enterobacteriaceae 1
TRANSCRIPT
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
1/35
Fam.
Enterobacteriaceae• Bacili Gram negativi• Mobili (cu exceptia Shigella, Yersinia, Klebsiella )• Nesporulati• Nepretentiosi nutritiv• Aerobi facultativi anaerobi• Catalazo pozitivi• Oxi azo negativi• Fermenteaza glucoza (cu !fara pro ucere e gaz)•
"e uc nitratii la nitriti• ## genuri ($% e genuri e interes me ical)• Salmonella• Shigella• Yersinia
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
2/35
• Escherichia• Klebsiella• Enterobacter• Serratia• Proteus• Bacterii ubicuitare
– ma&oritatea speciilor intra in componenta
microbiotei comensale intestinale la om sianimale
– pot coloniza si mucoasa genito'urinara – prezente in m extern (sol apa plante)
• Categorii e patogenitate
– atogeni primari intestinali* Salmonella,Shigella, Yersinia – Con itionat patogeni* pot pro uce infectii
aca
• pose a factori suplimentari e virulenta
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
3/35
(ex patotipuri e E coli )• exista e+ciente ale apararii imune
– Ocazional patogeni
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
4/35
Categoria GenSemnifcatieetiologica
atogeneSalmonella,Shigella, CertaYersinia, E coli(fenotipuripatogene)
Con itionatpatogene Citrobacter,
,zolate semni+cativin
Enterobacter,probenecontaminate
Escherichia (alte (-C" colectiilocalizari ecat neabce ate)
intestinala siurinara) emoculturiKlebsiella,Morganella,
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
5/35
Proteus, SerratiaOcazional patogene Hafnia, Kluyvera,
Pantoea s.a.
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
6/35
A. ,nfectii intestinale ( Salmonella, Shigella, Yersiniaenterocolitica, Escherichia coli patotipuri
iareigene etc) B. ,nfectii cu alte localizari • ,nfectii urinare ( Escherichia coli Proteus mirabilis,
Enterobacter spp. Klebsiella pneumoniae etc) • ,nfectii respiratorii frecvent nosocomiale ( Klebsiella
pneumoniae, Enterobacter spp. Escherichia colietc)
• Meningite neonatale ( Escherichia coli) • ,nfectii ale plagilor c irurgicale ( Proteus )C. ,nfectii sistemice• Bacteriemii ( Escherichia coli Enterobacter spp.
Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis)
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
7/35
• /epticemii ( Salmonella Typhi, S Paratyphi, Yersinia pestis ) Caractere microscopice –
bacili gram negativi
– Yersinia 0 frecvent cocobacili – Proteus 0 aspect polimorf – Klebsiella 0 pot prezenta capsula (in pro us
patologic)
• Caractere cultivare• pe m simple upa 1%'$# ore e incubare la 234C
formeazacolonii e $'2 mm forma /5 – Klebsiella colonii mucoase cu ten inta lacon6uare
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
8/35
– roteus 0 culturi cu caracter invaziv in valuriconcentrice
– /erratia 0 colonii pigmentate in rosu • pe geloza sange 0 uneori colonii 7 emolitice
(caracter e tulpina nu e specie8)• pe m iferentiale sau selective 0 caractere e
iferentiere (ex fermentarea lactozei)Caractere bioc imice 0 permit i enti+carea• preliminara• e+nitiva
prin utilizarea unor sisteme• conventionale• multitest 0 mai multe teste in acelasi me iu (9/,
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
9/35
M,: M,-F)• microtest 0 (manuale ! automate) baterii e teste
bioc imice unele cu citire rapi a (#'; ore)
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
10/35
, enti+care• Caractere bioc imice 0 me ii multitest
– fermentarea unor za aruri (glucoza lactozaetc)
– pro ucerea unor metaboliti (pro ucerea ein ol evi entiata cu reactiv
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
11/35
– Ag = (6agelar) 0 la tulpinile mobile 0 e+nesctipuri
– Ag e invelis* > (capsular) la Klebsiella si Ecoli B la Shigella ?i la Salmonella
Algoritmul izolarii si identifcariienterobacteriilor• robe
– Necontaminate (ma uva osoasa colectiiinc ise sange)
– :rina
– Contaminate (materii fecale bila probenecroptice alimente suspecte)
Algoritmul izolarii si identifcarii
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
12/35
enterobacteriilor• Me ii e izolare 0 in functie e tipul
probei – necontaminate* agar simplu @ agar sange – sange* emoculturi – urina* agar sange @ agar Mac Con e
– contaminate* m e imbogatire @ m selective(MacCon e A C- D- =e toen // EilsonBlair) m cromogene
colonii izolate
Algoritmul izolarii si identifcariienterobacteriilor
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
13/35
• Me ii multitest (9/, M,:!M,-F) pentrui enti+care preliminara
•
, enti+care e+nitiva – 9este bioc imice – /erologica (lama!tub) – 9ipare
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
14/35
Escherichia coli• component important al microbiotei colonului• Mobil (ma&oritatea tulpinilor)• fermenteaza Glu cu pro ucere e CO $
fermenteaza lactoza• pro uce in ol test rosu metil @• Nu pro uce = $ / ureaza fenilalanin
ezaminaza• Nu utilizeaza citratul ca unica sursa e carbon
(nu cultiva pe m m /immons)• ,nfectii intestinale (patotipuri iareigene)• ,nfectii urinare ( E coli ! cea mai frecventa
cauza ) • Meningite neonatale ( E coli >1)• neumonii
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
15/35
• eritonite colecistite• Bacteriemii• ,nfectii ale plagilor (etiologie mixta)• E coli enterotoxigen (ETEC) • etermina upa o incubatie e 1'$ zile
iaree apoasa
autolimitata secun ar expunerii la apasau alimente contaminate (1 % 0 1 1 :FC)
•
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
16/35
in ibarea absorbtiei Na in lumen – 9oxina termostabila (9/) 0 structura
asemanatoare5 activeaza guanilat 0 ciclaza•
A ezine co i+cate e gene plasmi ice – Fimbrii (Colonization Factor Antigens) CFA , CFA,, CFA ,?
– Anticorpi antia ezine au rol protector
• E coli enterotoxigen (ETEC) 0i enti+care (laboratoare ereferinta)
• ,n vivo 0 ansa ileala ligaturata (iepure)inoculare intragastrica
(soarece n.n.)• ,n vitro
–
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
17/35
– C"* etectarea lt ", st " –
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
18/35
uremic (anemie emoliticamicroangiopatica trombocitopenie insuf renala acuta)
• Citotoxinele 1 si $ – asemanatoare structural toxinei / iga
pro usa e Shigella #ysenteriae (toxine/ iga'li e /-9)
– efect citopatic pe celulele ?ero
– iseminare sistemica – tropism pentru receptori e la nivel en otelialrenal pancreatic cerebral
– co i+cate e gene profagice
•
A ezina – intimina proteina co i+cata cromosomal ( eaeA) etermina aplatizarea microvililor
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
19/35
• E coli enterohemoragic (EHEC) 'i enti+care
• ,n vitro – ,nca rare in serogrupe 0 aglutinare – efect citopatic pe celulele ?ero – etectarea genelor st$ %&', eventual eae ( – etectarea toxinelor /-9 1 si /-9$ prin
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
20/35
• E coli enteroinvaziv (EIEC) • etermina iaree apoasa sau mai
rar febra iaree cu mucus sisange (s r izenteriform)• ,nvazia celulelor epiteliale atorita
unor proteine ,pa co i+cate egene plasmi ice – enetrarea in celulele M ale mucoaseicolonului
– Captarea e catre Mf lizareafagozomului supravietuireintracelulara eliberare in spatiulsubepitelial si en ocitare e catrecelulele intestinale
– Multiplicare intracelulara si extin erela celule a iacente
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
21/35
– -iza celulelor epiteliale si raspin6amator pro uc ulceratii
•
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
22/35
(E!EC) • etermina iaree apoasa uneori
prelungita la copii K 1 an• Asociere cu anumite serotipuri• Atasare la enterocite prin a ezina
+mbriala (Bun le formingpilus BF ) care favorizeaza formarea
e microcolonii a erente• ro ucerea unor proteine secretorii
co i+cate cromosomal ( esp )• A erare prin intimina co i+cata
cromosomal ( eae A
Escherichia coli attaching an#e acing ) • mo i+cari ale citosc eletului si
stergerea microvililor care
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
23/35
etermina alterareatransportului electrolitilor siapei
• E coli entero atogen(E!EC)
• ,n vitro – ,nca rare in serogrupe 0 aglutinare cu
seruri polivalente si monovalente –
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
24/35
uneori cu mucus• /e ataseaza la suprafata enterocitelor
prin +mbrii (AggregativeA erence Fimbriae AAF , ' ,,,)co i+cate plasmi ic
• /timuleaza secretia e mucus(bio+lm)
• ro uce citotoxine care eterminanecroza microvililor
• E coli aderent di"uz(#AEC)
• ro uce iaree apoasa la copii e 1'Hani
• A ezine +mbriale
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
25/35
• Mo i+carea microvililor
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
26/35
• Fenotipuri uropatogene – cauza a L % J in infectiile urinare necomplicate –
Asociere cu anumite serotipuri O (1 $ # ; 3 1;1% 3H) – Factori e patogenitate* – a ezine +mbriale ( A associate pili) 0 recunosc
Ag prezente pe suprafata celulelor uroepiteliale si a
ematiilor (grup sangvin ) – A ezine ne+mbriale – aerobactina 0 +xarea Fe – emolizine 0 in iba fagocitoza – capsula poliza ari ica (serotipuri capsulare >1 $
2 H sa)
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
27/35
• Fenotipuri bacteriemice – Factor e patogenitate* antigen capsular >1
(similitu ine structurala cu Ag capsular e grup B al*eisseria meningiti#is si cu glicopepti e cerebrale)
– etermina meningite neonatale ( ca si Streptococcus agalactiae si +isteria monocytogenes )
#iagn de laborator• ro us patologic 0 in functie e s r clinic
– Materii fecale – :rina – /puta – -ic i peritoneal – /ange – uroi
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
28/35
– -C"
• / r iareic 0 implicarea unui fenotip patogen e Ecoli in absenta izolarii unui patogen
• iagn fenotipului iareigen ' meto e – Moleculare – Fenotipice
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
29/35
Klebsiella, Enterobacter, Serratia• Fermenteaza lactoza (-ac @)• ro uc acetoina in glucoza (r ?oges' ros auer
poz.)• cultiva pe m cu citrat (m /immons)• /pecii
– K pneumoniae susp pneumoniae, subspo-enae, subsp rhinoscleromatis), K o$ytoca
– Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes – Serratia marcescens
Klebsiella• Fermenteaza lactoza• ro uc acetoina in glucoza (r ?oges' ros auer
poz.)• Nu pro uce = $ /• cultiva pe m cu citrat (m /immons)
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
30/35
• in ol – Negativ K pneumoniae susp pneumoniae,
subsp o-enae, subsp rhinoscleromatis), –
ozitiv K o$ytoca
Klebsiella pneumoniae• prezenta in microbiota colonului5 poate
coloniza mucoasa oro'faringiana• Factori e virulenta
– Capsula poliza ari ica (33 serotipuri)5serotipurile >1 si >$ 0 mai virulente
– Fenotip ipermucos (sinteza abun enta epoliza ari capsular) 0 asociat infectiilorinvazive5 gena plasmi ica rmp 0 regleazaexpresia genei cps
– - / 0 in iba +xarea complementuluistimuleaza eliberarea e cito ine – /i erofori (aerobactin) – Fimbrii (pili)
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
31/35
• ,nfectii (mai ales nosocomiale asociate unorinvestigatii invazive)
• pulmonare•
infectii ale plagilor si arsurilor• Bacteriemii septicemii• urinare (serotip >$)• abcese epatice (serotip >1)• eritonite 0 la pacienti cu ascita ( upa E coli )•
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
32/35
• 9ratament – Natural rezistente la aminopeniciline – /ensibilitate variabila5 tulpinile nosocomiale
frecvent multirezistente prin pro ucerea•
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
33/35
• Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes• Mobili• Fermenteaza Glu cu pro ucerea unor cantitati marie gaz• Fermenteaza -ac• Nu pro uce in ol = $ / fenilalanin ecarboxilaza• oar Enterobacter aerogenes pro uce
lizin ecarboxilaza• ,nfectii similare K pneumoniae • Natural rezistente la aminopeniciline
cefalosporine gen ,• "ezistenta variabila
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
34/35
Proteus• Proteus mirabilis P vulgaris•
Componente ale microbiotei intestinale la om sianimale• Mobili• -actozo neg pro uc = $/ fenilalanin' ezaminaza
ureaza•
Nu pro uc lizin ecarboxilaza5 P vulgaris estein ol neg• ,nfectii urinare (ureaza alcalinizeaza urina
favorizan precipitarea sarurilor si formareacalculilor5 pe suprafata calculilor persistaProteus )
• bacteriemii infectii ale plagilor• e me ii neselective 0 crestere cu caracterinvaziv 9ratament
-
8/16/2019 Enterobacteriaceae 1
35/35
• Natural rezistente la polimixine si tetracicline• /ensibilitate variabila la alte Atb• 9estarea sensibilitatii la Atb 0 antibiograma
ifuzimetrica