POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR)DASAR BIOTEKNOLOGIKELAS K

GROUP 3 :1. Retno Febriyanti (115100600111028)2. Ghani Rasyid Ning (125100600111009)3. Quinntita Rofifadhila (115100607111004)4. Ni Luh Bella W. F. D (125100601111001)5. Muhammad Adiansyah (125100607111005)6. Nanda Filosofia (115100600111034)7. Fathul Mubin (115100600111006)

1. DEFINISI PCR

2. KOMPONEN PCR

3. SIKLUS PCR

4. PRINSIP DASAR PCR

5. VARIASI PCR

6. APLIKASI PCR

@ OUTLINE

What is PCR?

@ Polymerase Chain ReactioN

PCR adalah suatu teknik atau metode perbanyakan (replikasi) DNA secara enzimatik tanpa menggunakan organisme.

@ KOMPONEN PCR

1. CETAKAN DNA

2. PRIMER

6. PCR GENE CYCLER

4. BUFFER PCR & KONSENTRASI MG2+

3. TAQ DNA POLYMERASE

5. NUKLEOTIDA (dNTP)

@ SIKLUS PCR

1. Denaturasi

Untaian Ganda DNA

2. Primer Annealin

g

3. DNA Polymera

se Extensio

n

@ PRINSIP DASAR PCR

PENGGANDAAN DNA

PRIME FORWARD &

REVERSE

DEOXYNUCLEOSIDE TRIPHOSPHATES

(dNTPs)

ENZIM DNA POLIMERASE

@. Reverse Transcriptase PCR (RT-PCR)

# Yang diamplifikasi berupa m-RNA# Sampel yang digunakan adalah RNA yang diekstrak dari sel atau jaringan# Dibantu oleh enzim Reverse Transcriptase# RT-PCR digunakan sebagai alat diagnostik untuk mendeteksi dan menentukan serotipe virus, sebagai informasi untuk studi epidemiologi

@ VARIASI-VARIASI PCR

@. Nested PCR# Teknik perbanyakan replikasi sampel DNA dengan

bantuan enzim DNA polymerase# Menggunakan dua pasang primer untuk

mengamplifikasi fragmen# Hasil fragmen DNA dari nested PCR lebih

spesifik (lebih pendek) dibandingkan dengan PCR biasa

# Waktu yang diperlukan dalam reaksi Nested PCR lebih lama daripada PCR biasa

@ VARIASI-VARIASI PCR…

Denaturasi

Penempelan• Primer 1• Amplifikasi• Produk Pertama

Pemanjangan• Primer 2 (Nested

Primer)• Amplifikasi• Produk Kedua

@ APLIKASI PCR

ISOLASI GEN

DNA SEQUENCING

IDENTIFIKASI FORENSIK

DIAGNOSA PENYAKIT

• Aryani, Any dan Kusumawaty, Diah. 2007. Prinsip-prinsip Polymerase Chain

Reaction dan Aplikasinya.http://file.upi.edu/Direktori

/FPMIPA/JUR._PEND._BIOLOGI/197008112001122-DIAH_KUSUMAWATY/

Materi/PCRkursus.pdf. Diakses pada tanggal 19 Maret 2013 pukul 19.14

WIB.

• Campbell dan Farrell. 2008. Biochemistry Sixt Edition. Kanada :

Brooks/cole.

• Kurniawan, Annas. 2012. Reaksi Polimerase Berantai atau Polymerase

Chain Reaction (PCR). Bali : Universitas Pendidikan Ganesha.

• Muladno. 2002. Seputar Teknologi Rekayasa Genetika. Bogor : Pustaka

Wirausaha Muda dan USESE Foundation.

• Stanfield, W., dkk. 2009. Biologi Molekuler dan Sel. Jakarta : Erlangga.

@ REFERENSI

JIKA INGIN MENJADI YANG TERBAIK, LAKUKAN YANG TERBAIK TERLEBIH

DAHULU.

TERIMA KASIH… AKHIR KATA…

WASSALAMUALAIKUM…