une administration orale (5) Il
est eacutetablit dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) que si les parties de
mytille utiliseacutees pour les phytomeacutedicaments est une poudre de fruit frais ou sec ou de feuille
le dossier laquo abreacutegeacute raquo de lrsquoAMM doit preacutesenter une eacutetude toxicologique alleacutegeacutee celle-ci
nrsquoeacutetant pas indispensable pour certaines formes galeacuteniques agrave base de myrtille (tisane extrait
aqueux teinture extrait hydro-alcoolique) La monographie de la Commission E allemande
preacutecise que si la baie de myrtille est atoxique la feuille quant agrave elle peut induire des
intoxications chroniques en cas de doses eacuteleveacutees ou drsquousage prolongeacute Les premiers
symptocircmes chez lrsquoanimal se traduisent par une aneacutemie une cachexie un ictegravere un eacutetat
drsquoexcitation aiguumle et des perturbations du tonus pouvant agrave terme ecirctre fatale apregraves une
administration chronique de 15 gkgjour Ces symptocircmes ressembleraient agrave ceux preacutesents
dans lrsquointoxication par lrsquohydroquinone ce dipheacutenol nrsquoest pourtant pas preacutesent dans la feuille
de myrtille La Commission E par prudence ne justifie pas lrsquoutilisation de la feuille dans un
but theacuterapeutique face agrave ces risques La Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament quant agrave
79
elle ne demande un essai toxicologique que pour la poudre de feuille mais pas pour les
extraits (quelque soit le titre) (11) De ce fait drsquoautres eacutetudes toxicologiques seraient
neacutecessaires
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus
Mecircme si aucune contre-indication nrsquoest mentionneacutee dans la litteacuterature il convient toutefois de
consideacuterer un risque potentiel drsquointeraction entre les preacuteparations agrave base de myrtille et drsquoautres
produits meacutedicinaux ayant des effets similaires ou opposeacutes agrave ceux de la myrtille Des eacutetudes
preacutecliniques par exemple ont montreacute que les extraits de V myrtillus avaient un effet anti-
agreacutegant et pouvaient augmenter le temps de saignement (5) Une surveillance devrait ecirctre
apporteacutee lors drsquoassociation entre les speacutecialiteacutes agrave base de myrtille et les meacutedicaments
antiagreacutegants ou anticoagulants mecircme si aucune interaction nrsquoa eacuteteacute rapporteacutee Enfin comme
nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment lrsquoutilisation de speacutecialiteacutes agrave base de myrtille est deacuteconseilleacutee
chez la femme enceinte ou allaitante (5)
80
QUATRIEME PARTIE
UTILISATIONS DE VACCINIUM
MYRTILLUS L
81
I Utilisations alimentaires de Vaccinium myrtillus
La myrtille est avant tout un fruit tregraves appreacutecieacute par les consommateurs pour ses proprieacuteteacutes
gustatives et sa valeur nutritive
1 Utilisations culinaires
Les promeneurs friands des baies de myrtille les consomment sur place ou chez eux Il est
important de laver les baies avant leur consommation car lrsquohomme risque drsquoecirctre toucheacute par
lrsquoeacutechinococcose multiloculaire Cette maladie parasitaire est une cestodose qui seacutevit dans
lrsquoheacutemisphegravere Nord le Massif central lrsquoEst de la France et la Suisse Le renard et autres
canideacutes (chiens) se contaminent eux-mecircmes en mangeant des rongeurs sauvages parasiteacutes
(campagnoleshellip) ils deacuteposent alors des selles contenant des œufs de teacutenia sur le sol
lrsquohomme srsquoinfeste en mangeant les myrtilles proches du sol La maladie se caracteacuterise par le
deacuteveloppement de la larve de teacutenia dans le foie y formant de nombreux alveacuteoles Les
symptocircmes principaux sont douleur sourde amaigrissement et ictegravere (1)
Utiliseacutees en cuisine les myrtilles font lrsquoobjet de nombreuses recettes culinaires Elles sont
utiliseacutees pour accommoder les viandes leur apportant une saveur aciduleacutee Des charcutiers les
ajoutent mecircme agrave leurs saucissons pour les rendre plus moelleux
Les myrtilles sont souvent retrouveacutees dans de nombreuses pacirctisseries (sableacutes citronneacutes cakes
brioches tartes tartelettes puddings vacherins souffleacutes et glaceacutes coulis de fruits rouges
sorbets glaceshellip)
Les baies peuvent aussi ecirctre utiliseacutees pour la preacuteparation de confiture geleacutee et compote
Certains agriculteurs-reacutecolteurs vendent les myrtilles en confiture sur les marcheacutes locaux
Enfin on retrouve des boissons agrave base de myrtilles (jus de fruit nectar sirop liqueur vin et
vinaigre) (22)
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire
Les proprieacuteteacutes tinctoriales des anthocyanes de myrtille sont utiliseacutees dans lrsquoindustrie
alimentaire comme colorant sous la codification E 163 Gracircce agrave leur tregraves faible toxiciteacute il nrsquoy
aucune quantiteacute maximale speacutecifieacutee (quantum satis) ni dose journaliegravere acceptable Malgreacute
leurs proprieacuteteacutes tinctoriales les anthocyanes sont peu utiliseacutees dans lrsquoindustrie alimentaire agrave
cause de leur instabiliteacute (perte ou changement de couleur) en preacutesence de certains facteurs
physico-chimiques de lrsquoenvironnement comme le pH la tempeacuterature et la lumiegravere De plus
82
drsquoautres problegravemes srsquoajoutent agrave leur utilisation comme leur reacuteaction avec le dioxyde de soufre
(substance utiliseacutee pour la conservation drsquoaliments) leur faible solubiliteacute dans lrsquoeau et leur
preacutecipitation formant des complexes avec les proteacuteines Crsquoest pourquoi des proceacutedeacutes ont eacuteteacute
rechercheacutes pour augmenter leur stabiliteacute comme lrsquoutilisation drsquohydrocolloiumldes comme
lrsquoalginate de sodium et un surfactant ionique comme le laurylsulfate de sodium (3)
II Utilisations pharmaceutiques
Pour rappel la liste des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition
comporte deux parties (2)
La LISTE A laquo Plantes meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement raquo et la LISTE B laquo Plantes
meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement en lrsquoeacutetat ou sous forme de preacuteparation dont les effets
indeacutesirables potentiels sont supeacuterieurs au beacuteneacutefice theacuterapeutique attendu raquo
La myrtille appartient agrave la liste A des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition mais nrsquoy fait lrsquoobjet drsquoaucune monographie Agrave la Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition le fruit frais et sec de myrtille font lrsquoobjet drsquoune monographie (Annexe II et III
respectivement) En France certaines indications theacuterapeutiques selon la partie de plante
utiliseacutee sont revendiqueacutees dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) Ainsi
on retrouve les indications suivantes
- pour le fruit (frais ou sec) et la feuille par voie orale ou en usage locale
traditionnellement utiliseacute dans les manifestations subjectives de lrsquoinsuffisance veineuse telles
que jambes lourdes et dans la symptomatologie heacutemorroiumldaire
Il y a drsquoautres indications theacuterapeutiques possibles comme
- pour le fruit (frais ou sec) par voie orale traditionnellement utiliseacute comme
traitement adjuvant de la composante douloureuse des troubles fonctionnels digestifs
- pour le fruit frais (voie orale ou usage local) traitement symptomatique des
troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire tels que ecchymoses peacuteteacutechies
- pour la feuille et le fruit sec (voie orale) traitement symptomatique des diarrheacutees
leacutegegraveres
La Commission E allemande preacutecise dans la monographie (1987) que le fruit de myrtille est
eacutegalement utiliseacute pour le traitement des diarrheacutees aigueumls et pour lrsquoinflammation locale
modeacutereacutee des muqueuses de la caviteacute buccale Le fruit seacutecheacute est utiliseacute agrave la dose de 20 agrave 60 g
par jour en deacutecoction par voie orale pour le traitement de la diarrheacutee chez lrsquoadulte
83
Ainsi les extraits riches en anthocyanosides des fruits de la myrtille peuvent entrer dans la
composition de meacutedicaments utiliseacutes pour traiter les manifestations fonctionnelles de
lrsquoinsuffisance veinolymphatique la symptomatologie des troubles fonctionnels de la fragiliteacute
capillaire et les troubles de la vision meacutesopique et scotopique (11)
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille
11 Meacutedicaments allopathiques (82)
Laboratoire LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRARELreg 100 (comprimeacute enrobeacute bleu clair conditionnement de 20 comprimeacutes)
Meacutedicament vasculoprotecteur drsquoautorisation de mise sur le marcheacute (AMM) ndeg
3400930311714 (1987 reacuteviseacute le 24082005) Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Crsquoest une speacutecialiteacute pharmaceutique associant 100 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de V
myrtillus et 5 mg de β-carotegravene avec comme indications
laquo - Traitement dappoint des manifestations fonctionnelles de linsuffisance veinolymphatique
(jambes lourdes douleurs impatiences du primodecubitus)
- Traitement symptomatique dappoint des troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire
- Traitement dappoint des baisses dacuiteacute et troubles du champ visuel preacutesumeacutes dorigine
vasculaire raquo
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
DIFRARELreg E (comprimeacute enrobeacute blanc)
Meacutedicament ophtalmique agrave viseacute vasculoprotectrice drsquoAMM ndeg3400930311592 (196597
reacuteviseacute le 28022006) pour le conditionnement de 26 comprimeacutes et ndeg3400937701068 (2006)
pour le conditionnement de 60 comprimeacutes Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Cette speacutecialiteacute pharmaceutique associe 50 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de myrtille et
50 mg drsquoα-tocopheacuterol avec comme indication les troubles de la vision meacutesopique scotopique
(heacutemeacuteralopie) et la myopie
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
84
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques
LABORATOIRE BOIRON
Ce laboratoire homeacuteopathique commercialise la teinture megravere de V myrtillus et des dilutions
homeacuteopathiques
Agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise la myrtille a une monographie speacutecifique intituleacutee laquo Vaccinium
myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Annexe IV)
LABORATOIRE LEHNING
DIACUREreg (conditionnement de 60 geacutelules) drsquoAMM ndeg 3232544
Meacutedicament homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale Il est
constitueacute de lrsquoassociation suivante
- Taraxacum pulveacuteriseacute (H) (Pissenlit) 40 mg
- Berberis vulgaris (H) D3 (Epine-vinette) 40 mg
- Juglans regia pulveacuteriseacute (H) (Noyer) 120 mg
- Achillea millefolium (H) D2 (Achilleacutee millefeuille) 40 mg
- Vaccinium myrtillus folium pulveacuteriseacute (H) (feuille de myrtille) 80 mg
- Erythrea centaurium pulveacuteriseacute (H) (Petite centaureacutee) 40 mg
- Natrum phosphoricum (H) D3 40 mg
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute pour les polysurcharges
meacutetaboliques (facilite lrsquoeacutelimination des deacutechets meacutetaboliques) et notamment comme
traitement divers du diabegravete la feuille de myrtille y est utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes
hypoglyceacutemiantes
La posologie est de 1 agrave 2 geacutelules 3 fois par jour en dehors des repas en cure de 1 agrave 2 mois
(82)
DIABENEreg (solution buvable flacon de 30 mL) drsquoAMM ndeg 3030349 est un meacutedicament
homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale
Il est constitueacute de lrsquoassociation suivante Alchemilla vulgaris D3 Kreosotum D4
Strychninum nitricum D4 Arsenicum album D4 Adrenalinum D6 Belladonna D4 Syzygium
jambolanum D2 Vaccinium myrtillus D2 Taraxacum D3 Natrum phosphoricum D3
Helonias dioica D2
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute dans les polysurcharges
meacutetaboliques comme traitement divers de lrsquoobeacutesiteacute
85
La posologie est de 30 gouttes 3 fois par jour de preacutefeacuterence en dehors des repas (82)
13 Compleacutements alimentaires
LABORATOIRE MERCK
BION 3 SENIORreg (conditionnement de 30 ou 60 comprimeacutes)
Compleacutement alimentaire constitueacute de 3 probiotiques 12 vitamines 8 oligo-eacuteleacutements et 3
extraits veacutegeacutetaux (100 microg de luteacuteine extraits de 20 mg de ginseng et 1 mg de myrtille) Il est
preacuteconiseacute en cas de sphegravere ORL fragiliseacutee de deacutefenses naturelles affaiblies et pour mieux
faire face aux rythmes de vie actuels alimentation deacuteseacutequilibreacutee stress surmenage La
posologie est de 1 comprimeacute par jour en cure de 30 ou 60 jours (82)
RICHELETreg ANTI-AGE VISION (conditionnement de 30 comprimeacutes)
Crsquoest un compleacutement alimentaire composeacute de luteacuteine 105 mg drsquoextrait de myrtille des
vitamines B1 B2 et B6 A C E et du seacuteleacutenium La myrtille est utiliseacutee dans ce produit pour
ameacuteliorer la microcirculation sanguine de lrsquoœil et assurer le bon fonctionnement de ses
constituants La posologie est de 1 comprimeacute par jour pendant 3 mois agrave renouveler
peacuteriodiquement (82)
LABORATOIRE LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRAVISIONreg ANTI-VIEILLISSEMENT
Compleacutement alimentaire agrave viseacutee oculaire comprenant des vitamines (vitamine C et E) des
oligo-eacuteleacutements (Zn et Se) des pigments maculaires (luteacuteine extrait de maiumls dont
zeacuteaxanthine) du DHA (ω3) des huiles de poisson et un extrait sec de myrtille doseacute agrave 100 mg
(pour 2 geacutelules) Sur la notice du meacutedicament on trouve les indictions suivantes laquo il est
conseilleacute pour corriger les effets neacutefastes au niveau oculaire des deacuteficits antioxydants en
acides gras essentiels et en pigments maculaires raquo La posologie est de 1 geacutelule 2 fois par jour
(notice du compleacutement alimentaire)
LABORATOIRE ARKOPHARMA
Ce laboratoire pharmaceutique fabrique des geacutelules contenant de la poudre totale microniseacutee
Aujourdrsquohui seule la baie de myrtille est commercialiseacutee par le laboratoire Arkopharma
86
Les Arkogeacutelules de myrtille (baie) sont indiqueacutees dans la diarrheacutee la colite et lrsquoameacutelioration
de la vision nocturne (Brochure Arkopharma)
La myrtille est preacutesente dans beaucoup drsquoautres compleacutements alimentaires que nous ne
citerons pas ici
89
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98
LISTE DES ANNEXES
ANNEXE I Table de composition nutritionnelle Ciqual 2008 de lrsquoAffsa
ANNEXE II Monographie du fruit frais de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE III Monographie du fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE IV laquo Vaccinium myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Pharmacopeacutee
franccedilaise Xegraveme eacutedition)
99
ANNEXE I
TABLE DE COMPOSITION
NUTRITIONNELLE CIQUAL 2008 DE
LrsquoAFSSA
100
Myrtille fraicircche (teneurs pour 100 grammes drsquoaliment comestible)
Leacutegende du code confiance
Echelle de fiabiliteacute de A agrave D A correspondant aux donneacutees les plus fiables
Nom des constituants Uniteacute Teneur
moyenne Min Max Nb eacutechantillons
Source des
donneacutees
Code
confiance
Energie kJ 213 - - - C
Energie kcal 50 - - - C
Energie eacutetiquetage kJ 213 - - - C
Energie eacutetiquetage kcal 50 - - - C
Eau g 838 834 8421 2 760
743 C
Proteacuteines g 074 - - - C
Proteacuteines brutes (N x 625) g 074 - - 1 743 C
Glucides g 10 - - - C
Sucres g 996 - - 1 743 C
Amidon g 003 - - 1 743 C
Polyols totaux g 0 - - - D
Fibres alimentaires g 24 - - 1 743 C
Lipides g 033 - - 1 743 C
AG satureacutes g 0028 - - 1 743 C
AG monoinsatureacutes g 0047 - - 1 743 C
AG polyinsatureacutes g 0146 - - 1 743 C
Cholesteacuterol mg 0 - - 1 690 C
Alcool (eacutethanol) g 0 - - 1 690 C
Acides organiques g 137 - - - 723 C
Sodium mg 1 - - 1 743 C
Magneacutesium mg 6 - - 1 743 C
Phosphore mg 12 - - 1 743 C
Potassium mg 77 - - 1 743 C
Calcium mg 6 - - 1 743 C
Manganegravese mg 0336 - - 1 743 C
Fer total mg 028 - - 1 743 C
Cuivre mg 0057 - - 1 743 C
Zinc mg 016 - - 1 743 C
Seacuteleacutenium microg 01 - - 1 743 C
Iode microg 05 - - 1 573 D
Reacutetinol microg 0 - - 1 743 C
Becircta-carotegravene microg 32 - - 1 743 C
Vitamine D microg 0 - - 1 445 C
Activiteacute vitaminique E (en
eacutequivalents alpha-tocopheacuterol) mg 1 - - 1 497 C
Vitamine C mg 97 - - 1 743 C
Vitamine B1 ou Thiamine mg 0037 - - 1 743 C
Vitamine B2 ou Riboflavine mg 0041 - - 1 743 C
Vitamine B3 ou PP ou
Niacine mg 0418 - - 1 743 C
Vitamine B5 ou Acide
pantotheacutenique mg 0124 - - 1 743 C
Vitamine B6 ou Pyridoxine mg 0052 - - 1 743 C
Vitamine B9 ou Folates
totaux microg 6 - - 1 743 C
Vitamine B12 ou
Cobalamines microg 0 - - 1 743 C
101
ANNEXE II
MONOGRAPHIE DU FRUIT FRAIS
DE VACCINIUM MYRTILLUS L
(Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
102
Myrtille (fruit frais de)
Myrtilli fructus recens
DEacuteFINITION
Fruit mucircr frais ou congeleacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 030 pour cent drsquoanthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-
O-glucoside (chrysantheacutemine C21H21ClO11 Mr 4848) (drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur sucreacutee un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit frais de myrtille est une baie bleu-noir globuleuse drsquoenviron 5 mm de diamegravetre Il
comporte agrave la base une cicatrice ou rarement un fragment de peacutedoncule Le sommet aplati
est surmonteacute par les restes du style persistant et du calice qui forme un repli circulaire Dans
le meacutesocarpe violaceacute et juteux 4 agrave 5 loges renferment de nombreuses petites graines ovoiumldes
brunes
B Le fruit frais de myrtille broyeacute est rouge violaceacute Examinez-le au microscope en utilisant
de la solution drsquohydrate de chloral R Il preacutesente des cellules scleacutereuses rose violaceacute agrave paroi
eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en amas provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des
fragments drsquoeacutepicarpe brun-rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie
des fragments jaune-brun du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave
paroi preacutesentant des eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles de cristaux
drsquooxalate de calcium
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 5 g de drogue reacutecemment broyeacutee ajoutez 20 ml de meacutethanol R
Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
103
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge violaceacute
Chrysantheacutemine une bande rouge violaceacute Une bande principale rouge violaceacute
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge violaceacute
mdash plusieurs bandes bleu violaceacute
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Cendres totales (2416) maximum 06 pour cent
Perte agrave la dessiccation (2232) 800 pour cent agrave 900 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave 105 degC
sur 5000 g de drogue reacutecemment broyeacutee
DOSAGE
Broyez extemporaneacutement 50 g de drogue A environ 500 g de drogue broyeacutee exactement
peseacutes ajoutez 95 ml de meacutethanol R Agitez meacutecaniquement pendant 30 min Filtrez dans une
fiole jaugeacutee de 1000 ml lavez le filtre et compleacutetez au volume avec du meacutethanol R Diluez
cette solution au 150 dans une solution drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le
meacutethanol R
Mesurez lrsquoabsorbance (2225) de la solution obtenue agrave 528 nm en prenant une solution
drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le meacutethanol R comme liquide de
compensation
Calculez la teneur pour cent en anthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-O-
glucoside agrave lrsquoaide de lrsquoexpression suivante
718 = absorbance speacutecifique du chlorure de cyanidine 3-O-glucoside agrave 528 nm
A = absorbance agrave 528 nm
M = Masse de la prise drsquoessai en grammes
CONSERVATION
Lorsque le fruit frais de myrtille est congeleacute conservez-le agrave une tempeacuterature infeacuterieure ou
eacutegale agrave minus 18degC
104
ANNEXE III
MONOGRAPHIE DU FRUIT MUcircR
SECHE DE VACCINIUM MYRTILLUS
L
(Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
105
Fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 10 pour cent de tanins exprimeacutes en pyrogallol (C6H6O3 Mr 1261)
(drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur douce un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit sec de myrtille est une baie bleu-noir ratatineacutee subglobuleuse de 5 mm environ de
diamegravetre avec une cicatrice agrave la base Le sommet est surmonteacute par les restes du style et le
calice persistant qui forme un repli circulaire Le meacutesocarpe violet intense et charnu renferme
de nombreuses petites graines ovoiumldes brunes
B Reacuteduisez le fruit sec de myrtille en poudre (355) (2912) La poudre est brun-violet
Examinez au microscope en utilisant de la solution drsquohydrate de chloral R La poudre
preacutesente des cellules scleacutereuses rose-violet agrave paroi eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en
amas et provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des fragments drsquoeacutepicarpe coloreacutes en brun-
rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie des fragments jaune-brun
du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave paroi preacutesentant des
eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles et des prismes de cristaux drsquooxalate de
calcium de diffeacuterente taille
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 2 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912) ajoutez 20 ml de
meacutethanol R Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
106
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge-violet de faible intensiteacute
Chrysantheacutemine une bande rouge- violet Une bande principale rouge-violet
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge-violet
mdash plusieurs bandes bleu-violet
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Perte agrave la dessiccation (2232) au maximum 120 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave
105 degC pendant 2 h sur 1000 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute
Cendres totales (2416) au maximum 50 pour cent
DOSAGE
Effectuez la deacutetermination des tanins dans les drogues veacutegeacutetales (2814) Utilisez 1500 g de
fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912)
107
ANNEXE IV
laquo VACCINIUM MYRTILLUS
POUR
PREPARATIONS
HOMEOPATHIQUES raquo
(Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition)
108
109
110
111
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
REacuteSUMEacute
Vaccinium myrtillus Linneacute ou myrtille sauvage est un sous-arbrisseau de la famille des
Ericaceacutees On la retrouve dans le nord et le centre de lrsquoEurope en Asie et en Ameacuterique
Boreacuteale En France la myrtille est commune dans la plupart des montagnes entre 400 et 2500
megravetres drsquoaltitude Elle est diffeacuterente de la myrtille cultiveacutee ou Vaccinium corymbosum L Son
fruit est une baie bleu-noir globuleuse agrave saveur sucreacutee et aciduleacutee V myrtillus L renferme de
nombreux composeacutes pheacutenoliques dont les anthocyanosides ceux-ci sont principalement
retrouveacutes dans la peau et la pulpe du fruit de la myrtille ils sont agrave lrsquoorigine de la plupart de
ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques mecircme si drsquoautres composeacutes participeraient agrave lrsquoaction beacuteneacutefique
de la myrtille
V myrtillus L est une plante meacutedicinale inscrite sur la liste A de la Pharmacopeacutee franccedilaise
Xegraveme
eacutedition Le fruit (frais et sec) de la myrtille fait lrsquoobjet drsquoune monographie dans la
Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition Les proprieacuteteacutes theacuterapeutiques des feuilles et des fruits
de V myrtillus L ont eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine populaire les fleurs pour leurs
proprieacuteteacutes toniques astringentes antiseptiques dans le traitement de la diarrheacutee de la
dysenterie quant agrave la feuille elle eacutetait surtout utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
Certaines indications sont valideacutees et figurent dans la Note explicative de lrsquoAgence du
meacutedicament de 1998 et la Commission E allemande Si la baie est atoxique la feuille
preacutesenterait un risque drsquointoxication lieacute agrave des fortes doses ou agrave une utilisation chronique
La myrtille a fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vitro in vivo et quelques eacutetudes cliniques
ayant montreacute une faible biodisponibiliteacute (surtout chez lrsquohomme) mais des effets beacuteneacutefiques
dans le domaine vasculaire dans certaines pathologies ougrave le stress oxydant est impliqueacute
(cancer maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives DMLAhellip) cette activiteacute reste agrave ecirctre prouveacutee chez
lrsquohomme Quant aux eacutetudes cliniques concernant lrsquoaction de la myrtille sur la vision (surtout
nocturne) elles restent controverseacutees mais des eacutetudes in vitro reacutecentes ont montreacute ses effets
beacuteneacutefiques sur la reacutegeacuteneacuteration des cellules corneacuteennes Enfin outre son emploi en cuisine la
myrtille est utiliseacutee dans lrsquoindustrie pour ses anthocyanes aux proprieacuteteacutes tinctoriales et dans le
domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments et des compleacutements alimentaires
agrave base de myrtille pour diverses indications (traitement de la fragiliteacute capillaire de
lrsquoinsuffisance veineuse et dans les troubles de la vision meacutesopique et scotopique)
MOTS-CLEFS Vaccinium myrtillus - Myrtille - anthocyanosides - phytotheacuterapie - stress
oxydant
THESE SOUTENUE LE 19 MAI 2010
Par Olivia Maillefert
86 rue des Ecoles
73230 St Alban Leysse
COMPOSITION DU JURY
Preacutesident du jury
Mr KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences en Botanique
Membres du jury
Mr CORJON Gilles Docteur en Pharmacie
Mr CHOVELON Michel Docteur en Pharmacie
- 1ere pagepdf
- table des matiegraverespdf
- thegravese myrtille olivia paginationpdf
- Derniere pagepdf
-
REMERCIEMENTS
A Monsieur Serge Krivobok
Merci de tout mon cœur pour votre soutien et votre aide dans la reacutealisation de ce travail Vous
mrsquoavez offert votre temps et vos encouragements et ccedila je ne lrsquooublierai jamais
A Monsieur Michel Chovelon
Merci drsquoavoir donneacute de votre temps et de faire partie de mon jury
A Monsieur Gilles Corjon
Je vous remercie drsquoavoir accepteacute si geacuteneacutereusement de faire partie de mon jury
A Monsieur et Madame Berendsen
Je vous remercie pour votre compreacutehension et votre gentillesse
A mes parents
Merci drsquoavoir toujours eacuteteacute lagrave pour moi de mrsquoavoir soutenue dans les moments difficiles Jrsquoai
beaucoup de chance de vous avoir Je vous aime
A mes grands-parents
Que dire si ce nrsquoest que je vous aime
A toute ma famille
Vous comptez tellement pour moi
A mes amis
Merci pour tous ces fous rires et tous les bons moments que nous avons partageacutes Vous avez
toujours eacuteteacute lagrave dans les moments de joie et de peine
A Fabien
Tu es mon avenir et je souhaite de tout cœur qursquoil soit magnifique
A mon grand-pegravere Roger
Jrsquoaurai tant voulu que tu sois lagrave aujourdrsquohui Tu es preacutesent dans mon cœur je pense agrave toi
chaque jour Tu me manques
TABLE DES MATIERES
Liste des tableaux p1
Liste des figures p2
Liste des abreacuteviations p3
Glossaire p4
Introduction et historique p6
Premiegravere partie Botanique de Vaccinium myrtillus L p7
I Classification botanique de la myrtille p8
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees p8
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium p10
3 Vaccinium myrtillus L ou myrtille sauvage p10
31 Description botanique p10
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille p13
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium p13
41 Vaccinium uliginosum L p13
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo p14
43 Vaccinium macrocarpon L p16
II Culture reacutecolte et production des myrtilles p17
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques p17
11 pH du sol p17
12 Conditions climatiques p17
13 Besoins en eau p17
2 Reacutecolte des myrtilles p18
21 Date et mode de reacutecolte p18
3 Production des myrtilles p19
31 Production mondiale p19
32 Production europeacuteenne p19
33 Production franccedilaise p19
4 Post-reacutecolte p20
41 Conservation p20
42 Conditionnement p20
Deuxiegraveme partie Composition chimique de Vaccinium myrtillus L p21
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus p22
1 Identification macroscopique et microscopique p22
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus p22
21 Composition chimique des feuilles p22
22 Composition chimique des fruits p23
II Anthocyanosides p24
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes p24
2 Structure des anthocyanosides p25
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides p26
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides p27
41 Extraction p27
42 Seacuteparation et identification p27
43 Dosage des anthocyanosides p27
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p28
51 Composition en anthocyanosides p28
52 Donneacutees quantitatives p29
53 Donneacutees qualitatives p29
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus p29
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p30
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus p34
1 Acides pheacutenoliques p34
2 Tanins p34
3 Flavonols p35
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans V myrtillus p35
Troisiegraveme partie Inteacuterecircts theacuterapeutiques de Vaccinium myrtillus L p36
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire p37
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur p37
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire p37
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires p39
2 Activiteacute vasoprotectrice p40
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique p40
22 Action sur la reacutesistance capillaire p41
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme p41
24 Action antiatheacuterogegravenique p42
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice p42
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA) p43
5 Action sur lrsquoangiogenegravese p44
II Action de Vaccinium myrtillus dans le stress oxydant p45
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes p45
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p46
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides p46
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma p47
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides p47
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces reacuteactives
azoteacutees p48
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique p49
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines p50
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie p51
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie p51
32 Etudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques p51
4 Effet de Vaccinium myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives
et le vieillissement p53
41 Effets sur un stress eacutemotionnel p53
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication
du stress oxydant p54
5 Effet de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB p56
51 Effets drsquoune exposition solaire p56
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires p56
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire p57
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes p57
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire p58
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge p59
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus p61
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant
un stress oxydant p61
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus p62
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer p62
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus p63
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine p65
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases p66
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes p66
42 Etude de Teller et coll (2009) p66
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision p67
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale p68
2 Eacutetude chez des sujets myopes p69
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004) p70
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique p72
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes p72
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete p73
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine p73
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques p74
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac p74
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique p74
2 Action sur Helicobacter pylori p76
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus p76
1 Action antibacteacuterienne p76
VIII Toxicologie p77
1 Effets indeacutesirables p77
2 Doses leacutetales 50 (DL50) p78
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus p79
Quatriegraveme partie Utilisations de Vaccinium myrtillus L p80
I Utilisations alimentaires p81
1 Utilisations culinaires p81
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire p81
II Utilisations pharmaceutiques p82
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille p83
11 Meacutedicaments allopathiques p83
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques p84
13 Compleacutements alimentaires p85
Conclusion p87
Bibliographie p89
Liste des Annexes p98
Annexe I p99
Annexe II p101
Annexe III p104
Annexe IV p107
1
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
2
LISTE DES FIGURES
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme
3
LISTE DES ABREVIATIONS
AA allyl alcool
ADP adeacutenosine diphosphate
AMPc adeacutenosine monophosphate cyclique
DMLA deacutegeacuteneacuterescence maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge
ECA enzyme de conversion de lrsquoangiotensine
EDRF endothelium-derived relaxing factorfacteur relaxant deacuteriveacute lrsquoendotheacutelium
ERO espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
GAGs glycosaminoglycanes
GSH glutathion
H2O2 peroxyde drsquohydrogegravene
IC50 Inhibitory Concentration 50concentration inhibitrice agrave 50
IEC inhibiteur de lrsquoenzyme de conversion
IGF insulin-like growth factor
LDLs low-density lipoproteins lipoproteacuteines de basse densiteacute
MDA malondialdeacutehyde
NO monoxyde drsquoazote radicalaire
O2- anion superoxyde
OH radical hydroxyle
PGI2-like prostacyclin-like
PLCγ phospholipase Cγ
RTK reacutecepteur agrave activiteacute tyrosine kinase
tBH tert-butylhydroperoxyde
TBRAs thiobarbituric acid reactive substancessubstances reacuteagissant avec lrsquoacide
thiobarbiturique
UV ultraviolet
VEGF vascular endothelial growth factorfacteur de croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire
XOD xanthine oxydase
4
GLOSSAIRE
Termes botaniques
Actinomorphe se dit dune fleur preacutesentant une symeacutetrie axiale
Adneacute soudeacute ou attacheacute agrave sapplique agrave des organes diffeacuterents comme par exemple des
eacutetamines adneacutees au peacuterianthe
Aneacutemogame qualifie le mode de feacutecondation des plantes dans lequel le pollen est porteacute par
le vent
Anthegravere partie de leacutetamine habituellement porteacutee par le filet contenant le pollen celui-ci
est libeacutereacute lorsque souvre cette terminaison renfleacutee sous forme de petit sac oblong
geacuteneacuteralement jaune et double
Campanuleacute se dit dune fleur en forme de cloche
Capiteacute termineacute en tecircte arrondie
Carpelles organe femelle Lensemble des carpelles forme le pistil (ou gyneacuteceacutee)
Dialypeacutetale dont les peacutetales sont indeacutependants les uns des autres
Hermaphrodite plante portant des organes floraux macircle et femelle
Infundibuliforme se dit dune fleur dont la corolle est en forme dentonnoir
Ligneux se dit des veacutegeacutetaux formant du bois arbres et arbustes mais aussi un certain
nombre de plantes grimpantes
Lobeacute se dit dun organe comme feuille ou peacutetale eacutechancreacute mais sans division complegravete
Loculicide qui souvre en se fendant longitudinalement le long de la nervure dorsale de
chaque loge
Marcotte organe veacutegeacutetal aeacuterien qui srsquoenterre et srsquoenracine avant de se seacuteparer (ou drsquoecirctre
seacutepareacute) de la plante megravere
Peacuterianthe ensemble des piegraveces florales non sexueacutees dune fleur
Septicide qualifie un fruit qui souvre en se fendant longitudinalement au niveau des
cloisons (septums) et seacuteparant ainsi les carpelles
Stomate structure foliaire organiseacutee ayant des meacutecanismes drsquoouverture reacuteversibles
permettant les eacutechanges gazeux
5
Teacutenuinucelleacute se dit dun ovule contenant un nucelle peu deacuteveloppeacute (dans les groupes
eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Uniteacutegumenteacute se dit dun ovule ayant une seule enveloppe autour du nucelle (dans les
groupes eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Urceacuteoleacutee corolle en forme de tube dilateacute agrave la base et reacutetreacutecit au sommet
Zygomorphe se dit dune plante preacutesentant une symeacutetrie par rapport agrave un plan
Autres
Astheacutenopie fatigue de loeil surtout lors daccommodation soutenue et qui provoque des
signes dirritation une sensation de brucirclure et des maux de tecircte
Meacutesopique Caracteacuteristique visuelle du systegraveme oculaire utilisant agrave la fois bacirctonnets et cocircnes
pour interpreacuteter une scegravene visuelle dont lintensiteacute lumineuse est comprise entre celle du jour
et de la nuit (creacutepusculaire)
Reacutetinite pigmentaire maladie heacutereacuteditaire deacutegeacuteneacuterative des cellules visuelles reacuteceptrices de
la lumiegravere (cocircnes et bacirctonnets)
Sensibiliteacute au contraste elle est baseacutee sur la capaciteacute du systegraveme visuel agrave deacutetecter des
diffeacuterences de luminances donc de deacuteterminer lexistence de bords entre surfaces
homogegravenes
Scotopique vision nocturne se basant principalement sur linformation capteacutee par les
bacirctonnets
6
Introduction et historique
Dans une socieacuteteacute ougrave la phytotheacuterapie connait un engouement croissant voulant se rapprocher
au plus pregraves du laquo naturel raquo la connaissance des plantes aux vertus theacuterapeutiques est de plus
en plus rechercheacutee La myrtille sauvage ou Vaccinium myrtillus L appartient agrave la famille des
Ericaceacutees elle est lrsquoune des plantes centrales faisant partie de la liste des plantes meacutedicinales
inscrites agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition (liste A) et dont le fuit (sec et frais) fait
lrsquoobjet drsquoune monographie agrave la Pharmacopeacutee europeacuteenne (6egraveme
eacutedition) Lrsquoeacutetymologie du
genre Vaccinium est incertaine il deacuteriverait du nom latin vacca pour vache car la plante eacutetait
volontiers brouteacutee par les bovins mais pour drsquoautres du nom bacca pour baie (43) Le terme
myrtillus provient de la ressemblance avec les feuilles et les fruits du myrte (Myrtus
communis L) V myrtillus empreinte divers noms vernaculaires (airelle airelle noire airelle
anguleuse bluet brimbelle raisin des bois raisin de bruyegraverehellip) Les deacutesignations anglaises
pour la baie de myrtille sont bilberry fruit blueberry whortleberry pour les feuilles bilberry
leaf huckleberry leaf (67)
Ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques sont utiliseacutees dans la meacutedecine populaire depuis fort
longtemps Dioscoride est le premier agrave vanter les bienfaits de la myrtille dans le traitement de
la dysenterie Puis au XVIegraveme
siegravecle une religieuse et mystique allemande Sainte Hildegarde
de Bingen preacuteconisait la plante pour provoquer faciliter ou augmenter les regravegles (20)
Depuis de nombreuses proprieacuteteacutes sont attribueacutees au myrtillier en fonction de la partie de
plante utiliseacutee On utilisait les baies pour ses proprieacuteteacutes astringentes toniques antiseptiques
dans le traitement de la diarrheacutee des heacutemorroiumldes des inflammations gastro-intestinaleshellip
quant aux feuilles elles eacutetaient surtout utiliseacutees pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes (43)
Lrsquoameacutelioration de la vision nocturne par la myrtille a eacuteteacute rapporteacutee par les pilotes de la British
Royal Air Force qui en consommaient quotidiennement Certains usages precircteacutes agrave la myrtille
ont eacuteteacute valideacutes et figure dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la
monographie de la Commission E allemande (ces usages seront citeacutes dans cette thegravese) La
myrtille fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vivo in vitro et de quelques eacutetudes cliniques
(dans des domaines meacutedicaux varieacutes) dont certaines posent des interrogations Ses utilisations
sont diverses on lrsquoemploie en cuisine (pacirctisseries confitures vin vinaigrehellip) dans
lrsquoindustrie et dans le domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments agrave base de
myrtille et des compliments alimentaires
7
Premiegravere partie
Botanique de Vaccinium myrtillus L
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L (70)
8
I Classification botanique de la myrtille
Le taxon des Spermatophytes ou plantes agrave graines est constitueacute de deux clades les
Gymnospermes ou plantes agrave ovules nus et les Angiospermes ou plantes agrave ovaires
La myrtille (ou myrtillier) appartient agrave lrsquoembranchement des Angiospermes se distinguant des
Gymnospermes par plusieurs caractegraveres dont trois fondamentaux
- les organes reproducteurs se groupent en fleurs bisexueacutees
- les carpelles entourent complegravetement les ovules et se transforment apregraves
feacutecondation en fruit
- le gameacutetophyte femelle situeacute dans lrsquoovule nommeacute sac embryonnaire est le siegravege
drsquoune double feacutecondation lrsquoune donnant lrsquoembryon lrsquoautre conduisant agrave lrsquoalbumen (tissu de
reacuteserve des graines agrave 3n chromosomes)
Selon la classification systeacutematique la myrtille fait partie de la classe des Asteacuterideacutees
(Eudicots agrave peacutetales et carpelles soudeacutes) constitueacutee drsquoenviron 67000 espegraveces on distingue les
Asteacuterideacutees basales et les Euasteacuterideacutees I et II Les Asteacuterideacutees basales ont deux ordres fregraveres
les Ericales et les Cornales (25)
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees (22) (25) (30)
Lrsquoordre des Ericales dont le nom vient drsquoErica pour bruyegravere comprend 7000 espegraveces
reacuteparties en 24 familles dont celle des Ericaceacutees auxquelles appartient la myrtille Cette
famille est reacutepartie dans le monde entier mais avec une preacutefeacuterence geacuteographique pour les
reacutegions tempeacutereacutees ou froides voire mecircme les hautes montagnes De faccedilon geacuteneacuterale elle
regroupe des arbres des arbustes et des lianes aux caracteacuteristiques suivantes (Figure 2)
- des feuilles alternes simples entiegraveres agrave denteacutees-serreacutees dont les bords du limbe
peuvent se replier sur eux-mecircmes afin de proteacuteger les stomates porteacutes par la face infeacuterieure
de la transpiration Chez certaines Ericaceacutees les feuilles sont plates et coriaces ce qui leur
procure une reacutesistance agrave la seacutecheresse
- des fleurs le plus souvent hermaphrodites geacuteneacuteralement plus ou moins pendantes
actinomorphes agrave leacutegegraverement zygomorphes
- quatre ou cinq seacutepales libres agrave leacutegegraverement soudeacutes
les mots suivis de ce symbole ont leur deacutefinition dans le glossaire
9
- quatre ou cinq peacutetales soudeacutees constituant une corolle cylindrique ou urceacuteoleacutee
campanuleacutee ou infundibuliforme parfois dialypeacutetale Chez certains genres aneacutemogames
le peacuterianthe nrsquoest constitueacute que de deux ou trois seacutepales et peacutetales ou trois agrave quatre peacutetales
- huit agrave dix eacutetamines reacuteduites agrave deux ou trois chez les espegraveces aneacutemogames
- le filet des eacutetamines est libre ou adneacute agrave la corolle voire mecircme soudeacute Quelques fois
il peut y avoir une paire drsquoappendices en eacuteperon dresseacute srsquoinseacuterant agrave proximiteacute ou agrave lrsquoendroit
mecircme ougrave se trouve lrsquoanthegravere
- lrsquoanthegravere est constitueacute drsquoune ou de deux loges srsquoouvrant par deux pores libeacuterant les
grains de pollen habituellement disposeacutes en teacutetrades
- les carpelles sont au nombre de deux agrave dix agrave ovaire supegravere ou infegravere comme chez la
myrtille (crsquoest-agrave-dire que lrsquoovaire peut se souder agrave la coupe florale)
- un style avec souvent un creux agrave lrsquointeacuterieur
- un stigmate capiteacute ou faiblement lobeacute
- un ou plusieurs ovules par loge uniteacutegumenteacutes ou teacutenuinucelleacutes
- enfin le fruit peut ecirctre une capsule septicide ou loculicide une drupe agrave plusieurs
noyaux ou une baie comme chez la myrtille
4 ou 5 seacutepales agrave soudure ou adnation variable
4 ou 5 peacutetales soudeacutes
Soudure ou adnation variable
Ovaire infegravere
Ovaire supegravere Type de fruit
Symeacutetrie radiaire () 2 agrave 10 carpelles soudeacutees
ou 4 agrave 10 eacutetamines
Symeacutetrie bilateacuterale (X) Etamines adneacutees aux peacutetales
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees (30)
10
La famille des Ericaceacutees regroupe plusieurs genres et espegraveces dont le nombre varie selon la
litteacuterature de 70 agrave 130 genres et de 2000 agrave 3400 espegraveces Cette famille comprend
- des plantes alimentaires comme Vaccinium myrtillus L (myrtille) Vaccinium
uliginosum L (airelle des marais) Gaultheria procumbens L (theacute du Canada qui fournit le
salicylate de meacutethyle)hellip
- des plantes meacutedicinales comme V myrtillus Ledum palustre L (leacutedon des marais)
Calluna vulgaris L (bruyegravere callune)hellip
- des plantes utiliseacutees pour lrsquoobtention du bois comme Erica arborea L (fabrication
des pipes)
- de nombreuses espegraveces ornementales dans les genres Arbutus (arbousier) Erica
(bruyegravere) Rhododendron (azaleacutee)hellip
La famille des Ericaceacutees est constitueacutee de quatre sous-familles dont les Vaccinioiumldeacutees qui
englobent le genre Vaccinium
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium (22)
Le genre Vaccinium se caracteacuterise par plusieurs particulariteacutes botaniques
- des tiges drsquoaspect contourneacute conseacutequence drsquoune croissance tregraves lente
- des feuilles coriaces plates reacutesistantes agrave la seacutecheresse
- des anthegraveres srsquoouvrant par deux pores souvent munis de deux appendices dresseacutes en
forme de cornes
- un ovaire composeacute de cinq carpelles fermeacutes
- un fruit repreacutesenteacute par une capsule
Ce genre est lui-mecircme constitueacute drsquoenviron 150 espegraveces auquel fait partie la myrtille
Les myrtilles drsquoEurope regroupent deux espegraveces de myrtilles
- V uliginosum L
- V myrtillus L
3 Vaccinum myrtillus L ou myrtille sauvage
31 Description botanique (22) (67)
Le myrtillier (Vaccinum myrtillus L) est un sous-arbrisseau vivace atteignant 20 agrave 60 cm de
hauteur agrave tige verte dresseacutee cylindrique rigide et agrave rameaux vert pacircle anguleux aileacutes dans
leur longueur et plus ou moins grecircles Cette tige est recouverte drsquoune eacutecorce ligneuse sans
poil ni stipule ni latex ni vrille
11
Les racines souterraines sont nombreuses et forment un lacis tregraves serreacute proche du sol avec des
racines adventives La plante se perpeacutetue soit par ramification des tiges souterraines soit par
des bourgeons prenant naissance sur les racines elle est dite plante sociale car elle se
marcotte naturellement
Les feuilles (Figure 3) vert pacircle sont petites (1 agrave 2 cm voire 2 agrave 3 cm selon la litteacuterature)
alternes de forme oblongue agrave ovale agrave pointe fine et allongeacutee Le bord du limbe est finement
denteleacute avec des nervures opposeacutees Ces feuilles sont courtement peacutetioleacutees avec un peacutetiole
(tige portant la feuille) recourbeacute vers le bas Les feuilles prennent une belle couleur rouge-
cuivre en automne Elles sont caduques et reacuteapparaissent au printemps
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus (75)
Les fleurs de couleur blanc roseacute rouge pacircle agrave verdacirctre ont une corolle pendante comportant
quatre ou cinq peacutetales soudeacutes entre eux sur une grande longueur et formant un tube globuleux
agrave lobes courts Elles sont solitaires ou regroupeacutees par deux porteacutees par un peacutedoncule courbeacute
Les seacutepales tregraves petits verts sont soudeacutes agrave la corolle (Figure 4) La floraison a lieu en mai-
juin
12
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus (72)
Le fruit est une baie globuleuse de la taille drsquoun petit pois (diamegravetre variant de 4 agrave 8 mm)
bleu noir agrave maturiteacute cette baie preacutesente parfois des restes de style agrave la base et peut ecirctre
surmonteacutee du calice agrave son sommet formant un disque entoureacute drsquoun faible rebord (Figure 5)
On peut apercevoir agrave la base de la baie la cicatrice du peacutedoncule Le meacutesocarpe est charnu
constitueacute de 4 ou 5 petites loges contenant de multiples petites graines brillantes brun-rouge
La baie mucircrit jusqursquoen en juillet-aoucirct voire septembre
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus (72)
Si le fruit est frais la saveur est douce sucreacutee et leacutegegraverement aciduleacutee voire mecircme astringente
Le fruit sec par contre a une saveur aigre-douce leacutegegraverement astringente En ce qui concerne
les organes reproducteurs lrsquoovaire infegravere est soudeacute agrave la coupe florale Les eacutetamines eacutegales
entre elles deacutepassent la dizaine en nombre elles sont complegravetement libres soudeacutees au
reacuteceptacle elles peuvent ecirctre soit disposeacutees en plusieurs verticilles soit nrsquoavoir aucune
position bien deacutefinie
13
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille (67)
Vaccinium myrtillus est une myrtille sauvage tregraves peu cultiveacutee originaire drsquoEurope du Nord et
Centrale abondant dans les bois clairsemeacutes et les bruyegraveres sur les sols siliceux de montagne
En France on la trouve dans la plupart des massifs montagneux entre 400 et 2500 megravetres
drsquoaltitude (Figure 6)
Leacutegende
Preacutesent
Zone geacuteographique non renseigneacutee
Preacutesence non signaleacutee
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France (81)
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium
41 Vaccinium uliginosum L (22)
Vaccinium uliginosum L nommeacute myrtille de loup ou myrtille des marais se situe
principalement aux bords des marais dans les tourbiegraveres les landes et les bois humides On le
trouve en Dauphineacute dans le Jura les Pyreacuteneacuteeshellip et en Savoie jusqursquoagrave 2000 megravetres et plus
Crsquoest un buisson bas agrave moyen agrave tiges et rameaux arrondis dans leur longueur Ses feuilles
vert-pacircle au dessus nervureacutees au-dessous ne persistent pas en hiver Les fleurs (Figure 7)
sont disposeacutees en grappe de mai agrave juillet
14
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum (72)
Le fruit (Figure 8) drsquoun diamegravetre drsquoenviron 6 mm est bleu-noir pruineux donnant un jus
incolore et agrave chair blanche Sa saveur est fade et sucreacutee Il mucircrit en juillet-aoucirct voire mecircme
jusqursquoen septembre
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum (72)
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo (61)
Ce sont des myrtilles drsquoorigine ameacutericaine dont lrsquoimplantation a eacuteteacute faite essentiellement agrave
partir de Vaccinium corymbosum L (myrtillier geacuteant ou arbustif) Celui-ci est un arbuste
pouvant atteindre 25 megravetres de hauteur drsquoougrave son nom Il est reacutesistant au froid Ses
inflorescences forment un corymbe ougrave le nombre de fleurs par corymbe varie beaucoup
(Figure 9) La baie (Figure 10) est de couleur bleue recouvert de pruine qui masque une chair
blanche
15
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum (79)
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo (79)
La floraison apparait de mars agrave fin mai et dure plusieurs semaines Les feuilles (Figure 11)
prennent une belle coloration en automne ce qui en fait une magnifique plante deacutecorative
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum (79)
16
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage la myrtille drsquoorigine ameacutericaine a un fruit plus gros et
plus sucreacute Cette derniegravere a une pulpe non coloreacutee Plusieurs varieacuteteacutes existent classeacutees en
fonction de lrsquoeacutepoque de maturiteacute
- les varieacuteteacutes preacutecoces comme le Bluetta lrsquoEarlibluehellip
- les varieacuteteacutes demi-preacutecoces comme le Patriot le Collinshellip
- les varieacuteteacutes demi-saison comme le Bluejay le Bluecrophellip
- les varieacuteteacutes demi-tardives comme le Berkeley le Jerseyhellip
- les varieacuteteacutes tregraves tardives comme le Darrow lrsquoElliothellip
43 Vaccinium macrocarpon L (4)
Vaccinium macrocarpon Ait ou canneberge drsquoAmeacuterique (Figure 12) reacutesistant agrave de fortes
geleacutees de moins 35degC et plus est un arbrisseau ressemblant agrave la myrtille sa croissance est
lente Son fruit est une baie aciduleacutee utiliseacutee dans la preacutevention des reacutecidives drsquoinfections
urinaires car elle contient des moleacutecules anti-adheacutesines des fimbriae drsquoEscherichia coli
(bacteacuterie intestinale pouvant ecirctre la cause drsquoinfection urinaire)
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits (83)
Drsquoautres espegraveces de Vaccinium se rencontrent sur le continent ameacutericain comme
- Vaccinium angustifolium Ait (Bleuet nain) qui est un buisson bas infeacuterieur agrave 50 cm
reacutesistant au froid
- Vaccinium ashei Reade qui est un buisson haut (3 agrave 6 megravetres) reacutesistant agrave la
seacutecheresse
Il ya beaucoup drsquoautre espegraveces de Vaccinium que nous ne citerons pas ici
17
II Culture reacutecolte et production des myrtilles
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques
Comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment la myrtille de culture est diffeacuterente de la myrtille
sauvage exigeant des conditions optimales pour une bonne production
11 pH du sol (49) (61)
Le sol doit ecirctre acide et mecircme tregraves acide pour permettre une croissance et un deacuteveloppement
normal ainsi qursquoune bonne reacuteussite de culture pH compris entre 4 et 5 voire 4 agrave 52 selon la
litteacuterature Or ce type de sol nrsquoest pas freacutequent en France Le pH optimum est de 48 Si le pH
deacutepasse 55 les plantes sont chlorotiques et il faut soit diminuer le pH soit renoncer agrave une
telle culture Les sols humides doivent ecirctre eacuteviteacutes car les racines sont tregraves sensibles agrave
lrsquoasphyxie et le deacuteveloppement du systegraveme racinaire est limiteacute
12 Conditions climatiques (49) (61)
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage qui croit dans les landes et les sous-bois humides de
demi-montagne ougrave elle vit en colonie vers 1000 megravetres drsquoaltitude le myrtillier cultiveacute est une
plante de plaine et de faible altitude qui preacutefegravere les endroits ensoleilleacutes Ainsi une exposition
sud ou sud-ouest est conseilleacutee mais il faut faire attention agrave la seacutecheresse En raison des
risques de geleacutees printaniegraveres il faut eacuteviter les lisiegraveres de bois ou la profondeur des valleacutees
Cette plante peut ecirctre eacutegalement cultiveacutee en demi-montagne agrave une altitude comprise entre 600
et 800 megravetres Reacutesistante au froid elle peut supporter de basses tempeacuteratures jusqursquoagrave -30degC
Bien qursquoau cours de la floraison les fleurs peuvent supporter des tempeacuteratures neacutegatives (-
5degC) il faut faire attention car les deacutegacircts peuvent ecirctre tregraves importants surtout sur les varieacuteteacutes
sensibles Agrave lrsquoopposeacute le myrtillier craint la seacutecheresse en eacuteteacute et les vents secs
13 Besoins en eau (49) (61)
La myrtille cultiveacutee aime la proximiteacute de la surface de la nappe phreacuteatique mais craint les
excegraves en eau Ses besoins sont limiteacutes mais permanents tout le long de sa peacuteriode de vie (au
moins 1000 mm drsquoeau durant lrsquoeacuteteacute) Ceci peut srsquoexpliquer par le deacuteveloppement tregraves
superficiel de son systegraveme racinaire et lrsquoabsence de poils absorbants En Lorraine par
exemple le systegraveme drsquoirrigation est le laquo goutte agrave goutte raquo localiseacute permettant drsquoapporter les
doses neacutecessaires en eau et de limiter la contamination fongique Les besoins en eau par
semaine sont de 20 mm
18
Ainsi il faudra tenir compte de ces exigences pour choisir la meilleure exposition possible
2 Reacutecolte des myrtilles
21 Date et mode de reacutecolte (49) (22)
La croissance de la plante eacutetant lente la reacutecolte peut deacutebuter la 2egraveme
anneacutee apregraves la plantation
La production augmente reacuteguliegraverement jusqursquoagrave la 8egraveme
ou la 9egraveme
anneacutee en rapport avec le
deacuteveloppement veacutegeacutetatif La date de reacutecolte deacutepend beaucoup de la varieacuteteacute de lrsquoaltitude des
tempeacuteratures printaniegraveres et du mode de reacutecolte Elle srsquoeacutetend de mai agrave fin septembre voire mi-
juin pour les varieacuteteacutes les plus preacutecoces et fin septembre pour les varieacuteteacutes les plus tardives La
reacutecolte deacutebute lorsque 20 des baies sont mucircres En effet si la reacutecolte se fait trop tocirct les
fruits ne sont pas mucircres et seront de mauvaise qualiteacute En geacuteneacuteral la reacutecolte dure de 3 agrave 5
semaines avec plusieurs passages successifs (un ou plusieurs par semaine) pour une mecircme
varieacuteteacute au fur et agrave mesure de la maturation des fruits
La reacutecolte de la myrtille cultiveacutee se fait manuellement directement dans les barquettes pour
eacuteviter drsquoabicircmer les fruits avec une manipulation suppleacutementaire Ceci est diffeacuterent pour la
myrtille sauvage ougrave la reacutecolte se fait agrave lrsquoaide drsquoun instrument que lrsquoon nomme laquo peigne raquo
(Figure 13) dont il existe divers modegraveles (en bois ou en fer) constitueacutes drsquoune grille permettant
drsquoarracher vite et en quantiteacutes importantes les baies en les emprisonnant entre les dents
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages (78)
19
3 Production des myrtilles
31 Production mondiale (61)
Les Etats-Unis sont les premiers producteurs mondiaux de myrtilles suivis du Canada Ces
pays produisent deux types de myrtille des myrtilles sauvages appartenant majoritairement agrave
lrsquoespegravece Vaccinium angustifolium qui se rapproche de la myrtille europeacuteenne comme nous
lrsquoavons vu dans le chapitre preacuteceacutedent Son deacuteboucheacute est principalement la congeacutelation et la
transformation dont une partie est exporteacutee en Europe
Les myrtilles cultiveacutees aux USA sont principalement composeacutees de
- Vaccinium corymbosum
- des hybrides entre V corymbosum et V angustifolium
- des hybrides entre V ashei et V corymbosum
Ces myrtilles cultiveacutees sont commercialiseacutees majoritairement sur le marcheacute inteacuterieur et un
faible tonnage est exporteacute en Europe et surtout en Australie
En Europe de lrsquoEst et en Scandinavie la cueillette des myrtilles sauvages pour le commerce
ou lrsquoautoconsommation nrsquoest pas neacutegligeable
32 Production europeacuteenne (22) (61)
Crsquoest lrsquoAllemagne qui deacutetient les plus grandes surfaces de myrtilles cultiveacutees suivie par la
France et les Pays-Bas Elles sont aussi cultiveacutees en Italie et au Portugal mais de faccedilon moins
importante
Dans les pays scandinaves la production est principalement constitueacutee de V myrtillus Il faut
noter que des quantiteacutes non neacutegligeables de reacutecolte sont le fait de cueillettes reacutealiseacutees par des
laquo pillards raquo des cultivateurs et enfin par des voyageurs des particuliers ou des touristes qui
consomment les myrtilles sur place pour leur plaisir
33 Production franccedilaise (22) (61)
En France les Landes constituent la premiegravere zone de production des myrtilles cultiveacutees
suivies du Val de Loire du Limousin de la Sologne et des Vosges La majoriteacute des myrtilles
cultiveacutees au niveau national (1300 agrave 1500 tonnesan) est destineacutee pour 95 des tonnages au
marcheacute du frais et est exporteacutee vers lrsquoAllemagne ougrave la consommation y est plus importante
qursquoen France vers la Suisse la Grande-Bretagne lrsquoItaliehellip et en importe de Suegravede du
Canada de Pologne et de Roumanie
En ce qui concerne les myrtilles sauvages 1500 agrave 2000 tonnes sont reacutecolteacutees en France La
principale zone de production est lrsquoArdegraveche suivie du Massif central et des Vosges Cette
20
reacutecolte se fait au peigne par des personnes cueilleurs agriculteurs qui ont un laquo droit de
cueillette raquo La majoriteacute des myrtilles sauvages reacutecolteacutees est destineacutee agrave la transformation en
geleacutees confitureshellippar des ateliers drsquoexploitation ou par des entreprises proches des sites de
production Une faible quantiteacute est destineacutee agrave la vente sur les marcheacutes ou agrave des grossistes pour
la restauration et les eacutepiceries fines
Les statistiques de 2001 ont reacutecapituleacute une production mondiale drsquoenviron 190000 tonnes
(1000 tonnes pour la France) avec pregraves de 38000 hectares cultiveacutes aux Etats-Unis et au
Canada
4 Post-reacutecolte
41 Conservation (49) (61)
Une fois les myrtilles reacutecolteacutees elles doivent ecirctre placeacutees dans une chambre froide pour
garder toutes ses qualiteacutes Lrsquoideacuteal pour conserver le fruit intact pendant une dizaine de jours
est de le stocker entre 8 et 10degC Il gardera alors son parfum lrsquoarocircme en sera mecircme
deacuteveloppeacute Si on veut le conserver plus longtemps il faut le soumettre agrave des tempeacuteratures plus
basses En effet la congeacutelation est un bon proceacutedeacute de conservation pour ce fruit
42 Conditionnement (61)
Le conditionnement que lrsquoon retrouve le plus souvent est la barquette en plastique fermeacutee par
un couvercle perforeacute Ainsi les myrtilles peuvent ecirctre conserveacutees selon les conditions deacutefinies
preacuteceacutedemment
Le temps de stockage est ameacutelioreacute par lrsquoutilisation de films en polypropylegravene semi-
permeacuteables qui maintiennent le fruit sous atmosphegravere modifieacutee Ces films peuvent apregraves
sortie du froid ecirctre gardeacutes durant seulement 24 heures car au-delagrave il peut y avoir des risques
de deacuteveloppement de pourritures
21
Deuxiegraveme partie
Composition chimique
de Vaccinium myrtillus L
22
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus 1 Identification macroscopique et microscopique (43) (67)
Du point de vue macroscopique les feuilles de V myrtillus sont alternes caduques ovales agrave
elliptiques pointues courtement peacutetioleacutees et finement denteleacutees Le bord de la feuille preacutesente
des poils seacutecreacuteteurs peacutedicelleacutes agrave lrsquoextreacutemiteacute de chaque dent quelques fois briseacutes
Du point de vue microscopique la feuille preacutesente des stomates paracytiques des poils agrave
parois eacutepaisses sur la face supeacuterieure des grandes nervures des poils seacutecreacuteteurs et des rangeacutees
de cellules agrave cristaux sur la nervure principale
Du point de vue macroscopique le fruit est une baie globuleuse drsquoun noir violaceacutee nettement
deacuteprimeacutee au sommet de la taille drsquoun petit pois Cet examen doit se faire sur une baie intacte
crsquoest-agrave-dire ni attaqueacutee par des insectes ni moisie De plus elle doit ecirctre molle car elle
devient cassante si elle est stockeacutee de faccedilon prolongeacutee
Lrsquoexamen microscopique est surtout caracteacuteriseacute par la preacutesence de cellules agrave cristaux du
meacutesocarpe et de lrsquoendocarpe Le fruit frais broyeacute ou la poudre de fruit sec met en eacutevidence la
preacutesence de macles de cristaux drsquooxalate de calcium des amas de cellules scleacutereuses de
couleur rose violaceacute agrave parois canaliculeacutees et des fragments jaune-brun du teacutegument seacuteminal agrave
paroi en forme de fer agrave cheval
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus
21 Composition chimique des feuilles (11) (67)
Celle-ci renferme des tanins cateacutechiques (08 agrave 67) des cateacutechols (eacutepicateacutechol
gallocateacutechol eacutepigallocateacutecholhellip) jusqursquoagrave 10 des proanthocyanidines (dimegraveres du cateacutechol
et drsquoeacutepicateacutechol) des flavonoiumldes (heacuteteacuterosides du querceacutetol rhamnoglucosyl- arabinosyl- et
glucuronyl-querceacutetol ainsi que des heacuteteacuterosides de kaempfeacuterol astragaloside) des iridoiumldes
des acides-pheacutenols surtout des acides chlorogeacuteniques et enfin des traces drsquoalcaloiumldes
quinolizidiniques comme la myrtine et lrsquoeacutepimyrtine
La bibliographie ancienne cite la preacutesence drsquoarbutoside et drsquohydroquinone qui ne sont
preacutesents qursquoagrave lrsquoeacutetat de trace voire totalement absent Ceci peut srsquoexpliquer soit par la preacutesence
de chimiotypes soit par une contamination des lots par des espegraveces proches qui ont le mecircme
habitat eacutecologique comme Vaccinium vitis-idaea L ou Vaccinium x intermedium Ruthe
(hybride entre V myrtillus et V vitis-idaea) dans lesquels on retrouve de lrsquoarbutoside de
lrsquohydroquinone libre et du pyroside (6-O-meacutethylarbutoside)
Enfin la feuille contient de faccedilon importante du chrome et du manganegravese
23
22 Composition chimique des fruits (11) (67)
Le fruit de la myrtille est riche en eau (jusqursquoagrave 90) en oligosaccharides (3 agrave 7) et en
acides organiques (acide malique citrique et quinique) Il contient des tanins essentiellement
des tanins cateacutechiques des proanthocyanidols (dimegravere de cateacutechol et drsquoeacutepicateacutechol) une
quinzaine drsquoheacuteteacuterosides les anthocyanosides qui sont des O-glucosides des O-galactosides et
des O-arabinosides en C-3 du cyanidol peacuteonidol delphinidol malvidol et peacutetunidol des
flavonoiumldes (heacuteteacuterosides de querceacutetol et kaempfeacuterol) des flavan-3-ols monomegraveres (cateacutechol et
eacutepicateacutechol)
Enfin on retrouve drsquoautres constituants comme les acides chlorogeacuteniques cafeacuteylquiniques
des acides pheacutenols et des pectines Les iridoiumldes quant agrave eux ne sont preacutesents que dans les
fruits immatures
24
II Anthocyanosides
Avant drsquoentrer dans les deacutetails il est important de connaitre les principaux groupes de
composeacutes phytochimiques que lrsquoon retrouve dans la plupart des fruits et des leacutegumes
(Tableau I)
Familles Classes Sous-classes
Polypheacutenols Flavonoiumldes - anthocyanidines
- flavones
-flavanols
- flavanones
- flavonols
- isoflavones
- tanins
acides pheacutenoliques - hydroxycinnamates
- hydroxybenzoates
non-flavonoiumldes - stilbegravenes
- coumarines
- lignans
Terpegravenes - caroteacutenoiumldes
- monoterpegravenes
Composeacutes soufreacutes - allyl sulfides
- isothiocyanates
Saponines - triterpeacutenoiumldes
- steacuteroiumldes
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes (7)
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes
Le terme anthocyane du grec laquo anthos raquo (signifiant fleur) et laquo kyanos raquo (bleu) est utiliseacute pour
deacutesigner la substance responsable de la coloration du bleuet Ce terme srsquoapplique agrave un groupe
de pigments qui donnent la coloration rouge rose mauve pourpre bleue et violette de la
plupart des fleurs et des fruits Ces pigments existent sous deux formes soit la forme
heacuteteacuteroside (anthocyanosides ou laquo anthocyanins raquo en anglais) soit sous la forme geacutenine
correspondante (anthocyanidols ou laquo anthocyanidins raquo en anglais) On connait environ 400
25
anthocyanosides qui sont preacutesents chez tous les Angiospermes agrave lrsquoexception des
Caryophyllales ougrave seule la famille des Caryophyllaceacutees et des Molluginaceacutees en contiennent
En effet leur preacutesence chez les Gymnospermes est rare Comme nous lrsquoavons vu les
anthocyanes sont responsables de la couleur des fleurs et des fruits mais peuvent eacutegalement
coloreacutes les bracteacutees les feuilles les peacutetioles les racines voire mecircme les bulbes comme dans
lrsquooignon rouge Cependant ce sont dans les fruits que leur concentration est la plus eacuteleveacutee Ils
srsquoaccumulent dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques sous forme de solution et de faccedilon
moins freacutequente sous forme drsquoanthocyanoplastes (11) Selon Szajdek et coll (58) les parois
cellulaires et la chair ne contiennent presque pas drsquoanthocyanosides
2 Structure des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont les pigments les plus importants des plantes visibles par lrsquoœil
humain Ils appartiennent agrave une large classe de composeacutes pheacutenoliques que lrsquoon appelle les
flavonoiumldes Ce sont des glycosides des deacuteriveacutes polyhydroxy et polymethoxy du 2-
pheacutenylbenzopyrylium plus communeacutement appeleacutes cation flavylium
Les diffeacuterences existant entre les anthocyanosides individuels sont lieacutees au nombre de groupe
hydroxyl agrave la nature et agrave la position drsquoattachement des sucres agrave la moleacutecule ainsi qursquoau
nombre et agrave la nature des acides aliphatiques ou aromatiques des sucres attacheacutes agrave la
moleacutecule Dix sept anthocyanosides et leurs aglycones naturellement preacutesents dans les plantes
sont connus Cependant seulement six geacutenines sont les plus freacutequentes (voire quasiment
universelles) dans les plantes supeacuterieures Il srsquoagit du cyanidol (50) du peacutelargonidol (12)
du peacuteonidol (12) du delphinidol (12) du peacutetunidol (7) et du malvidol (7) (Figure 14)
Les glycosides de trois anthocyanidines non meacutethyleacutes les plus largement reacutepandus dans la
nature sont la delphinidine la cyanidine et la peacutelargonidine Ils sont preacutesents dans 80 des
feuilles pigmenteacutees 69 des fruits et 50 des fleurs respectivement (33)
Dans les baies les anthocyanosides sont retrouveacutes sont la forme de mono di ou triglycosides
ougrave les reacutesidus glycosides sont principalement lieacutes agrave C-3 et moins freacutequemment agrave C-5 ou C-7
Les sucres les plus courants sont le glucose le galactose le rhamnose lrsquoarabinose le rutinose
le sambubiose et le sophorose De plus les glycosides des anthocyanosides sont souvent
acyleacutes par des acides comme les acides p-coumarique cafeacuteique feacuterulique et moins
couramment par les acides p-hydroxybenzoiumlque malonique ou aceacutetique (58)
26
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines (65)
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont des pigments solubles dans lrsquoeau ils sont instables agrave la lumiegravere agrave
la tempeacuterature et agrave lrsquooxygegravene Ils agissent en rapport au cation flavylium qui est agrave la fois un
diacide faible et un bon eacutelectrophile Agrave pH tregraves acide (lt agrave 3) la forme cationique coloreacutee en
rouge est stable Agrave pH moins acide (entre 4 et 6) la moleacutecule perd deux protons donnant une
moleacutecule neutre ou ioniseacutee devenant une forme quinonoiumlde coloreacutee en bleu et stabiliseacutee par
reacutesonnance Lrsquohydratation de la moleacutecule conduit agrave la formation drsquoune laquo pseudo-base raquo
carbinolique incolore et si le pH augmente la moleacutecule se transforme en pheacutenate (forme
ioniseacutee) la structure anthocyanique eacutetant deacutetruite Ainsi les anthocyanosides en milieu neutre
ou tregraves peu acide perdent leur coloration Or dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques le
pH est tregraves rarement infeacuterieur agrave 3 Sa coloration dans le milieu vivant peut donc srsquoexpliquer
par trois meacutecanismes qui permettent une protection ou une stabilisation de la moleacutecule
- soit un meacutecanisme par lequel les acides acylant les sucres forment un laquo sandwich raquo
autour de la geacutenine permettant une copigmentation intramoleacuteculaire
- soit par une auto-copigmentation se traduisant par lrsquoempilement intermoleacuteculaire
drsquoanthocyanosides se proteacutegeant les uns avec les autres
- soit par une copigmentation avec les flavonoiumldes (11)
27
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides
41 Extraction
Les anthocyanosides sont solubles dans les solvants polaires et lrsquoextraction agrave partir des plantes
est reacutealiseacutee en utilisant du meacutethanol qui contient de faibles quantiteacutes drsquoacide chlorhydrique ou
drsquoacide formique Il est preacutefeacuterable drsquoutiliser des acides plus faibles comme lrsquoacide aceacutetique
tartrique ou citrique des acides volatils ou travailler en milieu neutre et agrave basse tempeacuterature
pour empecirccher la deacutesacylation des anthocyanosides
Lrsquoaceacutetone peut aussi ecirctre utiliseacutee pour lrsquoextraction des anthocyanosides de plusieurs plantes
Par rapport au meacutethanol acidifieacute lrsquousage de ce solvant a lrsquoavantage drsquoecirctre une technique plus
efficace et reproductible
Lrsquoextraction en phase solide peut ecirctre utiliseacutee pour la purification initiale des extraits crus
drsquoanthocyanosides (33)
42 Seacuteparation et identification
Pour la seacuteparation et lrsquoanalyse de la structure des anthocyanosides lrsquoutilisation de la
chromatographie liquide coupleacutee agrave la spectromeacutetrie de masse permet de combiner la
seacuteparation de la chromatographie liquide avec la sensibiliteacute et la seacutelectiviteacute de la spectromeacutetrie
de masse (33) Drsquoautres meacutethodes chromatographiques peuvent ecirctre utiliseacutees pour leur
seacuteparation comme les colonnes de polyamide de polyvinylpyrrolidone les reacutesines
eacutechangeuses drsquoions la chromatographie sur couche mince preacuteparative sur cellulose (10)
Lrsquoanalyse des plantes agrave anthocyanosides peut ecirctre reacutealiseacutee par la chromatographie liquide
associeacutee agrave un deacutetecteur agrave barrettes de diodes Cette analyse peut ecirctre faite par lrsquoeacutelectrophoregravese
capillaire qui selon Szajdek et coll (58) est une meacutethode avec une tregraves bonne sensibiliteacute une
haute reacutesolution coupleacutee agrave une basse consommation drsquoeacutechantillon et enfin un moindre
laquo gaspillage raquo des solvants utiliseacutes
Drsquoautres meacutethodes plus perfectionneacutees ne peuvent ecirctre utiliseacutees que par des laboratoires de
recherche
43 Dosage des anthocyanosides
Le dosage se fait par spectrophotomeacutetrie aux longueurs drsquoonde des maximums drsquoabsorption
des anthocyanosides (λ = 520 nm) Il peut ecirctre fait sur une solution alcoolique acide ou sur un
jus acidifieacute Dans tout les cas il faut le faire en milieu tregraves dilueacute pour empecirccher les moleacutecules
drsquoanthocyanosides de srsquoassocier les unes avec les autres (11)
28
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
51 Composition en anthocyanosides
Les baies de V myrtillus contiennent environ quinze anthocyanosides ces heacuteteacuterosides sont
des O-glucosides des O-galactosides et des O-arabinosides en C-3 du cyanidol du peacuteonidol
du delphinidol du malvidol et du peacutetunidol (Figure 15)
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus (14)
29
52 Donneacutees quantitatives
Vaccinum myrtillus contient une quantiteacute importante drsquoanthocyanosides (300 agrave
698 mg100 g) Lrsquoeacutequipe de Prior et coll (50) a montreacute que la quantiteacute drsquoanthocyanosides
augmente avec la maturiteacute du fruit lors de la reacutecolte
Burdulis et coll (12) ont eacutetudieacute la diversiteacute des anthocyanosides du fruit de V myrtillus dans
diffeacuterents pays comme la Lituanie la Suegravede la Russie et la Bieacutelorussie ainsi que dans
diffeacuterentes reacutegions de Lituanie comme Šilutė Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees en
anthocyanosides ont eacuteteacute retrouveacutees dans les baies ramasseacutees en Russie et en Suegravede Ces
reacutesultats sont lieacutes agrave la cueillette tardive des baies et agrave lrsquoemplacement plus au nord des
cultures en effet les baies eacutetaient plus mucircres et avaient donc une plus haute contenance en
anthocyanosides Par contre la quantiteacute en Beacuteliorussie et en Lituanie est similaire
53 Donneacutees qualitatives
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Burdulis et coll (12) ont observeacute que lrsquoanalyse
chromatographique ne reacutevegravele pas de diffeacuterence dans la composition qualitative des
anthocyanosides Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees sont repreacutesenteacutees par la cyanidine (quantiteacute
moyenne de 53 ngml) suivie de la delphinidine et la peacutetunidine en quantiteacute 25 fois plus
faible que la cyanidine et pour terminer la malvidine et la peacuteonidine en quantiteacute encore plus
faible En Suegravede seule la malvidine a eacuteteacute retrouveacutee en plus grande quantiteacute parmi tous les
anthocyanosides (15 fois plus eacuteleveacutee que celle de la peacutetunidine et la delphinidine)
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus
Riihinen et coll (53) ont eacutetudieacute la distribution des composeacutes pheacutenoliques dans les diffeacuterents
organes de V myrtillus et drsquoun hybride entre le V corymbosum et V augustifolium
Ainsi les anthocyanosides sont preacutesents dans la pulpe et la peau des fruits de V myrtillus
constituant 2 du poids frais de la peau de la baie cela indique que lrsquoextraction du jus agrave
partir de la peau pourrait ecirctre une source riche drsquoanthocyanosides Les feuilles rouges des
myrtilles ont de faibles quantiteacutes drsquoanthocyanosides et ne contiennent que des glycosides de
cyanidine alors que les fruits contiennent les cinq types drsquoanthocyanosides (delphinidine
cyanidine peacuteonidine peacutetunidine et malvidine-glycosides) Les feuilles sont donc des sources
moins inteacuteressantes pour lrsquoutilisation nutraceutique et pharmaceutique que les fruits
30
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
Des eacutetudes ont eacuteteacute reacutealiseacutees sur la pharmacocineacutetique des anthocyanosides agrave partir drsquoun
produit commercial le Myrtocyanreg Celui-ci est un extrait hautement purifieacute de baies de
Vaccinum myrtillus dans lequel les anthocyanosides sont les composants actifs les plus
importants (36)
Lorsque lrsquoextrait est injecteacute chez le rat par voie intraveineuse ou parenteacuterale aux doses de 20-
40 mgkg ou 25 mgkg respectivement les anthocyanosides disparaissent de la circulation
sanguine et sont distribueacutes rapidement dans les tissus Lrsquoeacutelimination se fait de faccedilon
preacutedominante par les urines (25-30) 24 heures apregraves lrsquoadministration et une plus faible
quantiteacute est eacutelimineacutee via la bile (15-20)
Le Myrtocyanreg
injecteacute par voie intrapeacuteritonale agrave la dose de 200 mgkg montre que les
anthocyanosides ont une affiniteacute particuliegravere pour certains tissus notamment les tissus reacutenaux
et cutaneacutes dans ces tissus les anthocyanosides y demeurent plus longtemps que dans le
plasma Cette observation pourrait expliquer leur effet biologique agrave long terme
Lrsquoadministration orale de Myrtocyanreg
agrave la dose de 400 mgkg chez le rat montre que les
anthocyanosides sont rapidement absorbeacutes par le tractus gastro-intestinal et atteignent un pic
plasmatique quinze minutes apregraves lrsquoadministration Par contre ils ne demeurent pas
longtemps dans le sang car aucune concentration ne peut ecirctre mesureacutee apregraves deux heures Par
voie orale environ 4 des anthocyanosides sont eacutelimineacutes par la bile apregraves 24 heures
En conclusion par voie orale la biodisponibiliteacute faible des anthocyanosides peut ecirctre due agrave
une forte meacutetabolisation heacutepatique en meacutetabolites non deacutetectables par la meacutethode analytique
Le pic plasmatique de 2-3 microgml drsquoanthocyanosides non modifieacutes pourrait ecirctre suffisant pour
garantir les effets biologiques des anthocyanosides apregraves une administration orale Enfin des
tests in vitro ont reporteacute une activiteacute des anthocyanosides agrave des concentrations de 2 agrave 7 microgml
(43)
En 2006 Ichiyanagi et coll (28) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute et la distribution dans les tissus
drsquoun autre extrait de V myrtillus (Bilberon 25reg
constitueacutes de 25 anthocyanosides) administreacute
oralement ou par voie intraveineuse agrave des rats
Pour rappel les aglycones sont de cinq types la cyanidine la delphinidine la peacutetunidine la
peacuteonidine et la malvidine
Seules la malvidine la peacuteonidine et la peacutetunidine sont des structures aglycones meacutethyleacutes ces
anthocyanidines sont glycosyleacutees pour former les anthocyanosides qui repreacutesentent une
structure beaucoup plus stable Trois sortes de sucres sont rattacheacutees agrave la structure le
glucose le galactose et lrsquoarabinose
31
Ainsi le niveau plasmatique de chaque anthocyanoside est eacutevalueacute par chromatographie
liquide haute performance Lrsquoeacutetude montre clairement que lrsquoabsorption le meacutetabolisme et
lrsquoeacutelimination sont diffeacuterents pour chaque anthocyanoside Ichiyanagi et coll (27) ont calculeacute
le rapport C15dose deacutefini par la concentration plasmatique de chaque anthocyanoside quinze
minutes apregraves administration orale diviseacutee par sa concentration initiale dans lrsquoextrait de
Bilberon 25reg
(soit le rapport C15dose) La comparaison de ces rapports a montreacute que pour les
anthocyanosides posseacutedant le mecircme aglycone les galactosides ont un rapport C15dose plus
important suivi des glucosides et des arabinosides agrave lrsquoexception de la malvidine La
diffeacuterence est significative entre les anthocyanosides glucosides et galactosides Par contre
lorsque les anthocyanosides portant le mecircme sucre sont compareacutes les glycosides de cyanidine
et delphidine preacutesentent des valeurs plus eacuteleveacutees que les glycosides de malvidine et
peacutetunidine alors que la peacuteonidine 3-O-β-D-galactoside affiche les valeurs les plus hautes
parmi tous les anthocyanosides
En conclusion les niveaux plasmatiques deacutependent de plusieurs facteurs tels que lrsquoabsorption
gastro-intestinale le taux de distribution dans les tissus et leur excreacutetion via les urines et la
bile
La demi-vie est eacutevalueacutee par administration intraveineuse de lrsquoextrait pour les
anthocyanosides portant le mecircme sucre les demi-vies de la delphinidine et de la cyanidine
sont plus eacuteleveacutees que leurs analogues O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacuteonidine et la
peacutetunidine Par contre lorsque les auteurs comparent les sucres porteacutes par le mecircme aglycone
aucune diffeacuterence significative nrsquoest observeacutee entre les galactosides et les glucosides mais les
arabinosides affichent des valeurs plus faibles Seule la malvidine ne preacutesente pas de
diffeacuterence significative entre galactoside et arabinoside compareacutee aux autres anthocyanidines
Ichiyanagi et coll (28) ont eacutevalueacute la biodisponibiliteacute de chaque anthocyanoside Celle-ci varie
de 061 agrave 182 et elle est de 093 dans le meacutelange de lrsquoextrait Bilberon 25reg
Ainsi la
biodisponibiliteacute des anthocyanosides O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacutetunidine et la
peacuteonidine est plus eacuteleveacutee que la delphinidine et la cyanidine particuliegraverement pour les
galactosides (diffeacuterence significative entre la cyanidine et la peacuteonidine galactoside et entre la
delphinidine et la peacutetunidine arabinoside) Cependant les biodisponibiliteacutes des glycosides de
peacutetunidine sont plus eacuteleveacutees que celles des glycosides de malvidine mecircme si la malvidine est
lrsquoanalogue O-meacutethyl de la peacutetunidine-glycoside Ainsi la biodisponibiliteacute importante des
glycosides de peacutetunidine pourraient ecirctre expliqueacutee par une absorption gastro-intestinale
prolongeacutee De plus lrsquoexceptionnelle forte biodisponibiliteacute de la peacuteonidine 3-O-β-D-
galactoside traduirait une absorption gastro-intestinale plus efficace Lorsque les auteurs
32
comparent la biodisponibiliteacute entre les anthocyanosides sur la base du type de sucre attacheacute agrave
la structure les galactosides preacutesentent la plus haute valeur suivis des arabinosides puis des
glucosides qui preacutesentent les valeurs les plus basses (agrave lrsquoexception de la delphinidine et de la
malvidine)
Ces eacutetudes sur le meacutetabolisme et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides montrent que les
anthocyanosides majoritairement retrouveacutes dans lrsquourine et la bile sont les glycosides de
peacuteonidine et malvidine crsquoest-agrave-dire des anthocyanosides O-meacutethyleacutes Les pourcentages des
anthocyanosides dans les urines et la bile durant les quatre premiegraveres heures apregraves
administration intraveineuse sont seulement de 308 et 134 respectivement suggeacuterant une
meacutetabolisation ou une accumulation des anthocyanosides dans les tissus La quantiteacute et la
nature des anthocyanosides dans le foie et les reins diffegraverent de ceux du meacutelange Bilberon
25reg
indiquant une meacutetabolisation heacutepatique et reacutenale De plus lrsquoapparition de nouveaux pics
montreacutes par la chromatographie liquide haute performance souligne la preacutesence de
meacutetabolites drsquoanthocyanosides
En ce qui concerne la distribution dans les tissus les auteurs ont montreacute qursquoapregraves 15 minutes
drsquoune administration orale de lrsquoextrait de V myrtillus les anthocyanosides retrouveacutes
majoritairement dans les reins et le foie sont des glycosides de peacuteonidine et de malvidine les
anthocyanosides deacutetecteacutes sont des glucosides et galactosides de peacuteonidine malvidine et
peacutetunidine des meacutetabolites 4rsquo-O-meacutethyl de cyanidine delphinidine et peacutetunidine 3-O-β-D-
glucoside ou galactoside alors que les arabinosides ne sont pas deacutetecteacutes agrave lrsquoexception du 4rsquo-
O-meacutethyl delphinidine 3-O-α-L-arabinoside Les meacutetabolites comme les glucosides-
glucuronides de cyanidine et de delphinidine sont aussi preacutesents dans les tissus
particuliegraverement au niveau reacutenal
Apregraves administration intraveineuse les glycosides de cyanidine et delphinidine sont preacutesents agrave
lrsquoeacutetat de traces dans les tissus
Pour conclure plusieurs points ont pu ecirctre eacutetablis et clarifieacutes premiegraverement tous les
anthocyanosides de lrsquoextrait atteignent leur niveau plasmatique maximum en 15 agrave 30 minutes
apregraves administration orale soulignant une absorption efficace au niveau de lrsquoestomac et de
lrsquointestin grecircle Cette absorption deacutepend du type de sucre attacheacute agrave lrsquoaglycone les galactosides
eacutetant par exemple plus efficacement absorbeacutes que les arabinosides Deuxiegravemement la
biodisponibiliteacute deacutepend de plusieurs facteurs comme le meacutetabolisme lrsquohydrophobiciteacute du
cycle B de lrsquoaglycone et le type de sucre attacheacute agrave la structure De plus la synergie entre
anthocyanosides eux-mecircmes ou anthocyanosides avec drsquoautres composants preacutesents dans
lrsquoextrait peuvent moduler lrsquoabsorption au niveau du tractus gastro-intestinal
33
Sakakibara et coll (54) ont eacutetudieacute la distribution et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides chez la
souris apregraves une administration orale de 100 mgkg de poids corporel de V myrtillus
Les anthocyanosides absorbeacutes sous leur forme initiale ou meacutethoxyleacutee quinze minutes apregraves
une administration orale sont eacutelimineacutes via les urines dans les vingt quatre heures La totaliteacute
des anthocyanosides atteignent une concentration plasmatique maximale drsquoenviron 12 microM
quinze minutes apregraves administration orale puis cette concentration diminue brusquement Les
glycosides de malvidine pourraient ecirctre les anthocyanosides majoritaires dans des conditions
physiologiques en effet les anthocyanosides meacutethoxyleacutes ont des proprieacuteteacutes leur permettant
de demeurer dans lrsquoorganisme apregraves absorption De plus les glycosides de delphinidine et
cyanidine subissent une meacutethylation pouvant donner les glycosides de peacuteonidine et malvidine
par conseacutequent les anthocyanosides meacutethoxyleacutes peuvent ecirctre produits par la conversion
drsquoautres anthocyanosides eacutegalement absorbeacutes
Lrsquoexcreacutetion urinaire des anthocyanosides apregraves administration de 500 mgkg de poids corporel
de lrsquoextrait de V myrtillus a montreacute que les anthocyanosides sont eacutelimineacutes dans lrsquourine dans
les six premiegraveres heures apregraves administration orale De faibles quantiteacutes sont eacutelimineacutees entre 6
et 24 heures dont un unique pic drsquoexcreacutetion entre 6 et 12 heures Les quantiteacutes
drsquoanthocyanosides excreacuteteacutees dans lrsquourine dans les 24 heures suivant lrsquoadministration sont
faibles et ne repreacutesentent que 188 des anthocyanosides totaux ingeacutereacutes Par conseacutequent
quelque soit les quantiteacutes drsquoextrait administreacutees les anthocyanosides absorbeacutes par le corps
sont excreacuteteacutes par voie urinaire en 24 heures
Lrsquoeacutetude de la distribution des antocyanosides dans les organes a eacuteteacute reacutealiseacutee sur des souris
ayant une alimentation contenant 05 des anthocyanosides de V myrtillus durant 2
semaines Ce sont les glycosides de malvidine (surtout le 3-glucoside et 3-galactoside de
malvidine) les anthocyanosides majoritairement preacutesents dans des organes tels que le foie les
reins les testicules et les poumons Lrsquoeacutetude de Sakakibara et coll (54) est la premiegravere agrave avoir
montreacute la preacutesence des anthocyanosides dans les testicules de souris
Les auteurs montrent aussi que le foie est sucircrement lrsquoorgane cible des anthocyanosides car
515 y sont localiseacutes Par contre les anthocyanosides nrsquoont pas eacuteteacute deacutetecteacutes dans la rate le
thymus le cœur les muscles le cerveau la graisse blanche ou les yeux
Chez lrsquohomme la plupart des eacutetudes montrent une faible biodisponibiliteacute des anthocyanosides
(faible taux drsquoexcreacutetion) (3)
Cooke et coll en 2006 (18) ont deacutemontreacute la preacutesence dans lrsquourine drsquoanthocyanosides sous
forme inchangeacutee et de glucuronides drsquoanthocyanidines (meacutetabolites) apregraves une administration
orale de Mirtoselectreg
La preacutesence de glucuronides drsquoanthocyanidines dans lrsquourine suggegravere
34
une transformation des anthocyanosides en leurs deacuteriveacutes non glycosyleacutes lesquels subiront
plus tard une biotransformation Les anthocyanidines sont suspecteacutees pour avoir une meilleure
activiteacute biologique que leurs preacutecurseurs glycosyleacutes
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus
1 Acides pheacutenoliques
Les acides pheacutenoliques dans les fruits des baies sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique et benzoiumlque Le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide benzoiumlque inclus les acides p-
hydroxybenzoiumlque salicylique gallique et ellagique Dans le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique on trouve les acides p-coumarique cafeacuteique et feacuterulique Les deacuteriveacutes drsquoacide
hydroxycinnamique sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide cafeacuteique comme les acides
chlorogeacutenique et neacuteochlorogeacutenique Dans Vaccinum myrtillus des quantiteacutes significatives
drsquoacides p-coumarique et feacuterulique sont retrouveacutees Lrsquoacide hydroxycinnamique se trouve
dans tous les organes de la myrtille mais les quantiteacutes les plus importantes sont retrouveacutees
dans les feuilles il est le principal composeacute pheacutenolique du rhizome Cet acide
hydroxycinnamique joue un rocircle dans la protection de la plante vis-agrave-vis drsquoagents pathogegravenes
et drsquoautres facteurs de stress comme une radiation solaire intense une basse tempeacuterature ou
une blessure (58)
2 Tanins
Les tanins sont des composeacutes pheacutenoliques hydrosolubles importants dans les fruits des baies
Ils sont de deux types
- les tanins hydrolysables (oligo- ou polyesters drsquoun sucre et drsquoun nombre variant de
moleacutecules drsquoacide-pheacutenol) Le sucre est le plus souvent le glucose et lrsquoacide-pheacutenol est soit
lrsquoacide hexahydroxydipheacutenique et ses deacuteriveacutes drsquooxydation pour les tanins ellagiques soit
lrsquoacide gallique dans le cas des tanins galliques
- les tanins non hydrolysables condenseacutes sont des polymegraveres flavaniques constitueacutes
drsquouniteacutes flavan-3-ols lieacutees entre elles par des liaisons carbone-carbone On les appelle
eacutegalement les proanthocyanidols qui en milieu acide et agrave chaud donnent des anthocyanidols
(11)
Les tanins donnent le goucirct aux tartes et sont responsables du changement de couleur des fruits
et des produits deacuteriveacutes des fruits Le goucirct des tartes reacutesulte de lrsquointeraction entre les tanins et
les reacutecepteurs gustatifs de la bouche De plus les tanins stabilisent les anthocyanosides
35
preacutesents en quantiteacute importante dans le fuit de la myrtille en se liant agrave eux pour former des
copolymegraveres (58)
Dans V myrtillus les feuilles vertes et rouges sont les meilleures sources de procyanidines
Leurs proportions dans les feuilles sont drsquoenviron 7 du poids sec il conviendrait donc
drsquoapporter un inteacuterecirct aux feuilles qui actuellement lors de la reacutecolte et du traitement des
fruits constituent des deacutechets alors que ce sont des parties de la plante riche en
proanthocyanidines connus pour leurs activiteacutes antimicrobiennes et antioxydantes (53)
3 Flavonols
Les flavanols sont repreacutesenteacutes par la querceacutetine la myriceacutetine le kaempfeacuterol et
lrsquoisorhamneacutetine abondants dans les plantes alimentaires comme lrsquooignon le theacute les pommes
et les baies
Le fruit de V myrtillus contient de faccedilon preacutedominante de la querceacutetine eacutegalement preacutesent
avec le kaempfeacuterol dans les feuilles Cependant leur proportion est plus importante dans les
feuilles rouges que dans les feuilles vertes car les radiations solaires augmentent leur quantiteacute
(on peut supposer un rocircle dans la photoprotection) (58)
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans Vaccinium myrtillus
Les stilbegravenes sont un groupe de composants qui inclut notamment le resveacuteratrol retrouveacute
initialement dans les grappes de raisin De petites quantiteacutes de trans-resveacuteratrol ont eacuteteacute
retrouveacutees dans les baies et notamment dans la myrtille (de lrsquoordre de 678 microgg) Cette plante
contient eacutegalement de petites quantiteacutes de caroteacutenoiumldes (58)
Autres ces composeacutes pheacutenoliques la myrtille est eacutegalement constitueacutee drsquoun ensemble de
micro- et macronutriments reacutepertorieacute dans la table de composition nutritionnelle des aliments
du Ciqual (centre drsquoinformation sur la qualiteacute des aliments) 2008 de lrsquoAfssa (71) (Annexe I)
36
Troisiegraveme partie
Inteacuterecircts theacuterapeutiques
de Vaccinium myrtillus L
37
En Europe les baies et les feuilles de myrtille ont largement eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine
populaire les baies pour leurs proprieacuteteacutes astringentes toniques et antiseptiques dans le
traitement de la diarrheacutee la dysenterie (maladie infectieuse du cocirclon) les heacutemorroiumldes les
inflammations gastro-intestinales et les infections buccales (stomatites aphtes muguet des
enfants) Elles sont eacutegalement utiliseacutees pour les deacutesordres urinaires Quant aux feuilles elles
eacutetaient particuliegraverement utiliseacutees dans le diabegravete gracircce agrave leurs proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
En application locale une infusion ou une deacutecoction de feuilles de myrtilles eacutetaient utiliseacutees
lors drsquoinflammations oculaires buccales drsquoinfections cutaneacutees et dans les brucirclures
Agrave partir du XVIIIegraveme
des herboristes utilisaient la baie de myrtille dans des preacuteparations pour
traiter certaines maladies intestinales incluant la fiegravevre typhoiumlde elle eacutetait aussi utiliseacutee dans
les infections buccales cutaneacutees urinaires dans la goutte et le rhumatisme (43) Les usages
valideacutes par la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la Commission E seront
deacuteveloppeacutes dans la derniegravere partie de cette thegravese
La myrtille inteacuteresse encore actuellement les scientifiques et fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes
in vitro et in vivo elle est aussi preacutesente dans quelques eacutetudes cliniques Certaines de ces
eacutetudes seront reacutepertorieacutees dans les chapitres qui vont suivre
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire
En 1990 Morazzoni et coll (44) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vivo et in vitro drsquoun complexe
drsquoanthocyanosides de V myrtillus dont le nom deacuteposeacute est Myrtocyanreg
(contenant environ
38 drsquoanthocyanosides) sur lrsquoactiviteacute plaquettaire en comparaison avec drsquoautres anti-
agreacutegants plaquettaires comme lrsquoacide aceacutetylsalicylique le dipyridamole et la ticlopidine
Lrsquoeacutetude in vitro sur plasma de lapin montre un effet inhibiteur de V myrtillus sur lrsquoagreacutegation
plaquettaire induite par lrsquoadeacutenosine diphosphate (ADP) le collagegravene et lrsquoarachidonate de
sodium (sel drsquoacide arachidonique) cette inhibition est fonction de la concentration en
anthocynosides Cette activiteacute est comparable agrave celle du dipyridamole mais est moins efficace
que celle de lrsquoacide aceacutetylsalicylique Toutefois les anthocyanosides de la myrtille et le
dipyridamole sont tous les deux efficaces pour inhiber lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par
lrsquoADP exogegravene alors que lrsquoacide aceacutetylsalicylique nrsquoa pas montreacute drsquoactiviteacute Lrsquoeffet anti-
agreacutegant plaquettaire des anthocyanosides de V myrtillus perdure apregraves certaines
manipulations chimiques et physiques comme lrsquoeacutebullition pendant cinq minutes le chauffage
38
pendant trente minutes agrave 56degC la digestion agrave la trypsine et lrsquoincubation en preacutesence
drsquoadeacutenosine phosphate
Lrsquoaction in vitro des anthocyanosides de V myrtillus sur la circulation sanguine chez le rat
montre une inhibition de lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP de maniegravere dose-
deacutependante et par voie arteacuterielle
In vivo lrsquoadministration orale du complexe anthocyanosidique de V myrtillus agrave une
concentration variant de 5 agrave 400 mgkg chez le rat montre une augmentation du temps de
saignement Cette activiteacute du complexe perdure pendant 24 heures (mecircme observation avec
lrsquoassociation acide aceacutetylsalicylique-dipyridamole) et le temps de saignement retourne agrave des
valeurs normales apregraves 48 heures Par contre cette augmentation du temps de saignement nrsquoa
pas donneacute drsquoeffet ni sur lrsquoheacutematocrite ni sur les voies intrinsegraveques et extrinsegraveques de la
coagulation sanguine
Lrsquoadministration orale de 400 mgkg du complexe anthocyanosidique de myrtille agrave des souris
deux heures avant lrsquoeacutetude diminue lrsquoadheacutesion plaquettaire cette action eacutetant similaire agrave celle
observeacutee avec 100 mgkg de ticlopidine administreacutes dans les mecircmes conditions
expeacuterimentales
Morazzoni et coll (44) ont eacutegalement eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vitro drsquoun produit composeacute des trois
principaux anthocyanosides (malvidine 3-O-glucoside cyanidine 3-O-glucoside et
delphinidine 3-O-glucoside) trouveacutes dans lrsquoextrait Myrtocyanreg
afin de comprendre leur
impact sur lrsquoeffet anti-agreacutegant Ce meacutelange montre la mecircme activiteacute inhibitrice sur
lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP le collagegravene et lrsquoarachidonate de sodium que
lrsquoextrait Myrtocyanreg
Notons que les anthocyanosides du produit reconstitueacute sont retrouveacutes
avec le mecircme ratio que ceux de lrsquoextrait
Une eacutetude clinique incluant 30 patients en bonne santeacute avec une agreacutegation plaquettaire
normale a deacutemontreacute la capaciteacute drsquoanthocyanosides de myrtille Myrtocyanreg
administreacute
pendant 30 et 60 jours agrave la dose de 480 mgjour seul ou en association avec lrsquoacide ascorbique
(3 gjour) agrave reacuteduire lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par le collagegravene ou lrsquoADP La meilleure
activiteacute est deacutetenue par Myrtocyanreg
seul ou associeacute agrave lrsquoacide ascorbique compareacutee agrave la
vitamine C seule (5)
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus riche en anthocyanosides a montreacute une forte inhibition
de lrsquoagreacutegation plaquettaire dans des expeacuteriences in vivo et in vitro sans interfeacuterer avec les
facteurs plasmatiques Lrsquoactiviteacute des trois principaux anthocyanosides de lrsquoextrait Myrtocyanreg
a permis de mettre en eacutevidence leur forte implication dans lrsquoeffet anti-agreacutegant plaquettaire
De plus lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans lrsquoinhibition plaquettaire est
39
lrsquoaugmentation des niveaux drsquoadeacutenosine monophosphate cyclique (AMP cyclique) soit par
stimulation de lrsquoadeacutenylate cyclase soit par inhibition de lrsquoAMP cyclique-phosphodiesteacuterase
Or il a eacuteteacute observeacute que les aglycones de lrsquoextrait Myrtocyanreg
sont des inhibiteurs potentiels
de lrsquoAMP cyclique- phosphodiesteacuterase de plusieurs tissus Ce meacutecanisme nrsquoest pas le seul car
un autre a eacuteteacute proposeacute il concernerait les anthocyanidines (principalement la delphinidine et
la cyanidine) qui affecteraient les fonctions plaquettaires par leur action antioxydante cette
action se ferait en interfeacuterant avec les processus membranaires cellulaires incluant les eacutetapes
initiales plaquettaires et la production des prostaglandines des cellules endotheacuteliales
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires
Les anthocyanosides de V myrtillus (Myrtocyanreg
) sont couramment utiliseacutes comme agents
vasoprotecteurs inhibant lrsquoagreacutegation plaquettaire et la formation de thrombus De plus il a
eacuteteacute montreacute que les anthocyanosides de myrtille administreacutes per os (100 mgkg pc) reacuteduisent
la reacuteponse contractile du muscle lisse vasculaire et montrent une activiteacute prostacycline-like
(PGI2-like) (45) Cette eacutetude est en accord avec celle de Bettini et coll (9) qui ont montreacute que
les anthocyanosides de V myrtillus ont un effet relaxant in vitro pouvant ecirctre meacutedieacute par la
stimulation de la synthegravese de prostaglandines vasodilatatrices dans les vaisseaux sanguins
En conclusion agrave lrsquoinverse de lrsquoacide aceacutetylsalicylique qui in vivo reacuteduit la production
arteacuterielle de PGI2 en agissant comme un inhibiteur de la synthegravese des prostaglandines les
anthocyanosides de V myrtillus stimulent la production drsquoune substance PGI2-like par le tissu
vasculaire
Les anthocyanosides de myrtille comme drsquoautres bioflavonoiumldes srsquoopposent agrave la contraction
de plusieurs types de muscles lisses en reacuteponse agrave des agents varieacutes comme lrsquoangiotensine II la
seacuterotonine le baryum lrsquohistamine ou lrsquoaceacutetylcholine En effet lrsquoaceacutetylcholine agrave des
concentrations variant de 1 agrave 2 ngml induit une relaxation dans toutes les preacuteparations alors
qursquoagrave hautes concentrations elle induit une contraction (9)
Bettini et coll (9) ont rechercheacute eacutegalement lrsquoeffet vasodilatateur du complexe dans les
preacuteparations traiteacutees avec du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration du facteur
relaxant deacuteriveacute de lrsquoendotheacutelium (EDRF ou endothelium-derived relaxing factor) qui est une
substance vasodilatatrice
Le Myrtocyanreg agrave une concentration entre 50 et 200 microgml reacuteduit la reacuteponse contractile des
artegraveres coronaires agrave lrsquoaceacutetylcholine cette activiteacute est drsquoautant plus marqueacutee lorsque lrsquoacide
ascorbique est ajouteacute (100-300 microgml) Mais cet effet est diminueacute en preacutesence drsquoindomeacutetacine
ou drsquoaceacutetylsalicylate de lysine connus pour ecirctre des inhibiteurs de la cyclo-oxygeacutenase A des
40
concentrations entre 1 et 2 microgml ces deux substances nrsquoaffectent pas la diminution du tonus
induite par Myrtocyanreg alors qursquoagrave des concentrations plus eacuteleveacutees elles le reacuteduisent sans
toutefois lrsquoabolir complegravetement mecircme aux plus fortes concentrations
Une autre expeacuterience de cette eacutetude consiste agrave traiter les segments des artegraveres coronaires avec
du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration de lrsquoEDRF Selon la concentration le
bleu de meacutethylegravene a plusieurs effets entre 1 et 8 microgml il ne modifie pas le tonus des
preacuteparations entre 8 et 18 microgml il ne provoque qursquoune lente augmentation du tonus de
plusieurs preacuteparations alors qursquoentre 18 et 24 microgml il induit une reacuteelle augmentation du
tonus des artegraveres coronaires suivie drsquoune relaxation assez marqueacutee Lrsquoeffet des
anthocyanosides de Vaccinum myrtillus a eacuteteacute eacutetudieacute apregraves disparition de lrsquoeffet du bleu de
meacutethylegravene son effet relaxant perdure partiellement malgreacute le preacute-traitement au bleu de
meacutethylegravene
En conclusion lrsquoeffet vasodilatateur de Myrtocyanreg
deacutepend agrave la fois de la libeacuteration des
prostacyclines mais aussi drsquoune faciliteacute agrave libeacuterer lrsquoEDRF les prostacyclines et lrsquoEDRF sont
probablement les meacutediateurs fonctionnels des anthocyanosides de V myrtillus
2 Activiteacute vasoprotectrice
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique
Une preacuteparation drsquoanthocyanosides de V myrtillus eacutequivalant agrave 25 drsquoanthocyanosides
administreacutee par voie intrapeacuteritoneacuteale ou per os agrave des lapins montre une reacuteduction de la
permeacuteabiliteacute capillaire de la peau (augmentant avec le temps) preacutealablement stimuleacutee par le
chloroforme lrsquohistamine ou la bradykinine (36)
Jonadet et coll (29) ont compareacute sur des rats lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides
extraits de Vitis vinifera L de V myrtillus (Difrarelreg
) et de Pinus maritimus (appeleacute
maintenant Pinus pinaster Aiton) Ainsi lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides est
par ordre deacutecroissant la suivante anthocyanosides de Vitis vinifera gt anthocyanosides de V
myrtillus gt proanthocyanosides de Pinus maritimus Les auteurs soulignent que les
anthocyanosides agissent agrave travers une activiteacute anti-proteacuteasique deacutemontreacutee in vitro En effet
ils ont montreacute que les anthocyanosides des extraits preacutealablement citeacutes possegravedent des activiteacutes
inhibitrices vis-agrave-vis drsquoenzymes proteacuteolytiques comme lrsquoeacutelastase laquelle peut intervenir dans
la deacutegradation du tissu conjonctif des fibres eacutelastiques et jouerait un rocircle dans des affections
pathologiques comme lrsquoatheacuteroscleacuterose lrsquoemphysegraveme pulmonaire et lrsquoarthrite rhumatoiumlde Les
anthocyanosides apportent cette activiteacute anti-proteacuteasique en inhibant la libeacuteration des peptides
41
vasoactifs En effet lrsquoune des causes de lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire est
lrsquointervention de meacutediateurs chimiques comme lrsquohistamine la 5-hydroxytryptamine et les
kinines Enfin Jonadet et coll (29) ont reporteacute une activiteacute anti-trypsique et anti-
chymotrypsique (proteacuteases digestives) des substances pharmacologiques des extraits eacutetudieacutes
22 Action sur la reacutesistance capillaire
Lietti et coll (36) ont deacutemontreacute dans une expeacuterience lrsquointeacuterecirct des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus sur la reacutesistance vasculaire Pour cela ils les administrent par voie
intrapeacuteritoneacuteale agrave des rats preacutealablement alimenteacutes pendant 4 semaines avec une alimentation
deacuteficitaire en facteur P induisant ainsi une fragiliteacute capillaire Apregraves mesure agrave plusieurs
heures de la reacutesistance capillaire les reacutesultats montrent une eacuteleacutevation remarquable de la
reacutesistance capillaire de la peau induite par les anthocyanosides de V myrtillus Lrsquoactiviteacute est
maximale 4 heures apregraves le traitement et ne change pas apregraves 6 heures Cette activiteacute est
compareacutee avec celle de la rutine (substance de la famille des bioflavonoiumldes) laquelle montre
un effet comparable agrave 200 mgkg mais qui agrave 100 mgkg nrsquoest presque plus efficace
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Lietti et coll (36) ont montreacute que lrsquoadministration
des anthocyanosides de V myrtillus dans la patte de rats par voie intraveineuse et par voie
orale respectivement 15 et 60 minutes preacuteceacutedant lrsquoinjection de carrageacutenine (substance
induisant un œdegraveme) entraicircne une diminution de lrsquoœdegraveme formeacutee de maniegravere dose-
deacutependante En effet lrsquoutilisation de 200 mgkg de preacuteparation est plus efficace que 50 mgkg
sur le volume de lrsquoœdegraveme La dose de 200 mgkg permet une reacuteduction de lrsquoœdegraveme agrave 45
Lrsquoapplication topique de la preacuteparation 60 secondes suivant lrsquoinjection de carrageacutenine induit
eacutegalement une reacuteduction du volume de lrsquoœdegraveme agrave 39 Cette eacutetude montre lrsquoaction anti-
inflammatoire de V myrtillus
Les eacutetudes in vivo reacutealiseacutees sur des animaux montrent que les anthocyanosides de V myrtillus
sont vasoprotecteurs ils inhibent lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire augmentent la
reacutesistance vasculaire et reacuteduisent le volume de lrsquoœdegraveme de maniegravere dose-deacutependante et ses
activiteacutes perdurent dans le temps De plus ils sont plus efficaces que la rutine ou la
meacutepyramine (substance antiseacuterotoninergique et antihistaminergique) Enfin les
anthocyanidines restent longtemps dans les tissus de la peau riche en collagegravene et en
mucopolysaccharides Crsquoest pourquoi il serait inteacuteressant de mettre en place des expeacuteriences
42
pour eacutetudier la relation entre ces substances et les anthocyanosides afin de voir si ce lien
pourrait expliquer lrsquoactiviteacute pharmacologique exerceacutee sur les vaisseaux sanguins (36)
24 Action antiatheacuterogegravenique
En 2009 une eacutetude meneacutee par Mauray et coll (41) a deacutemontreacute qursquoune suppleacutementation
alimentaire avec des extraits de V myrtillus limitait la progression des leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques dans un modegravele de souris deacuteficitaire en apolipoproteacuteine E Lrsquoaction
inhibitrice du deacuteveloppement de la plaque atheacuteromateuse est indeacutependante des modifications
du statut antioxydant plasmatique des marqueurs biologiques du stress oxydant et du profil
lipidique suggeacuterant lrsquoimplication drsquoautres meacutecanismes drsquoactions (peut-ecirctre lrsquoaction anti-
inflammatoire) De plus des deux extraits utiliseacutes (lrsquoun riche en anthocyanosides extraits de
myrtilles non traiteacutees et le deuxiegraveme extraits de myrtilles fermenteacutees par des levures) la
meilleure activiteacute antiatheacuterogegravene est deacutetenue par lrsquoextrait de myrtilles fermenteacutees suggeacuterant la
formation par la fermentation de nouveaux composeacutes avec des proprieacuteteacutes beacuteneacutefiques pour la
santeacute les pigments polymeacuteriques deacuteriveacutes des anthocyanosides atteacutenueraient mieux les leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques que les anthocyanosides de lrsquoextrait non traiteacute En effet lors de la
fermentation les anthocyanosides se condensent avec drsquoautres composeacutes preacutesents dans le fruit
de la myrtille Il reste alors agrave deacuteterminer les composeacutes responsables de lrsquoeffet observeacute et les
meacutecanismes drsquoaction impliqueacutes
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice
Des reacutesultats pharmacologiques prometteurs des extraits de fruits de V myrtillus issus
drsquoeacutetudes cliniques encouragent leur utilisation chez lrsquohomme dans le traitement des maladies
vasculaires peacuteripheacuteriques pouvant associer fragiliteacute capillaire alteacuteration de la permeacuteabiliteacute et
insuffisances veineuses chroniques des membres infeacuterieurs Drsquoautres eacutetudes cliniques ont
montreacute lrsquoefficaciteacute de la myrtille dans les symptocircmes cliniques post-opeacuteratoires
Ainsi les anthocyanosides de V myrtillus (480 mg par voie orale pendant 30 jours) ont
montreacute leur capaciteacute agrave diminuer les symptocircmes subjectifs (douleur parestheacutesiehellip) et objectifs
(œdegraveme des membres pheacutenomegravenes dyschromiques de la peauhellip) de patients atteints du
syndrome variqueux des membres infeacuterieurs tout comme les patients souffrant de fragiliteacute
capillaire ougrave une administration orale drsquoanthocyanosides de V myrtillus (160-800 mgjour)
reacuteduit les symptocircmes cliniques drsquoune reacutesistance capillaire diminueacutee (peacuteteacutechies contusion
sang feacutecal occulte) (43)
43
Lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille Myrtocyanreg (480 mgjour pendant 30 agrave 180 jours) a eacuteteacute
deacutemontreacutee dans des eacutetudes porteacutees sur des patients diabeacutetiques dyslipideacutemiques souffrant de
maladies secondaires agrave une stase des membres infeacuterieurs comme le syndrome preacute-variqueux
les varices essentielles le syndrome post-phleacutebitique et plusieurs maladies vasculaires
atheacuteroscleacuterotiques (43) Une eacutetude double-aveugle et controcircleacutee par placebo incluant 47
patients atteints de deacutesordres vasculaires drsquoorigine varieacutee a deacutemontreacute la capaciteacute de
Myrtocyanreg agrave reacuteduire les symptocircmes subjectifs et objectifs de la pathologie (diminution de la
douleur de la parestheacutesie de lrsquoœdegraveme et de la mobilisation des extreacutemiteacutes des doigts chez les
patients avec syndrome de Raynaud) Une eacutetude meneacutee sur 568 patients souffrants
drsquoinsuffisance veineuse des membres infeacuterieurs a montreacute la capaciteacute des anthocyanosides agrave
faire disparaitre les symptocircmes et agrave ameacuteliorer la microcirculation et le drainage lymphatique
(43)
Lrsquoefficaciteacute de la myrtille (320 mgjour pendant 60 agrave 90 jours) a mecircme eacuteteacute deacutemontreacutee chez 54
femmes enceintes souffrant de phleacutebite secondaire agrave stase veineuse (diminution de la douleur
de lrsquoœdegraveme de la fragiliteacute capillairehellip) et des patients avec bronchite chronique et
asthmatique (reacuteduction par lrsquoextrait de V myrtillus agrave 480 mgjour pendant 10 agrave 30 jours des
modifications microcirculatoires induites par la corticotheacuterapie) (43)
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA)
Pour rappel lrsquoECA (dipeptidylcarboxypeptidase) est une enzyme impliqueacutee dans le systegraveme
reacutenine-angiotensine (lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans la reacutegulation de la pression
arteacuterielle) permettant la conversion de lrsquoangiotensine I inactive en angiotensine II active Cette
derniegravere est capable drsquoaugmenter la pression sanguine et la pression de perfusion reacutenale les
inhibiteurs de lrsquoECA (IEC) constituent alors la premiegravere ligne de traitement pour
lrsquohypertension arteacuterielle et lrsquoinsuffisance cardiaque Les deux sites actifs de lrsquoACE
contiennent un atome de Zn2+
et les IEC sont capables de se lier agrave cet atome (47)
Personn et coll (47) ont rapporteacute dans une eacutetude in vitro la proprieacuteteacute drsquoun extrait de V
myrtillus agrave inhiber lrsquoECA peut-ecirctre par sa capaciteacute agrave cheacutelater des ions meacutetaux comme Zn2+
ou
Fe2+
cette inhibition eacutetant plus forte que les anthocyanidines combineacutees ou seacutepareacutees
deacutemontre lrsquoimplication drsquoautres composeacutes de la plante dans cette action En effet V myrtillus
ne contient pas seulement des anthocyanosides et anthocyanidines mais aussi de la querceacutetine
(flavonol) du stilbegravene resveacuteratrol des acides feacuterulique et coumarique Crsquoest la composition
speacutecifique de la plante qui semble ecirctre agrave lrsquoorigine de lrsquoeffet observeacute
44
Par conseacutequent le lien entre V myrtillus et lrsquoECA pourrait expliquer les effets
pharmacologiques de la plante sur la circulation cette plante pouvant ecirctre alors utiliseacutee en
preacutevention des maladies cardiovasculaires
5 Action sur lrsquoangiogenegravese
Lrsquoangiogenegravese se deacutefinit comme la formation de nouveaux vaisseaux sanguins agrave partir de
vaisseaux preacuteexistants (neacuteovascularisation) Elle est indispensable dans de nombreux
processus physiologiques comme le deacuteveloppement embryonnaire lrsquoimplantation du placenta
mais peut aussi contribuer agrave des processus pathologiques comme la croissance des tumeurs et
le deacuteveloppement des meacutetastases Lrsquoangiogenegravese se fait par plusieurs eacutetapes qui se trouvent
ecirctre les mecircmes dans lrsquoensemble des processus
- activation des cellules endotheacuteliales
- deacutegradation de la membrane basale et de la matrice extra-cellulaire
- migration orienteacutee des cellules endotheacuteliales
- prolifeacuteration cellulaire
- diffeacuterenciation des cellules endotheacuteliales en une structure de type capillaire pour
former une structure vasculaire permettant le deacuteveloppement des tissus
Lrsquoangiogenegravese est controcircleacutee par plusieurs facteurs inducteurs ou inhibiteurs dont le facteur de
croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire (VEGF ou vascular endothelial growth factor)
reacutegulateur cleacute de lrsquoangiogenegravese (73)
En 2007 Matsunaga et coll (40) ont eacutetudieacute in vitro lrsquoaction de V myrtillus sur lrsquoangiogenegravese
plus preacuteciseacutement sur la formation des tubules vasculaires la prolifeacuteration et la migration des
cellules ainsi que leur action sur la phosphorylation de proteacuteines kinases comme ERK 12
(laquo extra-cellular signal-regulated kinase raquo ou kinase reacuteguleacutee par le signal extra-cellulaire)
phospholipase Cγ et Akt (constitueacutes de trois enzymes appartenant agrave la famille des proteacuteines
kinases) induite par le VEGF Lrsquoeacutetude deacutemontre les effets inhibiteurs des extraits de myrtille
sur les paramegravetres de lrsquoangiogenegravese sur des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales
humaines co-cultiveacutees avec des fibroblastes Ainsi entre 1 et 30 microgml-1
lrsquoextrait de
Vaccinum myrtillus inhibe significativement la surface des tubules vasculaires la longueur
lrsquoenchevecirctrement des tubules et le nombre de reacuteseaux formeacutes A 3 microgml-1
ou plus lrsquoextrait
reacuteduit lrsquoensemble des paramegravetres de lrsquoangiogenegravese
Lrsquoextrait inhibe la prolifeacuteration (inhibition significative agrave 3 microgml-1
) et la migration
(inhibition significative agrave 10 et 30 microgml-1
) des cellules induites par VEGF-A de maniegravere
dose-deacutependante ceci ne se voyant qursquoen preacutesence du facteur de croissance
45
La phosphorylation des proteacuteines kinases comme ERK 12 est important dans la prolifeacuteration
des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales humaines et celle de Akt est une eacutetape
importante dans la prolifeacuteration et la migration de ces cellules
Les auteurs deacutemontrent la capaciteacute de V myrtillus agrave inhiber lrsquoaugmentation de la
phosphorylation de ces deux proteacuteines kinases mais pas la phosphorylation de la PLCγ
indiquant que lrsquoextrait agit en aval de celle-ci dans la cascade de signalisation induite par le
VEGF
Lrsquoeacutetude in vivo mise en place par Matsunaga et coll (39) chez la souris a permis de montrer
lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoextrait de V myrtillus dans la formation de reacuteseaux neacuteovasculaires dans
la reacutetinopathie induite par oxygegravene
II Action de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes
Un radical libre est une espegravece chimique qui possegravede un eacutelectron ceacutelibataire sur sa couche
peacuteripheacuterique Les radicaux libres qui interviennent dans le stress oxydant ont un eacutelectron
ceacutelibataire centreacute sur un atome drsquooxygegravene On les nomme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
(ERO) Plusieurs ERO existent comme le radical superoxyde le radical perhydroxyle (forme
protoneacutee du superoxyde) le radical hydroxyle le radical peroxyle et le radical alkoxyle Les
radicaux ne sont pas seulement formeacutes au cours des pheacutenomegravenes de stress oxydant mais
eacutegalement lors du meacutetabolisme normal de lrsquooxygegravene in vivo mecircme si ils ne sont geacuteneacutereacutes
qursquoen faible quantiteacute En effet crsquoest au niveau de la chaine respiratoire de la mitochondrie ougrave
85 de lrsquooxygegravene sont meacutetaboliseacutes que se produit la reacuteduction complegravete par 4 eacutelectrons de la
moleacutecule drsquoO2 conduisant agrave la formation drsquoeau La reacuteduction de la moleacutecule ne peut se faire
que par lrsquoenchainement de plusieurs eacutetapes donnant naissance agrave des intermeacutediaires reacuteduits de
lrsquooxygegravene La reacuteduction monoeacutelectronique de lrsquooxygegravene consommeacute au niveau
mitochondriale fournit lrsquoanion superoxyde (O2-) qui est une espegravece toxique Mais des
enzymes antioxydantes comme les superoxydes dismutases vont reacuteguler lrsquoanion superoxyde
en catalysant leur dismutation et en produisant le peroxyde drsquohydrogegravene (H2O2) Ce dernier
nrsquoest pas un radical libre mais une moleacutecule posseacutedant tous ses eacutelectrons apparieacutes Cependant
dans des reacuteactions in vivo comme la reacuteaction de Fenton et en preacutesence de cations meacutetalliques
comme Fe2+
ou Cu+ le H2O2 devient toxique en donnant les radicaux libres les plus neacutefastes
du stress oxydant que sont les radicaux hydroxyles (OH) De mecircme que le radical
superoxyde le peroxyde drsquohydrogegravene est reacuteguleacute in vivo par des systegravemes antioxydants comme
46
la catalase qui acceacutelegravere sa dismutation ou la glutathion peroxydase qui catalyse sa reacuteduction
par le glutathion
Ainsi le radical O2- le H2O2 et le radical OH forment les ERO (beaucoup plus reacuteactives que
lrsquooxygegravene) Cependant drsquoautres espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene existent comme les radicaux
peroxyles (RO2) les hydroperoxydes (RO2H) et les radicaux alkoxyles (RO)
Ces ERO tregraves reacuteactifs peuvent endommager les proteacuteines les lipides les glucides et les
acides nucleacuteiques par des reacuteactions drsquooxydation A cocircteacute des ERO il existe le monoxyde
drsquoazote radicalaire NO pouvant avoir des effets deacuteleacutetegraveres en reacuteagissant lors drsquoun stress
oxydant avec lrsquoO2-
pour former le peroxynitrite (ONOO-) tregraves reacuteactif et capable
drsquoendommager les proteacuteines les lipides et les acides nucleacuteiques On parle alors de stress
nitrosant
Crsquoest pourquoi il existe des systegravemes de deacutefense dans lrsquoorganisme (antioxydants) comme les
systegravemes de deacutefense enzymatique (superoxyde dismutase catalase glutathion
peroxydaseshellip) Toutefois le stress oxydant peut ecirctre important et les systegravemes de deacutefenses
deacutepasseacutes drsquoougrave la survenue ou lrsquoaggravation de pathologies comme lrsquoatheacuteroscleacuterose le diabegravete
sucreacute lrsquoischeacutemie ceacutereacutebrale le cancerhellip(21)
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides
Les anthocyanosides comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment sont des colorants
naturellement preacutesents dans les fleurs les fruits (particuliegraverement dans les baies) et les
leacutegumes Ce sont des pigments responsables de la couleur comme lrsquoorange le rouge le
bleuhellip Ils peuvent jouer plusieurs rocircles (attirer les insectes pour la pollinisation et la
dispersion des graines ou contribuer agrave la reacutesistance des plantes vis-agrave-vis drsquoattaques
exteacuterieures) Pour rappel les anthocyanosides sont des glycosides ou des acylglycosides des
anthocyanidines (les formes aglycones) Ils ont une structure de base flavylium et des
substitutions hydroxyles ou meacutethoxyles De plus ils sont tous O-glycosyleacutes avec diffeacuterents
sucres dont la preacutevalence est dans lrsquoordre deacutecroissant le glucose le rhamnose le xylose le
galactose lrsquoarabinose et le fructose Les anthocyanosides les plus preacutedominants sont des 3- ou
35-glycosyleacutes Quand le nombre de sucre augmente on observe une alternance sucre et
liaisons laquo acyl raquo De nombreuses eacutetudes ont reporteacute les effets positifs des anthocyanosides
dont certaines seront deacutecrites dans cette thegravese Certains de leurs effets sont attribueacutes agrave leurs
proprieacuteteacutes antioxydantes (64)
47
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma
En 2006 Talaveacutera et coll (59) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus (Antho 50reg
) et leur potentiel antioxydant sur le plasma de rats alimenteacutes
avec Antho 50reg pendant 8 jours Lrsquoeacutetude a montreacute une augmentation du statut antioxydant
plasmatique par cette administration mecircme si la biodisponibiliteacute eacutevalueacutee par excreacutetion
urinaire est basse Mais la chimie des anthocyanosides est complexe ceux-ci pourraient
subir une conversion en formes moins coloreacutees agrave cause de leur instabiliteacute agrave pH physiologique
ou meacutetaboliseacutes en composeacutes encore inconnus Quoiqursquoil en soit une consommation
quotidienne en anthocyanosides a un effet positif sur la capaciteacute antioxydant du plasma
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides
Lrsquoessai ORAC (oxygen radical absorbance capacity ou capaciteacute drsquoabsorbance du radical
oxygegravene) est une mesure standardiseacutee du pouvoir antiradicalaire de substances pures ou en
meacutelange Apregraves extraction des principes actifs dans un meacutelange eau-eacutethanol pour les
moleacutecules hydrosolubles et eacutethanol pour les moleacutecules lipophiles le test par
spectrofluorimeacutetrie consiste en la mesure de la protection exerceacutee par la moleacutecule contre
lrsquooxydation de la fluoresceacuteine par un radical libre et stable le AAPH (22-azobis(2-
amidinopropane) dihydrochloride) Les reacutesultats sont ensuite exprimeacutes par rapport au pouvoir
antioxydant exerceacute par une moleacutecule de reacutefeacuterence le Trolox (eacutequivalent hydrosoluble de la
vitamine E) rameneacute par le poids (en gramme) du produit que lrsquoon teste (75)
La valeur ORAC de la myrtille (446 micromol Troloxg de poids frais) est plus eacuteleveacutee que celle
drsquoautres baies (Figure 16) (58)
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies (58)
48
En 1997 Wang et coll (64) ont eacutevalueacute la capaciteacute antioxydante drsquoanthocyanidines communs
comme les aglycones de delphinidine cyanidine peacutelargonidine malvidine peacuteonidine et leurs
deacuteriveacutes glycosyleacutes Pour cela ils utilisent lrsquoessai ORAC avec geacuteneacuterateur de radical peroxyl
(ROO) Ainsi lrsquoeacutetude deacutemontre que les anthocyanidines posseacutedant la mecircme hydroxylation
sur le cycle A et C et une seule hydroxylation sur le cycle B comme la peacutelargonidine la
malvidine et la peacuteonidine ont une plus basse valeur ORAC que les anthocyanidines
dihydroxyleacutees sur le cycle B (3rsquo 4rsquo-di-OH) comme la cyanidine Les groupes hydroxyls en
position 3rsquo et 4rsquo du cycle B constituent un facteur important dans le pouvant antioxydant
seule la delphinidine eacutechappe agrave cette regravegle (plusieurs hydroxylations sur le cycle B mais
valeur ORAC plus faible) Mecircme si dans certains flavonoiumldes le nombre de groupes
hydroxyls augmentent la capaciteacute antioxydante ceci nrsquoest pas constateacute pour les
anthocyanosides ougrave la peacutelargonidine la cyanidine et la delphinide ayant 4 5 et 6 groupes
hydroxyls respectivement ont des valeurs ORAC respectives de 154 224 et 181 De plus la
glycosylation peut avoir aussi un effet sur lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides Elle
peut diminuer augmenter ou nrsquoavoir aucun effet sur le pouvoir antiradicalaire Par exemple
la 3-glycosylation du cycle C de la cyanidine augmente lrsquoactiviteacute ORAC pour le glucose et le
rhamnose mais la diminue pour le galactose Ainsi lrsquoordre deacutecroissant de lrsquoactiviteacute ORAC
pour la cyanidine est le suivant cyanidine 3-glucoside gt cyanidine 3-rhamnoside gt cyanidine
gt cyanidine 3-galactoside Mecircme lrsquoorientation du groupe hydroxyl affecte le pouvoir
antioxydant contre le radical peroxyl De plus lrsquoefficaciteacute drsquoun antioxydant agrave pieacuteger les
radicaux libres deacutepend aussi de sa capaciteacute agrave former un radical lui-mecircme stable Enfin le
classement des antioxydants par leur valeur ORAC deacutepend aussi de lrsquooxydant du radical libre
utiliseacute et de la meacutethode chimique employeacutee
Ainsi cette eacutetude a montreacute le fort pouvoir antioxydant des anthocyanosides ceux-ci sont
donc de bons candidats pour la preacutevention et le traitement de maladies mecircme si drsquoautres
eacutetudes sont neacutecessaires pour eacutelucider leur impact sur la santeacute humaine
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces
reacuteactives azoteacutees
Lrsquooxyde nitrique ou monoxyde drsquoazote radicalaire (NO) est un meacutediateur important
participant agrave des reacuteactions physiologiques dans les organismes vivants comme le
meacutetabolisme eacutenergeacutetique mitochondrial ou la transduction de signaux Cependant le NO peut
reacuteagir rapidement avec lrsquoO2- et former le peroxynitrite (ONOO
-) un fort oxydant tregraves reacuteactif
pouvant reacuteagir avec des moleacutecules biologiques comme les proteacuteines ou les acides nucleacuteiques
49
LrsquoONOO- participe agrave la formation de nitro-tyrosine dans les proteacuteines et agrave lrsquooxydation des
lipoproteacuteines de basse densiteacute responsable de la formation de plaques drsquoatheacuterome Les
radicaux NO sont geacuteneacutereacutes de faccedilon constitutive dans le cerveau sous des conditions
physiologiques LrsquoONOO- peut ecirctre lrsquoune des causes de deacutesordres ceacutereacutebraux (accidents
vasculaires ceacutereacutebraux ou maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie drsquoAlzheimer) (27)
En 2004 Ichiyanagi et coll (27) ont compareacute les reacuteactiviteacutes de 20 anthocyanosides extraits de
Vaccinum myrtillus contre les espegraveces reacuteactives azoteacutees et oxygeacuteneacutees Lrsquoextrait utiliseacute dans
lrsquoeacutetude est le Bilberon 25reg
(extrait pur sous forme de poudre provenant de V myrtillus)
Comme lrsquoantioxydant de reacutefeacuterence la (+)-cateacutechine les anthocyanosides ont la capaciteacute de
pieacuteger les radicaux libres comme le radical OH mais ont une reacuteactiviteacute 20 fois plus hautes
que celui-ci contre lrsquoO2- De plus la reacuteactiviteacute contre le radical OH nrsquoest pas tregraves sensible agrave
la diversiteacute structurale des anthocyanosides alors qursquoelle lrsquoest pour lrsquoO2- Dans lrsquoeacutetude de
Ichiyanagi et coll (27) lrsquoactiviteacute contre le NO est presque la mecircme entre tous les
anthocyanosides eacutetant tregraves peu sensible aux diversiteacutes structurales (les groupes hydroxyls
libres sur le cycle B de la moleacutecule de base ou lrsquoimportance de la meacutethylation de ces groupes
ne contribueraient pas aux reacuteactiviteacutes des anthocyanosides contre les radicaux NO et OH)
Parmi tous les anthocyanosides ce sont les glycosides (position 3) de delphinidine qui
reacuteagissent le plus contre les radicaux NO et ONOO- (reacuteactiviteacute 6 et 3 fois plus hautes que les
anthocyanosides et la (+)-cateacutechine respectivement) les autres anthocyanosides ayant une
reacuteactiviteacute comparable entre eux contre NO et lrsquoONOO-
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique
Les lipoproteacuteines de basse densiteacute (LDLs ou low-density lipoproteins) oxydeacutees par des
radicaux libres et des pro-oxydants ont plusieurs effets biologiques neacutefastes comme le
deacuteclenchement drsquoeacutevegravenements cellulaires conduisant agrave la formation et la progression de la
plaque atheacuteroscleacutereuse (21)
Laplaud et coll (34) ont eacutetudieacute lrsquoaction antioxydante drsquoun extrait de Vaccinum myrtillus sur
les LDLs Lrsquoeacutetude deacutemontre la diminution de tous les paramegravetres eacutevalueacutes lors de lrsquooxydation
des LDLs par cet extrait En effet la myrtille est capable de ralentir la formation de diegravenes
conjugueacutes de retarder la production de lipoperoxydes et de malondialdeacutehyde (indicateurs de
la peroxydation lipidique) et de diminuer la charge eacutelectrique nette des lipoproteacuteines
Enfin V myrtillus serait plus efficace que lacide ascorbique ou lrsquohydroxytoluegravene butyleacute
(BHT) pour diminuer la peroxydation lipidique des LDLs
50
En 1998 Martiacuten-Aragoacuten et coll (38) ont eacutetudieacute in vitro la capaciteacute drsquoun extrait complexe
drsquoanthocyanoside de V myrtillus agrave inhiber la peroxydation lipidique et agrave pieacuteger les ERO
comme les radicaux OH et O2- Lrsquoeacutetude deacutemontre un effet antiperoxydant de lrsquoextrait
(concentration-deacutependante) la concentration capable drsquoinhiber 50 de la peroxydation
lipidique (IC50 ou concentration inhibitrice 50) eacutetant de 5028 microgmL Sa capaciteacute agrave pieacuteger le
radical OH est faible (deacutetectable agrave partir de 50 microgmL) alors que sa reacuteactiviteacute contre le
radical O2- est forte
(observeacutee agrave toutes les concentrations testeacutees avec une valeur drsquoIC50 de
moins de 25 microgmL)
En conclusion la myrtille pourrait par son activiteacute antiperoxydative contribuer agrave la protection
vis-agrave-vis de lrsquoatheacuteroscleacuterose
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines
Viljanen et coll (63) ont compareacute lrsquoinhibition de lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines entre
les composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus avec ceux drsquoautres baies comme Rubus idaeus L
(framboisier) Vaccinium vitis-idaea L (airelle rouge) et Ribes nigrum L (cassis) Les
composeacutes pheacutenoliques sont repreacutesenteacutes par des anthocyanosides des ellagitanins et des
proanthocyanidines Lrsquoeacutetude deacutemontre que V myrtillus et Rubus idaeus possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante parmi la totaliteacute des baies eacutetudieacutees contre lrsquooxydation des
proteacuteines (cette oxydation eacutetant mesureacutee par la perte de la fluorescence au tryptophane et la
formation de proteacuteines carbonyles) Vaccinium myrtillus et V vitis-idaea possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante vis-agrave-vis de lrsquooxydation des lipides suivis par Ribes nigrum et
Rubus idaeus (cette oxydation est mesureacutee par lrsquoanalyse drsquohexanal de diegravenes conjugueacutes et
drsquohydroperoxydes) Dans la myrtille et le cassis ce sont les anthocyanosides qui contribuent agrave
la majoriteacute de lrsquoeffet antioxydant par inhibition de la formation des proteacuteines carbonyles et
drsquohexanal (hexanaldehyde) Cette activiteacute antioxydante des anthocyanosides et des
proanthocyanidines est dose-deacutependante ce qui nrsquoest pas le cas pour les autres composeacutes
pheacutenoliques Lrsquoeffet antioxydant des composeacutes pheacutenoliques des baies est plus prononceacute
contre lrsquooxydation des lipides particuliegraverement lrsquoinhibition du composeacute hexanal que celle des
proteacuteines Lrsquoinhibition des composeacutes aldeacutehydes des lipides reacutesulte en geacuteneacuteral de lrsquoinhibition
de la formation de deacuteriveacutes carbonyls conseacutequence drsquoune diminution de lrsquointeraction lipide-
proteacuteine
51
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie
Le foie est lrsquoorgane central du meacutetabolisme des composeacutes exogegravenes et endogegravenes il est donc
lrsquoorgane cible de lrsquoaction des xeacutenobiotiques et de leurs meacutetabolites Les eacutetudes sur les
heacutepatocytes sont importantes car ces cellules repreacutesentent 65 du parenchyme du foie et ils
assurent presque toutes les fonctions de cet organe Les heacutepatocytes ont un appareil de Golgi
distinct et de nombreuses mitochondries Malheureusement ils peuvent ecirctre soumis agrave un
stress oxydant Les eacutetudes faites agrave ce jour ont utiliseacute des toxines expeacuterimentales varieacutees afin
drsquoeacutetudier les effets cytoprotecteurs de substances comme lrsquoextrait de V myrtillus Dans les
eacutetudes qui vont suivre deux toxines sont employeacutees Le tert ndashbutyl hydroperoxyde (tBH) et
lrsquoallyl-alcool (2-propen-1-ol) Le tBH peut induire un stress oxydant aux cellules agrave travers des
radicaux (radical hydroxyl peroxyl drsquohydrogegravene et alkoxyl se formant lors de sa
deacutecomposition) Le tBH est la cause de plusieurs dommages comme la rupture des
membranes cellulaires lrsquoinduction de la peroxydation lipidique (responsable
drsquoatheacuteroscleacuterose) la fuite drsquoenzymes agrave travers lrsquoespace extracellulaire lrsquooxydation du
glutathion et lrsquoalkylation de macromoleacutecules cellulaires Lrsquoallyl-alcool (AA) est une toxine
qui agit indirectement agrave travers ses meacutetabolites Il est oxydeacute dans les cellules en acroleacuteine
sous lrsquoaction de lrsquoalcool deacuteshydrogeacutenase cytosolique Lrsquoacroleacuteine est capable de former un
produit avec le glutathion reacuteduit (GSH) et drsquoautres biomoleacutecules Elle induit aussi la
peroxydation lipidique catalyseacutee par les ions Fe(II) (62)
32 Eacutetudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques
En 2007 Valentovaacute et coll (62) ont utiliseacute un extrait de Vaccinum myrtillus (contenant 25
drsquoanthocyanosides) pour eacutevaluer son effet contre une leacutesion oxydative dans des cultures
primaires drsquoheacutepatocytes de rat induite par tBH et AA Jusqursquoagrave preacutesent lrsquoactiviteacute
cytoprotectrice de la myrtille contre une leacutesion oxydative nrsquoeacutetait pas documenteacutee
Lrsquoeacutetude a deacutemontreacute lrsquoactiviteacute protectrice dose-deacutependante de la plante vis-agrave-vis de leacutesions
oxydatives dans ces cultures cellulaires avec une protection maximale de 5116 contre les
dommages occasionneacutes par AA De plus les auteurs ont montreacute la capaciteacute de lrsquoextrait agrave
pieacuteger les radicaux DPPH (dipheacutenylpicrylhydrazyl) et O2-
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus montre des effets cytoprotecteurs agrave 100 et 500 microgmL
dans le test au MTT (sel de teacutetrazolium permettant une numeacuteration rapide des cellules
vivantes) Lrsquoextrait protegravege les heacutepatocytes de la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase et de la
formation des produits de la lipoperoxydation (TBARS repreacutesentant les substances reacuteagissant
52
avec lrsquoacide thiobarbiturique et permettant une premiegravere approche de la peroxydation
lipidique) Lrsquoimportante reacuteactiviteacute dans lrsquoeacutetude est sucircrement due agrave la dureacutee plus importante du
temps drsquoincubation dans le meacutelange reacuteactionnel Les effets observeacutes dans lrsquoeacutetude de
Valentovaacute et coll (62) montre que la capaciteacute cytoprotectrice de V myrtillus vis-agrave-vis des
heacutepatocytes de rat est probablement due aux proprieacuteteacutes antioxydantes de ses constituants
principaux (les anthocyanosides) Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude soutien lrsquoutilisation de la
myrtille dans les compleacutements alimentaires pour preacutevenir les maladies chroniques associeacutees
au stress oxydant
En 2008 Bao et coll (6) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun extrait de V myrtillus
commercialiseacute (contenant 4204 drsquoanthocyanosides) vis-agrave-vis drsquoun dommage du foie de
souris induit par un stress Ce stress est provoqueacute par lrsquoenfermement des souris dans une cage
meacutetallique pendant 18 heures provoquant un dommage heacutepatique avec augmentation des
enzymes heacutepatiques (alanine aminotransfeacuterase) du niveau de malondialdeacutehyde (MDA) du
monoxyde drsquoazote de la xanthine oxydase (XOD) et de la peroxydation lipidique avec un
deacuteseacutequilibre de la balance oxydants-antioxydants et la diminution de GSH de la vitamine C
et de la valeur ORAC Or lrsquoadministration orale de plusieurs dosages drsquoextrait de V
myrtillus pendant 5 jours preacuteceacutedant lrsquoinduction drsquoun stress chez la souris diminue le niveau
drsquoalanine aminotransfeacuterase (agrave 200 mgkgjour drsquoextrait) augmente les niveaux de GSH (50
100 et 200 mgkgjour drsquoextrait) et diminue significativement les niveaux de XOD et de NO
(agrave des concentrations de 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait)
De plus lrsquoextrait de myrtille agrave 200 mgkgjour pourrait supprimer et renverser le niveau de
MDA heacutepatique et plasmatique agrave un niveau comparable agrave celui du groupe controcircle (non
soumis au stress) La mecircme chose est observeacutee avec 200 mgkg jour de vitamine C (autre
antioxydant) Enfin le niveau ORAC est augmenteacute par 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait de V
myrtillus
Bao et coll (6) avaient deacutejagrave mis en eacutevidence lrsquoeffet protecteur du rein drsquoun extrait de V
myrtillus vis-agrave-vis drsquoun stress oxydant induit par KBrO3
En conclusion la myrtille pourrait preacutevenir les dommages heacutepatiques causeacutes par un stress
oxydant gracircce agrave ses proprieacuteteacutes antioxydantes
53
4 Effet de Vaccinim myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives et le
vieillissement
41 Effets sur un stress eacutemotionnel
Il a eacuteteacute mis en eacutevidence que le stress psychologique joue un rocircle significatif dans la
pathogenegravese de cancers et peut ecirctre associeacute avec une augmentation des produits issus de
lrsquooxydation et de leurs dommages sur les tissus
Le stress oxydant participe agrave lrsquoeacutetiologie de maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie
drsquoAlzheimer et la maladie de Parkinson En effet le stress eacutemotionnel peut affecter le systegraveme
nerveux central dans lequel se trouve notamment les neurones dopaminergiques qui
produisent la dopamine un neurotransmetteur du groupe des cateacutecholamines preacutecurseur de la
noradreacutenaline jouant un rocircle fondamentale dans le cerveau (controcircle de la motriciteacute) utiliseacute
en theacuterapeutique pour son action stimulante sur le systegraveme cardiovasculaire Les neurones
dopaminergiques sont localiseacutes dans certaines reacutegions ceacutereacutebrales comme lrsquohypothalamus le
locus niger et les corps strieacutes Ainsi la rupture de la transmission dopaminergique affecte
lrsquoactiviteacute comportementale Une baisse du niveau de dopamine dans certaines reacutegions
ceacutereacutebrales peut induire une perte des certains fonctions cognitives comme la meacutemoire
lrsquoattention la reacutesolution de problegraveme le mouvement la reacuteponse eacutemotionnelle et la capaciteacute
eacutemotionnelle agrave ressentir le plaisir ou la douleur
De plus les ERO induites par un stress sont connues pour ecirctre responsables de la
peroxydation lipidique et de lrsquooxydation des proteacuteines avec formation de proteacuteines
carbonyles Ainsi des eacutetudes ont deacutemontreacute que la modification de proteacuteines intracellulaires
comme certaines enzymes cleacutes et proteacuteines structurales peuvent mener agrave la deacutegeacuteneacuteration
neurofibrillaire des neurones menant agrave la maladie drsquoAlzheimer une autre maladie
neurodeacutegeacuteneacuterative (1) (52)
En 2008 Rahman et coll (52) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun meacutelange
drsquoanthocyanosides de Vaccinum myrtillus administreacute oralement agrave des souris soumis agrave un
stress oxydant ceacutereacutebral provoqueacute par la coupure des moustaches En effet le retrait des
moustaches augmente la formation de proteacuteines carbonyles et induit la peroxydation lipidique
dans le cerveau le cœur le rein et le foie Le niveau des marqueurs de lrsquooxydation diffegraverent
en fonction des reacutegions ceacutereacutebrales De mecircme le niveau de dopamine est alteacutereacute dans le cortex
ceacutereacutebral et le meacutesenceacutephale Les moustaches de souris jouent un rocircle tregraves important dans le
sens et la motriciteacute et la contribution sensorielle est directement lieacutee aux neurones moteurs
54
controcirclant leur activiteacute locomotrice Crsquoest pourquoi le retrait des moustaches a de graves
conseacutequences puisqursquoil affecte lrsquoactiviteacute locomotrice induisant anxieacuteteacute et hyper-locomotion
Ce stress oxydant induit par un stress psychologique augmente les niveaux de marqueurs
biologiques comme les proteacuteines carbonyles et les TBARS dans certains organes et reacutegions
ceacutereacutebrales (cœur reins foie meacutesenceacutephale cortex et ceacutereacutebellum) Or lrsquoadministration des
anthocyanosides de V myrtillus des souris diminue la peroxydation lipidique dans tous les
tissus reacuteduit lrsquooxydation des proteacuteines dans les reins le foie le meacutesenceacutephale et le cortex
ceacutereacutebral de faccedilon notable et diminue eacutegalement les niveaux de proteacuteines carbonyles et de
TBARS
Enfin lrsquoadministration de myrtille supprime les modifications (induites par le stress
psychologique) des niveaux de dopamine et de ses meacutetabolites (ces modifications pouvant
provoquer des maladies deacutegeacuteneacuteratives comme la maladie de Parkinson)
Cependant cette eacutetude ne peut pas conclure sur la capaciteacute des anthocyanosides de V
myrtillus agrave franchir la barriegravere heacutemato-enceacutephalique et agrave y exercer leur action antioxydante
Les principales formes retrouveacutees dans le foie et les reins sont des meacutetabolites meacutethyleacutes des
anthocyanosides et drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour prouver le lien entre ces meacutetabolites
meacutethyleacutes et la neuroprotection observeacutee dans lrsquoeacutetude
En conclusion cette eacutetude suggegravere que les anthocyanosides peuvent ecirctre utiles dans la
protection et le traitement des maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives associeacutees agrave un stress oxydant
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication du stress oxydant
Le dommage oxydant a depuis longtemps eacuteteacute proposeacute pour ecirctre en partie responsable de
plusieurs deacutesordres lieacutes agrave lrsquoacircge De plus plusieurs eacutetudes ont confirmeacute lrsquoaccumulation des
marqueurs biologiques du stress oxydant (augmentation de lrsquooxydation des lipides et des
proteacuteines dans les cerveaux de mammifegraveres acircgeacutes) Les pertes de la fonction ceacutereacutebrale avec le
vieillissement pourraient ecirctre associeacutees agrave une leacutesion oxydante des biomoleacutecules dans certaines
reacutegions ceacutereacutebrales et un niveau augmenteacute de peroxydes lipidiques observeacute dans des reacutegions
du cerveau impliqueacutees dans les fonctions de meacutemoire et drsquoapprentissage De plus les auteurs
ont deacutemontreacute lrsquoassociation des alteacuterations des fonctions ceacutereacutebrales cognitives avec des
modifications du systegraveme cardiovasculaire comme lrsquoaugmentation de la pression sanguine
(impliqueacutee dans lrsquoacceacuteleacuteration du vieillissement des vaisseaux les alteacuterations des fonctions
ceacutereacutebrales et le deacuteveloppement de lrsquoatheacuteroscleacuterose) (32)
Kolosova et coll (32) utilisent pour leur eacutetude deux souches de rats La souche OXYS qui est
une souche aux traits heacuteriteacutes de vieillissement acceacuteleacutereacute et une haute sensitiviteacute au stress
55
oxydant par rapport agrave une autre souche la souche Wistar Les rats OXYS ont une espeacuterance
de vie plus courte et deacuteveloppent plus preacutecocement des deacutesordres pathologiques lieacutes agrave lrsquoacircge
semblables agrave ceux observeacutes chez lrsquohumain comme lrsquoosteacuteoporose lrsquohypertension arteacuterielle
de ce fait le comportement de jeunes rats OXYS est semblable agrave celui des rats Wistar acircgeacutes
Lrsquoobjectif de leur eacutetude eacutetait de veacuterifier srsquoil existe un lien entre le vieillissement ceacutereacutebral et les
marqueurs du stress oxydant chez les rats OXYS pour rechercher lrsquoefficaciteacute drsquoune
suppleacutementation agrave long terme drsquoantioxydants dans la preacutevention de lrsquoapparition de deacuteficits
cognitifs comme les deacuteficits drsquoapprentissage et de meacutemoire
Les diffeacuterents paramegravetres de stress oxydant dans ces deux souches de rats sont eacutevalueacutes
(peroxydation lipidique niveau de proteacuteines carbonyles niveau de MDA activiteacute de
superoxyde dismutase (SOD) de niveau de GSH et quantiteacute drsquoα-tocopheacuterol)
Lrsquoeacutetude deacutemontre qursquoune suppleacutementation agrave long terme avec un extrait de V myrtillus
preacutevient la manifestation exteacuterieure du vieillissement des deux souches de rats (lrsquoextrait
augmente le poids des souris) Chez les rats OXYS lrsquoextrait de myrtille diminue
- la peroxydation lipidique
- lrsquoactiviteacute SOD dans le cerveau (en jouant un rocircle protecteur vis-agrave-vis du stress
oxydant)
- et le niveau de MDA dans le cerveau
La myrtille preacutevient aussi chez les rats OXYS
- les deacuteficits de meacutemoire et drsquoapprentissage plus efficacement que la vitamine E (autre
antioxydant)
- la deacuteteacuterioration de la fonction mitochondriale (autre cause de seacutenescence acceacuteleacutereacutee)
De plus V myrtillus a la capaciteacute de preacutevenir les mutations induites par les ERO lesquels
srsquoaccumulent avec lrsquoacircge dans la mitochondrie menant agrave un dysfonctionnement
mitochondriale Ce mecircme meacutecanisme pourrait ecirctre impliqueacute dans lrsquoeffet positif exerceacute par la
myrtille sur la meacutemoire des rats OXYS Ainsi la preacutevention des deacuteficits cognitifs
comportementaux avec des antioxydants peuvent montrer le rocircle du stress oxydant dans ces
processus mecircme si drsquoautres meacutecanismes peuvent jouer un rocircle dans cette capaciteacute de
preacutevention des composeacutes
En conclusion Vaccinum myrtillus atteacutenue les deacuteficits cognitifs chez les rats OXYS
apportant la preuve du rocircle theacuterapeutique de cette plante Cependant les meacutecanismes par
lesquels cet antioxydant agit pour exercer une neuroprotection in vivo et le reacuteel impact du
stress oxydant et de ses marqueurs biologiques sur les deacuteficits cognitifs des rats OXYS
doivent encore ecirctre eacutetudieacutes
56
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB
51 Effets drsquoune exposition solaire
Une exposition prolongeacutee aux ultraviolets (UV) durant le sport ou drsquoautres activiteacutes est un
facteur de risque de plusieurs maladies de la peau comme le cancer cutaneacute La deacutepleacutetion de la
couche drsquoozone protectrice entraicircne une quantiteacute plus importante des rayons UV atteignant la
surface planeacutetaire et exerccedilant des effets neacutefastes Les UVB sont largement absorbeacutes mais
moins peacuteneacutetrants que les UVA atteignant particuliegraverement la couche cellulaire de lrsquoeacutepiderme
basal Les UVB sont plus geacutenotoxiques et environ 1000 fois plus capables de provoquer un
coup de soleil que les UVA Ainsi le coup de soleil lrsquoeacuterythegraveme et lrsquoœdegraveme sont des
manifestations de lrsquoexposition aux UVB Lrsquoabsorption des photons UVB megravenent agrave des
dislocations de lrsquoADN et agrave la formation de photoproduits dimegraveriques de pyrimidine De plus
ils interagissent directement avec les acides amineacutes aromatiques notamment le tryptophane et
la tyrosine (inclus dans les proteacuteines) pouvant alors alteacuterer les fonctions de celles-ci Les UVB
altegraverent indirectement les macromoleacutecules ils geacutenegraverent la production de radicaux libres
comme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote induisant lrsquooxydation des proteacuteines
des lipides et de lrsquoADN Ces produits oxydeacutes (hydroperoxydes lipidiques proteacuteines
carbonyles et 8-hydroxydeacuteoxyguanosine) sont impliqueacutes dans le deacutebut des cancers cutaneacutes
Les UVB diminuent aussi les antioxydants de la peau responsable drsquoune baisse de la
protection vis-agrave-vis des radicaux libres Ils participent aux pheacutenomegravenes de processus
inflammatoire de la peau incluant une cascade drsquoeacutevegravenements comme lrsquoinfiltration de
leucocytes sanguins inflammatoires (macrophages et neutrophiles) lrsquoaugmentation de la
production des prostaglandines comme conseacutequence de lrsquoaugmentation de la peroxydation
lipidique la libeacuteration du fateur TNFα (tumour necrosis factor alpha ou facteur de neacutecrose
tumoral) le NFκB (nuclear factor κB ou facteur nucleacuteaire κB) des cytokines pro-
inflammatoires comme les interleukines (IL-1α IL-1β IL-6 IL-8 IL-12) qui en retour
augmentent la production des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote Un deacutefaut de
reacuteparation des leacutesions de lrsquoADN et les effets neacutefastes des UVB du soleil sont agrave lrsquoorigine des
cancers cutaneacutes Crsquoest pourquoi des meacutecanismes de protection de la peau ou une atteacutenuation
de la quantiteacute drsquoUVB atteignant et peacuteneacutetrant la peau peuvent ecirctre des strateacutegies efficaces dans
la preacutevention des dommages occasionneacutes par le soleil (57)
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires
Svobodovaacute et coll (57) Ont eacutetudieacute la capaciteacute des fractions pheacutenoliques des fruits de Lonicera
caerulea L (chegravevrefeuille bleu) et de V myrtillus en preacute et post-traitement sur les dommages
57
oxydants des keacuteratinocytes HaCaT humains induits par un simulateur de radiations solaires
(UVB) Plusieurs paramegravetres sont eacutetudieacutes et seuls les reacutesultats concernant V myrtillus sont
rapporteacutes dans cette thegravese Cette plante a plusieurs effets
- elle augmente le nombre de cellules viables
- diminue significativement la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase de maniegravere dose
deacutependante
- augmente de faccedilon dose-deacutependante la prolifeacuteration cellulaire (prolifeacuteration reacuteduite
par les UVB)
- preacutevient la formation et reacuteduit significativement la cassure simple brin de lrsquoADN
- diminue la caspase-3 (meacutediateur de lrsquoexeacutecution de la mort cellulaire apoptotique)
- diminue la caspase-9 de maniegravere dose-deacutependante (meacutediateurs de lrsquoexeacutecution de la
mort cellulaire apoptotique)
- preacutevient la formation des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote avec
eacutelimination excellente en post-traitement
- et diminue de maniegravere dose-deacutependante la production drsquoIL6
Cependant on remarque que cette protection deacutecline leacutegegraverement agrave des concentrations plus
hautes srsquoexpliquant par un effet pro-oxydant des polypheacutenols dans les cellules irradieacutees ougrave la
balance oxydantsantioxydants est deacuteseacutequilibreacutee
En conclusion V myrtillus pourrait ecirctre un bon candidat pour la fabrication de preacuteparations
dermatologiques protectrices agrave large spectre ou dans des preacuteparations apregraves-soleil Pour cela
des eacutetudes futures sont neacutecessaires pour eacutetudier la biodisponibiliteacute des composants exclure
les toxiques eacuteventuels ou les effets photoxiques et confirmer lrsquoeffet photoprotecteur in vivo
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes
Chez lrsquohomme la reacutetine (Figure 17) est une membrane photosensible qui tapisse la face
interne de lrsquoœil elle est constitueacutee de plusieurs types de cellules formant trois couches
superposeacutees qui sont de lrsquoarriegravere vers lrsquoavant de lrsquoœil
- les cellules photoreacuteceptrices constitueacutees de cocircnes et de bacirctonnets
- les cellules bipolaires
- les cellules ganglionnaires
Sa face posteacuterieure est en contact avec la choroiumlde par lrsquointermeacutediaire de lrsquoeacutepitheacutelium
pigmentaire et sa face anteacuterieure avec le corps vitreacute Les cellules de la reacutetine transforment les
58
influx nerveux en impulsions nerveuses qui gagnent les fibres nerveuses du nerf optique
permettant le transport des informations visuelles jusqursquoau cerveau (1)
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme (77)
La reacutetine est situeacutee dans un environnement tregraves oxygeacuteneacute pouvant subir des dommages induits
par le stress oxydant (les radicaux libres peuvent oxyder les lipides des photoreacutecepteurs) (23)
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire
Dutot et coll (23) ont eacutetudieacute les effets cytoprotecteurs drsquoun extrait en poudre de V myrtillus
(contenant 10 de proanthocyanidols et 10 drsquoanthocyanidines) sur le stress oxydant
appliqueacute aux cellules reacutetiniennes humaines dans un systegraveme in vitro Lrsquoextrait de V myrtillus
est incubeacute (005 et 01) pendant 15 minutes ou 24 heures sur une ligneacutee de cellules de
lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute reacutetinien Puis un stress oxydant induit par le tBHP est appliqueacute
pendant une heure sur ces cellules Les diffeacuterents paramegravetres des dommages du stress oxydant
sont eacutevalueacutes comme les modifications du meacutetabolisme cellulaire la formation des ERO la
formation drsquoO2-et lrsquoapoptose mitochondriale
Les reacutesultats sur ces diffeacuterents paramegravetres sont reacutesumeacutes dans les tableaux II agrave V
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
baisse induite par le tBHP Aucun effet cytoprotecteur
Incubation 24 heures Blocage de lrsquoeffet du tBHP sur le meacutetabolisme cellulaire
59
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Une concentration faible drsquoextrait (005) nrsquoa pas drsquoeffet sur une peacuteriode courte drsquoincubation
(15 minutes) par contre crsquoest le cas pour une peacuteriode plus longue (24 heures) cette
concentration est capable drsquoavoir des effets cytoprotecteurs V myrtillus pourrait ecirctre capable
de stimuler les deacutefenses antioxydantes de lrsquoorganisme mais des eacutetudes compleacutementaires sont
neacutecessaires pour confirmer cette hypothegravese
Enfin lrsquoeacutetude a montreacute que lorsque lrsquoextrait diminue le stress oxydant et lrsquoapoptose
mitochondriale elle restaure aussi la viabiliteacute cellulaire Par contre srsquoil nrsquoy a pas drsquoeffet sur le
stress oxydant il nrsquoy en a pas non plus sur la viabiliteacute cellulaire
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge
Lors du vieillissement et dans certaines maladies oculaires (comme la deacutegeacuteneacuterescence
maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge ougrave le stress oxydant est fortement impliqueacute) des pigments
autofluorescents constitueacutes par des deacutepocircts de lipofuchsine (pigment jaune-brun constitueacutee de
deacutebris moleacuteculaires) peuvent srsquoaccumuler dans les cellules eacutepitheacuteliales du pigment reacutetinien
La lipofuchsine peut absorber la lumiegravere bleue et geacuteneacuterer des photoproduits toxiques
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
surproduction drsquoERO Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution du stress oxydant
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
production drsquoO2-
Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Reacuteduction de la production drsquoO2-
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Inhibition significative de
lrsquoapoptose mitochondriale Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution de lrsquoapoptose mitochondriale
60
perturbant le fonctionnement cellulaire crsquoest donc un geacuteneacuterateur de radicaux lieacutes agrave la
lumiegravere Un composant de reacutetinoiumlde majeur de la lipofuchsine est lrsquoA2E (bis reacutetinoiumlde de
pyridinium deacuteriveacute de reacutetinal et de phosphatidyl eacutethanolamine) il contribue agrave
lrsquoautofluorescence de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute agrave lrsquoinhibition de fonctions cellulaires
essentielles au deacuteclenchement de la mort par apoptose des cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute
et agrave lrsquoabsorption de la lumiegravere bleue aggravant les leacutesions cellulaires (79) A2E lors de
lrsquoirradiation par la lumiegravere bleue subit une photooxydation en geacuteneacuterant de lrsquooxygegravene
singulet celui-ci reacuteagit en retour avec le fluorophore geacuteneacuterant des eacutepoxydes au niveau des
doubles liaisons carbone-carbone Les A2E-eacutepoxydes peuvent alors induire de graves leacutesions
agrave lrsquoADN (une des cibles des eacutevegravenements photodynamiques par interaction lumiegravere bleue-
A2E) pouvant srsquoaccumuler avec lrsquoacircge ougrave un deacuteclin des meacutecanismes de reacuteparation des bases
de lrsquoADN oxydeacutees a eacuteteacute reconnu (56)
Les antioxydants pourraient avoir un rocircle important dans la preacutevention des leacutesions oxydatives
sur les macromoleacutecules comme les bases de lrsquoADN et la deacutegeacuteneacuterescence de la maculaire lieacutee agrave
lrsquoacircge (DMLA) Crsquoest pourquoi Vaccinum myrtillus (par ses proprieacuteteacutes antioxydantes) a fait
lrsquoobjet drsquoeacutetudes montrant sa capaciteacute agrave preacutevenir certaines maladies oculaires causes majeurs
de ceacuteciteacute et de deacuteteacuterioration de lrsquoacuiteacute visuelle chez les personnes acircgeacutees
En 2003 Sparrow et coll (56) ont deacutemontreacute dans une eacutetude in vitro la capaciteacute drsquoun extrait
de V myrtillus agrave inhiber lrsquoeacutepoxydation drsquoA2E par capture de lrsquooxygegravene singulet gracircce agrave sa
richesse en anthocyanosides antioxydants
Dans une eacutetude in vivo utilisant une souche de rats avec seacutenescence acceacuteleacutereacutee (rats OXYS)
Fursova et coll (24) ont deacutemontreacute qursquoune alimentation suppleacutementeacutee agrave long terme avec un
extrait de V myrtillus pouvait ecirctre efficace dans la preacutevention de la DMLA et de la cataracte
seacutenile deux maladies dont les dommages ont eacuteteacute attribueacutees aux radicaux libres
La surreacutegulation des proteacuteines de stress est un moyen de protection contre des conditions
deacuteleacutetegraveres comme le stress oxydant Ainsi Milbury et coll (42) ont deacutemontreacute in vitro la
capaciteacute des anthocyanosides et drsquoautres composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus agrave surreacuteguler
les enzymes de deacutefense du stress oxydant comme lrsquohegraveme oxygeacutenase-1 (HO-1) et la glutathion
S-transfeacuterase (GST) dans des cultures de cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmentaire reacutetinien humain
Agrave cocircteacute du stress oxydant des facteurs vasculaires peuvent ecirctre impliqueacutes dans les maladies
oculaires comme le glaucome la DMLA ou la reacutetinopathie diabeacutetique Comme nous lrsquoavons
vu dans le premier chapitre de cette partie Personn et coll (46) ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoun
extrait de V myrtillus agrave inhiber lrsquoECA cet effet pourrait ecirctre une explication aux effets
observeacutes de la plante sur la vision
61
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus
Un stress oxydant peut laquo srsquoattaquer raquo aux neurotransmetteurs entrainant leur oxydation Ainsi
les neurotransmetteurs comme la dopamine et son meacutetabolite neurotoxique la 6-
hydroxydopamine peuvent subir une oxydation geacuteneacuterant H2O2 et des ERO Dans les neurones
et drsquoautres cellules ce stress oxydant peut ecirctre amplifieacute par le relargage du cytochrome c
(composant essentiel de la chaine respiratoire mitochondriale participant au transfert
drsquoeacutelectrons) localiseacute dans la membrane interne de la mitochondrie dans le cytoplasme ce
relargage induit toute une cascade de reacuteactions aboutissant agrave lrsquoactivation de caspases
(proteacuteines directement lieacutees agrave lrsquoapoptose) pouvant ecirctre fortement preacutejudiciable pour les
meacutetabolites de la dopamine La perte de lrsquointeacutegriteacute mitochondriale observeacutee dans des maladies
neurodeacutegeacuteneacuteratives peut contribuer aussi agrave des niveaux relargueacutes de cytochrome c au-dessus
de la normale (68)
Yao et coll (68) ont montreacute in vitro la capaciteacute drsquoune preacuteparation riche en anthocyanosides
composeacutee de V myrtillus V corymbosum et V oxycoccus L et des anthocyanosides purifieacutes agrave
inhiber lrsquooxydation de la 6-hydoxydopamine augmenteacutee par le cytochrome c Parmi les trois
espegraveces eacutetudieacutees les extraits de V myrtillus apparaissent pour ecirctre plus efficaces dans cette
activiteacute que les deux autres espegraveces ou que les anthocyanosides purifieacutes pouvant srsquoexpliquer
par une plus grande richesse en anthocyanosidesanthocyanidines particuliegraverement la
cyanidine et delphinidine La composition en querceacutetine et agrave moindre degreacute en myriceacutetine
nrsquoont pas de rocircle dans lrsquoactiviteacute antioxydante la preacutesence de querceacutetine est mecircme
inversement correacuteleacutee avec lrsquoeffet antioxydant Lrsquoeffet inhibiteur observeacute est principalement ducirc
agrave lrsquoeffet antioxydant des anthocyanosides
Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent la forte activiteacute des anthocyanosides vis-agrave-vis des
reacuteactions neurotoxiques potentielles et suggegraverent lrsquoimportance de mettre au point des eacutetudes in
vivo dans le but de deacutemontrer des effets neuro- et mitochondrio-protecteurs de ces
phytochimiques particuliegraverement dans la maladie de Parkinson et drsquoautres maladies
impliquant un dysfonctionnement mitochondriale
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant un
stress oxydant
Une ischeacutemie-reperfusion entraine de nombreuses alteacuterations microvasculaires comme une
augmentation des leucocytes adheacuterant agrave la paroi des vaisseaux veineux une diminution de la
longueur des capillaires perfuseacutes menant agrave une diminution du nombre de capillaires
62
fonctionnels une perte de lrsquointeacutegriteacute endotheacuteliale une augmentation de la permeacuteabiliteacute
capillaire (relargage de proteacuteases comme lrsquoeacutelastase et la collageacutenase avec formation drsquoœdegraveme)
et des modifications du diamegravetre des arteacuterioles (modification de la balance vosodilatation-
vasoconstriction au profit drsquoune vasoconstriction ) Les leucocytes jouent un rocircle fondamental
dans lrsquoischeacutemie-reperfusion en srsquoaccumulant dans les tissus ils provoquent lrsquoocclusion
intravasculaire ainsi que le relargage de cytokines pro-inflammatoires et des meacutetabolites
deacuteriveacutes de lrsquooxygegravene En effet les ERO ont eacuteteacute fortement impliqueacutees dans ces deacutesordres
microcirculatoires elles altegraverent entre autre lrsquointeacutegriteacute de la paroi des vaisseaux et entrainent
une augmentation de la permeacuteabiliteacute en post-capillaire et dans les veines collectrices de
lrsquoabajoue drsquohamster De plus les ERO provenant des leucocytes ou non peuvent induire une
contraction des arteacuterioles (8)
En 1995 Bertuglia et coll (8) ont eacutetudieacute les effets des anthocyanosides de V myrtillus sur
lrsquoischeacutemie-reperfusion provoqueacutee sur lrsquoabajoue drsquohamster entrainant les deacutesordres
microcirculatoires citeacutes preacuteceacutedemment Lrsquoeacutetude montre qursquoune administration orale
drsquoanthocyanosides de V myrtillus suite agrave ces dommages permet une protection de la paroi des
vaisseaux gracircce agrave leur action antioxydante une reacuteduction du nombre de leucocytes adheacuterant agrave
la paroi veineuse (proteacutegeant les tissus de lrsquoischeacutemie-reperfusion et preacutevenant la formation de
meacutediateurs inflammatoires) une diminution de la permeacuteabiliteacute capillaire par son activiteacute anti-
proteacuteasique la plante peut ecirctre eacutegalement un modulateur important du tonus des arteacuterioles en
controcirclant la freacutequence et lrsquoamplitude la vasomotion (modification du calibre vasculaire)
permettant une ameacutelioration de la perfusion capillaire (inhibition de la vasoconstriction par les
ERO)
Cette eacutetude est importante drsquoune part pour montrer le rocircle des radicaux libres deacuteriveacutes de
lrsquooxygegravene dans les deacutesordres microcirculatoires et drsquoautre part pour deacutemontrer les effets
beacuteneacutefiques de V myrtillus agrave restaurer les diffeacuterents paramegravetres notamment par son action
antioxydante
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer
Wang et coll (65) ont reporteacute les reacutesultats des eacutetudes qui ont permis de mettre en eacutevidence les
activiteacutes anticarcinogeacuteniques des anthocyanosides et des extraits riches en anthocyanosides
dans des modegraveles de cultures cellulaires in vitro et dans des systegravemes in vivo de modegraveles
tumoraux chez lrsquoanimal Lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides est due agrave leur structure
63
pheacutenolique en donnant un eacutelectron aux radicaux ceux-ci devenant stables (eacutelectrons
apparieacutes) En effet les anthocyanosides sont capables comme nous lrsquoavons vu
preacuteceacutedemment de pieacuteger directement les ERO drsquoaugmenter la valeur ORAC des cellules de
stimuler lrsquoexpression de la phase II de deacutetoxification des enzymes de reacuteduire la formation des
sous-produits de lrsquoADN de diminuer la peroxydation lipidique drsquoinhiber la mutagenegravese
induite par des carcinogegravenes ou des toxines et de reacuteduire la prolifeacuteration cellulaire en
modulant les voies de transduction du signal Ils sont capables eacutegalement de cheacutelater les
meacutetaux et de se lier directement aux proteacuteines Lrsquoactiviteacute antioxydante est principalement due
aux groupes hydroxyles des anthocyanosides en position 3 du cycle C et en position 3rsquo 4rsquo et
5rsquo du cycle B de leur structure de base Enfin il a eacuteteacute montreacute que les aglycones
drsquoanthocyanidines ont une activiteacute antioxydante plus importante que leurs homologues
glycosyleacutes et cette activiteacute diminue quand le nombre de sucres augmente
Mecircme si les eacutetudes expeacuterimentales ont deacutemontreacute lrsquoactiviteacute anticancer des anthocyanosides les
eacutetudes eacutepideacutemiologiques nrsquoont pas montreacute lrsquoactiviteacute protectrice de la consommation
drsquoanthocyanosides vis-agrave-vis du risque de cancer humain et leur activiteacute antioxydante reste
encore questionnable De plus les quantiteacutes drsquoanthocyanosides neacutecessaires pour observer un
effet in vitro sont importantes par rapport aux quantiteacutes retrouveacutees dans le plasma humain in
vivo Crsquoest pourquoi des eacutetudes sont neacutecessaires pour deacutevelopper des solutions qui
permettraient drsquoaugmenter lrsquoabsorption des anthocyanosides etou leurs meacutetabolites
permettant ainsi lrsquoutilisation optimale des anthocyanosides dans la preacutevention de cancer chez
lrsquohomme particuliegraverement dans les tissus autres que le tractus gastro-intestinal et la peau
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus
Katsube et coll (31) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute anticarcinogeacutenique dans un systegraveme in vitro de dix
baies comestibles et particuliegraverement celle de V myrtillus Lrsquoactiviteacute de la myrtille est testeacutee
sur deux ligneacutees cellulaires diffeacuterentes les cellules leuceacutemiques humaines HL60 et les
cellules carcinomateuses du cocirclon HCT116 Lrsquoeacutetude deacutemontre que lrsquoextrait de V myrtillus est
le plus efficace parmi les dix extraits eacutethanoliques de baies pour inhiber la croissance de ces
ligneacutees cellulaires Toutes les concentrations testeacutees inhibent la croissance des cellules HL60
lors des deux peacuteriodes drsquoincubation (24 et 48 heures) alors que lrsquoinhibition de la croissance
des HCT116 nrsquoest observeacutee que pour des intervalles speacutecifiques de concentrations De plus
lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus induit des niveaux significatifs drsquoapoptose dans les
cellules HL60 mais pas dans les cellules HCT116
64
Ce sont les anthocyanosides qui sont responsables de lrsquoinhibition de la croissance des cellules
canceacutereuses HL60 et HCT116 induisant eacutegalement lrsquoapoptose des cellules HL60
Les anthocyanosides de V myrtillus plus particuliegraverement les glycosides de delphinidine et
malvidine induisent lrsquoinhibition de la croissance des cellules de la leuceacutemie humaine HL60
par induction de lrsquoapoptose et mecircme si lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus et certains
anthocyanosides inhibent la croissance des cellules carcinomateuses du cocirclon humain
(HCT116) ces cellules sont toutefois moins sensibles agrave lrsquoapoptose que les autres ligneacutees en
se reacutefeacuterant agrave drsquoautres donneacutees on pourrait suggeacuterer un blocage de la voie drsquoinduction de
lrsquoapoptose des cellules HCT116
Lrsquoinhibition de la croissance par les baies nrsquoest toutefois pas speacutecifique aux cellules
canceacutereuses En conclusion une consommation reacuteguliegravere de baies pourrait maintenir des
niveaux drsquoanthocyanosides dans le plasma Ces baies sont des aliments fonctionnels
prometteurs dans la preacutevention du risque de cancer gracircce agrave leurs effets multiples comme
lrsquoinduction de lrsquoapoptose lrsquoactiviteacute antioxydante et drsquoautres effets anticanceacutereux
En 2004 Zhao et coll (69) ont eacutetudieacute les effets de trois extraits riches en anthocyanosides
Vitis vinifera (Vigne rouge) V myrtillus L et Aronia melanocarpa E (Aronie noire) sur les
cellules canceacutereuses du cocirclon HT-29 et les cellules non tumorigeacuteniques du cocirclon NCM460
Lrsquoeacutetude deacutemontre lrsquoinhibition de la croissance des cellules HT-29 par V myrtillus agrave faibles
concentrations tandis que lrsquoeffet est pauvre sur les cellules NCM460 Cependant une peacuteriode
longue drsquoincubation (72 heures) montre un effet de la myrtille sur la croissance des cellules
NCM460 V myrtillus a une activiteacute importante peut-ecirctre gracircce agrave la cyanidine reporteacutee pour
ecirctre un inhibiteur efficace de la croissance des cellules canceacutereuses coloniques
Dans cette eacutetude la croissance des cellules du colon est inhibeacutee alors que les conditions de pH
et de tempeacuterature ne sont pas optimum pour la stabiliteacute des anthocyanosides Les formes
actives responsables des effets observeacutes pourraient ecirctre dues aux produits de deacutegradation des
anthocyanosides
En conclusion cette eacutetude deacutemontre que des extraits riches en anthocyanosides et notamment
V myrtillus sont capables drsquoinhiber la croissance des cellules canceacutereuses du colon HT-29 agrave
plus basse concentration et agrave des peacuteriodes drsquoincubation plus courtes que la croissance des
cellules non tumorigeacuteniques NCM460 du colon Il reste toutefois agrave deacuteterminer quels sont les
composeacutes des extraits veacuteritablement responsables des effets observeacutes
65
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine
En 2006 Cooke et coll (18) ont eacutetudieacute les effets drsquoun meacutelange drsquoanthocyanosides de V
myrtillus (Mirtoselectreg) et de cyanidine-3-glucoside ou C3G (anthocyanoside le plus
abondant de lrsquoalimentation) sur le deacuteveloppement drsquoadeacutenome intestinal sur souris ApcMin
alimenteacutees pendant 12 semaines avec ces extraits Les souris ApcMin
constituent un modegravele
geacuteneacutetique de polypose adeacutenomateuse familiale humaine Cette maladie autosomique
dominante de lrsquohomme est caracteacuteriseacutee par le deacuteveloppement spontaneacute drsquoune centaine de
polypes colorectaux pouvant se transformer en carcinomes
Les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent que les deux extraits utiliseacutes diminuent le nombre
drsquoadeacutenomes drsquoune maniegravere dose-deacutependante (agrave la plus haute concentration lrsquoinhibition la plus
importante est observeacutee pour la cyanidine-3-glucoside) Les anthocyanosides sont retrouveacutes
dans le plasma agrave la limite de la deacutetection analytique et sont retrouveacutes agrave des niveaux
quantifiables dans lrsquointestin et lrsquourine Les principales formes preacutesentes dans lrsquointestin et
lrsquourine sont des anthocyanosides glucuronides et des meacutetabolites meacutethyleacutes Enfin les
anthocyanosides sont retrouveacutes dans drsquoautres tissus que lrsquointestin
En conclusion la dose eacutequivalente de Mirtoselectreg
chez lrsquohumain est contenue dans environ
740 grammes de baies de V myrtillus suggeacuterant que la dose efficace de lrsquoextrait chez la
souris ApcMin
pourrait ecirctre traduite en une dose importante (mais non impossible) chez
lrsquohumain De plus les glycosides de malvidine sont les anthocyanosides laquo survivants raquo les
mieux sous forme inchangeacutee dans lrsquointestin leur structure eacutetant moins apte agrave subir les
reacuteactions de conjugaison que celle drsquoautres anthocyanosides Lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides
in vivo pourrait ecirctre due au moins en partie agrave leur hydrolyse en anthocyanidines La preacutesence
transitoire des anthocyanidines apregraves hydrolyse de leurs preacutecurseurs glycosyleacutes et leur
transformation par conjugaison meacutetabolique pourraient expliquer lrsquoefficaciteacute de C3G ou du
Mirtoselectreg Le niveau drsquoanthocyanosides agrave la dose efficace chez la souris Apc
Min est bas
dans la circulation systeacutemique mais deacutetectable et mesurable dans le tractus gastro-intestinal et
lrsquourine
Ainsi lrsquoabsence drsquoeffets indeacutesirables des anthocyanosides et leur efficaciteacute dans la reacuteduction
du deacuteveloppement de lrsquoadeacutenome en font de bons candidats pour le deacuteveloppement clinique
66
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes
Les reacutecepteurs agrave lrsquoactiviteacute tyrosine kinase sont des moleacutecules transmembranaires constitueacutees
drsquoun site reacutecepteur sur lequel se lie un ligand (localiseacute sur la face extracellulaire) et un site
tyrosine kinase (sur la face interne) Ces reacutecepteurs ont en plus un site de phosphorylation Le
site tyrosine kinase (constituant une famille drsquoenzymes) est normalement inactif mais peut
srsquoactiver par phosphorylation de la tyrosine Le meacutecanisme drsquoactivation du site tyrosine
kinase ne se fait pas par passage drsquoinformations depuis le site de reconnaissance du ligand
jusqursquoagrave lrsquointeacuterieur de la cellule mais par la liaison du ligand sur deux reacutecepteurs pouvant se
rapprocher et se phosphoryler mutuellement Les reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase jouent
un rocircle crucial dans la carcinogenegravese et la progression tumorale Des exemples importants de
reacutecepteurs agrave tyrosine kinase comportent la famille ErbB incluant le facteur de croissance
eacutepidermique (EGFR ErbB1) et les reacutecepteurs ErbB2-4 lrsquoIGFR1 (insulin-like growth factor
receptor 1) et les VEGFR-2 et VEGFR-3 (vascular endothelial growth factor receptors) ErbB
et IGF sont des reacutecepteurs agrave tyrosine kinase surexprimeacutes dans certains types tumoraux
reacutesultant dans des modifications de la signalisation cellulaire impliqueacutees dans la croissance
cellulaire et la diffeacuterentiation Les reacutecepteurs VEGF sont des modulateurs de lrsquoangiogenegravese et
de la lymphangiogenegravese Crsquoest pourquoi lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs agrave tyrosine
kinase peut ecirctre une theacuterapeutique inteacuteressante (84)
42 Eacutetude de Teller et coll (2009)
Teller et coll (60) ont eacutetudieacute les effets de deux extraits standardiseacutes Mirtocyanreg
(extrait de V
myrtillus et Oenocyaninreg
(extrait de raisins) sur lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs tyrosine kinases
(RTKs) Seuls les reacutesultats concernant V myrtillus seront rapporteacutes dans cette thegravese
Lrsquoinhibition des RTK est eacutevalueacutee en utilisant une activiteacute kinase recombinante dans un
systegraveme de cellules libres et en deacuteterminant lrsquoautophosphorylation induit par le ligand dans
des cellules carcinomateuses de la vulve E431 et dans des cellules endotheacuteliales aortiques
porcines exprimant soit VEGFR-2 soit VEGFR-3 La capaciteacute des extraits riches en
anthocyanosides agrave modifier lrsquoactiviteacute des RTK est compareacutee agrave leur capaciteacute agrave moduler la
croissance des cellules
Les deux extraits inhibent lrsquoactiviteacute drsquoune varieacuteteacute de RTKs dans le systegraveme de cellules libres
(activiteacute kinase des domaines kinases recombinants) et dans les cellules vivantes (reacutecepteur
intact autophosphorylation induite par ligand) Par contre lrsquoautophosphorylation du reacutecepteur
des cellules intactes neacutecessitent des concentrations 10 agrave 50 fois plus hautes que celles
67
neacutecessaires pour lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute kinase recombinante dans le systegraveme de cellules
libres Cette diffeacuterence pourrait srsquoexpliquer par un accegraves pauvre des glycosides aux domaines
kinases recombinants
De plus les deux extraits inhibent davantage les kinases associeacutees avec EGFR et le VEGFR-2
que les kinases associeacutees avec ErbB-2 VEGFR-3 et IGF1R De plus les extraits preacutesentent
peu de speacutecificiteacute entre les membres des reacutecepteurs de la famille ErbB Mecircme si les extraits
riches en anthocyanosides inhibent lrsquoactiviteacute des RTKs peu drsquoeffets ont eacuteteacute montreacutes sur la
croissance des cellules Ceci pourrait ecirctre ducirc soit agrave la faible stabiliteacute des anthocyanosides dans
le milieu de culture soit agrave la preacutesence drsquoautres voies moleacuteculaires que les RTKs ces voies ne
seraient pas affecteacutees par les extraits riches en anthocyanosides et auraient la capaciteacute de
promouvoir la croissance et la survie cellulaire elles pourraient ainsi compenser lrsquoinhibition
des RTKs
Lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoactiviteacute des RTKs nrsquoest pas ducirc aux composants individuels des
extraits en effet V myrtillus contient un ensemble de composeacutes polypheacutenoliques ainsi que
des constituants inconnus Les cateacutechines flavonols et procyanidines preacutesents dans les
extraits en quantiteacutes plus basses que les anthocyanosides ont montreacute dans drsquoautres eacutetudes des
effets inhibiteurs des RTKs Mais la basse biodisponibiliteacute de ces extraits doit ecirctre prise en
compte pour lrsquoeacutevaluation de leurs effets physiologiques
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision
Les extraits de V myrtillus ont eacuteteacute utiliseacutes depuis 1964 dans les affections ophtalmiques et
dans les deacutesordres de la microcirculation Des eacutetudes anciennes ont rapporteacute les effets de
preacuteparations agrave base du fruit de V myrtillus dans lrsquoacuiteacute visuelle en lumiegravere sombre dans la
vision nocturne chez les sujets ne preacutesentant pas de troubles de la vision chez les patients
avec un problegraveme significatif de vision en lumiegravere vive les patients atteints de DMLA de
reacutetinopathie diabeacutetique drsquoinflammation reacutetinienne de reacutetinite pigmentaire (V myrtillus
associeacute au β-carotegravene) et enfin chez les patients avec myopie progressive Drsquoautres eacutetudes ont
rechercheacute les effets de V myrtillus sur la formation de la cataracte chez des patients souffrant
de cataracte corticale seacutenile (extrait pris en association avec la vitamine E) Cependant
lrsquohypothegravese drsquoun effet de V myrtillus sur la vision est tregraves controverseacutee certaines eacutetudes
rapportent des reacutesultats neacutegatifs (35)
Durant la seconde guerre mondiale les pilotes de la British Royal Air force avaient deacutejagrave
rapporteacute une ameacutelioration de lrsquoacuiteacute visuelle apregraves consommation de confitures de myrtilles
68
Cependant durant cette mecircme peacuteriode la technologie du radar a eacuteteacute introduite en Grande-
Bretagne pour la deacutefense aeacuterienne et des eacutetudes ulteacuterieures nrsquoont pas supporteacute lrsquohypothegravese
drsquoune ameacutelioration de la vision nocturne et de la sensibiliteacute au contraste nocturne par la
suppleacutementation en V myrtillus Le systegraveme de radar et non V myrtillus pourrait alors ecirctre la
cause du succegraves de la Royal Air Force (66)
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale
Des eacutetudes ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoextraits de Vaccinum myrtillus seuls ou associeacutes agrave du
β-carotegravene et de la vitamine E (chez des patients avec ou sans deacutesordre oculaire) agrave ameacuteliorer
la vision nocturne agrave induire une adaptation agrave lrsquoobscuriteacute et une restauration de lrsquoacuiteacute
visuelle (suite agrave une exposition agrave une lumiegravere vive ou un flash) plus rapides (42) Drsquoautres
eacutetudes ont montreacute lrsquoefficaciteacute des extraits anthocyanosidiques de myrtille agrave ameacuteliorer la vision
nocturne et lrsquoajustement agrave lrsquoobscuriteacute chez des controcircleurs aeacuteriens des pilotes drsquoavion des
conducteurs de voiture et de camion (43)
Agrave lrsquoopposeacute drsquoautres eacutetudes ne precirctent pas agrave la myrtille des proprieacuteteacutes sur la vision Crsquoest le
cas notamment de lrsquoeacutetude en 2000 de Muth et coll (46) ils ont rechercheacute les effets de V
myrtillus sur lrsquoacuiteacute visuelle nocturne et la sensibiliteacute au contraste nocturne Leur eacutetude est
randomiseacutee double-aveugle et controcircleacutee par placebo Les sujets inclus dans lrsquoeacutetude sont des
hommes jeunes preacutesentant une bonne vision Un groupe reccediloit 160 mg drsquoextrait de V
myrtillus et lrsquoautre groupe un placebo trois fois par jour pendant 21 jours Apregraves un mois
sans traitement le test reprend pendant 3 semaines en inversant les groupes (les sujets ayant
eu le placebo ont maintenant les capsules de V myrtillus et vice versa) Les reacutesultats montrent
qursquoil nrsquoy a pas de diffeacuterences entre les mesures de la moyenne de lrsquoacuiteacute visuelle nocturne
chez les sujets soumis au traitement par V myrtillus et ceux soumis au placebo De mecircme
lrsquoexamen de la derniegravere acuiteacute visuelle durant le traitement actif et celui durant le placebo ne
reacutevegravelent pas de diffeacuterences dans lrsquoacuiteacute visuelle nocturne Le mecircme reacutesultat neacutegatif est
constateacute pour la sensibiliteacute au contraste nocturne
En conclusion cette eacutetude nrsquoapporte pas de reacutesultats positifs sur lrsquoeffet de V myrtillus sur les
deux paramegravetres mesureacutes mecircme si lrsquoextrait est pris agrave haute dose et pendant une dureacutee
significative
Une critique de lrsquoeacutetude de Muth et coll (46) pourrait ecirctre faite sur la population limiteacutee
utiliseacutee peu de sujets ont eacuteteacute inclus dans lrsquoeacutetude et ceux-ci eacutetaient tous des hommes jeunes
avec une bonne vision Il est vrai que deux de ces sujets avaient une moyenne drsquoacuiteacute
69
visuelle nocturne et une sensibiliteacute au contraste nocturne en dessous des autres sujets or
mecircme chez ces sujets aucune diffeacuterence de mesure nrsquoa eacuteteacute enregistreacutee
Cette eacutetude pose de nouveau des doutes sur lrsquoutilisation de la myrtille dans des formes
couramment disponibles et aux doses recommandeacutees comme suppleacutementation efficace pour
lrsquoameacutelioration de la vision nocturne dans une cateacutegorie de sujets preacutesentant une bonne vision
et essentiellement une vision nocturne normale
2 Eacutetude chez des sujets myopes
Une eacutetude a montreacute qursquoune association drsquoanthocyanosides de V myrtillus avec vitamine E et
β-carotegravene ameacuteliorait le champ visuel de patients atteints de myopie aussi bien lors drsquoun
traitement court que long De mecircme il a eacuteteacute deacutemontreacute une efficaciteacute de lrsquoassociation
drsquoanthocyanosides de myrtille avec le reacutetinol sur la sensibiliteacute de la reacutetine de patients myopes
dans 32 des 42 yeux examineacutes (43)
En 2005 Lee et coll (35) ont mis au point une eacutetude randomiseacutee double-aveugle controcircleacutee
par placebo impliquant 60 sujets avec astheacutenopie et myopie basse agrave modeacutereacutee avec erreurs
reacutefractaires entre -1 et -8 dioptres au niveau des deux yeux Lrsquoobjectif de lrsquoeacutetude est de
deacuteterminer lrsquoeffet de lrsquoadministration drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides purifieacutes agrave hautes doses
de V myrtillus sur la fonction visuelle nocturne et les symptocircmes cliniques chez ces sujets de
mecircme acircge et de sensibiliteacute au contraste similaire Ainsi 30 sujets ont reccedilu des comprimeacutes de
100 mg de traitement contenant 85 drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides et les 30 autres sujets
des comprimeacutes placebo deux fois par jours pendant 4 semaines La fonction visuelle nocturne
est eacutevalueacutee par le test de sensibiliteacute au contraste (test objectif) et les symptocircmes cliniques par
un questionnaire rempli par les sujets (test subjectif) avant et apregraves le traitement Ainsi les
reacutesultats baseacutes sur lrsquoanalyse du questionnaire montrent qursquoagrave la suite des 4 semaines de
traitement les sujets traiteacutes par anthocyanosides ont preacutesenteacute une ameacutelioration des symptocircmes
(meilleurs que le groupe placebo) De plus le groupe anthocyanoside a montreacute une sensibiliteacute
au contraste ameacutelioreacutee agrave chaque cycle par degreacute alors qursquoaucune ameacutelioration nrsquoa eacuteteacute
constateacutee dans le groupe placebo
Des eacutetudes anciennes ont reporteacutes une ameacutelioration de la fonction visuelle nocturne chez des
sujets normaux prenant des anthocyanosides alors que des eacutetudes plus reacutecentes nrsquoont montreacute
aucun effet sur la vision nocturne par administration orale simple ou multiple drsquooligomegraveres
drsquoanthocyanosides (35) Ces discordances de reacutesultats pourraient ecirctre causeacutees par des
diffeacuterences dans le choix des sujets les meacutethodes drsquoeacutevaluation de la vision nocturne ainsi que
la concentration et la dose drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides utiliseacutees Alors que des eacutetudes ne
70
montrent pas drsquoeffets des oligomegraveres drsquoanthocyanosides chez les sujets normaux drsquoautres
eacutetudes deacutemontrent lrsquoefficaciteacute de ceux-ci chez les sujets avec myopie ou heacutemeacuteralopie
(diminution anormale de la vision dans lrsquoobscuriteacute)
Dans lrsquoeacutetude de Lee et coll (35) les conditions sont diffeacuterentes de celles que lrsquoon peut trouver
dans drsquoautres eacutetudes qui ont pu ecirctre faites en termes de dose de dureacutee et de type de sujets En
effet une haute dose drsquooligomegraveres anthocyanosides (concentreacutes agrave 85 gracircce au processus de
fermentation speacutecifique) est administreacutee pendant une plus longue peacuteriode compareacutee aux autres
eacutetudes De plus les sujets utiliseacutes englobent des personnes avec myopie astheacutenopie et une
sensitiviteacute au contraste meacutesopique diminueacutee alors que drsquoautres eacutetudes utilisent des sujets
normaux
En conclusion cette eacutetude montre que les anthocyanosides peuvent ameacuteliorer les symptocircmes
subjectifs et les reacutesultats de la moyenne de la sensibiliteacute au contraste chez des sujets
preacutesentant myopie et astheacutenopie Mais drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour rechercher la
dose optimale de V myrtillus la dureacutee de traitement neacutecessaire la dureacutee de lrsquoeffet apregraves
lrsquoarrecirct du traitement et lrsquoapplication de ce traitement en clinique chez des patients avec des
maladies oculaires comme la reacutetinite pigmentaire le glaucome et la reacutetinopathie diabeacutetique
connus pour reacuteduire la vision nocturne
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004)
Canter et coll (13) ont proceacutedeacute agrave une meacuteta-analyse des eacutetudes faites concernant lrsquoeffet des
anthocyanosides de V myrtillus sur la vision nocturne
Des 30 eacutetudes trouveacutees par les auteurs avec des reacutesultats se reacutefeacuterant agrave la vision dans des
conditions de lumiegravere reacuteduites 12 eacutetudes sont des eacutetudes controcircleacutees par placebo Les 4 eacutetudes
les plus reacutecentes sont des eacutetudes controcircleacutees randomiseacutees et rapportent des reacutesultats neacutegatifs
La 5egraveme
eacutetude controcircleacutee randomiseacutee et les 7 eacutetudes controcircleacutees non randomiseacutees rapportent des
reacutesultats positifs dans lrsquoameacutelioration de la vision en lumiegravere reacuteduite Les reacutesultats neacutegatifs sont
associeacutes avec une plus grande rigueur dans la meacutethodologie mais aussi des doses plus basses
et des extraits provenant de sources geacuteographiques distincts pouvant diffeacuterer dans la
composition en anthocyanosides De plus dans 11 des 12 eacutetudes les sujets utiliseacutes sont des
sujets en bonne santeacute avec une vision moyenne normale voire au-dessus de la normale Ainsi
les eacutetudes cliniques les plus rigoureuses ne supportent pas lrsquohypothegravese drsquoune ameacutelioration de
la vision nocturne chez les sujets en bonne santeacute par les anthocyanosides de V myrtillus
Cependant lrsquoassociation entre rigueur meacutethodologique publication reacutecente reacutesultat neacutegatif
est confondu avec plusieurs facteurs de confusion qui peuvent biaiser les eacutetudes comme la
71
dose les diffeacuterentes variations geacuteographiques modifiant la composition des extraits et le type
de sujets inclus dans les eacutetudes De plus les meacutethodes mises en place pour obtenir et
interpreacuteter les eacutelectroreacutetinogrammes employeacutees dans les eacutetudes plus anciennes diffegraverent des
proceacutedures standardiseacutees utiliseacutees maintenant
Lorsque lrsquoanalyse des facteurs de confusion est faite une association entre les reacutesultats
positifs et lrsquoutilisation de plus hautes doses en anthocyanosides de V myrtillus est mise en
eacutevidence De plus la composition phytochimique des extraits diffegraverent selon la geacuteographie
des plantes de Myrtillier Les reacutesultats positifs sont souvent associeacutes avec des eacutetudes utilisant
des extraits provenant drsquoItalie ou de France La quantiteacute des anthocyanosides de la myrtille
(constituants les plus actifs) varient en fonction du cycle de vie des plantes en reacuteponse agrave des
facteurs de stress et des signaux de lrsquoenvironnement Ainsi avec le mucircrissement la quantiteacute
des anthocyanosides augmente alors que celle des proanthocyanidines diminue Crsquoest
pourquoi agrave cause des diffeacuterences geacuteographiques une standardisation drsquoune quantiteacute en
pourcentage fixe drsquoextrait est une proceacutedure insuffisante pour garantir une composition
identique et une activiteacute pharmacologique Lors des eacutetudes drsquoautres composants peuvent ecirctre
ajouteacutes avec les anthocyanosides de mytille comme le β-carotegravene (un deacuteficit est connu pour
ecirctre lieacute agrave une alteacuteration de la vision nocturne) Lrsquoeffet confondant du β-carotegravene dans
certaines eacutetudes ne peut ecirctre correctement eacutevalueacute sans connaitre le statut nutritionnel des
sujets Dans cette meacuteta-analyse 5 eacutetudes utilisent dans le traitement actif du β-carotegravene Une
eacutetude ne montre pas de diffeacuterences dans lrsquointerpreacutetation de lrsquoeacutelectroreacutetinogramme des sujets
traiteacutes avec lrsquoextrait de V myrtillus avec ou sans β-carotegravene et 3 eacutetudes reacutealiseacutees dans les
anneacutees 1940 montrent que le β-carotegravene nrsquoa pas drsquoeffet sur lrsquoadaptation nocturne quand il est
administreacute seul
En conclusion des eacutetudes rigoureuses sur les effets des extraits de V myrtillus vis-agrave-vis de
sujets souffrant drsquoune alteacuteration de la vision nocturne due agrave des conditions pathologiques
oculaires sont neacutecessaires Cependant la preacutesence drsquoeacutetude plus faibles dans la meacutethodologie
le teacutemoignage des eacutetudes animales les eacutetudes des anthocyanosides syntheacutetiques (la cyanidine
syntheacutetique utiliseacutee dans des eacutetudes controcircleacutees par placebo dans les anneacutees 1970 et 1980 a
montreacute une ameacutelioration de la vision nocturne chez des sujets en bonne santeacute et souffrant
drsquoune varieacuteteacute de deacutesordres ophtalmologiques) une eacutetude controcircleacutee randomiseacutee de Ribes
nigrum montrant un effet positif sur le seuil drsquoadaptation nocturne pourraient justifier des
eacutetudes compleacutementaires sur les anthocyanosides de myrtille chez des sujets preacutesentant une
alteacuteration de la vision nocturne
72
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique
La reacutetinopathie diabeacutetique est une complication agrave long terme du diabegravete qui se traduit par une
deacutegeacuteneacuterescence des capillaires irrigant la reacutetine La maladie se manifeste par des
microaneacutevrysmes qui sont de petites dilatations de la paroi des capillaires (preacutesence de petits
points rouges drsquoheacutemorragies et drsquoapparition drsquoexsudatshellip) Dans des formes eacutevolueacutees une
baisse de la vision peut survenir (1) La neacuteovascularisation est la principale modification
rencontreacutee dans la reacutetinopathie diabeacutetique reacutesultant drsquoune interaction avec des cytokines et
des facteurs de croissance pouvant ecirctre responsables de lrsquoangiogenegravese comme dans le cancer
Or VEGF joue un rocircle dans la neacuteovascularisation reacutetinienne mecircme si son rocircle exact dans la
survenue preacutecoce de la pathologie nrsquoest pas encore entiegraverement compris (16)
En 2005 une eacutetude meneacutee par Chung et coll (16) a deacutemontreacute la capaciteacute de Vaccinium
myrtilus a diminueacute le glucose sanguin plasmatique et agrave reacuteduire le pourcentage de surface de
vascularisation reacutetinien chez des rats diabeacutetiques compliqueacute drsquoune reacutetinopathie diabeacutetique
ces pathologies eacutetant induites par la streptozocine Cependant pas drsquoeffet est constateacute sur le
VEGF (16)
Une eacutetude clinique a deacutemontreacute lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides de V myrtillus (administration
orale de 480 mgjour pendant 180 jours) sur les manifestations de la reacutetinopathie diabeacutetique
notamment la reacuteduction voire la disparition des heacutemorragies reacutetiniennes chez des patients
diabeacutetiques (diabegravete type 2) et souffrant drsquoune reacutetinopathie non prolifeacuterative (43)
Lrsquoameacutelioration significative des examens ophtalmoscopiques et angiographiques apregraves
traitement avec 320 mg de Myrtocyanreg
pendant 30 jours a eacuteteacute montreacutee chez 77 agrave 92 des 40
patients inclus dans lrsquoeacutetude et souffrant de diabegravete et de reacutetinopathie hypertensive (43)
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes
Lrsquoeacutepitheacutelium de la surface oculaire joue le rocircle fondamental de barriegravere empecircchant lrsquoentreacutee de
substances nocives dans la corneacutee et maintenant lrsquointeacutegriteacute de la surface oculaire La
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes permet la reacutegeacuteneacuteration du tissu pour
maintenir le rocircle protecteur de la corneacutee et la cicatrisation Crsquoest pourquoi le cycle cellulaire
est tregraves important Au niveau de ces cellules des glycosaminoglycanes (GAGs glucides de
lrsquoorganisme localiseacutes dans le mucus les seacutecreacutetions digestives et le tissu conjonctif) sulfateacutes
sont produits par les trois types de cellules de la corneacutee (cellules eacutepitheacuteliales endotheacuteliales et
les fibroblastes) Les GAGs de lrsquoeacutepitheacutelium corneacuteen peuvent moduler le comportement
cellulaire comme lrsquoadheacutesion la migrationhellip et jouent donc un rocircle important pour la
73
cicatrisation corneacuteenne Lrsquoun des GAGs est lrsquoacide hyaluronique substance de la matrice
extra-cellulaire jouant plusieurs rocircles notamment dans la lubrification lrsquohydratation de la
matrice corneacuteenne et lrsquohomeacuteostasie Il pourrait aussi ameacuteliorer la santeacute de la surface oculaire
et reacuteduire la pression intraoculaire lors de la pose chirurgicale drsquoun implant oculaire (55)
Song et coll (55) ont reacutecemment eacutetudieacute les effets drsquoun extrait de V myrtillus sur le cycle la
croissance cellulaire lrsquoexpression des GAGs et de lrsquoacide hyaluronique dans un modegravele in
vitro de cellules eacutepitheacuteliales limbales corneacuteennes humaines Les reacutesultats deacutemontrent
lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille et ses anthocyanosides agrave promouvoir la division et la
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteenne sans aucune toxiciteacute cellulaire et agrave
augmenter la quantiteacute totale de GAGs sans modifications significatives de lrsquoacide
hyaluronique Lrsquoextrait de myrtille peut alors ecirctre beacuteneacutefique pour la reacutegeacuteneacuteration
physiologique et lrsquohomeacuteostasie
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete
Helmstaumldter (26) a reacutepertorieacute les substances antidiabeacutetiques utiliseacutees avant la deacutecouverte de
lrsquoinsuline Parmi toutes les plantes V myrtillus est celle la plus freacutequemment retrouveacutee dans
les preacuteparations antidiabeacutetiques commerciales au XXegraveme
siegravecle Les feuilles pourraient ecirctre la
partie de plante la plus utiliseacutee Une preacuteparation tregraves commune eacutetait le laquo Pilulae Myrtilli
Jasper raquo (1912) chacun contenant 012 grammes drsquoextraits de feuilles mais cette preacuteparation
nrsquoeacutetait mentionneacutee qursquooccasionnellement dans les traiteacutes scientifiques et seulement quelques
recherches ont eacuteteacute retrouveacutees
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine
Petlevski et coll (48) ont eacutetudieacute les effets drsquoune preacuteparation agrave base de plantes antidiabeacutetiques
comprenant la feuille de V myrtillus et drsquoautres plantes breveteacutee sous le numeacutero No P-
9801091 disponible sur le marcheacute Croate Deux extraits un extrait eacutethanolique (extrait 1) et
non eacutethanolique (extrait 2) sont administreacutes agrave des souris (NOD) non obegraveses rendues
diabeacutetiques par lrsquoalloxane (deacuteriveacute pyrimidique produisant chez lrsquoanimal une neacutecrose des
cellules β des icirclots de Langerhans)
Lrsquoeacutetude deacutemontre que les extraits 1 et 2 diminuent le glucose sanguin de 10 et 20
respectivement de la valeur initiale des souris NOD controcircles (sans traitement) Lrsquoeffet de
lrsquoextrait 2 est donc beaucoup plus marqueacute il est compareacute agrave un antidiabeacutetique de reacutefeacuterence
(acarbose) Les reacutesultats montrent que lrsquoextrait diminue significativement le niveau de glucose
74
sanguin alors que la diminution par lrsquoacarbose nrsquoest pas significative La mecircme chose est
observeacutee pour le niveau de fructosamine dans le sang
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques
Le diabegravete est une maladie souvent associeacutee agrave des deacutesordres meacutetaboliques comme une
hypertriglyceacuterideacutemie Lrsquoinsuline joue un rocircle essentiel dans le meacutetabolisme des lipoproteacuteines
Chez la plupart des patients atteints de diabegravete type 1 (insulino-deacutependant)
lrsquohypertriglyceacuterideacutemie est induit par une moindre activiteacute de la lipase lipoproteacuteique (enzyme
permettant lrsquohydrolyse des triglyceacuterides des lipoproteacuteines plasmatiques) deacutependante de
lrsquoinsuline
Une eacutetude meneacutee en 1996 par Cignarella et coll (17) a montreacute que lrsquoadministration orale
(pendant 4 jours) drsquoun extrait hydro-alcoolique seacutecheacute de feuilles de V myrtillus agrave des rats
rendus diabeacutetiques par streptozocine pouvait diminuer le niveau de glucose plasmatique par
environ 26 et le niveau de triglyceacuterides plasmatiques par 39 Ainsi lrsquoextrait de myrtille
expose une activiteacute hypolipideacutemiante dose-deacutependante chez les rats en stimulant le
catabolisme des lipoproteacuteines riches en triglyceacuterides probablement sous des conditions en
deacuteficits drsquoinsuline Par contre agrave lrsquoopposeacute du ciprofibrate (une moleacutecule de reacutefeacuterence dans le
traitement de lrsquohypertriglyceacuterideacutemie) lrsquoextrait de V myrtillus ne preacutevient pas la formation de
thrombus veineux chez ces rats diabeacutetiques
Ces eacutetudes in vivo ont montreacute lrsquoaction hypoglyceacutemiante de V myrtillus une fois les
constituants isoleacutes cette plante agrave usage traditionnel pourrait eacutegalement attirer lrsquoattention sur le
traitement de certains deacutesordres du meacutetabolisme lipidique
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique
Borrelli et coll (10) ont listeacute les agents phytogeacuteniques utiliseacutes comme remegravedes des ulcegraveres
gastriques Des reacutesultats ont deacutemontreacute lrsquoaction significative de V myrtillus dans la preacutevention
et le traitement des ulcegraveres Certaines eacutetudes ont montreacute ses effets protecteurs dans des ulcegraveres
induits par ligature du pylore par la reacuteserpine ou la pheacutenylbutazone ougrave le traitement avec les
anthocyanosides de V myrtillus a eacuteteacute donneacute avant ou pendant la formation de lrsquoulcegravere La
myrtille exerce un effet anti-ulcegravere en partie par une augmentation du mucus dans la paroi de
lrsquoestomac (ameacuteliorant lrsquoefficaciteacute de la barriegravere formeacutee par ce mucus) et peut influencer la
biosynthegravese des mucopolysaccharides
75
Magistretti et coll (37) montrent qursquoun extrait drsquoanthocyanosides de Vaccinium myrtillus
possegravede une action anti-ulcegravere inteacuteressante dans divers modegraveles expeacuterimentaux De ces
reacutesultats les auteurs ont voulu trouver les composants de Vaccinium myrtillus responsables de
cette action Or cette plante comme nous le savons est riche en anthocyanosides et
anthocyanidines (aglycones respectifs) Cela explique pourquoi les auteurs ont eacutetudieacute les
effets sur lrsquoulcegravere aigu et chronique chez des rats drsquoune anthocyanidine la cyanidine ou 3 5
7-trihydroxy-2-(34-dihydroxypheacutenyl)-1-benzopyrylium chloride (IdB 1027) Les reacutesultats
montrent les effets drsquoIdB 1027 suivants
- reacuteduction de lrsquoulcegravere gastrique induit par la ligature du pylore de faccedilon non dose-
deacutependante
- inhibition de lrsquoulcegravere de stress
- protection de lrsquoestomac de lrsquoulcegravere induit par pheacutenylbutazone
- reacuteduction de la seacuteveacuteriteacute de lrsquoulcegravere induit par indomeacutetacine de faccedilon dose-
deacutependante
- inhibe significativement lrsquoulceacuteration gastrique induit par reacuteserpine
- protection significative mais pas dose-deacutependante contre les leacutesions induites par
lrsquoeacutethanol
- inhibe significativement et de faccedilon dose-deacutependante lrsquoulcegravere induit par histamine
- et reacuteduction significative les leacutesions induites par acide aceacutetique
En conclusion lrsquoIdB 1027 est capable de reacuteduire ou mecircme drsquoinhiber les ulcegraveres induits par de
nombreux facteurs comme la ligature du pylore les AINS Les meacutecanismes par lesquels un
meacutedicament augmente les deacutefenses de la muqueuse gastrique sont varieacutes cela peut ecirctre une
influence sur la seacutecreacutetion et les proprieacuteteacutes physicochimiques du mucus ou une stimulation de
la reacutegeacuteneacuteration cellulaire une influence sur la microcirculation de la muqueuse la seacutecreacutetion
de bicarbonate la protection contre les dommages induits par les radicaux libres ou
lrsquoaugmentation de lrsquoAMP cyclique Ainsi lrsquoIdB 1027 peut agir par une combinaison de
certains de ces meacutecanismes comme une augmentation de la seacutecreacutetion de mucus (sans effet
anti-seacutecreacutetoire gastrique) dans des conditions physiologiques normales et dans des conditions
de deacutefense alteacutereacutees la stimulation de la reacutegeacuteneacuteration cellulaire montreacutee par son activiteacute contre
lrsquoulcegravere induit par acide aceacutetique lrsquoameacutelioration de la microcirculation de la muqueuse
montreacutee par son activiteacute contre lrsquoulcegravere geacuteneacutereacute par lrsquohistamine De plus lrsquoIdB 1027 est un
antioxydant et les anthocyanidines sont des inhibiteurs efficaces de lrsquoAMPc-
phosphodiesteacuterase dans des tissus varieacutes ce qui pourrait contribuer agrave lrsquoactiviteacute
pharmacologique observeacute
76
En conclusion les effets deacutemontreacutes dans les modegraveles drsquoanimaux lrsquoabsence de toxiciteacute et
lrsquoexcellente toleacuterance font de cette moleacutecule un bon candidat dans des eacutetudes cliniques
comme agent antiulcegravereux
2 Action sur Helicobacter pylori
Le traitement contre Helicobacter pylori est la plupart du temps constitueacute de deux
antibiotiques et drsquoun inhibiteur de la pompe agrave protons comme lrsquoomeacuteprazole par exemple Or
le problegraveme qui se pose est lrsquoapparition drsquoune reacutesistance aux antibiotiques De plus la bacteacuterie
peut intervenir dans la production des radicaux libres de lrsquooxygegravene augmentant davantage le
stress oxydant et ses dommages au niveau gastrique Une augmentation de la peroxydation
lipidique et un dommage agrave lrsquoADN au niveau des tissus gastriques sont alors observeacutes Par
conseacutequent des antioxydants naturels comme les anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
pourraient servir comme outil theacuterapeutique pour reacuteduire le stress oxydant induit par
Helicobacter pylori (15)
Chatterjee et coll (15) ont eacutetudieacute les effets de diffeacuterents extraits de baies sur Helicobacter
pylori avec ou sans clarithromycine in vitro ainsi que la sensibiliteacute de la bacteacuterie agrave la
clarithromycine Plusieurs baies sont eacutetudieacutees comme la myrtille sauvage (Vaccinium
myrtillus) lrsquoairelle la canneberge la fraise la framboise le sureau et Optiberryreg (un
meacutelange de ces six baies) Cette eacutetude a montreacute que tous les extraits aux concentrations
testeacutees inhibent la croissance de maniegravere dose-deacutependante de H pylori avec une efficaciteacute
supeacuterieure pour Optiberryreg Crsquoest la premiegravere eacutetude montrant lrsquoinhibition de H pylori par des
extraits de baies et notamment V myrtillus lequel preacutesente une meilleure activiteacute que la
fraise la framboise et la canneberge en particulier pour des basses concentrations Enfin un
effet inhibiteur suppleacutementaire est obtenu avec lrsquoajout de la clarithromycine associeacutee aux
extraits de baies agrave toutes les concentrations testeacutees
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus
1 Action antibacteacuterienne
Une eacutetude meneacutee en 2005 par Puupponen-Pimiauml et coll (51) a montreacute lrsquoactiviteacute
antibacteacuterienne de plusieurs baies nordiques incluant V myrtillus Les reacutesultats rapporteacutes
dans cette thegravese ne se reacutefegraverent qursquoagrave la myrtille et sont reacutesumeacutes dans le tableau suivant
77
Listeria
monocytogenes
E-991205
Salmonella
enterica sv
thyphimurium
E-981151
Staphylococcus
aureus E-70045
Lactobacillus
rhamnosus
E-96666
Temps
drsquoincubation 12h 24h 12h 24h 12h 24h 12h 24h
2 mgmL-1
- - + - ++ ++ - -
10 mgmL-1
- - +++ + +++++ +++++ - -
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
(Leacutegende C concentration de la baie de myrtille - pas drsquoeffets inhibiteurs + nombre de
bacteacuteries viables diffegraverent de 10-5 times 101 par rapport au controcircle ++ nombre de bacteacuteries viables
diffegraverent de 5 times 101-5 times 102 par rapport au controcircle +++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 102-5 times 103 par rapport au controcircle ++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 103-5 times 104
par rapport au controcircle +++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de plus 5 times 104 par rapport au
controcircle)
Les reacutesultats deacutemontrent lrsquoactiviteacute antimicrobienne de la myrtille lyophiliseacutee sur les bacteacuteries
Salmonella et Staphylococcus augmente de maniegravere concentration-deacutependante Par contre la
myrtille nrsquoa aucune activiteacute vis-agrave-vis de Listeria et Lactobacillus
Les composeacutes pheacutenoliques ne sont responsables que partiellement de lrsquoinhibition de la
croissance des bacteacuteries Salmonella les effets antimicrobiens eacutetant probablement deacutetenus par
drsquoautres composeacutes comme les acides organiques
Les baies et notamment V myrtillus pourraient ecirctre utiliseacutees dans les aliments fonctionnels et
dans lrsquoindustrie pharmaceutique en tant qursquoagents antimicrobiens
Ainsi la myrtille utiliseacutee traditionnellement est preacutesente dans de nombreuses eacutetudes qui ont
deacutemontreacute ses multiples actions dans des domaines meacutedicaux varieacutes et des pathologies diverses
comme lrsquoinsuffisance veineuse lrsquoatheacuteroscleacuterose le cancer le diabegravete les deacutesordres
oculaireshellip Par ailleurs son action antioxydante attire lrsquoattention des scientifiques et il serait
favorable drsquoentreprendre des eacutetudes cliniques
VIII Toxicologie
1 Effets indeacutesirables
Dans les eacutetudes cliniques sur les extraits de V myrtillus reacutepertorieacutees par Marazzoni et coll en
1996 (43) aucun effet indeacutesirable nrsquoa eacuteteacute observeacute mecircme lors drsquoeacutetudes ougrave le traitement aux
78
extraits de V myrtillus est pris sur une longue peacuteriode Cependant la plupart des eacutetudes
nrsquoincluaient qursquoun petit nombre de patients Une eacutetude de surveillance post-marketing a inclus
2295 sujets prenant 160 mg de Myrtocyanreg
deux fois par jour pendant 1-2 mois pour des
pathologies diverses (insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs fragiliteacute capillaire
modifications de la microcirculation reacutetinienne ou heacutemorroiumldes) Cette eacutetude a montreacute que
seuls 94 sujets ont reporteacute des effets indeacutesirables surtout lieacutes agrave la peau au tractus gastro-
intestinal et au systegraveme nerveux Une eacutetude non-controcircleacutee incluant des femmes enceintes avec
insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs et en crise heacutemorroiumldaire montre qursquoune
administration drsquoun extrait de myrtille (80 ou 160 mg) deux ou trois par jour pendant trois
mois nrsquoentraicircnait pas drsquoeffets indeacutesirables Mais en preacutesence de peu drsquoeacutetudes toxicologiques et
drsquoune seacutecuriteacute de la myrtille non eacutetablie lrsquoutilisation de la myrtille chez la femme enceinte et
allaitante devrait ecirctre proscrite
2 Doses leacutetales 50 (DL50)
Les donneacutees toxicologiques indiquent une DL50 pour le Myrtocyanreg drsquoenviron 2 gkg chez
les souris et les rats Chez le chien des doses uniques de 3 gkg nrsquoentraicircnent pas drsquoeffets
indeacutesirables si ce nrsquoest une coloration plus fonceacutee des urines et fegraveces Une administration
orale quotidienne drsquoextrait de V myrtillus agrave des doses de 125 agrave 500 mgkg et 80 agrave 320 mgk
respectivement agrave des rats et des chiens pendant 6 mois nrsquoentrainent ni mortaliteacute ni toxiciteacute
Les eacutetudes pharmacocineacutetiques reacutealiseacutees chez des rats ont deacutemontreacute une eacutelimination rapide
des anthocyanosides de myrtille dans les deux heures suivant une administration orale (5) Il
est eacutetablit dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) que si les parties de
mytille utiliseacutees pour les phytomeacutedicaments est une poudre de fruit frais ou sec ou de feuille
le dossier laquo abreacutegeacute raquo de lrsquoAMM doit preacutesenter une eacutetude toxicologique alleacutegeacutee celle-ci
nrsquoeacutetant pas indispensable pour certaines formes galeacuteniques agrave base de myrtille (tisane extrait
aqueux teinture extrait hydro-alcoolique) La monographie de la Commission E allemande
preacutecise que si la baie de myrtille est atoxique la feuille quant agrave elle peut induire des
intoxications chroniques en cas de doses eacuteleveacutees ou drsquousage prolongeacute Les premiers
symptocircmes chez lrsquoanimal se traduisent par une aneacutemie une cachexie un ictegravere un eacutetat
drsquoexcitation aiguumle et des perturbations du tonus pouvant agrave terme ecirctre fatale apregraves une
administration chronique de 15 gkgjour Ces symptocircmes ressembleraient agrave ceux preacutesents
dans lrsquointoxication par lrsquohydroquinone ce dipheacutenol nrsquoest pourtant pas preacutesent dans la feuille
de myrtille La Commission E par prudence ne justifie pas lrsquoutilisation de la feuille dans un
but theacuterapeutique face agrave ces risques La Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament quant agrave
79
elle ne demande un essai toxicologique que pour la poudre de feuille mais pas pour les
extraits (quelque soit le titre) (11) De ce fait drsquoautres eacutetudes toxicologiques seraient
neacutecessaires
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus
Mecircme si aucune contre-indication nrsquoest mentionneacutee dans la litteacuterature il convient toutefois de
consideacuterer un risque potentiel drsquointeraction entre les preacuteparations agrave base de myrtille et drsquoautres
produits meacutedicinaux ayant des effets similaires ou opposeacutes agrave ceux de la myrtille Des eacutetudes
preacutecliniques par exemple ont montreacute que les extraits de V myrtillus avaient un effet anti-
agreacutegant et pouvaient augmenter le temps de saignement (5) Une surveillance devrait ecirctre
apporteacutee lors drsquoassociation entre les speacutecialiteacutes agrave base de myrtille et les meacutedicaments
antiagreacutegants ou anticoagulants mecircme si aucune interaction nrsquoa eacuteteacute rapporteacutee Enfin comme
nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment lrsquoutilisation de speacutecialiteacutes agrave base de myrtille est deacuteconseilleacutee
chez la femme enceinte ou allaitante (5)
80
QUATRIEME PARTIE
UTILISATIONS DE VACCINIUM
MYRTILLUS L
81
I Utilisations alimentaires de Vaccinium myrtillus
La myrtille est avant tout un fruit tregraves appreacutecieacute par les consommateurs pour ses proprieacuteteacutes
gustatives et sa valeur nutritive
1 Utilisations culinaires
Les promeneurs friands des baies de myrtille les consomment sur place ou chez eux Il est
important de laver les baies avant leur consommation car lrsquohomme risque drsquoecirctre toucheacute par
lrsquoeacutechinococcose multiloculaire Cette maladie parasitaire est une cestodose qui seacutevit dans
lrsquoheacutemisphegravere Nord le Massif central lrsquoEst de la France et la Suisse Le renard et autres
canideacutes (chiens) se contaminent eux-mecircmes en mangeant des rongeurs sauvages parasiteacutes
(campagnoleshellip) ils deacuteposent alors des selles contenant des œufs de teacutenia sur le sol
lrsquohomme srsquoinfeste en mangeant les myrtilles proches du sol La maladie se caracteacuterise par le
deacuteveloppement de la larve de teacutenia dans le foie y formant de nombreux alveacuteoles Les
symptocircmes principaux sont douleur sourde amaigrissement et ictegravere (1)
Utiliseacutees en cuisine les myrtilles font lrsquoobjet de nombreuses recettes culinaires Elles sont
utiliseacutees pour accommoder les viandes leur apportant une saveur aciduleacutee Des charcutiers les
ajoutent mecircme agrave leurs saucissons pour les rendre plus moelleux
Les myrtilles sont souvent retrouveacutees dans de nombreuses pacirctisseries (sableacutes citronneacutes cakes
brioches tartes tartelettes puddings vacherins souffleacutes et glaceacutes coulis de fruits rouges
sorbets glaceshellip)
Les baies peuvent aussi ecirctre utiliseacutees pour la preacuteparation de confiture geleacutee et compote
Certains agriculteurs-reacutecolteurs vendent les myrtilles en confiture sur les marcheacutes locaux
Enfin on retrouve des boissons agrave base de myrtilles (jus de fruit nectar sirop liqueur vin et
vinaigre) (22)
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire
Les proprieacuteteacutes tinctoriales des anthocyanes de myrtille sont utiliseacutees dans lrsquoindustrie
alimentaire comme colorant sous la codification E 163 Gracircce agrave leur tregraves faible toxiciteacute il nrsquoy
aucune quantiteacute maximale speacutecifieacutee (quantum satis) ni dose journaliegravere acceptable Malgreacute
leurs proprieacuteteacutes tinctoriales les anthocyanes sont peu utiliseacutees dans lrsquoindustrie alimentaire agrave
cause de leur instabiliteacute (perte ou changement de couleur) en preacutesence de certains facteurs
physico-chimiques de lrsquoenvironnement comme le pH la tempeacuterature et la lumiegravere De plus
82
drsquoautres problegravemes srsquoajoutent agrave leur utilisation comme leur reacuteaction avec le dioxyde de soufre
(substance utiliseacutee pour la conservation drsquoaliments) leur faible solubiliteacute dans lrsquoeau et leur
preacutecipitation formant des complexes avec les proteacuteines Crsquoest pourquoi des proceacutedeacutes ont eacuteteacute
rechercheacutes pour augmenter leur stabiliteacute comme lrsquoutilisation drsquohydrocolloiumldes comme
lrsquoalginate de sodium et un surfactant ionique comme le laurylsulfate de sodium (3)
II Utilisations pharmaceutiques
Pour rappel la liste des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition
comporte deux parties (2)
La LISTE A laquo Plantes meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement raquo et la LISTE B laquo Plantes
meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement en lrsquoeacutetat ou sous forme de preacuteparation dont les effets
indeacutesirables potentiels sont supeacuterieurs au beacuteneacutefice theacuterapeutique attendu raquo
La myrtille appartient agrave la liste A des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition mais nrsquoy fait lrsquoobjet drsquoaucune monographie Agrave la Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition le fruit frais et sec de myrtille font lrsquoobjet drsquoune monographie (Annexe II et III
respectivement) En France certaines indications theacuterapeutiques selon la partie de plante
utiliseacutee sont revendiqueacutees dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) Ainsi
on retrouve les indications suivantes
- pour le fruit (frais ou sec) et la feuille par voie orale ou en usage locale
traditionnellement utiliseacute dans les manifestations subjectives de lrsquoinsuffisance veineuse telles
que jambes lourdes et dans la symptomatologie heacutemorroiumldaire
Il y a drsquoautres indications theacuterapeutiques possibles comme
- pour le fruit (frais ou sec) par voie orale traditionnellement utiliseacute comme
traitement adjuvant de la composante douloureuse des troubles fonctionnels digestifs
- pour le fruit frais (voie orale ou usage local) traitement symptomatique des
troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire tels que ecchymoses peacuteteacutechies
- pour la feuille et le fruit sec (voie orale) traitement symptomatique des diarrheacutees
leacutegegraveres
La Commission E allemande preacutecise dans la monographie (1987) que le fruit de myrtille est
eacutegalement utiliseacute pour le traitement des diarrheacutees aigueumls et pour lrsquoinflammation locale
modeacutereacutee des muqueuses de la caviteacute buccale Le fruit seacutecheacute est utiliseacute agrave la dose de 20 agrave 60 g
par jour en deacutecoction par voie orale pour le traitement de la diarrheacutee chez lrsquoadulte
83
Ainsi les extraits riches en anthocyanosides des fruits de la myrtille peuvent entrer dans la
composition de meacutedicaments utiliseacutes pour traiter les manifestations fonctionnelles de
lrsquoinsuffisance veinolymphatique la symptomatologie des troubles fonctionnels de la fragiliteacute
capillaire et les troubles de la vision meacutesopique et scotopique (11)
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille
11 Meacutedicaments allopathiques (82)
Laboratoire LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRARELreg 100 (comprimeacute enrobeacute bleu clair conditionnement de 20 comprimeacutes)
Meacutedicament vasculoprotecteur drsquoautorisation de mise sur le marcheacute (AMM) ndeg
3400930311714 (1987 reacuteviseacute le 24082005) Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Crsquoest une speacutecialiteacute pharmaceutique associant 100 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de V
myrtillus et 5 mg de β-carotegravene avec comme indications
laquo - Traitement dappoint des manifestations fonctionnelles de linsuffisance veinolymphatique
(jambes lourdes douleurs impatiences du primodecubitus)
- Traitement symptomatique dappoint des troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire
- Traitement dappoint des baisses dacuiteacute et troubles du champ visuel preacutesumeacutes dorigine
vasculaire raquo
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
DIFRARELreg E (comprimeacute enrobeacute blanc)
Meacutedicament ophtalmique agrave viseacute vasculoprotectrice drsquoAMM ndeg3400930311592 (196597
reacuteviseacute le 28022006) pour le conditionnement de 26 comprimeacutes et ndeg3400937701068 (2006)
pour le conditionnement de 60 comprimeacutes Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Cette speacutecialiteacute pharmaceutique associe 50 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de myrtille et
50 mg drsquoα-tocopheacuterol avec comme indication les troubles de la vision meacutesopique scotopique
(heacutemeacuteralopie) et la myopie
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
84
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques
LABORATOIRE BOIRON
Ce laboratoire homeacuteopathique commercialise la teinture megravere de V myrtillus et des dilutions
homeacuteopathiques
Agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise la myrtille a une monographie speacutecifique intituleacutee laquo Vaccinium
myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Annexe IV)
LABORATOIRE LEHNING
DIACUREreg (conditionnement de 60 geacutelules) drsquoAMM ndeg 3232544
Meacutedicament homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale Il est
constitueacute de lrsquoassociation suivante
- Taraxacum pulveacuteriseacute (H) (Pissenlit) 40 mg
- Berberis vulgaris (H) D3 (Epine-vinette) 40 mg
- Juglans regia pulveacuteriseacute (H) (Noyer) 120 mg
- Achillea millefolium (H) D2 (Achilleacutee millefeuille) 40 mg
- Vaccinium myrtillus folium pulveacuteriseacute (H) (feuille de myrtille) 80 mg
- Erythrea centaurium pulveacuteriseacute (H) (Petite centaureacutee) 40 mg
- Natrum phosphoricum (H) D3 40 mg
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute pour les polysurcharges
meacutetaboliques (facilite lrsquoeacutelimination des deacutechets meacutetaboliques) et notamment comme
traitement divers du diabegravete la feuille de myrtille y est utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes
hypoglyceacutemiantes
La posologie est de 1 agrave 2 geacutelules 3 fois par jour en dehors des repas en cure de 1 agrave 2 mois
(82)
DIABENEreg (solution buvable flacon de 30 mL) drsquoAMM ndeg 3030349 est un meacutedicament
homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale
Il est constitueacute de lrsquoassociation suivante Alchemilla vulgaris D3 Kreosotum D4
Strychninum nitricum D4 Arsenicum album D4 Adrenalinum D6 Belladonna D4 Syzygium
jambolanum D2 Vaccinium myrtillus D2 Taraxacum D3 Natrum phosphoricum D3
Helonias dioica D2
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute dans les polysurcharges
meacutetaboliques comme traitement divers de lrsquoobeacutesiteacute
85
La posologie est de 30 gouttes 3 fois par jour de preacutefeacuterence en dehors des repas (82)
13 Compleacutements alimentaires
LABORATOIRE MERCK
BION 3 SENIORreg (conditionnement de 30 ou 60 comprimeacutes)
Compleacutement alimentaire constitueacute de 3 probiotiques 12 vitamines 8 oligo-eacuteleacutements et 3
extraits veacutegeacutetaux (100 microg de luteacuteine extraits de 20 mg de ginseng et 1 mg de myrtille) Il est
preacuteconiseacute en cas de sphegravere ORL fragiliseacutee de deacutefenses naturelles affaiblies et pour mieux
faire face aux rythmes de vie actuels alimentation deacuteseacutequilibreacutee stress surmenage La
posologie est de 1 comprimeacute par jour en cure de 30 ou 60 jours (82)
RICHELETreg ANTI-AGE VISION (conditionnement de 30 comprimeacutes)
Crsquoest un compleacutement alimentaire composeacute de luteacuteine 105 mg drsquoextrait de myrtille des
vitamines B1 B2 et B6 A C E et du seacuteleacutenium La myrtille est utiliseacutee dans ce produit pour
ameacuteliorer la microcirculation sanguine de lrsquoœil et assurer le bon fonctionnement de ses
constituants La posologie est de 1 comprimeacute par jour pendant 3 mois agrave renouveler
peacuteriodiquement (82)
LABORATOIRE LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRAVISIONreg ANTI-VIEILLISSEMENT
Compleacutement alimentaire agrave viseacutee oculaire comprenant des vitamines (vitamine C et E) des
oligo-eacuteleacutements (Zn et Se) des pigments maculaires (luteacuteine extrait de maiumls dont
zeacuteaxanthine) du DHA (ω3) des huiles de poisson et un extrait sec de myrtille doseacute agrave 100 mg
(pour 2 geacutelules) Sur la notice du meacutedicament on trouve les indictions suivantes laquo il est
conseilleacute pour corriger les effets neacutefastes au niveau oculaire des deacuteficits antioxydants en
acides gras essentiels et en pigments maculaires raquo La posologie est de 1 geacutelule 2 fois par jour
(notice du compleacutement alimentaire)
LABORATOIRE ARKOPHARMA
Ce laboratoire pharmaceutique fabrique des geacutelules contenant de la poudre totale microniseacutee
Aujourdrsquohui seule la baie de myrtille est commercialiseacutee par le laboratoire Arkopharma
86
Les Arkogeacutelules de myrtille (baie) sont indiqueacutees dans la diarrheacutee la colite et lrsquoameacutelioration
de la vision nocturne (Brochure Arkopharma)
La myrtille est preacutesente dans beaucoup drsquoautres compleacutements alimentaires que nous ne
citerons pas ici
89
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LISTE DES ANNEXES
ANNEXE I Table de composition nutritionnelle Ciqual 2008 de lrsquoAffsa
ANNEXE II Monographie du fruit frais de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE III Monographie du fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE IV laquo Vaccinium myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Pharmacopeacutee
franccedilaise Xegraveme eacutedition)
99
ANNEXE I
TABLE DE COMPOSITION
NUTRITIONNELLE CIQUAL 2008 DE
LrsquoAFSSA
100
Myrtille fraicircche (teneurs pour 100 grammes drsquoaliment comestible)
Leacutegende du code confiance
Echelle de fiabiliteacute de A agrave D A correspondant aux donneacutees les plus fiables
Nom des constituants Uniteacute Teneur
moyenne Min Max Nb eacutechantillons
Source des
donneacutees
Code
confiance
Energie kJ 213 - - - C
Energie kcal 50 - - - C
Energie eacutetiquetage kJ 213 - - - C
Energie eacutetiquetage kcal 50 - - - C
Eau g 838 834 8421 2 760
743 C
Proteacuteines g 074 - - - C
Proteacuteines brutes (N x 625) g 074 - - 1 743 C
Glucides g 10 - - - C
Sucres g 996 - - 1 743 C
Amidon g 003 - - 1 743 C
Polyols totaux g 0 - - - D
Fibres alimentaires g 24 - - 1 743 C
Lipides g 033 - - 1 743 C
AG satureacutes g 0028 - - 1 743 C
AG monoinsatureacutes g 0047 - - 1 743 C
AG polyinsatureacutes g 0146 - - 1 743 C
Cholesteacuterol mg 0 - - 1 690 C
Alcool (eacutethanol) g 0 - - 1 690 C
Acides organiques g 137 - - - 723 C
Sodium mg 1 - - 1 743 C
Magneacutesium mg 6 - - 1 743 C
Phosphore mg 12 - - 1 743 C
Potassium mg 77 - - 1 743 C
Calcium mg 6 - - 1 743 C
Manganegravese mg 0336 - - 1 743 C
Fer total mg 028 - - 1 743 C
Cuivre mg 0057 - - 1 743 C
Zinc mg 016 - - 1 743 C
Seacuteleacutenium microg 01 - - 1 743 C
Iode microg 05 - - 1 573 D
Reacutetinol microg 0 - - 1 743 C
Becircta-carotegravene microg 32 - - 1 743 C
Vitamine D microg 0 - - 1 445 C
Activiteacute vitaminique E (en
eacutequivalents alpha-tocopheacuterol) mg 1 - - 1 497 C
Vitamine C mg 97 - - 1 743 C
Vitamine B1 ou Thiamine mg 0037 - - 1 743 C
Vitamine B2 ou Riboflavine mg 0041 - - 1 743 C
Vitamine B3 ou PP ou
Niacine mg 0418 - - 1 743 C
Vitamine B5 ou Acide
pantotheacutenique mg 0124 - - 1 743 C
Vitamine B6 ou Pyridoxine mg 0052 - - 1 743 C
Vitamine B9 ou Folates
totaux microg 6 - - 1 743 C
Vitamine B12 ou
Cobalamines microg 0 - - 1 743 C
101
ANNEXE II
MONOGRAPHIE DU FRUIT FRAIS
DE VACCINIUM MYRTILLUS L
(Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
102
Myrtille (fruit frais de)
Myrtilli fructus recens
DEacuteFINITION
Fruit mucircr frais ou congeleacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 030 pour cent drsquoanthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-
O-glucoside (chrysantheacutemine C21H21ClO11 Mr 4848) (drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur sucreacutee un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit frais de myrtille est une baie bleu-noir globuleuse drsquoenviron 5 mm de diamegravetre Il
comporte agrave la base une cicatrice ou rarement un fragment de peacutedoncule Le sommet aplati
est surmonteacute par les restes du style persistant et du calice qui forme un repli circulaire Dans
le meacutesocarpe violaceacute et juteux 4 agrave 5 loges renferment de nombreuses petites graines ovoiumldes
brunes
B Le fruit frais de myrtille broyeacute est rouge violaceacute Examinez-le au microscope en utilisant
de la solution drsquohydrate de chloral R Il preacutesente des cellules scleacutereuses rose violaceacute agrave paroi
eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en amas provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des
fragments drsquoeacutepicarpe brun-rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie
des fragments jaune-brun du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave
paroi preacutesentant des eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles de cristaux
drsquooxalate de calcium
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 5 g de drogue reacutecemment broyeacutee ajoutez 20 ml de meacutethanol R
Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
103
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge violaceacute
Chrysantheacutemine une bande rouge violaceacute Une bande principale rouge violaceacute
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge violaceacute
mdash plusieurs bandes bleu violaceacute
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Cendres totales (2416) maximum 06 pour cent
Perte agrave la dessiccation (2232) 800 pour cent agrave 900 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave 105 degC
sur 5000 g de drogue reacutecemment broyeacutee
DOSAGE
Broyez extemporaneacutement 50 g de drogue A environ 500 g de drogue broyeacutee exactement
peseacutes ajoutez 95 ml de meacutethanol R Agitez meacutecaniquement pendant 30 min Filtrez dans une
fiole jaugeacutee de 1000 ml lavez le filtre et compleacutetez au volume avec du meacutethanol R Diluez
cette solution au 150 dans une solution drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le
meacutethanol R
Mesurez lrsquoabsorbance (2225) de la solution obtenue agrave 528 nm en prenant une solution
drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le meacutethanol R comme liquide de
compensation
Calculez la teneur pour cent en anthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-O-
glucoside agrave lrsquoaide de lrsquoexpression suivante
718 = absorbance speacutecifique du chlorure de cyanidine 3-O-glucoside agrave 528 nm
A = absorbance agrave 528 nm
M = Masse de la prise drsquoessai en grammes
CONSERVATION
Lorsque le fruit frais de myrtille est congeleacute conservez-le agrave une tempeacuterature infeacuterieure ou
eacutegale agrave minus 18degC
104
ANNEXE III
MONOGRAPHIE DU FRUIT MUcircR
SECHE DE VACCINIUM MYRTILLUS
L
(Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
105
Fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 10 pour cent de tanins exprimeacutes en pyrogallol (C6H6O3 Mr 1261)
(drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur douce un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit sec de myrtille est une baie bleu-noir ratatineacutee subglobuleuse de 5 mm environ de
diamegravetre avec une cicatrice agrave la base Le sommet est surmonteacute par les restes du style et le
calice persistant qui forme un repli circulaire Le meacutesocarpe violet intense et charnu renferme
de nombreuses petites graines ovoiumldes brunes
B Reacuteduisez le fruit sec de myrtille en poudre (355) (2912) La poudre est brun-violet
Examinez au microscope en utilisant de la solution drsquohydrate de chloral R La poudre
preacutesente des cellules scleacutereuses rose-violet agrave paroi eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en
amas et provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des fragments drsquoeacutepicarpe coloreacutes en brun-
rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie des fragments jaune-brun
du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave paroi preacutesentant des
eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles et des prismes de cristaux drsquooxalate de
calcium de diffeacuterente taille
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 2 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912) ajoutez 20 ml de
meacutethanol R Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
106
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge-violet de faible intensiteacute
Chrysantheacutemine une bande rouge- violet Une bande principale rouge-violet
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge-violet
mdash plusieurs bandes bleu-violet
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Perte agrave la dessiccation (2232) au maximum 120 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave
105 degC pendant 2 h sur 1000 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute
Cendres totales (2416) au maximum 50 pour cent
DOSAGE
Effectuez la deacutetermination des tanins dans les drogues veacutegeacutetales (2814) Utilisez 1500 g de
fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912)
107
ANNEXE IV
laquo VACCINIUM MYRTILLUS
POUR
PREPARATIONS
HOMEOPATHIQUES raquo
(Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition)
108
109
110
111
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
REacuteSUMEacute
Vaccinium myrtillus Linneacute ou myrtille sauvage est un sous-arbrisseau de la famille des
Ericaceacutees On la retrouve dans le nord et le centre de lrsquoEurope en Asie et en Ameacuterique
Boreacuteale En France la myrtille est commune dans la plupart des montagnes entre 400 et 2500
megravetres drsquoaltitude Elle est diffeacuterente de la myrtille cultiveacutee ou Vaccinium corymbosum L Son
fruit est une baie bleu-noir globuleuse agrave saveur sucreacutee et aciduleacutee V myrtillus L renferme de
nombreux composeacutes pheacutenoliques dont les anthocyanosides ceux-ci sont principalement
retrouveacutes dans la peau et la pulpe du fruit de la myrtille ils sont agrave lrsquoorigine de la plupart de
ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques mecircme si drsquoautres composeacutes participeraient agrave lrsquoaction beacuteneacutefique
de la myrtille
V myrtillus L est une plante meacutedicinale inscrite sur la liste A de la Pharmacopeacutee franccedilaise
Xegraveme
eacutedition Le fruit (frais et sec) de la myrtille fait lrsquoobjet drsquoune monographie dans la
Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition Les proprieacuteteacutes theacuterapeutiques des feuilles et des fruits
de V myrtillus L ont eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine populaire les fleurs pour leurs
proprieacuteteacutes toniques astringentes antiseptiques dans le traitement de la diarrheacutee de la
dysenterie quant agrave la feuille elle eacutetait surtout utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
Certaines indications sont valideacutees et figurent dans la Note explicative de lrsquoAgence du
meacutedicament de 1998 et la Commission E allemande Si la baie est atoxique la feuille
preacutesenterait un risque drsquointoxication lieacute agrave des fortes doses ou agrave une utilisation chronique
La myrtille a fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vitro in vivo et quelques eacutetudes cliniques
ayant montreacute une faible biodisponibiliteacute (surtout chez lrsquohomme) mais des effets beacuteneacutefiques
dans le domaine vasculaire dans certaines pathologies ougrave le stress oxydant est impliqueacute
(cancer maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives DMLAhellip) cette activiteacute reste agrave ecirctre prouveacutee chez
lrsquohomme Quant aux eacutetudes cliniques concernant lrsquoaction de la myrtille sur la vision (surtout
nocturne) elles restent controverseacutees mais des eacutetudes in vitro reacutecentes ont montreacute ses effets
beacuteneacutefiques sur la reacutegeacuteneacuteration des cellules corneacuteennes Enfin outre son emploi en cuisine la
myrtille est utiliseacutee dans lrsquoindustrie pour ses anthocyanes aux proprieacuteteacutes tinctoriales et dans le
domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments et des compleacutements alimentaires
agrave base de myrtille pour diverses indications (traitement de la fragiliteacute capillaire de
lrsquoinsuffisance veineuse et dans les troubles de la vision meacutesopique et scotopique)
MOTS-CLEFS Vaccinium myrtillus - Myrtille - anthocyanosides - phytotheacuterapie - stress
oxydant
THESE SOUTENUE LE 19 MAI 2010
Par Olivia Maillefert
86 rue des Ecoles
73230 St Alban Leysse
COMPOSITION DU JURY
Preacutesident du jury
Mr KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences en Botanique
Membres du jury
Mr CORJON Gilles Docteur en Pharmacie
Mr CHOVELON Michel Docteur en Pharmacie
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- table des matiegraverespdf
- thegravese myrtille olivia paginationpdf
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-
TABLE DES MATIERES
Liste des tableaux p1
Liste des figures p2
Liste des abreacuteviations p3
Glossaire p4
Introduction et historique p6
Premiegravere partie Botanique de Vaccinium myrtillus L p7
I Classification botanique de la myrtille p8
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees p8
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium p10
3 Vaccinium myrtillus L ou myrtille sauvage p10
31 Description botanique p10
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille p13
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium p13
41 Vaccinium uliginosum L p13
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo p14
43 Vaccinium macrocarpon L p16
II Culture reacutecolte et production des myrtilles p17
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques p17
11 pH du sol p17
12 Conditions climatiques p17
13 Besoins en eau p17
2 Reacutecolte des myrtilles p18
21 Date et mode de reacutecolte p18
3 Production des myrtilles p19
31 Production mondiale p19
32 Production europeacuteenne p19
33 Production franccedilaise p19
4 Post-reacutecolte p20
41 Conservation p20
42 Conditionnement p20
Deuxiegraveme partie Composition chimique de Vaccinium myrtillus L p21
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus p22
1 Identification macroscopique et microscopique p22
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus p22
21 Composition chimique des feuilles p22
22 Composition chimique des fruits p23
II Anthocyanosides p24
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes p24
2 Structure des anthocyanosides p25
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides p26
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides p27
41 Extraction p27
42 Seacuteparation et identification p27
43 Dosage des anthocyanosides p27
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p28
51 Composition en anthocyanosides p28
52 Donneacutees quantitatives p29
53 Donneacutees qualitatives p29
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus p29
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p30
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus p34
1 Acides pheacutenoliques p34
2 Tanins p34
3 Flavonols p35
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans V myrtillus p35
Troisiegraveme partie Inteacuterecircts theacuterapeutiques de Vaccinium myrtillus L p36
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire p37
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur p37
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire p37
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires p39
2 Activiteacute vasoprotectrice p40
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique p40
22 Action sur la reacutesistance capillaire p41
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme p41
24 Action antiatheacuterogegravenique p42
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice p42
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA) p43
5 Action sur lrsquoangiogenegravese p44
II Action de Vaccinium myrtillus dans le stress oxydant p45
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes p45
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p46
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides p46
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma p47
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides p47
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces reacuteactives
azoteacutees p48
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique p49
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines p50
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie p51
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie p51
32 Etudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques p51
4 Effet de Vaccinium myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives
et le vieillissement p53
41 Effets sur un stress eacutemotionnel p53
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication
du stress oxydant p54
5 Effet de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB p56
51 Effets drsquoune exposition solaire p56
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires p56
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire p57
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes p57
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire p58
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge p59
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus p61
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant
un stress oxydant p61
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus p62
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer p62
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus p63
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine p65
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases p66
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes p66
42 Etude de Teller et coll (2009) p66
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision p67
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale p68
2 Eacutetude chez des sujets myopes p69
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004) p70
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique p72
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes p72
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete p73
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine p73
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques p74
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac p74
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique p74
2 Action sur Helicobacter pylori p76
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus p76
1 Action antibacteacuterienne p76
VIII Toxicologie p77
1 Effets indeacutesirables p77
2 Doses leacutetales 50 (DL50) p78
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus p79
Quatriegraveme partie Utilisations de Vaccinium myrtillus L p80
I Utilisations alimentaires p81
1 Utilisations culinaires p81
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire p81
II Utilisations pharmaceutiques p82
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille p83
11 Meacutedicaments allopathiques p83
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques p84
13 Compleacutements alimentaires p85
Conclusion p87
Bibliographie p89
Liste des Annexes p98
Annexe I p99
Annexe II p101
Annexe III p104
Annexe IV p107
1
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
2
LISTE DES FIGURES
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme
3
LISTE DES ABREVIATIONS
AA allyl alcool
ADP adeacutenosine diphosphate
AMPc adeacutenosine monophosphate cyclique
DMLA deacutegeacuteneacuterescence maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge
ECA enzyme de conversion de lrsquoangiotensine
EDRF endothelium-derived relaxing factorfacteur relaxant deacuteriveacute lrsquoendotheacutelium
ERO espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
GAGs glycosaminoglycanes
GSH glutathion
H2O2 peroxyde drsquohydrogegravene
IC50 Inhibitory Concentration 50concentration inhibitrice agrave 50
IEC inhibiteur de lrsquoenzyme de conversion
IGF insulin-like growth factor
LDLs low-density lipoproteins lipoproteacuteines de basse densiteacute
MDA malondialdeacutehyde
NO monoxyde drsquoazote radicalaire
O2- anion superoxyde
OH radical hydroxyle
PGI2-like prostacyclin-like
PLCγ phospholipase Cγ
RTK reacutecepteur agrave activiteacute tyrosine kinase
tBH tert-butylhydroperoxyde
TBRAs thiobarbituric acid reactive substancessubstances reacuteagissant avec lrsquoacide
thiobarbiturique
UV ultraviolet
VEGF vascular endothelial growth factorfacteur de croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire
XOD xanthine oxydase
4
GLOSSAIRE
Termes botaniques
Actinomorphe se dit dune fleur preacutesentant une symeacutetrie axiale
Adneacute soudeacute ou attacheacute agrave sapplique agrave des organes diffeacuterents comme par exemple des
eacutetamines adneacutees au peacuterianthe
Aneacutemogame qualifie le mode de feacutecondation des plantes dans lequel le pollen est porteacute par
le vent
Anthegravere partie de leacutetamine habituellement porteacutee par le filet contenant le pollen celui-ci
est libeacutereacute lorsque souvre cette terminaison renfleacutee sous forme de petit sac oblong
geacuteneacuteralement jaune et double
Campanuleacute se dit dune fleur en forme de cloche
Capiteacute termineacute en tecircte arrondie
Carpelles organe femelle Lensemble des carpelles forme le pistil (ou gyneacuteceacutee)
Dialypeacutetale dont les peacutetales sont indeacutependants les uns des autres
Hermaphrodite plante portant des organes floraux macircle et femelle
Infundibuliforme se dit dune fleur dont la corolle est en forme dentonnoir
Ligneux se dit des veacutegeacutetaux formant du bois arbres et arbustes mais aussi un certain
nombre de plantes grimpantes
Lobeacute se dit dun organe comme feuille ou peacutetale eacutechancreacute mais sans division complegravete
Loculicide qui souvre en se fendant longitudinalement le long de la nervure dorsale de
chaque loge
Marcotte organe veacutegeacutetal aeacuterien qui srsquoenterre et srsquoenracine avant de se seacuteparer (ou drsquoecirctre
seacutepareacute) de la plante megravere
Peacuterianthe ensemble des piegraveces florales non sexueacutees dune fleur
Septicide qualifie un fruit qui souvre en se fendant longitudinalement au niveau des
cloisons (septums) et seacuteparant ainsi les carpelles
Stomate structure foliaire organiseacutee ayant des meacutecanismes drsquoouverture reacuteversibles
permettant les eacutechanges gazeux
5
Teacutenuinucelleacute se dit dun ovule contenant un nucelle peu deacuteveloppeacute (dans les groupes
eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Uniteacutegumenteacute se dit dun ovule ayant une seule enveloppe autour du nucelle (dans les
groupes eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Urceacuteoleacutee corolle en forme de tube dilateacute agrave la base et reacutetreacutecit au sommet
Zygomorphe se dit dune plante preacutesentant une symeacutetrie par rapport agrave un plan
Autres
Astheacutenopie fatigue de loeil surtout lors daccommodation soutenue et qui provoque des
signes dirritation une sensation de brucirclure et des maux de tecircte
Meacutesopique Caracteacuteristique visuelle du systegraveme oculaire utilisant agrave la fois bacirctonnets et cocircnes
pour interpreacuteter une scegravene visuelle dont lintensiteacute lumineuse est comprise entre celle du jour
et de la nuit (creacutepusculaire)
Reacutetinite pigmentaire maladie heacutereacuteditaire deacutegeacuteneacuterative des cellules visuelles reacuteceptrices de
la lumiegravere (cocircnes et bacirctonnets)
Sensibiliteacute au contraste elle est baseacutee sur la capaciteacute du systegraveme visuel agrave deacutetecter des
diffeacuterences de luminances donc de deacuteterminer lexistence de bords entre surfaces
homogegravenes
Scotopique vision nocturne se basant principalement sur linformation capteacutee par les
bacirctonnets
6
Introduction et historique
Dans une socieacuteteacute ougrave la phytotheacuterapie connait un engouement croissant voulant se rapprocher
au plus pregraves du laquo naturel raquo la connaissance des plantes aux vertus theacuterapeutiques est de plus
en plus rechercheacutee La myrtille sauvage ou Vaccinium myrtillus L appartient agrave la famille des
Ericaceacutees elle est lrsquoune des plantes centrales faisant partie de la liste des plantes meacutedicinales
inscrites agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition (liste A) et dont le fuit (sec et frais) fait
lrsquoobjet drsquoune monographie agrave la Pharmacopeacutee europeacuteenne (6egraveme
eacutedition) Lrsquoeacutetymologie du
genre Vaccinium est incertaine il deacuteriverait du nom latin vacca pour vache car la plante eacutetait
volontiers brouteacutee par les bovins mais pour drsquoautres du nom bacca pour baie (43) Le terme
myrtillus provient de la ressemblance avec les feuilles et les fruits du myrte (Myrtus
communis L) V myrtillus empreinte divers noms vernaculaires (airelle airelle noire airelle
anguleuse bluet brimbelle raisin des bois raisin de bruyegraverehellip) Les deacutesignations anglaises
pour la baie de myrtille sont bilberry fruit blueberry whortleberry pour les feuilles bilberry
leaf huckleberry leaf (67)
Ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques sont utiliseacutees dans la meacutedecine populaire depuis fort
longtemps Dioscoride est le premier agrave vanter les bienfaits de la myrtille dans le traitement de
la dysenterie Puis au XVIegraveme
siegravecle une religieuse et mystique allemande Sainte Hildegarde
de Bingen preacuteconisait la plante pour provoquer faciliter ou augmenter les regravegles (20)
Depuis de nombreuses proprieacuteteacutes sont attribueacutees au myrtillier en fonction de la partie de
plante utiliseacutee On utilisait les baies pour ses proprieacuteteacutes astringentes toniques antiseptiques
dans le traitement de la diarrheacutee des heacutemorroiumldes des inflammations gastro-intestinaleshellip
quant aux feuilles elles eacutetaient surtout utiliseacutees pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes (43)
Lrsquoameacutelioration de la vision nocturne par la myrtille a eacuteteacute rapporteacutee par les pilotes de la British
Royal Air Force qui en consommaient quotidiennement Certains usages precircteacutes agrave la myrtille
ont eacuteteacute valideacutes et figure dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la
monographie de la Commission E allemande (ces usages seront citeacutes dans cette thegravese) La
myrtille fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vivo in vitro et de quelques eacutetudes cliniques
(dans des domaines meacutedicaux varieacutes) dont certaines posent des interrogations Ses utilisations
sont diverses on lrsquoemploie en cuisine (pacirctisseries confitures vin vinaigrehellip) dans
lrsquoindustrie et dans le domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments agrave base de
myrtille et des compliments alimentaires
7
Premiegravere partie
Botanique de Vaccinium myrtillus L
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L (70)
8
I Classification botanique de la myrtille
Le taxon des Spermatophytes ou plantes agrave graines est constitueacute de deux clades les
Gymnospermes ou plantes agrave ovules nus et les Angiospermes ou plantes agrave ovaires
La myrtille (ou myrtillier) appartient agrave lrsquoembranchement des Angiospermes se distinguant des
Gymnospermes par plusieurs caractegraveres dont trois fondamentaux
- les organes reproducteurs se groupent en fleurs bisexueacutees
- les carpelles entourent complegravetement les ovules et se transforment apregraves
feacutecondation en fruit
- le gameacutetophyte femelle situeacute dans lrsquoovule nommeacute sac embryonnaire est le siegravege
drsquoune double feacutecondation lrsquoune donnant lrsquoembryon lrsquoautre conduisant agrave lrsquoalbumen (tissu de
reacuteserve des graines agrave 3n chromosomes)
Selon la classification systeacutematique la myrtille fait partie de la classe des Asteacuterideacutees
(Eudicots agrave peacutetales et carpelles soudeacutes) constitueacutee drsquoenviron 67000 espegraveces on distingue les
Asteacuterideacutees basales et les Euasteacuterideacutees I et II Les Asteacuterideacutees basales ont deux ordres fregraveres
les Ericales et les Cornales (25)
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees (22) (25) (30)
Lrsquoordre des Ericales dont le nom vient drsquoErica pour bruyegravere comprend 7000 espegraveces
reacuteparties en 24 familles dont celle des Ericaceacutees auxquelles appartient la myrtille Cette
famille est reacutepartie dans le monde entier mais avec une preacutefeacuterence geacuteographique pour les
reacutegions tempeacutereacutees ou froides voire mecircme les hautes montagnes De faccedilon geacuteneacuterale elle
regroupe des arbres des arbustes et des lianes aux caracteacuteristiques suivantes (Figure 2)
- des feuilles alternes simples entiegraveres agrave denteacutees-serreacutees dont les bords du limbe
peuvent se replier sur eux-mecircmes afin de proteacuteger les stomates porteacutes par la face infeacuterieure
de la transpiration Chez certaines Ericaceacutees les feuilles sont plates et coriaces ce qui leur
procure une reacutesistance agrave la seacutecheresse
- des fleurs le plus souvent hermaphrodites geacuteneacuteralement plus ou moins pendantes
actinomorphes agrave leacutegegraverement zygomorphes
- quatre ou cinq seacutepales libres agrave leacutegegraverement soudeacutes
les mots suivis de ce symbole ont leur deacutefinition dans le glossaire
9
- quatre ou cinq peacutetales soudeacutees constituant une corolle cylindrique ou urceacuteoleacutee
campanuleacutee ou infundibuliforme parfois dialypeacutetale Chez certains genres aneacutemogames
le peacuterianthe nrsquoest constitueacute que de deux ou trois seacutepales et peacutetales ou trois agrave quatre peacutetales
- huit agrave dix eacutetamines reacuteduites agrave deux ou trois chez les espegraveces aneacutemogames
- le filet des eacutetamines est libre ou adneacute agrave la corolle voire mecircme soudeacute Quelques fois
il peut y avoir une paire drsquoappendices en eacuteperon dresseacute srsquoinseacuterant agrave proximiteacute ou agrave lrsquoendroit
mecircme ougrave se trouve lrsquoanthegravere
- lrsquoanthegravere est constitueacute drsquoune ou de deux loges srsquoouvrant par deux pores libeacuterant les
grains de pollen habituellement disposeacutes en teacutetrades
- les carpelles sont au nombre de deux agrave dix agrave ovaire supegravere ou infegravere comme chez la
myrtille (crsquoest-agrave-dire que lrsquoovaire peut se souder agrave la coupe florale)
- un style avec souvent un creux agrave lrsquointeacuterieur
- un stigmate capiteacute ou faiblement lobeacute
- un ou plusieurs ovules par loge uniteacutegumenteacutes ou teacutenuinucelleacutes
- enfin le fruit peut ecirctre une capsule septicide ou loculicide une drupe agrave plusieurs
noyaux ou une baie comme chez la myrtille
4 ou 5 seacutepales agrave soudure ou adnation variable
4 ou 5 peacutetales soudeacutes
Soudure ou adnation variable
Ovaire infegravere
Ovaire supegravere Type de fruit
Symeacutetrie radiaire () 2 agrave 10 carpelles soudeacutees
ou 4 agrave 10 eacutetamines
Symeacutetrie bilateacuterale (X) Etamines adneacutees aux peacutetales
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees (30)
10
La famille des Ericaceacutees regroupe plusieurs genres et espegraveces dont le nombre varie selon la
litteacuterature de 70 agrave 130 genres et de 2000 agrave 3400 espegraveces Cette famille comprend
- des plantes alimentaires comme Vaccinium myrtillus L (myrtille) Vaccinium
uliginosum L (airelle des marais) Gaultheria procumbens L (theacute du Canada qui fournit le
salicylate de meacutethyle)hellip
- des plantes meacutedicinales comme V myrtillus Ledum palustre L (leacutedon des marais)
Calluna vulgaris L (bruyegravere callune)hellip
- des plantes utiliseacutees pour lrsquoobtention du bois comme Erica arborea L (fabrication
des pipes)
- de nombreuses espegraveces ornementales dans les genres Arbutus (arbousier) Erica
(bruyegravere) Rhododendron (azaleacutee)hellip
La famille des Ericaceacutees est constitueacutee de quatre sous-familles dont les Vaccinioiumldeacutees qui
englobent le genre Vaccinium
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium (22)
Le genre Vaccinium se caracteacuterise par plusieurs particulariteacutes botaniques
- des tiges drsquoaspect contourneacute conseacutequence drsquoune croissance tregraves lente
- des feuilles coriaces plates reacutesistantes agrave la seacutecheresse
- des anthegraveres srsquoouvrant par deux pores souvent munis de deux appendices dresseacutes en
forme de cornes
- un ovaire composeacute de cinq carpelles fermeacutes
- un fruit repreacutesenteacute par une capsule
Ce genre est lui-mecircme constitueacute drsquoenviron 150 espegraveces auquel fait partie la myrtille
Les myrtilles drsquoEurope regroupent deux espegraveces de myrtilles
- V uliginosum L
- V myrtillus L
3 Vaccinum myrtillus L ou myrtille sauvage
31 Description botanique (22) (67)
Le myrtillier (Vaccinum myrtillus L) est un sous-arbrisseau vivace atteignant 20 agrave 60 cm de
hauteur agrave tige verte dresseacutee cylindrique rigide et agrave rameaux vert pacircle anguleux aileacutes dans
leur longueur et plus ou moins grecircles Cette tige est recouverte drsquoune eacutecorce ligneuse sans
poil ni stipule ni latex ni vrille
11
Les racines souterraines sont nombreuses et forment un lacis tregraves serreacute proche du sol avec des
racines adventives La plante se perpeacutetue soit par ramification des tiges souterraines soit par
des bourgeons prenant naissance sur les racines elle est dite plante sociale car elle se
marcotte naturellement
Les feuilles (Figure 3) vert pacircle sont petites (1 agrave 2 cm voire 2 agrave 3 cm selon la litteacuterature)
alternes de forme oblongue agrave ovale agrave pointe fine et allongeacutee Le bord du limbe est finement
denteleacute avec des nervures opposeacutees Ces feuilles sont courtement peacutetioleacutees avec un peacutetiole
(tige portant la feuille) recourbeacute vers le bas Les feuilles prennent une belle couleur rouge-
cuivre en automne Elles sont caduques et reacuteapparaissent au printemps
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus (75)
Les fleurs de couleur blanc roseacute rouge pacircle agrave verdacirctre ont une corolle pendante comportant
quatre ou cinq peacutetales soudeacutes entre eux sur une grande longueur et formant un tube globuleux
agrave lobes courts Elles sont solitaires ou regroupeacutees par deux porteacutees par un peacutedoncule courbeacute
Les seacutepales tregraves petits verts sont soudeacutes agrave la corolle (Figure 4) La floraison a lieu en mai-
juin
12
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus (72)
Le fruit est une baie globuleuse de la taille drsquoun petit pois (diamegravetre variant de 4 agrave 8 mm)
bleu noir agrave maturiteacute cette baie preacutesente parfois des restes de style agrave la base et peut ecirctre
surmonteacutee du calice agrave son sommet formant un disque entoureacute drsquoun faible rebord (Figure 5)
On peut apercevoir agrave la base de la baie la cicatrice du peacutedoncule Le meacutesocarpe est charnu
constitueacute de 4 ou 5 petites loges contenant de multiples petites graines brillantes brun-rouge
La baie mucircrit jusqursquoen en juillet-aoucirct voire septembre
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus (72)
Si le fruit est frais la saveur est douce sucreacutee et leacutegegraverement aciduleacutee voire mecircme astringente
Le fruit sec par contre a une saveur aigre-douce leacutegegraverement astringente En ce qui concerne
les organes reproducteurs lrsquoovaire infegravere est soudeacute agrave la coupe florale Les eacutetamines eacutegales
entre elles deacutepassent la dizaine en nombre elles sont complegravetement libres soudeacutees au
reacuteceptacle elles peuvent ecirctre soit disposeacutees en plusieurs verticilles soit nrsquoavoir aucune
position bien deacutefinie
13
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille (67)
Vaccinium myrtillus est une myrtille sauvage tregraves peu cultiveacutee originaire drsquoEurope du Nord et
Centrale abondant dans les bois clairsemeacutes et les bruyegraveres sur les sols siliceux de montagne
En France on la trouve dans la plupart des massifs montagneux entre 400 et 2500 megravetres
drsquoaltitude (Figure 6)
Leacutegende
Preacutesent
Zone geacuteographique non renseigneacutee
Preacutesence non signaleacutee
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France (81)
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium
41 Vaccinium uliginosum L (22)
Vaccinium uliginosum L nommeacute myrtille de loup ou myrtille des marais se situe
principalement aux bords des marais dans les tourbiegraveres les landes et les bois humides On le
trouve en Dauphineacute dans le Jura les Pyreacuteneacuteeshellip et en Savoie jusqursquoagrave 2000 megravetres et plus
Crsquoest un buisson bas agrave moyen agrave tiges et rameaux arrondis dans leur longueur Ses feuilles
vert-pacircle au dessus nervureacutees au-dessous ne persistent pas en hiver Les fleurs (Figure 7)
sont disposeacutees en grappe de mai agrave juillet
14
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum (72)
Le fruit (Figure 8) drsquoun diamegravetre drsquoenviron 6 mm est bleu-noir pruineux donnant un jus
incolore et agrave chair blanche Sa saveur est fade et sucreacutee Il mucircrit en juillet-aoucirct voire mecircme
jusqursquoen septembre
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum (72)
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo (61)
Ce sont des myrtilles drsquoorigine ameacutericaine dont lrsquoimplantation a eacuteteacute faite essentiellement agrave
partir de Vaccinium corymbosum L (myrtillier geacuteant ou arbustif) Celui-ci est un arbuste
pouvant atteindre 25 megravetres de hauteur drsquoougrave son nom Il est reacutesistant au froid Ses
inflorescences forment un corymbe ougrave le nombre de fleurs par corymbe varie beaucoup
(Figure 9) La baie (Figure 10) est de couleur bleue recouvert de pruine qui masque une chair
blanche
15
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum (79)
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo (79)
La floraison apparait de mars agrave fin mai et dure plusieurs semaines Les feuilles (Figure 11)
prennent une belle coloration en automne ce qui en fait une magnifique plante deacutecorative
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum (79)
16
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage la myrtille drsquoorigine ameacutericaine a un fruit plus gros et
plus sucreacute Cette derniegravere a une pulpe non coloreacutee Plusieurs varieacuteteacutes existent classeacutees en
fonction de lrsquoeacutepoque de maturiteacute
- les varieacuteteacutes preacutecoces comme le Bluetta lrsquoEarlibluehellip
- les varieacuteteacutes demi-preacutecoces comme le Patriot le Collinshellip
- les varieacuteteacutes demi-saison comme le Bluejay le Bluecrophellip
- les varieacuteteacutes demi-tardives comme le Berkeley le Jerseyhellip
- les varieacuteteacutes tregraves tardives comme le Darrow lrsquoElliothellip
43 Vaccinium macrocarpon L (4)
Vaccinium macrocarpon Ait ou canneberge drsquoAmeacuterique (Figure 12) reacutesistant agrave de fortes
geleacutees de moins 35degC et plus est un arbrisseau ressemblant agrave la myrtille sa croissance est
lente Son fruit est une baie aciduleacutee utiliseacutee dans la preacutevention des reacutecidives drsquoinfections
urinaires car elle contient des moleacutecules anti-adheacutesines des fimbriae drsquoEscherichia coli
(bacteacuterie intestinale pouvant ecirctre la cause drsquoinfection urinaire)
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits (83)
Drsquoautres espegraveces de Vaccinium se rencontrent sur le continent ameacutericain comme
- Vaccinium angustifolium Ait (Bleuet nain) qui est un buisson bas infeacuterieur agrave 50 cm
reacutesistant au froid
- Vaccinium ashei Reade qui est un buisson haut (3 agrave 6 megravetres) reacutesistant agrave la
seacutecheresse
Il ya beaucoup drsquoautre espegraveces de Vaccinium que nous ne citerons pas ici
17
II Culture reacutecolte et production des myrtilles
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques
Comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment la myrtille de culture est diffeacuterente de la myrtille
sauvage exigeant des conditions optimales pour une bonne production
11 pH du sol (49) (61)
Le sol doit ecirctre acide et mecircme tregraves acide pour permettre une croissance et un deacuteveloppement
normal ainsi qursquoune bonne reacuteussite de culture pH compris entre 4 et 5 voire 4 agrave 52 selon la
litteacuterature Or ce type de sol nrsquoest pas freacutequent en France Le pH optimum est de 48 Si le pH
deacutepasse 55 les plantes sont chlorotiques et il faut soit diminuer le pH soit renoncer agrave une
telle culture Les sols humides doivent ecirctre eacuteviteacutes car les racines sont tregraves sensibles agrave
lrsquoasphyxie et le deacuteveloppement du systegraveme racinaire est limiteacute
12 Conditions climatiques (49) (61)
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage qui croit dans les landes et les sous-bois humides de
demi-montagne ougrave elle vit en colonie vers 1000 megravetres drsquoaltitude le myrtillier cultiveacute est une
plante de plaine et de faible altitude qui preacutefegravere les endroits ensoleilleacutes Ainsi une exposition
sud ou sud-ouest est conseilleacutee mais il faut faire attention agrave la seacutecheresse En raison des
risques de geleacutees printaniegraveres il faut eacuteviter les lisiegraveres de bois ou la profondeur des valleacutees
Cette plante peut ecirctre eacutegalement cultiveacutee en demi-montagne agrave une altitude comprise entre 600
et 800 megravetres Reacutesistante au froid elle peut supporter de basses tempeacuteratures jusqursquoagrave -30degC
Bien qursquoau cours de la floraison les fleurs peuvent supporter des tempeacuteratures neacutegatives (-
5degC) il faut faire attention car les deacutegacircts peuvent ecirctre tregraves importants surtout sur les varieacuteteacutes
sensibles Agrave lrsquoopposeacute le myrtillier craint la seacutecheresse en eacuteteacute et les vents secs
13 Besoins en eau (49) (61)
La myrtille cultiveacutee aime la proximiteacute de la surface de la nappe phreacuteatique mais craint les
excegraves en eau Ses besoins sont limiteacutes mais permanents tout le long de sa peacuteriode de vie (au
moins 1000 mm drsquoeau durant lrsquoeacuteteacute) Ceci peut srsquoexpliquer par le deacuteveloppement tregraves
superficiel de son systegraveme racinaire et lrsquoabsence de poils absorbants En Lorraine par
exemple le systegraveme drsquoirrigation est le laquo goutte agrave goutte raquo localiseacute permettant drsquoapporter les
doses neacutecessaires en eau et de limiter la contamination fongique Les besoins en eau par
semaine sont de 20 mm
18
Ainsi il faudra tenir compte de ces exigences pour choisir la meilleure exposition possible
2 Reacutecolte des myrtilles
21 Date et mode de reacutecolte (49) (22)
La croissance de la plante eacutetant lente la reacutecolte peut deacutebuter la 2egraveme
anneacutee apregraves la plantation
La production augmente reacuteguliegraverement jusqursquoagrave la 8egraveme
ou la 9egraveme
anneacutee en rapport avec le
deacuteveloppement veacutegeacutetatif La date de reacutecolte deacutepend beaucoup de la varieacuteteacute de lrsquoaltitude des
tempeacuteratures printaniegraveres et du mode de reacutecolte Elle srsquoeacutetend de mai agrave fin septembre voire mi-
juin pour les varieacuteteacutes les plus preacutecoces et fin septembre pour les varieacuteteacutes les plus tardives La
reacutecolte deacutebute lorsque 20 des baies sont mucircres En effet si la reacutecolte se fait trop tocirct les
fruits ne sont pas mucircres et seront de mauvaise qualiteacute En geacuteneacuteral la reacutecolte dure de 3 agrave 5
semaines avec plusieurs passages successifs (un ou plusieurs par semaine) pour une mecircme
varieacuteteacute au fur et agrave mesure de la maturation des fruits
La reacutecolte de la myrtille cultiveacutee se fait manuellement directement dans les barquettes pour
eacuteviter drsquoabicircmer les fruits avec une manipulation suppleacutementaire Ceci est diffeacuterent pour la
myrtille sauvage ougrave la reacutecolte se fait agrave lrsquoaide drsquoun instrument que lrsquoon nomme laquo peigne raquo
(Figure 13) dont il existe divers modegraveles (en bois ou en fer) constitueacutes drsquoune grille permettant
drsquoarracher vite et en quantiteacutes importantes les baies en les emprisonnant entre les dents
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages (78)
19
3 Production des myrtilles
31 Production mondiale (61)
Les Etats-Unis sont les premiers producteurs mondiaux de myrtilles suivis du Canada Ces
pays produisent deux types de myrtille des myrtilles sauvages appartenant majoritairement agrave
lrsquoespegravece Vaccinium angustifolium qui se rapproche de la myrtille europeacuteenne comme nous
lrsquoavons vu dans le chapitre preacuteceacutedent Son deacuteboucheacute est principalement la congeacutelation et la
transformation dont une partie est exporteacutee en Europe
Les myrtilles cultiveacutees aux USA sont principalement composeacutees de
- Vaccinium corymbosum
- des hybrides entre V corymbosum et V angustifolium
- des hybrides entre V ashei et V corymbosum
Ces myrtilles cultiveacutees sont commercialiseacutees majoritairement sur le marcheacute inteacuterieur et un
faible tonnage est exporteacute en Europe et surtout en Australie
En Europe de lrsquoEst et en Scandinavie la cueillette des myrtilles sauvages pour le commerce
ou lrsquoautoconsommation nrsquoest pas neacutegligeable
32 Production europeacuteenne (22) (61)
Crsquoest lrsquoAllemagne qui deacutetient les plus grandes surfaces de myrtilles cultiveacutees suivie par la
France et les Pays-Bas Elles sont aussi cultiveacutees en Italie et au Portugal mais de faccedilon moins
importante
Dans les pays scandinaves la production est principalement constitueacutee de V myrtillus Il faut
noter que des quantiteacutes non neacutegligeables de reacutecolte sont le fait de cueillettes reacutealiseacutees par des
laquo pillards raquo des cultivateurs et enfin par des voyageurs des particuliers ou des touristes qui
consomment les myrtilles sur place pour leur plaisir
33 Production franccedilaise (22) (61)
En France les Landes constituent la premiegravere zone de production des myrtilles cultiveacutees
suivies du Val de Loire du Limousin de la Sologne et des Vosges La majoriteacute des myrtilles
cultiveacutees au niveau national (1300 agrave 1500 tonnesan) est destineacutee pour 95 des tonnages au
marcheacute du frais et est exporteacutee vers lrsquoAllemagne ougrave la consommation y est plus importante
qursquoen France vers la Suisse la Grande-Bretagne lrsquoItaliehellip et en importe de Suegravede du
Canada de Pologne et de Roumanie
En ce qui concerne les myrtilles sauvages 1500 agrave 2000 tonnes sont reacutecolteacutees en France La
principale zone de production est lrsquoArdegraveche suivie du Massif central et des Vosges Cette
20
reacutecolte se fait au peigne par des personnes cueilleurs agriculteurs qui ont un laquo droit de
cueillette raquo La majoriteacute des myrtilles sauvages reacutecolteacutees est destineacutee agrave la transformation en
geleacutees confitureshellippar des ateliers drsquoexploitation ou par des entreprises proches des sites de
production Une faible quantiteacute est destineacutee agrave la vente sur les marcheacutes ou agrave des grossistes pour
la restauration et les eacutepiceries fines
Les statistiques de 2001 ont reacutecapituleacute une production mondiale drsquoenviron 190000 tonnes
(1000 tonnes pour la France) avec pregraves de 38000 hectares cultiveacutes aux Etats-Unis et au
Canada
4 Post-reacutecolte
41 Conservation (49) (61)
Une fois les myrtilles reacutecolteacutees elles doivent ecirctre placeacutees dans une chambre froide pour
garder toutes ses qualiteacutes Lrsquoideacuteal pour conserver le fruit intact pendant une dizaine de jours
est de le stocker entre 8 et 10degC Il gardera alors son parfum lrsquoarocircme en sera mecircme
deacuteveloppeacute Si on veut le conserver plus longtemps il faut le soumettre agrave des tempeacuteratures plus
basses En effet la congeacutelation est un bon proceacutedeacute de conservation pour ce fruit
42 Conditionnement (61)
Le conditionnement que lrsquoon retrouve le plus souvent est la barquette en plastique fermeacutee par
un couvercle perforeacute Ainsi les myrtilles peuvent ecirctre conserveacutees selon les conditions deacutefinies
preacuteceacutedemment
Le temps de stockage est ameacutelioreacute par lrsquoutilisation de films en polypropylegravene semi-
permeacuteables qui maintiennent le fruit sous atmosphegravere modifieacutee Ces films peuvent apregraves
sortie du froid ecirctre gardeacutes durant seulement 24 heures car au-delagrave il peut y avoir des risques
de deacuteveloppement de pourritures
21
Deuxiegraveme partie
Composition chimique
de Vaccinium myrtillus L
22
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus 1 Identification macroscopique et microscopique (43) (67)
Du point de vue macroscopique les feuilles de V myrtillus sont alternes caduques ovales agrave
elliptiques pointues courtement peacutetioleacutees et finement denteleacutees Le bord de la feuille preacutesente
des poils seacutecreacuteteurs peacutedicelleacutes agrave lrsquoextreacutemiteacute de chaque dent quelques fois briseacutes
Du point de vue microscopique la feuille preacutesente des stomates paracytiques des poils agrave
parois eacutepaisses sur la face supeacuterieure des grandes nervures des poils seacutecreacuteteurs et des rangeacutees
de cellules agrave cristaux sur la nervure principale
Du point de vue macroscopique le fruit est une baie globuleuse drsquoun noir violaceacutee nettement
deacuteprimeacutee au sommet de la taille drsquoun petit pois Cet examen doit se faire sur une baie intacte
crsquoest-agrave-dire ni attaqueacutee par des insectes ni moisie De plus elle doit ecirctre molle car elle
devient cassante si elle est stockeacutee de faccedilon prolongeacutee
Lrsquoexamen microscopique est surtout caracteacuteriseacute par la preacutesence de cellules agrave cristaux du
meacutesocarpe et de lrsquoendocarpe Le fruit frais broyeacute ou la poudre de fruit sec met en eacutevidence la
preacutesence de macles de cristaux drsquooxalate de calcium des amas de cellules scleacutereuses de
couleur rose violaceacute agrave parois canaliculeacutees et des fragments jaune-brun du teacutegument seacuteminal agrave
paroi en forme de fer agrave cheval
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus
21 Composition chimique des feuilles (11) (67)
Celle-ci renferme des tanins cateacutechiques (08 agrave 67) des cateacutechols (eacutepicateacutechol
gallocateacutechol eacutepigallocateacutecholhellip) jusqursquoagrave 10 des proanthocyanidines (dimegraveres du cateacutechol
et drsquoeacutepicateacutechol) des flavonoiumldes (heacuteteacuterosides du querceacutetol rhamnoglucosyl- arabinosyl- et
glucuronyl-querceacutetol ainsi que des heacuteteacuterosides de kaempfeacuterol astragaloside) des iridoiumldes
des acides-pheacutenols surtout des acides chlorogeacuteniques et enfin des traces drsquoalcaloiumldes
quinolizidiniques comme la myrtine et lrsquoeacutepimyrtine
La bibliographie ancienne cite la preacutesence drsquoarbutoside et drsquohydroquinone qui ne sont
preacutesents qursquoagrave lrsquoeacutetat de trace voire totalement absent Ceci peut srsquoexpliquer soit par la preacutesence
de chimiotypes soit par une contamination des lots par des espegraveces proches qui ont le mecircme
habitat eacutecologique comme Vaccinium vitis-idaea L ou Vaccinium x intermedium Ruthe
(hybride entre V myrtillus et V vitis-idaea) dans lesquels on retrouve de lrsquoarbutoside de
lrsquohydroquinone libre et du pyroside (6-O-meacutethylarbutoside)
Enfin la feuille contient de faccedilon importante du chrome et du manganegravese
23
22 Composition chimique des fruits (11) (67)
Le fruit de la myrtille est riche en eau (jusqursquoagrave 90) en oligosaccharides (3 agrave 7) et en
acides organiques (acide malique citrique et quinique) Il contient des tanins essentiellement
des tanins cateacutechiques des proanthocyanidols (dimegravere de cateacutechol et drsquoeacutepicateacutechol) une
quinzaine drsquoheacuteteacuterosides les anthocyanosides qui sont des O-glucosides des O-galactosides et
des O-arabinosides en C-3 du cyanidol peacuteonidol delphinidol malvidol et peacutetunidol des
flavonoiumldes (heacuteteacuterosides de querceacutetol et kaempfeacuterol) des flavan-3-ols monomegraveres (cateacutechol et
eacutepicateacutechol)
Enfin on retrouve drsquoautres constituants comme les acides chlorogeacuteniques cafeacuteylquiniques
des acides pheacutenols et des pectines Les iridoiumldes quant agrave eux ne sont preacutesents que dans les
fruits immatures
24
II Anthocyanosides
Avant drsquoentrer dans les deacutetails il est important de connaitre les principaux groupes de
composeacutes phytochimiques que lrsquoon retrouve dans la plupart des fruits et des leacutegumes
(Tableau I)
Familles Classes Sous-classes
Polypheacutenols Flavonoiumldes - anthocyanidines
- flavones
-flavanols
- flavanones
- flavonols
- isoflavones
- tanins
acides pheacutenoliques - hydroxycinnamates
- hydroxybenzoates
non-flavonoiumldes - stilbegravenes
- coumarines
- lignans
Terpegravenes - caroteacutenoiumldes
- monoterpegravenes
Composeacutes soufreacutes - allyl sulfides
- isothiocyanates
Saponines - triterpeacutenoiumldes
- steacuteroiumldes
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes (7)
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes
Le terme anthocyane du grec laquo anthos raquo (signifiant fleur) et laquo kyanos raquo (bleu) est utiliseacute pour
deacutesigner la substance responsable de la coloration du bleuet Ce terme srsquoapplique agrave un groupe
de pigments qui donnent la coloration rouge rose mauve pourpre bleue et violette de la
plupart des fleurs et des fruits Ces pigments existent sous deux formes soit la forme
heacuteteacuteroside (anthocyanosides ou laquo anthocyanins raquo en anglais) soit sous la forme geacutenine
correspondante (anthocyanidols ou laquo anthocyanidins raquo en anglais) On connait environ 400
25
anthocyanosides qui sont preacutesents chez tous les Angiospermes agrave lrsquoexception des
Caryophyllales ougrave seule la famille des Caryophyllaceacutees et des Molluginaceacutees en contiennent
En effet leur preacutesence chez les Gymnospermes est rare Comme nous lrsquoavons vu les
anthocyanes sont responsables de la couleur des fleurs et des fruits mais peuvent eacutegalement
coloreacutes les bracteacutees les feuilles les peacutetioles les racines voire mecircme les bulbes comme dans
lrsquooignon rouge Cependant ce sont dans les fruits que leur concentration est la plus eacuteleveacutee Ils
srsquoaccumulent dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques sous forme de solution et de faccedilon
moins freacutequente sous forme drsquoanthocyanoplastes (11) Selon Szajdek et coll (58) les parois
cellulaires et la chair ne contiennent presque pas drsquoanthocyanosides
2 Structure des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont les pigments les plus importants des plantes visibles par lrsquoœil
humain Ils appartiennent agrave une large classe de composeacutes pheacutenoliques que lrsquoon appelle les
flavonoiumldes Ce sont des glycosides des deacuteriveacutes polyhydroxy et polymethoxy du 2-
pheacutenylbenzopyrylium plus communeacutement appeleacutes cation flavylium
Les diffeacuterences existant entre les anthocyanosides individuels sont lieacutees au nombre de groupe
hydroxyl agrave la nature et agrave la position drsquoattachement des sucres agrave la moleacutecule ainsi qursquoau
nombre et agrave la nature des acides aliphatiques ou aromatiques des sucres attacheacutes agrave la
moleacutecule Dix sept anthocyanosides et leurs aglycones naturellement preacutesents dans les plantes
sont connus Cependant seulement six geacutenines sont les plus freacutequentes (voire quasiment
universelles) dans les plantes supeacuterieures Il srsquoagit du cyanidol (50) du peacutelargonidol (12)
du peacuteonidol (12) du delphinidol (12) du peacutetunidol (7) et du malvidol (7) (Figure 14)
Les glycosides de trois anthocyanidines non meacutethyleacutes les plus largement reacutepandus dans la
nature sont la delphinidine la cyanidine et la peacutelargonidine Ils sont preacutesents dans 80 des
feuilles pigmenteacutees 69 des fruits et 50 des fleurs respectivement (33)
Dans les baies les anthocyanosides sont retrouveacutes sont la forme de mono di ou triglycosides
ougrave les reacutesidus glycosides sont principalement lieacutes agrave C-3 et moins freacutequemment agrave C-5 ou C-7
Les sucres les plus courants sont le glucose le galactose le rhamnose lrsquoarabinose le rutinose
le sambubiose et le sophorose De plus les glycosides des anthocyanosides sont souvent
acyleacutes par des acides comme les acides p-coumarique cafeacuteique feacuterulique et moins
couramment par les acides p-hydroxybenzoiumlque malonique ou aceacutetique (58)
26
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines (65)
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont des pigments solubles dans lrsquoeau ils sont instables agrave la lumiegravere agrave
la tempeacuterature et agrave lrsquooxygegravene Ils agissent en rapport au cation flavylium qui est agrave la fois un
diacide faible et un bon eacutelectrophile Agrave pH tregraves acide (lt agrave 3) la forme cationique coloreacutee en
rouge est stable Agrave pH moins acide (entre 4 et 6) la moleacutecule perd deux protons donnant une
moleacutecule neutre ou ioniseacutee devenant une forme quinonoiumlde coloreacutee en bleu et stabiliseacutee par
reacutesonnance Lrsquohydratation de la moleacutecule conduit agrave la formation drsquoune laquo pseudo-base raquo
carbinolique incolore et si le pH augmente la moleacutecule se transforme en pheacutenate (forme
ioniseacutee) la structure anthocyanique eacutetant deacutetruite Ainsi les anthocyanosides en milieu neutre
ou tregraves peu acide perdent leur coloration Or dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques le
pH est tregraves rarement infeacuterieur agrave 3 Sa coloration dans le milieu vivant peut donc srsquoexpliquer
par trois meacutecanismes qui permettent une protection ou une stabilisation de la moleacutecule
- soit un meacutecanisme par lequel les acides acylant les sucres forment un laquo sandwich raquo
autour de la geacutenine permettant une copigmentation intramoleacuteculaire
- soit par une auto-copigmentation se traduisant par lrsquoempilement intermoleacuteculaire
drsquoanthocyanosides se proteacutegeant les uns avec les autres
- soit par une copigmentation avec les flavonoiumldes (11)
27
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides
41 Extraction
Les anthocyanosides sont solubles dans les solvants polaires et lrsquoextraction agrave partir des plantes
est reacutealiseacutee en utilisant du meacutethanol qui contient de faibles quantiteacutes drsquoacide chlorhydrique ou
drsquoacide formique Il est preacutefeacuterable drsquoutiliser des acides plus faibles comme lrsquoacide aceacutetique
tartrique ou citrique des acides volatils ou travailler en milieu neutre et agrave basse tempeacuterature
pour empecirccher la deacutesacylation des anthocyanosides
Lrsquoaceacutetone peut aussi ecirctre utiliseacutee pour lrsquoextraction des anthocyanosides de plusieurs plantes
Par rapport au meacutethanol acidifieacute lrsquousage de ce solvant a lrsquoavantage drsquoecirctre une technique plus
efficace et reproductible
Lrsquoextraction en phase solide peut ecirctre utiliseacutee pour la purification initiale des extraits crus
drsquoanthocyanosides (33)
42 Seacuteparation et identification
Pour la seacuteparation et lrsquoanalyse de la structure des anthocyanosides lrsquoutilisation de la
chromatographie liquide coupleacutee agrave la spectromeacutetrie de masse permet de combiner la
seacuteparation de la chromatographie liquide avec la sensibiliteacute et la seacutelectiviteacute de la spectromeacutetrie
de masse (33) Drsquoautres meacutethodes chromatographiques peuvent ecirctre utiliseacutees pour leur
seacuteparation comme les colonnes de polyamide de polyvinylpyrrolidone les reacutesines
eacutechangeuses drsquoions la chromatographie sur couche mince preacuteparative sur cellulose (10)
Lrsquoanalyse des plantes agrave anthocyanosides peut ecirctre reacutealiseacutee par la chromatographie liquide
associeacutee agrave un deacutetecteur agrave barrettes de diodes Cette analyse peut ecirctre faite par lrsquoeacutelectrophoregravese
capillaire qui selon Szajdek et coll (58) est une meacutethode avec une tregraves bonne sensibiliteacute une
haute reacutesolution coupleacutee agrave une basse consommation drsquoeacutechantillon et enfin un moindre
laquo gaspillage raquo des solvants utiliseacutes
Drsquoautres meacutethodes plus perfectionneacutees ne peuvent ecirctre utiliseacutees que par des laboratoires de
recherche
43 Dosage des anthocyanosides
Le dosage se fait par spectrophotomeacutetrie aux longueurs drsquoonde des maximums drsquoabsorption
des anthocyanosides (λ = 520 nm) Il peut ecirctre fait sur une solution alcoolique acide ou sur un
jus acidifieacute Dans tout les cas il faut le faire en milieu tregraves dilueacute pour empecirccher les moleacutecules
drsquoanthocyanosides de srsquoassocier les unes avec les autres (11)
28
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
51 Composition en anthocyanosides
Les baies de V myrtillus contiennent environ quinze anthocyanosides ces heacuteteacuterosides sont
des O-glucosides des O-galactosides et des O-arabinosides en C-3 du cyanidol du peacuteonidol
du delphinidol du malvidol et du peacutetunidol (Figure 15)
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus (14)
29
52 Donneacutees quantitatives
Vaccinum myrtillus contient une quantiteacute importante drsquoanthocyanosides (300 agrave
698 mg100 g) Lrsquoeacutequipe de Prior et coll (50) a montreacute que la quantiteacute drsquoanthocyanosides
augmente avec la maturiteacute du fruit lors de la reacutecolte
Burdulis et coll (12) ont eacutetudieacute la diversiteacute des anthocyanosides du fruit de V myrtillus dans
diffeacuterents pays comme la Lituanie la Suegravede la Russie et la Bieacutelorussie ainsi que dans
diffeacuterentes reacutegions de Lituanie comme Šilutė Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees en
anthocyanosides ont eacuteteacute retrouveacutees dans les baies ramasseacutees en Russie et en Suegravede Ces
reacutesultats sont lieacutes agrave la cueillette tardive des baies et agrave lrsquoemplacement plus au nord des
cultures en effet les baies eacutetaient plus mucircres et avaient donc une plus haute contenance en
anthocyanosides Par contre la quantiteacute en Beacuteliorussie et en Lituanie est similaire
53 Donneacutees qualitatives
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Burdulis et coll (12) ont observeacute que lrsquoanalyse
chromatographique ne reacutevegravele pas de diffeacuterence dans la composition qualitative des
anthocyanosides Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees sont repreacutesenteacutees par la cyanidine (quantiteacute
moyenne de 53 ngml) suivie de la delphinidine et la peacutetunidine en quantiteacute 25 fois plus
faible que la cyanidine et pour terminer la malvidine et la peacuteonidine en quantiteacute encore plus
faible En Suegravede seule la malvidine a eacuteteacute retrouveacutee en plus grande quantiteacute parmi tous les
anthocyanosides (15 fois plus eacuteleveacutee que celle de la peacutetunidine et la delphinidine)
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus
Riihinen et coll (53) ont eacutetudieacute la distribution des composeacutes pheacutenoliques dans les diffeacuterents
organes de V myrtillus et drsquoun hybride entre le V corymbosum et V augustifolium
Ainsi les anthocyanosides sont preacutesents dans la pulpe et la peau des fruits de V myrtillus
constituant 2 du poids frais de la peau de la baie cela indique que lrsquoextraction du jus agrave
partir de la peau pourrait ecirctre une source riche drsquoanthocyanosides Les feuilles rouges des
myrtilles ont de faibles quantiteacutes drsquoanthocyanosides et ne contiennent que des glycosides de
cyanidine alors que les fruits contiennent les cinq types drsquoanthocyanosides (delphinidine
cyanidine peacuteonidine peacutetunidine et malvidine-glycosides) Les feuilles sont donc des sources
moins inteacuteressantes pour lrsquoutilisation nutraceutique et pharmaceutique que les fruits
30
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
Des eacutetudes ont eacuteteacute reacutealiseacutees sur la pharmacocineacutetique des anthocyanosides agrave partir drsquoun
produit commercial le Myrtocyanreg Celui-ci est un extrait hautement purifieacute de baies de
Vaccinum myrtillus dans lequel les anthocyanosides sont les composants actifs les plus
importants (36)
Lorsque lrsquoextrait est injecteacute chez le rat par voie intraveineuse ou parenteacuterale aux doses de 20-
40 mgkg ou 25 mgkg respectivement les anthocyanosides disparaissent de la circulation
sanguine et sont distribueacutes rapidement dans les tissus Lrsquoeacutelimination se fait de faccedilon
preacutedominante par les urines (25-30) 24 heures apregraves lrsquoadministration et une plus faible
quantiteacute est eacutelimineacutee via la bile (15-20)
Le Myrtocyanreg
injecteacute par voie intrapeacuteritonale agrave la dose de 200 mgkg montre que les
anthocyanosides ont une affiniteacute particuliegravere pour certains tissus notamment les tissus reacutenaux
et cutaneacutes dans ces tissus les anthocyanosides y demeurent plus longtemps que dans le
plasma Cette observation pourrait expliquer leur effet biologique agrave long terme
Lrsquoadministration orale de Myrtocyanreg
agrave la dose de 400 mgkg chez le rat montre que les
anthocyanosides sont rapidement absorbeacutes par le tractus gastro-intestinal et atteignent un pic
plasmatique quinze minutes apregraves lrsquoadministration Par contre ils ne demeurent pas
longtemps dans le sang car aucune concentration ne peut ecirctre mesureacutee apregraves deux heures Par
voie orale environ 4 des anthocyanosides sont eacutelimineacutes par la bile apregraves 24 heures
En conclusion par voie orale la biodisponibiliteacute faible des anthocyanosides peut ecirctre due agrave
une forte meacutetabolisation heacutepatique en meacutetabolites non deacutetectables par la meacutethode analytique
Le pic plasmatique de 2-3 microgml drsquoanthocyanosides non modifieacutes pourrait ecirctre suffisant pour
garantir les effets biologiques des anthocyanosides apregraves une administration orale Enfin des
tests in vitro ont reporteacute une activiteacute des anthocyanosides agrave des concentrations de 2 agrave 7 microgml
(43)
En 2006 Ichiyanagi et coll (28) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute et la distribution dans les tissus
drsquoun autre extrait de V myrtillus (Bilberon 25reg
constitueacutes de 25 anthocyanosides) administreacute
oralement ou par voie intraveineuse agrave des rats
Pour rappel les aglycones sont de cinq types la cyanidine la delphinidine la peacutetunidine la
peacuteonidine et la malvidine
Seules la malvidine la peacuteonidine et la peacutetunidine sont des structures aglycones meacutethyleacutes ces
anthocyanidines sont glycosyleacutees pour former les anthocyanosides qui repreacutesentent une
structure beaucoup plus stable Trois sortes de sucres sont rattacheacutees agrave la structure le
glucose le galactose et lrsquoarabinose
31
Ainsi le niveau plasmatique de chaque anthocyanoside est eacutevalueacute par chromatographie
liquide haute performance Lrsquoeacutetude montre clairement que lrsquoabsorption le meacutetabolisme et
lrsquoeacutelimination sont diffeacuterents pour chaque anthocyanoside Ichiyanagi et coll (27) ont calculeacute
le rapport C15dose deacutefini par la concentration plasmatique de chaque anthocyanoside quinze
minutes apregraves administration orale diviseacutee par sa concentration initiale dans lrsquoextrait de
Bilberon 25reg
(soit le rapport C15dose) La comparaison de ces rapports a montreacute que pour les
anthocyanosides posseacutedant le mecircme aglycone les galactosides ont un rapport C15dose plus
important suivi des glucosides et des arabinosides agrave lrsquoexception de la malvidine La
diffeacuterence est significative entre les anthocyanosides glucosides et galactosides Par contre
lorsque les anthocyanosides portant le mecircme sucre sont compareacutes les glycosides de cyanidine
et delphidine preacutesentent des valeurs plus eacuteleveacutees que les glycosides de malvidine et
peacutetunidine alors que la peacuteonidine 3-O-β-D-galactoside affiche les valeurs les plus hautes
parmi tous les anthocyanosides
En conclusion les niveaux plasmatiques deacutependent de plusieurs facteurs tels que lrsquoabsorption
gastro-intestinale le taux de distribution dans les tissus et leur excreacutetion via les urines et la
bile
La demi-vie est eacutevalueacutee par administration intraveineuse de lrsquoextrait pour les
anthocyanosides portant le mecircme sucre les demi-vies de la delphinidine et de la cyanidine
sont plus eacuteleveacutees que leurs analogues O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacuteonidine et la
peacutetunidine Par contre lorsque les auteurs comparent les sucres porteacutes par le mecircme aglycone
aucune diffeacuterence significative nrsquoest observeacutee entre les galactosides et les glucosides mais les
arabinosides affichent des valeurs plus faibles Seule la malvidine ne preacutesente pas de
diffeacuterence significative entre galactoside et arabinoside compareacutee aux autres anthocyanidines
Ichiyanagi et coll (28) ont eacutevalueacute la biodisponibiliteacute de chaque anthocyanoside Celle-ci varie
de 061 agrave 182 et elle est de 093 dans le meacutelange de lrsquoextrait Bilberon 25reg
Ainsi la
biodisponibiliteacute des anthocyanosides O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacutetunidine et la
peacuteonidine est plus eacuteleveacutee que la delphinidine et la cyanidine particuliegraverement pour les
galactosides (diffeacuterence significative entre la cyanidine et la peacuteonidine galactoside et entre la
delphinidine et la peacutetunidine arabinoside) Cependant les biodisponibiliteacutes des glycosides de
peacutetunidine sont plus eacuteleveacutees que celles des glycosides de malvidine mecircme si la malvidine est
lrsquoanalogue O-meacutethyl de la peacutetunidine-glycoside Ainsi la biodisponibiliteacute importante des
glycosides de peacutetunidine pourraient ecirctre expliqueacutee par une absorption gastro-intestinale
prolongeacutee De plus lrsquoexceptionnelle forte biodisponibiliteacute de la peacuteonidine 3-O-β-D-
galactoside traduirait une absorption gastro-intestinale plus efficace Lorsque les auteurs
32
comparent la biodisponibiliteacute entre les anthocyanosides sur la base du type de sucre attacheacute agrave
la structure les galactosides preacutesentent la plus haute valeur suivis des arabinosides puis des
glucosides qui preacutesentent les valeurs les plus basses (agrave lrsquoexception de la delphinidine et de la
malvidine)
Ces eacutetudes sur le meacutetabolisme et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides montrent que les
anthocyanosides majoritairement retrouveacutes dans lrsquourine et la bile sont les glycosides de
peacuteonidine et malvidine crsquoest-agrave-dire des anthocyanosides O-meacutethyleacutes Les pourcentages des
anthocyanosides dans les urines et la bile durant les quatre premiegraveres heures apregraves
administration intraveineuse sont seulement de 308 et 134 respectivement suggeacuterant une
meacutetabolisation ou une accumulation des anthocyanosides dans les tissus La quantiteacute et la
nature des anthocyanosides dans le foie et les reins diffegraverent de ceux du meacutelange Bilberon
25reg
indiquant une meacutetabolisation heacutepatique et reacutenale De plus lrsquoapparition de nouveaux pics
montreacutes par la chromatographie liquide haute performance souligne la preacutesence de
meacutetabolites drsquoanthocyanosides
En ce qui concerne la distribution dans les tissus les auteurs ont montreacute qursquoapregraves 15 minutes
drsquoune administration orale de lrsquoextrait de V myrtillus les anthocyanosides retrouveacutes
majoritairement dans les reins et le foie sont des glycosides de peacuteonidine et de malvidine les
anthocyanosides deacutetecteacutes sont des glucosides et galactosides de peacuteonidine malvidine et
peacutetunidine des meacutetabolites 4rsquo-O-meacutethyl de cyanidine delphinidine et peacutetunidine 3-O-β-D-
glucoside ou galactoside alors que les arabinosides ne sont pas deacutetecteacutes agrave lrsquoexception du 4rsquo-
O-meacutethyl delphinidine 3-O-α-L-arabinoside Les meacutetabolites comme les glucosides-
glucuronides de cyanidine et de delphinidine sont aussi preacutesents dans les tissus
particuliegraverement au niveau reacutenal
Apregraves administration intraveineuse les glycosides de cyanidine et delphinidine sont preacutesents agrave
lrsquoeacutetat de traces dans les tissus
Pour conclure plusieurs points ont pu ecirctre eacutetablis et clarifieacutes premiegraverement tous les
anthocyanosides de lrsquoextrait atteignent leur niveau plasmatique maximum en 15 agrave 30 minutes
apregraves administration orale soulignant une absorption efficace au niveau de lrsquoestomac et de
lrsquointestin grecircle Cette absorption deacutepend du type de sucre attacheacute agrave lrsquoaglycone les galactosides
eacutetant par exemple plus efficacement absorbeacutes que les arabinosides Deuxiegravemement la
biodisponibiliteacute deacutepend de plusieurs facteurs comme le meacutetabolisme lrsquohydrophobiciteacute du
cycle B de lrsquoaglycone et le type de sucre attacheacute agrave la structure De plus la synergie entre
anthocyanosides eux-mecircmes ou anthocyanosides avec drsquoautres composants preacutesents dans
lrsquoextrait peuvent moduler lrsquoabsorption au niveau du tractus gastro-intestinal
33
Sakakibara et coll (54) ont eacutetudieacute la distribution et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides chez la
souris apregraves une administration orale de 100 mgkg de poids corporel de V myrtillus
Les anthocyanosides absorbeacutes sous leur forme initiale ou meacutethoxyleacutee quinze minutes apregraves
une administration orale sont eacutelimineacutes via les urines dans les vingt quatre heures La totaliteacute
des anthocyanosides atteignent une concentration plasmatique maximale drsquoenviron 12 microM
quinze minutes apregraves administration orale puis cette concentration diminue brusquement Les
glycosides de malvidine pourraient ecirctre les anthocyanosides majoritaires dans des conditions
physiologiques en effet les anthocyanosides meacutethoxyleacutes ont des proprieacuteteacutes leur permettant
de demeurer dans lrsquoorganisme apregraves absorption De plus les glycosides de delphinidine et
cyanidine subissent une meacutethylation pouvant donner les glycosides de peacuteonidine et malvidine
par conseacutequent les anthocyanosides meacutethoxyleacutes peuvent ecirctre produits par la conversion
drsquoautres anthocyanosides eacutegalement absorbeacutes
Lrsquoexcreacutetion urinaire des anthocyanosides apregraves administration de 500 mgkg de poids corporel
de lrsquoextrait de V myrtillus a montreacute que les anthocyanosides sont eacutelimineacutes dans lrsquourine dans
les six premiegraveres heures apregraves administration orale De faibles quantiteacutes sont eacutelimineacutees entre 6
et 24 heures dont un unique pic drsquoexcreacutetion entre 6 et 12 heures Les quantiteacutes
drsquoanthocyanosides excreacuteteacutees dans lrsquourine dans les 24 heures suivant lrsquoadministration sont
faibles et ne repreacutesentent que 188 des anthocyanosides totaux ingeacutereacutes Par conseacutequent
quelque soit les quantiteacutes drsquoextrait administreacutees les anthocyanosides absorbeacutes par le corps
sont excreacuteteacutes par voie urinaire en 24 heures
Lrsquoeacutetude de la distribution des antocyanosides dans les organes a eacuteteacute reacutealiseacutee sur des souris
ayant une alimentation contenant 05 des anthocyanosides de V myrtillus durant 2
semaines Ce sont les glycosides de malvidine (surtout le 3-glucoside et 3-galactoside de
malvidine) les anthocyanosides majoritairement preacutesents dans des organes tels que le foie les
reins les testicules et les poumons Lrsquoeacutetude de Sakakibara et coll (54) est la premiegravere agrave avoir
montreacute la preacutesence des anthocyanosides dans les testicules de souris
Les auteurs montrent aussi que le foie est sucircrement lrsquoorgane cible des anthocyanosides car
515 y sont localiseacutes Par contre les anthocyanosides nrsquoont pas eacuteteacute deacutetecteacutes dans la rate le
thymus le cœur les muscles le cerveau la graisse blanche ou les yeux
Chez lrsquohomme la plupart des eacutetudes montrent une faible biodisponibiliteacute des anthocyanosides
(faible taux drsquoexcreacutetion) (3)
Cooke et coll en 2006 (18) ont deacutemontreacute la preacutesence dans lrsquourine drsquoanthocyanosides sous
forme inchangeacutee et de glucuronides drsquoanthocyanidines (meacutetabolites) apregraves une administration
orale de Mirtoselectreg
La preacutesence de glucuronides drsquoanthocyanidines dans lrsquourine suggegravere
34
une transformation des anthocyanosides en leurs deacuteriveacutes non glycosyleacutes lesquels subiront
plus tard une biotransformation Les anthocyanidines sont suspecteacutees pour avoir une meilleure
activiteacute biologique que leurs preacutecurseurs glycosyleacutes
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus
1 Acides pheacutenoliques
Les acides pheacutenoliques dans les fruits des baies sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique et benzoiumlque Le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide benzoiumlque inclus les acides p-
hydroxybenzoiumlque salicylique gallique et ellagique Dans le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique on trouve les acides p-coumarique cafeacuteique et feacuterulique Les deacuteriveacutes drsquoacide
hydroxycinnamique sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide cafeacuteique comme les acides
chlorogeacutenique et neacuteochlorogeacutenique Dans Vaccinum myrtillus des quantiteacutes significatives
drsquoacides p-coumarique et feacuterulique sont retrouveacutees Lrsquoacide hydroxycinnamique se trouve
dans tous les organes de la myrtille mais les quantiteacutes les plus importantes sont retrouveacutees
dans les feuilles il est le principal composeacute pheacutenolique du rhizome Cet acide
hydroxycinnamique joue un rocircle dans la protection de la plante vis-agrave-vis drsquoagents pathogegravenes
et drsquoautres facteurs de stress comme une radiation solaire intense une basse tempeacuterature ou
une blessure (58)
2 Tanins
Les tanins sont des composeacutes pheacutenoliques hydrosolubles importants dans les fruits des baies
Ils sont de deux types
- les tanins hydrolysables (oligo- ou polyesters drsquoun sucre et drsquoun nombre variant de
moleacutecules drsquoacide-pheacutenol) Le sucre est le plus souvent le glucose et lrsquoacide-pheacutenol est soit
lrsquoacide hexahydroxydipheacutenique et ses deacuteriveacutes drsquooxydation pour les tanins ellagiques soit
lrsquoacide gallique dans le cas des tanins galliques
- les tanins non hydrolysables condenseacutes sont des polymegraveres flavaniques constitueacutes
drsquouniteacutes flavan-3-ols lieacutees entre elles par des liaisons carbone-carbone On les appelle
eacutegalement les proanthocyanidols qui en milieu acide et agrave chaud donnent des anthocyanidols
(11)
Les tanins donnent le goucirct aux tartes et sont responsables du changement de couleur des fruits
et des produits deacuteriveacutes des fruits Le goucirct des tartes reacutesulte de lrsquointeraction entre les tanins et
les reacutecepteurs gustatifs de la bouche De plus les tanins stabilisent les anthocyanosides
35
preacutesents en quantiteacute importante dans le fuit de la myrtille en se liant agrave eux pour former des
copolymegraveres (58)
Dans V myrtillus les feuilles vertes et rouges sont les meilleures sources de procyanidines
Leurs proportions dans les feuilles sont drsquoenviron 7 du poids sec il conviendrait donc
drsquoapporter un inteacuterecirct aux feuilles qui actuellement lors de la reacutecolte et du traitement des
fruits constituent des deacutechets alors que ce sont des parties de la plante riche en
proanthocyanidines connus pour leurs activiteacutes antimicrobiennes et antioxydantes (53)
3 Flavonols
Les flavanols sont repreacutesenteacutes par la querceacutetine la myriceacutetine le kaempfeacuterol et
lrsquoisorhamneacutetine abondants dans les plantes alimentaires comme lrsquooignon le theacute les pommes
et les baies
Le fruit de V myrtillus contient de faccedilon preacutedominante de la querceacutetine eacutegalement preacutesent
avec le kaempfeacuterol dans les feuilles Cependant leur proportion est plus importante dans les
feuilles rouges que dans les feuilles vertes car les radiations solaires augmentent leur quantiteacute
(on peut supposer un rocircle dans la photoprotection) (58)
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans Vaccinium myrtillus
Les stilbegravenes sont un groupe de composants qui inclut notamment le resveacuteratrol retrouveacute
initialement dans les grappes de raisin De petites quantiteacutes de trans-resveacuteratrol ont eacuteteacute
retrouveacutees dans les baies et notamment dans la myrtille (de lrsquoordre de 678 microgg) Cette plante
contient eacutegalement de petites quantiteacutes de caroteacutenoiumldes (58)
Autres ces composeacutes pheacutenoliques la myrtille est eacutegalement constitueacutee drsquoun ensemble de
micro- et macronutriments reacutepertorieacute dans la table de composition nutritionnelle des aliments
du Ciqual (centre drsquoinformation sur la qualiteacute des aliments) 2008 de lrsquoAfssa (71) (Annexe I)
36
Troisiegraveme partie
Inteacuterecircts theacuterapeutiques
de Vaccinium myrtillus L
37
En Europe les baies et les feuilles de myrtille ont largement eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine
populaire les baies pour leurs proprieacuteteacutes astringentes toniques et antiseptiques dans le
traitement de la diarrheacutee la dysenterie (maladie infectieuse du cocirclon) les heacutemorroiumldes les
inflammations gastro-intestinales et les infections buccales (stomatites aphtes muguet des
enfants) Elles sont eacutegalement utiliseacutees pour les deacutesordres urinaires Quant aux feuilles elles
eacutetaient particuliegraverement utiliseacutees dans le diabegravete gracircce agrave leurs proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
En application locale une infusion ou une deacutecoction de feuilles de myrtilles eacutetaient utiliseacutees
lors drsquoinflammations oculaires buccales drsquoinfections cutaneacutees et dans les brucirclures
Agrave partir du XVIIIegraveme
des herboristes utilisaient la baie de myrtille dans des preacuteparations pour
traiter certaines maladies intestinales incluant la fiegravevre typhoiumlde elle eacutetait aussi utiliseacutee dans
les infections buccales cutaneacutees urinaires dans la goutte et le rhumatisme (43) Les usages
valideacutes par la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la Commission E seront
deacuteveloppeacutes dans la derniegravere partie de cette thegravese
La myrtille inteacuteresse encore actuellement les scientifiques et fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes
in vitro et in vivo elle est aussi preacutesente dans quelques eacutetudes cliniques Certaines de ces
eacutetudes seront reacutepertorieacutees dans les chapitres qui vont suivre
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire
En 1990 Morazzoni et coll (44) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vivo et in vitro drsquoun complexe
drsquoanthocyanosides de V myrtillus dont le nom deacuteposeacute est Myrtocyanreg
(contenant environ
38 drsquoanthocyanosides) sur lrsquoactiviteacute plaquettaire en comparaison avec drsquoautres anti-
agreacutegants plaquettaires comme lrsquoacide aceacutetylsalicylique le dipyridamole et la ticlopidine
Lrsquoeacutetude in vitro sur plasma de lapin montre un effet inhibiteur de V myrtillus sur lrsquoagreacutegation
plaquettaire induite par lrsquoadeacutenosine diphosphate (ADP) le collagegravene et lrsquoarachidonate de
sodium (sel drsquoacide arachidonique) cette inhibition est fonction de la concentration en
anthocynosides Cette activiteacute est comparable agrave celle du dipyridamole mais est moins efficace
que celle de lrsquoacide aceacutetylsalicylique Toutefois les anthocyanosides de la myrtille et le
dipyridamole sont tous les deux efficaces pour inhiber lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par
lrsquoADP exogegravene alors que lrsquoacide aceacutetylsalicylique nrsquoa pas montreacute drsquoactiviteacute Lrsquoeffet anti-
agreacutegant plaquettaire des anthocyanosides de V myrtillus perdure apregraves certaines
manipulations chimiques et physiques comme lrsquoeacutebullition pendant cinq minutes le chauffage
38
pendant trente minutes agrave 56degC la digestion agrave la trypsine et lrsquoincubation en preacutesence
drsquoadeacutenosine phosphate
Lrsquoaction in vitro des anthocyanosides de V myrtillus sur la circulation sanguine chez le rat
montre une inhibition de lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP de maniegravere dose-
deacutependante et par voie arteacuterielle
In vivo lrsquoadministration orale du complexe anthocyanosidique de V myrtillus agrave une
concentration variant de 5 agrave 400 mgkg chez le rat montre une augmentation du temps de
saignement Cette activiteacute du complexe perdure pendant 24 heures (mecircme observation avec
lrsquoassociation acide aceacutetylsalicylique-dipyridamole) et le temps de saignement retourne agrave des
valeurs normales apregraves 48 heures Par contre cette augmentation du temps de saignement nrsquoa
pas donneacute drsquoeffet ni sur lrsquoheacutematocrite ni sur les voies intrinsegraveques et extrinsegraveques de la
coagulation sanguine
Lrsquoadministration orale de 400 mgkg du complexe anthocyanosidique de myrtille agrave des souris
deux heures avant lrsquoeacutetude diminue lrsquoadheacutesion plaquettaire cette action eacutetant similaire agrave celle
observeacutee avec 100 mgkg de ticlopidine administreacutes dans les mecircmes conditions
expeacuterimentales
Morazzoni et coll (44) ont eacutegalement eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vitro drsquoun produit composeacute des trois
principaux anthocyanosides (malvidine 3-O-glucoside cyanidine 3-O-glucoside et
delphinidine 3-O-glucoside) trouveacutes dans lrsquoextrait Myrtocyanreg
afin de comprendre leur
impact sur lrsquoeffet anti-agreacutegant Ce meacutelange montre la mecircme activiteacute inhibitrice sur
lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP le collagegravene et lrsquoarachidonate de sodium que
lrsquoextrait Myrtocyanreg
Notons que les anthocyanosides du produit reconstitueacute sont retrouveacutes
avec le mecircme ratio que ceux de lrsquoextrait
Une eacutetude clinique incluant 30 patients en bonne santeacute avec une agreacutegation plaquettaire
normale a deacutemontreacute la capaciteacute drsquoanthocyanosides de myrtille Myrtocyanreg
administreacute
pendant 30 et 60 jours agrave la dose de 480 mgjour seul ou en association avec lrsquoacide ascorbique
(3 gjour) agrave reacuteduire lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par le collagegravene ou lrsquoADP La meilleure
activiteacute est deacutetenue par Myrtocyanreg
seul ou associeacute agrave lrsquoacide ascorbique compareacutee agrave la
vitamine C seule (5)
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus riche en anthocyanosides a montreacute une forte inhibition
de lrsquoagreacutegation plaquettaire dans des expeacuteriences in vivo et in vitro sans interfeacuterer avec les
facteurs plasmatiques Lrsquoactiviteacute des trois principaux anthocyanosides de lrsquoextrait Myrtocyanreg
a permis de mettre en eacutevidence leur forte implication dans lrsquoeffet anti-agreacutegant plaquettaire
De plus lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans lrsquoinhibition plaquettaire est
39
lrsquoaugmentation des niveaux drsquoadeacutenosine monophosphate cyclique (AMP cyclique) soit par
stimulation de lrsquoadeacutenylate cyclase soit par inhibition de lrsquoAMP cyclique-phosphodiesteacuterase
Or il a eacuteteacute observeacute que les aglycones de lrsquoextrait Myrtocyanreg
sont des inhibiteurs potentiels
de lrsquoAMP cyclique- phosphodiesteacuterase de plusieurs tissus Ce meacutecanisme nrsquoest pas le seul car
un autre a eacuteteacute proposeacute il concernerait les anthocyanidines (principalement la delphinidine et
la cyanidine) qui affecteraient les fonctions plaquettaires par leur action antioxydante cette
action se ferait en interfeacuterant avec les processus membranaires cellulaires incluant les eacutetapes
initiales plaquettaires et la production des prostaglandines des cellules endotheacuteliales
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires
Les anthocyanosides de V myrtillus (Myrtocyanreg
) sont couramment utiliseacutes comme agents
vasoprotecteurs inhibant lrsquoagreacutegation plaquettaire et la formation de thrombus De plus il a
eacuteteacute montreacute que les anthocyanosides de myrtille administreacutes per os (100 mgkg pc) reacuteduisent
la reacuteponse contractile du muscle lisse vasculaire et montrent une activiteacute prostacycline-like
(PGI2-like) (45) Cette eacutetude est en accord avec celle de Bettini et coll (9) qui ont montreacute que
les anthocyanosides de V myrtillus ont un effet relaxant in vitro pouvant ecirctre meacutedieacute par la
stimulation de la synthegravese de prostaglandines vasodilatatrices dans les vaisseaux sanguins
En conclusion agrave lrsquoinverse de lrsquoacide aceacutetylsalicylique qui in vivo reacuteduit la production
arteacuterielle de PGI2 en agissant comme un inhibiteur de la synthegravese des prostaglandines les
anthocyanosides de V myrtillus stimulent la production drsquoune substance PGI2-like par le tissu
vasculaire
Les anthocyanosides de myrtille comme drsquoautres bioflavonoiumldes srsquoopposent agrave la contraction
de plusieurs types de muscles lisses en reacuteponse agrave des agents varieacutes comme lrsquoangiotensine II la
seacuterotonine le baryum lrsquohistamine ou lrsquoaceacutetylcholine En effet lrsquoaceacutetylcholine agrave des
concentrations variant de 1 agrave 2 ngml induit une relaxation dans toutes les preacuteparations alors
qursquoagrave hautes concentrations elle induit une contraction (9)
Bettini et coll (9) ont rechercheacute eacutegalement lrsquoeffet vasodilatateur du complexe dans les
preacuteparations traiteacutees avec du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration du facteur
relaxant deacuteriveacute de lrsquoendotheacutelium (EDRF ou endothelium-derived relaxing factor) qui est une
substance vasodilatatrice
Le Myrtocyanreg agrave une concentration entre 50 et 200 microgml reacuteduit la reacuteponse contractile des
artegraveres coronaires agrave lrsquoaceacutetylcholine cette activiteacute est drsquoautant plus marqueacutee lorsque lrsquoacide
ascorbique est ajouteacute (100-300 microgml) Mais cet effet est diminueacute en preacutesence drsquoindomeacutetacine
ou drsquoaceacutetylsalicylate de lysine connus pour ecirctre des inhibiteurs de la cyclo-oxygeacutenase A des
40
concentrations entre 1 et 2 microgml ces deux substances nrsquoaffectent pas la diminution du tonus
induite par Myrtocyanreg alors qursquoagrave des concentrations plus eacuteleveacutees elles le reacuteduisent sans
toutefois lrsquoabolir complegravetement mecircme aux plus fortes concentrations
Une autre expeacuterience de cette eacutetude consiste agrave traiter les segments des artegraveres coronaires avec
du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration de lrsquoEDRF Selon la concentration le
bleu de meacutethylegravene a plusieurs effets entre 1 et 8 microgml il ne modifie pas le tonus des
preacuteparations entre 8 et 18 microgml il ne provoque qursquoune lente augmentation du tonus de
plusieurs preacuteparations alors qursquoentre 18 et 24 microgml il induit une reacuteelle augmentation du
tonus des artegraveres coronaires suivie drsquoune relaxation assez marqueacutee Lrsquoeffet des
anthocyanosides de Vaccinum myrtillus a eacuteteacute eacutetudieacute apregraves disparition de lrsquoeffet du bleu de
meacutethylegravene son effet relaxant perdure partiellement malgreacute le preacute-traitement au bleu de
meacutethylegravene
En conclusion lrsquoeffet vasodilatateur de Myrtocyanreg
deacutepend agrave la fois de la libeacuteration des
prostacyclines mais aussi drsquoune faciliteacute agrave libeacuterer lrsquoEDRF les prostacyclines et lrsquoEDRF sont
probablement les meacutediateurs fonctionnels des anthocyanosides de V myrtillus
2 Activiteacute vasoprotectrice
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique
Une preacuteparation drsquoanthocyanosides de V myrtillus eacutequivalant agrave 25 drsquoanthocyanosides
administreacutee par voie intrapeacuteritoneacuteale ou per os agrave des lapins montre une reacuteduction de la
permeacuteabiliteacute capillaire de la peau (augmentant avec le temps) preacutealablement stimuleacutee par le
chloroforme lrsquohistamine ou la bradykinine (36)
Jonadet et coll (29) ont compareacute sur des rats lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides
extraits de Vitis vinifera L de V myrtillus (Difrarelreg
) et de Pinus maritimus (appeleacute
maintenant Pinus pinaster Aiton) Ainsi lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides est
par ordre deacutecroissant la suivante anthocyanosides de Vitis vinifera gt anthocyanosides de V
myrtillus gt proanthocyanosides de Pinus maritimus Les auteurs soulignent que les
anthocyanosides agissent agrave travers une activiteacute anti-proteacuteasique deacutemontreacutee in vitro En effet
ils ont montreacute que les anthocyanosides des extraits preacutealablement citeacutes possegravedent des activiteacutes
inhibitrices vis-agrave-vis drsquoenzymes proteacuteolytiques comme lrsquoeacutelastase laquelle peut intervenir dans
la deacutegradation du tissu conjonctif des fibres eacutelastiques et jouerait un rocircle dans des affections
pathologiques comme lrsquoatheacuteroscleacuterose lrsquoemphysegraveme pulmonaire et lrsquoarthrite rhumatoiumlde Les
anthocyanosides apportent cette activiteacute anti-proteacuteasique en inhibant la libeacuteration des peptides
41
vasoactifs En effet lrsquoune des causes de lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire est
lrsquointervention de meacutediateurs chimiques comme lrsquohistamine la 5-hydroxytryptamine et les
kinines Enfin Jonadet et coll (29) ont reporteacute une activiteacute anti-trypsique et anti-
chymotrypsique (proteacuteases digestives) des substances pharmacologiques des extraits eacutetudieacutes
22 Action sur la reacutesistance capillaire
Lietti et coll (36) ont deacutemontreacute dans une expeacuterience lrsquointeacuterecirct des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus sur la reacutesistance vasculaire Pour cela ils les administrent par voie
intrapeacuteritoneacuteale agrave des rats preacutealablement alimenteacutes pendant 4 semaines avec une alimentation
deacuteficitaire en facteur P induisant ainsi une fragiliteacute capillaire Apregraves mesure agrave plusieurs
heures de la reacutesistance capillaire les reacutesultats montrent une eacuteleacutevation remarquable de la
reacutesistance capillaire de la peau induite par les anthocyanosides de V myrtillus Lrsquoactiviteacute est
maximale 4 heures apregraves le traitement et ne change pas apregraves 6 heures Cette activiteacute est
compareacutee avec celle de la rutine (substance de la famille des bioflavonoiumldes) laquelle montre
un effet comparable agrave 200 mgkg mais qui agrave 100 mgkg nrsquoest presque plus efficace
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Lietti et coll (36) ont montreacute que lrsquoadministration
des anthocyanosides de V myrtillus dans la patte de rats par voie intraveineuse et par voie
orale respectivement 15 et 60 minutes preacuteceacutedant lrsquoinjection de carrageacutenine (substance
induisant un œdegraveme) entraicircne une diminution de lrsquoœdegraveme formeacutee de maniegravere dose-
deacutependante En effet lrsquoutilisation de 200 mgkg de preacuteparation est plus efficace que 50 mgkg
sur le volume de lrsquoœdegraveme La dose de 200 mgkg permet une reacuteduction de lrsquoœdegraveme agrave 45
Lrsquoapplication topique de la preacuteparation 60 secondes suivant lrsquoinjection de carrageacutenine induit
eacutegalement une reacuteduction du volume de lrsquoœdegraveme agrave 39 Cette eacutetude montre lrsquoaction anti-
inflammatoire de V myrtillus
Les eacutetudes in vivo reacutealiseacutees sur des animaux montrent que les anthocyanosides de V myrtillus
sont vasoprotecteurs ils inhibent lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire augmentent la
reacutesistance vasculaire et reacuteduisent le volume de lrsquoœdegraveme de maniegravere dose-deacutependante et ses
activiteacutes perdurent dans le temps De plus ils sont plus efficaces que la rutine ou la
meacutepyramine (substance antiseacuterotoninergique et antihistaminergique) Enfin les
anthocyanidines restent longtemps dans les tissus de la peau riche en collagegravene et en
mucopolysaccharides Crsquoest pourquoi il serait inteacuteressant de mettre en place des expeacuteriences
42
pour eacutetudier la relation entre ces substances et les anthocyanosides afin de voir si ce lien
pourrait expliquer lrsquoactiviteacute pharmacologique exerceacutee sur les vaisseaux sanguins (36)
24 Action antiatheacuterogegravenique
En 2009 une eacutetude meneacutee par Mauray et coll (41) a deacutemontreacute qursquoune suppleacutementation
alimentaire avec des extraits de V myrtillus limitait la progression des leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques dans un modegravele de souris deacuteficitaire en apolipoproteacuteine E Lrsquoaction
inhibitrice du deacuteveloppement de la plaque atheacuteromateuse est indeacutependante des modifications
du statut antioxydant plasmatique des marqueurs biologiques du stress oxydant et du profil
lipidique suggeacuterant lrsquoimplication drsquoautres meacutecanismes drsquoactions (peut-ecirctre lrsquoaction anti-
inflammatoire) De plus des deux extraits utiliseacutes (lrsquoun riche en anthocyanosides extraits de
myrtilles non traiteacutees et le deuxiegraveme extraits de myrtilles fermenteacutees par des levures) la
meilleure activiteacute antiatheacuterogegravene est deacutetenue par lrsquoextrait de myrtilles fermenteacutees suggeacuterant la
formation par la fermentation de nouveaux composeacutes avec des proprieacuteteacutes beacuteneacutefiques pour la
santeacute les pigments polymeacuteriques deacuteriveacutes des anthocyanosides atteacutenueraient mieux les leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques que les anthocyanosides de lrsquoextrait non traiteacute En effet lors de la
fermentation les anthocyanosides se condensent avec drsquoautres composeacutes preacutesents dans le fruit
de la myrtille Il reste alors agrave deacuteterminer les composeacutes responsables de lrsquoeffet observeacute et les
meacutecanismes drsquoaction impliqueacutes
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice
Des reacutesultats pharmacologiques prometteurs des extraits de fruits de V myrtillus issus
drsquoeacutetudes cliniques encouragent leur utilisation chez lrsquohomme dans le traitement des maladies
vasculaires peacuteripheacuteriques pouvant associer fragiliteacute capillaire alteacuteration de la permeacuteabiliteacute et
insuffisances veineuses chroniques des membres infeacuterieurs Drsquoautres eacutetudes cliniques ont
montreacute lrsquoefficaciteacute de la myrtille dans les symptocircmes cliniques post-opeacuteratoires
Ainsi les anthocyanosides de V myrtillus (480 mg par voie orale pendant 30 jours) ont
montreacute leur capaciteacute agrave diminuer les symptocircmes subjectifs (douleur parestheacutesiehellip) et objectifs
(œdegraveme des membres pheacutenomegravenes dyschromiques de la peauhellip) de patients atteints du
syndrome variqueux des membres infeacuterieurs tout comme les patients souffrant de fragiliteacute
capillaire ougrave une administration orale drsquoanthocyanosides de V myrtillus (160-800 mgjour)
reacuteduit les symptocircmes cliniques drsquoune reacutesistance capillaire diminueacutee (peacuteteacutechies contusion
sang feacutecal occulte) (43)
43
Lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille Myrtocyanreg (480 mgjour pendant 30 agrave 180 jours) a eacuteteacute
deacutemontreacutee dans des eacutetudes porteacutees sur des patients diabeacutetiques dyslipideacutemiques souffrant de
maladies secondaires agrave une stase des membres infeacuterieurs comme le syndrome preacute-variqueux
les varices essentielles le syndrome post-phleacutebitique et plusieurs maladies vasculaires
atheacuteroscleacuterotiques (43) Une eacutetude double-aveugle et controcircleacutee par placebo incluant 47
patients atteints de deacutesordres vasculaires drsquoorigine varieacutee a deacutemontreacute la capaciteacute de
Myrtocyanreg agrave reacuteduire les symptocircmes subjectifs et objectifs de la pathologie (diminution de la
douleur de la parestheacutesie de lrsquoœdegraveme et de la mobilisation des extreacutemiteacutes des doigts chez les
patients avec syndrome de Raynaud) Une eacutetude meneacutee sur 568 patients souffrants
drsquoinsuffisance veineuse des membres infeacuterieurs a montreacute la capaciteacute des anthocyanosides agrave
faire disparaitre les symptocircmes et agrave ameacuteliorer la microcirculation et le drainage lymphatique
(43)
Lrsquoefficaciteacute de la myrtille (320 mgjour pendant 60 agrave 90 jours) a mecircme eacuteteacute deacutemontreacutee chez 54
femmes enceintes souffrant de phleacutebite secondaire agrave stase veineuse (diminution de la douleur
de lrsquoœdegraveme de la fragiliteacute capillairehellip) et des patients avec bronchite chronique et
asthmatique (reacuteduction par lrsquoextrait de V myrtillus agrave 480 mgjour pendant 10 agrave 30 jours des
modifications microcirculatoires induites par la corticotheacuterapie) (43)
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA)
Pour rappel lrsquoECA (dipeptidylcarboxypeptidase) est une enzyme impliqueacutee dans le systegraveme
reacutenine-angiotensine (lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans la reacutegulation de la pression
arteacuterielle) permettant la conversion de lrsquoangiotensine I inactive en angiotensine II active Cette
derniegravere est capable drsquoaugmenter la pression sanguine et la pression de perfusion reacutenale les
inhibiteurs de lrsquoECA (IEC) constituent alors la premiegravere ligne de traitement pour
lrsquohypertension arteacuterielle et lrsquoinsuffisance cardiaque Les deux sites actifs de lrsquoACE
contiennent un atome de Zn2+
et les IEC sont capables de se lier agrave cet atome (47)
Personn et coll (47) ont rapporteacute dans une eacutetude in vitro la proprieacuteteacute drsquoun extrait de V
myrtillus agrave inhiber lrsquoECA peut-ecirctre par sa capaciteacute agrave cheacutelater des ions meacutetaux comme Zn2+
ou
Fe2+
cette inhibition eacutetant plus forte que les anthocyanidines combineacutees ou seacutepareacutees
deacutemontre lrsquoimplication drsquoautres composeacutes de la plante dans cette action En effet V myrtillus
ne contient pas seulement des anthocyanosides et anthocyanidines mais aussi de la querceacutetine
(flavonol) du stilbegravene resveacuteratrol des acides feacuterulique et coumarique Crsquoest la composition
speacutecifique de la plante qui semble ecirctre agrave lrsquoorigine de lrsquoeffet observeacute
44
Par conseacutequent le lien entre V myrtillus et lrsquoECA pourrait expliquer les effets
pharmacologiques de la plante sur la circulation cette plante pouvant ecirctre alors utiliseacutee en
preacutevention des maladies cardiovasculaires
5 Action sur lrsquoangiogenegravese
Lrsquoangiogenegravese se deacutefinit comme la formation de nouveaux vaisseaux sanguins agrave partir de
vaisseaux preacuteexistants (neacuteovascularisation) Elle est indispensable dans de nombreux
processus physiologiques comme le deacuteveloppement embryonnaire lrsquoimplantation du placenta
mais peut aussi contribuer agrave des processus pathologiques comme la croissance des tumeurs et
le deacuteveloppement des meacutetastases Lrsquoangiogenegravese se fait par plusieurs eacutetapes qui se trouvent
ecirctre les mecircmes dans lrsquoensemble des processus
- activation des cellules endotheacuteliales
- deacutegradation de la membrane basale et de la matrice extra-cellulaire
- migration orienteacutee des cellules endotheacuteliales
- prolifeacuteration cellulaire
- diffeacuterenciation des cellules endotheacuteliales en une structure de type capillaire pour
former une structure vasculaire permettant le deacuteveloppement des tissus
Lrsquoangiogenegravese est controcircleacutee par plusieurs facteurs inducteurs ou inhibiteurs dont le facteur de
croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire (VEGF ou vascular endothelial growth factor)
reacutegulateur cleacute de lrsquoangiogenegravese (73)
En 2007 Matsunaga et coll (40) ont eacutetudieacute in vitro lrsquoaction de V myrtillus sur lrsquoangiogenegravese
plus preacuteciseacutement sur la formation des tubules vasculaires la prolifeacuteration et la migration des
cellules ainsi que leur action sur la phosphorylation de proteacuteines kinases comme ERK 12
(laquo extra-cellular signal-regulated kinase raquo ou kinase reacuteguleacutee par le signal extra-cellulaire)
phospholipase Cγ et Akt (constitueacutes de trois enzymes appartenant agrave la famille des proteacuteines
kinases) induite par le VEGF Lrsquoeacutetude deacutemontre les effets inhibiteurs des extraits de myrtille
sur les paramegravetres de lrsquoangiogenegravese sur des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales
humaines co-cultiveacutees avec des fibroblastes Ainsi entre 1 et 30 microgml-1
lrsquoextrait de
Vaccinum myrtillus inhibe significativement la surface des tubules vasculaires la longueur
lrsquoenchevecirctrement des tubules et le nombre de reacuteseaux formeacutes A 3 microgml-1
ou plus lrsquoextrait
reacuteduit lrsquoensemble des paramegravetres de lrsquoangiogenegravese
Lrsquoextrait inhibe la prolifeacuteration (inhibition significative agrave 3 microgml-1
) et la migration
(inhibition significative agrave 10 et 30 microgml-1
) des cellules induites par VEGF-A de maniegravere
dose-deacutependante ceci ne se voyant qursquoen preacutesence du facteur de croissance
45
La phosphorylation des proteacuteines kinases comme ERK 12 est important dans la prolifeacuteration
des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales humaines et celle de Akt est une eacutetape
importante dans la prolifeacuteration et la migration de ces cellules
Les auteurs deacutemontrent la capaciteacute de V myrtillus agrave inhiber lrsquoaugmentation de la
phosphorylation de ces deux proteacuteines kinases mais pas la phosphorylation de la PLCγ
indiquant que lrsquoextrait agit en aval de celle-ci dans la cascade de signalisation induite par le
VEGF
Lrsquoeacutetude in vivo mise en place par Matsunaga et coll (39) chez la souris a permis de montrer
lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoextrait de V myrtillus dans la formation de reacuteseaux neacuteovasculaires dans
la reacutetinopathie induite par oxygegravene
II Action de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes
Un radical libre est une espegravece chimique qui possegravede un eacutelectron ceacutelibataire sur sa couche
peacuteripheacuterique Les radicaux libres qui interviennent dans le stress oxydant ont un eacutelectron
ceacutelibataire centreacute sur un atome drsquooxygegravene On les nomme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
(ERO) Plusieurs ERO existent comme le radical superoxyde le radical perhydroxyle (forme
protoneacutee du superoxyde) le radical hydroxyle le radical peroxyle et le radical alkoxyle Les
radicaux ne sont pas seulement formeacutes au cours des pheacutenomegravenes de stress oxydant mais
eacutegalement lors du meacutetabolisme normal de lrsquooxygegravene in vivo mecircme si ils ne sont geacuteneacutereacutes
qursquoen faible quantiteacute En effet crsquoest au niveau de la chaine respiratoire de la mitochondrie ougrave
85 de lrsquooxygegravene sont meacutetaboliseacutes que se produit la reacuteduction complegravete par 4 eacutelectrons de la
moleacutecule drsquoO2 conduisant agrave la formation drsquoeau La reacuteduction de la moleacutecule ne peut se faire
que par lrsquoenchainement de plusieurs eacutetapes donnant naissance agrave des intermeacutediaires reacuteduits de
lrsquooxygegravene La reacuteduction monoeacutelectronique de lrsquooxygegravene consommeacute au niveau
mitochondriale fournit lrsquoanion superoxyde (O2-) qui est une espegravece toxique Mais des
enzymes antioxydantes comme les superoxydes dismutases vont reacuteguler lrsquoanion superoxyde
en catalysant leur dismutation et en produisant le peroxyde drsquohydrogegravene (H2O2) Ce dernier
nrsquoest pas un radical libre mais une moleacutecule posseacutedant tous ses eacutelectrons apparieacutes Cependant
dans des reacuteactions in vivo comme la reacuteaction de Fenton et en preacutesence de cations meacutetalliques
comme Fe2+
ou Cu+ le H2O2 devient toxique en donnant les radicaux libres les plus neacutefastes
du stress oxydant que sont les radicaux hydroxyles (OH) De mecircme que le radical
superoxyde le peroxyde drsquohydrogegravene est reacuteguleacute in vivo par des systegravemes antioxydants comme
46
la catalase qui acceacutelegravere sa dismutation ou la glutathion peroxydase qui catalyse sa reacuteduction
par le glutathion
Ainsi le radical O2- le H2O2 et le radical OH forment les ERO (beaucoup plus reacuteactives que
lrsquooxygegravene) Cependant drsquoautres espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene existent comme les radicaux
peroxyles (RO2) les hydroperoxydes (RO2H) et les radicaux alkoxyles (RO)
Ces ERO tregraves reacuteactifs peuvent endommager les proteacuteines les lipides les glucides et les
acides nucleacuteiques par des reacuteactions drsquooxydation A cocircteacute des ERO il existe le monoxyde
drsquoazote radicalaire NO pouvant avoir des effets deacuteleacutetegraveres en reacuteagissant lors drsquoun stress
oxydant avec lrsquoO2-
pour former le peroxynitrite (ONOO-) tregraves reacuteactif et capable
drsquoendommager les proteacuteines les lipides et les acides nucleacuteiques On parle alors de stress
nitrosant
Crsquoest pourquoi il existe des systegravemes de deacutefense dans lrsquoorganisme (antioxydants) comme les
systegravemes de deacutefense enzymatique (superoxyde dismutase catalase glutathion
peroxydaseshellip) Toutefois le stress oxydant peut ecirctre important et les systegravemes de deacutefenses
deacutepasseacutes drsquoougrave la survenue ou lrsquoaggravation de pathologies comme lrsquoatheacuteroscleacuterose le diabegravete
sucreacute lrsquoischeacutemie ceacutereacutebrale le cancerhellip(21)
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides
Les anthocyanosides comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment sont des colorants
naturellement preacutesents dans les fleurs les fruits (particuliegraverement dans les baies) et les
leacutegumes Ce sont des pigments responsables de la couleur comme lrsquoorange le rouge le
bleuhellip Ils peuvent jouer plusieurs rocircles (attirer les insectes pour la pollinisation et la
dispersion des graines ou contribuer agrave la reacutesistance des plantes vis-agrave-vis drsquoattaques
exteacuterieures) Pour rappel les anthocyanosides sont des glycosides ou des acylglycosides des
anthocyanidines (les formes aglycones) Ils ont une structure de base flavylium et des
substitutions hydroxyles ou meacutethoxyles De plus ils sont tous O-glycosyleacutes avec diffeacuterents
sucres dont la preacutevalence est dans lrsquoordre deacutecroissant le glucose le rhamnose le xylose le
galactose lrsquoarabinose et le fructose Les anthocyanosides les plus preacutedominants sont des 3- ou
35-glycosyleacutes Quand le nombre de sucre augmente on observe une alternance sucre et
liaisons laquo acyl raquo De nombreuses eacutetudes ont reporteacute les effets positifs des anthocyanosides
dont certaines seront deacutecrites dans cette thegravese Certains de leurs effets sont attribueacutes agrave leurs
proprieacuteteacutes antioxydantes (64)
47
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma
En 2006 Talaveacutera et coll (59) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus (Antho 50reg
) et leur potentiel antioxydant sur le plasma de rats alimenteacutes
avec Antho 50reg pendant 8 jours Lrsquoeacutetude a montreacute une augmentation du statut antioxydant
plasmatique par cette administration mecircme si la biodisponibiliteacute eacutevalueacutee par excreacutetion
urinaire est basse Mais la chimie des anthocyanosides est complexe ceux-ci pourraient
subir une conversion en formes moins coloreacutees agrave cause de leur instabiliteacute agrave pH physiologique
ou meacutetaboliseacutes en composeacutes encore inconnus Quoiqursquoil en soit une consommation
quotidienne en anthocyanosides a un effet positif sur la capaciteacute antioxydant du plasma
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides
Lrsquoessai ORAC (oxygen radical absorbance capacity ou capaciteacute drsquoabsorbance du radical
oxygegravene) est une mesure standardiseacutee du pouvoir antiradicalaire de substances pures ou en
meacutelange Apregraves extraction des principes actifs dans un meacutelange eau-eacutethanol pour les
moleacutecules hydrosolubles et eacutethanol pour les moleacutecules lipophiles le test par
spectrofluorimeacutetrie consiste en la mesure de la protection exerceacutee par la moleacutecule contre
lrsquooxydation de la fluoresceacuteine par un radical libre et stable le AAPH (22-azobis(2-
amidinopropane) dihydrochloride) Les reacutesultats sont ensuite exprimeacutes par rapport au pouvoir
antioxydant exerceacute par une moleacutecule de reacutefeacuterence le Trolox (eacutequivalent hydrosoluble de la
vitamine E) rameneacute par le poids (en gramme) du produit que lrsquoon teste (75)
La valeur ORAC de la myrtille (446 micromol Troloxg de poids frais) est plus eacuteleveacutee que celle
drsquoautres baies (Figure 16) (58)
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies (58)
48
En 1997 Wang et coll (64) ont eacutevalueacute la capaciteacute antioxydante drsquoanthocyanidines communs
comme les aglycones de delphinidine cyanidine peacutelargonidine malvidine peacuteonidine et leurs
deacuteriveacutes glycosyleacutes Pour cela ils utilisent lrsquoessai ORAC avec geacuteneacuterateur de radical peroxyl
(ROO) Ainsi lrsquoeacutetude deacutemontre que les anthocyanidines posseacutedant la mecircme hydroxylation
sur le cycle A et C et une seule hydroxylation sur le cycle B comme la peacutelargonidine la
malvidine et la peacuteonidine ont une plus basse valeur ORAC que les anthocyanidines
dihydroxyleacutees sur le cycle B (3rsquo 4rsquo-di-OH) comme la cyanidine Les groupes hydroxyls en
position 3rsquo et 4rsquo du cycle B constituent un facteur important dans le pouvant antioxydant
seule la delphinidine eacutechappe agrave cette regravegle (plusieurs hydroxylations sur le cycle B mais
valeur ORAC plus faible) Mecircme si dans certains flavonoiumldes le nombre de groupes
hydroxyls augmentent la capaciteacute antioxydante ceci nrsquoest pas constateacute pour les
anthocyanosides ougrave la peacutelargonidine la cyanidine et la delphinide ayant 4 5 et 6 groupes
hydroxyls respectivement ont des valeurs ORAC respectives de 154 224 et 181 De plus la
glycosylation peut avoir aussi un effet sur lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides Elle
peut diminuer augmenter ou nrsquoavoir aucun effet sur le pouvoir antiradicalaire Par exemple
la 3-glycosylation du cycle C de la cyanidine augmente lrsquoactiviteacute ORAC pour le glucose et le
rhamnose mais la diminue pour le galactose Ainsi lrsquoordre deacutecroissant de lrsquoactiviteacute ORAC
pour la cyanidine est le suivant cyanidine 3-glucoside gt cyanidine 3-rhamnoside gt cyanidine
gt cyanidine 3-galactoside Mecircme lrsquoorientation du groupe hydroxyl affecte le pouvoir
antioxydant contre le radical peroxyl De plus lrsquoefficaciteacute drsquoun antioxydant agrave pieacuteger les
radicaux libres deacutepend aussi de sa capaciteacute agrave former un radical lui-mecircme stable Enfin le
classement des antioxydants par leur valeur ORAC deacutepend aussi de lrsquooxydant du radical libre
utiliseacute et de la meacutethode chimique employeacutee
Ainsi cette eacutetude a montreacute le fort pouvoir antioxydant des anthocyanosides ceux-ci sont
donc de bons candidats pour la preacutevention et le traitement de maladies mecircme si drsquoautres
eacutetudes sont neacutecessaires pour eacutelucider leur impact sur la santeacute humaine
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces
reacuteactives azoteacutees
Lrsquooxyde nitrique ou monoxyde drsquoazote radicalaire (NO) est un meacutediateur important
participant agrave des reacuteactions physiologiques dans les organismes vivants comme le
meacutetabolisme eacutenergeacutetique mitochondrial ou la transduction de signaux Cependant le NO peut
reacuteagir rapidement avec lrsquoO2- et former le peroxynitrite (ONOO
-) un fort oxydant tregraves reacuteactif
pouvant reacuteagir avec des moleacutecules biologiques comme les proteacuteines ou les acides nucleacuteiques
49
LrsquoONOO- participe agrave la formation de nitro-tyrosine dans les proteacuteines et agrave lrsquooxydation des
lipoproteacuteines de basse densiteacute responsable de la formation de plaques drsquoatheacuterome Les
radicaux NO sont geacuteneacutereacutes de faccedilon constitutive dans le cerveau sous des conditions
physiologiques LrsquoONOO- peut ecirctre lrsquoune des causes de deacutesordres ceacutereacutebraux (accidents
vasculaires ceacutereacutebraux ou maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie drsquoAlzheimer) (27)
En 2004 Ichiyanagi et coll (27) ont compareacute les reacuteactiviteacutes de 20 anthocyanosides extraits de
Vaccinum myrtillus contre les espegraveces reacuteactives azoteacutees et oxygeacuteneacutees Lrsquoextrait utiliseacute dans
lrsquoeacutetude est le Bilberon 25reg
(extrait pur sous forme de poudre provenant de V myrtillus)
Comme lrsquoantioxydant de reacutefeacuterence la (+)-cateacutechine les anthocyanosides ont la capaciteacute de
pieacuteger les radicaux libres comme le radical OH mais ont une reacuteactiviteacute 20 fois plus hautes
que celui-ci contre lrsquoO2- De plus la reacuteactiviteacute contre le radical OH nrsquoest pas tregraves sensible agrave
la diversiteacute structurale des anthocyanosides alors qursquoelle lrsquoest pour lrsquoO2- Dans lrsquoeacutetude de
Ichiyanagi et coll (27) lrsquoactiviteacute contre le NO est presque la mecircme entre tous les
anthocyanosides eacutetant tregraves peu sensible aux diversiteacutes structurales (les groupes hydroxyls
libres sur le cycle B de la moleacutecule de base ou lrsquoimportance de la meacutethylation de ces groupes
ne contribueraient pas aux reacuteactiviteacutes des anthocyanosides contre les radicaux NO et OH)
Parmi tous les anthocyanosides ce sont les glycosides (position 3) de delphinidine qui
reacuteagissent le plus contre les radicaux NO et ONOO- (reacuteactiviteacute 6 et 3 fois plus hautes que les
anthocyanosides et la (+)-cateacutechine respectivement) les autres anthocyanosides ayant une
reacuteactiviteacute comparable entre eux contre NO et lrsquoONOO-
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique
Les lipoproteacuteines de basse densiteacute (LDLs ou low-density lipoproteins) oxydeacutees par des
radicaux libres et des pro-oxydants ont plusieurs effets biologiques neacutefastes comme le
deacuteclenchement drsquoeacutevegravenements cellulaires conduisant agrave la formation et la progression de la
plaque atheacuteroscleacutereuse (21)
Laplaud et coll (34) ont eacutetudieacute lrsquoaction antioxydante drsquoun extrait de Vaccinum myrtillus sur
les LDLs Lrsquoeacutetude deacutemontre la diminution de tous les paramegravetres eacutevalueacutes lors de lrsquooxydation
des LDLs par cet extrait En effet la myrtille est capable de ralentir la formation de diegravenes
conjugueacutes de retarder la production de lipoperoxydes et de malondialdeacutehyde (indicateurs de
la peroxydation lipidique) et de diminuer la charge eacutelectrique nette des lipoproteacuteines
Enfin V myrtillus serait plus efficace que lacide ascorbique ou lrsquohydroxytoluegravene butyleacute
(BHT) pour diminuer la peroxydation lipidique des LDLs
50
En 1998 Martiacuten-Aragoacuten et coll (38) ont eacutetudieacute in vitro la capaciteacute drsquoun extrait complexe
drsquoanthocyanoside de V myrtillus agrave inhiber la peroxydation lipidique et agrave pieacuteger les ERO
comme les radicaux OH et O2- Lrsquoeacutetude deacutemontre un effet antiperoxydant de lrsquoextrait
(concentration-deacutependante) la concentration capable drsquoinhiber 50 de la peroxydation
lipidique (IC50 ou concentration inhibitrice 50) eacutetant de 5028 microgmL Sa capaciteacute agrave pieacuteger le
radical OH est faible (deacutetectable agrave partir de 50 microgmL) alors que sa reacuteactiviteacute contre le
radical O2- est forte
(observeacutee agrave toutes les concentrations testeacutees avec une valeur drsquoIC50 de
moins de 25 microgmL)
En conclusion la myrtille pourrait par son activiteacute antiperoxydative contribuer agrave la protection
vis-agrave-vis de lrsquoatheacuteroscleacuterose
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines
Viljanen et coll (63) ont compareacute lrsquoinhibition de lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines entre
les composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus avec ceux drsquoautres baies comme Rubus idaeus L
(framboisier) Vaccinium vitis-idaea L (airelle rouge) et Ribes nigrum L (cassis) Les
composeacutes pheacutenoliques sont repreacutesenteacutes par des anthocyanosides des ellagitanins et des
proanthocyanidines Lrsquoeacutetude deacutemontre que V myrtillus et Rubus idaeus possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante parmi la totaliteacute des baies eacutetudieacutees contre lrsquooxydation des
proteacuteines (cette oxydation eacutetant mesureacutee par la perte de la fluorescence au tryptophane et la
formation de proteacuteines carbonyles) Vaccinium myrtillus et V vitis-idaea possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante vis-agrave-vis de lrsquooxydation des lipides suivis par Ribes nigrum et
Rubus idaeus (cette oxydation est mesureacutee par lrsquoanalyse drsquohexanal de diegravenes conjugueacutes et
drsquohydroperoxydes) Dans la myrtille et le cassis ce sont les anthocyanosides qui contribuent agrave
la majoriteacute de lrsquoeffet antioxydant par inhibition de la formation des proteacuteines carbonyles et
drsquohexanal (hexanaldehyde) Cette activiteacute antioxydante des anthocyanosides et des
proanthocyanidines est dose-deacutependante ce qui nrsquoest pas le cas pour les autres composeacutes
pheacutenoliques Lrsquoeffet antioxydant des composeacutes pheacutenoliques des baies est plus prononceacute
contre lrsquooxydation des lipides particuliegraverement lrsquoinhibition du composeacute hexanal que celle des
proteacuteines Lrsquoinhibition des composeacutes aldeacutehydes des lipides reacutesulte en geacuteneacuteral de lrsquoinhibition
de la formation de deacuteriveacutes carbonyls conseacutequence drsquoune diminution de lrsquointeraction lipide-
proteacuteine
51
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie
Le foie est lrsquoorgane central du meacutetabolisme des composeacutes exogegravenes et endogegravenes il est donc
lrsquoorgane cible de lrsquoaction des xeacutenobiotiques et de leurs meacutetabolites Les eacutetudes sur les
heacutepatocytes sont importantes car ces cellules repreacutesentent 65 du parenchyme du foie et ils
assurent presque toutes les fonctions de cet organe Les heacutepatocytes ont un appareil de Golgi
distinct et de nombreuses mitochondries Malheureusement ils peuvent ecirctre soumis agrave un
stress oxydant Les eacutetudes faites agrave ce jour ont utiliseacute des toxines expeacuterimentales varieacutees afin
drsquoeacutetudier les effets cytoprotecteurs de substances comme lrsquoextrait de V myrtillus Dans les
eacutetudes qui vont suivre deux toxines sont employeacutees Le tert ndashbutyl hydroperoxyde (tBH) et
lrsquoallyl-alcool (2-propen-1-ol) Le tBH peut induire un stress oxydant aux cellules agrave travers des
radicaux (radical hydroxyl peroxyl drsquohydrogegravene et alkoxyl se formant lors de sa
deacutecomposition) Le tBH est la cause de plusieurs dommages comme la rupture des
membranes cellulaires lrsquoinduction de la peroxydation lipidique (responsable
drsquoatheacuteroscleacuterose) la fuite drsquoenzymes agrave travers lrsquoespace extracellulaire lrsquooxydation du
glutathion et lrsquoalkylation de macromoleacutecules cellulaires Lrsquoallyl-alcool (AA) est une toxine
qui agit indirectement agrave travers ses meacutetabolites Il est oxydeacute dans les cellules en acroleacuteine
sous lrsquoaction de lrsquoalcool deacuteshydrogeacutenase cytosolique Lrsquoacroleacuteine est capable de former un
produit avec le glutathion reacuteduit (GSH) et drsquoautres biomoleacutecules Elle induit aussi la
peroxydation lipidique catalyseacutee par les ions Fe(II) (62)
32 Eacutetudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques
En 2007 Valentovaacute et coll (62) ont utiliseacute un extrait de Vaccinum myrtillus (contenant 25
drsquoanthocyanosides) pour eacutevaluer son effet contre une leacutesion oxydative dans des cultures
primaires drsquoheacutepatocytes de rat induite par tBH et AA Jusqursquoagrave preacutesent lrsquoactiviteacute
cytoprotectrice de la myrtille contre une leacutesion oxydative nrsquoeacutetait pas documenteacutee
Lrsquoeacutetude a deacutemontreacute lrsquoactiviteacute protectrice dose-deacutependante de la plante vis-agrave-vis de leacutesions
oxydatives dans ces cultures cellulaires avec une protection maximale de 5116 contre les
dommages occasionneacutes par AA De plus les auteurs ont montreacute la capaciteacute de lrsquoextrait agrave
pieacuteger les radicaux DPPH (dipheacutenylpicrylhydrazyl) et O2-
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus montre des effets cytoprotecteurs agrave 100 et 500 microgmL
dans le test au MTT (sel de teacutetrazolium permettant une numeacuteration rapide des cellules
vivantes) Lrsquoextrait protegravege les heacutepatocytes de la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase et de la
formation des produits de la lipoperoxydation (TBARS repreacutesentant les substances reacuteagissant
52
avec lrsquoacide thiobarbiturique et permettant une premiegravere approche de la peroxydation
lipidique) Lrsquoimportante reacuteactiviteacute dans lrsquoeacutetude est sucircrement due agrave la dureacutee plus importante du
temps drsquoincubation dans le meacutelange reacuteactionnel Les effets observeacutes dans lrsquoeacutetude de
Valentovaacute et coll (62) montre que la capaciteacute cytoprotectrice de V myrtillus vis-agrave-vis des
heacutepatocytes de rat est probablement due aux proprieacuteteacutes antioxydantes de ses constituants
principaux (les anthocyanosides) Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude soutien lrsquoutilisation de la
myrtille dans les compleacutements alimentaires pour preacutevenir les maladies chroniques associeacutees
au stress oxydant
En 2008 Bao et coll (6) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun extrait de V myrtillus
commercialiseacute (contenant 4204 drsquoanthocyanosides) vis-agrave-vis drsquoun dommage du foie de
souris induit par un stress Ce stress est provoqueacute par lrsquoenfermement des souris dans une cage
meacutetallique pendant 18 heures provoquant un dommage heacutepatique avec augmentation des
enzymes heacutepatiques (alanine aminotransfeacuterase) du niveau de malondialdeacutehyde (MDA) du
monoxyde drsquoazote de la xanthine oxydase (XOD) et de la peroxydation lipidique avec un
deacuteseacutequilibre de la balance oxydants-antioxydants et la diminution de GSH de la vitamine C
et de la valeur ORAC Or lrsquoadministration orale de plusieurs dosages drsquoextrait de V
myrtillus pendant 5 jours preacuteceacutedant lrsquoinduction drsquoun stress chez la souris diminue le niveau
drsquoalanine aminotransfeacuterase (agrave 200 mgkgjour drsquoextrait) augmente les niveaux de GSH (50
100 et 200 mgkgjour drsquoextrait) et diminue significativement les niveaux de XOD et de NO
(agrave des concentrations de 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait)
De plus lrsquoextrait de myrtille agrave 200 mgkgjour pourrait supprimer et renverser le niveau de
MDA heacutepatique et plasmatique agrave un niveau comparable agrave celui du groupe controcircle (non
soumis au stress) La mecircme chose est observeacutee avec 200 mgkg jour de vitamine C (autre
antioxydant) Enfin le niveau ORAC est augmenteacute par 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait de V
myrtillus
Bao et coll (6) avaient deacutejagrave mis en eacutevidence lrsquoeffet protecteur du rein drsquoun extrait de V
myrtillus vis-agrave-vis drsquoun stress oxydant induit par KBrO3
En conclusion la myrtille pourrait preacutevenir les dommages heacutepatiques causeacutes par un stress
oxydant gracircce agrave ses proprieacuteteacutes antioxydantes
53
4 Effet de Vaccinim myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives et le
vieillissement
41 Effets sur un stress eacutemotionnel
Il a eacuteteacute mis en eacutevidence que le stress psychologique joue un rocircle significatif dans la
pathogenegravese de cancers et peut ecirctre associeacute avec une augmentation des produits issus de
lrsquooxydation et de leurs dommages sur les tissus
Le stress oxydant participe agrave lrsquoeacutetiologie de maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie
drsquoAlzheimer et la maladie de Parkinson En effet le stress eacutemotionnel peut affecter le systegraveme
nerveux central dans lequel se trouve notamment les neurones dopaminergiques qui
produisent la dopamine un neurotransmetteur du groupe des cateacutecholamines preacutecurseur de la
noradreacutenaline jouant un rocircle fondamentale dans le cerveau (controcircle de la motriciteacute) utiliseacute
en theacuterapeutique pour son action stimulante sur le systegraveme cardiovasculaire Les neurones
dopaminergiques sont localiseacutes dans certaines reacutegions ceacutereacutebrales comme lrsquohypothalamus le
locus niger et les corps strieacutes Ainsi la rupture de la transmission dopaminergique affecte
lrsquoactiviteacute comportementale Une baisse du niveau de dopamine dans certaines reacutegions
ceacutereacutebrales peut induire une perte des certains fonctions cognitives comme la meacutemoire
lrsquoattention la reacutesolution de problegraveme le mouvement la reacuteponse eacutemotionnelle et la capaciteacute
eacutemotionnelle agrave ressentir le plaisir ou la douleur
De plus les ERO induites par un stress sont connues pour ecirctre responsables de la
peroxydation lipidique et de lrsquooxydation des proteacuteines avec formation de proteacuteines
carbonyles Ainsi des eacutetudes ont deacutemontreacute que la modification de proteacuteines intracellulaires
comme certaines enzymes cleacutes et proteacuteines structurales peuvent mener agrave la deacutegeacuteneacuteration
neurofibrillaire des neurones menant agrave la maladie drsquoAlzheimer une autre maladie
neurodeacutegeacuteneacuterative (1) (52)
En 2008 Rahman et coll (52) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun meacutelange
drsquoanthocyanosides de Vaccinum myrtillus administreacute oralement agrave des souris soumis agrave un
stress oxydant ceacutereacutebral provoqueacute par la coupure des moustaches En effet le retrait des
moustaches augmente la formation de proteacuteines carbonyles et induit la peroxydation lipidique
dans le cerveau le cœur le rein et le foie Le niveau des marqueurs de lrsquooxydation diffegraverent
en fonction des reacutegions ceacutereacutebrales De mecircme le niveau de dopamine est alteacutereacute dans le cortex
ceacutereacutebral et le meacutesenceacutephale Les moustaches de souris jouent un rocircle tregraves important dans le
sens et la motriciteacute et la contribution sensorielle est directement lieacutee aux neurones moteurs
54
controcirclant leur activiteacute locomotrice Crsquoest pourquoi le retrait des moustaches a de graves
conseacutequences puisqursquoil affecte lrsquoactiviteacute locomotrice induisant anxieacuteteacute et hyper-locomotion
Ce stress oxydant induit par un stress psychologique augmente les niveaux de marqueurs
biologiques comme les proteacuteines carbonyles et les TBARS dans certains organes et reacutegions
ceacutereacutebrales (cœur reins foie meacutesenceacutephale cortex et ceacutereacutebellum) Or lrsquoadministration des
anthocyanosides de V myrtillus des souris diminue la peroxydation lipidique dans tous les
tissus reacuteduit lrsquooxydation des proteacuteines dans les reins le foie le meacutesenceacutephale et le cortex
ceacutereacutebral de faccedilon notable et diminue eacutegalement les niveaux de proteacuteines carbonyles et de
TBARS
Enfin lrsquoadministration de myrtille supprime les modifications (induites par le stress
psychologique) des niveaux de dopamine et de ses meacutetabolites (ces modifications pouvant
provoquer des maladies deacutegeacuteneacuteratives comme la maladie de Parkinson)
Cependant cette eacutetude ne peut pas conclure sur la capaciteacute des anthocyanosides de V
myrtillus agrave franchir la barriegravere heacutemato-enceacutephalique et agrave y exercer leur action antioxydante
Les principales formes retrouveacutees dans le foie et les reins sont des meacutetabolites meacutethyleacutes des
anthocyanosides et drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour prouver le lien entre ces meacutetabolites
meacutethyleacutes et la neuroprotection observeacutee dans lrsquoeacutetude
En conclusion cette eacutetude suggegravere que les anthocyanosides peuvent ecirctre utiles dans la
protection et le traitement des maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives associeacutees agrave un stress oxydant
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication du stress oxydant
Le dommage oxydant a depuis longtemps eacuteteacute proposeacute pour ecirctre en partie responsable de
plusieurs deacutesordres lieacutes agrave lrsquoacircge De plus plusieurs eacutetudes ont confirmeacute lrsquoaccumulation des
marqueurs biologiques du stress oxydant (augmentation de lrsquooxydation des lipides et des
proteacuteines dans les cerveaux de mammifegraveres acircgeacutes) Les pertes de la fonction ceacutereacutebrale avec le
vieillissement pourraient ecirctre associeacutees agrave une leacutesion oxydante des biomoleacutecules dans certaines
reacutegions ceacutereacutebrales et un niveau augmenteacute de peroxydes lipidiques observeacute dans des reacutegions
du cerveau impliqueacutees dans les fonctions de meacutemoire et drsquoapprentissage De plus les auteurs
ont deacutemontreacute lrsquoassociation des alteacuterations des fonctions ceacutereacutebrales cognitives avec des
modifications du systegraveme cardiovasculaire comme lrsquoaugmentation de la pression sanguine
(impliqueacutee dans lrsquoacceacuteleacuteration du vieillissement des vaisseaux les alteacuterations des fonctions
ceacutereacutebrales et le deacuteveloppement de lrsquoatheacuteroscleacuterose) (32)
Kolosova et coll (32) utilisent pour leur eacutetude deux souches de rats La souche OXYS qui est
une souche aux traits heacuteriteacutes de vieillissement acceacuteleacutereacute et une haute sensitiviteacute au stress
55
oxydant par rapport agrave une autre souche la souche Wistar Les rats OXYS ont une espeacuterance
de vie plus courte et deacuteveloppent plus preacutecocement des deacutesordres pathologiques lieacutes agrave lrsquoacircge
semblables agrave ceux observeacutes chez lrsquohumain comme lrsquoosteacuteoporose lrsquohypertension arteacuterielle
de ce fait le comportement de jeunes rats OXYS est semblable agrave celui des rats Wistar acircgeacutes
Lrsquoobjectif de leur eacutetude eacutetait de veacuterifier srsquoil existe un lien entre le vieillissement ceacutereacutebral et les
marqueurs du stress oxydant chez les rats OXYS pour rechercher lrsquoefficaciteacute drsquoune
suppleacutementation agrave long terme drsquoantioxydants dans la preacutevention de lrsquoapparition de deacuteficits
cognitifs comme les deacuteficits drsquoapprentissage et de meacutemoire
Les diffeacuterents paramegravetres de stress oxydant dans ces deux souches de rats sont eacutevalueacutes
(peroxydation lipidique niveau de proteacuteines carbonyles niveau de MDA activiteacute de
superoxyde dismutase (SOD) de niveau de GSH et quantiteacute drsquoα-tocopheacuterol)
Lrsquoeacutetude deacutemontre qursquoune suppleacutementation agrave long terme avec un extrait de V myrtillus
preacutevient la manifestation exteacuterieure du vieillissement des deux souches de rats (lrsquoextrait
augmente le poids des souris) Chez les rats OXYS lrsquoextrait de myrtille diminue
- la peroxydation lipidique
- lrsquoactiviteacute SOD dans le cerveau (en jouant un rocircle protecteur vis-agrave-vis du stress
oxydant)
- et le niveau de MDA dans le cerveau
La myrtille preacutevient aussi chez les rats OXYS
- les deacuteficits de meacutemoire et drsquoapprentissage plus efficacement que la vitamine E (autre
antioxydant)
- la deacuteteacuterioration de la fonction mitochondriale (autre cause de seacutenescence acceacuteleacutereacutee)
De plus V myrtillus a la capaciteacute de preacutevenir les mutations induites par les ERO lesquels
srsquoaccumulent avec lrsquoacircge dans la mitochondrie menant agrave un dysfonctionnement
mitochondriale Ce mecircme meacutecanisme pourrait ecirctre impliqueacute dans lrsquoeffet positif exerceacute par la
myrtille sur la meacutemoire des rats OXYS Ainsi la preacutevention des deacuteficits cognitifs
comportementaux avec des antioxydants peuvent montrer le rocircle du stress oxydant dans ces
processus mecircme si drsquoautres meacutecanismes peuvent jouer un rocircle dans cette capaciteacute de
preacutevention des composeacutes
En conclusion Vaccinum myrtillus atteacutenue les deacuteficits cognitifs chez les rats OXYS
apportant la preuve du rocircle theacuterapeutique de cette plante Cependant les meacutecanismes par
lesquels cet antioxydant agit pour exercer une neuroprotection in vivo et le reacuteel impact du
stress oxydant et de ses marqueurs biologiques sur les deacuteficits cognitifs des rats OXYS
doivent encore ecirctre eacutetudieacutes
56
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB
51 Effets drsquoune exposition solaire
Une exposition prolongeacutee aux ultraviolets (UV) durant le sport ou drsquoautres activiteacutes est un
facteur de risque de plusieurs maladies de la peau comme le cancer cutaneacute La deacutepleacutetion de la
couche drsquoozone protectrice entraicircne une quantiteacute plus importante des rayons UV atteignant la
surface planeacutetaire et exerccedilant des effets neacutefastes Les UVB sont largement absorbeacutes mais
moins peacuteneacutetrants que les UVA atteignant particuliegraverement la couche cellulaire de lrsquoeacutepiderme
basal Les UVB sont plus geacutenotoxiques et environ 1000 fois plus capables de provoquer un
coup de soleil que les UVA Ainsi le coup de soleil lrsquoeacuterythegraveme et lrsquoœdegraveme sont des
manifestations de lrsquoexposition aux UVB Lrsquoabsorption des photons UVB megravenent agrave des
dislocations de lrsquoADN et agrave la formation de photoproduits dimegraveriques de pyrimidine De plus
ils interagissent directement avec les acides amineacutes aromatiques notamment le tryptophane et
la tyrosine (inclus dans les proteacuteines) pouvant alors alteacuterer les fonctions de celles-ci Les UVB
altegraverent indirectement les macromoleacutecules ils geacutenegraverent la production de radicaux libres
comme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote induisant lrsquooxydation des proteacuteines
des lipides et de lrsquoADN Ces produits oxydeacutes (hydroperoxydes lipidiques proteacuteines
carbonyles et 8-hydroxydeacuteoxyguanosine) sont impliqueacutes dans le deacutebut des cancers cutaneacutes
Les UVB diminuent aussi les antioxydants de la peau responsable drsquoune baisse de la
protection vis-agrave-vis des radicaux libres Ils participent aux pheacutenomegravenes de processus
inflammatoire de la peau incluant une cascade drsquoeacutevegravenements comme lrsquoinfiltration de
leucocytes sanguins inflammatoires (macrophages et neutrophiles) lrsquoaugmentation de la
production des prostaglandines comme conseacutequence de lrsquoaugmentation de la peroxydation
lipidique la libeacuteration du fateur TNFα (tumour necrosis factor alpha ou facteur de neacutecrose
tumoral) le NFκB (nuclear factor κB ou facteur nucleacuteaire κB) des cytokines pro-
inflammatoires comme les interleukines (IL-1α IL-1β IL-6 IL-8 IL-12) qui en retour
augmentent la production des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote Un deacutefaut de
reacuteparation des leacutesions de lrsquoADN et les effets neacutefastes des UVB du soleil sont agrave lrsquoorigine des
cancers cutaneacutes Crsquoest pourquoi des meacutecanismes de protection de la peau ou une atteacutenuation
de la quantiteacute drsquoUVB atteignant et peacuteneacutetrant la peau peuvent ecirctre des strateacutegies efficaces dans
la preacutevention des dommages occasionneacutes par le soleil (57)
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires
Svobodovaacute et coll (57) Ont eacutetudieacute la capaciteacute des fractions pheacutenoliques des fruits de Lonicera
caerulea L (chegravevrefeuille bleu) et de V myrtillus en preacute et post-traitement sur les dommages
57
oxydants des keacuteratinocytes HaCaT humains induits par un simulateur de radiations solaires
(UVB) Plusieurs paramegravetres sont eacutetudieacutes et seuls les reacutesultats concernant V myrtillus sont
rapporteacutes dans cette thegravese Cette plante a plusieurs effets
- elle augmente le nombre de cellules viables
- diminue significativement la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase de maniegravere dose
deacutependante
- augmente de faccedilon dose-deacutependante la prolifeacuteration cellulaire (prolifeacuteration reacuteduite
par les UVB)
- preacutevient la formation et reacuteduit significativement la cassure simple brin de lrsquoADN
- diminue la caspase-3 (meacutediateur de lrsquoexeacutecution de la mort cellulaire apoptotique)
- diminue la caspase-9 de maniegravere dose-deacutependante (meacutediateurs de lrsquoexeacutecution de la
mort cellulaire apoptotique)
- preacutevient la formation des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote avec
eacutelimination excellente en post-traitement
- et diminue de maniegravere dose-deacutependante la production drsquoIL6
Cependant on remarque que cette protection deacutecline leacutegegraverement agrave des concentrations plus
hautes srsquoexpliquant par un effet pro-oxydant des polypheacutenols dans les cellules irradieacutees ougrave la
balance oxydantsantioxydants est deacuteseacutequilibreacutee
En conclusion V myrtillus pourrait ecirctre un bon candidat pour la fabrication de preacuteparations
dermatologiques protectrices agrave large spectre ou dans des preacuteparations apregraves-soleil Pour cela
des eacutetudes futures sont neacutecessaires pour eacutetudier la biodisponibiliteacute des composants exclure
les toxiques eacuteventuels ou les effets photoxiques et confirmer lrsquoeffet photoprotecteur in vivo
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes
Chez lrsquohomme la reacutetine (Figure 17) est une membrane photosensible qui tapisse la face
interne de lrsquoœil elle est constitueacutee de plusieurs types de cellules formant trois couches
superposeacutees qui sont de lrsquoarriegravere vers lrsquoavant de lrsquoœil
- les cellules photoreacuteceptrices constitueacutees de cocircnes et de bacirctonnets
- les cellules bipolaires
- les cellules ganglionnaires
Sa face posteacuterieure est en contact avec la choroiumlde par lrsquointermeacutediaire de lrsquoeacutepitheacutelium
pigmentaire et sa face anteacuterieure avec le corps vitreacute Les cellules de la reacutetine transforment les
58
influx nerveux en impulsions nerveuses qui gagnent les fibres nerveuses du nerf optique
permettant le transport des informations visuelles jusqursquoau cerveau (1)
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme (77)
La reacutetine est situeacutee dans un environnement tregraves oxygeacuteneacute pouvant subir des dommages induits
par le stress oxydant (les radicaux libres peuvent oxyder les lipides des photoreacutecepteurs) (23)
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire
Dutot et coll (23) ont eacutetudieacute les effets cytoprotecteurs drsquoun extrait en poudre de V myrtillus
(contenant 10 de proanthocyanidols et 10 drsquoanthocyanidines) sur le stress oxydant
appliqueacute aux cellules reacutetiniennes humaines dans un systegraveme in vitro Lrsquoextrait de V myrtillus
est incubeacute (005 et 01) pendant 15 minutes ou 24 heures sur une ligneacutee de cellules de
lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute reacutetinien Puis un stress oxydant induit par le tBHP est appliqueacute
pendant une heure sur ces cellules Les diffeacuterents paramegravetres des dommages du stress oxydant
sont eacutevalueacutes comme les modifications du meacutetabolisme cellulaire la formation des ERO la
formation drsquoO2-et lrsquoapoptose mitochondriale
Les reacutesultats sur ces diffeacuterents paramegravetres sont reacutesumeacutes dans les tableaux II agrave V
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
baisse induite par le tBHP Aucun effet cytoprotecteur
Incubation 24 heures Blocage de lrsquoeffet du tBHP sur le meacutetabolisme cellulaire
59
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Une concentration faible drsquoextrait (005) nrsquoa pas drsquoeffet sur une peacuteriode courte drsquoincubation
(15 minutes) par contre crsquoest le cas pour une peacuteriode plus longue (24 heures) cette
concentration est capable drsquoavoir des effets cytoprotecteurs V myrtillus pourrait ecirctre capable
de stimuler les deacutefenses antioxydantes de lrsquoorganisme mais des eacutetudes compleacutementaires sont
neacutecessaires pour confirmer cette hypothegravese
Enfin lrsquoeacutetude a montreacute que lorsque lrsquoextrait diminue le stress oxydant et lrsquoapoptose
mitochondriale elle restaure aussi la viabiliteacute cellulaire Par contre srsquoil nrsquoy a pas drsquoeffet sur le
stress oxydant il nrsquoy en a pas non plus sur la viabiliteacute cellulaire
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge
Lors du vieillissement et dans certaines maladies oculaires (comme la deacutegeacuteneacuterescence
maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge ougrave le stress oxydant est fortement impliqueacute) des pigments
autofluorescents constitueacutes par des deacutepocircts de lipofuchsine (pigment jaune-brun constitueacutee de
deacutebris moleacuteculaires) peuvent srsquoaccumuler dans les cellules eacutepitheacuteliales du pigment reacutetinien
La lipofuchsine peut absorber la lumiegravere bleue et geacuteneacuterer des photoproduits toxiques
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
surproduction drsquoERO Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution du stress oxydant
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
production drsquoO2-
Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Reacuteduction de la production drsquoO2-
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Inhibition significative de
lrsquoapoptose mitochondriale Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution de lrsquoapoptose mitochondriale
60
perturbant le fonctionnement cellulaire crsquoest donc un geacuteneacuterateur de radicaux lieacutes agrave la
lumiegravere Un composant de reacutetinoiumlde majeur de la lipofuchsine est lrsquoA2E (bis reacutetinoiumlde de
pyridinium deacuteriveacute de reacutetinal et de phosphatidyl eacutethanolamine) il contribue agrave
lrsquoautofluorescence de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute agrave lrsquoinhibition de fonctions cellulaires
essentielles au deacuteclenchement de la mort par apoptose des cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute
et agrave lrsquoabsorption de la lumiegravere bleue aggravant les leacutesions cellulaires (79) A2E lors de
lrsquoirradiation par la lumiegravere bleue subit une photooxydation en geacuteneacuterant de lrsquooxygegravene
singulet celui-ci reacuteagit en retour avec le fluorophore geacuteneacuterant des eacutepoxydes au niveau des
doubles liaisons carbone-carbone Les A2E-eacutepoxydes peuvent alors induire de graves leacutesions
agrave lrsquoADN (une des cibles des eacutevegravenements photodynamiques par interaction lumiegravere bleue-
A2E) pouvant srsquoaccumuler avec lrsquoacircge ougrave un deacuteclin des meacutecanismes de reacuteparation des bases
de lrsquoADN oxydeacutees a eacuteteacute reconnu (56)
Les antioxydants pourraient avoir un rocircle important dans la preacutevention des leacutesions oxydatives
sur les macromoleacutecules comme les bases de lrsquoADN et la deacutegeacuteneacuterescence de la maculaire lieacutee agrave
lrsquoacircge (DMLA) Crsquoest pourquoi Vaccinum myrtillus (par ses proprieacuteteacutes antioxydantes) a fait
lrsquoobjet drsquoeacutetudes montrant sa capaciteacute agrave preacutevenir certaines maladies oculaires causes majeurs
de ceacuteciteacute et de deacuteteacuterioration de lrsquoacuiteacute visuelle chez les personnes acircgeacutees
En 2003 Sparrow et coll (56) ont deacutemontreacute dans une eacutetude in vitro la capaciteacute drsquoun extrait
de V myrtillus agrave inhiber lrsquoeacutepoxydation drsquoA2E par capture de lrsquooxygegravene singulet gracircce agrave sa
richesse en anthocyanosides antioxydants
Dans une eacutetude in vivo utilisant une souche de rats avec seacutenescence acceacuteleacutereacutee (rats OXYS)
Fursova et coll (24) ont deacutemontreacute qursquoune alimentation suppleacutementeacutee agrave long terme avec un
extrait de V myrtillus pouvait ecirctre efficace dans la preacutevention de la DMLA et de la cataracte
seacutenile deux maladies dont les dommages ont eacuteteacute attribueacutees aux radicaux libres
La surreacutegulation des proteacuteines de stress est un moyen de protection contre des conditions
deacuteleacutetegraveres comme le stress oxydant Ainsi Milbury et coll (42) ont deacutemontreacute in vitro la
capaciteacute des anthocyanosides et drsquoautres composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus agrave surreacuteguler
les enzymes de deacutefense du stress oxydant comme lrsquohegraveme oxygeacutenase-1 (HO-1) et la glutathion
S-transfeacuterase (GST) dans des cultures de cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmentaire reacutetinien humain
Agrave cocircteacute du stress oxydant des facteurs vasculaires peuvent ecirctre impliqueacutes dans les maladies
oculaires comme le glaucome la DMLA ou la reacutetinopathie diabeacutetique Comme nous lrsquoavons
vu dans le premier chapitre de cette partie Personn et coll (46) ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoun
extrait de V myrtillus agrave inhiber lrsquoECA cet effet pourrait ecirctre une explication aux effets
observeacutes de la plante sur la vision
61
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus
Un stress oxydant peut laquo srsquoattaquer raquo aux neurotransmetteurs entrainant leur oxydation Ainsi
les neurotransmetteurs comme la dopamine et son meacutetabolite neurotoxique la 6-
hydroxydopamine peuvent subir une oxydation geacuteneacuterant H2O2 et des ERO Dans les neurones
et drsquoautres cellules ce stress oxydant peut ecirctre amplifieacute par le relargage du cytochrome c
(composant essentiel de la chaine respiratoire mitochondriale participant au transfert
drsquoeacutelectrons) localiseacute dans la membrane interne de la mitochondrie dans le cytoplasme ce
relargage induit toute une cascade de reacuteactions aboutissant agrave lrsquoactivation de caspases
(proteacuteines directement lieacutees agrave lrsquoapoptose) pouvant ecirctre fortement preacutejudiciable pour les
meacutetabolites de la dopamine La perte de lrsquointeacutegriteacute mitochondriale observeacutee dans des maladies
neurodeacutegeacuteneacuteratives peut contribuer aussi agrave des niveaux relargueacutes de cytochrome c au-dessus
de la normale (68)
Yao et coll (68) ont montreacute in vitro la capaciteacute drsquoune preacuteparation riche en anthocyanosides
composeacutee de V myrtillus V corymbosum et V oxycoccus L et des anthocyanosides purifieacutes agrave
inhiber lrsquooxydation de la 6-hydoxydopamine augmenteacutee par le cytochrome c Parmi les trois
espegraveces eacutetudieacutees les extraits de V myrtillus apparaissent pour ecirctre plus efficaces dans cette
activiteacute que les deux autres espegraveces ou que les anthocyanosides purifieacutes pouvant srsquoexpliquer
par une plus grande richesse en anthocyanosidesanthocyanidines particuliegraverement la
cyanidine et delphinidine La composition en querceacutetine et agrave moindre degreacute en myriceacutetine
nrsquoont pas de rocircle dans lrsquoactiviteacute antioxydante la preacutesence de querceacutetine est mecircme
inversement correacuteleacutee avec lrsquoeffet antioxydant Lrsquoeffet inhibiteur observeacute est principalement ducirc
agrave lrsquoeffet antioxydant des anthocyanosides
Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent la forte activiteacute des anthocyanosides vis-agrave-vis des
reacuteactions neurotoxiques potentielles et suggegraverent lrsquoimportance de mettre au point des eacutetudes in
vivo dans le but de deacutemontrer des effets neuro- et mitochondrio-protecteurs de ces
phytochimiques particuliegraverement dans la maladie de Parkinson et drsquoautres maladies
impliquant un dysfonctionnement mitochondriale
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant un
stress oxydant
Une ischeacutemie-reperfusion entraine de nombreuses alteacuterations microvasculaires comme une
augmentation des leucocytes adheacuterant agrave la paroi des vaisseaux veineux une diminution de la
longueur des capillaires perfuseacutes menant agrave une diminution du nombre de capillaires
62
fonctionnels une perte de lrsquointeacutegriteacute endotheacuteliale une augmentation de la permeacuteabiliteacute
capillaire (relargage de proteacuteases comme lrsquoeacutelastase et la collageacutenase avec formation drsquoœdegraveme)
et des modifications du diamegravetre des arteacuterioles (modification de la balance vosodilatation-
vasoconstriction au profit drsquoune vasoconstriction ) Les leucocytes jouent un rocircle fondamental
dans lrsquoischeacutemie-reperfusion en srsquoaccumulant dans les tissus ils provoquent lrsquoocclusion
intravasculaire ainsi que le relargage de cytokines pro-inflammatoires et des meacutetabolites
deacuteriveacutes de lrsquooxygegravene En effet les ERO ont eacuteteacute fortement impliqueacutees dans ces deacutesordres
microcirculatoires elles altegraverent entre autre lrsquointeacutegriteacute de la paroi des vaisseaux et entrainent
une augmentation de la permeacuteabiliteacute en post-capillaire et dans les veines collectrices de
lrsquoabajoue drsquohamster De plus les ERO provenant des leucocytes ou non peuvent induire une
contraction des arteacuterioles (8)
En 1995 Bertuglia et coll (8) ont eacutetudieacute les effets des anthocyanosides de V myrtillus sur
lrsquoischeacutemie-reperfusion provoqueacutee sur lrsquoabajoue drsquohamster entrainant les deacutesordres
microcirculatoires citeacutes preacuteceacutedemment Lrsquoeacutetude montre qursquoune administration orale
drsquoanthocyanosides de V myrtillus suite agrave ces dommages permet une protection de la paroi des
vaisseaux gracircce agrave leur action antioxydante une reacuteduction du nombre de leucocytes adheacuterant agrave
la paroi veineuse (proteacutegeant les tissus de lrsquoischeacutemie-reperfusion et preacutevenant la formation de
meacutediateurs inflammatoires) une diminution de la permeacuteabiliteacute capillaire par son activiteacute anti-
proteacuteasique la plante peut ecirctre eacutegalement un modulateur important du tonus des arteacuterioles en
controcirclant la freacutequence et lrsquoamplitude la vasomotion (modification du calibre vasculaire)
permettant une ameacutelioration de la perfusion capillaire (inhibition de la vasoconstriction par les
ERO)
Cette eacutetude est importante drsquoune part pour montrer le rocircle des radicaux libres deacuteriveacutes de
lrsquooxygegravene dans les deacutesordres microcirculatoires et drsquoautre part pour deacutemontrer les effets
beacuteneacutefiques de V myrtillus agrave restaurer les diffeacuterents paramegravetres notamment par son action
antioxydante
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer
Wang et coll (65) ont reporteacute les reacutesultats des eacutetudes qui ont permis de mettre en eacutevidence les
activiteacutes anticarcinogeacuteniques des anthocyanosides et des extraits riches en anthocyanosides
dans des modegraveles de cultures cellulaires in vitro et dans des systegravemes in vivo de modegraveles
tumoraux chez lrsquoanimal Lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides est due agrave leur structure
63
pheacutenolique en donnant un eacutelectron aux radicaux ceux-ci devenant stables (eacutelectrons
apparieacutes) En effet les anthocyanosides sont capables comme nous lrsquoavons vu
preacuteceacutedemment de pieacuteger directement les ERO drsquoaugmenter la valeur ORAC des cellules de
stimuler lrsquoexpression de la phase II de deacutetoxification des enzymes de reacuteduire la formation des
sous-produits de lrsquoADN de diminuer la peroxydation lipidique drsquoinhiber la mutagenegravese
induite par des carcinogegravenes ou des toxines et de reacuteduire la prolifeacuteration cellulaire en
modulant les voies de transduction du signal Ils sont capables eacutegalement de cheacutelater les
meacutetaux et de se lier directement aux proteacuteines Lrsquoactiviteacute antioxydante est principalement due
aux groupes hydroxyles des anthocyanosides en position 3 du cycle C et en position 3rsquo 4rsquo et
5rsquo du cycle B de leur structure de base Enfin il a eacuteteacute montreacute que les aglycones
drsquoanthocyanidines ont une activiteacute antioxydante plus importante que leurs homologues
glycosyleacutes et cette activiteacute diminue quand le nombre de sucres augmente
Mecircme si les eacutetudes expeacuterimentales ont deacutemontreacute lrsquoactiviteacute anticancer des anthocyanosides les
eacutetudes eacutepideacutemiologiques nrsquoont pas montreacute lrsquoactiviteacute protectrice de la consommation
drsquoanthocyanosides vis-agrave-vis du risque de cancer humain et leur activiteacute antioxydante reste
encore questionnable De plus les quantiteacutes drsquoanthocyanosides neacutecessaires pour observer un
effet in vitro sont importantes par rapport aux quantiteacutes retrouveacutees dans le plasma humain in
vivo Crsquoest pourquoi des eacutetudes sont neacutecessaires pour deacutevelopper des solutions qui
permettraient drsquoaugmenter lrsquoabsorption des anthocyanosides etou leurs meacutetabolites
permettant ainsi lrsquoutilisation optimale des anthocyanosides dans la preacutevention de cancer chez
lrsquohomme particuliegraverement dans les tissus autres que le tractus gastro-intestinal et la peau
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus
Katsube et coll (31) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute anticarcinogeacutenique dans un systegraveme in vitro de dix
baies comestibles et particuliegraverement celle de V myrtillus Lrsquoactiviteacute de la myrtille est testeacutee
sur deux ligneacutees cellulaires diffeacuterentes les cellules leuceacutemiques humaines HL60 et les
cellules carcinomateuses du cocirclon HCT116 Lrsquoeacutetude deacutemontre que lrsquoextrait de V myrtillus est
le plus efficace parmi les dix extraits eacutethanoliques de baies pour inhiber la croissance de ces
ligneacutees cellulaires Toutes les concentrations testeacutees inhibent la croissance des cellules HL60
lors des deux peacuteriodes drsquoincubation (24 et 48 heures) alors que lrsquoinhibition de la croissance
des HCT116 nrsquoest observeacutee que pour des intervalles speacutecifiques de concentrations De plus
lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus induit des niveaux significatifs drsquoapoptose dans les
cellules HL60 mais pas dans les cellules HCT116
64
Ce sont les anthocyanosides qui sont responsables de lrsquoinhibition de la croissance des cellules
canceacutereuses HL60 et HCT116 induisant eacutegalement lrsquoapoptose des cellules HL60
Les anthocyanosides de V myrtillus plus particuliegraverement les glycosides de delphinidine et
malvidine induisent lrsquoinhibition de la croissance des cellules de la leuceacutemie humaine HL60
par induction de lrsquoapoptose et mecircme si lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus et certains
anthocyanosides inhibent la croissance des cellules carcinomateuses du cocirclon humain
(HCT116) ces cellules sont toutefois moins sensibles agrave lrsquoapoptose que les autres ligneacutees en
se reacutefeacuterant agrave drsquoautres donneacutees on pourrait suggeacuterer un blocage de la voie drsquoinduction de
lrsquoapoptose des cellules HCT116
Lrsquoinhibition de la croissance par les baies nrsquoest toutefois pas speacutecifique aux cellules
canceacutereuses En conclusion une consommation reacuteguliegravere de baies pourrait maintenir des
niveaux drsquoanthocyanosides dans le plasma Ces baies sont des aliments fonctionnels
prometteurs dans la preacutevention du risque de cancer gracircce agrave leurs effets multiples comme
lrsquoinduction de lrsquoapoptose lrsquoactiviteacute antioxydante et drsquoautres effets anticanceacutereux
En 2004 Zhao et coll (69) ont eacutetudieacute les effets de trois extraits riches en anthocyanosides
Vitis vinifera (Vigne rouge) V myrtillus L et Aronia melanocarpa E (Aronie noire) sur les
cellules canceacutereuses du cocirclon HT-29 et les cellules non tumorigeacuteniques du cocirclon NCM460
Lrsquoeacutetude deacutemontre lrsquoinhibition de la croissance des cellules HT-29 par V myrtillus agrave faibles
concentrations tandis que lrsquoeffet est pauvre sur les cellules NCM460 Cependant une peacuteriode
longue drsquoincubation (72 heures) montre un effet de la myrtille sur la croissance des cellules
NCM460 V myrtillus a une activiteacute importante peut-ecirctre gracircce agrave la cyanidine reporteacutee pour
ecirctre un inhibiteur efficace de la croissance des cellules canceacutereuses coloniques
Dans cette eacutetude la croissance des cellules du colon est inhibeacutee alors que les conditions de pH
et de tempeacuterature ne sont pas optimum pour la stabiliteacute des anthocyanosides Les formes
actives responsables des effets observeacutes pourraient ecirctre dues aux produits de deacutegradation des
anthocyanosides
En conclusion cette eacutetude deacutemontre que des extraits riches en anthocyanosides et notamment
V myrtillus sont capables drsquoinhiber la croissance des cellules canceacutereuses du colon HT-29 agrave
plus basse concentration et agrave des peacuteriodes drsquoincubation plus courtes que la croissance des
cellules non tumorigeacuteniques NCM460 du colon Il reste toutefois agrave deacuteterminer quels sont les
composeacutes des extraits veacuteritablement responsables des effets observeacutes
65
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine
En 2006 Cooke et coll (18) ont eacutetudieacute les effets drsquoun meacutelange drsquoanthocyanosides de V
myrtillus (Mirtoselectreg) et de cyanidine-3-glucoside ou C3G (anthocyanoside le plus
abondant de lrsquoalimentation) sur le deacuteveloppement drsquoadeacutenome intestinal sur souris ApcMin
alimenteacutees pendant 12 semaines avec ces extraits Les souris ApcMin
constituent un modegravele
geacuteneacutetique de polypose adeacutenomateuse familiale humaine Cette maladie autosomique
dominante de lrsquohomme est caracteacuteriseacutee par le deacuteveloppement spontaneacute drsquoune centaine de
polypes colorectaux pouvant se transformer en carcinomes
Les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent que les deux extraits utiliseacutes diminuent le nombre
drsquoadeacutenomes drsquoune maniegravere dose-deacutependante (agrave la plus haute concentration lrsquoinhibition la plus
importante est observeacutee pour la cyanidine-3-glucoside) Les anthocyanosides sont retrouveacutes
dans le plasma agrave la limite de la deacutetection analytique et sont retrouveacutes agrave des niveaux
quantifiables dans lrsquointestin et lrsquourine Les principales formes preacutesentes dans lrsquointestin et
lrsquourine sont des anthocyanosides glucuronides et des meacutetabolites meacutethyleacutes Enfin les
anthocyanosides sont retrouveacutes dans drsquoautres tissus que lrsquointestin
En conclusion la dose eacutequivalente de Mirtoselectreg
chez lrsquohumain est contenue dans environ
740 grammes de baies de V myrtillus suggeacuterant que la dose efficace de lrsquoextrait chez la
souris ApcMin
pourrait ecirctre traduite en une dose importante (mais non impossible) chez
lrsquohumain De plus les glycosides de malvidine sont les anthocyanosides laquo survivants raquo les
mieux sous forme inchangeacutee dans lrsquointestin leur structure eacutetant moins apte agrave subir les
reacuteactions de conjugaison que celle drsquoautres anthocyanosides Lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides
in vivo pourrait ecirctre due au moins en partie agrave leur hydrolyse en anthocyanidines La preacutesence
transitoire des anthocyanidines apregraves hydrolyse de leurs preacutecurseurs glycosyleacutes et leur
transformation par conjugaison meacutetabolique pourraient expliquer lrsquoefficaciteacute de C3G ou du
Mirtoselectreg Le niveau drsquoanthocyanosides agrave la dose efficace chez la souris Apc
Min est bas
dans la circulation systeacutemique mais deacutetectable et mesurable dans le tractus gastro-intestinal et
lrsquourine
Ainsi lrsquoabsence drsquoeffets indeacutesirables des anthocyanosides et leur efficaciteacute dans la reacuteduction
du deacuteveloppement de lrsquoadeacutenome en font de bons candidats pour le deacuteveloppement clinique
66
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes
Les reacutecepteurs agrave lrsquoactiviteacute tyrosine kinase sont des moleacutecules transmembranaires constitueacutees
drsquoun site reacutecepteur sur lequel se lie un ligand (localiseacute sur la face extracellulaire) et un site
tyrosine kinase (sur la face interne) Ces reacutecepteurs ont en plus un site de phosphorylation Le
site tyrosine kinase (constituant une famille drsquoenzymes) est normalement inactif mais peut
srsquoactiver par phosphorylation de la tyrosine Le meacutecanisme drsquoactivation du site tyrosine
kinase ne se fait pas par passage drsquoinformations depuis le site de reconnaissance du ligand
jusqursquoagrave lrsquointeacuterieur de la cellule mais par la liaison du ligand sur deux reacutecepteurs pouvant se
rapprocher et se phosphoryler mutuellement Les reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase jouent
un rocircle crucial dans la carcinogenegravese et la progression tumorale Des exemples importants de
reacutecepteurs agrave tyrosine kinase comportent la famille ErbB incluant le facteur de croissance
eacutepidermique (EGFR ErbB1) et les reacutecepteurs ErbB2-4 lrsquoIGFR1 (insulin-like growth factor
receptor 1) et les VEGFR-2 et VEGFR-3 (vascular endothelial growth factor receptors) ErbB
et IGF sont des reacutecepteurs agrave tyrosine kinase surexprimeacutes dans certains types tumoraux
reacutesultant dans des modifications de la signalisation cellulaire impliqueacutees dans la croissance
cellulaire et la diffeacuterentiation Les reacutecepteurs VEGF sont des modulateurs de lrsquoangiogenegravese et
de la lymphangiogenegravese Crsquoest pourquoi lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs agrave tyrosine
kinase peut ecirctre une theacuterapeutique inteacuteressante (84)
42 Eacutetude de Teller et coll (2009)
Teller et coll (60) ont eacutetudieacute les effets de deux extraits standardiseacutes Mirtocyanreg
(extrait de V
myrtillus et Oenocyaninreg
(extrait de raisins) sur lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs tyrosine kinases
(RTKs) Seuls les reacutesultats concernant V myrtillus seront rapporteacutes dans cette thegravese
Lrsquoinhibition des RTK est eacutevalueacutee en utilisant une activiteacute kinase recombinante dans un
systegraveme de cellules libres et en deacuteterminant lrsquoautophosphorylation induit par le ligand dans
des cellules carcinomateuses de la vulve E431 et dans des cellules endotheacuteliales aortiques
porcines exprimant soit VEGFR-2 soit VEGFR-3 La capaciteacute des extraits riches en
anthocyanosides agrave modifier lrsquoactiviteacute des RTK est compareacutee agrave leur capaciteacute agrave moduler la
croissance des cellules
Les deux extraits inhibent lrsquoactiviteacute drsquoune varieacuteteacute de RTKs dans le systegraveme de cellules libres
(activiteacute kinase des domaines kinases recombinants) et dans les cellules vivantes (reacutecepteur
intact autophosphorylation induite par ligand) Par contre lrsquoautophosphorylation du reacutecepteur
des cellules intactes neacutecessitent des concentrations 10 agrave 50 fois plus hautes que celles
67
neacutecessaires pour lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute kinase recombinante dans le systegraveme de cellules
libres Cette diffeacuterence pourrait srsquoexpliquer par un accegraves pauvre des glycosides aux domaines
kinases recombinants
De plus les deux extraits inhibent davantage les kinases associeacutees avec EGFR et le VEGFR-2
que les kinases associeacutees avec ErbB-2 VEGFR-3 et IGF1R De plus les extraits preacutesentent
peu de speacutecificiteacute entre les membres des reacutecepteurs de la famille ErbB Mecircme si les extraits
riches en anthocyanosides inhibent lrsquoactiviteacute des RTKs peu drsquoeffets ont eacuteteacute montreacutes sur la
croissance des cellules Ceci pourrait ecirctre ducirc soit agrave la faible stabiliteacute des anthocyanosides dans
le milieu de culture soit agrave la preacutesence drsquoautres voies moleacuteculaires que les RTKs ces voies ne
seraient pas affecteacutees par les extraits riches en anthocyanosides et auraient la capaciteacute de
promouvoir la croissance et la survie cellulaire elles pourraient ainsi compenser lrsquoinhibition
des RTKs
Lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoactiviteacute des RTKs nrsquoest pas ducirc aux composants individuels des
extraits en effet V myrtillus contient un ensemble de composeacutes polypheacutenoliques ainsi que
des constituants inconnus Les cateacutechines flavonols et procyanidines preacutesents dans les
extraits en quantiteacutes plus basses que les anthocyanosides ont montreacute dans drsquoautres eacutetudes des
effets inhibiteurs des RTKs Mais la basse biodisponibiliteacute de ces extraits doit ecirctre prise en
compte pour lrsquoeacutevaluation de leurs effets physiologiques
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision
Les extraits de V myrtillus ont eacuteteacute utiliseacutes depuis 1964 dans les affections ophtalmiques et
dans les deacutesordres de la microcirculation Des eacutetudes anciennes ont rapporteacute les effets de
preacuteparations agrave base du fruit de V myrtillus dans lrsquoacuiteacute visuelle en lumiegravere sombre dans la
vision nocturne chez les sujets ne preacutesentant pas de troubles de la vision chez les patients
avec un problegraveme significatif de vision en lumiegravere vive les patients atteints de DMLA de
reacutetinopathie diabeacutetique drsquoinflammation reacutetinienne de reacutetinite pigmentaire (V myrtillus
associeacute au β-carotegravene) et enfin chez les patients avec myopie progressive Drsquoautres eacutetudes ont
rechercheacute les effets de V myrtillus sur la formation de la cataracte chez des patients souffrant
de cataracte corticale seacutenile (extrait pris en association avec la vitamine E) Cependant
lrsquohypothegravese drsquoun effet de V myrtillus sur la vision est tregraves controverseacutee certaines eacutetudes
rapportent des reacutesultats neacutegatifs (35)
Durant la seconde guerre mondiale les pilotes de la British Royal Air force avaient deacutejagrave
rapporteacute une ameacutelioration de lrsquoacuiteacute visuelle apregraves consommation de confitures de myrtilles
68
Cependant durant cette mecircme peacuteriode la technologie du radar a eacuteteacute introduite en Grande-
Bretagne pour la deacutefense aeacuterienne et des eacutetudes ulteacuterieures nrsquoont pas supporteacute lrsquohypothegravese
drsquoune ameacutelioration de la vision nocturne et de la sensibiliteacute au contraste nocturne par la
suppleacutementation en V myrtillus Le systegraveme de radar et non V myrtillus pourrait alors ecirctre la
cause du succegraves de la Royal Air Force (66)
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale
Des eacutetudes ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoextraits de Vaccinum myrtillus seuls ou associeacutes agrave du
β-carotegravene et de la vitamine E (chez des patients avec ou sans deacutesordre oculaire) agrave ameacuteliorer
la vision nocturne agrave induire une adaptation agrave lrsquoobscuriteacute et une restauration de lrsquoacuiteacute
visuelle (suite agrave une exposition agrave une lumiegravere vive ou un flash) plus rapides (42) Drsquoautres
eacutetudes ont montreacute lrsquoefficaciteacute des extraits anthocyanosidiques de myrtille agrave ameacuteliorer la vision
nocturne et lrsquoajustement agrave lrsquoobscuriteacute chez des controcircleurs aeacuteriens des pilotes drsquoavion des
conducteurs de voiture et de camion (43)
Agrave lrsquoopposeacute drsquoautres eacutetudes ne precirctent pas agrave la myrtille des proprieacuteteacutes sur la vision Crsquoest le
cas notamment de lrsquoeacutetude en 2000 de Muth et coll (46) ils ont rechercheacute les effets de V
myrtillus sur lrsquoacuiteacute visuelle nocturne et la sensibiliteacute au contraste nocturne Leur eacutetude est
randomiseacutee double-aveugle et controcircleacutee par placebo Les sujets inclus dans lrsquoeacutetude sont des
hommes jeunes preacutesentant une bonne vision Un groupe reccediloit 160 mg drsquoextrait de V
myrtillus et lrsquoautre groupe un placebo trois fois par jour pendant 21 jours Apregraves un mois
sans traitement le test reprend pendant 3 semaines en inversant les groupes (les sujets ayant
eu le placebo ont maintenant les capsules de V myrtillus et vice versa) Les reacutesultats montrent
qursquoil nrsquoy a pas de diffeacuterences entre les mesures de la moyenne de lrsquoacuiteacute visuelle nocturne
chez les sujets soumis au traitement par V myrtillus et ceux soumis au placebo De mecircme
lrsquoexamen de la derniegravere acuiteacute visuelle durant le traitement actif et celui durant le placebo ne
reacutevegravelent pas de diffeacuterences dans lrsquoacuiteacute visuelle nocturne Le mecircme reacutesultat neacutegatif est
constateacute pour la sensibiliteacute au contraste nocturne
En conclusion cette eacutetude nrsquoapporte pas de reacutesultats positifs sur lrsquoeffet de V myrtillus sur les
deux paramegravetres mesureacutes mecircme si lrsquoextrait est pris agrave haute dose et pendant une dureacutee
significative
Une critique de lrsquoeacutetude de Muth et coll (46) pourrait ecirctre faite sur la population limiteacutee
utiliseacutee peu de sujets ont eacuteteacute inclus dans lrsquoeacutetude et ceux-ci eacutetaient tous des hommes jeunes
avec une bonne vision Il est vrai que deux de ces sujets avaient une moyenne drsquoacuiteacute
69
visuelle nocturne et une sensibiliteacute au contraste nocturne en dessous des autres sujets or
mecircme chez ces sujets aucune diffeacuterence de mesure nrsquoa eacuteteacute enregistreacutee
Cette eacutetude pose de nouveau des doutes sur lrsquoutilisation de la myrtille dans des formes
couramment disponibles et aux doses recommandeacutees comme suppleacutementation efficace pour
lrsquoameacutelioration de la vision nocturne dans une cateacutegorie de sujets preacutesentant une bonne vision
et essentiellement une vision nocturne normale
2 Eacutetude chez des sujets myopes
Une eacutetude a montreacute qursquoune association drsquoanthocyanosides de V myrtillus avec vitamine E et
β-carotegravene ameacuteliorait le champ visuel de patients atteints de myopie aussi bien lors drsquoun
traitement court que long De mecircme il a eacuteteacute deacutemontreacute une efficaciteacute de lrsquoassociation
drsquoanthocyanosides de myrtille avec le reacutetinol sur la sensibiliteacute de la reacutetine de patients myopes
dans 32 des 42 yeux examineacutes (43)
En 2005 Lee et coll (35) ont mis au point une eacutetude randomiseacutee double-aveugle controcircleacutee
par placebo impliquant 60 sujets avec astheacutenopie et myopie basse agrave modeacutereacutee avec erreurs
reacutefractaires entre -1 et -8 dioptres au niveau des deux yeux Lrsquoobjectif de lrsquoeacutetude est de
deacuteterminer lrsquoeffet de lrsquoadministration drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides purifieacutes agrave hautes doses
de V myrtillus sur la fonction visuelle nocturne et les symptocircmes cliniques chez ces sujets de
mecircme acircge et de sensibiliteacute au contraste similaire Ainsi 30 sujets ont reccedilu des comprimeacutes de
100 mg de traitement contenant 85 drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides et les 30 autres sujets
des comprimeacutes placebo deux fois par jours pendant 4 semaines La fonction visuelle nocturne
est eacutevalueacutee par le test de sensibiliteacute au contraste (test objectif) et les symptocircmes cliniques par
un questionnaire rempli par les sujets (test subjectif) avant et apregraves le traitement Ainsi les
reacutesultats baseacutes sur lrsquoanalyse du questionnaire montrent qursquoagrave la suite des 4 semaines de
traitement les sujets traiteacutes par anthocyanosides ont preacutesenteacute une ameacutelioration des symptocircmes
(meilleurs que le groupe placebo) De plus le groupe anthocyanoside a montreacute une sensibiliteacute
au contraste ameacutelioreacutee agrave chaque cycle par degreacute alors qursquoaucune ameacutelioration nrsquoa eacuteteacute
constateacutee dans le groupe placebo
Des eacutetudes anciennes ont reporteacutes une ameacutelioration de la fonction visuelle nocturne chez des
sujets normaux prenant des anthocyanosides alors que des eacutetudes plus reacutecentes nrsquoont montreacute
aucun effet sur la vision nocturne par administration orale simple ou multiple drsquooligomegraveres
drsquoanthocyanosides (35) Ces discordances de reacutesultats pourraient ecirctre causeacutees par des
diffeacuterences dans le choix des sujets les meacutethodes drsquoeacutevaluation de la vision nocturne ainsi que
la concentration et la dose drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides utiliseacutees Alors que des eacutetudes ne
70
montrent pas drsquoeffets des oligomegraveres drsquoanthocyanosides chez les sujets normaux drsquoautres
eacutetudes deacutemontrent lrsquoefficaciteacute de ceux-ci chez les sujets avec myopie ou heacutemeacuteralopie
(diminution anormale de la vision dans lrsquoobscuriteacute)
Dans lrsquoeacutetude de Lee et coll (35) les conditions sont diffeacuterentes de celles que lrsquoon peut trouver
dans drsquoautres eacutetudes qui ont pu ecirctre faites en termes de dose de dureacutee et de type de sujets En
effet une haute dose drsquooligomegraveres anthocyanosides (concentreacutes agrave 85 gracircce au processus de
fermentation speacutecifique) est administreacutee pendant une plus longue peacuteriode compareacutee aux autres
eacutetudes De plus les sujets utiliseacutes englobent des personnes avec myopie astheacutenopie et une
sensitiviteacute au contraste meacutesopique diminueacutee alors que drsquoautres eacutetudes utilisent des sujets
normaux
En conclusion cette eacutetude montre que les anthocyanosides peuvent ameacuteliorer les symptocircmes
subjectifs et les reacutesultats de la moyenne de la sensibiliteacute au contraste chez des sujets
preacutesentant myopie et astheacutenopie Mais drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour rechercher la
dose optimale de V myrtillus la dureacutee de traitement neacutecessaire la dureacutee de lrsquoeffet apregraves
lrsquoarrecirct du traitement et lrsquoapplication de ce traitement en clinique chez des patients avec des
maladies oculaires comme la reacutetinite pigmentaire le glaucome et la reacutetinopathie diabeacutetique
connus pour reacuteduire la vision nocturne
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004)
Canter et coll (13) ont proceacutedeacute agrave une meacuteta-analyse des eacutetudes faites concernant lrsquoeffet des
anthocyanosides de V myrtillus sur la vision nocturne
Des 30 eacutetudes trouveacutees par les auteurs avec des reacutesultats se reacutefeacuterant agrave la vision dans des
conditions de lumiegravere reacuteduites 12 eacutetudes sont des eacutetudes controcircleacutees par placebo Les 4 eacutetudes
les plus reacutecentes sont des eacutetudes controcircleacutees randomiseacutees et rapportent des reacutesultats neacutegatifs
La 5egraveme
eacutetude controcircleacutee randomiseacutee et les 7 eacutetudes controcircleacutees non randomiseacutees rapportent des
reacutesultats positifs dans lrsquoameacutelioration de la vision en lumiegravere reacuteduite Les reacutesultats neacutegatifs sont
associeacutes avec une plus grande rigueur dans la meacutethodologie mais aussi des doses plus basses
et des extraits provenant de sources geacuteographiques distincts pouvant diffeacuterer dans la
composition en anthocyanosides De plus dans 11 des 12 eacutetudes les sujets utiliseacutes sont des
sujets en bonne santeacute avec une vision moyenne normale voire au-dessus de la normale Ainsi
les eacutetudes cliniques les plus rigoureuses ne supportent pas lrsquohypothegravese drsquoune ameacutelioration de
la vision nocturne chez les sujets en bonne santeacute par les anthocyanosides de V myrtillus
Cependant lrsquoassociation entre rigueur meacutethodologique publication reacutecente reacutesultat neacutegatif
est confondu avec plusieurs facteurs de confusion qui peuvent biaiser les eacutetudes comme la
71
dose les diffeacuterentes variations geacuteographiques modifiant la composition des extraits et le type
de sujets inclus dans les eacutetudes De plus les meacutethodes mises en place pour obtenir et
interpreacuteter les eacutelectroreacutetinogrammes employeacutees dans les eacutetudes plus anciennes diffegraverent des
proceacutedures standardiseacutees utiliseacutees maintenant
Lorsque lrsquoanalyse des facteurs de confusion est faite une association entre les reacutesultats
positifs et lrsquoutilisation de plus hautes doses en anthocyanosides de V myrtillus est mise en
eacutevidence De plus la composition phytochimique des extraits diffegraverent selon la geacuteographie
des plantes de Myrtillier Les reacutesultats positifs sont souvent associeacutes avec des eacutetudes utilisant
des extraits provenant drsquoItalie ou de France La quantiteacute des anthocyanosides de la myrtille
(constituants les plus actifs) varient en fonction du cycle de vie des plantes en reacuteponse agrave des
facteurs de stress et des signaux de lrsquoenvironnement Ainsi avec le mucircrissement la quantiteacute
des anthocyanosides augmente alors que celle des proanthocyanidines diminue Crsquoest
pourquoi agrave cause des diffeacuterences geacuteographiques une standardisation drsquoune quantiteacute en
pourcentage fixe drsquoextrait est une proceacutedure insuffisante pour garantir une composition
identique et une activiteacute pharmacologique Lors des eacutetudes drsquoautres composants peuvent ecirctre
ajouteacutes avec les anthocyanosides de mytille comme le β-carotegravene (un deacuteficit est connu pour
ecirctre lieacute agrave une alteacuteration de la vision nocturne) Lrsquoeffet confondant du β-carotegravene dans
certaines eacutetudes ne peut ecirctre correctement eacutevalueacute sans connaitre le statut nutritionnel des
sujets Dans cette meacuteta-analyse 5 eacutetudes utilisent dans le traitement actif du β-carotegravene Une
eacutetude ne montre pas de diffeacuterences dans lrsquointerpreacutetation de lrsquoeacutelectroreacutetinogramme des sujets
traiteacutes avec lrsquoextrait de V myrtillus avec ou sans β-carotegravene et 3 eacutetudes reacutealiseacutees dans les
anneacutees 1940 montrent que le β-carotegravene nrsquoa pas drsquoeffet sur lrsquoadaptation nocturne quand il est
administreacute seul
En conclusion des eacutetudes rigoureuses sur les effets des extraits de V myrtillus vis-agrave-vis de
sujets souffrant drsquoune alteacuteration de la vision nocturne due agrave des conditions pathologiques
oculaires sont neacutecessaires Cependant la preacutesence drsquoeacutetude plus faibles dans la meacutethodologie
le teacutemoignage des eacutetudes animales les eacutetudes des anthocyanosides syntheacutetiques (la cyanidine
syntheacutetique utiliseacutee dans des eacutetudes controcircleacutees par placebo dans les anneacutees 1970 et 1980 a
montreacute une ameacutelioration de la vision nocturne chez des sujets en bonne santeacute et souffrant
drsquoune varieacuteteacute de deacutesordres ophtalmologiques) une eacutetude controcircleacutee randomiseacutee de Ribes
nigrum montrant un effet positif sur le seuil drsquoadaptation nocturne pourraient justifier des
eacutetudes compleacutementaires sur les anthocyanosides de myrtille chez des sujets preacutesentant une
alteacuteration de la vision nocturne
72
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique
La reacutetinopathie diabeacutetique est une complication agrave long terme du diabegravete qui se traduit par une
deacutegeacuteneacuterescence des capillaires irrigant la reacutetine La maladie se manifeste par des
microaneacutevrysmes qui sont de petites dilatations de la paroi des capillaires (preacutesence de petits
points rouges drsquoheacutemorragies et drsquoapparition drsquoexsudatshellip) Dans des formes eacutevolueacutees une
baisse de la vision peut survenir (1) La neacuteovascularisation est la principale modification
rencontreacutee dans la reacutetinopathie diabeacutetique reacutesultant drsquoune interaction avec des cytokines et
des facteurs de croissance pouvant ecirctre responsables de lrsquoangiogenegravese comme dans le cancer
Or VEGF joue un rocircle dans la neacuteovascularisation reacutetinienne mecircme si son rocircle exact dans la
survenue preacutecoce de la pathologie nrsquoest pas encore entiegraverement compris (16)
En 2005 une eacutetude meneacutee par Chung et coll (16) a deacutemontreacute la capaciteacute de Vaccinium
myrtilus a diminueacute le glucose sanguin plasmatique et agrave reacuteduire le pourcentage de surface de
vascularisation reacutetinien chez des rats diabeacutetiques compliqueacute drsquoune reacutetinopathie diabeacutetique
ces pathologies eacutetant induites par la streptozocine Cependant pas drsquoeffet est constateacute sur le
VEGF (16)
Une eacutetude clinique a deacutemontreacute lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides de V myrtillus (administration
orale de 480 mgjour pendant 180 jours) sur les manifestations de la reacutetinopathie diabeacutetique
notamment la reacuteduction voire la disparition des heacutemorragies reacutetiniennes chez des patients
diabeacutetiques (diabegravete type 2) et souffrant drsquoune reacutetinopathie non prolifeacuterative (43)
Lrsquoameacutelioration significative des examens ophtalmoscopiques et angiographiques apregraves
traitement avec 320 mg de Myrtocyanreg
pendant 30 jours a eacuteteacute montreacutee chez 77 agrave 92 des 40
patients inclus dans lrsquoeacutetude et souffrant de diabegravete et de reacutetinopathie hypertensive (43)
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes
Lrsquoeacutepitheacutelium de la surface oculaire joue le rocircle fondamental de barriegravere empecircchant lrsquoentreacutee de
substances nocives dans la corneacutee et maintenant lrsquointeacutegriteacute de la surface oculaire La
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes permet la reacutegeacuteneacuteration du tissu pour
maintenir le rocircle protecteur de la corneacutee et la cicatrisation Crsquoest pourquoi le cycle cellulaire
est tregraves important Au niveau de ces cellules des glycosaminoglycanes (GAGs glucides de
lrsquoorganisme localiseacutes dans le mucus les seacutecreacutetions digestives et le tissu conjonctif) sulfateacutes
sont produits par les trois types de cellules de la corneacutee (cellules eacutepitheacuteliales endotheacuteliales et
les fibroblastes) Les GAGs de lrsquoeacutepitheacutelium corneacuteen peuvent moduler le comportement
cellulaire comme lrsquoadheacutesion la migrationhellip et jouent donc un rocircle important pour la
73
cicatrisation corneacuteenne Lrsquoun des GAGs est lrsquoacide hyaluronique substance de la matrice
extra-cellulaire jouant plusieurs rocircles notamment dans la lubrification lrsquohydratation de la
matrice corneacuteenne et lrsquohomeacuteostasie Il pourrait aussi ameacuteliorer la santeacute de la surface oculaire
et reacuteduire la pression intraoculaire lors de la pose chirurgicale drsquoun implant oculaire (55)
Song et coll (55) ont reacutecemment eacutetudieacute les effets drsquoun extrait de V myrtillus sur le cycle la
croissance cellulaire lrsquoexpression des GAGs et de lrsquoacide hyaluronique dans un modegravele in
vitro de cellules eacutepitheacuteliales limbales corneacuteennes humaines Les reacutesultats deacutemontrent
lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille et ses anthocyanosides agrave promouvoir la division et la
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteenne sans aucune toxiciteacute cellulaire et agrave
augmenter la quantiteacute totale de GAGs sans modifications significatives de lrsquoacide
hyaluronique Lrsquoextrait de myrtille peut alors ecirctre beacuteneacutefique pour la reacutegeacuteneacuteration
physiologique et lrsquohomeacuteostasie
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete
Helmstaumldter (26) a reacutepertorieacute les substances antidiabeacutetiques utiliseacutees avant la deacutecouverte de
lrsquoinsuline Parmi toutes les plantes V myrtillus est celle la plus freacutequemment retrouveacutee dans
les preacuteparations antidiabeacutetiques commerciales au XXegraveme
siegravecle Les feuilles pourraient ecirctre la
partie de plante la plus utiliseacutee Une preacuteparation tregraves commune eacutetait le laquo Pilulae Myrtilli
Jasper raquo (1912) chacun contenant 012 grammes drsquoextraits de feuilles mais cette preacuteparation
nrsquoeacutetait mentionneacutee qursquooccasionnellement dans les traiteacutes scientifiques et seulement quelques
recherches ont eacuteteacute retrouveacutees
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine
Petlevski et coll (48) ont eacutetudieacute les effets drsquoune preacuteparation agrave base de plantes antidiabeacutetiques
comprenant la feuille de V myrtillus et drsquoautres plantes breveteacutee sous le numeacutero No P-
9801091 disponible sur le marcheacute Croate Deux extraits un extrait eacutethanolique (extrait 1) et
non eacutethanolique (extrait 2) sont administreacutes agrave des souris (NOD) non obegraveses rendues
diabeacutetiques par lrsquoalloxane (deacuteriveacute pyrimidique produisant chez lrsquoanimal une neacutecrose des
cellules β des icirclots de Langerhans)
Lrsquoeacutetude deacutemontre que les extraits 1 et 2 diminuent le glucose sanguin de 10 et 20
respectivement de la valeur initiale des souris NOD controcircles (sans traitement) Lrsquoeffet de
lrsquoextrait 2 est donc beaucoup plus marqueacute il est compareacute agrave un antidiabeacutetique de reacutefeacuterence
(acarbose) Les reacutesultats montrent que lrsquoextrait diminue significativement le niveau de glucose
74
sanguin alors que la diminution par lrsquoacarbose nrsquoest pas significative La mecircme chose est
observeacutee pour le niveau de fructosamine dans le sang
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques
Le diabegravete est une maladie souvent associeacutee agrave des deacutesordres meacutetaboliques comme une
hypertriglyceacuterideacutemie Lrsquoinsuline joue un rocircle essentiel dans le meacutetabolisme des lipoproteacuteines
Chez la plupart des patients atteints de diabegravete type 1 (insulino-deacutependant)
lrsquohypertriglyceacuterideacutemie est induit par une moindre activiteacute de la lipase lipoproteacuteique (enzyme
permettant lrsquohydrolyse des triglyceacuterides des lipoproteacuteines plasmatiques) deacutependante de
lrsquoinsuline
Une eacutetude meneacutee en 1996 par Cignarella et coll (17) a montreacute que lrsquoadministration orale
(pendant 4 jours) drsquoun extrait hydro-alcoolique seacutecheacute de feuilles de V myrtillus agrave des rats
rendus diabeacutetiques par streptozocine pouvait diminuer le niveau de glucose plasmatique par
environ 26 et le niveau de triglyceacuterides plasmatiques par 39 Ainsi lrsquoextrait de myrtille
expose une activiteacute hypolipideacutemiante dose-deacutependante chez les rats en stimulant le
catabolisme des lipoproteacuteines riches en triglyceacuterides probablement sous des conditions en
deacuteficits drsquoinsuline Par contre agrave lrsquoopposeacute du ciprofibrate (une moleacutecule de reacutefeacuterence dans le
traitement de lrsquohypertriglyceacuterideacutemie) lrsquoextrait de V myrtillus ne preacutevient pas la formation de
thrombus veineux chez ces rats diabeacutetiques
Ces eacutetudes in vivo ont montreacute lrsquoaction hypoglyceacutemiante de V myrtillus une fois les
constituants isoleacutes cette plante agrave usage traditionnel pourrait eacutegalement attirer lrsquoattention sur le
traitement de certains deacutesordres du meacutetabolisme lipidique
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique
Borrelli et coll (10) ont listeacute les agents phytogeacuteniques utiliseacutes comme remegravedes des ulcegraveres
gastriques Des reacutesultats ont deacutemontreacute lrsquoaction significative de V myrtillus dans la preacutevention
et le traitement des ulcegraveres Certaines eacutetudes ont montreacute ses effets protecteurs dans des ulcegraveres
induits par ligature du pylore par la reacuteserpine ou la pheacutenylbutazone ougrave le traitement avec les
anthocyanosides de V myrtillus a eacuteteacute donneacute avant ou pendant la formation de lrsquoulcegravere La
myrtille exerce un effet anti-ulcegravere en partie par une augmentation du mucus dans la paroi de
lrsquoestomac (ameacuteliorant lrsquoefficaciteacute de la barriegravere formeacutee par ce mucus) et peut influencer la
biosynthegravese des mucopolysaccharides
75
Magistretti et coll (37) montrent qursquoun extrait drsquoanthocyanosides de Vaccinium myrtillus
possegravede une action anti-ulcegravere inteacuteressante dans divers modegraveles expeacuterimentaux De ces
reacutesultats les auteurs ont voulu trouver les composants de Vaccinium myrtillus responsables de
cette action Or cette plante comme nous le savons est riche en anthocyanosides et
anthocyanidines (aglycones respectifs) Cela explique pourquoi les auteurs ont eacutetudieacute les
effets sur lrsquoulcegravere aigu et chronique chez des rats drsquoune anthocyanidine la cyanidine ou 3 5
7-trihydroxy-2-(34-dihydroxypheacutenyl)-1-benzopyrylium chloride (IdB 1027) Les reacutesultats
montrent les effets drsquoIdB 1027 suivants
- reacuteduction de lrsquoulcegravere gastrique induit par la ligature du pylore de faccedilon non dose-
deacutependante
- inhibition de lrsquoulcegravere de stress
- protection de lrsquoestomac de lrsquoulcegravere induit par pheacutenylbutazone
- reacuteduction de la seacuteveacuteriteacute de lrsquoulcegravere induit par indomeacutetacine de faccedilon dose-
deacutependante
- inhibe significativement lrsquoulceacuteration gastrique induit par reacuteserpine
- protection significative mais pas dose-deacutependante contre les leacutesions induites par
lrsquoeacutethanol
- inhibe significativement et de faccedilon dose-deacutependante lrsquoulcegravere induit par histamine
- et reacuteduction significative les leacutesions induites par acide aceacutetique
En conclusion lrsquoIdB 1027 est capable de reacuteduire ou mecircme drsquoinhiber les ulcegraveres induits par de
nombreux facteurs comme la ligature du pylore les AINS Les meacutecanismes par lesquels un
meacutedicament augmente les deacutefenses de la muqueuse gastrique sont varieacutes cela peut ecirctre une
influence sur la seacutecreacutetion et les proprieacuteteacutes physicochimiques du mucus ou une stimulation de
la reacutegeacuteneacuteration cellulaire une influence sur la microcirculation de la muqueuse la seacutecreacutetion
de bicarbonate la protection contre les dommages induits par les radicaux libres ou
lrsquoaugmentation de lrsquoAMP cyclique Ainsi lrsquoIdB 1027 peut agir par une combinaison de
certains de ces meacutecanismes comme une augmentation de la seacutecreacutetion de mucus (sans effet
anti-seacutecreacutetoire gastrique) dans des conditions physiologiques normales et dans des conditions
de deacutefense alteacutereacutees la stimulation de la reacutegeacuteneacuteration cellulaire montreacutee par son activiteacute contre
lrsquoulcegravere induit par acide aceacutetique lrsquoameacutelioration de la microcirculation de la muqueuse
montreacutee par son activiteacute contre lrsquoulcegravere geacuteneacutereacute par lrsquohistamine De plus lrsquoIdB 1027 est un
antioxydant et les anthocyanidines sont des inhibiteurs efficaces de lrsquoAMPc-
phosphodiesteacuterase dans des tissus varieacutes ce qui pourrait contribuer agrave lrsquoactiviteacute
pharmacologique observeacute
76
En conclusion les effets deacutemontreacutes dans les modegraveles drsquoanimaux lrsquoabsence de toxiciteacute et
lrsquoexcellente toleacuterance font de cette moleacutecule un bon candidat dans des eacutetudes cliniques
comme agent antiulcegravereux
2 Action sur Helicobacter pylori
Le traitement contre Helicobacter pylori est la plupart du temps constitueacute de deux
antibiotiques et drsquoun inhibiteur de la pompe agrave protons comme lrsquoomeacuteprazole par exemple Or
le problegraveme qui se pose est lrsquoapparition drsquoune reacutesistance aux antibiotiques De plus la bacteacuterie
peut intervenir dans la production des radicaux libres de lrsquooxygegravene augmentant davantage le
stress oxydant et ses dommages au niveau gastrique Une augmentation de la peroxydation
lipidique et un dommage agrave lrsquoADN au niveau des tissus gastriques sont alors observeacutes Par
conseacutequent des antioxydants naturels comme les anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
pourraient servir comme outil theacuterapeutique pour reacuteduire le stress oxydant induit par
Helicobacter pylori (15)
Chatterjee et coll (15) ont eacutetudieacute les effets de diffeacuterents extraits de baies sur Helicobacter
pylori avec ou sans clarithromycine in vitro ainsi que la sensibiliteacute de la bacteacuterie agrave la
clarithromycine Plusieurs baies sont eacutetudieacutees comme la myrtille sauvage (Vaccinium
myrtillus) lrsquoairelle la canneberge la fraise la framboise le sureau et Optiberryreg (un
meacutelange de ces six baies) Cette eacutetude a montreacute que tous les extraits aux concentrations
testeacutees inhibent la croissance de maniegravere dose-deacutependante de H pylori avec une efficaciteacute
supeacuterieure pour Optiberryreg Crsquoest la premiegravere eacutetude montrant lrsquoinhibition de H pylori par des
extraits de baies et notamment V myrtillus lequel preacutesente une meilleure activiteacute que la
fraise la framboise et la canneberge en particulier pour des basses concentrations Enfin un
effet inhibiteur suppleacutementaire est obtenu avec lrsquoajout de la clarithromycine associeacutee aux
extraits de baies agrave toutes les concentrations testeacutees
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus
1 Action antibacteacuterienne
Une eacutetude meneacutee en 2005 par Puupponen-Pimiauml et coll (51) a montreacute lrsquoactiviteacute
antibacteacuterienne de plusieurs baies nordiques incluant V myrtillus Les reacutesultats rapporteacutes
dans cette thegravese ne se reacutefegraverent qursquoagrave la myrtille et sont reacutesumeacutes dans le tableau suivant
77
Listeria
monocytogenes
E-991205
Salmonella
enterica sv
thyphimurium
E-981151
Staphylococcus
aureus E-70045
Lactobacillus
rhamnosus
E-96666
Temps
drsquoincubation 12h 24h 12h 24h 12h 24h 12h 24h
2 mgmL-1
- - + - ++ ++ - -
10 mgmL-1
- - +++ + +++++ +++++ - -
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
(Leacutegende C concentration de la baie de myrtille - pas drsquoeffets inhibiteurs + nombre de
bacteacuteries viables diffegraverent de 10-5 times 101 par rapport au controcircle ++ nombre de bacteacuteries viables
diffegraverent de 5 times 101-5 times 102 par rapport au controcircle +++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 102-5 times 103 par rapport au controcircle ++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 103-5 times 104
par rapport au controcircle +++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de plus 5 times 104 par rapport au
controcircle)
Les reacutesultats deacutemontrent lrsquoactiviteacute antimicrobienne de la myrtille lyophiliseacutee sur les bacteacuteries
Salmonella et Staphylococcus augmente de maniegravere concentration-deacutependante Par contre la
myrtille nrsquoa aucune activiteacute vis-agrave-vis de Listeria et Lactobacillus
Les composeacutes pheacutenoliques ne sont responsables que partiellement de lrsquoinhibition de la
croissance des bacteacuteries Salmonella les effets antimicrobiens eacutetant probablement deacutetenus par
drsquoautres composeacutes comme les acides organiques
Les baies et notamment V myrtillus pourraient ecirctre utiliseacutees dans les aliments fonctionnels et
dans lrsquoindustrie pharmaceutique en tant qursquoagents antimicrobiens
Ainsi la myrtille utiliseacutee traditionnellement est preacutesente dans de nombreuses eacutetudes qui ont
deacutemontreacute ses multiples actions dans des domaines meacutedicaux varieacutes et des pathologies diverses
comme lrsquoinsuffisance veineuse lrsquoatheacuteroscleacuterose le cancer le diabegravete les deacutesordres
oculaireshellip Par ailleurs son action antioxydante attire lrsquoattention des scientifiques et il serait
favorable drsquoentreprendre des eacutetudes cliniques
VIII Toxicologie
1 Effets indeacutesirables
Dans les eacutetudes cliniques sur les extraits de V myrtillus reacutepertorieacutees par Marazzoni et coll en
1996 (43) aucun effet indeacutesirable nrsquoa eacuteteacute observeacute mecircme lors drsquoeacutetudes ougrave le traitement aux
78
extraits de V myrtillus est pris sur une longue peacuteriode Cependant la plupart des eacutetudes
nrsquoincluaient qursquoun petit nombre de patients Une eacutetude de surveillance post-marketing a inclus
2295 sujets prenant 160 mg de Myrtocyanreg
deux fois par jour pendant 1-2 mois pour des
pathologies diverses (insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs fragiliteacute capillaire
modifications de la microcirculation reacutetinienne ou heacutemorroiumldes) Cette eacutetude a montreacute que
seuls 94 sujets ont reporteacute des effets indeacutesirables surtout lieacutes agrave la peau au tractus gastro-
intestinal et au systegraveme nerveux Une eacutetude non-controcircleacutee incluant des femmes enceintes avec
insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs et en crise heacutemorroiumldaire montre qursquoune
administration drsquoun extrait de myrtille (80 ou 160 mg) deux ou trois par jour pendant trois
mois nrsquoentraicircnait pas drsquoeffets indeacutesirables Mais en preacutesence de peu drsquoeacutetudes toxicologiques et
drsquoune seacutecuriteacute de la myrtille non eacutetablie lrsquoutilisation de la myrtille chez la femme enceinte et
allaitante devrait ecirctre proscrite
2 Doses leacutetales 50 (DL50)
Les donneacutees toxicologiques indiquent une DL50 pour le Myrtocyanreg drsquoenviron 2 gkg chez
les souris et les rats Chez le chien des doses uniques de 3 gkg nrsquoentraicircnent pas drsquoeffets
indeacutesirables si ce nrsquoest une coloration plus fonceacutee des urines et fegraveces Une administration
orale quotidienne drsquoextrait de V myrtillus agrave des doses de 125 agrave 500 mgkg et 80 agrave 320 mgk
respectivement agrave des rats et des chiens pendant 6 mois nrsquoentrainent ni mortaliteacute ni toxiciteacute
Les eacutetudes pharmacocineacutetiques reacutealiseacutees chez des rats ont deacutemontreacute une eacutelimination rapide
des anthocyanosides de myrtille dans les deux heures suivant une administration orale (5) Il
est eacutetablit dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) que si les parties de
mytille utiliseacutees pour les phytomeacutedicaments est une poudre de fruit frais ou sec ou de feuille
le dossier laquo abreacutegeacute raquo de lrsquoAMM doit preacutesenter une eacutetude toxicologique alleacutegeacutee celle-ci
nrsquoeacutetant pas indispensable pour certaines formes galeacuteniques agrave base de myrtille (tisane extrait
aqueux teinture extrait hydro-alcoolique) La monographie de la Commission E allemande
preacutecise que si la baie de myrtille est atoxique la feuille quant agrave elle peut induire des
intoxications chroniques en cas de doses eacuteleveacutees ou drsquousage prolongeacute Les premiers
symptocircmes chez lrsquoanimal se traduisent par une aneacutemie une cachexie un ictegravere un eacutetat
drsquoexcitation aiguumle et des perturbations du tonus pouvant agrave terme ecirctre fatale apregraves une
administration chronique de 15 gkgjour Ces symptocircmes ressembleraient agrave ceux preacutesents
dans lrsquointoxication par lrsquohydroquinone ce dipheacutenol nrsquoest pourtant pas preacutesent dans la feuille
de myrtille La Commission E par prudence ne justifie pas lrsquoutilisation de la feuille dans un
but theacuterapeutique face agrave ces risques La Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament quant agrave
79
elle ne demande un essai toxicologique que pour la poudre de feuille mais pas pour les
extraits (quelque soit le titre) (11) De ce fait drsquoautres eacutetudes toxicologiques seraient
neacutecessaires
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus
Mecircme si aucune contre-indication nrsquoest mentionneacutee dans la litteacuterature il convient toutefois de
consideacuterer un risque potentiel drsquointeraction entre les preacuteparations agrave base de myrtille et drsquoautres
produits meacutedicinaux ayant des effets similaires ou opposeacutes agrave ceux de la myrtille Des eacutetudes
preacutecliniques par exemple ont montreacute que les extraits de V myrtillus avaient un effet anti-
agreacutegant et pouvaient augmenter le temps de saignement (5) Une surveillance devrait ecirctre
apporteacutee lors drsquoassociation entre les speacutecialiteacutes agrave base de myrtille et les meacutedicaments
antiagreacutegants ou anticoagulants mecircme si aucune interaction nrsquoa eacuteteacute rapporteacutee Enfin comme
nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment lrsquoutilisation de speacutecialiteacutes agrave base de myrtille est deacuteconseilleacutee
chez la femme enceinte ou allaitante (5)
80
QUATRIEME PARTIE
UTILISATIONS DE VACCINIUM
MYRTILLUS L
81
I Utilisations alimentaires de Vaccinium myrtillus
La myrtille est avant tout un fruit tregraves appreacutecieacute par les consommateurs pour ses proprieacuteteacutes
gustatives et sa valeur nutritive
1 Utilisations culinaires
Les promeneurs friands des baies de myrtille les consomment sur place ou chez eux Il est
important de laver les baies avant leur consommation car lrsquohomme risque drsquoecirctre toucheacute par
lrsquoeacutechinococcose multiloculaire Cette maladie parasitaire est une cestodose qui seacutevit dans
lrsquoheacutemisphegravere Nord le Massif central lrsquoEst de la France et la Suisse Le renard et autres
canideacutes (chiens) se contaminent eux-mecircmes en mangeant des rongeurs sauvages parasiteacutes
(campagnoleshellip) ils deacuteposent alors des selles contenant des œufs de teacutenia sur le sol
lrsquohomme srsquoinfeste en mangeant les myrtilles proches du sol La maladie se caracteacuterise par le
deacuteveloppement de la larve de teacutenia dans le foie y formant de nombreux alveacuteoles Les
symptocircmes principaux sont douleur sourde amaigrissement et ictegravere (1)
Utiliseacutees en cuisine les myrtilles font lrsquoobjet de nombreuses recettes culinaires Elles sont
utiliseacutees pour accommoder les viandes leur apportant une saveur aciduleacutee Des charcutiers les
ajoutent mecircme agrave leurs saucissons pour les rendre plus moelleux
Les myrtilles sont souvent retrouveacutees dans de nombreuses pacirctisseries (sableacutes citronneacutes cakes
brioches tartes tartelettes puddings vacherins souffleacutes et glaceacutes coulis de fruits rouges
sorbets glaceshellip)
Les baies peuvent aussi ecirctre utiliseacutees pour la preacuteparation de confiture geleacutee et compote
Certains agriculteurs-reacutecolteurs vendent les myrtilles en confiture sur les marcheacutes locaux
Enfin on retrouve des boissons agrave base de myrtilles (jus de fruit nectar sirop liqueur vin et
vinaigre) (22)
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire
Les proprieacuteteacutes tinctoriales des anthocyanes de myrtille sont utiliseacutees dans lrsquoindustrie
alimentaire comme colorant sous la codification E 163 Gracircce agrave leur tregraves faible toxiciteacute il nrsquoy
aucune quantiteacute maximale speacutecifieacutee (quantum satis) ni dose journaliegravere acceptable Malgreacute
leurs proprieacuteteacutes tinctoriales les anthocyanes sont peu utiliseacutees dans lrsquoindustrie alimentaire agrave
cause de leur instabiliteacute (perte ou changement de couleur) en preacutesence de certains facteurs
physico-chimiques de lrsquoenvironnement comme le pH la tempeacuterature et la lumiegravere De plus
82
drsquoautres problegravemes srsquoajoutent agrave leur utilisation comme leur reacuteaction avec le dioxyde de soufre
(substance utiliseacutee pour la conservation drsquoaliments) leur faible solubiliteacute dans lrsquoeau et leur
preacutecipitation formant des complexes avec les proteacuteines Crsquoest pourquoi des proceacutedeacutes ont eacuteteacute
rechercheacutes pour augmenter leur stabiliteacute comme lrsquoutilisation drsquohydrocolloiumldes comme
lrsquoalginate de sodium et un surfactant ionique comme le laurylsulfate de sodium (3)
II Utilisations pharmaceutiques
Pour rappel la liste des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition
comporte deux parties (2)
La LISTE A laquo Plantes meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement raquo et la LISTE B laquo Plantes
meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement en lrsquoeacutetat ou sous forme de preacuteparation dont les effets
indeacutesirables potentiels sont supeacuterieurs au beacuteneacutefice theacuterapeutique attendu raquo
La myrtille appartient agrave la liste A des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition mais nrsquoy fait lrsquoobjet drsquoaucune monographie Agrave la Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition le fruit frais et sec de myrtille font lrsquoobjet drsquoune monographie (Annexe II et III
respectivement) En France certaines indications theacuterapeutiques selon la partie de plante
utiliseacutee sont revendiqueacutees dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) Ainsi
on retrouve les indications suivantes
- pour le fruit (frais ou sec) et la feuille par voie orale ou en usage locale
traditionnellement utiliseacute dans les manifestations subjectives de lrsquoinsuffisance veineuse telles
que jambes lourdes et dans la symptomatologie heacutemorroiumldaire
Il y a drsquoautres indications theacuterapeutiques possibles comme
- pour le fruit (frais ou sec) par voie orale traditionnellement utiliseacute comme
traitement adjuvant de la composante douloureuse des troubles fonctionnels digestifs
- pour le fruit frais (voie orale ou usage local) traitement symptomatique des
troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire tels que ecchymoses peacuteteacutechies
- pour la feuille et le fruit sec (voie orale) traitement symptomatique des diarrheacutees
leacutegegraveres
La Commission E allemande preacutecise dans la monographie (1987) que le fruit de myrtille est
eacutegalement utiliseacute pour le traitement des diarrheacutees aigueumls et pour lrsquoinflammation locale
modeacutereacutee des muqueuses de la caviteacute buccale Le fruit seacutecheacute est utiliseacute agrave la dose de 20 agrave 60 g
par jour en deacutecoction par voie orale pour le traitement de la diarrheacutee chez lrsquoadulte
83
Ainsi les extraits riches en anthocyanosides des fruits de la myrtille peuvent entrer dans la
composition de meacutedicaments utiliseacutes pour traiter les manifestations fonctionnelles de
lrsquoinsuffisance veinolymphatique la symptomatologie des troubles fonctionnels de la fragiliteacute
capillaire et les troubles de la vision meacutesopique et scotopique (11)
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille
11 Meacutedicaments allopathiques (82)
Laboratoire LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRARELreg 100 (comprimeacute enrobeacute bleu clair conditionnement de 20 comprimeacutes)
Meacutedicament vasculoprotecteur drsquoautorisation de mise sur le marcheacute (AMM) ndeg
3400930311714 (1987 reacuteviseacute le 24082005) Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Crsquoest une speacutecialiteacute pharmaceutique associant 100 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de V
myrtillus et 5 mg de β-carotegravene avec comme indications
laquo - Traitement dappoint des manifestations fonctionnelles de linsuffisance veinolymphatique
(jambes lourdes douleurs impatiences du primodecubitus)
- Traitement symptomatique dappoint des troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire
- Traitement dappoint des baisses dacuiteacute et troubles du champ visuel preacutesumeacutes dorigine
vasculaire raquo
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
DIFRARELreg E (comprimeacute enrobeacute blanc)
Meacutedicament ophtalmique agrave viseacute vasculoprotectrice drsquoAMM ndeg3400930311592 (196597
reacuteviseacute le 28022006) pour le conditionnement de 26 comprimeacutes et ndeg3400937701068 (2006)
pour le conditionnement de 60 comprimeacutes Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Cette speacutecialiteacute pharmaceutique associe 50 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de myrtille et
50 mg drsquoα-tocopheacuterol avec comme indication les troubles de la vision meacutesopique scotopique
(heacutemeacuteralopie) et la myopie
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
84
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques
LABORATOIRE BOIRON
Ce laboratoire homeacuteopathique commercialise la teinture megravere de V myrtillus et des dilutions
homeacuteopathiques
Agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise la myrtille a une monographie speacutecifique intituleacutee laquo Vaccinium
myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Annexe IV)
LABORATOIRE LEHNING
DIACUREreg (conditionnement de 60 geacutelules) drsquoAMM ndeg 3232544
Meacutedicament homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale Il est
constitueacute de lrsquoassociation suivante
- Taraxacum pulveacuteriseacute (H) (Pissenlit) 40 mg
- Berberis vulgaris (H) D3 (Epine-vinette) 40 mg
- Juglans regia pulveacuteriseacute (H) (Noyer) 120 mg
- Achillea millefolium (H) D2 (Achilleacutee millefeuille) 40 mg
- Vaccinium myrtillus folium pulveacuteriseacute (H) (feuille de myrtille) 80 mg
- Erythrea centaurium pulveacuteriseacute (H) (Petite centaureacutee) 40 mg
- Natrum phosphoricum (H) D3 40 mg
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute pour les polysurcharges
meacutetaboliques (facilite lrsquoeacutelimination des deacutechets meacutetaboliques) et notamment comme
traitement divers du diabegravete la feuille de myrtille y est utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes
hypoglyceacutemiantes
La posologie est de 1 agrave 2 geacutelules 3 fois par jour en dehors des repas en cure de 1 agrave 2 mois
(82)
DIABENEreg (solution buvable flacon de 30 mL) drsquoAMM ndeg 3030349 est un meacutedicament
homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale
Il est constitueacute de lrsquoassociation suivante Alchemilla vulgaris D3 Kreosotum D4
Strychninum nitricum D4 Arsenicum album D4 Adrenalinum D6 Belladonna D4 Syzygium
jambolanum D2 Vaccinium myrtillus D2 Taraxacum D3 Natrum phosphoricum D3
Helonias dioica D2
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute dans les polysurcharges
meacutetaboliques comme traitement divers de lrsquoobeacutesiteacute
85
La posologie est de 30 gouttes 3 fois par jour de preacutefeacuterence en dehors des repas (82)
13 Compleacutements alimentaires
LABORATOIRE MERCK
BION 3 SENIORreg (conditionnement de 30 ou 60 comprimeacutes)
Compleacutement alimentaire constitueacute de 3 probiotiques 12 vitamines 8 oligo-eacuteleacutements et 3
extraits veacutegeacutetaux (100 microg de luteacuteine extraits de 20 mg de ginseng et 1 mg de myrtille) Il est
preacuteconiseacute en cas de sphegravere ORL fragiliseacutee de deacutefenses naturelles affaiblies et pour mieux
faire face aux rythmes de vie actuels alimentation deacuteseacutequilibreacutee stress surmenage La
posologie est de 1 comprimeacute par jour en cure de 30 ou 60 jours (82)
RICHELETreg ANTI-AGE VISION (conditionnement de 30 comprimeacutes)
Crsquoest un compleacutement alimentaire composeacute de luteacuteine 105 mg drsquoextrait de myrtille des
vitamines B1 B2 et B6 A C E et du seacuteleacutenium La myrtille est utiliseacutee dans ce produit pour
ameacuteliorer la microcirculation sanguine de lrsquoœil et assurer le bon fonctionnement de ses
constituants La posologie est de 1 comprimeacute par jour pendant 3 mois agrave renouveler
peacuteriodiquement (82)
LABORATOIRE LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRAVISIONreg ANTI-VIEILLISSEMENT
Compleacutement alimentaire agrave viseacutee oculaire comprenant des vitamines (vitamine C et E) des
oligo-eacuteleacutements (Zn et Se) des pigments maculaires (luteacuteine extrait de maiumls dont
zeacuteaxanthine) du DHA (ω3) des huiles de poisson et un extrait sec de myrtille doseacute agrave 100 mg
(pour 2 geacutelules) Sur la notice du meacutedicament on trouve les indictions suivantes laquo il est
conseilleacute pour corriger les effets neacutefastes au niveau oculaire des deacuteficits antioxydants en
acides gras essentiels et en pigments maculaires raquo La posologie est de 1 geacutelule 2 fois par jour
(notice du compleacutement alimentaire)
LABORATOIRE ARKOPHARMA
Ce laboratoire pharmaceutique fabrique des geacutelules contenant de la poudre totale microniseacutee
Aujourdrsquohui seule la baie de myrtille est commercialiseacutee par le laboratoire Arkopharma
86
Les Arkogeacutelules de myrtille (baie) sont indiqueacutees dans la diarrheacutee la colite et lrsquoameacutelioration
de la vision nocturne (Brochure Arkopharma)
La myrtille est preacutesente dans beaucoup drsquoautres compleacutements alimentaires que nous ne
citerons pas ici
89
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(84) httpwebiologiefreefr (consulteacute en avril 2010)
98
LISTE DES ANNEXES
ANNEXE I Table de composition nutritionnelle Ciqual 2008 de lrsquoAffsa
ANNEXE II Monographie du fruit frais de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE III Monographie du fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE IV laquo Vaccinium myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Pharmacopeacutee
franccedilaise Xegraveme eacutedition)
99
ANNEXE I
TABLE DE COMPOSITION
NUTRITIONNELLE CIQUAL 2008 DE
LrsquoAFSSA
100
Myrtille fraicircche (teneurs pour 100 grammes drsquoaliment comestible)
Leacutegende du code confiance
Echelle de fiabiliteacute de A agrave D A correspondant aux donneacutees les plus fiables
Nom des constituants Uniteacute Teneur
moyenne Min Max Nb eacutechantillons
Source des
donneacutees
Code
confiance
Energie kJ 213 - - - C
Energie kcal 50 - - - C
Energie eacutetiquetage kJ 213 - - - C
Energie eacutetiquetage kcal 50 - - - C
Eau g 838 834 8421 2 760
743 C
Proteacuteines g 074 - - - C
Proteacuteines brutes (N x 625) g 074 - - 1 743 C
Glucides g 10 - - - C
Sucres g 996 - - 1 743 C
Amidon g 003 - - 1 743 C
Polyols totaux g 0 - - - D
Fibres alimentaires g 24 - - 1 743 C
Lipides g 033 - - 1 743 C
AG satureacutes g 0028 - - 1 743 C
AG monoinsatureacutes g 0047 - - 1 743 C
AG polyinsatureacutes g 0146 - - 1 743 C
Cholesteacuterol mg 0 - - 1 690 C
Alcool (eacutethanol) g 0 - - 1 690 C
Acides organiques g 137 - - - 723 C
Sodium mg 1 - - 1 743 C
Magneacutesium mg 6 - - 1 743 C
Phosphore mg 12 - - 1 743 C
Potassium mg 77 - - 1 743 C
Calcium mg 6 - - 1 743 C
Manganegravese mg 0336 - - 1 743 C
Fer total mg 028 - - 1 743 C
Cuivre mg 0057 - - 1 743 C
Zinc mg 016 - - 1 743 C
Seacuteleacutenium microg 01 - - 1 743 C
Iode microg 05 - - 1 573 D
Reacutetinol microg 0 - - 1 743 C
Becircta-carotegravene microg 32 - - 1 743 C
Vitamine D microg 0 - - 1 445 C
Activiteacute vitaminique E (en
eacutequivalents alpha-tocopheacuterol) mg 1 - - 1 497 C
Vitamine C mg 97 - - 1 743 C
Vitamine B1 ou Thiamine mg 0037 - - 1 743 C
Vitamine B2 ou Riboflavine mg 0041 - - 1 743 C
Vitamine B3 ou PP ou
Niacine mg 0418 - - 1 743 C
Vitamine B5 ou Acide
pantotheacutenique mg 0124 - - 1 743 C
Vitamine B6 ou Pyridoxine mg 0052 - - 1 743 C
Vitamine B9 ou Folates
totaux microg 6 - - 1 743 C
Vitamine B12 ou
Cobalamines microg 0 - - 1 743 C
101
ANNEXE II
MONOGRAPHIE DU FRUIT FRAIS
DE VACCINIUM MYRTILLUS L
(Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
102
Myrtille (fruit frais de)
Myrtilli fructus recens
DEacuteFINITION
Fruit mucircr frais ou congeleacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 030 pour cent drsquoanthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-
O-glucoside (chrysantheacutemine C21H21ClO11 Mr 4848) (drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur sucreacutee un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit frais de myrtille est une baie bleu-noir globuleuse drsquoenviron 5 mm de diamegravetre Il
comporte agrave la base une cicatrice ou rarement un fragment de peacutedoncule Le sommet aplati
est surmonteacute par les restes du style persistant et du calice qui forme un repli circulaire Dans
le meacutesocarpe violaceacute et juteux 4 agrave 5 loges renferment de nombreuses petites graines ovoiumldes
brunes
B Le fruit frais de myrtille broyeacute est rouge violaceacute Examinez-le au microscope en utilisant
de la solution drsquohydrate de chloral R Il preacutesente des cellules scleacutereuses rose violaceacute agrave paroi
eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en amas provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des
fragments drsquoeacutepicarpe brun-rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie
des fragments jaune-brun du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave
paroi preacutesentant des eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles de cristaux
drsquooxalate de calcium
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 5 g de drogue reacutecemment broyeacutee ajoutez 20 ml de meacutethanol R
Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
103
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge violaceacute
Chrysantheacutemine une bande rouge violaceacute Une bande principale rouge violaceacute
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge violaceacute
mdash plusieurs bandes bleu violaceacute
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Cendres totales (2416) maximum 06 pour cent
Perte agrave la dessiccation (2232) 800 pour cent agrave 900 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave 105 degC
sur 5000 g de drogue reacutecemment broyeacutee
DOSAGE
Broyez extemporaneacutement 50 g de drogue A environ 500 g de drogue broyeacutee exactement
peseacutes ajoutez 95 ml de meacutethanol R Agitez meacutecaniquement pendant 30 min Filtrez dans une
fiole jaugeacutee de 1000 ml lavez le filtre et compleacutetez au volume avec du meacutethanol R Diluez
cette solution au 150 dans une solution drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le
meacutethanol R
Mesurez lrsquoabsorbance (2225) de la solution obtenue agrave 528 nm en prenant une solution
drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le meacutethanol R comme liquide de
compensation
Calculez la teneur pour cent en anthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-O-
glucoside agrave lrsquoaide de lrsquoexpression suivante
718 = absorbance speacutecifique du chlorure de cyanidine 3-O-glucoside agrave 528 nm
A = absorbance agrave 528 nm
M = Masse de la prise drsquoessai en grammes
CONSERVATION
Lorsque le fruit frais de myrtille est congeleacute conservez-le agrave une tempeacuterature infeacuterieure ou
eacutegale agrave minus 18degC
104
ANNEXE III
MONOGRAPHIE DU FRUIT MUcircR
SECHE DE VACCINIUM MYRTILLUS
L
(Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
105
Fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 10 pour cent de tanins exprimeacutes en pyrogallol (C6H6O3 Mr 1261)
(drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur douce un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit sec de myrtille est une baie bleu-noir ratatineacutee subglobuleuse de 5 mm environ de
diamegravetre avec une cicatrice agrave la base Le sommet est surmonteacute par les restes du style et le
calice persistant qui forme un repli circulaire Le meacutesocarpe violet intense et charnu renferme
de nombreuses petites graines ovoiumldes brunes
B Reacuteduisez le fruit sec de myrtille en poudre (355) (2912) La poudre est brun-violet
Examinez au microscope en utilisant de la solution drsquohydrate de chloral R La poudre
preacutesente des cellules scleacutereuses rose-violet agrave paroi eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en
amas et provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des fragments drsquoeacutepicarpe coloreacutes en brun-
rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie des fragments jaune-brun
du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave paroi preacutesentant des
eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles et des prismes de cristaux drsquooxalate de
calcium de diffeacuterente taille
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 2 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912) ajoutez 20 ml de
meacutethanol R Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
106
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge-violet de faible intensiteacute
Chrysantheacutemine une bande rouge- violet Une bande principale rouge-violet
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge-violet
mdash plusieurs bandes bleu-violet
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Perte agrave la dessiccation (2232) au maximum 120 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave
105 degC pendant 2 h sur 1000 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute
Cendres totales (2416) au maximum 50 pour cent
DOSAGE
Effectuez la deacutetermination des tanins dans les drogues veacutegeacutetales (2814) Utilisez 1500 g de
fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912)
107
ANNEXE IV
laquo VACCINIUM MYRTILLUS
POUR
PREPARATIONS
HOMEOPATHIQUES raquo
(Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition)
108
109
110
111
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
REacuteSUMEacute
Vaccinium myrtillus Linneacute ou myrtille sauvage est un sous-arbrisseau de la famille des
Ericaceacutees On la retrouve dans le nord et le centre de lrsquoEurope en Asie et en Ameacuterique
Boreacuteale En France la myrtille est commune dans la plupart des montagnes entre 400 et 2500
megravetres drsquoaltitude Elle est diffeacuterente de la myrtille cultiveacutee ou Vaccinium corymbosum L Son
fruit est une baie bleu-noir globuleuse agrave saveur sucreacutee et aciduleacutee V myrtillus L renferme de
nombreux composeacutes pheacutenoliques dont les anthocyanosides ceux-ci sont principalement
retrouveacutes dans la peau et la pulpe du fruit de la myrtille ils sont agrave lrsquoorigine de la plupart de
ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques mecircme si drsquoautres composeacutes participeraient agrave lrsquoaction beacuteneacutefique
de la myrtille
V myrtillus L est une plante meacutedicinale inscrite sur la liste A de la Pharmacopeacutee franccedilaise
Xegraveme
eacutedition Le fruit (frais et sec) de la myrtille fait lrsquoobjet drsquoune monographie dans la
Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition Les proprieacuteteacutes theacuterapeutiques des feuilles et des fruits
de V myrtillus L ont eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine populaire les fleurs pour leurs
proprieacuteteacutes toniques astringentes antiseptiques dans le traitement de la diarrheacutee de la
dysenterie quant agrave la feuille elle eacutetait surtout utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
Certaines indications sont valideacutees et figurent dans la Note explicative de lrsquoAgence du
meacutedicament de 1998 et la Commission E allemande Si la baie est atoxique la feuille
preacutesenterait un risque drsquointoxication lieacute agrave des fortes doses ou agrave une utilisation chronique
La myrtille a fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vitro in vivo et quelques eacutetudes cliniques
ayant montreacute une faible biodisponibiliteacute (surtout chez lrsquohomme) mais des effets beacuteneacutefiques
dans le domaine vasculaire dans certaines pathologies ougrave le stress oxydant est impliqueacute
(cancer maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives DMLAhellip) cette activiteacute reste agrave ecirctre prouveacutee chez
lrsquohomme Quant aux eacutetudes cliniques concernant lrsquoaction de la myrtille sur la vision (surtout
nocturne) elles restent controverseacutees mais des eacutetudes in vitro reacutecentes ont montreacute ses effets
beacuteneacutefiques sur la reacutegeacuteneacuteration des cellules corneacuteennes Enfin outre son emploi en cuisine la
myrtille est utiliseacutee dans lrsquoindustrie pour ses anthocyanes aux proprieacuteteacutes tinctoriales et dans le
domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments et des compleacutements alimentaires
agrave base de myrtille pour diverses indications (traitement de la fragiliteacute capillaire de
lrsquoinsuffisance veineuse et dans les troubles de la vision meacutesopique et scotopique)
MOTS-CLEFS Vaccinium myrtillus - Myrtille - anthocyanosides - phytotheacuterapie - stress
oxydant
THESE SOUTENUE LE 19 MAI 2010
Par Olivia Maillefert
86 rue des Ecoles
73230 St Alban Leysse
COMPOSITION DU JURY
Preacutesident du jury
Mr KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences en Botanique
Membres du jury
Mr CORJON Gilles Docteur en Pharmacie
Mr CHOVELON Michel Docteur en Pharmacie
- 1ere pagepdf
- table des matiegraverespdf
- thegravese myrtille olivia paginationpdf
- Derniere pagepdf
-
Deuxiegraveme partie Composition chimique de Vaccinium myrtillus L p21
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus p22
1 Identification macroscopique et microscopique p22
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus p22
21 Composition chimique des feuilles p22
22 Composition chimique des fruits p23
II Anthocyanosides p24
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes p24
2 Structure des anthocyanosides p25
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides p26
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides p27
41 Extraction p27
42 Seacuteparation et identification p27
43 Dosage des anthocyanosides p27
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p28
51 Composition en anthocyanosides p28
52 Donneacutees quantitatives p29
53 Donneacutees qualitatives p29
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus p29
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p30
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus p34
1 Acides pheacutenoliques p34
2 Tanins p34
3 Flavonols p35
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans V myrtillus p35
Troisiegraveme partie Inteacuterecircts theacuterapeutiques de Vaccinium myrtillus L p36
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire p37
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur p37
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire p37
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires p39
2 Activiteacute vasoprotectrice p40
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique p40
22 Action sur la reacutesistance capillaire p41
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme p41
24 Action antiatheacuterogegravenique p42
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice p42
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA) p43
5 Action sur lrsquoangiogenegravese p44
II Action de Vaccinium myrtillus dans le stress oxydant p45
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes p45
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p46
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides p46
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma p47
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides p47
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces reacuteactives
azoteacutees p48
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique p49
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines p50
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie p51
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie p51
32 Etudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques p51
4 Effet de Vaccinium myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives
et le vieillissement p53
41 Effets sur un stress eacutemotionnel p53
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication
du stress oxydant p54
5 Effet de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB p56
51 Effets drsquoune exposition solaire p56
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires p56
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire p57
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes p57
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire p58
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge p59
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus p61
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant
un stress oxydant p61
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus p62
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer p62
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus p63
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine p65
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases p66
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes p66
42 Etude de Teller et coll (2009) p66
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision p67
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale p68
2 Eacutetude chez des sujets myopes p69
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004) p70
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique p72
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes p72
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete p73
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine p73
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques p74
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac p74
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique p74
2 Action sur Helicobacter pylori p76
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus p76
1 Action antibacteacuterienne p76
VIII Toxicologie p77
1 Effets indeacutesirables p77
2 Doses leacutetales 50 (DL50) p78
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus p79
Quatriegraveme partie Utilisations de Vaccinium myrtillus L p80
I Utilisations alimentaires p81
1 Utilisations culinaires p81
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire p81
II Utilisations pharmaceutiques p82
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille p83
11 Meacutedicaments allopathiques p83
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques p84
13 Compleacutements alimentaires p85
Conclusion p87
Bibliographie p89
Liste des Annexes p98
Annexe I p99
Annexe II p101
Annexe III p104
Annexe IV p107
1
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
2
LISTE DES FIGURES
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme
3
LISTE DES ABREVIATIONS
AA allyl alcool
ADP adeacutenosine diphosphate
AMPc adeacutenosine monophosphate cyclique
DMLA deacutegeacuteneacuterescence maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge
ECA enzyme de conversion de lrsquoangiotensine
EDRF endothelium-derived relaxing factorfacteur relaxant deacuteriveacute lrsquoendotheacutelium
ERO espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
GAGs glycosaminoglycanes
GSH glutathion
H2O2 peroxyde drsquohydrogegravene
IC50 Inhibitory Concentration 50concentration inhibitrice agrave 50
IEC inhibiteur de lrsquoenzyme de conversion
IGF insulin-like growth factor
LDLs low-density lipoproteins lipoproteacuteines de basse densiteacute
MDA malondialdeacutehyde
NO monoxyde drsquoazote radicalaire
O2- anion superoxyde
OH radical hydroxyle
PGI2-like prostacyclin-like
PLCγ phospholipase Cγ
RTK reacutecepteur agrave activiteacute tyrosine kinase
tBH tert-butylhydroperoxyde
TBRAs thiobarbituric acid reactive substancessubstances reacuteagissant avec lrsquoacide
thiobarbiturique
UV ultraviolet
VEGF vascular endothelial growth factorfacteur de croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire
XOD xanthine oxydase
4
GLOSSAIRE
Termes botaniques
Actinomorphe se dit dune fleur preacutesentant une symeacutetrie axiale
Adneacute soudeacute ou attacheacute agrave sapplique agrave des organes diffeacuterents comme par exemple des
eacutetamines adneacutees au peacuterianthe
Aneacutemogame qualifie le mode de feacutecondation des plantes dans lequel le pollen est porteacute par
le vent
Anthegravere partie de leacutetamine habituellement porteacutee par le filet contenant le pollen celui-ci
est libeacutereacute lorsque souvre cette terminaison renfleacutee sous forme de petit sac oblong
geacuteneacuteralement jaune et double
Campanuleacute se dit dune fleur en forme de cloche
Capiteacute termineacute en tecircte arrondie
Carpelles organe femelle Lensemble des carpelles forme le pistil (ou gyneacuteceacutee)
Dialypeacutetale dont les peacutetales sont indeacutependants les uns des autres
Hermaphrodite plante portant des organes floraux macircle et femelle
Infundibuliforme se dit dune fleur dont la corolle est en forme dentonnoir
Ligneux se dit des veacutegeacutetaux formant du bois arbres et arbustes mais aussi un certain
nombre de plantes grimpantes
Lobeacute se dit dun organe comme feuille ou peacutetale eacutechancreacute mais sans division complegravete
Loculicide qui souvre en se fendant longitudinalement le long de la nervure dorsale de
chaque loge
Marcotte organe veacutegeacutetal aeacuterien qui srsquoenterre et srsquoenracine avant de se seacuteparer (ou drsquoecirctre
seacutepareacute) de la plante megravere
Peacuterianthe ensemble des piegraveces florales non sexueacutees dune fleur
Septicide qualifie un fruit qui souvre en se fendant longitudinalement au niveau des
cloisons (septums) et seacuteparant ainsi les carpelles
Stomate structure foliaire organiseacutee ayant des meacutecanismes drsquoouverture reacuteversibles
permettant les eacutechanges gazeux
5
Teacutenuinucelleacute se dit dun ovule contenant un nucelle peu deacuteveloppeacute (dans les groupes
eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Uniteacutegumenteacute se dit dun ovule ayant une seule enveloppe autour du nucelle (dans les
groupes eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Urceacuteoleacutee corolle en forme de tube dilateacute agrave la base et reacutetreacutecit au sommet
Zygomorphe se dit dune plante preacutesentant une symeacutetrie par rapport agrave un plan
Autres
Astheacutenopie fatigue de loeil surtout lors daccommodation soutenue et qui provoque des
signes dirritation une sensation de brucirclure et des maux de tecircte
Meacutesopique Caracteacuteristique visuelle du systegraveme oculaire utilisant agrave la fois bacirctonnets et cocircnes
pour interpreacuteter une scegravene visuelle dont lintensiteacute lumineuse est comprise entre celle du jour
et de la nuit (creacutepusculaire)
Reacutetinite pigmentaire maladie heacutereacuteditaire deacutegeacuteneacuterative des cellules visuelles reacuteceptrices de
la lumiegravere (cocircnes et bacirctonnets)
Sensibiliteacute au contraste elle est baseacutee sur la capaciteacute du systegraveme visuel agrave deacutetecter des
diffeacuterences de luminances donc de deacuteterminer lexistence de bords entre surfaces
homogegravenes
Scotopique vision nocturne se basant principalement sur linformation capteacutee par les
bacirctonnets
6
Introduction et historique
Dans une socieacuteteacute ougrave la phytotheacuterapie connait un engouement croissant voulant se rapprocher
au plus pregraves du laquo naturel raquo la connaissance des plantes aux vertus theacuterapeutiques est de plus
en plus rechercheacutee La myrtille sauvage ou Vaccinium myrtillus L appartient agrave la famille des
Ericaceacutees elle est lrsquoune des plantes centrales faisant partie de la liste des plantes meacutedicinales
inscrites agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition (liste A) et dont le fuit (sec et frais) fait
lrsquoobjet drsquoune monographie agrave la Pharmacopeacutee europeacuteenne (6egraveme
eacutedition) Lrsquoeacutetymologie du
genre Vaccinium est incertaine il deacuteriverait du nom latin vacca pour vache car la plante eacutetait
volontiers brouteacutee par les bovins mais pour drsquoautres du nom bacca pour baie (43) Le terme
myrtillus provient de la ressemblance avec les feuilles et les fruits du myrte (Myrtus
communis L) V myrtillus empreinte divers noms vernaculaires (airelle airelle noire airelle
anguleuse bluet brimbelle raisin des bois raisin de bruyegraverehellip) Les deacutesignations anglaises
pour la baie de myrtille sont bilberry fruit blueberry whortleberry pour les feuilles bilberry
leaf huckleberry leaf (67)
Ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques sont utiliseacutees dans la meacutedecine populaire depuis fort
longtemps Dioscoride est le premier agrave vanter les bienfaits de la myrtille dans le traitement de
la dysenterie Puis au XVIegraveme
siegravecle une religieuse et mystique allemande Sainte Hildegarde
de Bingen preacuteconisait la plante pour provoquer faciliter ou augmenter les regravegles (20)
Depuis de nombreuses proprieacuteteacutes sont attribueacutees au myrtillier en fonction de la partie de
plante utiliseacutee On utilisait les baies pour ses proprieacuteteacutes astringentes toniques antiseptiques
dans le traitement de la diarrheacutee des heacutemorroiumldes des inflammations gastro-intestinaleshellip
quant aux feuilles elles eacutetaient surtout utiliseacutees pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes (43)
Lrsquoameacutelioration de la vision nocturne par la myrtille a eacuteteacute rapporteacutee par les pilotes de la British
Royal Air Force qui en consommaient quotidiennement Certains usages precircteacutes agrave la myrtille
ont eacuteteacute valideacutes et figure dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la
monographie de la Commission E allemande (ces usages seront citeacutes dans cette thegravese) La
myrtille fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vivo in vitro et de quelques eacutetudes cliniques
(dans des domaines meacutedicaux varieacutes) dont certaines posent des interrogations Ses utilisations
sont diverses on lrsquoemploie en cuisine (pacirctisseries confitures vin vinaigrehellip) dans
lrsquoindustrie et dans le domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments agrave base de
myrtille et des compliments alimentaires
7
Premiegravere partie
Botanique de Vaccinium myrtillus L
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L (70)
8
I Classification botanique de la myrtille
Le taxon des Spermatophytes ou plantes agrave graines est constitueacute de deux clades les
Gymnospermes ou plantes agrave ovules nus et les Angiospermes ou plantes agrave ovaires
La myrtille (ou myrtillier) appartient agrave lrsquoembranchement des Angiospermes se distinguant des
Gymnospermes par plusieurs caractegraveres dont trois fondamentaux
- les organes reproducteurs se groupent en fleurs bisexueacutees
- les carpelles entourent complegravetement les ovules et se transforment apregraves
feacutecondation en fruit
- le gameacutetophyte femelle situeacute dans lrsquoovule nommeacute sac embryonnaire est le siegravege
drsquoune double feacutecondation lrsquoune donnant lrsquoembryon lrsquoautre conduisant agrave lrsquoalbumen (tissu de
reacuteserve des graines agrave 3n chromosomes)
Selon la classification systeacutematique la myrtille fait partie de la classe des Asteacuterideacutees
(Eudicots agrave peacutetales et carpelles soudeacutes) constitueacutee drsquoenviron 67000 espegraveces on distingue les
Asteacuterideacutees basales et les Euasteacuterideacutees I et II Les Asteacuterideacutees basales ont deux ordres fregraveres
les Ericales et les Cornales (25)
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees (22) (25) (30)
Lrsquoordre des Ericales dont le nom vient drsquoErica pour bruyegravere comprend 7000 espegraveces
reacuteparties en 24 familles dont celle des Ericaceacutees auxquelles appartient la myrtille Cette
famille est reacutepartie dans le monde entier mais avec une preacutefeacuterence geacuteographique pour les
reacutegions tempeacutereacutees ou froides voire mecircme les hautes montagnes De faccedilon geacuteneacuterale elle
regroupe des arbres des arbustes et des lianes aux caracteacuteristiques suivantes (Figure 2)
- des feuilles alternes simples entiegraveres agrave denteacutees-serreacutees dont les bords du limbe
peuvent se replier sur eux-mecircmes afin de proteacuteger les stomates porteacutes par la face infeacuterieure
de la transpiration Chez certaines Ericaceacutees les feuilles sont plates et coriaces ce qui leur
procure une reacutesistance agrave la seacutecheresse
- des fleurs le plus souvent hermaphrodites geacuteneacuteralement plus ou moins pendantes
actinomorphes agrave leacutegegraverement zygomorphes
- quatre ou cinq seacutepales libres agrave leacutegegraverement soudeacutes
les mots suivis de ce symbole ont leur deacutefinition dans le glossaire
9
- quatre ou cinq peacutetales soudeacutees constituant une corolle cylindrique ou urceacuteoleacutee
campanuleacutee ou infundibuliforme parfois dialypeacutetale Chez certains genres aneacutemogames
le peacuterianthe nrsquoest constitueacute que de deux ou trois seacutepales et peacutetales ou trois agrave quatre peacutetales
- huit agrave dix eacutetamines reacuteduites agrave deux ou trois chez les espegraveces aneacutemogames
- le filet des eacutetamines est libre ou adneacute agrave la corolle voire mecircme soudeacute Quelques fois
il peut y avoir une paire drsquoappendices en eacuteperon dresseacute srsquoinseacuterant agrave proximiteacute ou agrave lrsquoendroit
mecircme ougrave se trouve lrsquoanthegravere
- lrsquoanthegravere est constitueacute drsquoune ou de deux loges srsquoouvrant par deux pores libeacuterant les
grains de pollen habituellement disposeacutes en teacutetrades
- les carpelles sont au nombre de deux agrave dix agrave ovaire supegravere ou infegravere comme chez la
myrtille (crsquoest-agrave-dire que lrsquoovaire peut se souder agrave la coupe florale)
- un style avec souvent un creux agrave lrsquointeacuterieur
- un stigmate capiteacute ou faiblement lobeacute
- un ou plusieurs ovules par loge uniteacutegumenteacutes ou teacutenuinucelleacutes
- enfin le fruit peut ecirctre une capsule septicide ou loculicide une drupe agrave plusieurs
noyaux ou une baie comme chez la myrtille
4 ou 5 seacutepales agrave soudure ou adnation variable
4 ou 5 peacutetales soudeacutes
Soudure ou adnation variable
Ovaire infegravere
Ovaire supegravere Type de fruit
Symeacutetrie radiaire () 2 agrave 10 carpelles soudeacutees
ou 4 agrave 10 eacutetamines
Symeacutetrie bilateacuterale (X) Etamines adneacutees aux peacutetales
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees (30)
10
La famille des Ericaceacutees regroupe plusieurs genres et espegraveces dont le nombre varie selon la
litteacuterature de 70 agrave 130 genres et de 2000 agrave 3400 espegraveces Cette famille comprend
- des plantes alimentaires comme Vaccinium myrtillus L (myrtille) Vaccinium
uliginosum L (airelle des marais) Gaultheria procumbens L (theacute du Canada qui fournit le
salicylate de meacutethyle)hellip
- des plantes meacutedicinales comme V myrtillus Ledum palustre L (leacutedon des marais)
Calluna vulgaris L (bruyegravere callune)hellip
- des plantes utiliseacutees pour lrsquoobtention du bois comme Erica arborea L (fabrication
des pipes)
- de nombreuses espegraveces ornementales dans les genres Arbutus (arbousier) Erica
(bruyegravere) Rhododendron (azaleacutee)hellip
La famille des Ericaceacutees est constitueacutee de quatre sous-familles dont les Vaccinioiumldeacutees qui
englobent le genre Vaccinium
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium (22)
Le genre Vaccinium se caracteacuterise par plusieurs particulariteacutes botaniques
- des tiges drsquoaspect contourneacute conseacutequence drsquoune croissance tregraves lente
- des feuilles coriaces plates reacutesistantes agrave la seacutecheresse
- des anthegraveres srsquoouvrant par deux pores souvent munis de deux appendices dresseacutes en
forme de cornes
- un ovaire composeacute de cinq carpelles fermeacutes
- un fruit repreacutesenteacute par une capsule
Ce genre est lui-mecircme constitueacute drsquoenviron 150 espegraveces auquel fait partie la myrtille
Les myrtilles drsquoEurope regroupent deux espegraveces de myrtilles
- V uliginosum L
- V myrtillus L
3 Vaccinum myrtillus L ou myrtille sauvage
31 Description botanique (22) (67)
Le myrtillier (Vaccinum myrtillus L) est un sous-arbrisseau vivace atteignant 20 agrave 60 cm de
hauteur agrave tige verte dresseacutee cylindrique rigide et agrave rameaux vert pacircle anguleux aileacutes dans
leur longueur et plus ou moins grecircles Cette tige est recouverte drsquoune eacutecorce ligneuse sans
poil ni stipule ni latex ni vrille
11
Les racines souterraines sont nombreuses et forment un lacis tregraves serreacute proche du sol avec des
racines adventives La plante se perpeacutetue soit par ramification des tiges souterraines soit par
des bourgeons prenant naissance sur les racines elle est dite plante sociale car elle se
marcotte naturellement
Les feuilles (Figure 3) vert pacircle sont petites (1 agrave 2 cm voire 2 agrave 3 cm selon la litteacuterature)
alternes de forme oblongue agrave ovale agrave pointe fine et allongeacutee Le bord du limbe est finement
denteleacute avec des nervures opposeacutees Ces feuilles sont courtement peacutetioleacutees avec un peacutetiole
(tige portant la feuille) recourbeacute vers le bas Les feuilles prennent une belle couleur rouge-
cuivre en automne Elles sont caduques et reacuteapparaissent au printemps
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus (75)
Les fleurs de couleur blanc roseacute rouge pacircle agrave verdacirctre ont une corolle pendante comportant
quatre ou cinq peacutetales soudeacutes entre eux sur une grande longueur et formant un tube globuleux
agrave lobes courts Elles sont solitaires ou regroupeacutees par deux porteacutees par un peacutedoncule courbeacute
Les seacutepales tregraves petits verts sont soudeacutes agrave la corolle (Figure 4) La floraison a lieu en mai-
juin
12
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus (72)
Le fruit est une baie globuleuse de la taille drsquoun petit pois (diamegravetre variant de 4 agrave 8 mm)
bleu noir agrave maturiteacute cette baie preacutesente parfois des restes de style agrave la base et peut ecirctre
surmonteacutee du calice agrave son sommet formant un disque entoureacute drsquoun faible rebord (Figure 5)
On peut apercevoir agrave la base de la baie la cicatrice du peacutedoncule Le meacutesocarpe est charnu
constitueacute de 4 ou 5 petites loges contenant de multiples petites graines brillantes brun-rouge
La baie mucircrit jusqursquoen en juillet-aoucirct voire septembre
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus (72)
Si le fruit est frais la saveur est douce sucreacutee et leacutegegraverement aciduleacutee voire mecircme astringente
Le fruit sec par contre a une saveur aigre-douce leacutegegraverement astringente En ce qui concerne
les organes reproducteurs lrsquoovaire infegravere est soudeacute agrave la coupe florale Les eacutetamines eacutegales
entre elles deacutepassent la dizaine en nombre elles sont complegravetement libres soudeacutees au
reacuteceptacle elles peuvent ecirctre soit disposeacutees en plusieurs verticilles soit nrsquoavoir aucune
position bien deacutefinie
13
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille (67)
Vaccinium myrtillus est une myrtille sauvage tregraves peu cultiveacutee originaire drsquoEurope du Nord et
Centrale abondant dans les bois clairsemeacutes et les bruyegraveres sur les sols siliceux de montagne
En France on la trouve dans la plupart des massifs montagneux entre 400 et 2500 megravetres
drsquoaltitude (Figure 6)
Leacutegende
Preacutesent
Zone geacuteographique non renseigneacutee
Preacutesence non signaleacutee
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France (81)
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium
41 Vaccinium uliginosum L (22)
Vaccinium uliginosum L nommeacute myrtille de loup ou myrtille des marais se situe
principalement aux bords des marais dans les tourbiegraveres les landes et les bois humides On le
trouve en Dauphineacute dans le Jura les Pyreacuteneacuteeshellip et en Savoie jusqursquoagrave 2000 megravetres et plus
Crsquoest un buisson bas agrave moyen agrave tiges et rameaux arrondis dans leur longueur Ses feuilles
vert-pacircle au dessus nervureacutees au-dessous ne persistent pas en hiver Les fleurs (Figure 7)
sont disposeacutees en grappe de mai agrave juillet
14
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum (72)
Le fruit (Figure 8) drsquoun diamegravetre drsquoenviron 6 mm est bleu-noir pruineux donnant un jus
incolore et agrave chair blanche Sa saveur est fade et sucreacutee Il mucircrit en juillet-aoucirct voire mecircme
jusqursquoen septembre
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum (72)
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo (61)
Ce sont des myrtilles drsquoorigine ameacutericaine dont lrsquoimplantation a eacuteteacute faite essentiellement agrave
partir de Vaccinium corymbosum L (myrtillier geacuteant ou arbustif) Celui-ci est un arbuste
pouvant atteindre 25 megravetres de hauteur drsquoougrave son nom Il est reacutesistant au froid Ses
inflorescences forment un corymbe ougrave le nombre de fleurs par corymbe varie beaucoup
(Figure 9) La baie (Figure 10) est de couleur bleue recouvert de pruine qui masque une chair
blanche
15
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum (79)
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo (79)
La floraison apparait de mars agrave fin mai et dure plusieurs semaines Les feuilles (Figure 11)
prennent une belle coloration en automne ce qui en fait une magnifique plante deacutecorative
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum (79)
16
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage la myrtille drsquoorigine ameacutericaine a un fruit plus gros et
plus sucreacute Cette derniegravere a une pulpe non coloreacutee Plusieurs varieacuteteacutes existent classeacutees en
fonction de lrsquoeacutepoque de maturiteacute
- les varieacuteteacutes preacutecoces comme le Bluetta lrsquoEarlibluehellip
- les varieacuteteacutes demi-preacutecoces comme le Patriot le Collinshellip
- les varieacuteteacutes demi-saison comme le Bluejay le Bluecrophellip
- les varieacuteteacutes demi-tardives comme le Berkeley le Jerseyhellip
- les varieacuteteacutes tregraves tardives comme le Darrow lrsquoElliothellip
43 Vaccinium macrocarpon L (4)
Vaccinium macrocarpon Ait ou canneberge drsquoAmeacuterique (Figure 12) reacutesistant agrave de fortes
geleacutees de moins 35degC et plus est un arbrisseau ressemblant agrave la myrtille sa croissance est
lente Son fruit est une baie aciduleacutee utiliseacutee dans la preacutevention des reacutecidives drsquoinfections
urinaires car elle contient des moleacutecules anti-adheacutesines des fimbriae drsquoEscherichia coli
(bacteacuterie intestinale pouvant ecirctre la cause drsquoinfection urinaire)
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits (83)
Drsquoautres espegraveces de Vaccinium se rencontrent sur le continent ameacutericain comme
- Vaccinium angustifolium Ait (Bleuet nain) qui est un buisson bas infeacuterieur agrave 50 cm
reacutesistant au froid
- Vaccinium ashei Reade qui est un buisson haut (3 agrave 6 megravetres) reacutesistant agrave la
seacutecheresse
Il ya beaucoup drsquoautre espegraveces de Vaccinium que nous ne citerons pas ici
17
II Culture reacutecolte et production des myrtilles
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques
Comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment la myrtille de culture est diffeacuterente de la myrtille
sauvage exigeant des conditions optimales pour une bonne production
11 pH du sol (49) (61)
Le sol doit ecirctre acide et mecircme tregraves acide pour permettre une croissance et un deacuteveloppement
normal ainsi qursquoune bonne reacuteussite de culture pH compris entre 4 et 5 voire 4 agrave 52 selon la
litteacuterature Or ce type de sol nrsquoest pas freacutequent en France Le pH optimum est de 48 Si le pH
deacutepasse 55 les plantes sont chlorotiques et il faut soit diminuer le pH soit renoncer agrave une
telle culture Les sols humides doivent ecirctre eacuteviteacutes car les racines sont tregraves sensibles agrave
lrsquoasphyxie et le deacuteveloppement du systegraveme racinaire est limiteacute
12 Conditions climatiques (49) (61)
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage qui croit dans les landes et les sous-bois humides de
demi-montagne ougrave elle vit en colonie vers 1000 megravetres drsquoaltitude le myrtillier cultiveacute est une
plante de plaine et de faible altitude qui preacutefegravere les endroits ensoleilleacutes Ainsi une exposition
sud ou sud-ouest est conseilleacutee mais il faut faire attention agrave la seacutecheresse En raison des
risques de geleacutees printaniegraveres il faut eacuteviter les lisiegraveres de bois ou la profondeur des valleacutees
Cette plante peut ecirctre eacutegalement cultiveacutee en demi-montagne agrave une altitude comprise entre 600
et 800 megravetres Reacutesistante au froid elle peut supporter de basses tempeacuteratures jusqursquoagrave -30degC
Bien qursquoau cours de la floraison les fleurs peuvent supporter des tempeacuteratures neacutegatives (-
5degC) il faut faire attention car les deacutegacircts peuvent ecirctre tregraves importants surtout sur les varieacuteteacutes
sensibles Agrave lrsquoopposeacute le myrtillier craint la seacutecheresse en eacuteteacute et les vents secs
13 Besoins en eau (49) (61)
La myrtille cultiveacutee aime la proximiteacute de la surface de la nappe phreacuteatique mais craint les
excegraves en eau Ses besoins sont limiteacutes mais permanents tout le long de sa peacuteriode de vie (au
moins 1000 mm drsquoeau durant lrsquoeacuteteacute) Ceci peut srsquoexpliquer par le deacuteveloppement tregraves
superficiel de son systegraveme racinaire et lrsquoabsence de poils absorbants En Lorraine par
exemple le systegraveme drsquoirrigation est le laquo goutte agrave goutte raquo localiseacute permettant drsquoapporter les
doses neacutecessaires en eau et de limiter la contamination fongique Les besoins en eau par
semaine sont de 20 mm
18
Ainsi il faudra tenir compte de ces exigences pour choisir la meilleure exposition possible
2 Reacutecolte des myrtilles
21 Date et mode de reacutecolte (49) (22)
La croissance de la plante eacutetant lente la reacutecolte peut deacutebuter la 2egraveme
anneacutee apregraves la plantation
La production augmente reacuteguliegraverement jusqursquoagrave la 8egraveme
ou la 9egraveme
anneacutee en rapport avec le
deacuteveloppement veacutegeacutetatif La date de reacutecolte deacutepend beaucoup de la varieacuteteacute de lrsquoaltitude des
tempeacuteratures printaniegraveres et du mode de reacutecolte Elle srsquoeacutetend de mai agrave fin septembre voire mi-
juin pour les varieacuteteacutes les plus preacutecoces et fin septembre pour les varieacuteteacutes les plus tardives La
reacutecolte deacutebute lorsque 20 des baies sont mucircres En effet si la reacutecolte se fait trop tocirct les
fruits ne sont pas mucircres et seront de mauvaise qualiteacute En geacuteneacuteral la reacutecolte dure de 3 agrave 5
semaines avec plusieurs passages successifs (un ou plusieurs par semaine) pour une mecircme
varieacuteteacute au fur et agrave mesure de la maturation des fruits
La reacutecolte de la myrtille cultiveacutee se fait manuellement directement dans les barquettes pour
eacuteviter drsquoabicircmer les fruits avec une manipulation suppleacutementaire Ceci est diffeacuterent pour la
myrtille sauvage ougrave la reacutecolte se fait agrave lrsquoaide drsquoun instrument que lrsquoon nomme laquo peigne raquo
(Figure 13) dont il existe divers modegraveles (en bois ou en fer) constitueacutes drsquoune grille permettant
drsquoarracher vite et en quantiteacutes importantes les baies en les emprisonnant entre les dents
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages (78)
19
3 Production des myrtilles
31 Production mondiale (61)
Les Etats-Unis sont les premiers producteurs mondiaux de myrtilles suivis du Canada Ces
pays produisent deux types de myrtille des myrtilles sauvages appartenant majoritairement agrave
lrsquoespegravece Vaccinium angustifolium qui se rapproche de la myrtille europeacuteenne comme nous
lrsquoavons vu dans le chapitre preacuteceacutedent Son deacuteboucheacute est principalement la congeacutelation et la
transformation dont une partie est exporteacutee en Europe
Les myrtilles cultiveacutees aux USA sont principalement composeacutees de
- Vaccinium corymbosum
- des hybrides entre V corymbosum et V angustifolium
- des hybrides entre V ashei et V corymbosum
Ces myrtilles cultiveacutees sont commercialiseacutees majoritairement sur le marcheacute inteacuterieur et un
faible tonnage est exporteacute en Europe et surtout en Australie
En Europe de lrsquoEst et en Scandinavie la cueillette des myrtilles sauvages pour le commerce
ou lrsquoautoconsommation nrsquoest pas neacutegligeable
32 Production europeacuteenne (22) (61)
Crsquoest lrsquoAllemagne qui deacutetient les plus grandes surfaces de myrtilles cultiveacutees suivie par la
France et les Pays-Bas Elles sont aussi cultiveacutees en Italie et au Portugal mais de faccedilon moins
importante
Dans les pays scandinaves la production est principalement constitueacutee de V myrtillus Il faut
noter que des quantiteacutes non neacutegligeables de reacutecolte sont le fait de cueillettes reacutealiseacutees par des
laquo pillards raquo des cultivateurs et enfin par des voyageurs des particuliers ou des touristes qui
consomment les myrtilles sur place pour leur plaisir
33 Production franccedilaise (22) (61)
En France les Landes constituent la premiegravere zone de production des myrtilles cultiveacutees
suivies du Val de Loire du Limousin de la Sologne et des Vosges La majoriteacute des myrtilles
cultiveacutees au niveau national (1300 agrave 1500 tonnesan) est destineacutee pour 95 des tonnages au
marcheacute du frais et est exporteacutee vers lrsquoAllemagne ougrave la consommation y est plus importante
qursquoen France vers la Suisse la Grande-Bretagne lrsquoItaliehellip et en importe de Suegravede du
Canada de Pologne et de Roumanie
En ce qui concerne les myrtilles sauvages 1500 agrave 2000 tonnes sont reacutecolteacutees en France La
principale zone de production est lrsquoArdegraveche suivie du Massif central et des Vosges Cette
20
reacutecolte se fait au peigne par des personnes cueilleurs agriculteurs qui ont un laquo droit de
cueillette raquo La majoriteacute des myrtilles sauvages reacutecolteacutees est destineacutee agrave la transformation en
geleacutees confitureshellippar des ateliers drsquoexploitation ou par des entreprises proches des sites de
production Une faible quantiteacute est destineacutee agrave la vente sur les marcheacutes ou agrave des grossistes pour
la restauration et les eacutepiceries fines
Les statistiques de 2001 ont reacutecapituleacute une production mondiale drsquoenviron 190000 tonnes
(1000 tonnes pour la France) avec pregraves de 38000 hectares cultiveacutes aux Etats-Unis et au
Canada
4 Post-reacutecolte
41 Conservation (49) (61)
Une fois les myrtilles reacutecolteacutees elles doivent ecirctre placeacutees dans une chambre froide pour
garder toutes ses qualiteacutes Lrsquoideacuteal pour conserver le fruit intact pendant une dizaine de jours
est de le stocker entre 8 et 10degC Il gardera alors son parfum lrsquoarocircme en sera mecircme
deacuteveloppeacute Si on veut le conserver plus longtemps il faut le soumettre agrave des tempeacuteratures plus
basses En effet la congeacutelation est un bon proceacutedeacute de conservation pour ce fruit
42 Conditionnement (61)
Le conditionnement que lrsquoon retrouve le plus souvent est la barquette en plastique fermeacutee par
un couvercle perforeacute Ainsi les myrtilles peuvent ecirctre conserveacutees selon les conditions deacutefinies
preacuteceacutedemment
Le temps de stockage est ameacutelioreacute par lrsquoutilisation de films en polypropylegravene semi-
permeacuteables qui maintiennent le fruit sous atmosphegravere modifieacutee Ces films peuvent apregraves
sortie du froid ecirctre gardeacutes durant seulement 24 heures car au-delagrave il peut y avoir des risques
de deacuteveloppement de pourritures
21
Deuxiegraveme partie
Composition chimique
de Vaccinium myrtillus L
22
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus 1 Identification macroscopique et microscopique (43) (67)
Du point de vue macroscopique les feuilles de V myrtillus sont alternes caduques ovales agrave
elliptiques pointues courtement peacutetioleacutees et finement denteleacutees Le bord de la feuille preacutesente
des poils seacutecreacuteteurs peacutedicelleacutes agrave lrsquoextreacutemiteacute de chaque dent quelques fois briseacutes
Du point de vue microscopique la feuille preacutesente des stomates paracytiques des poils agrave
parois eacutepaisses sur la face supeacuterieure des grandes nervures des poils seacutecreacuteteurs et des rangeacutees
de cellules agrave cristaux sur la nervure principale
Du point de vue macroscopique le fruit est une baie globuleuse drsquoun noir violaceacutee nettement
deacuteprimeacutee au sommet de la taille drsquoun petit pois Cet examen doit se faire sur une baie intacte
crsquoest-agrave-dire ni attaqueacutee par des insectes ni moisie De plus elle doit ecirctre molle car elle
devient cassante si elle est stockeacutee de faccedilon prolongeacutee
Lrsquoexamen microscopique est surtout caracteacuteriseacute par la preacutesence de cellules agrave cristaux du
meacutesocarpe et de lrsquoendocarpe Le fruit frais broyeacute ou la poudre de fruit sec met en eacutevidence la
preacutesence de macles de cristaux drsquooxalate de calcium des amas de cellules scleacutereuses de
couleur rose violaceacute agrave parois canaliculeacutees et des fragments jaune-brun du teacutegument seacuteminal agrave
paroi en forme de fer agrave cheval
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus
21 Composition chimique des feuilles (11) (67)
Celle-ci renferme des tanins cateacutechiques (08 agrave 67) des cateacutechols (eacutepicateacutechol
gallocateacutechol eacutepigallocateacutecholhellip) jusqursquoagrave 10 des proanthocyanidines (dimegraveres du cateacutechol
et drsquoeacutepicateacutechol) des flavonoiumldes (heacuteteacuterosides du querceacutetol rhamnoglucosyl- arabinosyl- et
glucuronyl-querceacutetol ainsi que des heacuteteacuterosides de kaempfeacuterol astragaloside) des iridoiumldes
des acides-pheacutenols surtout des acides chlorogeacuteniques et enfin des traces drsquoalcaloiumldes
quinolizidiniques comme la myrtine et lrsquoeacutepimyrtine
La bibliographie ancienne cite la preacutesence drsquoarbutoside et drsquohydroquinone qui ne sont
preacutesents qursquoagrave lrsquoeacutetat de trace voire totalement absent Ceci peut srsquoexpliquer soit par la preacutesence
de chimiotypes soit par une contamination des lots par des espegraveces proches qui ont le mecircme
habitat eacutecologique comme Vaccinium vitis-idaea L ou Vaccinium x intermedium Ruthe
(hybride entre V myrtillus et V vitis-idaea) dans lesquels on retrouve de lrsquoarbutoside de
lrsquohydroquinone libre et du pyroside (6-O-meacutethylarbutoside)
Enfin la feuille contient de faccedilon importante du chrome et du manganegravese
23
22 Composition chimique des fruits (11) (67)
Le fruit de la myrtille est riche en eau (jusqursquoagrave 90) en oligosaccharides (3 agrave 7) et en
acides organiques (acide malique citrique et quinique) Il contient des tanins essentiellement
des tanins cateacutechiques des proanthocyanidols (dimegravere de cateacutechol et drsquoeacutepicateacutechol) une
quinzaine drsquoheacuteteacuterosides les anthocyanosides qui sont des O-glucosides des O-galactosides et
des O-arabinosides en C-3 du cyanidol peacuteonidol delphinidol malvidol et peacutetunidol des
flavonoiumldes (heacuteteacuterosides de querceacutetol et kaempfeacuterol) des flavan-3-ols monomegraveres (cateacutechol et
eacutepicateacutechol)
Enfin on retrouve drsquoautres constituants comme les acides chlorogeacuteniques cafeacuteylquiniques
des acides pheacutenols et des pectines Les iridoiumldes quant agrave eux ne sont preacutesents que dans les
fruits immatures
24
II Anthocyanosides
Avant drsquoentrer dans les deacutetails il est important de connaitre les principaux groupes de
composeacutes phytochimiques que lrsquoon retrouve dans la plupart des fruits et des leacutegumes
(Tableau I)
Familles Classes Sous-classes
Polypheacutenols Flavonoiumldes - anthocyanidines
- flavones
-flavanols
- flavanones
- flavonols
- isoflavones
- tanins
acides pheacutenoliques - hydroxycinnamates
- hydroxybenzoates
non-flavonoiumldes - stilbegravenes
- coumarines
- lignans
Terpegravenes - caroteacutenoiumldes
- monoterpegravenes
Composeacutes soufreacutes - allyl sulfides
- isothiocyanates
Saponines - triterpeacutenoiumldes
- steacuteroiumldes
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes (7)
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes
Le terme anthocyane du grec laquo anthos raquo (signifiant fleur) et laquo kyanos raquo (bleu) est utiliseacute pour
deacutesigner la substance responsable de la coloration du bleuet Ce terme srsquoapplique agrave un groupe
de pigments qui donnent la coloration rouge rose mauve pourpre bleue et violette de la
plupart des fleurs et des fruits Ces pigments existent sous deux formes soit la forme
heacuteteacuteroside (anthocyanosides ou laquo anthocyanins raquo en anglais) soit sous la forme geacutenine
correspondante (anthocyanidols ou laquo anthocyanidins raquo en anglais) On connait environ 400
25
anthocyanosides qui sont preacutesents chez tous les Angiospermes agrave lrsquoexception des
Caryophyllales ougrave seule la famille des Caryophyllaceacutees et des Molluginaceacutees en contiennent
En effet leur preacutesence chez les Gymnospermes est rare Comme nous lrsquoavons vu les
anthocyanes sont responsables de la couleur des fleurs et des fruits mais peuvent eacutegalement
coloreacutes les bracteacutees les feuilles les peacutetioles les racines voire mecircme les bulbes comme dans
lrsquooignon rouge Cependant ce sont dans les fruits que leur concentration est la plus eacuteleveacutee Ils
srsquoaccumulent dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques sous forme de solution et de faccedilon
moins freacutequente sous forme drsquoanthocyanoplastes (11) Selon Szajdek et coll (58) les parois
cellulaires et la chair ne contiennent presque pas drsquoanthocyanosides
2 Structure des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont les pigments les plus importants des plantes visibles par lrsquoœil
humain Ils appartiennent agrave une large classe de composeacutes pheacutenoliques que lrsquoon appelle les
flavonoiumldes Ce sont des glycosides des deacuteriveacutes polyhydroxy et polymethoxy du 2-
pheacutenylbenzopyrylium plus communeacutement appeleacutes cation flavylium
Les diffeacuterences existant entre les anthocyanosides individuels sont lieacutees au nombre de groupe
hydroxyl agrave la nature et agrave la position drsquoattachement des sucres agrave la moleacutecule ainsi qursquoau
nombre et agrave la nature des acides aliphatiques ou aromatiques des sucres attacheacutes agrave la
moleacutecule Dix sept anthocyanosides et leurs aglycones naturellement preacutesents dans les plantes
sont connus Cependant seulement six geacutenines sont les plus freacutequentes (voire quasiment
universelles) dans les plantes supeacuterieures Il srsquoagit du cyanidol (50) du peacutelargonidol (12)
du peacuteonidol (12) du delphinidol (12) du peacutetunidol (7) et du malvidol (7) (Figure 14)
Les glycosides de trois anthocyanidines non meacutethyleacutes les plus largement reacutepandus dans la
nature sont la delphinidine la cyanidine et la peacutelargonidine Ils sont preacutesents dans 80 des
feuilles pigmenteacutees 69 des fruits et 50 des fleurs respectivement (33)
Dans les baies les anthocyanosides sont retrouveacutes sont la forme de mono di ou triglycosides
ougrave les reacutesidus glycosides sont principalement lieacutes agrave C-3 et moins freacutequemment agrave C-5 ou C-7
Les sucres les plus courants sont le glucose le galactose le rhamnose lrsquoarabinose le rutinose
le sambubiose et le sophorose De plus les glycosides des anthocyanosides sont souvent
acyleacutes par des acides comme les acides p-coumarique cafeacuteique feacuterulique et moins
couramment par les acides p-hydroxybenzoiumlque malonique ou aceacutetique (58)
26
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines (65)
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont des pigments solubles dans lrsquoeau ils sont instables agrave la lumiegravere agrave
la tempeacuterature et agrave lrsquooxygegravene Ils agissent en rapport au cation flavylium qui est agrave la fois un
diacide faible et un bon eacutelectrophile Agrave pH tregraves acide (lt agrave 3) la forme cationique coloreacutee en
rouge est stable Agrave pH moins acide (entre 4 et 6) la moleacutecule perd deux protons donnant une
moleacutecule neutre ou ioniseacutee devenant une forme quinonoiumlde coloreacutee en bleu et stabiliseacutee par
reacutesonnance Lrsquohydratation de la moleacutecule conduit agrave la formation drsquoune laquo pseudo-base raquo
carbinolique incolore et si le pH augmente la moleacutecule se transforme en pheacutenate (forme
ioniseacutee) la structure anthocyanique eacutetant deacutetruite Ainsi les anthocyanosides en milieu neutre
ou tregraves peu acide perdent leur coloration Or dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques le
pH est tregraves rarement infeacuterieur agrave 3 Sa coloration dans le milieu vivant peut donc srsquoexpliquer
par trois meacutecanismes qui permettent une protection ou une stabilisation de la moleacutecule
- soit un meacutecanisme par lequel les acides acylant les sucres forment un laquo sandwich raquo
autour de la geacutenine permettant une copigmentation intramoleacuteculaire
- soit par une auto-copigmentation se traduisant par lrsquoempilement intermoleacuteculaire
drsquoanthocyanosides se proteacutegeant les uns avec les autres
- soit par une copigmentation avec les flavonoiumldes (11)
27
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides
41 Extraction
Les anthocyanosides sont solubles dans les solvants polaires et lrsquoextraction agrave partir des plantes
est reacutealiseacutee en utilisant du meacutethanol qui contient de faibles quantiteacutes drsquoacide chlorhydrique ou
drsquoacide formique Il est preacutefeacuterable drsquoutiliser des acides plus faibles comme lrsquoacide aceacutetique
tartrique ou citrique des acides volatils ou travailler en milieu neutre et agrave basse tempeacuterature
pour empecirccher la deacutesacylation des anthocyanosides
Lrsquoaceacutetone peut aussi ecirctre utiliseacutee pour lrsquoextraction des anthocyanosides de plusieurs plantes
Par rapport au meacutethanol acidifieacute lrsquousage de ce solvant a lrsquoavantage drsquoecirctre une technique plus
efficace et reproductible
Lrsquoextraction en phase solide peut ecirctre utiliseacutee pour la purification initiale des extraits crus
drsquoanthocyanosides (33)
42 Seacuteparation et identification
Pour la seacuteparation et lrsquoanalyse de la structure des anthocyanosides lrsquoutilisation de la
chromatographie liquide coupleacutee agrave la spectromeacutetrie de masse permet de combiner la
seacuteparation de la chromatographie liquide avec la sensibiliteacute et la seacutelectiviteacute de la spectromeacutetrie
de masse (33) Drsquoautres meacutethodes chromatographiques peuvent ecirctre utiliseacutees pour leur
seacuteparation comme les colonnes de polyamide de polyvinylpyrrolidone les reacutesines
eacutechangeuses drsquoions la chromatographie sur couche mince preacuteparative sur cellulose (10)
Lrsquoanalyse des plantes agrave anthocyanosides peut ecirctre reacutealiseacutee par la chromatographie liquide
associeacutee agrave un deacutetecteur agrave barrettes de diodes Cette analyse peut ecirctre faite par lrsquoeacutelectrophoregravese
capillaire qui selon Szajdek et coll (58) est une meacutethode avec une tregraves bonne sensibiliteacute une
haute reacutesolution coupleacutee agrave une basse consommation drsquoeacutechantillon et enfin un moindre
laquo gaspillage raquo des solvants utiliseacutes
Drsquoautres meacutethodes plus perfectionneacutees ne peuvent ecirctre utiliseacutees que par des laboratoires de
recherche
43 Dosage des anthocyanosides
Le dosage se fait par spectrophotomeacutetrie aux longueurs drsquoonde des maximums drsquoabsorption
des anthocyanosides (λ = 520 nm) Il peut ecirctre fait sur une solution alcoolique acide ou sur un
jus acidifieacute Dans tout les cas il faut le faire en milieu tregraves dilueacute pour empecirccher les moleacutecules
drsquoanthocyanosides de srsquoassocier les unes avec les autres (11)
28
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
51 Composition en anthocyanosides
Les baies de V myrtillus contiennent environ quinze anthocyanosides ces heacuteteacuterosides sont
des O-glucosides des O-galactosides et des O-arabinosides en C-3 du cyanidol du peacuteonidol
du delphinidol du malvidol et du peacutetunidol (Figure 15)
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus (14)
29
52 Donneacutees quantitatives
Vaccinum myrtillus contient une quantiteacute importante drsquoanthocyanosides (300 agrave
698 mg100 g) Lrsquoeacutequipe de Prior et coll (50) a montreacute que la quantiteacute drsquoanthocyanosides
augmente avec la maturiteacute du fruit lors de la reacutecolte
Burdulis et coll (12) ont eacutetudieacute la diversiteacute des anthocyanosides du fruit de V myrtillus dans
diffeacuterents pays comme la Lituanie la Suegravede la Russie et la Bieacutelorussie ainsi que dans
diffeacuterentes reacutegions de Lituanie comme Šilutė Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees en
anthocyanosides ont eacuteteacute retrouveacutees dans les baies ramasseacutees en Russie et en Suegravede Ces
reacutesultats sont lieacutes agrave la cueillette tardive des baies et agrave lrsquoemplacement plus au nord des
cultures en effet les baies eacutetaient plus mucircres et avaient donc une plus haute contenance en
anthocyanosides Par contre la quantiteacute en Beacuteliorussie et en Lituanie est similaire
53 Donneacutees qualitatives
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Burdulis et coll (12) ont observeacute que lrsquoanalyse
chromatographique ne reacutevegravele pas de diffeacuterence dans la composition qualitative des
anthocyanosides Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees sont repreacutesenteacutees par la cyanidine (quantiteacute
moyenne de 53 ngml) suivie de la delphinidine et la peacutetunidine en quantiteacute 25 fois plus
faible que la cyanidine et pour terminer la malvidine et la peacuteonidine en quantiteacute encore plus
faible En Suegravede seule la malvidine a eacuteteacute retrouveacutee en plus grande quantiteacute parmi tous les
anthocyanosides (15 fois plus eacuteleveacutee que celle de la peacutetunidine et la delphinidine)
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus
Riihinen et coll (53) ont eacutetudieacute la distribution des composeacutes pheacutenoliques dans les diffeacuterents
organes de V myrtillus et drsquoun hybride entre le V corymbosum et V augustifolium
Ainsi les anthocyanosides sont preacutesents dans la pulpe et la peau des fruits de V myrtillus
constituant 2 du poids frais de la peau de la baie cela indique que lrsquoextraction du jus agrave
partir de la peau pourrait ecirctre une source riche drsquoanthocyanosides Les feuilles rouges des
myrtilles ont de faibles quantiteacutes drsquoanthocyanosides et ne contiennent que des glycosides de
cyanidine alors que les fruits contiennent les cinq types drsquoanthocyanosides (delphinidine
cyanidine peacuteonidine peacutetunidine et malvidine-glycosides) Les feuilles sont donc des sources
moins inteacuteressantes pour lrsquoutilisation nutraceutique et pharmaceutique que les fruits
30
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
Des eacutetudes ont eacuteteacute reacutealiseacutees sur la pharmacocineacutetique des anthocyanosides agrave partir drsquoun
produit commercial le Myrtocyanreg Celui-ci est un extrait hautement purifieacute de baies de
Vaccinum myrtillus dans lequel les anthocyanosides sont les composants actifs les plus
importants (36)
Lorsque lrsquoextrait est injecteacute chez le rat par voie intraveineuse ou parenteacuterale aux doses de 20-
40 mgkg ou 25 mgkg respectivement les anthocyanosides disparaissent de la circulation
sanguine et sont distribueacutes rapidement dans les tissus Lrsquoeacutelimination se fait de faccedilon
preacutedominante par les urines (25-30) 24 heures apregraves lrsquoadministration et une plus faible
quantiteacute est eacutelimineacutee via la bile (15-20)
Le Myrtocyanreg
injecteacute par voie intrapeacuteritonale agrave la dose de 200 mgkg montre que les
anthocyanosides ont une affiniteacute particuliegravere pour certains tissus notamment les tissus reacutenaux
et cutaneacutes dans ces tissus les anthocyanosides y demeurent plus longtemps que dans le
plasma Cette observation pourrait expliquer leur effet biologique agrave long terme
Lrsquoadministration orale de Myrtocyanreg
agrave la dose de 400 mgkg chez le rat montre que les
anthocyanosides sont rapidement absorbeacutes par le tractus gastro-intestinal et atteignent un pic
plasmatique quinze minutes apregraves lrsquoadministration Par contre ils ne demeurent pas
longtemps dans le sang car aucune concentration ne peut ecirctre mesureacutee apregraves deux heures Par
voie orale environ 4 des anthocyanosides sont eacutelimineacutes par la bile apregraves 24 heures
En conclusion par voie orale la biodisponibiliteacute faible des anthocyanosides peut ecirctre due agrave
une forte meacutetabolisation heacutepatique en meacutetabolites non deacutetectables par la meacutethode analytique
Le pic plasmatique de 2-3 microgml drsquoanthocyanosides non modifieacutes pourrait ecirctre suffisant pour
garantir les effets biologiques des anthocyanosides apregraves une administration orale Enfin des
tests in vitro ont reporteacute une activiteacute des anthocyanosides agrave des concentrations de 2 agrave 7 microgml
(43)
En 2006 Ichiyanagi et coll (28) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute et la distribution dans les tissus
drsquoun autre extrait de V myrtillus (Bilberon 25reg
constitueacutes de 25 anthocyanosides) administreacute
oralement ou par voie intraveineuse agrave des rats
Pour rappel les aglycones sont de cinq types la cyanidine la delphinidine la peacutetunidine la
peacuteonidine et la malvidine
Seules la malvidine la peacuteonidine et la peacutetunidine sont des structures aglycones meacutethyleacutes ces
anthocyanidines sont glycosyleacutees pour former les anthocyanosides qui repreacutesentent une
structure beaucoup plus stable Trois sortes de sucres sont rattacheacutees agrave la structure le
glucose le galactose et lrsquoarabinose
31
Ainsi le niveau plasmatique de chaque anthocyanoside est eacutevalueacute par chromatographie
liquide haute performance Lrsquoeacutetude montre clairement que lrsquoabsorption le meacutetabolisme et
lrsquoeacutelimination sont diffeacuterents pour chaque anthocyanoside Ichiyanagi et coll (27) ont calculeacute
le rapport C15dose deacutefini par la concentration plasmatique de chaque anthocyanoside quinze
minutes apregraves administration orale diviseacutee par sa concentration initiale dans lrsquoextrait de
Bilberon 25reg
(soit le rapport C15dose) La comparaison de ces rapports a montreacute que pour les
anthocyanosides posseacutedant le mecircme aglycone les galactosides ont un rapport C15dose plus
important suivi des glucosides et des arabinosides agrave lrsquoexception de la malvidine La
diffeacuterence est significative entre les anthocyanosides glucosides et galactosides Par contre
lorsque les anthocyanosides portant le mecircme sucre sont compareacutes les glycosides de cyanidine
et delphidine preacutesentent des valeurs plus eacuteleveacutees que les glycosides de malvidine et
peacutetunidine alors que la peacuteonidine 3-O-β-D-galactoside affiche les valeurs les plus hautes
parmi tous les anthocyanosides
En conclusion les niveaux plasmatiques deacutependent de plusieurs facteurs tels que lrsquoabsorption
gastro-intestinale le taux de distribution dans les tissus et leur excreacutetion via les urines et la
bile
La demi-vie est eacutevalueacutee par administration intraveineuse de lrsquoextrait pour les
anthocyanosides portant le mecircme sucre les demi-vies de la delphinidine et de la cyanidine
sont plus eacuteleveacutees que leurs analogues O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacuteonidine et la
peacutetunidine Par contre lorsque les auteurs comparent les sucres porteacutes par le mecircme aglycone
aucune diffeacuterence significative nrsquoest observeacutee entre les galactosides et les glucosides mais les
arabinosides affichent des valeurs plus faibles Seule la malvidine ne preacutesente pas de
diffeacuterence significative entre galactoside et arabinoside compareacutee aux autres anthocyanidines
Ichiyanagi et coll (28) ont eacutevalueacute la biodisponibiliteacute de chaque anthocyanoside Celle-ci varie
de 061 agrave 182 et elle est de 093 dans le meacutelange de lrsquoextrait Bilberon 25reg
Ainsi la
biodisponibiliteacute des anthocyanosides O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacutetunidine et la
peacuteonidine est plus eacuteleveacutee que la delphinidine et la cyanidine particuliegraverement pour les
galactosides (diffeacuterence significative entre la cyanidine et la peacuteonidine galactoside et entre la
delphinidine et la peacutetunidine arabinoside) Cependant les biodisponibiliteacutes des glycosides de
peacutetunidine sont plus eacuteleveacutees que celles des glycosides de malvidine mecircme si la malvidine est
lrsquoanalogue O-meacutethyl de la peacutetunidine-glycoside Ainsi la biodisponibiliteacute importante des
glycosides de peacutetunidine pourraient ecirctre expliqueacutee par une absorption gastro-intestinale
prolongeacutee De plus lrsquoexceptionnelle forte biodisponibiliteacute de la peacuteonidine 3-O-β-D-
galactoside traduirait une absorption gastro-intestinale plus efficace Lorsque les auteurs
32
comparent la biodisponibiliteacute entre les anthocyanosides sur la base du type de sucre attacheacute agrave
la structure les galactosides preacutesentent la plus haute valeur suivis des arabinosides puis des
glucosides qui preacutesentent les valeurs les plus basses (agrave lrsquoexception de la delphinidine et de la
malvidine)
Ces eacutetudes sur le meacutetabolisme et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides montrent que les
anthocyanosides majoritairement retrouveacutes dans lrsquourine et la bile sont les glycosides de
peacuteonidine et malvidine crsquoest-agrave-dire des anthocyanosides O-meacutethyleacutes Les pourcentages des
anthocyanosides dans les urines et la bile durant les quatre premiegraveres heures apregraves
administration intraveineuse sont seulement de 308 et 134 respectivement suggeacuterant une
meacutetabolisation ou une accumulation des anthocyanosides dans les tissus La quantiteacute et la
nature des anthocyanosides dans le foie et les reins diffegraverent de ceux du meacutelange Bilberon
25reg
indiquant une meacutetabolisation heacutepatique et reacutenale De plus lrsquoapparition de nouveaux pics
montreacutes par la chromatographie liquide haute performance souligne la preacutesence de
meacutetabolites drsquoanthocyanosides
En ce qui concerne la distribution dans les tissus les auteurs ont montreacute qursquoapregraves 15 minutes
drsquoune administration orale de lrsquoextrait de V myrtillus les anthocyanosides retrouveacutes
majoritairement dans les reins et le foie sont des glycosides de peacuteonidine et de malvidine les
anthocyanosides deacutetecteacutes sont des glucosides et galactosides de peacuteonidine malvidine et
peacutetunidine des meacutetabolites 4rsquo-O-meacutethyl de cyanidine delphinidine et peacutetunidine 3-O-β-D-
glucoside ou galactoside alors que les arabinosides ne sont pas deacutetecteacutes agrave lrsquoexception du 4rsquo-
O-meacutethyl delphinidine 3-O-α-L-arabinoside Les meacutetabolites comme les glucosides-
glucuronides de cyanidine et de delphinidine sont aussi preacutesents dans les tissus
particuliegraverement au niveau reacutenal
Apregraves administration intraveineuse les glycosides de cyanidine et delphinidine sont preacutesents agrave
lrsquoeacutetat de traces dans les tissus
Pour conclure plusieurs points ont pu ecirctre eacutetablis et clarifieacutes premiegraverement tous les
anthocyanosides de lrsquoextrait atteignent leur niveau plasmatique maximum en 15 agrave 30 minutes
apregraves administration orale soulignant une absorption efficace au niveau de lrsquoestomac et de
lrsquointestin grecircle Cette absorption deacutepend du type de sucre attacheacute agrave lrsquoaglycone les galactosides
eacutetant par exemple plus efficacement absorbeacutes que les arabinosides Deuxiegravemement la
biodisponibiliteacute deacutepend de plusieurs facteurs comme le meacutetabolisme lrsquohydrophobiciteacute du
cycle B de lrsquoaglycone et le type de sucre attacheacute agrave la structure De plus la synergie entre
anthocyanosides eux-mecircmes ou anthocyanosides avec drsquoautres composants preacutesents dans
lrsquoextrait peuvent moduler lrsquoabsorption au niveau du tractus gastro-intestinal
33
Sakakibara et coll (54) ont eacutetudieacute la distribution et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides chez la
souris apregraves une administration orale de 100 mgkg de poids corporel de V myrtillus
Les anthocyanosides absorbeacutes sous leur forme initiale ou meacutethoxyleacutee quinze minutes apregraves
une administration orale sont eacutelimineacutes via les urines dans les vingt quatre heures La totaliteacute
des anthocyanosides atteignent une concentration plasmatique maximale drsquoenviron 12 microM
quinze minutes apregraves administration orale puis cette concentration diminue brusquement Les
glycosides de malvidine pourraient ecirctre les anthocyanosides majoritaires dans des conditions
physiologiques en effet les anthocyanosides meacutethoxyleacutes ont des proprieacuteteacutes leur permettant
de demeurer dans lrsquoorganisme apregraves absorption De plus les glycosides de delphinidine et
cyanidine subissent une meacutethylation pouvant donner les glycosides de peacuteonidine et malvidine
par conseacutequent les anthocyanosides meacutethoxyleacutes peuvent ecirctre produits par la conversion
drsquoautres anthocyanosides eacutegalement absorbeacutes
Lrsquoexcreacutetion urinaire des anthocyanosides apregraves administration de 500 mgkg de poids corporel
de lrsquoextrait de V myrtillus a montreacute que les anthocyanosides sont eacutelimineacutes dans lrsquourine dans
les six premiegraveres heures apregraves administration orale De faibles quantiteacutes sont eacutelimineacutees entre 6
et 24 heures dont un unique pic drsquoexcreacutetion entre 6 et 12 heures Les quantiteacutes
drsquoanthocyanosides excreacuteteacutees dans lrsquourine dans les 24 heures suivant lrsquoadministration sont
faibles et ne repreacutesentent que 188 des anthocyanosides totaux ingeacutereacutes Par conseacutequent
quelque soit les quantiteacutes drsquoextrait administreacutees les anthocyanosides absorbeacutes par le corps
sont excreacuteteacutes par voie urinaire en 24 heures
Lrsquoeacutetude de la distribution des antocyanosides dans les organes a eacuteteacute reacutealiseacutee sur des souris
ayant une alimentation contenant 05 des anthocyanosides de V myrtillus durant 2
semaines Ce sont les glycosides de malvidine (surtout le 3-glucoside et 3-galactoside de
malvidine) les anthocyanosides majoritairement preacutesents dans des organes tels que le foie les
reins les testicules et les poumons Lrsquoeacutetude de Sakakibara et coll (54) est la premiegravere agrave avoir
montreacute la preacutesence des anthocyanosides dans les testicules de souris
Les auteurs montrent aussi que le foie est sucircrement lrsquoorgane cible des anthocyanosides car
515 y sont localiseacutes Par contre les anthocyanosides nrsquoont pas eacuteteacute deacutetecteacutes dans la rate le
thymus le cœur les muscles le cerveau la graisse blanche ou les yeux
Chez lrsquohomme la plupart des eacutetudes montrent une faible biodisponibiliteacute des anthocyanosides
(faible taux drsquoexcreacutetion) (3)
Cooke et coll en 2006 (18) ont deacutemontreacute la preacutesence dans lrsquourine drsquoanthocyanosides sous
forme inchangeacutee et de glucuronides drsquoanthocyanidines (meacutetabolites) apregraves une administration
orale de Mirtoselectreg
La preacutesence de glucuronides drsquoanthocyanidines dans lrsquourine suggegravere
34
une transformation des anthocyanosides en leurs deacuteriveacutes non glycosyleacutes lesquels subiront
plus tard une biotransformation Les anthocyanidines sont suspecteacutees pour avoir une meilleure
activiteacute biologique que leurs preacutecurseurs glycosyleacutes
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus
1 Acides pheacutenoliques
Les acides pheacutenoliques dans les fruits des baies sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique et benzoiumlque Le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide benzoiumlque inclus les acides p-
hydroxybenzoiumlque salicylique gallique et ellagique Dans le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique on trouve les acides p-coumarique cafeacuteique et feacuterulique Les deacuteriveacutes drsquoacide
hydroxycinnamique sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide cafeacuteique comme les acides
chlorogeacutenique et neacuteochlorogeacutenique Dans Vaccinum myrtillus des quantiteacutes significatives
drsquoacides p-coumarique et feacuterulique sont retrouveacutees Lrsquoacide hydroxycinnamique se trouve
dans tous les organes de la myrtille mais les quantiteacutes les plus importantes sont retrouveacutees
dans les feuilles il est le principal composeacute pheacutenolique du rhizome Cet acide
hydroxycinnamique joue un rocircle dans la protection de la plante vis-agrave-vis drsquoagents pathogegravenes
et drsquoautres facteurs de stress comme une radiation solaire intense une basse tempeacuterature ou
une blessure (58)
2 Tanins
Les tanins sont des composeacutes pheacutenoliques hydrosolubles importants dans les fruits des baies
Ils sont de deux types
- les tanins hydrolysables (oligo- ou polyesters drsquoun sucre et drsquoun nombre variant de
moleacutecules drsquoacide-pheacutenol) Le sucre est le plus souvent le glucose et lrsquoacide-pheacutenol est soit
lrsquoacide hexahydroxydipheacutenique et ses deacuteriveacutes drsquooxydation pour les tanins ellagiques soit
lrsquoacide gallique dans le cas des tanins galliques
- les tanins non hydrolysables condenseacutes sont des polymegraveres flavaniques constitueacutes
drsquouniteacutes flavan-3-ols lieacutees entre elles par des liaisons carbone-carbone On les appelle
eacutegalement les proanthocyanidols qui en milieu acide et agrave chaud donnent des anthocyanidols
(11)
Les tanins donnent le goucirct aux tartes et sont responsables du changement de couleur des fruits
et des produits deacuteriveacutes des fruits Le goucirct des tartes reacutesulte de lrsquointeraction entre les tanins et
les reacutecepteurs gustatifs de la bouche De plus les tanins stabilisent les anthocyanosides
35
preacutesents en quantiteacute importante dans le fuit de la myrtille en se liant agrave eux pour former des
copolymegraveres (58)
Dans V myrtillus les feuilles vertes et rouges sont les meilleures sources de procyanidines
Leurs proportions dans les feuilles sont drsquoenviron 7 du poids sec il conviendrait donc
drsquoapporter un inteacuterecirct aux feuilles qui actuellement lors de la reacutecolte et du traitement des
fruits constituent des deacutechets alors que ce sont des parties de la plante riche en
proanthocyanidines connus pour leurs activiteacutes antimicrobiennes et antioxydantes (53)
3 Flavonols
Les flavanols sont repreacutesenteacutes par la querceacutetine la myriceacutetine le kaempfeacuterol et
lrsquoisorhamneacutetine abondants dans les plantes alimentaires comme lrsquooignon le theacute les pommes
et les baies
Le fruit de V myrtillus contient de faccedilon preacutedominante de la querceacutetine eacutegalement preacutesent
avec le kaempfeacuterol dans les feuilles Cependant leur proportion est plus importante dans les
feuilles rouges que dans les feuilles vertes car les radiations solaires augmentent leur quantiteacute
(on peut supposer un rocircle dans la photoprotection) (58)
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans Vaccinium myrtillus
Les stilbegravenes sont un groupe de composants qui inclut notamment le resveacuteratrol retrouveacute
initialement dans les grappes de raisin De petites quantiteacutes de trans-resveacuteratrol ont eacuteteacute
retrouveacutees dans les baies et notamment dans la myrtille (de lrsquoordre de 678 microgg) Cette plante
contient eacutegalement de petites quantiteacutes de caroteacutenoiumldes (58)
Autres ces composeacutes pheacutenoliques la myrtille est eacutegalement constitueacutee drsquoun ensemble de
micro- et macronutriments reacutepertorieacute dans la table de composition nutritionnelle des aliments
du Ciqual (centre drsquoinformation sur la qualiteacute des aliments) 2008 de lrsquoAfssa (71) (Annexe I)
36
Troisiegraveme partie
Inteacuterecircts theacuterapeutiques
de Vaccinium myrtillus L
37
En Europe les baies et les feuilles de myrtille ont largement eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine
populaire les baies pour leurs proprieacuteteacutes astringentes toniques et antiseptiques dans le
traitement de la diarrheacutee la dysenterie (maladie infectieuse du cocirclon) les heacutemorroiumldes les
inflammations gastro-intestinales et les infections buccales (stomatites aphtes muguet des
enfants) Elles sont eacutegalement utiliseacutees pour les deacutesordres urinaires Quant aux feuilles elles
eacutetaient particuliegraverement utiliseacutees dans le diabegravete gracircce agrave leurs proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
En application locale une infusion ou une deacutecoction de feuilles de myrtilles eacutetaient utiliseacutees
lors drsquoinflammations oculaires buccales drsquoinfections cutaneacutees et dans les brucirclures
Agrave partir du XVIIIegraveme
des herboristes utilisaient la baie de myrtille dans des preacuteparations pour
traiter certaines maladies intestinales incluant la fiegravevre typhoiumlde elle eacutetait aussi utiliseacutee dans
les infections buccales cutaneacutees urinaires dans la goutte et le rhumatisme (43) Les usages
valideacutes par la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la Commission E seront
deacuteveloppeacutes dans la derniegravere partie de cette thegravese
La myrtille inteacuteresse encore actuellement les scientifiques et fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes
in vitro et in vivo elle est aussi preacutesente dans quelques eacutetudes cliniques Certaines de ces
eacutetudes seront reacutepertorieacutees dans les chapitres qui vont suivre
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire
En 1990 Morazzoni et coll (44) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vivo et in vitro drsquoun complexe
drsquoanthocyanosides de V myrtillus dont le nom deacuteposeacute est Myrtocyanreg
(contenant environ
38 drsquoanthocyanosides) sur lrsquoactiviteacute plaquettaire en comparaison avec drsquoautres anti-
agreacutegants plaquettaires comme lrsquoacide aceacutetylsalicylique le dipyridamole et la ticlopidine
Lrsquoeacutetude in vitro sur plasma de lapin montre un effet inhibiteur de V myrtillus sur lrsquoagreacutegation
plaquettaire induite par lrsquoadeacutenosine diphosphate (ADP) le collagegravene et lrsquoarachidonate de
sodium (sel drsquoacide arachidonique) cette inhibition est fonction de la concentration en
anthocynosides Cette activiteacute est comparable agrave celle du dipyridamole mais est moins efficace
que celle de lrsquoacide aceacutetylsalicylique Toutefois les anthocyanosides de la myrtille et le
dipyridamole sont tous les deux efficaces pour inhiber lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par
lrsquoADP exogegravene alors que lrsquoacide aceacutetylsalicylique nrsquoa pas montreacute drsquoactiviteacute Lrsquoeffet anti-
agreacutegant plaquettaire des anthocyanosides de V myrtillus perdure apregraves certaines
manipulations chimiques et physiques comme lrsquoeacutebullition pendant cinq minutes le chauffage
38
pendant trente minutes agrave 56degC la digestion agrave la trypsine et lrsquoincubation en preacutesence
drsquoadeacutenosine phosphate
Lrsquoaction in vitro des anthocyanosides de V myrtillus sur la circulation sanguine chez le rat
montre une inhibition de lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP de maniegravere dose-
deacutependante et par voie arteacuterielle
In vivo lrsquoadministration orale du complexe anthocyanosidique de V myrtillus agrave une
concentration variant de 5 agrave 400 mgkg chez le rat montre une augmentation du temps de
saignement Cette activiteacute du complexe perdure pendant 24 heures (mecircme observation avec
lrsquoassociation acide aceacutetylsalicylique-dipyridamole) et le temps de saignement retourne agrave des
valeurs normales apregraves 48 heures Par contre cette augmentation du temps de saignement nrsquoa
pas donneacute drsquoeffet ni sur lrsquoheacutematocrite ni sur les voies intrinsegraveques et extrinsegraveques de la
coagulation sanguine
Lrsquoadministration orale de 400 mgkg du complexe anthocyanosidique de myrtille agrave des souris
deux heures avant lrsquoeacutetude diminue lrsquoadheacutesion plaquettaire cette action eacutetant similaire agrave celle
observeacutee avec 100 mgkg de ticlopidine administreacutes dans les mecircmes conditions
expeacuterimentales
Morazzoni et coll (44) ont eacutegalement eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vitro drsquoun produit composeacute des trois
principaux anthocyanosides (malvidine 3-O-glucoside cyanidine 3-O-glucoside et
delphinidine 3-O-glucoside) trouveacutes dans lrsquoextrait Myrtocyanreg
afin de comprendre leur
impact sur lrsquoeffet anti-agreacutegant Ce meacutelange montre la mecircme activiteacute inhibitrice sur
lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP le collagegravene et lrsquoarachidonate de sodium que
lrsquoextrait Myrtocyanreg
Notons que les anthocyanosides du produit reconstitueacute sont retrouveacutes
avec le mecircme ratio que ceux de lrsquoextrait
Une eacutetude clinique incluant 30 patients en bonne santeacute avec une agreacutegation plaquettaire
normale a deacutemontreacute la capaciteacute drsquoanthocyanosides de myrtille Myrtocyanreg
administreacute
pendant 30 et 60 jours agrave la dose de 480 mgjour seul ou en association avec lrsquoacide ascorbique
(3 gjour) agrave reacuteduire lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par le collagegravene ou lrsquoADP La meilleure
activiteacute est deacutetenue par Myrtocyanreg
seul ou associeacute agrave lrsquoacide ascorbique compareacutee agrave la
vitamine C seule (5)
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus riche en anthocyanosides a montreacute une forte inhibition
de lrsquoagreacutegation plaquettaire dans des expeacuteriences in vivo et in vitro sans interfeacuterer avec les
facteurs plasmatiques Lrsquoactiviteacute des trois principaux anthocyanosides de lrsquoextrait Myrtocyanreg
a permis de mettre en eacutevidence leur forte implication dans lrsquoeffet anti-agreacutegant plaquettaire
De plus lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans lrsquoinhibition plaquettaire est
39
lrsquoaugmentation des niveaux drsquoadeacutenosine monophosphate cyclique (AMP cyclique) soit par
stimulation de lrsquoadeacutenylate cyclase soit par inhibition de lrsquoAMP cyclique-phosphodiesteacuterase
Or il a eacuteteacute observeacute que les aglycones de lrsquoextrait Myrtocyanreg
sont des inhibiteurs potentiels
de lrsquoAMP cyclique- phosphodiesteacuterase de plusieurs tissus Ce meacutecanisme nrsquoest pas le seul car
un autre a eacuteteacute proposeacute il concernerait les anthocyanidines (principalement la delphinidine et
la cyanidine) qui affecteraient les fonctions plaquettaires par leur action antioxydante cette
action se ferait en interfeacuterant avec les processus membranaires cellulaires incluant les eacutetapes
initiales plaquettaires et la production des prostaglandines des cellules endotheacuteliales
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires
Les anthocyanosides de V myrtillus (Myrtocyanreg
) sont couramment utiliseacutes comme agents
vasoprotecteurs inhibant lrsquoagreacutegation plaquettaire et la formation de thrombus De plus il a
eacuteteacute montreacute que les anthocyanosides de myrtille administreacutes per os (100 mgkg pc) reacuteduisent
la reacuteponse contractile du muscle lisse vasculaire et montrent une activiteacute prostacycline-like
(PGI2-like) (45) Cette eacutetude est en accord avec celle de Bettini et coll (9) qui ont montreacute que
les anthocyanosides de V myrtillus ont un effet relaxant in vitro pouvant ecirctre meacutedieacute par la
stimulation de la synthegravese de prostaglandines vasodilatatrices dans les vaisseaux sanguins
En conclusion agrave lrsquoinverse de lrsquoacide aceacutetylsalicylique qui in vivo reacuteduit la production
arteacuterielle de PGI2 en agissant comme un inhibiteur de la synthegravese des prostaglandines les
anthocyanosides de V myrtillus stimulent la production drsquoune substance PGI2-like par le tissu
vasculaire
Les anthocyanosides de myrtille comme drsquoautres bioflavonoiumldes srsquoopposent agrave la contraction
de plusieurs types de muscles lisses en reacuteponse agrave des agents varieacutes comme lrsquoangiotensine II la
seacuterotonine le baryum lrsquohistamine ou lrsquoaceacutetylcholine En effet lrsquoaceacutetylcholine agrave des
concentrations variant de 1 agrave 2 ngml induit une relaxation dans toutes les preacuteparations alors
qursquoagrave hautes concentrations elle induit une contraction (9)
Bettini et coll (9) ont rechercheacute eacutegalement lrsquoeffet vasodilatateur du complexe dans les
preacuteparations traiteacutees avec du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration du facteur
relaxant deacuteriveacute de lrsquoendotheacutelium (EDRF ou endothelium-derived relaxing factor) qui est une
substance vasodilatatrice
Le Myrtocyanreg agrave une concentration entre 50 et 200 microgml reacuteduit la reacuteponse contractile des
artegraveres coronaires agrave lrsquoaceacutetylcholine cette activiteacute est drsquoautant plus marqueacutee lorsque lrsquoacide
ascorbique est ajouteacute (100-300 microgml) Mais cet effet est diminueacute en preacutesence drsquoindomeacutetacine
ou drsquoaceacutetylsalicylate de lysine connus pour ecirctre des inhibiteurs de la cyclo-oxygeacutenase A des
40
concentrations entre 1 et 2 microgml ces deux substances nrsquoaffectent pas la diminution du tonus
induite par Myrtocyanreg alors qursquoagrave des concentrations plus eacuteleveacutees elles le reacuteduisent sans
toutefois lrsquoabolir complegravetement mecircme aux plus fortes concentrations
Une autre expeacuterience de cette eacutetude consiste agrave traiter les segments des artegraveres coronaires avec
du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration de lrsquoEDRF Selon la concentration le
bleu de meacutethylegravene a plusieurs effets entre 1 et 8 microgml il ne modifie pas le tonus des
preacuteparations entre 8 et 18 microgml il ne provoque qursquoune lente augmentation du tonus de
plusieurs preacuteparations alors qursquoentre 18 et 24 microgml il induit une reacuteelle augmentation du
tonus des artegraveres coronaires suivie drsquoune relaxation assez marqueacutee Lrsquoeffet des
anthocyanosides de Vaccinum myrtillus a eacuteteacute eacutetudieacute apregraves disparition de lrsquoeffet du bleu de
meacutethylegravene son effet relaxant perdure partiellement malgreacute le preacute-traitement au bleu de
meacutethylegravene
En conclusion lrsquoeffet vasodilatateur de Myrtocyanreg
deacutepend agrave la fois de la libeacuteration des
prostacyclines mais aussi drsquoune faciliteacute agrave libeacuterer lrsquoEDRF les prostacyclines et lrsquoEDRF sont
probablement les meacutediateurs fonctionnels des anthocyanosides de V myrtillus
2 Activiteacute vasoprotectrice
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique
Une preacuteparation drsquoanthocyanosides de V myrtillus eacutequivalant agrave 25 drsquoanthocyanosides
administreacutee par voie intrapeacuteritoneacuteale ou per os agrave des lapins montre une reacuteduction de la
permeacuteabiliteacute capillaire de la peau (augmentant avec le temps) preacutealablement stimuleacutee par le
chloroforme lrsquohistamine ou la bradykinine (36)
Jonadet et coll (29) ont compareacute sur des rats lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides
extraits de Vitis vinifera L de V myrtillus (Difrarelreg
) et de Pinus maritimus (appeleacute
maintenant Pinus pinaster Aiton) Ainsi lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides est
par ordre deacutecroissant la suivante anthocyanosides de Vitis vinifera gt anthocyanosides de V
myrtillus gt proanthocyanosides de Pinus maritimus Les auteurs soulignent que les
anthocyanosides agissent agrave travers une activiteacute anti-proteacuteasique deacutemontreacutee in vitro En effet
ils ont montreacute que les anthocyanosides des extraits preacutealablement citeacutes possegravedent des activiteacutes
inhibitrices vis-agrave-vis drsquoenzymes proteacuteolytiques comme lrsquoeacutelastase laquelle peut intervenir dans
la deacutegradation du tissu conjonctif des fibres eacutelastiques et jouerait un rocircle dans des affections
pathologiques comme lrsquoatheacuteroscleacuterose lrsquoemphysegraveme pulmonaire et lrsquoarthrite rhumatoiumlde Les
anthocyanosides apportent cette activiteacute anti-proteacuteasique en inhibant la libeacuteration des peptides
41
vasoactifs En effet lrsquoune des causes de lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire est
lrsquointervention de meacutediateurs chimiques comme lrsquohistamine la 5-hydroxytryptamine et les
kinines Enfin Jonadet et coll (29) ont reporteacute une activiteacute anti-trypsique et anti-
chymotrypsique (proteacuteases digestives) des substances pharmacologiques des extraits eacutetudieacutes
22 Action sur la reacutesistance capillaire
Lietti et coll (36) ont deacutemontreacute dans une expeacuterience lrsquointeacuterecirct des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus sur la reacutesistance vasculaire Pour cela ils les administrent par voie
intrapeacuteritoneacuteale agrave des rats preacutealablement alimenteacutes pendant 4 semaines avec une alimentation
deacuteficitaire en facteur P induisant ainsi une fragiliteacute capillaire Apregraves mesure agrave plusieurs
heures de la reacutesistance capillaire les reacutesultats montrent une eacuteleacutevation remarquable de la
reacutesistance capillaire de la peau induite par les anthocyanosides de V myrtillus Lrsquoactiviteacute est
maximale 4 heures apregraves le traitement et ne change pas apregraves 6 heures Cette activiteacute est
compareacutee avec celle de la rutine (substance de la famille des bioflavonoiumldes) laquelle montre
un effet comparable agrave 200 mgkg mais qui agrave 100 mgkg nrsquoest presque plus efficace
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Lietti et coll (36) ont montreacute que lrsquoadministration
des anthocyanosides de V myrtillus dans la patte de rats par voie intraveineuse et par voie
orale respectivement 15 et 60 minutes preacuteceacutedant lrsquoinjection de carrageacutenine (substance
induisant un œdegraveme) entraicircne une diminution de lrsquoœdegraveme formeacutee de maniegravere dose-
deacutependante En effet lrsquoutilisation de 200 mgkg de preacuteparation est plus efficace que 50 mgkg
sur le volume de lrsquoœdegraveme La dose de 200 mgkg permet une reacuteduction de lrsquoœdegraveme agrave 45
Lrsquoapplication topique de la preacuteparation 60 secondes suivant lrsquoinjection de carrageacutenine induit
eacutegalement une reacuteduction du volume de lrsquoœdegraveme agrave 39 Cette eacutetude montre lrsquoaction anti-
inflammatoire de V myrtillus
Les eacutetudes in vivo reacutealiseacutees sur des animaux montrent que les anthocyanosides de V myrtillus
sont vasoprotecteurs ils inhibent lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire augmentent la
reacutesistance vasculaire et reacuteduisent le volume de lrsquoœdegraveme de maniegravere dose-deacutependante et ses
activiteacutes perdurent dans le temps De plus ils sont plus efficaces que la rutine ou la
meacutepyramine (substance antiseacuterotoninergique et antihistaminergique) Enfin les
anthocyanidines restent longtemps dans les tissus de la peau riche en collagegravene et en
mucopolysaccharides Crsquoest pourquoi il serait inteacuteressant de mettre en place des expeacuteriences
42
pour eacutetudier la relation entre ces substances et les anthocyanosides afin de voir si ce lien
pourrait expliquer lrsquoactiviteacute pharmacologique exerceacutee sur les vaisseaux sanguins (36)
24 Action antiatheacuterogegravenique
En 2009 une eacutetude meneacutee par Mauray et coll (41) a deacutemontreacute qursquoune suppleacutementation
alimentaire avec des extraits de V myrtillus limitait la progression des leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques dans un modegravele de souris deacuteficitaire en apolipoproteacuteine E Lrsquoaction
inhibitrice du deacuteveloppement de la plaque atheacuteromateuse est indeacutependante des modifications
du statut antioxydant plasmatique des marqueurs biologiques du stress oxydant et du profil
lipidique suggeacuterant lrsquoimplication drsquoautres meacutecanismes drsquoactions (peut-ecirctre lrsquoaction anti-
inflammatoire) De plus des deux extraits utiliseacutes (lrsquoun riche en anthocyanosides extraits de
myrtilles non traiteacutees et le deuxiegraveme extraits de myrtilles fermenteacutees par des levures) la
meilleure activiteacute antiatheacuterogegravene est deacutetenue par lrsquoextrait de myrtilles fermenteacutees suggeacuterant la
formation par la fermentation de nouveaux composeacutes avec des proprieacuteteacutes beacuteneacutefiques pour la
santeacute les pigments polymeacuteriques deacuteriveacutes des anthocyanosides atteacutenueraient mieux les leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques que les anthocyanosides de lrsquoextrait non traiteacute En effet lors de la
fermentation les anthocyanosides se condensent avec drsquoautres composeacutes preacutesents dans le fruit
de la myrtille Il reste alors agrave deacuteterminer les composeacutes responsables de lrsquoeffet observeacute et les
meacutecanismes drsquoaction impliqueacutes
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice
Des reacutesultats pharmacologiques prometteurs des extraits de fruits de V myrtillus issus
drsquoeacutetudes cliniques encouragent leur utilisation chez lrsquohomme dans le traitement des maladies
vasculaires peacuteripheacuteriques pouvant associer fragiliteacute capillaire alteacuteration de la permeacuteabiliteacute et
insuffisances veineuses chroniques des membres infeacuterieurs Drsquoautres eacutetudes cliniques ont
montreacute lrsquoefficaciteacute de la myrtille dans les symptocircmes cliniques post-opeacuteratoires
Ainsi les anthocyanosides de V myrtillus (480 mg par voie orale pendant 30 jours) ont
montreacute leur capaciteacute agrave diminuer les symptocircmes subjectifs (douleur parestheacutesiehellip) et objectifs
(œdegraveme des membres pheacutenomegravenes dyschromiques de la peauhellip) de patients atteints du
syndrome variqueux des membres infeacuterieurs tout comme les patients souffrant de fragiliteacute
capillaire ougrave une administration orale drsquoanthocyanosides de V myrtillus (160-800 mgjour)
reacuteduit les symptocircmes cliniques drsquoune reacutesistance capillaire diminueacutee (peacuteteacutechies contusion
sang feacutecal occulte) (43)
43
Lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille Myrtocyanreg (480 mgjour pendant 30 agrave 180 jours) a eacuteteacute
deacutemontreacutee dans des eacutetudes porteacutees sur des patients diabeacutetiques dyslipideacutemiques souffrant de
maladies secondaires agrave une stase des membres infeacuterieurs comme le syndrome preacute-variqueux
les varices essentielles le syndrome post-phleacutebitique et plusieurs maladies vasculaires
atheacuteroscleacuterotiques (43) Une eacutetude double-aveugle et controcircleacutee par placebo incluant 47
patients atteints de deacutesordres vasculaires drsquoorigine varieacutee a deacutemontreacute la capaciteacute de
Myrtocyanreg agrave reacuteduire les symptocircmes subjectifs et objectifs de la pathologie (diminution de la
douleur de la parestheacutesie de lrsquoœdegraveme et de la mobilisation des extreacutemiteacutes des doigts chez les
patients avec syndrome de Raynaud) Une eacutetude meneacutee sur 568 patients souffrants
drsquoinsuffisance veineuse des membres infeacuterieurs a montreacute la capaciteacute des anthocyanosides agrave
faire disparaitre les symptocircmes et agrave ameacuteliorer la microcirculation et le drainage lymphatique
(43)
Lrsquoefficaciteacute de la myrtille (320 mgjour pendant 60 agrave 90 jours) a mecircme eacuteteacute deacutemontreacutee chez 54
femmes enceintes souffrant de phleacutebite secondaire agrave stase veineuse (diminution de la douleur
de lrsquoœdegraveme de la fragiliteacute capillairehellip) et des patients avec bronchite chronique et
asthmatique (reacuteduction par lrsquoextrait de V myrtillus agrave 480 mgjour pendant 10 agrave 30 jours des
modifications microcirculatoires induites par la corticotheacuterapie) (43)
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA)
Pour rappel lrsquoECA (dipeptidylcarboxypeptidase) est une enzyme impliqueacutee dans le systegraveme
reacutenine-angiotensine (lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans la reacutegulation de la pression
arteacuterielle) permettant la conversion de lrsquoangiotensine I inactive en angiotensine II active Cette
derniegravere est capable drsquoaugmenter la pression sanguine et la pression de perfusion reacutenale les
inhibiteurs de lrsquoECA (IEC) constituent alors la premiegravere ligne de traitement pour
lrsquohypertension arteacuterielle et lrsquoinsuffisance cardiaque Les deux sites actifs de lrsquoACE
contiennent un atome de Zn2+
et les IEC sont capables de se lier agrave cet atome (47)
Personn et coll (47) ont rapporteacute dans une eacutetude in vitro la proprieacuteteacute drsquoun extrait de V
myrtillus agrave inhiber lrsquoECA peut-ecirctre par sa capaciteacute agrave cheacutelater des ions meacutetaux comme Zn2+
ou
Fe2+
cette inhibition eacutetant plus forte que les anthocyanidines combineacutees ou seacutepareacutees
deacutemontre lrsquoimplication drsquoautres composeacutes de la plante dans cette action En effet V myrtillus
ne contient pas seulement des anthocyanosides et anthocyanidines mais aussi de la querceacutetine
(flavonol) du stilbegravene resveacuteratrol des acides feacuterulique et coumarique Crsquoest la composition
speacutecifique de la plante qui semble ecirctre agrave lrsquoorigine de lrsquoeffet observeacute
44
Par conseacutequent le lien entre V myrtillus et lrsquoECA pourrait expliquer les effets
pharmacologiques de la plante sur la circulation cette plante pouvant ecirctre alors utiliseacutee en
preacutevention des maladies cardiovasculaires
5 Action sur lrsquoangiogenegravese
Lrsquoangiogenegravese se deacutefinit comme la formation de nouveaux vaisseaux sanguins agrave partir de
vaisseaux preacuteexistants (neacuteovascularisation) Elle est indispensable dans de nombreux
processus physiologiques comme le deacuteveloppement embryonnaire lrsquoimplantation du placenta
mais peut aussi contribuer agrave des processus pathologiques comme la croissance des tumeurs et
le deacuteveloppement des meacutetastases Lrsquoangiogenegravese se fait par plusieurs eacutetapes qui se trouvent
ecirctre les mecircmes dans lrsquoensemble des processus
- activation des cellules endotheacuteliales
- deacutegradation de la membrane basale et de la matrice extra-cellulaire
- migration orienteacutee des cellules endotheacuteliales
- prolifeacuteration cellulaire
- diffeacuterenciation des cellules endotheacuteliales en une structure de type capillaire pour
former une structure vasculaire permettant le deacuteveloppement des tissus
Lrsquoangiogenegravese est controcircleacutee par plusieurs facteurs inducteurs ou inhibiteurs dont le facteur de
croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire (VEGF ou vascular endothelial growth factor)
reacutegulateur cleacute de lrsquoangiogenegravese (73)
En 2007 Matsunaga et coll (40) ont eacutetudieacute in vitro lrsquoaction de V myrtillus sur lrsquoangiogenegravese
plus preacuteciseacutement sur la formation des tubules vasculaires la prolifeacuteration et la migration des
cellules ainsi que leur action sur la phosphorylation de proteacuteines kinases comme ERK 12
(laquo extra-cellular signal-regulated kinase raquo ou kinase reacuteguleacutee par le signal extra-cellulaire)
phospholipase Cγ et Akt (constitueacutes de trois enzymes appartenant agrave la famille des proteacuteines
kinases) induite par le VEGF Lrsquoeacutetude deacutemontre les effets inhibiteurs des extraits de myrtille
sur les paramegravetres de lrsquoangiogenegravese sur des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales
humaines co-cultiveacutees avec des fibroblastes Ainsi entre 1 et 30 microgml-1
lrsquoextrait de
Vaccinum myrtillus inhibe significativement la surface des tubules vasculaires la longueur
lrsquoenchevecirctrement des tubules et le nombre de reacuteseaux formeacutes A 3 microgml-1
ou plus lrsquoextrait
reacuteduit lrsquoensemble des paramegravetres de lrsquoangiogenegravese
Lrsquoextrait inhibe la prolifeacuteration (inhibition significative agrave 3 microgml-1
) et la migration
(inhibition significative agrave 10 et 30 microgml-1
) des cellules induites par VEGF-A de maniegravere
dose-deacutependante ceci ne se voyant qursquoen preacutesence du facteur de croissance
45
La phosphorylation des proteacuteines kinases comme ERK 12 est important dans la prolifeacuteration
des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales humaines et celle de Akt est une eacutetape
importante dans la prolifeacuteration et la migration de ces cellules
Les auteurs deacutemontrent la capaciteacute de V myrtillus agrave inhiber lrsquoaugmentation de la
phosphorylation de ces deux proteacuteines kinases mais pas la phosphorylation de la PLCγ
indiquant que lrsquoextrait agit en aval de celle-ci dans la cascade de signalisation induite par le
VEGF
Lrsquoeacutetude in vivo mise en place par Matsunaga et coll (39) chez la souris a permis de montrer
lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoextrait de V myrtillus dans la formation de reacuteseaux neacuteovasculaires dans
la reacutetinopathie induite par oxygegravene
II Action de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes
Un radical libre est une espegravece chimique qui possegravede un eacutelectron ceacutelibataire sur sa couche
peacuteripheacuterique Les radicaux libres qui interviennent dans le stress oxydant ont un eacutelectron
ceacutelibataire centreacute sur un atome drsquooxygegravene On les nomme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
(ERO) Plusieurs ERO existent comme le radical superoxyde le radical perhydroxyle (forme
protoneacutee du superoxyde) le radical hydroxyle le radical peroxyle et le radical alkoxyle Les
radicaux ne sont pas seulement formeacutes au cours des pheacutenomegravenes de stress oxydant mais
eacutegalement lors du meacutetabolisme normal de lrsquooxygegravene in vivo mecircme si ils ne sont geacuteneacutereacutes
qursquoen faible quantiteacute En effet crsquoest au niveau de la chaine respiratoire de la mitochondrie ougrave
85 de lrsquooxygegravene sont meacutetaboliseacutes que se produit la reacuteduction complegravete par 4 eacutelectrons de la
moleacutecule drsquoO2 conduisant agrave la formation drsquoeau La reacuteduction de la moleacutecule ne peut se faire
que par lrsquoenchainement de plusieurs eacutetapes donnant naissance agrave des intermeacutediaires reacuteduits de
lrsquooxygegravene La reacuteduction monoeacutelectronique de lrsquooxygegravene consommeacute au niveau
mitochondriale fournit lrsquoanion superoxyde (O2-) qui est une espegravece toxique Mais des
enzymes antioxydantes comme les superoxydes dismutases vont reacuteguler lrsquoanion superoxyde
en catalysant leur dismutation et en produisant le peroxyde drsquohydrogegravene (H2O2) Ce dernier
nrsquoest pas un radical libre mais une moleacutecule posseacutedant tous ses eacutelectrons apparieacutes Cependant
dans des reacuteactions in vivo comme la reacuteaction de Fenton et en preacutesence de cations meacutetalliques
comme Fe2+
ou Cu+ le H2O2 devient toxique en donnant les radicaux libres les plus neacutefastes
du stress oxydant que sont les radicaux hydroxyles (OH) De mecircme que le radical
superoxyde le peroxyde drsquohydrogegravene est reacuteguleacute in vivo par des systegravemes antioxydants comme
46
la catalase qui acceacutelegravere sa dismutation ou la glutathion peroxydase qui catalyse sa reacuteduction
par le glutathion
Ainsi le radical O2- le H2O2 et le radical OH forment les ERO (beaucoup plus reacuteactives que
lrsquooxygegravene) Cependant drsquoautres espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene existent comme les radicaux
peroxyles (RO2) les hydroperoxydes (RO2H) et les radicaux alkoxyles (RO)
Ces ERO tregraves reacuteactifs peuvent endommager les proteacuteines les lipides les glucides et les
acides nucleacuteiques par des reacuteactions drsquooxydation A cocircteacute des ERO il existe le monoxyde
drsquoazote radicalaire NO pouvant avoir des effets deacuteleacutetegraveres en reacuteagissant lors drsquoun stress
oxydant avec lrsquoO2-
pour former le peroxynitrite (ONOO-) tregraves reacuteactif et capable
drsquoendommager les proteacuteines les lipides et les acides nucleacuteiques On parle alors de stress
nitrosant
Crsquoest pourquoi il existe des systegravemes de deacutefense dans lrsquoorganisme (antioxydants) comme les
systegravemes de deacutefense enzymatique (superoxyde dismutase catalase glutathion
peroxydaseshellip) Toutefois le stress oxydant peut ecirctre important et les systegravemes de deacutefenses
deacutepasseacutes drsquoougrave la survenue ou lrsquoaggravation de pathologies comme lrsquoatheacuteroscleacuterose le diabegravete
sucreacute lrsquoischeacutemie ceacutereacutebrale le cancerhellip(21)
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides
Les anthocyanosides comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment sont des colorants
naturellement preacutesents dans les fleurs les fruits (particuliegraverement dans les baies) et les
leacutegumes Ce sont des pigments responsables de la couleur comme lrsquoorange le rouge le
bleuhellip Ils peuvent jouer plusieurs rocircles (attirer les insectes pour la pollinisation et la
dispersion des graines ou contribuer agrave la reacutesistance des plantes vis-agrave-vis drsquoattaques
exteacuterieures) Pour rappel les anthocyanosides sont des glycosides ou des acylglycosides des
anthocyanidines (les formes aglycones) Ils ont une structure de base flavylium et des
substitutions hydroxyles ou meacutethoxyles De plus ils sont tous O-glycosyleacutes avec diffeacuterents
sucres dont la preacutevalence est dans lrsquoordre deacutecroissant le glucose le rhamnose le xylose le
galactose lrsquoarabinose et le fructose Les anthocyanosides les plus preacutedominants sont des 3- ou
35-glycosyleacutes Quand le nombre de sucre augmente on observe une alternance sucre et
liaisons laquo acyl raquo De nombreuses eacutetudes ont reporteacute les effets positifs des anthocyanosides
dont certaines seront deacutecrites dans cette thegravese Certains de leurs effets sont attribueacutes agrave leurs
proprieacuteteacutes antioxydantes (64)
47
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma
En 2006 Talaveacutera et coll (59) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus (Antho 50reg
) et leur potentiel antioxydant sur le plasma de rats alimenteacutes
avec Antho 50reg pendant 8 jours Lrsquoeacutetude a montreacute une augmentation du statut antioxydant
plasmatique par cette administration mecircme si la biodisponibiliteacute eacutevalueacutee par excreacutetion
urinaire est basse Mais la chimie des anthocyanosides est complexe ceux-ci pourraient
subir une conversion en formes moins coloreacutees agrave cause de leur instabiliteacute agrave pH physiologique
ou meacutetaboliseacutes en composeacutes encore inconnus Quoiqursquoil en soit une consommation
quotidienne en anthocyanosides a un effet positif sur la capaciteacute antioxydant du plasma
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides
Lrsquoessai ORAC (oxygen radical absorbance capacity ou capaciteacute drsquoabsorbance du radical
oxygegravene) est une mesure standardiseacutee du pouvoir antiradicalaire de substances pures ou en
meacutelange Apregraves extraction des principes actifs dans un meacutelange eau-eacutethanol pour les
moleacutecules hydrosolubles et eacutethanol pour les moleacutecules lipophiles le test par
spectrofluorimeacutetrie consiste en la mesure de la protection exerceacutee par la moleacutecule contre
lrsquooxydation de la fluoresceacuteine par un radical libre et stable le AAPH (22-azobis(2-
amidinopropane) dihydrochloride) Les reacutesultats sont ensuite exprimeacutes par rapport au pouvoir
antioxydant exerceacute par une moleacutecule de reacutefeacuterence le Trolox (eacutequivalent hydrosoluble de la
vitamine E) rameneacute par le poids (en gramme) du produit que lrsquoon teste (75)
La valeur ORAC de la myrtille (446 micromol Troloxg de poids frais) est plus eacuteleveacutee que celle
drsquoautres baies (Figure 16) (58)
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies (58)
48
En 1997 Wang et coll (64) ont eacutevalueacute la capaciteacute antioxydante drsquoanthocyanidines communs
comme les aglycones de delphinidine cyanidine peacutelargonidine malvidine peacuteonidine et leurs
deacuteriveacutes glycosyleacutes Pour cela ils utilisent lrsquoessai ORAC avec geacuteneacuterateur de radical peroxyl
(ROO) Ainsi lrsquoeacutetude deacutemontre que les anthocyanidines posseacutedant la mecircme hydroxylation
sur le cycle A et C et une seule hydroxylation sur le cycle B comme la peacutelargonidine la
malvidine et la peacuteonidine ont une plus basse valeur ORAC que les anthocyanidines
dihydroxyleacutees sur le cycle B (3rsquo 4rsquo-di-OH) comme la cyanidine Les groupes hydroxyls en
position 3rsquo et 4rsquo du cycle B constituent un facteur important dans le pouvant antioxydant
seule la delphinidine eacutechappe agrave cette regravegle (plusieurs hydroxylations sur le cycle B mais
valeur ORAC plus faible) Mecircme si dans certains flavonoiumldes le nombre de groupes
hydroxyls augmentent la capaciteacute antioxydante ceci nrsquoest pas constateacute pour les
anthocyanosides ougrave la peacutelargonidine la cyanidine et la delphinide ayant 4 5 et 6 groupes
hydroxyls respectivement ont des valeurs ORAC respectives de 154 224 et 181 De plus la
glycosylation peut avoir aussi un effet sur lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides Elle
peut diminuer augmenter ou nrsquoavoir aucun effet sur le pouvoir antiradicalaire Par exemple
la 3-glycosylation du cycle C de la cyanidine augmente lrsquoactiviteacute ORAC pour le glucose et le
rhamnose mais la diminue pour le galactose Ainsi lrsquoordre deacutecroissant de lrsquoactiviteacute ORAC
pour la cyanidine est le suivant cyanidine 3-glucoside gt cyanidine 3-rhamnoside gt cyanidine
gt cyanidine 3-galactoside Mecircme lrsquoorientation du groupe hydroxyl affecte le pouvoir
antioxydant contre le radical peroxyl De plus lrsquoefficaciteacute drsquoun antioxydant agrave pieacuteger les
radicaux libres deacutepend aussi de sa capaciteacute agrave former un radical lui-mecircme stable Enfin le
classement des antioxydants par leur valeur ORAC deacutepend aussi de lrsquooxydant du radical libre
utiliseacute et de la meacutethode chimique employeacutee
Ainsi cette eacutetude a montreacute le fort pouvoir antioxydant des anthocyanosides ceux-ci sont
donc de bons candidats pour la preacutevention et le traitement de maladies mecircme si drsquoautres
eacutetudes sont neacutecessaires pour eacutelucider leur impact sur la santeacute humaine
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces
reacuteactives azoteacutees
Lrsquooxyde nitrique ou monoxyde drsquoazote radicalaire (NO) est un meacutediateur important
participant agrave des reacuteactions physiologiques dans les organismes vivants comme le
meacutetabolisme eacutenergeacutetique mitochondrial ou la transduction de signaux Cependant le NO peut
reacuteagir rapidement avec lrsquoO2- et former le peroxynitrite (ONOO
-) un fort oxydant tregraves reacuteactif
pouvant reacuteagir avec des moleacutecules biologiques comme les proteacuteines ou les acides nucleacuteiques
49
LrsquoONOO- participe agrave la formation de nitro-tyrosine dans les proteacuteines et agrave lrsquooxydation des
lipoproteacuteines de basse densiteacute responsable de la formation de plaques drsquoatheacuterome Les
radicaux NO sont geacuteneacutereacutes de faccedilon constitutive dans le cerveau sous des conditions
physiologiques LrsquoONOO- peut ecirctre lrsquoune des causes de deacutesordres ceacutereacutebraux (accidents
vasculaires ceacutereacutebraux ou maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie drsquoAlzheimer) (27)
En 2004 Ichiyanagi et coll (27) ont compareacute les reacuteactiviteacutes de 20 anthocyanosides extraits de
Vaccinum myrtillus contre les espegraveces reacuteactives azoteacutees et oxygeacuteneacutees Lrsquoextrait utiliseacute dans
lrsquoeacutetude est le Bilberon 25reg
(extrait pur sous forme de poudre provenant de V myrtillus)
Comme lrsquoantioxydant de reacutefeacuterence la (+)-cateacutechine les anthocyanosides ont la capaciteacute de
pieacuteger les radicaux libres comme le radical OH mais ont une reacuteactiviteacute 20 fois plus hautes
que celui-ci contre lrsquoO2- De plus la reacuteactiviteacute contre le radical OH nrsquoest pas tregraves sensible agrave
la diversiteacute structurale des anthocyanosides alors qursquoelle lrsquoest pour lrsquoO2- Dans lrsquoeacutetude de
Ichiyanagi et coll (27) lrsquoactiviteacute contre le NO est presque la mecircme entre tous les
anthocyanosides eacutetant tregraves peu sensible aux diversiteacutes structurales (les groupes hydroxyls
libres sur le cycle B de la moleacutecule de base ou lrsquoimportance de la meacutethylation de ces groupes
ne contribueraient pas aux reacuteactiviteacutes des anthocyanosides contre les radicaux NO et OH)
Parmi tous les anthocyanosides ce sont les glycosides (position 3) de delphinidine qui
reacuteagissent le plus contre les radicaux NO et ONOO- (reacuteactiviteacute 6 et 3 fois plus hautes que les
anthocyanosides et la (+)-cateacutechine respectivement) les autres anthocyanosides ayant une
reacuteactiviteacute comparable entre eux contre NO et lrsquoONOO-
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique
Les lipoproteacuteines de basse densiteacute (LDLs ou low-density lipoproteins) oxydeacutees par des
radicaux libres et des pro-oxydants ont plusieurs effets biologiques neacutefastes comme le
deacuteclenchement drsquoeacutevegravenements cellulaires conduisant agrave la formation et la progression de la
plaque atheacuteroscleacutereuse (21)
Laplaud et coll (34) ont eacutetudieacute lrsquoaction antioxydante drsquoun extrait de Vaccinum myrtillus sur
les LDLs Lrsquoeacutetude deacutemontre la diminution de tous les paramegravetres eacutevalueacutes lors de lrsquooxydation
des LDLs par cet extrait En effet la myrtille est capable de ralentir la formation de diegravenes
conjugueacutes de retarder la production de lipoperoxydes et de malondialdeacutehyde (indicateurs de
la peroxydation lipidique) et de diminuer la charge eacutelectrique nette des lipoproteacuteines
Enfin V myrtillus serait plus efficace que lacide ascorbique ou lrsquohydroxytoluegravene butyleacute
(BHT) pour diminuer la peroxydation lipidique des LDLs
50
En 1998 Martiacuten-Aragoacuten et coll (38) ont eacutetudieacute in vitro la capaciteacute drsquoun extrait complexe
drsquoanthocyanoside de V myrtillus agrave inhiber la peroxydation lipidique et agrave pieacuteger les ERO
comme les radicaux OH et O2- Lrsquoeacutetude deacutemontre un effet antiperoxydant de lrsquoextrait
(concentration-deacutependante) la concentration capable drsquoinhiber 50 de la peroxydation
lipidique (IC50 ou concentration inhibitrice 50) eacutetant de 5028 microgmL Sa capaciteacute agrave pieacuteger le
radical OH est faible (deacutetectable agrave partir de 50 microgmL) alors que sa reacuteactiviteacute contre le
radical O2- est forte
(observeacutee agrave toutes les concentrations testeacutees avec une valeur drsquoIC50 de
moins de 25 microgmL)
En conclusion la myrtille pourrait par son activiteacute antiperoxydative contribuer agrave la protection
vis-agrave-vis de lrsquoatheacuteroscleacuterose
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines
Viljanen et coll (63) ont compareacute lrsquoinhibition de lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines entre
les composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus avec ceux drsquoautres baies comme Rubus idaeus L
(framboisier) Vaccinium vitis-idaea L (airelle rouge) et Ribes nigrum L (cassis) Les
composeacutes pheacutenoliques sont repreacutesenteacutes par des anthocyanosides des ellagitanins et des
proanthocyanidines Lrsquoeacutetude deacutemontre que V myrtillus et Rubus idaeus possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante parmi la totaliteacute des baies eacutetudieacutees contre lrsquooxydation des
proteacuteines (cette oxydation eacutetant mesureacutee par la perte de la fluorescence au tryptophane et la
formation de proteacuteines carbonyles) Vaccinium myrtillus et V vitis-idaea possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante vis-agrave-vis de lrsquooxydation des lipides suivis par Ribes nigrum et
Rubus idaeus (cette oxydation est mesureacutee par lrsquoanalyse drsquohexanal de diegravenes conjugueacutes et
drsquohydroperoxydes) Dans la myrtille et le cassis ce sont les anthocyanosides qui contribuent agrave
la majoriteacute de lrsquoeffet antioxydant par inhibition de la formation des proteacuteines carbonyles et
drsquohexanal (hexanaldehyde) Cette activiteacute antioxydante des anthocyanosides et des
proanthocyanidines est dose-deacutependante ce qui nrsquoest pas le cas pour les autres composeacutes
pheacutenoliques Lrsquoeffet antioxydant des composeacutes pheacutenoliques des baies est plus prononceacute
contre lrsquooxydation des lipides particuliegraverement lrsquoinhibition du composeacute hexanal que celle des
proteacuteines Lrsquoinhibition des composeacutes aldeacutehydes des lipides reacutesulte en geacuteneacuteral de lrsquoinhibition
de la formation de deacuteriveacutes carbonyls conseacutequence drsquoune diminution de lrsquointeraction lipide-
proteacuteine
51
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie
Le foie est lrsquoorgane central du meacutetabolisme des composeacutes exogegravenes et endogegravenes il est donc
lrsquoorgane cible de lrsquoaction des xeacutenobiotiques et de leurs meacutetabolites Les eacutetudes sur les
heacutepatocytes sont importantes car ces cellules repreacutesentent 65 du parenchyme du foie et ils
assurent presque toutes les fonctions de cet organe Les heacutepatocytes ont un appareil de Golgi
distinct et de nombreuses mitochondries Malheureusement ils peuvent ecirctre soumis agrave un
stress oxydant Les eacutetudes faites agrave ce jour ont utiliseacute des toxines expeacuterimentales varieacutees afin
drsquoeacutetudier les effets cytoprotecteurs de substances comme lrsquoextrait de V myrtillus Dans les
eacutetudes qui vont suivre deux toxines sont employeacutees Le tert ndashbutyl hydroperoxyde (tBH) et
lrsquoallyl-alcool (2-propen-1-ol) Le tBH peut induire un stress oxydant aux cellules agrave travers des
radicaux (radical hydroxyl peroxyl drsquohydrogegravene et alkoxyl se formant lors de sa
deacutecomposition) Le tBH est la cause de plusieurs dommages comme la rupture des
membranes cellulaires lrsquoinduction de la peroxydation lipidique (responsable
drsquoatheacuteroscleacuterose) la fuite drsquoenzymes agrave travers lrsquoespace extracellulaire lrsquooxydation du
glutathion et lrsquoalkylation de macromoleacutecules cellulaires Lrsquoallyl-alcool (AA) est une toxine
qui agit indirectement agrave travers ses meacutetabolites Il est oxydeacute dans les cellules en acroleacuteine
sous lrsquoaction de lrsquoalcool deacuteshydrogeacutenase cytosolique Lrsquoacroleacuteine est capable de former un
produit avec le glutathion reacuteduit (GSH) et drsquoautres biomoleacutecules Elle induit aussi la
peroxydation lipidique catalyseacutee par les ions Fe(II) (62)
32 Eacutetudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques
En 2007 Valentovaacute et coll (62) ont utiliseacute un extrait de Vaccinum myrtillus (contenant 25
drsquoanthocyanosides) pour eacutevaluer son effet contre une leacutesion oxydative dans des cultures
primaires drsquoheacutepatocytes de rat induite par tBH et AA Jusqursquoagrave preacutesent lrsquoactiviteacute
cytoprotectrice de la myrtille contre une leacutesion oxydative nrsquoeacutetait pas documenteacutee
Lrsquoeacutetude a deacutemontreacute lrsquoactiviteacute protectrice dose-deacutependante de la plante vis-agrave-vis de leacutesions
oxydatives dans ces cultures cellulaires avec une protection maximale de 5116 contre les
dommages occasionneacutes par AA De plus les auteurs ont montreacute la capaciteacute de lrsquoextrait agrave
pieacuteger les radicaux DPPH (dipheacutenylpicrylhydrazyl) et O2-
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus montre des effets cytoprotecteurs agrave 100 et 500 microgmL
dans le test au MTT (sel de teacutetrazolium permettant une numeacuteration rapide des cellules
vivantes) Lrsquoextrait protegravege les heacutepatocytes de la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase et de la
formation des produits de la lipoperoxydation (TBARS repreacutesentant les substances reacuteagissant
52
avec lrsquoacide thiobarbiturique et permettant une premiegravere approche de la peroxydation
lipidique) Lrsquoimportante reacuteactiviteacute dans lrsquoeacutetude est sucircrement due agrave la dureacutee plus importante du
temps drsquoincubation dans le meacutelange reacuteactionnel Les effets observeacutes dans lrsquoeacutetude de
Valentovaacute et coll (62) montre que la capaciteacute cytoprotectrice de V myrtillus vis-agrave-vis des
heacutepatocytes de rat est probablement due aux proprieacuteteacutes antioxydantes de ses constituants
principaux (les anthocyanosides) Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude soutien lrsquoutilisation de la
myrtille dans les compleacutements alimentaires pour preacutevenir les maladies chroniques associeacutees
au stress oxydant
En 2008 Bao et coll (6) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun extrait de V myrtillus
commercialiseacute (contenant 4204 drsquoanthocyanosides) vis-agrave-vis drsquoun dommage du foie de
souris induit par un stress Ce stress est provoqueacute par lrsquoenfermement des souris dans une cage
meacutetallique pendant 18 heures provoquant un dommage heacutepatique avec augmentation des
enzymes heacutepatiques (alanine aminotransfeacuterase) du niveau de malondialdeacutehyde (MDA) du
monoxyde drsquoazote de la xanthine oxydase (XOD) et de la peroxydation lipidique avec un
deacuteseacutequilibre de la balance oxydants-antioxydants et la diminution de GSH de la vitamine C
et de la valeur ORAC Or lrsquoadministration orale de plusieurs dosages drsquoextrait de V
myrtillus pendant 5 jours preacuteceacutedant lrsquoinduction drsquoun stress chez la souris diminue le niveau
drsquoalanine aminotransfeacuterase (agrave 200 mgkgjour drsquoextrait) augmente les niveaux de GSH (50
100 et 200 mgkgjour drsquoextrait) et diminue significativement les niveaux de XOD et de NO
(agrave des concentrations de 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait)
De plus lrsquoextrait de myrtille agrave 200 mgkgjour pourrait supprimer et renverser le niveau de
MDA heacutepatique et plasmatique agrave un niveau comparable agrave celui du groupe controcircle (non
soumis au stress) La mecircme chose est observeacutee avec 200 mgkg jour de vitamine C (autre
antioxydant) Enfin le niveau ORAC est augmenteacute par 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait de V
myrtillus
Bao et coll (6) avaient deacutejagrave mis en eacutevidence lrsquoeffet protecteur du rein drsquoun extrait de V
myrtillus vis-agrave-vis drsquoun stress oxydant induit par KBrO3
En conclusion la myrtille pourrait preacutevenir les dommages heacutepatiques causeacutes par un stress
oxydant gracircce agrave ses proprieacuteteacutes antioxydantes
53
4 Effet de Vaccinim myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives et le
vieillissement
41 Effets sur un stress eacutemotionnel
Il a eacuteteacute mis en eacutevidence que le stress psychologique joue un rocircle significatif dans la
pathogenegravese de cancers et peut ecirctre associeacute avec une augmentation des produits issus de
lrsquooxydation et de leurs dommages sur les tissus
Le stress oxydant participe agrave lrsquoeacutetiologie de maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie
drsquoAlzheimer et la maladie de Parkinson En effet le stress eacutemotionnel peut affecter le systegraveme
nerveux central dans lequel se trouve notamment les neurones dopaminergiques qui
produisent la dopamine un neurotransmetteur du groupe des cateacutecholamines preacutecurseur de la
noradreacutenaline jouant un rocircle fondamentale dans le cerveau (controcircle de la motriciteacute) utiliseacute
en theacuterapeutique pour son action stimulante sur le systegraveme cardiovasculaire Les neurones
dopaminergiques sont localiseacutes dans certaines reacutegions ceacutereacutebrales comme lrsquohypothalamus le
locus niger et les corps strieacutes Ainsi la rupture de la transmission dopaminergique affecte
lrsquoactiviteacute comportementale Une baisse du niveau de dopamine dans certaines reacutegions
ceacutereacutebrales peut induire une perte des certains fonctions cognitives comme la meacutemoire
lrsquoattention la reacutesolution de problegraveme le mouvement la reacuteponse eacutemotionnelle et la capaciteacute
eacutemotionnelle agrave ressentir le plaisir ou la douleur
De plus les ERO induites par un stress sont connues pour ecirctre responsables de la
peroxydation lipidique et de lrsquooxydation des proteacuteines avec formation de proteacuteines
carbonyles Ainsi des eacutetudes ont deacutemontreacute que la modification de proteacuteines intracellulaires
comme certaines enzymes cleacutes et proteacuteines structurales peuvent mener agrave la deacutegeacuteneacuteration
neurofibrillaire des neurones menant agrave la maladie drsquoAlzheimer une autre maladie
neurodeacutegeacuteneacuterative (1) (52)
En 2008 Rahman et coll (52) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun meacutelange
drsquoanthocyanosides de Vaccinum myrtillus administreacute oralement agrave des souris soumis agrave un
stress oxydant ceacutereacutebral provoqueacute par la coupure des moustaches En effet le retrait des
moustaches augmente la formation de proteacuteines carbonyles et induit la peroxydation lipidique
dans le cerveau le cœur le rein et le foie Le niveau des marqueurs de lrsquooxydation diffegraverent
en fonction des reacutegions ceacutereacutebrales De mecircme le niveau de dopamine est alteacutereacute dans le cortex
ceacutereacutebral et le meacutesenceacutephale Les moustaches de souris jouent un rocircle tregraves important dans le
sens et la motriciteacute et la contribution sensorielle est directement lieacutee aux neurones moteurs
54
controcirclant leur activiteacute locomotrice Crsquoest pourquoi le retrait des moustaches a de graves
conseacutequences puisqursquoil affecte lrsquoactiviteacute locomotrice induisant anxieacuteteacute et hyper-locomotion
Ce stress oxydant induit par un stress psychologique augmente les niveaux de marqueurs
biologiques comme les proteacuteines carbonyles et les TBARS dans certains organes et reacutegions
ceacutereacutebrales (cœur reins foie meacutesenceacutephale cortex et ceacutereacutebellum) Or lrsquoadministration des
anthocyanosides de V myrtillus des souris diminue la peroxydation lipidique dans tous les
tissus reacuteduit lrsquooxydation des proteacuteines dans les reins le foie le meacutesenceacutephale et le cortex
ceacutereacutebral de faccedilon notable et diminue eacutegalement les niveaux de proteacuteines carbonyles et de
TBARS
Enfin lrsquoadministration de myrtille supprime les modifications (induites par le stress
psychologique) des niveaux de dopamine et de ses meacutetabolites (ces modifications pouvant
provoquer des maladies deacutegeacuteneacuteratives comme la maladie de Parkinson)
Cependant cette eacutetude ne peut pas conclure sur la capaciteacute des anthocyanosides de V
myrtillus agrave franchir la barriegravere heacutemato-enceacutephalique et agrave y exercer leur action antioxydante
Les principales formes retrouveacutees dans le foie et les reins sont des meacutetabolites meacutethyleacutes des
anthocyanosides et drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour prouver le lien entre ces meacutetabolites
meacutethyleacutes et la neuroprotection observeacutee dans lrsquoeacutetude
En conclusion cette eacutetude suggegravere que les anthocyanosides peuvent ecirctre utiles dans la
protection et le traitement des maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives associeacutees agrave un stress oxydant
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication du stress oxydant
Le dommage oxydant a depuis longtemps eacuteteacute proposeacute pour ecirctre en partie responsable de
plusieurs deacutesordres lieacutes agrave lrsquoacircge De plus plusieurs eacutetudes ont confirmeacute lrsquoaccumulation des
marqueurs biologiques du stress oxydant (augmentation de lrsquooxydation des lipides et des
proteacuteines dans les cerveaux de mammifegraveres acircgeacutes) Les pertes de la fonction ceacutereacutebrale avec le
vieillissement pourraient ecirctre associeacutees agrave une leacutesion oxydante des biomoleacutecules dans certaines
reacutegions ceacutereacutebrales et un niveau augmenteacute de peroxydes lipidiques observeacute dans des reacutegions
du cerveau impliqueacutees dans les fonctions de meacutemoire et drsquoapprentissage De plus les auteurs
ont deacutemontreacute lrsquoassociation des alteacuterations des fonctions ceacutereacutebrales cognitives avec des
modifications du systegraveme cardiovasculaire comme lrsquoaugmentation de la pression sanguine
(impliqueacutee dans lrsquoacceacuteleacuteration du vieillissement des vaisseaux les alteacuterations des fonctions
ceacutereacutebrales et le deacuteveloppement de lrsquoatheacuteroscleacuterose) (32)
Kolosova et coll (32) utilisent pour leur eacutetude deux souches de rats La souche OXYS qui est
une souche aux traits heacuteriteacutes de vieillissement acceacuteleacutereacute et une haute sensitiviteacute au stress
55
oxydant par rapport agrave une autre souche la souche Wistar Les rats OXYS ont une espeacuterance
de vie plus courte et deacuteveloppent plus preacutecocement des deacutesordres pathologiques lieacutes agrave lrsquoacircge
semblables agrave ceux observeacutes chez lrsquohumain comme lrsquoosteacuteoporose lrsquohypertension arteacuterielle
de ce fait le comportement de jeunes rats OXYS est semblable agrave celui des rats Wistar acircgeacutes
Lrsquoobjectif de leur eacutetude eacutetait de veacuterifier srsquoil existe un lien entre le vieillissement ceacutereacutebral et les
marqueurs du stress oxydant chez les rats OXYS pour rechercher lrsquoefficaciteacute drsquoune
suppleacutementation agrave long terme drsquoantioxydants dans la preacutevention de lrsquoapparition de deacuteficits
cognitifs comme les deacuteficits drsquoapprentissage et de meacutemoire
Les diffeacuterents paramegravetres de stress oxydant dans ces deux souches de rats sont eacutevalueacutes
(peroxydation lipidique niveau de proteacuteines carbonyles niveau de MDA activiteacute de
superoxyde dismutase (SOD) de niveau de GSH et quantiteacute drsquoα-tocopheacuterol)
Lrsquoeacutetude deacutemontre qursquoune suppleacutementation agrave long terme avec un extrait de V myrtillus
preacutevient la manifestation exteacuterieure du vieillissement des deux souches de rats (lrsquoextrait
augmente le poids des souris) Chez les rats OXYS lrsquoextrait de myrtille diminue
- la peroxydation lipidique
- lrsquoactiviteacute SOD dans le cerveau (en jouant un rocircle protecteur vis-agrave-vis du stress
oxydant)
- et le niveau de MDA dans le cerveau
La myrtille preacutevient aussi chez les rats OXYS
- les deacuteficits de meacutemoire et drsquoapprentissage plus efficacement que la vitamine E (autre
antioxydant)
- la deacuteteacuterioration de la fonction mitochondriale (autre cause de seacutenescence acceacuteleacutereacutee)
De plus V myrtillus a la capaciteacute de preacutevenir les mutations induites par les ERO lesquels
srsquoaccumulent avec lrsquoacircge dans la mitochondrie menant agrave un dysfonctionnement
mitochondriale Ce mecircme meacutecanisme pourrait ecirctre impliqueacute dans lrsquoeffet positif exerceacute par la
myrtille sur la meacutemoire des rats OXYS Ainsi la preacutevention des deacuteficits cognitifs
comportementaux avec des antioxydants peuvent montrer le rocircle du stress oxydant dans ces
processus mecircme si drsquoautres meacutecanismes peuvent jouer un rocircle dans cette capaciteacute de
preacutevention des composeacutes
En conclusion Vaccinum myrtillus atteacutenue les deacuteficits cognitifs chez les rats OXYS
apportant la preuve du rocircle theacuterapeutique de cette plante Cependant les meacutecanismes par
lesquels cet antioxydant agit pour exercer une neuroprotection in vivo et le reacuteel impact du
stress oxydant et de ses marqueurs biologiques sur les deacuteficits cognitifs des rats OXYS
doivent encore ecirctre eacutetudieacutes
56
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB
51 Effets drsquoune exposition solaire
Une exposition prolongeacutee aux ultraviolets (UV) durant le sport ou drsquoautres activiteacutes est un
facteur de risque de plusieurs maladies de la peau comme le cancer cutaneacute La deacutepleacutetion de la
couche drsquoozone protectrice entraicircne une quantiteacute plus importante des rayons UV atteignant la
surface planeacutetaire et exerccedilant des effets neacutefastes Les UVB sont largement absorbeacutes mais
moins peacuteneacutetrants que les UVA atteignant particuliegraverement la couche cellulaire de lrsquoeacutepiderme
basal Les UVB sont plus geacutenotoxiques et environ 1000 fois plus capables de provoquer un
coup de soleil que les UVA Ainsi le coup de soleil lrsquoeacuterythegraveme et lrsquoœdegraveme sont des
manifestations de lrsquoexposition aux UVB Lrsquoabsorption des photons UVB megravenent agrave des
dislocations de lrsquoADN et agrave la formation de photoproduits dimegraveriques de pyrimidine De plus
ils interagissent directement avec les acides amineacutes aromatiques notamment le tryptophane et
la tyrosine (inclus dans les proteacuteines) pouvant alors alteacuterer les fonctions de celles-ci Les UVB
altegraverent indirectement les macromoleacutecules ils geacutenegraverent la production de radicaux libres
comme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote induisant lrsquooxydation des proteacuteines
des lipides et de lrsquoADN Ces produits oxydeacutes (hydroperoxydes lipidiques proteacuteines
carbonyles et 8-hydroxydeacuteoxyguanosine) sont impliqueacutes dans le deacutebut des cancers cutaneacutes
Les UVB diminuent aussi les antioxydants de la peau responsable drsquoune baisse de la
protection vis-agrave-vis des radicaux libres Ils participent aux pheacutenomegravenes de processus
inflammatoire de la peau incluant une cascade drsquoeacutevegravenements comme lrsquoinfiltration de
leucocytes sanguins inflammatoires (macrophages et neutrophiles) lrsquoaugmentation de la
production des prostaglandines comme conseacutequence de lrsquoaugmentation de la peroxydation
lipidique la libeacuteration du fateur TNFα (tumour necrosis factor alpha ou facteur de neacutecrose
tumoral) le NFκB (nuclear factor κB ou facteur nucleacuteaire κB) des cytokines pro-
inflammatoires comme les interleukines (IL-1α IL-1β IL-6 IL-8 IL-12) qui en retour
augmentent la production des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote Un deacutefaut de
reacuteparation des leacutesions de lrsquoADN et les effets neacutefastes des UVB du soleil sont agrave lrsquoorigine des
cancers cutaneacutes Crsquoest pourquoi des meacutecanismes de protection de la peau ou une atteacutenuation
de la quantiteacute drsquoUVB atteignant et peacuteneacutetrant la peau peuvent ecirctre des strateacutegies efficaces dans
la preacutevention des dommages occasionneacutes par le soleil (57)
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires
Svobodovaacute et coll (57) Ont eacutetudieacute la capaciteacute des fractions pheacutenoliques des fruits de Lonicera
caerulea L (chegravevrefeuille bleu) et de V myrtillus en preacute et post-traitement sur les dommages
57
oxydants des keacuteratinocytes HaCaT humains induits par un simulateur de radiations solaires
(UVB) Plusieurs paramegravetres sont eacutetudieacutes et seuls les reacutesultats concernant V myrtillus sont
rapporteacutes dans cette thegravese Cette plante a plusieurs effets
- elle augmente le nombre de cellules viables
- diminue significativement la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase de maniegravere dose
deacutependante
- augmente de faccedilon dose-deacutependante la prolifeacuteration cellulaire (prolifeacuteration reacuteduite
par les UVB)
- preacutevient la formation et reacuteduit significativement la cassure simple brin de lrsquoADN
- diminue la caspase-3 (meacutediateur de lrsquoexeacutecution de la mort cellulaire apoptotique)
- diminue la caspase-9 de maniegravere dose-deacutependante (meacutediateurs de lrsquoexeacutecution de la
mort cellulaire apoptotique)
- preacutevient la formation des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote avec
eacutelimination excellente en post-traitement
- et diminue de maniegravere dose-deacutependante la production drsquoIL6
Cependant on remarque que cette protection deacutecline leacutegegraverement agrave des concentrations plus
hautes srsquoexpliquant par un effet pro-oxydant des polypheacutenols dans les cellules irradieacutees ougrave la
balance oxydantsantioxydants est deacuteseacutequilibreacutee
En conclusion V myrtillus pourrait ecirctre un bon candidat pour la fabrication de preacuteparations
dermatologiques protectrices agrave large spectre ou dans des preacuteparations apregraves-soleil Pour cela
des eacutetudes futures sont neacutecessaires pour eacutetudier la biodisponibiliteacute des composants exclure
les toxiques eacuteventuels ou les effets photoxiques et confirmer lrsquoeffet photoprotecteur in vivo
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes
Chez lrsquohomme la reacutetine (Figure 17) est une membrane photosensible qui tapisse la face
interne de lrsquoœil elle est constitueacutee de plusieurs types de cellules formant trois couches
superposeacutees qui sont de lrsquoarriegravere vers lrsquoavant de lrsquoœil
- les cellules photoreacuteceptrices constitueacutees de cocircnes et de bacirctonnets
- les cellules bipolaires
- les cellules ganglionnaires
Sa face posteacuterieure est en contact avec la choroiumlde par lrsquointermeacutediaire de lrsquoeacutepitheacutelium
pigmentaire et sa face anteacuterieure avec le corps vitreacute Les cellules de la reacutetine transforment les
58
influx nerveux en impulsions nerveuses qui gagnent les fibres nerveuses du nerf optique
permettant le transport des informations visuelles jusqursquoau cerveau (1)
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme (77)
La reacutetine est situeacutee dans un environnement tregraves oxygeacuteneacute pouvant subir des dommages induits
par le stress oxydant (les radicaux libres peuvent oxyder les lipides des photoreacutecepteurs) (23)
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire
Dutot et coll (23) ont eacutetudieacute les effets cytoprotecteurs drsquoun extrait en poudre de V myrtillus
(contenant 10 de proanthocyanidols et 10 drsquoanthocyanidines) sur le stress oxydant
appliqueacute aux cellules reacutetiniennes humaines dans un systegraveme in vitro Lrsquoextrait de V myrtillus
est incubeacute (005 et 01) pendant 15 minutes ou 24 heures sur une ligneacutee de cellules de
lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute reacutetinien Puis un stress oxydant induit par le tBHP est appliqueacute
pendant une heure sur ces cellules Les diffeacuterents paramegravetres des dommages du stress oxydant
sont eacutevalueacutes comme les modifications du meacutetabolisme cellulaire la formation des ERO la
formation drsquoO2-et lrsquoapoptose mitochondriale
Les reacutesultats sur ces diffeacuterents paramegravetres sont reacutesumeacutes dans les tableaux II agrave V
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
baisse induite par le tBHP Aucun effet cytoprotecteur
Incubation 24 heures Blocage de lrsquoeffet du tBHP sur le meacutetabolisme cellulaire
59
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Une concentration faible drsquoextrait (005) nrsquoa pas drsquoeffet sur une peacuteriode courte drsquoincubation
(15 minutes) par contre crsquoest le cas pour une peacuteriode plus longue (24 heures) cette
concentration est capable drsquoavoir des effets cytoprotecteurs V myrtillus pourrait ecirctre capable
de stimuler les deacutefenses antioxydantes de lrsquoorganisme mais des eacutetudes compleacutementaires sont
neacutecessaires pour confirmer cette hypothegravese
Enfin lrsquoeacutetude a montreacute que lorsque lrsquoextrait diminue le stress oxydant et lrsquoapoptose
mitochondriale elle restaure aussi la viabiliteacute cellulaire Par contre srsquoil nrsquoy a pas drsquoeffet sur le
stress oxydant il nrsquoy en a pas non plus sur la viabiliteacute cellulaire
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge
Lors du vieillissement et dans certaines maladies oculaires (comme la deacutegeacuteneacuterescence
maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge ougrave le stress oxydant est fortement impliqueacute) des pigments
autofluorescents constitueacutes par des deacutepocircts de lipofuchsine (pigment jaune-brun constitueacutee de
deacutebris moleacuteculaires) peuvent srsquoaccumuler dans les cellules eacutepitheacuteliales du pigment reacutetinien
La lipofuchsine peut absorber la lumiegravere bleue et geacuteneacuterer des photoproduits toxiques
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
surproduction drsquoERO Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution du stress oxydant
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
production drsquoO2-
Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Reacuteduction de la production drsquoO2-
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Inhibition significative de
lrsquoapoptose mitochondriale Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution de lrsquoapoptose mitochondriale
60
perturbant le fonctionnement cellulaire crsquoest donc un geacuteneacuterateur de radicaux lieacutes agrave la
lumiegravere Un composant de reacutetinoiumlde majeur de la lipofuchsine est lrsquoA2E (bis reacutetinoiumlde de
pyridinium deacuteriveacute de reacutetinal et de phosphatidyl eacutethanolamine) il contribue agrave
lrsquoautofluorescence de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute agrave lrsquoinhibition de fonctions cellulaires
essentielles au deacuteclenchement de la mort par apoptose des cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute
et agrave lrsquoabsorption de la lumiegravere bleue aggravant les leacutesions cellulaires (79) A2E lors de
lrsquoirradiation par la lumiegravere bleue subit une photooxydation en geacuteneacuterant de lrsquooxygegravene
singulet celui-ci reacuteagit en retour avec le fluorophore geacuteneacuterant des eacutepoxydes au niveau des
doubles liaisons carbone-carbone Les A2E-eacutepoxydes peuvent alors induire de graves leacutesions
agrave lrsquoADN (une des cibles des eacutevegravenements photodynamiques par interaction lumiegravere bleue-
A2E) pouvant srsquoaccumuler avec lrsquoacircge ougrave un deacuteclin des meacutecanismes de reacuteparation des bases
de lrsquoADN oxydeacutees a eacuteteacute reconnu (56)
Les antioxydants pourraient avoir un rocircle important dans la preacutevention des leacutesions oxydatives
sur les macromoleacutecules comme les bases de lrsquoADN et la deacutegeacuteneacuterescence de la maculaire lieacutee agrave
lrsquoacircge (DMLA) Crsquoest pourquoi Vaccinum myrtillus (par ses proprieacuteteacutes antioxydantes) a fait
lrsquoobjet drsquoeacutetudes montrant sa capaciteacute agrave preacutevenir certaines maladies oculaires causes majeurs
de ceacuteciteacute et de deacuteteacuterioration de lrsquoacuiteacute visuelle chez les personnes acircgeacutees
En 2003 Sparrow et coll (56) ont deacutemontreacute dans une eacutetude in vitro la capaciteacute drsquoun extrait
de V myrtillus agrave inhiber lrsquoeacutepoxydation drsquoA2E par capture de lrsquooxygegravene singulet gracircce agrave sa
richesse en anthocyanosides antioxydants
Dans une eacutetude in vivo utilisant une souche de rats avec seacutenescence acceacuteleacutereacutee (rats OXYS)
Fursova et coll (24) ont deacutemontreacute qursquoune alimentation suppleacutementeacutee agrave long terme avec un
extrait de V myrtillus pouvait ecirctre efficace dans la preacutevention de la DMLA et de la cataracte
seacutenile deux maladies dont les dommages ont eacuteteacute attribueacutees aux radicaux libres
La surreacutegulation des proteacuteines de stress est un moyen de protection contre des conditions
deacuteleacutetegraveres comme le stress oxydant Ainsi Milbury et coll (42) ont deacutemontreacute in vitro la
capaciteacute des anthocyanosides et drsquoautres composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus agrave surreacuteguler
les enzymes de deacutefense du stress oxydant comme lrsquohegraveme oxygeacutenase-1 (HO-1) et la glutathion
S-transfeacuterase (GST) dans des cultures de cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmentaire reacutetinien humain
Agrave cocircteacute du stress oxydant des facteurs vasculaires peuvent ecirctre impliqueacutes dans les maladies
oculaires comme le glaucome la DMLA ou la reacutetinopathie diabeacutetique Comme nous lrsquoavons
vu dans le premier chapitre de cette partie Personn et coll (46) ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoun
extrait de V myrtillus agrave inhiber lrsquoECA cet effet pourrait ecirctre une explication aux effets
observeacutes de la plante sur la vision
61
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus
Un stress oxydant peut laquo srsquoattaquer raquo aux neurotransmetteurs entrainant leur oxydation Ainsi
les neurotransmetteurs comme la dopamine et son meacutetabolite neurotoxique la 6-
hydroxydopamine peuvent subir une oxydation geacuteneacuterant H2O2 et des ERO Dans les neurones
et drsquoautres cellules ce stress oxydant peut ecirctre amplifieacute par le relargage du cytochrome c
(composant essentiel de la chaine respiratoire mitochondriale participant au transfert
drsquoeacutelectrons) localiseacute dans la membrane interne de la mitochondrie dans le cytoplasme ce
relargage induit toute une cascade de reacuteactions aboutissant agrave lrsquoactivation de caspases
(proteacuteines directement lieacutees agrave lrsquoapoptose) pouvant ecirctre fortement preacutejudiciable pour les
meacutetabolites de la dopamine La perte de lrsquointeacutegriteacute mitochondriale observeacutee dans des maladies
neurodeacutegeacuteneacuteratives peut contribuer aussi agrave des niveaux relargueacutes de cytochrome c au-dessus
de la normale (68)
Yao et coll (68) ont montreacute in vitro la capaciteacute drsquoune preacuteparation riche en anthocyanosides
composeacutee de V myrtillus V corymbosum et V oxycoccus L et des anthocyanosides purifieacutes agrave
inhiber lrsquooxydation de la 6-hydoxydopamine augmenteacutee par le cytochrome c Parmi les trois
espegraveces eacutetudieacutees les extraits de V myrtillus apparaissent pour ecirctre plus efficaces dans cette
activiteacute que les deux autres espegraveces ou que les anthocyanosides purifieacutes pouvant srsquoexpliquer
par une plus grande richesse en anthocyanosidesanthocyanidines particuliegraverement la
cyanidine et delphinidine La composition en querceacutetine et agrave moindre degreacute en myriceacutetine
nrsquoont pas de rocircle dans lrsquoactiviteacute antioxydante la preacutesence de querceacutetine est mecircme
inversement correacuteleacutee avec lrsquoeffet antioxydant Lrsquoeffet inhibiteur observeacute est principalement ducirc
agrave lrsquoeffet antioxydant des anthocyanosides
Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent la forte activiteacute des anthocyanosides vis-agrave-vis des
reacuteactions neurotoxiques potentielles et suggegraverent lrsquoimportance de mettre au point des eacutetudes in
vivo dans le but de deacutemontrer des effets neuro- et mitochondrio-protecteurs de ces
phytochimiques particuliegraverement dans la maladie de Parkinson et drsquoautres maladies
impliquant un dysfonctionnement mitochondriale
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant un
stress oxydant
Une ischeacutemie-reperfusion entraine de nombreuses alteacuterations microvasculaires comme une
augmentation des leucocytes adheacuterant agrave la paroi des vaisseaux veineux une diminution de la
longueur des capillaires perfuseacutes menant agrave une diminution du nombre de capillaires
62
fonctionnels une perte de lrsquointeacutegriteacute endotheacuteliale une augmentation de la permeacuteabiliteacute
capillaire (relargage de proteacuteases comme lrsquoeacutelastase et la collageacutenase avec formation drsquoœdegraveme)
et des modifications du diamegravetre des arteacuterioles (modification de la balance vosodilatation-
vasoconstriction au profit drsquoune vasoconstriction ) Les leucocytes jouent un rocircle fondamental
dans lrsquoischeacutemie-reperfusion en srsquoaccumulant dans les tissus ils provoquent lrsquoocclusion
intravasculaire ainsi que le relargage de cytokines pro-inflammatoires et des meacutetabolites
deacuteriveacutes de lrsquooxygegravene En effet les ERO ont eacuteteacute fortement impliqueacutees dans ces deacutesordres
microcirculatoires elles altegraverent entre autre lrsquointeacutegriteacute de la paroi des vaisseaux et entrainent
une augmentation de la permeacuteabiliteacute en post-capillaire et dans les veines collectrices de
lrsquoabajoue drsquohamster De plus les ERO provenant des leucocytes ou non peuvent induire une
contraction des arteacuterioles (8)
En 1995 Bertuglia et coll (8) ont eacutetudieacute les effets des anthocyanosides de V myrtillus sur
lrsquoischeacutemie-reperfusion provoqueacutee sur lrsquoabajoue drsquohamster entrainant les deacutesordres
microcirculatoires citeacutes preacuteceacutedemment Lrsquoeacutetude montre qursquoune administration orale
drsquoanthocyanosides de V myrtillus suite agrave ces dommages permet une protection de la paroi des
vaisseaux gracircce agrave leur action antioxydante une reacuteduction du nombre de leucocytes adheacuterant agrave
la paroi veineuse (proteacutegeant les tissus de lrsquoischeacutemie-reperfusion et preacutevenant la formation de
meacutediateurs inflammatoires) une diminution de la permeacuteabiliteacute capillaire par son activiteacute anti-
proteacuteasique la plante peut ecirctre eacutegalement un modulateur important du tonus des arteacuterioles en
controcirclant la freacutequence et lrsquoamplitude la vasomotion (modification du calibre vasculaire)
permettant une ameacutelioration de la perfusion capillaire (inhibition de la vasoconstriction par les
ERO)
Cette eacutetude est importante drsquoune part pour montrer le rocircle des radicaux libres deacuteriveacutes de
lrsquooxygegravene dans les deacutesordres microcirculatoires et drsquoautre part pour deacutemontrer les effets
beacuteneacutefiques de V myrtillus agrave restaurer les diffeacuterents paramegravetres notamment par son action
antioxydante
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer
Wang et coll (65) ont reporteacute les reacutesultats des eacutetudes qui ont permis de mettre en eacutevidence les
activiteacutes anticarcinogeacuteniques des anthocyanosides et des extraits riches en anthocyanosides
dans des modegraveles de cultures cellulaires in vitro et dans des systegravemes in vivo de modegraveles
tumoraux chez lrsquoanimal Lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides est due agrave leur structure
63
pheacutenolique en donnant un eacutelectron aux radicaux ceux-ci devenant stables (eacutelectrons
apparieacutes) En effet les anthocyanosides sont capables comme nous lrsquoavons vu
preacuteceacutedemment de pieacuteger directement les ERO drsquoaugmenter la valeur ORAC des cellules de
stimuler lrsquoexpression de la phase II de deacutetoxification des enzymes de reacuteduire la formation des
sous-produits de lrsquoADN de diminuer la peroxydation lipidique drsquoinhiber la mutagenegravese
induite par des carcinogegravenes ou des toxines et de reacuteduire la prolifeacuteration cellulaire en
modulant les voies de transduction du signal Ils sont capables eacutegalement de cheacutelater les
meacutetaux et de se lier directement aux proteacuteines Lrsquoactiviteacute antioxydante est principalement due
aux groupes hydroxyles des anthocyanosides en position 3 du cycle C et en position 3rsquo 4rsquo et
5rsquo du cycle B de leur structure de base Enfin il a eacuteteacute montreacute que les aglycones
drsquoanthocyanidines ont une activiteacute antioxydante plus importante que leurs homologues
glycosyleacutes et cette activiteacute diminue quand le nombre de sucres augmente
Mecircme si les eacutetudes expeacuterimentales ont deacutemontreacute lrsquoactiviteacute anticancer des anthocyanosides les
eacutetudes eacutepideacutemiologiques nrsquoont pas montreacute lrsquoactiviteacute protectrice de la consommation
drsquoanthocyanosides vis-agrave-vis du risque de cancer humain et leur activiteacute antioxydante reste
encore questionnable De plus les quantiteacutes drsquoanthocyanosides neacutecessaires pour observer un
effet in vitro sont importantes par rapport aux quantiteacutes retrouveacutees dans le plasma humain in
vivo Crsquoest pourquoi des eacutetudes sont neacutecessaires pour deacutevelopper des solutions qui
permettraient drsquoaugmenter lrsquoabsorption des anthocyanosides etou leurs meacutetabolites
permettant ainsi lrsquoutilisation optimale des anthocyanosides dans la preacutevention de cancer chez
lrsquohomme particuliegraverement dans les tissus autres que le tractus gastro-intestinal et la peau
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus
Katsube et coll (31) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute anticarcinogeacutenique dans un systegraveme in vitro de dix
baies comestibles et particuliegraverement celle de V myrtillus Lrsquoactiviteacute de la myrtille est testeacutee
sur deux ligneacutees cellulaires diffeacuterentes les cellules leuceacutemiques humaines HL60 et les
cellules carcinomateuses du cocirclon HCT116 Lrsquoeacutetude deacutemontre que lrsquoextrait de V myrtillus est
le plus efficace parmi les dix extraits eacutethanoliques de baies pour inhiber la croissance de ces
ligneacutees cellulaires Toutes les concentrations testeacutees inhibent la croissance des cellules HL60
lors des deux peacuteriodes drsquoincubation (24 et 48 heures) alors que lrsquoinhibition de la croissance
des HCT116 nrsquoest observeacutee que pour des intervalles speacutecifiques de concentrations De plus
lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus induit des niveaux significatifs drsquoapoptose dans les
cellules HL60 mais pas dans les cellules HCT116
64
Ce sont les anthocyanosides qui sont responsables de lrsquoinhibition de la croissance des cellules
canceacutereuses HL60 et HCT116 induisant eacutegalement lrsquoapoptose des cellules HL60
Les anthocyanosides de V myrtillus plus particuliegraverement les glycosides de delphinidine et
malvidine induisent lrsquoinhibition de la croissance des cellules de la leuceacutemie humaine HL60
par induction de lrsquoapoptose et mecircme si lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus et certains
anthocyanosides inhibent la croissance des cellules carcinomateuses du cocirclon humain
(HCT116) ces cellules sont toutefois moins sensibles agrave lrsquoapoptose que les autres ligneacutees en
se reacutefeacuterant agrave drsquoautres donneacutees on pourrait suggeacuterer un blocage de la voie drsquoinduction de
lrsquoapoptose des cellules HCT116
Lrsquoinhibition de la croissance par les baies nrsquoest toutefois pas speacutecifique aux cellules
canceacutereuses En conclusion une consommation reacuteguliegravere de baies pourrait maintenir des
niveaux drsquoanthocyanosides dans le plasma Ces baies sont des aliments fonctionnels
prometteurs dans la preacutevention du risque de cancer gracircce agrave leurs effets multiples comme
lrsquoinduction de lrsquoapoptose lrsquoactiviteacute antioxydante et drsquoautres effets anticanceacutereux
En 2004 Zhao et coll (69) ont eacutetudieacute les effets de trois extraits riches en anthocyanosides
Vitis vinifera (Vigne rouge) V myrtillus L et Aronia melanocarpa E (Aronie noire) sur les
cellules canceacutereuses du cocirclon HT-29 et les cellules non tumorigeacuteniques du cocirclon NCM460
Lrsquoeacutetude deacutemontre lrsquoinhibition de la croissance des cellules HT-29 par V myrtillus agrave faibles
concentrations tandis que lrsquoeffet est pauvre sur les cellules NCM460 Cependant une peacuteriode
longue drsquoincubation (72 heures) montre un effet de la myrtille sur la croissance des cellules
NCM460 V myrtillus a une activiteacute importante peut-ecirctre gracircce agrave la cyanidine reporteacutee pour
ecirctre un inhibiteur efficace de la croissance des cellules canceacutereuses coloniques
Dans cette eacutetude la croissance des cellules du colon est inhibeacutee alors que les conditions de pH
et de tempeacuterature ne sont pas optimum pour la stabiliteacute des anthocyanosides Les formes
actives responsables des effets observeacutes pourraient ecirctre dues aux produits de deacutegradation des
anthocyanosides
En conclusion cette eacutetude deacutemontre que des extraits riches en anthocyanosides et notamment
V myrtillus sont capables drsquoinhiber la croissance des cellules canceacutereuses du colon HT-29 agrave
plus basse concentration et agrave des peacuteriodes drsquoincubation plus courtes que la croissance des
cellules non tumorigeacuteniques NCM460 du colon Il reste toutefois agrave deacuteterminer quels sont les
composeacutes des extraits veacuteritablement responsables des effets observeacutes
65
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine
En 2006 Cooke et coll (18) ont eacutetudieacute les effets drsquoun meacutelange drsquoanthocyanosides de V
myrtillus (Mirtoselectreg) et de cyanidine-3-glucoside ou C3G (anthocyanoside le plus
abondant de lrsquoalimentation) sur le deacuteveloppement drsquoadeacutenome intestinal sur souris ApcMin
alimenteacutees pendant 12 semaines avec ces extraits Les souris ApcMin
constituent un modegravele
geacuteneacutetique de polypose adeacutenomateuse familiale humaine Cette maladie autosomique
dominante de lrsquohomme est caracteacuteriseacutee par le deacuteveloppement spontaneacute drsquoune centaine de
polypes colorectaux pouvant se transformer en carcinomes
Les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent que les deux extraits utiliseacutes diminuent le nombre
drsquoadeacutenomes drsquoune maniegravere dose-deacutependante (agrave la plus haute concentration lrsquoinhibition la plus
importante est observeacutee pour la cyanidine-3-glucoside) Les anthocyanosides sont retrouveacutes
dans le plasma agrave la limite de la deacutetection analytique et sont retrouveacutes agrave des niveaux
quantifiables dans lrsquointestin et lrsquourine Les principales formes preacutesentes dans lrsquointestin et
lrsquourine sont des anthocyanosides glucuronides et des meacutetabolites meacutethyleacutes Enfin les
anthocyanosides sont retrouveacutes dans drsquoautres tissus que lrsquointestin
En conclusion la dose eacutequivalente de Mirtoselectreg
chez lrsquohumain est contenue dans environ
740 grammes de baies de V myrtillus suggeacuterant que la dose efficace de lrsquoextrait chez la
souris ApcMin
pourrait ecirctre traduite en une dose importante (mais non impossible) chez
lrsquohumain De plus les glycosides de malvidine sont les anthocyanosides laquo survivants raquo les
mieux sous forme inchangeacutee dans lrsquointestin leur structure eacutetant moins apte agrave subir les
reacuteactions de conjugaison que celle drsquoautres anthocyanosides Lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides
in vivo pourrait ecirctre due au moins en partie agrave leur hydrolyse en anthocyanidines La preacutesence
transitoire des anthocyanidines apregraves hydrolyse de leurs preacutecurseurs glycosyleacutes et leur
transformation par conjugaison meacutetabolique pourraient expliquer lrsquoefficaciteacute de C3G ou du
Mirtoselectreg Le niveau drsquoanthocyanosides agrave la dose efficace chez la souris Apc
Min est bas
dans la circulation systeacutemique mais deacutetectable et mesurable dans le tractus gastro-intestinal et
lrsquourine
Ainsi lrsquoabsence drsquoeffets indeacutesirables des anthocyanosides et leur efficaciteacute dans la reacuteduction
du deacuteveloppement de lrsquoadeacutenome en font de bons candidats pour le deacuteveloppement clinique
66
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes
Les reacutecepteurs agrave lrsquoactiviteacute tyrosine kinase sont des moleacutecules transmembranaires constitueacutees
drsquoun site reacutecepteur sur lequel se lie un ligand (localiseacute sur la face extracellulaire) et un site
tyrosine kinase (sur la face interne) Ces reacutecepteurs ont en plus un site de phosphorylation Le
site tyrosine kinase (constituant une famille drsquoenzymes) est normalement inactif mais peut
srsquoactiver par phosphorylation de la tyrosine Le meacutecanisme drsquoactivation du site tyrosine
kinase ne se fait pas par passage drsquoinformations depuis le site de reconnaissance du ligand
jusqursquoagrave lrsquointeacuterieur de la cellule mais par la liaison du ligand sur deux reacutecepteurs pouvant se
rapprocher et se phosphoryler mutuellement Les reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase jouent
un rocircle crucial dans la carcinogenegravese et la progression tumorale Des exemples importants de
reacutecepteurs agrave tyrosine kinase comportent la famille ErbB incluant le facteur de croissance
eacutepidermique (EGFR ErbB1) et les reacutecepteurs ErbB2-4 lrsquoIGFR1 (insulin-like growth factor
receptor 1) et les VEGFR-2 et VEGFR-3 (vascular endothelial growth factor receptors) ErbB
et IGF sont des reacutecepteurs agrave tyrosine kinase surexprimeacutes dans certains types tumoraux
reacutesultant dans des modifications de la signalisation cellulaire impliqueacutees dans la croissance
cellulaire et la diffeacuterentiation Les reacutecepteurs VEGF sont des modulateurs de lrsquoangiogenegravese et
de la lymphangiogenegravese Crsquoest pourquoi lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs agrave tyrosine
kinase peut ecirctre une theacuterapeutique inteacuteressante (84)
42 Eacutetude de Teller et coll (2009)
Teller et coll (60) ont eacutetudieacute les effets de deux extraits standardiseacutes Mirtocyanreg
(extrait de V
myrtillus et Oenocyaninreg
(extrait de raisins) sur lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs tyrosine kinases
(RTKs) Seuls les reacutesultats concernant V myrtillus seront rapporteacutes dans cette thegravese
Lrsquoinhibition des RTK est eacutevalueacutee en utilisant une activiteacute kinase recombinante dans un
systegraveme de cellules libres et en deacuteterminant lrsquoautophosphorylation induit par le ligand dans
des cellules carcinomateuses de la vulve E431 et dans des cellules endotheacuteliales aortiques
porcines exprimant soit VEGFR-2 soit VEGFR-3 La capaciteacute des extraits riches en
anthocyanosides agrave modifier lrsquoactiviteacute des RTK est compareacutee agrave leur capaciteacute agrave moduler la
croissance des cellules
Les deux extraits inhibent lrsquoactiviteacute drsquoune varieacuteteacute de RTKs dans le systegraveme de cellules libres
(activiteacute kinase des domaines kinases recombinants) et dans les cellules vivantes (reacutecepteur
intact autophosphorylation induite par ligand) Par contre lrsquoautophosphorylation du reacutecepteur
des cellules intactes neacutecessitent des concentrations 10 agrave 50 fois plus hautes que celles
67
neacutecessaires pour lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute kinase recombinante dans le systegraveme de cellules
libres Cette diffeacuterence pourrait srsquoexpliquer par un accegraves pauvre des glycosides aux domaines
kinases recombinants
De plus les deux extraits inhibent davantage les kinases associeacutees avec EGFR et le VEGFR-2
que les kinases associeacutees avec ErbB-2 VEGFR-3 et IGF1R De plus les extraits preacutesentent
peu de speacutecificiteacute entre les membres des reacutecepteurs de la famille ErbB Mecircme si les extraits
riches en anthocyanosides inhibent lrsquoactiviteacute des RTKs peu drsquoeffets ont eacuteteacute montreacutes sur la
croissance des cellules Ceci pourrait ecirctre ducirc soit agrave la faible stabiliteacute des anthocyanosides dans
le milieu de culture soit agrave la preacutesence drsquoautres voies moleacuteculaires que les RTKs ces voies ne
seraient pas affecteacutees par les extraits riches en anthocyanosides et auraient la capaciteacute de
promouvoir la croissance et la survie cellulaire elles pourraient ainsi compenser lrsquoinhibition
des RTKs
Lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoactiviteacute des RTKs nrsquoest pas ducirc aux composants individuels des
extraits en effet V myrtillus contient un ensemble de composeacutes polypheacutenoliques ainsi que
des constituants inconnus Les cateacutechines flavonols et procyanidines preacutesents dans les
extraits en quantiteacutes plus basses que les anthocyanosides ont montreacute dans drsquoautres eacutetudes des
effets inhibiteurs des RTKs Mais la basse biodisponibiliteacute de ces extraits doit ecirctre prise en
compte pour lrsquoeacutevaluation de leurs effets physiologiques
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision
Les extraits de V myrtillus ont eacuteteacute utiliseacutes depuis 1964 dans les affections ophtalmiques et
dans les deacutesordres de la microcirculation Des eacutetudes anciennes ont rapporteacute les effets de
preacuteparations agrave base du fruit de V myrtillus dans lrsquoacuiteacute visuelle en lumiegravere sombre dans la
vision nocturne chez les sujets ne preacutesentant pas de troubles de la vision chez les patients
avec un problegraveme significatif de vision en lumiegravere vive les patients atteints de DMLA de
reacutetinopathie diabeacutetique drsquoinflammation reacutetinienne de reacutetinite pigmentaire (V myrtillus
associeacute au β-carotegravene) et enfin chez les patients avec myopie progressive Drsquoautres eacutetudes ont
rechercheacute les effets de V myrtillus sur la formation de la cataracte chez des patients souffrant
de cataracte corticale seacutenile (extrait pris en association avec la vitamine E) Cependant
lrsquohypothegravese drsquoun effet de V myrtillus sur la vision est tregraves controverseacutee certaines eacutetudes
rapportent des reacutesultats neacutegatifs (35)
Durant la seconde guerre mondiale les pilotes de la British Royal Air force avaient deacutejagrave
rapporteacute une ameacutelioration de lrsquoacuiteacute visuelle apregraves consommation de confitures de myrtilles
68
Cependant durant cette mecircme peacuteriode la technologie du radar a eacuteteacute introduite en Grande-
Bretagne pour la deacutefense aeacuterienne et des eacutetudes ulteacuterieures nrsquoont pas supporteacute lrsquohypothegravese
drsquoune ameacutelioration de la vision nocturne et de la sensibiliteacute au contraste nocturne par la
suppleacutementation en V myrtillus Le systegraveme de radar et non V myrtillus pourrait alors ecirctre la
cause du succegraves de la Royal Air Force (66)
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale
Des eacutetudes ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoextraits de Vaccinum myrtillus seuls ou associeacutes agrave du
β-carotegravene et de la vitamine E (chez des patients avec ou sans deacutesordre oculaire) agrave ameacuteliorer
la vision nocturne agrave induire une adaptation agrave lrsquoobscuriteacute et une restauration de lrsquoacuiteacute
visuelle (suite agrave une exposition agrave une lumiegravere vive ou un flash) plus rapides (42) Drsquoautres
eacutetudes ont montreacute lrsquoefficaciteacute des extraits anthocyanosidiques de myrtille agrave ameacuteliorer la vision
nocturne et lrsquoajustement agrave lrsquoobscuriteacute chez des controcircleurs aeacuteriens des pilotes drsquoavion des
conducteurs de voiture et de camion (43)
Agrave lrsquoopposeacute drsquoautres eacutetudes ne precirctent pas agrave la myrtille des proprieacuteteacutes sur la vision Crsquoest le
cas notamment de lrsquoeacutetude en 2000 de Muth et coll (46) ils ont rechercheacute les effets de V
myrtillus sur lrsquoacuiteacute visuelle nocturne et la sensibiliteacute au contraste nocturne Leur eacutetude est
randomiseacutee double-aveugle et controcircleacutee par placebo Les sujets inclus dans lrsquoeacutetude sont des
hommes jeunes preacutesentant une bonne vision Un groupe reccediloit 160 mg drsquoextrait de V
myrtillus et lrsquoautre groupe un placebo trois fois par jour pendant 21 jours Apregraves un mois
sans traitement le test reprend pendant 3 semaines en inversant les groupes (les sujets ayant
eu le placebo ont maintenant les capsules de V myrtillus et vice versa) Les reacutesultats montrent
qursquoil nrsquoy a pas de diffeacuterences entre les mesures de la moyenne de lrsquoacuiteacute visuelle nocturne
chez les sujets soumis au traitement par V myrtillus et ceux soumis au placebo De mecircme
lrsquoexamen de la derniegravere acuiteacute visuelle durant le traitement actif et celui durant le placebo ne
reacutevegravelent pas de diffeacuterences dans lrsquoacuiteacute visuelle nocturne Le mecircme reacutesultat neacutegatif est
constateacute pour la sensibiliteacute au contraste nocturne
En conclusion cette eacutetude nrsquoapporte pas de reacutesultats positifs sur lrsquoeffet de V myrtillus sur les
deux paramegravetres mesureacutes mecircme si lrsquoextrait est pris agrave haute dose et pendant une dureacutee
significative
Une critique de lrsquoeacutetude de Muth et coll (46) pourrait ecirctre faite sur la population limiteacutee
utiliseacutee peu de sujets ont eacuteteacute inclus dans lrsquoeacutetude et ceux-ci eacutetaient tous des hommes jeunes
avec une bonne vision Il est vrai que deux de ces sujets avaient une moyenne drsquoacuiteacute
69
visuelle nocturne et une sensibiliteacute au contraste nocturne en dessous des autres sujets or
mecircme chez ces sujets aucune diffeacuterence de mesure nrsquoa eacuteteacute enregistreacutee
Cette eacutetude pose de nouveau des doutes sur lrsquoutilisation de la myrtille dans des formes
couramment disponibles et aux doses recommandeacutees comme suppleacutementation efficace pour
lrsquoameacutelioration de la vision nocturne dans une cateacutegorie de sujets preacutesentant une bonne vision
et essentiellement une vision nocturne normale
2 Eacutetude chez des sujets myopes
Une eacutetude a montreacute qursquoune association drsquoanthocyanosides de V myrtillus avec vitamine E et
β-carotegravene ameacuteliorait le champ visuel de patients atteints de myopie aussi bien lors drsquoun
traitement court que long De mecircme il a eacuteteacute deacutemontreacute une efficaciteacute de lrsquoassociation
drsquoanthocyanosides de myrtille avec le reacutetinol sur la sensibiliteacute de la reacutetine de patients myopes
dans 32 des 42 yeux examineacutes (43)
En 2005 Lee et coll (35) ont mis au point une eacutetude randomiseacutee double-aveugle controcircleacutee
par placebo impliquant 60 sujets avec astheacutenopie et myopie basse agrave modeacutereacutee avec erreurs
reacutefractaires entre -1 et -8 dioptres au niveau des deux yeux Lrsquoobjectif de lrsquoeacutetude est de
deacuteterminer lrsquoeffet de lrsquoadministration drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides purifieacutes agrave hautes doses
de V myrtillus sur la fonction visuelle nocturne et les symptocircmes cliniques chez ces sujets de
mecircme acircge et de sensibiliteacute au contraste similaire Ainsi 30 sujets ont reccedilu des comprimeacutes de
100 mg de traitement contenant 85 drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides et les 30 autres sujets
des comprimeacutes placebo deux fois par jours pendant 4 semaines La fonction visuelle nocturne
est eacutevalueacutee par le test de sensibiliteacute au contraste (test objectif) et les symptocircmes cliniques par
un questionnaire rempli par les sujets (test subjectif) avant et apregraves le traitement Ainsi les
reacutesultats baseacutes sur lrsquoanalyse du questionnaire montrent qursquoagrave la suite des 4 semaines de
traitement les sujets traiteacutes par anthocyanosides ont preacutesenteacute une ameacutelioration des symptocircmes
(meilleurs que le groupe placebo) De plus le groupe anthocyanoside a montreacute une sensibiliteacute
au contraste ameacutelioreacutee agrave chaque cycle par degreacute alors qursquoaucune ameacutelioration nrsquoa eacuteteacute
constateacutee dans le groupe placebo
Des eacutetudes anciennes ont reporteacutes une ameacutelioration de la fonction visuelle nocturne chez des
sujets normaux prenant des anthocyanosides alors que des eacutetudes plus reacutecentes nrsquoont montreacute
aucun effet sur la vision nocturne par administration orale simple ou multiple drsquooligomegraveres
drsquoanthocyanosides (35) Ces discordances de reacutesultats pourraient ecirctre causeacutees par des
diffeacuterences dans le choix des sujets les meacutethodes drsquoeacutevaluation de la vision nocturne ainsi que
la concentration et la dose drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides utiliseacutees Alors que des eacutetudes ne
70
montrent pas drsquoeffets des oligomegraveres drsquoanthocyanosides chez les sujets normaux drsquoautres
eacutetudes deacutemontrent lrsquoefficaciteacute de ceux-ci chez les sujets avec myopie ou heacutemeacuteralopie
(diminution anormale de la vision dans lrsquoobscuriteacute)
Dans lrsquoeacutetude de Lee et coll (35) les conditions sont diffeacuterentes de celles que lrsquoon peut trouver
dans drsquoautres eacutetudes qui ont pu ecirctre faites en termes de dose de dureacutee et de type de sujets En
effet une haute dose drsquooligomegraveres anthocyanosides (concentreacutes agrave 85 gracircce au processus de
fermentation speacutecifique) est administreacutee pendant une plus longue peacuteriode compareacutee aux autres
eacutetudes De plus les sujets utiliseacutes englobent des personnes avec myopie astheacutenopie et une
sensitiviteacute au contraste meacutesopique diminueacutee alors que drsquoautres eacutetudes utilisent des sujets
normaux
En conclusion cette eacutetude montre que les anthocyanosides peuvent ameacuteliorer les symptocircmes
subjectifs et les reacutesultats de la moyenne de la sensibiliteacute au contraste chez des sujets
preacutesentant myopie et astheacutenopie Mais drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour rechercher la
dose optimale de V myrtillus la dureacutee de traitement neacutecessaire la dureacutee de lrsquoeffet apregraves
lrsquoarrecirct du traitement et lrsquoapplication de ce traitement en clinique chez des patients avec des
maladies oculaires comme la reacutetinite pigmentaire le glaucome et la reacutetinopathie diabeacutetique
connus pour reacuteduire la vision nocturne
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004)
Canter et coll (13) ont proceacutedeacute agrave une meacuteta-analyse des eacutetudes faites concernant lrsquoeffet des
anthocyanosides de V myrtillus sur la vision nocturne
Des 30 eacutetudes trouveacutees par les auteurs avec des reacutesultats se reacutefeacuterant agrave la vision dans des
conditions de lumiegravere reacuteduites 12 eacutetudes sont des eacutetudes controcircleacutees par placebo Les 4 eacutetudes
les plus reacutecentes sont des eacutetudes controcircleacutees randomiseacutees et rapportent des reacutesultats neacutegatifs
La 5egraveme
eacutetude controcircleacutee randomiseacutee et les 7 eacutetudes controcircleacutees non randomiseacutees rapportent des
reacutesultats positifs dans lrsquoameacutelioration de la vision en lumiegravere reacuteduite Les reacutesultats neacutegatifs sont
associeacutes avec une plus grande rigueur dans la meacutethodologie mais aussi des doses plus basses
et des extraits provenant de sources geacuteographiques distincts pouvant diffeacuterer dans la
composition en anthocyanosides De plus dans 11 des 12 eacutetudes les sujets utiliseacutes sont des
sujets en bonne santeacute avec une vision moyenne normale voire au-dessus de la normale Ainsi
les eacutetudes cliniques les plus rigoureuses ne supportent pas lrsquohypothegravese drsquoune ameacutelioration de
la vision nocturne chez les sujets en bonne santeacute par les anthocyanosides de V myrtillus
Cependant lrsquoassociation entre rigueur meacutethodologique publication reacutecente reacutesultat neacutegatif
est confondu avec plusieurs facteurs de confusion qui peuvent biaiser les eacutetudes comme la
71
dose les diffeacuterentes variations geacuteographiques modifiant la composition des extraits et le type
de sujets inclus dans les eacutetudes De plus les meacutethodes mises en place pour obtenir et
interpreacuteter les eacutelectroreacutetinogrammes employeacutees dans les eacutetudes plus anciennes diffegraverent des
proceacutedures standardiseacutees utiliseacutees maintenant
Lorsque lrsquoanalyse des facteurs de confusion est faite une association entre les reacutesultats
positifs et lrsquoutilisation de plus hautes doses en anthocyanosides de V myrtillus est mise en
eacutevidence De plus la composition phytochimique des extraits diffegraverent selon la geacuteographie
des plantes de Myrtillier Les reacutesultats positifs sont souvent associeacutes avec des eacutetudes utilisant
des extraits provenant drsquoItalie ou de France La quantiteacute des anthocyanosides de la myrtille
(constituants les plus actifs) varient en fonction du cycle de vie des plantes en reacuteponse agrave des
facteurs de stress et des signaux de lrsquoenvironnement Ainsi avec le mucircrissement la quantiteacute
des anthocyanosides augmente alors que celle des proanthocyanidines diminue Crsquoest
pourquoi agrave cause des diffeacuterences geacuteographiques une standardisation drsquoune quantiteacute en
pourcentage fixe drsquoextrait est une proceacutedure insuffisante pour garantir une composition
identique et une activiteacute pharmacologique Lors des eacutetudes drsquoautres composants peuvent ecirctre
ajouteacutes avec les anthocyanosides de mytille comme le β-carotegravene (un deacuteficit est connu pour
ecirctre lieacute agrave une alteacuteration de la vision nocturne) Lrsquoeffet confondant du β-carotegravene dans
certaines eacutetudes ne peut ecirctre correctement eacutevalueacute sans connaitre le statut nutritionnel des
sujets Dans cette meacuteta-analyse 5 eacutetudes utilisent dans le traitement actif du β-carotegravene Une
eacutetude ne montre pas de diffeacuterences dans lrsquointerpreacutetation de lrsquoeacutelectroreacutetinogramme des sujets
traiteacutes avec lrsquoextrait de V myrtillus avec ou sans β-carotegravene et 3 eacutetudes reacutealiseacutees dans les
anneacutees 1940 montrent que le β-carotegravene nrsquoa pas drsquoeffet sur lrsquoadaptation nocturne quand il est
administreacute seul
En conclusion des eacutetudes rigoureuses sur les effets des extraits de V myrtillus vis-agrave-vis de
sujets souffrant drsquoune alteacuteration de la vision nocturne due agrave des conditions pathologiques
oculaires sont neacutecessaires Cependant la preacutesence drsquoeacutetude plus faibles dans la meacutethodologie
le teacutemoignage des eacutetudes animales les eacutetudes des anthocyanosides syntheacutetiques (la cyanidine
syntheacutetique utiliseacutee dans des eacutetudes controcircleacutees par placebo dans les anneacutees 1970 et 1980 a
montreacute une ameacutelioration de la vision nocturne chez des sujets en bonne santeacute et souffrant
drsquoune varieacuteteacute de deacutesordres ophtalmologiques) une eacutetude controcircleacutee randomiseacutee de Ribes
nigrum montrant un effet positif sur le seuil drsquoadaptation nocturne pourraient justifier des
eacutetudes compleacutementaires sur les anthocyanosides de myrtille chez des sujets preacutesentant une
alteacuteration de la vision nocturne
72
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique
La reacutetinopathie diabeacutetique est une complication agrave long terme du diabegravete qui se traduit par une
deacutegeacuteneacuterescence des capillaires irrigant la reacutetine La maladie se manifeste par des
microaneacutevrysmes qui sont de petites dilatations de la paroi des capillaires (preacutesence de petits
points rouges drsquoheacutemorragies et drsquoapparition drsquoexsudatshellip) Dans des formes eacutevolueacutees une
baisse de la vision peut survenir (1) La neacuteovascularisation est la principale modification
rencontreacutee dans la reacutetinopathie diabeacutetique reacutesultant drsquoune interaction avec des cytokines et
des facteurs de croissance pouvant ecirctre responsables de lrsquoangiogenegravese comme dans le cancer
Or VEGF joue un rocircle dans la neacuteovascularisation reacutetinienne mecircme si son rocircle exact dans la
survenue preacutecoce de la pathologie nrsquoest pas encore entiegraverement compris (16)
En 2005 une eacutetude meneacutee par Chung et coll (16) a deacutemontreacute la capaciteacute de Vaccinium
myrtilus a diminueacute le glucose sanguin plasmatique et agrave reacuteduire le pourcentage de surface de
vascularisation reacutetinien chez des rats diabeacutetiques compliqueacute drsquoune reacutetinopathie diabeacutetique
ces pathologies eacutetant induites par la streptozocine Cependant pas drsquoeffet est constateacute sur le
VEGF (16)
Une eacutetude clinique a deacutemontreacute lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides de V myrtillus (administration
orale de 480 mgjour pendant 180 jours) sur les manifestations de la reacutetinopathie diabeacutetique
notamment la reacuteduction voire la disparition des heacutemorragies reacutetiniennes chez des patients
diabeacutetiques (diabegravete type 2) et souffrant drsquoune reacutetinopathie non prolifeacuterative (43)
Lrsquoameacutelioration significative des examens ophtalmoscopiques et angiographiques apregraves
traitement avec 320 mg de Myrtocyanreg
pendant 30 jours a eacuteteacute montreacutee chez 77 agrave 92 des 40
patients inclus dans lrsquoeacutetude et souffrant de diabegravete et de reacutetinopathie hypertensive (43)
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes
Lrsquoeacutepitheacutelium de la surface oculaire joue le rocircle fondamental de barriegravere empecircchant lrsquoentreacutee de
substances nocives dans la corneacutee et maintenant lrsquointeacutegriteacute de la surface oculaire La
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes permet la reacutegeacuteneacuteration du tissu pour
maintenir le rocircle protecteur de la corneacutee et la cicatrisation Crsquoest pourquoi le cycle cellulaire
est tregraves important Au niveau de ces cellules des glycosaminoglycanes (GAGs glucides de
lrsquoorganisme localiseacutes dans le mucus les seacutecreacutetions digestives et le tissu conjonctif) sulfateacutes
sont produits par les trois types de cellules de la corneacutee (cellules eacutepitheacuteliales endotheacuteliales et
les fibroblastes) Les GAGs de lrsquoeacutepitheacutelium corneacuteen peuvent moduler le comportement
cellulaire comme lrsquoadheacutesion la migrationhellip et jouent donc un rocircle important pour la
73
cicatrisation corneacuteenne Lrsquoun des GAGs est lrsquoacide hyaluronique substance de la matrice
extra-cellulaire jouant plusieurs rocircles notamment dans la lubrification lrsquohydratation de la
matrice corneacuteenne et lrsquohomeacuteostasie Il pourrait aussi ameacuteliorer la santeacute de la surface oculaire
et reacuteduire la pression intraoculaire lors de la pose chirurgicale drsquoun implant oculaire (55)
Song et coll (55) ont reacutecemment eacutetudieacute les effets drsquoun extrait de V myrtillus sur le cycle la
croissance cellulaire lrsquoexpression des GAGs et de lrsquoacide hyaluronique dans un modegravele in
vitro de cellules eacutepitheacuteliales limbales corneacuteennes humaines Les reacutesultats deacutemontrent
lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille et ses anthocyanosides agrave promouvoir la division et la
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteenne sans aucune toxiciteacute cellulaire et agrave
augmenter la quantiteacute totale de GAGs sans modifications significatives de lrsquoacide
hyaluronique Lrsquoextrait de myrtille peut alors ecirctre beacuteneacutefique pour la reacutegeacuteneacuteration
physiologique et lrsquohomeacuteostasie
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete
Helmstaumldter (26) a reacutepertorieacute les substances antidiabeacutetiques utiliseacutees avant la deacutecouverte de
lrsquoinsuline Parmi toutes les plantes V myrtillus est celle la plus freacutequemment retrouveacutee dans
les preacuteparations antidiabeacutetiques commerciales au XXegraveme
siegravecle Les feuilles pourraient ecirctre la
partie de plante la plus utiliseacutee Une preacuteparation tregraves commune eacutetait le laquo Pilulae Myrtilli
Jasper raquo (1912) chacun contenant 012 grammes drsquoextraits de feuilles mais cette preacuteparation
nrsquoeacutetait mentionneacutee qursquooccasionnellement dans les traiteacutes scientifiques et seulement quelques
recherches ont eacuteteacute retrouveacutees
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine
Petlevski et coll (48) ont eacutetudieacute les effets drsquoune preacuteparation agrave base de plantes antidiabeacutetiques
comprenant la feuille de V myrtillus et drsquoautres plantes breveteacutee sous le numeacutero No P-
9801091 disponible sur le marcheacute Croate Deux extraits un extrait eacutethanolique (extrait 1) et
non eacutethanolique (extrait 2) sont administreacutes agrave des souris (NOD) non obegraveses rendues
diabeacutetiques par lrsquoalloxane (deacuteriveacute pyrimidique produisant chez lrsquoanimal une neacutecrose des
cellules β des icirclots de Langerhans)
Lrsquoeacutetude deacutemontre que les extraits 1 et 2 diminuent le glucose sanguin de 10 et 20
respectivement de la valeur initiale des souris NOD controcircles (sans traitement) Lrsquoeffet de
lrsquoextrait 2 est donc beaucoup plus marqueacute il est compareacute agrave un antidiabeacutetique de reacutefeacuterence
(acarbose) Les reacutesultats montrent que lrsquoextrait diminue significativement le niveau de glucose
74
sanguin alors que la diminution par lrsquoacarbose nrsquoest pas significative La mecircme chose est
observeacutee pour le niveau de fructosamine dans le sang
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques
Le diabegravete est une maladie souvent associeacutee agrave des deacutesordres meacutetaboliques comme une
hypertriglyceacuterideacutemie Lrsquoinsuline joue un rocircle essentiel dans le meacutetabolisme des lipoproteacuteines
Chez la plupart des patients atteints de diabegravete type 1 (insulino-deacutependant)
lrsquohypertriglyceacuterideacutemie est induit par une moindre activiteacute de la lipase lipoproteacuteique (enzyme
permettant lrsquohydrolyse des triglyceacuterides des lipoproteacuteines plasmatiques) deacutependante de
lrsquoinsuline
Une eacutetude meneacutee en 1996 par Cignarella et coll (17) a montreacute que lrsquoadministration orale
(pendant 4 jours) drsquoun extrait hydro-alcoolique seacutecheacute de feuilles de V myrtillus agrave des rats
rendus diabeacutetiques par streptozocine pouvait diminuer le niveau de glucose plasmatique par
environ 26 et le niveau de triglyceacuterides plasmatiques par 39 Ainsi lrsquoextrait de myrtille
expose une activiteacute hypolipideacutemiante dose-deacutependante chez les rats en stimulant le
catabolisme des lipoproteacuteines riches en triglyceacuterides probablement sous des conditions en
deacuteficits drsquoinsuline Par contre agrave lrsquoopposeacute du ciprofibrate (une moleacutecule de reacutefeacuterence dans le
traitement de lrsquohypertriglyceacuterideacutemie) lrsquoextrait de V myrtillus ne preacutevient pas la formation de
thrombus veineux chez ces rats diabeacutetiques
Ces eacutetudes in vivo ont montreacute lrsquoaction hypoglyceacutemiante de V myrtillus une fois les
constituants isoleacutes cette plante agrave usage traditionnel pourrait eacutegalement attirer lrsquoattention sur le
traitement de certains deacutesordres du meacutetabolisme lipidique
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique
Borrelli et coll (10) ont listeacute les agents phytogeacuteniques utiliseacutes comme remegravedes des ulcegraveres
gastriques Des reacutesultats ont deacutemontreacute lrsquoaction significative de V myrtillus dans la preacutevention
et le traitement des ulcegraveres Certaines eacutetudes ont montreacute ses effets protecteurs dans des ulcegraveres
induits par ligature du pylore par la reacuteserpine ou la pheacutenylbutazone ougrave le traitement avec les
anthocyanosides de V myrtillus a eacuteteacute donneacute avant ou pendant la formation de lrsquoulcegravere La
myrtille exerce un effet anti-ulcegravere en partie par une augmentation du mucus dans la paroi de
lrsquoestomac (ameacuteliorant lrsquoefficaciteacute de la barriegravere formeacutee par ce mucus) et peut influencer la
biosynthegravese des mucopolysaccharides
75
Magistretti et coll (37) montrent qursquoun extrait drsquoanthocyanosides de Vaccinium myrtillus
possegravede une action anti-ulcegravere inteacuteressante dans divers modegraveles expeacuterimentaux De ces
reacutesultats les auteurs ont voulu trouver les composants de Vaccinium myrtillus responsables de
cette action Or cette plante comme nous le savons est riche en anthocyanosides et
anthocyanidines (aglycones respectifs) Cela explique pourquoi les auteurs ont eacutetudieacute les
effets sur lrsquoulcegravere aigu et chronique chez des rats drsquoune anthocyanidine la cyanidine ou 3 5
7-trihydroxy-2-(34-dihydroxypheacutenyl)-1-benzopyrylium chloride (IdB 1027) Les reacutesultats
montrent les effets drsquoIdB 1027 suivants
- reacuteduction de lrsquoulcegravere gastrique induit par la ligature du pylore de faccedilon non dose-
deacutependante
- inhibition de lrsquoulcegravere de stress
- protection de lrsquoestomac de lrsquoulcegravere induit par pheacutenylbutazone
- reacuteduction de la seacuteveacuteriteacute de lrsquoulcegravere induit par indomeacutetacine de faccedilon dose-
deacutependante
- inhibe significativement lrsquoulceacuteration gastrique induit par reacuteserpine
- protection significative mais pas dose-deacutependante contre les leacutesions induites par
lrsquoeacutethanol
- inhibe significativement et de faccedilon dose-deacutependante lrsquoulcegravere induit par histamine
- et reacuteduction significative les leacutesions induites par acide aceacutetique
En conclusion lrsquoIdB 1027 est capable de reacuteduire ou mecircme drsquoinhiber les ulcegraveres induits par de
nombreux facteurs comme la ligature du pylore les AINS Les meacutecanismes par lesquels un
meacutedicament augmente les deacutefenses de la muqueuse gastrique sont varieacutes cela peut ecirctre une
influence sur la seacutecreacutetion et les proprieacuteteacutes physicochimiques du mucus ou une stimulation de
la reacutegeacuteneacuteration cellulaire une influence sur la microcirculation de la muqueuse la seacutecreacutetion
de bicarbonate la protection contre les dommages induits par les radicaux libres ou
lrsquoaugmentation de lrsquoAMP cyclique Ainsi lrsquoIdB 1027 peut agir par une combinaison de
certains de ces meacutecanismes comme une augmentation de la seacutecreacutetion de mucus (sans effet
anti-seacutecreacutetoire gastrique) dans des conditions physiologiques normales et dans des conditions
de deacutefense alteacutereacutees la stimulation de la reacutegeacuteneacuteration cellulaire montreacutee par son activiteacute contre
lrsquoulcegravere induit par acide aceacutetique lrsquoameacutelioration de la microcirculation de la muqueuse
montreacutee par son activiteacute contre lrsquoulcegravere geacuteneacutereacute par lrsquohistamine De plus lrsquoIdB 1027 est un
antioxydant et les anthocyanidines sont des inhibiteurs efficaces de lrsquoAMPc-
phosphodiesteacuterase dans des tissus varieacutes ce qui pourrait contribuer agrave lrsquoactiviteacute
pharmacologique observeacute
76
En conclusion les effets deacutemontreacutes dans les modegraveles drsquoanimaux lrsquoabsence de toxiciteacute et
lrsquoexcellente toleacuterance font de cette moleacutecule un bon candidat dans des eacutetudes cliniques
comme agent antiulcegravereux
2 Action sur Helicobacter pylori
Le traitement contre Helicobacter pylori est la plupart du temps constitueacute de deux
antibiotiques et drsquoun inhibiteur de la pompe agrave protons comme lrsquoomeacuteprazole par exemple Or
le problegraveme qui se pose est lrsquoapparition drsquoune reacutesistance aux antibiotiques De plus la bacteacuterie
peut intervenir dans la production des radicaux libres de lrsquooxygegravene augmentant davantage le
stress oxydant et ses dommages au niveau gastrique Une augmentation de la peroxydation
lipidique et un dommage agrave lrsquoADN au niveau des tissus gastriques sont alors observeacutes Par
conseacutequent des antioxydants naturels comme les anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
pourraient servir comme outil theacuterapeutique pour reacuteduire le stress oxydant induit par
Helicobacter pylori (15)
Chatterjee et coll (15) ont eacutetudieacute les effets de diffeacuterents extraits de baies sur Helicobacter
pylori avec ou sans clarithromycine in vitro ainsi que la sensibiliteacute de la bacteacuterie agrave la
clarithromycine Plusieurs baies sont eacutetudieacutees comme la myrtille sauvage (Vaccinium
myrtillus) lrsquoairelle la canneberge la fraise la framboise le sureau et Optiberryreg (un
meacutelange de ces six baies) Cette eacutetude a montreacute que tous les extraits aux concentrations
testeacutees inhibent la croissance de maniegravere dose-deacutependante de H pylori avec une efficaciteacute
supeacuterieure pour Optiberryreg Crsquoest la premiegravere eacutetude montrant lrsquoinhibition de H pylori par des
extraits de baies et notamment V myrtillus lequel preacutesente une meilleure activiteacute que la
fraise la framboise et la canneberge en particulier pour des basses concentrations Enfin un
effet inhibiteur suppleacutementaire est obtenu avec lrsquoajout de la clarithromycine associeacutee aux
extraits de baies agrave toutes les concentrations testeacutees
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus
1 Action antibacteacuterienne
Une eacutetude meneacutee en 2005 par Puupponen-Pimiauml et coll (51) a montreacute lrsquoactiviteacute
antibacteacuterienne de plusieurs baies nordiques incluant V myrtillus Les reacutesultats rapporteacutes
dans cette thegravese ne se reacutefegraverent qursquoagrave la myrtille et sont reacutesumeacutes dans le tableau suivant
77
Listeria
monocytogenes
E-991205
Salmonella
enterica sv
thyphimurium
E-981151
Staphylococcus
aureus E-70045
Lactobacillus
rhamnosus
E-96666
Temps
drsquoincubation 12h 24h 12h 24h 12h 24h 12h 24h
2 mgmL-1
- - + - ++ ++ - -
10 mgmL-1
- - +++ + +++++ +++++ - -
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
(Leacutegende C concentration de la baie de myrtille - pas drsquoeffets inhibiteurs + nombre de
bacteacuteries viables diffegraverent de 10-5 times 101 par rapport au controcircle ++ nombre de bacteacuteries viables
diffegraverent de 5 times 101-5 times 102 par rapport au controcircle +++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 102-5 times 103 par rapport au controcircle ++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 103-5 times 104
par rapport au controcircle +++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de plus 5 times 104 par rapport au
controcircle)
Les reacutesultats deacutemontrent lrsquoactiviteacute antimicrobienne de la myrtille lyophiliseacutee sur les bacteacuteries
Salmonella et Staphylococcus augmente de maniegravere concentration-deacutependante Par contre la
myrtille nrsquoa aucune activiteacute vis-agrave-vis de Listeria et Lactobacillus
Les composeacutes pheacutenoliques ne sont responsables que partiellement de lrsquoinhibition de la
croissance des bacteacuteries Salmonella les effets antimicrobiens eacutetant probablement deacutetenus par
drsquoautres composeacutes comme les acides organiques
Les baies et notamment V myrtillus pourraient ecirctre utiliseacutees dans les aliments fonctionnels et
dans lrsquoindustrie pharmaceutique en tant qursquoagents antimicrobiens
Ainsi la myrtille utiliseacutee traditionnellement est preacutesente dans de nombreuses eacutetudes qui ont
deacutemontreacute ses multiples actions dans des domaines meacutedicaux varieacutes et des pathologies diverses
comme lrsquoinsuffisance veineuse lrsquoatheacuteroscleacuterose le cancer le diabegravete les deacutesordres
oculaireshellip Par ailleurs son action antioxydante attire lrsquoattention des scientifiques et il serait
favorable drsquoentreprendre des eacutetudes cliniques
VIII Toxicologie
1 Effets indeacutesirables
Dans les eacutetudes cliniques sur les extraits de V myrtillus reacutepertorieacutees par Marazzoni et coll en
1996 (43) aucun effet indeacutesirable nrsquoa eacuteteacute observeacute mecircme lors drsquoeacutetudes ougrave le traitement aux
78
extraits de V myrtillus est pris sur une longue peacuteriode Cependant la plupart des eacutetudes
nrsquoincluaient qursquoun petit nombre de patients Une eacutetude de surveillance post-marketing a inclus
2295 sujets prenant 160 mg de Myrtocyanreg
deux fois par jour pendant 1-2 mois pour des
pathologies diverses (insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs fragiliteacute capillaire
modifications de la microcirculation reacutetinienne ou heacutemorroiumldes) Cette eacutetude a montreacute que
seuls 94 sujets ont reporteacute des effets indeacutesirables surtout lieacutes agrave la peau au tractus gastro-
intestinal et au systegraveme nerveux Une eacutetude non-controcircleacutee incluant des femmes enceintes avec
insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs et en crise heacutemorroiumldaire montre qursquoune
administration drsquoun extrait de myrtille (80 ou 160 mg) deux ou trois par jour pendant trois
mois nrsquoentraicircnait pas drsquoeffets indeacutesirables Mais en preacutesence de peu drsquoeacutetudes toxicologiques et
drsquoune seacutecuriteacute de la myrtille non eacutetablie lrsquoutilisation de la myrtille chez la femme enceinte et
allaitante devrait ecirctre proscrite
2 Doses leacutetales 50 (DL50)
Les donneacutees toxicologiques indiquent une DL50 pour le Myrtocyanreg drsquoenviron 2 gkg chez
les souris et les rats Chez le chien des doses uniques de 3 gkg nrsquoentraicircnent pas drsquoeffets
indeacutesirables si ce nrsquoest une coloration plus fonceacutee des urines et fegraveces Une administration
orale quotidienne drsquoextrait de V myrtillus agrave des doses de 125 agrave 500 mgkg et 80 agrave 320 mgk
respectivement agrave des rats et des chiens pendant 6 mois nrsquoentrainent ni mortaliteacute ni toxiciteacute
Les eacutetudes pharmacocineacutetiques reacutealiseacutees chez des rats ont deacutemontreacute une eacutelimination rapide
des anthocyanosides de myrtille dans les deux heures suivant une administration orale (5) Il
est eacutetablit dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) que si les parties de
mytille utiliseacutees pour les phytomeacutedicaments est une poudre de fruit frais ou sec ou de feuille
le dossier laquo abreacutegeacute raquo de lrsquoAMM doit preacutesenter une eacutetude toxicologique alleacutegeacutee celle-ci
nrsquoeacutetant pas indispensable pour certaines formes galeacuteniques agrave base de myrtille (tisane extrait
aqueux teinture extrait hydro-alcoolique) La monographie de la Commission E allemande
preacutecise que si la baie de myrtille est atoxique la feuille quant agrave elle peut induire des
intoxications chroniques en cas de doses eacuteleveacutees ou drsquousage prolongeacute Les premiers
symptocircmes chez lrsquoanimal se traduisent par une aneacutemie une cachexie un ictegravere un eacutetat
drsquoexcitation aiguumle et des perturbations du tonus pouvant agrave terme ecirctre fatale apregraves une
administration chronique de 15 gkgjour Ces symptocircmes ressembleraient agrave ceux preacutesents
dans lrsquointoxication par lrsquohydroquinone ce dipheacutenol nrsquoest pourtant pas preacutesent dans la feuille
de myrtille La Commission E par prudence ne justifie pas lrsquoutilisation de la feuille dans un
but theacuterapeutique face agrave ces risques La Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament quant agrave
79
elle ne demande un essai toxicologique que pour la poudre de feuille mais pas pour les
extraits (quelque soit le titre) (11) De ce fait drsquoautres eacutetudes toxicologiques seraient
neacutecessaires
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus
Mecircme si aucune contre-indication nrsquoest mentionneacutee dans la litteacuterature il convient toutefois de
consideacuterer un risque potentiel drsquointeraction entre les preacuteparations agrave base de myrtille et drsquoautres
produits meacutedicinaux ayant des effets similaires ou opposeacutes agrave ceux de la myrtille Des eacutetudes
preacutecliniques par exemple ont montreacute que les extraits de V myrtillus avaient un effet anti-
agreacutegant et pouvaient augmenter le temps de saignement (5) Une surveillance devrait ecirctre
apporteacutee lors drsquoassociation entre les speacutecialiteacutes agrave base de myrtille et les meacutedicaments
antiagreacutegants ou anticoagulants mecircme si aucune interaction nrsquoa eacuteteacute rapporteacutee Enfin comme
nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment lrsquoutilisation de speacutecialiteacutes agrave base de myrtille est deacuteconseilleacutee
chez la femme enceinte ou allaitante (5)
80
QUATRIEME PARTIE
UTILISATIONS DE VACCINIUM
MYRTILLUS L
81
I Utilisations alimentaires de Vaccinium myrtillus
La myrtille est avant tout un fruit tregraves appreacutecieacute par les consommateurs pour ses proprieacuteteacutes
gustatives et sa valeur nutritive
1 Utilisations culinaires
Les promeneurs friands des baies de myrtille les consomment sur place ou chez eux Il est
important de laver les baies avant leur consommation car lrsquohomme risque drsquoecirctre toucheacute par
lrsquoeacutechinococcose multiloculaire Cette maladie parasitaire est une cestodose qui seacutevit dans
lrsquoheacutemisphegravere Nord le Massif central lrsquoEst de la France et la Suisse Le renard et autres
canideacutes (chiens) se contaminent eux-mecircmes en mangeant des rongeurs sauvages parasiteacutes
(campagnoleshellip) ils deacuteposent alors des selles contenant des œufs de teacutenia sur le sol
lrsquohomme srsquoinfeste en mangeant les myrtilles proches du sol La maladie se caracteacuterise par le
deacuteveloppement de la larve de teacutenia dans le foie y formant de nombreux alveacuteoles Les
symptocircmes principaux sont douleur sourde amaigrissement et ictegravere (1)
Utiliseacutees en cuisine les myrtilles font lrsquoobjet de nombreuses recettes culinaires Elles sont
utiliseacutees pour accommoder les viandes leur apportant une saveur aciduleacutee Des charcutiers les
ajoutent mecircme agrave leurs saucissons pour les rendre plus moelleux
Les myrtilles sont souvent retrouveacutees dans de nombreuses pacirctisseries (sableacutes citronneacutes cakes
brioches tartes tartelettes puddings vacherins souffleacutes et glaceacutes coulis de fruits rouges
sorbets glaceshellip)
Les baies peuvent aussi ecirctre utiliseacutees pour la preacuteparation de confiture geleacutee et compote
Certains agriculteurs-reacutecolteurs vendent les myrtilles en confiture sur les marcheacutes locaux
Enfin on retrouve des boissons agrave base de myrtilles (jus de fruit nectar sirop liqueur vin et
vinaigre) (22)
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire
Les proprieacuteteacutes tinctoriales des anthocyanes de myrtille sont utiliseacutees dans lrsquoindustrie
alimentaire comme colorant sous la codification E 163 Gracircce agrave leur tregraves faible toxiciteacute il nrsquoy
aucune quantiteacute maximale speacutecifieacutee (quantum satis) ni dose journaliegravere acceptable Malgreacute
leurs proprieacuteteacutes tinctoriales les anthocyanes sont peu utiliseacutees dans lrsquoindustrie alimentaire agrave
cause de leur instabiliteacute (perte ou changement de couleur) en preacutesence de certains facteurs
physico-chimiques de lrsquoenvironnement comme le pH la tempeacuterature et la lumiegravere De plus
82
drsquoautres problegravemes srsquoajoutent agrave leur utilisation comme leur reacuteaction avec le dioxyde de soufre
(substance utiliseacutee pour la conservation drsquoaliments) leur faible solubiliteacute dans lrsquoeau et leur
preacutecipitation formant des complexes avec les proteacuteines Crsquoest pourquoi des proceacutedeacutes ont eacuteteacute
rechercheacutes pour augmenter leur stabiliteacute comme lrsquoutilisation drsquohydrocolloiumldes comme
lrsquoalginate de sodium et un surfactant ionique comme le laurylsulfate de sodium (3)
II Utilisations pharmaceutiques
Pour rappel la liste des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition
comporte deux parties (2)
La LISTE A laquo Plantes meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement raquo et la LISTE B laquo Plantes
meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement en lrsquoeacutetat ou sous forme de preacuteparation dont les effets
indeacutesirables potentiels sont supeacuterieurs au beacuteneacutefice theacuterapeutique attendu raquo
La myrtille appartient agrave la liste A des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition mais nrsquoy fait lrsquoobjet drsquoaucune monographie Agrave la Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition le fruit frais et sec de myrtille font lrsquoobjet drsquoune monographie (Annexe II et III
respectivement) En France certaines indications theacuterapeutiques selon la partie de plante
utiliseacutee sont revendiqueacutees dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) Ainsi
on retrouve les indications suivantes
- pour le fruit (frais ou sec) et la feuille par voie orale ou en usage locale
traditionnellement utiliseacute dans les manifestations subjectives de lrsquoinsuffisance veineuse telles
que jambes lourdes et dans la symptomatologie heacutemorroiumldaire
Il y a drsquoautres indications theacuterapeutiques possibles comme
- pour le fruit (frais ou sec) par voie orale traditionnellement utiliseacute comme
traitement adjuvant de la composante douloureuse des troubles fonctionnels digestifs
- pour le fruit frais (voie orale ou usage local) traitement symptomatique des
troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire tels que ecchymoses peacuteteacutechies
- pour la feuille et le fruit sec (voie orale) traitement symptomatique des diarrheacutees
leacutegegraveres
La Commission E allemande preacutecise dans la monographie (1987) que le fruit de myrtille est
eacutegalement utiliseacute pour le traitement des diarrheacutees aigueumls et pour lrsquoinflammation locale
modeacutereacutee des muqueuses de la caviteacute buccale Le fruit seacutecheacute est utiliseacute agrave la dose de 20 agrave 60 g
par jour en deacutecoction par voie orale pour le traitement de la diarrheacutee chez lrsquoadulte
83
Ainsi les extraits riches en anthocyanosides des fruits de la myrtille peuvent entrer dans la
composition de meacutedicaments utiliseacutes pour traiter les manifestations fonctionnelles de
lrsquoinsuffisance veinolymphatique la symptomatologie des troubles fonctionnels de la fragiliteacute
capillaire et les troubles de la vision meacutesopique et scotopique (11)
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille
11 Meacutedicaments allopathiques (82)
Laboratoire LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRARELreg 100 (comprimeacute enrobeacute bleu clair conditionnement de 20 comprimeacutes)
Meacutedicament vasculoprotecteur drsquoautorisation de mise sur le marcheacute (AMM) ndeg
3400930311714 (1987 reacuteviseacute le 24082005) Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Crsquoest une speacutecialiteacute pharmaceutique associant 100 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de V
myrtillus et 5 mg de β-carotegravene avec comme indications
laquo - Traitement dappoint des manifestations fonctionnelles de linsuffisance veinolymphatique
(jambes lourdes douleurs impatiences du primodecubitus)
- Traitement symptomatique dappoint des troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire
- Traitement dappoint des baisses dacuiteacute et troubles du champ visuel preacutesumeacutes dorigine
vasculaire raquo
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
DIFRARELreg E (comprimeacute enrobeacute blanc)
Meacutedicament ophtalmique agrave viseacute vasculoprotectrice drsquoAMM ndeg3400930311592 (196597
reacuteviseacute le 28022006) pour le conditionnement de 26 comprimeacutes et ndeg3400937701068 (2006)
pour le conditionnement de 60 comprimeacutes Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Cette speacutecialiteacute pharmaceutique associe 50 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de myrtille et
50 mg drsquoα-tocopheacuterol avec comme indication les troubles de la vision meacutesopique scotopique
(heacutemeacuteralopie) et la myopie
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
84
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques
LABORATOIRE BOIRON
Ce laboratoire homeacuteopathique commercialise la teinture megravere de V myrtillus et des dilutions
homeacuteopathiques
Agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise la myrtille a une monographie speacutecifique intituleacutee laquo Vaccinium
myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Annexe IV)
LABORATOIRE LEHNING
DIACUREreg (conditionnement de 60 geacutelules) drsquoAMM ndeg 3232544
Meacutedicament homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale Il est
constitueacute de lrsquoassociation suivante
- Taraxacum pulveacuteriseacute (H) (Pissenlit) 40 mg
- Berberis vulgaris (H) D3 (Epine-vinette) 40 mg
- Juglans regia pulveacuteriseacute (H) (Noyer) 120 mg
- Achillea millefolium (H) D2 (Achilleacutee millefeuille) 40 mg
- Vaccinium myrtillus folium pulveacuteriseacute (H) (feuille de myrtille) 80 mg
- Erythrea centaurium pulveacuteriseacute (H) (Petite centaureacutee) 40 mg
- Natrum phosphoricum (H) D3 40 mg
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute pour les polysurcharges
meacutetaboliques (facilite lrsquoeacutelimination des deacutechets meacutetaboliques) et notamment comme
traitement divers du diabegravete la feuille de myrtille y est utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes
hypoglyceacutemiantes
La posologie est de 1 agrave 2 geacutelules 3 fois par jour en dehors des repas en cure de 1 agrave 2 mois
(82)
DIABENEreg (solution buvable flacon de 30 mL) drsquoAMM ndeg 3030349 est un meacutedicament
homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale
Il est constitueacute de lrsquoassociation suivante Alchemilla vulgaris D3 Kreosotum D4
Strychninum nitricum D4 Arsenicum album D4 Adrenalinum D6 Belladonna D4 Syzygium
jambolanum D2 Vaccinium myrtillus D2 Taraxacum D3 Natrum phosphoricum D3
Helonias dioica D2
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute dans les polysurcharges
meacutetaboliques comme traitement divers de lrsquoobeacutesiteacute
85
La posologie est de 30 gouttes 3 fois par jour de preacutefeacuterence en dehors des repas (82)
13 Compleacutements alimentaires
LABORATOIRE MERCK
BION 3 SENIORreg (conditionnement de 30 ou 60 comprimeacutes)
Compleacutement alimentaire constitueacute de 3 probiotiques 12 vitamines 8 oligo-eacuteleacutements et 3
extraits veacutegeacutetaux (100 microg de luteacuteine extraits de 20 mg de ginseng et 1 mg de myrtille) Il est
preacuteconiseacute en cas de sphegravere ORL fragiliseacutee de deacutefenses naturelles affaiblies et pour mieux
faire face aux rythmes de vie actuels alimentation deacuteseacutequilibreacutee stress surmenage La
posologie est de 1 comprimeacute par jour en cure de 30 ou 60 jours (82)
RICHELETreg ANTI-AGE VISION (conditionnement de 30 comprimeacutes)
Crsquoest un compleacutement alimentaire composeacute de luteacuteine 105 mg drsquoextrait de myrtille des
vitamines B1 B2 et B6 A C E et du seacuteleacutenium La myrtille est utiliseacutee dans ce produit pour
ameacuteliorer la microcirculation sanguine de lrsquoœil et assurer le bon fonctionnement de ses
constituants La posologie est de 1 comprimeacute par jour pendant 3 mois agrave renouveler
peacuteriodiquement (82)
LABORATOIRE LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRAVISIONreg ANTI-VIEILLISSEMENT
Compleacutement alimentaire agrave viseacutee oculaire comprenant des vitamines (vitamine C et E) des
oligo-eacuteleacutements (Zn et Se) des pigments maculaires (luteacuteine extrait de maiumls dont
zeacuteaxanthine) du DHA (ω3) des huiles de poisson et un extrait sec de myrtille doseacute agrave 100 mg
(pour 2 geacutelules) Sur la notice du meacutedicament on trouve les indictions suivantes laquo il est
conseilleacute pour corriger les effets neacutefastes au niveau oculaire des deacuteficits antioxydants en
acides gras essentiels et en pigments maculaires raquo La posologie est de 1 geacutelule 2 fois par jour
(notice du compleacutement alimentaire)
LABORATOIRE ARKOPHARMA
Ce laboratoire pharmaceutique fabrique des geacutelules contenant de la poudre totale microniseacutee
Aujourdrsquohui seule la baie de myrtille est commercialiseacutee par le laboratoire Arkopharma
86
Les Arkogeacutelules de myrtille (baie) sont indiqueacutees dans la diarrheacutee la colite et lrsquoameacutelioration
de la vision nocturne (Brochure Arkopharma)
La myrtille est preacutesente dans beaucoup drsquoautres compleacutements alimentaires que nous ne
citerons pas ici
89
BIBLIOGRAPHIE
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(2) ANONYME Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition
(3) ANTAL DS GARBAN G GARBAL Z The anthocyans biologically-activite
substances of food and pharmaceutic interest
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98
LISTE DES ANNEXES
ANNEXE I Table de composition nutritionnelle Ciqual 2008 de lrsquoAffsa
ANNEXE II Monographie du fruit frais de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE III Monographie du fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE IV laquo Vaccinium myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Pharmacopeacutee
franccedilaise Xegraveme eacutedition)
99
ANNEXE I
TABLE DE COMPOSITION
NUTRITIONNELLE CIQUAL 2008 DE
LrsquoAFSSA
100
Myrtille fraicircche (teneurs pour 100 grammes drsquoaliment comestible)
Leacutegende du code confiance
Echelle de fiabiliteacute de A agrave D A correspondant aux donneacutees les plus fiables
Nom des constituants Uniteacute Teneur
moyenne Min Max Nb eacutechantillons
Source des
donneacutees
Code
confiance
Energie kJ 213 - - - C
Energie kcal 50 - - - C
Energie eacutetiquetage kJ 213 - - - C
Energie eacutetiquetage kcal 50 - - - C
Eau g 838 834 8421 2 760
743 C
Proteacuteines g 074 - - - C
Proteacuteines brutes (N x 625) g 074 - - 1 743 C
Glucides g 10 - - - C
Sucres g 996 - - 1 743 C
Amidon g 003 - - 1 743 C
Polyols totaux g 0 - - - D
Fibres alimentaires g 24 - - 1 743 C
Lipides g 033 - - 1 743 C
AG satureacutes g 0028 - - 1 743 C
AG monoinsatureacutes g 0047 - - 1 743 C
AG polyinsatureacutes g 0146 - - 1 743 C
Cholesteacuterol mg 0 - - 1 690 C
Alcool (eacutethanol) g 0 - - 1 690 C
Acides organiques g 137 - - - 723 C
Sodium mg 1 - - 1 743 C
Magneacutesium mg 6 - - 1 743 C
Phosphore mg 12 - - 1 743 C
Potassium mg 77 - - 1 743 C
Calcium mg 6 - - 1 743 C
Manganegravese mg 0336 - - 1 743 C
Fer total mg 028 - - 1 743 C
Cuivre mg 0057 - - 1 743 C
Zinc mg 016 - - 1 743 C
Seacuteleacutenium microg 01 - - 1 743 C
Iode microg 05 - - 1 573 D
Reacutetinol microg 0 - - 1 743 C
Becircta-carotegravene microg 32 - - 1 743 C
Vitamine D microg 0 - - 1 445 C
Activiteacute vitaminique E (en
eacutequivalents alpha-tocopheacuterol) mg 1 - - 1 497 C
Vitamine C mg 97 - - 1 743 C
Vitamine B1 ou Thiamine mg 0037 - - 1 743 C
Vitamine B2 ou Riboflavine mg 0041 - - 1 743 C
Vitamine B3 ou PP ou
Niacine mg 0418 - - 1 743 C
Vitamine B5 ou Acide
pantotheacutenique mg 0124 - - 1 743 C
Vitamine B6 ou Pyridoxine mg 0052 - - 1 743 C
Vitamine B9 ou Folates
totaux microg 6 - - 1 743 C
Vitamine B12 ou
Cobalamines microg 0 - - 1 743 C
101
ANNEXE II
MONOGRAPHIE DU FRUIT FRAIS
DE VACCINIUM MYRTILLUS L
(Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
102
Myrtille (fruit frais de)
Myrtilli fructus recens
DEacuteFINITION
Fruit mucircr frais ou congeleacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 030 pour cent drsquoanthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-
O-glucoside (chrysantheacutemine C21H21ClO11 Mr 4848) (drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur sucreacutee un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit frais de myrtille est une baie bleu-noir globuleuse drsquoenviron 5 mm de diamegravetre Il
comporte agrave la base une cicatrice ou rarement un fragment de peacutedoncule Le sommet aplati
est surmonteacute par les restes du style persistant et du calice qui forme un repli circulaire Dans
le meacutesocarpe violaceacute et juteux 4 agrave 5 loges renferment de nombreuses petites graines ovoiumldes
brunes
B Le fruit frais de myrtille broyeacute est rouge violaceacute Examinez-le au microscope en utilisant
de la solution drsquohydrate de chloral R Il preacutesente des cellules scleacutereuses rose violaceacute agrave paroi
eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en amas provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des
fragments drsquoeacutepicarpe brun-rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie
des fragments jaune-brun du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave
paroi preacutesentant des eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles de cristaux
drsquooxalate de calcium
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 5 g de drogue reacutecemment broyeacutee ajoutez 20 ml de meacutethanol R
Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
103
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge violaceacute
Chrysantheacutemine une bande rouge violaceacute Une bande principale rouge violaceacute
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge violaceacute
mdash plusieurs bandes bleu violaceacute
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Cendres totales (2416) maximum 06 pour cent
Perte agrave la dessiccation (2232) 800 pour cent agrave 900 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave 105 degC
sur 5000 g de drogue reacutecemment broyeacutee
DOSAGE
Broyez extemporaneacutement 50 g de drogue A environ 500 g de drogue broyeacutee exactement
peseacutes ajoutez 95 ml de meacutethanol R Agitez meacutecaniquement pendant 30 min Filtrez dans une
fiole jaugeacutee de 1000 ml lavez le filtre et compleacutetez au volume avec du meacutethanol R Diluez
cette solution au 150 dans une solution drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le
meacutethanol R
Mesurez lrsquoabsorbance (2225) de la solution obtenue agrave 528 nm en prenant une solution
drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le meacutethanol R comme liquide de
compensation
Calculez la teneur pour cent en anthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-O-
glucoside agrave lrsquoaide de lrsquoexpression suivante
718 = absorbance speacutecifique du chlorure de cyanidine 3-O-glucoside agrave 528 nm
A = absorbance agrave 528 nm
M = Masse de la prise drsquoessai en grammes
CONSERVATION
Lorsque le fruit frais de myrtille est congeleacute conservez-le agrave une tempeacuterature infeacuterieure ou
eacutegale agrave minus 18degC
104
ANNEXE III
MONOGRAPHIE DU FRUIT MUcircR
SECHE DE VACCINIUM MYRTILLUS
L
(Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
105
Fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 10 pour cent de tanins exprimeacutes en pyrogallol (C6H6O3 Mr 1261)
(drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur douce un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit sec de myrtille est une baie bleu-noir ratatineacutee subglobuleuse de 5 mm environ de
diamegravetre avec une cicatrice agrave la base Le sommet est surmonteacute par les restes du style et le
calice persistant qui forme un repli circulaire Le meacutesocarpe violet intense et charnu renferme
de nombreuses petites graines ovoiumldes brunes
B Reacuteduisez le fruit sec de myrtille en poudre (355) (2912) La poudre est brun-violet
Examinez au microscope en utilisant de la solution drsquohydrate de chloral R La poudre
preacutesente des cellules scleacutereuses rose-violet agrave paroi eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en
amas et provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des fragments drsquoeacutepicarpe coloreacutes en brun-
rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie des fragments jaune-brun
du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave paroi preacutesentant des
eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles et des prismes de cristaux drsquooxalate de
calcium de diffeacuterente taille
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 2 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912) ajoutez 20 ml de
meacutethanol R Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
106
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge-violet de faible intensiteacute
Chrysantheacutemine une bande rouge- violet Une bande principale rouge-violet
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge-violet
mdash plusieurs bandes bleu-violet
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Perte agrave la dessiccation (2232) au maximum 120 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave
105 degC pendant 2 h sur 1000 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute
Cendres totales (2416) au maximum 50 pour cent
DOSAGE
Effectuez la deacutetermination des tanins dans les drogues veacutegeacutetales (2814) Utilisez 1500 g de
fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912)
107
ANNEXE IV
laquo VACCINIUM MYRTILLUS
POUR
PREPARATIONS
HOMEOPATHIQUES raquo
(Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition)
108
109
110
111
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
REacuteSUMEacute
Vaccinium myrtillus Linneacute ou myrtille sauvage est un sous-arbrisseau de la famille des
Ericaceacutees On la retrouve dans le nord et le centre de lrsquoEurope en Asie et en Ameacuterique
Boreacuteale En France la myrtille est commune dans la plupart des montagnes entre 400 et 2500
megravetres drsquoaltitude Elle est diffeacuterente de la myrtille cultiveacutee ou Vaccinium corymbosum L Son
fruit est une baie bleu-noir globuleuse agrave saveur sucreacutee et aciduleacutee V myrtillus L renferme de
nombreux composeacutes pheacutenoliques dont les anthocyanosides ceux-ci sont principalement
retrouveacutes dans la peau et la pulpe du fruit de la myrtille ils sont agrave lrsquoorigine de la plupart de
ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques mecircme si drsquoautres composeacutes participeraient agrave lrsquoaction beacuteneacutefique
de la myrtille
V myrtillus L est une plante meacutedicinale inscrite sur la liste A de la Pharmacopeacutee franccedilaise
Xegraveme
eacutedition Le fruit (frais et sec) de la myrtille fait lrsquoobjet drsquoune monographie dans la
Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition Les proprieacuteteacutes theacuterapeutiques des feuilles et des fruits
de V myrtillus L ont eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine populaire les fleurs pour leurs
proprieacuteteacutes toniques astringentes antiseptiques dans le traitement de la diarrheacutee de la
dysenterie quant agrave la feuille elle eacutetait surtout utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
Certaines indications sont valideacutees et figurent dans la Note explicative de lrsquoAgence du
meacutedicament de 1998 et la Commission E allemande Si la baie est atoxique la feuille
preacutesenterait un risque drsquointoxication lieacute agrave des fortes doses ou agrave une utilisation chronique
La myrtille a fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vitro in vivo et quelques eacutetudes cliniques
ayant montreacute une faible biodisponibiliteacute (surtout chez lrsquohomme) mais des effets beacuteneacutefiques
dans le domaine vasculaire dans certaines pathologies ougrave le stress oxydant est impliqueacute
(cancer maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives DMLAhellip) cette activiteacute reste agrave ecirctre prouveacutee chez
lrsquohomme Quant aux eacutetudes cliniques concernant lrsquoaction de la myrtille sur la vision (surtout
nocturne) elles restent controverseacutees mais des eacutetudes in vitro reacutecentes ont montreacute ses effets
beacuteneacutefiques sur la reacutegeacuteneacuteration des cellules corneacuteennes Enfin outre son emploi en cuisine la
myrtille est utiliseacutee dans lrsquoindustrie pour ses anthocyanes aux proprieacuteteacutes tinctoriales et dans le
domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments et des compleacutements alimentaires
agrave base de myrtille pour diverses indications (traitement de la fragiliteacute capillaire de
lrsquoinsuffisance veineuse et dans les troubles de la vision meacutesopique et scotopique)
MOTS-CLEFS Vaccinium myrtillus - Myrtille - anthocyanosides - phytotheacuterapie - stress
oxydant
THESE SOUTENUE LE 19 MAI 2010
Par Olivia Maillefert
86 rue des Ecoles
73230 St Alban Leysse
COMPOSITION DU JURY
Preacutesident du jury
Mr KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences en Botanique
Membres du jury
Mr CORJON Gilles Docteur en Pharmacie
Mr CHOVELON Michel Docteur en Pharmacie
- 1ere pagepdf
- table des matiegraverespdf
- thegravese myrtille olivia paginationpdf
- Derniere pagepdf
-
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme p41
24 Action antiatheacuterogegravenique p42
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice p42
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA) p43
5 Action sur lrsquoangiogenegravese p44
II Action de Vaccinium myrtillus dans le stress oxydant p45
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes p45
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus p46
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides p46
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma p47
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides p47
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces reacuteactives
azoteacutees p48
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique p49
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines p50
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie p51
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie p51
32 Etudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques p51
4 Effet de Vaccinium myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives
et le vieillissement p53
41 Effets sur un stress eacutemotionnel p53
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication
du stress oxydant p54
5 Effet de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB p56
51 Effets drsquoune exposition solaire p56
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires p56
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire p57
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes p57
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire p58
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge p59
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus p61
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant
un stress oxydant p61
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus p62
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer p62
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus p63
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine p65
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases p66
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes p66
42 Etude de Teller et coll (2009) p66
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision p67
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale p68
2 Eacutetude chez des sujets myopes p69
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004) p70
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique p72
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes p72
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete p73
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine p73
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques p74
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac p74
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique p74
2 Action sur Helicobacter pylori p76
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus p76
1 Action antibacteacuterienne p76
VIII Toxicologie p77
1 Effets indeacutesirables p77
2 Doses leacutetales 50 (DL50) p78
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus p79
Quatriegraveme partie Utilisations de Vaccinium myrtillus L p80
I Utilisations alimentaires p81
1 Utilisations culinaires p81
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire p81
II Utilisations pharmaceutiques p82
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille p83
11 Meacutedicaments allopathiques p83
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques p84
13 Compleacutements alimentaires p85
Conclusion p87
Bibliographie p89
Liste des Annexes p98
Annexe I p99
Annexe II p101
Annexe III p104
Annexe IV p107
1
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
2
LISTE DES FIGURES
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme
3
LISTE DES ABREVIATIONS
AA allyl alcool
ADP adeacutenosine diphosphate
AMPc adeacutenosine monophosphate cyclique
DMLA deacutegeacuteneacuterescence maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge
ECA enzyme de conversion de lrsquoangiotensine
EDRF endothelium-derived relaxing factorfacteur relaxant deacuteriveacute lrsquoendotheacutelium
ERO espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
GAGs glycosaminoglycanes
GSH glutathion
H2O2 peroxyde drsquohydrogegravene
IC50 Inhibitory Concentration 50concentration inhibitrice agrave 50
IEC inhibiteur de lrsquoenzyme de conversion
IGF insulin-like growth factor
LDLs low-density lipoproteins lipoproteacuteines de basse densiteacute
MDA malondialdeacutehyde
NO monoxyde drsquoazote radicalaire
O2- anion superoxyde
OH radical hydroxyle
PGI2-like prostacyclin-like
PLCγ phospholipase Cγ
RTK reacutecepteur agrave activiteacute tyrosine kinase
tBH tert-butylhydroperoxyde
TBRAs thiobarbituric acid reactive substancessubstances reacuteagissant avec lrsquoacide
thiobarbiturique
UV ultraviolet
VEGF vascular endothelial growth factorfacteur de croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire
XOD xanthine oxydase
4
GLOSSAIRE
Termes botaniques
Actinomorphe se dit dune fleur preacutesentant une symeacutetrie axiale
Adneacute soudeacute ou attacheacute agrave sapplique agrave des organes diffeacuterents comme par exemple des
eacutetamines adneacutees au peacuterianthe
Aneacutemogame qualifie le mode de feacutecondation des plantes dans lequel le pollen est porteacute par
le vent
Anthegravere partie de leacutetamine habituellement porteacutee par le filet contenant le pollen celui-ci
est libeacutereacute lorsque souvre cette terminaison renfleacutee sous forme de petit sac oblong
geacuteneacuteralement jaune et double
Campanuleacute se dit dune fleur en forme de cloche
Capiteacute termineacute en tecircte arrondie
Carpelles organe femelle Lensemble des carpelles forme le pistil (ou gyneacuteceacutee)
Dialypeacutetale dont les peacutetales sont indeacutependants les uns des autres
Hermaphrodite plante portant des organes floraux macircle et femelle
Infundibuliforme se dit dune fleur dont la corolle est en forme dentonnoir
Ligneux se dit des veacutegeacutetaux formant du bois arbres et arbustes mais aussi un certain
nombre de plantes grimpantes
Lobeacute se dit dun organe comme feuille ou peacutetale eacutechancreacute mais sans division complegravete
Loculicide qui souvre en se fendant longitudinalement le long de la nervure dorsale de
chaque loge
Marcotte organe veacutegeacutetal aeacuterien qui srsquoenterre et srsquoenracine avant de se seacuteparer (ou drsquoecirctre
seacutepareacute) de la plante megravere
Peacuterianthe ensemble des piegraveces florales non sexueacutees dune fleur
Septicide qualifie un fruit qui souvre en se fendant longitudinalement au niveau des
cloisons (septums) et seacuteparant ainsi les carpelles
Stomate structure foliaire organiseacutee ayant des meacutecanismes drsquoouverture reacuteversibles
permettant les eacutechanges gazeux
5
Teacutenuinucelleacute se dit dun ovule contenant un nucelle peu deacuteveloppeacute (dans les groupes
eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Uniteacutegumenteacute se dit dun ovule ayant une seule enveloppe autour du nucelle (dans les
groupes eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Urceacuteoleacutee corolle en forme de tube dilateacute agrave la base et reacutetreacutecit au sommet
Zygomorphe se dit dune plante preacutesentant une symeacutetrie par rapport agrave un plan
Autres
Astheacutenopie fatigue de loeil surtout lors daccommodation soutenue et qui provoque des
signes dirritation une sensation de brucirclure et des maux de tecircte
Meacutesopique Caracteacuteristique visuelle du systegraveme oculaire utilisant agrave la fois bacirctonnets et cocircnes
pour interpreacuteter une scegravene visuelle dont lintensiteacute lumineuse est comprise entre celle du jour
et de la nuit (creacutepusculaire)
Reacutetinite pigmentaire maladie heacutereacuteditaire deacutegeacuteneacuterative des cellules visuelles reacuteceptrices de
la lumiegravere (cocircnes et bacirctonnets)
Sensibiliteacute au contraste elle est baseacutee sur la capaciteacute du systegraveme visuel agrave deacutetecter des
diffeacuterences de luminances donc de deacuteterminer lexistence de bords entre surfaces
homogegravenes
Scotopique vision nocturne se basant principalement sur linformation capteacutee par les
bacirctonnets
6
Introduction et historique
Dans une socieacuteteacute ougrave la phytotheacuterapie connait un engouement croissant voulant se rapprocher
au plus pregraves du laquo naturel raquo la connaissance des plantes aux vertus theacuterapeutiques est de plus
en plus rechercheacutee La myrtille sauvage ou Vaccinium myrtillus L appartient agrave la famille des
Ericaceacutees elle est lrsquoune des plantes centrales faisant partie de la liste des plantes meacutedicinales
inscrites agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition (liste A) et dont le fuit (sec et frais) fait
lrsquoobjet drsquoune monographie agrave la Pharmacopeacutee europeacuteenne (6egraveme
eacutedition) Lrsquoeacutetymologie du
genre Vaccinium est incertaine il deacuteriverait du nom latin vacca pour vache car la plante eacutetait
volontiers brouteacutee par les bovins mais pour drsquoautres du nom bacca pour baie (43) Le terme
myrtillus provient de la ressemblance avec les feuilles et les fruits du myrte (Myrtus
communis L) V myrtillus empreinte divers noms vernaculaires (airelle airelle noire airelle
anguleuse bluet brimbelle raisin des bois raisin de bruyegraverehellip) Les deacutesignations anglaises
pour la baie de myrtille sont bilberry fruit blueberry whortleberry pour les feuilles bilberry
leaf huckleberry leaf (67)
Ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques sont utiliseacutees dans la meacutedecine populaire depuis fort
longtemps Dioscoride est le premier agrave vanter les bienfaits de la myrtille dans le traitement de
la dysenterie Puis au XVIegraveme
siegravecle une religieuse et mystique allemande Sainte Hildegarde
de Bingen preacuteconisait la plante pour provoquer faciliter ou augmenter les regravegles (20)
Depuis de nombreuses proprieacuteteacutes sont attribueacutees au myrtillier en fonction de la partie de
plante utiliseacutee On utilisait les baies pour ses proprieacuteteacutes astringentes toniques antiseptiques
dans le traitement de la diarrheacutee des heacutemorroiumldes des inflammations gastro-intestinaleshellip
quant aux feuilles elles eacutetaient surtout utiliseacutees pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes (43)
Lrsquoameacutelioration de la vision nocturne par la myrtille a eacuteteacute rapporteacutee par les pilotes de la British
Royal Air Force qui en consommaient quotidiennement Certains usages precircteacutes agrave la myrtille
ont eacuteteacute valideacutes et figure dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la
monographie de la Commission E allemande (ces usages seront citeacutes dans cette thegravese) La
myrtille fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vivo in vitro et de quelques eacutetudes cliniques
(dans des domaines meacutedicaux varieacutes) dont certaines posent des interrogations Ses utilisations
sont diverses on lrsquoemploie en cuisine (pacirctisseries confitures vin vinaigrehellip) dans
lrsquoindustrie et dans le domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments agrave base de
myrtille et des compliments alimentaires
7
Premiegravere partie
Botanique de Vaccinium myrtillus L
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L (70)
8
I Classification botanique de la myrtille
Le taxon des Spermatophytes ou plantes agrave graines est constitueacute de deux clades les
Gymnospermes ou plantes agrave ovules nus et les Angiospermes ou plantes agrave ovaires
La myrtille (ou myrtillier) appartient agrave lrsquoembranchement des Angiospermes se distinguant des
Gymnospermes par plusieurs caractegraveres dont trois fondamentaux
- les organes reproducteurs se groupent en fleurs bisexueacutees
- les carpelles entourent complegravetement les ovules et se transforment apregraves
feacutecondation en fruit
- le gameacutetophyte femelle situeacute dans lrsquoovule nommeacute sac embryonnaire est le siegravege
drsquoune double feacutecondation lrsquoune donnant lrsquoembryon lrsquoautre conduisant agrave lrsquoalbumen (tissu de
reacuteserve des graines agrave 3n chromosomes)
Selon la classification systeacutematique la myrtille fait partie de la classe des Asteacuterideacutees
(Eudicots agrave peacutetales et carpelles soudeacutes) constitueacutee drsquoenviron 67000 espegraveces on distingue les
Asteacuterideacutees basales et les Euasteacuterideacutees I et II Les Asteacuterideacutees basales ont deux ordres fregraveres
les Ericales et les Cornales (25)
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees (22) (25) (30)
Lrsquoordre des Ericales dont le nom vient drsquoErica pour bruyegravere comprend 7000 espegraveces
reacuteparties en 24 familles dont celle des Ericaceacutees auxquelles appartient la myrtille Cette
famille est reacutepartie dans le monde entier mais avec une preacutefeacuterence geacuteographique pour les
reacutegions tempeacutereacutees ou froides voire mecircme les hautes montagnes De faccedilon geacuteneacuterale elle
regroupe des arbres des arbustes et des lianes aux caracteacuteristiques suivantes (Figure 2)
- des feuilles alternes simples entiegraveres agrave denteacutees-serreacutees dont les bords du limbe
peuvent se replier sur eux-mecircmes afin de proteacuteger les stomates porteacutes par la face infeacuterieure
de la transpiration Chez certaines Ericaceacutees les feuilles sont plates et coriaces ce qui leur
procure une reacutesistance agrave la seacutecheresse
- des fleurs le plus souvent hermaphrodites geacuteneacuteralement plus ou moins pendantes
actinomorphes agrave leacutegegraverement zygomorphes
- quatre ou cinq seacutepales libres agrave leacutegegraverement soudeacutes
les mots suivis de ce symbole ont leur deacutefinition dans le glossaire
9
- quatre ou cinq peacutetales soudeacutees constituant une corolle cylindrique ou urceacuteoleacutee
campanuleacutee ou infundibuliforme parfois dialypeacutetale Chez certains genres aneacutemogames
le peacuterianthe nrsquoest constitueacute que de deux ou trois seacutepales et peacutetales ou trois agrave quatre peacutetales
- huit agrave dix eacutetamines reacuteduites agrave deux ou trois chez les espegraveces aneacutemogames
- le filet des eacutetamines est libre ou adneacute agrave la corolle voire mecircme soudeacute Quelques fois
il peut y avoir une paire drsquoappendices en eacuteperon dresseacute srsquoinseacuterant agrave proximiteacute ou agrave lrsquoendroit
mecircme ougrave se trouve lrsquoanthegravere
- lrsquoanthegravere est constitueacute drsquoune ou de deux loges srsquoouvrant par deux pores libeacuterant les
grains de pollen habituellement disposeacutes en teacutetrades
- les carpelles sont au nombre de deux agrave dix agrave ovaire supegravere ou infegravere comme chez la
myrtille (crsquoest-agrave-dire que lrsquoovaire peut se souder agrave la coupe florale)
- un style avec souvent un creux agrave lrsquointeacuterieur
- un stigmate capiteacute ou faiblement lobeacute
- un ou plusieurs ovules par loge uniteacutegumenteacutes ou teacutenuinucelleacutes
- enfin le fruit peut ecirctre une capsule septicide ou loculicide une drupe agrave plusieurs
noyaux ou une baie comme chez la myrtille
4 ou 5 seacutepales agrave soudure ou adnation variable
4 ou 5 peacutetales soudeacutes
Soudure ou adnation variable
Ovaire infegravere
Ovaire supegravere Type de fruit
Symeacutetrie radiaire () 2 agrave 10 carpelles soudeacutees
ou 4 agrave 10 eacutetamines
Symeacutetrie bilateacuterale (X) Etamines adneacutees aux peacutetales
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees (30)
10
La famille des Ericaceacutees regroupe plusieurs genres et espegraveces dont le nombre varie selon la
litteacuterature de 70 agrave 130 genres et de 2000 agrave 3400 espegraveces Cette famille comprend
- des plantes alimentaires comme Vaccinium myrtillus L (myrtille) Vaccinium
uliginosum L (airelle des marais) Gaultheria procumbens L (theacute du Canada qui fournit le
salicylate de meacutethyle)hellip
- des plantes meacutedicinales comme V myrtillus Ledum palustre L (leacutedon des marais)
Calluna vulgaris L (bruyegravere callune)hellip
- des plantes utiliseacutees pour lrsquoobtention du bois comme Erica arborea L (fabrication
des pipes)
- de nombreuses espegraveces ornementales dans les genres Arbutus (arbousier) Erica
(bruyegravere) Rhododendron (azaleacutee)hellip
La famille des Ericaceacutees est constitueacutee de quatre sous-familles dont les Vaccinioiumldeacutees qui
englobent le genre Vaccinium
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium (22)
Le genre Vaccinium se caracteacuterise par plusieurs particulariteacutes botaniques
- des tiges drsquoaspect contourneacute conseacutequence drsquoune croissance tregraves lente
- des feuilles coriaces plates reacutesistantes agrave la seacutecheresse
- des anthegraveres srsquoouvrant par deux pores souvent munis de deux appendices dresseacutes en
forme de cornes
- un ovaire composeacute de cinq carpelles fermeacutes
- un fruit repreacutesenteacute par une capsule
Ce genre est lui-mecircme constitueacute drsquoenviron 150 espegraveces auquel fait partie la myrtille
Les myrtilles drsquoEurope regroupent deux espegraveces de myrtilles
- V uliginosum L
- V myrtillus L
3 Vaccinum myrtillus L ou myrtille sauvage
31 Description botanique (22) (67)
Le myrtillier (Vaccinum myrtillus L) est un sous-arbrisseau vivace atteignant 20 agrave 60 cm de
hauteur agrave tige verte dresseacutee cylindrique rigide et agrave rameaux vert pacircle anguleux aileacutes dans
leur longueur et plus ou moins grecircles Cette tige est recouverte drsquoune eacutecorce ligneuse sans
poil ni stipule ni latex ni vrille
11
Les racines souterraines sont nombreuses et forment un lacis tregraves serreacute proche du sol avec des
racines adventives La plante se perpeacutetue soit par ramification des tiges souterraines soit par
des bourgeons prenant naissance sur les racines elle est dite plante sociale car elle se
marcotte naturellement
Les feuilles (Figure 3) vert pacircle sont petites (1 agrave 2 cm voire 2 agrave 3 cm selon la litteacuterature)
alternes de forme oblongue agrave ovale agrave pointe fine et allongeacutee Le bord du limbe est finement
denteleacute avec des nervures opposeacutees Ces feuilles sont courtement peacutetioleacutees avec un peacutetiole
(tige portant la feuille) recourbeacute vers le bas Les feuilles prennent une belle couleur rouge-
cuivre en automne Elles sont caduques et reacuteapparaissent au printemps
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus (75)
Les fleurs de couleur blanc roseacute rouge pacircle agrave verdacirctre ont une corolle pendante comportant
quatre ou cinq peacutetales soudeacutes entre eux sur une grande longueur et formant un tube globuleux
agrave lobes courts Elles sont solitaires ou regroupeacutees par deux porteacutees par un peacutedoncule courbeacute
Les seacutepales tregraves petits verts sont soudeacutes agrave la corolle (Figure 4) La floraison a lieu en mai-
juin
12
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus (72)
Le fruit est une baie globuleuse de la taille drsquoun petit pois (diamegravetre variant de 4 agrave 8 mm)
bleu noir agrave maturiteacute cette baie preacutesente parfois des restes de style agrave la base et peut ecirctre
surmonteacutee du calice agrave son sommet formant un disque entoureacute drsquoun faible rebord (Figure 5)
On peut apercevoir agrave la base de la baie la cicatrice du peacutedoncule Le meacutesocarpe est charnu
constitueacute de 4 ou 5 petites loges contenant de multiples petites graines brillantes brun-rouge
La baie mucircrit jusqursquoen en juillet-aoucirct voire septembre
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus (72)
Si le fruit est frais la saveur est douce sucreacutee et leacutegegraverement aciduleacutee voire mecircme astringente
Le fruit sec par contre a une saveur aigre-douce leacutegegraverement astringente En ce qui concerne
les organes reproducteurs lrsquoovaire infegravere est soudeacute agrave la coupe florale Les eacutetamines eacutegales
entre elles deacutepassent la dizaine en nombre elles sont complegravetement libres soudeacutees au
reacuteceptacle elles peuvent ecirctre soit disposeacutees en plusieurs verticilles soit nrsquoavoir aucune
position bien deacutefinie
13
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille (67)
Vaccinium myrtillus est une myrtille sauvage tregraves peu cultiveacutee originaire drsquoEurope du Nord et
Centrale abondant dans les bois clairsemeacutes et les bruyegraveres sur les sols siliceux de montagne
En France on la trouve dans la plupart des massifs montagneux entre 400 et 2500 megravetres
drsquoaltitude (Figure 6)
Leacutegende
Preacutesent
Zone geacuteographique non renseigneacutee
Preacutesence non signaleacutee
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France (81)
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium
41 Vaccinium uliginosum L (22)
Vaccinium uliginosum L nommeacute myrtille de loup ou myrtille des marais se situe
principalement aux bords des marais dans les tourbiegraveres les landes et les bois humides On le
trouve en Dauphineacute dans le Jura les Pyreacuteneacuteeshellip et en Savoie jusqursquoagrave 2000 megravetres et plus
Crsquoest un buisson bas agrave moyen agrave tiges et rameaux arrondis dans leur longueur Ses feuilles
vert-pacircle au dessus nervureacutees au-dessous ne persistent pas en hiver Les fleurs (Figure 7)
sont disposeacutees en grappe de mai agrave juillet
14
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum (72)
Le fruit (Figure 8) drsquoun diamegravetre drsquoenviron 6 mm est bleu-noir pruineux donnant un jus
incolore et agrave chair blanche Sa saveur est fade et sucreacutee Il mucircrit en juillet-aoucirct voire mecircme
jusqursquoen septembre
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum (72)
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo (61)
Ce sont des myrtilles drsquoorigine ameacutericaine dont lrsquoimplantation a eacuteteacute faite essentiellement agrave
partir de Vaccinium corymbosum L (myrtillier geacuteant ou arbustif) Celui-ci est un arbuste
pouvant atteindre 25 megravetres de hauteur drsquoougrave son nom Il est reacutesistant au froid Ses
inflorescences forment un corymbe ougrave le nombre de fleurs par corymbe varie beaucoup
(Figure 9) La baie (Figure 10) est de couleur bleue recouvert de pruine qui masque une chair
blanche
15
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum (79)
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo (79)
La floraison apparait de mars agrave fin mai et dure plusieurs semaines Les feuilles (Figure 11)
prennent une belle coloration en automne ce qui en fait une magnifique plante deacutecorative
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum (79)
16
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage la myrtille drsquoorigine ameacutericaine a un fruit plus gros et
plus sucreacute Cette derniegravere a une pulpe non coloreacutee Plusieurs varieacuteteacutes existent classeacutees en
fonction de lrsquoeacutepoque de maturiteacute
- les varieacuteteacutes preacutecoces comme le Bluetta lrsquoEarlibluehellip
- les varieacuteteacutes demi-preacutecoces comme le Patriot le Collinshellip
- les varieacuteteacutes demi-saison comme le Bluejay le Bluecrophellip
- les varieacuteteacutes demi-tardives comme le Berkeley le Jerseyhellip
- les varieacuteteacutes tregraves tardives comme le Darrow lrsquoElliothellip
43 Vaccinium macrocarpon L (4)
Vaccinium macrocarpon Ait ou canneberge drsquoAmeacuterique (Figure 12) reacutesistant agrave de fortes
geleacutees de moins 35degC et plus est un arbrisseau ressemblant agrave la myrtille sa croissance est
lente Son fruit est une baie aciduleacutee utiliseacutee dans la preacutevention des reacutecidives drsquoinfections
urinaires car elle contient des moleacutecules anti-adheacutesines des fimbriae drsquoEscherichia coli
(bacteacuterie intestinale pouvant ecirctre la cause drsquoinfection urinaire)
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits (83)
Drsquoautres espegraveces de Vaccinium se rencontrent sur le continent ameacutericain comme
- Vaccinium angustifolium Ait (Bleuet nain) qui est un buisson bas infeacuterieur agrave 50 cm
reacutesistant au froid
- Vaccinium ashei Reade qui est un buisson haut (3 agrave 6 megravetres) reacutesistant agrave la
seacutecheresse
Il ya beaucoup drsquoautre espegraveces de Vaccinium que nous ne citerons pas ici
17
II Culture reacutecolte et production des myrtilles
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques
Comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment la myrtille de culture est diffeacuterente de la myrtille
sauvage exigeant des conditions optimales pour une bonne production
11 pH du sol (49) (61)
Le sol doit ecirctre acide et mecircme tregraves acide pour permettre une croissance et un deacuteveloppement
normal ainsi qursquoune bonne reacuteussite de culture pH compris entre 4 et 5 voire 4 agrave 52 selon la
litteacuterature Or ce type de sol nrsquoest pas freacutequent en France Le pH optimum est de 48 Si le pH
deacutepasse 55 les plantes sont chlorotiques et il faut soit diminuer le pH soit renoncer agrave une
telle culture Les sols humides doivent ecirctre eacuteviteacutes car les racines sont tregraves sensibles agrave
lrsquoasphyxie et le deacuteveloppement du systegraveme racinaire est limiteacute
12 Conditions climatiques (49) (61)
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage qui croit dans les landes et les sous-bois humides de
demi-montagne ougrave elle vit en colonie vers 1000 megravetres drsquoaltitude le myrtillier cultiveacute est une
plante de plaine et de faible altitude qui preacutefegravere les endroits ensoleilleacutes Ainsi une exposition
sud ou sud-ouest est conseilleacutee mais il faut faire attention agrave la seacutecheresse En raison des
risques de geleacutees printaniegraveres il faut eacuteviter les lisiegraveres de bois ou la profondeur des valleacutees
Cette plante peut ecirctre eacutegalement cultiveacutee en demi-montagne agrave une altitude comprise entre 600
et 800 megravetres Reacutesistante au froid elle peut supporter de basses tempeacuteratures jusqursquoagrave -30degC
Bien qursquoau cours de la floraison les fleurs peuvent supporter des tempeacuteratures neacutegatives (-
5degC) il faut faire attention car les deacutegacircts peuvent ecirctre tregraves importants surtout sur les varieacuteteacutes
sensibles Agrave lrsquoopposeacute le myrtillier craint la seacutecheresse en eacuteteacute et les vents secs
13 Besoins en eau (49) (61)
La myrtille cultiveacutee aime la proximiteacute de la surface de la nappe phreacuteatique mais craint les
excegraves en eau Ses besoins sont limiteacutes mais permanents tout le long de sa peacuteriode de vie (au
moins 1000 mm drsquoeau durant lrsquoeacuteteacute) Ceci peut srsquoexpliquer par le deacuteveloppement tregraves
superficiel de son systegraveme racinaire et lrsquoabsence de poils absorbants En Lorraine par
exemple le systegraveme drsquoirrigation est le laquo goutte agrave goutte raquo localiseacute permettant drsquoapporter les
doses neacutecessaires en eau et de limiter la contamination fongique Les besoins en eau par
semaine sont de 20 mm
18
Ainsi il faudra tenir compte de ces exigences pour choisir la meilleure exposition possible
2 Reacutecolte des myrtilles
21 Date et mode de reacutecolte (49) (22)
La croissance de la plante eacutetant lente la reacutecolte peut deacutebuter la 2egraveme
anneacutee apregraves la plantation
La production augmente reacuteguliegraverement jusqursquoagrave la 8egraveme
ou la 9egraveme
anneacutee en rapport avec le
deacuteveloppement veacutegeacutetatif La date de reacutecolte deacutepend beaucoup de la varieacuteteacute de lrsquoaltitude des
tempeacuteratures printaniegraveres et du mode de reacutecolte Elle srsquoeacutetend de mai agrave fin septembre voire mi-
juin pour les varieacuteteacutes les plus preacutecoces et fin septembre pour les varieacuteteacutes les plus tardives La
reacutecolte deacutebute lorsque 20 des baies sont mucircres En effet si la reacutecolte se fait trop tocirct les
fruits ne sont pas mucircres et seront de mauvaise qualiteacute En geacuteneacuteral la reacutecolte dure de 3 agrave 5
semaines avec plusieurs passages successifs (un ou plusieurs par semaine) pour une mecircme
varieacuteteacute au fur et agrave mesure de la maturation des fruits
La reacutecolte de la myrtille cultiveacutee se fait manuellement directement dans les barquettes pour
eacuteviter drsquoabicircmer les fruits avec une manipulation suppleacutementaire Ceci est diffeacuterent pour la
myrtille sauvage ougrave la reacutecolte se fait agrave lrsquoaide drsquoun instrument que lrsquoon nomme laquo peigne raquo
(Figure 13) dont il existe divers modegraveles (en bois ou en fer) constitueacutes drsquoune grille permettant
drsquoarracher vite et en quantiteacutes importantes les baies en les emprisonnant entre les dents
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages (78)
19
3 Production des myrtilles
31 Production mondiale (61)
Les Etats-Unis sont les premiers producteurs mondiaux de myrtilles suivis du Canada Ces
pays produisent deux types de myrtille des myrtilles sauvages appartenant majoritairement agrave
lrsquoespegravece Vaccinium angustifolium qui se rapproche de la myrtille europeacuteenne comme nous
lrsquoavons vu dans le chapitre preacuteceacutedent Son deacuteboucheacute est principalement la congeacutelation et la
transformation dont une partie est exporteacutee en Europe
Les myrtilles cultiveacutees aux USA sont principalement composeacutees de
- Vaccinium corymbosum
- des hybrides entre V corymbosum et V angustifolium
- des hybrides entre V ashei et V corymbosum
Ces myrtilles cultiveacutees sont commercialiseacutees majoritairement sur le marcheacute inteacuterieur et un
faible tonnage est exporteacute en Europe et surtout en Australie
En Europe de lrsquoEst et en Scandinavie la cueillette des myrtilles sauvages pour le commerce
ou lrsquoautoconsommation nrsquoest pas neacutegligeable
32 Production europeacuteenne (22) (61)
Crsquoest lrsquoAllemagne qui deacutetient les plus grandes surfaces de myrtilles cultiveacutees suivie par la
France et les Pays-Bas Elles sont aussi cultiveacutees en Italie et au Portugal mais de faccedilon moins
importante
Dans les pays scandinaves la production est principalement constitueacutee de V myrtillus Il faut
noter que des quantiteacutes non neacutegligeables de reacutecolte sont le fait de cueillettes reacutealiseacutees par des
laquo pillards raquo des cultivateurs et enfin par des voyageurs des particuliers ou des touristes qui
consomment les myrtilles sur place pour leur plaisir
33 Production franccedilaise (22) (61)
En France les Landes constituent la premiegravere zone de production des myrtilles cultiveacutees
suivies du Val de Loire du Limousin de la Sologne et des Vosges La majoriteacute des myrtilles
cultiveacutees au niveau national (1300 agrave 1500 tonnesan) est destineacutee pour 95 des tonnages au
marcheacute du frais et est exporteacutee vers lrsquoAllemagne ougrave la consommation y est plus importante
qursquoen France vers la Suisse la Grande-Bretagne lrsquoItaliehellip et en importe de Suegravede du
Canada de Pologne et de Roumanie
En ce qui concerne les myrtilles sauvages 1500 agrave 2000 tonnes sont reacutecolteacutees en France La
principale zone de production est lrsquoArdegraveche suivie du Massif central et des Vosges Cette
20
reacutecolte se fait au peigne par des personnes cueilleurs agriculteurs qui ont un laquo droit de
cueillette raquo La majoriteacute des myrtilles sauvages reacutecolteacutees est destineacutee agrave la transformation en
geleacutees confitureshellippar des ateliers drsquoexploitation ou par des entreprises proches des sites de
production Une faible quantiteacute est destineacutee agrave la vente sur les marcheacutes ou agrave des grossistes pour
la restauration et les eacutepiceries fines
Les statistiques de 2001 ont reacutecapituleacute une production mondiale drsquoenviron 190000 tonnes
(1000 tonnes pour la France) avec pregraves de 38000 hectares cultiveacutes aux Etats-Unis et au
Canada
4 Post-reacutecolte
41 Conservation (49) (61)
Une fois les myrtilles reacutecolteacutees elles doivent ecirctre placeacutees dans une chambre froide pour
garder toutes ses qualiteacutes Lrsquoideacuteal pour conserver le fruit intact pendant une dizaine de jours
est de le stocker entre 8 et 10degC Il gardera alors son parfum lrsquoarocircme en sera mecircme
deacuteveloppeacute Si on veut le conserver plus longtemps il faut le soumettre agrave des tempeacuteratures plus
basses En effet la congeacutelation est un bon proceacutedeacute de conservation pour ce fruit
42 Conditionnement (61)
Le conditionnement que lrsquoon retrouve le plus souvent est la barquette en plastique fermeacutee par
un couvercle perforeacute Ainsi les myrtilles peuvent ecirctre conserveacutees selon les conditions deacutefinies
preacuteceacutedemment
Le temps de stockage est ameacutelioreacute par lrsquoutilisation de films en polypropylegravene semi-
permeacuteables qui maintiennent le fruit sous atmosphegravere modifieacutee Ces films peuvent apregraves
sortie du froid ecirctre gardeacutes durant seulement 24 heures car au-delagrave il peut y avoir des risques
de deacuteveloppement de pourritures
21
Deuxiegraveme partie
Composition chimique
de Vaccinium myrtillus L
22
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus 1 Identification macroscopique et microscopique (43) (67)
Du point de vue macroscopique les feuilles de V myrtillus sont alternes caduques ovales agrave
elliptiques pointues courtement peacutetioleacutees et finement denteleacutees Le bord de la feuille preacutesente
des poils seacutecreacuteteurs peacutedicelleacutes agrave lrsquoextreacutemiteacute de chaque dent quelques fois briseacutes
Du point de vue microscopique la feuille preacutesente des stomates paracytiques des poils agrave
parois eacutepaisses sur la face supeacuterieure des grandes nervures des poils seacutecreacuteteurs et des rangeacutees
de cellules agrave cristaux sur la nervure principale
Du point de vue macroscopique le fruit est une baie globuleuse drsquoun noir violaceacutee nettement
deacuteprimeacutee au sommet de la taille drsquoun petit pois Cet examen doit se faire sur une baie intacte
crsquoest-agrave-dire ni attaqueacutee par des insectes ni moisie De plus elle doit ecirctre molle car elle
devient cassante si elle est stockeacutee de faccedilon prolongeacutee
Lrsquoexamen microscopique est surtout caracteacuteriseacute par la preacutesence de cellules agrave cristaux du
meacutesocarpe et de lrsquoendocarpe Le fruit frais broyeacute ou la poudre de fruit sec met en eacutevidence la
preacutesence de macles de cristaux drsquooxalate de calcium des amas de cellules scleacutereuses de
couleur rose violaceacute agrave parois canaliculeacutees et des fragments jaune-brun du teacutegument seacuteminal agrave
paroi en forme de fer agrave cheval
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus
21 Composition chimique des feuilles (11) (67)
Celle-ci renferme des tanins cateacutechiques (08 agrave 67) des cateacutechols (eacutepicateacutechol
gallocateacutechol eacutepigallocateacutecholhellip) jusqursquoagrave 10 des proanthocyanidines (dimegraveres du cateacutechol
et drsquoeacutepicateacutechol) des flavonoiumldes (heacuteteacuterosides du querceacutetol rhamnoglucosyl- arabinosyl- et
glucuronyl-querceacutetol ainsi que des heacuteteacuterosides de kaempfeacuterol astragaloside) des iridoiumldes
des acides-pheacutenols surtout des acides chlorogeacuteniques et enfin des traces drsquoalcaloiumldes
quinolizidiniques comme la myrtine et lrsquoeacutepimyrtine
La bibliographie ancienne cite la preacutesence drsquoarbutoside et drsquohydroquinone qui ne sont
preacutesents qursquoagrave lrsquoeacutetat de trace voire totalement absent Ceci peut srsquoexpliquer soit par la preacutesence
de chimiotypes soit par une contamination des lots par des espegraveces proches qui ont le mecircme
habitat eacutecologique comme Vaccinium vitis-idaea L ou Vaccinium x intermedium Ruthe
(hybride entre V myrtillus et V vitis-idaea) dans lesquels on retrouve de lrsquoarbutoside de
lrsquohydroquinone libre et du pyroside (6-O-meacutethylarbutoside)
Enfin la feuille contient de faccedilon importante du chrome et du manganegravese
23
22 Composition chimique des fruits (11) (67)
Le fruit de la myrtille est riche en eau (jusqursquoagrave 90) en oligosaccharides (3 agrave 7) et en
acides organiques (acide malique citrique et quinique) Il contient des tanins essentiellement
des tanins cateacutechiques des proanthocyanidols (dimegravere de cateacutechol et drsquoeacutepicateacutechol) une
quinzaine drsquoheacuteteacuterosides les anthocyanosides qui sont des O-glucosides des O-galactosides et
des O-arabinosides en C-3 du cyanidol peacuteonidol delphinidol malvidol et peacutetunidol des
flavonoiumldes (heacuteteacuterosides de querceacutetol et kaempfeacuterol) des flavan-3-ols monomegraveres (cateacutechol et
eacutepicateacutechol)
Enfin on retrouve drsquoautres constituants comme les acides chlorogeacuteniques cafeacuteylquiniques
des acides pheacutenols et des pectines Les iridoiumldes quant agrave eux ne sont preacutesents que dans les
fruits immatures
24
II Anthocyanosides
Avant drsquoentrer dans les deacutetails il est important de connaitre les principaux groupes de
composeacutes phytochimiques que lrsquoon retrouve dans la plupart des fruits et des leacutegumes
(Tableau I)
Familles Classes Sous-classes
Polypheacutenols Flavonoiumldes - anthocyanidines
- flavones
-flavanols
- flavanones
- flavonols
- isoflavones
- tanins
acides pheacutenoliques - hydroxycinnamates
- hydroxybenzoates
non-flavonoiumldes - stilbegravenes
- coumarines
- lignans
Terpegravenes - caroteacutenoiumldes
- monoterpegravenes
Composeacutes soufreacutes - allyl sulfides
- isothiocyanates
Saponines - triterpeacutenoiumldes
- steacuteroiumldes
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes (7)
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes
Le terme anthocyane du grec laquo anthos raquo (signifiant fleur) et laquo kyanos raquo (bleu) est utiliseacute pour
deacutesigner la substance responsable de la coloration du bleuet Ce terme srsquoapplique agrave un groupe
de pigments qui donnent la coloration rouge rose mauve pourpre bleue et violette de la
plupart des fleurs et des fruits Ces pigments existent sous deux formes soit la forme
heacuteteacuteroside (anthocyanosides ou laquo anthocyanins raquo en anglais) soit sous la forme geacutenine
correspondante (anthocyanidols ou laquo anthocyanidins raquo en anglais) On connait environ 400
25
anthocyanosides qui sont preacutesents chez tous les Angiospermes agrave lrsquoexception des
Caryophyllales ougrave seule la famille des Caryophyllaceacutees et des Molluginaceacutees en contiennent
En effet leur preacutesence chez les Gymnospermes est rare Comme nous lrsquoavons vu les
anthocyanes sont responsables de la couleur des fleurs et des fruits mais peuvent eacutegalement
coloreacutes les bracteacutees les feuilles les peacutetioles les racines voire mecircme les bulbes comme dans
lrsquooignon rouge Cependant ce sont dans les fruits que leur concentration est la plus eacuteleveacutee Ils
srsquoaccumulent dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques sous forme de solution et de faccedilon
moins freacutequente sous forme drsquoanthocyanoplastes (11) Selon Szajdek et coll (58) les parois
cellulaires et la chair ne contiennent presque pas drsquoanthocyanosides
2 Structure des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont les pigments les plus importants des plantes visibles par lrsquoœil
humain Ils appartiennent agrave une large classe de composeacutes pheacutenoliques que lrsquoon appelle les
flavonoiumldes Ce sont des glycosides des deacuteriveacutes polyhydroxy et polymethoxy du 2-
pheacutenylbenzopyrylium plus communeacutement appeleacutes cation flavylium
Les diffeacuterences existant entre les anthocyanosides individuels sont lieacutees au nombre de groupe
hydroxyl agrave la nature et agrave la position drsquoattachement des sucres agrave la moleacutecule ainsi qursquoau
nombre et agrave la nature des acides aliphatiques ou aromatiques des sucres attacheacutes agrave la
moleacutecule Dix sept anthocyanosides et leurs aglycones naturellement preacutesents dans les plantes
sont connus Cependant seulement six geacutenines sont les plus freacutequentes (voire quasiment
universelles) dans les plantes supeacuterieures Il srsquoagit du cyanidol (50) du peacutelargonidol (12)
du peacuteonidol (12) du delphinidol (12) du peacutetunidol (7) et du malvidol (7) (Figure 14)
Les glycosides de trois anthocyanidines non meacutethyleacutes les plus largement reacutepandus dans la
nature sont la delphinidine la cyanidine et la peacutelargonidine Ils sont preacutesents dans 80 des
feuilles pigmenteacutees 69 des fruits et 50 des fleurs respectivement (33)
Dans les baies les anthocyanosides sont retrouveacutes sont la forme de mono di ou triglycosides
ougrave les reacutesidus glycosides sont principalement lieacutes agrave C-3 et moins freacutequemment agrave C-5 ou C-7
Les sucres les plus courants sont le glucose le galactose le rhamnose lrsquoarabinose le rutinose
le sambubiose et le sophorose De plus les glycosides des anthocyanosides sont souvent
acyleacutes par des acides comme les acides p-coumarique cafeacuteique feacuterulique et moins
couramment par les acides p-hydroxybenzoiumlque malonique ou aceacutetique (58)
26
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines (65)
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont des pigments solubles dans lrsquoeau ils sont instables agrave la lumiegravere agrave
la tempeacuterature et agrave lrsquooxygegravene Ils agissent en rapport au cation flavylium qui est agrave la fois un
diacide faible et un bon eacutelectrophile Agrave pH tregraves acide (lt agrave 3) la forme cationique coloreacutee en
rouge est stable Agrave pH moins acide (entre 4 et 6) la moleacutecule perd deux protons donnant une
moleacutecule neutre ou ioniseacutee devenant une forme quinonoiumlde coloreacutee en bleu et stabiliseacutee par
reacutesonnance Lrsquohydratation de la moleacutecule conduit agrave la formation drsquoune laquo pseudo-base raquo
carbinolique incolore et si le pH augmente la moleacutecule se transforme en pheacutenate (forme
ioniseacutee) la structure anthocyanique eacutetant deacutetruite Ainsi les anthocyanosides en milieu neutre
ou tregraves peu acide perdent leur coloration Or dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques le
pH est tregraves rarement infeacuterieur agrave 3 Sa coloration dans le milieu vivant peut donc srsquoexpliquer
par trois meacutecanismes qui permettent une protection ou une stabilisation de la moleacutecule
- soit un meacutecanisme par lequel les acides acylant les sucres forment un laquo sandwich raquo
autour de la geacutenine permettant une copigmentation intramoleacuteculaire
- soit par une auto-copigmentation se traduisant par lrsquoempilement intermoleacuteculaire
drsquoanthocyanosides se proteacutegeant les uns avec les autres
- soit par une copigmentation avec les flavonoiumldes (11)
27
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides
41 Extraction
Les anthocyanosides sont solubles dans les solvants polaires et lrsquoextraction agrave partir des plantes
est reacutealiseacutee en utilisant du meacutethanol qui contient de faibles quantiteacutes drsquoacide chlorhydrique ou
drsquoacide formique Il est preacutefeacuterable drsquoutiliser des acides plus faibles comme lrsquoacide aceacutetique
tartrique ou citrique des acides volatils ou travailler en milieu neutre et agrave basse tempeacuterature
pour empecirccher la deacutesacylation des anthocyanosides
Lrsquoaceacutetone peut aussi ecirctre utiliseacutee pour lrsquoextraction des anthocyanosides de plusieurs plantes
Par rapport au meacutethanol acidifieacute lrsquousage de ce solvant a lrsquoavantage drsquoecirctre une technique plus
efficace et reproductible
Lrsquoextraction en phase solide peut ecirctre utiliseacutee pour la purification initiale des extraits crus
drsquoanthocyanosides (33)
42 Seacuteparation et identification
Pour la seacuteparation et lrsquoanalyse de la structure des anthocyanosides lrsquoutilisation de la
chromatographie liquide coupleacutee agrave la spectromeacutetrie de masse permet de combiner la
seacuteparation de la chromatographie liquide avec la sensibiliteacute et la seacutelectiviteacute de la spectromeacutetrie
de masse (33) Drsquoautres meacutethodes chromatographiques peuvent ecirctre utiliseacutees pour leur
seacuteparation comme les colonnes de polyamide de polyvinylpyrrolidone les reacutesines
eacutechangeuses drsquoions la chromatographie sur couche mince preacuteparative sur cellulose (10)
Lrsquoanalyse des plantes agrave anthocyanosides peut ecirctre reacutealiseacutee par la chromatographie liquide
associeacutee agrave un deacutetecteur agrave barrettes de diodes Cette analyse peut ecirctre faite par lrsquoeacutelectrophoregravese
capillaire qui selon Szajdek et coll (58) est une meacutethode avec une tregraves bonne sensibiliteacute une
haute reacutesolution coupleacutee agrave une basse consommation drsquoeacutechantillon et enfin un moindre
laquo gaspillage raquo des solvants utiliseacutes
Drsquoautres meacutethodes plus perfectionneacutees ne peuvent ecirctre utiliseacutees que par des laboratoires de
recherche
43 Dosage des anthocyanosides
Le dosage se fait par spectrophotomeacutetrie aux longueurs drsquoonde des maximums drsquoabsorption
des anthocyanosides (λ = 520 nm) Il peut ecirctre fait sur une solution alcoolique acide ou sur un
jus acidifieacute Dans tout les cas il faut le faire en milieu tregraves dilueacute pour empecirccher les moleacutecules
drsquoanthocyanosides de srsquoassocier les unes avec les autres (11)
28
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
51 Composition en anthocyanosides
Les baies de V myrtillus contiennent environ quinze anthocyanosides ces heacuteteacuterosides sont
des O-glucosides des O-galactosides et des O-arabinosides en C-3 du cyanidol du peacuteonidol
du delphinidol du malvidol et du peacutetunidol (Figure 15)
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus (14)
29
52 Donneacutees quantitatives
Vaccinum myrtillus contient une quantiteacute importante drsquoanthocyanosides (300 agrave
698 mg100 g) Lrsquoeacutequipe de Prior et coll (50) a montreacute que la quantiteacute drsquoanthocyanosides
augmente avec la maturiteacute du fruit lors de la reacutecolte
Burdulis et coll (12) ont eacutetudieacute la diversiteacute des anthocyanosides du fruit de V myrtillus dans
diffeacuterents pays comme la Lituanie la Suegravede la Russie et la Bieacutelorussie ainsi que dans
diffeacuterentes reacutegions de Lituanie comme Šilutė Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees en
anthocyanosides ont eacuteteacute retrouveacutees dans les baies ramasseacutees en Russie et en Suegravede Ces
reacutesultats sont lieacutes agrave la cueillette tardive des baies et agrave lrsquoemplacement plus au nord des
cultures en effet les baies eacutetaient plus mucircres et avaient donc une plus haute contenance en
anthocyanosides Par contre la quantiteacute en Beacuteliorussie et en Lituanie est similaire
53 Donneacutees qualitatives
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Burdulis et coll (12) ont observeacute que lrsquoanalyse
chromatographique ne reacutevegravele pas de diffeacuterence dans la composition qualitative des
anthocyanosides Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees sont repreacutesenteacutees par la cyanidine (quantiteacute
moyenne de 53 ngml) suivie de la delphinidine et la peacutetunidine en quantiteacute 25 fois plus
faible que la cyanidine et pour terminer la malvidine et la peacuteonidine en quantiteacute encore plus
faible En Suegravede seule la malvidine a eacuteteacute retrouveacutee en plus grande quantiteacute parmi tous les
anthocyanosides (15 fois plus eacuteleveacutee que celle de la peacutetunidine et la delphinidine)
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus
Riihinen et coll (53) ont eacutetudieacute la distribution des composeacutes pheacutenoliques dans les diffeacuterents
organes de V myrtillus et drsquoun hybride entre le V corymbosum et V augustifolium
Ainsi les anthocyanosides sont preacutesents dans la pulpe et la peau des fruits de V myrtillus
constituant 2 du poids frais de la peau de la baie cela indique que lrsquoextraction du jus agrave
partir de la peau pourrait ecirctre une source riche drsquoanthocyanosides Les feuilles rouges des
myrtilles ont de faibles quantiteacutes drsquoanthocyanosides et ne contiennent que des glycosides de
cyanidine alors que les fruits contiennent les cinq types drsquoanthocyanosides (delphinidine
cyanidine peacuteonidine peacutetunidine et malvidine-glycosides) Les feuilles sont donc des sources
moins inteacuteressantes pour lrsquoutilisation nutraceutique et pharmaceutique que les fruits
30
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
Des eacutetudes ont eacuteteacute reacutealiseacutees sur la pharmacocineacutetique des anthocyanosides agrave partir drsquoun
produit commercial le Myrtocyanreg Celui-ci est un extrait hautement purifieacute de baies de
Vaccinum myrtillus dans lequel les anthocyanosides sont les composants actifs les plus
importants (36)
Lorsque lrsquoextrait est injecteacute chez le rat par voie intraveineuse ou parenteacuterale aux doses de 20-
40 mgkg ou 25 mgkg respectivement les anthocyanosides disparaissent de la circulation
sanguine et sont distribueacutes rapidement dans les tissus Lrsquoeacutelimination se fait de faccedilon
preacutedominante par les urines (25-30) 24 heures apregraves lrsquoadministration et une plus faible
quantiteacute est eacutelimineacutee via la bile (15-20)
Le Myrtocyanreg
injecteacute par voie intrapeacuteritonale agrave la dose de 200 mgkg montre que les
anthocyanosides ont une affiniteacute particuliegravere pour certains tissus notamment les tissus reacutenaux
et cutaneacutes dans ces tissus les anthocyanosides y demeurent plus longtemps que dans le
plasma Cette observation pourrait expliquer leur effet biologique agrave long terme
Lrsquoadministration orale de Myrtocyanreg
agrave la dose de 400 mgkg chez le rat montre que les
anthocyanosides sont rapidement absorbeacutes par le tractus gastro-intestinal et atteignent un pic
plasmatique quinze minutes apregraves lrsquoadministration Par contre ils ne demeurent pas
longtemps dans le sang car aucune concentration ne peut ecirctre mesureacutee apregraves deux heures Par
voie orale environ 4 des anthocyanosides sont eacutelimineacutes par la bile apregraves 24 heures
En conclusion par voie orale la biodisponibiliteacute faible des anthocyanosides peut ecirctre due agrave
une forte meacutetabolisation heacutepatique en meacutetabolites non deacutetectables par la meacutethode analytique
Le pic plasmatique de 2-3 microgml drsquoanthocyanosides non modifieacutes pourrait ecirctre suffisant pour
garantir les effets biologiques des anthocyanosides apregraves une administration orale Enfin des
tests in vitro ont reporteacute une activiteacute des anthocyanosides agrave des concentrations de 2 agrave 7 microgml
(43)
En 2006 Ichiyanagi et coll (28) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute et la distribution dans les tissus
drsquoun autre extrait de V myrtillus (Bilberon 25reg
constitueacutes de 25 anthocyanosides) administreacute
oralement ou par voie intraveineuse agrave des rats
Pour rappel les aglycones sont de cinq types la cyanidine la delphinidine la peacutetunidine la
peacuteonidine et la malvidine
Seules la malvidine la peacuteonidine et la peacutetunidine sont des structures aglycones meacutethyleacutes ces
anthocyanidines sont glycosyleacutees pour former les anthocyanosides qui repreacutesentent une
structure beaucoup plus stable Trois sortes de sucres sont rattacheacutees agrave la structure le
glucose le galactose et lrsquoarabinose
31
Ainsi le niveau plasmatique de chaque anthocyanoside est eacutevalueacute par chromatographie
liquide haute performance Lrsquoeacutetude montre clairement que lrsquoabsorption le meacutetabolisme et
lrsquoeacutelimination sont diffeacuterents pour chaque anthocyanoside Ichiyanagi et coll (27) ont calculeacute
le rapport C15dose deacutefini par la concentration plasmatique de chaque anthocyanoside quinze
minutes apregraves administration orale diviseacutee par sa concentration initiale dans lrsquoextrait de
Bilberon 25reg
(soit le rapport C15dose) La comparaison de ces rapports a montreacute que pour les
anthocyanosides posseacutedant le mecircme aglycone les galactosides ont un rapport C15dose plus
important suivi des glucosides et des arabinosides agrave lrsquoexception de la malvidine La
diffeacuterence est significative entre les anthocyanosides glucosides et galactosides Par contre
lorsque les anthocyanosides portant le mecircme sucre sont compareacutes les glycosides de cyanidine
et delphidine preacutesentent des valeurs plus eacuteleveacutees que les glycosides de malvidine et
peacutetunidine alors que la peacuteonidine 3-O-β-D-galactoside affiche les valeurs les plus hautes
parmi tous les anthocyanosides
En conclusion les niveaux plasmatiques deacutependent de plusieurs facteurs tels que lrsquoabsorption
gastro-intestinale le taux de distribution dans les tissus et leur excreacutetion via les urines et la
bile
La demi-vie est eacutevalueacutee par administration intraveineuse de lrsquoextrait pour les
anthocyanosides portant le mecircme sucre les demi-vies de la delphinidine et de la cyanidine
sont plus eacuteleveacutees que leurs analogues O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacuteonidine et la
peacutetunidine Par contre lorsque les auteurs comparent les sucres porteacutes par le mecircme aglycone
aucune diffeacuterence significative nrsquoest observeacutee entre les galactosides et les glucosides mais les
arabinosides affichent des valeurs plus faibles Seule la malvidine ne preacutesente pas de
diffeacuterence significative entre galactoside et arabinoside compareacutee aux autres anthocyanidines
Ichiyanagi et coll (28) ont eacutevalueacute la biodisponibiliteacute de chaque anthocyanoside Celle-ci varie
de 061 agrave 182 et elle est de 093 dans le meacutelange de lrsquoextrait Bilberon 25reg
Ainsi la
biodisponibiliteacute des anthocyanosides O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacutetunidine et la
peacuteonidine est plus eacuteleveacutee que la delphinidine et la cyanidine particuliegraverement pour les
galactosides (diffeacuterence significative entre la cyanidine et la peacuteonidine galactoside et entre la
delphinidine et la peacutetunidine arabinoside) Cependant les biodisponibiliteacutes des glycosides de
peacutetunidine sont plus eacuteleveacutees que celles des glycosides de malvidine mecircme si la malvidine est
lrsquoanalogue O-meacutethyl de la peacutetunidine-glycoside Ainsi la biodisponibiliteacute importante des
glycosides de peacutetunidine pourraient ecirctre expliqueacutee par une absorption gastro-intestinale
prolongeacutee De plus lrsquoexceptionnelle forte biodisponibiliteacute de la peacuteonidine 3-O-β-D-
galactoside traduirait une absorption gastro-intestinale plus efficace Lorsque les auteurs
32
comparent la biodisponibiliteacute entre les anthocyanosides sur la base du type de sucre attacheacute agrave
la structure les galactosides preacutesentent la plus haute valeur suivis des arabinosides puis des
glucosides qui preacutesentent les valeurs les plus basses (agrave lrsquoexception de la delphinidine et de la
malvidine)
Ces eacutetudes sur le meacutetabolisme et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides montrent que les
anthocyanosides majoritairement retrouveacutes dans lrsquourine et la bile sont les glycosides de
peacuteonidine et malvidine crsquoest-agrave-dire des anthocyanosides O-meacutethyleacutes Les pourcentages des
anthocyanosides dans les urines et la bile durant les quatre premiegraveres heures apregraves
administration intraveineuse sont seulement de 308 et 134 respectivement suggeacuterant une
meacutetabolisation ou une accumulation des anthocyanosides dans les tissus La quantiteacute et la
nature des anthocyanosides dans le foie et les reins diffegraverent de ceux du meacutelange Bilberon
25reg
indiquant une meacutetabolisation heacutepatique et reacutenale De plus lrsquoapparition de nouveaux pics
montreacutes par la chromatographie liquide haute performance souligne la preacutesence de
meacutetabolites drsquoanthocyanosides
En ce qui concerne la distribution dans les tissus les auteurs ont montreacute qursquoapregraves 15 minutes
drsquoune administration orale de lrsquoextrait de V myrtillus les anthocyanosides retrouveacutes
majoritairement dans les reins et le foie sont des glycosides de peacuteonidine et de malvidine les
anthocyanosides deacutetecteacutes sont des glucosides et galactosides de peacuteonidine malvidine et
peacutetunidine des meacutetabolites 4rsquo-O-meacutethyl de cyanidine delphinidine et peacutetunidine 3-O-β-D-
glucoside ou galactoside alors que les arabinosides ne sont pas deacutetecteacutes agrave lrsquoexception du 4rsquo-
O-meacutethyl delphinidine 3-O-α-L-arabinoside Les meacutetabolites comme les glucosides-
glucuronides de cyanidine et de delphinidine sont aussi preacutesents dans les tissus
particuliegraverement au niveau reacutenal
Apregraves administration intraveineuse les glycosides de cyanidine et delphinidine sont preacutesents agrave
lrsquoeacutetat de traces dans les tissus
Pour conclure plusieurs points ont pu ecirctre eacutetablis et clarifieacutes premiegraverement tous les
anthocyanosides de lrsquoextrait atteignent leur niveau plasmatique maximum en 15 agrave 30 minutes
apregraves administration orale soulignant une absorption efficace au niveau de lrsquoestomac et de
lrsquointestin grecircle Cette absorption deacutepend du type de sucre attacheacute agrave lrsquoaglycone les galactosides
eacutetant par exemple plus efficacement absorbeacutes que les arabinosides Deuxiegravemement la
biodisponibiliteacute deacutepend de plusieurs facteurs comme le meacutetabolisme lrsquohydrophobiciteacute du
cycle B de lrsquoaglycone et le type de sucre attacheacute agrave la structure De plus la synergie entre
anthocyanosides eux-mecircmes ou anthocyanosides avec drsquoautres composants preacutesents dans
lrsquoextrait peuvent moduler lrsquoabsorption au niveau du tractus gastro-intestinal
33
Sakakibara et coll (54) ont eacutetudieacute la distribution et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides chez la
souris apregraves une administration orale de 100 mgkg de poids corporel de V myrtillus
Les anthocyanosides absorbeacutes sous leur forme initiale ou meacutethoxyleacutee quinze minutes apregraves
une administration orale sont eacutelimineacutes via les urines dans les vingt quatre heures La totaliteacute
des anthocyanosides atteignent une concentration plasmatique maximale drsquoenviron 12 microM
quinze minutes apregraves administration orale puis cette concentration diminue brusquement Les
glycosides de malvidine pourraient ecirctre les anthocyanosides majoritaires dans des conditions
physiologiques en effet les anthocyanosides meacutethoxyleacutes ont des proprieacuteteacutes leur permettant
de demeurer dans lrsquoorganisme apregraves absorption De plus les glycosides de delphinidine et
cyanidine subissent une meacutethylation pouvant donner les glycosides de peacuteonidine et malvidine
par conseacutequent les anthocyanosides meacutethoxyleacutes peuvent ecirctre produits par la conversion
drsquoautres anthocyanosides eacutegalement absorbeacutes
Lrsquoexcreacutetion urinaire des anthocyanosides apregraves administration de 500 mgkg de poids corporel
de lrsquoextrait de V myrtillus a montreacute que les anthocyanosides sont eacutelimineacutes dans lrsquourine dans
les six premiegraveres heures apregraves administration orale De faibles quantiteacutes sont eacutelimineacutees entre 6
et 24 heures dont un unique pic drsquoexcreacutetion entre 6 et 12 heures Les quantiteacutes
drsquoanthocyanosides excreacuteteacutees dans lrsquourine dans les 24 heures suivant lrsquoadministration sont
faibles et ne repreacutesentent que 188 des anthocyanosides totaux ingeacutereacutes Par conseacutequent
quelque soit les quantiteacutes drsquoextrait administreacutees les anthocyanosides absorbeacutes par le corps
sont excreacuteteacutes par voie urinaire en 24 heures
Lrsquoeacutetude de la distribution des antocyanosides dans les organes a eacuteteacute reacutealiseacutee sur des souris
ayant une alimentation contenant 05 des anthocyanosides de V myrtillus durant 2
semaines Ce sont les glycosides de malvidine (surtout le 3-glucoside et 3-galactoside de
malvidine) les anthocyanosides majoritairement preacutesents dans des organes tels que le foie les
reins les testicules et les poumons Lrsquoeacutetude de Sakakibara et coll (54) est la premiegravere agrave avoir
montreacute la preacutesence des anthocyanosides dans les testicules de souris
Les auteurs montrent aussi que le foie est sucircrement lrsquoorgane cible des anthocyanosides car
515 y sont localiseacutes Par contre les anthocyanosides nrsquoont pas eacuteteacute deacutetecteacutes dans la rate le
thymus le cœur les muscles le cerveau la graisse blanche ou les yeux
Chez lrsquohomme la plupart des eacutetudes montrent une faible biodisponibiliteacute des anthocyanosides
(faible taux drsquoexcreacutetion) (3)
Cooke et coll en 2006 (18) ont deacutemontreacute la preacutesence dans lrsquourine drsquoanthocyanosides sous
forme inchangeacutee et de glucuronides drsquoanthocyanidines (meacutetabolites) apregraves une administration
orale de Mirtoselectreg
La preacutesence de glucuronides drsquoanthocyanidines dans lrsquourine suggegravere
34
une transformation des anthocyanosides en leurs deacuteriveacutes non glycosyleacutes lesquels subiront
plus tard une biotransformation Les anthocyanidines sont suspecteacutees pour avoir une meilleure
activiteacute biologique que leurs preacutecurseurs glycosyleacutes
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus
1 Acides pheacutenoliques
Les acides pheacutenoliques dans les fruits des baies sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique et benzoiumlque Le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide benzoiumlque inclus les acides p-
hydroxybenzoiumlque salicylique gallique et ellagique Dans le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique on trouve les acides p-coumarique cafeacuteique et feacuterulique Les deacuteriveacutes drsquoacide
hydroxycinnamique sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide cafeacuteique comme les acides
chlorogeacutenique et neacuteochlorogeacutenique Dans Vaccinum myrtillus des quantiteacutes significatives
drsquoacides p-coumarique et feacuterulique sont retrouveacutees Lrsquoacide hydroxycinnamique se trouve
dans tous les organes de la myrtille mais les quantiteacutes les plus importantes sont retrouveacutees
dans les feuilles il est le principal composeacute pheacutenolique du rhizome Cet acide
hydroxycinnamique joue un rocircle dans la protection de la plante vis-agrave-vis drsquoagents pathogegravenes
et drsquoautres facteurs de stress comme une radiation solaire intense une basse tempeacuterature ou
une blessure (58)
2 Tanins
Les tanins sont des composeacutes pheacutenoliques hydrosolubles importants dans les fruits des baies
Ils sont de deux types
- les tanins hydrolysables (oligo- ou polyesters drsquoun sucre et drsquoun nombre variant de
moleacutecules drsquoacide-pheacutenol) Le sucre est le plus souvent le glucose et lrsquoacide-pheacutenol est soit
lrsquoacide hexahydroxydipheacutenique et ses deacuteriveacutes drsquooxydation pour les tanins ellagiques soit
lrsquoacide gallique dans le cas des tanins galliques
- les tanins non hydrolysables condenseacutes sont des polymegraveres flavaniques constitueacutes
drsquouniteacutes flavan-3-ols lieacutees entre elles par des liaisons carbone-carbone On les appelle
eacutegalement les proanthocyanidols qui en milieu acide et agrave chaud donnent des anthocyanidols
(11)
Les tanins donnent le goucirct aux tartes et sont responsables du changement de couleur des fruits
et des produits deacuteriveacutes des fruits Le goucirct des tartes reacutesulte de lrsquointeraction entre les tanins et
les reacutecepteurs gustatifs de la bouche De plus les tanins stabilisent les anthocyanosides
35
preacutesents en quantiteacute importante dans le fuit de la myrtille en se liant agrave eux pour former des
copolymegraveres (58)
Dans V myrtillus les feuilles vertes et rouges sont les meilleures sources de procyanidines
Leurs proportions dans les feuilles sont drsquoenviron 7 du poids sec il conviendrait donc
drsquoapporter un inteacuterecirct aux feuilles qui actuellement lors de la reacutecolte et du traitement des
fruits constituent des deacutechets alors que ce sont des parties de la plante riche en
proanthocyanidines connus pour leurs activiteacutes antimicrobiennes et antioxydantes (53)
3 Flavonols
Les flavanols sont repreacutesenteacutes par la querceacutetine la myriceacutetine le kaempfeacuterol et
lrsquoisorhamneacutetine abondants dans les plantes alimentaires comme lrsquooignon le theacute les pommes
et les baies
Le fruit de V myrtillus contient de faccedilon preacutedominante de la querceacutetine eacutegalement preacutesent
avec le kaempfeacuterol dans les feuilles Cependant leur proportion est plus importante dans les
feuilles rouges que dans les feuilles vertes car les radiations solaires augmentent leur quantiteacute
(on peut supposer un rocircle dans la photoprotection) (58)
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans Vaccinium myrtillus
Les stilbegravenes sont un groupe de composants qui inclut notamment le resveacuteratrol retrouveacute
initialement dans les grappes de raisin De petites quantiteacutes de trans-resveacuteratrol ont eacuteteacute
retrouveacutees dans les baies et notamment dans la myrtille (de lrsquoordre de 678 microgg) Cette plante
contient eacutegalement de petites quantiteacutes de caroteacutenoiumldes (58)
Autres ces composeacutes pheacutenoliques la myrtille est eacutegalement constitueacutee drsquoun ensemble de
micro- et macronutriments reacutepertorieacute dans la table de composition nutritionnelle des aliments
du Ciqual (centre drsquoinformation sur la qualiteacute des aliments) 2008 de lrsquoAfssa (71) (Annexe I)
36
Troisiegraveme partie
Inteacuterecircts theacuterapeutiques
de Vaccinium myrtillus L
37
En Europe les baies et les feuilles de myrtille ont largement eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine
populaire les baies pour leurs proprieacuteteacutes astringentes toniques et antiseptiques dans le
traitement de la diarrheacutee la dysenterie (maladie infectieuse du cocirclon) les heacutemorroiumldes les
inflammations gastro-intestinales et les infections buccales (stomatites aphtes muguet des
enfants) Elles sont eacutegalement utiliseacutees pour les deacutesordres urinaires Quant aux feuilles elles
eacutetaient particuliegraverement utiliseacutees dans le diabegravete gracircce agrave leurs proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
En application locale une infusion ou une deacutecoction de feuilles de myrtilles eacutetaient utiliseacutees
lors drsquoinflammations oculaires buccales drsquoinfections cutaneacutees et dans les brucirclures
Agrave partir du XVIIIegraveme
des herboristes utilisaient la baie de myrtille dans des preacuteparations pour
traiter certaines maladies intestinales incluant la fiegravevre typhoiumlde elle eacutetait aussi utiliseacutee dans
les infections buccales cutaneacutees urinaires dans la goutte et le rhumatisme (43) Les usages
valideacutes par la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la Commission E seront
deacuteveloppeacutes dans la derniegravere partie de cette thegravese
La myrtille inteacuteresse encore actuellement les scientifiques et fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes
in vitro et in vivo elle est aussi preacutesente dans quelques eacutetudes cliniques Certaines de ces
eacutetudes seront reacutepertorieacutees dans les chapitres qui vont suivre
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire
En 1990 Morazzoni et coll (44) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vivo et in vitro drsquoun complexe
drsquoanthocyanosides de V myrtillus dont le nom deacuteposeacute est Myrtocyanreg
(contenant environ
38 drsquoanthocyanosides) sur lrsquoactiviteacute plaquettaire en comparaison avec drsquoautres anti-
agreacutegants plaquettaires comme lrsquoacide aceacutetylsalicylique le dipyridamole et la ticlopidine
Lrsquoeacutetude in vitro sur plasma de lapin montre un effet inhibiteur de V myrtillus sur lrsquoagreacutegation
plaquettaire induite par lrsquoadeacutenosine diphosphate (ADP) le collagegravene et lrsquoarachidonate de
sodium (sel drsquoacide arachidonique) cette inhibition est fonction de la concentration en
anthocynosides Cette activiteacute est comparable agrave celle du dipyridamole mais est moins efficace
que celle de lrsquoacide aceacutetylsalicylique Toutefois les anthocyanosides de la myrtille et le
dipyridamole sont tous les deux efficaces pour inhiber lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par
lrsquoADP exogegravene alors que lrsquoacide aceacutetylsalicylique nrsquoa pas montreacute drsquoactiviteacute Lrsquoeffet anti-
agreacutegant plaquettaire des anthocyanosides de V myrtillus perdure apregraves certaines
manipulations chimiques et physiques comme lrsquoeacutebullition pendant cinq minutes le chauffage
38
pendant trente minutes agrave 56degC la digestion agrave la trypsine et lrsquoincubation en preacutesence
drsquoadeacutenosine phosphate
Lrsquoaction in vitro des anthocyanosides de V myrtillus sur la circulation sanguine chez le rat
montre une inhibition de lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP de maniegravere dose-
deacutependante et par voie arteacuterielle
In vivo lrsquoadministration orale du complexe anthocyanosidique de V myrtillus agrave une
concentration variant de 5 agrave 400 mgkg chez le rat montre une augmentation du temps de
saignement Cette activiteacute du complexe perdure pendant 24 heures (mecircme observation avec
lrsquoassociation acide aceacutetylsalicylique-dipyridamole) et le temps de saignement retourne agrave des
valeurs normales apregraves 48 heures Par contre cette augmentation du temps de saignement nrsquoa
pas donneacute drsquoeffet ni sur lrsquoheacutematocrite ni sur les voies intrinsegraveques et extrinsegraveques de la
coagulation sanguine
Lrsquoadministration orale de 400 mgkg du complexe anthocyanosidique de myrtille agrave des souris
deux heures avant lrsquoeacutetude diminue lrsquoadheacutesion plaquettaire cette action eacutetant similaire agrave celle
observeacutee avec 100 mgkg de ticlopidine administreacutes dans les mecircmes conditions
expeacuterimentales
Morazzoni et coll (44) ont eacutegalement eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vitro drsquoun produit composeacute des trois
principaux anthocyanosides (malvidine 3-O-glucoside cyanidine 3-O-glucoside et
delphinidine 3-O-glucoside) trouveacutes dans lrsquoextrait Myrtocyanreg
afin de comprendre leur
impact sur lrsquoeffet anti-agreacutegant Ce meacutelange montre la mecircme activiteacute inhibitrice sur
lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP le collagegravene et lrsquoarachidonate de sodium que
lrsquoextrait Myrtocyanreg
Notons que les anthocyanosides du produit reconstitueacute sont retrouveacutes
avec le mecircme ratio que ceux de lrsquoextrait
Une eacutetude clinique incluant 30 patients en bonne santeacute avec une agreacutegation plaquettaire
normale a deacutemontreacute la capaciteacute drsquoanthocyanosides de myrtille Myrtocyanreg
administreacute
pendant 30 et 60 jours agrave la dose de 480 mgjour seul ou en association avec lrsquoacide ascorbique
(3 gjour) agrave reacuteduire lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par le collagegravene ou lrsquoADP La meilleure
activiteacute est deacutetenue par Myrtocyanreg
seul ou associeacute agrave lrsquoacide ascorbique compareacutee agrave la
vitamine C seule (5)
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus riche en anthocyanosides a montreacute une forte inhibition
de lrsquoagreacutegation plaquettaire dans des expeacuteriences in vivo et in vitro sans interfeacuterer avec les
facteurs plasmatiques Lrsquoactiviteacute des trois principaux anthocyanosides de lrsquoextrait Myrtocyanreg
a permis de mettre en eacutevidence leur forte implication dans lrsquoeffet anti-agreacutegant plaquettaire
De plus lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans lrsquoinhibition plaquettaire est
39
lrsquoaugmentation des niveaux drsquoadeacutenosine monophosphate cyclique (AMP cyclique) soit par
stimulation de lrsquoadeacutenylate cyclase soit par inhibition de lrsquoAMP cyclique-phosphodiesteacuterase
Or il a eacuteteacute observeacute que les aglycones de lrsquoextrait Myrtocyanreg
sont des inhibiteurs potentiels
de lrsquoAMP cyclique- phosphodiesteacuterase de plusieurs tissus Ce meacutecanisme nrsquoest pas le seul car
un autre a eacuteteacute proposeacute il concernerait les anthocyanidines (principalement la delphinidine et
la cyanidine) qui affecteraient les fonctions plaquettaires par leur action antioxydante cette
action se ferait en interfeacuterant avec les processus membranaires cellulaires incluant les eacutetapes
initiales plaquettaires et la production des prostaglandines des cellules endotheacuteliales
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires
Les anthocyanosides de V myrtillus (Myrtocyanreg
) sont couramment utiliseacutes comme agents
vasoprotecteurs inhibant lrsquoagreacutegation plaquettaire et la formation de thrombus De plus il a
eacuteteacute montreacute que les anthocyanosides de myrtille administreacutes per os (100 mgkg pc) reacuteduisent
la reacuteponse contractile du muscle lisse vasculaire et montrent une activiteacute prostacycline-like
(PGI2-like) (45) Cette eacutetude est en accord avec celle de Bettini et coll (9) qui ont montreacute que
les anthocyanosides de V myrtillus ont un effet relaxant in vitro pouvant ecirctre meacutedieacute par la
stimulation de la synthegravese de prostaglandines vasodilatatrices dans les vaisseaux sanguins
En conclusion agrave lrsquoinverse de lrsquoacide aceacutetylsalicylique qui in vivo reacuteduit la production
arteacuterielle de PGI2 en agissant comme un inhibiteur de la synthegravese des prostaglandines les
anthocyanosides de V myrtillus stimulent la production drsquoune substance PGI2-like par le tissu
vasculaire
Les anthocyanosides de myrtille comme drsquoautres bioflavonoiumldes srsquoopposent agrave la contraction
de plusieurs types de muscles lisses en reacuteponse agrave des agents varieacutes comme lrsquoangiotensine II la
seacuterotonine le baryum lrsquohistamine ou lrsquoaceacutetylcholine En effet lrsquoaceacutetylcholine agrave des
concentrations variant de 1 agrave 2 ngml induit une relaxation dans toutes les preacuteparations alors
qursquoagrave hautes concentrations elle induit une contraction (9)
Bettini et coll (9) ont rechercheacute eacutegalement lrsquoeffet vasodilatateur du complexe dans les
preacuteparations traiteacutees avec du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration du facteur
relaxant deacuteriveacute de lrsquoendotheacutelium (EDRF ou endothelium-derived relaxing factor) qui est une
substance vasodilatatrice
Le Myrtocyanreg agrave une concentration entre 50 et 200 microgml reacuteduit la reacuteponse contractile des
artegraveres coronaires agrave lrsquoaceacutetylcholine cette activiteacute est drsquoautant plus marqueacutee lorsque lrsquoacide
ascorbique est ajouteacute (100-300 microgml) Mais cet effet est diminueacute en preacutesence drsquoindomeacutetacine
ou drsquoaceacutetylsalicylate de lysine connus pour ecirctre des inhibiteurs de la cyclo-oxygeacutenase A des
40
concentrations entre 1 et 2 microgml ces deux substances nrsquoaffectent pas la diminution du tonus
induite par Myrtocyanreg alors qursquoagrave des concentrations plus eacuteleveacutees elles le reacuteduisent sans
toutefois lrsquoabolir complegravetement mecircme aux plus fortes concentrations
Une autre expeacuterience de cette eacutetude consiste agrave traiter les segments des artegraveres coronaires avec
du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration de lrsquoEDRF Selon la concentration le
bleu de meacutethylegravene a plusieurs effets entre 1 et 8 microgml il ne modifie pas le tonus des
preacuteparations entre 8 et 18 microgml il ne provoque qursquoune lente augmentation du tonus de
plusieurs preacuteparations alors qursquoentre 18 et 24 microgml il induit une reacuteelle augmentation du
tonus des artegraveres coronaires suivie drsquoune relaxation assez marqueacutee Lrsquoeffet des
anthocyanosides de Vaccinum myrtillus a eacuteteacute eacutetudieacute apregraves disparition de lrsquoeffet du bleu de
meacutethylegravene son effet relaxant perdure partiellement malgreacute le preacute-traitement au bleu de
meacutethylegravene
En conclusion lrsquoeffet vasodilatateur de Myrtocyanreg
deacutepend agrave la fois de la libeacuteration des
prostacyclines mais aussi drsquoune faciliteacute agrave libeacuterer lrsquoEDRF les prostacyclines et lrsquoEDRF sont
probablement les meacutediateurs fonctionnels des anthocyanosides de V myrtillus
2 Activiteacute vasoprotectrice
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique
Une preacuteparation drsquoanthocyanosides de V myrtillus eacutequivalant agrave 25 drsquoanthocyanosides
administreacutee par voie intrapeacuteritoneacuteale ou per os agrave des lapins montre une reacuteduction de la
permeacuteabiliteacute capillaire de la peau (augmentant avec le temps) preacutealablement stimuleacutee par le
chloroforme lrsquohistamine ou la bradykinine (36)
Jonadet et coll (29) ont compareacute sur des rats lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides
extraits de Vitis vinifera L de V myrtillus (Difrarelreg
) et de Pinus maritimus (appeleacute
maintenant Pinus pinaster Aiton) Ainsi lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides est
par ordre deacutecroissant la suivante anthocyanosides de Vitis vinifera gt anthocyanosides de V
myrtillus gt proanthocyanosides de Pinus maritimus Les auteurs soulignent que les
anthocyanosides agissent agrave travers une activiteacute anti-proteacuteasique deacutemontreacutee in vitro En effet
ils ont montreacute que les anthocyanosides des extraits preacutealablement citeacutes possegravedent des activiteacutes
inhibitrices vis-agrave-vis drsquoenzymes proteacuteolytiques comme lrsquoeacutelastase laquelle peut intervenir dans
la deacutegradation du tissu conjonctif des fibres eacutelastiques et jouerait un rocircle dans des affections
pathologiques comme lrsquoatheacuteroscleacuterose lrsquoemphysegraveme pulmonaire et lrsquoarthrite rhumatoiumlde Les
anthocyanosides apportent cette activiteacute anti-proteacuteasique en inhibant la libeacuteration des peptides
41
vasoactifs En effet lrsquoune des causes de lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire est
lrsquointervention de meacutediateurs chimiques comme lrsquohistamine la 5-hydroxytryptamine et les
kinines Enfin Jonadet et coll (29) ont reporteacute une activiteacute anti-trypsique et anti-
chymotrypsique (proteacuteases digestives) des substances pharmacologiques des extraits eacutetudieacutes
22 Action sur la reacutesistance capillaire
Lietti et coll (36) ont deacutemontreacute dans une expeacuterience lrsquointeacuterecirct des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus sur la reacutesistance vasculaire Pour cela ils les administrent par voie
intrapeacuteritoneacuteale agrave des rats preacutealablement alimenteacutes pendant 4 semaines avec une alimentation
deacuteficitaire en facteur P induisant ainsi une fragiliteacute capillaire Apregraves mesure agrave plusieurs
heures de la reacutesistance capillaire les reacutesultats montrent une eacuteleacutevation remarquable de la
reacutesistance capillaire de la peau induite par les anthocyanosides de V myrtillus Lrsquoactiviteacute est
maximale 4 heures apregraves le traitement et ne change pas apregraves 6 heures Cette activiteacute est
compareacutee avec celle de la rutine (substance de la famille des bioflavonoiumldes) laquelle montre
un effet comparable agrave 200 mgkg mais qui agrave 100 mgkg nrsquoest presque plus efficace
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Lietti et coll (36) ont montreacute que lrsquoadministration
des anthocyanosides de V myrtillus dans la patte de rats par voie intraveineuse et par voie
orale respectivement 15 et 60 minutes preacuteceacutedant lrsquoinjection de carrageacutenine (substance
induisant un œdegraveme) entraicircne une diminution de lrsquoœdegraveme formeacutee de maniegravere dose-
deacutependante En effet lrsquoutilisation de 200 mgkg de preacuteparation est plus efficace que 50 mgkg
sur le volume de lrsquoœdegraveme La dose de 200 mgkg permet une reacuteduction de lrsquoœdegraveme agrave 45
Lrsquoapplication topique de la preacuteparation 60 secondes suivant lrsquoinjection de carrageacutenine induit
eacutegalement une reacuteduction du volume de lrsquoœdegraveme agrave 39 Cette eacutetude montre lrsquoaction anti-
inflammatoire de V myrtillus
Les eacutetudes in vivo reacutealiseacutees sur des animaux montrent que les anthocyanosides de V myrtillus
sont vasoprotecteurs ils inhibent lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire augmentent la
reacutesistance vasculaire et reacuteduisent le volume de lrsquoœdegraveme de maniegravere dose-deacutependante et ses
activiteacutes perdurent dans le temps De plus ils sont plus efficaces que la rutine ou la
meacutepyramine (substance antiseacuterotoninergique et antihistaminergique) Enfin les
anthocyanidines restent longtemps dans les tissus de la peau riche en collagegravene et en
mucopolysaccharides Crsquoest pourquoi il serait inteacuteressant de mettre en place des expeacuteriences
42
pour eacutetudier la relation entre ces substances et les anthocyanosides afin de voir si ce lien
pourrait expliquer lrsquoactiviteacute pharmacologique exerceacutee sur les vaisseaux sanguins (36)
24 Action antiatheacuterogegravenique
En 2009 une eacutetude meneacutee par Mauray et coll (41) a deacutemontreacute qursquoune suppleacutementation
alimentaire avec des extraits de V myrtillus limitait la progression des leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques dans un modegravele de souris deacuteficitaire en apolipoproteacuteine E Lrsquoaction
inhibitrice du deacuteveloppement de la plaque atheacuteromateuse est indeacutependante des modifications
du statut antioxydant plasmatique des marqueurs biologiques du stress oxydant et du profil
lipidique suggeacuterant lrsquoimplication drsquoautres meacutecanismes drsquoactions (peut-ecirctre lrsquoaction anti-
inflammatoire) De plus des deux extraits utiliseacutes (lrsquoun riche en anthocyanosides extraits de
myrtilles non traiteacutees et le deuxiegraveme extraits de myrtilles fermenteacutees par des levures) la
meilleure activiteacute antiatheacuterogegravene est deacutetenue par lrsquoextrait de myrtilles fermenteacutees suggeacuterant la
formation par la fermentation de nouveaux composeacutes avec des proprieacuteteacutes beacuteneacutefiques pour la
santeacute les pigments polymeacuteriques deacuteriveacutes des anthocyanosides atteacutenueraient mieux les leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques que les anthocyanosides de lrsquoextrait non traiteacute En effet lors de la
fermentation les anthocyanosides se condensent avec drsquoautres composeacutes preacutesents dans le fruit
de la myrtille Il reste alors agrave deacuteterminer les composeacutes responsables de lrsquoeffet observeacute et les
meacutecanismes drsquoaction impliqueacutes
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice
Des reacutesultats pharmacologiques prometteurs des extraits de fruits de V myrtillus issus
drsquoeacutetudes cliniques encouragent leur utilisation chez lrsquohomme dans le traitement des maladies
vasculaires peacuteripheacuteriques pouvant associer fragiliteacute capillaire alteacuteration de la permeacuteabiliteacute et
insuffisances veineuses chroniques des membres infeacuterieurs Drsquoautres eacutetudes cliniques ont
montreacute lrsquoefficaciteacute de la myrtille dans les symptocircmes cliniques post-opeacuteratoires
Ainsi les anthocyanosides de V myrtillus (480 mg par voie orale pendant 30 jours) ont
montreacute leur capaciteacute agrave diminuer les symptocircmes subjectifs (douleur parestheacutesiehellip) et objectifs
(œdegraveme des membres pheacutenomegravenes dyschromiques de la peauhellip) de patients atteints du
syndrome variqueux des membres infeacuterieurs tout comme les patients souffrant de fragiliteacute
capillaire ougrave une administration orale drsquoanthocyanosides de V myrtillus (160-800 mgjour)
reacuteduit les symptocircmes cliniques drsquoune reacutesistance capillaire diminueacutee (peacuteteacutechies contusion
sang feacutecal occulte) (43)
43
Lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille Myrtocyanreg (480 mgjour pendant 30 agrave 180 jours) a eacuteteacute
deacutemontreacutee dans des eacutetudes porteacutees sur des patients diabeacutetiques dyslipideacutemiques souffrant de
maladies secondaires agrave une stase des membres infeacuterieurs comme le syndrome preacute-variqueux
les varices essentielles le syndrome post-phleacutebitique et plusieurs maladies vasculaires
atheacuteroscleacuterotiques (43) Une eacutetude double-aveugle et controcircleacutee par placebo incluant 47
patients atteints de deacutesordres vasculaires drsquoorigine varieacutee a deacutemontreacute la capaciteacute de
Myrtocyanreg agrave reacuteduire les symptocircmes subjectifs et objectifs de la pathologie (diminution de la
douleur de la parestheacutesie de lrsquoœdegraveme et de la mobilisation des extreacutemiteacutes des doigts chez les
patients avec syndrome de Raynaud) Une eacutetude meneacutee sur 568 patients souffrants
drsquoinsuffisance veineuse des membres infeacuterieurs a montreacute la capaciteacute des anthocyanosides agrave
faire disparaitre les symptocircmes et agrave ameacuteliorer la microcirculation et le drainage lymphatique
(43)
Lrsquoefficaciteacute de la myrtille (320 mgjour pendant 60 agrave 90 jours) a mecircme eacuteteacute deacutemontreacutee chez 54
femmes enceintes souffrant de phleacutebite secondaire agrave stase veineuse (diminution de la douleur
de lrsquoœdegraveme de la fragiliteacute capillairehellip) et des patients avec bronchite chronique et
asthmatique (reacuteduction par lrsquoextrait de V myrtillus agrave 480 mgjour pendant 10 agrave 30 jours des
modifications microcirculatoires induites par la corticotheacuterapie) (43)
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA)
Pour rappel lrsquoECA (dipeptidylcarboxypeptidase) est une enzyme impliqueacutee dans le systegraveme
reacutenine-angiotensine (lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans la reacutegulation de la pression
arteacuterielle) permettant la conversion de lrsquoangiotensine I inactive en angiotensine II active Cette
derniegravere est capable drsquoaugmenter la pression sanguine et la pression de perfusion reacutenale les
inhibiteurs de lrsquoECA (IEC) constituent alors la premiegravere ligne de traitement pour
lrsquohypertension arteacuterielle et lrsquoinsuffisance cardiaque Les deux sites actifs de lrsquoACE
contiennent un atome de Zn2+
et les IEC sont capables de se lier agrave cet atome (47)
Personn et coll (47) ont rapporteacute dans une eacutetude in vitro la proprieacuteteacute drsquoun extrait de V
myrtillus agrave inhiber lrsquoECA peut-ecirctre par sa capaciteacute agrave cheacutelater des ions meacutetaux comme Zn2+
ou
Fe2+
cette inhibition eacutetant plus forte que les anthocyanidines combineacutees ou seacutepareacutees
deacutemontre lrsquoimplication drsquoautres composeacutes de la plante dans cette action En effet V myrtillus
ne contient pas seulement des anthocyanosides et anthocyanidines mais aussi de la querceacutetine
(flavonol) du stilbegravene resveacuteratrol des acides feacuterulique et coumarique Crsquoest la composition
speacutecifique de la plante qui semble ecirctre agrave lrsquoorigine de lrsquoeffet observeacute
44
Par conseacutequent le lien entre V myrtillus et lrsquoECA pourrait expliquer les effets
pharmacologiques de la plante sur la circulation cette plante pouvant ecirctre alors utiliseacutee en
preacutevention des maladies cardiovasculaires
5 Action sur lrsquoangiogenegravese
Lrsquoangiogenegravese se deacutefinit comme la formation de nouveaux vaisseaux sanguins agrave partir de
vaisseaux preacuteexistants (neacuteovascularisation) Elle est indispensable dans de nombreux
processus physiologiques comme le deacuteveloppement embryonnaire lrsquoimplantation du placenta
mais peut aussi contribuer agrave des processus pathologiques comme la croissance des tumeurs et
le deacuteveloppement des meacutetastases Lrsquoangiogenegravese se fait par plusieurs eacutetapes qui se trouvent
ecirctre les mecircmes dans lrsquoensemble des processus
- activation des cellules endotheacuteliales
- deacutegradation de la membrane basale et de la matrice extra-cellulaire
- migration orienteacutee des cellules endotheacuteliales
- prolifeacuteration cellulaire
- diffeacuterenciation des cellules endotheacuteliales en une structure de type capillaire pour
former une structure vasculaire permettant le deacuteveloppement des tissus
Lrsquoangiogenegravese est controcircleacutee par plusieurs facteurs inducteurs ou inhibiteurs dont le facteur de
croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire (VEGF ou vascular endothelial growth factor)
reacutegulateur cleacute de lrsquoangiogenegravese (73)
En 2007 Matsunaga et coll (40) ont eacutetudieacute in vitro lrsquoaction de V myrtillus sur lrsquoangiogenegravese
plus preacuteciseacutement sur la formation des tubules vasculaires la prolifeacuteration et la migration des
cellules ainsi que leur action sur la phosphorylation de proteacuteines kinases comme ERK 12
(laquo extra-cellular signal-regulated kinase raquo ou kinase reacuteguleacutee par le signal extra-cellulaire)
phospholipase Cγ et Akt (constitueacutes de trois enzymes appartenant agrave la famille des proteacuteines
kinases) induite par le VEGF Lrsquoeacutetude deacutemontre les effets inhibiteurs des extraits de myrtille
sur les paramegravetres de lrsquoangiogenegravese sur des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales
humaines co-cultiveacutees avec des fibroblastes Ainsi entre 1 et 30 microgml-1
lrsquoextrait de
Vaccinum myrtillus inhibe significativement la surface des tubules vasculaires la longueur
lrsquoenchevecirctrement des tubules et le nombre de reacuteseaux formeacutes A 3 microgml-1
ou plus lrsquoextrait
reacuteduit lrsquoensemble des paramegravetres de lrsquoangiogenegravese
Lrsquoextrait inhibe la prolifeacuteration (inhibition significative agrave 3 microgml-1
) et la migration
(inhibition significative agrave 10 et 30 microgml-1
) des cellules induites par VEGF-A de maniegravere
dose-deacutependante ceci ne se voyant qursquoen preacutesence du facteur de croissance
45
La phosphorylation des proteacuteines kinases comme ERK 12 est important dans la prolifeacuteration
des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales humaines et celle de Akt est une eacutetape
importante dans la prolifeacuteration et la migration de ces cellules
Les auteurs deacutemontrent la capaciteacute de V myrtillus agrave inhiber lrsquoaugmentation de la
phosphorylation de ces deux proteacuteines kinases mais pas la phosphorylation de la PLCγ
indiquant que lrsquoextrait agit en aval de celle-ci dans la cascade de signalisation induite par le
VEGF
Lrsquoeacutetude in vivo mise en place par Matsunaga et coll (39) chez la souris a permis de montrer
lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoextrait de V myrtillus dans la formation de reacuteseaux neacuteovasculaires dans
la reacutetinopathie induite par oxygegravene
II Action de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes
Un radical libre est une espegravece chimique qui possegravede un eacutelectron ceacutelibataire sur sa couche
peacuteripheacuterique Les radicaux libres qui interviennent dans le stress oxydant ont un eacutelectron
ceacutelibataire centreacute sur un atome drsquooxygegravene On les nomme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
(ERO) Plusieurs ERO existent comme le radical superoxyde le radical perhydroxyle (forme
protoneacutee du superoxyde) le radical hydroxyle le radical peroxyle et le radical alkoxyle Les
radicaux ne sont pas seulement formeacutes au cours des pheacutenomegravenes de stress oxydant mais
eacutegalement lors du meacutetabolisme normal de lrsquooxygegravene in vivo mecircme si ils ne sont geacuteneacutereacutes
qursquoen faible quantiteacute En effet crsquoest au niveau de la chaine respiratoire de la mitochondrie ougrave
85 de lrsquooxygegravene sont meacutetaboliseacutes que se produit la reacuteduction complegravete par 4 eacutelectrons de la
moleacutecule drsquoO2 conduisant agrave la formation drsquoeau La reacuteduction de la moleacutecule ne peut se faire
que par lrsquoenchainement de plusieurs eacutetapes donnant naissance agrave des intermeacutediaires reacuteduits de
lrsquooxygegravene La reacuteduction monoeacutelectronique de lrsquooxygegravene consommeacute au niveau
mitochondriale fournit lrsquoanion superoxyde (O2-) qui est une espegravece toxique Mais des
enzymes antioxydantes comme les superoxydes dismutases vont reacuteguler lrsquoanion superoxyde
en catalysant leur dismutation et en produisant le peroxyde drsquohydrogegravene (H2O2) Ce dernier
nrsquoest pas un radical libre mais une moleacutecule posseacutedant tous ses eacutelectrons apparieacutes Cependant
dans des reacuteactions in vivo comme la reacuteaction de Fenton et en preacutesence de cations meacutetalliques
comme Fe2+
ou Cu+ le H2O2 devient toxique en donnant les radicaux libres les plus neacutefastes
du stress oxydant que sont les radicaux hydroxyles (OH) De mecircme que le radical
superoxyde le peroxyde drsquohydrogegravene est reacuteguleacute in vivo par des systegravemes antioxydants comme
46
la catalase qui acceacutelegravere sa dismutation ou la glutathion peroxydase qui catalyse sa reacuteduction
par le glutathion
Ainsi le radical O2- le H2O2 et le radical OH forment les ERO (beaucoup plus reacuteactives que
lrsquooxygegravene) Cependant drsquoautres espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene existent comme les radicaux
peroxyles (RO2) les hydroperoxydes (RO2H) et les radicaux alkoxyles (RO)
Ces ERO tregraves reacuteactifs peuvent endommager les proteacuteines les lipides les glucides et les
acides nucleacuteiques par des reacuteactions drsquooxydation A cocircteacute des ERO il existe le monoxyde
drsquoazote radicalaire NO pouvant avoir des effets deacuteleacutetegraveres en reacuteagissant lors drsquoun stress
oxydant avec lrsquoO2-
pour former le peroxynitrite (ONOO-) tregraves reacuteactif et capable
drsquoendommager les proteacuteines les lipides et les acides nucleacuteiques On parle alors de stress
nitrosant
Crsquoest pourquoi il existe des systegravemes de deacutefense dans lrsquoorganisme (antioxydants) comme les
systegravemes de deacutefense enzymatique (superoxyde dismutase catalase glutathion
peroxydaseshellip) Toutefois le stress oxydant peut ecirctre important et les systegravemes de deacutefenses
deacutepasseacutes drsquoougrave la survenue ou lrsquoaggravation de pathologies comme lrsquoatheacuteroscleacuterose le diabegravete
sucreacute lrsquoischeacutemie ceacutereacutebrale le cancerhellip(21)
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides
Les anthocyanosides comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment sont des colorants
naturellement preacutesents dans les fleurs les fruits (particuliegraverement dans les baies) et les
leacutegumes Ce sont des pigments responsables de la couleur comme lrsquoorange le rouge le
bleuhellip Ils peuvent jouer plusieurs rocircles (attirer les insectes pour la pollinisation et la
dispersion des graines ou contribuer agrave la reacutesistance des plantes vis-agrave-vis drsquoattaques
exteacuterieures) Pour rappel les anthocyanosides sont des glycosides ou des acylglycosides des
anthocyanidines (les formes aglycones) Ils ont une structure de base flavylium et des
substitutions hydroxyles ou meacutethoxyles De plus ils sont tous O-glycosyleacutes avec diffeacuterents
sucres dont la preacutevalence est dans lrsquoordre deacutecroissant le glucose le rhamnose le xylose le
galactose lrsquoarabinose et le fructose Les anthocyanosides les plus preacutedominants sont des 3- ou
35-glycosyleacutes Quand le nombre de sucre augmente on observe une alternance sucre et
liaisons laquo acyl raquo De nombreuses eacutetudes ont reporteacute les effets positifs des anthocyanosides
dont certaines seront deacutecrites dans cette thegravese Certains de leurs effets sont attribueacutes agrave leurs
proprieacuteteacutes antioxydantes (64)
47
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma
En 2006 Talaveacutera et coll (59) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus (Antho 50reg
) et leur potentiel antioxydant sur le plasma de rats alimenteacutes
avec Antho 50reg pendant 8 jours Lrsquoeacutetude a montreacute une augmentation du statut antioxydant
plasmatique par cette administration mecircme si la biodisponibiliteacute eacutevalueacutee par excreacutetion
urinaire est basse Mais la chimie des anthocyanosides est complexe ceux-ci pourraient
subir une conversion en formes moins coloreacutees agrave cause de leur instabiliteacute agrave pH physiologique
ou meacutetaboliseacutes en composeacutes encore inconnus Quoiqursquoil en soit une consommation
quotidienne en anthocyanosides a un effet positif sur la capaciteacute antioxydant du plasma
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides
Lrsquoessai ORAC (oxygen radical absorbance capacity ou capaciteacute drsquoabsorbance du radical
oxygegravene) est une mesure standardiseacutee du pouvoir antiradicalaire de substances pures ou en
meacutelange Apregraves extraction des principes actifs dans un meacutelange eau-eacutethanol pour les
moleacutecules hydrosolubles et eacutethanol pour les moleacutecules lipophiles le test par
spectrofluorimeacutetrie consiste en la mesure de la protection exerceacutee par la moleacutecule contre
lrsquooxydation de la fluoresceacuteine par un radical libre et stable le AAPH (22-azobis(2-
amidinopropane) dihydrochloride) Les reacutesultats sont ensuite exprimeacutes par rapport au pouvoir
antioxydant exerceacute par une moleacutecule de reacutefeacuterence le Trolox (eacutequivalent hydrosoluble de la
vitamine E) rameneacute par le poids (en gramme) du produit que lrsquoon teste (75)
La valeur ORAC de la myrtille (446 micromol Troloxg de poids frais) est plus eacuteleveacutee que celle
drsquoautres baies (Figure 16) (58)
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies (58)
48
En 1997 Wang et coll (64) ont eacutevalueacute la capaciteacute antioxydante drsquoanthocyanidines communs
comme les aglycones de delphinidine cyanidine peacutelargonidine malvidine peacuteonidine et leurs
deacuteriveacutes glycosyleacutes Pour cela ils utilisent lrsquoessai ORAC avec geacuteneacuterateur de radical peroxyl
(ROO) Ainsi lrsquoeacutetude deacutemontre que les anthocyanidines posseacutedant la mecircme hydroxylation
sur le cycle A et C et une seule hydroxylation sur le cycle B comme la peacutelargonidine la
malvidine et la peacuteonidine ont une plus basse valeur ORAC que les anthocyanidines
dihydroxyleacutees sur le cycle B (3rsquo 4rsquo-di-OH) comme la cyanidine Les groupes hydroxyls en
position 3rsquo et 4rsquo du cycle B constituent un facteur important dans le pouvant antioxydant
seule la delphinidine eacutechappe agrave cette regravegle (plusieurs hydroxylations sur le cycle B mais
valeur ORAC plus faible) Mecircme si dans certains flavonoiumldes le nombre de groupes
hydroxyls augmentent la capaciteacute antioxydante ceci nrsquoest pas constateacute pour les
anthocyanosides ougrave la peacutelargonidine la cyanidine et la delphinide ayant 4 5 et 6 groupes
hydroxyls respectivement ont des valeurs ORAC respectives de 154 224 et 181 De plus la
glycosylation peut avoir aussi un effet sur lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides Elle
peut diminuer augmenter ou nrsquoavoir aucun effet sur le pouvoir antiradicalaire Par exemple
la 3-glycosylation du cycle C de la cyanidine augmente lrsquoactiviteacute ORAC pour le glucose et le
rhamnose mais la diminue pour le galactose Ainsi lrsquoordre deacutecroissant de lrsquoactiviteacute ORAC
pour la cyanidine est le suivant cyanidine 3-glucoside gt cyanidine 3-rhamnoside gt cyanidine
gt cyanidine 3-galactoside Mecircme lrsquoorientation du groupe hydroxyl affecte le pouvoir
antioxydant contre le radical peroxyl De plus lrsquoefficaciteacute drsquoun antioxydant agrave pieacuteger les
radicaux libres deacutepend aussi de sa capaciteacute agrave former un radical lui-mecircme stable Enfin le
classement des antioxydants par leur valeur ORAC deacutepend aussi de lrsquooxydant du radical libre
utiliseacute et de la meacutethode chimique employeacutee
Ainsi cette eacutetude a montreacute le fort pouvoir antioxydant des anthocyanosides ceux-ci sont
donc de bons candidats pour la preacutevention et le traitement de maladies mecircme si drsquoautres
eacutetudes sont neacutecessaires pour eacutelucider leur impact sur la santeacute humaine
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces
reacuteactives azoteacutees
Lrsquooxyde nitrique ou monoxyde drsquoazote radicalaire (NO) est un meacutediateur important
participant agrave des reacuteactions physiologiques dans les organismes vivants comme le
meacutetabolisme eacutenergeacutetique mitochondrial ou la transduction de signaux Cependant le NO peut
reacuteagir rapidement avec lrsquoO2- et former le peroxynitrite (ONOO
-) un fort oxydant tregraves reacuteactif
pouvant reacuteagir avec des moleacutecules biologiques comme les proteacuteines ou les acides nucleacuteiques
49
LrsquoONOO- participe agrave la formation de nitro-tyrosine dans les proteacuteines et agrave lrsquooxydation des
lipoproteacuteines de basse densiteacute responsable de la formation de plaques drsquoatheacuterome Les
radicaux NO sont geacuteneacutereacutes de faccedilon constitutive dans le cerveau sous des conditions
physiologiques LrsquoONOO- peut ecirctre lrsquoune des causes de deacutesordres ceacutereacutebraux (accidents
vasculaires ceacutereacutebraux ou maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie drsquoAlzheimer) (27)
En 2004 Ichiyanagi et coll (27) ont compareacute les reacuteactiviteacutes de 20 anthocyanosides extraits de
Vaccinum myrtillus contre les espegraveces reacuteactives azoteacutees et oxygeacuteneacutees Lrsquoextrait utiliseacute dans
lrsquoeacutetude est le Bilberon 25reg
(extrait pur sous forme de poudre provenant de V myrtillus)
Comme lrsquoantioxydant de reacutefeacuterence la (+)-cateacutechine les anthocyanosides ont la capaciteacute de
pieacuteger les radicaux libres comme le radical OH mais ont une reacuteactiviteacute 20 fois plus hautes
que celui-ci contre lrsquoO2- De plus la reacuteactiviteacute contre le radical OH nrsquoest pas tregraves sensible agrave
la diversiteacute structurale des anthocyanosides alors qursquoelle lrsquoest pour lrsquoO2- Dans lrsquoeacutetude de
Ichiyanagi et coll (27) lrsquoactiviteacute contre le NO est presque la mecircme entre tous les
anthocyanosides eacutetant tregraves peu sensible aux diversiteacutes structurales (les groupes hydroxyls
libres sur le cycle B de la moleacutecule de base ou lrsquoimportance de la meacutethylation de ces groupes
ne contribueraient pas aux reacuteactiviteacutes des anthocyanosides contre les radicaux NO et OH)
Parmi tous les anthocyanosides ce sont les glycosides (position 3) de delphinidine qui
reacuteagissent le plus contre les radicaux NO et ONOO- (reacuteactiviteacute 6 et 3 fois plus hautes que les
anthocyanosides et la (+)-cateacutechine respectivement) les autres anthocyanosides ayant une
reacuteactiviteacute comparable entre eux contre NO et lrsquoONOO-
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique
Les lipoproteacuteines de basse densiteacute (LDLs ou low-density lipoproteins) oxydeacutees par des
radicaux libres et des pro-oxydants ont plusieurs effets biologiques neacutefastes comme le
deacuteclenchement drsquoeacutevegravenements cellulaires conduisant agrave la formation et la progression de la
plaque atheacuteroscleacutereuse (21)
Laplaud et coll (34) ont eacutetudieacute lrsquoaction antioxydante drsquoun extrait de Vaccinum myrtillus sur
les LDLs Lrsquoeacutetude deacutemontre la diminution de tous les paramegravetres eacutevalueacutes lors de lrsquooxydation
des LDLs par cet extrait En effet la myrtille est capable de ralentir la formation de diegravenes
conjugueacutes de retarder la production de lipoperoxydes et de malondialdeacutehyde (indicateurs de
la peroxydation lipidique) et de diminuer la charge eacutelectrique nette des lipoproteacuteines
Enfin V myrtillus serait plus efficace que lacide ascorbique ou lrsquohydroxytoluegravene butyleacute
(BHT) pour diminuer la peroxydation lipidique des LDLs
50
En 1998 Martiacuten-Aragoacuten et coll (38) ont eacutetudieacute in vitro la capaciteacute drsquoun extrait complexe
drsquoanthocyanoside de V myrtillus agrave inhiber la peroxydation lipidique et agrave pieacuteger les ERO
comme les radicaux OH et O2- Lrsquoeacutetude deacutemontre un effet antiperoxydant de lrsquoextrait
(concentration-deacutependante) la concentration capable drsquoinhiber 50 de la peroxydation
lipidique (IC50 ou concentration inhibitrice 50) eacutetant de 5028 microgmL Sa capaciteacute agrave pieacuteger le
radical OH est faible (deacutetectable agrave partir de 50 microgmL) alors que sa reacuteactiviteacute contre le
radical O2- est forte
(observeacutee agrave toutes les concentrations testeacutees avec une valeur drsquoIC50 de
moins de 25 microgmL)
En conclusion la myrtille pourrait par son activiteacute antiperoxydative contribuer agrave la protection
vis-agrave-vis de lrsquoatheacuteroscleacuterose
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines
Viljanen et coll (63) ont compareacute lrsquoinhibition de lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines entre
les composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus avec ceux drsquoautres baies comme Rubus idaeus L
(framboisier) Vaccinium vitis-idaea L (airelle rouge) et Ribes nigrum L (cassis) Les
composeacutes pheacutenoliques sont repreacutesenteacutes par des anthocyanosides des ellagitanins et des
proanthocyanidines Lrsquoeacutetude deacutemontre que V myrtillus et Rubus idaeus possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante parmi la totaliteacute des baies eacutetudieacutees contre lrsquooxydation des
proteacuteines (cette oxydation eacutetant mesureacutee par la perte de la fluorescence au tryptophane et la
formation de proteacuteines carbonyles) Vaccinium myrtillus et V vitis-idaea possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante vis-agrave-vis de lrsquooxydation des lipides suivis par Ribes nigrum et
Rubus idaeus (cette oxydation est mesureacutee par lrsquoanalyse drsquohexanal de diegravenes conjugueacutes et
drsquohydroperoxydes) Dans la myrtille et le cassis ce sont les anthocyanosides qui contribuent agrave
la majoriteacute de lrsquoeffet antioxydant par inhibition de la formation des proteacuteines carbonyles et
drsquohexanal (hexanaldehyde) Cette activiteacute antioxydante des anthocyanosides et des
proanthocyanidines est dose-deacutependante ce qui nrsquoest pas le cas pour les autres composeacutes
pheacutenoliques Lrsquoeffet antioxydant des composeacutes pheacutenoliques des baies est plus prononceacute
contre lrsquooxydation des lipides particuliegraverement lrsquoinhibition du composeacute hexanal que celle des
proteacuteines Lrsquoinhibition des composeacutes aldeacutehydes des lipides reacutesulte en geacuteneacuteral de lrsquoinhibition
de la formation de deacuteriveacutes carbonyls conseacutequence drsquoune diminution de lrsquointeraction lipide-
proteacuteine
51
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie
Le foie est lrsquoorgane central du meacutetabolisme des composeacutes exogegravenes et endogegravenes il est donc
lrsquoorgane cible de lrsquoaction des xeacutenobiotiques et de leurs meacutetabolites Les eacutetudes sur les
heacutepatocytes sont importantes car ces cellules repreacutesentent 65 du parenchyme du foie et ils
assurent presque toutes les fonctions de cet organe Les heacutepatocytes ont un appareil de Golgi
distinct et de nombreuses mitochondries Malheureusement ils peuvent ecirctre soumis agrave un
stress oxydant Les eacutetudes faites agrave ce jour ont utiliseacute des toxines expeacuterimentales varieacutees afin
drsquoeacutetudier les effets cytoprotecteurs de substances comme lrsquoextrait de V myrtillus Dans les
eacutetudes qui vont suivre deux toxines sont employeacutees Le tert ndashbutyl hydroperoxyde (tBH) et
lrsquoallyl-alcool (2-propen-1-ol) Le tBH peut induire un stress oxydant aux cellules agrave travers des
radicaux (radical hydroxyl peroxyl drsquohydrogegravene et alkoxyl se formant lors de sa
deacutecomposition) Le tBH est la cause de plusieurs dommages comme la rupture des
membranes cellulaires lrsquoinduction de la peroxydation lipidique (responsable
drsquoatheacuteroscleacuterose) la fuite drsquoenzymes agrave travers lrsquoespace extracellulaire lrsquooxydation du
glutathion et lrsquoalkylation de macromoleacutecules cellulaires Lrsquoallyl-alcool (AA) est une toxine
qui agit indirectement agrave travers ses meacutetabolites Il est oxydeacute dans les cellules en acroleacuteine
sous lrsquoaction de lrsquoalcool deacuteshydrogeacutenase cytosolique Lrsquoacroleacuteine est capable de former un
produit avec le glutathion reacuteduit (GSH) et drsquoautres biomoleacutecules Elle induit aussi la
peroxydation lipidique catalyseacutee par les ions Fe(II) (62)
32 Eacutetudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques
En 2007 Valentovaacute et coll (62) ont utiliseacute un extrait de Vaccinum myrtillus (contenant 25
drsquoanthocyanosides) pour eacutevaluer son effet contre une leacutesion oxydative dans des cultures
primaires drsquoheacutepatocytes de rat induite par tBH et AA Jusqursquoagrave preacutesent lrsquoactiviteacute
cytoprotectrice de la myrtille contre une leacutesion oxydative nrsquoeacutetait pas documenteacutee
Lrsquoeacutetude a deacutemontreacute lrsquoactiviteacute protectrice dose-deacutependante de la plante vis-agrave-vis de leacutesions
oxydatives dans ces cultures cellulaires avec une protection maximale de 5116 contre les
dommages occasionneacutes par AA De plus les auteurs ont montreacute la capaciteacute de lrsquoextrait agrave
pieacuteger les radicaux DPPH (dipheacutenylpicrylhydrazyl) et O2-
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus montre des effets cytoprotecteurs agrave 100 et 500 microgmL
dans le test au MTT (sel de teacutetrazolium permettant une numeacuteration rapide des cellules
vivantes) Lrsquoextrait protegravege les heacutepatocytes de la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase et de la
formation des produits de la lipoperoxydation (TBARS repreacutesentant les substances reacuteagissant
52
avec lrsquoacide thiobarbiturique et permettant une premiegravere approche de la peroxydation
lipidique) Lrsquoimportante reacuteactiviteacute dans lrsquoeacutetude est sucircrement due agrave la dureacutee plus importante du
temps drsquoincubation dans le meacutelange reacuteactionnel Les effets observeacutes dans lrsquoeacutetude de
Valentovaacute et coll (62) montre que la capaciteacute cytoprotectrice de V myrtillus vis-agrave-vis des
heacutepatocytes de rat est probablement due aux proprieacuteteacutes antioxydantes de ses constituants
principaux (les anthocyanosides) Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude soutien lrsquoutilisation de la
myrtille dans les compleacutements alimentaires pour preacutevenir les maladies chroniques associeacutees
au stress oxydant
En 2008 Bao et coll (6) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun extrait de V myrtillus
commercialiseacute (contenant 4204 drsquoanthocyanosides) vis-agrave-vis drsquoun dommage du foie de
souris induit par un stress Ce stress est provoqueacute par lrsquoenfermement des souris dans une cage
meacutetallique pendant 18 heures provoquant un dommage heacutepatique avec augmentation des
enzymes heacutepatiques (alanine aminotransfeacuterase) du niveau de malondialdeacutehyde (MDA) du
monoxyde drsquoazote de la xanthine oxydase (XOD) et de la peroxydation lipidique avec un
deacuteseacutequilibre de la balance oxydants-antioxydants et la diminution de GSH de la vitamine C
et de la valeur ORAC Or lrsquoadministration orale de plusieurs dosages drsquoextrait de V
myrtillus pendant 5 jours preacuteceacutedant lrsquoinduction drsquoun stress chez la souris diminue le niveau
drsquoalanine aminotransfeacuterase (agrave 200 mgkgjour drsquoextrait) augmente les niveaux de GSH (50
100 et 200 mgkgjour drsquoextrait) et diminue significativement les niveaux de XOD et de NO
(agrave des concentrations de 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait)
De plus lrsquoextrait de myrtille agrave 200 mgkgjour pourrait supprimer et renverser le niveau de
MDA heacutepatique et plasmatique agrave un niveau comparable agrave celui du groupe controcircle (non
soumis au stress) La mecircme chose est observeacutee avec 200 mgkg jour de vitamine C (autre
antioxydant) Enfin le niveau ORAC est augmenteacute par 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait de V
myrtillus
Bao et coll (6) avaient deacutejagrave mis en eacutevidence lrsquoeffet protecteur du rein drsquoun extrait de V
myrtillus vis-agrave-vis drsquoun stress oxydant induit par KBrO3
En conclusion la myrtille pourrait preacutevenir les dommages heacutepatiques causeacutes par un stress
oxydant gracircce agrave ses proprieacuteteacutes antioxydantes
53
4 Effet de Vaccinim myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives et le
vieillissement
41 Effets sur un stress eacutemotionnel
Il a eacuteteacute mis en eacutevidence que le stress psychologique joue un rocircle significatif dans la
pathogenegravese de cancers et peut ecirctre associeacute avec une augmentation des produits issus de
lrsquooxydation et de leurs dommages sur les tissus
Le stress oxydant participe agrave lrsquoeacutetiologie de maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie
drsquoAlzheimer et la maladie de Parkinson En effet le stress eacutemotionnel peut affecter le systegraveme
nerveux central dans lequel se trouve notamment les neurones dopaminergiques qui
produisent la dopamine un neurotransmetteur du groupe des cateacutecholamines preacutecurseur de la
noradreacutenaline jouant un rocircle fondamentale dans le cerveau (controcircle de la motriciteacute) utiliseacute
en theacuterapeutique pour son action stimulante sur le systegraveme cardiovasculaire Les neurones
dopaminergiques sont localiseacutes dans certaines reacutegions ceacutereacutebrales comme lrsquohypothalamus le
locus niger et les corps strieacutes Ainsi la rupture de la transmission dopaminergique affecte
lrsquoactiviteacute comportementale Une baisse du niveau de dopamine dans certaines reacutegions
ceacutereacutebrales peut induire une perte des certains fonctions cognitives comme la meacutemoire
lrsquoattention la reacutesolution de problegraveme le mouvement la reacuteponse eacutemotionnelle et la capaciteacute
eacutemotionnelle agrave ressentir le plaisir ou la douleur
De plus les ERO induites par un stress sont connues pour ecirctre responsables de la
peroxydation lipidique et de lrsquooxydation des proteacuteines avec formation de proteacuteines
carbonyles Ainsi des eacutetudes ont deacutemontreacute que la modification de proteacuteines intracellulaires
comme certaines enzymes cleacutes et proteacuteines structurales peuvent mener agrave la deacutegeacuteneacuteration
neurofibrillaire des neurones menant agrave la maladie drsquoAlzheimer une autre maladie
neurodeacutegeacuteneacuterative (1) (52)
En 2008 Rahman et coll (52) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun meacutelange
drsquoanthocyanosides de Vaccinum myrtillus administreacute oralement agrave des souris soumis agrave un
stress oxydant ceacutereacutebral provoqueacute par la coupure des moustaches En effet le retrait des
moustaches augmente la formation de proteacuteines carbonyles et induit la peroxydation lipidique
dans le cerveau le cœur le rein et le foie Le niveau des marqueurs de lrsquooxydation diffegraverent
en fonction des reacutegions ceacutereacutebrales De mecircme le niveau de dopamine est alteacutereacute dans le cortex
ceacutereacutebral et le meacutesenceacutephale Les moustaches de souris jouent un rocircle tregraves important dans le
sens et la motriciteacute et la contribution sensorielle est directement lieacutee aux neurones moteurs
54
controcirclant leur activiteacute locomotrice Crsquoest pourquoi le retrait des moustaches a de graves
conseacutequences puisqursquoil affecte lrsquoactiviteacute locomotrice induisant anxieacuteteacute et hyper-locomotion
Ce stress oxydant induit par un stress psychologique augmente les niveaux de marqueurs
biologiques comme les proteacuteines carbonyles et les TBARS dans certains organes et reacutegions
ceacutereacutebrales (cœur reins foie meacutesenceacutephale cortex et ceacutereacutebellum) Or lrsquoadministration des
anthocyanosides de V myrtillus des souris diminue la peroxydation lipidique dans tous les
tissus reacuteduit lrsquooxydation des proteacuteines dans les reins le foie le meacutesenceacutephale et le cortex
ceacutereacutebral de faccedilon notable et diminue eacutegalement les niveaux de proteacuteines carbonyles et de
TBARS
Enfin lrsquoadministration de myrtille supprime les modifications (induites par le stress
psychologique) des niveaux de dopamine et de ses meacutetabolites (ces modifications pouvant
provoquer des maladies deacutegeacuteneacuteratives comme la maladie de Parkinson)
Cependant cette eacutetude ne peut pas conclure sur la capaciteacute des anthocyanosides de V
myrtillus agrave franchir la barriegravere heacutemato-enceacutephalique et agrave y exercer leur action antioxydante
Les principales formes retrouveacutees dans le foie et les reins sont des meacutetabolites meacutethyleacutes des
anthocyanosides et drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour prouver le lien entre ces meacutetabolites
meacutethyleacutes et la neuroprotection observeacutee dans lrsquoeacutetude
En conclusion cette eacutetude suggegravere que les anthocyanosides peuvent ecirctre utiles dans la
protection et le traitement des maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives associeacutees agrave un stress oxydant
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication du stress oxydant
Le dommage oxydant a depuis longtemps eacuteteacute proposeacute pour ecirctre en partie responsable de
plusieurs deacutesordres lieacutes agrave lrsquoacircge De plus plusieurs eacutetudes ont confirmeacute lrsquoaccumulation des
marqueurs biologiques du stress oxydant (augmentation de lrsquooxydation des lipides et des
proteacuteines dans les cerveaux de mammifegraveres acircgeacutes) Les pertes de la fonction ceacutereacutebrale avec le
vieillissement pourraient ecirctre associeacutees agrave une leacutesion oxydante des biomoleacutecules dans certaines
reacutegions ceacutereacutebrales et un niveau augmenteacute de peroxydes lipidiques observeacute dans des reacutegions
du cerveau impliqueacutees dans les fonctions de meacutemoire et drsquoapprentissage De plus les auteurs
ont deacutemontreacute lrsquoassociation des alteacuterations des fonctions ceacutereacutebrales cognitives avec des
modifications du systegraveme cardiovasculaire comme lrsquoaugmentation de la pression sanguine
(impliqueacutee dans lrsquoacceacuteleacuteration du vieillissement des vaisseaux les alteacuterations des fonctions
ceacutereacutebrales et le deacuteveloppement de lrsquoatheacuteroscleacuterose) (32)
Kolosova et coll (32) utilisent pour leur eacutetude deux souches de rats La souche OXYS qui est
une souche aux traits heacuteriteacutes de vieillissement acceacuteleacutereacute et une haute sensitiviteacute au stress
55
oxydant par rapport agrave une autre souche la souche Wistar Les rats OXYS ont une espeacuterance
de vie plus courte et deacuteveloppent plus preacutecocement des deacutesordres pathologiques lieacutes agrave lrsquoacircge
semblables agrave ceux observeacutes chez lrsquohumain comme lrsquoosteacuteoporose lrsquohypertension arteacuterielle
de ce fait le comportement de jeunes rats OXYS est semblable agrave celui des rats Wistar acircgeacutes
Lrsquoobjectif de leur eacutetude eacutetait de veacuterifier srsquoil existe un lien entre le vieillissement ceacutereacutebral et les
marqueurs du stress oxydant chez les rats OXYS pour rechercher lrsquoefficaciteacute drsquoune
suppleacutementation agrave long terme drsquoantioxydants dans la preacutevention de lrsquoapparition de deacuteficits
cognitifs comme les deacuteficits drsquoapprentissage et de meacutemoire
Les diffeacuterents paramegravetres de stress oxydant dans ces deux souches de rats sont eacutevalueacutes
(peroxydation lipidique niveau de proteacuteines carbonyles niveau de MDA activiteacute de
superoxyde dismutase (SOD) de niveau de GSH et quantiteacute drsquoα-tocopheacuterol)
Lrsquoeacutetude deacutemontre qursquoune suppleacutementation agrave long terme avec un extrait de V myrtillus
preacutevient la manifestation exteacuterieure du vieillissement des deux souches de rats (lrsquoextrait
augmente le poids des souris) Chez les rats OXYS lrsquoextrait de myrtille diminue
- la peroxydation lipidique
- lrsquoactiviteacute SOD dans le cerveau (en jouant un rocircle protecteur vis-agrave-vis du stress
oxydant)
- et le niveau de MDA dans le cerveau
La myrtille preacutevient aussi chez les rats OXYS
- les deacuteficits de meacutemoire et drsquoapprentissage plus efficacement que la vitamine E (autre
antioxydant)
- la deacuteteacuterioration de la fonction mitochondriale (autre cause de seacutenescence acceacuteleacutereacutee)
De plus V myrtillus a la capaciteacute de preacutevenir les mutations induites par les ERO lesquels
srsquoaccumulent avec lrsquoacircge dans la mitochondrie menant agrave un dysfonctionnement
mitochondriale Ce mecircme meacutecanisme pourrait ecirctre impliqueacute dans lrsquoeffet positif exerceacute par la
myrtille sur la meacutemoire des rats OXYS Ainsi la preacutevention des deacuteficits cognitifs
comportementaux avec des antioxydants peuvent montrer le rocircle du stress oxydant dans ces
processus mecircme si drsquoautres meacutecanismes peuvent jouer un rocircle dans cette capaciteacute de
preacutevention des composeacutes
En conclusion Vaccinum myrtillus atteacutenue les deacuteficits cognitifs chez les rats OXYS
apportant la preuve du rocircle theacuterapeutique de cette plante Cependant les meacutecanismes par
lesquels cet antioxydant agit pour exercer une neuroprotection in vivo et le reacuteel impact du
stress oxydant et de ses marqueurs biologiques sur les deacuteficits cognitifs des rats OXYS
doivent encore ecirctre eacutetudieacutes
56
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB
51 Effets drsquoune exposition solaire
Une exposition prolongeacutee aux ultraviolets (UV) durant le sport ou drsquoautres activiteacutes est un
facteur de risque de plusieurs maladies de la peau comme le cancer cutaneacute La deacutepleacutetion de la
couche drsquoozone protectrice entraicircne une quantiteacute plus importante des rayons UV atteignant la
surface planeacutetaire et exerccedilant des effets neacutefastes Les UVB sont largement absorbeacutes mais
moins peacuteneacutetrants que les UVA atteignant particuliegraverement la couche cellulaire de lrsquoeacutepiderme
basal Les UVB sont plus geacutenotoxiques et environ 1000 fois plus capables de provoquer un
coup de soleil que les UVA Ainsi le coup de soleil lrsquoeacuterythegraveme et lrsquoœdegraveme sont des
manifestations de lrsquoexposition aux UVB Lrsquoabsorption des photons UVB megravenent agrave des
dislocations de lrsquoADN et agrave la formation de photoproduits dimegraveriques de pyrimidine De plus
ils interagissent directement avec les acides amineacutes aromatiques notamment le tryptophane et
la tyrosine (inclus dans les proteacuteines) pouvant alors alteacuterer les fonctions de celles-ci Les UVB
altegraverent indirectement les macromoleacutecules ils geacutenegraverent la production de radicaux libres
comme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote induisant lrsquooxydation des proteacuteines
des lipides et de lrsquoADN Ces produits oxydeacutes (hydroperoxydes lipidiques proteacuteines
carbonyles et 8-hydroxydeacuteoxyguanosine) sont impliqueacutes dans le deacutebut des cancers cutaneacutes
Les UVB diminuent aussi les antioxydants de la peau responsable drsquoune baisse de la
protection vis-agrave-vis des radicaux libres Ils participent aux pheacutenomegravenes de processus
inflammatoire de la peau incluant une cascade drsquoeacutevegravenements comme lrsquoinfiltration de
leucocytes sanguins inflammatoires (macrophages et neutrophiles) lrsquoaugmentation de la
production des prostaglandines comme conseacutequence de lrsquoaugmentation de la peroxydation
lipidique la libeacuteration du fateur TNFα (tumour necrosis factor alpha ou facteur de neacutecrose
tumoral) le NFκB (nuclear factor κB ou facteur nucleacuteaire κB) des cytokines pro-
inflammatoires comme les interleukines (IL-1α IL-1β IL-6 IL-8 IL-12) qui en retour
augmentent la production des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote Un deacutefaut de
reacuteparation des leacutesions de lrsquoADN et les effets neacutefastes des UVB du soleil sont agrave lrsquoorigine des
cancers cutaneacutes Crsquoest pourquoi des meacutecanismes de protection de la peau ou une atteacutenuation
de la quantiteacute drsquoUVB atteignant et peacuteneacutetrant la peau peuvent ecirctre des strateacutegies efficaces dans
la preacutevention des dommages occasionneacutes par le soleil (57)
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires
Svobodovaacute et coll (57) Ont eacutetudieacute la capaciteacute des fractions pheacutenoliques des fruits de Lonicera
caerulea L (chegravevrefeuille bleu) et de V myrtillus en preacute et post-traitement sur les dommages
57
oxydants des keacuteratinocytes HaCaT humains induits par un simulateur de radiations solaires
(UVB) Plusieurs paramegravetres sont eacutetudieacutes et seuls les reacutesultats concernant V myrtillus sont
rapporteacutes dans cette thegravese Cette plante a plusieurs effets
- elle augmente le nombre de cellules viables
- diminue significativement la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase de maniegravere dose
deacutependante
- augmente de faccedilon dose-deacutependante la prolifeacuteration cellulaire (prolifeacuteration reacuteduite
par les UVB)
- preacutevient la formation et reacuteduit significativement la cassure simple brin de lrsquoADN
- diminue la caspase-3 (meacutediateur de lrsquoexeacutecution de la mort cellulaire apoptotique)
- diminue la caspase-9 de maniegravere dose-deacutependante (meacutediateurs de lrsquoexeacutecution de la
mort cellulaire apoptotique)
- preacutevient la formation des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote avec
eacutelimination excellente en post-traitement
- et diminue de maniegravere dose-deacutependante la production drsquoIL6
Cependant on remarque que cette protection deacutecline leacutegegraverement agrave des concentrations plus
hautes srsquoexpliquant par un effet pro-oxydant des polypheacutenols dans les cellules irradieacutees ougrave la
balance oxydantsantioxydants est deacuteseacutequilibreacutee
En conclusion V myrtillus pourrait ecirctre un bon candidat pour la fabrication de preacuteparations
dermatologiques protectrices agrave large spectre ou dans des preacuteparations apregraves-soleil Pour cela
des eacutetudes futures sont neacutecessaires pour eacutetudier la biodisponibiliteacute des composants exclure
les toxiques eacuteventuels ou les effets photoxiques et confirmer lrsquoeffet photoprotecteur in vivo
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes
Chez lrsquohomme la reacutetine (Figure 17) est une membrane photosensible qui tapisse la face
interne de lrsquoœil elle est constitueacutee de plusieurs types de cellules formant trois couches
superposeacutees qui sont de lrsquoarriegravere vers lrsquoavant de lrsquoœil
- les cellules photoreacuteceptrices constitueacutees de cocircnes et de bacirctonnets
- les cellules bipolaires
- les cellules ganglionnaires
Sa face posteacuterieure est en contact avec la choroiumlde par lrsquointermeacutediaire de lrsquoeacutepitheacutelium
pigmentaire et sa face anteacuterieure avec le corps vitreacute Les cellules de la reacutetine transforment les
58
influx nerveux en impulsions nerveuses qui gagnent les fibres nerveuses du nerf optique
permettant le transport des informations visuelles jusqursquoau cerveau (1)
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme (77)
La reacutetine est situeacutee dans un environnement tregraves oxygeacuteneacute pouvant subir des dommages induits
par le stress oxydant (les radicaux libres peuvent oxyder les lipides des photoreacutecepteurs) (23)
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire
Dutot et coll (23) ont eacutetudieacute les effets cytoprotecteurs drsquoun extrait en poudre de V myrtillus
(contenant 10 de proanthocyanidols et 10 drsquoanthocyanidines) sur le stress oxydant
appliqueacute aux cellules reacutetiniennes humaines dans un systegraveme in vitro Lrsquoextrait de V myrtillus
est incubeacute (005 et 01) pendant 15 minutes ou 24 heures sur une ligneacutee de cellules de
lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute reacutetinien Puis un stress oxydant induit par le tBHP est appliqueacute
pendant une heure sur ces cellules Les diffeacuterents paramegravetres des dommages du stress oxydant
sont eacutevalueacutes comme les modifications du meacutetabolisme cellulaire la formation des ERO la
formation drsquoO2-et lrsquoapoptose mitochondriale
Les reacutesultats sur ces diffeacuterents paramegravetres sont reacutesumeacutes dans les tableaux II agrave V
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
baisse induite par le tBHP Aucun effet cytoprotecteur
Incubation 24 heures Blocage de lrsquoeffet du tBHP sur le meacutetabolisme cellulaire
59
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Une concentration faible drsquoextrait (005) nrsquoa pas drsquoeffet sur une peacuteriode courte drsquoincubation
(15 minutes) par contre crsquoest le cas pour une peacuteriode plus longue (24 heures) cette
concentration est capable drsquoavoir des effets cytoprotecteurs V myrtillus pourrait ecirctre capable
de stimuler les deacutefenses antioxydantes de lrsquoorganisme mais des eacutetudes compleacutementaires sont
neacutecessaires pour confirmer cette hypothegravese
Enfin lrsquoeacutetude a montreacute que lorsque lrsquoextrait diminue le stress oxydant et lrsquoapoptose
mitochondriale elle restaure aussi la viabiliteacute cellulaire Par contre srsquoil nrsquoy a pas drsquoeffet sur le
stress oxydant il nrsquoy en a pas non plus sur la viabiliteacute cellulaire
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge
Lors du vieillissement et dans certaines maladies oculaires (comme la deacutegeacuteneacuterescence
maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge ougrave le stress oxydant est fortement impliqueacute) des pigments
autofluorescents constitueacutes par des deacutepocircts de lipofuchsine (pigment jaune-brun constitueacutee de
deacutebris moleacuteculaires) peuvent srsquoaccumuler dans les cellules eacutepitheacuteliales du pigment reacutetinien
La lipofuchsine peut absorber la lumiegravere bleue et geacuteneacuterer des photoproduits toxiques
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
surproduction drsquoERO Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution du stress oxydant
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
production drsquoO2-
Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Reacuteduction de la production drsquoO2-
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Inhibition significative de
lrsquoapoptose mitochondriale Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution de lrsquoapoptose mitochondriale
60
perturbant le fonctionnement cellulaire crsquoest donc un geacuteneacuterateur de radicaux lieacutes agrave la
lumiegravere Un composant de reacutetinoiumlde majeur de la lipofuchsine est lrsquoA2E (bis reacutetinoiumlde de
pyridinium deacuteriveacute de reacutetinal et de phosphatidyl eacutethanolamine) il contribue agrave
lrsquoautofluorescence de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute agrave lrsquoinhibition de fonctions cellulaires
essentielles au deacuteclenchement de la mort par apoptose des cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute
et agrave lrsquoabsorption de la lumiegravere bleue aggravant les leacutesions cellulaires (79) A2E lors de
lrsquoirradiation par la lumiegravere bleue subit une photooxydation en geacuteneacuterant de lrsquooxygegravene
singulet celui-ci reacuteagit en retour avec le fluorophore geacuteneacuterant des eacutepoxydes au niveau des
doubles liaisons carbone-carbone Les A2E-eacutepoxydes peuvent alors induire de graves leacutesions
agrave lrsquoADN (une des cibles des eacutevegravenements photodynamiques par interaction lumiegravere bleue-
A2E) pouvant srsquoaccumuler avec lrsquoacircge ougrave un deacuteclin des meacutecanismes de reacuteparation des bases
de lrsquoADN oxydeacutees a eacuteteacute reconnu (56)
Les antioxydants pourraient avoir un rocircle important dans la preacutevention des leacutesions oxydatives
sur les macromoleacutecules comme les bases de lrsquoADN et la deacutegeacuteneacuterescence de la maculaire lieacutee agrave
lrsquoacircge (DMLA) Crsquoest pourquoi Vaccinum myrtillus (par ses proprieacuteteacutes antioxydantes) a fait
lrsquoobjet drsquoeacutetudes montrant sa capaciteacute agrave preacutevenir certaines maladies oculaires causes majeurs
de ceacuteciteacute et de deacuteteacuterioration de lrsquoacuiteacute visuelle chez les personnes acircgeacutees
En 2003 Sparrow et coll (56) ont deacutemontreacute dans une eacutetude in vitro la capaciteacute drsquoun extrait
de V myrtillus agrave inhiber lrsquoeacutepoxydation drsquoA2E par capture de lrsquooxygegravene singulet gracircce agrave sa
richesse en anthocyanosides antioxydants
Dans une eacutetude in vivo utilisant une souche de rats avec seacutenescence acceacuteleacutereacutee (rats OXYS)
Fursova et coll (24) ont deacutemontreacute qursquoune alimentation suppleacutementeacutee agrave long terme avec un
extrait de V myrtillus pouvait ecirctre efficace dans la preacutevention de la DMLA et de la cataracte
seacutenile deux maladies dont les dommages ont eacuteteacute attribueacutees aux radicaux libres
La surreacutegulation des proteacuteines de stress est un moyen de protection contre des conditions
deacuteleacutetegraveres comme le stress oxydant Ainsi Milbury et coll (42) ont deacutemontreacute in vitro la
capaciteacute des anthocyanosides et drsquoautres composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus agrave surreacuteguler
les enzymes de deacutefense du stress oxydant comme lrsquohegraveme oxygeacutenase-1 (HO-1) et la glutathion
S-transfeacuterase (GST) dans des cultures de cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmentaire reacutetinien humain
Agrave cocircteacute du stress oxydant des facteurs vasculaires peuvent ecirctre impliqueacutes dans les maladies
oculaires comme le glaucome la DMLA ou la reacutetinopathie diabeacutetique Comme nous lrsquoavons
vu dans le premier chapitre de cette partie Personn et coll (46) ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoun
extrait de V myrtillus agrave inhiber lrsquoECA cet effet pourrait ecirctre une explication aux effets
observeacutes de la plante sur la vision
61
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus
Un stress oxydant peut laquo srsquoattaquer raquo aux neurotransmetteurs entrainant leur oxydation Ainsi
les neurotransmetteurs comme la dopamine et son meacutetabolite neurotoxique la 6-
hydroxydopamine peuvent subir une oxydation geacuteneacuterant H2O2 et des ERO Dans les neurones
et drsquoautres cellules ce stress oxydant peut ecirctre amplifieacute par le relargage du cytochrome c
(composant essentiel de la chaine respiratoire mitochondriale participant au transfert
drsquoeacutelectrons) localiseacute dans la membrane interne de la mitochondrie dans le cytoplasme ce
relargage induit toute une cascade de reacuteactions aboutissant agrave lrsquoactivation de caspases
(proteacuteines directement lieacutees agrave lrsquoapoptose) pouvant ecirctre fortement preacutejudiciable pour les
meacutetabolites de la dopamine La perte de lrsquointeacutegriteacute mitochondriale observeacutee dans des maladies
neurodeacutegeacuteneacuteratives peut contribuer aussi agrave des niveaux relargueacutes de cytochrome c au-dessus
de la normale (68)
Yao et coll (68) ont montreacute in vitro la capaciteacute drsquoune preacuteparation riche en anthocyanosides
composeacutee de V myrtillus V corymbosum et V oxycoccus L et des anthocyanosides purifieacutes agrave
inhiber lrsquooxydation de la 6-hydoxydopamine augmenteacutee par le cytochrome c Parmi les trois
espegraveces eacutetudieacutees les extraits de V myrtillus apparaissent pour ecirctre plus efficaces dans cette
activiteacute que les deux autres espegraveces ou que les anthocyanosides purifieacutes pouvant srsquoexpliquer
par une plus grande richesse en anthocyanosidesanthocyanidines particuliegraverement la
cyanidine et delphinidine La composition en querceacutetine et agrave moindre degreacute en myriceacutetine
nrsquoont pas de rocircle dans lrsquoactiviteacute antioxydante la preacutesence de querceacutetine est mecircme
inversement correacuteleacutee avec lrsquoeffet antioxydant Lrsquoeffet inhibiteur observeacute est principalement ducirc
agrave lrsquoeffet antioxydant des anthocyanosides
Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent la forte activiteacute des anthocyanosides vis-agrave-vis des
reacuteactions neurotoxiques potentielles et suggegraverent lrsquoimportance de mettre au point des eacutetudes in
vivo dans le but de deacutemontrer des effets neuro- et mitochondrio-protecteurs de ces
phytochimiques particuliegraverement dans la maladie de Parkinson et drsquoautres maladies
impliquant un dysfonctionnement mitochondriale
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant un
stress oxydant
Une ischeacutemie-reperfusion entraine de nombreuses alteacuterations microvasculaires comme une
augmentation des leucocytes adheacuterant agrave la paroi des vaisseaux veineux une diminution de la
longueur des capillaires perfuseacutes menant agrave une diminution du nombre de capillaires
62
fonctionnels une perte de lrsquointeacutegriteacute endotheacuteliale une augmentation de la permeacuteabiliteacute
capillaire (relargage de proteacuteases comme lrsquoeacutelastase et la collageacutenase avec formation drsquoœdegraveme)
et des modifications du diamegravetre des arteacuterioles (modification de la balance vosodilatation-
vasoconstriction au profit drsquoune vasoconstriction ) Les leucocytes jouent un rocircle fondamental
dans lrsquoischeacutemie-reperfusion en srsquoaccumulant dans les tissus ils provoquent lrsquoocclusion
intravasculaire ainsi que le relargage de cytokines pro-inflammatoires et des meacutetabolites
deacuteriveacutes de lrsquooxygegravene En effet les ERO ont eacuteteacute fortement impliqueacutees dans ces deacutesordres
microcirculatoires elles altegraverent entre autre lrsquointeacutegriteacute de la paroi des vaisseaux et entrainent
une augmentation de la permeacuteabiliteacute en post-capillaire et dans les veines collectrices de
lrsquoabajoue drsquohamster De plus les ERO provenant des leucocytes ou non peuvent induire une
contraction des arteacuterioles (8)
En 1995 Bertuglia et coll (8) ont eacutetudieacute les effets des anthocyanosides de V myrtillus sur
lrsquoischeacutemie-reperfusion provoqueacutee sur lrsquoabajoue drsquohamster entrainant les deacutesordres
microcirculatoires citeacutes preacuteceacutedemment Lrsquoeacutetude montre qursquoune administration orale
drsquoanthocyanosides de V myrtillus suite agrave ces dommages permet une protection de la paroi des
vaisseaux gracircce agrave leur action antioxydante une reacuteduction du nombre de leucocytes adheacuterant agrave
la paroi veineuse (proteacutegeant les tissus de lrsquoischeacutemie-reperfusion et preacutevenant la formation de
meacutediateurs inflammatoires) une diminution de la permeacuteabiliteacute capillaire par son activiteacute anti-
proteacuteasique la plante peut ecirctre eacutegalement un modulateur important du tonus des arteacuterioles en
controcirclant la freacutequence et lrsquoamplitude la vasomotion (modification du calibre vasculaire)
permettant une ameacutelioration de la perfusion capillaire (inhibition de la vasoconstriction par les
ERO)
Cette eacutetude est importante drsquoune part pour montrer le rocircle des radicaux libres deacuteriveacutes de
lrsquooxygegravene dans les deacutesordres microcirculatoires et drsquoautre part pour deacutemontrer les effets
beacuteneacutefiques de V myrtillus agrave restaurer les diffeacuterents paramegravetres notamment par son action
antioxydante
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer
Wang et coll (65) ont reporteacute les reacutesultats des eacutetudes qui ont permis de mettre en eacutevidence les
activiteacutes anticarcinogeacuteniques des anthocyanosides et des extraits riches en anthocyanosides
dans des modegraveles de cultures cellulaires in vitro et dans des systegravemes in vivo de modegraveles
tumoraux chez lrsquoanimal Lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides est due agrave leur structure
63
pheacutenolique en donnant un eacutelectron aux radicaux ceux-ci devenant stables (eacutelectrons
apparieacutes) En effet les anthocyanosides sont capables comme nous lrsquoavons vu
preacuteceacutedemment de pieacuteger directement les ERO drsquoaugmenter la valeur ORAC des cellules de
stimuler lrsquoexpression de la phase II de deacutetoxification des enzymes de reacuteduire la formation des
sous-produits de lrsquoADN de diminuer la peroxydation lipidique drsquoinhiber la mutagenegravese
induite par des carcinogegravenes ou des toxines et de reacuteduire la prolifeacuteration cellulaire en
modulant les voies de transduction du signal Ils sont capables eacutegalement de cheacutelater les
meacutetaux et de se lier directement aux proteacuteines Lrsquoactiviteacute antioxydante est principalement due
aux groupes hydroxyles des anthocyanosides en position 3 du cycle C et en position 3rsquo 4rsquo et
5rsquo du cycle B de leur structure de base Enfin il a eacuteteacute montreacute que les aglycones
drsquoanthocyanidines ont une activiteacute antioxydante plus importante que leurs homologues
glycosyleacutes et cette activiteacute diminue quand le nombre de sucres augmente
Mecircme si les eacutetudes expeacuterimentales ont deacutemontreacute lrsquoactiviteacute anticancer des anthocyanosides les
eacutetudes eacutepideacutemiologiques nrsquoont pas montreacute lrsquoactiviteacute protectrice de la consommation
drsquoanthocyanosides vis-agrave-vis du risque de cancer humain et leur activiteacute antioxydante reste
encore questionnable De plus les quantiteacutes drsquoanthocyanosides neacutecessaires pour observer un
effet in vitro sont importantes par rapport aux quantiteacutes retrouveacutees dans le plasma humain in
vivo Crsquoest pourquoi des eacutetudes sont neacutecessaires pour deacutevelopper des solutions qui
permettraient drsquoaugmenter lrsquoabsorption des anthocyanosides etou leurs meacutetabolites
permettant ainsi lrsquoutilisation optimale des anthocyanosides dans la preacutevention de cancer chez
lrsquohomme particuliegraverement dans les tissus autres que le tractus gastro-intestinal et la peau
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus
Katsube et coll (31) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute anticarcinogeacutenique dans un systegraveme in vitro de dix
baies comestibles et particuliegraverement celle de V myrtillus Lrsquoactiviteacute de la myrtille est testeacutee
sur deux ligneacutees cellulaires diffeacuterentes les cellules leuceacutemiques humaines HL60 et les
cellules carcinomateuses du cocirclon HCT116 Lrsquoeacutetude deacutemontre que lrsquoextrait de V myrtillus est
le plus efficace parmi les dix extraits eacutethanoliques de baies pour inhiber la croissance de ces
ligneacutees cellulaires Toutes les concentrations testeacutees inhibent la croissance des cellules HL60
lors des deux peacuteriodes drsquoincubation (24 et 48 heures) alors que lrsquoinhibition de la croissance
des HCT116 nrsquoest observeacutee que pour des intervalles speacutecifiques de concentrations De plus
lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus induit des niveaux significatifs drsquoapoptose dans les
cellules HL60 mais pas dans les cellules HCT116
64
Ce sont les anthocyanosides qui sont responsables de lrsquoinhibition de la croissance des cellules
canceacutereuses HL60 et HCT116 induisant eacutegalement lrsquoapoptose des cellules HL60
Les anthocyanosides de V myrtillus plus particuliegraverement les glycosides de delphinidine et
malvidine induisent lrsquoinhibition de la croissance des cellules de la leuceacutemie humaine HL60
par induction de lrsquoapoptose et mecircme si lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus et certains
anthocyanosides inhibent la croissance des cellules carcinomateuses du cocirclon humain
(HCT116) ces cellules sont toutefois moins sensibles agrave lrsquoapoptose que les autres ligneacutees en
se reacutefeacuterant agrave drsquoautres donneacutees on pourrait suggeacuterer un blocage de la voie drsquoinduction de
lrsquoapoptose des cellules HCT116
Lrsquoinhibition de la croissance par les baies nrsquoest toutefois pas speacutecifique aux cellules
canceacutereuses En conclusion une consommation reacuteguliegravere de baies pourrait maintenir des
niveaux drsquoanthocyanosides dans le plasma Ces baies sont des aliments fonctionnels
prometteurs dans la preacutevention du risque de cancer gracircce agrave leurs effets multiples comme
lrsquoinduction de lrsquoapoptose lrsquoactiviteacute antioxydante et drsquoautres effets anticanceacutereux
En 2004 Zhao et coll (69) ont eacutetudieacute les effets de trois extraits riches en anthocyanosides
Vitis vinifera (Vigne rouge) V myrtillus L et Aronia melanocarpa E (Aronie noire) sur les
cellules canceacutereuses du cocirclon HT-29 et les cellules non tumorigeacuteniques du cocirclon NCM460
Lrsquoeacutetude deacutemontre lrsquoinhibition de la croissance des cellules HT-29 par V myrtillus agrave faibles
concentrations tandis que lrsquoeffet est pauvre sur les cellules NCM460 Cependant une peacuteriode
longue drsquoincubation (72 heures) montre un effet de la myrtille sur la croissance des cellules
NCM460 V myrtillus a une activiteacute importante peut-ecirctre gracircce agrave la cyanidine reporteacutee pour
ecirctre un inhibiteur efficace de la croissance des cellules canceacutereuses coloniques
Dans cette eacutetude la croissance des cellules du colon est inhibeacutee alors que les conditions de pH
et de tempeacuterature ne sont pas optimum pour la stabiliteacute des anthocyanosides Les formes
actives responsables des effets observeacutes pourraient ecirctre dues aux produits de deacutegradation des
anthocyanosides
En conclusion cette eacutetude deacutemontre que des extraits riches en anthocyanosides et notamment
V myrtillus sont capables drsquoinhiber la croissance des cellules canceacutereuses du colon HT-29 agrave
plus basse concentration et agrave des peacuteriodes drsquoincubation plus courtes que la croissance des
cellules non tumorigeacuteniques NCM460 du colon Il reste toutefois agrave deacuteterminer quels sont les
composeacutes des extraits veacuteritablement responsables des effets observeacutes
65
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine
En 2006 Cooke et coll (18) ont eacutetudieacute les effets drsquoun meacutelange drsquoanthocyanosides de V
myrtillus (Mirtoselectreg) et de cyanidine-3-glucoside ou C3G (anthocyanoside le plus
abondant de lrsquoalimentation) sur le deacuteveloppement drsquoadeacutenome intestinal sur souris ApcMin
alimenteacutees pendant 12 semaines avec ces extraits Les souris ApcMin
constituent un modegravele
geacuteneacutetique de polypose adeacutenomateuse familiale humaine Cette maladie autosomique
dominante de lrsquohomme est caracteacuteriseacutee par le deacuteveloppement spontaneacute drsquoune centaine de
polypes colorectaux pouvant se transformer en carcinomes
Les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent que les deux extraits utiliseacutes diminuent le nombre
drsquoadeacutenomes drsquoune maniegravere dose-deacutependante (agrave la plus haute concentration lrsquoinhibition la plus
importante est observeacutee pour la cyanidine-3-glucoside) Les anthocyanosides sont retrouveacutes
dans le plasma agrave la limite de la deacutetection analytique et sont retrouveacutes agrave des niveaux
quantifiables dans lrsquointestin et lrsquourine Les principales formes preacutesentes dans lrsquointestin et
lrsquourine sont des anthocyanosides glucuronides et des meacutetabolites meacutethyleacutes Enfin les
anthocyanosides sont retrouveacutes dans drsquoautres tissus que lrsquointestin
En conclusion la dose eacutequivalente de Mirtoselectreg
chez lrsquohumain est contenue dans environ
740 grammes de baies de V myrtillus suggeacuterant que la dose efficace de lrsquoextrait chez la
souris ApcMin
pourrait ecirctre traduite en une dose importante (mais non impossible) chez
lrsquohumain De plus les glycosides de malvidine sont les anthocyanosides laquo survivants raquo les
mieux sous forme inchangeacutee dans lrsquointestin leur structure eacutetant moins apte agrave subir les
reacuteactions de conjugaison que celle drsquoautres anthocyanosides Lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides
in vivo pourrait ecirctre due au moins en partie agrave leur hydrolyse en anthocyanidines La preacutesence
transitoire des anthocyanidines apregraves hydrolyse de leurs preacutecurseurs glycosyleacutes et leur
transformation par conjugaison meacutetabolique pourraient expliquer lrsquoefficaciteacute de C3G ou du
Mirtoselectreg Le niveau drsquoanthocyanosides agrave la dose efficace chez la souris Apc
Min est bas
dans la circulation systeacutemique mais deacutetectable et mesurable dans le tractus gastro-intestinal et
lrsquourine
Ainsi lrsquoabsence drsquoeffets indeacutesirables des anthocyanosides et leur efficaciteacute dans la reacuteduction
du deacuteveloppement de lrsquoadeacutenome en font de bons candidats pour le deacuteveloppement clinique
66
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes
Les reacutecepteurs agrave lrsquoactiviteacute tyrosine kinase sont des moleacutecules transmembranaires constitueacutees
drsquoun site reacutecepteur sur lequel se lie un ligand (localiseacute sur la face extracellulaire) et un site
tyrosine kinase (sur la face interne) Ces reacutecepteurs ont en plus un site de phosphorylation Le
site tyrosine kinase (constituant une famille drsquoenzymes) est normalement inactif mais peut
srsquoactiver par phosphorylation de la tyrosine Le meacutecanisme drsquoactivation du site tyrosine
kinase ne se fait pas par passage drsquoinformations depuis le site de reconnaissance du ligand
jusqursquoagrave lrsquointeacuterieur de la cellule mais par la liaison du ligand sur deux reacutecepteurs pouvant se
rapprocher et se phosphoryler mutuellement Les reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase jouent
un rocircle crucial dans la carcinogenegravese et la progression tumorale Des exemples importants de
reacutecepteurs agrave tyrosine kinase comportent la famille ErbB incluant le facteur de croissance
eacutepidermique (EGFR ErbB1) et les reacutecepteurs ErbB2-4 lrsquoIGFR1 (insulin-like growth factor
receptor 1) et les VEGFR-2 et VEGFR-3 (vascular endothelial growth factor receptors) ErbB
et IGF sont des reacutecepteurs agrave tyrosine kinase surexprimeacutes dans certains types tumoraux
reacutesultant dans des modifications de la signalisation cellulaire impliqueacutees dans la croissance
cellulaire et la diffeacuterentiation Les reacutecepteurs VEGF sont des modulateurs de lrsquoangiogenegravese et
de la lymphangiogenegravese Crsquoest pourquoi lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs agrave tyrosine
kinase peut ecirctre une theacuterapeutique inteacuteressante (84)
42 Eacutetude de Teller et coll (2009)
Teller et coll (60) ont eacutetudieacute les effets de deux extraits standardiseacutes Mirtocyanreg
(extrait de V
myrtillus et Oenocyaninreg
(extrait de raisins) sur lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs tyrosine kinases
(RTKs) Seuls les reacutesultats concernant V myrtillus seront rapporteacutes dans cette thegravese
Lrsquoinhibition des RTK est eacutevalueacutee en utilisant une activiteacute kinase recombinante dans un
systegraveme de cellules libres et en deacuteterminant lrsquoautophosphorylation induit par le ligand dans
des cellules carcinomateuses de la vulve E431 et dans des cellules endotheacuteliales aortiques
porcines exprimant soit VEGFR-2 soit VEGFR-3 La capaciteacute des extraits riches en
anthocyanosides agrave modifier lrsquoactiviteacute des RTK est compareacutee agrave leur capaciteacute agrave moduler la
croissance des cellules
Les deux extraits inhibent lrsquoactiviteacute drsquoune varieacuteteacute de RTKs dans le systegraveme de cellules libres
(activiteacute kinase des domaines kinases recombinants) et dans les cellules vivantes (reacutecepteur
intact autophosphorylation induite par ligand) Par contre lrsquoautophosphorylation du reacutecepteur
des cellules intactes neacutecessitent des concentrations 10 agrave 50 fois plus hautes que celles
67
neacutecessaires pour lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute kinase recombinante dans le systegraveme de cellules
libres Cette diffeacuterence pourrait srsquoexpliquer par un accegraves pauvre des glycosides aux domaines
kinases recombinants
De plus les deux extraits inhibent davantage les kinases associeacutees avec EGFR et le VEGFR-2
que les kinases associeacutees avec ErbB-2 VEGFR-3 et IGF1R De plus les extraits preacutesentent
peu de speacutecificiteacute entre les membres des reacutecepteurs de la famille ErbB Mecircme si les extraits
riches en anthocyanosides inhibent lrsquoactiviteacute des RTKs peu drsquoeffets ont eacuteteacute montreacutes sur la
croissance des cellules Ceci pourrait ecirctre ducirc soit agrave la faible stabiliteacute des anthocyanosides dans
le milieu de culture soit agrave la preacutesence drsquoautres voies moleacuteculaires que les RTKs ces voies ne
seraient pas affecteacutees par les extraits riches en anthocyanosides et auraient la capaciteacute de
promouvoir la croissance et la survie cellulaire elles pourraient ainsi compenser lrsquoinhibition
des RTKs
Lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoactiviteacute des RTKs nrsquoest pas ducirc aux composants individuels des
extraits en effet V myrtillus contient un ensemble de composeacutes polypheacutenoliques ainsi que
des constituants inconnus Les cateacutechines flavonols et procyanidines preacutesents dans les
extraits en quantiteacutes plus basses que les anthocyanosides ont montreacute dans drsquoautres eacutetudes des
effets inhibiteurs des RTKs Mais la basse biodisponibiliteacute de ces extraits doit ecirctre prise en
compte pour lrsquoeacutevaluation de leurs effets physiologiques
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision
Les extraits de V myrtillus ont eacuteteacute utiliseacutes depuis 1964 dans les affections ophtalmiques et
dans les deacutesordres de la microcirculation Des eacutetudes anciennes ont rapporteacute les effets de
preacuteparations agrave base du fruit de V myrtillus dans lrsquoacuiteacute visuelle en lumiegravere sombre dans la
vision nocturne chez les sujets ne preacutesentant pas de troubles de la vision chez les patients
avec un problegraveme significatif de vision en lumiegravere vive les patients atteints de DMLA de
reacutetinopathie diabeacutetique drsquoinflammation reacutetinienne de reacutetinite pigmentaire (V myrtillus
associeacute au β-carotegravene) et enfin chez les patients avec myopie progressive Drsquoautres eacutetudes ont
rechercheacute les effets de V myrtillus sur la formation de la cataracte chez des patients souffrant
de cataracte corticale seacutenile (extrait pris en association avec la vitamine E) Cependant
lrsquohypothegravese drsquoun effet de V myrtillus sur la vision est tregraves controverseacutee certaines eacutetudes
rapportent des reacutesultats neacutegatifs (35)
Durant la seconde guerre mondiale les pilotes de la British Royal Air force avaient deacutejagrave
rapporteacute une ameacutelioration de lrsquoacuiteacute visuelle apregraves consommation de confitures de myrtilles
68
Cependant durant cette mecircme peacuteriode la technologie du radar a eacuteteacute introduite en Grande-
Bretagne pour la deacutefense aeacuterienne et des eacutetudes ulteacuterieures nrsquoont pas supporteacute lrsquohypothegravese
drsquoune ameacutelioration de la vision nocturne et de la sensibiliteacute au contraste nocturne par la
suppleacutementation en V myrtillus Le systegraveme de radar et non V myrtillus pourrait alors ecirctre la
cause du succegraves de la Royal Air Force (66)
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale
Des eacutetudes ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoextraits de Vaccinum myrtillus seuls ou associeacutes agrave du
β-carotegravene et de la vitamine E (chez des patients avec ou sans deacutesordre oculaire) agrave ameacuteliorer
la vision nocturne agrave induire une adaptation agrave lrsquoobscuriteacute et une restauration de lrsquoacuiteacute
visuelle (suite agrave une exposition agrave une lumiegravere vive ou un flash) plus rapides (42) Drsquoautres
eacutetudes ont montreacute lrsquoefficaciteacute des extraits anthocyanosidiques de myrtille agrave ameacuteliorer la vision
nocturne et lrsquoajustement agrave lrsquoobscuriteacute chez des controcircleurs aeacuteriens des pilotes drsquoavion des
conducteurs de voiture et de camion (43)
Agrave lrsquoopposeacute drsquoautres eacutetudes ne precirctent pas agrave la myrtille des proprieacuteteacutes sur la vision Crsquoest le
cas notamment de lrsquoeacutetude en 2000 de Muth et coll (46) ils ont rechercheacute les effets de V
myrtillus sur lrsquoacuiteacute visuelle nocturne et la sensibiliteacute au contraste nocturne Leur eacutetude est
randomiseacutee double-aveugle et controcircleacutee par placebo Les sujets inclus dans lrsquoeacutetude sont des
hommes jeunes preacutesentant une bonne vision Un groupe reccediloit 160 mg drsquoextrait de V
myrtillus et lrsquoautre groupe un placebo trois fois par jour pendant 21 jours Apregraves un mois
sans traitement le test reprend pendant 3 semaines en inversant les groupes (les sujets ayant
eu le placebo ont maintenant les capsules de V myrtillus et vice versa) Les reacutesultats montrent
qursquoil nrsquoy a pas de diffeacuterences entre les mesures de la moyenne de lrsquoacuiteacute visuelle nocturne
chez les sujets soumis au traitement par V myrtillus et ceux soumis au placebo De mecircme
lrsquoexamen de la derniegravere acuiteacute visuelle durant le traitement actif et celui durant le placebo ne
reacutevegravelent pas de diffeacuterences dans lrsquoacuiteacute visuelle nocturne Le mecircme reacutesultat neacutegatif est
constateacute pour la sensibiliteacute au contraste nocturne
En conclusion cette eacutetude nrsquoapporte pas de reacutesultats positifs sur lrsquoeffet de V myrtillus sur les
deux paramegravetres mesureacutes mecircme si lrsquoextrait est pris agrave haute dose et pendant une dureacutee
significative
Une critique de lrsquoeacutetude de Muth et coll (46) pourrait ecirctre faite sur la population limiteacutee
utiliseacutee peu de sujets ont eacuteteacute inclus dans lrsquoeacutetude et ceux-ci eacutetaient tous des hommes jeunes
avec une bonne vision Il est vrai que deux de ces sujets avaient une moyenne drsquoacuiteacute
69
visuelle nocturne et une sensibiliteacute au contraste nocturne en dessous des autres sujets or
mecircme chez ces sujets aucune diffeacuterence de mesure nrsquoa eacuteteacute enregistreacutee
Cette eacutetude pose de nouveau des doutes sur lrsquoutilisation de la myrtille dans des formes
couramment disponibles et aux doses recommandeacutees comme suppleacutementation efficace pour
lrsquoameacutelioration de la vision nocturne dans une cateacutegorie de sujets preacutesentant une bonne vision
et essentiellement une vision nocturne normale
2 Eacutetude chez des sujets myopes
Une eacutetude a montreacute qursquoune association drsquoanthocyanosides de V myrtillus avec vitamine E et
β-carotegravene ameacuteliorait le champ visuel de patients atteints de myopie aussi bien lors drsquoun
traitement court que long De mecircme il a eacuteteacute deacutemontreacute une efficaciteacute de lrsquoassociation
drsquoanthocyanosides de myrtille avec le reacutetinol sur la sensibiliteacute de la reacutetine de patients myopes
dans 32 des 42 yeux examineacutes (43)
En 2005 Lee et coll (35) ont mis au point une eacutetude randomiseacutee double-aveugle controcircleacutee
par placebo impliquant 60 sujets avec astheacutenopie et myopie basse agrave modeacutereacutee avec erreurs
reacutefractaires entre -1 et -8 dioptres au niveau des deux yeux Lrsquoobjectif de lrsquoeacutetude est de
deacuteterminer lrsquoeffet de lrsquoadministration drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides purifieacutes agrave hautes doses
de V myrtillus sur la fonction visuelle nocturne et les symptocircmes cliniques chez ces sujets de
mecircme acircge et de sensibiliteacute au contraste similaire Ainsi 30 sujets ont reccedilu des comprimeacutes de
100 mg de traitement contenant 85 drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides et les 30 autres sujets
des comprimeacutes placebo deux fois par jours pendant 4 semaines La fonction visuelle nocturne
est eacutevalueacutee par le test de sensibiliteacute au contraste (test objectif) et les symptocircmes cliniques par
un questionnaire rempli par les sujets (test subjectif) avant et apregraves le traitement Ainsi les
reacutesultats baseacutes sur lrsquoanalyse du questionnaire montrent qursquoagrave la suite des 4 semaines de
traitement les sujets traiteacutes par anthocyanosides ont preacutesenteacute une ameacutelioration des symptocircmes
(meilleurs que le groupe placebo) De plus le groupe anthocyanoside a montreacute une sensibiliteacute
au contraste ameacutelioreacutee agrave chaque cycle par degreacute alors qursquoaucune ameacutelioration nrsquoa eacuteteacute
constateacutee dans le groupe placebo
Des eacutetudes anciennes ont reporteacutes une ameacutelioration de la fonction visuelle nocturne chez des
sujets normaux prenant des anthocyanosides alors que des eacutetudes plus reacutecentes nrsquoont montreacute
aucun effet sur la vision nocturne par administration orale simple ou multiple drsquooligomegraveres
drsquoanthocyanosides (35) Ces discordances de reacutesultats pourraient ecirctre causeacutees par des
diffeacuterences dans le choix des sujets les meacutethodes drsquoeacutevaluation de la vision nocturne ainsi que
la concentration et la dose drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides utiliseacutees Alors que des eacutetudes ne
70
montrent pas drsquoeffets des oligomegraveres drsquoanthocyanosides chez les sujets normaux drsquoautres
eacutetudes deacutemontrent lrsquoefficaciteacute de ceux-ci chez les sujets avec myopie ou heacutemeacuteralopie
(diminution anormale de la vision dans lrsquoobscuriteacute)
Dans lrsquoeacutetude de Lee et coll (35) les conditions sont diffeacuterentes de celles que lrsquoon peut trouver
dans drsquoautres eacutetudes qui ont pu ecirctre faites en termes de dose de dureacutee et de type de sujets En
effet une haute dose drsquooligomegraveres anthocyanosides (concentreacutes agrave 85 gracircce au processus de
fermentation speacutecifique) est administreacutee pendant une plus longue peacuteriode compareacutee aux autres
eacutetudes De plus les sujets utiliseacutes englobent des personnes avec myopie astheacutenopie et une
sensitiviteacute au contraste meacutesopique diminueacutee alors que drsquoautres eacutetudes utilisent des sujets
normaux
En conclusion cette eacutetude montre que les anthocyanosides peuvent ameacuteliorer les symptocircmes
subjectifs et les reacutesultats de la moyenne de la sensibiliteacute au contraste chez des sujets
preacutesentant myopie et astheacutenopie Mais drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour rechercher la
dose optimale de V myrtillus la dureacutee de traitement neacutecessaire la dureacutee de lrsquoeffet apregraves
lrsquoarrecirct du traitement et lrsquoapplication de ce traitement en clinique chez des patients avec des
maladies oculaires comme la reacutetinite pigmentaire le glaucome et la reacutetinopathie diabeacutetique
connus pour reacuteduire la vision nocturne
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004)
Canter et coll (13) ont proceacutedeacute agrave une meacuteta-analyse des eacutetudes faites concernant lrsquoeffet des
anthocyanosides de V myrtillus sur la vision nocturne
Des 30 eacutetudes trouveacutees par les auteurs avec des reacutesultats se reacutefeacuterant agrave la vision dans des
conditions de lumiegravere reacuteduites 12 eacutetudes sont des eacutetudes controcircleacutees par placebo Les 4 eacutetudes
les plus reacutecentes sont des eacutetudes controcircleacutees randomiseacutees et rapportent des reacutesultats neacutegatifs
La 5egraveme
eacutetude controcircleacutee randomiseacutee et les 7 eacutetudes controcircleacutees non randomiseacutees rapportent des
reacutesultats positifs dans lrsquoameacutelioration de la vision en lumiegravere reacuteduite Les reacutesultats neacutegatifs sont
associeacutes avec une plus grande rigueur dans la meacutethodologie mais aussi des doses plus basses
et des extraits provenant de sources geacuteographiques distincts pouvant diffeacuterer dans la
composition en anthocyanosides De plus dans 11 des 12 eacutetudes les sujets utiliseacutes sont des
sujets en bonne santeacute avec une vision moyenne normale voire au-dessus de la normale Ainsi
les eacutetudes cliniques les plus rigoureuses ne supportent pas lrsquohypothegravese drsquoune ameacutelioration de
la vision nocturne chez les sujets en bonne santeacute par les anthocyanosides de V myrtillus
Cependant lrsquoassociation entre rigueur meacutethodologique publication reacutecente reacutesultat neacutegatif
est confondu avec plusieurs facteurs de confusion qui peuvent biaiser les eacutetudes comme la
71
dose les diffeacuterentes variations geacuteographiques modifiant la composition des extraits et le type
de sujets inclus dans les eacutetudes De plus les meacutethodes mises en place pour obtenir et
interpreacuteter les eacutelectroreacutetinogrammes employeacutees dans les eacutetudes plus anciennes diffegraverent des
proceacutedures standardiseacutees utiliseacutees maintenant
Lorsque lrsquoanalyse des facteurs de confusion est faite une association entre les reacutesultats
positifs et lrsquoutilisation de plus hautes doses en anthocyanosides de V myrtillus est mise en
eacutevidence De plus la composition phytochimique des extraits diffegraverent selon la geacuteographie
des plantes de Myrtillier Les reacutesultats positifs sont souvent associeacutes avec des eacutetudes utilisant
des extraits provenant drsquoItalie ou de France La quantiteacute des anthocyanosides de la myrtille
(constituants les plus actifs) varient en fonction du cycle de vie des plantes en reacuteponse agrave des
facteurs de stress et des signaux de lrsquoenvironnement Ainsi avec le mucircrissement la quantiteacute
des anthocyanosides augmente alors que celle des proanthocyanidines diminue Crsquoest
pourquoi agrave cause des diffeacuterences geacuteographiques une standardisation drsquoune quantiteacute en
pourcentage fixe drsquoextrait est une proceacutedure insuffisante pour garantir une composition
identique et une activiteacute pharmacologique Lors des eacutetudes drsquoautres composants peuvent ecirctre
ajouteacutes avec les anthocyanosides de mytille comme le β-carotegravene (un deacuteficit est connu pour
ecirctre lieacute agrave une alteacuteration de la vision nocturne) Lrsquoeffet confondant du β-carotegravene dans
certaines eacutetudes ne peut ecirctre correctement eacutevalueacute sans connaitre le statut nutritionnel des
sujets Dans cette meacuteta-analyse 5 eacutetudes utilisent dans le traitement actif du β-carotegravene Une
eacutetude ne montre pas de diffeacuterences dans lrsquointerpreacutetation de lrsquoeacutelectroreacutetinogramme des sujets
traiteacutes avec lrsquoextrait de V myrtillus avec ou sans β-carotegravene et 3 eacutetudes reacutealiseacutees dans les
anneacutees 1940 montrent que le β-carotegravene nrsquoa pas drsquoeffet sur lrsquoadaptation nocturne quand il est
administreacute seul
En conclusion des eacutetudes rigoureuses sur les effets des extraits de V myrtillus vis-agrave-vis de
sujets souffrant drsquoune alteacuteration de la vision nocturne due agrave des conditions pathologiques
oculaires sont neacutecessaires Cependant la preacutesence drsquoeacutetude plus faibles dans la meacutethodologie
le teacutemoignage des eacutetudes animales les eacutetudes des anthocyanosides syntheacutetiques (la cyanidine
syntheacutetique utiliseacutee dans des eacutetudes controcircleacutees par placebo dans les anneacutees 1970 et 1980 a
montreacute une ameacutelioration de la vision nocturne chez des sujets en bonne santeacute et souffrant
drsquoune varieacuteteacute de deacutesordres ophtalmologiques) une eacutetude controcircleacutee randomiseacutee de Ribes
nigrum montrant un effet positif sur le seuil drsquoadaptation nocturne pourraient justifier des
eacutetudes compleacutementaires sur les anthocyanosides de myrtille chez des sujets preacutesentant une
alteacuteration de la vision nocturne
72
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique
La reacutetinopathie diabeacutetique est une complication agrave long terme du diabegravete qui se traduit par une
deacutegeacuteneacuterescence des capillaires irrigant la reacutetine La maladie se manifeste par des
microaneacutevrysmes qui sont de petites dilatations de la paroi des capillaires (preacutesence de petits
points rouges drsquoheacutemorragies et drsquoapparition drsquoexsudatshellip) Dans des formes eacutevolueacutees une
baisse de la vision peut survenir (1) La neacuteovascularisation est la principale modification
rencontreacutee dans la reacutetinopathie diabeacutetique reacutesultant drsquoune interaction avec des cytokines et
des facteurs de croissance pouvant ecirctre responsables de lrsquoangiogenegravese comme dans le cancer
Or VEGF joue un rocircle dans la neacuteovascularisation reacutetinienne mecircme si son rocircle exact dans la
survenue preacutecoce de la pathologie nrsquoest pas encore entiegraverement compris (16)
En 2005 une eacutetude meneacutee par Chung et coll (16) a deacutemontreacute la capaciteacute de Vaccinium
myrtilus a diminueacute le glucose sanguin plasmatique et agrave reacuteduire le pourcentage de surface de
vascularisation reacutetinien chez des rats diabeacutetiques compliqueacute drsquoune reacutetinopathie diabeacutetique
ces pathologies eacutetant induites par la streptozocine Cependant pas drsquoeffet est constateacute sur le
VEGF (16)
Une eacutetude clinique a deacutemontreacute lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides de V myrtillus (administration
orale de 480 mgjour pendant 180 jours) sur les manifestations de la reacutetinopathie diabeacutetique
notamment la reacuteduction voire la disparition des heacutemorragies reacutetiniennes chez des patients
diabeacutetiques (diabegravete type 2) et souffrant drsquoune reacutetinopathie non prolifeacuterative (43)
Lrsquoameacutelioration significative des examens ophtalmoscopiques et angiographiques apregraves
traitement avec 320 mg de Myrtocyanreg
pendant 30 jours a eacuteteacute montreacutee chez 77 agrave 92 des 40
patients inclus dans lrsquoeacutetude et souffrant de diabegravete et de reacutetinopathie hypertensive (43)
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes
Lrsquoeacutepitheacutelium de la surface oculaire joue le rocircle fondamental de barriegravere empecircchant lrsquoentreacutee de
substances nocives dans la corneacutee et maintenant lrsquointeacutegriteacute de la surface oculaire La
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes permet la reacutegeacuteneacuteration du tissu pour
maintenir le rocircle protecteur de la corneacutee et la cicatrisation Crsquoest pourquoi le cycle cellulaire
est tregraves important Au niveau de ces cellules des glycosaminoglycanes (GAGs glucides de
lrsquoorganisme localiseacutes dans le mucus les seacutecreacutetions digestives et le tissu conjonctif) sulfateacutes
sont produits par les trois types de cellules de la corneacutee (cellules eacutepitheacuteliales endotheacuteliales et
les fibroblastes) Les GAGs de lrsquoeacutepitheacutelium corneacuteen peuvent moduler le comportement
cellulaire comme lrsquoadheacutesion la migrationhellip et jouent donc un rocircle important pour la
73
cicatrisation corneacuteenne Lrsquoun des GAGs est lrsquoacide hyaluronique substance de la matrice
extra-cellulaire jouant plusieurs rocircles notamment dans la lubrification lrsquohydratation de la
matrice corneacuteenne et lrsquohomeacuteostasie Il pourrait aussi ameacuteliorer la santeacute de la surface oculaire
et reacuteduire la pression intraoculaire lors de la pose chirurgicale drsquoun implant oculaire (55)
Song et coll (55) ont reacutecemment eacutetudieacute les effets drsquoun extrait de V myrtillus sur le cycle la
croissance cellulaire lrsquoexpression des GAGs et de lrsquoacide hyaluronique dans un modegravele in
vitro de cellules eacutepitheacuteliales limbales corneacuteennes humaines Les reacutesultats deacutemontrent
lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille et ses anthocyanosides agrave promouvoir la division et la
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteenne sans aucune toxiciteacute cellulaire et agrave
augmenter la quantiteacute totale de GAGs sans modifications significatives de lrsquoacide
hyaluronique Lrsquoextrait de myrtille peut alors ecirctre beacuteneacutefique pour la reacutegeacuteneacuteration
physiologique et lrsquohomeacuteostasie
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete
Helmstaumldter (26) a reacutepertorieacute les substances antidiabeacutetiques utiliseacutees avant la deacutecouverte de
lrsquoinsuline Parmi toutes les plantes V myrtillus est celle la plus freacutequemment retrouveacutee dans
les preacuteparations antidiabeacutetiques commerciales au XXegraveme
siegravecle Les feuilles pourraient ecirctre la
partie de plante la plus utiliseacutee Une preacuteparation tregraves commune eacutetait le laquo Pilulae Myrtilli
Jasper raquo (1912) chacun contenant 012 grammes drsquoextraits de feuilles mais cette preacuteparation
nrsquoeacutetait mentionneacutee qursquooccasionnellement dans les traiteacutes scientifiques et seulement quelques
recherches ont eacuteteacute retrouveacutees
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine
Petlevski et coll (48) ont eacutetudieacute les effets drsquoune preacuteparation agrave base de plantes antidiabeacutetiques
comprenant la feuille de V myrtillus et drsquoautres plantes breveteacutee sous le numeacutero No P-
9801091 disponible sur le marcheacute Croate Deux extraits un extrait eacutethanolique (extrait 1) et
non eacutethanolique (extrait 2) sont administreacutes agrave des souris (NOD) non obegraveses rendues
diabeacutetiques par lrsquoalloxane (deacuteriveacute pyrimidique produisant chez lrsquoanimal une neacutecrose des
cellules β des icirclots de Langerhans)
Lrsquoeacutetude deacutemontre que les extraits 1 et 2 diminuent le glucose sanguin de 10 et 20
respectivement de la valeur initiale des souris NOD controcircles (sans traitement) Lrsquoeffet de
lrsquoextrait 2 est donc beaucoup plus marqueacute il est compareacute agrave un antidiabeacutetique de reacutefeacuterence
(acarbose) Les reacutesultats montrent que lrsquoextrait diminue significativement le niveau de glucose
74
sanguin alors que la diminution par lrsquoacarbose nrsquoest pas significative La mecircme chose est
observeacutee pour le niveau de fructosamine dans le sang
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques
Le diabegravete est une maladie souvent associeacutee agrave des deacutesordres meacutetaboliques comme une
hypertriglyceacuterideacutemie Lrsquoinsuline joue un rocircle essentiel dans le meacutetabolisme des lipoproteacuteines
Chez la plupart des patients atteints de diabegravete type 1 (insulino-deacutependant)
lrsquohypertriglyceacuterideacutemie est induit par une moindre activiteacute de la lipase lipoproteacuteique (enzyme
permettant lrsquohydrolyse des triglyceacuterides des lipoproteacuteines plasmatiques) deacutependante de
lrsquoinsuline
Une eacutetude meneacutee en 1996 par Cignarella et coll (17) a montreacute que lrsquoadministration orale
(pendant 4 jours) drsquoun extrait hydro-alcoolique seacutecheacute de feuilles de V myrtillus agrave des rats
rendus diabeacutetiques par streptozocine pouvait diminuer le niveau de glucose plasmatique par
environ 26 et le niveau de triglyceacuterides plasmatiques par 39 Ainsi lrsquoextrait de myrtille
expose une activiteacute hypolipideacutemiante dose-deacutependante chez les rats en stimulant le
catabolisme des lipoproteacuteines riches en triglyceacuterides probablement sous des conditions en
deacuteficits drsquoinsuline Par contre agrave lrsquoopposeacute du ciprofibrate (une moleacutecule de reacutefeacuterence dans le
traitement de lrsquohypertriglyceacuterideacutemie) lrsquoextrait de V myrtillus ne preacutevient pas la formation de
thrombus veineux chez ces rats diabeacutetiques
Ces eacutetudes in vivo ont montreacute lrsquoaction hypoglyceacutemiante de V myrtillus une fois les
constituants isoleacutes cette plante agrave usage traditionnel pourrait eacutegalement attirer lrsquoattention sur le
traitement de certains deacutesordres du meacutetabolisme lipidique
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique
Borrelli et coll (10) ont listeacute les agents phytogeacuteniques utiliseacutes comme remegravedes des ulcegraveres
gastriques Des reacutesultats ont deacutemontreacute lrsquoaction significative de V myrtillus dans la preacutevention
et le traitement des ulcegraveres Certaines eacutetudes ont montreacute ses effets protecteurs dans des ulcegraveres
induits par ligature du pylore par la reacuteserpine ou la pheacutenylbutazone ougrave le traitement avec les
anthocyanosides de V myrtillus a eacuteteacute donneacute avant ou pendant la formation de lrsquoulcegravere La
myrtille exerce un effet anti-ulcegravere en partie par une augmentation du mucus dans la paroi de
lrsquoestomac (ameacuteliorant lrsquoefficaciteacute de la barriegravere formeacutee par ce mucus) et peut influencer la
biosynthegravese des mucopolysaccharides
75
Magistretti et coll (37) montrent qursquoun extrait drsquoanthocyanosides de Vaccinium myrtillus
possegravede une action anti-ulcegravere inteacuteressante dans divers modegraveles expeacuterimentaux De ces
reacutesultats les auteurs ont voulu trouver les composants de Vaccinium myrtillus responsables de
cette action Or cette plante comme nous le savons est riche en anthocyanosides et
anthocyanidines (aglycones respectifs) Cela explique pourquoi les auteurs ont eacutetudieacute les
effets sur lrsquoulcegravere aigu et chronique chez des rats drsquoune anthocyanidine la cyanidine ou 3 5
7-trihydroxy-2-(34-dihydroxypheacutenyl)-1-benzopyrylium chloride (IdB 1027) Les reacutesultats
montrent les effets drsquoIdB 1027 suivants
- reacuteduction de lrsquoulcegravere gastrique induit par la ligature du pylore de faccedilon non dose-
deacutependante
- inhibition de lrsquoulcegravere de stress
- protection de lrsquoestomac de lrsquoulcegravere induit par pheacutenylbutazone
- reacuteduction de la seacuteveacuteriteacute de lrsquoulcegravere induit par indomeacutetacine de faccedilon dose-
deacutependante
- inhibe significativement lrsquoulceacuteration gastrique induit par reacuteserpine
- protection significative mais pas dose-deacutependante contre les leacutesions induites par
lrsquoeacutethanol
- inhibe significativement et de faccedilon dose-deacutependante lrsquoulcegravere induit par histamine
- et reacuteduction significative les leacutesions induites par acide aceacutetique
En conclusion lrsquoIdB 1027 est capable de reacuteduire ou mecircme drsquoinhiber les ulcegraveres induits par de
nombreux facteurs comme la ligature du pylore les AINS Les meacutecanismes par lesquels un
meacutedicament augmente les deacutefenses de la muqueuse gastrique sont varieacutes cela peut ecirctre une
influence sur la seacutecreacutetion et les proprieacuteteacutes physicochimiques du mucus ou une stimulation de
la reacutegeacuteneacuteration cellulaire une influence sur la microcirculation de la muqueuse la seacutecreacutetion
de bicarbonate la protection contre les dommages induits par les radicaux libres ou
lrsquoaugmentation de lrsquoAMP cyclique Ainsi lrsquoIdB 1027 peut agir par une combinaison de
certains de ces meacutecanismes comme une augmentation de la seacutecreacutetion de mucus (sans effet
anti-seacutecreacutetoire gastrique) dans des conditions physiologiques normales et dans des conditions
de deacutefense alteacutereacutees la stimulation de la reacutegeacuteneacuteration cellulaire montreacutee par son activiteacute contre
lrsquoulcegravere induit par acide aceacutetique lrsquoameacutelioration de la microcirculation de la muqueuse
montreacutee par son activiteacute contre lrsquoulcegravere geacuteneacutereacute par lrsquohistamine De plus lrsquoIdB 1027 est un
antioxydant et les anthocyanidines sont des inhibiteurs efficaces de lrsquoAMPc-
phosphodiesteacuterase dans des tissus varieacutes ce qui pourrait contribuer agrave lrsquoactiviteacute
pharmacologique observeacute
76
En conclusion les effets deacutemontreacutes dans les modegraveles drsquoanimaux lrsquoabsence de toxiciteacute et
lrsquoexcellente toleacuterance font de cette moleacutecule un bon candidat dans des eacutetudes cliniques
comme agent antiulcegravereux
2 Action sur Helicobacter pylori
Le traitement contre Helicobacter pylori est la plupart du temps constitueacute de deux
antibiotiques et drsquoun inhibiteur de la pompe agrave protons comme lrsquoomeacuteprazole par exemple Or
le problegraveme qui se pose est lrsquoapparition drsquoune reacutesistance aux antibiotiques De plus la bacteacuterie
peut intervenir dans la production des radicaux libres de lrsquooxygegravene augmentant davantage le
stress oxydant et ses dommages au niveau gastrique Une augmentation de la peroxydation
lipidique et un dommage agrave lrsquoADN au niveau des tissus gastriques sont alors observeacutes Par
conseacutequent des antioxydants naturels comme les anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
pourraient servir comme outil theacuterapeutique pour reacuteduire le stress oxydant induit par
Helicobacter pylori (15)
Chatterjee et coll (15) ont eacutetudieacute les effets de diffeacuterents extraits de baies sur Helicobacter
pylori avec ou sans clarithromycine in vitro ainsi que la sensibiliteacute de la bacteacuterie agrave la
clarithromycine Plusieurs baies sont eacutetudieacutees comme la myrtille sauvage (Vaccinium
myrtillus) lrsquoairelle la canneberge la fraise la framboise le sureau et Optiberryreg (un
meacutelange de ces six baies) Cette eacutetude a montreacute que tous les extraits aux concentrations
testeacutees inhibent la croissance de maniegravere dose-deacutependante de H pylori avec une efficaciteacute
supeacuterieure pour Optiberryreg Crsquoest la premiegravere eacutetude montrant lrsquoinhibition de H pylori par des
extraits de baies et notamment V myrtillus lequel preacutesente une meilleure activiteacute que la
fraise la framboise et la canneberge en particulier pour des basses concentrations Enfin un
effet inhibiteur suppleacutementaire est obtenu avec lrsquoajout de la clarithromycine associeacutee aux
extraits de baies agrave toutes les concentrations testeacutees
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus
1 Action antibacteacuterienne
Une eacutetude meneacutee en 2005 par Puupponen-Pimiauml et coll (51) a montreacute lrsquoactiviteacute
antibacteacuterienne de plusieurs baies nordiques incluant V myrtillus Les reacutesultats rapporteacutes
dans cette thegravese ne se reacutefegraverent qursquoagrave la myrtille et sont reacutesumeacutes dans le tableau suivant
77
Listeria
monocytogenes
E-991205
Salmonella
enterica sv
thyphimurium
E-981151
Staphylococcus
aureus E-70045
Lactobacillus
rhamnosus
E-96666
Temps
drsquoincubation 12h 24h 12h 24h 12h 24h 12h 24h
2 mgmL-1
- - + - ++ ++ - -
10 mgmL-1
- - +++ + +++++ +++++ - -
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
(Leacutegende C concentration de la baie de myrtille - pas drsquoeffets inhibiteurs + nombre de
bacteacuteries viables diffegraverent de 10-5 times 101 par rapport au controcircle ++ nombre de bacteacuteries viables
diffegraverent de 5 times 101-5 times 102 par rapport au controcircle +++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 102-5 times 103 par rapport au controcircle ++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 103-5 times 104
par rapport au controcircle +++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de plus 5 times 104 par rapport au
controcircle)
Les reacutesultats deacutemontrent lrsquoactiviteacute antimicrobienne de la myrtille lyophiliseacutee sur les bacteacuteries
Salmonella et Staphylococcus augmente de maniegravere concentration-deacutependante Par contre la
myrtille nrsquoa aucune activiteacute vis-agrave-vis de Listeria et Lactobacillus
Les composeacutes pheacutenoliques ne sont responsables que partiellement de lrsquoinhibition de la
croissance des bacteacuteries Salmonella les effets antimicrobiens eacutetant probablement deacutetenus par
drsquoautres composeacutes comme les acides organiques
Les baies et notamment V myrtillus pourraient ecirctre utiliseacutees dans les aliments fonctionnels et
dans lrsquoindustrie pharmaceutique en tant qursquoagents antimicrobiens
Ainsi la myrtille utiliseacutee traditionnellement est preacutesente dans de nombreuses eacutetudes qui ont
deacutemontreacute ses multiples actions dans des domaines meacutedicaux varieacutes et des pathologies diverses
comme lrsquoinsuffisance veineuse lrsquoatheacuteroscleacuterose le cancer le diabegravete les deacutesordres
oculaireshellip Par ailleurs son action antioxydante attire lrsquoattention des scientifiques et il serait
favorable drsquoentreprendre des eacutetudes cliniques
VIII Toxicologie
1 Effets indeacutesirables
Dans les eacutetudes cliniques sur les extraits de V myrtillus reacutepertorieacutees par Marazzoni et coll en
1996 (43) aucun effet indeacutesirable nrsquoa eacuteteacute observeacute mecircme lors drsquoeacutetudes ougrave le traitement aux
78
extraits de V myrtillus est pris sur une longue peacuteriode Cependant la plupart des eacutetudes
nrsquoincluaient qursquoun petit nombre de patients Une eacutetude de surveillance post-marketing a inclus
2295 sujets prenant 160 mg de Myrtocyanreg
deux fois par jour pendant 1-2 mois pour des
pathologies diverses (insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs fragiliteacute capillaire
modifications de la microcirculation reacutetinienne ou heacutemorroiumldes) Cette eacutetude a montreacute que
seuls 94 sujets ont reporteacute des effets indeacutesirables surtout lieacutes agrave la peau au tractus gastro-
intestinal et au systegraveme nerveux Une eacutetude non-controcircleacutee incluant des femmes enceintes avec
insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs et en crise heacutemorroiumldaire montre qursquoune
administration drsquoun extrait de myrtille (80 ou 160 mg) deux ou trois par jour pendant trois
mois nrsquoentraicircnait pas drsquoeffets indeacutesirables Mais en preacutesence de peu drsquoeacutetudes toxicologiques et
drsquoune seacutecuriteacute de la myrtille non eacutetablie lrsquoutilisation de la myrtille chez la femme enceinte et
allaitante devrait ecirctre proscrite
2 Doses leacutetales 50 (DL50)
Les donneacutees toxicologiques indiquent une DL50 pour le Myrtocyanreg drsquoenviron 2 gkg chez
les souris et les rats Chez le chien des doses uniques de 3 gkg nrsquoentraicircnent pas drsquoeffets
indeacutesirables si ce nrsquoest une coloration plus fonceacutee des urines et fegraveces Une administration
orale quotidienne drsquoextrait de V myrtillus agrave des doses de 125 agrave 500 mgkg et 80 agrave 320 mgk
respectivement agrave des rats et des chiens pendant 6 mois nrsquoentrainent ni mortaliteacute ni toxiciteacute
Les eacutetudes pharmacocineacutetiques reacutealiseacutees chez des rats ont deacutemontreacute une eacutelimination rapide
des anthocyanosides de myrtille dans les deux heures suivant une administration orale (5) Il
est eacutetablit dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) que si les parties de
mytille utiliseacutees pour les phytomeacutedicaments est une poudre de fruit frais ou sec ou de feuille
le dossier laquo abreacutegeacute raquo de lrsquoAMM doit preacutesenter une eacutetude toxicologique alleacutegeacutee celle-ci
nrsquoeacutetant pas indispensable pour certaines formes galeacuteniques agrave base de myrtille (tisane extrait
aqueux teinture extrait hydro-alcoolique) La monographie de la Commission E allemande
preacutecise que si la baie de myrtille est atoxique la feuille quant agrave elle peut induire des
intoxications chroniques en cas de doses eacuteleveacutees ou drsquousage prolongeacute Les premiers
symptocircmes chez lrsquoanimal se traduisent par une aneacutemie une cachexie un ictegravere un eacutetat
drsquoexcitation aiguumle et des perturbations du tonus pouvant agrave terme ecirctre fatale apregraves une
administration chronique de 15 gkgjour Ces symptocircmes ressembleraient agrave ceux preacutesents
dans lrsquointoxication par lrsquohydroquinone ce dipheacutenol nrsquoest pourtant pas preacutesent dans la feuille
de myrtille La Commission E par prudence ne justifie pas lrsquoutilisation de la feuille dans un
but theacuterapeutique face agrave ces risques La Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament quant agrave
79
elle ne demande un essai toxicologique que pour la poudre de feuille mais pas pour les
extraits (quelque soit le titre) (11) De ce fait drsquoautres eacutetudes toxicologiques seraient
neacutecessaires
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus
Mecircme si aucune contre-indication nrsquoest mentionneacutee dans la litteacuterature il convient toutefois de
consideacuterer un risque potentiel drsquointeraction entre les preacuteparations agrave base de myrtille et drsquoautres
produits meacutedicinaux ayant des effets similaires ou opposeacutes agrave ceux de la myrtille Des eacutetudes
preacutecliniques par exemple ont montreacute que les extraits de V myrtillus avaient un effet anti-
agreacutegant et pouvaient augmenter le temps de saignement (5) Une surveillance devrait ecirctre
apporteacutee lors drsquoassociation entre les speacutecialiteacutes agrave base de myrtille et les meacutedicaments
antiagreacutegants ou anticoagulants mecircme si aucune interaction nrsquoa eacuteteacute rapporteacutee Enfin comme
nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment lrsquoutilisation de speacutecialiteacutes agrave base de myrtille est deacuteconseilleacutee
chez la femme enceinte ou allaitante (5)
80
QUATRIEME PARTIE
UTILISATIONS DE VACCINIUM
MYRTILLUS L
81
I Utilisations alimentaires de Vaccinium myrtillus
La myrtille est avant tout un fruit tregraves appreacutecieacute par les consommateurs pour ses proprieacuteteacutes
gustatives et sa valeur nutritive
1 Utilisations culinaires
Les promeneurs friands des baies de myrtille les consomment sur place ou chez eux Il est
important de laver les baies avant leur consommation car lrsquohomme risque drsquoecirctre toucheacute par
lrsquoeacutechinococcose multiloculaire Cette maladie parasitaire est une cestodose qui seacutevit dans
lrsquoheacutemisphegravere Nord le Massif central lrsquoEst de la France et la Suisse Le renard et autres
canideacutes (chiens) se contaminent eux-mecircmes en mangeant des rongeurs sauvages parasiteacutes
(campagnoleshellip) ils deacuteposent alors des selles contenant des œufs de teacutenia sur le sol
lrsquohomme srsquoinfeste en mangeant les myrtilles proches du sol La maladie se caracteacuterise par le
deacuteveloppement de la larve de teacutenia dans le foie y formant de nombreux alveacuteoles Les
symptocircmes principaux sont douleur sourde amaigrissement et ictegravere (1)
Utiliseacutees en cuisine les myrtilles font lrsquoobjet de nombreuses recettes culinaires Elles sont
utiliseacutees pour accommoder les viandes leur apportant une saveur aciduleacutee Des charcutiers les
ajoutent mecircme agrave leurs saucissons pour les rendre plus moelleux
Les myrtilles sont souvent retrouveacutees dans de nombreuses pacirctisseries (sableacutes citronneacutes cakes
brioches tartes tartelettes puddings vacherins souffleacutes et glaceacutes coulis de fruits rouges
sorbets glaceshellip)
Les baies peuvent aussi ecirctre utiliseacutees pour la preacuteparation de confiture geleacutee et compote
Certains agriculteurs-reacutecolteurs vendent les myrtilles en confiture sur les marcheacutes locaux
Enfin on retrouve des boissons agrave base de myrtilles (jus de fruit nectar sirop liqueur vin et
vinaigre) (22)
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire
Les proprieacuteteacutes tinctoriales des anthocyanes de myrtille sont utiliseacutees dans lrsquoindustrie
alimentaire comme colorant sous la codification E 163 Gracircce agrave leur tregraves faible toxiciteacute il nrsquoy
aucune quantiteacute maximale speacutecifieacutee (quantum satis) ni dose journaliegravere acceptable Malgreacute
leurs proprieacuteteacutes tinctoriales les anthocyanes sont peu utiliseacutees dans lrsquoindustrie alimentaire agrave
cause de leur instabiliteacute (perte ou changement de couleur) en preacutesence de certains facteurs
physico-chimiques de lrsquoenvironnement comme le pH la tempeacuterature et la lumiegravere De plus
82
drsquoautres problegravemes srsquoajoutent agrave leur utilisation comme leur reacuteaction avec le dioxyde de soufre
(substance utiliseacutee pour la conservation drsquoaliments) leur faible solubiliteacute dans lrsquoeau et leur
preacutecipitation formant des complexes avec les proteacuteines Crsquoest pourquoi des proceacutedeacutes ont eacuteteacute
rechercheacutes pour augmenter leur stabiliteacute comme lrsquoutilisation drsquohydrocolloiumldes comme
lrsquoalginate de sodium et un surfactant ionique comme le laurylsulfate de sodium (3)
II Utilisations pharmaceutiques
Pour rappel la liste des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition
comporte deux parties (2)
La LISTE A laquo Plantes meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement raquo et la LISTE B laquo Plantes
meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement en lrsquoeacutetat ou sous forme de preacuteparation dont les effets
indeacutesirables potentiels sont supeacuterieurs au beacuteneacutefice theacuterapeutique attendu raquo
La myrtille appartient agrave la liste A des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition mais nrsquoy fait lrsquoobjet drsquoaucune monographie Agrave la Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition le fruit frais et sec de myrtille font lrsquoobjet drsquoune monographie (Annexe II et III
respectivement) En France certaines indications theacuterapeutiques selon la partie de plante
utiliseacutee sont revendiqueacutees dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) Ainsi
on retrouve les indications suivantes
- pour le fruit (frais ou sec) et la feuille par voie orale ou en usage locale
traditionnellement utiliseacute dans les manifestations subjectives de lrsquoinsuffisance veineuse telles
que jambes lourdes et dans la symptomatologie heacutemorroiumldaire
Il y a drsquoautres indications theacuterapeutiques possibles comme
- pour le fruit (frais ou sec) par voie orale traditionnellement utiliseacute comme
traitement adjuvant de la composante douloureuse des troubles fonctionnels digestifs
- pour le fruit frais (voie orale ou usage local) traitement symptomatique des
troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire tels que ecchymoses peacuteteacutechies
- pour la feuille et le fruit sec (voie orale) traitement symptomatique des diarrheacutees
leacutegegraveres
La Commission E allemande preacutecise dans la monographie (1987) que le fruit de myrtille est
eacutegalement utiliseacute pour le traitement des diarrheacutees aigueumls et pour lrsquoinflammation locale
modeacutereacutee des muqueuses de la caviteacute buccale Le fruit seacutecheacute est utiliseacute agrave la dose de 20 agrave 60 g
par jour en deacutecoction par voie orale pour le traitement de la diarrheacutee chez lrsquoadulte
83
Ainsi les extraits riches en anthocyanosides des fruits de la myrtille peuvent entrer dans la
composition de meacutedicaments utiliseacutes pour traiter les manifestations fonctionnelles de
lrsquoinsuffisance veinolymphatique la symptomatologie des troubles fonctionnels de la fragiliteacute
capillaire et les troubles de la vision meacutesopique et scotopique (11)
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille
11 Meacutedicaments allopathiques (82)
Laboratoire LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRARELreg 100 (comprimeacute enrobeacute bleu clair conditionnement de 20 comprimeacutes)
Meacutedicament vasculoprotecteur drsquoautorisation de mise sur le marcheacute (AMM) ndeg
3400930311714 (1987 reacuteviseacute le 24082005) Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Crsquoest une speacutecialiteacute pharmaceutique associant 100 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de V
myrtillus et 5 mg de β-carotegravene avec comme indications
laquo - Traitement dappoint des manifestations fonctionnelles de linsuffisance veinolymphatique
(jambes lourdes douleurs impatiences du primodecubitus)
- Traitement symptomatique dappoint des troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire
- Traitement dappoint des baisses dacuiteacute et troubles du champ visuel preacutesumeacutes dorigine
vasculaire raquo
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
DIFRARELreg E (comprimeacute enrobeacute blanc)
Meacutedicament ophtalmique agrave viseacute vasculoprotectrice drsquoAMM ndeg3400930311592 (196597
reacuteviseacute le 28022006) pour le conditionnement de 26 comprimeacutes et ndeg3400937701068 (2006)
pour le conditionnement de 60 comprimeacutes Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Cette speacutecialiteacute pharmaceutique associe 50 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de myrtille et
50 mg drsquoα-tocopheacuterol avec comme indication les troubles de la vision meacutesopique scotopique
(heacutemeacuteralopie) et la myopie
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
84
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques
LABORATOIRE BOIRON
Ce laboratoire homeacuteopathique commercialise la teinture megravere de V myrtillus et des dilutions
homeacuteopathiques
Agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise la myrtille a une monographie speacutecifique intituleacutee laquo Vaccinium
myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Annexe IV)
LABORATOIRE LEHNING
DIACUREreg (conditionnement de 60 geacutelules) drsquoAMM ndeg 3232544
Meacutedicament homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale Il est
constitueacute de lrsquoassociation suivante
- Taraxacum pulveacuteriseacute (H) (Pissenlit) 40 mg
- Berberis vulgaris (H) D3 (Epine-vinette) 40 mg
- Juglans regia pulveacuteriseacute (H) (Noyer) 120 mg
- Achillea millefolium (H) D2 (Achilleacutee millefeuille) 40 mg
- Vaccinium myrtillus folium pulveacuteriseacute (H) (feuille de myrtille) 80 mg
- Erythrea centaurium pulveacuteriseacute (H) (Petite centaureacutee) 40 mg
- Natrum phosphoricum (H) D3 40 mg
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute pour les polysurcharges
meacutetaboliques (facilite lrsquoeacutelimination des deacutechets meacutetaboliques) et notamment comme
traitement divers du diabegravete la feuille de myrtille y est utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes
hypoglyceacutemiantes
La posologie est de 1 agrave 2 geacutelules 3 fois par jour en dehors des repas en cure de 1 agrave 2 mois
(82)
DIABENEreg (solution buvable flacon de 30 mL) drsquoAMM ndeg 3030349 est un meacutedicament
homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale
Il est constitueacute de lrsquoassociation suivante Alchemilla vulgaris D3 Kreosotum D4
Strychninum nitricum D4 Arsenicum album D4 Adrenalinum D6 Belladonna D4 Syzygium
jambolanum D2 Vaccinium myrtillus D2 Taraxacum D3 Natrum phosphoricum D3
Helonias dioica D2
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute dans les polysurcharges
meacutetaboliques comme traitement divers de lrsquoobeacutesiteacute
85
La posologie est de 30 gouttes 3 fois par jour de preacutefeacuterence en dehors des repas (82)
13 Compleacutements alimentaires
LABORATOIRE MERCK
BION 3 SENIORreg (conditionnement de 30 ou 60 comprimeacutes)
Compleacutement alimentaire constitueacute de 3 probiotiques 12 vitamines 8 oligo-eacuteleacutements et 3
extraits veacutegeacutetaux (100 microg de luteacuteine extraits de 20 mg de ginseng et 1 mg de myrtille) Il est
preacuteconiseacute en cas de sphegravere ORL fragiliseacutee de deacutefenses naturelles affaiblies et pour mieux
faire face aux rythmes de vie actuels alimentation deacuteseacutequilibreacutee stress surmenage La
posologie est de 1 comprimeacute par jour en cure de 30 ou 60 jours (82)
RICHELETreg ANTI-AGE VISION (conditionnement de 30 comprimeacutes)
Crsquoest un compleacutement alimentaire composeacute de luteacuteine 105 mg drsquoextrait de myrtille des
vitamines B1 B2 et B6 A C E et du seacuteleacutenium La myrtille est utiliseacutee dans ce produit pour
ameacuteliorer la microcirculation sanguine de lrsquoœil et assurer le bon fonctionnement de ses
constituants La posologie est de 1 comprimeacute par jour pendant 3 mois agrave renouveler
peacuteriodiquement (82)
LABORATOIRE LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRAVISIONreg ANTI-VIEILLISSEMENT
Compleacutement alimentaire agrave viseacutee oculaire comprenant des vitamines (vitamine C et E) des
oligo-eacuteleacutements (Zn et Se) des pigments maculaires (luteacuteine extrait de maiumls dont
zeacuteaxanthine) du DHA (ω3) des huiles de poisson et un extrait sec de myrtille doseacute agrave 100 mg
(pour 2 geacutelules) Sur la notice du meacutedicament on trouve les indictions suivantes laquo il est
conseilleacute pour corriger les effets neacutefastes au niveau oculaire des deacuteficits antioxydants en
acides gras essentiels et en pigments maculaires raquo La posologie est de 1 geacutelule 2 fois par jour
(notice du compleacutement alimentaire)
LABORATOIRE ARKOPHARMA
Ce laboratoire pharmaceutique fabrique des geacutelules contenant de la poudre totale microniseacutee
Aujourdrsquohui seule la baie de myrtille est commercialiseacutee par le laboratoire Arkopharma
86
Les Arkogeacutelules de myrtille (baie) sont indiqueacutees dans la diarrheacutee la colite et lrsquoameacutelioration
de la vision nocturne (Brochure Arkopharma)
La myrtille est preacutesente dans beaucoup drsquoautres compleacutements alimentaires que nous ne
citerons pas ici
89
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98
LISTE DES ANNEXES
ANNEXE I Table de composition nutritionnelle Ciqual 2008 de lrsquoAffsa
ANNEXE II Monographie du fruit frais de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE III Monographie du fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE IV laquo Vaccinium myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Pharmacopeacutee
franccedilaise Xegraveme eacutedition)
99
ANNEXE I
TABLE DE COMPOSITION
NUTRITIONNELLE CIQUAL 2008 DE
LrsquoAFSSA
100
Myrtille fraicircche (teneurs pour 100 grammes drsquoaliment comestible)
Leacutegende du code confiance
Echelle de fiabiliteacute de A agrave D A correspondant aux donneacutees les plus fiables
Nom des constituants Uniteacute Teneur
moyenne Min Max Nb eacutechantillons
Source des
donneacutees
Code
confiance
Energie kJ 213 - - - C
Energie kcal 50 - - - C
Energie eacutetiquetage kJ 213 - - - C
Energie eacutetiquetage kcal 50 - - - C
Eau g 838 834 8421 2 760
743 C
Proteacuteines g 074 - - - C
Proteacuteines brutes (N x 625) g 074 - - 1 743 C
Glucides g 10 - - - C
Sucres g 996 - - 1 743 C
Amidon g 003 - - 1 743 C
Polyols totaux g 0 - - - D
Fibres alimentaires g 24 - - 1 743 C
Lipides g 033 - - 1 743 C
AG satureacutes g 0028 - - 1 743 C
AG monoinsatureacutes g 0047 - - 1 743 C
AG polyinsatureacutes g 0146 - - 1 743 C
Cholesteacuterol mg 0 - - 1 690 C
Alcool (eacutethanol) g 0 - - 1 690 C
Acides organiques g 137 - - - 723 C
Sodium mg 1 - - 1 743 C
Magneacutesium mg 6 - - 1 743 C
Phosphore mg 12 - - 1 743 C
Potassium mg 77 - - 1 743 C
Calcium mg 6 - - 1 743 C
Manganegravese mg 0336 - - 1 743 C
Fer total mg 028 - - 1 743 C
Cuivre mg 0057 - - 1 743 C
Zinc mg 016 - - 1 743 C
Seacuteleacutenium microg 01 - - 1 743 C
Iode microg 05 - - 1 573 D
Reacutetinol microg 0 - - 1 743 C
Becircta-carotegravene microg 32 - - 1 743 C
Vitamine D microg 0 - - 1 445 C
Activiteacute vitaminique E (en
eacutequivalents alpha-tocopheacuterol) mg 1 - - 1 497 C
Vitamine C mg 97 - - 1 743 C
Vitamine B1 ou Thiamine mg 0037 - - 1 743 C
Vitamine B2 ou Riboflavine mg 0041 - - 1 743 C
Vitamine B3 ou PP ou
Niacine mg 0418 - - 1 743 C
Vitamine B5 ou Acide
pantotheacutenique mg 0124 - - 1 743 C
Vitamine B6 ou Pyridoxine mg 0052 - - 1 743 C
Vitamine B9 ou Folates
totaux microg 6 - - 1 743 C
Vitamine B12 ou
Cobalamines microg 0 - - 1 743 C
101
ANNEXE II
MONOGRAPHIE DU FRUIT FRAIS
DE VACCINIUM MYRTILLUS L
(Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
102
Myrtille (fruit frais de)
Myrtilli fructus recens
DEacuteFINITION
Fruit mucircr frais ou congeleacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 030 pour cent drsquoanthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-
O-glucoside (chrysantheacutemine C21H21ClO11 Mr 4848) (drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur sucreacutee un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit frais de myrtille est une baie bleu-noir globuleuse drsquoenviron 5 mm de diamegravetre Il
comporte agrave la base une cicatrice ou rarement un fragment de peacutedoncule Le sommet aplati
est surmonteacute par les restes du style persistant et du calice qui forme un repli circulaire Dans
le meacutesocarpe violaceacute et juteux 4 agrave 5 loges renferment de nombreuses petites graines ovoiumldes
brunes
B Le fruit frais de myrtille broyeacute est rouge violaceacute Examinez-le au microscope en utilisant
de la solution drsquohydrate de chloral R Il preacutesente des cellules scleacutereuses rose violaceacute agrave paroi
eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en amas provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des
fragments drsquoeacutepicarpe brun-rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie
des fragments jaune-brun du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave
paroi preacutesentant des eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles de cristaux
drsquooxalate de calcium
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 5 g de drogue reacutecemment broyeacutee ajoutez 20 ml de meacutethanol R
Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
103
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge violaceacute
Chrysantheacutemine une bande rouge violaceacute Une bande principale rouge violaceacute
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge violaceacute
mdash plusieurs bandes bleu violaceacute
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Cendres totales (2416) maximum 06 pour cent
Perte agrave la dessiccation (2232) 800 pour cent agrave 900 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave 105 degC
sur 5000 g de drogue reacutecemment broyeacutee
DOSAGE
Broyez extemporaneacutement 50 g de drogue A environ 500 g de drogue broyeacutee exactement
peseacutes ajoutez 95 ml de meacutethanol R Agitez meacutecaniquement pendant 30 min Filtrez dans une
fiole jaugeacutee de 1000 ml lavez le filtre et compleacutetez au volume avec du meacutethanol R Diluez
cette solution au 150 dans une solution drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le
meacutethanol R
Mesurez lrsquoabsorbance (2225) de la solution obtenue agrave 528 nm en prenant une solution
drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le meacutethanol R comme liquide de
compensation
Calculez la teneur pour cent en anthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-O-
glucoside agrave lrsquoaide de lrsquoexpression suivante
718 = absorbance speacutecifique du chlorure de cyanidine 3-O-glucoside agrave 528 nm
A = absorbance agrave 528 nm
M = Masse de la prise drsquoessai en grammes
CONSERVATION
Lorsque le fruit frais de myrtille est congeleacute conservez-le agrave une tempeacuterature infeacuterieure ou
eacutegale agrave minus 18degC
104
ANNEXE III
MONOGRAPHIE DU FRUIT MUcircR
SECHE DE VACCINIUM MYRTILLUS
L
(Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
105
Fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 10 pour cent de tanins exprimeacutes en pyrogallol (C6H6O3 Mr 1261)
(drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur douce un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit sec de myrtille est une baie bleu-noir ratatineacutee subglobuleuse de 5 mm environ de
diamegravetre avec une cicatrice agrave la base Le sommet est surmonteacute par les restes du style et le
calice persistant qui forme un repli circulaire Le meacutesocarpe violet intense et charnu renferme
de nombreuses petites graines ovoiumldes brunes
B Reacuteduisez le fruit sec de myrtille en poudre (355) (2912) La poudre est brun-violet
Examinez au microscope en utilisant de la solution drsquohydrate de chloral R La poudre
preacutesente des cellules scleacutereuses rose-violet agrave paroi eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en
amas et provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des fragments drsquoeacutepicarpe coloreacutes en brun-
rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie des fragments jaune-brun
du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave paroi preacutesentant des
eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles et des prismes de cristaux drsquooxalate de
calcium de diffeacuterente taille
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 2 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912) ajoutez 20 ml de
meacutethanol R Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
106
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge-violet de faible intensiteacute
Chrysantheacutemine une bande rouge- violet Une bande principale rouge-violet
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge-violet
mdash plusieurs bandes bleu-violet
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Perte agrave la dessiccation (2232) au maximum 120 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave
105 degC pendant 2 h sur 1000 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute
Cendres totales (2416) au maximum 50 pour cent
DOSAGE
Effectuez la deacutetermination des tanins dans les drogues veacutegeacutetales (2814) Utilisez 1500 g de
fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912)
107
ANNEXE IV
laquo VACCINIUM MYRTILLUS
POUR
PREPARATIONS
HOMEOPATHIQUES raquo
(Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition)
108
109
110
111
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
REacuteSUMEacute
Vaccinium myrtillus Linneacute ou myrtille sauvage est un sous-arbrisseau de la famille des
Ericaceacutees On la retrouve dans le nord et le centre de lrsquoEurope en Asie et en Ameacuterique
Boreacuteale En France la myrtille est commune dans la plupart des montagnes entre 400 et 2500
megravetres drsquoaltitude Elle est diffeacuterente de la myrtille cultiveacutee ou Vaccinium corymbosum L Son
fruit est une baie bleu-noir globuleuse agrave saveur sucreacutee et aciduleacutee V myrtillus L renferme de
nombreux composeacutes pheacutenoliques dont les anthocyanosides ceux-ci sont principalement
retrouveacutes dans la peau et la pulpe du fruit de la myrtille ils sont agrave lrsquoorigine de la plupart de
ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques mecircme si drsquoautres composeacutes participeraient agrave lrsquoaction beacuteneacutefique
de la myrtille
V myrtillus L est une plante meacutedicinale inscrite sur la liste A de la Pharmacopeacutee franccedilaise
Xegraveme
eacutedition Le fruit (frais et sec) de la myrtille fait lrsquoobjet drsquoune monographie dans la
Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition Les proprieacuteteacutes theacuterapeutiques des feuilles et des fruits
de V myrtillus L ont eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine populaire les fleurs pour leurs
proprieacuteteacutes toniques astringentes antiseptiques dans le traitement de la diarrheacutee de la
dysenterie quant agrave la feuille elle eacutetait surtout utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
Certaines indications sont valideacutees et figurent dans la Note explicative de lrsquoAgence du
meacutedicament de 1998 et la Commission E allemande Si la baie est atoxique la feuille
preacutesenterait un risque drsquointoxication lieacute agrave des fortes doses ou agrave une utilisation chronique
La myrtille a fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vitro in vivo et quelques eacutetudes cliniques
ayant montreacute une faible biodisponibiliteacute (surtout chez lrsquohomme) mais des effets beacuteneacutefiques
dans le domaine vasculaire dans certaines pathologies ougrave le stress oxydant est impliqueacute
(cancer maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives DMLAhellip) cette activiteacute reste agrave ecirctre prouveacutee chez
lrsquohomme Quant aux eacutetudes cliniques concernant lrsquoaction de la myrtille sur la vision (surtout
nocturne) elles restent controverseacutees mais des eacutetudes in vitro reacutecentes ont montreacute ses effets
beacuteneacutefiques sur la reacutegeacuteneacuteration des cellules corneacuteennes Enfin outre son emploi en cuisine la
myrtille est utiliseacutee dans lrsquoindustrie pour ses anthocyanes aux proprieacuteteacutes tinctoriales et dans le
domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments et des compleacutements alimentaires
agrave base de myrtille pour diverses indications (traitement de la fragiliteacute capillaire de
lrsquoinsuffisance veineuse et dans les troubles de la vision meacutesopique et scotopique)
MOTS-CLEFS Vaccinium myrtillus - Myrtille - anthocyanosides - phytotheacuterapie - stress
oxydant
THESE SOUTENUE LE 19 MAI 2010
Par Olivia Maillefert
86 rue des Ecoles
73230 St Alban Leysse
COMPOSITION DU JURY
Preacutesident du jury
Mr KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences en Botanique
Membres du jury
Mr CORJON Gilles Docteur en Pharmacie
Mr CHOVELON Michel Docteur en Pharmacie
- 1ere pagepdf
- table des matiegraverespdf
- thegravese myrtille olivia paginationpdf
- Derniere pagepdf
-
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus p62
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer p62
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus p63
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine p65
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases p66
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes p66
42 Etude de Teller et coll (2009) p66
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision p67
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale p68
2 Eacutetude chez des sujets myopes p69
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004) p70
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique p72
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes p72
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete p73
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine p73
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques p74
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac p74
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique p74
2 Action sur Helicobacter pylori p76
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus p76
1 Action antibacteacuterienne p76
VIII Toxicologie p77
1 Effets indeacutesirables p77
2 Doses leacutetales 50 (DL50) p78
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus p79
Quatriegraveme partie Utilisations de Vaccinium myrtillus L p80
I Utilisations alimentaires p81
1 Utilisations culinaires p81
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire p81
II Utilisations pharmaceutiques p82
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille p83
11 Meacutedicaments allopathiques p83
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques p84
13 Compleacutements alimentaires p85
Conclusion p87
Bibliographie p89
Liste des Annexes p98
Annexe I p99
Annexe II p101
Annexe III p104
Annexe IV p107
1
LISTE DES TABLEAUX
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
2
LISTE DES FIGURES
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme
3
LISTE DES ABREVIATIONS
AA allyl alcool
ADP adeacutenosine diphosphate
AMPc adeacutenosine monophosphate cyclique
DMLA deacutegeacuteneacuterescence maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge
ECA enzyme de conversion de lrsquoangiotensine
EDRF endothelium-derived relaxing factorfacteur relaxant deacuteriveacute lrsquoendotheacutelium
ERO espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
GAGs glycosaminoglycanes
GSH glutathion
H2O2 peroxyde drsquohydrogegravene
IC50 Inhibitory Concentration 50concentration inhibitrice agrave 50
IEC inhibiteur de lrsquoenzyme de conversion
IGF insulin-like growth factor
LDLs low-density lipoproteins lipoproteacuteines de basse densiteacute
MDA malondialdeacutehyde
NO monoxyde drsquoazote radicalaire
O2- anion superoxyde
OH radical hydroxyle
PGI2-like prostacyclin-like
PLCγ phospholipase Cγ
RTK reacutecepteur agrave activiteacute tyrosine kinase
tBH tert-butylhydroperoxyde
TBRAs thiobarbituric acid reactive substancessubstances reacuteagissant avec lrsquoacide
thiobarbiturique
UV ultraviolet
VEGF vascular endothelial growth factorfacteur de croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire
XOD xanthine oxydase
4
GLOSSAIRE
Termes botaniques
Actinomorphe se dit dune fleur preacutesentant une symeacutetrie axiale
Adneacute soudeacute ou attacheacute agrave sapplique agrave des organes diffeacuterents comme par exemple des
eacutetamines adneacutees au peacuterianthe
Aneacutemogame qualifie le mode de feacutecondation des plantes dans lequel le pollen est porteacute par
le vent
Anthegravere partie de leacutetamine habituellement porteacutee par le filet contenant le pollen celui-ci
est libeacutereacute lorsque souvre cette terminaison renfleacutee sous forme de petit sac oblong
geacuteneacuteralement jaune et double
Campanuleacute se dit dune fleur en forme de cloche
Capiteacute termineacute en tecircte arrondie
Carpelles organe femelle Lensemble des carpelles forme le pistil (ou gyneacuteceacutee)
Dialypeacutetale dont les peacutetales sont indeacutependants les uns des autres
Hermaphrodite plante portant des organes floraux macircle et femelle
Infundibuliforme se dit dune fleur dont la corolle est en forme dentonnoir
Ligneux se dit des veacutegeacutetaux formant du bois arbres et arbustes mais aussi un certain
nombre de plantes grimpantes
Lobeacute se dit dun organe comme feuille ou peacutetale eacutechancreacute mais sans division complegravete
Loculicide qui souvre en se fendant longitudinalement le long de la nervure dorsale de
chaque loge
Marcotte organe veacutegeacutetal aeacuterien qui srsquoenterre et srsquoenracine avant de se seacuteparer (ou drsquoecirctre
seacutepareacute) de la plante megravere
Peacuterianthe ensemble des piegraveces florales non sexueacutees dune fleur
Septicide qualifie un fruit qui souvre en se fendant longitudinalement au niveau des
cloisons (septums) et seacuteparant ainsi les carpelles
Stomate structure foliaire organiseacutee ayant des meacutecanismes drsquoouverture reacuteversibles
permettant les eacutechanges gazeux
5
Teacutenuinucelleacute se dit dun ovule contenant un nucelle peu deacuteveloppeacute (dans les groupes
eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Uniteacutegumenteacute se dit dun ovule ayant une seule enveloppe autour du nucelle (dans les
groupes eacutevolueacutes comme les Asteacuterideacutees)
Urceacuteoleacutee corolle en forme de tube dilateacute agrave la base et reacutetreacutecit au sommet
Zygomorphe se dit dune plante preacutesentant une symeacutetrie par rapport agrave un plan
Autres
Astheacutenopie fatigue de loeil surtout lors daccommodation soutenue et qui provoque des
signes dirritation une sensation de brucirclure et des maux de tecircte
Meacutesopique Caracteacuteristique visuelle du systegraveme oculaire utilisant agrave la fois bacirctonnets et cocircnes
pour interpreacuteter une scegravene visuelle dont lintensiteacute lumineuse est comprise entre celle du jour
et de la nuit (creacutepusculaire)
Reacutetinite pigmentaire maladie heacutereacuteditaire deacutegeacuteneacuterative des cellules visuelles reacuteceptrices de
la lumiegravere (cocircnes et bacirctonnets)
Sensibiliteacute au contraste elle est baseacutee sur la capaciteacute du systegraveme visuel agrave deacutetecter des
diffeacuterences de luminances donc de deacuteterminer lexistence de bords entre surfaces
homogegravenes
Scotopique vision nocturne se basant principalement sur linformation capteacutee par les
bacirctonnets
6
Introduction et historique
Dans une socieacuteteacute ougrave la phytotheacuterapie connait un engouement croissant voulant se rapprocher
au plus pregraves du laquo naturel raquo la connaissance des plantes aux vertus theacuterapeutiques est de plus
en plus rechercheacutee La myrtille sauvage ou Vaccinium myrtillus L appartient agrave la famille des
Ericaceacutees elle est lrsquoune des plantes centrales faisant partie de la liste des plantes meacutedicinales
inscrites agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition (liste A) et dont le fuit (sec et frais) fait
lrsquoobjet drsquoune monographie agrave la Pharmacopeacutee europeacuteenne (6egraveme
eacutedition) Lrsquoeacutetymologie du
genre Vaccinium est incertaine il deacuteriverait du nom latin vacca pour vache car la plante eacutetait
volontiers brouteacutee par les bovins mais pour drsquoautres du nom bacca pour baie (43) Le terme
myrtillus provient de la ressemblance avec les feuilles et les fruits du myrte (Myrtus
communis L) V myrtillus empreinte divers noms vernaculaires (airelle airelle noire airelle
anguleuse bluet brimbelle raisin des bois raisin de bruyegraverehellip) Les deacutesignations anglaises
pour la baie de myrtille sont bilberry fruit blueberry whortleberry pour les feuilles bilberry
leaf huckleberry leaf (67)
Ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques sont utiliseacutees dans la meacutedecine populaire depuis fort
longtemps Dioscoride est le premier agrave vanter les bienfaits de la myrtille dans le traitement de
la dysenterie Puis au XVIegraveme
siegravecle une religieuse et mystique allemande Sainte Hildegarde
de Bingen preacuteconisait la plante pour provoquer faciliter ou augmenter les regravegles (20)
Depuis de nombreuses proprieacuteteacutes sont attribueacutees au myrtillier en fonction de la partie de
plante utiliseacutee On utilisait les baies pour ses proprieacuteteacutes astringentes toniques antiseptiques
dans le traitement de la diarrheacutee des heacutemorroiumldes des inflammations gastro-intestinaleshellip
quant aux feuilles elles eacutetaient surtout utiliseacutees pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes (43)
Lrsquoameacutelioration de la vision nocturne par la myrtille a eacuteteacute rapporteacutee par les pilotes de la British
Royal Air Force qui en consommaient quotidiennement Certains usages precircteacutes agrave la myrtille
ont eacuteteacute valideacutes et figure dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la
monographie de la Commission E allemande (ces usages seront citeacutes dans cette thegravese) La
myrtille fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vivo in vitro et de quelques eacutetudes cliniques
(dans des domaines meacutedicaux varieacutes) dont certaines posent des interrogations Ses utilisations
sont diverses on lrsquoemploie en cuisine (pacirctisseries confitures vin vinaigrehellip) dans
lrsquoindustrie et dans le domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments agrave base de
myrtille et des compliments alimentaires
7
Premiegravere partie
Botanique de Vaccinium myrtillus L
Figure 1 Planche botanique de Vaccinum myrtillus L (70)
8
I Classification botanique de la myrtille
Le taxon des Spermatophytes ou plantes agrave graines est constitueacute de deux clades les
Gymnospermes ou plantes agrave ovules nus et les Angiospermes ou plantes agrave ovaires
La myrtille (ou myrtillier) appartient agrave lrsquoembranchement des Angiospermes se distinguant des
Gymnospermes par plusieurs caractegraveres dont trois fondamentaux
- les organes reproducteurs se groupent en fleurs bisexueacutees
- les carpelles entourent complegravetement les ovules et se transforment apregraves
feacutecondation en fruit
- le gameacutetophyte femelle situeacute dans lrsquoovule nommeacute sac embryonnaire est le siegravege
drsquoune double feacutecondation lrsquoune donnant lrsquoembryon lrsquoautre conduisant agrave lrsquoalbumen (tissu de
reacuteserve des graines agrave 3n chromosomes)
Selon la classification systeacutematique la myrtille fait partie de la classe des Asteacuterideacutees
(Eudicots agrave peacutetales et carpelles soudeacutes) constitueacutee drsquoenviron 67000 espegraveces on distingue les
Asteacuterideacutees basales et les Euasteacuterideacutees I et II Les Asteacuterideacutees basales ont deux ordres fregraveres
les Ericales et les Cornales (25)
1 Caracteacuteristiques de la famille des Ericaceacutees (22) (25) (30)
Lrsquoordre des Ericales dont le nom vient drsquoErica pour bruyegravere comprend 7000 espegraveces
reacuteparties en 24 familles dont celle des Ericaceacutees auxquelles appartient la myrtille Cette
famille est reacutepartie dans le monde entier mais avec une preacutefeacuterence geacuteographique pour les
reacutegions tempeacutereacutees ou froides voire mecircme les hautes montagnes De faccedilon geacuteneacuterale elle
regroupe des arbres des arbustes et des lianes aux caracteacuteristiques suivantes (Figure 2)
- des feuilles alternes simples entiegraveres agrave denteacutees-serreacutees dont les bords du limbe
peuvent se replier sur eux-mecircmes afin de proteacuteger les stomates porteacutes par la face infeacuterieure
de la transpiration Chez certaines Ericaceacutees les feuilles sont plates et coriaces ce qui leur
procure une reacutesistance agrave la seacutecheresse
- des fleurs le plus souvent hermaphrodites geacuteneacuteralement plus ou moins pendantes
actinomorphes agrave leacutegegraverement zygomorphes
- quatre ou cinq seacutepales libres agrave leacutegegraverement soudeacutes
les mots suivis de ce symbole ont leur deacutefinition dans le glossaire
9
- quatre ou cinq peacutetales soudeacutees constituant une corolle cylindrique ou urceacuteoleacutee
campanuleacutee ou infundibuliforme parfois dialypeacutetale Chez certains genres aneacutemogames
le peacuterianthe nrsquoest constitueacute que de deux ou trois seacutepales et peacutetales ou trois agrave quatre peacutetales
- huit agrave dix eacutetamines reacuteduites agrave deux ou trois chez les espegraveces aneacutemogames
- le filet des eacutetamines est libre ou adneacute agrave la corolle voire mecircme soudeacute Quelques fois
il peut y avoir une paire drsquoappendices en eacuteperon dresseacute srsquoinseacuterant agrave proximiteacute ou agrave lrsquoendroit
mecircme ougrave se trouve lrsquoanthegravere
- lrsquoanthegravere est constitueacute drsquoune ou de deux loges srsquoouvrant par deux pores libeacuterant les
grains de pollen habituellement disposeacutes en teacutetrades
- les carpelles sont au nombre de deux agrave dix agrave ovaire supegravere ou infegravere comme chez la
myrtille (crsquoest-agrave-dire que lrsquoovaire peut se souder agrave la coupe florale)
- un style avec souvent un creux agrave lrsquointeacuterieur
- un stigmate capiteacute ou faiblement lobeacute
- un ou plusieurs ovules par loge uniteacutegumenteacutes ou teacutenuinucelleacutes
- enfin le fruit peut ecirctre une capsule septicide ou loculicide une drupe agrave plusieurs
noyaux ou une baie comme chez la myrtille
4 ou 5 seacutepales agrave soudure ou adnation variable
4 ou 5 peacutetales soudeacutes
Soudure ou adnation variable
Ovaire infegravere
Ovaire supegravere Type de fruit
Symeacutetrie radiaire () 2 agrave 10 carpelles soudeacutees
ou 4 agrave 10 eacutetamines
Symeacutetrie bilateacuterale (X) Etamines adneacutees aux peacutetales
Figure 2 Formule florale de la famille des Ericaceacutees (30)
10
La famille des Ericaceacutees regroupe plusieurs genres et espegraveces dont le nombre varie selon la
litteacuterature de 70 agrave 130 genres et de 2000 agrave 3400 espegraveces Cette famille comprend
- des plantes alimentaires comme Vaccinium myrtillus L (myrtille) Vaccinium
uliginosum L (airelle des marais) Gaultheria procumbens L (theacute du Canada qui fournit le
salicylate de meacutethyle)hellip
- des plantes meacutedicinales comme V myrtillus Ledum palustre L (leacutedon des marais)
Calluna vulgaris L (bruyegravere callune)hellip
- des plantes utiliseacutees pour lrsquoobtention du bois comme Erica arborea L (fabrication
des pipes)
- de nombreuses espegraveces ornementales dans les genres Arbutus (arbousier) Erica
(bruyegravere) Rhododendron (azaleacutee)hellip
La famille des Ericaceacutees est constitueacutee de quatre sous-familles dont les Vaccinioiumldeacutees qui
englobent le genre Vaccinium
2 Quelques geacuteneacuteraliteacutes sur le genre Vaccinium (22)
Le genre Vaccinium se caracteacuterise par plusieurs particulariteacutes botaniques
- des tiges drsquoaspect contourneacute conseacutequence drsquoune croissance tregraves lente
- des feuilles coriaces plates reacutesistantes agrave la seacutecheresse
- des anthegraveres srsquoouvrant par deux pores souvent munis de deux appendices dresseacutes en
forme de cornes
- un ovaire composeacute de cinq carpelles fermeacutes
- un fruit repreacutesenteacute par une capsule
Ce genre est lui-mecircme constitueacute drsquoenviron 150 espegraveces auquel fait partie la myrtille
Les myrtilles drsquoEurope regroupent deux espegraveces de myrtilles
- V uliginosum L
- V myrtillus L
3 Vaccinum myrtillus L ou myrtille sauvage
31 Description botanique (22) (67)
Le myrtillier (Vaccinum myrtillus L) est un sous-arbrisseau vivace atteignant 20 agrave 60 cm de
hauteur agrave tige verte dresseacutee cylindrique rigide et agrave rameaux vert pacircle anguleux aileacutes dans
leur longueur et plus ou moins grecircles Cette tige est recouverte drsquoune eacutecorce ligneuse sans
poil ni stipule ni latex ni vrille
11
Les racines souterraines sont nombreuses et forment un lacis tregraves serreacute proche du sol avec des
racines adventives La plante se perpeacutetue soit par ramification des tiges souterraines soit par
des bourgeons prenant naissance sur les racines elle est dite plante sociale car elle se
marcotte naturellement
Les feuilles (Figure 3) vert pacircle sont petites (1 agrave 2 cm voire 2 agrave 3 cm selon la litteacuterature)
alternes de forme oblongue agrave ovale agrave pointe fine et allongeacutee Le bord du limbe est finement
denteleacute avec des nervures opposeacutees Ces feuilles sont courtement peacutetioleacutees avec un peacutetiole
(tige portant la feuille) recourbeacute vers le bas Les feuilles prennent une belle couleur rouge-
cuivre en automne Elles sont caduques et reacuteapparaissent au printemps
Figure 3 Feuilles de Vaccinum myrtillus (75)
Les fleurs de couleur blanc roseacute rouge pacircle agrave verdacirctre ont une corolle pendante comportant
quatre ou cinq peacutetales soudeacutes entre eux sur une grande longueur et formant un tube globuleux
agrave lobes courts Elles sont solitaires ou regroupeacutees par deux porteacutees par un peacutedoncule courbeacute
Les seacutepales tregraves petits verts sont soudeacutes agrave la corolle (Figure 4) La floraison a lieu en mai-
juin
12
Figure 4 Fleur de Vaccinum myrtillus (72)
Le fruit est une baie globuleuse de la taille drsquoun petit pois (diamegravetre variant de 4 agrave 8 mm)
bleu noir agrave maturiteacute cette baie preacutesente parfois des restes de style agrave la base et peut ecirctre
surmonteacutee du calice agrave son sommet formant un disque entoureacute drsquoun faible rebord (Figure 5)
On peut apercevoir agrave la base de la baie la cicatrice du peacutedoncule Le meacutesocarpe est charnu
constitueacute de 4 ou 5 petites loges contenant de multiples petites graines brillantes brun-rouge
La baie mucircrit jusqursquoen en juillet-aoucirct voire septembre
Figure 5 Fruit de Vaccinium myrtillus (72)
Si le fruit est frais la saveur est douce sucreacutee et leacutegegraverement aciduleacutee voire mecircme astringente
Le fruit sec par contre a une saveur aigre-douce leacutegegraverement astringente En ce qui concerne
les organes reproducteurs lrsquoovaire infegravere est soudeacute agrave la coupe florale Les eacutetamines eacutegales
entre elles deacutepassent la dizaine en nombre elles sont complegravetement libres soudeacutees au
reacuteceptacle elles peuvent ecirctre soit disposeacutees en plusieurs verticilles soit nrsquoavoir aucune
position bien deacutefinie
13
32 Reacutepartition geacuteographique de la myrtille (67)
Vaccinium myrtillus est une myrtille sauvage tregraves peu cultiveacutee originaire drsquoEurope du Nord et
Centrale abondant dans les bois clairsemeacutes et les bruyegraveres sur les sols siliceux de montagne
En France on la trouve dans la plupart des massifs montagneux entre 400 et 2500 megravetres
drsquoaltitude (Figure 6)
Leacutegende
Preacutesent
Zone geacuteographique non renseigneacutee
Preacutesence non signaleacutee
Figure 6 Reacutepartition de Vaccinium myrtillus en France (81)
4 Autres espegraveces du genre Vaccinium
41 Vaccinium uliginosum L (22)
Vaccinium uliginosum L nommeacute myrtille de loup ou myrtille des marais se situe
principalement aux bords des marais dans les tourbiegraveres les landes et les bois humides On le
trouve en Dauphineacute dans le Jura les Pyreacuteneacuteeshellip et en Savoie jusqursquoagrave 2000 megravetres et plus
Crsquoest un buisson bas agrave moyen agrave tiges et rameaux arrondis dans leur longueur Ses feuilles
vert-pacircle au dessus nervureacutees au-dessous ne persistent pas en hiver Les fleurs (Figure 7)
sont disposeacutees en grappe de mai agrave juillet
14
Figure 7 Fleurs de Vaccinium uliginosum (72)
Le fruit (Figure 8) drsquoun diamegravetre drsquoenviron 6 mm est bleu-noir pruineux donnant un jus
incolore et agrave chair blanche Sa saveur est fade et sucreacutee Il mucircrit en juillet-aoucirct voire mecircme
jusqursquoen septembre
Figure 8 Fruit de Vaccinium uliginosum (72)
42 Myrtilles cultiveacutees ou laquo myrtilles arbustives raquo (61)
Ce sont des myrtilles drsquoorigine ameacutericaine dont lrsquoimplantation a eacuteteacute faite essentiellement agrave
partir de Vaccinium corymbosum L (myrtillier geacuteant ou arbustif) Celui-ci est un arbuste
pouvant atteindre 25 megravetres de hauteur drsquoougrave son nom Il est reacutesistant au froid Ses
inflorescences forment un corymbe ougrave le nombre de fleurs par corymbe varie beaucoup
(Figure 9) La baie (Figure 10) est de couleur bleue recouvert de pruine qui masque une chair
blanche
15
Figure 9 Fleurs de Vaccinium corymbosum (79)
Figure 10 Baies de Vaccinium corymbosum laquo Bluecrop raquo (79)
La floraison apparait de mars agrave fin mai et dure plusieurs semaines Les feuilles (Figure 11)
prennent une belle coloration en automne ce qui en fait une magnifique plante deacutecorative
Figure 11 Feuillage de Vaccinium corymbosum (79)
16
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage la myrtille drsquoorigine ameacutericaine a un fruit plus gros et
plus sucreacute Cette derniegravere a une pulpe non coloreacutee Plusieurs varieacuteteacutes existent classeacutees en
fonction de lrsquoeacutepoque de maturiteacute
- les varieacuteteacutes preacutecoces comme le Bluetta lrsquoEarlibluehellip
- les varieacuteteacutes demi-preacutecoces comme le Patriot le Collinshellip
- les varieacuteteacutes demi-saison comme le Bluejay le Bluecrophellip
- les varieacuteteacutes demi-tardives comme le Berkeley le Jerseyhellip
- les varieacuteteacutes tregraves tardives comme le Darrow lrsquoElliothellip
43 Vaccinium macrocarpon L (4)
Vaccinium macrocarpon Ait ou canneberge drsquoAmeacuterique (Figure 12) reacutesistant agrave de fortes
geleacutees de moins 35degC et plus est un arbrisseau ressemblant agrave la myrtille sa croissance est
lente Son fruit est une baie aciduleacutee utiliseacutee dans la preacutevention des reacutecidives drsquoinfections
urinaires car elle contient des moleacutecules anti-adheacutesines des fimbriae drsquoEscherichia coli
(bacteacuterie intestinale pouvant ecirctre la cause drsquoinfection urinaire)
Figure 12 Aspect geacuteneacuteral du Vaccinium macrocarpon fleurs feuilles et fruits (83)
Drsquoautres espegraveces de Vaccinium se rencontrent sur le continent ameacutericain comme
- Vaccinium angustifolium Ait (Bleuet nain) qui est un buisson bas infeacuterieur agrave 50 cm
reacutesistant au froid
- Vaccinium ashei Reade qui est un buisson haut (3 agrave 6 megravetres) reacutesistant agrave la
seacutecheresse
Il ya beaucoup drsquoautre espegraveces de Vaccinium que nous ne citerons pas ici
17
II Culture reacutecolte et production des myrtilles
1 Culture les exigences du sol et les conditions climatiques
Comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment la myrtille de culture est diffeacuterente de la myrtille
sauvage exigeant des conditions optimales pour une bonne production
11 pH du sol (49) (61)
Le sol doit ecirctre acide et mecircme tregraves acide pour permettre une croissance et un deacuteveloppement
normal ainsi qursquoune bonne reacuteussite de culture pH compris entre 4 et 5 voire 4 agrave 52 selon la
litteacuterature Or ce type de sol nrsquoest pas freacutequent en France Le pH optimum est de 48 Si le pH
deacutepasse 55 les plantes sont chlorotiques et il faut soit diminuer le pH soit renoncer agrave une
telle culture Les sols humides doivent ecirctre eacuteviteacutes car les racines sont tregraves sensibles agrave
lrsquoasphyxie et le deacuteveloppement du systegraveme racinaire est limiteacute
12 Conditions climatiques (49) (61)
Agrave la diffeacuterence de la myrtille sauvage qui croit dans les landes et les sous-bois humides de
demi-montagne ougrave elle vit en colonie vers 1000 megravetres drsquoaltitude le myrtillier cultiveacute est une
plante de plaine et de faible altitude qui preacutefegravere les endroits ensoleilleacutes Ainsi une exposition
sud ou sud-ouest est conseilleacutee mais il faut faire attention agrave la seacutecheresse En raison des
risques de geleacutees printaniegraveres il faut eacuteviter les lisiegraveres de bois ou la profondeur des valleacutees
Cette plante peut ecirctre eacutegalement cultiveacutee en demi-montagne agrave une altitude comprise entre 600
et 800 megravetres Reacutesistante au froid elle peut supporter de basses tempeacuteratures jusqursquoagrave -30degC
Bien qursquoau cours de la floraison les fleurs peuvent supporter des tempeacuteratures neacutegatives (-
5degC) il faut faire attention car les deacutegacircts peuvent ecirctre tregraves importants surtout sur les varieacuteteacutes
sensibles Agrave lrsquoopposeacute le myrtillier craint la seacutecheresse en eacuteteacute et les vents secs
13 Besoins en eau (49) (61)
La myrtille cultiveacutee aime la proximiteacute de la surface de la nappe phreacuteatique mais craint les
excegraves en eau Ses besoins sont limiteacutes mais permanents tout le long de sa peacuteriode de vie (au
moins 1000 mm drsquoeau durant lrsquoeacuteteacute) Ceci peut srsquoexpliquer par le deacuteveloppement tregraves
superficiel de son systegraveme racinaire et lrsquoabsence de poils absorbants En Lorraine par
exemple le systegraveme drsquoirrigation est le laquo goutte agrave goutte raquo localiseacute permettant drsquoapporter les
doses neacutecessaires en eau et de limiter la contamination fongique Les besoins en eau par
semaine sont de 20 mm
18
Ainsi il faudra tenir compte de ces exigences pour choisir la meilleure exposition possible
2 Reacutecolte des myrtilles
21 Date et mode de reacutecolte (49) (22)
La croissance de la plante eacutetant lente la reacutecolte peut deacutebuter la 2egraveme
anneacutee apregraves la plantation
La production augmente reacuteguliegraverement jusqursquoagrave la 8egraveme
ou la 9egraveme
anneacutee en rapport avec le
deacuteveloppement veacutegeacutetatif La date de reacutecolte deacutepend beaucoup de la varieacuteteacute de lrsquoaltitude des
tempeacuteratures printaniegraveres et du mode de reacutecolte Elle srsquoeacutetend de mai agrave fin septembre voire mi-
juin pour les varieacuteteacutes les plus preacutecoces et fin septembre pour les varieacuteteacutes les plus tardives La
reacutecolte deacutebute lorsque 20 des baies sont mucircres En effet si la reacutecolte se fait trop tocirct les
fruits ne sont pas mucircres et seront de mauvaise qualiteacute En geacuteneacuteral la reacutecolte dure de 3 agrave 5
semaines avec plusieurs passages successifs (un ou plusieurs par semaine) pour une mecircme
varieacuteteacute au fur et agrave mesure de la maturation des fruits
La reacutecolte de la myrtille cultiveacutee se fait manuellement directement dans les barquettes pour
eacuteviter drsquoabicircmer les fruits avec une manipulation suppleacutementaire Ceci est diffeacuterent pour la
myrtille sauvage ougrave la reacutecolte se fait agrave lrsquoaide drsquoun instrument que lrsquoon nomme laquo peigne raquo
(Figure 13) dont il existe divers modegraveles (en bois ou en fer) constitueacutes drsquoune grille permettant
drsquoarracher vite et en quantiteacutes importantes les baies en les emprisonnant entre les dents
Figure 13 Peigne utiliseacute pour la reacutecolte des myrtilles sauvages (78)
19
3 Production des myrtilles
31 Production mondiale (61)
Les Etats-Unis sont les premiers producteurs mondiaux de myrtilles suivis du Canada Ces
pays produisent deux types de myrtille des myrtilles sauvages appartenant majoritairement agrave
lrsquoespegravece Vaccinium angustifolium qui se rapproche de la myrtille europeacuteenne comme nous
lrsquoavons vu dans le chapitre preacuteceacutedent Son deacuteboucheacute est principalement la congeacutelation et la
transformation dont une partie est exporteacutee en Europe
Les myrtilles cultiveacutees aux USA sont principalement composeacutees de
- Vaccinium corymbosum
- des hybrides entre V corymbosum et V angustifolium
- des hybrides entre V ashei et V corymbosum
Ces myrtilles cultiveacutees sont commercialiseacutees majoritairement sur le marcheacute inteacuterieur et un
faible tonnage est exporteacute en Europe et surtout en Australie
En Europe de lrsquoEst et en Scandinavie la cueillette des myrtilles sauvages pour le commerce
ou lrsquoautoconsommation nrsquoest pas neacutegligeable
32 Production europeacuteenne (22) (61)
Crsquoest lrsquoAllemagne qui deacutetient les plus grandes surfaces de myrtilles cultiveacutees suivie par la
France et les Pays-Bas Elles sont aussi cultiveacutees en Italie et au Portugal mais de faccedilon moins
importante
Dans les pays scandinaves la production est principalement constitueacutee de V myrtillus Il faut
noter que des quantiteacutes non neacutegligeables de reacutecolte sont le fait de cueillettes reacutealiseacutees par des
laquo pillards raquo des cultivateurs et enfin par des voyageurs des particuliers ou des touristes qui
consomment les myrtilles sur place pour leur plaisir
33 Production franccedilaise (22) (61)
En France les Landes constituent la premiegravere zone de production des myrtilles cultiveacutees
suivies du Val de Loire du Limousin de la Sologne et des Vosges La majoriteacute des myrtilles
cultiveacutees au niveau national (1300 agrave 1500 tonnesan) est destineacutee pour 95 des tonnages au
marcheacute du frais et est exporteacutee vers lrsquoAllemagne ougrave la consommation y est plus importante
qursquoen France vers la Suisse la Grande-Bretagne lrsquoItaliehellip et en importe de Suegravede du
Canada de Pologne et de Roumanie
En ce qui concerne les myrtilles sauvages 1500 agrave 2000 tonnes sont reacutecolteacutees en France La
principale zone de production est lrsquoArdegraveche suivie du Massif central et des Vosges Cette
20
reacutecolte se fait au peigne par des personnes cueilleurs agriculteurs qui ont un laquo droit de
cueillette raquo La majoriteacute des myrtilles sauvages reacutecolteacutees est destineacutee agrave la transformation en
geleacutees confitureshellippar des ateliers drsquoexploitation ou par des entreprises proches des sites de
production Une faible quantiteacute est destineacutee agrave la vente sur les marcheacutes ou agrave des grossistes pour
la restauration et les eacutepiceries fines
Les statistiques de 2001 ont reacutecapituleacute une production mondiale drsquoenviron 190000 tonnes
(1000 tonnes pour la France) avec pregraves de 38000 hectares cultiveacutes aux Etats-Unis et au
Canada
4 Post-reacutecolte
41 Conservation (49) (61)
Une fois les myrtilles reacutecolteacutees elles doivent ecirctre placeacutees dans une chambre froide pour
garder toutes ses qualiteacutes Lrsquoideacuteal pour conserver le fruit intact pendant une dizaine de jours
est de le stocker entre 8 et 10degC Il gardera alors son parfum lrsquoarocircme en sera mecircme
deacuteveloppeacute Si on veut le conserver plus longtemps il faut le soumettre agrave des tempeacuteratures plus
basses En effet la congeacutelation est un bon proceacutedeacute de conservation pour ce fruit
42 Conditionnement (61)
Le conditionnement que lrsquoon retrouve le plus souvent est la barquette en plastique fermeacutee par
un couvercle perforeacute Ainsi les myrtilles peuvent ecirctre conserveacutees selon les conditions deacutefinies
preacuteceacutedemment
Le temps de stockage est ameacutelioreacute par lrsquoutilisation de films en polypropylegravene semi-
permeacuteables qui maintiennent le fruit sous atmosphegravere modifieacutee Ces films peuvent apregraves
sortie du froid ecirctre gardeacutes durant seulement 24 heures car au-delagrave il peut y avoir des risques
de deacuteveloppement de pourritures
21
Deuxiegraveme partie
Composition chimique
de Vaccinium myrtillus L
22
I Identification et composition chimique de Vaccinium myrtillus 1 Identification macroscopique et microscopique (43) (67)
Du point de vue macroscopique les feuilles de V myrtillus sont alternes caduques ovales agrave
elliptiques pointues courtement peacutetioleacutees et finement denteleacutees Le bord de la feuille preacutesente
des poils seacutecreacuteteurs peacutedicelleacutes agrave lrsquoextreacutemiteacute de chaque dent quelques fois briseacutes
Du point de vue microscopique la feuille preacutesente des stomates paracytiques des poils agrave
parois eacutepaisses sur la face supeacuterieure des grandes nervures des poils seacutecreacuteteurs et des rangeacutees
de cellules agrave cristaux sur la nervure principale
Du point de vue macroscopique le fruit est une baie globuleuse drsquoun noir violaceacutee nettement
deacuteprimeacutee au sommet de la taille drsquoun petit pois Cet examen doit se faire sur une baie intacte
crsquoest-agrave-dire ni attaqueacutee par des insectes ni moisie De plus elle doit ecirctre molle car elle
devient cassante si elle est stockeacutee de faccedilon prolongeacutee
Lrsquoexamen microscopique est surtout caracteacuteriseacute par la preacutesence de cellules agrave cristaux du
meacutesocarpe et de lrsquoendocarpe Le fruit frais broyeacute ou la poudre de fruit sec met en eacutevidence la
preacutesence de macles de cristaux drsquooxalate de calcium des amas de cellules scleacutereuses de
couleur rose violaceacute agrave parois canaliculeacutees et des fragments jaune-brun du teacutegument seacuteminal agrave
paroi en forme de fer agrave cheval
2 Composition chimique des feuilles et des fruits de Vaccinium myrtillus
21 Composition chimique des feuilles (11) (67)
Celle-ci renferme des tanins cateacutechiques (08 agrave 67) des cateacutechols (eacutepicateacutechol
gallocateacutechol eacutepigallocateacutecholhellip) jusqursquoagrave 10 des proanthocyanidines (dimegraveres du cateacutechol
et drsquoeacutepicateacutechol) des flavonoiumldes (heacuteteacuterosides du querceacutetol rhamnoglucosyl- arabinosyl- et
glucuronyl-querceacutetol ainsi que des heacuteteacuterosides de kaempfeacuterol astragaloside) des iridoiumldes
des acides-pheacutenols surtout des acides chlorogeacuteniques et enfin des traces drsquoalcaloiumldes
quinolizidiniques comme la myrtine et lrsquoeacutepimyrtine
La bibliographie ancienne cite la preacutesence drsquoarbutoside et drsquohydroquinone qui ne sont
preacutesents qursquoagrave lrsquoeacutetat de trace voire totalement absent Ceci peut srsquoexpliquer soit par la preacutesence
de chimiotypes soit par une contamination des lots par des espegraveces proches qui ont le mecircme
habitat eacutecologique comme Vaccinium vitis-idaea L ou Vaccinium x intermedium Ruthe
(hybride entre V myrtillus et V vitis-idaea) dans lesquels on retrouve de lrsquoarbutoside de
lrsquohydroquinone libre et du pyroside (6-O-meacutethylarbutoside)
Enfin la feuille contient de faccedilon importante du chrome et du manganegravese
23
22 Composition chimique des fruits (11) (67)
Le fruit de la myrtille est riche en eau (jusqursquoagrave 90) en oligosaccharides (3 agrave 7) et en
acides organiques (acide malique citrique et quinique) Il contient des tanins essentiellement
des tanins cateacutechiques des proanthocyanidols (dimegravere de cateacutechol et drsquoeacutepicateacutechol) une
quinzaine drsquoheacuteteacuterosides les anthocyanosides qui sont des O-glucosides des O-galactosides et
des O-arabinosides en C-3 du cyanidol peacuteonidol delphinidol malvidol et peacutetunidol des
flavonoiumldes (heacuteteacuterosides de querceacutetol et kaempfeacuterol) des flavan-3-ols monomegraveres (cateacutechol et
eacutepicateacutechol)
Enfin on retrouve drsquoautres constituants comme les acides chlorogeacuteniques cafeacuteylquiniques
des acides pheacutenols et des pectines Les iridoiumldes quant agrave eux ne sont preacutesents que dans les
fruits immatures
24
II Anthocyanosides
Avant drsquoentrer dans les deacutetails il est important de connaitre les principaux groupes de
composeacutes phytochimiques que lrsquoon retrouve dans la plupart des fruits et des leacutegumes
(Tableau I)
Familles Classes Sous-classes
Polypheacutenols Flavonoiumldes - anthocyanidines
- flavones
-flavanols
- flavanones
- flavonols
- isoflavones
- tanins
acides pheacutenoliques - hydroxycinnamates
- hydroxybenzoates
non-flavonoiumldes - stilbegravenes
- coumarines
- lignans
Terpegravenes - caroteacutenoiumldes
- monoterpegravenes
Composeacutes soufreacutes - allyl sulfides
- isothiocyanates
Saponines - triterpeacutenoiumldes
- steacuteroiumldes
Tableau I Principaux composeacutes des fruits et leacutegumes (7)
1 Geacuteneacuteraliteacutes sur les anthocyanes
Le terme anthocyane du grec laquo anthos raquo (signifiant fleur) et laquo kyanos raquo (bleu) est utiliseacute pour
deacutesigner la substance responsable de la coloration du bleuet Ce terme srsquoapplique agrave un groupe
de pigments qui donnent la coloration rouge rose mauve pourpre bleue et violette de la
plupart des fleurs et des fruits Ces pigments existent sous deux formes soit la forme
heacuteteacuteroside (anthocyanosides ou laquo anthocyanins raquo en anglais) soit sous la forme geacutenine
correspondante (anthocyanidols ou laquo anthocyanidins raquo en anglais) On connait environ 400
25
anthocyanosides qui sont preacutesents chez tous les Angiospermes agrave lrsquoexception des
Caryophyllales ougrave seule la famille des Caryophyllaceacutees et des Molluginaceacutees en contiennent
En effet leur preacutesence chez les Gymnospermes est rare Comme nous lrsquoavons vu les
anthocyanes sont responsables de la couleur des fleurs et des fruits mais peuvent eacutegalement
coloreacutes les bracteacutees les feuilles les peacutetioles les racines voire mecircme les bulbes comme dans
lrsquooignon rouge Cependant ce sont dans les fruits que leur concentration est la plus eacuteleveacutee Ils
srsquoaccumulent dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques sous forme de solution et de faccedilon
moins freacutequente sous forme drsquoanthocyanoplastes (11) Selon Szajdek et coll (58) les parois
cellulaires et la chair ne contiennent presque pas drsquoanthocyanosides
2 Structure des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont les pigments les plus importants des plantes visibles par lrsquoœil
humain Ils appartiennent agrave une large classe de composeacutes pheacutenoliques que lrsquoon appelle les
flavonoiumldes Ce sont des glycosides des deacuteriveacutes polyhydroxy et polymethoxy du 2-
pheacutenylbenzopyrylium plus communeacutement appeleacutes cation flavylium
Les diffeacuterences existant entre les anthocyanosides individuels sont lieacutees au nombre de groupe
hydroxyl agrave la nature et agrave la position drsquoattachement des sucres agrave la moleacutecule ainsi qursquoau
nombre et agrave la nature des acides aliphatiques ou aromatiques des sucres attacheacutes agrave la
moleacutecule Dix sept anthocyanosides et leurs aglycones naturellement preacutesents dans les plantes
sont connus Cependant seulement six geacutenines sont les plus freacutequentes (voire quasiment
universelles) dans les plantes supeacuterieures Il srsquoagit du cyanidol (50) du peacutelargonidol (12)
du peacuteonidol (12) du delphinidol (12) du peacutetunidol (7) et du malvidol (7) (Figure 14)
Les glycosides de trois anthocyanidines non meacutethyleacutes les plus largement reacutepandus dans la
nature sont la delphinidine la cyanidine et la peacutelargonidine Ils sont preacutesents dans 80 des
feuilles pigmenteacutees 69 des fruits et 50 des fleurs respectivement (33)
Dans les baies les anthocyanosides sont retrouveacutes sont la forme de mono di ou triglycosides
ougrave les reacutesidus glycosides sont principalement lieacutes agrave C-3 et moins freacutequemment agrave C-5 ou C-7
Les sucres les plus courants sont le glucose le galactose le rhamnose lrsquoarabinose le rutinose
le sambubiose et le sophorose De plus les glycosides des anthocyanosides sont souvent
acyleacutes par des acides comme les acides p-coumarique cafeacuteique feacuterulique et moins
couramment par les acides p-hydroxybenzoiumlque malonique ou aceacutetique (58)
26
Figure 14 Structure chimique des principaux anthocyanidines (65)
3 Proprieacuteteacutes physico-chimiques des anthocyanosides
Les anthocyanosides sont des pigments solubles dans lrsquoeau ils sont instables agrave la lumiegravere agrave
la tempeacuterature et agrave lrsquooxygegravene Ils agissent en rapport au cation flavylium qui est agrave la fois un
diacide faible et un bon eacutelectrophile Agrave pH tregraves acide (lt agrave 3) la forme cationique coloreacutee en
rouge est stable Agrave pH moins acide (entre 4 et 6) la moleacutecule perd deux protons donnant une
moleacutecule neutre ou ioniseacutee devenant une forme quinonoiumlde coloreacutee en bleu et stabiliseacutee par
reacutesonnance Lrsquohydratation de la moleacutecule conduit agrave la formation drsquoune laquo pseudo-base raquo
carbinolique incolore et si le pH augmente la moleacutecule se transforme en pheacutenate (forme
ioniseacutee) la structure anthocyanique eacutetant deacutetruite Ainsi les anthocyanosides en milieu neutre
ou tregraves peu acide perdent leur coloration Or dans les vacuoles des cellules eacutepidermiques le
pH est tregraves rarement infeacuterieur agrave 3 Sa coloration dans le milieu vivant peut donc srsquoexpliquer
par trois meacutecanismes qui permettent une protection ou une stabilisation de la moleacutecule
- soit un meacutecanisme par lequel les acides acylant les sucres forment un laquo sandwich raquo
autour de la geacutenine permettant une copigmentation intramoleacuteculaire
- soit par une auto-copigmentation se traduisant par lrsquoempilement intermoleacuteculaire
drsquoanthocyanosides se proteacutegeant les uns avec les autres
- soit par une copigmentation avec les flavonoiumldes (11)
27
4 Extraction seacuteparation et identification des anthocyanosides
41 Extraction
Les anthocyanosides sont solubles dans les solvants polaires et lrsquoextraction agrave partir des plantes
est reacutealiseacutee en utilisant du meacutethanol qui contient de faibles quantiteacutes drsquoacide chlorhydrique ou
drsquoacide formique Il est preacutefeacuterable drsquoutiliser des acides plus faibles comme lrsquoacide aceacutetique
tartrique ou citrique des acides volatils ou travailler en milieu neutre et agrave basse tempeacuterature
pour empecirccher la deacutesacylation des anthocyanosides
Lrsquoaceacutetone peut aussi ecirctre utiliseacutee pour lrsquoextraction des anthocyanosides de plusieurs plantes
Par rapport au meacutethanol acidifieacute lrsquousage de ce solvant a lrsquoavantage drsquoecirctre une technique plus
efficace et reproductible
Lrsquoextraction en phase solide peut ecirctre utiliseacutee pour la purification initiale des extraits crus
drsquoanthocyanosides (33)
42 Seacuteparation et identification
Pour la seacuteparation et lrsquoanalyse de la structure des anthocyanosides lrsquoutilisation de la
chromatographie liquide coupleacutee agrave la spectromeacutetrie de masse permet de combiner la
seacuteparation de la chromatographie liquide avec la sensibiliteacute et la seacutelectiviteacute de la spectromeacutetrie
de masse (33) Drsquoautres meacutethodes chromatographiques peuvent ecirctre utiliseacutees pour leur
seacuteparation comme les colonnes de polyamide de polyvinylpyrrolidone les reacutesines
eacutechangeuses drsquoions la chromatographie sur couche mince preacuteparative sur cellulose (10)
Lrsquoanalyse des plantes agrave anthocyanosides peut ecirctre reacutealiseacutee par la chromatographie liquide
associeacutee agrave un deacutetecteur agrave barrettes de diodes Cette analyse peut ecirctre faite par lrsquoeacutelectrophoregravese
capillaire qui selon Szajdek et coll (58) est une meacutethode avec une tregraves bonne sensibiliteacute une
haute reacutesolution coupleacutee agrave une basse consommation drsquoeacutechantillon et enfin un moindre
laquo gaspillage raquo des solvants utiliseacutes
Drsquoautres meacutethodes plus perfectionneacutees ne peuvent ecirctre utiliseacutees que par des laboratoires de
recherche
43 Dosage des anthocyanosides
Le dosage se fait par spectrophotomeacutetrie aux longueurs drsquoonde des maximums drsquoabsorption
des anthocyanosides (λ = 520 nm) Il peut ecirctre fait sur une solution alcoolique acide ou sur un
jus acidifieacute Dans tout les cas il faut le faire en milieu tregraves dilueacute pour empecirccher les moleacutecules
drsquoanthocyanosides de srsquoassocier les unes avec les autres (11)
28
5 Anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
51 Composition en anthocyanosides
Les baies de V myrtillus contiennent environ quinze anthocyanosides ces heacuteteacuterosides sont
des O-glucosides des O-galactosides et des O-arabinosides en C-3 du cyanidol du peacuteonidol
du delphinidol du malvidol et du peacutetunidol (Figure 15)
Figure 15 Structure chimique des anthocyanosides et anthocyanidines des fruits de V
myrtillus (14)
29
52 Donneacutees quantitatives
Vaccinum myrtillus contient une quantiteacute importante drsquoanthocyanosides (300 agrave
698 mg100 g) Lrsquoeacutequipe de Prior et coll (50) a montreacute que la quantiteacute drsquoanthocyanosides
augmente avec la maturiteacute du fruit lors de la reacutecolte
Burdulis et coll (12) ont eacutetudieacute la diversiteacute des anthocyanosides du fruit de V myrtillus dans
diffeacuterents pays comme la Lituanie la Suegravede la Russie et la Bieacutelorussie ainsi que dans
diffeacuterentes reacutegions de Lituanie comme Šilutė Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees en
anthocyanosides ont eacuteteacute retrouveacutees dans les baies ramasseacutees en Russie et en Suegravede Ces
reacutesultats sont lieacutes agrave la cueillette tardive des baies et agrave lrsquoemplacement plus au nord des
cultures en effet les baies eacutetaient plus mucircres et avaient donc une plus haute contenance en
anthocyanosides Par contre la quantiteacute en Beacuteliorussie et en Lituanie est similaire
53 Donneacutees qualitatives
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Burdulis et coll (12) ont observeacute que lrsquoanalyse
chromatographique ne reacutevegravele pas de diffeacuterence dans la composition qualitative des
anthocyanosides Les quantiteacutes les plus eacuteleveacutees sont repreacutesenteacutees par la cyanidine (quantiteacute
moyenne de 53 ngml) suivie de la delphinidine et la peacutetunidine en quantiteacute 25 fois plus
faible que la cyanidine et pour terminer la malvidine et la peacuteonidine en quantiteacute encore plus
faible En Suegravede seule la malvidine a eacuteteacute retrouveacutee en plus grande quantiteacute parmi tous les
anthocyanosides (15 fois plus eacuteleveacutee que celle de la peacutetunidine et la delphinidine)
54 Distribution des anthocyanosides dans Vaccinium myrtillus
Riihinen et coll (53) ont eacutetudieacute la distribution des composeacutes pheacutenoliques dans les diffeacuterents
organes de V myrtillus et drsquoun hybride entre le V corymbosum et V augustifolium
Ainsi les anthocyanosides sont preacutesents dans la pulpe et la peau des fruits de V myrtillus
constituant 2 du poids frais de la peau de la baie cela indique que lrsquoextraction du jus agrave
partir de la peau pourrait ecirctre une source riche drsquoanthocyanosides Les feuilles rouges des
myrtilles ont de faibles quantiteacutes drsquoanthocyanosides et ne contiennent que des glycosides de
cyanidine alors que les fruits contiennent les cinq types drsquoanthocyanosides (delphinidine
cyanidine peacuteonidine peacutetunidine et malvidine-glycosides) Les feuilles sont donc des sources
moins inteacuteressantes pour lrsquoutilisation nutraceutique et pharmaceutique que les fruits
30
55 Pharmacocineacutetique des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
Des eacutetudes ont eacuteteacute reacutealiseacutees sur la pharmacocineacutetique des anthocyanosides agrave partir drsquoun
produit commercial le Myrtocyanreg Celui-ci est un extrait hautement purifieacute de baies de
Vaccinum myrtillus dans lequel les anthocyanosides sont les composants actifs les plus
importants (36)
Lorsque lrsquoextrait est injecteacute chez le rat par voie intraveineuse ou parenteacuterale aux doses de 20-
40 mgkg ou 25 mgkg respectivement les anthocyanosides disparaissent de la circulation
sanguine et sont distribueacutes rapidement dans les tissus Lrsquoeacutelimination se fait de faccedilon
preacutedominante par les urines (25-30) 24 heures apregraves lrsquoadministration et une plus faible
quantiteacute est eacutelimineacutee via la bile (15-20)
Le Myrtocyanreg
injecteacute par voie intrapeacuteritonale agrave la dose de 200 mgkg montre que les
anthocyanosides ont une affiniteacute particuliegravere pour certains tissus notamment les tissus reacutenaux
et cutaneacutes dans ces tissus les anthocyanosides y demeurent plus longtemps que dans le
plasma Cette observation pourrait expliquer leur effet biologique agrave long terme
Lrsquoadministration orale de Myrtocyanreg
agrave la dose de 400 mgkg chez le rat montre que les
anthocyanosides sont rapidement absorbeacutes par le tractus gastro-intestinal et atteignent un pic
plasmatique quinze minutes apregraves lrsquoadministration Par contre ils ne demeurent pas
longtemps dans le sang car aucune concentration ne peut ecirctre mesureacutee apregraves deux heures Par
voie orale environ 4 des anthocyanosides sont eacutelimineacutes par la bile apregraves 24 heures
En conclusion par voie orale la biodisponibiliteacute faible des anthocyanosides peut ecirctre due agrave
une forte meacutetabolisation heacutepatique en meacutetabolites non deacutetectables par la meacutethode analytique
Le pic plasmatique de 2-3 microgml drsquoanthocyanosides non modifieacutes pourrait ecirctre suffisant pour
garantir les effets biologiques des anthocyanosides apregraves une administration orale Enfin des
tests in vitro ont reporteacute une activiteacute des anthocyanosides agrave des concentrations de 2 agrave 7 microgml
(43)
En 2006 Ichiyanagi et coll (28) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute et la distribution dans les tissus
drsquoun autre extrait de V myrtillus (Bilberon 25reg
constitueacutes de 25 anthocyanosides) administreacute
oralement ou par voie intraveineuse agrave des rats
Pour rappel les aglycones sont de cinq types la cyanidine la delphinidine la peacutetunidine la
peacuteonidine et la malvidine
Seules la malvidine la peacuteonidine et la peacutetunidine sont des structures aglycones meacutethyleacutes ces
anthocyanidines sont glycosyleacutees pour former les anthocyanosides qui repreacutesentent une
structure beaucoup plus stable Trois sortes de sucres sont rattacheacutees agrave la structure le
glucose le galactose et lrsquoarabinose
31
Ainsi le niveau plasmatique de chaque anthocyanoside est eacutevalueacute par chromatographie
liquide haute performance Lrsquoeacutetude montre clairement que lrsquoabsorption le meacutetabolisme et
lrsquoeacutelimination sont diffeacuterents pour chaque anthocyanoside Ichiyanagi et coll (27) ont calculeacute
le rapport C15dose deacutefini par la concentration plasmatique de chaque anthocyanoside quinze
minutes apregraves administration orale diviseacutee par sa concentration initiale dans lrsquoextrait de
Bilberon 25reg
(soit le rapport C15dose) La comparaison de ces rapports a montreacute que pour les
anthocyanosides posseacutedant le mecircme aglycone les galactosides ont un rapport C15dose plus
important suivi des glucosides et des arabinosides agrave lrsquoexception de la malvidine La
diffeacuterence est significative entre les anthocyanosides glucosides et galactosides Par contre
lorsque les anthocyanosides portant le mecircme sucre sont compareacutes les glycosides de cyanidine
et delphidine preacutesentent des valeurs plus eacuteleveacutees que les glycosides de malvidine et
peacutetunidine alors que la peacuteonidine 3-O-β-D-galactoside affiche les valeurs les plus hautes
parmi tous les anthocyanosides
En conclusion les niveaux plasmatiques deacutependent de plusieurs facteurs tels que lrsquoabsorption
gastro-intestinale le taux de distribution dans les tissus et leur excreacutetion via les urines et la
bile
La demi-vie est eacutevalueacutee par administration intraveineuse de lrsquoextrait pour les
anthocyanosides portant le mecircme sucre les demi-vies de la delphinidine et de la cyanidine
sont plus eacuteleveacutees que leurs analogues O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacuteonidine et la
peacutetunidine Par contre lorsque les auteurs comparent les sucres porteacutes par le mecircme aglycone
aucune diffeacuterence significative nrsquoest observeacutee entre les galactosides et les glucosides mais les
arabinosides affichent des valeurs plus faibles Seule la malvidine ne preacutesente pas de
diffeacuterence significative entre galactoside et arabinoside compareacutee aux autres anthocyanidines
Ichiyanagi et coll (28) ont eacutevalueacute la biodisponibiliteacute de chaque anthocyanoside Celle-ci varie
de 061 agrave 182 et elle est de 093 dans le meacutelange de lrsquoextrait Bilberon 25reg
Ainsi la
biodisponibiliteacute des anthocyanosides O-meacutethyleacutes comme la malvidine la peacutetunidine et la
peacuteonidine est plus eacuteleveacutee que la delphinidine et la cyanidine particuliegraverement pour les
galactosides (diffeacuterence significative entre la cyanidine et la peacuteonidine galactoside et entre la
delphinidine et la peacutetunidine arabinoside) Cependant les biodisponibiliteacutes des glycosides de
peacutetunidine sont plus eacuteleveacutees que celles des glycosides de malvidine mecircme si la malvidine est
lrsquoanalogue O-meacutethyl de la peacutetunidine-glycoside Ainsi la biodisponibiliteacute importante des
glycosides de peacutetunidine pourraient ecirctre expliqueacutee par une absorption gastro-intestinale
prolongeacutee De plus lrsquoexceptionnelle forte biodisponibiliteacute de la peacuteonidine 3-O-β-D-
galactoside traduirait une absorption gastro-intestinale plus efficace Lorsque les auteurs
32
comparent la biodisponibiliteacute entre les anthocyanosides sur la base du type de sucre attacheacute agrave
la structure les galactosides preacutesentent la plus haute valeur suivis des arabinosides puis des
glucosides qui preacutesentent les valeurs les plus basses (agrave lrsquoexception de la delphinidine et de la
malvidine)
Ces eacutetudes sur le meacutetabolisme et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides montrent que les
anthocyanosides majoritairement retrouveacutes dans lrsquourine et la bile sont les glycosides de
peacuteonidine et malvidine crsquoest-agrave-dire des anthocyanosides O-meacutethyleacutes Les pourcentages des
anthocyanosides dans les urines et la bile durant les quatre premiegraveres heures apregraves
administration intraveineuse sont seulement de 308 et 134 respectivement suggeacuterant une
meacutetabolisation ou une accumulation des anthocyanosides dans les tissus La quantiteacute et la
nature des anthocyanosides dans le foie et les reins diffegraverent de ceux du meacutelange Bilberon
25reg
indiquant une meacutetabolisation heacutepatique et reacutenale De plus lrsquoapparition de nouveaux pics
montreacutes par la chromatographie liquide haute performance souligne la preacutesence de
meacutetabolites drsquoanthocyanosides
En ce qui concerne la distribution dans les tissus les auteurs ont montreacute qursquoapregraves 15 minutes
drsquoune administration orale de lrsquoextrait de V myrtillus les anthocyanosides retrouveacutes
majoritairement dans les reins et le foie sont des glycosides de peacuteonidine et de malvidine les
anthocyanosides deacutetecteacutes sont des glucosides et galactosides de peacuteonidine malvidine et
peacutetunidine des meacutetabolites 4rsquo-O-meacutethyl de cyanidine delphinidine et peacutetunidine 3-O-β-D-
glucoside ou galactoside alors que les arabinosides ne sont pas deacutetecteacutes agrave lrsquoexception du 4rsquo-
O-meacutethyl delphinidine 3-O-α-L-arabinoside Les meacutetabolites comme les glucosides-
glucuronides de cyanidine et de delphinidine sont aussi preacutesents dans les tissus
particuliegraverement au niveau reacutenal
Apregraves administration intraveineuse les glycosides de cyanidine et delphinidine sont preacutesents agrave
lrsquoeacutetat de traces dans les tissus
Pour conclure plusieurs points ont pu ecirctre eacutetablis et clarifieacutes premiegraverement tous les
anthocyanosides de lrsquoextrait atteignent leur niveau plasmatique maximum en 15 agrave 30 minutes
apregraves administration orale soulignant une absorption efficace au niveau de lrsquoestomac et de
lrsquointestin grecircle Cette absorption deacutepend du type de sucre attacheacute agrave lrsquoaglycone les galactosides
eacutetant par exemple plus efficacement absorbeacutes que les arabinosides Deuxiegravemement la
biodisponibiliteacute deacutepend de plusieurs facteurs comme le meacutetabolisme lrsquohydrophobiciteacute du
cycle B de lrsquoaglycone et le type de sucre attacheacute agrave la structure De plus la synergie entre
anthocyanosides eux-mecircmes ou anthocyanosides avec drsquoautres composants preacutesents dans
lrsquoextrait peuvent moduler lrsquoabsorption au niveau du tractus gastro-intestinal
33
Sakakibara et coll (54) ont eacutetudieacute la distribution et lrsquoexcreacutetion des anthocyanosides chez la
souris apregraves une administration orale de 100 mgkg de poids corporel de V myrtillus
Les anthocyanosides absorbeacutes sous leur forme initiale ou meacutethoxyleacutee quinze minutes apregraves
une administration orale sont eacutelimineacutes via les urines dans les vingt quatre heures La totaliteacute
des anthocyanosides atteignent une concentration plasmatique maximale drsquoenviron 12 microM
quinze minutes apregraves administration orale puis cette concentration diminue brusquement Les
glycosides de malvidine pourraient ecirctre les anthocyanosides majoritaires dans des conditions
physiologiques en effet les anthocyanosides meacutethoxyleacutes ont des proprieacuteteacutes leur permettant
de demeurer dans lrsquoorganisme apregraves absorption De plus les glycosides de delphinidine et
cyanidine subissent une meacutethylation pouvant donner les glycosides de peacuteonidine et malvidine
par conseacutequent les anthocyanosides meacutethoxyleacutes peuvent ecirctre produits par la conversion
drsquoautres anthocyanosides eacutegalement absorbeacutes
Lrsquoexcreacutetion urinaire des anthocyanosides apregraves administration de 500 mgkg de poids corporel
de lrsquoextrait de V myrtillus a montreacute que les anthocyanosides sont eacutelimineacutes dans lrsquourine dans
les six premiegraveres heures apregraves administration orale De faibles quantiteacutes sont eacutelimineacutees entre 6
et 24 heures dont un unique pic drsquoexcreacutetion entre 6 et 12 heures Les quantiteacutes
drsquoanthocyanosides excreacuteteacutees dans lrsquourine dans les 24 heures suivant lrsquoadministration sont
faibles et ne repreacutesentent que 188 des anthocyanosides totaux ingeacutereacutes Par conseacutequent
quelque soit les quantiteacutes drsquoextrait administreacutees les anthocyanosides absorbeacutes par le corps
sont excreacuteteacutes par voie urinaire en 24 heures
Lrsquoeacutetude de la distribution des antocyanosides dans les organes a eacuteteacute reacutealiseacutee sur des souris
ayant une alimentation contenant 05 des anthocyanosides de V myrtillus durant 2
semaines Ce sont les glycosides de malvidine (surtout le 3-glucoside et 3-galactoside de
malvidine) les anthocyanosides majoritairement preacutesents dans des organes tels que le foie les
reins les testicules et les poumons Lrsquoeacutetude de Sakakibara et coll (54) est la premiegravere agrave avoir
montreacute la preacutesence des anthocyanosides dans les testicules de souris
Les auteurs montrent aussi que le foie est sucircrement lrsquoorgane cible des anthocyanosides car
515 y sont localiseacutes Par contre les anthocyanosides nrsquoont pas eacuteteacute deacutetecteacutes dans la rate le
thymus le cœur les muscles le cerveau la graisse blanche ou les yeux
Chez lrsquohomme la plupart des eacutetudes montrent une faible biodisponibiliteacute des anthocyanosides
(faible taux drsquoexcreacutetion) (3)
Cooke et coll en 2006 (18) ont deacutemontreacute la preacutesence dans lrsquourine drsquoanthocyanosides sous
forme inchangeacutee et de glucuronides drsquoanthocyanidines (meacutetabolites) apregraves une administration
orale de Mirtoselectreg
La preacutesence de glucuronides drsquoanthocyanidines dans lrsquourine suggegravere
34
une transformation des anthocyanosides en leurs deacuteriveacutes non glycosyleacutes lesquels subiront
plus tard une biotransformation Les anthocyanidines sont suspecteacutees pour avoir une meilleure
activiteacute biologique que leurs preacutecurseurs glycosyleacutes
III Autres composeacutes pheacutenoliques de Vaccinium myrtillus
1 Acides pheacutenoliques
Les acides pheacutenoliques dans les fruits des baies sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique et benzoiumlque Le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide benzoiumlque inclus les acides p-
hydroxybenzoiumlque salicylique gallique et ellagique Dans le groupe des deacuteriveacutes drsquoacide
cinnamique on trouve les acides p-coumarique cafeacuteique et feacuterulique Les deacuteriveacutes drsquoacide
hydroxycinnamique sont repreacutesenteacutes par des deacuteriveacutes drsquoacide cafeacuteique comme les acides
chlorogeacutenique et neacuteochlorogeacutenique Dans Vaccinum myrtillus des quantiteacutes significatives
drsquoacides p-coumarique et feacuterulique sont retrouveacutees Lrsquoacide hydroxycinnamique se trouve
dans tous les organes de la myrtille mais les quantiteacutes les plus importantes sont retrouveacutees
dans les feuilles il est le principal composeacute pheacutenolique du rhizome Cet acide
hydroxycinnamique joue un rocircle dans la protection de la plante vis-agrave-vis drsquoagents pathogegravenes
et drsquoautres facteurs de stress comme une radiation solaire intense une basse tempeacuterature ou
une blessure (58)
2 Tanins
Les tanins sont des composeacutes pheacutenoliques hydrosolubles importants dans les fruits des baies
Ils sont de deux types
- les tanins hydrolysables (oligo- ou polyesters drsquoun sucre et drsquoun nombre variant de
moleacutecules drsquoacide-pheacutenol) Le sucre est le plus souvent le glucose et lrsquoacide-pheacutenol est soit
lrsquoacide hexahydroxydipheacutenique et ses deacuteriveacutes drsquooxydation pour les tanins ellagiques soit
lrsquoacide gallique dans le cas des tanins galliques
- les tanins non hydrolysables condenseacutes sont des polymegraveres flavaniques constitueacutes
drsquouniteacutes flavan-3-ols lieacutees entre elles par des liaisons carbone-carbone On les appelle
eacutegalement les proanthocyanidols qui en milieu acide et agrave chaud donnent des anthocyanidols
(11)
Les tanins donnent le goucirct aux tartes et sont responsables du changement de couleur des fruits
et des produits deacuteriveacutes des fruits Le goucirct des tartes reacutesulte de lrsquointeraction entre les tanins et
les reacutecepteurs gustatifs de la bouche De plus les tanins stabilisent les anthocyanosides
35
preacutesents en quantiteacute importante dans le fuit de la myrtille en se liant agrave eux pour former des
copolymegraveres (58)
Dans V myrtillus les feuilles vertes et rouges sont les meilleures sources de procyanidines
Leurs proportions dans les feuilles sont drsquoenviron 7 du poids sec il conviendrait donc
drsquoapporter un inteacuterecirct aux feuilles qui actuellement lors de la reacutecolte et du traitement des
fruits constituent des deacutechets alors que ce sont des parties de la plante riche en
proanthocyanidines connus pour leurs activiteacutes antimicrobiennes et antioxydantes (53)
3 Flavonols
Les flavanols sont repreacutesenteacutes par la querceacutetine la myriceacutetine le kaempfeacuterol et
lrsquoisorhamneacutetine abondants dans les plantes alimentaires comme lrsquooignon le theacute les pommes
et les baies
Le fruit de V myrtillus contient de faccedilon preacutedominante de la querceacutetine eacutegalement preacutesent
avec le kaempfeacuterol dans les feuilles Cependant leur proportion est plus importante dans les
feuilles rouges que dans les feuilles vertes car les radiations solaires augmentent leur quantiteacute
(on peut supposer un rocircle dans la photoprotection) (58)
4 Autres composeacutes retrouveacutes en minoriteacute dans Vaccinium myrtillus
Les stilbegravenes sont un groupe de composants qui inclut notamment le resveacuteratrol retrouveacute
initialement dans les grappes de raisin De petites quantiteacutes de trans-resveacuteratrol ont eacuteteacute
retrouveacutees dans les baies et notamment dans la myrtille (de lrsquoordre de 678 microgg) Cette plante
contient eacutegalement de petites quantiteacutes de caroteacutenoiumldes (58)
Autres ces composeacutes pheacutenoliques la myrtille est eacutegalement constitueacutee drsquoun ensemble de
micro- et macronutriments reacutepertorieacute dans la table de composition nutritionnelle des aliments
du Ciqual (centre drsquoinformation sur la qualiteacute des aliments) 2008 de lrsquoAfssa (71) (Annexe I)
36
Troisiegraveme partie
Inteacuterecircts theacuterapeutiques
de Vaccinium myrtillus L
37
En Europe les baies et les feuilles de myrtille ont largement eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine
populaire les baies pour leurs proprieacuteteacutes astringentes toniques et antiseptiques dans le
traitement de la diarrheacutee la dysenterie (maladie infectieuse du cocirclon) les heacutemorroiumldes les
inflammations gastro-intestinales et les infections buccales (stomatites aphtes muguet des
enfants) Elles sont eacutegalement utiliseacutees pour les deacutesordres urinaires Quant aux feuilles elles
eacutetaient particuliegraverement utiliseacutees dans le diabegravete gracircce agrave leurs proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
En application locale une infusion ou une deacutecoction de feuilles de myrtilles eacutetaient utiliseacutees
lors drsquoinflammations oculaires buccales drsquoinfections cutaneacutees et dans les brucirclures
Agrave partir du XVIIIegraveme
des herboristes utilisaient la baie de myrtille dans des preacuteparations pour
traiter certaines maladies intestinales incluant la fiegravevre typhoiumlde elle eacutetait aussi utiliseacutee dans
les infections buccales cutaneacutees urinaires dans la goutte et le rhumatisme (43) Les usages
valideacutes par la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) et la Commission E seront
deacuteveloppeacutes dans la derniegravere partie de cette thegravese
La myrtille inteacuteresse encore actuellement les scientifiques et fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes
in vitro et in vivo elle est aussi preacutesente dans quelques eacutetudes cliniques Certaines de ces
eacutetudes seront reacutepertorieacutees dans les chapitres qui vont suivre
I Action de Vaccinium myrtillus dans le domaine vasculaire
1 Effet anti-agreacutegant et vasodilatateur
11 Effet anti-agreacutegant plaquettaire
En 1990 Morazzoni et coll (44) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vivo et in vitro drsquoun complexe
drsquoanthocyanosides de V myrtillus dont le nom deacuteposeacute est Myrtocyanreg
(contenant environ
38 drsquoanthocyanosides) sur lrsquoactiviteacute plaquettaire en comparaison avec drsquoautres anti-
agreacutegants plaquettaires comme lrsquoacide aceacutetylsalicylique le dipyridamole et la ticlopidine
Lrsquoeacutetude in vitro sur plasma de lapin montre un effet inhibiteur de V myrtillus sur lrsquoagreacutegation
plaquettaire induite par lrsquoadeacutenosine diphosphate (ADP) le collagegravene et lrsquoarachidonate de
sodium (sel drsquoacide arachidonique) cette inhibition est fonction de la concentration en
anthocynosides Cette activiteacute est comparable agrave celle du dipyridamole mais est moins efficace
que celle de lrsquoacide aceacutetylsalicylique Toutefois les anthocyanosides de la myrtille et le
dipyridamole sont tous les deux efficaces pour inhiber lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par
lrsquoADP exogegravene alors que lrsquoacide aceacutetylsalicylique nrsquoa pas montreacute drsquoactiviteacute Lrsquoeffet anti-
agreacutegant plaquettaire des anthocyanosides de V myrtillus perdure apregraves certaines
manipulations chimiques et physiques comme lrsquoeacutebullition pendant cinq minutes le chauffage
38
pendant trente minutes agrave 56degC la digestion agrave la trypsine et lrsquoincubation en preacutesence
drsquoadeacutenosine phosphate
Lrsquoaction in vitro des anthocyanosides de V myrtillus sur la circulation sanguine chez le rat
montre une inhibition de lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP de maniegravere dose-
deacutependante et par voie arteacuterielle
In vivo lrsquoadministration orale du complexe anthocyanosidique de V myrtillus agrave une
concentration variant de 5 agrave 400 mgkg chez le rat montre une augmentation du temps de
saignement Cette activiteacute du complexe perdure pendant 24 heures (mecircme observation avec
lrsquoassociation acide aceacutetylsalicylique-dipyridamole) et le temps de saignement retourne agrave des
valeurs normales apregraves 48 heures Par contre cette augmentation du temps de saignement nrsquoa
pas donneacute drsquoeffet ni sur lrsquoheacutematocrite ni sur les voies intrinsegraveques et extrinsegraveques de la
coagulation sanguine
Lrsquoadministration orale de 400 mgkg du complexe anthocyanosidique de myrtille agrave des souris
deux heures avant lrsquoeacutetude diminue lrsquoadheacutesion plaquettaire cette action eacutetant similaire agrave celle
observeacutee avec 100 mgkg de ticlopidine administreacutes dans les mecircmes conditions
expeacuterimentales
Morazzoni et coll (44) ont eacutegalement eacutetudieacute lrsquoactiviteacute in vitro drsquoun produit composeacute des trois
principaux anthocyanosides (malvidine 3-O-glucoside cyanidine 3-O-glucoside et
delphinidine 3-O-glucoside) trouveacutes dans lrsquoextrait Myrtocyanreg
afin de comprendre leur
impact sur lrsquoeffet anti-agreacutegant Ce meacutelange montre la mecircme activiteacute inhibitrice sur
lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par lrsquoADP le collagegravene et lrsquoarachidonate de sodium que
lrsquoextrait Myrtocyanreg
Notons que les anthocyanosides du produit reconstitueacute sont retrouveacutes
avec le mecircme ratio que ceux de lrsquoextrait
Une eacutetude clinique incluant 30 patients en bonne santeacute avec une agreacutegation plaquettaire
normale a deacutemontreacute la capaciteacute drsquoanthocyanosides de myrtille Myrtocyanreg
administreacute
pendant 30 et 60 jours agrave la dose de 480 mgjour seul ou en association avec lrsquoacide ascorbique
(3 gjour) agrave reacuteduire lrsquoagreacutegation plaquettaire induite par le collagegravene ou lrsquoADP La meilleure
activiteacute est deacutetenue par Myrtocyanreg
seul ou associeacute agrave lrsquoacide ascorbique compareacutee agrave la
vitamine C seule (5)
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus riche en anthocyanosides a montreacute une forte inhibition
de lrsquoagreacutegation plaquettaire dans des expeacuteriences in vivo et in vitro sans interfeacuterer avec les
facteurs plasmatiques Lrsquoactiviteacute des trois principaux anthocyanosides de lrsquoextrait Myrtocyanreg
a permis de mettre en eacutevidence leur forte implication dans lrsquoeffet anti-agreacutegant plaquettaire
De plus lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans lrsquoinhibition plaquettaire est
39
lrsquoaugmentation des niveaux drsquoadeacutenosine monophosphate cyclique (AMP cyclique) soit par
stimulation de lrsquoadeacutenylate cyclase soit par inhibition de lrsquoAMP cyclique-phosphodiesteacuterase
Or il a eacuteteacute observeacute que les aglycones de lrsquoextrait Myrtocyanreg
sont des inhibiteurs potentiels
de lrsquoAMP cyclique- phosphodiesteacuterase de plusieurs tissus Ce meacutecanisme nrsquoest pas le seul car
un autre a eacuteteacute proposeacute il concernerait les anthocyanidines (principalement la delphinidine et
la cyanidine) qui affecteraient les fonctions plaquettaires par leur action antioxydante cette
action se ferait en interfeacuterant avec les processus membranaires cellulaires incluant les eacutetapes
initiales plaquettaires et la production des prostaglandines des cellules endotheacuteliales
12 Effet vasodilatateur et relaxant des artegraveres coronaires
Les anthocyanosides de V myrtillus (Myrtocyanreg
) sont couramment utiliseacutes comme agents
vasoprotecteurs inhibant lrsquoagreacutegation plaquettaire et la formation de thrombus De plus il a
eacuteteacute montreacute que les anthocyanosides de myrtille administreacutes per os (100 mgkg pc) reacuteduisent
la reacuteponse contractile du muscle lisse vasculaire et montrent une activiteacute prostacycline-like
(PGI2-like) (45) Cette eacutetude est en accord avec celle de Bettini et coll (9) qui ont montreacute que
les anthocyanosides de V myrtillus ont un effet relaxant in vitro pouvant ecirctre meacutedieacute par la
stimulation de la synthegravese de prostaglandines vasodilatatrices dans les vaisseaux sanguins
En conclusion agrave lrsquoinverse de lrsquoacide aceacutetylsalicylique qui in vivo reacuteduit la production
arteacuterielle de PGI2 en agissant comme un inhibiteur de la synthegravese des prostaglandines les
anthocyanosides de V myrtillus stimulent la production drsquoune substance PGI2-like par le tissu
vasculaire
Les anthocyanosides de myrtille comme drsquoautres bioflavonoiumldes srsquoopposent agrave la contraction
de plusieurs types de muscles lisses en reacuteponse agrave des agents varieacutes comme lrsquoangiotensine II la
seacuterotonine le baryum lrsquohistamine ou lrsquoaceacutetylcholine En effet lrsquoaceacutetylcholine agrave des
concentrations variant de 1 agrave 2 ngml induit une relaxation dans toutes les preacuteparations alors
qursquoagrave hautes concentrations elle induit une contraction (9)
Bettini et coll (9) ont rechercheacute eacutegalement lrsquoeffet vasodilatateur du complexe dans les
preacuteparations traiteacutees avec du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration du facteur
relaxant deacuteriveacute de lrsquoendotheacutelium (EDRF ou endothelium-derived relaxing factor) qui est une
substance vasodilatatrice
Le Myrtocyanreg agrave une concentration entre 50 et 200 microgml reacuteduit la reacuteponse contractile des
artegraveres coronaires agrave lrsquoaceacutetylcholine cette activiteacute est drsquoautant plus marqueacutee lorsque lrsquoacide
ascorbique est ajouteacute (100-300 microgml) Mais cet effet est diminueacute en preacutesence drsquoindomeacutetacine
ou drsquoaceacutetylsalicylate de lysine connus pour ecirctre des inhibiteurs de la cyclo-oxygeacutenase A des
40
concentrations entre 1 et 2 microgml ces deux substances nrsquoaffectent pas la diminution du tonus
induite par Myrtocyanreg alors qursquoagrave des concentrations plus eacuteleveacutees elles le reacuteduisent sans
toutefois lrsquoabolir complegravetement mecircme aux plus fortes concentrations
Une autre expeacuterience de cette eacutetude consiste agrave traiter les segments des artegraveres coronaires avec
du bleu de meacutethylegravene connu pour bloquer la libeacuteration de lrsquoEDRF Selon la concentration le
bleu de meacutethylegravene a plusieurs effets entre 1 et 8 microgml il ne modifie pas le tonus des
preacuteparations entre 8 et 18 microgml il ne provoque qursquoune lente augmentation du tonus de
plusieurs preacuteparations alors qursquoentre 18 et 24 microgml il induit une reacuteelle augmentation du
tonus des artegraveres coronaires suivie drsquoune relaxation assez marqueacutee Lrsquoeffet des
anthocyanosides de Vaccinum myrtillus a eacuteteacute eacutetudieacute apregraves disparition de lrsquoeffet du bleu de
meacutethylegravene son effet relaxant perdure partiellement malgreacute le preacute-traitement au bleu de
meacutethylegravene
En conclusion lrsquoeffet vasodilatateur de Myrtocyanreg
deacutepend agrave la fois de la libeacuteration des
prostacyclines mais aussi drsquoune faciliteacute agrave libeacuterer lrsquoEDRF les prostacyclines et lrsquoEDRF sont
probablement les meacutediateurs fonctionnels des anthocyanosides de V myrtillus
2 Activiteacute vasoprotectrice
21 Action sur la permeacuteabiliteacute capillaire et activiteacute anti-proteacuteasique
Une preacuteparation drsquoanthocyanosides de V myrtillus eacutequivalant agrave 25 drsquoanthocyanosides
administreacutee par voie intrapeacuteritoneacuteale ou per os agrave des lapins montre une reacuteduction de la
permeacuteabiliteacute capillaire de la peau (augmentant avec le temps) preacutealablement stimuleacutee par le
chloroforme lrsquohistamine ou la bradykinine (36)
Jonadet et coll (29) ont compareacute sur des rats lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides
extraits de Vitis vinifera L de V myrtillus (Difrarelreg
) et de Pinus maritimus (appeleacute
maintenant Pinus pinaster Aiton) Ainsi lrsquoactiviteacute angioprotectrice des anthocyanosides est
par ordre deacutecroissant la suivante anthocyanosides de Vitis vinifera gt anthocyanosides de V
myrtillus gt proanthocyanosides de Pinus maritimus Les auteurs soulignent que les
anthocyanosides agissent agrave travers une activiteacute anti-proteacuteasique deacutemontreacutee in vitro En effet
ils ont montreacute que les anthocyanosides des extraits preacutealablement citeacutes possegravedent des activiteacutes
inhibitrices vis-agrave-vis drsquoenzymes proteacuteolytiques comme lrsquoeacutelastase laquelle peut intervenir dans
la deacutegradation du tissu conjonctif des fibres eacutelastiques et jouerait un rocircle dans des affections
pathologiques comme lrsquoatheacuteroscleacuterose lrsquoemphysegraveme pulmonaire et lrsquoarthrite rhumatoiumlde Les
anthocyanosides apportent cette activiteacute anti-proteacuteasique en inhibant la libeacuteration des peptides
41
vasoactifs En effet lrsquoune des causes de lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire est
lrsquointervention de meacutediateurs chimiques comme lrsquohistamine la 5-hydroxytryptamine et les
kinines Enfin Jonadet et coll (29) ont reporteacute une activiteacute anti-trypsique et anti-
chymotrypsique (proteacuteases digestives) des substances pharmacologiques des extraits eacutetudieacutes
22 Action sur la reacutesistance capillaire
Lietti et coll (36) ont deacutemontreacute dans une expeacuterience lrsquointeacuterecirct des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus sur la reacutesistance vasculaire Pour cela ils les administrent par voie
intrapeacuteritoneacuteale agrave des rats preacutealablement alimenteacutes pendant 4 semaines avec une alimentation
deacuteficitaire en facteur P induisant ainsi une fragiliteacute capillaire Apregraves mesure agrave plusieurs
heures de la reacutesistance capillaire les reacutesultats montrent une eacuteleacutevation remarquable de la
reacutesistance capillaire de la peau induite par les anthocyanosides de V myrtillus Lrsquoactiviteacute est
maximale 4 heures apregraves le traitement et ne change pas apregraves 6 heures Cette activiteacute est
compareacutee avec celle de la rutine (substance de la famille des bioflavonoiumldes) laquelle montre
un effet comparable agrave 200 mgkg mais qui agrave 100 mgkg nrsquoest presque plus efficace
23 Action sur la formation drsquoun œdegraveme
Dans la mecircme eacutetude que preacuteceacutedemment Lietti et coll (36) ont montreacute que lrsquoadministration
des anthocyanosides de V myrtillus dans la patte de rats par voie intraveineuse et par voie
orale respectivement 15 et 60 minutes preacuteceacutedant lrsquoinjection de carrageacutenine (substance
induisant un œdegraveme) entraicircne une diminution de lrsquoœdegraveme formeacutee de maniegravere dose-
deacutependante En effet lrsquoutilisation de 200 mgkg de preacuteparation est plus efficace que 50 mgkg
sur le volume de lrsquoœdegraveme La dose de 200 mgkg permet une reacuteduction de lrsquoœdegraveme agrave 45
Lrsquoapplication topique de la preacuteparation 60 secondes suivant lrsquoinjection de carrageacutenine induit
eacutegalement une reacuteduction du volume de lrsquoœdegraveme agrave 39 Cette eacutetude montre lrsquoaction anti-
inflammatoire de V myrtillus
Les eacutetudes in vivo reacutealiseacutees sur des animaux montrent que les anthocyanosides de V myrtillus
sont vasoprotecteurs ils inhibent lrsquoaugmentation de la permeacuteabiliteacute capillaire augmentent la
reacutesistance vasculaire et reacuteduisent le volume de lrsquoœdegraveme de maniegravere dose-deacutependante et ses
activiteacutes perdurent dans le temps De plus ils sont plus efficaces que la rutine ou la
meacutepyramine (substance antiseacuterotoninergique et antihistaminergique) Enfin les
anthocyanidines restent longtemps dans les tissus de la peau riche en collagegravene et en
mucopolysaccharides Crsquoest pourquoi il serait inteacuteressant de mettre en place des expeacuteriences
42
pour eacutetudier la relation entre ces substances et les anthocyanosides afin de voir si ce lien
pourrait expliquer lrsquoactiviteacute pharmacologique exerceacutee sur les vaisseaux sanguins (36)
24 Action antiatheacuterogegravenique
En 2009 une eacutetude meneacutee par Mauray et coll (41) a deacutemontreacute qursquoune suppleacutementation
alimentaire avec des extraits de V myrtillus limitait la progression des leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques dans un modegravele de souris deacuteficitaire en apolipoproteacuteine E Lrsquoaction
inhibitrice du deacuteveloppement de la plaque atheacuteromateuse est indeacutependante des modifications
du statut antioxydant plasmatique des marqueurs biologiques du stress oxydant et du profil
lipidique suggeacuterant lrsquoimplication drsquoautres meacutecanismes drsquoactions (peut-ecirctre lrsquoaction anti-
inflammatoire) De plus des deux extraits utiliseacutes (lrsquoun riche en anthocyanosides extraits de
myrtilles non traiteacutees et le deuxiegraveme extraits de myrtilles fermenteacutees par des levures) la
meilleure activiteacute antiatheacuterogegravene est deacutetenue par lrsquoextrait de myrtilles fermenteacutees suggeacuterant la
formation par la fermentation de nouveaux composeacutes avec des proprieacuteteacutes beacuteneacutefiques pour la
santeacute les pigments polymeacuteriques deacuteriveacutes des anthocyanosides atteacutenueraient mieux les leacutesions
atheacuteroscleacuterotiques que les anthocyanosides de lrsquoextrait non traiteacute En effet lors de la
fermentation les anthocyanosides se condensent avec drsquoautres composeacutes preacutesents dans le fruit
de la myrtille Il reste alors agrave deacuteterminer les composeacutes responsables de lrsquoeffet observeacute et les
meacutecanismes drsquoaction impliqueacutes
3 Etudes cliniques de lrsquoactiviteacute vasoprotectrice
Des reacutesultats pharmacologiques prometteurs des extraits de fruits de V myrtillus issus
drsquoeacutetudes cliniques encouragent leur utilisation chez lrsquohomme dans le traitement des maladies
vasculaires peacuteripheacuteriques pouvant associer fragiliteacute capillaire alteacuteration de la permeacuteabiliteacute et
insuffisances veineuses chroniques des membres infeacuterieurs Drsquoautres eacutetudes cliniques ont
montreacute lrsquoefficaciteacute de la myrtille dans les symptocircmes cliniques post-opeacuteratoires
Ainsi les anthocyanosides de V myrtillus (480 mg par voie orale pendant 30 jours) ont
montreacute leur capaciteacute agrave diminuer les symptocircmes subjectifs (douleur parestheacutesiehellip) et objectifs
(œdegraveme des membres pheacutenomegravenes dyschromiques de la peauhellip) de patients atteints du
syndrome variqueux des membres infeacuterieurs tout comme les patients souffrant de fragiliteacute
capillaire ougrave une administration orale drsquoanthocyanosides de V myrtillus (160-800 mgjour)
reacuteduit les symptocircmes cliniques drsquoune reacutesistance capillaire diminueacutee (peacuteteacutechies contusion
sang feacutecal occulte) (43)
43
Lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille Myrtocyanreg (480 mgjour pendant 30 agrave 180 jours) a eacuteteacute
deacutemontreacutee dans des eacutetudes porteacutees sur des patients diabeacutetiques dyslipideacutemiques souffrant de
maladies secondaires agrave une stase des membres infeacuterieurs comme le syndrome preacute-variqueux
les varices essentielles le syndrome post-phleacutebitique et plusieurs maladies vasculaires
atheacuteroscleacuterotiques (43) Une eacutetude double-aveugle et controcircleacutee par placebo incluant 47
patients atteints de deacutesordres vasculaires drsquoorigine varieacutee a deacutemontreacute la capaciteacute de
Myrtocyanreg agrave reacuteduire les symptocircmes subjectifs et objectifs de la pathologie (diminution de la
douleur de la parestheacutesie de lrsquoœdegraveme et de la mobilisation des extreacutemiteacutes des doigts chez les
patients avec syndrome de Raynaud) Une eacutetude meneacutee sur 568 patients souffrants
drsquoinsuffisance veineuse des membres infeacuterieurs a montreacute la capaciteacute des anthocyanosides agrave
faire disparaitre les symptocircmes et agrave ameacuteliorer la microcirculation et le drainage lymphatique
(43)
Lrsquoefficaciteacute de la myrtille (320 mgjour pendant 60 agrave 90 jours) a mecircme eacuteteacute deacutemontreacutee chez 54
femmes enceintes souffrant de phleacutebite secondaire agrave stase veineuse (diminution de la douleur
de lrsquoœdegraveme de la fragiliteacute capillairehellip) et des patients avec bronchite chronique et
asthmatique (reacuteduction par lrsquoextrait de V myrtillus agrave 480 mgjour pendant 10 agrave 30 jours des
modifications microcirculatoires induites par la corticotheacuterapie) (43)
4 Action sur lrsquoenzyme de conversion de lrsquoangiotensine (ECA)
Pour rappel lrsquoECA (dipeptidylcarboxypeptidase) est une enzyme impliqueacutee dans le systegraveme
reacutenine-angiotensine (lrsquoun des meacutecanismes le plus important dans la reacutegulation de la pression
arteacuterielle) permettant la conversion de lrsquoangiotensine I inactive en angiotensine II active Cette
derniegravere est capable drsquoaugmenter la pression sanguine et la pression de perfusion reacutenale les
inhibiteurs de lrsquoECA (IEC) constituent alors la premiegravere ligne de traitement pour
lrsquohypertension arteacuterielle et lrsquoinsuffisance cardiaque Les deux sites actifs de lrsquoACE
contiennent un atome de Zn2+
et les IEC sont capables de se lier agrave cet atome (47)
Personn et coll (47) ont rapporteacute dans une eacutetude in vitro la proprieacuteteacute drsquoun extrait de V
myrtillus agrave inhiber lrsquoECA peut-ecirctre par sa capaciteacute agrave cheacutelater des ions meacutetaux comme Zn2+
ou
Fe2+
cette inhibition eacutetant plus forte que les anthocyanidines combineacutees ou seacutepareacutees
deacutemontre lrsquoimplication drsquoautres composeacutes de la plante dans cette action En effet V myrtillus
ne contient pas seulement des anthocyanosides et anthocyanidines mais aussi de la querceacutetine
(flavonol) du stilbegravene resveacuteratrol des acides feacuterulique et coumarique Crsquoest la composition
speacutecifique de la plante qui semble ecirctre agrave lrsquoorigine de lrsquoeffet observeacute
44
Par conseacutequent le lien entre V myrtillus et lrsquoECA pourrait expliquer les effets
pharmacologiques de la plante sur la circulation cette plante pouvant ecirctre alors utiliseacutee en
preacutevention des maladies cardiovasculaires
5 Action sur lrsquoangiogenegravese
Lrsquoangiogenegravese se deacutefinit comme la formation de nouveaux vaisseaux sanguins agrave partir de
vaisseaux preacuteexistants (neacuteovascularisation) Elle est indispensable dans de nombreux
processus physiologiques comme le deacuteveloppement embryonnaire lrsquoimplantation du placenta
mais peut aussi contribuer agrave des processus pathologiques comme la croissance des tumeurs et
le deacuteveloppement des meacutetastases Lrsquoangiogenegravese se fait par plusieurs eacutetapes qui se trouvent
ecirctre les mecircmes dans lrsquoensemble des processus
- activation des cellules endotheacuteliales
- deacutegradation de la membrane basale et de la matrice extra-cellulaire
- migration orienteacutee des cellules endotheacuteliales
- prolifeacuteration cellulaire
- diffeacuterenciation des cellules endotheacuteliales en une structure de type capillaire pour
former une structure vasculaire permettant le deacuteveloppement des tissus
Lrsquoangiogenegravese est controcircleacutee par plusieurs facteurs inducteurs ou inhibiteurs dont le facteur de
croissance de lrsquoendotheacutelium vasculaire (VEGF ou vascular endothelial growth factor)
reacutegulateur cleacute de lrsquoangiogenegravese (73)
En 2007 Matsunaga et coll (40) ont eacutetudieacute in vitro lrsquoaction de V myrtillus sur lrsquoangiogenegravese
plus preacuteciseacutement sur la formation des tubules vasculaires la prolifeacuteration et la migration des
cellules ainsi que leur action sur la phosphorylation de proteacuteines kinases comme ERK 12
(laquo extra-cellular signal-regulated kinase raquo ou kinase reacuteguleacutee par le signal extra-cellulaire)
phospholipase Cγ et Akt (constitueacutes de trois enzymes appartenant agrave la famille des proteacuteines
kinases) induite par le VEGF Lrsquoeacutetude deacutemontre les effets inhibiteurs des extraits de myrtille
sur les paramegravetres de lrsquoangiogenegravese sur des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales
humaines co-cultiveacutees avec des fibroblastes Ainsi entre 1 et 30 microgml-1
lrsquoextrait de
Vaccinum myrtillus inhibe significativement la surface des tubules vasculaires la longueur
lrsquoenchevecirctrement des tubules et le nombre de reacuteseaux formeacutes A 3 microgml-1
ou plus lrsquoextrait
reacuteduit lrsquoensemble des paramegravetres de lrsquoangiogenegravese
Lrsquoextrait inhibe la prolifeacuteration (inhibition significative agrave 3 microgml-1
) et la migration
(inhibition significative agrave 10 et 30 microgml-1
) des cellules induites par VEGF-A de maniegravere
dose-deacutependante ceci ne se voyant qursquoen preacutesence du facteur de croissance
45
La phosphorylation des proteacuteines kinases comme ERK 12 est important dans la prolifeacuteration
des cellules endotheacuteliales des veines ombilicales humaines et celle de Akt est une eacutetape
importante dans la prolifeacuteration et la migration de ces cellules
Les auteurs deacutemontrent la capaciteacute de V myrtillus agrave inhiber lrsquoaugmentation de la
phosphorylation de ces deux proteacuteines kinases mais pas la phosphorylation de la PLCγ
indiquant que lrsquoextrait agit en aval de celle-ci dans la cascade de signalisation induite par le
VEGF
Lrsquoeacutetude in vivo mise en place par Matsunaga et coll (39) chez la souris a permis de montrer
lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoextrait de V myrtillus dans la formation de reacuteseaux neacuteovasculaires dans
la reacutetinopathie induite par oxygegravene
II Action de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant
1 Le stress oxydant quelques geacuteneacuteraliteacutes
Un radical libre est une espegravece chimique qui possegravede un eacutelectron ceacutelibataire sur sa couche
peacuteripheacuterique Les radicaux libres qui interviennent dans le stress oxydant ont un eacutelectron
ceacutelibataire centreacute sur un atome drsquooxygegravene On les nomme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene
(ERO) Plusieurs ERO existent comme le radical superoxyde le radical perhydroxyle (forme
protoneacutee du superoxyde) le radical hydroxyle le radical peroxyle et le radical alkoxyle Les
radicaux ne sont pas seulement formeacutes au cours des pheacutenomegravenes de stress oxydant mais
eacutegalement lors du meacutetabolisme normal de lrsquooxygegravene in vivo mecircme si ils ne sont geacuteneacutereacutes
qursquoen faible quantiteacute En effet crsquoest au niveau de la chaine respiratoire de la mitochondrie ougrave
85 de lrsquooxygegravene sont meacutetaboliseacutes que se produit la reacuteduction complegravete par 4 eacutelectrons de la
moleacutecule drsquoO2 conduisant agrave la formation drsquoeau La reacuteduction de la moleacutecule ne peut se faire
que par lrsquoenchainement de plusieurs eacutetapes donnant naissance agrave des intermeacutediaires reacuteduits de
lrsquooxygegravene La reacuteduction monoeacutelectronique de lrsquooxygegravene consommeacute au niveau
mitochondriale fournit lrsquoanion superoxyde (O2-) qui est une espegravece toxique Mais des
enzymes antioxydantes comme les superoxydes dismutases vont reacuteguler lrsquoanion superoxyde
en catalysant leur dismutation et en produisant le peroxyde drsquohydrogegravene (H2O2) Ce dernier
nrsquoest pas un radical libre mais une moleacutecule posseacutedant tous ses eacutelectrons apparieacutes Cependant
dans des reacuteactions in vivo comme la reacuteaction de Fenton et en preacutesence de cations meacutetalliques
comme Fe2+
ou Cu+ le H2O2 devient toxique en donnant les radicaux libres les plus neacutefastes
du stress oxydant que sont les radicaux hydroxyles (OH) De mecircme que le radical
superoxyde le peroxyde drsquohydrogegravene est reacuteguleacute in vivo par des systegravemes antioxydants comme
46
la catalase qui acceacutelegravere sa dismutation ou la glutathion peroxydase qui catalyse sa reacuteduction
par le glutathion
Ainsi le radical O2- le H2O2 et le radical OH forment les ERO (beaucoup plus reacuteactives que
lrsquooxygegravene) Cependant drsquoautres espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene existent comme les radicaux
peroxyles (RO2) les hydroperoxydes (RO2H) et les radicaux alkoxyles (RO)
Ces ERO tregraves reacuteactifs peuvent endommager les proteacuteines les lipides les glucides et les
acides nucleacuteiques par des reacuteactions drsquooxydation A cocircteacute des ERO il existe le monoxyde
drsquoazote radicalaire NO pouvant avoir des effets deacuteleacutetegraveres en reacuteagissant lors drsquoun stress
oxydant avec lrsquoO2-
pour former le peroxynitrite (ONOO-) tregraves reacuteactif et capable
drsquoendommager les proteacuteines les lipides et les acides nucleacuteiques On parle alors de stress
nitrosant
Crsquoest pourquoi il existe des systegravemes de deacutefense dans lrsquoorganisme (antioxydants) comme les
systegravemes de deacutefense enzymatique (superoxyde dismutase catalase glutathion
peroxydaseshellip) Toutefois le stress oxydant peut ecirctre important et les systegravemes de deacutefenses
deacutepasseacutes drsquoougrave la survenue ou lrsquoaggravation de pathologies comme lrsquoatheacuteroscleacuterose le diabegravete
sucreacute lrsquoischeacutemie ceacutereacutebrale le cancerhellip(21)
2 Proprieacuteteacutes antioxydantes des anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
21 Quelques rappels sur les anthocyanosides
Les anthocyanosides comme nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment sont des colorants
naturellement preacutesents dans les fleurs les fruits (particuliegraverement dans les baies) et les
leacutegumes Ce sont des pigments responsables de la couleur comme lrsquoorange le rouge le
bleuhellip Ils peuvent jouer plusieurs rocircles (attirer les insectes pour la pollinisation et la
dispersion des graines ou contribuer agrave la reacutesistance des plantes vis-agrave-vis drsquoattaques
exteacuterieures) Pour rappel les anthocyanosides sont des glycosides ou des acylglycosides des
anthocyanidines (les formes aglycones) Ils ont une structure de base flavylium et des
substitutions hydroxyles ou meacutethoxyles De plus ils sont tous O-glycosyleacutes avec diffeacuterents
sucres dont la preacutevalence est dans lrsquoordre deacutecroissant le glucose le rhamnose le xylose le
galactose lrsquoarabinose et le fructose Les anthocyanosides les plus preacutedominants sont des 3- ou
35-glycosyleacutes Quand le nombre de sucre augmente on observe une alternance sucre et
liaisons laquo acyl raquo De nombreuses eacutetudes ont reporteacute les effets positifs des anthocyanosides
dont certaines seront deacutecrites dans cette thegravese Certains de leurs effets sont attribueacutes agrave leurs
proprieacuteteacutes antioxydantes (64)
47
22 Effet des anthocyanosides sur la capaciteacute antioxydante du plasma
En 2006 Talaveacutera et coll (59) ont eacutetudieacute la biodisponibiliteacute des anthocyanosides de
Vaccinum myrtillus (Antho 50reg
) et leur potentiel antioxydant sur le plasma de rats alimenteacutes
avec Antho 50reg pendant 8 jours Lrsquoeacutetude a montreacute une augmentation du statut antioxydant
plasmatique par cette administration mecircme si la biodisponibiliteacute eacutevalueacutee par excreacutetion
urinaire est basse Mais la chimie des anthocyanosides est complexe ceux-ci pourraient
subir une conversion en formes moins coloreacutees agrave cause de leur instabiliteacute agrave pH physiologique
ou meacutetaboliseacutes en composeacutes encore inconnus Quoiqursquoil en soit une consommation
quotidienne en anthocyanosides a un effet positif sur la capaciteacute antioxydant du plasma
23 Pouvoir ORAC des anthocyanosides
Lrsquoessai ORAC (oxygen radical absorbance capacity ou capaciteacute drsquoabsorbance du radical
oxygegravene) est une mesure standardiseacutee du pouvoir antiradicalaire de substances pures ou en
meacutelange Apregraves extraction des principes actifs dans un meacutelange eau-eacutethanol pour les
moleacutecules hydrosolubles et eacutethanol pour les moleacutecules lipophiles le test par
spectrofluorimeacutetrie consiste en la mesure de la protection exerceacutee par la moleacutecule contre
lrsquooxydation de la fluoresceacuteine par un radical libre et stable le AAPH (22-azobis(2-
amidinopropane) dihydrochloride) Les reacutesultats sont ensuite exprimeacutes par rapport au pouvoir
antioxydant exerceacute par une moleacutecule de reacutefeacuterence le Trolox (eacutequivalent hydrosoluble de la
vitamine E) rameneacute par le poids (en gramme) du produit que lrsquoon teste (75)
La valeur ORAC de la myrtille (446 micromol Troloxg de poids frais) est plus eacuteleveacutee que celle
drsquoautres baies (Figure 16) (58)
Figure 16 Capaciteacute antioxydante de quelques baies (58)
48
En 1997 Wang et coll (64) ont eacutevalueacute la capaciteacute antioxydante drsquoanthocyanidines communs
comme les aglycones de delphinidine cyanidine peacutelargonidine malvidine peacuteonidine et leurs
deacuteriveacutes glycosyleacutes Pour cela ils utilisent lrsquoessai ORAC avec geacuteneacuterateur de radical peroxyl
(ROO) Ainsi lrsquoeacutetude deacutemontre que les anthocyanidines posseacutedant la mecircme hydroxylation
sur le cycle A et C et une seule hydroxylation sur le cycle B comme la peacutelargonidine la
malvidine et la peacuteonidine ont une plus basse valeur ORAC que les anthocyanidines
dihydroxyleacutees sur le cycle B (3rsquo 4rsquo-di-OH) comme la cyanidine Les groupes hydroxyls en
position 3rsquo et 4rsquo du cycle B constituent un facteur important dans le pouvant antioxydant
seule la delphinidine eacutechappe agrave cette regravegle (plusieurs hydroxylations sur le cycle B mais
valeur ORAC plus faible) Mecircme si dans certains flavonoiumldes le nombre de groupes
hydroxyls augmentent la capaciteacute antioxydante ceci nrsquoest pas constateacute pour les
anthocyanosides ougrave la peacutelargonidine la cyanidine et la delphinide ayant 4 5 et 6 groupes
hydroxyls respectivement ont des valeurs ORAC respectives de 154 224 et 181 De plus la
glycosylation peut avoir aussi un effet sur lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides Elle
peut diminuer augmenter ou nrsquoavoir aucun effet sur le pouvoir antiradicalaire Par exemple
la 3-glycosylation du cycle C de la cyanidine augmente lrsquoactiviteacute ORAC pour le glucose et le
rhamnose mais la diminue pour le galactose Ainsi lrsquoordre deacutecroissant de lrsquoactiviteacute ORAC
pour la cyanidine est le suivant cyanidine 3-glucoside gt cyanidine 3-rhamnoside gt cyanidine
gt cyanidine 3-galactoside Mecircme lrsquoorientation du groupe hydroxyl affecte le pouvoir
antioxydant contre le radical peroxyl De plus lrsquoefficaciteacute drsquoun antioxydant agrave pieacuteger les
radicaux libres deacutepend aussi de sa capaciteacute agrave former un radical lui-mecircme stable Enfin le
classement des antioxydants par leur valeur ORAC deacutepend aussi de lrsquooxydant du radical libre
utiliseacute et de la meacutethode chimique employeacutee
Ainsi cette eacutetude a montreacute le fort pouvoir antioxydant des anthocyanosides ceux-ci sont
donc de bons candidats pour la preacutevention et le traitement de maladies mecircme si drsquoautres
eacutetudes sont neacutecessaires pour eacutelucider leur impact sur la santeacute humaine
24 Capaciteacute antioxydante des anthocyanosides vis-agrave-vis des espegraveces
reacuteactives azoteacutees
Lrsquooxyde nitrique ou monoxyde drsquoazote radicalaire (NO) est un meacutediateur important
participant agrave des reacuteactions physiologiques dans les organismes vivants comme le
meacutetabolisme eacutenergeacutetique mitochondrial ou la transduction de signaux Cependant le NO peut
reacuteagir rapidement avec lrsquoO2- et former le peroxynitrite (ONOO
-) un fort oxydant tregraves reacuteactif
pouvant reacuteagir avec des moleacutecules biologiques comme les proteacuteines ou les acides nucleacuteiques
49
LrsquoONOO- participe agrave la formation de nitro-tyrosine dans les proteacuteines et agrave lrsquooxydation des
lipoproteacuteines de basse densiteacute responsable de la formation de plaques drsquoatheacuterome Les
radicaux NO sont geacuteneacutereacutes de faccedilon constitutive dans le cerveau sous des conditions
physiologiques LrsquoONOO- peut ecirctre lrsquoune des causes de deacutesordres ceacutereacutebraux (accidents
vasculaires ceacutereacutebraux ou maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie drsquoAlzheimer) (27)
En 2004 Ichiyanagi et coll (27) ont compareacute les reacuteactiviteacutes de 20 anthocyanosides extraits de
Vaccinum myrtillus contre les espegraveces reacuteactives azoteacutees et oxygeacuteneacutees Lrsquoextrait utiliseacute dans
lrsquoeacutetude est le Bilberon 25reg
(extrait pur sous forme de poudre provenant de V myrtillus)
Comme lrsquoantioxydant de reacutefeacuterence la (+)-cateacutechine les anthocyanosides ont la capaciteacute de
pieacuteger les radicaux libres comme le radical OH mais ont une reacuteactiviteacute 20 fois plus hautes
que celui-ci contre lrsquoO2- De plus la reacuteactiviteacute contre le radical OH nrsquoest pas tregraves sensible agrave
la diversiteacute structurale des anthocyanosides alors qursquoelle lrsquoest pour lrsquoO2- Dans lrsquoeacutetude de
Ichiyanagi et coll (27) lrsquoactiviteacute contre le NO est presque la mecircme entre tous les
anthocyanosides eacutetant tregraves peu sensible aux diversiteacutes structurales (les groupes hydroxyls
libres sur le cycle B de la moleacutecule de base ou lrsquoimportance de la meacutethylation de ces groupes
ne contribueraient pas aux reacuteactiviteacutes des anthocyanosides contre les radicaux NO et OH)
Parmi tous les anthocyanosides ce sont les glycosides (position 3) de delphinidine qui
reacuteagissent le plus contre les radicaux NO et ONOO- (reacuteactiviteacute 6 et 3 fois plus hautes que les
anthocyanosides et la (+)-cateacutechine respectivement) les autres anthocyanosides ayant une
reacuteactiviteacute comparable entre eux contre NO et lrsquoONOO-
25 Reacuteactiviteacute contre la peroxydation lipidique
Les lipoproteacuteines de basse densiteacute (LDLs ou low-density lipoproteins) oxydeacutees par des
radicaux libres et des pro-oxydants ont plusieurs effets biologiques neacutefastes comme le
deacuteclenchement drsquoeacutevegravenements cellulaires conduisant agrave la formation et la progression de la
plaque atheacuteroscleacutereuse (21)
Laplaud et coll (34) ont eacutetudieacute lrsquoaction antioxydante drsquoun extrait de Vaccinum myrtillus sur
les LDLs Lrsquoeacutetude deacutemontre la diminution de tous les paramegravetres eacutevalueacutes lors de lrsquooxydation
des LDLs par cet extrait En effet la myrtille est capable de ralentir la formation de diegravenes
conjugueacutes de retarder la production de lipoperoxydes et de malondialdeacutehyde (indicateurs de
la peroxydation lipidique) et de diminuer la charge eacutelectrique nette des lipoproteacuteines
Enfin V myrtillus serait plus efficace que lacide ascorbique ou lrsquohydroxytoluegravene butyleacute
(BHT) pour diminuer la peroxydation lipidique des LDLs
50
En 1998 Martiacuten-Aragoacuten et coll (38) ont eacutetudieacute in vitro la capaciteacute drsquoun extrait complexe
drsquoanthocyanoside de V myrtillus agrave inhiber la peroxydation lipidique et agrave pieacuteger les ERO
comme les radicaux OH et O2- Lrsquoeacutetude deacutemontre un effet antiperoxydant de lrsquoextrait
(concentration-deacutependante) la concentration capable drsquoinhiber 50 de la peroxydation
lipidique (IC50 ou concentration inhibitrice 50) eacutetant de 5028 microgmL Sa capaciteacute agrave pieacuteger le
radical OH est faible (deacutetectable agrave partir de 50 microgmL) alors que sa reacuteactiviteacute contre le
radical O2- est forte
(observeacutee agrave toutes les concentrations testeacutees avec une valeur drsquoIC50 de
moins de 25 microgmL)
En conclusion la myrtille pourrait par son activiteacute antiperoxydative contribuer agrave la protection
vis-agrave-vis de lrsquoatheacuteroscleacuterose
26 Action inhibitrice sur lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines
Viljanen et coll (63) ont compareacute lrsquoinhibition de lrsquooxydation des lipides et des proteacuteines entre
les composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus avec ceux drsquoautres baies comme Rubus idaeus L
(framboisier) Vaccinium vitis-idaea L (airelle rouge) et Ribes nigrum L (cassis) Les
composeacutes pheacutenoliques sont repreacutesenteacutes par des anthocyanosides des ellagitanins et des
proanthocyanidines Lrsquoeacutetude deacutemontre que V myrtillus et Rubus idaeus possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante parmi la totaliteacute des baies eacutetudieacutees contre lrsquooxydation des
proteacuteines (cette oxydation eacutetant mesureacutee par la perte de la fluorescence au tryptophane et la
formation de proteacuteines carbonyles) Vaccinium myrtillus et V vitis-idaea possegravedent la
meilleure activiteacute antioxydante vis-agrave-vis de lrsquooxydation des lipides suivis par Ribes nigrum et
Rubus idaeus (cette oxydation est mesureacutee par lrsquoanalyse drsquohexanal de diegravenes conjugueacutes et
drsquohydroperoxydes) Dans la myrtille et le cassis ce sont les anthocyanosides qui contribuent agrave
la majoriteacute de lrsquoeffet antioxydant par inhibition de la formation des proteacuteines carbonyles et
drsquohexanal (hexanaldehyde) Cette activiteacute antioxydante des anthocyanosides et des
proanthocyanidines est dose-deacutependante ce qui nrsquoest pas le cas pour les autres composeacutes
pheacutenoliques Lrsquoeffet antioxydant des composeacutes pheacutenoliques des baies est plus prononceacute
contre lrsquooxydation des lipides particuliegraverement lrsquoinhibition du composeacute hexanal que celle des
proteacuteines Lrsquoinhibition des composeacutes aldeacutehydes des lipides reacutesulte en geacuteneacuteral de lrsquoinhibition
de la formation de deacuteriveacutes carbonyls conseacutequence drsquoune diminution de lrsquointeraction lipide-
proteacuteine
51
3 Effet cytoprotecteur de Vaccinium myrtillus sur les dommages du foie
31 Geacuteneacuteraliteacutes sur le foie
Le foie est lrsquoorgane central du meacutetabolisme des composeacutes exogegravenes et endogegravenes il est donc
lrsquoorgane cible de lrsquoaction des xeacutenobiotiques et de leurs meacutetabolites Les eacutetudes sur les
heacutepatocytes sont importantes car ces cellules repreacutesentent 65 du parenchyme du foie et ils
assurent presque toutes les fonctions de cet organe Les heacutepatocytes ont un appareil de Golgi
distinct et de nombreuses mitochondries Malheureusement ils peuvent ecirctre soumis agrave un
stress oxydant Les eacutetudes faites agrave ce jour ont utiliseacute des toxines expeacuterimentales varieacutees afin
drsquoeacutetudier les effets cytoprotecteurs de substances comme lrsquoextrait de V myrtillus Dans les
eacutetudes qui vont suivre deux toxines sont employeacutees Le tert ndashbutyl hydroperoxyde (tBH) et
lrsquoallyl-alcool (2-propen-1-ol) Le tBH peut induire un stress oxydant aux cellules agrave travers des
radicaux (radical hydroxyl peroxyl drsquohydrogegravene et alkoxyl se formant lors de sa
deacutecomposition) Le tBH est la cause de plusieurs dommages comme la rupture des
membranes cellulaires lrsquoinduction de la peroxydation lipidique (responsable
drsquoatheacuteroscleacuterose) la fuite drsquoenzymes agrave travers lrsquoespace extracellulaire lrsquooxydation du
glutathion et lrsquoalkylation de macromoleacutecules cellulaires Lrsquoallyl-alcool (AA) est une toxine
qui agit indirectement agrave travers ses meacutetabolites Il est oxydeacute dans les cellules en acroleacuteine
sous lrsquoaction de lrsquoalcool deacuteshydrogeacutenase cytosolique Lrsquoacroleacuteine est capable de former un
produit avec le glutathion reacuteduit (GSH) et drsquoautres biomoleacutecules Elle induit aussi la
peroxydation lipidique catalyseacutee par les ions Fe(II) (62)
32 Eacutetudes de leacutesions oxydatives heacutepatiques
En 2007 Valentovaacute et coll (62) ont utiliseacute un extrait de Vaccinum myrtillus (contenant 25
drsquoanthocyanosides) pour eacutevaluer son effet contre une leacutesion oxydative dans des cultures
primaires drsquoheacutepatocytes de rat induite par tBH et AA Jusqursquoagrave preacutesent lrsquoactiviteacute
cytoprotectrice de la myrtille contre une leacutesion oxydative nrsquoeacutetait pas documenteacutee
Lrsquoeacutetude a deacutemontreacute lrsquoactiviteacute protectrice dose-deacutependante de la plante vis-agrave-vis de leacutesions
oxydatives dans ces cultures cellulaires avec une protection maximale de 5116 contre les
dommages occasionneacutes par AA De plus les auteurs ont montreacute la capaciteacute de lrsquoextrait agrave
pieacuteger les radicaux DPPH (dipheacutenylpicrylhydrazyl) et O2-
En conclusion lrsquoextrait de V myrtillus montre des effets cytoprotecteurs agrave 100 et 500 microgmL
dans le test au MTT (sel de teacutetrazolium permettant une numeacuteration rapide des cellules
vivantes) Lrsquoextrait protegravege les heacutepatocytes de la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase et de la
formation des produits de la lipoperoxydation (TBARS repreacutesentant les substances reacuteagissant
52
avec lrsquoacide thiobarbiturique et permettant une premiegravere approche de la peroxydation
lipidique) Lrsquoimportante reacuteactiviteacute dans lrsquoeacutetude est sucircrement due agrave la dureacutee plus importante du
temps drsquoincubation dans le meacutelange reacuteactionnel Les effets observeacutes dans lrsquoeacutetude de
Valentovaacute et coll (62) montre que la capaciteacute cytoprotectrice de V myrtillus vis-agrave-vis des
heacutepatocytes de rat est probablement due aux proprieacuteteacutes antioxydantes de ses constituants
principaux (les anthocyanosides) Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude soutien lrsquoutilisation de la
myrtille dans les compleacutements alimentaires pour preacutevenir les maladies chroniques associeacutees
au stress oxydant
En 2008 Bao et coll (6) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun extrait de V myrtillus
commercialiseacute (contenant 4204 drsquoanthocyanosides) vis-agrave-vis drsquoun dommage du foie de
souris induit par un stress Ce stress est provoqueacute par lrsquoenfermement des souris dans une cage
meacutetallique pendant 18 heures provoquant un dommage heacutepatique avec augmentation des
enzymes heacutepatiques (alanine aminotransfeacuterase) du niveau de malondialdeacutehyde (MDA) du
monoxyde drsquoazote de la xanthine oxydase (XOD) et de la peroxydation lipidique avec un
deacuteseacutequilibre de la balance oxydants-antioxydants et la diminution de GSH de la vitamine C
et de la valeur ORAC Or lrsquoadministration orale de plusieurs dosages drsquoextrait de V
myrtillus pendant 5 jours preacuteceacutedant lrsquoinduction drsquoun stress chez la souris diminue le niveau
drsquoalanine aminotransfeacuterase (agrave 200 mgkgjour drsquoextrait) augmente les niveaux de GSH (50
100 et 200 mgkgjour drsquoextrait) et diminue significativement les niveaux de XOD et de NO
(agrave des concentrations de 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait)
De plus lrsquoextrait de myrtille agrave 200 mgkgjour pourrait supprimer et renverser le niveau de
MDA heacutepatique et plasmatique agrave un niveau comparable agrave celui du groupe controcircle (non
soumis au stress) La mecircme chose est observeacutee avec 200 mgkg jour de vitamine C (autre
antioxydant) Enfin le niveau ORAC est augmenteacute par 100 et 200 mgkgjour drsquoextrait de V
myrtillus
Bao et coll (6) avaient deacutejagrave mis en eacutevidence lrsquoeffet protecteur du rein drsquoun extrait de V
myrtillus vis-agrave-vis drsquoun stress oxydant induit par KBrO3
En conclusion la myrtille pourrait preacutevenir les dommages heacutepatiques causeacutes par un stress
oxydant gracircce agrave ses proprieacuteteacutes antioxydantes
53
4 Effet de Vaccinim myrtillus sur les maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives et le
vieillissement
41 Effets sur un stress eacutemotionnel
Il a eacuteteacute mis en eacutevidence que le stress psychologique joue un rocircle significatif dans la
pathogenegravese de cancers et peut ecirctre associeacute avec une augmentation des produits issus de
lrsquooxydation et de leurs dommages sur les tissus
Le stress oxydant participe agrave lrsquoeacutetiologie de maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives comme la maladie
drsquoAlzheimer et la maladie de Parkinson En effet le stress eacutemotionnel peut affecter le systegraveme
nerveux central dans lequel se trouve notamment les neurones dopaminergiques qui
produisent la dopamine un neurotransmetteur du groupe des cateacutecholamines preacutecurseur de la
noradreacutenaline jouant un rocircle fondamentale dans le cerveau (controcircle de la motriciteacute) utiliseacute
en theacuterapeutique pour son action stimulante sur le systegraveme cardiovasculaire Les neurones
dopaminergiques sont localiseacutes dans certaines reacutegions ceacutereacutebrales comme lrsquohypothalamus le
locus niger et les corps strieacutes Ainsi la rupture de la transmission dopaminergique affecte
lrsquoactiviteacute comportementale Une baisse du niveau de dopamine dans certaines reacutegions
ceacutereacutebrales peut induire une perte des certains fonctions cognitives comme la meacutemoire
lrsquoattention la reacutesolution de problegraveme le mouvement la reacuteponse eacutemotionnelle et la capaciteacute
eacutemotionnelle agrave ressentir le plaisir ou la douleur
De plus les ERO induites par un stress sont connues pour ecirctre responsables de la
peroxydation lipidique et de lrsquooxydation des proteacuteines avec formation de proteacuteines
carbonyles Ainsi des eacutetudes ont deacutemontreacute que la modification de proteacuteines intracellulaires
comme certaines enzymes cleacutes et proteacuteines structurales peuvent mener agrave la deacutegeacuteneacuteration
neurofibrillaire des neurones menant agrave la maladie drsquoAlzheimer une autre maladie
neurodeacutegeacuteneacuterative (1) (52)
En 2008 Rahman et coll (52) ont eacutetudieacute les effets protecteurs drsquoun meacutelange
drsquoanthocyanosides de Vaccinum myrtillus administreacute oralement agrave des souris soumis agrave un
stress oxydant ceacutereacutebral provoqueacute par la coupure des moustaches En effet le retrait des
moustaches augmente la formation de proteacuteines carbonyles et induit la peroxydation lipidique
dans le cerveau le cœur le rein et le foie Le niveau des marqueurs de lrsquooxydation diffegraverent
en fonction des reacutegions ceacutereacutebrales De mecircme le niveau de dopamine est alteacutereacute dans le cortex
ceacutereacutebral et le meacutesenceacutephale Les moustaches de souris jouent un rocircle tregraves important dans le
sens et la motriciteacute et la contribution sensorielle est directement lieacutee aux neurones moteurs
54
controcirclant leur activiteacute locomotrice Crsquoest pourquoi le retrait des moustaches a de graves
conseacutequences puisqursquoil affecte lrsquoactiviteacute locomotrice induisant anxieacuteteacute et hyper-locomotion
Ce stress oxydant induit par un stress psychologique augmente les niveaux de marqueurs
biologiques comme les proteacuteines carbonyles et les TBARS dans certains organes et reacutegions
ceacutereacutebrales (cœur reins foie meacutesenceacutephale cortex et ceacutereacutebellum) Or lrsquoadministration des
anthocyanosides de V myrtillus des souris diminue la peroxydation lipidique dans tous les
tissus reacuteduit lrsquooxydation des proteacuteines dans les reins le foie le meacutesenceacutephale et le cortex
ceacutereacutebral de faccedilon notable et diminue eacutegalement les niveaux de proteacuteines carbonyles et de
TBARS
Enfin lrsquoadministration de myrtille supprime les modifications (induites par le stress
psychologique) des niveaux de dopamine et de ses meacutetabolites (ces modifications pouvant
provoquer des maladies deacutegeacuteneacuteratives comme la maladie de Parkinson)
Cependant cette eacutetude ne peut pas conclure sur la capaciteacute des anthocyanosides de V
myrtillus agrave franchir la barriegravere heacutemato-enceacutephalique et agrave y exercer leur action antioxydante
Les principales formes retrouveacutees dans le foie et les reins sont des meacutetabolites meacutethyleacutes des
anthocyanosides et drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour prouver le lien entre ces meacutetabolites
meacutethyleacutes et la neuroprotection observeacutee dans lrsquoeacutetude
En conclusion cette eacutetude suggegravere que les anthocyanosides peuvent ecirctre utiles dans la
protection et le traitement des maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives associeacutees agrave un stress oxydant
42 Effet sur les deacuteficits cognitifs lieacutes agrave lrsquoacircge et implication du stress oxydant
Le dommage oxydant a depuis longtemps eacuteteacute proposeacute pour ecirctre en partie responsable de
plusieurs deacutesordres lieacutes agrave lrsquoacircge De plus plusieurs eacutetudes ont confirmeacute lrsquoaccumulation des
marqueurs biologiques du stress oxydant (augmentation de lrsquooxydation des lipides et des
proteacuteines dans les cerveaux de mammifegraveres acircgeacutes) Les pertes de la fonction ceacutereacutebrale avec le
vieillissement pourraient ecirctre associeacutees agrave une leacutesion oxydante des biomoleacutecules dans certaines
reacutegions ceacutereacutebrales et un niveau augmenteacute de peroxydes lipidiques observeacute dans des reacutegions
du cerveau impliqueacutees dans les fonctions de meacutemoire et drsquoapprentissage De plus les auteurs
ont deacutemontreacute lrsquoassociation des alteacuterations des fonctions ceacutereacutebrales cognitives avec des
modifications du systegraveme cardiovasculaire comme lrsquoaugmentation de la pression sanguine
(impliqueacutee dans lrsquoacceacuteleacuteration du vieillissement des vaisseaux les alteacuterations des fonctions
ceacutereacutebrales et le deacuteveloppement de lrsquoatheacuteroscleacuterose) (32)
Kolosova et coll (32) utilisent pour leur eacutetude deux souches de rats La souche OXYS qui est
une souche aux traits heacuteriteacutes de vieillissement acceacuteleacutereacute et une haute sensitiviteacute au stress
55
oxydant par rapport agrave une autre souche la souche Wistar Les rats OXYS ont une espeacuterance
de vie plus courte et deacuteveloppent plus preacutecocement des deacutesordres pathologiques lieacutes agrave lrsquoacircge
semblables agrave ceux observeacutes chez lrsquohumain comme lrsquoosteacuteoporose lrsquohypertension arteacuterielle
de ce fait le comportement de jeunes rats OXYS est semblable agrave celui des rats Wistar acircgeacutes
Lrsquoobjectif de leur eacutetude eacutetait de veacuterifier srsquoil existe un lien entre le vieillissement ceacutereacutebral et les
marqueurs du stress oxydant chez les rats OXYS pour rechercher lrsquoefficaciteacute drsquoune
suppleacutementation agrave long terme drsquoantioxydants dans la preacutevention de lrsquoapparition de deacuteficits
cognitifs comme les deacuteficits drsquoapprentissage et de meacutemoire
Les diffeacuterents paramegravetres de stress oxydant dans ces deux souches de rats sont eacutevalueacutes
(peroxydation lipidique niveau de proteacuteines carbonyles niveau de MDA activiteacute de
superoxyde dismutase (SOD) de niveau de GSH et quantiteacute drsquoα-tocopheacuterol)
Lrsquoeacutetude deacutemontre qursquoune suppleacutementation agrave long terme avec un extrait de V myrtillus
preacutevient la manifestation exteacuterieure du vieillissement des deux souches de rats (lrsquoextrait
augmente le poids des souris) Chez les rats OXYS lrsquoextrait de myrtille diminue
- la peroxydation lipidique
- lrsquoactiviteacute SOD dans le cerveau (en jouant un rocircle protecteur vis-agrave-vis du stress
oxydant)
- et le niveau de MDA dans le cerveau
La myrtille preacutevient aussi chez les rats OXYS
- les deacuteficits de meacutemoire et drsquoapprentissage plus efficacement que la vitamine E (autre
antioxydant)
- la deacuteteacuterioration de la fonction mitochondriale (autre cause de seacutenescence acceacuteleacutereacutee)
De plus V myrtillus a la capaciteacute de preacutevenir les mutations induites par les ERO lesquels
srsquoaccumulent avec lrsquoacircge dans la mitochondrie menant agrave un dysfonctionnement
mitochondriale Ce mecircme meacutecanisme pourrait ecirctre impliqueacute dans lrsquoeffet positif exerceacute par la
myrtille sur la meacutemoire des rats OXYS Ainsi la preacutevention des deacuteficits cognitifs
comportementaux avec des antioxydants peuvent montrer le rocircle du stress oxydant dans ces
processus mecircme si drsquoautres meacutecanismes peuvent jouer un rocircle dans cette capaciteacute de
preacutevention des composeacutes
En conclusion Vaccinum myrtillus atteacutenue les deacuteficits cognitifs chez les rats OXYS
apportant la preuve du rocircle theacuterapeutique de cette plante Cependant les meacutecanismes par
lesquels cet antioxydant agit pour exercer une neuroprotection in vivo et le reacuteel impact du
stress oxydant et de ses marqueurs biologiques sur les deacuteficits cognitifs des rats OXYS
doivent encore ecirctre eacutetudieacutes
56
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les dommages induits par les UVB
51 Effets drsquoune exposition solaire
Une exposition prolongeacutee aux ultraviolets (UV) durant le sport ou drsquoautres activiteacutes est un
facteur de risque de plusieurs maladies de la peau comme le cancer cutaneacute La deacutepleacutetion de la
couche drsquoozone protectrice entraicircne une quantiteacute plus importante des rayons UV atteignant la
surface planeacutetaire et exerccedilant des effets neacutefastes Les UVB sont largement absorbeacutes mais
moins peacuteneacutetrants que les UVA atteignant particuliegraverement la couche cellulaire de lrsquoeacutepiderme
basal Les UVB sont plus geacutenotoxiques et environ 1000 fois plus capables de provoquer un
coup de soleil que les UVA Ainsi le coup de soleil lrsquoeacuterythegraveme et lrsquoœdegraveme sont des
manifestations de lrsquoexposition aux UVB Lrsquoabsorption des photons UVB megravenent agrave des
dislocations de lrsquoADN et agrave la formation de photoproduits dimegraveriques de pyrimidine De plus
ils interagissent directement avec les acides amineacutes aromatiques notamment le tryptophane et
la tyrosine (inclus dans les proteacuteines) pouvant alors alteacuterer les fonctions de celles-ci Les UVB
altegraverent indirectement les macromoleacutecules ils geacutenegraverent la production de radicaux libres
comme les espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote induisant lrsquooxydation des proteacuteines
des lipides et de lrsquoADN Ces produits oxydeacutes (hydroperoxydes lipidiques proteacuteines
carbonyles et 8-hydroxydeacuteoxyguanosine) sont impliqueacutes dans le deacutebut des cancers cutaneacutes
Les UVB diminuent aussi les antioxydants de la peau responsable drsquoune baisse de la
protection vis-agrave-vis des radicaux libres Ils participent aux pheacutenomegravenes de processus
inflammatoire de la peau incluant une cascade drsquoeacutevegravenements comme lrsquoinfiltration de
leucocytes sanguins inflammatoires (macrophages et neutrophiles) lrsquoaugmentation de la
production des prostaglandines comme conseacutequence de lrsquoaugmentation de la peroxydation
lipidique la libeacuteration du fateur TNFα (tumour necrosis factor alpha ou facteur de neacutecrose
tumoral) le NFκB (nuclear factor κB ou facteur nucleacuteaire κB) des cytokines pro-
inflammatoires comme les interleukines (IL-1α IL-1β IL-6 IL-8 IL-12) qui en retour
augmentent la production des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote Un deacutefaut de
reacuteparation des leacutesions de lrsquoADN et les effets neacutefastes des UVB du soleil sont agrave lrsquoorigine des
cancers cutaneacutes Crsquoest pourquoi des meacutecanismes de protection de la peau ou une atteacutenuation
de la quantiteacute drsquoUVB atteignant et peacuteneacutetrant la peau peuvent ecirctre des strateacutegies efficaces dans
la preacutevention des dommages occasionneacutes par le soleil (57)
52 Effet de Vaccinium myrtillus sur les radiations solaires
Svobodovaacute et coll (57) Ont eacutetudieacute la capaciteacute des fractions pheacutenoliques des fruits de Lonicera
caerulea L (chegravevrefeuille bleu) et de V myrtillus en preacute et post-traitement sur les dommages
57
oxydants des keacuteratinocytes HaCaT humains induits par un simulateur de radiations solaires
(UVB) Plusieurs paramegravetres sont eacutetudieacutes et seuls les reacutesultats concernant V myrtillus sont
rapporteacutes dans cette thegravese Cette plante a plusieurs effets
- elle augmente le nombre de cellules viables
- diminue significativement la libeacuteration de lactate deacuteshydrogeacutenase de maniegravere dose
deacutependante
- augmente de faccedilon dose-deacutependante la prolifeacuteration cellulaire (prolifeacuteration reacuteduite
par les UVB)
- preacutevient la formation et reacuteduit significativement la cassure simple brin de lrsquoADN
- diminue la caspase-3 (meacutediateur de lrsquoexeacutecution de la mort cellulaire apoptotique)
- diminue la caspase-9 de maniegravere dose-deacutependante (meacutediateurs de lrsquoexeacutecution de la
mort cellulaire apoptotique)
- preacutevient la formation des espegraveces reacuteactives de lrsquooxygegravene et de lrsquoazote avec
eacutelimination excellente en post-traitement
- et diminue de maniegravere dose-deacutependante la production drsquoIL6
Cependant on remarque que cette protection deacutecline leacutegegraverement agrave des concentrations plus
hautes srsquoexpliquant par un effet pro-oxydant des polypheacutenols dans les cellules irradieacutees ougrave la
balance oxydantsantioxydants est deacuteseacutequilibreacutee
En conclusion V myrtillus pourrait ecirctre un bon candidat pour la fabrication de preacuteparations
dermatologiques protectrices agrave large spectre ou dans des preacuteparations apregraves-soleil Pour cela
des eacutetudes futures sont neacutecessaires pour eacutetudier la biodisponibiliteacute des composants exclure
les toxiques eacuteventuels ou les effets photoxiques et confirmer lrsquoeffet photoprotecteur in vivo
6 Effets de Vaccinium myrtillus sur le stress oxydant oculaire
61 La reacutetine quelques geacuteneacuteraliteacutes
Chez lrsquohomme la reacutetine (Figure 17) est une membrane photosensible qui tapisse la face
interne de lrsquoœil elle est constitueacutee de plusieurs types de cellules formant trois couches
superposeacutees qui sont de lrsquoarriegravere vers lrsquoavant de lrsquoœil
- les cellules photoreacuteceptrices constitueacutees de cocircnes et de bacirctonnets
- les cellules bipolaires
- les cellules ganglionnaires
Sa face posteacuterieure est en contact avec la choroiumlde par lrsquointermeacutediaire de lrsquoeacutepitheacutelium
pigmentaire et sa face anteacuterieure avec le corps vitreacute Les cellules de la reacutetine transforment les
58
influx nerveux en impulsions nerveuses qui gagnent les fibres nerveuses du nerf optique
permettant le transport des informations visuelles jusqursquoau cerveau (1)
Figure 17 La reacutetine chez lrsquohomme (77)
La reacutetine est situeacutee dans un environnement tregraves oxygeacuteneacute pouvant subir des dommages induits
par le stress oxydant (les radicaux libres peuvent oxyder les lipides des photoreacutecepteurs) (23)
62 Effets de Vaccinium myrtillus sur les paramegravetres du stress oxydant
oculaire
Dutot et coll (23) ont eacutetudieacute les effets cytoprotecteurs drsquoun extrait en poudre de V myrtillus
(contenant 10 de proanthocyanidols et 10 drsquoanthocyanidines) sur le stress oxydant
appliqueacute aux cellules reacutetiniennes humaines dans un systegraveme in vitro Lrsquoextrait de V myrtillus
est incubeacute (005 et 01) pendant 15 minutes ou 24 heures sur une ligneacutee de cellules de
lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute reacutetinien Puis un stress oxydant induit par le tBHP est appliqueacute
pendant une heure sur ces cellules Les diffeacuterents paramegravetres des dommages du stress oxydant
sont eacutevalueacutes comme les modifications du meacutetabolisme cellulaire la formation des ERO la
formation drsquoO2-et lrsquoapoptose mitochondriale
Les reacutesultats sur ces diffeacuterents paramegravetres sont reacutesumeacutes dans les tableaux II agrave V
Tableau II Effets de V myrtillus sur la baisse du meacutetabolisme cellulaire induite par le tBHP
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
baisse induite par le tBHP Aucun effet cytoprotecteur
Incubation 24 heures Blocage de lrsquoeffet du tBHP sur le meacutetabolisme cellulaire
59
Tableau III Effets de V myrtillus sur la surproduction des ERO induite par le tBHP
Tableau IV Effets de V myrtillus sur la surpoduction O2- induite par le tBHP
Tableau V Effets de V myrtillus sur lrsquoapoptose mitochondriale induite par le tBHP
Une concentration faible drsquoextrait (005) nrsquoa pas drsquoeffet sur une peacuteriode courte drsquoincubation
(15 minutes) par contre crsquoest le cas pour une peacuteriode plus longue (24 heures) cette
concentration est capable drsquoavoir des effets cytoprotecteurs V myrtillus pourrait ecirctre capable
de stimuler les deacutefenses antioxydantes de lrsquoorganisme mais des eacutetudes compleacutementaires sont
neacutecessaires pour confirmer cette hypothegravese
Enfin lrsquoeacutetude a montreacute que lorsque lrsquoextrait diminue le stress oxydant et lrsquoapoptose
mitochondriale elle restaure aussi la viabiliteacute cellulaire Par contre srsquoil nrsquoy a pas drsquoeffet sur le
stress oxydant il nrsquoy en a pas non plus sur la viabiliteacute cellulaire
63 Effets de Vaccinium myrtillus sur les maladies oculaires lieacutes agrave lrsquoacircge
Lors du vieillissement et dans certaines maladies oculaires (comme la deacutegeacuteneacuterescence
maculaire lieacutee agrave lrsquoacircge ougrave le stress oxydant est fortement impliqueacute) des pigments
autofluorescents constitueacutes par des deacutepocircts de lipofuchsine (pigment jaune-brun constitueacutee de
deacutebris moleacuteculaires) peuvent srsquoaccumuler dans les cellules eacutepitheacuteliales du pigment reacutetinien
La lipofuchsine peut absorber la lumiegravere bleue et geacuteneacuterer des photoproduits toxiques
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
surproduction drsquoERO Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution du stress oxydant
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Reacuteduction significative de la
production drsquoO2-
Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Reacuteduction de la production drsquoO2-
01 de Vaccinium myrtillus 005 de Vaccinium myrtillus
Incubation 15 minutes Inhibition significative de
lrsquoapoptose mitochondriale Pas drsquoeffet
Incubation 24 heures Diminution de lrsquoapoptose mitochondriale
60
perturbant le fonctionnement cellulaire crsquoest donc un geacuteneacuterateur de radicaux lieacutes agrave la
lumiegravere Un composant de reacutetinoiumlde majeur de la lipofuchsine est lrsquoA2E (bis reacutetinoiumlde de
pyridinium deacuteriveacute de reacutetinal et de phosphatidyl eacutethanolamine) il contribue agrave
lrsquoautofluorescence de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute agrave lrsquoinhibition de fonctions cellulaires
essentielles au deacuteclenchement de la mort par apoptose des cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmenteacute
et agrave lrsquoabsorption de la lumiegravere bleue aggravant les leacutesions cellulaires (79) A2E lors de
lrsquoirradiation par la lumiegravere bleue subit une photooxydation en geacuteneacuterant de lrsquooxygegravene
singulet celui-ci reacuteagit en retour avec le fluorophore geacuteneacuterant des eacutepoxydes au niveau des
doubles liaisons carbone-carbone Les A2E-eacutepoxydes peuvent alors induire de graves leacutesions
agrave lrsquoADN (une des cibles des eacutevegravenements photodynamiques par interaction lumiegravere bleue-
A2E) pouvant srsquoaccumuler avec lrsquoacircge ougrave un deacuteclin des meacutecanismes de reacuteparation des bases
de lrsquoADN oxydeacutees a eacuteteacute reconnu (56)
Les antioxydants pourraient avoir un rocircle important dans la preacutevention des leacutesions oxydatives
sur les macromoleacutecules comme les bases de lrsquoADN et la deacutegeacuteneacuterescence de la maculaire lieacutee agrave
lrsquoacircge (DMLA) Crsquoest pourquoi Vaccinum myrtillus (par ses proprieacuteteacutes antioxydantes) a fait
lrsquoobjet drsquoeacutetudes montrant sa capaciteacute agrave preacutevenir certaines maladies oculaires causes majeurs
de ceacuteciteacute et de deacuteteacuterioration de lrsquoacuiteacute visuelle chez les personnes acircgeacutees
En 2003 Sparrow et coll (56) ont deacutemontreacute dans une eacutetude in vitro la capaciteacute drsquoun extrait
de V myrtillus agrave inhiber lrsquoeacutepoxydation drsquoA2E par capture de lrsquooxygegravene singulet gracircce agrave sa
richesse en anthocyanosides antioxydants
Dans une eacutetude in vivo utilisant une souche de rats avec seacutenescence acceacuteleacutereacutee (rats OXYS)
Fursova et coll (24) ont deacutemontreacute qursquoune alimentation suppleacutementeacutee agrave long terme avec un
extrait de V myrtillus pouvait ecirctre efficace dans la preacutevention de la DMLA et de la cataracte
seacutenile deux maladies dont les dommages ont eacuteteacute attribueacutees aux radicaux libres
La surreacutegulation des proteacuteines de stress est un moyen de protection contre des conditions
deacuteleacutetegraveres comme le stress oxydant Ainsi Milbury et coll (42) ont deacutemontreacute in vitro la
capaciteacute des anthocyanosides et drsquoautres composeacutes pheacutenoliques de V myrtillus agrave surreacuteguler
les enzymes de deacutefense du stress oxydant comme lrsquohegraveme oxygeacutenase-1 (HO-1) et la glutathion
S-transfeacuterase (GST) dans des cultures de cellules de lrsquoeacutepitheacutelium pigmentaire reacutetinien humain
Agrave cocircteacute du stress oxydant des facteurs vasculaires peuvent ecirctre impliqueacutes dans les maladies
oculaires comme le glaucome la DMLA ou la reacutetinopathie diabeacutetique Comme nous lrsquoavons
vu dans le premier chapitre de cette partie Personn et coll (46) ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoun
extrait de V myrtillus agrave inhiber lrsquoECA cet effet pourrait ecirctre une explication aux effets
observeacutes de la plante sur la vision
61
7 Effets neuroprotecteurs de Vaccinium myrtillus
Un stress oxydant peut laquo srsquoattaquer raquo aux neurotransmetteurs entrainant leur oxydation Ainsi
les neurotransmetteurs comme la dopamine et son meacutetabolite neurotoxique la 6-
hydroxydopamine peuvent subir une oxydation geacuteneacuterant H2O2 et des ERO Dans les neurones
et drsquoautres cellules ce stress oxydant peut ecirctre amplifieacute par le relargage du cytochrome c
(composant essentiel de la chaine respiratoire mitochondriale participant au transfert
drsquoeacutelectrons) localiseacute dans la membrane interne de la mitochondrie dans le cytoplasme ce
relargage induit toute une cascade de reacuteactions aboutissant agrave lrsquoactivation de caspases
(proteacuteines directement lieacutees agrave lrsquoapoptose) pouvant ecirctre fortement preacutejudiciable pour les
meacutetabolites de la dopamine La perte de lrsquointeacutegriteacute mitochondriale observeacutee dans des maladies
neurodeacutegeacuteneacuteratives peut contribuer aussi agrave des niveaux relargueacutes de cytochrome c au-dessus
de la normale (68)
Yao et coll (68) ont montreacute in vitro la capaciteacute drsquoune preacuteparation riche en anthocyanosides
composeacutee de V myrtillus V corymbosum et V oxycoccus L et des anthocyanosides purifieacutes agrave
inhiber lrsquooxydation de la 6-hydoxydopamine augmenteacutee par le cytochrome c Parmi les trois
espegraveces eacutetudieacutees les extraits de V myrtillus apparaissent pour ecirctre plus efficaces dans cette
activiteacute que les deux autres espegraveces ou que les anthocyanosides purifieacutes pouvant srsquoexpliquer
par une plus grande richesse en anthocyanosidesanthocyanidines particuliegraverement la
cyanidine et delphinidine La composition en querceacutetine et agrave moindre degreacute en myriceacutetine
nrsquoont pas de rocircle dans lrsquoactiviteacute antioxydante la preacutesence de querceacutetine est mecircme
inversement correacuteleacutee avec lrsquoeffet antioxydant Lrsquoeffet inhibiteur observeacute est principalement ducirc
agrave lrsquoeffet antioxydant des anthocyanosides
Ainsi les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent la forte activiteacute des anthocyanosides vis-agrave-vis des
reacuteactions neurotoxiques potentielles et suggegraverent lrsquoimportance de mettre au point des eacutetudes in
vivo dans le but de deacutemontrer des effets neuro- et mitochondrio-protecteurs de ces
phytochimiques particuliegraverement dans la maladie de Parkinson et drsquoautres maladies
impliquant un dysfonctionnement mitochondriale
8 Effet de Vaccinium myrtillus sur une ischeacutemie-reperfusion impliquant un
stress oxydant
Une ischeacutemie-reperfusion entraine de nombreuses alteacuterations microvasculaires comme une
augmentation des leucocytes adheacuterant agrave la paroi des vaisseaux veineux une diminution de la
longueur des capillaires perfuseacutes menant agrave une diminution du nombre de capillaires
62
fonctionnels une perte de lrsquointeacutegriteacute endotheacuteliale une augmentation de la permeacuteabiliteacute
capillaire (relargage de proteacuteases comme lrsquoeacutelastase et la collageacutenase avec formation drsquoœdegraveme)
et des modifications du diamegravetre des arteacuterioles (modification de la balance vosodilatation-
vasoconstriction au profit drsquoune vasoconstriction ) Les leucocytes jouent un rocircle fondamental
dans lrsquoischeacutemie-reperfusion en srsquoaccumulant dans les tissus ils provoquent lrsquoocclusion
intravasculaire ainsi que le relargage de cytokines pro-inflammatoires et des meacutetabolites
deacuteriveacutes de lrsquooxygegravene En effet les ERO ont eacuteteacute fortement impliqueacutees dans ces deacutesordres
microcirculatoires elles altegraverent entre autre lrsquointeacutegriteacute de la paroi des vaisseaux et entrainent
une augmentation de la permeacuteabiliteacute en post-capillaire et dans les veines collectrices de
lrsquoabajoue drsquohamster De plus les ERO provenant des leucocytes ou non peuvent induire une
contraction des arteacuterioles (8)
En 1995 Bertuglia et coll (8) ont eacutetudieacute les effets des anthocyanosides de V myrtillus sur
lrsquoischeacutemie-reperfusion provoqueacutee sur lrsquoabajoue drsquohamster entrainant les deacutesordres
microcirculatoires citeacutes preacuteceacutedemment Lrsquoeacutetude montre qursquoune administration orale
drsquoanthocyanosides de V myrtillus suite agrave ces dommages permet une protection de la paroi des
vaisseaux gracircce agrave leur action antioxydante une reacuteduction du nombre de leucocytes adheacuterant agrave
la paroi veineuse (proteacutegeant les tissus de lrsquoischeacutemie-reperfusion et preacutevenant la formation de
meacutediateurs inflammatoires) une diminution de la permeacuteabiliteacute capillaire par son activiteacute anti-
proteacuteasique la plante peut ecirctre eacutegalement un modulateur important du tonus des arteacuterioles en
controcirclant la freacutequence et lrsquoamplitude la vasomotion (modification du calibre vasculaire)
permettant une ameacutelioration de la perfusion capillaire (inhibition de la vasoconstriction par les
ERO)
Cette eacutetude est importante drsquoune part pour montrer le rocircle des radicaux libres deacuteriveacutes de
lrsquooxygegravene dans les deacutesordres microcirculatoires et drsquoautre part pour deacutemontrer les effets
beacuteneacutefiques de V myrtillus agrave restaurer les diffeacuterents paramegravetres notamment par son action
antioxydante
III Effets anticanceacutereux de Vaccinium myrtillus
1 Rocircle des anthocyanosides dans la preacutevention du cancer
Wang et coll (65) ont reporteacute les reacutesultats des eacutetudes qui ont permis de mettre en eacutevidence les
activiteacutes anticarcinogeacuteniques des anthocyanosides et des extraits riches en anthocyanosides
dans des modegraveles de cultures cellulaires in vitro et dans des systegravemes in vivo de modegraveles
tumoraux chez lrsquoanimal Lrsquoactiviteacute antioxydante des anthocyanosides est due agrave leur structure
63
pheacutenolique en donnant un eacutelectron aux radicaux ceux-ci devenant stables (eacutelectrons
apparieacutes) En effet les anthocyanosides sont capables comme nous lrsquoavons vu
preacuteceacutedemment de pieacuteger directement les ERO drsquoaugmenter la valeur ORAC des cellules de
stimuler lrsquoexpression de la phase II de deacutetoxification des enzymes de reacuteduire la formation des
sous-produits de lrsquoADN de diminuer la peroxydation lipidique drsquoinhiber la mutagenegravese
induite par des carcinogegravenes ou des toxines et de reacuteduire la prolifeacuteration cellulaire en
modulant les voies de transduction du signal Ils sont capables eacutegalement de cheacutelater les
meacutetaux et de se lier directement aux proteacuteines Lrsquoactiviteacute antioxydante est principalement due
aux groupes hydroxyles des anthocyanosides en position 3 du cycle C et en position 3rsquo 4rsquo et
5rsquo du cycle B de leur structure de base Enfin il a eacuteteacute montreacute que les aglycones
drsquoanthocyanidines ont une activiteacute antioxydante plus importante que leurs homologues
glycosyleacutes et cette activiteacute diminue quand le nombre de sucres augmente
Mecircme si les eacutetudes expeacuterimentales ont deacutemontreacute lrsquoactiviteacute anticancer des anthocyanosides les
eacutetudes eacutepideacutemiologiques nrsquoont pas montreacute lrsquoactiviteacute protectrice de la consommation
drsquoanthocyanosides vis-agrave-vis du risque de cancer humain et leur activiteacute antioxydante reste
encore questionnable De plus les quantiteacutes drsquoanthocyanosides neacutecessaires pour observer un
effet in vitro sont importantes par rapport aux quantiteacutes retrouveacutees dans le plasma humain in
vivo Crsquoest pourquoi des eacutetudes sont neacutecessaires pour deacutevelopper des solutions qui
permettraient drsquoaugmenter lrsquoabsorption des anthocyanosides etou leurs meacutetabolites
permettant ainsi lrsquoutilisation optimale des anthocyanosides dans la preacutevention de cancer chez
lrsquohomme particuliegraverement dans les tissus autres que le tractus gastro-intestinal et la peau
2 Induction de lrsquoapoptose des cellules canceacutereuses par Vaccinium myrtillus
Katsube et coll (31) ont eacutetudieacute lrsquoactiviteacute anticarcinogeacutenique dans un systegraveme in vitro de dix
baies comestibles et particuliegraverement celle de V myrtillus Lrsquoactiviteacute de la myrtille est testeacutee
sur deux ligneacutees cellulaires diffeacuterentes les cellules leuceacutemiques humaines HL60 et les
cellules carcinomateuses du cocirclon HCT116 Lrsquoeacutetude deacutemontre que lrsquoextrait de V myrtillus est
le plus efficace parmi les dix extraits eacutethanoliques de baies pour inhiber la croissance de ces
ligneacutees cellulaires Toutes les concentrations testeacutees inhibent la croissance des cellules HL60
lors des deux peacuteriodes drsquoincubation (24 et 48 heures) alors que lrsquoinhibition de la croissance
des HCT116 nrsquoest observeacutee que pour des intervalles speacutecifiques de concentrations De plus
lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus induit des niveaux significatifs drsquoapoptose dans les
cellules HL60 mais pas dans les cellules HCT116
64
Ce sont les anthocyanosides qui sont responsables de lrsquoinhibition de la croissance des cellules
canceacutereuses HL60 et HCT116 induisant eacutegalement lrsquoapoptose des cellules HL60
Les anthocyanosides de V myrtillus plus particuliegraverement les glycosides de delphinidine et
malvidine induisent lrsquoinhibition de la croissance des cellules de la leuceacutemie humaine HL60
par induction de lrsquoapoptose et mecircme si lrsquoextrait eacutethanolique de V myrtillus et certains
anthocyanosides inhibent la croissance des cellules carcinomateuses du cocirclon humain
(HCT116) ces cellules sont toutefois moins sensibles agrave lrsquoapoptose que les autres ligneacutees en
se reacutefeacuterant agrave drsquoautres donneacutees on pourrait suggeacuterer un blocage de la voie drsquoinduction de
lrsquoapoptose des cellules HCT116
Lrsquoinhibition de la croissance par les baies nrsquoest toutefois pas speacutecifique aux cellules
canceacutereuses En conclusion une consommation reacuteguliegravere de baies pourrait maintenir des
niveaux drsquoanthocyanosides dans le plasma Ces baies sont des aliments fonctionnels
prometteurs dans la preacutevention du risque de cancer gracircce agrave leurs effets multiples comme
lrsquoinduction de lrsquoapoptose lrsquoactiviteacute antioxydante et drsquoautres effets anticanceacutereux
En 2004 Zhao et coll (69) ont eacutetudieacute les effets de trois extraits riches en anthocyanosides
Vitis vinifera (Vigne rouge) V myrtillus L et Aronia melanocarpa E (Aronie noire) sur les
cellules canceacutereuses du cocirclon HT-29 et les cellules non tumorigeacuteniques du cocirclon NCM460
Lrsquoeacutetude deacutemontre lrsquoinhibition de la croissance des cellules HT-29 par V myrtillus agrave faibles
concentrations tandis que lrsquoeffet est pauvre sur les cellules NCM460 Cependant une peacuteriode
longue drsquoincubation (72 heures) montre un effet de la myrtille sur la croissance des cellules
NCM460 V myrtillus a une activiteacute importante peut-ecirctre gracircce agrave la cyanidine reporteacutee pour
ecirctre un inhibiteur efficace de la croissance des cellules canceacutereuses coloniques
Dans cette eacutetude la croissance des cellules du colon est inhibeacutee alors que les conditions de pH
et de tempeacuterature ne sont pas optimum pour la stabiliteacute des anthocyanosides Les formes
actives responsables des effets observeacutes pourraient ecirctre dues aux produits de deacutegradation des
anthocyanosides
En conclusion cette eacutetude deacutemontre que des extraits riches en anthocyanosides et notamment
V myrtillus sont capables drsquoinhiber la croissance des cellules canceacutereuses du colon HT-29 agrave
plus basse concentration et agrave des peacuteriodes drsquoincubation plus courtes que la croissance des
cellules non tumorigeacuteniques NCM460 du colon Il reste toutefois agrave deacuteterminer quels sont les
composeacutes des extraits veacuteritablement responsables des effets observeacutes
65
3 Action de Vaccinium myrtillus sur un modegravele geacuteneacutetique de polypose
adeacutenomateuse familiale humaine
En 2006 Cooke et coll (18) ont eacutetudieacute les effets drsquoun meacutelange drsquoanthocyanosides de V
myrtillus (Mirtoselectreg) et de cyanidine-3-glucoside ou C3G (anthocyanoside le plus
abondant de lrsquoalimentation) sur le deacuteveloppement drsquoadeacutenome intestinal sur souris ApcMin
alimenteacutees pendant 12 semaines avec ces extraits Les souris ApcMin
constituent un modegravele
geacuteneacutetique de polypose adeacutenomateuse familiale humaine Cette maladie autosomique
dominante de lrsquohomme est caracteacuteriseacutee par le deacuteveloppement spontaneacute drsquoune centaine de
polypes colorectaux pouvant se transformer en carcinomes
Les reacutesultats de lrsquoeacutetude montrent que les deux extraits utiliseacutes diminuent le nombre
drsquoadeacutenomes drsquoune maniegravere dose-deacutependante (agrave la plus haute concentration lrsquoinhibition la plus
importante est observeacutee pour la cyanidine-3-glucoside) Les anthocyanosides sont retrouveacutes
dans le plasma agrave la limite de la deacutetection analytique et sont retrouveacutes agrave des niveaux
quantifiables dans lrsquointestin et lrsquourine Les principales formes preacutesentes dans lrsquointestin et
lrsquourine sont des anthocyanosides glucuronides et des meacutetabolites meacutethyleacutes Enfin les
anthocyanosides sont retrouveacutes dans drsquoautres tissus que lrsquointestin
En conclusion la dose eacutequivalente de Mirtoselectreg
chez lrsquohumain est contenue dans environ
740 grammes de baies de V myrtillus suggeacuterant que la dose efficace de lrsquoextrait chez la
souris ApcMin
pourrait ecirctre traduite en une dose importante (mais non impossible) chez
lrsquohumain De plus les glycosides de malvidine sont les anthocyanosides laquo survivants raquo les
mieux sous forme inchangeacutee dans lrsquointestin leur structure eacutetant moins apte agrave subir les
reacuteactions de conjugaison que celle drsquoautres anthocyanosides Lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides
in vivo pourrait ecirctre due au moins en partie agrave leur hydrolyse en anthocyanidines La preacutesence
transitoire des anthocyanidines apregraves hydrolyse de leurs preacutecurseurs glycosyleacutes et leur
transformation par conjugaison meacutetabolique pourraient expliquer lrsquoefficaciteacute de C3G ou du
Mirtoselectreg Le niveau drsquoanthocyanosides agrave la dose efficace chez la souris Apc
Min est bas
dans la circulation systeacutemique mais deacutetectable et mesurable dans le tractus gastro-intestinal et
lrsquourine
Ainsi lrsquoabsence drsquoeffets indeacutesirables des anthocyanosides et leur efficaciteacute dans la reacuteduction
du deacuteveloppement de lrsquoadeacutenome en font de bons candidats pour le deacuteveloppement clinique
66
4 Action de Vaccinium myrtillus sur les reacutecepteurs tyrosine-kinases
41 Reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase quelques geacuteneacuteraliteacutes
Les reacutecepteurs agrave lrsquoactiviteacute tyrosine kinase sont des moleacutecules transmembranaires constitueacutees
drsquoun site reacutecepteur sur lequel se lie un ligand (localiseacute sur la face extracellulaire) et un site
tyrosine kinase (sur la face interne) Ces reacutecepteurs ont en plus un site de phosphorylation Le
site tyrosine kinase (constituant une famille drsquoenzymes) est normalement inactif mais peut
srsquoactiver par phosphorylation de la tyrosine Le meacutecanisme drsquoactivation du site tyrosine
kinase ne se fait pas par passage drsquoinformations depuis le site de reconnaissance du ligand
jusqursquoagrave lrsquointeacuterieur de la cellule mais par la liaison du ligand sur deux reacutecepteurs pouvant se
rapprocher et se phosphoryler mutuellement Les reacutecepteurs agrave activiteacute tyrosine kinase jouent
un rocircle crucial dans la carcinogenegravese et la progression tumorale Des exemples importants de
reacutecepteurs agrave tyrosine kinase comportent la famille ErbB incluant le facteur de croissance
eacutepidermique (EGFR ErbB1) et les reacutecepteurs ErbB2-4 lrsquoIGFR1 (insulin-like growth factor
receptor 1) et les VEGFR-2 et VEGFR-3 (vascular endothelial growth factor receptors) ErbB
et IGF sont des reacutecepteurs agrave tyrosine kinase surexprimeacutes dans certains types tumoraux
reacutesultant dans des modifications de la signalisation cellulaire impliqueacutees dans la croissance
cellulaire et la diffeacuterentiation Les reacutecepteurs VEGF sont des modulateurs de lrsquoangiogenegravese et
de la lymphangiogenegravese Crsquoest pourquoi lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs agrave tyrosine
kinase peut ecirctre une theacuterapeutique inteacuteressante (84)
42 Eacutetude de Teller et coll (2009)
Teller et coll (60) ont eacutetudieacute les effets de deux extraits standardiseacutes Mirtocyanreg
(extrait de V
myrtillus et Oenocyaninreg
(extrait de raisins) sur lrsquoactiviteacute des reacutecepteurs tyrosine kinases
(RTKs) Seuls les reacutesultats concernant V myrtillus seront rapporteacutes dans cette thegravese
Lrsquoinhibition des RTK est eacutevalueacutee en utilisant une activiteacute kinase recombinante dans un
systegraveme de cellules libres et en deacuteterminant lrsquoautophosphorylation induit par le ligand dans
des cellules carcinomateuses de la vulve E431 et dans des cellules endotheacuteliales aortiques
porcines exprimant soit VEGFR-2 soit VEGFR-3 La capaciteacute des extraits riches en
anthocyanosides agrave modifier lrsquoactiviteacute des RTK est compareacutee agrave leur capaciteacute agrave moduler la
croissance des cellules
Les deux extraits inhibent lrsquoactiviteacute drsquoune varieacuteteacute de RTKs dans le systegraveme de cellules libres
(activiteacute kinase des domaines kinases recombinants) et dans les cellules vivantes (reacutecepteur
intact autophosphorylation induite par ligand) Par contre lrsquoautophosphorylation du reacutecepteur
des cellules intactes neacutecessitent des concentrations 10 agrave 50 fois plus hautes que celles
67
neacutecessaires pour lrsquoinhibition de lrsquoactiviteacute kinase recombinante dans le systegraveme de cellules
libres Cette diffeacuterence pourrait srsquoexpliquer par un accegraves pauvre des glycosides aux domaines
kinases recombinants
De plus les deux extraits inhibent davantage les kinases associeacutees avec EGFR et le VEGFR-2
que les kinases associeacutees avec ErbB-2 VEGFR-3 et IGF1R De plus les extraits preacutesentent
peu de speacutecificiteacute entre les membres des reacutecepteurs de la famille ErbB Mecircme si les extraits
riches en anthocyanosides inhibent lrsquoactiviteacute des RTKs peu drsquoeffets ont eacuteteacute montreacutes sur la
croissance des cellules Ceci pourrait ecirctre ducirc soit agrave la faible stabiliteacute des anthocyanosides dans
le milieu de culture soit agrave la preacutesence drsquoautres voies moleacuteculaires que les RTKs ces voies ne
seraient pas affecteacutees par les extraits riches en anthocyanosides et auraient la capaciteacute de
promouvoir la croissance et la survie cellulaire elles pourraient ainsi compenser lrsquoinhibition
des RTKs
Lrsquoeffet inhibiteur de lrsquoactiviteacute des RTKs nrsquoest pas ducirc aux composants individuels des
extraits en effet V myrtillus contient un ensemble de composeacutes polypheacutenoliques ainsi que
des constituants inconnus Les cateacutechines flavonols et procyanidines preacutesents dans les
extraits en quantiteacutes plus basses que les anthocyanosides ont montreacute dans drsquoautres eacutetudes des
effets inhibiteurs des RTKs Mais la basse biodisponibiliteacute de ces extraits doit ecirctre prise en
compte pour lrsquoeacutevaluation de leurs effets physiologiques
IV Action de Vaccinium myrtillus sur la vision
Les extraits de V myrtillus ont eacuteteacute utiliseacutes depuis 1964 dans les affections ophtalmiques et
dans les deacutesordres de la microcirculation Des eacutetudes anciennes ont rapporteacute les effets de
preacuteparations agrave base du fruit de V myrtillus dans lrsquoacuiteacute visuelle en lumiegravere sombre dans la
vision nocturne chez les sujets ne preacutesentant pas de troubles de la vision chez les patients
avec un problegraveme significatif de vision en lumiegravere vive les patients atteints de DMLA de
reacutetinopathie diabeacutetique drsquoinflammation reacutetinienne de reacutetinite pigmentaire (V myrtillus
associeacute au β-carotegravene) et enfin chez les patients avec myopie progressive Drsquoautres eacutetudes ont
rechercheacute les effets de V myrtillus sur la formation de la cataracte chez des patients souffrant
de cataracte corticale seacutenile (extrait pris en association avec la vitamine E) Cependant
lrsquohypothegravese drsquoun effet de V myrtillus sur la vision est tregraves controverseacutee certaines eacutetudes
rapportent des reacutesultats neacutegatifs (35)
Durant la seconde guerre mondiale les pilotes de la British Royal Air force avaient deacutejagrave
rapporteacute une ameacutelioration de lrsquoacuiteacute visuelle apregraves consommation de confitures de myrtilles
68
Cependant durant cette mecircme peacuteriode la technologie du radar a eacuteteacute introduite en Grande-
Bretagne pour la deacutefense aeacuterienne et des eacutetudes ulteacuterieures nrsquoont pas supporteacute lrsquohypothegravese
drsquoune ameacutelioration de la vision nocturne et de la sensibiliteacute au contraste nocturne par la
suppleacutementation en V myrtillus Le systegraveme de radar et non V myrtillus pourrait alors ecirctre la
cause du succegraves de la Royal Air Force (66)
1 Eacutetude chez des sujets agrave vision normale
Des eacutetudes ont deacutemontreacute la capaciteacute drsquoextraits de Vaccinum myrtillus seuls ou associeacutes agrave du
β-carotegravene et de la vitamine E (chez des patients avec ou sans deacutesordre oculaire) agrave ameacuteliorer
la vision nocturne agrave induire une adaptation agrave lrsquoobscuriteacute et une restauration de lrsquoacuiteacute
visuelle (suite agrave une exposition agrave une lumiegravere vive ou un flash) plus rapides (42) Drsquoautres
eacutetudes ont montreacute lrsquoefficaciteacute des extraits anthocyanosidiques de myrtille agrave ameacuteliorer la vision
nocturne et lrsquoajustement agrave lrsquoobscuriteacute chez des controcircleurs aeacuteriens des pilotes drsquoavion des
conducteurs de voiture et de camion (43)
Agrave lrsquoopposeacute drsquoautres eacutetudes ne precirctent pas agrave la myrtille des proprieacuteteacutes sur la vision Crsquoest le
cas notamment de lrsquoeacutetude en 2000 de Muth et coll (46) ils ont rechercheacute les effets de V
myrtillus sur lrsquoacuiteacute visuelle nocturne et la sensibiliteacute au contraste nocturne Leur eacutetude est
randomiseacutee double-aveugle et controcircleacutee par placebo Les sujets inclus dans lrsquoeacutetude sont des
hommes jeunes preacutesentant une bonne vision Un groupe reccediloit 160 mg drsquoextrait de V
myrtillus et lrsquoautre groupe un placebo trois fois par jour pendant 21 jours Apregraves un mois
sans traitement le test reprend pendant 3 semaines en inversant les groupes (les sujets ayant
eu le placebo ont maintenant les capsules de V myrtillus et vice versa) Les reacutesultats montrent
qursquoil nrsquoy a pas de diffeacuterences entre les mesures de la moyenne de lrsquoacuiteacute visuelle nocturne
chez les sujets soumis au traitement par V myrtillus et ceux soumis au placebo De mecircme
lrsquoexamen de la derniegravere acuiteacute visuelle durant le traitement actif et celui durant le placebo ne
reacutevegravelent pas de diffeacuterences dans lrsquoacuiteacute visuelle nocturne Le mecircme reacutesultat neacutegatif est
constateacute pour la sensibiliteacute au contraste nocturne
En conclusion cette eacutetude nrsquoapporte pas de reacutesultats positifs sur lrsquoeffet de V myrtillus sur les
deux paramegravetres mesureacutes mecircme si lrsquoextrait est pris agrave haute dose et pendant une dureacutee
significative
Une critique de lrsquoeacutetude de Muth et coll (46) pourrait ecirctre faite sur la population limiteacutee
utiliseacutee peu de sujets ont eacuteteacute inclus dans lrsquoeacutetude et ceux-ci eacutetaient tous des hommes jeunes
avec une bonne vision Il est vrai que deux de ces sujets avaient une moyenne drsquoacuiteacute
69
visuelle nocturne et une sensibiliteacute au contraste nocturne en dessous des autres sujets or
mecircme chez ces sujets aucune diffeacuterence de mesure nrsquoa eacuteteacute enregistreacutee
Cette eacutetude pose de nouveau des doutes sur lrsquoutilisation de la myrtille dans des formes
couramment disponibles et aux doses recommandeacutees comme suppleacutementation efficace pour
lrsquoameacutelioration de la vision nocturne dans une cateacutegorie de sujets preacutesentant une bonne vision
et essentiellement une vision nocturne normale
2 Eacutetude chez des sujets myopes
Une eacutetude a montreacute qursquoune association drsquoanthocyanosides de V myrtillus avec vitamine E et
β-carotegravene ameacuteliorait le champ visuel de patients atteints de myopie aussi bien lors drsquoun
traitement court que long De mecircme il a eacuteteacute deacutemontreacute une efficaciteacute de lrsquoassociation
drsquoanthocyanosides de myrtille avec le reacutetinol sur la sensibiliteacute de la reacutetine de patients myopes
dans 32 des 42 yeux examineacutes (43)
En 2005 Lee et coll (35) ont mis au point une eacutetude randomiseacutee double-aveugle controcircleacutee
par placebo impliquant 60 sujets avec astheacutenopie et myopie basse agrave modeacutereacutee avec erreurs
reacutefractaires entre -1 et -8 dioptres au niveau des deux yeux Lrsquoobjectif de lrsquoeacutetude est de
deacuteterminer lrsquoeffet de lrsquoadministration drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides purifieacutes agrave hautes doses
de V myrtillus sur la fonction visuelle nocturne et les symptocircmes cliniques chez ces sujets de
mecircme acircge et de sensibiliteacute au contraste similaire Ainsi 30 sujets ont reccedilu des comprimeacutes de
100 mg de traitement contenant 85 drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides et les 30 autres sujets
des comprimeacutes placebo deux fois par jours pendant 4 semaines La fonction visuelle nocturne
est eacutevalueacutee par le test de sensibiliteacute au contraste (test objectif) et les symptocircmes cliniques par
un questionnaire rempli par les sujets (test subjectif) avant et apregraves le traitement Ainsi les
reacutesultats baseacutes sur lrsquoanalyse du questionnaire montrent qursquoagrave la suite des 4 semaines de
traitement les sujets traiteacutes par anthocyanosides ont preacutesenteacute une ameacutelioration des symptocircmes
(meilleurs que le groupe placebo) De plus le groupe anthocyanoside a montreacute une sensibiliteacute
au contraste ameacutelioreacutee agrave chaque cycle par degreacute alors qursquoaucune ameacutelioration nrsquoa eacuteteacute
constateacutee dans le groupe placebo
Des eacutetudes anciennes ont reporteacutes une ameacutelioration de la fonction visuelle nocturne chez des
sujets normaux prenant des anthocyanosides alors que des eacutetudes plus reacutecentes nrsquoont montreacute
aucun effet sur la vision nocturne par administration orale simple ou multiple drsquooligomegraveres
drsquoanthocyanosides (35) Ces discordances de reacutesultats pourraient ecirctre causeacutees par des
diffeacuterences dans le choix des sujets les meacutethodes drsquoeacutevaluation de la vision nocturne ainsi que
la concentration et la dose drsquooligomegraveres drsquoanthocyanosides utiliseacutees Alors que des eacutetudes ne
70
montrent pas drsquoeffets des oligomegraveres drsquoanthocyanosides chez les sujets normaux drsquoautres
eacutetudes deacutemontrent lrsquoefficaciteacute de ceux-ci chez les sujets avec myopie ou heacutemeacuteralopie
(diminution anormale de la vision dans lrsquoobscuriteacute)
Dans lrsquoeacutetude de Lee et coll (35) les conditions sont diffeacuterentes de celles que lrsquoon peut trouver
dans drsquoautres eacutetudes qui ont pu ecirctre faites en termes de dose de dureacutee et de type de sujets En
effet une haute dose drsquooligomegraveres anthocyanosides (concentreacutes agrave 85 gracircce au processus de
fermentation speacutecifique) est administreacutee pendant une plus longue peacuteriode compareacutee aux autres
eacutetudes De plus les sujets utiliseacutes englobent des personnes avec myopie astheacutenopie et une
sensitiviteacute au contraste meacutesopique diminueacutee alors que drsquoautres eacutetudes utilisent des sujets
normaux
En conclusion cette eacutetude montre que les anthocyanosides peuvent ameacuteliorer les symptocircmes
subjectifs et les reacutesultats de la moyenne de la sensibiliteacute au contraste chez des sujets
preacutesentant myopie et astheacutenopie Mais drsquoautres eacutetudes sont neacutecessaires pour rechercher la
dose optimale de V myrtillus la dureacutee de traitement neacutecessaire la dureacutee de lrsquoeffet apregraves
lrsquoarrecirct du traitement et lrsquoapplication de ce traitement en clinique chez des patients avec des
maladies oculaires comme la reacutetinite pigmentaire le glaucome et la reacutetinopathie diabeacutetique
connus pour reacuteduire la vision nocturne
3 Meacuteta-analyse de Canter et coll (2004)
Canter et coll (13) ont proceacutedeacute agrave une meacuteta-analyse des eacutetudes faites concernant lrsquoeffet des
anthocyanosides de V myrtillus sur la vision nocturne
Des 30 eacutetudes trouveacutees par les auteurs avec des reacutesultats se reacutefeacuterant agrave la vision dans des
conditions de lumiegravere reacuteduites 12 eacutetudes sont des eacutetudes controcircleacutees par placebo Les 4 eacutetudes
les plus reacutecentes sont des eacutetudes controcircleacutees randomiseacutees et rapportent des reacutesultats neacutegatifs
La 5egraveme
eacutetude controcircleacutee randomiseacutee et les 7 eacutetudes controcircleacutees non randomiseacutees rapportent des
reacutesultats positifs dans lrsquoameacutelioration de la vision en lumiegravere reacuteduite Les reacutesultats neacutegatifs sont
associeacutes avec une plus grande rigueur dans la meacutethodologie mais aussi des doses plus basses
et des extraits provenant de sources geacuteographiques distincts pouvant diffeacuterer dans la
composition en anthocyanosides De plus dans 11 des 12 eacutetudes les sujets utiliseacutes sont des
sujets en bonne santeacute avec une vision moyenne normale voire au-dessus de la normale Ainsi
les eacutetudes cliniques les plus rigoureuses ne supportent pas lrsquohypothegravese drsquoune ameacutelioration de
la vision nocturne chez les sujets en bonne santeacute par les anthocyanosides de V myrtillus
Cependant lrsquoassociation entre rigueur meacutethodologique publication reacutecente reacutesultat neacutegatif
est confondu avec plusieurs facteurs de confusion qui peuvent biaiser les eacutetudes comme la
71
dose les diffeacuterentes variations geacuteographiques modifiant la composition des extraits et le type
de sujets inclus dans les eacutetudes De plus les meacutethodes mises en place pour obtenir et
interpreacuteter les eacutelectroreacutetinogrammes employeacutees dans les eacutetudes plus anciennes diffegraverent des
proceacutedures standardiseacutees utiliseacutees maintenant
Lorsque lrsquoanalyse des facteurs de confusion est faite une association entre les reacutesultats
positifs et lrsquoutilisation de plus hautes doses en anthocyanosides de V myrtillus est mise en
eacutevidence De plus la composition phytochimique des extraits diffegraverent selon la geacuteographie
des plantes de Myrtillier Les reacutesultats positifs sont souvent associeacutes avec des eacutetudes utilisant
des extraits provenant drsquoItalie ou de France La quantiteacute des anthocyanosides de la myrtille
(constituants les plus actifs) varient en fonction du cycle de vie des plantes en reacuteponse agrave des
facteurs de stress et des signaux de lrsquoenvironnement Ainsi avec le mucircrissement la quantiteacute
des anthocyanosides augmente alors que celle des proanthocyanidines diminue Crsquoest
pourquoi agrave cause des diffeacuterences geacuteographiques une standardisation drsquoune quantiteacute en
pourcentage fixe drsquoextrait est une proceacutedure insuffisante pour garantir une composition
identique et une activiteacute pharmacologique Lors des eacutetudes drsquoautres composants peuvent ecirctre
ajouteacutes avec les anthocyanosides de mytille comme le β-carotegravene (un deacuteficit est connu pour
ecirctre lieacute agrave une alteacuteration de la vision nocturne) Lrsquoeffet confondant du β-carotegravene dans
certaines eacutetudes ne peut ecirctre correctement eacutevalueacute sans connaitre le statut nutritionnel des
sujets Dans cette meacuteta-analyse 5 eacutetudes utilisent dans le traitement actif du β-carotegravene Une
eacutetude ne montre pas de diffeacuterences dans lrsquointerpreacutetation de lrsquoeacutelectroreacutetinogramme des sujets
traiteacutes avec lrsquoextrait de V myrtillus avec ou sans β-carotegravene et 3 eacutetudes reacutealiseacutees dans les
anneacutees 1940 montrent que le β-carotegravene nrsquoa pas drsquoeffet sur lrsquoadaptation nocturne quand il est
administreacute seul
En conclusion des eacutetudes rigoureuses sur les effets des extraits de V myrtillus vis-agrave-vis de
sujets souffrant drsquoune alteacuteration de la vision nocturne due agrave des conditions pathologiques
oculaires sont neacutecessaires Cependant la preacutesence drsquoeacutetude plus faibles dans la meacutethodologie
le teacutemoignage des eacutetudes animales les eacutetudes des anthocyanosides syntheacutetiques (la cyanidine
syntheacutetique utiliseacutee dans des eacutetudes controcircleacutees par placebo dans les anneacutees 1970 et 1980 a
montreacute une ameacutelioration de la vision nocturne chez des sujets en bonne santeacute et souffrant
drsquoune varieacuteteacute de deacutesordres ophtalmologiques) une eacutetude controcircleacutee randomiseacutee de Ribes
nigrum montrant un effet positif sur le seuil drsquoadaptation nocturne pourraient justifier des
eacutetudes compleacutementaires sur les anthocyanosides de myrtille chez des sujets preacutesentant une
alteacuteration de la vision nocturne
72
4 Eacutetude de Vaccinium myrtillus sur la reacutetinopathie diabeacutetique
La reacutetinopathie diabeacutetique est une complication agrave long terme du diabegravete qui se traduit par une
deacutegeacuteneacuterescence des capillaires irrigant la reacutetine La maladie se manifeste par des
microaneacutevrysmes qui sont de petites dilatations de la paroi des capillaires (preacutesence de petits
points rouges drsquoheacutemorragies et drsquoapparition drsquoexsudatshellip) Dans des formes eacutevolueacutees une
baisse de la vision peut survenir (1) La neacuteovascularisation est la principale modification
rencontreacutee dans la reacutetinopathie diabeacutetique reacutesultant drsquoune interaction avec des cytokines et
des facteurs de croissance pouvant ecirctre responsables de lrsquoangiogenegravese comme dans le cancer
Or VEGF joue un rocircle dans la neacuteovascularisation reacutetinienne mecircme si son rocircle exact dans la
survenue preacutecoce de la pathologie nrsquoest pas encore entiegraverement compris (16)
En 2005 une eacutetude meneacutee par Chung et coll (16) a deacutemontreacute la capaciteacute de Vaccinium
myrtilus a diminueacute le glucose sanguin plasmatique et agrave reacuteduire le pourcentage de surface de
vascularisation reacutetinien chez des rats diabeacutetiques compliqueacute drsquoune reacutetinopathie diabeacutetique
ces pathologies eacutetant induites par la streptozocine Cependant pas drsquoeffet est constateacute sur le
VEGF (16)
Une eacutetude clinique a deacutemontreacute lrsquoefficaciteacute des anthocyanosides de V myrtillus (administration
orale de 480 mgjour pendant 180 jours) sur les manifestations de la reacutetinopathie diabeacutetique
notamment la reacuteduction voire la disparition des heacutemorragies reacutetiniennes chez des patients
diabeacutetiques (diabegravete type 2) et souffrant drsquoune reacutetinopathie non prolifeacuterative (43)
Lrsquoameacutelioration significative des examens ophtalmoscopiques et angiographiques apregraves
traitement avec 320 mg de Myrtocyanreg
pendant 30 jours a eacuteteacute montreacutee chez 77 agrave 92 des 40
patients inclus dans lrsquoeacutetude et souffrant de diabegravete et de reacutetinopathie hypertensive (43)
5 Effets de Vaccinium myrtillus sur les cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes
Lrsquoeacutepitheacutelium de la surface oculaire joue le rocircle fondamental de barriegravere empecircchant lrsquoentreacutee de
substances nocives dans la corneacutee et maintenant lrsquointeacutegriteacute de la surface oculaire La
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteennes permet la reacutegeacuteneacuteration du tissu pour
maintenir le rocircle protecteur de la corneacutee et la cicatrisation Crsquoest pourquoi le cycle cellulaire
est tregraves important Au niveau de ces cellules des glycosaminoglycanes (GAGs glucides de
lrsquoorganisme localiseacutes dans le mucus les seacutecreacutetions digestives et le tissu conjonctif) sulfateacutes
sont produits par les trois types de cellules de la corneacutee (cellules eacutepitheacuteliales endotheacuteliales et
les fibroblastes) Les GAGs de lrsquoeacutepitheacutelium corneacuteen peuvent moduler le comportement
cellulaire comme lrsquoadheacutesion la migrationhellip et jouent donc un rocircle important pour la
73
cicatrisation corneacuteenne Lrsquoun des GAGs est lrsquoacide hyaluronique substance de la matrice
extra-cellulaire jouant plusieurs rocircles notamment dans la lubrification lrsquohydratation de la
matrice corneacuteenne et lrsquohomeacuteostasie Il pourrait aussi ameacuteliorer la santeacute de la surface oculaire
et reacuteduire la pression intraoculaire lors de la pose chirurgicale drsquoun implant oculaire (55)
Song et coll (55) ont reacutecemment eacutetudieacute les effets drsquoun extrait de V myrtillus sur le cycle la
croissance cellulaire lrsquoexpression des GAGs et de lrsquoacide hyaluronique dans un modegravele in
vitro de cellules eacutepitheacuteliales limbales corneacuteennes humaines Les reacutesultats deacutemontrent
lrsquoefficaciteacute de lrsquoextrait de myrtille et ses anthocyanosides agrave promouvoir la division et la
prolifeacuteration des cellules eacutepitheacuteliales corneacuteenne sans aucune toxiciteacute cellulaire et agrave
augmenter la quantiteacute totale de GAGs sans modifications significatives de lrsquoacide
hyaluronique Lrsquoextrait de myrtille peut alors ecirctre beacuteneacutefique pour la reacutegeacuteneacuteration
physiologique et lrsquohomeacuteostasie
V Action de Vaccinium myrtillus sur le diabegravete
Helmstaumldter (26) a reacutepertorieacute les substances antidiabeacutetiques utiliseacutees avant la deacutecouverte de
lrsquoinsuline Parmi toutes les plantes V myrtillus est celle la plus freacutequemment retrouveacutee dans
les preacuteparations antidiabeacutetiques commerciales au XXegraveme
siegravecle Les feuilles pourraient ecirctre la
partie de plante la plus utiliseacutee Une preacuteparation tregraves commune eacutetait le laquo Pilulae Myrtilli
Jasper raquo (1912) chacun contenant 012 grammes drsquoextraits de feuilles mais cette preacuteparation
nrsquoeacutetait mentionneacutee qursquooccasionnellement dans les traiteacutes scientifiques et seulement quelques
recherches ont eacuteteacute retrouveacutees
1 Action sur le glucose du seacuterum et la fructosamine
Petlevski et coll (48) ont eacutetudieacute les effets drsquoune preacuteparation agrave base de plantes antidiabeacutetiques
comprenant la feuille de V myrtillus et drsquoautres plantes breveteacutee sous le numeacutero No P-
9801091 disponible sur le marcheacute Croate Deux extraits un extrait eacutethanolique (extrait 1) et
non eacutethanolique (extrait 2) sont administreacutes agrave des souris (NOD) non obegraveses rendues
diabeacutetiques par lrsquoalloxane (deacuteriveacute pyrimidique produisant chez lrsquoanimal une neacutecrose des
cellules β des icirclots de Langerhans)
Lrsquoeacutetude deacutemontre que les extraits 1 et 2 diminuent le glucose sanguin de 10 et 20
respectivement de la valeur initiale des souris NOD controcircles (sans traitement) Lrsquoeffet de
lrsquoextrait 2 est donc beaucoup plus marqueacute il est compareacute agrave un antidiabeacutetique de reacutefeacuterence
(acarbose) Les reacutesultats montrent que lrsquoextrait diminue significativement le niveau de glucose
74
sanguin alors que la diminution par lrsquoacarbose nrsquoest pas significative La mecircme chose est
observeacutee pour le niveau de fructosamine dans le sang
2 Action sur le meacutetabolisme lipidique de rats diabeacutetiques
Le diabegravete est une maladie souvent associeacutee agrave des deacutesordres meacutetaboliques comme une
hypertriglyceacuterideacutemie Lrsquoinsuline joue un rocircle essentiel dans le meacutetabolisme des lipoproteacuteines
Chez la plupart des patients atteints de diabegravete type 1 (insulino-deacutependant)
lrsquohypertriglyceacuterideacutemie est induit par une moindre activiteacute de la lipase lipoproteacuteique (enzyme
permettant lrsquohydrolyse des triglyceacuterides des lipoproteacuteines plasmatiques) deacutependante de
lrsquoinsuline
Une eacutetude meneacutee en 1996 par Cignarella et coll (17) a montreacute que lrsquoadministration orale
(pendant 4 jours) drsquoun extrait hydro-alcoolique seacutecheacute de feuilles de V myrtillus agrave des rats
rendus diabeacutetiques par streptozocine pouvait diminuer le niveau de glucose plasmatique par
environ 26 et le niveau de triglyceacuterides plasmatiques par 39 Ainsi lrsquoextrait de myrtille
expose une activiteacute hypolipideacutemiante dose-deacutependante chez les rats en stimulant le
catabolisme des lipoproteacuteines riches en triglyceacuterides probablement sous des conditions en
deacuteficits drsquoinsuline Par contre agrave lrsquoopposeacute du ciprofibrate (une moleacutecule de reacutefeacuterence dans le
traitement de lrsquohypertriglyceacuterideacutemie) lrsquoextrait de V myrtillus ne preacutevient pas la formation de
thrombus veineux chez ces rats diabeacutetiques
Ces eacutetudes in vivo ont montreacute lrsquoaction hypoglyceacutemiante de V myrtillus une fois les
constituants isoleacutes cette plante agrave usage traditionnel pourrait eacutegalement attirer lrsquoattention sur le
traitement de certains deacutesordres du meacutetabolisme lipidique
VI Action de Vaccinium myrtillus sur lrsquoestomac
1 Action sur lrsquoulcegravere gastrique
Borrelli et coll (10) ont listeacute les agents phytogeacuteniques utiliseacutes comme remegravedes des ulcegraveres
gastriques Des reacutesultats ont deacutemontreacute lrsquoaction significative de V myrtillus dans la preacutevention
et le traitement des ulcegraveres Certaines eacutetudes ont montreacute ses effets protecteurs dans des ulcegraveres
induits par ligature du pylore par la reacuteserpine ou la pheacutenylbutazone ougrave le traitement avec les
anthocyanosides de V myrtillus a eacuteteacute donneacute avant ou pendant la formation de lrsquoulcegravere La
myrtille exerce un effet anti-ulcegravere en partie par une augmentation du mucus dans la paroi de
lrsquoestomac (ameacuteliorant lrsquoefficaciteacute de la barriegravere formeacutee par ce mucus) et peut influencer la
biosynthegravese des mucopolysaccharides
75
Magistretti et coll (37) montrent qursquoun extrait drsquoanthocyanosides de Vaccinium myrtillus
possegravede une action anti-ulcegravere inteacuteressante dans divers modegraveles expeacuterimentaux De ces
reacutesultats les auteurs ont voulu trouver les composants de Vaccinium myrtillus responsables de
cette action Or cette plante comme nous le savons est riche en anthocyanosides et
anthocyanidines (aglycones respectifs) Cela explique pourquoi les auteurs ont eacutetudieacute les
effets sur lrsquoulcegravere aigu et chronique chez des rats drsquoune anthocyanidine la cyanidine ou 3 5
7-trihydroxy-2-(34-dihydroxypheacutenyl)-1-benzopyrylium chloride (IdB 1027) Les reacutesultats
montrent les effets drsquoIdB 1027 suivants
- reacuteduction de lrsquoulcegravere gastrique induit par la ligature du pylore de faccedilon non dose-
deacutependante
- inhibition de lrsquoulcegravere de stress
- protection de lrsquoestomac de lrsquoulcegravere induit par pheacutenylbutazone
- reacuteduction de la seacuteveacuteriteacute de lrsquoulcegravere induit par indomeacutetacine de faccedilon dose-
deacutependante
- inhibe significativement lrsquoulceacuteration gastrique induit par reacuteserpine
- protection significative mais pas dose-deacutependante contre les leacutesions induites par
lrsquoeacutethanol
- inhibe significativement et de faccedilon dose-deacutependante lrsquoulcegravere induit par histamine
- et reacuteduction significative les leacutesions induites par acide aceacutetique
En conclusion lrsquoIdB 1027 est capable de reacuteduire ou mecircme drsquoinhiber les ulcegraveres induits par de
nombreux facteurs comme la ligature du pylore les AINS Les meacutecanismes par lesquels un
meacutedicament augmente les deacutefenses de la muqueuse gastrique sont varieacutes cela peut ecirctre une
influence sur la seacutecreacutetion et les proprieacuteteacutes physicochimiques du mucus ou une stimulation de
la reacutegeacuteneacuteration cellulaire une influence sur la microcirculation de la muqueuse la seacutecreacutetion
de bicarbonate la protection contre les dommages induits par les radicaux libres ou
lrsquoaugmentation de lrsquoAMP cyclique Ainsi lrsquoIdB 1027 peut agir par une combinaison de
certains de ces meacutecanismes comme une augmentation de la seacutecreacutetion de mucus (sans effet
anti-seacutecreacutetoire gastrique) dans des conditions physiologiques normales et dans des conditions
de deacutefense alteacutereacutees la stimulation de la reacutegeacuteneacuteration cellulaire montreacutee par son activiteacute contre
lrsquoulcegravere induit par acide aceacutetique lrsquoameacutelioration de la microcirculation de la muqueuse
montreacutee par son activiteacute contre lrsquoulcegravere geacuteneacutereacute par lrsquohistamine De plus lrsquoIdB 1027 est un
antioxydant et les anthocyanidines sont des inhibiteurs efficaces de lrsquoAMPc-
phosphodiesteacuterase dans des tissus varieacutes ce qui pourrait contribuer agrave lrsquoactiviteacute
pharmacologique observeacute
76
En conclusion les effets deacutemontreacutes dans les modegraveles drsquoanimaux lrsquoabsence de toxiciteacute et
lrsquoexcellente toleacuterance font de cette moleacutecule un bon candidat dans des eacutetudes cliniques
comme agent antiulcegravereux
2 Action sur Helicobacter pylori
Le traitement contre Helicobacter pylori est la plupart du temps constitueacute de deux
antibiotiques et drsquoun inhibiteur de la pompe agrave protons comme lrsquoomeacuteprazole par exemple Or
le problegraveme qui se pose est lrsquoapparition drsquoune reacutesistance aux antibiotiques De plus la bacteacuterie
peut intervenir dans la production des radicaux libres de lrsquooxygegravene augmentant davantage le
stress oxydant et ses dommages au niveau gastrique Une augmentation de la peroxydation
lipidique et un dommage agrave lrsquoADN au niveau des tissus gastriques sont alors observeacutes Par
conseacutequent des antioxydants naturels comme les anthocyanosides de Vaccinium myrtillus
pourraient servir comme outil theacuterapeutique pour reacuteduire le stress oxydant induit par
Helicobacter pylori (15)
Chatterjee et coll (15) ont eacutetudieacute les effets de diffeacuterents extraits de baies sur Helicobacter
pylori avec ou sans clarithromycine in vitro ainsi que la sensibiliteacute de la bacteacuterie agrave la
clarithromycine Plusieurs baies sont eacutetudieacutees comme la myrtille sauvage (Vaccinium
myrtillus) lrsquoairelle la canneberge la fraise la framboise le sureau et Optiberryreg (un
meacutelange de ces six baies) Cette eacutetude a montreacute que tous les extraits aux concentrations
testeacutees inhibent la croissance de maniegravere dose-deacutependante de H pylori avec une efficaciteacute
supeacuterieure pour Optiberryreg Crsquoest la premiegravere eacutetude montrant lrsquoinhibition de H pylori par des
extraits de baies et notamment V myrtillus lequel preacutesente une meilleure activiteacute que la
fraise la framboise et la canneberge en particulier pour des basses concentrations Enfin un
effet inhibiteur suppleacutementaire est obtenu avec lrsquoajout de la clarithromycine associeacutee aux
extraits de baies agrave toutes les concentrations testeacutees
VII Autre effet de Vaccinium myrtillus
1 Action antibacteacuterienne
Une eacutetude meneacutee en 2005 par Puupponen-Pimiauml et coll (51) a montreacute lrsquoactiviteacute
antibacteacuterienne de plusieurs baies nordiques incluant V myrtillus Les reacutesultats rapporteacutes
dans cette thegravese ne se reacutefegraverent qursquoagrave la myrtille et sont reacutesumeacutes dans le tableau suivant
77
Listeria
monocytogenes
E-991205
Salmonella
enterica sv
thyphimurium
E-981151
Staphylococcus
aureus E-70045
Lactobacillus
rhamnosus
E-96666
Temps
drsquoincubation 12h 24h 12h 24h 12h 24h 12h 24h
2 mgmL-1
- - + - ++ ++ - -
10 mgmL-1
- - +++ + +++++ +++++ - -
Tableau VI Activiteacute antimicrobienne de la baie de V myrtillus lyophiliseacutee
(Leacutegende C concentration de la baie de myrtille - pas drsquoeffets inhibiteurs + nombre de
bacteacuteries viables diffegraverent de 10-5 times 101 par rapport au controcircle ++ nombre de bacteacuteries viables
diffegraverent de 5 times 101-5 times 102 par rapport au controcircle +++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 102-5 times 103 par rapport au controcircle ++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de 5 times 103-5 times 104
par rapport au controcircle +++++ nombre de bacteacuteries viables diffegraverent de plus 5 times 104 par rapport au
controcircle)
Les reacutesultats deacutemontrent lrsquoactiviteacute antimicrobienne de la myrtille lyophiliseacutee sur les bacteacuteries
Salmonella et Staphylococcus augmente de maniegravere concentration-deacutependante Par contre la
myrtille nrsquoa aucune activiteacute vis-agrave-vis de Listeria et Lactobacillus
Les composeacutes pheacutenoliques ne sont responsables que partiellement de lrsquoinhibition de la
croissance des bacteacuteries Salmonella les effets antimicrobiens eacutetant probablement deacutetenus par
drsquoautres composeacutes comme les acides organiques
Les baies et notamment V myrtillus pourraient ecirctre utiliseacutees dans les aliments fonctionnels et
dans lrsquoindustrie pharmaceutique en tant qursquoagents antimicrobiens
Ainsi la myrtille utiliseacutee traditionnellement est preacutesente dans de nombreuses eacutetudes qui ont
deacutemontreacute ses multiples actions dans des domaines meacutedicaux varieacutes et des pathologies diverses
comme lrsquoinsuffisance veineuse lrsquoatheacuteroscleacuterose le cancer le diabegravete les deacutesordres
oculaireshellip Par ailleurs son action antioxydante attire lrsquoattention des scientifiques et il serait
favorable drsquoentreprendre des eacutetudes cliniques
VIII Toxicologie
1 Effets indeacutesirables
Dans les eacutetudes cliniques sur les extraits de V myrtillus reacutepertorieacutees par Marazzoni et coll en
1996 (43) aucun effet indeacutesirable nrsquoa eacuteteacute observeacute mecircme lors drsquoeacutetudes ougrave le traitement aux
78
extraits de V myrtillus est pris sur une longue peacuteriode Cependant la plupart des eacutetudes
nrsquoincluaient qursquoun petit nombre de patients Une eacutetude de surveillance post-marketing a inclus
2295 sujets prenant 160 mg de Myrtocyanreg
deux fois par jour pendant 1-2 mois pour des
pathologies diverses (insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs fragiliteacute capillaire
modifications de la microcirculation reacutetinienne ou heacutemorroiumldes) Cette eacutetude a montreacute que
seuls 94 sujets ont reporteacute des effets indeacutesirables surtout lieacutes agrave la peau au tractus gastro-
intestinal et au systegraveme nerveux Une eacutetude non-controcircleacutee incluant des femmes enceintes avec
insuffisance veineuse des membres infeacuterieurs et en crise heacutemorroiumldaire montre qursquoune
administration drsquoun extrait de myrtille (80 ou 160 mg) deux ou trois par jour pendant trois
mois nrsquoentraicircnait pas drsquoeffets indeacutesirables Mais en preacutesence de peu drsquoeacutetudes toxicologiques et
drsquoune seacutecuriteacute de la myrtille non eacutetablie lrsquoutilisation de la myrtille chez la femme enceinte et
allaitante devrait ecirctre proscrite
2 Doses leacutetales 50 (DL50)
Les donneacutees toxicologiques indiquent une DL50 pour le Myrtocyanreg drsquoenviron 2 gkg chez
les souris et les rats Chez le chien des doses uniques de 3 gkg nrsquoentraicircnent pas drsquoeffets
indeacutesirables si ce nrsquoest une coloration plus fonceacutee des urines et fegraveces Une administration
orale quotidienne drsquoextrait de V myrtillus agrave des doses de 125 agrave 500 mgkg et 80 agrave 320 mgk
respectivement agrave des rats et des chiens pendant 6 mois nrsquoentrainent ni mortaliteacute ni toxiciteacute
Les eacutetudes pharmacocineacutetiques reacutealiseacutees chez des rats ont deacutemontreacute une eacutelimination rapide
des anthocyanosides de myrtille dans les deux heures suivant une administration orale (5) Il
est eacutetablit dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) que si les parties de
mytille utiliseacutees pour les phytomeacutedicaments est une poudre de fruit frais ou sec ou de feuille
le dossier laquo abreacutegeacute raquo de lrsquoAMM doit preacutesenter une eacutetude toxicologique alleacutegeacutee celle-ci
nrsquoeacutetant pas indispensable pour certaines formes galeacuteniques agrave base de myrtille (tisane extrait
aqueux teinture extrait hydro-alcoolique) La monographie de la Commission E allemande
preacutecise que si la baie de myrtille est atoxique la feuille quant agrave elle peut induire des
intoxications chroniques en cas de doses eacuteleveacutees ou drsquousage prolongeacute Les premiers
symptocircmes chez lrsquoanimal se traduisent par une aneacutemie une cachexie un ictegravere un eacutetat
drsquoexcitation aiguumle et des perturbations du tonus pouvant agrave terme ecirctre fatale apregraves une
administration chronique de 15 gkgjour Ces symptocircmes ressembleraient agrave ceux preacutesents
dans lrsquointoxication par lrsquohydroquinone ce dipheacutenol nrsquoest pourtant pas preacutesent dans la feuille
de myrtille La Commission E par prudence ne justifie pas lrsquoutilisation de la feuille dans un
but theacuterapeutique face agrave ces risques La Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament quant agrave
79
elle ne demande un essai toxicologique que pour la poudre de feuille mais pas pour les
extraits (quelque soit le titre) (11) De ce fait drsquoautres eacutetudes toxicologiques seraient
neacutecessaires
3 Contre-indications de Vaccinium myrtillus
Mecircme si aucune contre-indication nrsquoest mentionneacutee dans la litteacuterature il convient toutefois de
consideacuterer un risque potentiel drsquointeraction entre les preacuteparations agrave base de myrtille et drsquoautres
produits meacutedicinaux ayant des effets similaires ou opposeacutes agrave ceux de la myrtille Des eacutetudes
preacutecliniques par exemple ont montreacute que les extraits de V myrtillus avaient un effet anti-
agreacutegant et pouvaient augmenter le temps de saignement (5) Une surveillance devrait ecirctre
apporteacutee lors drsquoassociation entre les speacutecialiteacutes agrave base de myrtille et les meacutedicaments
antiagreacutegants ou anticoagulants mecircme si aucune interaction nrsquoa eacuteteacute rapporteacutee Enfin comme
nous lrsquoavons vu preacuteceacutedemment lrsquoutilisation de speacutecialiteacutes agrave base de myrtille est deacuteconseilleacutee
chez la femme enceinte ou allaitante (5)
80
QUATRIEME PARTIE
UTILISATIONS DE VACCINIUM
MYRTILLUS L
81
I Utilisations alimentaires de Vaccinium myrtillus
La myrtille est avant tout un fruit tregraves appreacutecieacute par les consommateurs pour ses proprieacuteteacutes
gustatives et sa valeur nutritive
1 Utilisations culinaires
Les promeneurs friands des baies de myrtille les consomment sur place ou chez eux Il est
important de laver les baies avant leur consommation car lrsquohomme risque drsquoecirctre toucheacute par
lrsquoeacutechinococcose multiloculaire Cette maladie parasitaire est une cestodose qui seacutevit dans
lrsquoheacutemisphegravere Nord le Massif central lrsquoEst de la France et la Suisse Le renard et autres
canideacutes (chiens) se contaminent eux-mecircmes en mangeant des rongeurs sauvages parasiteacutes
(campagnoleshellip) ils deacuteposent alors des selles contenant des œufs de teacutenia sur le sol
lrsquohomme srsquoinfeste en mangeant les myrtilles proches du sol La maladie se caracteacuterise par le
deacuteveloppement de la larve de teacutenia dans le foie y formant de nombreux alveacuteoles Les
symptocircmes principaux sont douleur sourde amaigrissement et ictegravere (1)
Utiliseacutees en cuisine les myrtilles font lrsquoobjet de nombreuses recettes culinaires Elles sont
utiliseacutees pour accommoder les viandes leur apportant une saveur aciduleacutee Des charcutiers les
ajoutent mecircme agrave leurs saucissons pour les rendre plus moelleux
Les myrtilles sont souvent retrouveacutees dans de nombreuses pacirctisseries (sableacutes citronneacutes cakes
brioches tartes tartelettes puddings vacherins souffleacutes et glaceacutes coulis de fruits rouges
sorbets glaceshellip)
Les baies peuvent aussi ecirctre utiliseacutees pour la preacuteparation de confiture geleacutee et compote
Certains agriculteurs-reacutecolteurs vendent les myrtilles en confiture sur les marcheacutes locaux
Enfin on retrouve des boissons agrave base de myrtilles (jus de fruit nectar sirop liqueur vin et
vinaigre) (22)
2 Utilisation dans lrsquoindustrie alimentaire
Les proprieacuteteacutes tinctoriales des anthocyanes de myrtille sont utiliseacutees dans lrsquoindustrie
alimentaire comme colorant sous la codification E 163 Gracircce agrave leur tregraves faible toxiciteacute il nrsquoy
aucune quantiteacute maximale speacutecifieacutee (quantum satis) ni dose journaliegravere acceptable Malgreacute
leurs proprieacuteteacutes tinctoriales les anthocyanes sont peu utiliseacutees dans lrsquoindustrie alimentaire agrave
cause de leur instabiliteacute (perte ou changement de couleur) en preacutesence de certains facteurs
physico-chimiques de lrsquoenvironnement comme le pH la tempeacuterature et la lumiegravere De plus
82
drsquoautres problegravemes srsquoajoutent agrave leur utilisation comme leur reacuteaction avec le dioxyde de soufre
(substance utiliseacutee pour la conservation drsquoaliments) leur faible solubiliteacute dans lrsquoeau et leur
preacutecipitation formant des complexes avec les proteacuteines Crsquoest pourquoi des proceacutedeacutes ont eacuteteacute
rechercheacutes pour augmenter leur stabiliteacute comme lrsquoutilisation drsquohydrocolloiumldes comme
lrsquoalginate de sodium et un surfactant ionique comme le laurylsulfate de sodium (3)
II Utilisations pharmaceutiques
Pour rappel la liste des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition
comporte deux parties (2)
La LISTE A laquo Plantes meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement raquo et la LISTE B laquo Plantes
meacutedicinales utiliseacutees traditionnellement en lrsquoeacutetat ou sous forme de preacuteparation dont les effets
indeacutesirables potentiels sont supeacuterieurs au beacuteneacutefice theacuterapeutique attendu raquo
La myrtille appartient agrave la liste A des plantes meacutedicinales de la Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition mais nrsquoy fait lrsquoobjet drsquoaucune monographie Agrave la Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition le fruit frais et sec de myrtille font lrsquoobjet drsquoune monographie (Annexe II et III
respectivement) En France certaines indications theacuterapeutiques selon la partie de plante
utiliseacutee sont revendiqueacutees dans la Note explicative de lrsquoAgence du meacutedicament (1998) Ainsi
on retrouve les indications suivantes
- pour le fruit (frais ou sec) et la feuille par voie orale ou en usage locale
traditionnellement utiliseacute dans les manifestations subjectives de lrsquoinsuffisance veineuse telles
que jambes lourdes et dans la symptomatologie heacutemorroiumldaire
Il y a drsquoautres indications theacuterapeutiques possibles comme
- pour le fruit (frais ou sec) par voie orale traditionnellement utiliseacute comme
traitement adjuvant de la composante douloureuse des troubles fonctionnels digestifs
- pour le fruit frais (voie orale ou usage local) traitement symptomatique des
troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire tels que ecchymoses peacuteteacutechies
- pour la feuille et le fruit sec (voie orale) traitement symptomatique des diarrheacutees
leacutegegraveres
La Commission E allemande preacutecise dans la monographie (1987) que le fruit de myrtille est
eacutegalement utiliseacute pour le traitement des diarrheacutees aigueumls et pour lrsquoinflammation locale
modeacutereacutee des muqueuses de la caviteacute buccale Le fruit seacutecheacute est utiliseacute agrave la dose de 20 agrave 60 g
par jour en deacutecoction par voie orale pour le traitement de la diarrheacutee chez lrsquoadulte
83
Ainsi les extraits riches en anthocyanosides des fruits de la myrtille peuvent entrer dans la
composition de meacutedicaments utiliseacutes pour traiter les manifestations fonctionnelles de
lrsquoinsuffisance veinolymphatique la symptomatologie des troubles fonctionnels de la fragiliteacute
capillaire et les troubles de la vision meacutesopique et scotopique (11)
1 Meacutedicaments agrave base de myrtille
11 Meacutedicaments allopathiques (82)
Laboratoire LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRARELreg 100 (comprimeacute enrobeacute bleu clair conditionnement de 20 comprimeacutes)
Meacutedicament vasculoprotecteur drsquoautorisation de mise sur le marcheacute (AMM) ndeg
3400930311714 (1987 reacuteviseacute le 24082005) Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Crsquoest une speacutecialiteacute pharmaceutique associant 100 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de V
myrtillus et 5 mg de β-carotegravene avec comme indications
laquo - Traitement dappoint des manifestations fonctionnelles de linsuffisance veinolymphatique
(jambes lourdes douleurs impatiences du primodecubitus)
- Traitement symptomatique dappoint des troubles fonctionnels de la fragiliteacute capillaire
- Traitement dappoint des baisses dacuiteacute et troubles du champ visuel preacutesumeacutes dorigine
vasculaire raquo
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
DIFRARELreg E (comprimeacute enrobeacute blanc)
Meacutedicament ophtalmique agrave viseacute vasculoprotectrice drsquoAMM ndeg3400930311592 (196597
reacuteviseacute le 28022006) pour le conditionnement de 26 comprimeacutes et ndeg3400937701068 (2006)
pour le conditionnement de 60 comprimeacutes Il est en vente libre et non rembourseacute par la
seacutecuriteacute sociale
Cette speacutecialiteacute pharmaceutique associe 50 mg drsquoun extrait anthocyanosidique de myrtille et
50 mg drsquoα-tocopheacuterol avec comme indication les troubles de la vision meacutesopique scotopique
(heacutemeacuteralopie) et la myopie
La posologie est de 3 agrave 6 comprimeacutes par jour en cure de 20 jours par mois renouvelable si
neacutecessaire
84
12 Meacutedicaments homeacuteopathiques
LABORATOIRE BOIRON
Ce laboratoire homeacuteopathique commercialise la teinture megravere de V myrtillus et des dilutions
homeacuteopathiques
Agrave la Pharmacopeacutee franccedilaise la myrtille a une monographie speacutecifique intituleacutee laquo Vaccinium
myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Annexe IV)
LABORATOIRE LEHNING
DIACUREreg (conditionnement de 60 geacutelules) drsquoAMM ndeg 3232544
Meacutedicament homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale Il est
constitueacute de lrsquoassociation suivante
- Taraxacum pulveacuteriseacute (H) (Pissenlit) 40 mg
- Berberis vulgaris (H) D3 (Epine-vinette) 40 mg
- Juglans regia pulveacuteriseacute (H) (Noyer) 120 mg
- Achillea millefolium (H) D2 (Achilleacutee millefeuille) 40 mg
- Vaccinium myrtillus folium pulveacuteriseacute (H) (feuille de myrtille) 80 mg
- Erythrea centaurium pulveacuteriseacute (H) (Petite centaureacutee) 40 mg
- Natrum phosphoricum (H) D3 40 mg
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute pour les polysurcharges
meacutetaboliques (facilite lrsquoeacutelimination des deacutechets meacutetaboliques) et notamment comme
traitement divers du diabegravete la feuille de myrtille y est utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes
hypoglyceacutemiantes
La posologie est de 1 agrave 2 geacutelules 3 fois par jour en dehors des repas en cure de 1 agrave 2 mois
(82)
DIABENEreg (solution buvable flacon de 30 mL) drsquoAMM ndeg 3030349 est un meacutedicament
homeacuteopathique en vente libre et non rembourseacute par la seacutecuriteacute sociale
Il est constitueacute de lrsquoassociation suivante Alchemilla vulgaris D3 Kreosotum D4
Strychninum nitricum D4 Arsenicum album D4 Adrenalinum D6 Belladonna D4 Syzygium
jambolanum D2 Vaccinium myrtillus D2 Taraxacum D3 Natrum phosphoricum D3
Helonias dioica D2
Ce meacutedicament homeacuteopathique est traditionnellement utiliseacute dans les polysurcharges
meacutetaboliques comme traitement divers de lrsquoobeacutesiteacute
85
La posologie est de 30 gouttes 3 fois par jour de preacutefeacuterence en dehors des repas (82)
13 Compleacutements alimentaires
LABORATOIRE MERCK
BION 3 SENIORreg (conditionnement de 30 ou 60 comprimeacutes)
Compleacutement alimentaire constitueacute de 3 probiotiques 12 vitamines 8 oligo-eacuteleacutements et 3
extraits veacutegeacutetaux (100 microg de luteacuteine extraits de 20 mg de ginseng et 1 mg de myrtille) Il est
preacuteconiseacute en cas de sphegravere ORL fragiliseacutee de deacutefenses naturelles affaiblies et pour mieux
faire face aux rythmes de vie actuels alimentation deacuteseacutequilibreacutee stress surmenage La
posologie est de 1 comprimeacute par jour en cure de 30 ou 60 jours (82)
RICHELETreg ANTI-AGE VISION (conditionnement de 30 comprimeacutes)
Crsquoest un compleacutement alimentaire composeacute de luteacuteine 105 mg drsquoextrait de myrtille des
vitamines B1 B2 et B6 A C E et du seacuteleacutenium La myrtille est utiliseacutee dans ce produit pour
ameacuteliorer la microcirculation sanguine de lrsquoœil et assurer le bon fonctionnement de ses
constituants La posologie est de 1 comprimeacute par jour pendant 3 mois agrave renouveler
peacuteriodiquement (82)
LABORATOIRE LEURQUIN-MEDIOLANUM
DIFRAVISIONreg ANTI-VIEILLISSEMENT
Compleacutement alimentaire agrave viseacutee oculaire comprenant des vitamines (vitamine C et E) des
oligo-eacuteleacutements (Zn et Se) des pigments maculaires (luteacuteine extrait de maiumls dont
zeacuteaxanthine) du DHA (ω3) des huiles de poisson et un extrait sec de myrtille doseacute agrave 100 mg
(pour 2 geacutelules) Sur la notice du meacutedicament on trouve les indictions suivantes laquo il est
conseilleacute pour corriger les effets neacutefastes au niveau oculaire des deacuteficits antioxydants en
acides gras essentiels et en pigments maculaires raquo La posologie est de 1 geacutelule 2 fois par jour
(notice du compleacutement alimentaire)
LABORATOIRE ARKOPHARMA
Ce laboratoire pharmaceutique fabrique des geacutelules contenant de la poudre totale microniseacutee
Aujourdrsquohui seule la baie de myrtille est commercialiseacutee par le laboratoire Arkopharma
86
Les Arkogeacutelules de myrtille (baie) sont indiqueacutees dans la diarrheacutee la colite et lrsquoameacutelioration
de la vision nocturne (Brochure Arkopharma)
La myrtille est preacutesente dans beaucoup drsquoautres compleacutements alimentaires que nous ne
citerons pas ici
89
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98
LISTE DES ANNEXES
ANNEXE I Table de composition nutritionnelle Ciqual 2008 de lrsquoAffsa
ANNEXE II Monographie du fruit frais de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE III Monographie du fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L (Pharmacopeacutee
europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
ANNEXE IV laquo Vaccinium myrtillus pour preacuteparations homeacuteopathiques raquo (Pharmacopeacutee
franccedilaise Xegraveme eacutedition)
99
ANNEXE I
TABLE DE COMPOSITION
NUTRITIONNELLE CIQUAL 2008 DE
LrsquoAFSSA
100
Myrtille fraicircche (teneurs pour 100 grammes drsquoaliment comestible)
Leacutegende du code confiance
Echelle de fiabiliteacute de A agrave D A correspondant aux donneacutees les plus fiables
Nom des constituants Uniteacute Teneur
moyenne Min Max Nb eacutechantillons
Source des
donneacutees
Code
confiance
Energie kJ 213 - - - C
Energie kcal 50 - - - C
Energie eacutetiquetage kJ 213 - - - C
Energie eacutetiquetage kcal 50 - - - C
Eau g 838 834 8421 2 760
743 C
Proteacuteines g 074 - - - C
Proteacuteines brutes (N x 625) g 074 - - 1 743 C
Glucides g 10 - - - C
Sucres g 996 - - 1 743 C
Amidon g 003 - - 1 743 C
Polyols totaux g 0 - - - D
Fibres alimentaires g 24 - - 1 743 C
Lipides g 033 - - 1 743 C
AG satureacutes g 0028 - - 1 743 C
AG monoinsatureacutes g 0047 - - 1 743 C
AG polyinsatureacutes g 0146 - - 1 743 C
Cholesteacuterol mg 0 - - 1 690 C
Alcool (eacutethanol) g 0 - - 1 690 C
Acides organiques g 137 - - - 723 C
Sodium mg 1 - - 1 743 C
Magneacutesium mg 6 - - 1 743 C
Phosphore mg 12 - - 1 743 C
Potassium mg 77 - - 1 743 C
Calcium mg 6 - - 1 743 C
Manganegravese mg 0336 - - 1 743 C
Fer total mg 028 - - 1 743 C
Cuivre mg 0057 - - 1 743 C
Zinc mg 016 - - 1 743 C
Seacuteleacutenium microg 01 - - 1 743 C
Iode microg 05 - - 1 573 D
Reacutetinol microg 0 - - 1 743 C
Becircta-carotegravene microg 32 - - 1 743 C
Vitamine D microg 0 - - 1 445 C
Activiteacute vitaminique E (en
eacutequivalents alpha-tocopheacuterol) mg 1 - - 1 497 C
Vitamine C mg 97 - - 1 743 C
Vitamine B1 ou Thiamine mg 0037 - - 1 743 C
Vitamine B2 ou Riboflavine mg 0041 - - 1 743 C
Vitamine B3 ou PP ou
Niacine mg 0418 - - 1 743 C
Vitamine B5 ou Acide
pantotheacutenique mg 0124 - - 1 743 C
Vitamine B6 ou Pyridoxine mg 0052 - - 1 743 C
Vitamine B9 ou Folates
totaux microg 6 - - 1 743 C
Vitamine B12 ou
Cobalamines microg 0 - - 1 743 C
101
ANNEXE II
MONOGRAPHIE DU FRUIT FRAIS
DE VACCINIUM MYRTILLUS L
(Pharmacopeacutee Europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
102
Myrtille (fruit frais de)
Myrtilli fructus recens
DEacuteFINITION
Fruit mucircr frais ou congeleacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 030 pour cent drsquoanthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-
O-glucoside (chrysantheacutemine C21H21ClO11 Mr 4848) (drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur sucreacutee un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit frais de myrtille est une baie bleu-noir globuleuse drsquoenviron 5 mm de diamegravetre Il
comporte agrave la base une cicatrice ou rarement un fragment de peacutedoncule Le sommet aplati
est surmonteacute par les restes du style persistant et du calice qui forme un repli circulaire Dans
le meacutesocarpe violaceacute et juteux 4 agrave 5 loges renferment de nombreuses petites graines ovoiumldes
brunes
B Le fruit frais de myrtille broyeacute est rouge violaceacute Examinez-le au microscope en utilisant
de la solution drsquohydrate de chloral R Il preacutesente des cellules scleacutereuses rose violaceacute agrave paroi
eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en amas provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des
fragments drsquoeacutepicarpe brun-rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie
des fragments jaune-brun du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave
paroi preacutesentant des eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles de cristaux
drsquooxalate de calcium
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 5 g de drogue reacutecemment broyeacutee ajoutez 20 ml de meacutethanol R
Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
103
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge violaceacute
Chrysantheacutemine une bande rouge violaceacute Une bande principale rouge violaceacute
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge violaceacute
mdash plusieurs bandes bleu violaceacute
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Cendres totales (2416) maximum 06 pour cent
Perte agrave la dessiccation (2232) 800 pour cent agrave 900 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave 105 degC
sur 5000 g de drogue reacutecemment broyeacutee
DOSAGE
Broyez extemporaneacutement 50 g de drogue A environ 500 g de drogue broyeacutee exactement
peseacutes ajoutez 95 ml de meacutethanol R Agitez meacutecaniquement pendant 30 min Filtrez dans une
fiole jaugeacutee de 1000 ml lavez le filtre et compleacutetez au volume avec du meacutethanol R Diluez
cette solution au 150 dans une solution drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le
meacutethanol R
Mesurez lrsquoabsorbance (2225) de la solution obtenue agrave 528 nm en prenant une solution
drsquoacide chlorhydrique R agrave 01 pour cent VV dans le meacutethanol R comme liquide de
compensation
Calculez la teneur pour cent en anthocyanosides exprimeacutes en chlorure de cyanidine 3-O-
glucoside agrave lrsquoaide de lrsquoexpression suivante
718 = absorbance speacutecifique du chlorure de cyanidine 3-O-glucoside agrave 528 nm
A = absorbance agrave 528 nm
M = Masse de la prise drsquoessai en grammes
CONSERVATION
Lorsque le fruit frais de myrtille est congeleacute conservez-le agrave une tempeacuterature infeacuterieure ou
eacutegale agrave minus 18degC
104
ANNEXE III
MONOGRAPHIE DU FRUIT MUcircR
SECHE DE VACCINIUM MYRTILLUS
L
(Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition)
105
Fruit mucircr seacutecheacute de Vaccinium myrtillus L
Teneur au minimum 10 pour cent de tanins exprimeacutes en pyrogallol (C6H6O3 Mr 1261)
(drogue desseacutecheacutee)
CARACTEgraveRES
Saveur douce un peu astringente
IDENTIFICATION
A Le fruit sec de myrtille est une baie bleu-noir ratatineacutee subglobuleuse de 5 mm environ de
diamegravetre avec une cicatrice agrave la base Le sommet est surmonteacute par les restes du style et le
calice persistant qui forme un repli circulaire Le meacutesocarpe violet intense et charnu renferme
de nombreuses petites graines ovoiumldes brunes
B Reacuteduisez le fruit sec de myrtille en poudre (355) (2912) La poudre est brun-violet
Examinez au microscope en utilisant de la solution drsquohydrate de chloral R La poudre
preacutesente des cellules scleacutereuses rose-violet agrave paroi eacutepaisse canaliculeacutee geacuteneacuteralement en
amas et provenant de lrsquoendocarpe et du meacutesocarpe des fragments drsquoeacutepicarpe coloreacutes en brun-
rouge formeacutes de cellules polygonales agrave paroi leacutegegraverement eacutepaissie des fragments jaune-brun
du teacutegument externe de la graine composeacutes de cellules allongeacutees agrave paroi preacutesentant des
eacutepaississements en forme de fer agrave cheval des macles et des prismes de cristaux drsquooxalate de
calcium de diffeacuterente taille
C Chromatographie sur couche mince (2227)
Solution agrave examiner A 2 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912) ajoutez 20 ml de
meacutethanol R Agitez pendant 15 min et filtrez
Solution teacutemoin Dissolvez 5 mg de chrysantheacutemine R dans 10 ml de meacutethanol R
Plaque plaque au gel de silice pour CCM R
Phase mobile acide formique anhydre R eau R butanol R (161965 VVV)
Deacutepocirct 10 microl en bandes
Deacuteveloppement sur un parcours de 10 cm
Seacutechage agrave lrsquoair
Deacutetection examinez agrave la lumiegravere du jour
106
Reacutesultats voir ci-dessous la seacutequence des bandes preacutesentes dans les chromatogrammes
obtenus avec la solution teacutemoin et la solution agrave examiner
Haut de la plaque
Une bande rouge-violet de faible intensiteacute
Chrysantheacutemine une bande rouge- violet Une bande principale rouge-violet
Un ensemble compact drsquoautres bandes
principales
mdash une bande rouge-violet
mdash plusieurs bandes bleu-violet
Solution teacutemoin Solution agrave examiner
ESSAI
Perte agrave la dessiccation (2232) au maximum 120 pour cent deacutetermineacute agrave lrsquoeacutetuve agrave
105 degC pendant 2 h sur 1000 g de fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute
Cendres totales (2416) au maximum 50 pour cent
DOSAGE
Effectuez la deacutetermination des tanins dans les drogues veacutegeacutetales (2814) Utilisez 1500 g de
fruit sec de myrtille pulveacuteriseacute (355) (2912)
107
ANNEXE IV
laquo VACCINIUM MYRTILLUS
POUR
PREPARATIONS
HOMEOPATHIQUES raquo
(Pharmacopeacutee franccedilaise Xegraveme
eacutedition)
108
109
110
111
Vaccinium myrtillus L une plante meacutedicinale agrave anthocyanosides
REacuteSUMEacute
Vaccinium myrtillus Linneacute ou myrtille sauvage est un sous-arbrisseau de la famille des
Ericaceacutees On la retrouve dans le nord et le centre de lrsquoEurope en Asie et en Ameacuterique
Boreacuteale En France la myrtille est commune dans la plupart des montagnes entre 400 et 2500
megravetres drsquoaltitude Elle est diffeacuterente de la myrtille cultiveacutee ou Vaccinium corymbosum L Son
fruit est une baie bleu-noir globuleuse agrave saveur sucreacutee et aciduleacutee V myrtillus L renferme de
nombreux composeacutes pheacutenoliques dont les anthocyanosides ceux-ci sont principalement
retrouveacutes dans la peau et la pulpe du fruit de la myrtille ils sont agrave lrsquoorigine de la plupart de
ses proprieacuteteacutes theacuterapeutiques mecircme si drsquoautres composeacutes participeraient agrave lrsquoaction beacuteneacutefique
de la myrtille
V myrtillus L est une plante meacutedicinale inscrite sur la liste A de la Pharmacopeacutee franccedilaise
Xegraveme
eacutedition Le fruit (frais et sec) de la myrtille fait lrsquoobjet drsquoune monographie dans la
Pharmacopeacutee europeacuteenne 6egraveme
eacutedition Les proprieacuteteacutes theacuterapeutiques des feuilles et des fruits
de V myrtillus L ont eacuteteacute utiliseacutees dans la meacutedecine populaire les fleurs pour leurs
proprieacuteteacutes toniques astringentes antiseptiques dans le traitement de la diarrheacutee de la
dysenterie quant agrave la feuille elle eacutetait surtout utiliseacutee pour ses proprieacuteteacutes hypoglyceacutemiantes
Certaines indications sont valideacutees et figurent dans la Note explicative de lrsquoAgence du
meacutedicament de 1998 et la Commission E allemande Si la baie est atoxique la feuille
preacutesenterait un risque drsquointoxication lieacute agrave des fortes doses ou agrave une utilisation chronique
La myrtille a fait lrsquoobjet de nombreuses eacutetudes in vitro in vivo et quelques eacutetudes cliniques
ayant montreacute une faible biodisponibiliteacute (surtout chez lrsquohomme) mais des effets beacuteneacutefiques
dans le domaine vasculaire dans certaines pathologies ougrave le stress oxydant est impliqueacute
(cancer maladies neurodeacutegeacuteneacuteratives DMLAhellip) cette activiteacute reste agrave ecirctre prouveacutee chez
lrsquohomme Quant aux eacutetudes cliniques concernant lrsquoaction de la myrtille sur la vision (surtout
nocturne) elles restent controverseacutees mais des eacutetudes in vitro reacutecentes ont montreacute ses effets
beacuteneacutefiques sur la reacutegeacuteneacuteration des cellules corneacuteennes Enfin outre son emploi en cuisine la
myrtille est utiliseacutee dans lrsquoindustrie pour ses anthocyanes aux proprieacuteteacutes tinctoriales et dans le
domaine pharmaceutique ougrave lrsquoon retrouve des meacutedicaments et des compleacutements alimentaires
agrave base de myrtille pour diverses indications (traitement de la fragiliteacute capillaire de
lrsquoinsuffisance veineuse et dans les troubles de la vision meacutesopique et scotopique)
MOTS-CLEFS Vaccinium myrtillus - Myrtille - anthocyanosides - phytotheacuterapie - stress
oxydant
THESE SOUTENUE LE 19 MAI 2010
Par Olivia Maillefert
86 rue des Ecoles
73230 St Alban Leysse
COMPOSITION DU JURY
Preacutesident du jury
Mr KRIVOBOK Serge Docteur en Pharmacie et Maicirctre de Confeacuterences en Botanique
Membres du jury
Mr CORJON Gilles Docteur en Pharmacie
Mr CHOVELON Michel Docteur en Pharmacie
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