S

UNIVERSIDAD DE PANAMÀ

FACULTAD DE MEDICINA ESCUELA DE TECNOLOGIA MÉDICA

MICROBIOLOGIA II

ALBÚM VIRTUAL

S

PROFESORES Dra. EVELIA QUIROZ Dra. DORA DE MORENO Dra. MARKELA DE QUINZADA DR. FRANCISCO RIVAS MG. CARMEN ESPINO MG. VALENTIN ROJAS LIC.ALEXA PRISCILLA

ESTUDIANTES

LUISA PINEDA 8- 863-1423 ANDREA ORTIZ 9-731-873

ERODITA MORÀN 8-845-1341 EVELYN MADRID 2-726-2246

KIZMETT MARTINEZ 2-726-850 JULIA POLO 8-860-149

JENILEE PINILLA 9-733-1401 GLADYS MORALES 8-858-581

MARDELYS PITTY 4-757-1841

BACTERIOLOGÌA MICROORGANISMOS IMPLICADOS EN INFECCIONES NOSOCOMIALES Las infecciones nosocomiales son aquellas que se adquieren dentro del hospital y que no tienen relación directa con la dolencia que lo llevó a una hospitalización.

LABORATORIO #2 BACILOS GRAM POSITIVO ESPORULADOS Y NO ESPORULADOS AEROBIOS DEIMPORTANCIA MEDICA

Bacillus cereus •  Bacilo Gram positivo, esporulado, aerobio o anaerobio facultativo, móvil. •  La espora es ovoidea, central y no deformante. •  Hidroliza la lecitina de la yema del huevo y no fermenta el manitol. •  Produce dos tipos de toxiinfecciones alimentarias: la forma diarreica y la forma emética •  Móvil •  Gamma hemolítico

  Bacillus megaterium •  Bacteria Gram positivos, formadores de endosporas, bacteria con forma de bastón.  •  Se considera aeróbico.  •  Se encuentra en el suelo y se considera un saprofito.

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Bacillus anthracis •  Es un Gram-positivo , inmóviles, endospora formador, en forma de vara bacteria. •  Causante del Ántrax

Inoculación de ratón de laboratorio

Bacillus anthracis Hígado

  Bacillus anthracis

Pulmón

Bacillus anthracis Riñón   •  Listeria monocytogenes •  Bacilo Gram positivo •  Beta hemolítico •  Crecimiento a temperatura ambiente •  Prueba de motilidad en SIM: forma de paraguas

Listeria monocytogenes Colonia Bacillus anthracis - Colonias

•  Encapsulado •  Prueba de motilidad en SIM: negativo •  Altamente virulento con aplicaciones en armas biológicas y bioterrorismo •  Gamma hemolítico

LABORATORIO # 3: CONTROL DE CALIDAD EN MICROBIOLOGIA Y CONSERVACION DE CEPAS DE REFERENCIA EN EL LABORATORIO

Proteusspp. (Prueba-)  -  Medio  mal  inoculado,  o  

contaminado.  Se  debió  insertar  la  aguja  en  el  centro  para  que  se  diera  la  reacción  alcalina  àK/AH2S (Prueba +)

A/Ag  Klebsiella pneumoniae  

  CITRATO DE SIMMON’S

Klebsiella pneumoniae  

Proteusspp  

Mc CONKEY

Klebsiella pneumoniae  Lactosa (+) - Color rosa      

Pseudomona aeruginosa  Lactosa (-) – Color verde  

Staphylococcus aureus  G (+) – No debió crecer  

Klebsiella pneumoniae  G (-)  

FENILALANINA

Klebsiella pneumoniae  

Proteusspp.  

Pseudomona aeruginosa + aceite mineral, que cubra el pico de flauta.  

CONSERVACION DE CEPAS AGAR CORAZÓN

MICOLOGÍA Levaduras de importancia clínica Hongos de crecimiento principalmente unicelular capaces de causar o contribuir en la producción de enfermedades de seres humanos y animales.

Candida albicans

Candida  albicans      (Blastosporas)  

   

Candida  albicans    (Cul=vo  en  Sabourand)    

   

Candida  albicans    (Levaduras  en  =nción  de  Gram)  

   

   

Candida  albicans      túbulo  germinal  en  medio  de  hagar,  harina  de  maíz    

   

Cryptococcus neoformans

Tinción de tinta china

Cultivo de Cryptococcus neoformans

Colonias de apariencia mucoide DERMATOPHITOS Trichophyton rubrum

Microconidias en forma de lágrimas al lado de las hifas

Trichophyton mentagrophytes

•  Microconidias esfericas en racimos •  Hifas en espiral

Trichophyton mentagrophytes en sab. Colonias de crecimiento rápido, de centro granuloso color blanco a beige y bordes bellosos. Reverso incoloro a chocolate. El t. ment. Var interdigitale colonias algodonosas.

Microsporum canis

Abudantes macroconidias de pared gruesa y equinulada con la extremidad prominente y a menudo curvada.

Colonias de crecimiento moderadamente rápido, vellosas, color amarillo naranja. Reverso

incoloro a a naranja.

Abundantes macroconidias de pared fina y equinulada, de forma

apepinada muy irregular y extremidad redondeada.

  Colonias de crecimiento rápido, de aspecto granular, en el centro de color canela y bordes vellosos blancos, reverso incoloro a crema.

Epidermophyton floccosum

Macroconidias de pared fina con forma de dedos

Estos hongos se caracterizan por la producción de esporas que son diseminadas por el viento y a partir del hombre o los animales llegan a los reservorios antes mencionados. Las esporas son resistentes a los cambios de temperatura, humedad, calor y desecación, su período de incubación se desconoce. Cladiosporum Conidióforos cortos y pigmentados, con formación acropétala de conidios (sólo es terminal) y cada conidio produce al subsecuente por gemación, de manera que forman cadenas. Las cadenas pueden ser cortas, de 3 a 4 esporas y son muy ramificados y con conidios elípticos de tamaño constante.

DEMATIÁCEOS

T í t u l o :   C u l = v o   d e  Cladiosporum   spp.   Agar  Sabouraud.   Desarro l lo  promedio  15  -­‐  21  días.    

Desc r ipc ión :   Co lon ia s  p u l v e r u l e n t a s ,  a t e r c i o p e l a d a s   o  algodonosas,   de   color   gris  verdoso,   verde   oliva   a  negro.  

Título:   Morfología   microscópica   a   par=r   de   cul=vo   de  Cladosporium  herbarum.  Azul  de  lactofenol,  40x.  

Descripción:   Hifas   gruesas,   septadas,   dema=áceas.   Células  conidiógenas   indiferenciadas.   Conidias   dema=áceas,   en  cadenas,  y  con  cicatrices  café  oscuro.  

Curvularia: Es un patógeno de plantas con gran importancia en los trópicos. En humanos, causa queratitis y sinusitis. Hay varios casos descritos de infección profunda en pacientes inmunodeprimidos.

Las  conidias  son  curvadas,  20-­‐32  x  9-­‐15  μm  de  diámetro,  con  3  tabiques;  la  penúl=ma  célula  es  asimétrica  y  más  oscura  que  las  otras.  

Título:  Cul=vo  de  Curvularia  spp.  Agar  Sabouraud.  Desarrollo  promedio  5  días.  Descripción:  Colonias  algodonosas,  de  color  blanco  a  gris  que  se  torna  verde  oliva,  café  a  negro  a  medida  que  madura.        

Células fumagoides Ta m b i é n l l a m a d o esclerotes de Medlar, s o n e s t r u c t u r a s patognómicas para un hongo dematiáceo en el examen directo de la muestra clínica con cromoblastomicosis. Se observan en grupos de 2 o más; son esféricas u ovaladas, miden de 4 a 8 um de diámetro, son d e c o l o r c a f é amarillento, presentan membrana gruesa y en ocasiones se observan divisiones o filamentos; se comparan a granos de café o monedas de cobre.

DIMÓRFICOS Algunos hongos y especialmente, las especies patógenas, muestran dimorfismo, es decir, dos formas de crecimiento. Estos hongos pueden crecer como moho o como levadura. A menudo, este dimorfismo depende de la temperatura de incubación: a 37ºC el hongo es levaduriforme mientras que a 25ºC es filamentoso.

Histoplasma capsulatum var. capsulatum Enfermedad aguda, subaguda o crónica, producida por un hongo dimórfico sexuado que afecta el sistema retículo endotelial. Vive en tierras ricas en nitrógeno, húmedas, suelos fértiles, temperatura promedio 15 a 25 ºC

Título:  Morfología   microscópica   a   par=r   de   un   cul=vo   en  fase  miceliar   de  Histoplasma   capsulatum  var.   capsulatum.  Azul  __de  lactofenol,  40x.  

 

 

Descripción:   Hifas   delgadas,   septadas,   hialinas,  macroconidias   tuberculadas,   redondeadas,   de   doble  membrana  y  microconidias  piriformes  adheridas  a  la  hifa.  

Título:  Examen  directo  Histoplasmosis  (sangre  periférica).  Giemsa.  100x.  

Descripción:   Levaduras  al   interior  de   los   leucocitos,  de  1  a  2  µm,  unigemantes,  rodeadas  de  un  halo  transparente.  

Título:  Examen  directo  Histoplasmosis  (ganglio).  Wright.  100x.  

Descripción:   Levaduras   intracelulares   de   1   a   2   µm,  unigemantes,  con  un  halo  transparente.  

Blastomyces dermatitidis: Micosis sistémica granulomatosa y supurativa causada por Blastomyces dermatitidis, Inhalación de esporas produce infección pulmonar. Lesiones en piel, huesos, articulaciones, aparato genitourinario Predominio en varones 9:1. Mujeres susceptibles en menopausia o embarazos (cambios hormonales) 30-60 años.

Levaduras grandes, 8-15 μm. La gemación tiene una base ancha y a menudo se ve un tabique que separa las células.

HONGOS CONTAMINANTES COMUNES

CARACTERISTICAS GENERALES Las esporas y fragmentos miceliales de muchas especies y géneros de mohos se encuentran ampliamente distribuidos en el ambiente y constituyen una porción significativa de la materia encontrada en el aire; de esta forma pueden ser alergénicos al inhalarlos, como ocurre en el caso de polen y de los insectos. También pueden causar patologías importante en pacientes inmunocomprometidos tales como los diabéticos, cancerosos, con SIDA entre otros.

Penicilium spp.

Colonias de crecimiento rápido y abundante, de aspecto variable, afelpado, algodonoso o pulverizado, de colores diversos que van del blanco, azul-verdoso a verde olivo, etc.

Microscopiacamente produce micelio vegetativo con hifas septadas coloreadas o hialinas, con un micelio reproductor diferenciado a partir de hifas vegetativas, simetricas, que dan lugar a las ramas en cuyos extremos se tienen los esterigmaso fiálides, los cuales sostienen las conidias dispuestas en cadena.

Aspergillus spp.

Colonias de crecimiento rápido y aspecto variable, afelpado, pulvurulento o algodonoso, de colores diversos que van del blanco al amarillo pálido o cetrino, del rojo vinoso o marrón oscuro, de olor característico a “moho”

Microscopicamente los conidióforos son fácilmente distinguibles del micelio vegetativo, delongitud variable terminando en una vesicula globosa o clavada, rodeada parcial o totalmente, con sus conidias globosas o elipsoidales, hialinas o  

Cladosporium spp.

Colonia de crecimiento abundante o circunscrito a una pequeña área de aspecto afelpado o algodonoso, de color verde al verde negruzco.

Hifas vegetativas oscuras septadas, con conidióforo simple o ramificado produciendo en el ápice conidias, con o sin septos elipsoidales o limoniformes, coloreadas.

Fusarium spp.

Colonias de crecimiento rápido y abundante generalmente de aspecto algodonoso, de diversos colores que van del blanco, rosado, salmón o violeta cubriendo toda la superficie del medio.

Conidióforos simples o ramificados; s o l i t a r i o s o a g r u p a d o s f o r m a n d o esporodoquios, conidias apicales simples (microconidia) o septadas (macroconidias) típicas de bordes curvados ( apariencia de media luna), con ápices obtusos o agudos.

Rhizopus spp.

Presenta micelio vegetativo formado por hifas sin septos ( cenocíticas) hialinas o ligeramente coloreadas a partir de las cuales se diferencian los conidióforos (esporangióforos) sobre un rizoide típico que le da una apariencia al hongo de los tallos estoloníferos de la “fresa”.

Scopulariopsis spp. Colonias de color chocolatoso

Conidióforos ramificados, las esporas nacen del conidióforo y se desprenden de la base hacia el ápice en forma distal.  

 Mucor spp.   Espongióforos solitarios y sin rizoides

VIROLOGÍA Inclusiones virales

OJO  DE  BUHO  

En  infecciones  por  CMV  se  observaran  células  más  grandes  que  las  normales,  con   inc lusiones   intranucleares  basoGlicas,   rodeada   de   un   halo   claro  que   se   exJende   a   la   membrana  nuclear.    

   

CUERPOS  DE  COWDRI  

Inclusiones  causada  por  miembros  de  la    familia  

Herpes  viridae  

CUERPOS  DE  COWDRI  

   

OJO  DE  BUHO  Y  CUERPOS  DE  COWDRI  

COILOCITOS Inclusión viral causada por virus papiloma humano

Pruebas Rápidas Diagnósticas Hepatitis b à detección de Anticuerpos

Kit de hepatitis b Inserto para hepatitis b Procedimiento para la prueba

Resultados

Prueba rápida VIH à detección de Antígenos

Prueba rápida virus sincitial respiratorio (RSV)àdetección de Antígeno

Prueba rápida para virus influenzaà detección de Antígenos

Prueba rápida para rotavirus

Prueba rápida para dengue dúo detección Antígeno- Anticuerpo

Métodos para cultivar células Es un método mediante el que células se conservan las propiedades bioquímicas y físicas donde puedan cultivarse en condiciones controladas.

1.  Macar la cámara de aire de los embriones de 9 a 11 días. 2.  Trabajar en la cámara de flujo. Limpiar todo el área de trabajo, el huevo

con alcohol al 70%, usar guantes, tratar de no hablar durante el experimento, para así mantener toda la asepsia posible.

 3. Romper el cascarón con mucho cuidado procurando sacar el embrión sin dañarlo y ponerlos en el plato petri.

4. Separar el embrión de las membranas y posteriormente quitarle las partes como la cabeza, alas, patas y órganos, es decir células que ya estén diferenciadas

5. Lavar lo obtenido con solución salina, macerar previniendo no perder tejido y pasarlo a una jeringa.

6. Se coloca en un portaobjeto una gota de la solución y se observa la cantidad de fibroblasto que hay, para así poder agregarle el medio de cultivo (RPMI) necesario. Dependiendo de la cantidad de células.

7 Luego pasamos a unas botellas para cultivo las células con el medio de cultivo y el indicador (rojo fenol). Se deja incubando a 37°C, procurando observar su crecimiento todos los días para ver si se forma la monocapa de células y así poder hacer el subcultivo.

7 Luego pasamos a unas botellas para cultivo las células con el medio de cultivo y el indicador (rojo fenol). Se deja incubando a 37°C, procurando observar su crecimiento todos los días para ver si se forma la monocapa de células y así poder hacer el subcultivo.

8. Después de dos semanas se observo el crecimiento de la monocapa de células, pero el medio se volvió básico y también se estaba terminando por lo cual se le puso más. Para poder remover las células se le puso tripsina, dando golpes energéticos y así pasar a otra botella de cultivo.

NOTA: Las imágenes de subcultivo fueron adquiridas de otra mesa, ya que nuestro cultivo se contamino con hongos.

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