a.viscosus and a.naesulundii

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  • 8/6/2019 A.viscosus and a.naesulundii

    1/6

    I N F E C T I O N AND I M M U N I T Y , N o v . 1 9 7 6 , p . 1 1 1 9 - 1 1 2 4C o p y r i g h t X ) 1 9 7 6 A m e r i c a n S o c i e t y f o r M i c r o b i o l o g y V o l . 1 4 , N o . 5P r i n t e d i n U . S . A .

    E s t a b l i s h m e n t a n d D i s t r i b u t i o n o f A c t i n o m y c e s v i s c o s u s a n dA c t i n o m y c e s n a e s l u n d i i i n t h e Human O r a l C a v i t yRICHARD P . ELLEN

    F a c u l t y o f D e n t i s t r y , U n i v e r s i t y o f T o r o n t o , T o r o n t o , O n t a r i o , Canada M5G I G6R e c e i v e d f o r p u b l i c a t i o n 2 J u l y 1 9 7 6

    T h e i n t r a o r a l e s t a b l i s h m e n t a n d p r o p o r t i o n a l d i s t r i b u t i o n o f s u s p e c t e d p e r i o -d o n t a l p a t h o g e n s A c t i n o m y c e s v i s c o s u s a n d A c t i n o m y c e s n a e s l u n d i i were s t u d -i e d u s i n g a r e c e n t l y d e v e l o p e d d i f f e r e n t i a l p l a t i n g m e d i u m , CNAC-20. S a l i v aa n d d e n t a l p l a q u e s a m p l e s were c o l l e c t e d f r o m 1 0 8 s u b j e c t s r a n g i n g i n age f r o mi n f a n t s t o young a d u l t s ; t o n g u e a n d b u c c a l mucosa s a m p l e s were c o l l e c t e d f r o mo n l y t h e a d u l t s u b j e c t s . C a t a l a s e - n e g a t i v e A . n a e s l u n d i i was i s o l a t e d f r o m 40 %o f t h e p r e d e n t a t e i n f a n t s ' a n d a l m o s t a l l o t h e r s u b j e c t s ' s a l i v a s a m p l e s . I tp r e d o m i n a t e d among CNAC-20 i s o l a t e s i n t h e s a l i v a o f s u b j e c t s o f a l l agegroups, i n t h e p l a q u e s o f young c h i l d r e n , a n d i n t h e a d u l t t o n g u e s a m p l e s . I nc o n t r a s t , c a t a l a s e - p o s i t i v e A . v i s c o s u s was n o t i s o l a t e d f r o m p r e d e n t a t e i n f a n ts a m p l e s , a n d i t s f r e q u e n c y o f i s o l a t i o n i n c r e a s e d s l o w l y w i t h age (>50% d e t e c -t i o n b y age 7 ) . A . v i s c o s u s was i s o l a t e d i n h i g h e s t r e l a t i v e p r o p o r t i o n s f r o md e n t a l p l a q u e a n d b u c c a l mucosa s a m p l e s . The t w o c l o s e l y r e l a t e d s p e c i e s A .v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i i a p p a r e n t l y d i f f e r i n r e s p e c t t o f a c t o r s d e t e r m i n i n gt h e h o s t age a t w h i c h t h e y c o l o n i z e a n d t h e i r r e l a t i v e i n t r a o r a l d i s t r i b u t i o n i nh u m a n s .

    A c t i n o m y c e s v i s c o s u s a n d A c t i n o m y c e s n a e s -l u n d i i h a v e b e e n i m p l i c a t e d i n t h e e t i o l o g y o fp e r i o d o n t a l d i s e a s e p r i m a r i l y b e c a u s e o f t h e i ra s s o c i a t i o n w i t h n a t u r a l l y t r a n s m i s s i b l e a n de x p e r i m e n t a l l y i n d u c e d p e r i o d o n t a l l e s i o n s i nl a b o r a t o r y a n i m a l s ( 1 3 , 1 5 - 1 8 , 2 1 ) . H o w e v e r ,l i t t l e i s known a b o u t t h e i r e c o l o g i c a l r e l a t i o n -s h i p w i t h t h e human h o s t a n d t h e i r i m p a c t o nt h e c o u r s e o f n a t u r a l l y o c c u r r i n g human p e r i o -d o n t a l d i s e a s e s . P r e s u m a b l y , t h i s l a c k o f i n f o r -m a t i o n r e f l e c t s p r e v i o u s l y e n c o u n t e r e d d i f f i c u l -t i e s i n r a p i d l y e n u m e r a t i n g t h e s e s p e c i e s i nc l i n i c a l s a m p l e s a n d i n d i f f e r e n t i a t i n g t h e mf r o m o t h e r f a c u l t a t i v e l y a n a e r o b i c , g r a m - p o s i -t i v e , p l e o m o r p h i c r o d s a n d f i l a m e n t s t h a t a l s oc o l o n i z e t h e m o u t h . S u c h i d e n t i f i c a t i o n p r o b -l e m s w e r e e v i d e n t i n a p r e v i o u s a t t e m p t t ot r a c e t h e e s t a b l i s h m e n t o f A c t i n o m y c e s s p e c i e si n t h e d e v e l o p i n g o r a l f l o r a o f n e w b o r n i n f a n t s( 2 0 ) . T h e r e c e n t d e v e l o p m e n t o f a p a r t i a l l y s e -l e c t i v e , d i f f e r e n t i a l medium f o r d e t e c t i n g f a c u l -t a t i v e l y a n a e r o b i c A c t i n o m y c e s c o l o n i e s ( 6 ) h a sf a c i l i t a t e d t h e p r o c e s s i n g o f n u m e r o u s c l i n i c a ls a m p l e s , m a k i n g t h e p r e s e n t i n v e s t i g a t i o n f e a -s i b l e . T h i s r e p o r t d e s c r i b e s i n v e s t i g a t i o n s i n t ot h e h o s t a g e a t w h i c h A . v i s c o s u s a n d A . n a e s -l u n d i i i n f e c t humans a n d t h e d i s t r i b u t i o n o ft h e t w o s p e c i e s i n t h e m o u t h . D a t a a r e p r e -s e n t e d t h a t i n d i c a t e t h a t t h e c l o s e l y r e l a t e ds p e c i e s A . v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i i d i f f e rm a r k e d l y i n t h e i r p a t t e r n s o f human i n t r a o r a lc o l o n i z a t i o n .

    MATERIALS AND METHODSP o p u l a t i o n s u n d e r i n v e s t i g a t i o n . T h e 1 0 8 s u b -j e c t s f o r t h i s i n v e s t i g a t i o n r a n g e d i n a g e f r o m 3m o n t h s t o 3 0 y e a r s . T h i r t y - s i x h e a l t h y i n f a n t s w e r es e l e c t e d f r o m t h e p o p u l a t i o n a t E d g e w o o d ManorDay N u r s e r y a n d t h e F a m i l y P r a c t i c e U n i t o f S t .M i c h a e l ' s H o s p i t a l , T o r o n t o , C a n a d a . F i f t y - s e v e nc h i l d r e n f r o m 3 t o 1 6 y e a r s o f a g e w e r e s a m p l e d a tt h e F a c u l t y o f D e n t i s t r y c l i n i c s , U n i v e r s i t y o f T o -r o n t o . T h e a du l t p o p u l a t i o n i n c l u d e d 1 5 s u b j e c t s , 2 0t o 3 0 y e a r s o f a g e , w h o w e r e s e l e c t e d f r o m t h e s t a f fa n d s t u d e n t s o f t h e F a c u l t y o f D e n t i s t r y a n d w e r ef o u n d t o b e r e l a t i v e l y f r e e o f c l i n i c a l s i g n s o f p e r i o -d o n t a l d i s e a s e .S a m p l e c o l l e c t i o n a n d c u l t u r a l c o n d i -t i o n s . S a m p l e s o f w h o l e s a l i v a w e r e c o l l e c t e d f r o ma l l t h e s u b j e c t s . U n s t i m u l a t e d w h o l e s a l i v a w a s c o l -l e c t e d i n s t e r i l e v i a l s f r o m t h e c h i l d r e n a n d a d u l t s .I n f a n t s a l i v a s a m p l e s w e r e c o l l e c t e d b y a b s o r b i n gt h e s a l i v a b a t h i n g t h e i r m u c o s a l s u r f a c e s w i t h c a l -c i u m a l g i n a t e s w a b s ( C a l g i s w a b s , W i l s o n D i a g n o s -t i c s , I n c . , G l e n w o o d , I l l . ) . P o o l e d s m o o t h - s u r f a c ep l a q u e s a m p l e s w e r e o b t a i n e d f r o m a l l d e n t u l o u ss u b j e c t s b y s w a b b i n g t h e f a c i a l a n d l i n g u a l s u r f a c e so f t h e i r m a x i l l a r y a n t e r i o r t e e t h . A d d i t i o n a l s w a bs a m p l e s w e r e c o l l e c t e d f r o m t h e d o r s u m o f t h et o n g u e a n d f r o m t h e b u c c a l m u c o s a o f t h e a d u l ts u b j e c t s . T h e c a l c i u m a l g i n a t e s w a b s w e r e p a r t i a l l yd i s s o l v e d i n 2 . 0 ml o f m o d i f i e d R i n g e r s o l u t i o n w i t hh e x a m e t a p h o s p h a t e ( 2 3 ) b y v i b r a t i n g t h e s a m p l et u b e s o n a V o r t e x m i x e r f o r 2 0 s .T e n f o l d s e r i a l d i l u t i o n s o f e a c h s a m p l e w e r e p r e -p a r e d i n 0 . 0 5 % y e a s t e x t r a c t b r o t h ( D i f c o ) , a n d a p -p r o p r i a t e d i l u t i o n s w e r e s p r e a d i n d u p l i c a t e o np l a t e s o f t r y p t i c s o y a g a r ( D i f c o ) c o n t a i n i n g 5 . 0 %

    1 1 1 9

  • 8/6/2019 A.viscosus and a.naesulundii

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    1 1 2 0 ELLENs h e e p b l o o d a n d C o l u m b i a CNA a g a r ( D i f c o ) c o n -t a i n i n g 2 0 . 0 , u g o f 3 C d S O 4 8 H 2 O p e r m l ( C N A C - 2 0 )( 6 ) . U n d i l u t e d s w a b s a m p l e s o f p l a q u e a n d i n f a n ts a l i v a w e r e a l s o i n o c u l a t e d d i r e c t l y o n t o C N A C - 2 0 .F o r t h e w h o l e s a l i v a s a m p l e s , t h e l o w e s t d i l u t i o np l a t e d o n CNAC-20 w a s 1 0 - 3 . T h e b l o o d p l a t e s w e r ei n c u b a t e d a t 3 5 C f o r 4 d a y s i n a n a t m o s p h e r e o f 95%N 2 a n d 5 % C O 2 . T h e CNAC-20 p l a t e s w e r e i n c u b a t e df o r 2 d a y s i n 90% a i r a n d 1 0 % C O 2 t o e n c o u r a g e t h eg r o w t h o f A c t i n o r n y c e s w h i c h c o u l d g r o w a e r o b i c a l l y( 6 ) .C o l l e c t i o n a n d a n a l y s i s o f d a t a . T h e n u m b e r o fc o l o n y - f o r m i n g u n i t s ( C F U ) p e r m i l l i l i t e r o f s a m p l ew a s d e t e r m i n e d b y c a l c u l a t i n g t h e a v e r a g e c o l o n yc o u n t o n d u p l i c a t e p l a t e s o f d i l u t i o n s y i e l d i n g b e -t w e e n 2 0 a n d 2 0 0 c o l o n i e s . T h e n u m b e r o f f a c u l t a -t i v e l y a n a e r o b i c A c t i n o r n y c e s w a s d e t e r m i n e d b yc o u n t i n g o n l y t h e l a r g e , w h i t e , s m o o t h , o p a q u eCNAC-20 c o l o n i e s p r e v i o u s l y s h o w n t o c o n t a i n b a c -t e r i a r e s e m b l i n g e i t h e r A . v i s c o s u s o r A . n a e s l u n d i i( 6 ) . Q u e s t i o n a b l e c o l o n y t y p e s w e r e i s o l a t e d , a n dp u r e c u l t u r e s t h e r e o f w e r e i d e n t i f i e d b y c u l t u r a lm e t h o d s ( 6 , 1 4 ) . C a t a l a s e a c t i v i t y t o d i f f e r e n t i a t eb e t w e e n c a t a l a s e - p o s i t i v e A . v i s c o s u s - l i k e a n d c a t a -l a s e - n e g a t i v e A . n a e s l u n d i i - l i k e CNAC-20 i s o l a t e sw a s t e s t e d b y a p p l y i n g 3 . 0 % H 2 0 2 d i r e c t l y t o t h ec o l o n i e s . T h e p r o p o r t i o n s o f c a t a l a s e - p o s i t i v e a n dc a t a l a s e - n e g a t i v e i s o l a t e s i n t h e s a m p l e s w e r e d e -t e r m i n e d o n t h e s a m e p l a t e s u s e d f o r t h e c o l o n yc o u n t . I f n o c a t a l a s e - p o s i t i v e c o l o n i e s w e r e d e t e c t e d ,p l a t e s f r o m s u c c e s s i v e l y l o w e r d i l u t i o n s w e r e c h o -s e n .T h e f r e q u e n c y o f A . v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i ii s o l a t i o n was c a l c u l a t e d a n d e x p r e s s e d a s t h e p e r -c e n t a g e o f s u b j e c t s i n e a c h a g e g r o u p w h o s e s a m p l e sy i e l d e d d e t e c t a b l e CNAC-20 A c t i n o m y c e s i s o l a t e s .T h e i n f a n t g r o u p was c o m p o s e d o f 1 5 p r e d e n t a t e sa n d 2 1 i n f a n t s w i t h t e e t h . T h e g r o u p o f p r e s c h o o l -a g e d c h i l d r e n ( 3 t o 4 y e a r s ) i n c l u d e d 9 s u b j e c t s .Among t h e s c h o o l - a g e d c h i l d r e n , 1 0 w e r e 5 t o 6 y e a r so f a g e ; 1 4 w e r e 7 t o 8 y e a r s ; 1 1 w e r e 9 t o 1 0 y e a r s ; 7w e r e 1 1 t o 1 2 y e a r s ; a n d 6 w e r e 1 3 t o 1 6 y e a r s o f a g e .F o r e a c h s a m p l e , t h e p r o p o r t i o n s o f A . v i s c o s u sa n d A . n a e s l u n d i i ( C N A C - 2 0 p l a t e c o u n t s ) amongt h e t o t a l CFU r e c o v e r e d ( b l o o d p l a t e s ) w e r e c a l c u -l a t e d . An e s t i m a t e o f t h e e f f i c i e n c y o f CNAC-20 i nr e c o v e r i n g A c t i n o m y c e s f r o m t h e s a m p l e s w a s o b -t a i n e d b y c o m p a r i n g t h e n u m b e r o f A c t i n o m y c e sCFU d e t e c t e d o n CNAC-20 w i t h t h e n u m b e r o f CFUr e c o v e r e d o n b l o o d a g a r t h a t c o u l d b e i d e n t i f i e ds u b s e q u e n t l y a s A . v i s c o s u s o r A . n a e s l u n d i i . T h i se s t i m a t e was made o n f i v e o f t h e c l i n i c a l s a m p l e s .E v e r y c o l o n y o n b l o o d a g a r p l a t e s c o n t a i n i n g 5 0 t o1 0 0 c o l o n i e s was i s o l a t e d . P u r e c u l t u r e s o f t h e i s o -l a t e s w e r e Gram s t a i n e d . G r a m - p o s i t i v e r o d s , p l e o -m o r p h i c r o d s , f i l a m e n t s , a n d c o c c o b a c i l l i w e r e s u b -m i t t e d t o s e v e r a l c u l t u r a l t e s t s ( 6 , 1 4 ) t o d e t e r m i n et h e i r r e s e m b l a n c e t o A . v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i i .An i n d e x was c a l c u l a t e d t o d e t e r m i n e t h e r e l a t i v ep r e f e r e n c e s o f A . v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i i f o r c o l o -n i z i n g s p e c i f i c i n t r a o r a l s u r f a c e s . T h e i n d e x c o n -s i s t e d o f t h e r a t i o o f c a t a l a s e - p o s i t i v e t o c a t a l a s e -n e g a t i v e CFU i n s a m p l e s f r o m o n l y t h o s e s u b j e c t sf o u n d t o b e i n f e c t e d w i t h b o t h c a t a l a s e - p o s i t i v e a n dc a t a l a s e - n e g a t i v e A c t i n o m y c e s . T h u s , f o r a n y i n -

    I N F E C T . IMMUN.t r a o r a l s i t e , a mean r a t i o s i g n i f i c a n t l y g r e a t e r t h a n1 . 0 i n d i c a t e d a p r e d o m i n a n c e o f c a t a l a s e - p o s i t i v eCFU among t h e f a c u l t a t i v e l y a n a e r o b i c A c t i n o -m y c e s i s o l a t e d ; a mean r a t i o o f l e s s t h a n 1 . 0 i n d i -c a t e d a p r e d o m i n a n c e o f c a t a l a s e - n e g a t i v e i s o l a t e s .

    RESULTSE s t a b l i s h m e n t o f f a c u l t a t i v e l y a n a e r o b i cA c t i n o m y c e s i n t h e human m o u t h . T h e f r e -q u e n c y o f i s o l a t i o n o f b a c t e r i a r e s e m b l i n g A .v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i i i s i l l u s t r a t e d i n F i g .1 . I n g e n e r a l , t h e f r e q u e n c y o f f a c u l t a t i v e l ya n a e r o b i c A c t i n o m y c e s i s o l a t i o n i n c r e a s e d w i t ha g e , s i m i l a r t o f i n d i n g s f o r a n a e r o b i c A c t i n o -m y c e s r e p o r t e d b y o t h e r s ( 2 0 , 2 2 ) . C a t a l a s e -n e g a t i v e A c t i n o m y c e s w e r e d e t e c t e d i n 40 % o ft h e p r e d e n t a t e i n f a n t s a n d 82 % o f t h e i n f a n t s

    w i t h t e e t h . T h e s a l i v a s a m p l e s o f a l l o t h e r s u b -j e c t s c o n t a i n e d c a t a l a s e - n e g a t i v e i s o l a t e s . A l -t h o u g h t h e p l a q u e s a m p l e s f r o m m o s t s u b j e c t sa l s o c o n t a i n e d c a t a l a s e - n e g a t i v e CNAC-20C F U , t h e r e w e r e s o m e s a m p l e s i n w h i c h t h e yw e r e n o t d e t e c t e d . I n c o n t r a s t , t h e e s t a b l i s h -m e n t o f c a t a l a s e - p o s i t i v e A c t i n o m y c e s i n t h eo r a l c a v i t y w a s d e l a y e d . T h e y w e r e n o t d e t e c t e di n t h e s a m p l e s f r o m p r e d e n t a t e i n f a n t s . T h ef r e q u e n c y o f t h e i r d e t e c t i o n i n s a l i v a a n dp l a q u e s a m p l e s i n c r e a s e d s l o w l y , r e a c h i n g a ni s o l a t i o n f r e q u e n c y g r e a t e r t h a n 50% b y a g e 7 .N e i t h e r s a l i v a n o r p l a q u e s a m p l e s f r o m a n y o ft h e a g e g r o u p s y i e l d e d a 1 0 0 % d e t e c t i o n f r e -q u e n c y f o r c a t a l a s e - p o s i t i v e A c t i n o m y c e s .I n t r a o r a l d i s t r i b u t i o n o f f a c u l t a t i v e l y a n -a e r o b i c A c t i n o m y c e s . D a t a r e f l e c t i n g t h e p r o -p o r t i o n s o f A c t i n o m y c e s - l i k e i s o l a t e s i n t h e t o -t a l c u l t i v a t e d f l o r a s h o u l d b e c o n s i d e r e d a c c u -1 0 09 0

    C D

    E 8 01 0

    - C4 6 0

    C)50- F, 3 0K 2 0

    1 0

    A i 1/_ / ,I , 8 , ~ ~ ~ ~ 0-2 2 C a t a l a s eS a l i v a O____ +o- S m o o t h s u r f a c e Ap l a q u e * - - - - - +

    a I I I I A g e Y e a r s ,X _ , 3 - 4_c cT ? , C : Cs

    5 - 6 7 - 89 - 1 0 1 1 - 1 2 1 3 - 1 6 2 0 - 3 0

    F I G . 1 . F r e q u e n c y o f i s o l a t i o n o f f a c u l t a t i v e l y a n -a e r o b i c A c t i n o m y c e s f r o m s a l i v a a n d d e n t a l p l a q u ec o l l e c t e d f r o m s u b j e c t s o f v a r i o u s a g e s .

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    A . VISCOSUS AND A . NAESLUNDII ORAL COLONIZATION 1121T A B L E 1 . R e c o v e r y o f f a c u l t a t i v e l y a n a e r o b i c A c t i n o m y c e s f r o m s a l i v a a n d s m o o t h s u r f a c e d e n t a l p l a q u e s o fc h i l d r e n

    S a l i v a D e n t a l p l a q u e

    S u b j e c t age Mean % o f c u l t i v a t e d A c t i n o - M e a n % o f c u l t i v a t e d A c t i n o -( y e a r s ) Mean % o f c u l t i - m y c e s a Mean % o f c u l t i - m y c e sv a t e d f l o r a C a t a l a s e v a t e d f l o r a C a t a l a s eC a t a l a s e p o s i t i v e n e g a t i v e C a t a l a s e p o s i t i v e n e g a t i v e3 - 4 7 . 1 + 3 . 9 3 . 8 3 . 5 9 6 . 2 b 1 . 4 + 1 . 0 1 0 . 1 9 . 5 8 9 . 9 b( 0 . 2 - 3 6 . 7 ) c ( < 0 . 1 - 9 . 6 )5 - 6 6 . 1 + 1 . 3 3 . 5 + 1 . 6 9 6 . 5 3 . 6 1 . 7 1 8 . 0 1 1 . 1 8 2 . 0( 2 . 1 - 1 4 . 5 ) ( < 0 . 1 - 1 3 . 3 )7 - 8 5 . 2 1 . 0 1 0 . 0 4 . 1 9 0 . 0 0 . 6 0 . 2 3 6 . 0 + 1 0 . 5 6 4 . 0( < 0 . 1 - 1 3 . 5 ) ( < 0 . 1 - 2 . 0 )9 - 1 0 1 1 . 0 3 . 0 7 . 6 2 . 5 9 2 . 4 2 . 6 1 . 2 5 5 . 2 + 1 3 . 7 4 4 . 8( 2 . 9 - 3 4 . 4 ) ( < 0 . 1 - 8 . 7 )1 1 - 1 2 6 . 0 1 . 1 5 . 0 4 . 2 9 5 . 0 0 . 7 0 . 3 2 3 . 1 1 2 . 7 7 6 . 9( 1 . 9 - 9 . 7 ) ( < 0 . 1 - 1 . 8 )1 3 - 1 6 9 . 9 4 . 9 3 3 . 2 + 1 3 . 6 6 6 . 8 0 . 7 0 . 5 8 7 . 3 4 . 7 1 2 . 7( 1 . 7 - 3 3 . 2 ) ( < 0 . 1 - 2 . 9 )

    a F a c u l t a t i v e l y a n a e r o b i c A c t i n o m y c e s i s o l a t e d o n C N A C - 2 0 .b S t a n d a r d e r r o r s a m e a s f o r c a t a l a s e - p o s i t i v e p r o p o r t i o n s .C Mean s t a n d a r d e r r o r o f mean ( r a n g e ) .r a t e o n l y t o t h e l i m i t s o f t h e m e t h o d s u s e d t oe n u m e r a t e t h e m . We h a v e f o u n d p r e v i o u s l yt h a t s o m e s t o c k s t r a i n s o f b o t h A . v i s c o s u s a n dA . n a e s l u n d i i e i t h e r f a i l t o g r o w o n C N A C - 2 0o r l o s e t h e a b i l i t y t o g r o w o n i t a f t e r e x t e n d e dl a b o r a t o r y c u l t u r e ( 6 ; u n p u b l i s h e d o b s e r v a -t i o n s ) . H o w e v e r , p u r e c u l t u r e s o f s t o c k a n df r e s h l y i s o l a t e d s t r a i n s t h a t c a n g r o w o nC N A C - 2 0 y i e l d e q u i v a l e n t n u m b e r s o f CFU o nCNAC-20 a n d n o n s e l e c t i v e m e d i a ( 6 ) . I n t h es a m p l e s f r o m t h i s s t u d y c h o s e n t o e s t i m a t e t h ee f f i c i e n c y o f C N A C - 2 0 i n r e c o v e r i n g f a c u l t a -t i v e l y a n a e r o b i c A c t i n o m y c e s , t h e n u m b e r o fA c t i n o m y c e s CFU o n CNAC-20 r e p r e s e n t e d7 0 . 0 + 1 2 . 0 % ( m e a n + s t a n d a r d e r r o r ; r a n g e ,3 6 . 8 t o 9 0 . 4 ) o f t h e p r e d o m i n a n t CFU r e c o v e r e do n t r y p t i c s o y b l o o d a g a r t h a t c o u l d b e i d e n t i -f i e d s u b s e q u e n t l y a s A . v i s c o s u s o r A . n a e s l u n -d i i .Among t h e c h i l d r e n a n d a d u l t s , t h e a v e r a g ep e r c e n t a g e o f t h e s a l i v a r y f l o r a r e c o v e r e d o nb l o o d a g a r t h a t c o u l d b e a c c o u n t e d f o r b yCNAC-20 A c t i n o m y c e s i s o l a t e s r a n g e d f r o m 5 . 2+ 1 . 0 t o 1 1 . 0 + 3 . 0 % ( T a b l e s 1 a n d 3 ) . No t r e n d so f i n c r e a s i n g o r d e c r e a s i n g p r o p o r t i o n s w i t ha g e w e r e n o t e d . C a t a l a s e - n e g a t i v e i s o l a t e s p r e -d o m i n a t e d among CNAC-20 CFU r e c o v e r e df r o m s a l i v a o f s u b j e c t s i n a l l a g e g r o u p s . T h emean p e r c e n t a g e o f c a t a l a s e - n e g a t i v e i s o l a t e samong s a l i v a r y A c t i n o m y c e s i s o l a t e s wasg r e a t e r t h a n 9 0 % a t a l l a g e s y o u n g e r t h a n t h et e e n a g e a n d a d u l t g r o u p s . U n d e r t h e c o n d i t i o n su s e d , t h e a d u l t s a l i v a s a m p l e s c o n t a i n e d a na v e r a g e o f 8 . 9 x 1 0 " c a t a l a s e - n e g a t i v e a n d 2 . 9 x1 0 " c a t a l a s e - p o s i t i v e A c t i n o m y c e s C F U / m l .

    T h e mean p r o p o r t i o n s o f t h e c u l t i v a t e d d e n -t a l p l a q u e f l o r a r e c o v e r e d a s A c t i n o m y c e s CFUo n CNAC-20 w e r e q u i t e l o w i n t h e c h i l d r e n o fa l l a g e g r o u p s , r a n g i n g f r o m 0 . 6 + 0 . 2 t o 3 . 0 1 . 7 % ( T a b l e 1 ) . Among t h e s e , c a t a l a s e - n e g a t i v ei s o l a t e s p r e d o m i n a t e d i n t h e p l a q u e s f r o m t h ey o u n g c h i l d r e n . T h e r e l a t i v e p r o p o r t i o n s o f c a t -a l a s e - p o s i t i v e i s o l a t e s g e n e r a l l y i n c r e a s e d w i t ha g e . C a t a l a s e - p o s i t i v e i s o l a t e s p r e d o m i n a t e d i np l a q u e s a m p l e s f r o m t h e t e e n a g e a n d a d u l tg r o u p s ( T a b l e s 1 a n d 3 ) .F a c u l t a t i v e l y a n a e r o b i c A c t i n o m y c e s a c -c o u n t e d f o r 7 . 0 a n d 4 . 5 % o f t h e c u l t i v a t e d f l o r af r o m t h e a du l t t o n g u e a n d b u c c a l m u c o s a l s a m -p l e s , r e s p e c t i v e l y . T h e f r e q u e n c y o f i s o l a t i o na n d t h e r e l a t i v e p r o p o r t i o n s o f c a t a l a s e - p o s i t i v ea n d c a t a l a s e - n e g a t i v e A c t i n o m y c e s i s o l a t e s d i f -f e r e d i n s a m p l e s f r o m t h e t w o s i t e s ( T a b l e 3 ) .C a t a l a s e - n e g a t i v e CFU w e r e d e t e c t e d i n 1 0 0 %o f b o t h t o n g u e a n d b u c c a l m u c o s a s a m p l e s . I nc o n t r a s t , c a t a l a s e - p o s i t i v e CFU w e r e i s o l a t e df r o m o n l y 40 % o f t h e t o n g u e a n d 93% o f t h ec h e e k s a m p l e s . T o n g u e s a m p l e s c o n t a i n e d a na v e r a g e o f g r e a t e r t h a n f o u r f o l d m o r e c a t a l a s e -n e g a t i v e t h a n c a t a l a s e - p o s i t i v e i s o l a t e s . T h e i ra v e r a g e r e l a t i v e p r o p o r t i o n s i n t h e b u c c a l mu-c o s a s a m p l e s w e r e a l m o s t e q u a l .D i f f e r e n c e s i n t h e p r e f e r e n c e s o f c a t a l a s e - p o s -i t i v e a n d c a t a l a s e - n e g a t i v e A c t i n o m y c e s f o r c o l -o n i z i n g v a r i o u s s i t e s i n t h e human m o u t h w e r es u g g e s t e d b y t h e mean r e l a t i v e p r o p o r t i o n s d e -s c r i b e d a b o v e . T h e s e p r e f e r e n c e s b e c a m e moree v i d e n t when t h e r a t i o o f t h e i r p r o p o r t i o n s wasc a l c u l a t e d f o r s a m p l e s f r o m o n l y t h o s e s u b j e c t sf r o m w h om b o t h c a t a l a s e - p o s i t i v e a n d - n e g a -

    V O L . 1 4 , 1 9 7 6

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    1 1 2 2 ELLENt i v e A c t i n o r n y c e s w e r e i s o l a t e d ( T a b l e s 2 a n d3 ) . T h e mean r a t i o s f o r t h e s a l i v a s a m p l e s d i f -f e r e d m a r k e d l y f r o m t h o s e o f t h e p l a q u e s a m -p l e s a t a l l a g e s . W i t h o n e e x c e p t i o n ( s a l i v as a m p l e s f r o m t h e t e e n a g e g r o u p ) , t h e r a t i o i n d i -c a t e d a n o v e r a l l p r e d o m i n a n c e o f c a t a l a s e - n e g -a t i v e i s o l a t e s i n s a l i v a s a m p l e s a n d c a t a l a s e -p o s i t i v e i s o l a t e s i n p l a q u e . D i f f e r e n c e s i n t h er a t i o w e r e a l s o o b s e r v e d b e t w e e n t h e s a m p l e so b t a i n e d f r o m t h e t o n g u e a n d b u c c a l m u c o s a i na d u l t s ( T a b l e 3 ) . T h e r a t i o i n d i c a t e d a p r e d o m i -n a n c e o f c a t a l a s e - n e g a t i v e i s o l a t e s i n t h et o n g u e s a m p l e s , s i m i l a r t o t h a t d e t e c t e d i n s a -l i v a . I n c o n t r a s t , c a t a l a s e - p o s i t i v e i s o l a t e s p r e -d o m i n a t e d i n b u c c a l m u c o s a s a m p l e s f r o mt h o s e s u b j e c t s w i t h d e t e c t a b l e l e v e l s o f b o t hc a t a l a s e - p o s i t i v e a n d - n e g a t i v e CFU.DISCUSSION

    I n f o r m a t i o n r e g a r d i n g t h e h o s t a g e a t w h i c ho r a l p a t h o g e n s c o l o n i z e , t h e i r d i s t r i b u t i o n i nt h e m o u t h , a n d t h e c o n d i t i o n s n e c e s s a r y f o rs u c c e s s f u l i m p l a n t a t i o n s h o u l d s u g g e s t s o m em e a n s t o p r e v e n t t h e i r e s t a b l i s h m e n t , a n dT A B L E 2 . R a t i o o f c a t a l a s e - p o s i t i v e t o c a t a l a s e -n e g a t i v e A c t i n o m y c e s - l i k e i s o l a t e s i n s a m p l e s f r o mc h i l d r e n a

    Mean r a t i o ( c a t a l a s e - p o s i -S u b j e c t a g e N o . o f s u b - t i v e / n e g a t i v e C F U )( y e a r s ) j e c t s D e n t a lS a l i v a p l a q u e

    3 - 4 2 1 / l b 0 . 2 3 3 . 1 05 - 6 4 / 1 0 0 . 1 0 1 0 . 2 77 - 8 1 2 / 1 4 0 . 1 9 7 . 9 69 - 1 0 7 / 1 1 0 . 1 4 2 4 . 2 31 1 - 1 2 4 / 7 0 . 1 2 2 . 5 01 3 - 1 6 4 / 6 1 . 3 2 1 4 . 2 4a O n l y c h i l d r e n f r o m w hom b o t h c a t a l a s e - p o s i t i v ea n d c a t a l a s e - n e g a t i v e A c t i n o m y c e s w e r e i s o l a t e d .b Number o f c h i l d r e n s a m p l e d .

    t h e r e b y l o w e r t h e p a t h o g e n i c p o t e n t i a l o f t h ef l o r a . D a t a p r e s e n t e d h e r e i n i n d i c a t e t h a t t h es u s p e c t e d p e r i o d o n t a l p a t h o g e n s A . v i s c o s u sa n d A . n a e s l u n d i i d i f f e r i n b o t h t h e h o s t age a tw h i c h t h e y e s t a b l i s h i n t h e human mouth a n dt h e i r p r e f e r e n c e s f o r c o l o n i z i n g v a r i o u s i n -t r a o r a l s i t e s . C a t a l a s e - n e g a t i v e i s o l a t e s resem-b l i n g A . n a e s l u n d i i were f o u n d t o c o l o n i z e mosti n f a n t s , i n c l u d i n g 40% o f t h e p r e d e n t a t e s , a n dt o m a i n t a i n p r e d o m i n a n c e among f a c u l t a t i v e l ya n a e r o b i c A c t i n o r n y c e s i n s a l i v a a n d on t h et o n g u e . T h e s e d a t a agree w i t h e a r l i e r f i n d i n g st h a t t h e p r o p o r t i o n s o f b a c t e r i a l s p e c i e s i n sa-l i v a g e n e r a l l y r e f l e c t t h e p r o p o r t i o n s on t h et o n g u e d o r s u m ( 9 , 1 2 , 1 9 ) . I n c o n t r a s t , t h e c o l o -n i z a t i o n o f b a c t e r i a r e s e m b l i n g c a t a l a s e - p o s i -t i v e A . v i s c o s u s was d e l a y e d u n t i l a f t e r t e e t hh a d e r u p t e d , a n d even t h e n t h e i r r i s e t o pre-d o m i n a n c e over c a t a l a s e - n e g a t i v e A c t i n o r n y c e si n p l a q u e was d e l a y e d f o r s e v e r a l years. A l -t h o u g h t h e medium u s e d t o d e t e c t A . v i s c o s u sa n d A . n a e s l u n d i i c o u l d o n l y recover a p p r o x i -m a t e l y 70% o f t h e i r CFU c u l t i v a b l e on b l o o dagar, i t seems u n l i k e l y t h a t u n d e t e c t e d A . v i s -cosus CFU c o u l d h a v e c o m p r i s e d a s i g n i f i c a n tp r o p o r t i o n o f t h e f l o r a , c o n s i d e r i n g t h e f a c t t h a ti n f a n t s a l i v a s a m p l e s a n d p l a q u e s a m p l e s werep l a t e d u n d i l u t e d .

    I f o r a l b a c t e r i a are t r a n s m i t t e d b e t w e e n h u -mans p r i m a r i l y v i a s a l i v a , t h e n t h e r e l a t i v eease w i t h w h i c h s p e c i f i c b a c t e r i a are t r a n s m i t -t e d w o u l d l i k e l y b e i n f l u e n c e d i n p a r t b y t h e i rr e l a t i v e n u m b e r s i n s a l i v a . I n a d d i t i o n , d i f f e r -ences i n t h e i r p r e f e r r e d i n t r a o r a l s i t e s o f c o l o n i -z a t i o n w o u l d b e e x p e c t e d t o a f f e c t t h e p r o b a b i l -i t y o f i m p l a n t a t i o n , d e p e n d e n t upon t h e a v a i l a -b i l i t y o f a s p e c i f i c l o c a l e n v i r o n m e n t c o n d u c i v et o c o l o n i z a t i o n a t t h e t i m e o f t r a n s m i s s i o n . F o re x a m p l e , S t r e p t o c o c c u s s a l i v a r i u s , w h i c h c o l o -n i z e s t h e t o n g u e a n d i s p r e s e n t i n h i g h num-b e r s i n a d u l t s a l i v a , h a s b e e n s h o w n b y C a r l s -son a n d c o - w o r k e r s t o e s t a b l i s h i n t h e m o u t h s

    T A B L E 3 . R e c o v e r y o f f a c u l t a t i v e l y a n a e r o b i c A c t i n o m y c e s f r o m v a r i o u s i n t r a o r a l s i t e s o f a d u l t sMean % o f c u l t i v at e d f l o r a Mean % o f c u l t i v a t e d A c t i n o m y c e s Mean r a t i o aS i t e s a m p l e d ( c a t a l a s e - p o s i t i v e /C a t a l a s e p o s i t i v e C a t a l a s e n e g a t i v e C a t a l a s e p o s i t i v e C a t a l a s e n e g a t i v e n e g a t i v e CFU)

    S a l i v a 1 . 5 0 . 6 4 . 3 0 . 8 2 3 . 9 7 . 1 7 6 . 1 ' 0 . 7 3( < 0 . 1 - 6 . 4 ) b ( 0 . 6 1 2 . 9 )S m o o t h - s u r f a c e 4 . 4 + 1 . 4 2 . 9 1 . 3 5 8 . 3 1 1 . 2 4 1 . 7 1 3 . 3 4d e n t a l p l a q u e ( < 0 . 1 - 1 9 . 5 ) ( < 0 . 1 - 1 6 . 9 )T o n g u e 0 . 9 + 0 . 4 5 . 1 + 1 . 1 1 5 . 7 7 . 8 8 4 . 3 0 . 6 7( < 0 . 1 - 4 . 9 ) ( 0 . 8 - 1 2 . 8 )B u c c a l m u c o s a 2 . 9 + 1 . 1 1 . 6 + 0 . 7 5 1 . 2 9 . 5 4 8 . 8 5 . 8 1( < 0 . 1 - 1 3 . 5 ) ( 0 . 2 - 1 0 . 4 )

    I n c l u d e s o n l y s u b j e c t s f r o m w hom b o t h c a t a l a s e - p o s i t i v e a n d c a t a l a s e - n e g a t i v e A c t i n o m y c e s w e r ed e t e c t e d .b Mean s t a n d a r d e r r o r o f mean ( r a n g e ) .' S t a n d a r d e r r o r same a s f o r c a t a l a s e p o s i t i v e .

    I N F E C T . I M M U N .

  • 8/6/2019 A.viscosus and a.naesulundii

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    A . VISCOSUS AND A . NAESLUNDII ORAL COLONIZATION 1123o f n e o n a t e s ( 3 ) . T h u s , t h e l a r g e s u r f a c e a r e a o ft h e t o n g u e , w h i c h i s a p r i m e e c o l o g i c a l n i c h ef o r S . s a l i v a r i u s ( 1 0 , 1 1 , 1 9 ) , p r o v i d e s a n e n v i -r o n m e n t s u i t a b l e f o r c o l o n i z a t i o n b y t h e r e l a -t i v e l y h i g h n u m b e r s o f S . s a l i v a r i u s c e l l s t r a n s -m i t t e d v i a a d u l t s a l i v a . I n c o n t r a s t , t h e e s t a b -l i s h m e n t o f S t r e p t o c o c c u s m u t a n s a n d S t r e p t o -c oc c u s s a n g u i s , w h i c h p r e f e r e n t i a l l y c o l o n i z et e e t h , i s d e l a y e d u n t i l a f t e r t o o t h e r u p t i o n ( 1 , 4 ,5 ) . I n t h e c a s e o f S . m u t a n s , a d u l t s a l i v a r yn u m b e r s a r e r e l a t i v e l y l o w c o m p a r e d w i t ht h o s e o f o t h e r o r a l s t r e p t o c o c c i , a n d o r a l c o l o n i -z a t i o n i s o f t e n d e l a y e d u n t i l a f t e r t h e f i r s t y e a ro f a g e ( 1 , 4 , 5 , 2 2 ) . I n a d d i t i o n t o i t s f a v o r e d , a n dp e r h a p s e s s e n t i a l , e c o l o g i c a l n i c h e b e i n g u n a -v a i l a b l e u n t i l t e e t h e r u p t , t h e f r e q u e n c y w i t hw h i c h i n f a n t s ' t e e t h a r e e x p o s e d t o h i g h e n o u g hS . m u t a n s d o s e s t o f a v o r i m p l a n t a t i o n may b er a r e .E v i d e n t l y , m e m b e r s o f t h e g e n u s A c t i n o -m y c e s a l s o d i f f e r i n t h e i r e a s e o f i m p l a n t a t i o ni n h u m a n s . A . n a e s l u n d i i , w h i c h c o l o n i z e s t h et o n g u e a n d i s p r e s e n t i n r e l a t i v e l y h i g h n u m -b e r s i n s a l i v a , i s r e a d i l y t r a n s m i t t e d t o t h ei n f a n t a n d may e s t a b l i s h i n t h e p r e d e n t a t em o u t h . I n c o n t r a s t , o r a l c o l o n i z a t i o n o f A . v i s -c o s u s i s d e l a y e d . T h i s may b e e x p l a i n e d i n p a r tb y i t s p r e f e r e n c e f o r c o l o n i z i n g t e e t h a n d i t sr e l a t i v e l y l o w s a l i v a r y n u m b e r s a v a i l a b l e f o rt r a n s m i s s i o n . I t i s p r o b a b l e t h a t o t h e r a g e - r e -l a t e d p h e n o m e n a a l s o i n f l u e n c e t h e a b i l i t y o fs p e c i f i c b a c t e r i a t o c o l o n i z e . I n s t u d i e s t o d e t e r -m i n e t h e r e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e a g e o f r a t sa n d t h e i r s u s c e p t i b i l i t y t o t h e i m p l a n t a t i o n o fA . v i s c o s u s N y - 1 , B r e c h e r a n d v a n H o u t e h a v ef o u n d t h a t t h e o r g a n i s m e s t a b l i s h e d m o r e r e a d -i l y i n o l d e r t h a n i n y o u n g e r r a t s ( I n t . A s s o c .D e n t . R e s . , a b s t r . 4 6 2 , 1 9 7 6 ) . I t i s o f i n t e r e s tt h a t t h e i n f e c t i n g s t r a i n w a s r e c o v e r e d i nh i g h e r p r o p o r t i o n s o f t h e f l o r a f r o m t h e r a t s 't e e t h a n d b u c c a l m u c o s a e t h a n f r o m t h e i rt o n g u e s ( S . B r e c h e r a n d J . v a n H o u t e , p e r s o n a lc o m m u n i c a t i o n ) . T h u s , t h e m o s t h e a v i l y c o l o -n i z e d r a t s i t e s w e r e t h e s a m e a s t h o s e y i e l d i n gt h e h i g h e s t r e l a t i v e p r o p o r t i o n s o f A . v i s c o s u si n t h e p r e s e n t i n v e s t i g a t i o n o f h u m a n s .F a c t o r s i n f l u e n c i n g t h e d i s s i m i l a r i t i e s i n A .v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i i p a t t e r n s o f i n -t r a o r a l c o l o n i z a t i o n h a v e n o t y e t b e e n e l u c i -d a t e d . I t i s d o u b t f u l t h a t d i f f e r e n c e s i n t h e i rn u t r i e n t r e q u i r e m e n t s h a v e a p r o f o u n d e f f e c t ,s i n c e t a x o n o m i c s t u d i e s h a v e r e v e a l e d f e w d i s -s i m i l a r i t i e s i n t h e t w o s p e c i e s e x c e p t f o r d i s -t i n c t d i f f e r e n c e s i n t h e i r c a t a l a s e - l i k e a c t i v i t i e s( 1 4 ; E . D . F i l l e r y , G . H . B o w d e n , a n d J . M .H a r d i e , I n t . A s s o c . D e n t . R e s . , a b s t r . L - 2 1 8 ,1 9 7 5 ) . M o r e o v e r , r e p o r t e d s i m i l a r i t i e s i n t h e i rd e o x y r i b o n u c l e i c a c i d b a s e r a t i o s ( A . L . C o y -k e n d a l l , T . W . L e e , a n d A . T . B r o w n , I n t . A s -

    s o c . D e n t . R e s . a b s t r . 7 4 , 1 9 7 4 ) a n d c r o s s - r e a c -t i o n s b e t w e e n s o m e a n t i g e n s ( 8 ) s u g g e s t t h a tw h a t a r e now t e r m e d A . v i s c o s u s a n d A . n a e s -l u n d i i may e v e n t u a l l y b e c l a s s i f i e d a s c a t a l a s ea c t i v i t y v a r i a n t s o f o n e s p e c i e s . S i n c e s e v e r a lm e m b e r s o f t h e d e n t a l p l a q u e f l o r a a r e knownt o p r o d u c e h y d r o g e n p e r o x i d e , i t i s p o s s i b l e t h a tt h e i n c r ea s e d p r o p o r t i o n s o f A . v i s c o s u s r e -c o v e r e d f r o m p l a q u e a c c u m u l a t i o n s may h a v er e s u l t e d f r o m t h e i n d u c t i o n o f c a t a l a s e a c t i v i t yamong p o p u l a t i o n s o f A c t i n o m y c e s c e l l s i n r e -s p o n s e t o h i g h l o c a l h y d r o g e n p e r o x i d e c o n c e n -t r a t i o n s . H o w e v e r , t h e f i n d i n g s i n t h i s s t u d yt h a t c a t a l a s e - n e g a t i v e A c t i n o m y c e s p r e d o m i -n a t e d i n p l a q u e c o l l e c t e d f r o m y o u n g c h i l d r e na n d t h e f i n d i n g s o f S o c r a n s k y a n d c o - w o r k e r st h a t c a t a l a s e - p o s i t i v e A . v i s c o s u s i s o n e o f t h ef i r s t s p e c i e s t o r e c o l o n i z e c l e a n e d a d u l t t e e t h( S . S . S o c r a n s k y , A . D . M a n g a n i e l l o , D . P r o -p a s , V . O r a m , a n d J . v a n H o u t e , J . P e r i o d o n -t a l . R e s . , i n p r e s s ) d o n o t s u p p o r t t h i s c o n t e n -t i o n . I f c a t a l a s e - l i k e a c t i v i t y i s o f a n y s e l e c t i v ea d v a n t a g e f o r A . v i s c o s u s c e l l s , i t d o e s n o t a p -p e a r t o b e a b a s i c e c o l o g i c a l d e t e r m i n a n t a f f e c t -i n g t h e i r i n i t i a l c o l o n i z a t i o n .A m o r e l i k e l y e x p l a n a t i o n f o r d i f f e r e n c e s i nt h e p r o p o r t i o n a l d i s t r i b u t i o n o f A . v i s c o s u s a n dA . n a e s l u n d i i may i n v o l v e t h e s e l e c t i v i t y w i t hw h i c h t h e y a d h e r e t o v a r i o u s o r a l s u r f a c e s .S p e c i f i c i t y i n t h e e x t e n t t o w h i c h b a c t e r i a c a na t t a c h t o s u r f a c e s h a s b e e n s u b s t a n t i a t e d a s am a j o r e c o l o g i c a l p r e s s u r e r e g u l a t i n g t h e i n d i g e -n o u s m i c r o b i a l f l o r a o f t h e m o u t h a n d h a s b e e ni m p l i c a t e d among f a c t o r s i n f l u e n c i n g t h e t i s s u et r o p i s m s o f o v e r t p a t h o g e n s ( 7 , 1 0 ) . T h e f a c tt h a t A . v i s c o s u s c o l o n i z e s c l e a n e d t e e t h m o r er e a d i l y t h a n A . n a e s l u n d i i ( S o c r a n s k y e t a l . , i np r e s s ) , w h e r e a s t h e n u m b e r o f A . v i s c o s u s c e l l si n s a l i v a a v a i l a b l e f o r a t t a c h m e n t i s s e v e r a l -f o l d f e w e r , s u g g e s t s t h a t A . v i s c o s u s c e l l s h a v ea g r e a t e r a f f i n i t y f o r t e e t h t h a n c e l l s o f A .n a e s l u n d i i . S u c h d i f f e r e n c e s i n a f f i n i t y f o rt e e t h a n d s a l i v a r y c e l l c o n c e n t r a t i o n s h a v eb e e n u s e d t o p r e d i c t t h e p r o b a b i l i t y o f c o l o n i z a -t i o n b y o r a l s t r e p t o c o c c i a n d l a c t o b a c i l l i o ns m o o t h s u r f a c e s o f t e e t h ( 2 4 ) .A . v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i i may a l s o d i f f e ri n t h e d e g r e e t o w h i c h t h e y c a n a d h e r e t o a c c u -m u l a t e d p l a q u e d e p o s i t s . D i f f e r e n c e s i n t h ea b i l i t y o f s o m e A . v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i is t r a i n s t o a g g r e g a t e s e l e c t i v e l y w i t h g l u c o s e -g r o w n s t r a i n s o f p l a q u e s t r e p t o c o c c i h a v e b e e nr e p o r t e d ( R . P . E l l e n a n d I . B . B a l c e r z a k -R a c z k o w s k i , J . P e r i o d o n t a l R e s . , i n p r e s s ) . I na d d i t i o n , B o u r g e a u a n d M c B r i d e h a v e s h o w nr e c e n t l y t h a t A . v i s c o s u s c e l l s b i n d r e a d i l y t os u c r o s e - g r o w n S . m u t a n s a n d S . s a n g u i s c e l l sa n d t o g l u c a n s e l a b o r a t e d b y t h e s e s t r e p t o c o c c i( 2 ) . T h e a b i l i t y o f A . n a e s l u n d i i t o a g g r e g a t e

    V O L . 1 4 , 1 9 7 6

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    1 1 2 4 ELLEN I N F E C T . I M M U N .u n d e r s i m i l a r c o n d i t i o n s h a s n o t b e e n r e p o r t e d .T h e f u l l i m p a c t o f a d h e r e n c e - r e l a t e d p h e n o m -e n a a n d i n t e r b a c t e r i a l a f f i n i t i e s o n t h e e s t a b -l i s h m e n t a n d p r o p o r t i o n a l d i s t r i b u t i o n o f o r a lA c t i n o m y c e s s p e c i e s i s n o t y e t c l e a r . H o w e v e r ,i t i s e v i d e n t t h a t A . v i s c o s u s a n d A . n a e s l u n d i i ,w h i c h a r e s i m i l a r e n o u g h p h y s i o l o g i c a l l y t o b ec o n s i d e r e d m e m b e r s o f t h e s a m e s p e c i e s , d i f f e rg r e a t l y i n t h e p a t t e r n i n w h i c h t h e y n a t u r a l l yi n f e c t t h e human h o s t .

    ACKNOWLEDGMENTST h i s i n v e s t i g a t i o n w a s s u p p o r t e d b y g r a n t s T G - 2 a n d5 6 1 9 f r o m t h e M e d i c a l R e s e a r c h C o u n c i l o f C a n a d a a n d ag r a n t f r o m t h e A t k i n s o n C h a r i t a b l e F o u n d a t i o n .I t h a n k H . J . Sandham f o r h i s h e l p f u l s u g g e s t i o n s d u r i n gt h e p r e p a r a t i o n o f t h e m a n u s c r i p t .

    LITERATURE CI TED1 . B e r k o w i t z , R . J . , H . V . J o r do n , a n d G . W h i t e . 1 9 7 5 .T h e e a r l y e s t a b l i s h m e n t o f S t r e p t o c o c c u s m u t a n s i nt h e m o u t h s o f i n f a n t s . A r c h . O r a l B i o l . 2 0 : 1 7 1 - 1 7 4 .2 . B o u r g e a u , G . , a n d B . C . M c B r i d e . 1 9 7 6 . D e x t r a n - m e -d i a t e d i n t e r b a c t e r i a l a g g r e g a t i o n b e t w e e n d e x t r a n -s y n t h e s i z i n g s t r e p t o c o c c i a n d A c t i n o m y c e s v i s c o s u s .I n f e c t . Immun. 1 3 : 1 2 2 8 - 1 2 3 4 .3 . C a r l s s o n , J . , H . G r a h n e n , G . J o n s s o n , a n d S . W i k n e r .1 9 7 0 . E a r l y e s t a b l i s h m e n t o f S t r e p t o c o c c u s s a l i v a r i u si n t h e m o u t h s o f i n f a n t s . J . D e n t . R e s . 4 9 : 4 1 5 - 4 1 8 .4 . C a r l s s o n , J . , H . G r a h n e n , G . J o n s s o n , a n d S . W i k n e r .1 9 7 0 . E s t a b l i s h m e n t o f S t r e p t o c o c c u s s a n g u i s i n t h em o u t h s o f i n f a n t s . A r c h . O r a l B . i o l . 1 5 : 1 1 4 3 - 1 1 4 8 .5 . C a t a l a n o t t o , F . A . , I . L . S h k l a i r , a n d H . J . K e e n e . 1 9 7 5 .

    P r e v a l e n c e a n d l o c a l i z a t i o n o f S t r e p t o c o c c u s m u t a n si n i n f a n t s a n d c h i l d r e n . J . Am. D e n t . A s s o c . 9 1 : 6 0 6 -6 0 9 .6 . E l l e n , R . P . , a n d I . B . B a l c e r z a k - R a c z k o w s k i . 1 9 7 5 .D i f f e r e n t i a l medium f o r d e t e c t i n g d e n t a l p l a q u e b a c -t e r i a r e s e m b l i n g A c t i n o m y c e s v i s c o s u s a n d A c t i n o -m y c e s n a e s l u n d i i . J . C l i n . M i c r o b i o l . 2 : 3 0 5 - 3 1 0 .7 . E l l e n , R . P . , a n d R . J . G i b b o n s . 1 9 7 4 . P a r a m e t e r s a f -f e c t i n g t h e a d h e r e n c e a n d t i s s u e t r o p i s m s o f S t r e p t o -c o c c u s p y o g e n e s . I n f e c t . Immun. 9 : 8 5 - 9 1 .8 . G e r e n c s e r , M . A . , a n d J . M . S l a c k . 1 9 7 6 . S e r o l o g i c a li n d e n t i f i c a t i o n o f A c t i n o m y c e s u s i n g f l u o r e s c e n t a n t i -b o d y t e c h n i q u e s . J . D e n t . R e s . 5 5 ( s p e c i a l i s s u eA ) : A 1 8 4 - A 1 9 1 .9 . G i b b o n s , R . J . , B . K a p s i m a l i s , a n d S . S . S o c r a n s k y .1 9 6 4 . T h e s o u r c e o f s a l i v a r y b a c t e r i a . A r c h . O r a l B i o l .9 : 1 0 1 - 1 0 3 .

    1 0 . G i b b o n s , R . J . , a n d J . v a n H o u t e . 1 9 7 5 . B a c t e r i a l a d h e r -e n c e i n o r a l m i c r o b i a l e c o l o g y . A n n u . R e v . M i c r o b i o l .2 9 : 1 9 - 4 4 .1 1 . G o r d o n , D . F . , a n d R . J . G i b b o n s . 1 9 6 6 . S t u d i e s o n t h ep r e d o m i n a n t c u l t i v a b l e m i c r o o r g a n i s m s f r o m t h e h u -man t o n g u e . A r c h . O r a l B i o l . 1 1 : 6 2 7 - 6 3 2 .1 2 . G o r d o n , D . F . , a n d B . B . J o n g . 1 9 6 8 . I n d i g e n o u s f l o r af r o m human s a l i v a . A p p l . M i c r o b i o l . 1 6 : 4 2 8 - 4 2 9 .1 3 . G u g g e n h e i m , B . , a n d H . E . S c h r o e d e r . 1 9 7 4 . R e a c t i o n si n t h e p e r i o d o n t i u m t o c o n t i n u o u s a n t i g e n i c s t i m u l a -t i o n i n s e n s i t i z e d g n o t o b i o t i c r a t s . I n f e c t . I m m u n .1 0 : 5 6 5 - 5 7 7 .1 4 . H o l m b e r g , K . , a n d H . 0 . H a l l a n d e r . 1 9 7 3 . N u m e r i c a lt a x o n o m y a n d l a b o r a t o r y i d e n t i f i c a t i o n o f B a c t e r i -onema m a t r u c h o t i i , R o t h i a d e n t o c a r i o s a , A c t i n o m y c e sn a e s l u n d i i , A c t i n o m y c e s v i s c o s u s , a n d s o m e r e l a t e db a c t e r i a . J . G e n . M i c r o b i o l . 7 6 : 4 3 - 6 3 .1 5 . J o r d a n , H . V . 1 9 7 1 . R o d e n t m o d e l s y s t e m s i n p e r i o d o n -t a l d i s e a s e r e s e a r c h . J . D e n t . R e s . 5 0 : 2 3 6 - 2 4 2 .1 6 . J o r d a n , H . V . , a n d P . H . K e y e s . 1 9 6 4 . A e r o b i c , g r a m -p o s i t i v e f i l a m e n t o u s b a c t e r i a a s e t i o l o g i c a g e n t s o fe x p e r i m e n t a l p e r i o d o n t a l d i s e a s e i n h a m s t e r s . A r c h .O r a l B i o l . 9 : 4 0 1 - 4 1 4 .1 7 . J o r d a n , H . V . , P . H . K e y e s , a n d S . B e l l a c k . 1 9 7 2 .P e r i o d o n t a l l e s i o n s i n h a m s t e r s a n d g n o t o b i o t i c r a t si n f e c t e d w i t h A c t i n o m y c e s o f human o r i g i n . J . P e r i o -d o n t a l R e s . 7 : 2 1 - 2 8 .1 8 . K e y e s , P . H . , a n d H . V . J o r d a n . 1 9 6 4 . P e r i o d o n t a l l e -s i o n s i n t h e S y r i a n h a m s t e r . I I I . F i n d i n g s r e l a t e d t oa n i n f e c t i o u s a n d t r a n s m i s s i b l e c o m p o n e n t . A r c h .O r a l B i o l . 9 : 3 7 7 - 4 0 0 .1 9 . K r a s s e , B . 1 9 5 4 . T h e p r o p o r t i o n a l d i s t r i b u t i o n o f S t r e p -t o c o c c u s s a l i v a r i u s a n d o t h e r s t r e p t o c o c c i i n v a r i o u sp a r t s o f t h e m o u t h . O d o n t o l . R e v y 5 : 2 0 3 - 2 1 1 .2 0 . M c C a r t h y , C . , M . L . S n y d e r , a n d R . B . P a r k e r . 1 9 6 5 .

    T h e i n d i g e n o u s o r a l f l o r a o f m a n . I . T h e n e w b o r n t ot h e 1 - y e a r - o l d i n f a n t . A r c h . O r a l B i o l . 1 0 : 6 1 - 7 0 .2 1 . S o c r a n s k y , S . S . , C . H u b e r s a k , a n d D . P r o p a s . 1 9 7 0 .I n d u c t i o n o f p e r i o d o n t a l d e s t r u c t i o n i n g n o t o b i o t i cr a t s b y a human o r a l s t r a i n o f A c t i n o m y c e s n a e s l u n -d i i . A r c h . O r a l B i o l . 1 5 : 9 9 3 - 9 9 5 .2 2 . S o c r a n s k y , S . S . , a n d S . D . M a n g a n i e l l o . 1 9 7 1 . T h e o r a lm i c r o b i o t a o f man f r o m b i r t h t o s e n i l i t y . J . P e r i o d o n -t o l . 4 2 : 4 8 5 - 4 9 4 .2 3 . v a n H o u t e , J . , R . J . G i b b o n s , a n d S . B . B a n g h a r t . 1 9 7 0 .A d h e r e n c e a s a d e t e r m i n a n t o f t h e p r e s e n c e o f S t r e p -t o c o c c u s s a l i v a r i u s a n d S t r e p t o c o c c u s s a n g u i s o n t h ehuman t o o t h s u r f a c e . A r c h . O r a l B i o l . 1 5 : 1 0 2 5 - 1 0 3 4 .2 4 . v a n H o u t e , J . , a n d D . B . G r e e n . 1 9 7 4 . R e l a t i o n s h i pb e t w e e n t h e c o n c e n t r a t i o n o f b a c t e r i a i n s a l i v a a n dt h e c o l o n i z a t i o n o f t e e t h i n h u m a n s . I n f e c t . I m m u n .9 : 6 2 4 - 6 3 0 .