anticorpos irregulares - significado laboratorial e clínico

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Formação interna Serviço de Imuno-hemoterapia – 15/05/2012 Margarete Cardoso Anticorpos Irregulares – significado laboratorial e clínico

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Page 1: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Formação interna Serviço de Imuno-hemoterapia – 15/05/2012Margarete Cardoso

Anticorpos Irregulares –significado laboratorial

e clínico

Page 2: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

2

Objectivos

① Caracterizar as diferentes técnicas de identificação de anticorpos

envolvidas em estudos imuno-hematológicos.

② Exemplificar com casos práticos.

③ Dotar os Técnicos de Análises Clínicas do Serviço de Imuno-

hemoterapia de competências técnicas no âmbito da realização dos

estudos envolvendo anticorpos, interpretação e validação dos

resultados.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 3: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Grupo AB0 e RhD Fenótipo Rh e Kell PAI

Resultado +

Resultado -

TADIdentificação Alo-Ac

Irregular

Coombs Monoespecífico

Resultado + Resultado -

IgGFração do

complemento

Fenotipagem Alargada

Titulação (em mulheres grávidas)

Eluado

Reactivo Não Reactivo

Identificação Auto-Ac

Page 4: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Alguns Conceitos Básicos

Antigénio

Substância capaz de desencadear uma resposta imunitária específica

Qualquer molécula que pode ligar-se especificamente a um anticorpo

O seu nome deriva da sua capacidade de gerar anticorpos

Epítope ou Determinante Antigénico

Parte do antigénio a que o anticorpo se liga

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 5: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Alguns Conceitos Básicos

Anticorpo

Proteína (imunoglobulina) produzida pelo sistema imunitário em resposta

ao estímulo antigénico

Parátope

Parte do anticorpo que se liga ao epítope

Estrutura esquemática da molécula do anticorpo.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 6: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Classificação dos Anticorpos

Modo de Produção

Anticorpos “Naturais”

Ocorrem sem nenhuma estimulação evidente (transfusão ou gravidez).

Anticorpos Imunes

Produzidos após exposição do sistema imunológico a gv estranhos por transfusão

ou gravidez.

O termo “natural” serve para distinguir os ac´s do sistema AB0 dos ac´s dos

outros sistemas de grupo sanguíneo que requerem a exposição a eritrócitos

estranhos.

Anticorpos Irregulares – significado laboratorial e clínico

Page 7: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Classificação dos Anticorpos

Efeito da Temperatura

Anticorpos Frios ou Crioglobulinas

Reagem melhor à TA ou a baixas temperaturas (4ºC)

Anticorpos Quentes

Reagem melhor a 37ºC

Anticorpos Irregulares – significado laboratorial e clínico

Page 8: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Classificação dos Anticorpos

Força Iónica (Meio de Reacção)

Meio Salino – elevada força iónica.

Meio LISS (Low Ionic Strengh Saline) – meio de baixa força iónica que

contribui para a diminuição da repulsão interglobular aumentado a sensibilidade

da reacção e diminuição do tempo de incubação.

A diminuição da concentração de Na+ e Cl- no sistema soro - gv aumenta a

velocidade de ligação ag - ac e a quantidade

de ac que se liga.

Fig do lado esquerdo: meio NaCl

Fig do lado direito: meio LISS

Anticorpos Irregulares – significado laboratorial e clínico

Page 9: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Classificação dos Anticorpos

Classe de Imunoglobulina

Tipo IgM

Ex: ac anti-A. Pentâmeros de elevado peso molecular capazes de aglutinar as

células em meio salino sendo designados de Anticorpos Aglutinantes.

Tipo IgG

Ex: ac anti-D. Monómeros de baixo peso molecular, não são capazes de aglutinar

as hemácias em meio NaCl sendo necessário a adição de substâncias ao meio

para que ocorra a aglutinação. São designados de Anticorpos Não Aglutinantes.

Anticorpos Irregulares – significado laboratorial e clínico

Page 10: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Tipo de Ac e Meio de Reacção

Anticorpos Irregulares – significado laboratorial e clínico

Page 11: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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PESQUISA DE ANTICORPOS

IRREGULARES

Anticorpos Irregulares – significado laboratorial e clínico

Page 12: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Definição

Detecção de anticorpos anti-eritrocitários no soro ou plasma em estudo

por sensibilização dos glóbulos vermelhos in vitro.

Transfusão

Gravidez

Contacto com material imunogénico (bactérias e parasitas)

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

P.A.I.

Page 13: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Princípio do Teste

A AGH actua como ponte mantendo os gv sensibilizados ligados uns aos

outros.

Se a amostra conter ac´s contra os ag´s presentes nos gv, a AGH permite

a visualização da reacção de aglutinação.

Aglutinação Indirecta

(necessário incubar o soro contendo os ac´s

com os gv para promover a ligação entre eles).

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

P.A.I.

Page 14: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

14

Interesse Clínico

Rastreio laboratorial aos dadores de sangue

(detectar eventuais alo-imunizações)

Teste pré-transfusional aos doentes candidatos a transfusões de sangue

e/ou componentes (evitar reacções transfusionais)

Teste pré-natal (detectar uma possível AHRN)

Estudo de reacções transfusionais hemolíticas.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

P.A.I.

Page 15: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

15

Importância na Prática Laboratorial

A decisão de transfundir ou não um paciente com um alo-ac deve ser

baseada no significado clínico desse ac.

Os ac´s detectados devem ser identificados

(seleccionar uma unidade de sangue Negativa para o ag correspondente).

A prova de compatibilidade é efectuada antes da transfusão

(ganho de tempo para a identificação de qualquer ac e a localização de unidades

compatíveis que careçam do ag correspondente).

Contribui para o diagnóstico e monitorização da AHRN.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

P.A.I.

Page 16: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Anticorpos Clinicamente Significativos

Reagem a 37ºC

Reagem no teste da antiglobulina humana

Diminuição da sobrevida dos GVs

Reacção Transfusional Hemolítica

Anemia Hemolítica Auto-Imune

Anemia Hemolítica do Recém-Nascido

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

P.A.I.

Page 17: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

17

Resultados – P.A.I.Positiva

Reacção de aglutinação com todas as células comerciais. Noutros casos

pode verificar-se apenas resultados positivos com 1 ou 2 células

comerciais, dependendo do ac envolvido e da constituição antigénica das

células.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

P.A.I.

Page 18: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

18

Resultados – P.A.I.Negativa com Fibrina

Resíduos de fibrina na suspensão dos eritrócitos

podem reter os gv´s não aglutinados, formando

uma linha cor de rosa fina à superfície do gel

enquanto a maior parte dos eritrócitos migra

para o fundo da coluna após centrifugação.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

P.A.I.

Page 19: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Causas de FALSOS Resultados

Tempo/Temperatura/Centrifugação inadequados

Leitura incorrecta dos resultados

Erro no registo dos resultados

Troca de células do painel

Perda de ag´s da superfície eritrocitária (por armazenamento prolongado ou a

más condições) (Falso -)

Soro ou plasma em estudo não adicionado (Falso -)

Contaminação de uma coluna para outra do card (Falso +)

GV com TAD + (Falso +)

Presença de fibrina (Falso +)

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

P.A.I.

Page 20: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

20

P.A.I. POSITIVA ...

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

P.A.I.

Page 21: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

21

IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS

IRREGULARES

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 22: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Definição

Determinação da especificidade do(s) anticorpo(s) envolvido(s) detectado na

P.A.I.

Princípio da Técnica

Soro ou plasma em estudo é testado com um grupo de células de constituição

antigénica conhecida.

Suspensões celulares comercialmente preparadas a partir de amostras de

dadores que são fenotipados para a maioria dos ag´s.

As células são sempre do Grupo 0 (as reacções não sejam mascaradas pela

incompatibilidade AB0 entre as células comerciais e o grupo da amostra em estudo).

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES

Page 23: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Interesse Clínico

Teste pré-transfusional aos doentes candidatos a transfusões de sangue

e/ou componentes

(evitar reacções transfusionais e fornecer transfusões de GVs compatíveis com

o receptor)

Avaliação da anemia hemolítica do RN

Diagnóstico e tratamento da anemia hemolítica auto-imune

Estudo de reacções transfusionais hemolíticas

Condiciona a utilização dos diferentes componentes sanguíneos.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES

Page 24: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Meio Enzimático

Enzimas mais frequentemente utilizadas:

PAPAÍNA (tratamento dos gv antes da sua utilização)

BROMELINA (reagente aditivo)

Modo de Actuação Enzimas

Modificam os antigénios eritrocitários melhorando a reactividade de

certos sistemas antigénio/anticorpo.

A presença de determinantes antigénicos residuais são exacerbadas.

Alguns antigénios são destruídos ou enfraquecidos pelas enzimas:

sistemas MNSs e Fy.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES

Page 25: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

25

IDENTIFICADA A ESPECIFICIDADE DO AC ...

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

IDENTIFICAÇÃO DE ANTICORPOS IRREGULARES

Page 26: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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TITULAÇÃO DE ANTICORPOS

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 27: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Definição

Determinar a quantidade de anticorpo existente numa dada amostra de

soro ou plasma através da realização de uma série de diluições sucessivas

da amostra em estudo.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TITULAÇÃO DE ANTICORPOS

Page 28: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

28

Interesse Clínico

Seguimento de grávidas com anticorpos que podem causar a anemia

hemolítica do feto/RN

Seguimento de pacientes imunizados após transfusão

Seguimento de pacientes com auto-anticorpos.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TITULAÇÃO DE ANTICORPOS

Page 29: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Importância na Prática Transfusional

A monitorização com títulos seriados ao longo da gestação permite uma

estimativa da gravidade potencial da AH in utero. Uma rápida elevação no título

de um ac durante a gestação pode indicar que o feto está afectado.

Consoante o ac envolvido, a monitorização do título do ac pode levar a

procedimentos diagnósticos adicionais, durante a gestação.

Nas anemias hemolíticas auto-imunes é particularmente importante em

termos de avaliação da eficácia da terapêutica dando indicação se o título do ac

está ou não a baixar com a terapêutica prescrita.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TITULAÇÃO DE ANTICORPOS

Page 30: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

30

Princípio

Efectuadas diluições através da adição a um determinado volume de

diluente, igual volume de soro transferindo igual volume da mistura ao

volume seguinte de diluente e assim por diante.

Quando são identificados mais que um ac de importância clínica

conhecida, a titulação deve ser feita em separado.

Cada diluição do soro é testada contra as células apropriadas

(gv que possuem o ag correspondente ao ac identificado que se vai titular).

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TITULAÇÃO DE ANTICORPOS

Page 31: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

31

Resultados - Exemplo

O título de um ac é dado pelo inverso da diluição mais elevada onde se

observa aglutinação.

Exemplo de uma titulação efectuada a uma mulher com história de imunização

pela gravidez com ac anti-D. No caso em particular o título do ac é igual a 8.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TITULAÇÃO DE ANTICORPOS

Page 32: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

32

Considerações Gerais

Fundamental técnica de pipetagem correcta (usar sempre pontas de pipetas limpas

para cada diluição)

Quanto maior for o volume da diluição, menor é o erro

As diluições devem ser testadas o mais rapidamente possível

Quando são identificados mais que um ac, a titulação deve ser feita em

separado

Quando for identificado o ac anti-D, escolher célula do painel com o fenótipo

CCDee ou ccDEE (ag D homozigótico). Na célula com o fenótipo ccDee,

normalmente o ag D é heterozigótico.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TITULAÇÃO DE ANTICORPOS

Page 33: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

33

DETERMINADO O TÍTULO DO AC ...

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 34: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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TESTE DE ANTIGLOBULINA

HUMANA DIRECTA

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 35: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Definição

Detecta a sensibilização dos glóbulos vermelhos in vivo por imunoglobulinas e/ou

fracções do complemento.

Princípio

Baseia-se na aglutinação directa de eritrócitos revestidos in vivo com

globulinas (IgG e C3d) por soro AGH.

Inicialmente – Soro AGH Poliespecífico (IgG + C3d).

Se TAD + devem utilizar-se reagentes monoespecíficos para identificar o tipo de

globulina presente à superfície dos glóbulos vermelhos.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Page 36: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Interesse Clínico

AHRN

Reacções transfusionais hemolíticas

AHAI

Anemia hemolítica induzida por drogas

Controlo Rh+ na fenotipagem Rh

Incompatibilidade inexplicada numa prova de compatibilidade

Fenotipagem com resultados não coerentes

Resultados de P.A.I. +

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Page 37: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Importância na Prática Laboratorial

Pacientes com suspeita de hemólise de origem imune para fins

terapêuticos, diagnósticos ou de monitorização terapêutica.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Page 38: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Significado do TAD como Teste Pré Transfusional

Não faz parte dos testes Pré-transfusionais.

Não deve ser utilizado como teste de rotina mas apenas em pacientes

seleccionados pela sua patologia e em certas situações laboratoriais.

A presença de um TAD + não significa que um indivíduo tenha uma AH. Pode

ser + em pessoas normais, sob o ponto de vista hematológico.

A utilização mais adequada é no estudo das AH com suspeita de causa imune.

Um TAD + tem um elevado valor predictivo de origem imune num doente com

AH enquanto num dador de sangue ou num paciente sem sinais clínicos e

laboratoriais de hemólise não tem qualquer significado.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Page 39: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Significado do TAD como Teste Pós Transfusional

Adquire grande importância.

Obrigatório efectuar sempre que o paciente faz uma reacção ao sangue

que lhe foi transfundido.

Um TAD Negativo Antes da transfusão e Positivo Após a transfusão

indica uma destruição dos glóbulos vermelhos transfundidos.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Page 40: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

40

Significado do TAD + em Dadores de Sangue

Não faz parte do rastreio laboratorial aos dadores de sangue.

Situações de P.A.I. + e Provas de Compatibilidade +

TAD + numa unidade de sangue determina a eliminação dessa unidade:

- ausência de evidência de destruição dos eritrócitos transfundidos com TAD +

- fraco desenvolvimento de patologias nos dadores de sangue com TAD +

- a prevalência da positividade deste teste é bastante baixa

- efeito de armazenamento (alteração da forma discóide para esferócitos tendo

maior dificuldade em atravessar a coluna do gel).

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Page 41: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Como Resolver o Problema da Prova de Compatibilidade?

A tecnologia em gel (muito sensível e pouco específica) detecta TAD + sem

significado clínico.

Efectuar TAD da unidade pela técnica em Tubo (pouco sensível e muito

específica):

-Se TAD + a unidade é eliminada.

-Se TAD - fazer a prova de compatibilidade em tubo.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Page 42: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Considerações Gerais

O TAD está indicado apenas em doentes com suspeita de hemólise imune ou com fins

diagnósticos ou de monitorização terapêutica (teste com bom valor predictivo).

Nos doentes com TAD + avaliar:

- história clínica e o diagnóstico

- terapêutica em curso

- história transfusional

- dados laboratoriais sugestivos de hemólise

(anemia, diminuição da haptoglobina, bilirrubina elevada, DHL elevada, aumento dos

reticulócitos).

Um TAD + não significa que um doente tenha AHAI

Um TAD – não exclui a AHAI.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Page 43: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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TAD POSITIVO PARA IgG ...

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

TESTE DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Page 44: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

44

ELUADO E

IDENTIFICAÇÃO

AUTO-ANTICORPO

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 45: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Princípio

Romper as ligações entre o ag e o ac dos gv. O ac é testado como um soro.

① Os gv revestidos de ac´s são lavados com soro fisiológico para remover os

vestígios de proteínas.

② A lavagem com solução de lavagem mantém a ligação dos ac´s aos

eritrócitos e remove os ac´s que não estão agarrados às células.

③ Os glóbulos lavados são suspensos numa solução com pH baixo para

dissociar os ac´s que os revestem.

④ Neutralizada a acidez da solução de eluição pela adição de uma solução

tampão.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

ELUADO E IDENTIFICAÇÃO DO AUTO-ANTICORPO

Page 46: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

46

Interesse Clínico

Investigação de um TAD +

Identificação dos ac´s em especial nas situações de AHAI e AHRN

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

ELUADO E IDENTIFICAÇÃO DO AUTO-ANTICORPO

Page 47: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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SE TAD NEGATIVO ...

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

ELUADO E IDENTIFICAÇÃO DO AUTO-ANTICORPO

Page 48: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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FENOTIPAGEM ALARGADA

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 49: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Designação

Determinação dos antigénios de outros sistemas de grupo sanguíneo que não

o Rh e o Kell.

A determinação completa do perfil de antigénios engloba o estudo dos

antigénios dos sistemas P, Lewis, Lutheran, Kell, Kidd, MNSs e Duffy.

Princípio

Aglutinação directa dos eritrócitos com um determinado ag à sua superfície em

presença do ac correspondente.

A sua determinação é definida pela presença ou ausência dos ag´s dos

diferentes grupos sanguíneos nos gv.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

FENOTIPAGEM ALARGADA

Page 50: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

50

Interesse Clínico

Tipagem de dadores com vista à transfusão.

Quando aplicável, tipagem de receptores com vista à transfusão e/ou à

confirmação ou exclusão na identificação de ac.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

FENOTIPAGEM ALARGADA

Page 51: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

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Importância na Prática Laboratorial

Prevenir a aloimunização de pacientes com patologias crónicas

candidatos a múltiplas transfusões.

Melhorar a capacidade de resposta em situações em que é difícil

encontrar CE compatíveis (pacientes aloimunizados contra múltiplos ag´s

e/ou contra ag de alta frequência).

Contribuir para a identificação do ac irregular.

Diagnosticar a AHRN.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

FENOTIPAGEM ALARGADA

Page 52: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

52

Critérios de Selecção de Dadores

Dadores habituais

Idade inferior a 50 anos

Análises sem alterações

Grupos 0+ e 0-

Dadores do grupo A com fenótipos pouco frequentes (ccDEE ou ccdEE)

Dificuldade em arranjar sangue compatível para um paciente (provas

de compatibilidade todas positivas mas com TAD -).

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

FENOTIPAGEM ALARGADA

Page 53: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

53

Critérios de Selecção de Pacientes

Com patologias crónicas, os quais podem vir a necessitar de múltiplas

transfusões.

Pacientes em cujo soro/plasma foi identificado alo-ac.

Dificuldade em arranjar sangue compatível para um paciente (provas de

compatibilidade todas positivas mas com TAD -).

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

FENOTIPAGEM ALARGADA

Page 54: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

54

Resultados – Perfil I

Determinação dos ag´s dos sistemas P, Lewis e Lutheran.

A suspensão em gel já contém os ac´s correspondentes, apenas é

necessário adicionar a suspensão eritrocitária diluída.

Presença Ag P1 – P1

Ausência Ag P1 – P2

ctl Positivo invalida o teste

Perfil I - P1 / Le (a- b+) / Lu (a- b+)

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

FENOTIPAGEM ALARGADA

Page 55: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

55

Resultados – Perfil II

Determinação dos ag´s dos sistemas Kell e Kidd.

A suspensão em gel já contém os ac´s correspondentes, apenas é necessário

adicionar a suspensão eritrocitária diluída.

Sistema Kell:

- KK (K+ e k -)

- Kk (K+ e k+)

- kk (K- e k+)

Ctl Positivo invalida o teste

Perfil II – k+ / Kp (a- b+) / Jk (a+ b-)

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

FENOTIPAGEM ALARGADA

Page 56: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

56

Resultados – Perfil III

Determinação dos ag´s dos sistemas MNSs e Duffy.

As 2 primeiras colunas contêm gel neutro e as últimas 4 contêm AGH.

Os ac´s correspondentes são acrescentados após a suspensão de

eritrócitos.

Perfil III – Ns / Fy (a- b+)

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

FENOTIPAGEM ALARGADA

Page 57: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

57

GRUPO SANGUÍNEO P

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Page 58: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

58

Características dos Antigénios

Os indivíduos que não apresentam o ag P1 são designados de P2.

O fenótipo P+ passou a ser designado de fenótipo P1 e indica a

presença do ag P1 nos gv.

O fenótipo P- passou a designar-se de fenótipo P2 e indica a presença

do ag P nos gv mas não do ag P1.

Estão presentes nos eritrócitos, plaquetas, leucócitos e fibroblastos.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO P

Page 59: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

59

Características do Antigénio P1

A sua expressão varia consideravelmente durante o desenvolvimento

fetal. Pode ser encontrado nos gv do feto tão precocemente quanto com

12 semanas enfraquecendo com a idade gestacional.

Está mal desenvolvido ao nascimento sendo necessários 7 anos para se

expressar totalmente.

Ao contrário de P1, o antigénio P está bem desenvolvido ao

nascimento.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO P

Page 60: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

60

Associações Patológicas

Existe uma associação entre os ag´s do sistema P e as infecções do

trato urinário (E. coli).

Mais infecções urinárias em mulheres jovens que são P1 que nas que

são P2.

Mais infecções nas mulheres P2 em fase de pré-menopausa.

O ag P serve como receptor para o parvovírus B19. Os indivíduos com o

fenótipo p são resistentes à infecção causada por este vírus.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO P

Page 61: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

61

Características dos Anticorpos anti-P1

Frequentemente encontrado no soro de indivíduos P2

Deteriora-se rapidamente com o armazenamento

Ac frio

Reage bem em meio AGH

Do tipo IgM. Os ac´s do tipo IgG são raros

Não estão implicados na AHRN

Sem significado clínico para a transfusão. Se for identificado o ac, pode ser

administrado sangue com o ag correspondente.

Os casos raros de ac anti-P1 reactivo a 37ºC causam destruição in vivo das

hemácias.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO P

Page 62: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

62

GRUPO SANGUÍNEO LEWIS

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Fenótipos Caucasiana (%) Negra (%)

Le (a- b+) 72 55

Le (a+ b-) 22 23

Le (a- b-) 6 22

Le (a+ b+) raro raro

Page 63: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

63

Características dos Antigénios

Principais antigénios deste sistema: ag Lea e ag Leb.

Único sistema de grupo sanguíneo que não é produzido pelos gv.

Encontram-se nas secreções e no plasma. São adsorvidos pela

membrana eritrocitária a partir do plasma não constituindo parte

integrante da estrutura da membrana.

Mal desenvolvidos ao nascimento.

O ag Leb facilita a fixação do Helicobacter pylori à mucosa gástrica.

Relacionado com o aparecimento de gastrite, adenocarcinoma e úlcera

gástrica.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO LEWIS

Page 64: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

64

Características dos Anticorpos

Produzidos por pessoas Le (a- b-)

Usualmente de ocorrência natural

Quase sempre do tipo IgM

Possuem uma ampla variação térmica

Podem ocorrer com bastante frequência nos soros de mulheres

grávidas

Não estão implicados na AHRN

Não são clinicamente significativos na transfusão

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO LEWIS

Page 65: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

65

GRUPO SANGUÍNEO LUTHERAN

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Fenótipos Caucasiana (%) Negra (%)

Lu (a- b+) 92,35 94,7

Lu (a+ b-) 0,15 0,10

Lu (a+ b+) 7,5 5,2

Lu (a- b-) muito raro -

Page 66: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

66

Características dos Antigénios

Principais antigénios deste sistema: ag Lua e ag Lub

Detectados nos eritrócitos dos fetos tão precocemente quanto com 12

semanas, estão mal desenvolvidos ao nascimento e não atingem o nível

adulto por muitos anos

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO LUTHERAN

Page 67: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

67

Características dos Anticorpos

São ac´s imunes

Podem ter uma ocorrência natural

Ac´s frios (Ac anti-Lua)

Reage a 37ºC e no meio AGH (Ac anti-Lub)

Podem ser do tipo IgG, IgA, IgM

Causa ligeira da AHRN

Podem ou não ter significado clínico

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO LUTHERAN

Page 68: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

68

GRUPO SANGUÍNEO KELL

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Fenótipos Caucasiana (%) Negra (%)

K- k+ (kk) 91 98

K+ k+ (Kk) 8,8 2

K+ k- (KK) 0,2 raro

Js (a- b+) 99,9 80,5

Js (a+ b-) 0,1 1,1

Js (a+ b+) 0,1 18,4

Kp (a- b+) 97,7 100

Kp (a+ b-) 0,1 -

Kp (a+ b+) 2 -

Page 69: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

69

Características dos Antigénios

Ag´s mais importantes: K (Kell) e o k (celano) por serem os mais imunogénicos.

O ag K ocupa o 2º lugar logo após o ag D do sistema Rh.

Apesar de o ag k ser muito imunogénico, apenas 2 em cada 1000 indivíduos

carecem do ag k sendo capazes de produzir o alo-ac correspondente. A

probabilidade de estes indivíduos serem transfundidos e imunizarem é muito

rara.

Outros ag´s deste sistema: Kpa, Kpb, Jsa, Jsb.

Existem em menor quantidade à superfície eritrocitária quando comparados

com os ag´s do sistema Rh.

Encontram-se somente nos GV.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO KELL

Page 70: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

70

Características dos Anticorpos

Ac´s imunes

Tipo IgG

Anticorpos quentes

Reagem melhor em meio AGH

O ac anti-K é o ac deste sistema mais frequentemente identificado

São clinicamente significativos na transfusão

O ac anti-K de ocorrência natural foi associado com infecções por E. coli

e pelo bacilo da tuberculose desaparecendo após a recuperação do

paciente

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO KELL

Page 71: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

71

GRUPO SANGUÍNEO KIDD

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Fenótipos Caucasiana (%) Negra (%)

Jk (a+ b+) 49 34

Jk (a+ b-) 28 57

Jk (a- b+) 23 9

Jk (a- b-) raro raro

Page 72: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

72

Características dos Antigénios

Principais Ag´s: Jka e Jkb

Encontram-se bem desenvolvidos ao nascimento, contribuindo para a

AHRN

No gv desempenha a função de transporte de ureia e/ou água

São ag´s comuns sendo difícil arranjar unidades sem o ag

correspondente

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO KIDD

Page 73: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

73

Características dos Anticorpos

Principais Ac´s: anti-Jka e anti-Jkb

Regra geral, ocorrem em combinação com outros ac´s

São anticorpos imunes

Do tipo IgG

Reagem bem em meio AGH

Reagem bem à temperatura de 37ºC

São de difícil detecção

Deterioram-se durante o armazenamento

Envolvidos na AHRN e em RTH tardias

Clinicamente significativos na transfusão

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO KIDD

Page 74: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

74

GRUPO SANGUÍNEO MNSs

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Fenótipos Caucasiana (%) Negra (%)

M+ N+ 50 44

M+ N- 28 26

M- N+ 22 30

S- s+ 45 69

S+ s- 11 3

S+ s+ 44 28

S- s- muito raro < 1

Page 75: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

75

Características dos Antigénios

Principais Ag´s deste sistema: M, N, S, s

Existem apenas nos glóbulos vermelhos

Bem desenvolvidos ao nascimento

Muito úteis em casos de exclusão de paternidade (somente ag´s bem

desenvolvidos podem ser seguramente tipados)

Destruídos por acção de enzimas

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO MNSS

Page 76: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

76

Associações Patológicas

O antigénio M pode servir como receptor através do qual certas

estirpes de E. coli penetram no trato urinário

Os antigénios MN ou Ss funcionam como receptores para o parasita da

malária, o Plasmodium falciparum

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO MNSS

Page 77: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

77

Características do Ac anti-M

Reage bem nos meios salino e AGH

Reage bem à TA

Pode ser um ac de ocorrência natural ou imune

A maioria são do tipo IgG

Exibe dose (reage melhor com gv M+ N- que com gv M+ N+)

Sem significado clínico na transfusão

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO MNSS

Page 78: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

78

Características do Ac anti-N

Reage bem em meio salino

Reage bem à TA ou a 4ºC

Do tipo IgM ou IgG

Exibe dose

Sem significado clínico na transfusão

Sem significado clínico na gravidez

Presente no soro de doentes renais, independentemente do seu

fenótipo, que fazem diálise em equipamento esterilizado com

formaldeído

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO MNSS

Page 79: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

79

Características dos Anticorpos anti-S e anti-s

Anticorpos imunes

Do tipo IgG

Reagem bem à temperatura dos 37ºC

Reagem bem meio AGH

Foram implicados em casos de RTH e em casos de AHAI

Com algum significado clínico na transfusão. As unidades seleccionadas

não devem conter o ag correspondente ao ac identificado

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO MNSS

Page 80: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

80

GRUPO SANGUÍNEO DUFFY

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

Fenótipos Caucasiana (%) Negra (%)

Fy (a+ b+) 49 1

Fy (a+ b-) 17 9

Fy (a- b-) muito raro 68

Fy (a- b+) 34 22

Page 81: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

81

Características dos Antigénios

Principais Ag´s deste sistema: Fya e Fyb

Apresentam uma imunogenicidade moderada

Bem desenvolvidos por altura do nascimento

São destruídos por acção de enzimas

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO DUFFY

Page 82: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

82

Características dos Anticorpos

Principais Ac´s deste sistema: anti-Fya e anti-Fyb

São anticorpos imunes

São do tipo IgG

Reagem bem em meio AGH

Reagem bem à temperatura de 37ºC

Não reagem no meio enzimático

São clinicamente significativos na transfusão

A gravidade da AHRN varia de ligeira a severa

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO DUFFY

Page 83: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

83

Associação Duffy e Malária

A maior parte dos indivíduos de raça negra são Fy (a- b-), um fenótipo

muito raro entre os indivíduos de raça caucasiana. O gene responsável

por este fenótipo nulo foi denominado Fy. Os indivíduos com este

fenótipo são resistentes à infecção da malária pelo Plasmodium knowlesi

e Plasmodium vivax. O fenótipo Fy (a- b-) é a base para a resistência

sendo os ag´s Duffy os receptores para a invasão. Em África, a resistência

à malária conferida pelo fenótipo nulo faz com que a selecção natural

favoreça este fenótipo razão da elevada % de indivíduos com o fenótipo

nulo.

Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

GRUPO SANGUÍNEO DUFFY

Page 84: Anticorpos Irregulares - significado laboratorial e clínico

DÚVIDAS?

OBRIGADO PELA ATENÇÃO!

Esta apresentação só pode ser utilizada pelos formandos em actividadesassociadas ao exercício das suas funções no Serviço de Imuno-hemoterapia do Hospital Vila Franca de Xira. Qualquer outra utilização, carece de autorização

prévia por parte do autor.