det lectinas
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determinacion de lectinasTRANSCRIPT
7/17/2019 Det Lectinas
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Diluir en forma
seriada 0.5 mL
del extracto con
una pipeta
Determinación
semicuantitativa de
lectinas
Colocar 10 tubos de
hemolisis Colocar 0.5 mL
de disolución salina
Determinación
semicuantitativa de lectinas en
Sensibilizac
ión de los
eritrocitos
reparación de
!gregar 0.5 mL de suspensión de
glóbulos ro"os al #$ a cada tubo %
esar la muestra 1g demta seca % 5 g de mta
h&medas % moler.
'rasvasar
cuantitativamente a un
matraz 1(5 mL %
adicionar (5 mL de
reparar un control negativo con
0.5 mL de disolución isotónica % 0.5
mL de disolución de eritrocitos al #
)esuspender el
pa*uete de
eritrocitos al
volumen original del
paso + % conservar
'rasvasar la sangre
de cone"o con
heparina a un tubo
de centrifuga para
lavarla dos veces con
disolución isotónica
en una proporción
sangre, disolución-ncubar las series de tubos a + /C
durante una horaCentrifugar
nuevamente paraeliminar la enzima %
lavar tres veces con
disolución isotónica.
xtraer con agitación
continua % transcurrida
1 hora de"ar sedimentar
% ltrar
Centrifugar a (500
rmp durante 10 min Comparar el control negativo
con la serie de tubos.
ositivo tubos con
sedimentación
l <imo tubo de cada serie
donde se presente aglutinación
Llevar al aforo (5 mL con
cloruro de sodio al 1 $ %
guardar en refrigeración.
or cada 10 mL de
glóbulos ro"os al #$
agregar 1 mL de
disolución de tripsinae incubar durante #5
min a una
temperatura de +
liminar el
sobrenadante por
decantación2
despu3s del
segundo lavado
diluir el pa*uete de
glóbulos ro"os al #$
4por cada mL de
pa*uete de