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Patogenesi molecolare dellaMielofibrosi Primaria
Mielofibrosi primaria
WHO 2008:
Primary myelofibrosis (PMF) is a clonal myeloproliferative neoplasm (MPN) characterized by a proliferation of predominantly megakaryocytes and granulocytes in the bone marrow that in fully developed disease is associated with reactive deposition of fibrous connective tissue and with extramedullary haematopoiesis
Il cromosoma Philadelphianelle malattie mieloproliferative
t (9;22) q(34;11)
PHILADELPHIA POSITIVE:
• LEUCEMIA MIELOIDE CRONICA (CML)
PHILADELPHIA NEGATIVE:
• MIELOFIBROSI PRIMARIA (PMF)
• POLICITEMIA VERA (PV)
• TROMBOCITEMIA ESSENZIALE (ET)
• LEUCEMIA CRONICA NEUTROFILICA (CNL)
• LEUCEMIA CRONICA EOSINOFILICA , NAS (CEL)
• MASTOCITOSI (MCD)
• SINDROME IPERESOINOFILA (HES)
• NEOPLASIE MIELOPROFIRATIVE NON CLASSIFICABILI (MPN‐u)
Forme Classiche
Il cromosoma Philadelphianella classificazione delle MPN
Diagnosi di PMF
Integrazione dati :
• Epidemiologici
• Clinici
• Immunofenotipici
• Biologia molecolare
Mielofibrosi primariaEpidemiologia
• Età mediana alla diagnosi: 60 aa
• Più del 90% delle diagnosi è fatta dopo i 40 aa
• Infrequente, ma possibile anche nei bambini
• Malattia abbastanza rara : 0,3‐1,5/100.000 anno
• Mediana di sopravvivenza: 5 anni
• Le cause di morte includono la trasformazione leucemica
Mielofibrosi primariaCaratteristiche cliniche
• Progressiva fibrosi midollare, osteosclerosi, angiogenesi
• Ematopoiesi extramidollare
• Massiva splenomegalia
• Eritropoiesi inefficace
• Iperplasia mieloide e megacariocitaria
• Presenza di elementi immaturi della linea granulocitaria ed eritroblastica nel sangue periferico (dacriociti)
Mielofibrosi primariaCaratteristiche immunofenotipiche
Drssa Sabattini
Tecniche utilizzate: Citogenetica convenzionale, SNPs arrayprofiling
Le alterazioni più comuni sono:
• del(13)(q12;q22)• del(20)(q11;q13)• trisomia 8• parziale trisomia 1q • aUPD chr9
Mielofibrosi primariaCaratteristiche citogenetiche
PLoS One. 2011
SNPs array karyotyping reveals a novel recurrent 20p13 amplification in primary myelofibrosisVisani G, Sapienza MR, Isidori A, Tripodo C, Laginestra MA, Righi S, Sagramoso Sacchetti CA, Gazzola A, Mannu C, Rossi M, De Nictolis M, Valentini M, Donati M, Emiliani R, Alesiani F, Paolini S, Finelli C, Pileri SA, Piccaluga PP.
SNPs array profiling della PMF
Mielofibrosi primariaCaratteristiche genetiche
Marcatori diagnostici:
JAK2V617F (60%)
MPLW515K/L (5%)
Presenti anche nella policitemia vera e trombocitemia essenziale …
1) Ruolo centrale di JAK2
2) Alterazioni epigenetiche
3) Predisposizione genetica
Complessità genetica ed epigenetica nella patogenesi della mielofibrosi primaria
1) Ruolo centrale JAK2
ASH – American Society of Hematology
La proteina JAK2 è un enzima tirosin‐chinasi associato ai recettori dell’eritropoietina e della trombopoietina
Il legame ligando‐recettore attiva la proteina JAK2
L’enzima JAK2 attivato, attiva i pathway delle MAPK e delle proteine STAT, promuovendo la proliferazione e il differenziamento cellulare
La mutazione JAK2V617F porta ad una attivazione costituzionale della proteina JAK2
JAK2V617F fosforila SOCS3 e sfugge a regolazione negativa
JAK2V617FNORMAL
JAK2V617F fosforila la metiltransferasi PRMT5 con conseguente deregolazione trascrizionale
NORMAL JAK2V617F
Incidenza di JAK2V617F
Meccanismi alternativi a JAK2
Meccanismi alternativi di attivazione di JAK2
Trattamento della mielofibrosi primaria e delle neoplasie mieloproliferative classiche mediante inibitori di JAK2
La mutazione V617F in JAK2 è un eventosecondario
• La deregolazione del signalling di JAK2 e` un evento chiave nellapatogenesi delle MPN
MA ….
• L`acquisizione di JAK2V617 sembra essere un evento secondario
– Studi di clonalità
– Perdita di JAK2V617 durante la progressione della malattia nel 50% deicasi
Conclusioni JAK2V617F
• JAK2 e` una tirosin‐chinasi essenziale, legata a EpoR, TpoR e ad altri pathway
• JAK2V617F e` deregolato e costitutivamente attivo
• JAK2V617F fosforila SOCS3 e PRMT5, sfuggendo a meccanismi di regolazione negativa e alterando l ’ espressione genica, rispettivamente
• Il signalling di JAK2 puo essere deregolato da mutazioni a monte(es. MPL) e a valle (es. SH2B3/LNK)
• Anche se JAK2 ha un ruolo centrale nelle MPN la mutazioneJAK2V617F e` un evento secondario
• JAK2 e` un target terapeutico delle MPN
2) Alterazioni epigenetiche
Modificazioni epigenetiche nella mielofibrosiprimariaMODIFICAZIONI EPIGENETICHE: modificazioni dell’espressione genica ma non della sequenza di DNA
Alterazioni genetiche ma anche epigenetichenella mielofibrosi primaria
Regolatori epigenetici mutati nella mielofibrosiprimaria
• Diversi modulatori epigenetici sono mutati nelle MPN
• Non e` ancora chiara l’interazione fra di loro e con JAK2
• Le mutazioni in questione comportano per lo piu perdita difunzione e sono difficili target terapeutici
3) Predisposizione genetica
Predisposizione genetica della mielofibrosiprimaria
L’aplotipo (46/1 or GGCC) di JAK2 correla positivamente con la mutazione V617F
Conclusione
Maria Rosaria Sapienza, PhD
Molecular Pathology Laboratory,Unit of Hematopathology,Department of Hematology and Oncological Sciences "L. and A. Seràgnoli”
e‐mail: mariarosaria.sapienza@gmail.com
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