Las hormonas son tomados del medio externopor los tejidos de la planta. También son trasladadas a corto o largodistancias de la planta de sus sitios de síntesis y /o aplicación. En este capítulo se examinará en primer lugar las característicasde la absorción de la hormona y la acumulación, a continuación,su desplazamiento a larga distancia en los tejidos vasculares,y, finalmente, el transporte polar de auxinas, que es la basemuchos fenómenos del desarrollo de las plantas, asícomo sus respuestas a las señales del medio ambiente del trópico.

CARACTERÍSTICAS DE LOSCONSUMO Y LA ACUMULACIÓNHormonas de las plantas son pequeñas moléculas, que puedenfácilmente difunden a través de las fronteras de células en respuesta asu gradiente de concentración. Sin embargo, dicho movimientose rige por una compleja interacción de variosfactores, y cómo se produce la absorción en un caso concreto en vivotodavía no está totalmente entendido. Esta sección describe algunasconceptos generales sobre la absorción de la hormona por la difusión ya través de transportadores específicos, seguida por una discusión sobre laauxina transporte afluencia.Auxinas(IAA), giberelinas (GAs), el ácido abscísico (ABA),y el ácido jasmónico (JA) son ácidos débiles, que en la soluciónse disocian en aniones y protones (Fig. 13-1). lavalores PKA de IAA, ABA y JA medida a 20 ° C sonde 4.7 a 4.8, el PKA de Ga es menor, alrededor de 3,85.En consecuencia, a un pH neutro en una solución libre, estaslas hormonas se dan fundamentalmente en una forma disociada,pero a un pH cercano a la PkA o debajo de ella, la proporciónde los aumentos de forma no disociada.

La disociación de la IAA. 

IAA se disocia soluciónen IAA "y H +. La constante de equilibrio (KD) está dada por larelación entre la concentración de iones libres, dividido por la concentración dela molécula sin disociar. A un pH de 4,7, el pKa, la proporción dedisociadas y no disociadas IAA, es igual.

La situación en planta, sin embargo, no se conoce. Citoquininas (CK)y brasinoesteroides (RB) se producen principalmente comomoléculas no disociadas. El etileno es no polar ygaseoso y permeable con libertad, aunque su precursor,1-aminocyclopropane-l-carboxílico (ACC), es unácido débil.

Captación por difusiónHormonas no disociadas son permeablesa través del plasmalema. Su movimiento se rigepor su gradiente de concentración a través de la membrana,así como por el tamaño y la polaridad de la que impregnamolécula. Por ejemplo, el ácido jasmónico no disociado,que es más lipofílica, es más permeable queABA no disociado. Derivados sustituidos de las hormonaspuede ser más o menos permeables que los padresmolécula en función de la naturaleza y el tamaño de lasustitución. Por lo tanto, la adición de una fracción no polar a unaGA es que puedan hacer que el derivado más permeableque la Asamblea General de padres, pero más allá de un cierto tamaño, lasustitución puede convertirse en un obstáculo a la permeabilidad.Por ejemplo, la mayor actividad biológica de2,2 '-dimetil GA4 GA4 que se cree que es debido asu mayor permeabilidad, pero 2,2 '-dibutilo GA4 podría sermenos permeables que los padres GA4 debido a sutamaño mucho mayor.Movimiento por la difusión continúa hasta que la concentraciónde la hormona libre en los dos lados de lala membrana es igual. Bajo ciertas condiciones, sin embargo,grandes cantidades de la hormona, aunque en diferentesforma molecular, se pueden acumular.A ligeramente ácido pH (5.0-6.5), cantidades sustancialesde la LAA, GA, ABA y JA ocurrir como no disociadasmoléculas y puede difundirse a través de la plasmalemaen la célula. Dentro de la célula, que se disocian en susformas iónicas y H +, e iones de ser acusado no puedese difunden. Puesto que cada especie molecular se difundetravés de la membrana de acuerdo a su propia concentraciónpendiente, el movimiento de los sin disociarespecie continúa y grandes cantidades de la disociadala hormona se puede acumular en el citosol, unafenómeno que se conoce como captura de iones''"(Fig. 13 -2A).Además, la hormona no disociado puede ser metabolizadoa una especie molecular diferente (fig. 13-2B).Por ejemplo, Gai se convierte en su glucosiléster o un derivado inactivo, como el GAG.En estas condiciones, los niveles citosólicos de libre

Gai sigue siendo bajo, y puede absorción de la hormonacontinuar por un tiempo considerable sin llegar a unsaturación aparente (Fig. 13-2C). La hormona puedetambién se unen a una macromolécula intracelular, por ejemplo, unreceptor. Una vez unido al receptor, ya no es parte de la piscina libre en el citosol y la difusión de lala hormona en la célula continúa hasta que el nivel de libertadla hormona dentro de la célula es igual a que fuera de lacelular.

portador-mediada por absorción

Iones y moléculas cargadas o polares son incapaces decruz bicapas lipídicas artificiales. Sin embargo, soncapaz de penetrar las membranas biológicas, yaproteínas especiales de transporte de facilitar su movimientotravés de la membrana. Estos transportadores soncanales, soportes y bombas. Para el transporte de solutostravés de las membranas biológicas, se remite al lector atextos sobre la planta o la fisiología celular. Una descripción básicaEn el recuadro 13-1.

La acumulación de la hormona por la captura de iones ometabolismo. (A) La hormona no disociada (AH) siguese mueven en la célula, ya que, de entrada, que se convierte en su disociadaiones, A ~ + H +. (B) A la entrada, AH se convierte en su éster glucosil,Un G-, H +, mientras que se bombea fuera de la célula. (C) Bajo cualquier condición,la captación de AH en la célula sigue sin llegar a un aparentesaturación. La concentración de AH en el medio de incubación esindicado para la comparación.

CUADRO 13-1 ATPasas PROTON juegan un papel importante en la fisiología celular

LA transferencia de iones, tanto inorgánicos como orgánicos, y las moléculas, ni siquiera agua, a través de las membranas celularesconsiste en las actividades de los canales, los transportistas, y las bombas. Todos son proteínas integrales de membrana o proteínas

complejos.Canales se componen de proteínas que forman pasadizos cilíndrico lleno de agua a través del cualiones se mueven a través de una membrana lipídica. Canales muestran cierta selectividad hacia las especies iónicas, con una selectividadestá determinada por la densidad de la carga de la superficie en el revestimiento del canal y el tamaño de laporo. Algunos canales son específicos para un ion (por ejemplo, K + charmels), mientras que otros son menos específicos (por ejemplo, el anióncharmels, o K + / Ca ^ canales +). Canales de regular el flujo de iones por la apertura o cierre, un fenómenoconocido como "gating". Algunos canales se abren en respuesta a una sustancia química (ligando), que se une a su receptor,por lo general el canal de proteína en sí misma, sino que son "ligando" o canales de los receptores activados. Otros respondena las diferencias de tensión en los dos lados de la membrana plasmática o el tonoplasto, estos son voltageactivatedcanales. Y otros se abren como resultado de la membrana de estiramiento, que son activados por estiramientocanales. El flujo de iones a través de un canal abierto es pasivo y no requiere de energía. Se presenta enrespuesta a un gradiente de concentración del ion en cuestión en los dos lados de la membrana, pero el flujo dede los iones a través de un solo canal puede ser muy alto, con frecuencia de más de lO ^ s "^ y se acercael límite establecido por la libre difusión a través del agua.Las proteínas transportadoras de transferencia de un ion o una molécula de un lado de una membrana a la otra. Sonespecíficos para cada ion o especie molecular. Mientras que el movimiento de los iones o moléculas en sí es pasivo, elfuerza motriz de la proteína transportadora es proporcionada por el gradiente de protones o pH y / o gradiente eléctrico,que son establecidos por las bombas de protones (ver más abajo). Las proteínas transportadoras pueden actuar como "symporters," la transferencia dedos especies diferentes a través de la membrana en la misma dirección, o como "antiporters", que la transferencia de unespecies en una sola dirección y el otro en la dirección opuesta.Bombas implican un gasto de energía y son por lo general junto a una ATPasa, aunque acoplamientosotras fuentes de energía también se producen. Bombas de protones H + secretan activamente del citosol en el apoplasto yuso de la energía de hidrólisis de ATP para hacerlo. Son H +-ATPasa. La actividad de la H "^-ATPasa tiene dosconsecuencias inmediatas. Se reduce el pH de la apoplasto en relación con el del citoplasma, lo que resulta en unapH gradiente entre estos dos compartimientos. En las células en reposo, el pH del apoplasto varía entre pH5,0 y 6,5 en comparación con el pH citoplasmático, que tiende a ser ~ 7.0.Extrusión de

H + desde el citoplasmatambién se traduce en un potencial eléctrico en el lado citoplásmico de la membrana plasmática, que es negativocon respecto a que en la parte extracelular de la membrana plasmática. En las células en reposo, la diferencia de potencialpuede ser tan negativo como -100 a -150 mV. Tanto el gradiente de pH y del gradiente eléctrico proporcionanimportantes fuerzas motivo de muchas de las actividades celulares, incluyendo la captación de transporte mediada por iones, azúcares,aminoácidos, y hormonas. Células de las plantas gastan considerable cantidad de energía en el mantenimiento de sus protonesbombas (Fig. 13-3).Otras bombas uso de la energía ATP para bombear aniones tales como Cl o cationes como Ca ^ +, K + o Na +. Bombaspuede ser electrógenos o electroneutra. Son electrógenos, si en el proceso de transferencia de un ion (s),que crean un desequilibrio eléctrico o de carga en los dos lados de la membrana.Un protón es una ATPasabomba electrógenos, los resultados de actividad en el interior de la célula que más electronegativo con respectohacia el exterior. Por el contrario, es una bomba de electroneutra, si los iones se movió, no crear un desequilibrio eléctrico.Purificado vesículas derivadas de plasma o de las membranas vacuolares, o fracciones de membrana de los orgánulos,como las mitocondrias y Golgi, son frecuentemente utilizados para los experimentos in vitro sobre las actividades de transportelas proteínas. Vesículas representan un poderoso sistema experimental para el estudio de los fenómenos de transportedebido a los problemas asociados con las células intactas y tejidos, como las trampas de los solutos en el intracelularcompartimentos o difusión a través de las células, se evitan. En la preparación de las vesículas, se tenga cuidado de que elmembrana de la vesícula es lado derecho hacia afuera para asegurar la orientación correcta de las proteínas de transporte. Específicolas proteínas de transporte también pueden ser introducidos en las vesículas hecho de bicapas lipídicas artificiales para estudiar suactividades in vitro.

Figura 13-3 Acoplamiento de iones, el azúcar y el transporte de aminoácidos a lafuerza motriz de protones. H +-ATPasas bombean H + a laexterior de la célula y, en el proceso, establecer un gradiente electroquímico, lafuerza motriz de protones. La energía libre almacenada por lo tanto esse usa para el transporte de iones, azúcares, aminoácidos, hormonas o en contra de su gradiente electroquímico.

El transporte de iones a través de las membranas celulares de hormonasse produce sobre todo por las compañías, junto con protonesla fuerza motriz generada por la actividad de los protonesATPasas. Sin embargo, in vitro, se ve afectada por otrosfactores, así como las concentraciones iónicas en elapoplasto y simplasto, y el potencial de membrana enel plasmalema. Entre las hormonas, el transportista mediadala captación se ha estudiado sobre todo por las auxinas y,hasta cierto punto, de ABA. Este tema se discute a continuación.

2.2.1, la demostración de la absorción Carrier-mediada

A la absorción de transporte mediada por las hormonas por lo generaldemostrado por lo que se conoce como "la cinética de saturación / 'Si los segmentos de corte de tallo o raíz, o la suspensióncélulas en cultivo, se incuban con la hormona radiomarcada

a un pH determinado y las tasas de captación setrazado, entonces en algún momento, como todas las moléculas portadorasse saturan, una saturación en la tasa de absorción sealcanzado. Como se ha explicado anteriormente la saturación, como puedeNo se llega, sin embargo, debido al metabolismo hormonalo la unión a macromoléculas inespecíficos. aminimizar los efectos de tal unión no específica, lamaterial vegetal también se incuban en una mezcla de losmisma cantidad de la hormona marcada radiactivamente más grandes unaexceso de la hormona sin marcar. La hormona sin marcar,teóricamente, se satura todas las uniones inespecíficassitios. La diferencia entre la cantidad de radiofármacotomado en los dos incubaciones da la cantidad decomponente saturable o la hormona de etiquetado específicamenteobligado. (El protocolo es similar a la fijación de la hormonaLos ensayos, que se explican en el Apéndice 4.) Datos para un experimento de este tipo para la captación de ABA se muestran en laFig. 13-4. Como puede verse, la tasa de absorción de la saturablecomponente aumenta considerablemente en las mesetas y luegoa la tasa máxima.

2.2.2, la captación por vesículas de membranaExperimentos de absorción también puede llevarse a cabo utilizandovesículas microsomales preparado a partir de fracciones de membranaa partir de tejidos de las plantas, teniendo cuidado de queestán selladas y al derecho hacia fuera, es decir, que imitanel pH transmembrana y gradientes eléctricos queexisten en vivo. Tales vesículas de calabacín {Cucurbitapepo) hipocotilos se han utilizado para demostrar lala captación de ^ "^ C-IAA del medio ambiente. In vitroexperimentos con vesículas son útiles porque puedense usa para distinguir los efectos de los agentes que alteranel gradiente de protones sin afectar a la eléctricapendiente, o viceversa. Estos experimentos han demostradoque la acumulación de LAA etiquetado se rige principalmentepor el gradiente de protones en los dos lados de lamembrana de la vesícula, siempre que el interior de la membranaestá a un potencial negativo. Por LAA, se haademás postula que la H +-ATPasa actúa como un symportpara la entrada de la AICH / H +, pero que un 2H + / IAA-symportes un mecanismo más probable (fig. 13-5).

2.2.3. La dependencia de pH y EspecificidadCarrier-mediada por la captación de ambos LAA y ABA hapH óptimo entre pH 4,5 y 6,0 (Fig. 13-6), un pHrango en el que tanto las formas disociadas y no disociadas de la LAA y ABA se producen. Por encima de pH 6,0, no carrier-mediated

absorción que se observa. La situación en vivoy en la planta no se conoce.Acarreador de entrada de auxinas o ABA son específicos paralas hormonas. Por ejemplo, la absorción por el LAAauxina específicos de soporte puede ser competido por 2,4-D,pero no por las auxinas inactivas u otras hormonas, tales comogiberelinas y ABA. Sin embargo, dentro de cada clase de hormonas, parece que hay un amplio margen deestructuras que puedan ser aceptados por el transportista afluencia.Por lo tanto, el transportista afluencia de auxinas parece aceptar LAAy el 2,4-D, dos moléculas muy disímiles 1-naftalenoácido acético (1-NAA) es altamente lipofílico y entralas células en su mayoría por difusión pasiva. De ABA, no sóloel enantiómero natural, sino también varios anillos estructuralesde aceptar las modificaciones, pero la falta de un anión carboxiloen el CI en la cadena lateral no lo es. Mientras el vehículo afluenciade ABA, no ha sido aislado o clonado, el gen de laun portador de flujo LAA en Arabidopsis ha sido clonado.

2.2A. El aislamiento de una compañía afluencia LAALos intentos de aislar el transportista flujo de auxina por bioquímicosmedio que no han sido particularmente exitosos.El uso de tritio, fotoafinidad marcado LAA (para estemetodología, véase el Apéndice 4) llevaron a la identificaciónde dos proteínas en las fracciones de membrana plasmática de unavariedad de las dicotiledóneas, monocotiledóneas y coníferas. Las proteínas(Valores de Mr ~ 40 y 42 kDa, que podría ser el mismoproteína) se produjeron en baja abundancia y se encontraronsólo en las fracciones de la membrana plasmática de lostejidos / órganos cree que es activo en la captación de auxinao el transporte. Las proteínas no se han caracterizadomás.Auxina mutantes insensibles, es decir, los mutantes que nodar la respuesta esperada a la aplicación de auxina (para el aislamientode estos mutantes, véase el capítulo 22), puede estar defectuosoen la auxina de señalización o en la absorción de la auxina o el transporte. Unotales mutantes de Arabidopsis, AUXL (por auxina resistentes a 1),muestra una reducción en la magnitud de varios auxinspecificlas respuestas, especialmente en las raíces. Como se muestra enCapítulo 14, la auxina es necesaria para el inicio de lateraly raíces adventicias (aunque una vez iniciada, la auxinatambién inhibe el crecimiento de las raíces). Las raíces también se inclinan hacia la gravedad(Gravitropismo positivo), una respuesta que está mediadaen parte, a través de la auxina (véase el capítulo 27). El mutante AUXLmuestra reducida iniciación de las raíces laterales y una más lenta gravitrópicarespuesta que el tipo silvestre, que sugieren que los defectos

una deficiencia en la absorción de la auxina o el transporte. La de tipo salvajeAUXL gen ha sido clonado. Que codifica una hidrofóbicaproteína con 10-12 dominios transmembrana y una secuenciasimilitud con las proteínas transportadoras (permeasas) paraaminoácidos en una variedad de organismos, incluyendo las plantas.Permeasas son activos como symporters de protones, como se postulapara el transporte de auxina influjo de los estudios bioquímicos(Ver la discusión anterior). Basándose en estas observaciones,se ha propuesto que AUXL es el portador de flujo deLAA. Los datos sobre la absorción y la salida de auxinas en diferentesAUXL mutante apoyan esta conclusión (ver sección 4.5).Por otra parte, los patrones de expresión de AUXL en las raícessometido al estímulo gravitrópica confirmar que se trata deen el transporte de auxina.

2.2.5. Importancia de la captación oflAA Carrier-mediadaLa absorción de la auxina por difusión pasiva y / oa través deun portador de flujo es un requisito previo importante para latransporte polar de auxina, que se discute en la Sección4. Sin embargo, ¿qué proporción de la captación está mediado portadoro ¿qué papel juega la captación mediada por carrieren toda la planta o nivel del órgano no está claro. esimportante que el pH óptimo para la compañía mediadacaptación ('^ pH 5,0) se corresponde con el rango de pH enel apoplasto. Es posible, por tanto, que en comparacióna la difusión, transporte mediado por la absorción se utilizaproporcionalmente en mayor medida cuando la concentración de auxinaen el apoplasto son bajos o cuando el gradiente de pHa través de la membrana plasmática es pequeño. También esposible que la absorción a través de una compañía juega un papel importantecuando los rápidos cambios en la distribución de una hormonael tejido de la planta son necesarios, como, por ejemplo, duranterespuestas trópico cuando LAA debe ser redistribuida lateralmenteen un tiempo relativamente corto..

FIGURA 13-4 Carrier-mediada la captación de ABA. Cebada (Hordeum vulgare) las células en cultivo se incubaronen [^ H] - (+)-ABA (concentración final de 0 a 5,0 \ LM, 10 minutos de incubación) en un tampón a pH 4,5. Las tasas de usoradiomarcado de ABA se mide en la ausencia (absorción total) o en presencia deun gran exceso desin etiqueta ABA (50 | JLM). Carrier-mediada por la captación o la absorciónsaturable, se calcula restando elradiofármaco se recoge en la presencia de ABA sin etiqueta que el exceso detomar en su ausencia (el totalabsorción). De Perras et al. (1994).

FIGURA 13-5 Un modelo de transporte de auxina en la membrana plasmáticalas vesículas de los tejidos de disparar. Las vesículas se encuentran aisladas de tal manera queel pH y la eléctrica gradientes de potencial son similares a los decélulas intactas. Tales vesículas aisladas de calabacín pepo {Cucurhita)hipocotilos se puede mantener un gradiente de pH durante muchas horas. estosvesículas contienen un symport captación electrógenos, que transportaLAA junto con dos protones. La vesícula también se muestra con unportador de eflujo. Tanto influjo y acarreadores de salida son importantes para eltransporte polar de la LAA en las plantas (ver sección 4). De Lomax y otros(1995) con el permiso de Kluwer.

FIGURA 13-6 pH dependencia de la captación de transporte mediado porABA. Tenga en cuenta que la absorción saturable (es decir, la captación total deradiomarcadoABA menos captación en la presencia de un exceso de 100 veces mayor de no radiactivoABA) disminuye tanto a pH más bajos y más altos.De Perras et al (1994).

TRANSLOCACIONDE LAS HORMONASLas hormonas son transportadas a distancias cortas o largasen la planta, y el movimiento como se puede demostrarpor el uso de hormonas radiactivamente. paraejemplo, GA radiomarcada se aplica a los jóvenes, totalmentehojas expandidas se mueve hacia abajo el tronco y hastaápices de crecimiento disparar (Fig. 13-7). Marcado con tritio brasinoesteroides,como brassinólido y castaestrone,suministrado a las raíces de las plántulas de arroz se desplazan hacia lalos tallos y se recuperan en forma de metabolitos. etilenosolo entre las hormonas vegetales que se cree que no setransportados a largas distancias. Sin embargo, la inmediataprecursor de etileno, ACC, en el agua por medio de registros de arrozlas plantas se desplaza desde la raíz al tallo y seconvierte en etileno de las partes aéreas.3.1. Translocación de difusiónTodas las hormonas son trasladadas en distancias cortaspor difusión. De transporte, puede ocurrir en el apoplasto,es decir, es el sistema interconectado de las paredes celularesy los espacios intercelulares, o en el simplasto, es decir, elsistema interconectado de plasma unida a la membranalas células, incluyendo los plasmodesmos. de transporte de velocidadse rige por el gradiente de concentración y por el tamañoy la polaridad de la molécula transportada. En el simplasto,sin embargo, puede ser más compleja, siendo tambiénregulada por la compartimentación y / o desmotubuleen los plasmodesmos. Por lo general, la difusión de la velocidaden los sistemas de vida varía entre 2 y 5 mm • h ~ ^ ..

FIGURA 13-7 Movimiento de GA en las plantas de frijol. ^ ^ C-etiquetadosGA se aplica al nodo cotiledones de la planta, y sude distribución con el tiempo dentro de la planta fue seguido por autorradiografía.En esta técnica, las plantas se suministra con radiomarcado,después de los momentos apropiados, se presionan entre las hojas de borrarpapel y expuestos a la película de rayos X, que cuando se desarrollan espectáculosla ubicación del radiofármaco. (Arriba) autorradiogramas de las plantas endiferentes momentos después de la oferta de radiomarcado GA y (abajo)las mismas plantas fotografiadas con luz normal. La planta de la izquierdamuestra el sitio de aplicación de radiomarcado GA. Desde Wareing yPhillips (1981).

Una difusión activa en largas distancias, con la participaciónproteínas transportadoras, se muestra en la LAA. Este movimientoQueda terminantemente polar y se produce en una dirección en basipetalque viven las células del parénquima. En las secciones siguientes consideranel desplazamiento de larga distancia de las hormonas enxilema o floema primero antes de considerar la polartransporte de la LAA.

3.2. Transporte en el xilema o floemaTranslocación de las hormonas en el xilema o floemase produce a velocidades relativamente altas (en los tejidos del floema,por ejemplo, a 20 - 100 cm • h ~ ^), pero está sujeto a las

direccionalidad impuesta por el xilema o floemacorrientes de agua. Translocación en los tejidos del floema se produce a partir de"fuente de hundir", es decir, desde zonas de alta fotoasimiladosproducción, tales como totalmente expandido las hojas maduras,a zonas de alto consumo, como raíz en crecimientoy ápices de disparar, región cambial, las inflorescencias en desarrollo,jóvenes y las semillas inmaduras. translocación enxilema se produce principalmente a partir de las raíces hacia arriba enel rodaje.

3.2.1 Demostración de xilema o floema de transporteTranslocación en el xilema o floema se demuestramediante la obtención de xilema o savia del floema y el análisis dehormonas por inmunoensayo o GC-MS. Savia del xilema esobtenida cortando el tallo de una planta de raíces alrededor de 4 -6 cm por encima del nivel del suelo y recoger el exudado decortar el tronco (fig. 13-8A). Savia del floema por lo generalobtenidos por la realización de incisiones en la corteza y la recolección dela savia a través de un tubo capilar (fig. 13-8B). Por lo general, variosincisiones, uno encima del otro, están obligados a recogercantidades suficientes. Savia del floema recogidos de esta manerasuele ser contaminados por los desechos y solutos de corteo heridos células. Un método que da "más limpio" del floemaSAP utiliza los pulgones que se alimentan de los tejidos del floema. laáfidos insertan su parte de la boca, el estilete, a través dela corteza en elementos cribosos (Fig. 13-8E) y se alimentan delos fotoasimilados que se trasladaron. alimentaciónáfidos liberación "mielada" de sus extremos posteriores, quese pueden recoger en cantidades suficientes para el análisis (Fig.13-8C). Un pulgón de alimentación también pueden ser anestesiados por unasuave corriente de CO2 y el estilete de la corte por un fuertede afeitar o rayo láser. El extremo del corte del estilete continúaexudan savia tamiz del tubo durante muchas horas (fig. 13-8D)..

3.2.2. El análisis de exudado del floemaEl análisis de exudado del floema y de mielada tienereveló la presencia de varias hormonas, asícomo sus metabolitos. Por ejemplo, exudados del floemade 14 especies de ocho géneros de árboles, tales como Acer,Carpinus, Castanea, Quercus, Rohinia, Tilia, Sorbus, yAlnus, mostró la presencia de LAA, ABA, GA, y CK,así como varios de sus metabolitos por radioinmunoensayo.Los anticuerpos utilizados para GA o CK reconocidoGA3 / 7 o isopentenyladenine y zeatina, respectivamente.LAA y ABA, así como Gai, GA19, GA20 y seidentificados por GC-MS en la recogida de exudado del floemaa partir de plántulas de cero Pharbitis. GA varias, tanto deprimeros 13-hidroxilación y de principios de nonhydroxylation

las vías, fueron identificados por GC-MS en el floemasavia de Ricinus communis (ricino), Lupinus albus(lupino blanco), y Vigna unguiculata (caupí). zeatinay dihydrozeatin fueron identificados por GC-MS en elsavia del floema de lupino blanco. ABA y sus metabolitos,phaseic ácido (PA) y el ácido dihydrophaseic (DPA),fueron reportados en la savia del floema de ricinoy lupino blanco, así como los ejes de la inflorescenciaLa yuca y el Cocos nucifera (cocotero). El ácido jasmónico esTambién se sabe que ser trasladadas a grandes distancias,y se supone que se desplaza por el floemacorriente, sino una demostración inequívoca de la presenciade JA en el floema exudado o melaza no hase ha hecho. Brasinoesteroides se han identificado enla región cambial de pino {Pinus sylvestris), pero no está claro si son transportados en el floema tejido.

. FIGURA 13-8 Colección de xilema y floema savia. (A) del xilema savia se recogecortando el tallo y la recolección de

la savia que emana del tronco cortado bajo la presión de la raíz. (B) savia del floema pueden ser recogidos por hacer pequeñosincisiones en la corteza con un cuchillo afilado, la savia que exudan pueden ser recogidos por un tubo capilar. (C-E) Los áfidos de alimentaciónde fotoasimilados, que se desplaza en los elementos cribosos. Ellos usan elmaterial nitrogenado en la cribatubo de SAP para su nutrición, pero la autorización de la solución azucarada, comomelaza, que se pueden recoger. (C) Un pulgón esvisto alimentarse de la corteza de un árbol (parte de la rama aparece en la parte superior). (D) El cuerpo del pulgón se haextirpar quirúrgicamente después de la anestesia, dejando el extremo del corte del estilete todavía en su lugar en la corteza y exudaciónde mielada. (E) El extremo del estilete dentro de la luz de un elemento de malla en el interior de la corteza. De Zimmermann yBrown (1971).

3.2.3. Análisis ofXylem SapABA ha sido reportado en la savia del xilema de varioslas plantas [por ejemplo, el ricino, el girasol (Helianthus annuus),maíz (Zea mays), el pino {Pinus sylvestris), pino {Piceasitchensis)]. ABA se sabe que median varios, aunqueno todas, las respuestas de defensa en plantas frente al estrés de agua(Ver capítulo 16). Porque las raíces son el órgano primera plantapara detectar un déficit de agua en el suelo, se ha postuladoque un aumento en el nivel de ABA en la savia del xilema es elseñal de que se lleve a partir de las raíces hacia arriba a las partes aéreasy desencadena respuestas de protección, tales como el cierre deestomas. Puntas de las raíces son uno de los principales sitios de citoquininasíntesis de las plantas. De las raíces, las citoquininas se translocanal alza de tallo y hojas. Por lo tanto, hay muchosinformes de su presencia en la savia del xilema. Las citoquininas principalesidentificados en la savia del xilema, tanto por inmunoensayosy GC-MS, se ribósido zeatina y isopentenyladenine.En contraste con la ABA y citoquininas, hay pocainformación sobre el transporte de LAA, Gas, jasmónicoácido, o brasinoesteroides en el flujo de xilema, yNo está claro si ese transporte se produce. Sin embargo,giberelinas y brasinoesteroides, suministrados a través de las raíces,son recogidas y trasladadas a parecer aérealas partes.3.2.4. Las concentraciones de hormonas en el xilema oSavia del floemaLos estudios sobre el desplazamiento de las hormonas en el xilema ofloema son relativamente pocos, y hay muy poca informaciónsobre el importe total ni de las proporciones de la librehormonas vs metabolitos que son trasladadas. En unaestudio, sin los niveles de ALA en el exudado del floema seencontrado entre el 40 y 520nmol litros • "^, sino que

También se informó de que las concentraciones de libre yLAA conjugado varió con el grado de desarrollo dede la planta. Las concentraciones de Gai, GA19, GA20 yen el exudado de floema de las plantas Pharbites nula seinformó a aumentar en las plántulas que se había inducidoa florecer. ABA concentraciones en la savia del xilema de wellwateredplantas de maíz y el girasol son alrededor de 10 nm;cantidades que pueden elevarse de uno a dos órdenes de magnitudmediante el secado suave de la tierra. CK concentracionesen la savia del xilema también varían de acuerdo con las necesidades fisiológicas oestado de desarrollo de la planta. Por ejemplo, la decapitacióndel ápice del brote causa un aumento en la concentración de CKen el flujo de xilema. Un aumento de la CKconcentración que se observa con el inicio defloración, seguido por una disminución en el inicio desenescencia de la planta entera.