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Proceedings of the 16th Italian Association of Equine Veterinarians

Congress

Carrara, Italy January 29-31, 2010

Next SIVE Meeting:

Feb. 4-6, 2011 – Montesilvano, Pescara, Italy

Reprinted in the IVIS website with the permission of the Italian Association of Equine Veterinarians – SIVE

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VALUTAZIONE DI ALCUNI FATTORI CHE INFLUENZANO LA PROGNOSI ABREVE TERMINE IN CORSO DI SEPSI ARTICOLARE NEL PULEDRO:

STUDIO RETROSPETTIVO

C. Bazzica, DVM1, C. Tamantini, DVM, PhD1, M. Cercone, DVM1, S. Nannarone, DVM, PhD1,F. Beccati, DVM1, V.M. Masi, DVM2, F. Passamonti, DVM, PhD1, M. Pepe, DVM, PhD1

1Centro di Studio del Cavallo Sportivo - Dipartimento di Patologia, Diagnostica e Clinica Veterinaria Università degli Studi di Perugia, Perugia, Italia

2Sezione di Clinica Chirurgica Veterinaria e Medicina d’urgenza - Dipartimento di Salute Animale Università degli Studi di Parma, Parma, Italia

Area di interesse: Ortopedia

Scopo del lavoro. Valutare e confrontare l’efficacia a breve termine di diverse strategie di tratta-mento in casi di artrite settica nel puledro nei primi sei mesi di vita. Materiali e metodi. Lo studio, di tipo retrospettivo, è stato condotto mediante revisione di casi cli-nici pervenuti presso la nostra struttura da Gennaio 2000 a Dicembre 2008. Sono stati inclusi nellostudio 34 puledri di età inferiore ai 6 mesi di vita di varie razze con accertata infezione articolarecaratterizzata dalla presenza di almeno due dei seguenti parametri: zoppia, effusione articolare, li-quido sinoviale caratterizzato da più di 20.000 WBC/µl e proteine totali maggiori di 2,5 g/dl. Cia-scun caso è stato classificato in base a sesso, età, problemi riscontrati alla nascita, arto interessato,sepsi mono o poliarticolare, patogenesi dell’infezione (ematogena, non ematogena), presenza diconcomitante osteomielite, numero di lavaggi articolari effettuati (nessuno, uno, più di uno), tipo-logia di trattamento antibiotico sistemico, trattamento locale con antibiotici o meno (perfusioni re-gionali venose, inoculazione intrarticolare), presenza di altre patologie concomitanti (malattie ga-stro-enteriche, interessamento strutture ombelicali, mancato trasferimento dell’immunità passiva,setticemia, polmonite), esito dei trattamenti a breve termine (dimesso o deceduto) e presenza o me-no di zoppia e alterazioni osteoarticolari associate alla sepsi alla dimissione. L’analisi dei dati è sta-ta effettuata mediante test del Chi-quadrato. Risultati. L’età media dei soggetti interessati è stata di 52 giorni. In totale sono risultati colpiti daartrite settica 36 arti con una prevalenza dei posteriori (72,2%) e di localizzazione a livello del gar-retto (40,5%). Nell’85,3% dei casi si è avuto un interessamento monoarticolare. Nel 53% dei casila via di infezione è stata di tipo ematogeno mentre nel restante 47% di natura traumatica. Nel41,2% dei casi la sepsi era associata a segni radiografici di osteomielite, evidenti o al ricovero ocomparsi nel corso del periodo di ospedalizzazione. Tutti i soggetti con osteomielite sono stati di-messi ma presentavano ancora zoppia e segni radiografici. Il tempo medio di ospedalizzazione è sta-to di 11,5 giorni. Dagli esami batteriologici su fluido sinoviale non è risultata una netta prevalenzadi una popolazione batterica rispetto ad un’altra e in media la conta cellulare effettuata al ricoveroè stata caratterizzata da 57.342,31 WBC/µl con un valore medio di proteine totali di 3,27 g/dl. Laterapia antimicrobica sistemica è stata adattata nel corso della degenza sulla base degli esiti di esa-mi batteriologico ed antibiogramma effettuati sul liquido sinoviale prelevato, con una prevalenza diassociazione tra amikacina e ceftiofur. Dall’analisi dei dati ottenuti è risultato che effettuare più la-vaggi articolari rispetto ad uno solo o nessuno influenza in maniera significativa la sopravvivenzadei soggetti (P=0,008), così come l’associazione tra lavaggi e perfusione regionale venosa (PRV) ri-spetto al solo lavaggio (P=0,04) ed il solo lavaggio rispetto a nessun tipo di trattamento locale(P=0,03). La patogenesi di tipo ematogeno influenza negativamente la sopravvivenza a breve ter-mine rispetto alla forma non ematogena (P=0,04). Per quanto riguarda lo stato di salute dell’animalealla dimissione, l’effettuare più lavaggi articolari incide positivamente su questo fattore (P=0,006)rispetto ad un unico lavaggio o a nessuno o alle possibili combinazioni di trattamento locale. La pre-senza di osteomielite incide negativamente sullo stato dei soggetti (zoppie) alla dimissione (P=0,03)

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Proceedings of the Annual Meeting of the Italian Association of Equine Veterinarians, Carrara, Italy 2010

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ma non sulla sopravvivenza a breve termine. Per tutti gli altri parametri (sesso, età, problemi allanascita, arto interessato, sepsi mono o poliarticolare, altre patologie concomitanti, tipologia di trat-tamento antibiotico sistemico) non è risultata alcuna significatività statistica (P>0,05). È stata ri-scontrata una sopravvivenza a breve termine dell’83% con una percentuale di dimissione in assen-za di zoppia, effusione articolare e segni radiografici solo del 6%.Conclusioni. L’artrite settica è una delle condizioni patologiche più serie che possono coinvolgerele articolazioni del puledro, rivelandosi spesso limitante per la sopravvivenza a breve termine delsoggetto. I risultati ottenuti nel nostro studio sono in accordo con quanto reperibile in bibliografia.L’approccio terapeutico comprendente almeno un lavaggio articolare effettuato precocemente dopola comparsa dei segni clinici è confermato essere la scelta migliore al fine di aumentare le opportu-nità di sopravvivenza dei soggetti. L’associazione tra lavaggi articolari e PRV incrementa il succes-so del trattamento. La bassa percentuale di scomparsa dei segni clinici e recupero funzionale del-l’articolazione rispetto all’elevata sopravvivenza a breve termine è stata condizionata nel nostro ca-so dalla presenza di gravi osteomieliti e dalla necessità di dimettere i soggetti spesso precocementeper cause per lo più di tipo economico.

BibliografiaMeijer M.C. et al.(2000), Clinical experiences of treating septic arthritis in the equine by repente joint lavage: a series of 39

cases, J.Vet.Med. A 47, 351-365.Hance S.R. (1998), Hematogenous infections of the musculoskeletal system in foals, Proceedings of AAEP, vol.44, 159-166.Knottembelt D.C. et al.(2004), Equine Neonatology Medicine and Surgery, Saunders, pag. 316-319.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott.ssa Chiara Bazzica - Università degli Studi di Perugia - Facoltà di Medicina Veterinaria,Dip. di Patologia, Diagnostica e Clinica Veterinaria - Sez. di Chirurgia e Radiodiagnostica, Via San Costanzo, 4 - 06100 Perugia (PG), Italia Tel. 0755857713 - E-mail: [email protected]



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CORRELATION BETWEEN RADIOLOGICAL AND MRI LESIONS IN THE DISTAL BORDER OF THE NAVICULAR BONE

M. Biggi, DVM1, S. Dyson, MA, VetMB, DEO, PhD, FRCVS2

1Sezione di Radiologia Clinica e Sperimentale, Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie, Facoltà di Medicina Veterinaria, Università degli studi di Milano, Lodi, Italia

2Centre for Equine Studies, Animal Health Trust, Newmarket, UK

Topic: Imaging

Purpose of the work. To evaluate the accuracy of radiography for detection of osseous cyst-like le-sions (OCLLs) at the junction of the sloping and horizontal distal borders of the navicular bone(NB) and distal border fragments (DBFs) using high field magnetic resonance imaging (MRI) as thegold standard; to evaluate the association between specific radiological findings with lesions de-tected on MR images. Materials and used methods. Horses were included if lameness was abolished by palmar nerveblocks performed at the base of the proximal sesamoid bones. Radiographic (minimum four projec-tions) and high field MR [3D T1-weighted spoiled gradient echo (SPGR), 3D T2* gradient echo(GRE) and 2D short tau inversion recovery (STIR) acquired in sagittal, dorsal and transverseplanes] images were available in 427 horses. All radiographic and MR images were evaluated by asingle observer for the presence of a DBF, and radiolucent zones in either the distal border or spon-giosa of the NB. Each fragment was graded on MR images based on its size and the signal intensi-ty alteration in the adjacent NB; each NB was graded both on radiographs and MR images, usinga modification of previously described methods1,2. Sensitivity and specificity of radiography for de-tection of DBFs were calculated. A Chi square test was used to test for associations between spe-cific radiological and MRI findings. Outcomes. There were 37 fragments detected on radiographs and 93 on MR images. Fragmentswith a higher grade on MR images were more likely to be observed on radiographs. There was astatistically significant association between DBF on radiography and total MRI NB grade; & be-tween radiolucent areas or enlarged synovial invaginations on radiography and DBFs or OCLLson MRI. Conclusions. A DBF observed on radiographs is likely to be associated with pathology of the NBand in particular of the distal border. Radiolucent areas at the junction of the sloping and horizon-tal distal borders of the NB are suggestive of the presence of a fragment or OCLL observed on MRimages.

Bibliography1. Dyson, S.J. (2008) Radiological interpretation of the navicular bone. Equine vet. Educ. 20, 268–280.2. Murray, R., Schramme, M., Dyson, S., Branch, M. and Blunden, T. (2006) MRI characteristics of the foot in horses

with palmar foot pain and control horses. Vet. Radiol. Ultrasound 47, 1-16.

Address for correspondence:Dott.ssa Marianna Biggi - Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie, Facoltà di Medicina Veterinaria,Università degli Studi di Milano, Reparto di Radiologia, Az. “Polo Veterinario di Lodi”Via Dell’università, 6 - 26900 Lodi (LO), Italia E-mail: [email protected]



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CONCENTRAZIONI SIERICHE E SINOVIALI DELLE CITOCHINE PRO-INFIAMMATORIE E DELLA COMP IN 14 CAVALLI TROTTATORI

AFFETTI DA OSTEOARTRITE TRAUMATICA

A. Bertuglia, DVM, PhD1, M. Bullone, DVM1

1Dip. di Patologia Animale, Facoltà di Medicina Veterinaria, Università degli Studi di Torino, Italia


Scopo del lavoro. In questo lavoro, ci soffermeremo sulla determinazione delle concentrazioni sie-riche e sinoviali delle citochine pro-infiammatorie e della COMP in cavalli trottatori, verificando setali molecole, in corso delle fasi iniziali della patologia osteoartritica (OA), vadano incontro a va-riazioni significative e siano pertanto utilizzabili come marker precoci di danno osseo/cartilagineoal fine di una diagnosi che sia temporalmente il più vicina possibile all’evento traumatico iniziale. Materiali e metodi. In totale 14 cavalli trottatori in allenamento (GP) sono stati sottoposti ad unavisita di zoppia comprensiva di studio radiografico relativo all’articolazione del nodello, in seguitoalla quale è stata emessa una diagnosi di OA in fase iniziale dell’articolazione metacarpo(-tarso)-fa-langea. Per ogni soggetto sono stati raccolti, con tecnica asettica, due campioni: uno di liquido si-noviale (ls) ed uno di siero di sangue (s). I campioni sono stati centrifugati per 5 minuti a 1500 rpm,il surnatante è stato aspirato in provette prive di additivi e stoccato a -80°C.Ulteriori 5 cavalli non in allenamento, non presentanti zoppia né segni radiografici indicativi di OAiniziale, sono entrati a far parte di questo studio come controlli negativi (GC).Per ogni campione, si sono saggiate le concentrazioni di IL-1ß, TNF-a, IL-6 e di COMP. A tal fine,sono stati utilizzati kit ELISA che utilizzavano anticorpi diretti contro molecole target di derivazio-ne umana (IL-1ß, IL-6, COMP) o murina (TNF-a). Risultati. TNF-a – La correlazione dei valori di ls-GP e ls-GC ha dimostrato differenze statistica-mente significative (p<0,05), i valori sierici dei due gruppi non hanno mostrato l’esistenza di unadifferenza significativa. Comparando i valori sierici e sinoviali dello stesso gruppo, è stata dimo-strata una differenza molto significativa (p<0,01) tra le concentrazioni di TNF-a rilevabili a livellodi siero e sinovia sia in GP sia in GC.IL-1ß – Esiste una differenza significativa tra i valori di ls-GP e ls-GC (p<0,05). Per i valori sieri-ci, invece, l’analisi statistica non ha rivelato una differenza significativa. La comparazione di ls-GPe s-GP ha dimostrato l’esistenza di una differenza significativa (p<0,05). La differenza delle con-centrazioni di questa molecola in ls-GC e s-GC non è invece statisticamente significativa.IL-6 e COMP – Le indagini statistiche non hanno rivelato l’esistenza di differenze significative trale variabili dei due gruppi esaminati. Conclusioni. Nel cavallo da trotto, in presenza di OA iniziale, il TNF-a e l’IL-1ß sono le due prin-cipali citochine pro-infiammatorie; la loro azione è interdipendente, ma loro efficacia come biomar-ker di OA traumatica equina è ancora incerta1,2. Un precedente lavoro sul TNF-a pone un valore di36 pg/ml come soglia oltre la quale si è in presenza di OA3. I valori da noi ottenuti nei soggetti sanisono notevolmente maggiori, probabilmente a causa della visita di zoppia antecedente la centesi4. Laforte differenza riscontrata tra le concentrazioni sieriche e sinoviali di TNF-a negli stessi soggetti puòsuggerire un catabolismo in situ della molecola o una sua brevissima emivita plasmatica. La correla-zione esistente tra i valori sinoviali di TNF-a e IL-1ß nei soggetti GP e GC è opposta a quella attesa:in ls-GC le due citochine sono presenti in minor misura rispetto che in ls-GP. È probabile che lo sta-to infiammatorio possa portare ad un catabolismo accelerato di queste molecole.La mancanza di differenze significative nei valori di IL-6 è conforme a studi precedenti che mo-stravano un suo significativo aumento solo in presenza di fratture parcellari intra-articolari o di ci-sti ossee sub-condrali5. Le molecole da noi testate non si sono rilevate validi indicatori di OA nellesue fasi iniziali. Sebbene TNF-a e IL-1ß presentino concentrazioni statisticamente differenti in ls-



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GP e ls-GC, è difficile la determinazione di un valore soglia. L’IL-6 diventa un marker importantesolo con la comparsa di OA morfologicamente evidente e la COMP non sembra utilizzabile comevalido test di screening preliminare in caso di OA iniziale (danno osseo vs cartilagineo).

Bibliografia1. Jouglin M, Robert C, Valette J-P, Gavard F, Quintin-Colonna F, Denoix J-M. Metalloproteinases and tumour necrosis

factor-alpha activities in synovial fluid of horses: correlation with articular cartilage alterations – Vet Res 31, 507-515(2000).

2. Billinghurst RC, Fretz PB, Gordon JR. Induction of intra-articular tumour necrosis facrot during acute inflammatoryresponses in equine arthritis – Equine Vet J 27, 208-216 (1995).

3. Bertone AL, Palmer JL, Lones J. Synovial fluid citokines and eicosanoids as markers of joint disease in horse – VetSurg Nov-Dec 30(6), 528-538 (2001).

4. Van Den Boom R, Brama PAJ, Kiers GH, De Groot J, Barneveld A, Van Weeren PR. The influence of repeated arthro-centesis and exercise on matrix metalloproteinases and tumour necrosis factor-alpha activities in normal equine joints– Equine Vet J 36, 155-159 (2004).

5. Ley C, Ekman S, Elmén A, Nilsson G, Eloranta M-L. Interleukin-6 and high mobility group box protein-1 in synovialmembranes and osteochondral fragments in equine osteoarthritis – Res Vet Sci Jun 86(3), 490-497 (2009).

Indirizzo per la corrispondenza:Michela Bullone - Università degli Studi di Torino - Via L. da Vinci 44 - 10095 Grugliasco (TO), Italia E-mail: [email protected]



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MORPHOMETRIC PARAMETERS OF THE TENDO-LIGAMENTOUSSTRUCTURES IN THE PALMAR METACARPAL REGION OF HAFLINGER

HORSES DETERMINED ULTRASONOGRAPHICALLY

S. Boehart, Cand Med Vet1, G. Arndt, Dr Rer Pol2, B. Carstanjen, PD Dr Med Vet DEA PhD1

1Equine Clinic, Faculty of Veterinary Medicine, Freie Universität Berlin, Berlin, Germany2Institute for Biometrics and Data Processing, Faculty of Veterinary Medicine,

Freie Universität Berlin, Berlin, Germany

Topic: Imaging

Purpose of the work. The objectives were to assess reference values for tendons and ligaments ofthe palmar metacarpal region of sound Haflinger horses. Cross-sectional area, circumference, dor-sopalmar and lateromedial width of the superficial and deep digital flexor tendon, inferior checkligament and suspensory ligament were evaluated at six regions of interest (ROI) and findings com-pared with the literature. Influence of different categories was tested.Materials and used methods. 30 sound Haflinger mares, aged 4 to 20 years, height at the withersranging from 1.37 to 1.50 m and a bodyweight of 326.59 to 553.74 kg, were examined with an 8-10MHz linear ultrasound transducer. On both legs every structure was measured three times at eachROI. From the ultrasonograms data were assessed measuring the parameters. Statistical analysiswas done with SPSS, the significance level was p<0.05.Outcomes. The CV was < 3%. Age, height at the withers, BMI and diameter of the Os metacarpaleIII showed certain influences. Structures were compared between each other and values of eachstructure at the ROIs. Findings are consistent with literature1-7 concerning other breeds. Somebreed-specific characteristics were found.Conclusions. There is necessity of breed-specific reference values. Testing the influence of differentfactors on the parameters helps determining values that have to be expected in a certain animal.The data assessed can be used as reference values for Haflinger horses examined ultrasonograph-ically.

Bibliography1. Agut et al. Vet J. 2009, 180, 377-383.2. Birch et al. Equine Vet J. 1999, 31, 391-196.3. Boehart et al. Proc. 11th WEVA Congress 2009, Brazil.4. Çelimli et al. Equine Vet Educ. 2004, 16, 81-85.5. Gillis et al. Am J Vet. 1995, 56, 1265-1269.6. Nicoll et al. Am J Vet Res. 1993, 54, 502-506. 7. Smith et al. Equine Vet J. 1994, 26, 460-465.

Address for correspondence:PD Dr Bianca Carstanjen, PhD, Zugspitzstr 11, 82362 Weilheim, Germany - E-mail: [email protected]



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VARIAZIONI DELLA CONCENTRAZIONE DELLE IgG NEL SECRETOMAMMARIO A TERMINE GRAVIDANZA NELLA FATTRICE

I. Cristofaro, DVM1, S. Valentini, DVM2, M.P. Pasolini, DVM, PhD3, M. Greco, DVM, PhD3

1Libero Professionista, Benevento, Italia2Libero Professionista, Venezia, Italia

3Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie, Sezione di Chirurgia Università Federico II, Napoli, Italia

Area di interesse: Riproduzione

Scopo del lavoro. La previsione del parto, nella fattrice, si basa sulla valutazione di segni clinici edi caratteri quali/quantitativi del secreto mammario, a fine gravidanza, misurabili con tecniche, piùo meno accessibili nella pratica routinaria. Tra i segni clinici, si considerano l’aumento del volumemammario, il riempimento del capezzolo e il rilassamento dei legamenti sacroischiatici1,2,3. Sullamisurazione della concentrazione di componenti del secreto mammario, ed in particolare della con-centrazione degli ioni calcio, si basano i kit di previsione del parto comunemente in commercio(Foal Watch test® - Chemetrics, Inc.)4,5,6,7. La valutazione delle concentrazioni delle IgG colostrali, con tecniche di campo e di laboratorio, co-stituisce al tempo stesso un utile parametro per la previsione del parto e del livello di immunità co-lostrale acquisibile dal puledro nelle prime ore di vita8,9.Scopo del nostro lavoro è stato di valutare se la variazione della concentrazione di IgG nel secretomammario di cavalle trottatrici a fine gravidanza, misurata con refrattometro Brix per colostro, co-stituisca una metodologia semplice e affidabile per la previsione dell’imminenza del parto. Materiali e metodi. Con cadenza giornaliera, è stato esaminato il colostro di fattrici a termine(>320gg), di razza trottatore italiano, dal momento in cui mostravano modificazioni del volumemammario. Venivano raccolti, con mungitura manuale, 5 ml di colostro, filtrato e analizzato al re-frattometro Brix. Il valore delle IgG era riportato in cartella clinica; registrato un incremento im-portante delle IgG, si procedeva alla sutura vulvare del transmitter del Foalert® (Foalert Inc.). La correlazione tra concentrazione di IgG nel colostro ed i giorni mancanti al parto è stata valutatamediante analisi bivariata; la differenza tra le medie giornaliere della concentrazione di IgG è stataconfrontata con metodo ANOVA (P>0,05). Risultati. Sono state campionate 188 fattrici, tra i 4 e 22 anni, stabulate in paddock e trasferite inbox all’approssimarsi del parto; la razione era costituita da 3 kg di mangime e 8 kg di fieno. So-no stati eseguiti 1504 prelievi dai 15 a 1 giorno prima del parto (media±dev.st 8,3±4,1giorni). Laconcentrazione media giornaliera di IgG nel secreto mammario aumentava progressivamente dal15° giorno prima del parto (8,3° brix±6,9) fino al giorno prima del parto (19,9° brix±5,9). La dif-ferenza tra le medie giornaliere della concentrazione di IgG colostrale è risultata significativa(P<0,0001). Tra la concentrazione giornaliera di IgG e l’approssimarsi della data del parto è stataosservata una correlazione di tipo polinomiale di 3° grado (P<0,0019).Conclusioni. All’approssimarsi del parto il pre-colostro vira ad una tonalità più intensa, la viscosi-tà aumenta, la concentrazione di alcuni componenti si modifica: sodio e cloruro diminuiscono; lat-tosio, potassio, citrato, fosfato, calcio, magnesio e proteine aumentano4,5,6. Lo studio del secretomammario ha costituito, perciò, la base per la commercializzazione di specifici kit, di comune im-piego nella gestione allevatoriale. Numerosi studi, in particolare, hanno dimostrato che l’aumentodel calcio pre-colostrale al di sopra dei 10 mmol/l costituisce un indice attendibile di parto immi-nente4,1. La trasformazione del pre-colostro in colostro è caratterizzata anche da un significativo au-mento delle IgG, in associazione al loro decremento plasmatico7,8,9. Nella specie bovina, è stato di-mostrato che le variazioni endocrine delle ultime 4-6 settimane di gestazione influenzano il tra-sporto di IgG al colostro. È ipotizzabile che anche nella fattrice possano intervenire analoghi mec-canismi in grado di condizionare le variazioni quali/quantitative del secreto mammario8,9.



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I risultati del presente lavoro confermano l’affidabilità dell’aumento del contenuto di IgG, misura-to su un campione relativamente ampio, quale parametro predittivo dell’imminenza del parto, in fat-trici da trotto. A differenza della misurazione del calcio, la valutazione del contenuto di IgG colo-strali costituisce, inoltre, un importante parametro della qualità immunogena9. La concentrazione diIgG subisce variazioni individuali importanti e sono necessarie misurazioni ripetute per prevederel’imminenza del parto, segnalata da un incremento anticorpale significativo, pari, in media, al triplodel valore rilevato sui primi campioni. La tecnica di dosaggio delle IgG impiegata nel presente lavoro, con un refrattometro Brix, è risul-tata rapida, semplice, economica ed ha fornito risultati ripetibili e corrispondenti a quelli della let-teratura. Essa, pertanto, è apparsa un valido ausilio nel monitoraggio del periparto nella fattrice.

Bibliografia1. McKinnon A.O. e Voss J.L. Equine Reproduction, Lea&Febiger, Philadelphia, 1993, pp568-569.2. Ginther O.J. Reproductive Biology of the mare 2nd ed., Equiservices, 1993, pp457-458.3. Rossdale P.D., Ricketts S.W.: Equine Stud Farm Medicine 2nd ed, Lea&Febiger, Philadelphia, 1980.4. Peaker M.et al J. Reprod. Fertil. Suppl., 27:555-561, 1979.5. Ley, W.B. et al J.E..V..Sci., 9:95-99, 1989.6. Ley, W.B., et al.J.E.V.Sci., 9:88-93, 1989.7. Ousey, J. C.et al. EVJ., 21:196-200, 1989.8. Curadi M.C. et al Ann. della Facoltà di Medicina Veterinaria, 2001 pp.127-140., 2001.9. Jeffcott L. B J. Comp.Path. 84, pp. 93-101 1974.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott.ssa Irene Cristofaro - Via M. Rotili 150 - 82100 Benevento (BN), Italia Cell. 328 0378758 - E-mail: [email protected]



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THE RELATIONSHIP BETWEEN THE USE OF PGF2 ALPHA AND THE DEVELOPMENT OF HAEMORRHAGIC

ANOVULATORY FOLLICLES IN THE MARE: A CLINICAL EVIDENCE

J. Cuervo-Arango, DVM, CertVRep, MSc, MRCVS1,2, J. Newcombe, MRCVS2, J.I. Herraiz, DVM, MSc3

1Universidad CEU-UCH, Moncada, Spain2Equine Fertility Clinic, Brownhills, UK3Universidad De Murcia, Murcia, Spain

Topic: Reproduction

Purpose of the work. A distinct cause of ovulatory failure observed in the mare is haemorrhage in-to the dominant follicle(s) with subsequent organisation of follicular contents and, in most occa-sions, luteinisation of follicular wall without previous follicular collapse (Ginther 1992). The patho-genesis of this condition is unknown. Its incidence has been linked to age of mare (McCue 2002) and more recently to the use of hormonaltreatments for induction of estrus and ovulation (Cuervo-Arango and Newcombe 2008) as well asto follicular ablation in pony mares (Ginther et al., 2008). The relevance of this anovulatory condition lies on the fact that mares with preovulatory folliclesthat fail to collapse will not conceive unless ovulation of a concurrent preovulatory follicle occursin the same cycle. Although the overall incidence of haemorrhagic follicles in the mare populationis relatively low 5-8% (Ginther 1992; McCue 2002), it can be very frustrating for the practitionerwhen dealing with pre-ovulation breeding (natural mating and AI with chilled semen) when themare is bred on the basis of a normal dominant follicle which then fills with blood without ruptur-ing, leaving that cycle with no chance of conception. The objective of this work was to study the relationship between the use of cloprostenol (a PGF2αanalogue) to short-cycle mares and the incidence of haemorrhagic anovulatory follicles. Materials and used methods. Records from a total of 207 mares from a mixed population of Warm-bloods, Irish Draught and crossbreds with 536 estrous cycles recorded were analysed over the years2007 and 2008 in the northern hemisphere. Reproductive records consisted of whether a mare hadbeen administered cloprostenol to induce estrus or it was a spontaneous estrus (no drugs), ultra-sound records of ovulation / development of haemorrhagic anovulatory follicles (as described inCuervo-Arango and Newcombe 2009), age of mare, month and time from cloprostenol to HAF for-mation. Outcomes. The overall incidence of HAFs was 4.5% (24 / 536 estrous cycles for years 2006 and2007). Cycles induced with cloprostenol had a higher incidence of haemorrhagic anovulatory fol-licles (22 HAF cycles out of 263, 8.4%) than spontaneous cycles (2 HAF cycles out of 249, 0.8%;P < 0.001). In cloprostenol-induced HAF cycles, the mean interval from treatment to the day of expected ovu-lation / HAF development was 6.1 ± 0.5 days. The HAF reoccurrence rate in a consecutive cycle (n= 26 cycles) and following year (n = 5 mares) was 4% and 60% respectively. There was no effectof age on HAF incidence (11.2 and 12.5 years old for mares with ovulatory and HAF cycles re-spectively). Conclusions. The use of hormonal treatment such as cloprostenol (A PGF analogue) to bring amare in estrus, increase the incidence of haemorrhagic anovulatory follicles in mares. As thisanovulatory condition has a high recurrence rate in following cycles, it is advisable not to use thisdrugs to break down a luteinised haemorrhagic follicle.



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BibliographyCuervo-Arango J, Newcombe JR. Risk factors for the development of haemorrhagic follicles in the mare. Reprod Domest

Anim 2008; doi: 10.1111/j.1439-0531.2008.01260.xGinther OJ. Haemorrhagic follicles. In Reproductive biology of the mare: Basic and applied aspects, 2nd ed. Equiservices,

Cross Plain, Wisconsin 1992; pp 224-6.Ginther OJ, Gastal MO, Gastal EL, Jacob JC, Beg MA. Induction of haemorrhagic anovulatory follicles in mares. Reprod

Fertil Dev 2008; 20: 957-54.McCue PM, Squires EL. Persistent anovulatory follicles in the mare. Theriogenology 2002; 58: 541-43.

Address for correspondence:Mr. Juan Cuervo-Arango, Cantero S/N, 02434, Spain E-mail: [email protected]



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ATLANTE TOMOGRAFICO ED ANATOMO-SEZIONALE DELLA REGIONEDEI SENI PARANASALI NEL CAVALLO ADULTO

D. De Zani, DVM, D.D. Zani, DVM, PhD, M. Biggi, DVM, S. Borgonovo, DVM, M. Di Giancamillo, DVM

Reparto di radiologia clinica e sperimentale, azienda “Polo veterinario di Lodi”,Facoltà di Medicina Veterinaria, Università degli Studi di Milano, Lodi, Italia

Area di interesse: Diagnostica per immagini

Scopo del lavoro. In letteratura i lavori tomografici della regione dei seni del cavallo adulto sononumericamente scarsi1,2,3,4,5,6. Obiettivo del presente studio è stato quello di realizzare un atlantecomparativo tra immagini tomografiche a raggi X (TC) e sezioni macroscopiche della regione deiseni paranasali del cavallo adulto, sperimentando posizionamenti alternativi per l’ottenimento dellesezioni tomografiche acquisite secondo il piano dorsale.Materiali e metodi. Nello studio sono state inserite 3 teste di soggetti scheletricamente maturi, dietà compresa tra 8 ed 11 anni, prelevate in sede di macellazione. L’esame tomografico è stato effettuato mediante un tomografo di IV generazione, monostrato a ro-tazione continua. L’esame TC è stato eseguito dopo circa due ore dal prelievo dei campioni previarimozione della mandibola.Le scansioni condotte lungo il piano trasversale e dorsale sono state ottenute orientando il pianod’acquisizione rispettivamente perpendicolarmente e parallelamente al palato duro. Per quelle sa-gittali il piano di scansione è stato impostato parallelamente al setto nasale.Sono state così ottenute immagini trasversali, dorsali e sagittali dello spessore di 5 mm ed index di5 mm. I parametri utilizzati sono stati: 130 kV (120 kV per le scansioni trasversali), 175 mA, size400 (size 250 per quelle trasversali). Le immagini sono state poi processate con un algoritmo da os-so ed archiviate su DVD. Una volta terminato l’esame tomografico, i campioni sono stati sezionati tramite sega a nastro lun-go il piano trasversale. Al fine di ottenere sezioni anatomiche che rispecchiassero in maniera otti-male le corrispettive immagini TC, ci si è avvalsi di immagini su pellicola corredate dalle linee diriferimento (reference lines) di ciascun piano di scansione. Le sezioni sono state quindi poste su diun supporto retroilluminato e fotografate. Risultati. Sono state ottenute 9 sezioni anatomiche, 44 immagini tomografiche relative al piano tra-sversale, 46 al piano sagittale, 33 a quello dorsale. L’atlante è stato organizzato in due sezioni sud-divise in tavole: in quelle della prima sezione sono state messe a confronto le immagini TC condottelungo il piano trasversale e le relative sezioni anatomiche, nella seconda sezione invece, sono stateinserite le immagini ottenute secondo il piano dorsale e sagittale. Per ogni tomogramma è stata in-serita un’immagine con la reference line relativa al piano di scansione.Conclusioni. Le immagini TC della testa del cavallo hanno fornito un eccellente dettaglio anato-mico, un’ottima risoluzione spaziale e una buona discriminazione tra componente ossea e tessutimolli. I tomogrammi sono stati ottenuti sia lungo il piano trasversale che su quello sagittale e dor-sale. A nostra conoscenza, in letteratura non sono riportati studi TC del cranio equino ottenuti conposizionamenti differenti da quello utilizzato per le scansioni trasversali. Infatti, mentre le scansio-ni condotte lungo il piano sagittale possono essere ottenute soltanto su teste isolate oppure attra-verso riformattazione delle sezioni trasversali in post- acquisizione, le immagini relative al pianodorsale sono state acquisite flettendo la testa dell’animale e “tiltando” adeguatamente il gantry.L’impiego di tale posizionamento consentirebbe di ottenere informazioni addizionali durante glistudi “in-vivo”. Il presente lavoro si configura come un efficace strumento al servizio del clinico offrendo, una va-lida interpretazione delle regioni sinusali nell’equino.



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Bibliografia1. Arencibia A. Anat. Hist. Embryol. (2000) 29 (5) 295-299.2. Morrow K.L. Vet Radiol Ultrasound (2000) 41 (6) 491-497.3. Solano m. Clin Tech Equine Pract (2004) 3 (4) 374- 388.4. Smallwood J.E. Vet Radiol Ultrasound (2002) 43 (2) 99-117.5. Probst A. Vet Radiol Ultrasound (2005) 46 (1) 44-48.6. Ragle E.A. Proceeding of the NAVC, Jan 8-12 2005, Orlando, Florida.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott.ssa Donatella De Zani - Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie, Facoltà di Medicina Veterinaria,Università degli Studi di Milano, Reparto di Radiologia, Az. “Polo Veterinario di Lodi”Via dell’Università, 6 - 26900 Lodi (LO), Italia Tel. 0250331120 - Cell. 349 8610149 - E-mail: [email protected]



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INCARCERATION OF SMALL INTESTINE THROUGH THE GASTROSPLENIC LIGAMENT: 17 CASES

I. Durie, DVM, resident ECEIM1, L. Lefère, DVM1, G. van Loon, DVM, Phd, diplomate ECEIM1, T. Levet, DVM, resident ECVS2

1Departement of Large Animal Internal Medicine, Merelbeke, Belgium2Departement of Surgery and Anaesthesiology of domestic animals, Merelbeke, Belgium

Topic: Gastroenterology

Introduction. The gastrosplenic ligament is a portion of omentum that is located between the hilusof the spleen and the left part of the greater curvature of the stomach. Herniation of small intestine through a rent of the gastrosplenic ligament is a rare cause of smallintestine incarceration and acute colic in horses. Description of the case. Between January 2001 and September 2009, incarceration of small intes-tine through the gastrosplenic ligament was diagnosed in 17 horses (11 mares, 5 geldings and 1stallion; 12 warmblood horses, 2 saddle horses, 1 Fjord, 1 trotter and 1 Berber horse), aged be-tween 10 and 22 years (mean 15.6 years). Two mares were 9 and 10 months pregnant. Clinical examination revealed a heart rate between 36 and 100 beats/min (mean: 62 beats/min) anda PCV between 28 and 67% (mean: 44%). In all horses abdominal auscultation revealed intestin-al hypomotility, with complete absence of borborygmi in 9 horses. Gastric reflux was present in 7horses with a volume of 3 to 15 l (mean: 8.7 l). In all but 1 horse, which presented too severe colic signs, rectal palpation was performed, reveal-ing dilatation of the small intestines in 11 horses. In 4 horses there was a secondary impaction ofthe colon. Transabdominal ultrasound revealed distended small intestine in all 17 horses and in 8horses most of these distended small intestines were located in the left cranial abdomen. Ab-dominocentesis was performed in 9 horses and revealed serosanguinous fluid. Lactate valuesranged from 1 to 10.8 mmol/l, white blood cell count from 0.3 to 110.109/l and total protein from 4to 65 g/l. One horse was euthanized prior to surgery. Surgical correction was performed in 13 horses, whilein the 3 remaining horses euthanasia was elected during exploratory laparotomy.The incarcerated intestine was jejunum in 13 horses, a combination of ileum and distal jejunum in3 horses and only ileum in 1 horse. In 16 horses the incarcerated intestines were nonviable. In thesurgically treated horses, resection of 1 to 6 meters of small intestine was performed. Depending onthe location of the incarcerated intestine, an end-to-end jejunojejunostomy, an end-to-end je-junoileostomy or a side-to-side jejunocaecostomy was performed. In none of the horses the defectin the gastrosplenic ligament could be closed. Two horses were euthanized because of severe complications during recovery: one horse had trau-matic injury, the other showed central nervous signs. In another horse, a tracheostomy was per-formed because of laryngeal collapse. In the 11 horses that recovered from anesthesia, post-operative complications included ileus (5), en-dotoxemic shock (3), infection of the laparotomy wound (2) and diarrhea (1). In two horses, a second abdominal surgery was performed because of recurrence of colic signs. Inone horses there was a stenosis at the anastomosis site with impaction of ingesta and a jejunocae-costomy was performed. In the second horse, a resection of 7 meter was performed because of lackof intestinal motility of the previously incarcerated jejunum. Four horses were euthanized due to post-operative complications such as endotoxemic shock andileus. Overall, 7 horses were discharged after a hospitalization period of 8 to 41 days (mean of 15.5 days). Conclusions. Incarceration of the small intestine through the gastrosplenic ligament should be con-



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sidered as a differential diagnosis in case of an acute small intestinal obstruction. Mares (11 hors-es) and older horses (older than 10 years) seemed at increased risk. Ultrasonographic evidence ofdistended small intestines in the left cranial abdomen (between the stomach and the spleen), pres-ent in 47% of our cases, might be used to make a presumptive diagnosis. In none of the horses thedefect in the gastrosplenic ligament could be closed. Overall 7 of the 13 surgically treated horses(54%) survived.

BibliographyJenei T.M. et al. Surgical management of small intestinal incarceration through the gastrosplenic ligament: 14 cases (1994-

2006). J Am Vet Med Assoc 2007; 231: 1221-1224.Mariën T., Steenhaut M. Incarceration of small intestines through a rent in the gastrosplenic ligament in five horses. Equine

Vet Educ 1998; 10: 187-190.Rhoads W.S., Parks A.H. Incarceration of the small colon through a rent in the gastrosplenic ligament in a pony. J Am Vet

Med Assoc 1999; 214: 226-228.Trostel S.S., Markel M.D. Incarceration of the large colon in the gastrosplenic ligament of a horse. J Am Vet Med Assoc

1993; 202: 773-775.

Address for correspondence:Ms. Inge Durie - Faculty Of Veterinary Medicine Departement Of Large Animal Internal Medicine, Salisburylaan 133, Merelbeke 9820, Belgium E-mail: [email protected]



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VALUTAZIONI COMPORTAMENTALI E TESTOSTERONEMIA IN STALLONI TRATTATI CON IMPIANTO

A LENTO RILASCIO DI DESLORELIN ACETATO

M.E. Falomo, DVM, PhD, Specialista in medicina e chirurgia del cavallo1, E. Zanibellato, DVM1, S. Romagnoli, DVM, Phd, ECAR1, S. Normando, DVM, Phd2

1Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie, Padova, Italia2Dipartimento di Scienze Sperimentali Veterinarie, Padova, Italia


Scopo del lavoro. Valutare la potenzialità dell’impianto sottocutaneo a lento rilascio di GnRh ago-nista Deslorelin per inibire la funzione riproduttiva nello stallone misurando il suo effetto su con-centrazione plasmatica di testosterone e comportamento del soggetto. Materiali e metodi. Sono stati utilizzati 15 stalloni di proprietà, puberi, di età compresa tra i 16 me-si ed i 14 anni, di razza diversa, di peso compreso tra i 100 e 1200 kg.Gruppo campione (n=11): impiantato con 4.7 mg di Deslorelin (Suprerolin® Peptech AnimalHealth, Australia), tra il 22 Aprile ed il 27 Maggio. Gruppo controllo (n=5): sottoposto ad una iniezione placebo il giorno 27 Maggio. Lo studio si è svolto tra Aprile e Settembre per evitare l’effetto del fotoperiodo sui livelli di testo-sterone (Hoffmann e Landeck, 1999). I soggetti sono stati sottoposti a Test di Stimolo con 5000 UI di Hcg (Vetecor® CALIER, Barcello-na) prima dell’impianto ed al termine dello studio, per valutare se e come venisse modificata la ca-pacità del testicolo di rilasciare testosterone.I prelievi sono stati settimanali per il primo mese (Brinsko et al., 1998; Schoemaker et al., 2008) poiquindicinali fino al termine dello studio sperimentale (98 giorni). Il Testosterone è stato dosato con un Sistema Automatico per Immunodosaggi in Chemilumine-scenza (Immulite®), utilizzando le test unit (Test Unit Testosterone Totale (LTW1), fornite dalla dit-ta produttrice e conservate a 2°-8° C. I dati sono stati quindi trascritti in un Data Base e sottopostiad analisi statistica. Gli aspetti comportamentali sono stati valutati mediante questionari. Risultati. Solo un soggetto ha presentato un abbassamento dei livelli ematici di testosterone al disotto della soglia rilevabile dalla macchina (< 10 ng/dl). Tutti i soggetti trattati risultano in una te-stosteronemia al di sotto dei 200 ng/dl nei giorni 42, 56 e 70, rispettivamente dopo un picco nel gior-no 7 post-impianto. In particolare utilizzando il test di Wilcoxon, risulta in una differenza signifi-cativa tra giorno zero e giorno 7 (p=0,0016 e z=2,409) e tra giorno zero e giorno 42 (p=0,0262z=2,22).Dai test di stimolo effettuati, entrambi i gruppi del nostro studio hanno risposto all’Hcg esogeno di-mostrando che il testicolo degli animali trattati ha mantenuto la stessa capacità di secernere testo-sterone che aveva prima del trattamento. Le risposte nella specie equina sembrano più simili a quelle dell’opossum virginiano (Didelphis vir-giniana) dove la concentrazione del testosterone tende a diminuire, ma senza un effetto evidente nel-la sua secrezione (Johnston et al., 2008). Dal questionario iniziale è emerso che gli atteggiamenti maggiormente sofferti dai proprietari era-no certamente vocalizzare (5/11), mordere (4/11), rampare (4/11), sfoderare (4/11). Quasi tutti i soggetti risultavano poco concentrati nel lavoro ed aggressivi con gli altri cavalli. Levalutazioni comportamentali evidenziano un aumento dei comportamenti indesiderati (6/11) nei pri-mi 15 giorni post impianto, che coincide con il picco di rilascio del testosterone da noi rilevato e de-scritto in letteratura. Nel gruppo dei trattati, dopo il 15° giorno di trattamento è risultata una riduzione statisticamente si-gnificativa dei punteggi alle domande:



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- il soggetto morde o minaccia di mordere altri cavalli (p=0,017). In particolare tra 3°e 5° periodo;- il soggetto calcia o minaccia di calciare le persone (p=0,090);- soggetto calcia o minaccia di calciare gli altri cavalli (p=0,072);- soggetto si impenna (p=0,074). Nel gruppo di soggetti i cui proprietari si sono detti soddisfatti (n=5) del trattamento anche il com-portamento ‘sfoderare’ tende a diminuire tra giorno zero e ultimo periodo.Nel gruppo controllo invece non è stata rilevata alcuna differenza significativa dell’andamento com-plessivo. Nella domanda ‘‘il soggetto vocalizza”, se si applicasse il test di Wilcoxon ai due periodi di-pendenti, giorno zero e ultimo periodo, la differenza sarebbe statisticamente significativa (p=0,043).Conclusioni. Dai risultati è evidente che il Deslorelin è biologicamente attivo nel maschio equinodeterminando una diminuzione dei livelli del testosterone ematico nei soggetti trattati. La percezio-ne dei proprietari rileva una attenuazione di tutti quei comportamenti che maggiormente rendonodifficoltosa la gestione di uno stallone anche se non si ottiene l’attesa castrazione chimica dell’ani-male, perlomeno con i dosaggi e la frequenza di impianto scelti.

BibliografiaBrinsko SP, Squires EL, Pickett BW, Nett TM - Gonadal and Pituitary Responsiveness of Stallions is not Down-Regulated

by Prolonged Pulsatile Administration of GnRH. Journal of Andrology 19: 100-109, 1998.Hoffmann B, Landeck A - Testicular endocrine function, seasonality and semen quality of the stallion. Animal Reproduction

Science 57: 89-98, 1999.Jhonson CA, Thompson DLJ, Cartmill JA - Effects of deslorelin acetate implants in horses: Single implants in stallions and

steroid-treated geldings and multiple implants in mares. Journal of Animal Science 81:1300-1307, 2003.Schoemaker NJ, van Deijk R, Kik MJL, Kuijten AM, de Jong FH, Trigg TE, Kruitwagen CLJJ, Mol JA - Use of a go-

nadotropin releasing hormone agonist implant as an alternative for surgical castration in male ferrets (Mustela puto-rius furo). Theriogenology 70: 161-167, 2008.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott.ssa Maria Elena Falomo - Via Faggin, 26 - 35020 Ponte San Nicolò (PD), Italia Phone 049718573 - Mobile 339/3409979 - E-mail: [email protected]



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A COMPARISON OF HANDSEWN VERSUS STAPLED JEJUNOCECOSTOMY IN HORSES – COMPLICATIONS AND LONG-TERM SURVIVAL:

32 CASES (1994-2005)

David E. Freeman, MVB, PhD, Diplomate ACVS and David J. Schaeffer, PhDUniversity of Florida, College of Veterinary Medicine, Department of Large Animal Clinical Sciences,

PO Box 100136, Gainesville, Fl 32610-0136, and University of Illinois, College of Veterinary Medicine,1008 West Hazelwood Dr., Urbana, IL 61802

Topic: Surgery

Objective. Jejunocecostomy in horses tends to have more postoperative problems and lower survi-val than jejunojejunostomy. This study was designed to evaluate survival and complications afterjejunocecostomy in horses with colic and to compare outcomes after handsewn versus stapled jeju-nocecostomy.Materials.This was a retrospective study of horses that underwent jejunocecostomy for treatment ofcolic in two University teaching hospitals. The same surgeon did or directly supervised the surge-ries in all horses to maintain consistency.Methods. Information was retrieved from the medical records and through phone calls on horsesthat had handsewn and stapled side-to-side jejunocecostomy for treatment of colic by or under thesupervision of the same surgeon. A one-tailed test of the difference between two binomial propor-tions was used to compare findings, with P<0.05 considered significant. Kaplan-Meier life tableanalysis was used to compare survival distributions.Results. The jejunocecostomy was handsewn in 22 horses and stapled in 10 horses. Postoperativecolic, reflux, and need for a second surgery were higher during hospitalization with the stapled je-junocecostomy compared with the handsewn jejunocecostomy. Survival to discharge from the ho-spital was similar for both anastomoses (90%), but colic after hospital discharge was significantlymore likely after stapled anastomosis than after handsewn. The prevalence rates for adhesions andcolic after surgery were low, and most deaths after discharge did not appear to be related to the sur-gery. Longterm survival rates were similar for both groups.Conclusion. Short and longterm results demonstrated that jejunocecostomy is an effective proce-dure in horses and allows many horses to live a normal lifespan after surgery. Despite similar sur-vival rates, the stapled anastomosis had a greater tendency to postoperative reflux and colic thanthe handsewn anastomosis, suggesting that horses can be sensitive to minor differences within thesame anastomosis. Possible causes of problems after the stapled anastomosis were lack of a sutureoversew, which could lead to leakage, and a larger stoma, which could lead to reflux from cecum tojejunum.

Address for correspondence:Dr. Freeman’s present address is University of Florida, College of Veterinary Medicine, Department of Large Animal Clinical Sciences, PO Box 100136, Gainesville, Fl 32610-0136, U.S.A.E-mail: [email protected].



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EVALUATION OF CYTOLOGY AND BACTERIOLOGY IN BALF COLLECTEDFROM HEALTHY NOT PERFORMING HORSES AFTER EXPOSURE TO

ENVIRONMENTAL ALLERGENS

M. Sgorbini, DVM, PhD, MS1, R. Fusar Bassini, DVM1, A. R. Attili, DVM, Spec2, S. Preziuso, DVM, PhD2, M. Bizzeti, DVM1, V. Cuteri, DVM2, M. Corazza, DVM1

1Department of Veterinary Clinic, University of Pisa, San Piero a Grado, Pisa2Department of Veterinary Sciences, University of Camerino, Matelica, Macerata

Topic: Internal Medicine

Purpose of the work. Horses with clinical signs of RAO show an elevated total cell count and higherpercentages of neutrophils in broncoalveolar fluid (BALF), while subjects in remission show normalBALF citology. These horses may be differentiated from healthy horses after being housed for at least5 h in an inadequately ventilated stable containing poorly saved straw or hay (challenge), which in-duces an increase in neutrophils in the BALF and clinical sign of heaves1. To the Authors’ knowledge,there are no data concerning alterations of BALF cytology after challenge in healthy horses. The aim of this work was to verify variations in cytology and bacteriology of BALF obtained pre-and post-challenge in healthy not performing horses. Materials and used methods. Ten trotter mares, aged 3-6 years, (5±1,8; median value: 5 years),were included in this study. All the animals were considered healthy on the basis of clinical evalu-ation of the respiratory tract and thoracic ultrasound (convex probe, 5 MHz). Broncoalveolarlavage (BAL) was performed in all the horses before and after a challenge of fifteen days. BAL wasperformed by a colonscope, with the standing animal following mild sedation with an alfa2-agonistand application of a twitch. The external nostrils were cleaned to reduce contamination and coughduring the procedure was avoided by instillation of local anesthetic. 300 ml of pre-wormed sterilenormal saline was instilled and retrieved using suction with 60 ml syringes via a guarded catheterpassed through the biopsy channel of the endoscope. Samples were collected in EDTA tubes for cy-tology and in sterile tubes for microbiology; BALF specimens were stored at 4°C until use. Mucuswas quantified2. EDTA samples were used for total cell count and then cytocentrifugated. Smearswere air-dried and stained with Diff Quick®. Differential cell count was determined by counting atleast 400 cells/smear. Average (X) and standard deviation (SD) were calculated for total number ofcells/µl, and for macrophages, lymphocytes, neutrophils and eosinophils percentages pre- and post-challenge. For bacteriological examination, Blood Agar with and without Streptococcus SelectiveSupplement, Mannitol Salt Agar and MacConkey Agar were used. PCR for the identification of thebeta-hemolytic Streptococci Streptococcus equi subsp. equi, Streptococcus equi subsp. zooepidemi-cus and Streptococcus dysgalactiae subsp. equisimilis and for Rhodococcus equi was performed.For this purpose, the DNA was extracted as previously reported3. Outcomes. In pre-challenge BALF, X±SD for total number of cells/µl, macrophages, lymphocytes,neutrophils and eosinophils percentages were 230±150 cell/µL; 57,6%±19,6%; 27,6%±9,7%;3,3%±3,6%; 0,9%±1,3%, respectively. In post-challenge BALF, X±SD for total number of cells/µl,macrophages, lymphocytes, neutrophils and eosinophils percentages were 680±258,8 cell/µL;57,1%±19,4%; 30,8%±12,6%; 4,3%±4,1%; 3,4±5,1%, respectively. Mucus scoring was 1 in pre-challenge horses, while 2-3 after challenge. In pre-challenge BALF, Bacillus spp were isolated in 9/10 horses, Coagulase negative Staphylo-cocci (CNS) in 7/10, Stenotrophomonas maltophilia and Pseudomonas sp in 2/10, Streptococcusspp, Oerskovia spp and E. coli in 1/10 horses. After challenge, Bacillus spp were isolated in 8/10horses, CNS were isolated in 7/10, S. maltophilia in 3/10 and Pseudomonas spp in 3/10, Strepto-coccus spp in 1/10 horses. PCR identified in BALF post-challenge and not in pre-challenge, S.zooepidemicus in 3 horses. No positivity for S. equi and for R. equi was observed.



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Conclusions. After challenge, the total number of cells/µl, neutrophils, eosinophils percentages andmucus were increased, as reported in horses with respiratory diseases1. These results could be dueto a defense reaction to dust exposure in stabling not performing horses1,2. Most isolated bacteriacould be considered as normal flora both in pre- and post-challenge BALF and no correlation wasfound between presence of bacteria and mucus score. On the basis of the PCR results, S. zooepidemicus is more present in post-challenge. Although thepathogenic role of S. zooepidemicus is still discussed, this study suggests that the exposure to al-lergens and the increase in the mucus score can support the colonization of the respiratory mucosaby potentially pathogenic bacteria. The finding that S. zooepidemicus has been detected only byPCR and not by bacteriology confirms the higher sensitivity of the bio-molecular technique. The ab-sence of R. equi in the BALF is concordant with the age of the tested animals, being adult horse usu-ally intestinal carriers of R. equi.

Bibliography1. Hodgson JL, Hodgson DR (2004). WB Saunders, Philadelphia 119-150; 2. Holcombe SJ, et al. (2001). Equine Vet J, 33(3): 244-249; 3. Laus F, et al. (2007). Comp. Immun. Microbiol. Infect. Dis. 30: 247–260.

Address for correspondence:Dott.ssa Micaela Sgorbini - Dipartimento Clinica Veterinaria, via Livornese, snc, 56122 San Piero a Grado (PI), Italia Tel 050-2210137 - Cell 329/2299083 - E-mail: [email protected]



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IMPIEGO DI UN MESH IN MONOFILAMENTO POLIPROPILENE EPOLITETRAFLUOROETILENE ESPANSO NELLA CHIUSURA

LAPAROSCOPICA DELLO SPAZIO NEFROSPLENICO

R. Gialletti, DVM, I. Secco, DVM, PhD, S. Nannarone, DVM, PhD, M. Cercone, DVM, V. Cefaloni, DVM, M. Pepe, DVM, PhD

Dipartimento di patologia diagnostica e clinica veterinariaFacoltà di Medicina Veterinaria, Perugia, Italia

Area di interesse: Chirurgia

Scopo del lavoro. La chiusura dello spazio nefrosplenico è un intervento chirurgico elettivo in queisoggetti che presentano episodi di coliche ricorrenti con dislocazione dorsale sinistra e incarcera-mento nello spazio spleno-lienale del grosso colon. È possibile affrontare tale patologia utilizzandovarie tecniche, tra cui la colonpessi o la resezione del colon o la chiusura dello spazio mediante fi-lo di sutura fra rene e milza. Le moderne tecnologie hanno consentito un’evoluzione di quest’ulti-ma procedura che può essere effettuata in laparoscopia, visualizzando perfettamente la cavità ad-dominale, operando in sicurezza e riducendo invasività e tempi della chirurgia. Mediante interven-to laparoscopico abbiamo applicato un mesh, che aderisce alle porzioni anatomiche di interesse uti-lizzando dei fissatori elicoidali in titanio, i coils, andando quindi a chiudere lo spazio nefrosplenicofisicamente, fatto che impedisce l’incarceramento del colon qualora questo dislochi. Materiali e metodi. Lo studio è stato eseguito su 4 cavalli, ognuno dei quali aveva presentato fre-quentemente episodi di coliche ricorrenti, causate dalla dislocazione ed intrappolamento nefro-sple-nico del colon di sinistra. L’aspetto innovativo di questo studio è l’applicazione di un particolaremesh. Per l’intervento sono stati impiegati: trocars di diametro di 5 mm e 10 mm, ottica a visionefrontale 0°, Endo Babcock*, Protack*, strumento utilizzato per l’applicazione di 30 coils, spirali eli-coidali in titanio, di 3,9 mm di diametro e 4 mm di lunghezza, che vengono guidate dalla suturatri-ce fino al mesh, così da ancorarlo alle porzioni anatomiche di interesse.Il mesh consiste invece in una maglia Bard® Composix® che funge da protesi sterile e non assorbi-bile, concepita per la ricostruzione delle deficienze tissutali. Il mesh è composto di due strati di ma-glia, uno in polipropilene ed uno in politetrafluoroetilene espanso (ePTFE).La maglia Bard di polipropilene è una maglia intrecciata, prodotta con monofilamenti di polipropi-lene, che stimola una pronta risposta fibroblastica attraverso i suoi interstizi. Il foglio di ePTFE èestruso ed espanso onde impartire bassa porosità. La superficie della maglia stimola la rigenerazio-ne dei tessuti, mentre l’ePTFE la minimizza. La protesi a strati misura circa 1,5 mm di spessore, 7,6cm di larghezza e 15,2 cm di lunghezza e comporta un’alta resistenza allo scoppio e alla trazione.Sono stati eseguiti tre o, a seconda della necessità, quattro accessi per l’introduzione degli strumentilaparoscopici: il primo tra l’ultima costa e la tuberosità dell’anca, il secondo nell’ultimo spazio in-tercostale (alla stessa altezza del primo), il terzo ventralmente al primo e l’eventuale quarto nel 16°spazio intercostale. Valutato lo spazio nefro-splenico, visualizzato il margine dorso-mediale della milza, il legamentonefro-splenico e la capsula perirenale, è stato preparato il mesh, arrotolato “a sigaretta” e inserito inaddome attraverso il primo trocar da 10 mm. I bordi laterali del mesh sono stati apposti lungo il mar-gine dorso-mediale della milza, il legamento nefro-splenico e la capsula perirenale, così da creareun “collegamento fisico” tra queste porzioni anatomiche. Si è intervenuti, alla fissazione della retetramite l’inserimento del protack nel terzo/quarto trocar e apposizione dei coils, ad una distanza dicirca 1 cm l’uno dall’altro e il cui numero è stato variabile a seconda della necessità del caso, ov-vero in base all’ampiezza dello spazio. Risultati. L’apposizione del mesh non ha presentato problematiche, non è stato rilevato sanguina-mento e non ci sono state reazioni tissutali. È molto importante sottolineare la facilità e la rapidità



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dell’esecuzione della tecnica chirurgica in assoluta sicurezza e senza mostrare complicazioni po-stoperatorie.È stato possibile, in due soggetti, eseguire laparoscopia di controllo che ha messo in evidenza unanotevole riduzione dello spazio nefrosplenico. In tutti i cavalli si è registrata un’assenza di episodicolici post laparoscopia e notevole soddisfazione da parte dei proprietari. Conclusioni. La chiusura dello spazio nefro-splenico per via laparoscopica con apposizione delmesh è una tecnica di sicura efficacia e, alla luce dei risultati ottenuti, possiamo affermare che talechirurgia è senz’altro da applicare in tutti quei cavalli con coliche ricorrenti determinate da dislo-cazione e intrappolamento nefro-splenico del grosso colon per ottenerne una risoluzione definitiva.

BibliografiaFarstvedt E., Hendrickson D. Laparoscopic closure of the nephrosplenic space for prevention of recurrent nephrosplenic en-

trapment of the ascending colon. Veterinary Surgery 2005; 34:642-645.Röcken M., Schubert C., Mosel G., Litzke L. F. Indications, surgical technique, and long-term experience with lapaoscopic

closure of the nephrosplenic space in standing horses. Veterinary Surgery 2005; 34: 637-641.Mariën T., Adriaenssen A., Hoeck V. F., Segers L. Laparoscopic closure of the renosplenic space in standing horses. Veteri-

nary Surgery 2001; 30:559-563.Epstein K.L., Parente E. J. Laparoscopic obliteration of the nephrosplenic space using polypropylene mesh in five horses.

Veterinary Surgery 2006; 35:431-437.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott. Rodolfo Gialletti - Facoltà di Medicina Veterinaria Dipartimento di Patologia Diagnostica e Clinica Veterinaria - Via San Costanzo, 4 - 06124 Perugia (PG), Italia Tel. 0755857750 - E-mail: [email protected]



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PHARMACOKINETCS OF TEPOXALIN AND ITS MAJOR METABOLITE RWJ-20142 AFTER ORAL ADMINISTRATION IN FASTING/FED HORSES:

PRELIMINARY EVALUATIONS

M. Giorgi, DChem, MsPharmacol1, G. Ye, DVM, PhD2, B. Cuniberti, DVM, PhD3, R. Barbero, DVM, PhD3, C. Vercelli, DVM, PhD3, M. Sgorbini, DVM, PhD1,

M. Corazza, DVM, PhD1, G. Re, DVM, PhD, ECVP&T3

1Department of Veterinary Clinics, University of Pisa, Pisa, Italy2Deparment of Veterinary Medicine, College of Agriculture Animal Husbandry and Veterinary Medicine

of Qinghai, Xining, China3Department of Animal Pathology, University of Turin, Turin, Italy

Topic: Anaesthesia

Purpose of the work. Tepoxalin, is a dual COX/5-LOX inhibitor approved for use in dogs for the re-duction of inflammation and pain showing improved efficacy and reduced side-effects as a conse-quence of the concurrent decreased synthesis of pro-inflammatory prostaglandins/leukotrienes andgastro-damaging leukotrienes (Homer et al., 2005). Tepoxalin is known to undergo a fast metabol-ic conversion into an active metabolite (RWJ-20142) which maintains preferential inhibitory activ-ity on COX-1 isoenzyme but lacks the effects on 5-LOX. In order to investigate the potential fortepoxalin to represent an alternative to classical NSAID therapy in the horse, in this study the phar-macokinetics of the drug and RWJ-20142 were investigated in fasting and fed subjects. Materials and used methods. The subjects were 6 mares, aged from 9 to 13 years old and weigh-ing from 490 to 580 kg. The horses were previously determined to be clinically healthy on the basisof physical examination and full chemistry hematologic analyses. The study protocol was approvedby the ethics committee for animal experiments of the University Pisa (n° 9403). The test preparations were made according to an open balanced cross-over design: animals wererandomly assigned to two treatment groups, using an open, single dose, two treatment, two period,randomized cross-over design. Each subject received a single dose of 10 mg/kg of tepoxalin (Zubrin200 mg freeze-dry tablet) in the early morning by naso-gastric tube, either in fasting or in fed sta-tus. The wash-out period was two weeks. Subjective and objective symptoms and vital signs includ-ing blood pressure, heart rate and body temperature were assessed during the study. A catheter wasplaced into the right jugular vein to facilitate blood withdrawals. Blood samples of 5 mL, were col-lected at 0, 5, 15, 30, and 45 min and 1, 1.5, 2, 4, 6, 8, 10, 24, 34, 48, 58 and 72 h. The blood wasthen placed into collection tubes containing lithium heparin. The samples were centrifuged (3 000g for 3 min) within 30 min after collection and the harvested plasma was frozen at -20°C to be test-ed within 30 days.The concentration of tepoxalin and its major metabolite were measured in plasma samples using a val-idated method by HPLC coupled with fluorimetric detection (De Boever et al., 2009). Briefly; 500 µLof plasma were pipetted into a 1.5 mL Eppendorf tube, followed by the addition of 100 µL of internalstandard (RWJ-20294, Schering-Plough Co.) (10 µg /mL) and 900 µL of acetonitrile. After brief vor-texing and centrifugation (14 500 g for 10 min at room temperature), 50 µL of the supernatant was in-jected in the HPLC system (λ ex = 290 nm and λ em = 440 nm). A Gemini C-18 column (Phenomenex,Bologna, Italy) attached to an appropriate guard column was used. The mobile phase A consisted of0.01 M 1-octane-sulfonic acid in 0.01 M acetic acid in water, and the mobile phase B consisted oftetrahydrofuran. The retention time was 6.5, 8.8 and 12.6 minutes for tepoxalin, its acid metaboliteand the IS, respectively, using an isocratic elution at 50% A and 50% B at 1 mL/min. Outcomes. Throughout the study no abnormality definitely ascribable to the study drug was ob-served as assessed by measurement of subjective symptoms and vital signs, physical examinationand laboratory analysis.



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The plasma concentration vs time curves for tepoxalin and RWJ-20142 were best fitted to a non-compartmental model. In fasting animals, the plasma profile of tepoxalin showed a small amount ofthe drug (Cmax 44 ng/mL) and its rapid elimination (T1/2λ z 2.77 h). Its major metabolite RWJ-20142 showed higher Cmax (1250.1 ng/mL) and T1/2λ z (6.26 h). In the plasma of fed animals,tepoxalin was only detected in small amounts in two out of six horses and it did not allow the cal-culating of the pharmacokinetic parameters. In this animal group, despite the Cmax of RWJ-20142was lower (1197.6 ng/mL) than in fasting animals, the pharmacokinetic profile of RWJ-20142 wasnot significantly different between the groups. Such pharmacokinetic behavior suggests that tepox-alin might be subjected to a substantial first pass effect in horses as reported in other animal species(Homer et al., 2005; Pollock et al., 2008; De Boever et al., 2009) and humans (Waldman et al.,1996). In both treatments the formation of the RWJ-20142 showed a biphasic trend: a first rapidphase within 2 hours, and a second slower phase ending up in the Tmax (10 h). It could be specu-lated that this is due to variations in drug absorbance and metabolism in different intestinal tractsof the horse. In equines, the RWJ-20142/tepoxalin Cmax ratio (about 25) suggests, a rate of me-tabolism faster than in dogs (Homer et al., 2005) and humans (Waldman et al., 1996) (4), lowerthan in chickens (De Boever et al., 2009) (>25) and similar to rabbits (Pollock et al., 2008) (16). Conclusions. These findings show that tepoxalin, administered at 10 mg/kg in a single oral dose, isboth safe and well tolerated in horses, and possess excellent pharmacokinetic features for daily ad-ministration. However, further investigations (e.g. pharmacodynamic studies) to assess the possi-bility of extending the clinical use of tepoxalin to horses should be performed.

BibliographyHomer LM et al, J Vet Pharmacol Ther 2005 28: 287-91.Waldman SA et al, J Clin Pharmacol 1996 36: 462-8.Pollock CG et al, J Vet Pharmacol Ther 2008 31: 171-4.De Boever S et al, J Vet Pharmacol Ther 2009 32: 97-100.

Address for correspondence:Dr. Mario Giorgi - Università di Pisa, Facoltà di Medicina Veterinaria Dip. Clinica Veterinaria,Sez. di Farmacologia & Tossicologia - Via Livornese lato monte - 56010 S. Piero a Grado (PI), ItaliaTel. 050/2216805 - Cell. 3473159467 - E-mail: [email protected]



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ULTRASONOGRAPHIC IMAGING OF FETAL ANOMALIES DURING FIRST PREGNANCY PERIOD IN THE MARE

R. Mancuso, Med Vet, PhD, Dipl ECAR1, G. Catone, Med Vet, PA2, S. Russo Tiesi, Med Vet3, C. Caracausi, Med Vet4

1Libero professionista, Palermo, Italia2Dip. Scienze Veterinarie, Facoltà di Medicina Veterinaria,

Università degli Studi di Camerino, Camerino, Italia3Libero professionista, Trapani, Italia4Libero professionista, Catania, Italia

Topic: Reproduction

Introduction. Developments in diagnostic field and in ultrasound instruments improved visualiza-tion of reproductive anatomy and the approach to obstetric imaging. In addition to early embryon-ic death (5-24%)1 caused by insufficient progesteronemia, endometritis, endometriosis or develop-ment abnormalities of the conceptus, anembrionic pregnancy, chromosomal anomalies etc., also theinterrupted pregnancies in the first fetal period contribute to loss of horse’s breeding. Early recog-nition of abnormalities in the fetal period may limit these losses.Detection of fetal anomalies requires a systematic screening of all pregnancy starting in the em-bryonic stage to finish in the fetal stage. The complexity of taking place amniocentesis and the lackof serological screening as alternative methods make two dimensional real time ultrasound the on-ly means to detecting and diagnosing fetal defects.Although all the fetal periods allow the detection of anomalies, the period from 60th to 120th dayis the most employed because of fetal sexing. Sonographer needs to be familiar with normal fetalanatomy and common variants in relation to gestational age2,3.It is important apply a methodical method of morphological exam measuring a crown rump length(CRL) before 70th day, identifying both ocular globes, normal conformation of head whit recogniz-able brain, the nose septum, the neck, the spinal cord, the heart beat trying to performed a fourchamber view (in human species the four chamber view has the potential to detect 60% to 70% ofcardiac defects)4, the great vessels, the lung, the diaframmatic limit, the liver and the umbilical vein,the stomach and the repletion state that means normal deglutition, the kidneys, the entry of the um-bilical vessels in abdomen, the intestinal mass, the gonads, the bladder, the sexual organs and themammary glands, the anus and the tail. Moreover limbs and umbilical cord must be investigated.The aim of this study is to describe ultrasonographic aspects of some fetal anomalies in the first pe-riod of pregnancy in the mare with this method.Description of the case. As first of anomalies we describe the yolk sack remnant, perhaps the mostfrequent and the most simply to identify with ultrasound evaluation. It appears like an elongated orround shaped inside the allantoic portion of umbilical cord. Some authors reported that on rare oc-casion, these masses may compromise blood flow through the cord5.In a 22 year old Saddlebred mare we describe a case of bilateral microphthalmia detected at 100thday of pregnancy and confirmed at birth. Echographic measurements of both eyes were significant-ly inferior than references, without morphometric modifications of others organs6.A 7 year old Standardbred primiparous mare was referred at 104th day of pregnancy. Transrectalultrasound exam showed a female fetus. The fetus had an accumulation of fluid in the splancnicspace especially in the pleural space. This effusion appeared as symmetric anechoic fluid collectionwhit heart, lung and thymus that float in the fluid. Also was detected an integumentary edema. Ul-trasound findings were suggestive of a clinical diagnosis of fetal hydrops. Furthermore the marehad a lot of supplementary corpora lutea. Twelve days after the heart beat was not. On performeda fetal extraction for the macroscopic examination that confirmed the diagnosis.



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A 22 year old Arabian pluriparous mare was referred at 64th day of pregnancy. Transrectal sonog-raphy exam was performed and revealed a male fetus (CRL 65 mm) with a septated cyst filled withanechoic fluid around the neck. In other scan plans might we see a slight subcutaneous edema. Ina cardiac four chamber view was suspected a ventricular septum defect. Follow up at three weeksconfirmed the loss of gestation. Cystic hygromas are anomalies of the lymphatic system and in hu-man species they are often associated with aneuploidy. The presence of a cardiac malformation sig-nificantly increases the risk of an underlying chromosomal abnormality4.In a 3 year old Friesian primiparous mare we made a diagnosis of fetal defect at 57th day of ges-tation. The mare had a lot of supplementary corpora lutea. Transrectal ultrasound exam revealed acystic hygroma around the neck and the trunk of a female fetus (CRL 59 mm). The hygroma ap-peared symmetrically septated and at 64th day it is more evident a peripheral hypoechoic layer andcentral anechoic aspect. Thorax appeared narrow. At 79th day was evident the fetal death. Becausethe fetal parts are recognizable without any connection was established a fetal maceration. Conclusions. The window between 60th and 120th day of gestation seems an appropriate period inorder to evaluate the fetal morphology and to study the fetal anomalies. It is interesting the ovarycondition perhaps sign of high serum eCG level. Certainly we need keep working to improve the re-covery of these events and especially the development of the evaluation panel of normal findings.

Bibliography1. Ball BA.1988 Vet.Clin.N.Am.Equ.Pract.4:263-290.2. Yamaga Y, Too K. 1984. The Jap. j. vet. sci. 46(2):203-12.3. Kähn W, Leidl W.1987. Dtsch Tierarztl Wochenschr. 94(9):509-15.4. Nyberg D.A. et al. 2003 Diagnostic Imaging of Fetal Anomalies. Lippincott W&W. Philadelphia, PA.5. CassarT.I.Y. et al.2006. An.Repr.Sci.94: 439-442.6. McKinnonA.O., Voss J.L. 1992. Equine Reproduction. Lea & Febiger, Philadelphia.

Address for correspondence:Dott. Rosario Mancuso - Via Isidoro La Lumia, 52 - 90139 Palermo (PA), Italy Cell. 335 6204467 - E-mail: [email protected]



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INFEZIONE DA GAMMAHERPESVIRUS NEI PULEDRIGAMMAHERPESVIRUS INFECTIONS IN FOALS

M. L. Marenzoni, Med Vet, PhD1, F. Passamonti, Med Vet, PhD1, G. Coppola, Med Vet, PhD1, M. Maranesi, Med Vet, PhD1, K. Cappelli, Med Vet, PhD1, S. Capomaccio, Agr Vet, PhD1,

A. Verini Supplizi, Med Vet1, P. Cordioli, Med Vet2, M. Coletti, Med Vet1

1Centro di Studio del Cavallo Sportivo- Dipartimento di Patologia, Diagnostica e Clinica Veterinaria, Università degli Studi di Perugia, Perugia, Italia

2Istituto Zooprofilattico della Lombardia e dell’Emilia Romagna, Brescia, Italia

Area di interesse: Malattie Respiratorie

Scopo del lavoro. La complessità eziologica delle malattie respiratorie del cavallo e il loro impat-to economico rendono necessario approfondire le conoscenze di agenti virali, da sempre considera-ti secondari, ma che in realtà potrebbero avere un ruolo importante nell’insorgere di altre forme cli-niche gravi. Questo è il caso dei due gammaherpesvirus del cavallo (famiglia Herpesviridae, sotto-famiglia Gammaherpesvirinae, genere Rhadinovirus), Equid herpesvirus tipo 2 (EHV-2) e Equidherpesvirus tipo 5 (EHV-5), considerati ubiquitari nella popolazione equina e caratterizzati da infe-zioni persistenti, che nell’ospite alternano cicli litici di infezione a fasi di latenza. Non è ad oggichiaro se questi virus abbiano un ruolo patogeno, in quanto il loro ritrovamento sia su soggetti saniche malati rende difficile associare i virus a forme patologiche. Tuttavia negli ultimi anni sono sem-pre più numerosi i lavori che riscontrano i due virus in associazione a forme clinicamente manife-ste. In particolare EHV-2 è stato frequentemente associato a forme respiratorie nei puledri e studisperimentali hanno riscontrato una diminuzione dell’incidenza di infezione da Rhodococcus equi inpuledri vaccinati nei confronti di EHV-2. EHV-5 è stato evidenziato nelle lesioni polmonari di ca-valli affetti da fibrosi nodulare polmonare, parallelamente a quanto avviene con altri gammaherpe-svirus nell’uomo e nell’asino. Considerato questo, è stata condotta un’indagine biomolecolare suEHV-2 e EHV-5 e, limitatamente a EHV-2, sierologica, al fine di comprendere l’andamento e il pos-sibile ruolo di queste infezioni nei puledri.Materiali e metodi. Tamponi nasofaringei (TNF) e sangue sono stati prelevati da 15 puledri, a par-tire da 1 mese fino ai 6 mesi di età, ad intervalli di 6 settimane. Durante tale periodo i puledri sonostati sottoposti giornalmente a visita clinica. Il DNA dei TNF e dei leucociti del sangue è stato usa-to in un protocollo seminested di PCR, che aveva come bersaglio il gene per la glicoproteina H perEHV-2 e quello per la glicoproteina B per EHV-5. Il siero dei puledri è stato sottoposto a sieroneu-tralizzazione (SN) per EHV-2 al fine di mettere in evidenza un’eventuale sieroconversione (aumen-to di titolo di 4 o più diluizioni tra due prelievi successivi). Non è stato possibile allestire la SN perEHV-5 in quanto non esistono stipiti isolati in Italia. Risultati. Undici puledri hanno manifestato una sintomatologia respiratoria durante il periodo di os-servazione. I risultati della PCR per EHV-2 e per EHV-5 a un mese di vita erano completamente ne-gativi, mentre a 6 mesi di età avevano raggiunto il 100% e il 73% di positività rispettivamente perEHV-2 e per EHV-5. Non è stata riscontrata un’associazione statisticamente significativa tra formerespiratorie e positività dei campioni alla PCR, né per EHV-2 né per EHV-5. Invece la SN è statautile nell’identificare 3 soggetti con sintomi respiratori, che hanno manifestato una sieroconversio-ne nei confronti di EHV-2. Conclusioni. Le infezioni da EHV-2 e EHV-5 si instaurano dopo la nascita per raggiungere un’elevataprevalenza già entro i sei mesi di età. Il test di PCR ha un valore epidemiologico, ma di per sé non haun ruolo diagnostico nelle forme respiratorie da gammaherpesvirus. In tal senso invece il rilevamentodi sieroconversione può risultare più utile, sebbene attualmente non sia effettuabile per EHV-5. Nel pre-sente lavoro 3 puledri su 11 con sintomi respiratori hanno avuto sieroconversione da EHV-2, per cui ta-le virus andrebbe considerato tra le diagnosi differenziali delle forme respiratorie dei puledri.



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Bibliografia1. Bell, S.A., Balasuriya, U.B., Gardner, I.A., Barry, P.A., Wilson, W.D., Ferraro, G.L. & Maclachlan, N.J. (2006) Tem-

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2. Dunowska, M., Wilks, C.R., Studdert, M.J. & Meers, J. (2002) Equine respiratory viruses in foals in New Zealand.New Zealand Veterinary Journal 50, 140–147.

3. Nordengrahn, A., Merza, M., Ros, C., Lindholmc, A., Palfi, V., Hannant, D. & Belák, S. (2002) Prevalence of equineherpesvirus types 2 and 5 in horse populations by using type-specific PCR assays. Veterinary Research 33, 251–259.

4. Williams, K.J., Maes, R., Del Piero, F., Lim, A., Wise, A., Bolin, D.C., Caswell, J., Jackson, C., Robinson, N.E., Derk-sen, F., Scott, M.A., Uhal, B.D., Li, X., Youssef, S.A. & Bolin, S.R. (2007) Equine multinodular pulmonary fibrosis:a newly recognized herpesvirus-associated fibrotic lung disease. Veterinary Pathology 44, 849–862.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott.ssa Maria Luisa Marenzoni - Centro di Studio del Cavallo SportivoDipartimento di Patologia, Diagnostica e Clinica Veterinaria, Università degli Studi di PerugiaVia S. Costanzo, 4 - 06126 Perugia (PG), Italia Tel. 0755857662 - E-mail: [email protected]



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PROSPECTIVE EVALUATION OF A PARENTERAL NUTRITION FORMULA IN CRITICALLY-ILL NEONATAL FOALS

J. Mariella, DVM, PhD1, A. Pirrone, DVM1, C. Perciballi, DVM2, C. Castagnetti, DVM, PhD, Dipl. ECAR1

1Dipartimento Clinico Veterinario, Università di Bologna, Bologna, Italia2Libero Professionista, Fermo, Italia

Topic: Reproduction

Purpose of the work. Critically-ill foals often require parenteral nutrition (PN) when they are tooweak and recumbent or during gastrointestinal conditions such as ileus or enteritis.This prospective observational study evaluated the administration of a standardized formula of PNin critically-ill foals, comparing serum concentrations of glucose and triglyceride (TG) betweenfoals treated or not with PN, describing the associated complications (hyperglycemia, hyper-triglyceridemia and phlebitis), the amount of energy administered per day and the association withoutcome. The study examined also if the administration of PN was significantly associated with thepresence of Systemic Inflammatory Response Syndrome (SIRS) or with a sepsis score > 11 and ifthese conditions increased the risk of hypertriglyceridemia or hyperglycemia. Age-specific normalvalues of serum TG concentration were measured to define our reference range. Materials and used methods. All sick foals prospectively enrolled in the study received a standard-ized clinicopathological evaluation at admission. All the foals affected by Perinatal Asphyxia Syn-drome (PAS), septicemia and enteritis were included in the study.Sick foals were divided into two groups: the group N (nutrition) received PN during hospitalizationfor longer than 12 h and the group C (control) did not.A standard PN solution was formulated by mixing under strict aseptic conditions 1000 ml of 50%glucose, 1000 ml of 8.5% amino acids and 500 ml of 10% lipids (non-protein energy/gram of ni-trogen ratio 165.44 Kcal/g; final caloric content of the solution 2590 Kcal).The PN solution starting rate was 1 ml/Kg/h, gradually increased every 4 h to the maximum rate of2 ml/kg/h if the foal tolerated the infusion (blood glucose concentration between 4.44-10 mmol/L,monitored every 1-4 h).Serum TG concentration was measured in all the foals that received PN treatment before the be-ginning of PN and prior to the gradual decrease of the infusion rate.In the group C, TG and blood glucose concentration were measured at admission and after 48 h.Serum TG concentration of 14 healthy foals at 24, 48 and 72 h of life was measured and comparedwith 1-way ANOVA for repeated measures.Kruskal-Wallis test with Bonferroni’s correction, Mann-Whitney test and Fischer’s exact test wereused to analyze the recorded data. A p value <0.05 was considered significant. Outcomes. The study included 14 healthy foals and 41 sick foals, 21 in the group N and 20 in thegroup C, with a survival rate of 87.8%.Mean TG concentration in healthy foals was 0.55 ±0.35 mmol/L, 1.19 ±0.91mmol/L and 1.74 ±0.96mmol/L at 24, 48 and 72 h after birth, respectively. A significant difference (p <0.01) was revealedbetween 24 h and 72 h values and between 48 h and 72 h values.In the group N, mean blood glucose concentration at admission was 4.55 ±3.33 mmol/L.During PN administration, hyperglycemia was detected in 15/21 (71.43%) foals. Only one foal de-veloped hypoglycemia during insulin infusion.Mean energy provided with PN was 46.08 Kcal/Kg/day (range 27.78-75).In the group C, the mean blood glucose concentration at admission was 6.20 ±2.66 mmol/L and8.28 ±1.61 mmol/L after 48 h. At 48 h of hospitalization no foal was hypoglycemic and 4/17(23.53%) foals were hyperglycemic.



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In the group N, mean serum TG concentration was 1.84 ±2.39 mmol/L prior to PN and 1.17 ±1.37mmol/L at the end of PN.On the basis of age-specific normal range, 4 foals showed hypertriglyceridemia before PN and 2foals at the end of PN.In the group C, mean serum TG concentration was 1.40 ±1.17 mmol/L at admission and 1.02 ±0.50mmol/L after 48 h. On the basis of age-specific normal range, 5 foals showed hypertriglyceridemiaat admission.Phlebitis was not observed in both groups.Statistical analysis revealed that blood glucose concentration after 4 hours of PN treatment washigher (p <0.01) than prior to the beginning of PN and that foals of group N could have a higherprobability to develop hyperglycemia (p <0.05), with a relative risk = 3.03. No other statisticallysignificant difference was found. Conclusions. Based on the results of this study, there are no medical contraindications to addinglipids to PN formulations. The formula used are really simple to prepare and the protocol easy toapply, improving the possibility to use PN in critically-ill foals.

BibliographyHansen TO. Nutritional support: parenteral feeding. In: Koterba AM, Drummond WH, Kosch PC. Equine Clinical Neona-

tology, Philadelphia: Lea & Febiger, 1990;747-762.Hollis AR, Furr MO, Magdesian KG, Axon JE, Ludlow V, Boston RC, Corley KTT. Blood Glucose Concentrations in Crit-

ically Ill Neonatal Foals. J Vet Intern Med 2008;22:1223–1227.Knottenbelt DC, Holdstock N, Madigan JE. Equine Neonatology Medicine and Surgery. Philadelphia: Saunders, 2004;155-

363.Krause JB and McKenzie HC. Parenteral nutrition in foals: a retrospective study of 45 cases (2000-2004). Equine Vet J

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scription complications and outcome in 53 foals (1995-2005). Veterinary Journal, 2009;181:137-144.Stratton-Phelps M. Nutritional management of the hospitalized horse. In: Corley KTT, Stephen J. The Equine Hospital Man-

ual, Singapore: Blackwell Publishing, 2008;261-310.

Address for correspondence:Dott.ssa Carolina Castagnetti - Dipartimento Clinico Veterinario, Università di Bologna, Via Tolara di Sopra, 50 - 40064 Ozzano dell’Emilia (BO), Italia Tel. +39 051 2097571 - Cell. +39 3204020307 - E-mail: [email protected]



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CHARACTERIZATION, DIFFERENTIATION AND CRYOPRESERVATION OF EQUINE PERIPHERAL BLOOD-DERIVED MESENCHYMAL STEM CELLS

(ePB-MSC)

T. Martinello, PhD1, I. Bronzini, DVM1, L. Maccatrozzo, Dr1, I. Iacopetti, DVM2, F. Mascarello, DVM1, M. Sampaolesi, PhD3, M. Patruno, PhD1

1Department of Experimental Veterinary Sciences, University of Padova, Italy2Department of Clinical Veterinary Sciences, University of Padova, Italy

3Stem Cell Research Institute, University Hospital Gasthuisberg, Leuven, Belgium

Topic: Orthopaedics

Purpose of the work. Adult mesenchymal stem cells (MSC) hold a great potential for the develop-ment of new treatment strategies to be used in different orthopedic conditions. In equine medicine,the tissue of choice as source of stem cells is still bone marrow, but currently peripheral blood isconsidered a new potential tool for achieving clinical advantages because of its lower invasivity,easier accessibility and plasticity (Giovannini et al., 2008).The aim of our project was to isolate and fully characterize MSC from an easily and available adulttissue such as equine peripheral blood (ePB-MSC). Moreover, inasmuch as the percentage of cir-culating stem cells in mammalian peripheral blood is very low and their successful isolation inequine is of 33% (Koerner et al., 2006) the cryopreservation might be regarded as a key tool for ob-taining quickly available stem cells from domestic animals (Mambelli et al., 2009). Therefore, an-other aim of this work was to verify the proliferative capacity and the ability to differentiate into dif-ferent cell types of ePB-MSC without losing stem features after long term cryopreservation. Materials and used methods. Isolation protocol: 100 ml of blood collected from jugular vein in Li-heparin anticoagulant, and diluted 1:1 with saline solution (PBS), were deposited carefully abovea layer of Ficoll Paque solution, centrifuged at 1600g for 20 min to obtain gradient separation.Mononuclear interphase was removed and washed twice with PBS, finally plated in 25 cm2 cultureflask with normal growth medium. After 2-3 weeks, the developed colony-forming units of adherentcells were recovered and plated for amplification.Cryopreservation: ePB-MSC were resuspended in cryopreservation medium (90% FBS and 10% di-methyl sulfoxide) and frozen at concentration of 2x10E6 cells/cryovial. Cells were frozen decreas-ing -1°C/min until -80°C holding for 1 week and then transferred in liquid nitrogen tank for longterm storage. Thawing procedure was performed after 10/12 months.Comparative study: fresh and cryopreserved ePB-MSC were tested: 1) for their morphology andstemnees characteristics as population doubling time, alkaline posphatase activity, kariotyping,telomerase activity and flow cytometry assay (FACS); 2) for their capacity to differentiate into di-verse mesenchymal lineages as osteogenic, adipogenic and myogenic.Outcomes. Equine peripheral blood-derived mesenchymal stem cells were isolated and analyzedimmediately and after frozen in liquid nitrogen for 10-12 months. Both fresh and cryopreserved cellsshowed the typical morphology, growth curve and population doubling time referred in literature tostem cells population. FACS analysis had showed significant positivity for mesenchymal markers asCD90, CD44, CD117 and CD13 but not for hematopoietic markers as CD34 and CD45. Fresh andcryopreserved ePB-MSC have demonstrated a strong alkaline posphatase reactivity (commonlyused to detect stem cells), telomerase activity and a normal karyotype. Moreover, both fresh andfrozen cells were able to differentiate in non-hematopoietic lineages, such as osteogenic, myogenicand adipogenic proving a great differentiative potential.Conclusions. Overall, our results demonstrated that cryopreservation of ePB-MSC provides a con-venient tool for in vitro applications because they possess the same stem characteristics of fresh iso-lated cells. The possibility of maintaining the stem cell features of ePB-MSC after a long term stor-



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age will have important implications for an autologous cellular-based therapy in veterinary medi-cine. In collaboration with the Department of Veterinary Clinical Sciences autologous cryopre-served ePB-MSC were used in a particularly severe OCD lesion in the tarsal joint of a foal. The fol-low up is encouraging although other clinical trials are required.

BibliographyGiovannini S, Brehm W, Mainil-Varlet P, Nesic D. Multilineage differentiation potential of equine blood-derived fibroblast-

like cells. Differentiation 2008; 76: 118-129. Koerner J, Nesic D, Romero JD, Brehm W, Mainil-Varlet P, Grogan SP. Equine peripheral blood-derived progenitors in com-

parison to bone marrow-derived mesenchymal stem cells. STEM CELLS 2006; 24: 613-1619.Mambelli LI, Santos EJC, Frazao PJR, Chaparro MB, Kerkis A, Zoppa ALV, Kerkis I. (2009) Characterization of equine adi-

pose tissue-derived progenitor cells before and after cryopreservation. Tissue Eng 15:87-94.

Address for correspondence:Dott.ssa Ilaria Bronzini - Università di Padova Dip. Scienze Sperimentali VeterinarieViale dell’Università, 16 - 35011 Padova (PD), Italia Tel. 049/8272546 - Cell. 347/6808397 - E-mail: [email protected]



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LOW VOLUME INSEMINATION WITH FRESH SEMEN OF MARES WITH PATHOLOGICALLY TIGHT CERVIXES

M. Kölling & T.R.V. MatsonTwemlows Hall Stud Farm, AI & ET Centre, Whitchurch, UK

Stallion AI Services, Whitchurch, UK

Topic: Reproduction

Introduction. During oestrus the developing follicle secretes oestrogen and the cervix progressive-ly softens and drops towards the floor of the distended vagina. At the time of maximal relaxation,the cervix appears completely flattened on the vaginal floor, especially in pluriparous mares. Thecervix in maiden and younger mares usually relaxes to a lesser degree. Pathologically tight cervixes are often found in older maiden sport horse mares that are not pre-sented at stud until they finish their competitive career and in mares with cervical adhesions and fi-brosis. Often with these mares glandular degenerative changes and stromal fibrosis (endometrio-sis), paired with an abnormally tight cervix which fails to relax properly, make it very difficult to getthem in foal. Insemination volume of fresh and chilled semen varies between 6 to 60 ml per insemination doseand post mating accumulated fluid (post mating endometritis) is often unable to drain out of theuterine lumen due to failure of the cervix to relax.Description of the case. 5 mares aged between 9 and 15 years of age (mean average = 12.4) werepresented during the 2009 stud season for insemination with fresh semen. The follicular develop-ment was monitored ultrasonographically and when a follicle ≥ 35 mm was present on one ovarywith uterine oedema each mare was given Ovuplant subcutaneously (2,1 mg deslorelin actetate) toinduce ovulation. Insemination with fresh semen, extended with INRA 96 to a total volume of 20-30 ml with at least50 x 106 sperm/ml and an averaged raw progressive motility of 60%, was performed 24 hours af-ter Ovuplant administration. Ovulation was confirmed via ultrasound by the next day. On digital examination all 5 mares had pathologically tight cervixes in common. On the day ofovulation detection (Ov+0) all mares showed on the ultrasound scan 3-5 cm depth of free intraluminal fluid. Uterine lavage was performed until the recovered fluid was clear. Ultrasound examination was per-formed after the flush to make sure that all fluid was recovered. All 5 mares were monitored up toOv+3 ultrasonographically for fluid accumulation. Where fluid was detected (intra luminal fluid >1 cm) uterine lavage was repeated. A pregnancy scan was performed 15 days post ovulation andnone of the inseminations resulted in a pregnancy.On the second cycle all 5 mares were inseminated using the same stallion as on the first cycle. Se-men was collected, diluted 1:1 with extender (INRA 96), spun down at 600 g for 10 mins and loadedin 0.5 ml cc straws. The final density varied between 300 and 600 millions spermatozoa per straw. 24 hours post ovu-plant administration between 1 and 2 straws were used per rectally guided deep uterine insemina-tion (DUI catheter, Minitüb). Ovulation was detected the next day via ultrasound and 3 out of 5mares did not accumulate any fluid. 2 mares had ≤ 1 cm fluid intrauterine - they were scanned upto Ov+3 to monitor the fluid. At 3 days post ovulation, only a speck of fluid was detectable in theuterine body. A pregnancy was detected in all 5 mares 15 days post ovulation and a postive heart-beat around 28 days of gestation. Discussion. Reduced conception rates associated with fluid accumulation has been recognized formany years in broodmares. An adequate cervical opening is vital to allow drainage and any failureof the cervix to dilate can cause fluid accumulation.



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Spermatozoa are responsible for the acute inflammatory response in the equine uterus after insem-ination. The intensity of the reaction is dependent on the concentration and volume of the insemi-nation dose. By reducing the volume and compacting the concentration of spermatozoa we reducedthe inflammatory response in the mare’s uterus. This technique is might be helpful for mares withpathologically tight cervixes.

Address for correspondence:Tullis Matson, Stallion AI Services, Twemlows Hall, Whitchurch, Shropshire, SY13 2EZTel: 0044 1948 666295 - Mob: 0044 7801592111 - E-mail: [email protected]



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PROCEDURE CHIRURGICHE IN STAZIONE QUADRUPEDALE NELCAVALLO: CONFRONTO TRA DUE PROTOCOLLI ANESTESIOLOGICI

S. Nannarone, DVM, PhD, L. Sommer, DVM, I. Secco, DVM, PhD,M. Cercone, DVM, M. Pepe, DVM, PhD, R. Gialletti, DVM

1Centro di Studio del Cavallo Sportivo-Dip. Patologia, Diagnostica e Clinica Veterinaria Università degli Studi di Perugia, Perugia, Italia

Area di interesse: Anestesia

Scopo del lavoro. Confrontare l’azione di due a2-agonisti, detomidina e romifidina, somministratiin infusione continua (IC) a cavalli sottoposti a chirurgia in stazione quadrupedale. Sono stati valu-tati i loro effetti sull’apparato cardio-circolatorio e respiratorio, sulle capacità analgesiche e sedati-ve, e sul grado di atassia, valutata su una scala da 0-3 (0= assenza, 3= marcata). Materiali e metodi. Sono stati inclusi 62 cavalli suddivisi in maniera casuale in due gruppi in ba-se al farmaco impiegato: detomidina (gruppo D, n° 32), romifidina (gruppo R, n° 30). Tutti i sog-getti hanno ricevuto terapia antibiotica (gentamicina 6.6 mg/kg IV, penicillina 20000 UI/kg IM) edantinfiammatoria (flunixin meglumine 1 mg/kg IV) 30’ prima della procedura chirurgica. La premedicazione IV prevedeva detomidina 8.4 µg/kg (D) o romifidina 30 µg/kg (R) e la IC veni-va iniziata entro 10-15’ dal bolo, sempre prima dell’incisione chirurgica. La velocità di infusione dei due a2-agonisti, inizialmente pari a 0.5 (D) e 4 µg/kg/min (R), venivagradualmente diminuita secondo il giudizio dell’anestesista.I parametri fisiologici sono stati registrati prima della sedazione, considerandoli parametri basali, eogni 5’ dall’inizio dell’IC fino al completamento della chirurgia. Sono state valutate frequenza car-diaca (FC), frequenza respiratoria (FR), CO2 di fine espirazione (ETCO2) e pressione arteriosa si-stolica (PAS), media (PAM) e diastolica (PAD).Tutti i dati ottenuti sono stati sottoposti ad analisi statistica mediante ANOVA, convalidata da testBonferroni, o mediante Chi-quadrato e la significatività considerata per valori di p<0.05. Risultati. I due farmaci sono stati somministrati ad una velocità media di 0.2±0.06 e 1.3±0.5µg/kg/min rispettivamente per D e R, per un totale di 7.9±3.6 (D) e 57.8±26.9 mg (R), i tempi di in-fusione sono stati complessivamente 85.3±47.2 (D) e 90.7±45.1 min (R). Il tempo medio di chirur-gia è stato di 79.9±49 (D) e 80.5±51.4 min (R), sono state eseguite laparoscopie (D: 18, R: 17), enu-cleazioni (D: 2, R: 2), sutura di lacerazioni cutanee (D: 4, R: 3), ortopedia/varie (D: 8, R: 8). I va-lori medi di FC nei primi 140’ si sono modificati da valori basali di 34±7.4 e 34±8 bpm a 26.2±1 e27±0.8 bpm rispettivamente in D e R. In entrambi i gruppi si sono verificati blocchi atrio-ventrico-lari di 2° grado (D: 51.2%, R: 59%).Nel gruppo D i valori basali medi di PAS, PAM e PAD (126±37.5, 89±33.7 e 62±31.4 mmHg ri-spettivamente), si sono così modificati in corso di IC: PAS 135±13.9, PAM 89±7.8 e PAD 68±6.3mmHg.Nel gruppo R i valori basali medi, pari a 120±20.3 (PAS), 86±17.5 (PAM) e 66±17.5 mmHg (PAD),si sono così modificati in corso di IC: 148±30.2, 107±25.6 e 93±23.5 mmHg rispettivamente.L’analisi statistica ha evidenziato valori significativamente maggiori nel gruppo R a 65’, 70’, 85’e 90’ (PAM), al tempo 100’ (PAS), e ai tempi 15’, 25’, 35’, 40’, 60’, 65’, 70’, 75’, 80’, 85’, 90’e 100’ (PAD).La FR basale (D: 14±4.8, R: 20±13.5 apm) si è abbassata in corso di IC a valori medi di 12±3.6 e13±1.24 apm rispettivamente. L’analisi statistica ha permesso di evidenziare un maggior effetto de-pressivo, in termini di diminuzione della FR, nel gruppo D. Tuttavia non è possibile fare considera-zioni sull’eventuale instaurarsi di depressione respiratoria durante IC di a2-agonisti, poiché nellostudio è stata valutata solo la ETCO2 i cui valori si sono mantenuti sempre prossimi a quelli basalisenza differenze significative tra i due gruppi.



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La somministrazione IV di oppioide preoperatorio è stata effettuata nel 28% o 6% (D) e 30% o 13%(R) rispettivamente per butorfanolo 0.02 mg/kg o metadone 0.08 mg/kg. Per l’analgesia intraopera-toria, valutata in termini di mancata risposta emodinamica/comportamentale a manovre chirurgiche,era prevista la possibilità sia di somministrare butorfanolo (0.02 mg/kg IV), qualora il cavallo fos-se giudicato non sufficientemente sedato, sia, ovviamente, di modulare la velocità d’infusione. Èstato somministrato butorfanolo intraoperatorio nel 40.6% e 33.3% (D e R); non è stato mai som-ministrato alcun oppioide nel 25% e 23.3% (D e R), ciò indica un potere analgesico abbastanza so-vrapponibile per le due molecole. L’atassia residua è risultata significativamente minore nel gruppo R. Conclusioni. I due protocolli si sono dimostrati efficaci nel garantire un grado di sedazione ed anal-gesia sufficienti ad espletare interventi chirurgici elettivi in stazione quadrupedale, senza compor-tare segni di grave atassia né alterazioni cardio-respiratorie richiedenti trattamento farmacologico.Sono auspicabili indagini su eventuali modificazioni delle pressioni parziali dei gas ematici per ve-rificare l’effetto degli a2-agonisti sulla capacità ventilatoria dell’animale sedato, soprattutto in cor-so di laparoscopia dove è prevista l’induzione di capnoperitoneo. Vista la carenza in bibliografia, sa-rà altresì interessante effettuare studi di farmacocinetica per le due molecole in corso di IC.

BibliografiaGoodrich LR & Ludders JW (2004) How to attain effective and consistent sedation for standing procedures in the horse us-

ing constant rate infusion. Atti 50th AAEP. Nannarone S et al (2007) Anestesia per procedure chirurgiche in stazione: dati preliminari. Atti XIII SIVE p.175.Wilson D et al (2002) Retrospective analysis of detomidine infusion for standing chemical restraint in 51 horses. VAA 29,

54-57.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott.ssa Sara Nannarone - Dip. Patologia, Diagnostica e Clinica Veterinaria Sez. Chirurgia e Radiodiagnostica - Università degli Studi di PerugiaVia San Costanzo, 4 - 06126 Perugia (PG), Italia Tel. 075 5857715 - E-mail: [email protected]



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ENOSTOSIS-LIKE LESIONS IN THE HORSE: A RETROSPSECTIVE STUDY OF SCINTIGRAPHIC

AND RADIOGRAPHIC FINDINGS IN 21 CASES (2000 - 2008)

H. D. O’Neill, MVB MRCVS1, B. Bladon, BVM&S CertEP DESTS DipECVS MRCVS, RCVS & European Specialist2

1Large Animal Clinical Sciences, College of Veterinary Medicine, University of Michigan, East Lansing, USA2Donnington Grove Veterinary Surgery, Newbury, United Kingdom

Topic: Orthopaedics

Purpose of the work. There is limited published information regarding the distribution of enosto-sis-like lesions in the horse and its possible cause of lameness. The objective was to review and re-port the findings of a retrospective study of 21 horses admitted to a private equine referral hospitalover an 8-year period (2000 – 2008), with enostosis-like lesions that were confirmed both on radi-ographic and nuclear scintigraphic examination. Materials and used methods. Hospital records were analysed and information pertaining to patientsignalment, presenting complaint and diagnostic findings were all recorded.The diagnosis of enos-tosis-like lesions was based on the identification of discrete, focal or multifocal, intramedullary ar-eas of increased radionuclide uptake, invariably found around the nutrient foramina of long bones.Radiographically, these areas are confirmed as irregular to ovoid shaped radiopacities closely as-sociated with the endosteum and vascular channels within the medullary canal. The number, loca-tion and distribution of enostosis-like lesions were recorded. Race performance records were reviewed for those Thoroughbred patients pre- and post- examina-tion using the online Racing Post® database. Follow up information was obtained through a tele-phone questionnaire of owners and trainers regarding those horses that did not go onto compete fol-lowing investigation.Outcomes. Of the 21 horses presented, 17 were TBs, 12 of which were National Hunt racehorsesand 5 were Flat racehorses. The remaining four horses were used for general purpose riding (n =3) and showjumping (n = 1). A total of 68 individual enostosis-like lesions were confirmed in 57long bones from 21 horses. 5 horses were subject to repeat examinations at later dates, 4 of whichshowed the occurrence of new lesions in the same or different limb(s). Seventeen of the 21 horseswere males. Lesions were unequally distributed between the fore and hind limbs with over twice thenumber identified in the hindlimb (n = 46 foci) when compared to the forelimb (n = 22 foci). Thelesions were identified in the diaphysis of 22 tibiae, 14 radii, 13 third metatarsii, 6 humerii and 2femurs. Lameness attributable to enostosis-like lesions was thought to occur in 19/25 (76%) sepa-rate presentations. Follow up information was available on 18 of the 21 horses. With the exceptionof 1 horse, all cases had returned to soundness after a variable period of rest and controlled exer-cise programme. Conclusions. Enostosis-like lesions can be associated with a variable degree of lameness in thehorse, but clinical findings and diagnostic analgesia will often not precisely locate the site of the le-sion. Confirmation of a diagnosis is with the combined use of nuclear scintigraphy and radiogra-phy, and after exclusion of all other major musculoskeletal conditions. Whilst most lesions are self-limiting, some cases do recur in an unpredictable manner. The description of enostosis-like lesion distribution and clinical presentation should facilitate amore accurate diagnosis of the condition in the future. Further investigation is necessary to deter-mine the aetiopathogenesis of enostosis-like lesions so as to provide a more effective method of pre-vention and management of the condition.



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BibliographyBassage, L.H. and Ross, M.W. (1998) Enostosis-like lesions in the long bones of 10 horses: scintigraphic and radiographic

features. Equine vet J. 30(1): pp 35-42.Jones, E. and McDiarmid, A. (2005) Multiple enostosis-like lesions in a racing Thoroughbred. Equine vet Educ. 17(2): pp

92-95.Ramzan, P.H.L. (2002) Equine enostosis-like lesions. Equine vet Educ. 14(3): pp143-148.Stieger-Vanegas, S.M., Kippenes-Skogmo, H. and Nilsson, E. (2009) Imaging Diagnosis – Enostosis-like lesion in the femur

of a horse. Vet Radiol. Ultrasound. 50(5): pp 509-512.

Address for correspondence:Mr. Henry O’Neill - University Of Michigan Large Animal Clinic Sciences, College Of Veterinary Medicine, East Lansing, Michigan, 48824, United States E-mail: [email protected]



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INFEZIONI OMBELICALI DEL PULEDRO: INDAGINI MICROBIOLOGICHE SU 25 CASI CLINICI

UMBILICAL INFECTIONS IN FOAL: MICROBIOLOGICAL INVESTIGATIONS ON 25 CLINICAL CASES

F. Passamonti, DVM, PhD, C. Tamantini, DVM, PhD, M.L. Marenzoni, DVM, PhD, G. Coppola, DVM, PhD, R. Gialletti, DVM,

M. Cercone, DVM, M. Pepe, DVM, PhD, M. Coletti, DVMCentro di Studio del Cavallo Sportivo - Dip. Patologia, Diagnostica e Clinica Veterinaria,

Università degli Studi di Perugia, Italia

Area di interesse: Medicina interna

Scopo del lavoro. L’ombelico rappresenta una possibile via di ingresso di agenti patogeni nel pu-ledro e l’infezione che ne deriva frequentemente è associata a setticemia e poliartriti. Da un puntodi vista anatomico si possono distinguere 4 componenti (annessi ombelicali) che sono l’uraco, la ve-na ombelicale e 2 arterie ombelicali. Il processo patologico può riguardare ogni singolo annesso, mavista la stretta connessione l’infezione può diffondere ed interessare tutto l’ombelico. Le manife-stazioni cliniche si osservano in genere da 2-3 giorni dopo la nascita fino a circa 2 mesi di età; lecause sono riconducibili a cattive condizioni igieniche ambientali nei primi giorni di vita e al man-cato trasferimento dell’immunità passiva materna attraverso il colostro. Questo studio è stato con-dotto con lo scopo di evidenziare quali sono i batteri più frequentemente coinvolti nell’insorgenzadelle onfaliti nel puledro al fine di valutarne la sensibilità nei confronti degli antibiotici e chemio-terapici maggiormente utilizzati in medicina equina. Materiali e metodi. Sono stati presi in considerazione 25 puledri di età compresa tra i 2 e 30 gior-ni che presentavano una sintomatologia variabile caratterizzata da febbre, ottundimento del senso-rio, distensione articolare e problemi gastroenterici e respiratori. È stato possibile osservare l’au-mento di volume dell’ombelico, che alla palpazione appariva caldo, dolente e in alcuni casi drena-va materiale purulento, solo negli animali di età superiore a 7 giorni. 5 soggetti presentavano la per-vietà dell’uraco. Tutti i puledri sono stati sottoposti ad indagini ecografiche dell’ombelico, a prelie-vi di sangue per esami emocromocitometrici ed ematochimici e, dove le condizioni lo richiedeva-no, sono state allestite anche emocolture. 23 dei 25 soggetti sono stati sottoposti ad intervento chi-rurgico per onfalectomia e dagli ombelichi asportati sono stati effettuati tamponi da destinare agliesami batteriologici. Risultati. Sono stati isolati e tipizzati Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (27,6%), Escheri-chia coli (27,6%), Staphylococcus aureus (18,4%), Staphylococcus xylosus (9,2%), Enterococcusfaecalis (9,2%), Proteus mirabilis (9,2%), Staphylococcus epidermidis (4,6%), Arcanobacteriumpyogenes (4,6%), Klebsiella pneumoniae (4,6%) e Salmonella enterica subsp. enterica (4,6%). Duepuledri sono risultati negativi a questo tipo di indagine. Nel 77% degli esami la coltura batterica appariva in purezza mentre nel 23% erano presenti due otre specie batteriche diverse. All’antibiogramma i germi Gram positivi hanno mostrato una mag-giore sensibilità nei confronti delle Beta-Lattamine (Penicillina, Ampicillina, Cefalosporine), delleRifamicine (Rifampicina) e dei Fenicoli (Tiamfenicolo) mentre per Gram negativi si riscontrava unarisposta migliore verso i Chinoloni (Enrofloxacin, Marbofloxacin) e Aminoglicosidi (Gentamicina,Amikacina). Conclusioni. Nella prevenzione delle onfaliti del puledro è fondamentale al momento del parto lavalutazione del moncone ombelicale nonché la sua accurata pulizia e disinfezione. Anche gli am-bienti con cui il neonato entra in contatto devono essere sottoposti ad attenta pulizia e disinfezionee sarebbe opportuna la valutazione delle gamma globuline sieriche al fine di provvedere eventual-mente alla somministrazione di plasma iperimmune.



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Nelle onfaliti è importante a fini prognostici una diagnosi precoce e l’ausilio dell’indagine ecogra-fica risulta molto utile in quanto, in base alle dimensioni e all’ecogenicità degli annessi, si può emet-tere un sospetto diagnostico. In letteratura viene riportato che il 25% dei soggetti che presentanoqueste infezioni sviluppano quadri di setticemia e il 50% manifesta interessamento articolare e, neicasi più severi, fisiti settiche. La chirurgia è altamente consigliata in quanto la sola somministra-zione di farmaci può risultare non sufficiente nel debellare completamente l’infezione, così come èindispensabile, dopo onfalectomia, effettuare una terapia antibiotica mirata. L’approccio batteriolo-gico con la richiesta del relativo antibiogramma è essenziale in quanto la scelta del principio attivoda utilizzare può influenzare notevolmente il successo terapeutico. Ad oggi, nella pratica clinica fre-quentemente si ricorre agli antibiotici in maniera empirica basata su esperienze personali o di altricolleghi ed impiegando delle associazioni, dosaggi e tempi di somministrazione spesso inadeguati.Questo, come descritto ampiamente in letteratura, può portare a fenomeni di chemio-resistenza che,oltre a condizionare il risultato della terapia stessa, rappresentano problemi di sanità pubblica.

BibliografiaNolen-Walston R. (2006) Umbilical and urinary disorders in Equine Neonatal Medicine 12, 231-236.Ortega J. et al. (2007) Infection of internal umbilical remnant in foals by Clostridium sordellii. Vet Pathol 44, 269-275. Reef V.B. et al. (1989) Clinical, ultrasonographic, and surgical findings in foals with umbilical remnant infections. JAVMA

195, 69-72.Smith M. (2006) Management of umbilical disorders in the foal. In Practice 28, 280-287.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott. Fabrizio Passamonti - Dip. Patologia, Diagnostica e Clinica Vet. Università degli Studi di PerugiaVia San Costanzo, 4 - 06124 Perugia (PG), Italia Tel. 075 5857662 - E-mail: [email protected]



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UTILIZZO DELL’ATROPINA SOLFATO IN CAVALLI INTOSSICATI DA ADONIS AESTIVALIS

USE OF ATROPINE SULPHATE IN SUMMER PHEASANT’S EYE (ADONIS AESTIVALIS) POISONING IN HORSES

E. Pierni, Med Vet1, V. Esposito, Med Vet2, D. Gagliardi, Med Vet3

1Libero professionista, Avellino, Italy2Libero professionista, Napoli, Italy

3Libero professionista, Campobasso, Italy

Area di interesse: Alimentazione e Nutrizione

Purpose of the work. Livestock animals are at the mercy of toxic plants when these plants are pres-ent in pasture or hay and undesirable effects may result from ingestion. That make up the primaryreasons for dietary toxicosis and digestive disorders. In our case we found Adonis aestivalis’s pres-ence in the hay offered. Adonis spp. are members of the Ranunculaceae family, and are consideredunpalatable in the pasture which is most likely the reason why reports of poisoning are rare, but inthis cases no one stabled horse refuse the hay offered.Aims. To describe digestive and cardiac disturbance in horses feeding, for mishap, with hay infest-ed by Adonis aestivalis and, especially, the difficulty in effect the proper therapy. Materials and used methods. The clinical history refer of 21 cases, out 96, coming from three dif-ferent stables between 2003 and 2008. The hay, used in the dietary management, presented highamount of A. aestivalis deriving from a spontaneous mixture of a non pastured field. The toxic plantsin the hay was in different status of dehydration, evidently green respect the rest of the total hay,easy to differentiate. A sample of the plant was send to Botanical Laboratory to confirm identifica-tion and classification. Adonis spp. is native to Europe and Asia, has erect stems with terminal soli-tary red flowers. Flowers and leaves are rich in toxic cardiac glycosides (adonitoxin, strophantin, vernadigin and cy-marin). Horses affected was monitored by auscultation, haematic screening (VetScan), gas andelectrolyte analysis (iStat), ultrasound examinations (SonoScape) and electrocardiogram (Cardio-line). At the beginning the medical therapy was symptomatic with supportive care (oxygen and in-travenous fluidtherapy) but, after the identification of the toxic plant, was integrated with atropinesulphate as a parasympathetic antagonist to aid the management of bradycardia and arrhythmias.Atropine was administered intravenous at dosage of 0.0125 mg/kg for the first intervention and,then, with a effect-dose management (avoiding mydriasis and lack of salivation) until the end of car-diac signs. Outcomes. 24-48 hours after administration of infested hay, the horses presented lethargy, collapseand colic signs. Physical examination revealed dehydration, dark mucus membranes, tympanismand generalized ileus with moderate gaseous distension of the small intestine and cecum. We hadonly one case with dermatologic problem characterized by ponfi on thorax and neck. Some horseshad sudden acute colic signs with a very high gastric reflux but with an unusual low cardiac batesrate. All horses had also bradycardia, arrhythmias, first-degree atrioventricular blocks. Cardiac al-terations come from increase vagal tone by cardiac glycosides. Strophanthidin, the aglycone of sev-eral cardenolides in Adonis spp., is due to inhibition of the sodium potassium adenosine triphos-phatase enzyme system pump resulting in hyperkalemia and degenerative changes in the heart phys-iology. Twelve hours after atropine injection (0.0125 mg/kg each 6 hours) the bradycardia disap-peared but remained the atrioventricular blocks; 24 hours after (0.006 mg/kg each 12 hours) we hada normal frequency alternate to bradycardia and the blocks starts to disappear; 48 hours after(0.003 mg/kg each 12 hours) normal frequency with some and sporadic blocks; we had normal elec-trocardiogram and auscultation after 5 days.



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Conclusions. The beneficial effect of atropine was determinant, no one horse had adverse effect andthe dose-effect management avoid serious problems of reperfusion (colic signs). Only two horsesdied out to 21 affected. In one case there was a severe symptomatology before discovered the toxiccause and the other (23 y.o. geld), immediately after the disappeared of cardiac symptoms, by in-farct.

Bibliography1. Cunningham F.X. JrA, Gant E. Portfolio of plasmids for identification and analysis of carotenoid pathway enzymes:

Adonis aestivalis as a case study. Photosynth Res.pa; 92(2):245-59. Epub Jul 17 2007.2. Gagliardi D. et al. Toxicity of Adonis aestivalis in horses, EAAP Meeting 24-27 August 2009 pg.425.3. Kummer H. Vergiftungen bei Pferden durch Adonis in Luzernen. Tierarztliche Unschan, 7:43 (1952).4. Ohmura H. et al. Effects of repeated atropine injection on heart rate variability in Thoroughbred horses. J. Vet. Med.

Sci 63(12); 1359-1360, (2001).5. Puschner B. and Woods L. Poisonous plants and effect on animals Proceedings, California Alfalfa and Forage Sym-

posium, 17- 19 December, 2003.6. Roberts DM, Buckley NA. Antitodes for acute cardenoline (cardiac glycoside) poisoning. Oct 18;(4) (2006).7. Sandersen CF et al. Effect of atropine-dobutamine stress test on left ventricular echocardiographic parameters in un-

trained warmblood horses. J. Vet. Intern Med. May-Jun:20 (3); 575-80 (2006).8. Woods L., et al. Summer Pheasant’s eye (Adonis astivalis) poisoning in three horses. Vet Pathol 41:215-220 (2004).9. Woods L., et al. Evaluation of the toxicity of Adonis aestivalis in calves J. V. Diagnostic Investigation Vol. 19 Issue 5,

581-585 (2007).10. Wright B. A.A.E.P. Convenction 1-5 Dec 2007.

Address for correspondence:Dott. Daniele Gagliardi - Via Ferrari, 72 - 86100 Campobasso (CB), ItaliaTel. 337 918081 - E-mail: [email protected]



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NEUROPATHOGENIC AND NON-NEUROPATHOGENIC VARIANTS OF EQUINE HERPESVIRUS TYPE 1 IN FRANCE

S. Pronost, MS1, L. Legrand, MS1, B. Wegge, DVM, PhD2, J. Lissens, DVM3, C. Fortier, MS1,E. Richard, DVM, PhD, MS1, F. Freymuth, MD, PhD4, G. Fortier, DVM, PhD, MS1

1Frank Duncombe Laboratory, Caen, France2Department of Pathology, Faculty of Veterinary Medicine, Ghent University, Merelbeke, Belgium

3Private Practitioner, Rexpoede, France4Laboratory of Virology, University Hospital, Caen, France

Topic: Neurology

Purpose of the work. Herpes virus type 1 (EHV-1) is one of the most important equine pathogen,exerting its major clinical impact by induction of both abortion (abortion storms, sporadic abor-tions, neonatal death) and myeloencephalopathy (EHM; one-third of the affected horse being at riskof death or subject to euthanasia). During the last three years, outbreaks in horse-riding centers,racetracks and veterinary hospitals throughout North America and Europe lead US Department ofAgriculture to classify EHM as a potentially emerging disease. In parallel, a point of mutation(G/A2254) in DNA polymerase was demonstrated to be strongly associated with neuropathogenicdisease versus non-neuropathogenic disease. While several studies confirmed that a single aminoacid exchange influenced by itself the neuropathogenicity (assessing the primary host through tar-geted mutagenesis of a single nucleotide as well as the magnitude and duration of leucocyte asso-ciated viraemia), other works concluded that the D/N752 of ORF 30 may not be related to some as-pect of the neuropathogenic disease (studies on replication ability in neurons).The aim of the present study was 1/ to describe a recent EHM outbreak which occurred in Francelast July 2009 and 2/ to characterize 124 EHV-1 strains isolated in France between 2002 and 2009. Materials and used methods. Outbreak description: A neurologic EHV-1 outbreak occurred mid ofJuly in a riding club of the North of France. Respiratory symptoms and hyperthermia began in ahorse a few days after travelling for a show-jumping. Ataxia, urine incontinence, tail paralysis,ptose of penis, recumbency, hyperthermia, anorexia and nasal discharge was reported. 7 of 63 nonthoroughbred horses were then affected, 4 animals had to be euthanized and necropsy could be per-formed in one horse. A boost of vaccination was performed as soon as the diagnosis was confirmed(PCR from blood and nasal swab; blood culture). Molecular typing was performed. Quarantine hasbeen established and vaccination or boost of EHV vaccination was advised in the region. Strains characterisation: 124 horses presenting EHV-1 PCR positive results between 2002 and2009 were investigated. Most of them are issue from abortion (84) but others were obtained fromsamples after EHM (16) or respiratory (24) diagnosis. DNA was extracted from different samples(lung, allantochorion, brain, blood, nasal swab, cepholorachidian liquid) using the adapted QIAamp DNA kit (Qiagen, les Ulis Paris) according to the manufacture’s instruction.EHV-1 typing: A duplex real-time Taq-Man® PCR assay was performed for the discrimination of thenon-neuropathogenic (A2254) and neuropathogenic (G2254) EHV-1 strains, using a StepOnePlusPCR System (Applied Biosystems, Les Ulis Paris). The primers and probes were identical to thosedescribed by Allen (2007). Outcomes. Outbreak description: Necropsy revealed multiple petechias at the sight of the coronaryarteries and liver. The strain was isolated from this horse by culture and molecular typing revealeda neurological genotype. Five other horses were detected positive by PCR and the typing of thesestrains revealed 4 neurological genotype meanwhile one was non-reactive.Strains characterisation: 94 strains were non-neuropathogenic (abortion: 62; respiratory: 23;EHM: 9) and 30 were neuropathogenic (abortion: 22; respiratory: 1; EHM: 7). Concerning the 7EHM neuropathogenic strains, 5 are issued from the outbreak currently described and 2 from an-



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other outbreak observed in 2009. The 9 EHM non-neuropathogenic strains are all issue from dif-ferent premises between 2003 and 2009. All the respiratory strains were collected in a stud wereyoung foals presented respiratory symptoms after an EHM event. Only one strain was neuropatho-genic. Conclusions. These results showed that both genotypes are present in France. It also demonstratedthat neuropathogenic strains could be detected in aborted foetuses and furthermore confirmed thatnon-neuropathogenic strains could be implicated in EHM syndrome as previously reported (Perkinset al., 2009). The strains identified in the two most recent outbreaks could suggest that, as in othercountries, an increase in “neuropathogenic” EHM frequency was observed in France. These datawere obtained in the absence of a standardized protocol to define EHM criteria and samples to beanalyzed. The recent protocol defined by the RESPE (French Epidemiological Network of EquineDiseases) including these criteria, will help us to measure in the future the real implication of neu-ropathogenic strains in EHM. Moreover further investigations are required in order to characterizethese strains without restriction to the G/A2254 mutation analysis and to find other markers, lead-ing to HME in the field.

BibliographyAllen G.P (2007) Development of a real-time polymerase chain reaction assay for a rapide diagnosis of neuropathogenic

strains of equine herpesvirus-1. J Vet Diagn Invest 19, 69-72.Perkins GA et al. (2009) Investigation of the prevalence of neurologic equine herpes virus type 1 (EHV-1) in a 23-year ret-

rospective analysis (1984-2007). Vet. Microbiol.

Address for correspondence:Stephane PRONOST - Frank Duncombe Laboratory Research & Developpement, 1 Route De Rosel, 14053 Caen Cedex4, France Phone 0033 231 47 19 19 - E-mail: [email protected]



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CONCENTRATIONS OF TOTAL PROTEINS, ALBUMINS AND AST, LDH, CK, ALP AND GGT ACTIVITIES IN THE BLOOD PLASMA

OF SPANISH BROODMARES DURING PREGNANCY

K. Satué, DMV, PhD1, P. Montesinos, DMV, Private Practitioner2

1Department of Animal Medicine and Surgery CEU-Cardenal Herrera University, Valencia, Spain2Veterinary Clinic, Valencia, Spain

Topic: Reproduction

Purpose of the work. Pregnancy results in increased metabolic demands (Milinkovic-Tur et al., 2005;Larsson et al., 2008). Although homeostatic mechanisms function to keep substances in blood at rel-atively constant levels, some changes in clinical biochemistry are likely to occur. Alterations in rou-tine plasma clinical biochemistry have not been well studied during pregnancy in horses (Harvey etal., 2005) and more specifically in Spanish Purebred mare. The aim of this study was to determine ifphysiological changes occur in plasma ALB, TPP, GGT, AST, LDH, CK and ALP in Spanish Purebredmares during pregnancy and to determine whether changes in theses parameters are substantialenough to indicate the need to establish specific reference intervals for Spanish pregnant mare. Materials and used methods. A total of 31 reproductive Spanish mares with ages between 5 and 17years were studied during pregnancy. Pregnancy was divided into three periods of similar duration (I;from the beginning of pregnancy until the day 115), II (from 116 days to 230 days) and III (from 231days until the birth). Venous blood samples were extracted always in the morning, with a monthly fre-quency, and were introduced in tubes with lithium-heparin. Plasma ALB, TPP, GGT, AST, LDH, CKand ALP concentrations were measured by spectrophotometry (Metrolab 2300 Plus V3®), using spe-cific reagents (RAL®). The effect of the pregnancy on biochemical parameters was assessed by a oneway ANOVA and when significant differences were found, post-hoc analysis was made (Tukey test). Outcomes. Pregnancy caused a significant increase of TPP (I period: 6.85±0.86; II period:7.02±0.84; III period: 7.30±0.60 g/dl) (p<0.05) with decrease of activities of CK (I period:111.39±40.89, II period: 105.49±38.72; III period: 80.85±26.74 IU/L), GGT (I period:22.45±15.83; II period: 19.04±15.38; III period: 15.00±4.28 IU/L) and AST (I period:173.48±39.74; II period: 158.95±33.28; III period: 155.87±32.27 IU/L) (p < 0.05), without mod-ifications in the LDH, ALP and ALB concentrations. Conclusions. In conclusion, according to the research results, concentrations of TPP, ALB, andAST, LDH, CK, ALP and GGT enzyme activity in the blood plasma of Purebred broodmares duringpregnancy, remained within the known values recorded in different equine breeds. Pregnancy has asignificant influence in the dynamics of TPP, CK, GGT and AST in the mare, ensuring the develop-ment of reference ranges for this physiological condition. This fact could be related to certain hor-monal and metabolic events that occur during this period in the mare.

BibliographyHarvey, J.W.; Pate, M.; Kivipelto, J.; Asquith, R. Clinical biochemistry of pregnant and nursing mares. Vet. Clin. Pathol., 34

(3): 248-254, 2005.Larsson, A., Palm, M., Hansson, L.O., Axelsson, O. Reference values for clinical chemistry tests during normal pregnancy.

BJOG, 115 (7): 874-881, 2008.Milinkovic-Tur, S., Péric, V., Stojevic, Z., Zdelar-Tuk, M., Pirsljin, J. concentrations of total proteins and albumins, and AST,

ALT and GGT activities in the blood plasma of mares during pregnancy and early lactation. Veterinarski Arhiv, 75 (3):195-202, 2005.

Address for correspondence:Dr. Katy Satué - CEU-Cardenal Herrera University Department of Animal Medicine and Surgery,Avd. Seminary, s/n, Moncada, Valencia, Spain - Phone: +34 961369000 - E-mail: [email protected]



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ANALISI DEI PATTERN PROTEICI DEL LIQUIDO SINOVIALE DI ARTICOLAZIONI DI CAVALLI AFFETTI DA OSTEOCONDROSI

F. Scoppetta, DVM1, V. M. Masi, DVM1, M. Tartaglia, Biotecnologa1, E. Chiaradia, BSc1, S. Nannarone, DVM1, F. Moriconi, DVM1, L. Avellini, MD1, M. Pepe, DVM1

1Centro di Studio del Cavallo Sportivo Università Studi di Perugia, Perugia, Italia


Scopo del lavoro. Introduzione: Studi di proteomica applicati a patologie osteoarticolari umanehanno messo in evidenza rilevanti modificazioni quali-quantitative dei profili proteici dei tessuti ar-ticolari1-2. L’impiego di queste metodiche potrebbe risultare perciò di particolare utilità per la carat-terizzazione delle proteine espresse nel liquido sinoviale di articolazioni equine affette da osteo-condrosi. Questa patologia, classificata come disturbo focale dell’ossificazione encondrale, ad ezio-logia multifattoriale (genetica, nutrizionale, endocrina e traumatica), ha un notevole impatto sullaspecie equina. L’anormale differenziazione condrocitaria evolve anche per l’intervento di fattoriesogeni come forze di tensione e di compressione che, agendo sull’interfaccia condro-subcondraleportano alla creazione di fissurazioni e frammentazioni. Tutto ciò si rende manifesto con l’osteo-condrite dissecante la cui sintomatologia esprime i segni tipici di un processo flogistico articolarecorrelato alla liberazione di cataboliti condrolitici, alla formazione di flaps e al distacco di fram-menti osteo-cartilaginei nell’ambiente intra-articolare3. Lo scopo di questo studio è stato quello diindagare le modificazioni dei pattern proteici nel liquido sinoviale di cavalli affetti da osteocondro-si per meglio capirne la patogenesi, il ruolo nel determinismo della patologia e per identificare pos-sibili biomarker diagnostici e prognostici.Materiali e metodi. Lo studio è stato condotto su 12 equini, di età compresa tra 12 e 18 mesi, rife-riti presso la Sezione di Chirurgia e radiodiagnostica della Facoltà di Medicina Veterinaria dell’U-niversità degli Studi di Perugia. In particolare sono stati analizzati campioni di liquido sinoviale pro-venienti da 6 articolazioni tibiotarsiche, con frammentazione osteocondrale e 6 articolazioni tibio-tarsiche esenti da patologie e appartenenti a cavalli sottoposti ad eutanasia. I pazienti presentavanouna ectasia (grado 1-2/5) delle articolazioni colpite e zoppia di grado 1-2/5. I campioni di liquidosinoviale, dopo l’aggiunta di inibitore delle proteasi sono stati sottoposti ad analisi proteomica me-diante elettroforesi bidimensionale, analisi densitometrica dei gel e spettrometria di massa per l’i-dentificazione degli spot proteici. L’analisi statistica per la valutazione delle differenze tra le inten-sità degli spot relativi ai gel confrontati è stata effettuata mediante t-test di Student integrato nelsoftware utilizzato per l’analisi dell’immagine. I valori sono stati considerati statisticamente signi-ficativi solo per p<0,05.Risultati. La standardizzazione del protocollo sperimentale ha permesso l’ottenimento di gel elet-troforetici bidimensionali (2D-Gel) di riferimento in cui vengono evidenziati 298-308 spot, la cuisuccessiva analisi mediante spettrometria di massa permetterà l’identificazione dell’intero patternproteico di liquido sinoviale equino normale.Come teoricamente prevedibile, il liquido sinoviale mostra un profilo proteico molto simile ad altrifluidi biologici (plasma, siero, etc.) con una maggiore presenza di spot nel range di pH acido. La re-gione a pH basico appare invece ricca soprattutto di spot che, dal confronto con mappe presenti indatabase, risultano riferibili alle diverse catene leggere e pesanti delle immunoglobuline e a fram-menti delle catene alfa e beta di emoglobina.Dall’analisi differenziale è emerso che il profilo proteico ottenuto da LS patologico mostra 28 spotla cui densità è differente rispetto ai controlli, di questi, solo 11 spot risultano statisticamente si-gnificativi (p<0,05). La spettrometria di massa ha rivelato che questi spot sono riferibili a diverseisoforme di Aptoglobina, a isoforme di Ceruroplasmina, a vitamina D-Binding protein e a fram-menti di albumine sieriche.



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Conclusioni. La definizione dell’intero pattern proteico del liquido sinoviale equino arricchirà le in-formazioni sul proteoma della specie4 e potrà inoltre essere di notevole utilizzo per altri studi diffe-renziali riguardanti patologie articolari, che rimangono ancora oggi di notevole interesse per la me-dicina equina. Il confronto delle diverse isoforme proteiche con quelle di plasma e siero della stes-sa specie potrà essere utile per stabilire l’origine delle stesse e confermare quanto marker ematiciproteici, ritenuti indicativi di situazioni articolari, siano effettivamente tali o altrimenti correlabili asituazioni sistemiche. L’analisi e il significato delle variazioni del profilo proteico dei campioni diLS patologico ci portano ad affermare che esse sono correlabili alla presenza di uno stato patologi-co, che incide notevolmente sull’attività metabolica dell’articolazione e, probabilmente, ad unacomponente infiammatoria. L’osteocondrosi rimane ancora oggi una patologia in via di definizionee la proteomica può rappresentare un mezzo valido per la comprensione dei processi coinvolti nelsuo determinismo e nella ricerca di marker prognostici. Rispetto ad una classica indagine biochi-mica, piuttosto che caratterizzare singole proteine, la proteomica descrive complessi proteici, dina-mici ed interattivi; l’esame diventa globale e non più specifico e selettivo.

Bibliografia1. Tilleman K., Deforce D. (2008) Expert Rev. Protemics 5; 755-759.2. Gibson D. S., et al. (2009) Journal of Proteomics 656-676.3. Jeffcott LB, Henson FM. Vet J (1998) Nov: 156 (3): 177-92.4. Miller I., et al. (2004). Proteomics 4; 3227-3234.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott. Marco Pepe - Univesrità Studi di Perugia - Via San Costanzo, 4 - 06126 Perugia (PG), ItaliaTel. 075 5857729 - Cell. 347 2242659 - E-mail: [email protected]



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RISULTATI PRELIMINARI SULL’UTILIZZO DI IMPIANTI A LENTORILASCIO SUPRA-COROIDEI DI CICLOSPORINA A PER IL CONTROLLO ALUNGO TERMINE DELL’UVEITE RICORRENTE NEL CAVALLO IN ITALIA

R. Stoppini, Dr.1

1Libero Professionista, Brescia, Italia

Area di interesse: Oftalmologia

Scopo del lavoro. L’uveite ricorrente è attualmente la principale causa di perdita di visione nel ca-vallo. Tale patologia, mediata dall’azione di Linfociti T, può essere in alcuni casi controllata me-diante l’utilizzo di Ciclosporina A (CsA), come dimostrato da numerosi studi svolti negli ultimi an-ni all’estero.1-6 Lo scopo del presente lavoro, che si integra in un più ampio studio di ricerca a li-vello internazionale, è di valutare l’efficacia a lungo termine di un singolo impianto supra-coroideodi una matrice a lento rilascio di Ciclosporina A per il controllo dell’uveite ricorrente nei casi in cuiè stato utilizzato in Italia. Materiali e metodi. Quattro cavalli (1 QH, 1 PSA, 1 PSI, 1 Pony) di età compresa tra 7-13 anni,2 femmine e 2 castroni, sono stati presentati per visita oculistica in seguito a ripetuti episodi diuveite ricorrente monolaterale, controllabile nella fase acuta con terapia medica topica e sistemi-ca. Risolta la fase infiammatoria acuta è stato posizionato un impianto di una matrice a lento ri-lascio di Ciclosporina A nello spazio supra-coroideo. L’intervento è stato effettuato in anestesiagenerale, decubito laterale, con l’ausilio di microscopio chirurgico. Il posizionamento dell’im-pianto è avvenuto nella zona temporale, lateralmente al muscolo retto dorsale. Dopo aver effet-tuato un’incisione della congiuntiva bulbare temporo-dorsale di circa 1-2 cm, a 8 mm dal limboè stato creato un flap sclerale di 7 mm di margine con profondità tale da visualizzare centralmenteparte del tessuto coroideo. L’impianto a lento rilascio di Ciclosporina A (6 mm di diametro, 25 mg) è stato posizionato nel-la tasca sclerale creata, successivamente richiusa mediante sutura con Poliglactina 910 7/0. La te-rapia post chirurgica prevedeva l’applicazione di antibiotico topico oftalmico q 6-8 ore per 7 gge terapia sistemica antinfiammatoria per 3 giorni.I cavalli sono stati periodicamente ricontrollati per valutare la presenza di eventuali recidive. Il tem-po considerato nel follow-up varia da un minimo di 15 mesi ad massimo di 3 anni. Risultati. Tre dei quattro cavalli sottoposti ad impianto supra-coroideo di CsA presentavano al mo-mento della chirurgia lesioni oculari secondarie ai precedenti episodi infiammatori (es. catarattacapsulare anteriore, sinechie posteriori, precipitati cheratici endoteliali ed edema corneale seconda-rio). In uno di questi le lesioni corneali, seppur senza l’evidenza di ulteriori episodi infiammatori in-traoculari, sono progredite determinando la perdita della funzione visiva. In un caso si è verificatoun episodio di ulcerazione corneale secondario alle lesioni croniche endoteliali, risolto con terapiamedica topica. Tre dei quattro cavalli hanno mantenuto la funzione visiva senza ulteriori episodi infiammatori nelfollow-up considerato. Conclusioni. L’utilizzo di impianti a lento rilascio di Ciclosporina A per il controllo a lungo termi-ne dell’uveite ricorrente risulta essere ancora scarso, nonostante l’incoraggiante esito ottenuto neicasi clinici in cui è stato utilizzato in Italia ed all’estero. La selezione dei casi da sottoporre ad im-pianto risulta essere fondamentale per l’efficacia dello stesso e per il mantenimento della funzionevisiva a lungo termine. Una precoce diagnosi della patologia, il precoce controllo della fase infiammatoria acuta, al fine diridurre i danni intraoculari secondari, e l’impianto supracoroideo di CsA a lento rilascio, nei sog-getti responsivi alla terapia in fase acuta, risultano in un prolungato controllo delle recidive e con-seguente mantenimento della funzione visiva.



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Bibliografia1. Romeike A, Brugmann M, Drommer W. Immunohistochemical studies in equine recurrent uveitis (ERU). Vet Pathol

1998;35:515-526.2. Gilger BC, Allen JB. Cyclosporine A in veterinary ophthalmology. Vet Ophthalmol 1998;1:181-187.3. Gilger BC, Malok E, Cutter KV, et al. Characterization of T-lymphocytes in the anterior uvea of eyes with chronic

equine recurrent uveitis. Vet Immunol Immunopathol 1999;71:17-28.4. Gilger BC, Malok E, Stewart T, et al. Effect of an intravitreal cyclosporine implant on experimental uveitis in horses.

Vet Immunol Immunopathol 2000;76:239-255.5. Gilger BC, Malok E, Stewart T, et al. Long-term effect on the equine eye of an intravitreal device used for sustained

release of cyclosporine A. Vet Ophthalmol 2000;3:105-110.6. Gilger BC, Salmon JH, Wilkie DA, et al. A novel bioerodible deep scleral lamellar cyclosporine implant for uveitis.

Invest Ophthalmol Vis Sci 2006;47:2596-2605.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott. Riccardo Stoppini - Loc. Belvedere, 17 - 25080 Calvagese Della Riviera (BS), Italia Cell. 335 6815081 - E-mail: [email protected]



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TRATTAMENTO ENDOSCOPICO DI 2 CASI DI TENOSINOVITE DELLA GUAINA TARSICA CON FRATTURA DEL SUSTENTACULUM TALI

P. Straticò, DVM, Spec Med Chir Cavallo, A. Di Pietro, DVM, C. Sciarrini, DVM, V. Varasano, DVM, Spec Med Chir Cavallo, L. Petrizzi, DVM, DECVS

1Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie, Università degli Studi di Teramo, Teramo, Italia


Introduzione. I traumi del garretto possono avere come conseguenza patologie della guaina tarsica(GT) settiche o asettiche2. Le tenovaginiti postraumatiche della GT sono solitamente monolateralie talora si accompagnano a fratture o frammentazioni della superficie mediale del sustentaculum ta-li (ST) e osteomieliti dello stesso2. Soggetti con osteomielite di ST e tenosinovite settica della GThanno prognosi decisamente infausta per l’attività agonistica3-5.Descrizione del caso. Due cavalli, una femmina avelignese di 8 anni (1) ed un castrone S.I. di 14anni (2) sono stati riferiti per zoppia insorta da più di 7 giorni, tumefazione del garretto destro e fi-stolizzazione purulenta mediale, sottoposti a terapia antimicrobica sistemica senza successo. Sui ra-diogrammi del tarso era presente un’area radiotrasparente a contorni irregolari sul margine planta-ro-mediale del ST e nel caso (2) frattura del malleolo mediale della tibia. L’esame ecografico ha evi-denziato ectasia della GT e nel caso (2) della sinoviale crurotarsica, una tenite del capo laterale deltendine flessore profondo delle falangi (TFPF) e una desmite inserzionale prossimale del legamen-to collaterale mediale; in questo soggetto il liquido sinoviale dell’articolazione crurotarsica presen-tava elevata concentrazione proteica (4 g/dl) e bassa conta leucocitaria (100 cell/µl- 95% cellule mo-nonucleate). La fistola appariva comunicante con la GT ma non con la cavità articolare. Per en-trambi i pazienti è stata emessa diagnosi di tenosinovite post-traumatica della GT del garretto de-stro e si è deciso di procedere con una terapia chirurgica in tenovaginoscopia.La tecnica chirurgica utilizzata1 prevede un accesso endoscopico distale sulla faccia mediale delgarretto a livello del ST (5 mm parallelamente e plantarmente ad esso) ed una seconda porta opera-tiva prossimale tra il capo laterale del TFPF e la sua superficie di scorrimento. All’interno della GTil liquido sinoviale si presentava abbondante e torbido ed in entrambi i casi erano presenti fibrilla-zioni del tendine e frammenti a carico del ST. Si è proceduto alla rimozione dei frammenti, al cu-rettage della superficie tendinea e delle lesioni ossee del ST, al lavaggio della GT con NaCl 0,9%sterile ed infine ad un curettage chirurgico della fistola. L’esame citologico del liquido sinoviale pre-levato in sede intraoperatoria ha rivelato in entrambi i casi elevata concentrazione proteica e quadrocitologico compatibile con flogosi settica; nel secondo caso l’esame colturale ha dato esito positivo(Staph. epidermidis). Alla chirurgia sono state associate: terapia antibiotica sistemica per 1 settima-na (ampicillina 20 mg/kg i.v. BID, gentamicina 8 mg/kg i.v. SID); terapia locoregionale con perfu-sioni e.v. di cefazolina (1 g) e amikacina (500 mg) 2 volte a settimana per 2 settimane; terapia an-tinfiammatoria sistemica con fenilbutazone (2,2 mg/kg i.v. SID) e bendaggio per 2 settimane. En-trambi i pazienti hanno mostrato permanenza di una moderata ectasia della GT e dell’articolazionecrurotarsica adiacente, con un lento e progressivo miglioramento della zoppia. I dati laboratoristicievidenziavano una riduzione della conta cellulare totale pur persistendo una concentrazione protei-ca al di sopra del range. I pazienti sono stati dimessi 2 settimane dopo l’intervento raccomandandoai proprietari riposo in piccolo paddock o box per 2 mesi. Dopo circa 6 mesi dall’intervento en-trambi sono ritornati al livello di esercizio precedente.Conclusioni. I traumi del garretto sono la causa principale di sinovite settica o asettica della GT edi fratture o osteomieliti del ST8. La presenza di lesioni, sepsi e rimodellamento del tessuto osseodel ST rendono il trattamento medico inefficace e la prognosi infausta quoad functionem4-3. Il suc-cesso del trattamento chirurgico è condizionato dal grado di danneggiamento del capo laterale delTFPF. Un’esposizione chirurgica a cielo aperto può essere utile ma essa necessita di cure postope-



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ratorie attente con elevati rischi di complicazioni della ferita chirurgica4-8. Il vantaggio della teno-vaginoscopia è di ridurre queste evenienze7. La tecnica endoscopica descritta ha permesso di esplo-rare la GT anche nelle porzioni più distali, differentemente da quanto sarebbe successo scegliendoun ingresso a livello del fondo cieco prossimale1, e di intervenire sul ST effettuando un debridementdel margine medio-plantare. Solo uno degli esami colturali condotti ha dato esito positivo (Staph.epidermidis), ma ciò non permette di escludere un processo settico a carico della GT nel soggettonegativo6. Nonostante il grave quadro clinico, la cronicità delle lesioni, la presenza di fibrillazionidel capo laterale del TFPF e il sospetto processo settico a carico della GT rendessero la prognosiper entrambi i soggetti infausta, la terapia descritta ha avuto successo ed entrambi i pazienti 6 me-si dopo la chirurgia sono tornati al livello di esercizio precedente.

Bibliografia1. Cauvin E.R.J et al. Equine Vet J. 1999; 31: 219-227.2. Dick KJ, Leitch M. Vet Clin North Am Equine Pract. 1995; 11: 235-248.3. Dik KJ, Merkens HW. Equine Vet J. 1987; 19: 307-313.4. Edwards GB. Equine Vet J. 1978; 10: 97-101.5. Jakovljevic S, Bibbs C, Yeats JJ. Equine Vet J. 1982; 14: 62-68.6. Honnas CM et al. J Am Vet Med Ass. 1991; 219: 341-345.7. Nixon AJ, Sams AE, Ducharme NG. Vet Surg.1993; 22: 501-507.8. Santschi et al. Equine Vet J. 1997; 29: 244-247.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott.ssa Paola Straticò - Università degli Studi di TeramoViale Crispi, 212 - 64100 Teramo (TE), ItaliaCell. 339 4476944 - E-mail: [email protected]



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MALATTIA DEL MOTONEURONE INFERIORE: DESCRIZIONE DI TRE CASI CLINICI

EMND: A DESCRIPTION OF THREE CASES

C. Tamantini, DVM, PhD1, C. Bazzica, DVM1, S. Nannarone, DVM, PhD1, I. Secco, DVM, PhD1, S. Pavone, DVM, PhD2, R. Gialletti, DVM1

1 Centro di Studio del Cavallo Sportivo-Dipartimento di Patologia Clinica e Diagnostica VeterinariaUniversità degli Studi di Perugia, Perugia, Italia

2 Sezione di Patologia e Igiene Veterinaria-Dipartimento di Scienze Biopatologiche ed Igiene delle Produzioni Animali e Alimentari-Università degli Studi di Perugia, Perugia, Italia

Area di interesse: Neurologia

Introduzione. La malattia del motoneurone inferiore è un disordine neurodegenerativo acquisitodei motoneuroni somatici inferiori del cavallo. Tale patologia neuromuscolare è stata per prima de-scritta nel 1990 in Nord America. La malattia, ad eziologia multifattoriale ma definita su base nu-trizionale per la mancanza cronica di agenti antiossidanti, è caratterizzata dalla degenerazione deimotoneuroni inferiori situati nelle corna ventrali del midollo spinale e nel tronco encefalico.La sintomatologia clinica è alquanto peculiare anche se clinicamente si può sovrapporre ad altre pa-tologie quali miopatie, sindromi da malassorbimento, forme croniche di grass sickness, botulismoecc. Scopo del lavoro è quello di descrivere tre casi di malattia del motoneurone inferiore nel ca-vallo, l’iter diagnostico seguito e la prognosi. Descrizione del caso. Sono stati presentati alla nostra attenzione due femmine rispettivamente dirazza sella italiana e quarter horse, di anni 10 e 8; ed un maschio hannover di 9 anni. Tutti e tre i ca-valli erano stati riferiti per dimagramento e comparsa improvvisa di tremori e fascicolazioni mu-scolari o decubito prolungato. Nell’anamnesi i cavalli risultavano essere di proprietà da più di treanni e uno sin dalla nascita, scuderizzati in box e paddock. Tutti i cavalli sono stati sottoposti adesame neurologico, esami di laboratorio incluso il dosaggio della vitamina E, esame del fondo del-l’occhio, prova di carico del glucosio e biopsia del muscolo sacrocaudalis dorsalis medialis o delnervo accessorio spinale. Reperti clinici osservati in tutti i casi erano una debolezza marcata so-prattutto del treno posteriore, atrofia muscolare in particolare di tricipiti, quadricipiti e glutei, fasci-colazioni muscolari, testa e collo tenuti bassi, postura con i quattro arti sotto di sé, frequente decu-bito, dimagramento nonostante la presenza di buon appetito. In un caso la debolezza era tale da pro-vocare cadute improvvise. Inoltre era presente anche sollevamento della coda in tutti e tre i cavalli.In nessuno dei casi era presente atassia, solo in un caso ipermetria dei posteriori con una andaturasimile all’arpeggio anche se lieve. Gli esami ematologici mostravano un aumento della aspartatotransaminasi, della lattato deidrogenasi e della creatinkinasi, nonché una grave ipovitaminosi E. Intutti e tre i casi la prova di carico del glucosio mostrava un parziale malassorbimento. L’esame delfondo dell’occhio non mostrava alterazioni. Sulla base dei segni clinici e dei reperti di laboratorioveniva formulato un sospetto diagnostico di malattia del motoneurone inferiore. Un cavallo è statosottoposto a biopsia della branca ventrale del nervo accessorio spinale in anestesia generale e due abiopsia del muscolo sacrocaudalis dorsalis medialis in stazione. Le indagini istopatologiche rinve-nute hanno evidenziato fenomeni di degenerazione assonale e nei campioni muscolari presenza difibre atrofiche angolari consistenti con atrofia muscolare di origine neurogena, reperti compatibilicon il sospetto clinico emesso. Tutti e tre i cavalli sono stati dimessi con una terapia a base di vita-mina E naturale fino a miglioramento delle condizioni cliniche. Un follow up telefonico ha per-messo di appurare il miglioramento della sintomatologia clinica in due casi a distanza di 3 e 6 me-si di terapia e nel terzo caso una stabilizzazione della sintomatologia clinica già presente. Conclusioni. La diagnosi ante mortem della malattia del motoneurone inferiore è basata sull’a-namnesi, i segni clinici, gli esami di laboratorio, l’elettromiografia, la biopsia del muscolo sacro-



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caudalis dorsalis medialis o del ramo ventrale del nervo accessorio spinale. La biopsia del nervo ac-cessorio spinale generalmente richiede l’anestesia generale ed è un metodo indaginoso oltre ad ave-re dei costi superiori per il proprietario; la biopsia muscolare invece è una procedura molto più sem-plice da effettuare e può essere eseguita in stazione minimizzando le spese e i rischi per l’animale;entrambe le procedure hanno una sensibilità e specificità prossima al 90% se valutate da un esper-to neuropatologo. La prognosi per i cavalli affetti da questa malattia generalmente non è buona, cir-ca un terzo degli animali presenta un peggioramento della sintomatologia tale da richiedere l’euta-nasia, un altro terzo stabilizza la sintomatologia, e il restante terzo migliora lievemente la condizio-ne clinica. L’integrazione con vitamina E è molto utile nel migliorare i sintomi ma non garantiscela guarigione completa.

BibliografiaDivers T.J., Cummings J.F., Mohammed H.O., De Lahunta A., Valentine B.A., Jackson C.A.: Equine motor neuron disease

in the Eastern United States-Clinical and laboratory findings. Proceedings of 1st International Workshop on GrassSickness, EMND and related disorders (1997) 9-11.

Divers T.J., De Lahunta A., Hintz H.F., Riis R.C., Jackson C.A., Mohammed H.O.: Equine Motor Neuron Disease. EquineVet. Educ. (2001) 13 (2) 63-67.

Divers T.J., Mohammed H.O., Hintz H.F., De Lahunta A.: Equine Motor Neuron Disease: A rewiew of clinical and experi-mental studies. 49th AAEP Proceedings, 2003.

Mayhew Joe I.G.: Large Animal Neurology. Wiley-Blackwell, 2nd ed. 2009, 363-366.McGorum B.C., Mayhew I.G., Amory H., Deprez P., Gillies L., Green K., Mair T.S., Nollet H., Wijnberg I.D., Hahn C.N:

Horses on pasture may be affected by equine motor neuron disease. Equine vet J. (2006) 38 (1) 47-51.

Indirizzo per la corrispondenza:Cristina Tamantini, DVM, PhD - Dipartimento di Patologia Diagnostica e Clinica VeterinariaSezione di Chirurgia e Radiodiagnostica, Università degli Studi di PerugiaVia San Costanzo, 4 - 06124 Perugia (PG), Italia Tel. 075 5857713 - E-mail: [email protected]



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DIAGNOSI IN RISONANZA MAGNETICA DI UN CASO DI “BONE BRUISE” DELLA SECONDA FALANGE IN UN PONY

M. Toniato, Med Vet1, U. Carrozzo, Med Vet2, D. Zani, Med Vet PhD3, M. Biggi, Med Vet3, R.M. Pirazzoli, Med Vet2

1Libero professionista, Budrio, Italia 2Libero professionista, Argenta, Italia

3Università degli Studi di Milano, Ospedale Veterinario Grandi Animali, Reparto di Radiologia, Lodi, Italia


Introduzione. L’esame di risonanza magnetica (RM) rappresenta attualmente la tecnica di diagno-stica per immagini elettiva per la valutazione di lesioni ossee riconducibili ad edema osseo. Lesio-ni quali osteonecrosi, microfratture e contusioni ossee (bone bruise) sono tutte caratterizzate da unincremento locale del contenuto fluido del tessuto osseo e di solito non sono correlate a particolarireperti radiografici. Tali lesioni all’esame RM appaiono caratterizzate da un’alterazione di segnaleparticolarmente evidente nelle sequenze STIR, istologicamente compatibile con diverse entità pa-tologiche quali osteonecrosi, infiammazione, microtrauma trabecolare (emorragia) e fibrosi. Nel ca-so presentato, l’esame RM si è rivelato cruciale per diagnosticare una grave lesione ossea a caricodella seconda falange di un arto anteriore non identificabile attraverso completa indagine radiologi-ca digitale della regione in esame. Descrizione del caso. Un Pony castrone di 14 anni veniva presentato alla visita a causa di una zop-pia dell’arto anteriore destro a carattere recidivante e progressivamente aggravatasi nell’arco di cir-ca tre mesi. L’esame clinico evidenziava una modesta ectasia dell’articolazione interfalangea pros-simale e una moderata reazione alla sonda da piede dell’arto anteriore destro. Il pony manifestavauna zoppia di grado 2/5 al trotto in linea retta, che rimaneva invariata al trotto in volta su terrenomorbido, ma si aggravava al trotto in volta su terreno duro a mano sinistra. Il test di flessione dellearticolazioni distali dell’arto appariva lievemente positivo, mentre la pressione del piede con pinzatrasversale portava a 4/5 i gradi di zoppia. L’anestesia diagnostica dei nn digitali palmari risultavanegativa, pur abolendo la reazione alla sonda trasversale del piede; l’anestesia intrarticolare interfa-langea distale era positiva dopo 25’ e il blocco anestetico dei nn digitali comuni era positivo. L’e-same radiografico in CR e l’esame ecografico della regione del dito non offrivano reperti di nota ela ferratura terapeutica associata ad impacchi della suola non risolvevano la zoppia che si aggravòacutamente. L’esame in RM è stato eseguito in anestesia generale con apparecchiatura a basso cam-po (0,18 T) nelle sequenze T1, T2 pesate e STIR secondo diversi piani di scansione. La sequenzaSTIR evidenziava iperintensità focale dell’osso trabecolare in corrispondenza della porzione sub-condrale della cavità glenoidea mediale della seconda falange con interruzione di segnale dell’ossosubcondrale stesso. Sono state osservate inoltre lesioni secondarie caratterizzate da alterazione delprofilo dorsale e del segnale del lobo laterale del tendine flessore profondo del dito nel tratto prein-serzionale e, infine, un lieve aumento di segnale della porzione prossimale del legamento collatera-le mediale dell’articolazione interfalangea distale. I reperti osservati all’esame RM hanno permes-so di diagnosticare una lesione compatibile con bone bruise dell’osso subcondrale esteso alla spon-giosa in corrispondenza della cavità glenoidea mediale della seconda falange associato ad una pro-babile frattura transcondrale, tendinite preinserzionale (lobo laterale) del tendine flessore profondodel dito e desmite subacuta del legamento collaterale mediale dell’articolazione interfalangea dista-le. Il pony veniva confinato in box per un periodo di 6 mesi associato a trattamento con Tiludrona-to e ad esercizio controllato. Conclusioni. La disponibilità dell’esame RM nella diagnosi delle patologie ortopediche dell’equi-no ha introdotto nuovi quadri patologici originariamente tratti dall’ortopedia umana e ha permesso



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di definire con precisione sede e tipologia di lesione, a beneficio di un più preciso protocollo tera-peutico e un più circostanziato giudizio prognostico. Il caso presentato offre numerose analogie conuna serie di 7 casi recentemente pubblicati, nei quali l’esame MRI identificava lesioni dell’osso mi-dollare in P2 associate ad alterazioni del segnale in T1 GRE, T2* GRE e STIR. Nel caso da noi esa-minato, alla preponderante lesione dell’osso trabecolare di P2 sottostante la cavità glenoidea me-diale si associano reperti suggestivi di una frattura dell’osso subcondrale, segni di artropatia dege-nerativa dell’articolazione interfalangea prossimale e lesioni del tendine flessore profondo del ditoe del legamento collaterale mediale dell’articolazione interfalangea distale. Va sottolineata l’ineffi-cacia dei mezzi diagnostici comunemente impiegati in ambito ippiatrico (radiologia computerizza-ta ed ecografia) che nel caso specifico non hanno permesso di evidenziare le lesioni responsabilidella zoppia. Riteniamo infine degni di commento i risultati delle anestesie semeiologiche, nei con-fronti delle quali il clinico deve mantenere un atteggiamento critico e valutarle nella consapevolez-za dei limiti che esse hanno. La prognosi per cavalli con lesioni di P2 quale quella descritta è estre-mamente variabile, da pieno recupero atletico a zoppia permanente. Casi di zoppia quali quello ri-portato, caratterizzato da assenza di reperti radiografici/ecografici proporzionati alla gravità del sin-tomo inducono il clinico a ricorrere a mezzi diagnostici di secondo livello (scintigrafia, RM, TC)per escludere o confermare quadri patologici altrimenti non rilevabili.

Bibliografia 1. Dyson SJ et al EVJ (2005) 37 (2) 113-121.2. Olive J et al EVE (2009) 21 (3) 116-123.3. Werpy N EVE (2009) 21 (3) 125-130.

Indirizzo per la corrispondenza:Dott. Matteo Toniato, Via Riccardina Mezzolara 83, 40054 Budrio (BO), ITALYCell 348 2238313 - E-mail [email protected]



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MINIMALLY INVASIVE DESMOTOMY OF THE INFERIOR CHECK LIGAMENT IN HORSES

A. Tnibar, DVM, PhD, Dipl. ECVS, M. Christophersen, DVM, C. Lindegaard, DVM, PhDDepartment of Large Animal Sciences (Surgery) - University of Copenhagen, Taastrup, Denmark

Topic: Surgery

Purpose of the work. To present our experience with ultrasound guided inferior check ligament(ICL) desmotomy and describe a modification of this procedure. This modification involves using anadapted surgical instrument to assist with a minimally invasive isolation and transection of the ICL. Materials and used methods. Thirty one foals younger than 1 year (range 4-8 months) underwentultrasound guided ICL desmotomy. Twenty eight foals were presented with stage 1 distal interpha-langeal joint flexural deformity (DIPJD) unresponsive to conservative treatment and 3 foals werepresented with stage 2 distal DIPJD unresponsive to conservative treatment. Four horses more than1 year (range 16-28 months) were presented with stage 2 DIPJD. Before surgery, corrective trim-ming was performed as necessary to gain a normal foot conformation and, in all cases a correctiveshoeing with toe extension (Hoof acrylics in foals and shoe with extended toe in older horses) wasapplied to the foot and was used for 2 to 3 months post-operatively. In foals and in intractable hors-es, this surgery was performed under general anaesthesia, in dorsal or lateral recumbency, de-pending on the surgeon’s preference. However, in most adult horses, this surgery can be completedon sedated standing horse with local anaesthesia. Recently the authors improved this technique byusing the Desjardins forceps in the last five cases.Outcomes. In all foals, minimally invasive ICL desmotomy corrected the limb deformity. This sur-gical procedure corrected the stage 2 DIPJD in 3 horses, and in one horse we had an acceptableimprovement of the deformity. This procedure was also successful in correcting and improvingflexural deformity of the distal interphalangeal joint in 95% of horses6. All cases but 4 in this se-ries showed excellent wound healing. Three foals developed moderate wound swelling and per-sistent minimal scarring. One horse developed wound swelling which resulted in moderate andpersisting wound scarring. The cosmetic results following the minimally invasive procedure areexcellent. In the last 5 cases (4 foals and 1 horse) and allowed an easier isolation and transec-tion of the ICL.Conclusions. Ultrasound guidance, being established as an excellent modality for tendon and lig-ament surgery in the horse, enjoys application to correct limb flexural deformities2-4,6,7. In our se-ries, minimally invasive ICL desmotomy was successful in correcting limb deformity in all the foals,including those with grade 2 DIPJD. In horses, 3 were corrected while one showed an acceptableimprovement of the deformity. This procedure was also successful in correcting and improving flex-ural deformity of the distal interphalangeal joint in 95% of horses6 compared with 69%1 and 88%5

of cases previously reported using the common incisional procedure. As in a previous report6, ourhigher success can also be attributed to the number of young horses and to the corrective shoeingapplied in all cases prior to surgery. Using ultrasound guidance to ensure that ICL was fully tran-sected at the end of the surgery may also explain this success. The cosmetic results following theminimally invasive procedure are much better than in the open incisional procedure. We believe itis important to place the corrective shoe prior to surgery in order to avoid working with the limbimmediately after surgery and adding unnecessary trauma to the surgical wound. The Desjardinforceps used in the last 4 cases of our series was a better assistance that the other forceps with theisolation and transection of the ICL. Ultrasound aided ICL desmotomy offers the advantages ofminimally invasive surgery which include: 1) limited incision size, 2) decreased incision morbidity,3) decreased post-operative scarring and better cosmetic appearance, 4) reduced surgical time and5) may be performed on a standing horse3,4,6.



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Bibliography1. McIlwraith, C.W. and Fessler, J.F. (1978) Evaluation of inferior check ligament desmotomy for treatment of acquired

flexor tendon contracture in the horse. J. Am. vet. med. Ass. 172, 293-298.2. Tnibar, A. (2006) Chirurgie orthopédique échoguidée chez le cheval: applications pratiques. Bull. Soc. vét. prat. de

France. 90, 39-50.3. Tnibar, A. (2007) Ultrasound-aided tendon and ligament surgery in the horse. Equine vet. Educ. 19, 435-443. 4. Tnibar, A., Christophersen M.T., Lindegaard C. (2009). Minimally invasive desmotomy of the accessory ligament of

the deep digital flexor tendon in horses. Equine vet. Educ.(Submitted for publication). 5. Wagner, P.C., Grant, B.D., Kaneps, A.J. et al. (1985) Long-term results of desmotomy of the accessory ligament of the

deep digital flexor tendon in horses. J. Am. vet. med. Ass. 187, 1351-1352.6. White, N.A. (1995) Ultrasound-guided transection of the accessory ligament of the deep digital flexor muscle in hors-

es. Vet. surg. 24, 373-378.7. White, N.A. (1998) Ultrasound-guided tendon and ligament surgery. In: Current techniques in equine surgery and

lameness, Eds.: N.A. White and J.N. Moore, W.B. Saunders, Philadelphia. pp 357-362.

Address for correspondence:Dr. Aziz Tnibar - University of Copenhagen-Department of Large Animal Sciences (Surgery), Højbakkegaard Allé 5, 2630 Taastrup, Denmark E-mail: [email protected]



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STANDING LAPAROSCOPIC OVARIECTOMY IN MARES WITH OVARIANABNORMALITIES: A RETROSPECTIVE STUDY (2002-2009)

M. Villani, Med Vet, PhD, MRCVS1, J. M. Ensink, DVM, PhD, Dipl ECVS1, T.A.E. Stout, Vet MB, PhD, Dipl ECAR, MRCVS1,

A.B.M. Rijkenhuizen, DVM, PhD, Dipl ECVS1,2

1Department of Equine Sciences, Utrecht University, Utrecht, the Netherlands2Department of Equine Sciences, Vienna University, Vienna, Austria

Topic: Surgery

Purpose of the work. Until now only few reports have been published on standing laparoscopic re-moval of abnormal ovaries (McCue 1998; McCue et al., 2003; Rambags et al., 2003). Therefore theaim of the present retrospective study was to determine the incidence of various types of pathologyin mares referred for ovarian abnormality, to examine whether ultrasonographic appearance helpsin the diagnosis of the underlying pathological condition, and to evaluate the incidence of compli-cations after treatment by standing laparoscopic ovariectomy. Materials and used methods. Review of the clinical records of 45 mares referred for ovarian ab-normality, and treated by standing laparoscopic ovariectomy during 2002-2009. Outcomes. Of the 45 mares referred with ovarian pathology, 85% (38/45) proved to have a unilat-eral granulosa-theca-cell tumour (GTCT), 7% (3/45) were diagnosed as suffering from a unilater-al haematoma, 4% (2/45) from a unilateral teratoma, while further individual mares were diag-nosed with, respectively, a unilateral mesothelioma and a GTCT accompanied by an adenoma onthe contra-lateral ovary. The mares referred with ovarian tumours were aged between 3 and 20years, had 0-5 foals, and were predominantly maiden or barren at presentation (barren, 60%; maid-en, 26%; foaling, 12%; pregnant, 2%). By contrast, the mares suffering from an ovarian haematomawere 7-9 years old, had between 1 and 4 foals and were not more likely to be barren (foaling, 33%;barren, 33%; pregnant, 33%). Clinical signs associated with a GTCT were: stallion-like behaviour (40%), nymphomania (13%),prolonged anoestrus (8%), colic (5%), colic accompanied by abdominal distension due to ascites(3%) or haemoperitoneum (3%), back pain (3%), and hind leg eczema (3%); 25% of GTCT suffer-ers had no outwardly visible symptoms. Clinical signs relating to an ovarian haematoma were col-ic accompanied by haemoperitoneum (33%) or none (67%); one of the 2 mares with a teratoma hadcolic at presentation while the other showed no symptoms. The mare with the mesothelioma pre-sented with a combination of colic and a haemoperitoneum (100%). Ultrasonographically GTCTs were 6-30 cm in diameter multicystic (71%) or solid ovarian masses(24%) with an obvious ‘capsule’, or a single large fluid filled cyst (5%). The teratomas appearedas single 14-18 cm diameter cyst-like structures containing a mixture of echogenic fluid and hyper-echogenic material. The adenoma and the haematomas were solid, heterogeneous ovarian masseswith a diameter of 5-7 cm and a thickened capsule. The single mesothelioma was a solid heteroge-neous ovarian mass of 35 cm in diameter, but lacking a clear capsule. During laparoscopy, 8% of the GTCTs were found to be adhered to the abutting uterine horn, and8% showed superficial necrosis. (Multiple) abdominal metastasis was recorded only in the marewith the mesothelioma, which was therefore euthanized. Standing laparoscopic surgery was com-pleted in a mean (± SD) of 115 ± 55min, and took longer in the case of tumours exceeding 15 cmin diameter, or when both ovaries had to be removed. During surgery, the mesovarium was anaes-thetized, cauterized, partially dissected, ligated and then fully dissected. Subsequently, a sterileplastic drape was introduced into the abdominal cavity via a small (8-15 cm) partial grid-iron flankincision, either manually or using laparoscopic instruments. The drape was used to surround andisolate the ovary from the rest of the abdominal cavity, and thence to remove the ovary via the flank



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incision by simply pulling. Large tumours were reduced in size by aspirating fluid and/or dissectingthem into smaller pieces intra-abdominally, within the plastic drape. In 4 cases, the tumour was re-moved by midline laparotomy following laparoscopic excision because the mare could no longer berestrained by standing sedation (n=1: 2%), the adhesions with the uterine horn were extensive (4%)or because the tumour was very large (4%). The intra-operative complications recorded were; ac-cidental puncture of the spleen (n=2: 4%) or ascending colon (2%), and bleeding from the ovarianstump requiring further cautery (9%). The post-operative complications encountered were diar-rhoea (9%), emphysema around the surgical wound (9%), wound infection requiring treatment(4%) and bleeding from the ovarian pedicle (2%). Most mares exhibited 1-2 days of mild abdomi-nal discomfort and moderate fever (38.5-39.5 °C). Conclusions. The majority of mares presented with ovarian pathology suffer from a GTCT, andcommonly exhibit stallion-like behaviour or disruption of the reproductive cycle. Most GTCTs havea multicystic appearance, whereas single cysts or solid masses are suggestive of other types ofpathology. Laparoscopic standing ovariectomy is a quick and safe surgical procedure for removingeven grossly enlarged ovaries, while the minimally invasive approach is conducive to a rapid andrelatively uncomplicated recovery.

BibliographyMcCue PM. Neoplasia of the female reproductive tract. Vet Clin North Am Equine Pract. 1998 Dec; 14(3):505-15.McCue PM, Roser JF, Munro CJ, Liu IK, Lasley BL. Granulosa cell tumors of the equine ovary. Vet Clin North Am Equine

Pract. 2006 Dec; 22(3):799-817.Rambags BP, Stout TA, Rijkenhuizen AB. Ovarian granulosa cell tumours adherent to other abdominal organs; surgical re-

moval from 2 warmblood mares. Equine Vet J. 2003 Sep; 35(6):627-32.

Address for correspondence:Dr. Marta Villani - Utrecht University, Dept. Equine Sciences, Yalelaan 114, 3584 CM Utrecht, Netherlands E-mail: [email protected]



POSTERS



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TRYPANOSOMIASIS DUE TO TRYPANOSOMA EVANSI IN DARESHURI HORSES OF SHIRAZ SUBURBS, FARS PROVINCE, IRAN

K. Badiei, DVM, PhD; M. Pourjafar, DVM, PhD; M. Ghane, DVM, Resident of Large Animal Internal Medicine

Department of Large Animal Internal Medicine, School of Veterinary Medicine, University of Shiraz, Shiraz, Iran

Topic: Alternative Medicine

Introduction. This study reports an outbreak of trypanosomiasis due to Trypanosoma evansi in horsesof the Shiraz suburbs, Fars Province, Shiraz, Iran. Trypanosoma evansi is the causative agent ofsurra. This trypanosome can infect most mammals, although horses and camels are the principalhosts and represent the most significant sources of economic loss. Description of the case. Four DareShuri horses (Iranian native breed) were referred to Shiraz Uni-versity Veterinary Teaching Hospital. The clinical signs observed were fever, anemia, conjunctivitis,edema of the legs and lower parts of the body, progressive weakness, loss of condition, and loss ofappetite. The diagnosis was confirmed by morphological and biometrical studies. A stained bloodsmear and a wet blood film prepared and Lymph node smear was evaluated. In addition 5 rats wereinoculated with fresh Lymph node aspirate from suspected cases in order to demonstrate try-panosomal infection. A long and slender flagellate, measuring 20 µm in length and 2 µm in widthwas observed under the light microscope. Although T. evansi and T. equiperdum are indistinguish-able by light microscopy, the clinical presentation of disease indicated that the Trypanosoma evansihas been involved. Conclusions. The area where the animals were kept was investigated carefully and it was shownthat many other horses were in a state of chronic infection. The outbreak was brought under con-trol following the administration of Naganol (Suramin, Bayer) to infected animals and animals con-sidered to be at risk of infection.

BibliographyBrun R, Hecker H, Lun ZR. 1998. Trypanosoma evansi and T. equiperdum: Distribution, biology, treatment and phyloge-

netic relationship (A review). Vet Parasitol, 79:95-107.Gilbert, RO. Dourine. 1998. Foreign Animal Diseases. Richmond, VA, United States Animal Health Association, pp. 182-188.Wernery U, Zachariah R, Mumford JA, Luckins T. 2001. Preliminary evaluation of diagnostic tests using horses experimen-

tally infected with Trypanosoma evansi. Vet J, 161:287-300.

Corresponding Address Prof. Mehrdad Pourjafar - Shiraz University Clinical Studies, School Of Veterinary Medicine, Shiraz University, P.O.Box: 71345-1731, Shiraz, Iran., Shiraz, Fars, 71345-1731, Iran Phone +98 711 6242666 - E-mail [email protected]



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CHERATECTOMIA LAMELLARE ED INNESTO DI MEMBRANAAMNIOTICA IN UN CASO DI CARCINOMA SQUAMOCELLULARE

CORNEO-CONGIUNTIVALE IN UN CAVALLO

L. Barachetti, DVM1, R. Stoppini, DVM2

1Università degli Studi di Milano, Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie, Milano, Italia2Libero professionista, Brescia, Italia

Area di interesse: Oftalmologia

Introduzione. Il presente caso clinico ha lo scopo di descrivere l’utilizzo di un innesto di membra-na amniotica equina, quale terapia aggiuntiva alla cheratectomia lamellare per il trattamento di uncarcinoma squamocellulare in un cavallo. L’obiettivo di tale approccio terapeutico fu di prevenire ilverificarsi di un simblefaro, secondario alla cruentazione di una superficie corneale ed una con-giuntivale adiacenti e di ridurre la cicatrice corneale. Descrizione del caso. Un cavallo, Paint, maschio castrone, di 8 anni ci fu presentato per la presen-za di una neoformazione corneo-congiuntivale laterale dell’occhio sinistro. La neoformazione eracomparsa circa 7 mesi prima a livello di congiuntiva ed era progressivamente aumentata di volumefino a coinvolgere il quarto laterale della cornea. Alla visita si presentava di aspetto proliferante, consuperficie irregolare, di colore rosato, non ulcerata e infiltrante lo stroma corneale. Dati la localiz-zazione e l’aspetto macroscopico della lesione la diagnosi differenziale principale considerata fu dicarcinoma squamocellulare. Si decise di eseguire una chirurgia citoriduttiva. Con il cavallo in ane-stesia generale e sotto microscopio operatorio, venne eseguita un’exeresi del carcinoma. A livellodi cornea il tumore venne escisso tramite cheratectomia lamellare medio-stromale seguita da crio-chirurgia sul letto corneale e sui margini congiuntivali. Venne poi eseguito un innesto di membranaamniotica che venne applicato al difetto corneale con l’epitelio verso l’alto e suturato con poliglac-tina 910 7-0. Vennero poi prescritti come terapia postoperatoria: tobramicina e ofloxacina collirioogni 4 ore, atropina 1% collirio ogni 8 ore, interferone alfa-2b topico 1000 UI/ml ogni 6 ore e flu-nixin meglumine 0,5 mg/kg ogni 24 ore intramuscolo. L’esame istoplatologico del tumore escissoconfermò la diagnosi di carcinoma squamocellulare. Nei follow-up eseguiti ogni 2 giorni nella pri-ma settimana, ogni settimana nel primo mese e dopo 4 e 7 mesi dalla chirurgia si osservò una gra-duale integrazione dell’amnios, con un’iniziale reazione fibrovascolare e successiva regressione del-l’opacità corneale. A livello di fornice congiuntivale laterale non si verificarono né la formazione disimblefaro né recidive locali. Conclusioni. Il carcinoma squamocellulare è il più frequente tra i tumori corneali nel cavallo. Es-so può originare da diversi tessuti quali limbo, congiuntiva, terza palpebra e orbita. I cavalli di raz-za Belga, Shire, Clydesdale, Appaloosa, Pinto e Paint sono considerati ad alto rischio. L’esposi-zione ai raggi ultravioletti è considerata una delle cause scatenanti la formazione della neoplasia,specialmente in aree di cute ipopigmentate.1,2 Circa il 30% dei carcinomi squamocellulari ocularisono corneolimbari. Benché l’invasione intraoculare sia rara, il tumore è localmente invasivo e re-cidivante. Per questo motivo è consigliato l’uso di terapie aggiuntive quali radiazioni ionizzanti,crioterapia, interferone, ipertermia a radiofrequenza o laser a diossido di carbonio.3-7 La coperturadel difetto corneale dopo cheratectomia è consigliata per ridurre il dolore e i rischi di simblefaro,collagenasi, sovrainfezioni batteriche e formazione di cicatrici esuberanti. Le procedure utilizzateper coprire il difetto possono essere: flap di congiuntiva bulbare o innesti di cornea, di sottomuco-sa intestinale suina (SIS) o di membrana amniotica (AM).1 Studi recenti hanno riportato con suc-cesso l’uso di innesti di AM per la ricostruzione di varie superfici oculari nell’uomo e più recen-temente nel cane e nel cavallo. La membrana amniotica ha infatti ottime proprietà antiangiogeni-che, antinfiammatorie e antifibrotiche oltre a contenere fattori di crescita.1 Nel nostro caso la che-ratectomia mediostromale e l’escissione chirurgica della congiuntiva affetta, associate alla criote-



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rapia ed all’innesto di membrana amniotica equina hanno dato ottimi risultati sia in termini esteti-ci (trasparenza corneale) e funzionali (assenza di simblefaro) sia nella prevenzione di recidive amedio termine.

Bibliografia1. Ollivier FJ, Kallberg ME, Plummer CE, et al. Amniotic membrane transplantation for corneal surface reconstruction

after excision of corneolimbal squamous cell carcinomas in nine horses. Vet Ophthalmol 2006; 9:404-413.2. Kafarnik C, Rawlings M, Dubielzig RR. Corneal stromal invasive squamous cell carcinoma: a retrospective morpho-

logical description in 10 horses. Vet Ophthalmol 2009; 12:6-12.3. Galor A, Karp CL, Chhabra S, et al. Topical Interferon Alpha 2b Eye Drops for Treatment of Ocular Surface Squa-

mous Neoplasia: A Dose Comparison Study. Br J Ophthalmol 2009.4. Bosch G, Klein WR. Superficial keratectomy and cryosurgery as therapy for limbal neoplasms in 13 horses. Vet Oph-

thalmol 2005; 8:241-246.5. Giuliano EA, MacDonald I, McCaw DL, et al. Photodynamic therapy for the treatment of periocular squamous cell

carcinoma in horses: a pilot study. Vet Ophthalmol 2008; 11 Suppl 1:27-34.6. Rayner SG, Van Zyl N. The use of mitomycin C as an adjunctive treatment for equine ocular squamous cell carcino-

ma. Aust Vet J 2006; 84:43-46.7. Plummer CE, Smith S, Andrew SE, et al. Combined keratectomy, strontium-90 irradiation and permanent bulbar con-

junctival grafts for corneolimbal squamous cell carcinomas in horses (1990-2002): 38 horses. Vet Ophthalmol 2007;10:37-42.

Indirizzo per la corrispondenza:Laura BarachettiUniversità degli Studi di Milano, Facoltà di Medicina Veterinaria, Sezione di Clinica ChirurgicaVia Ponzio 7, 20133 Milano, ItaliaCell. +39/347/9530911 - E-mail: [email protected]



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EQUINE RHINOPNEUMONITIS IN CROATIA 2009 INTRODUCED OR UNRECOGNIZED DISEASE

L. Barbic, Prof., PhD1, N. Turk, Prof., PhD1, Z. Milas, Prof., PhD1, V. Starešina, Prof., PhD1, V. Stevanovic, Asist., DVM1, K. Martinkovic, Asist., DVM1,

J. Madic, Prof., PhD1, T. Bedekovic, Asist., DVM2, I. Lojkic, Asist., PhD2, M. Lojkic, Prof., PhD2

1Department of Microbiology and Infectious Diseases with Clinic, Faculty of Veterinary Medicine, University of Zagreb, Zagreb, Croatia

2Department of Virology, Croatian Veterinary Institute, Zagreb, Croatia

Topic: Respiratory Diseases

Purpose of the work. Equine rhinopneumonitis cause significant economic losses for equine indus-tries worldwide as a result of abortion, respiratory illness, and neurological disease in all breeds ofhorses. The disease is caused by EHV-1 and EHV-4 which are endemic in horse populations world-wide. Seroprevalence studies that have been performed in different countries showed that preva-lence of equine rhinopneumonitis varies dependent on geographic location, breed and age of hors-es. A clinical signs varies regarding on infective virus type (EHV-1 or EHV-4) as a virus strain(POWELL, 2008, GOEHRING et al., 2006). In April 2009 outbreak of equine rhinopneumonitiswere reported for the first time in Croatia. Infection was confirmed in two horse farms in easternCroatia and reported clinical signs were abortion in 14 mares and neurological disease with lethalepilogue in 1 animal. In both stable EHV-1 were isolated. As equine rhinopneumonites is worldwidedistributed disease object of this study was to determinate is 2009 outbreak consequence of intro-duction of EHV-1 for the first time in Croatia or rhinopneumonitis is endemic but unrecognized dis-ease. For objectivity of results we investigate seroprevalence of equine rhinopneumonitis in two typ-ical horse populations in Croatia using archived sera collected in 2005. First population is isolat-ed free-range population of cold blood horses bred in Lonjsko polje area and second populationwas presented by horses from Hippodrome Zagreb as typical sport and leisure horses in Croatia.Those two populations haven’t had any contact between them and represent distinct epidemiologi-cal populations. Vaccination of equine rhinopneumonitis wasn’t performed in any tested animals. Materials and used methods. To determinate former prevalence of equine rhinopneumonitis in dif-ferent horse populations in Croatia we used 200 archive horse sera randomly selected from horsesera collected during 2005. We tested 100 sera from sport and leisure horse population and anoth-er 100 from free-range horse populations. Specific antibodies were determinate by CF assay withEHV-1 and EHV-4 as antigens (THOMSON et al., 1976). Specific antibodies titer = 1:80 were con-sidered as acute positive. As cross reactivity of antibodies against EHV-1 and EHV-4 in CF test wasdescribed in former study we consider higher titer between it as a final sera titer of EHV-1/4 spe-cific antibodies. Outcomes. Results showed that seroprevalence of equine rhinopneumonitis in 2005 were 79% infree-range horses and 87% in sport and leisure horses. In comparison of antibodies titer for EHV-1 and EHV-4 we seen that all tested sera from free-range population had higher titer with EHV-1as an antigen and on opposite all tested sera from sport and leisure horse population have higherCF titer using EHV-4 as an antigen. In free-range horses determinated titer were between 1:5 to1:80. In 3% of tested animals we found acute titer, and in rest of positive animals titer was between1:5 and 1:20. In sport and leisure horses determinated titer were between 1:5 to 1:320. Acute titerwas found in 8% of tested animals and it was in range from 1:80 to 1:320. Titer in other positiveanimals in this population was between 1:5 to 1:40. Conclusions. Results of this study undoubtedly confirmed that equine rhinopneumonitis is presentin horse in Croatia at least 4 years. Also as all tested animals weren’t vaccinated results showedthat disease was present with high seroprevalence in both epidemiologically distinct populations. In



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contrast to VN and IF antibody titres, CF antibodies declined markedly after five weeks, and hadcompletely disappeared after 10 weeks (VAN MANNEN et al., 2000). Variation in determinate titerfrom low to acute indicating that disease is endemic in both populations. In spite of described crossreactivity of CF test, results showed that all positive animals in free-range population have highertitre with EHV-1 and all positive animals from sport and leisure population with EHV-4 used asantigen. This result could implicate possible circulation of different virus type in these two popula-tions. In conclusion equine rhinopneumonitis is endemic disease in Croatia and it wasn’t introducedfor the first time in Croatia in April 2009. Outbreak with neurological clinical signs and abortionin large numbers of mares wasn’t reported before and could be consequence of introduction of somenew virus strain which will be further investigated.

Bibliography1. Powell, D. (2008): Equine herpesvirus abortions. Equine Dis. Q. 17 (3), 4-5.2. Goehring et al. (2006): Equine herpesvirus type 1-associated myeloencephalopathy in The Netherlands: a four-year

retrospective study (1999-2003). J. Vet. Intern. Med. 20, 601-607.3. Thomson et al. (1976): Serological detection of equid herpesvirus 1 infections of the respiratory tract. Equine Vet. J.,

8, 58-65.4. Van Mannen et al. (2000): Development and validation of a monoclonal antibody blocking ELISA for the detection of

antibodies against both equine herpesvirus type 1 (EHV1) and equine herpesvirus type 4 (EHV4). Vet. Microbiol. 71,37-51.

Corresponding Address:Prof.ssa Ljubo Barbic - Faculty of Veterinary Medicine, University of Zagreb Department of Microbiology and Infectious Diseases with Clinic, Heinzelova 55, 10000 Zagreb, CroatiaPhone + 385 1 2390 196 - E-mail [email protected]

TABLE 1Seroprevalence of equine rhinopneumonitis specific antibodies

in different horse population in Croatia 2005

EHV–1/4 HORSE POPULATIONspecific

antibodie titer Free range horses Spot and leisure horses

1:5 41 16

1:10 34 31

1:20 1 14

1:40 - 18

1:80 3 5

1:160 - 1

1:320 - 2

Total prevalence 79% 87%



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FATTORI DI RISCHIO ASSOCIATI ALLE INFEZIONI SINOVIALI DEL CAVALLO: STUDIO RETROSPETTIVO

F. Beccati, DVM1, R. Gialletti, DVM1, C. Tamantini, DVM, PhD1, I. Secco, DVM, PhD1, C. Bazzica, DVM1, V.M. Masi, DVM2, G. Coppola, DVM, PhD1, M. Pepe, DVM, PhD1

1Centro di Studio del Cavallo Sportivo, Dipartimento di Patologia, Diagnostica e Clinica Veterinaria, Università degli Studi di Perugia, Perugia, Italia

2Università degli Studi di Parma, Parma, Italia


Scopo del lavoro. Le artriti/tenosinoviti settiche rappresentano patologie molto gravi che devonoessere prontamente individuate e trattate adeguatamente, perché capaci di compromettere la carrie-ra sportiva e, nei casi più gravi, la vita dell’animale. Nei cavalli adulti le ferite e le forme iatrogenecostituiscono i meccanismi patogenetici più comuni d’instaurazione del processo settico1-2. Nume-rosi fattori influenzano la prognosi: l’età, il numero di strutture interessate, l’arto coinvolto, il tem-po intercorso tra sviluppo dei segni clinici e ricovero3. Lo scopo di questo studio è stato quello diverificare se il meccanismo d’instaurazione di un processo settico possa influenzare la sopravvi-venza dei soggetti colpiti da artrite/tenosinovite settica ed è stato ipotizzato dagli autori che i cavallicon concomitanti lesioni alle strutture tendinee e/o legamentose avessero una minor probabilità diritorno alle piene capacità atletiche. Materiali e metodi. È stato effettuato uno studio retrospettivo sui cavalli ricoverati, presso la no-stra struttura, per artrite/tenosinovite settica, di origine non ematogena, tra Gennaio 1997 e Giugno2008. I pazienti sono stati inclusi nello studio quando 3 o più dei seguenti criteri di inclusione sonostati riscontrati: zoppia, distensione della struttura sinoviale interessata, conta leucocitaria del liqui-do sinoviale > 30.000 WBC/µl, coltura batterica positiva, presenza in anamnesi di infiltrazione/chi-rurgia al massimo 7 giorni prima del ricovero, comunicazione accertata tra ferita e struttura sino-viale tramite inoculazione di soluzione fisiologica sterile e fuoriuscita del liquido dalla ferita. Le in-formazioni relative al paziente, estrapolate dalle cartelle cliniche, includevano: dati del segnala-mento, tempo intercorso tra l’instaurazione del processo settico e il ricovero (<1 giorno, 1-10 gior-ni, >10 giorni), modalità patogenetica di infezione [ferita lacera (FL), ferita penetrante (FP), iatro-gena (A)], struttura/e interessata/e, conta leucocitaria sinoviale al momento del ricovero, risultatidella coltura batterica, dettagli della terapia antibiotica sistemica e locale, tipo di trattamento pri-mario effettuato e presenza concomitante di lesioni tendinee e/o legamentose. L’andamento dellapatologia dopo le dimissioni è stato registrato tramite intervista telefonica richiedendo informazio-ni sullo stato di salute dell’animale, la presenza/assenza di zoppia, il ripristino delle capacità atleti-che. I dati sono stati analizzati tramite regressione logistica e i risultati ottenuti sono stati confron-tati con il test χ2 o di Fischer quando considerati appropriati.Risultati. Sono stati inclusi nello studio 74 cavalli, di età compresa tra i 3 mesi e i 20 anni di varierazze. 58 (78,4%) cavalli hanno sviluppato la patologia settica a seguito di trauma, 23 (39,6%) grup-po FP e 35 (60,4%) gruppo FL, e 16 (21,6%) per causa iatrogena (gruppo A). Lesioni concomitan-ti a tendini e/o legamenti sono state identificate in 21 (36,2%) cavalli. 70 (94,6%) pazienti sono sta-ti dimessi dall’ospedale e si è ottenuto il follow-up in 66; 3 (1 gruppo FP, 1 gruppo FL, 1 gruppo A)sono stati sottoposti a eutanasia dopo le dimissioni, 40 cavalli (60,6%) [20 gruppo FL, 7 con com-plicazioni, 12 gruppo FP, 4 con complicazioni, 8 gruppo A] sono tornati al loro precedente livellodi utilizzo, 7 (10,6%) [4 gruppo FL, 3 gruppo FP, 3 con complicazioni] invece in attività ma a un li-vello inferiore e 16/63 (24,4%) [5 gruppo FL tutte con complicazioni, 3 gruppo FP, 1 con compli-cazioni, 8 gruppo A] hanno mostrato zoppia persistente. Conclusioni. I risultati hanno evidenziato come l’eziologia del processo settico non sia correlatacon il recupero delle capacità atletiche, mentre lo è la durata dell’infezione sinoviale prima del ri-



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covero e del trattamento. È però importante sottolineare che, in questo studio, la distribuzione deisoggetti dei gruppi F e A non è stata omogenea all’interno delle categorie di durata dei segni clini-ci. La persistenza della zoppia è strettamente correlata con lesioni concomitanti dei tendini o dei le-gamenti, in accordo con studi precedenti che hanno preso in considerazione lesioni tendinee all’in-terno della sola guaina digitale4, e la presenza di pannus di fibrina nella sinoviale e/o di osteomieli-te5. Le sinoviti settiche rappresentano tutt’oggi patologie molto pericolose; le ferite sinoviali tratta-te entro le 24 ore hanno una miglior prognosi per il recupero atletico rispetto ai pazienti ricoveratiin tempi più lunghi. La persistenza della zoppia in cavalli con lesioni tendinee/legamentose sugge-risce che, nonostante la sepsi sinoviale sia sicuramente la prima cosa da trattare, l’interessamentodei tessuti molli non deve essere sottovalutato ma adeguatamente gestito non solo sotto il profilo te-rapeutico ma anche con tecniche riabilitative idonee e specifiche rispetto alla struttura interessata.

Bibliografia1. AL Bertone (1996) Infectious Arthritis. In: Joint Disease in the Horse. CW Mcllwraight e GW Trotter. WB Saunders,

397-409.2. KT Gibson et al. (1989) J Am Vet Med Assoc 194, 398-404.3. LJ Smith et al. (2006) Equine Vet J 38, 337-341.4. MM Wereszka et al. (2007) J Am Vet Med Assoc 230, 1195-1200. 5. IM Wright et al. (2003) Equine Vet J 35, 613-619.6. JW Folland et al. (1991) Equine Vet J 23, 422-425.

Indirizzo per corrispondenza:Dott.ssa Francesca Beccati - Università degli Studi di PerugiaVia San Costanzo, 4 - 06126 Perugia (PG), ItaliaTel. 075/5857713 - Cell. 392/7846919 - E-mail: [email protected]



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MINERALS IN HORSES: INFLUENCE OF BREED AND EXERCISE

D. Beghelli, DVM1, M. Malavolta, DC, PhD2, F. Piacenza, BSc, PhD2,A. Verini Supplizi, DVM, PhD, Prof.3, C. Renieri, DVM, PhD, Prof.1,

C. Cavallucci, DVM, PhD4, E. Mocchegiani, DM, PhD, Prof.2

1SARRF, Scuola di Alta Formazione e Ricerca di Scienze Ambientali e NaturaliUniversità di Camerino, Matelica (MC), Italy

2National Institute of Research and Care in the Aged, Ancona, Italy3Department of Pathology, Diagnostic and Veterinary Clinics, Faculty of Veterinary Medicine, Perugia, Italy

4Sport Horse Research Centre, Perugia, Italy

Topic: Food and nutrition

Purpose of the work. Horses, as part of a proper nutrition, need in their diet certain trace mineralslike selenium (Se), zinc (Zn), copper (Cu) and manganese (Mn) besides the major ones (calcium, phos-phorus, iron etc..). In fact, the above minerals are involved in numerous biochemical pathways: for ex-ample, they act as cofactors of antioxidant enzymes (Zn-, Cu- and Mn- dependent superoxide dismu-tase) to protect the body from free radicals (Leung, 1998) or Zn exerts a regulatory role and is involvedin the mineralization of cartilagine, whereas Se is required for muscle and immune system integrityand for the biosynthesis of gluthatione peroxidase (GpX) (Li Li, 1995). Finally serving these elementsas structural or catalytic components of enzymes and regulators of many physiologic functions, theyhave the potential to affect physical performance. In different species (rats, horses and humans) and/orin their different breeds (horses) the acute and chronic exercise has been shown to alter the metabo-lism of several trace elements (Li Li, 1995; Lewis et al., 1993; Stubley et al., 1983; Yur et al., 2008)but it is quite difficult to compare the results because the experimental conditions (species, breed ortype of exercise) or the laboratory procedures were always different. Aim of this study was to definesome trace mineral ranges in different horse breeds and to evaluate the effect of endurance exercise(90 km) on their blood serum levels in Arabian horses. Materials and used methods. 141 blood samples were collected (in the morning, at rest) from 7 dif-ferent horse breeds (male and female, middle aged): Lipizzano (n.25), TPR (n. 18; only female),Italian Trotter (n. 20), Thoroughbred (n.21), Maremmano (n.21), Arabian horses (n.20) and Catria(n.16). Whereas blood samples (n.34) were withdrawn from twelve endurance horses (Arabians)during a race (90 Km) according to the following scheme: at Km 0 (T1); Km 30 (T2) and Km 90(T3). One horse, after the first gate (30 Km), had to stop and then he was excluded from the trial.All these blood serum were used to determine the mineral profile (Zn, Mn, Cu, Fe, Se, Cu/Zn) byICP-MS using a procedure similar to a previously described one (Mestek et al., 1997). Data wereseparately processed (breeds or exercise) by statistical package (SPSS). Outcomes. The ranges and the mean values per breed of the investigated trace minerals have beendefined. Significantly differences were found for all these ranges between the breeds (P<0,0001).No significant differences were found for the trace mineral levels during exercise. Although it waspossible to observe some trends of the latter that resemble those described by some Authors (Yur etal., 2008): a progressive increase of Iron and copper levels during race as well as an increase ofCu/Zn ratio. Curiously the Maremmano breed showed four in five times the lowest values (for Fe,Cu, Zn and Mn). Conclusions. Trace elements such as Cu, Mn, Fe, Se and Zn play key roles in the protection of thebody from free oxygen radicals and act as cofactors in the regulation of the antioxidant enzymes(Cu/Zn SOD, Mn SOD and GpX). The balance between pro-oxidant and antioxidant elements al-lows the cells to preserve their normal physiologic function and these data may be used for the ad-equate nutrition and supplementation of racing or working horses and, in general, in the search foradequate mineral intakes among physically active individuals.



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This work has been supported by the Ministry of Agriculture and Forestry (MIPAF): “SELMOL”project.

BibliographyLewis R.D., Johnson M.A., Dengal D.R., Jones M.T., Norton K.I. 1993. The effect of maternal training on plasma Cu, Mg

and Zn in rats. Nutr. Res. 13, 7: 771-778.Li Li J. 1995. Oxidative stress during exercise: implication of antioxidant nutrients. Free Radical Biol. & Med. 18, 6:1079-

1085.Mestek O., Suchánek M., Vodiciková Z., Zemanová B., Zima T. 1997. Comparison of the suitability of various atomic spec-

troscopic techniques for the determination of selenium in human whole blood. J Anal Atom Spectrometry 12:85-87.Stubley D., Campbell C., Dant C., Blackmore B.J., Pierce A. 1983. Cu and Zn levels in blood of thoroughbreds in training

in the United Kingdom. Equine Vet J., 15, 3: 253-256.Yur F., Dede Semiha, Deger Y., Kilicalp D. 2008. Effects of Vitamin E on serum breed and major elements in horses. Biol.

Tbreed Elem. Res. 125:223-228.

Indirizzo per corrispondenza:Dott.ssa Daniela Beghelli - Università di Camerino, SARRF di Scienze Ambientali e NaturaliVia Circonvallazione, 93/95 - 62024 Matelica (MC), ItaliaTel. 0737 40 34 38 - E-mail: [email protected]



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PRIME ESPERIENZE SULL’UTILIZZODEL RADIO ELECTRIC ASYMMETRIC CONVEYER (REAC)

NELL’IPOFERTILITÀ DELLO STALLONE

G.M. Careddu, DMV1, F. Cubeddu, DMV1,2, I. Cossu, DMV, PhD3, R. Cherchi, DMV3,V. Fontani, DM, PhD4, A. Castagna, DM, PhD5, G. Collodel, DM, PhD6,7, S. Rinaldi, DM, PhD4,

E. Sanna Passino, DMV1

1Dipartimento di Patologia e Clinica Veterinaria - Sezione di Clinica ChirurgicaUniversità di Sassari, Sassari, Italia

2Scuola di Dottorato in Riproduzione, Produzione e Benessere AnimaleUniversità di Sassari, Sassari, Italia

3Agris - Dipartimento di Ricerca per l’Incremento Ippico, Ozieri, Italia4Istituto Rinaldi Fontani, Firenze, Italia

5Libero Professionista, Sassari, Italia6Dipartimento di Chirurgia - Sezione di Biologia - Università di Siena, Siena, Italia

7Centro Interdipartimentale per la Ricerca e la Terapia dell’infertilità Maschile, Siena, Italia


Scopo del lavoro. Col presente studio si valuta l’effetto che la REAC terapia può esercitare sul-l’ipofertilità nello stallone, attraverso la sua azione sullo stress. La REAC terapia è una nuova for-ma di trattamento nelle patologie da stress nell’uomo1, riconosciuta dal Registro di Prove ClinicheAustraliano (ACTR) e dalla Piattaforma dei Registri di Prove Cliniche Internazionali (ICTRP) del-l’Organizzazione Mondiale della Sanità. Similmente a quanto descritto nell’uomo, anche nellostallone situazioni ambientali sfavorevoli possono influenzare il comportamento sessuale e le ca-ratteristiche del seme2. Diversi studi nell’uomo hanno mostrato che l’applicazione di questa tera-pia porta ad una riduzione del livello di stress, e può essere utile nel miglioramento del processodi spermatogenesi3. Sulla base di quanto evidenziato nell’uomo, viene qui effettuata una valuta-zione degli spermiogrammi di un gruppo di stalloni che hanno ricevuto la REAC terapia durantela stagione riproduttiva.Materiali e metodi. Il protocollo terapeutico REAC (mod. CRM, prodotto da ASMED Srl Firenze,Italia) effettuato durante la stagione di monta 2009 su 11 stalloni (7 ipofertili; 4 nella norma) di raz-za ed età diverse, stabulati presso un unico Centro di Riproduzione, ha previsto inizialmente l’Otti-mizzazione Neuro Posturale (ONP), seguita dall’applicazione, a giorni alterni per 18 sedute, del-l’Attivazione Tissutale (AT). Il prelievo del seme, effettuato tre volte alla settimana da marzo a giu-gno 2009, veniva eseguito al manichino con vagina artificiale di tipo INRA modificato. Da luglio asettembre 2009 i prelievi sono stati effettuati una volta alla settimana. La concentrazione degli sper-matozoi veniva misurata mediante Densimeter 590° - Animal Reproduction System, mentre conanalizzatore di immagini Ceros s/n v 12.0l/Power - Hamilton-Thorne Research venivano valutatemotilità totale e motilità progressiva. Le medie e gli andamenti dei valori del periodo marzo-aprile-maggio-giugno 2009 sono stati confrontati mediante T-test con i corrispondenti degli stessi stallo-ni, raccolti nell’anno precedente (2008). Risultati. Il volume totale è diminuito da marzo a maggio da ml 26 a ml 22 nel 2008 e da ml 36 aml 29 nel 2009, per poi risalire in giugno 2008 a ml 26 ed a ml 31 nel 2009. La concentrazione ècalata da 248 a 199 milioni/ml da marzo a giugno 2008; è diminuita da 271 a 239 milioni/ml nellostesso periodo 2009, presentando però un rialzo nel mese di aprile 2009 con 274 milioni/ml. La mo-tilità totale è passata da 85% a 82% nel 2008 e da 78% a 69% nel 2009, presentando un andamen-to positivo in aprile e maggio con valori medi di 80%. La motilità progressiva è calata nel 2008 da42% a 40% mentre è aumentata da 39% a 47% nel 2009. Le differenze osservate non sono risulta-te significative dal punto di vista statistico. Gli spermiogrammi dei mesi di luglio, agosto e settem-



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bre 2009 successivi alla stagione di monta, hanno mostrato lievi incrementi, sebbene non significa-tivi, soprattutto nei cavalli ipofertili nella motilità progressiva, con valori di 43%, 45% e 44% ri-spettivamente. Pressoché invariate sono invece risultate le medie di volume totale, concentrazione emotilità totale. Conclusioni. La presenza di stress non è stata verificata ma è facilmente presumibile, almeno dimoderato grado, dati gli inevitabili obblighi a cui uno stallone è sottoposto in un Centro di Ripro-duzione. Nei valori dei parametri osservati, la grande variabilità ha levato la significatività statisti-ca alle differenze comunque presenti e vantaggiose sia nelle medie che soprattutto in qualche casospecifico. Questo vale in modo particolare per il volume totale da marzo a giugno 2009 e per la ten-denza favorevole della motilità progressiva da luglio a settembre 2009. Ulteriori studi su più ampiascala che consentano confronti per periodi di tempo più lunghi, supportati da analisi con più sofi-sticate come TEM e FISH, sono necessari per valutare quanto la REAC terapia possa portare bene-ficio nel miglioramento del processo di spermatogenesi e dello stress legato alle odierne condizio-ni di stabulazione del cavallo.

Bibliografia1. Rinaldi S, Fontani V, Aravagli L, Saragò G. - A new diagnostic and therapeutic approach to the General Adaptation

Syndrome. Int J Psychophysiol 2002; 45: 148-9.2. McKinnon A., Voss J. - Equine Reproduction - Lea & Febiger, 1993.3. Collodel G., Moretti E., Fontani V., Rinaldi S., Aravagli L., Saragò G., Capitani S., Anichini C. - Effect of emotional

stress on sperm quality. Indian J Med Res 128, September 2008, pp 254-261.

Indirizzo per corrispondenza:Prof. Giovanni Mario Careddu - Università degli Studi di Sassari, Dipartimento di Patologia e Clinica VeterinariaVia Vienna, 2 - 07100 Sassari (SS), ItaliaTel. 079/229470 - Cell. 3293808647 - E-mail: [email protected].



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UN CASO DI “IMPACT FRACTURE” DELLA PRIMA FALANGE IN UNA CAVALLA DA SALTO: DIAGNOSI RADIOGRAFICA

E IN RISONANZA MAGNETICA

U. Carrozzo, Med Vet2, M. Toniato, Med Vet1, D. Zani, Med Vet, PhD3, A. Guazzieri, Med Vet4, I. Maffei, Med Vet5

1Libero professionista, Budrio, Italia2Libero professionista, Argenta, Italia

3Università degli Studi di Milano-Ospedale Veterinario Grandi Animali-Reparto di Radiologia, Lodi, Italia4Libero professionista, Ozzano dell’Emilia, Italia

5Libero professionista, Bologna, Italia


Introduzione. Le fratture della falange prossimale sono state estesamente descritte in letteraturaequina e variano da fratture semplici di tipo parcellare, a fratture comminute. In letteratura, a nostraconoscenza, è stato descritto un solo caso di frattura da impatto della glena prossimale della I fa-lange riguardante un purosangue da corsa alla cui diagnosi definitiva si è giunti tramite esame isto-patologico post-mortem. Lo scopo di questo lavoro è quello di descrivere la diagnosi per mezzo del-l’esame radiografico e di risonanza magnetica (RM) di una lesione di tipo simil cistico formatasi alivello di osso subcondrale della porzione prossimale prima falange come esito di una frattura daimpatto secondario ad una distorsione dell’articolazione metacarpofalangea. Descrizione del caso. Una cavalla di 13 anni, sella italiana, adibita al salto ostacoli di media cate-goria, è stata riferita per zoppia intermittente dell’arto anteriore destro. Alla visita clinica la cavallapresentava una zoppia di grado 3/5 in linea retta sull’anteriore destro, che si aggravava in circolo sufondo morbido a mano destra. Il test di flessione del nodello anteriore destro e l’anestesia semeio-logica dell’articolazione metacarpofalangea risultavano decisamente positivi. L’esame radiograficocompleto della regione del nodello anteriore destro inizialmente risultava inconclusivo, mentre l’e-same ecografico individuava la presenza di un piccolo frammento osteocondrale sul margine pros-simale dorso-mediale di P1. L’artroscopia diagnostica non evidenziava lesioni di rilievo; è statoquindi rimosso il frammento osteocondrale ed effettuato un lavaggio articolare. Successivi control-li radiografici, effettuati ad intervalli di circa 30 giorni, hanno mostrato, in sequenza: entesiopatiadell’inserzione distale del legamento collaterale mediale dell’articolazione metacarpo-falangea,osteofitosi del margine prossimo-mediale della falange prossimale, formazione di una lesione simil-cistica nella porzione prossimale mediale della prima falange in sede subcondrale. L’esame RM ese-guito circa 8 mesi dopo il trauma ha evidenziato la presenza di una lesione simil-cistica associata arimodellamento ed edema osseo (“bone bruise”) subcondrale in corrispondenza della glena media-le della falange prossimale. La cartilagine articolare in corrispondenza della lesione descritta evien-ziava alterazioni di segnale suggestive di condromalacia. Il condilo metacarpale mediale presenta-va sclerosi sia dorsalmente che palmarmente: a ciò corrispondeva lieve iperintensità di segnale insequenze STIR. Sono state inoltre osservate alterazioni compatibili con desmite del legamento se-samoideo distale obliquo mediale: il legamento presentava un modesto aumento di volume e di se-gnale in tutte le sequenze; rimodellamento endo e periostale a livello dell’inserzione distale del le-gamento collaterale mediale dell’articolazione metacarpo-falangea. Sulla scorta dei reperti radio-grafici e dell’esame RM veniva emessa diagnosi di frattura da impatto della falange prossimale se-condaria a distorsione metacarpofalangea. Conclusioni. Le lesioni ossee di tipo cistico sono comunemente presenti nel cavallo come manife-stazione di osteocondrosi o di trauma dell’osso subcondrale. Nell’articolazione metacarpo/metatar-so falangea le lesioni di tipo cistico si osservano più frequentemente a carico dell’osso metacarpa-le/ metatarsale terzo. Nel presente caso è stato ipotizzato il trauma distorsivo acuto come evento pa-



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togenetico primario della frattura da impatto a seguito della comparsa, oltre che della lesione simil-cistica, di un corollario di altri segni radiografici, ecografici, artroscopici ed RM, che comunemen-te si collegano a tale tipo di trauma. Alcuni studi hanno dimostrato che ad alte velocità l’articola-zione metacarpofalangea nel cavallo è sottoposta ad un carico non uniforme. La superficie articola-re della falange prossimale subisce, in questi casi, un aumento di carico soprattutto nella porzionedel margine articolare dorsale e sulla parte centrale della cavità glenoidea mediale. Come eviden-ziato dalla RM, proprio in tale sede si è realizzata la lesione focale ai danni dell’osso subcondralee del sovrastante rivestimento cartilagineo. Quest’ultimo subisce, in tali aree, modificazioni biochi-miche, sia in seguito all’età sia in seguito al carico a cui viene sottoposta, che apportano un incre-mento del contenuto in glicosamminoglicani e della lysyl idrossilazione ed una diminuzione delcontenuto in acqua, DNA, collagene e idrossiprolina con risultante “rigidità” della cartilagine. Que-sto adattamento biochimico della cartilagine, che rappresenta uno dei meccanismi che prevengonola degenerazione della stessa nel sito di maggior carico, è responsabile di un aumentato trasferi-mento della forza peso al sottostante osso sub-condrale. Questo potenzialmente determina, in casodi un aumento intenso del carico, una frattura focale dell’osso subcondrale, analogamente a quantodescritto nel nostro caso, la cui sclerosi si ripercuote negativamente sulla cartilagine sovrastante consecondaria condromalacia.

BibliografiaRichardson DW (1996) in Equine Fracture Repair Ed Nixon AJ 117-129.Brama PA et al. EVJ (2000) 32, 19-26.Brama PA et al. EVJ (2001) 33, 26-32.Brommer H et al. EVJ (2003) 35, 697-701.Cullimore AM et al. EVE (2009) 21 (5) 247-251.

Indirizzo per corrispondenza:Dott. Matteo ToniatoVia Riccardina Mezzolara, 83 - 40054 Budrio (BO), ITALYCell. 348 2238313 - E-mail: [email protected]



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EFFECTS OF A NUTRACEUTICAL INTEGRATION IN YEARLING HORSES

C. Cavallucci, DVM, PhD1, D. Beghelli, DVM2, M. Malavolta, DC, PhD3,E. Mocchegiani, DM, PhD, Prof3, F. Piacenza, BSc, PhD3, P. Polidori, DAG, PhD, Prof2

1Sport Horse Research Centre, Perugia, Italy2SARRF, Scuola di Alta Formazione e Ricerca di Scienze Ambientali e Naturali

Università di Camerino, Matelica (MC), Italy3National Institute of Research and Care in the Aged, Ancona, Italy

Topic: Nutrition

Purpose of the work. Growing horses have a high degree of stress least placed on the skeletal systemand this enormous potential risk for skeletal injury demand a proper nutrition to optimize the full ge-netic potential of the animals (Cooper et al., 1999). In particular, deficiency of essential trace elementsuch as copper, zinc and manganese is though to induce developmental musculoskeletal abnormalities(Okumura et al., 1998) being them essential co-factors for numerous metabolic reactions important forthe growth and development of animals (Ott and Johnson, 2001). Just because the nutrient requirementsof yearling horses constantly shift in a such dynamic period of life, the nutritionists sometimes includein their diet a margin of safety for the “growing period”. Aim of this study was to investigate the pos-sible effects of an oral nutraceutical supplementation (Horse Care, Deavit®) on serum osteocalcin con-centration (marker of skeletal metabolism) (Pastoret et al., 2006; Cavallucci et al., 2007) and on someimportant serum trace minerals (Fe, Zn, Cu, Se and Mn) in yearling trotters.Materials and used methods. The research took place at the Carfagna Standardbred Trotting Hors-es Farm (Assisi, Italy). The nutrients requirements of yearling horses were estimated using the val-ues provided by NRC (sixth edition 2007) and the horses were individually feed with a concentrate(well balanced and integrated: 2000 g/die), oat (2000 g/head/die) and hay ad libitum. During thefirst five months of conditioning (from February to July 2009), n. 6 yearling trotters (2 years old)(G1) received an addition of 50 g/die of nutraceutical integration, whereas the age- and gendermatched control group (n. 6 horses: G2) received only the control diet. Radiographic controls weremade at the beginning and at the end of experimental trial focusing the attention to the distal radi-al physis. Blood samples were collected before the start of the trial (T 0) and then after one (T1),three (T2) and five months (T3). Blood serum was used to determine mineral profile (Zn, Mn, Cu,Fe, Se, Cu/Zn) and a biochemical marker of bone turnover (osteocalcin). Trace minerals were eval-uated by ICP-MS using a procedure similar to a previously described one (Mestek et al., 1997). Os-teocalcin levels was determined by an Elisa test (Metra Osteocalcin, Quidel Corporation). Datawere processed by multifactorial analysis of variance procedure, including interaction in the mod-el and using the integration and the period as factors (SPSS statistical package). Outcomes. Time of sampling induced some statistical differences on the mineral profile both in thetreated (G1) than in control groups (G2), respectively: Mn (P>0.003), Cu (P> 0.012), Zn (P<0.001), Se (P<0.015), Cu/Zn ratio (P< 0.0001) and osteocalcin levels (P<0,045) in G1 and Mn(P<0.0001), Zn (P< 0.001) and Cu/Zn ratio (P< 0.003) in G2. However, neither the mineral pro-file and the radiographic controls were significantly affected by the nutraceutical integration. How-ever, the decreasing trend of osteocalcin level, observed in the group receiving the nutraceutical in-tegration, deserve further investigation in a larger sample because it could be associated with a sta-bilization of the osteogenesis. Conclusions. Being in humans some evidence to suggest that nutraceuticals may be effective for theprevention of Osteoarthritis (Reginster et al., 2001), the interest for this sort of integration has de-veloped in preventive approaches to joint disease. However there are few controlled and blindedprospective studies evaluating the efficacy of nutraceuticals in the horse. The results of this studyencourage towards further investigation in a larger sample and for a longer period.



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Acknowledgments: the authors are grateful to Dr. Angelo Paris for his kind cooperation.

BibliographyCavallucci C., Beghelli D., Polidori P. 2008. Effect of a nutraceutical integration in mares and foals: preliminary results. Proc.

S.I.V.E. 355-356.Cooper F.R., Topliff D.R., Freeman D.W., Breazile J.E. and Geisert R.D. 1999. Effect of dietary cation-anion difference on

growth and serum osteocalcin levels in weaning horses. Anim. Sci. Res. Rep.Mestek O, Suchánek M, Vodiciková Z, Zemanová B, Zima T. 1997. Comparison of the suitability of various atomic spec-

troscopic techniques for the determination of selenium in human whole blood. J Anal Atom Spectrometry 12:85-87.Okumura M., Asano M., Tagami M., Tsukiyama K. and Fujinaga T. 1998. “Serum cooper and ceruloplasmin activity at the

early growing stage in foals”, Can. J. Vet. Res. 62, pp 122-126.Ott E.A. and Johnson E.L. 2006. “ Effect of trace mineral proteinates on growth and skeletal and hoof development in year-

ling horses”, Journal of equine veterinaty science, vol 21 pp 287-291, 2001.Pastoret V., Castanjen B., Hoyle N., Remy B., Gabriel A. 2006. Biochemical markers of bone metabolism in Ardennes hors-

es. Proc. S.I.V.E, 157-158.Reginster J, Deroisy R, Rovati L, et al. Long-term effects of glucosamine sulphate on osteoarthritis progression: a random-

ized, placebo-controlled clinical trial. Lancet 2001; 357: 251–256.

Corresponding Address:Dott.ssa Clarita Cavallucci - Via San Francesco, 7 - 06083 Bastia Umbra (PG), Italy Phone 075/8011071 - Mobile 339/1568422 - E-mail: [email protected]



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RETICULATED LEUKOTRICHIA IN DARESHURI HORSE

M. Ghane, DVM, Resident of Large Animal Internal Medicine, K. Badiei, DVM, PhD, M. pourjafar, DVM, PhD

School of Veterinary Medicine, Shiraz University, shiraz, Iran


Introduction. The DareShuri Horse is a horse that its appearance suggested oriental forebears andit is bred in southern Iran. It is a spirited riding horse, with Arabian characteristics. Reticulated leu-cotrichia is a pattern of white hairs in otherwise normal skin. Description of the case Six 4-15 years old horses were referred to Shiraz University Veterinary Teaching Hospital during2008-2009. Cross-hatched pattern of crusts over the back and rump of affected horses were seen.All the horses were in healthy condition and had the disorder for at least 2 years. No history of ad-ministration of drugs or any previous disease was noticed. There was no pain or pruritus associa-ted. There was no underlying leukoderma. Conclusions. Reticulated leukotrichia is a characteristic skin disease seen primarily in youngQuarter Horses, but it has been observed in young horses of other breeds such as Thoroughbredand Standardbreds. There was no any previous report of the disorder in DareShuri Horses in Iran.Our observation of the disorder was mainly in aged horses. The lesions are first observed as a dis-tinctive cross-hatched pattern of crusts over the back and rump of affected horse. The crusts fall outleaving a cross-hatched pattern of alopecia. When the hair regrows, it is white. This is believed tobe a hereditary disorder because of its increased incidence in Quarter horses. As there was no Hi-story of drug or vaccine administration or previous disease, it is probable that the disorder be a he-reditary condition in this breed. No specific pathogenesis has been suggested for the disorder.

Bibliography Danny WS and William HMJR. 2003. Equine Dermatology. Journal of Equine Veterinary Science. 23, 2: 65-67.Pilsworth RC and Knottenbelt DC. 2005. Skin Diseases Refresher. Equine Veterinary Education. 17, 4: 172-174.Pascoe RR, and Knottenbelt DC. 1999. Manual of Equine Dermatology. WB Saunders, Philadelphia, Pp: 127.

Corresponding Address:Prof. Mehrdad Pourjafar - Shiraz University Clinical Studies, School Of Veterinary Medicine, Shiraz University, P.O.Box: 71345-1731, Shiraz, Iran., Shiraz, Fars, 71345-1731, Iran Phone +98 711 6242666 - E-mail [email protected]



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FATTORI DI RISCHIO NELLA RABDOMIOLISI DA SFORZO:CORRELAZIONE TRA LIVELLI PLASMATICI DEI MARKER MUSCOLARI

E CICLO ESTRALE IN CAVALLE TROTTATRICI

M. Greco*, N. Cocchia¥, P. Santoro°, M.Greco§, A. Potena §, L. Auletta§, M.P. Pasolini§

*DVM, Libero Professionista - Caserta¥Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie - Sezione di Clinica Ostetrica;

Università di Napoli Federico II°Di. Lab. srl - Napoli

§Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie - Sezione di Chirurgia; Università di Napoli Federico II


Scopo del lavoro. La rabdomiolisi da sforzo è una miopatia dei cavalli atleti. I fattori di rischio chia-mati in causa sono stati discussi in numerosi studi1-6. La predisposizione delle femmine, ricono-sciuta da molti ed attribuita al temperamento nevrile delle puledre nel PSI6, costituisce tuttora un ar-gomento controverso. Scopo di questo studio è stato di verificare se le variazioni dei livelli siericidegli enzimi muscolari, in cavalle trottatrici sane e affette da rabdomiolisi, siano correlate al cicloestrale, valutato con esame transrettale, in base a valutazione dei livelli plasmatici di estrogeni e pro-gesterone ed al giudizio di proprietari e/o dagli allenatori. Sulla base del grado di accordo tra que-ste tre metodiche si è analizzata la capacità del personale addetto alla gestione del cavallo di indi-viduare il periodo del calore.Materiali e metodi. Venti cavalle, trottatrici, cicliche ed in attività agonistica sono state esaminatesettimanalmente per un mese. Le cavalle erano divise nei Gruppi: ER (Exertional Rhabdomyolysis),10 femmine affette da episodi ricorrenti di Rabdomiolisi; C (Controllo), 10 soggetti sani. Si anno-tavano in apposita scheda: il temperamento, il grado di manifestazione dell’estro, i dati segnaletici,anamnestici, manageriali ed agonistici della cavalla ed il giudizio del proprietario/allenatore sullostato del ciclo estrale. Sono stati raccolti due campioni ematici, a T0 e a T1 (4-6 ore dopo un lavo-ro di media intensità). Sono stati valutati: parametri ematochimici, markers muscolari, elettroliti,progesterone (Pg) ed Estradiolo 17β (E2). A T1 la cavalla era sottoposta a visita dell’apparato ri-produttore. I dati continui sono stati confrontati con test del t di Student; i dati categoriali con ta-vole di contingenza. Il grado di concordanza tra la valutazione dello stadio del ciclo estrale è statovalutato con il metodo k di Cohen. Mediante analisi bivariata, è stata valutata la correlazione tra imarker muscolari e i valori di Pg ed E2 (software JMP di SAS, P< 0,05).Risultati. I 2 gruppi sono risultati omogenei per dati segnaletici, anamnestici, agonistici, tempera-mento, grado di manifestazione dell’estro, parametri ematochimici ed ormonali basali. Differivanoper i valori basali medi di CK e AST (P<0,04 e P<0,005). L’accuratezza dei proprietari/allenatorinell’individuare la fase estrale risultava scarsa (k=0,2). Buono era l’accordo tra diagnosi clinica evalutazione ormonale dello stadio del ciclo (k=0,7). Il ΔCK e il ΔAST tra i due tempi di prelievonon era significativa. Il CK in totale non risultava significativamente correlato alle variazioni di en-trambi gli ormoni sessuali. La AST totale (P<0,008) e la AST del gruppo ER (P<0,05) aumentava-no con l’incremento di E2. Il ΔCK ed il ΔAST, complessivo e del gruppo ER, tendevano a cresce-re con l’incremento del Pg (P<0,03). L’LDH si riduceva significativamente all’aumentare di E2(P<0,03). Gli elettroliti sierici non erano correlati all’andamento degli ormoni sessuali. Discussione. La differenza significativa dei valori medi di CK e di AST tra i 2 gruppi, per altro omo-genei, conferma una condizione di predisposizione alla patologia nel Gruppo ER. Gli allenatori e iguidatori asseriscono che le femmine presentino performance ridotte durante la fase estrale7. Dal-l’analisi dei dati, emerge la scarsa affidabilità del personale nell’identificare il calore e di conse-guenza di correlare in modo significativo il rendimento all’estro. La variazione degli enzimi mu-



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scolari non era correlata alle fasi del ciclo estrale in un campione di cavalle PSI non miopatiche inallenamento8. Numerosi studi sono stati condotti in medicina umana sul ruolo degli estrogeni ri-spetto al danno muscolare ed alla modulazione della risposta infiammatoria allo stesso. Poco o nul-la si sa sull’influenza del progesterone sul metabolismo muscolare9-12. I risultati del nostro lavoroinducono a ritenere che tale ruolo debba essere approfondito e che possa essere non secondario aquello degli estrogeni. La contraddittorietà dei dati in nostro possesso evidenzia che i meccanismicon cui le variazioni dei livelli ormonali possono influenzare la ricorrenza di episodi clinici di rab-domiolisi ed in generale il rendimento agonistico sono probabilmente complessi. Per una migliorecomprensione dei fattori di rischio della miopatia, sarebbe opportuno considerare che il termine rab-domiolisi è tuttora impiegato per descrivere un complesso di patologie forse caratterizzate da defi-cit metabolici muscolari diversi che andrebbero di volta in volta identificati mediante un iter dia-gnostico completo.Parole chiave. Rabdomiolisi, Enzimi muscolari, Ciclo estrale, Trottatore.Key words. Exertional Rhabdomyolysis, Muscular Markers, estrus, Standardbred.

Bibliografia1. Valberg SJ et al. E.V.J., suppl.1999, 30:533-538.2. Cole F. et al. Vet.Rec. 2004, 155:625-630.3. McGowan C et al. Vet Rec. 2002; 23: 623-626.4. McGowan CM et al. Vet. Rec 2002, 150:535-537.5. MacLeay J.M. in Equine Internal Medicine, 2nd Edition. Saunders 2004 461-522.6. Greco M et al. Atti LXI SISVet, 2007.7. Jorgensen JS Ippologia 1996, 4:65-71.8. Frauenfelder HC et al. E.V.J. 1986, 18:371-4.9. De Crée C Sport Med 1998, 6:369-406.

10. Tiidus PM Current opinion clinical nutrition and metabolical care 2001 4: 509-513.11. Tiidus PM Exercise and Sport Sciences Review 2003 1:40-44.12. Tiidus PM British J.of Sports Med. 2005, 39:251-253.

Indirizzo per la corrispondenza:Maria Pia Pasolini - Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie - Sezione di Chirurgia dell’Università Fede-rico II di Napoli Via Delpino 1, 80137 NAPOLI Tel. 081 2536047 - Fax 081 2536021 - E-mail: [email protected]



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COMPARISON OF IN SITU MEASURED CHANGES IN PLASMA LACTATE-LEVELS DURING THE SAME MODERATE EXERCISE IN HIGH WATER

AQUATRAINER AND ON TREAD-MILL IN SHOW JUMPERS

Ákos Hevesi¤, DVM, PhD, Christian Stanek#, Dr. Med. Vet. Habil, full Professor,Sandor Veres¤, DVM, Dániel Üt¤, DVM, Marta Vasko¤, DVM, Janos Seregi®, DVM

Eva Keller*, MD, Eva Erdelyi*, Imre Repa*, MD, PhD, Habil, ProfessorTamas Lajos Hodossy+, MD, Balazs Liposits+, MD

¤ Hungarian Equine Rehabilitation and Health Service Ltd; *Kaposi Mor Teaching Hospital# Clinic of Orthopaedics in Ungulates, University of Veterinary Medicine Vienna

® University of Kaposvar, Pannon Equestrain Academy; + Roche Hungary Ltd.

Topic: Equine sport physiology

Introduction. Unfortunately just a few data is available in the literature regarding the changes ofthe in situ measured biochemical parameters in aquatrainer and even more less datas that comparedifferences between aqua and dry unit. A device was developed at our service in which we can stan-dardize the experimental conditions during aqua or dry exercise. The Aim of the study is to investi-gate how the underwater exercise modifies the changes of biochemical and physiological parame-ters of the horse. In this abstract we focus on plasma lactate-acid changes. Materials and Methods. The measurements were made on 4 normally trained show jumpers (age:8-10 year, weight: 550-600 kg) under pulse control during a 4 days long period (1st day: warmingup, 2-4th day: training, 1 week rest between the two 4 days period). The blood samples for plasmalactate determination were collected through a fixed central catheter from the jugular vein into NaFcontained tube during exercise based on the following protocol (T/0: 0 km/h; T/1(0-10.min.): 4.5km/h; T/2-T/5 (10-40.min.): 16.5 km/h; T/6 (40-44.min.): 4.5 km/h; T/7 (60.min): 0 km/h; T/8(120.min.): 0 km/h.). The samples were centrifuged in 5 minutes after collection and the plasma wasstored under 2-8 ºC for max. 8 h. before measured with lactate-kit. The reference value of the sta-ble was determined using 59 samples. Paird samples T-test was used to evaulate the significance ofbetween group differences. Data evaluation was made according to the following major point ofviews: 1. data analysis from 2-4th day all together between dry and aqua work; 2. day after day sum-marized data analysis from 2-4th day; 3. evaluation of the trends of value changes day after day in-dividually from 2-4th day.Outcomes. Reference average-value: 0.774 mmol/l, sd.: 0.229. 1. The average of the min. values ofall horses was significantly (p=0.017) lower in aqua than on dry device but no significant differ-ence presented between the average of the max. values (p=0.943). The average of all together lac-tate-level (T/1-T/5 samp., 2-4th day) was almost significantly lower in aqua than in dry work(p=0.058) but absolutely no significant difference regarded in the average of all together datas fromsamples T/6-T/8. 2. The day after day summarized data analysis did not show significant differencesconcerning the average of the min. and max. values and the average of samples T/1-T/5 on each dayfrom 2-4th day. The average of samples T/6-T/8 was significantly (p=0.033) higher in aqua on the2nd day. 3. Trends of max. values individually day after day: in water the max. values were higheron the 2-3rd day and lower on the 4th day than in dry work. Trends of day after day individuallysummrized values from T/1-T/5: in water these were lower on each day except two days (almostequal).Discussion. The differences concerning the individuals were much more obvious- even under mod-erate aerob exercise - than in summarized analysis. Especially when the evaluation of the samplingtimes were divided into two parts: 1. T/1-T/5 samples during exercise; 2. T/6-T/8 samples aftertraining. The day after day summarized values were lower in aqua during exercise but higher afterexercise than on treadmill. The appropriate temperature, the continous more intensive flexor-exten-



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sor exercise, the massage effect of water and increased capillary activity must be important factorsto decrease the lactate-level during aquatrainig. The exercise seems to be more intensive in aqua-trainer regarding the higher maximum post-tarining value but geting more balanced for the totalmuscular system finally. (4th day: lower maximum in aqua than on treadmill). Conclusion. Aquatraining gives more balanced intensive training with lower lactate-level thantreadmill during exercise but 15-20 min. walk in the machine is suggested after intensive training(especially on the first 2-3 days of training) to lower the post-training maximum value of lactate.

Address of the presenting author:Ákos Hevesi, Hungarian Equine Rehabilitation and Health Service LtdGuba Sandor street 40. Kaposvar-7400, HUFax: 00 36 82 410 542 - E-mail: [email protected]



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UTILIZZO DI CONCENTRATO PIASTRINICO AUTOLOGO (PRP) ECELLULE STAMINALI MESENCHIMALI AUTOLOGHE ISOLATE DA

SANGUE PERIFERICO (ePB-MSC) IN UN CASO DI OCD IN UN PULEDRO:RISULTATI CLINICI PRELIMINARI

I. Iacopetti, DVM1, A. Perazzi, DVM1, M. Patruno, PhD2, T. Martinello, PhD2, I. Bronzini, DVM2, R. Busetto, DVM1

1Dipartmento di Scienze Cliniche Veterinarie, Padova, Italia2Dipartmento di Scienze Sperimentali Veterinarie, Padova, Italia


Introduzione. Diverse patologie dell’apparato muscolo-scheletrico, quali lesioni tenodesmiche, le-sioni osteo-cartilaginee ed ossee ad oggi non prevedono protocolli terapeutici che garantiscano deitempi di guarigione brevi, né una qualità della ricostruzione tissutale ottimale. Le attuali strategieterapeutiche, indirizzate allo studio di una rigenerazione tissutale che possa garantire al meglio larestituito ad integrum, si basano sull’impiego di cellule staminali mesenchimali di origine autologae sull’utilizzo di fattori di crescita. La ricerca nel campo delle cellule staminali è stimolata dalla pro-spettiva di poterle utilizzare a scopo terapeutico. È stata dimostrata infatti la loro capacità di rige-nerare tessuti muscolo-scheletrici grazie alla potenzialità di differenziarsi in vitro in cellule diverseda quelle d’origine, ad esempio osteoblasti, condrociti, adipociti e mioblasti. Il ruolo svolto local-mente dai fattori di crescita è noto da tempo: essi sono implicati nelle attività mitotiche dei proces-si di riparazione dei tessuti e nel richiamo chemiotattico dei fibroblasti e delle altre cellule coinvol-te nell’osteogenesi. Tra le diverse fonti di fattori di crescita, il plasma arricchito di piastrine (PRP),sta suscitando sempre maggiore interesse come trattamento alternativo e/o complementare di lesio-ni dell’apparato muscolo-scheletrico.Nel caso clinico presentato viene descritto il trattamento di una grave lesione osteocondrale a cari-co dell’articolazione tibio astragalica in una puledra trottatrice di 10 mesi mediante l’applicazionedi cellule staminali, ottenute dal sangue periferico, e di PRP autologhi.Descrizione del caso. Si riporta il caso di una puledra trottatrice di 10 mesi portata in visita perchémanifestava tumefazione bilaterale dell’articolazione dei garretti ed una contemporanea zoppia albipede posteriore particolarmente grave a sinistra. Il posteriore sinistro veniva appoggiato in puntae l’andatura al trotto appariva particolarmente difficoltosa.Le indagini radiografiche eseguite dimostravano la presenza di una lesione osteocondrale bilateraleparticolarmente grave a sinistra e coinvolgente la quasi totalità del labbro mediale dell’astragalo. Vi-sta la gravità della lesione osteocondrale del garretto di sinistra e l’evidente algia provocata, è statodeciso di asportare chirurgicamente, per via artroscopica, i frammenti osteocondrali e di inserire,sull’osso sub condrale esposto, concentrato piastrinico autologo (PRP) e cellule staminali mesen-chimali adulte isolate da sangue periferico, utilizzando trombina bovina come bio-attivatore. Duemesi prima dell’intervento sono stati prelevati 100 ml di sangue dalla vena giugulare della puledraper l’ottenimento delle cellule staminali mesenchimali. In laboratorio sono state isolate, caratteriz-zate, amplificate e congelate le cellule staminali adulte. Contestualmente all’intervento con una ap-posita centrifuga (SmartPReP2 APC+, Harvest®) è stato preparato il PRP autologo. Il solo garrettosinistro è stato trattato chirurgicamente per via artroscopica: al termine dell’intervento sono state in-serite, mediante doppia siringa (duploject syringe), 20x10E6 cellule staminali mesenchimali dilui-te in 2 ml di soluzione fisiologica e 7 ml di PRP. La gelificazione del preparato è stata ottenuta me-diante l’ausilio di trombina bovina. Non è stato eseguito nessun trattamento antiinfiammatorio lo-cale o sistemico, ma solo una terapia antibiotica per via generale per 7 gg. dopo l’intervento. Conclusioni. Il sangue periferico si è dimostrato essere una fonte di cellule staminali più facilmen-te reperibile rispetto a quelle tradizionali quali midollo osseo e tessuto adiposo. L’ausilio di kit ste-



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rili per la preparazione di concentrato piastrinico autologo ha permesso l’utilizzo di questo emode-rivato in completa sicurezza anche in sedi in cui la sterilità deve essere particolarmente rispettata. Nel periodo post operatorio non si sono verificate complicazioni né effetti collaterali. È stato evi-denziato un netto miglioramento della sintomatologia clinica già nei primi giorni successivi all’in-tervento ad indicare l’iniziale l’effetto antinfiammatorio esercitato dal PRP, non essendo sottopostoinfatti il paziente ad alcun tipo di terapia antinfiammatoria od analgesica concomitanti. Le visite cli-niche di controllo hanno evidenziato un progressivo miglioramento della sintomatologia clinica conun decorso post operatorio molto soddisfacente considerando la gravità della lesione iniziale. Esa-mi radiografici di controllo sono stati eseguiti 2, 9 e 12 mesi dopo il trattamento chirurgico.

BibliografiaAldegheri R. et al. 2002 Ruolo dei fattori di crescita autologhi nella chirurgia ossea ricostruttiva. Dallari D. et al. 2006 In vivo study on the healing of bone defects treated with bone marrow stromal cells, platelet-rich plas-

ma, and freeze-dried bone allografts, alone and in combination. Rebelatto CK. et al. 2008 Dissimilar differentiation of mesenchymal stem cells from bone marrow, umbilical cord blood, and

adipose tissue. Kern S. et al. 2006 Comparative analysis of mesenchymal stem cells from bone marrow, umbilical cord blood, or adipose

tissue. Marx RE. 2004 Platlet-rich plasma: evidence to support its use. Wilke M.M. et al. 2007 Enhanced early chondrogenesis in articular defects following arthroscopic mesenchymal stem cell

implantation in an equine model.

Indirizzo per corrispondenza:Dott.ssa Anna Perazzi - Dipartimento di Scienze Cliniche Veterinarie - Università di PadovaVia Altinia, 134/1 - 30173 Favaro Veneto (VE), Italia Tel. 041/634476 - Cell. 347/0595803 - E-mail: [email protected]



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EXPANSION AND PURIFICATION OF PERIPHERAL BLOOD STEM CELLS:PHENOTYPIC CHARACTERIZATION

V. Martini, PhD1, G. Rotta, Doctor2, P. Sinibaldi Salimei, Professor1, F. Acri, Student1, P. Palomba, Student1, M. Polettini, Doctor3, M. Ranalli, Doctor1, A. Gambacurta, Professor1

1Università Tor Vergata, Roma, Italia2BD Biosciences, Milano, Italia

3Libero professionista, Roma, Italia

Topic: Emergency

Purpose of the work. Stem cells are widely used in the clinical veterinary practice to treat ten-donitis and orthopaedic injuries. In the majority of the cases, autologous stem cells are derived frombone marrow or even from adipose tissue of animals, following expensive and time consuming pro-tocols. These require in vitro propagation prior to transplantation, and are affected by stem cellsyield decreases with animal ageing. Up to now, there are no reports of equine/dog adipose tissuederived stem cells phenotype, although commercial availability of so-called adipose tissue derivedstem cell therapy is rapidly taking place. In this paper we present a new method to obtain stem cells directly from mammal’s peripheral bloodcells (Patent N. IT RM 2006A000498).Our protocol is highly innovative as it allows to generate autologous stem cells in a quick and easyway. In our hands cells undergo few or not replication cycles, thus limiting all risks related to in vit-ro propagation. Materials and used methods. SamplingSixty animals between horses and dogs, males and females of all ages were analyzed and bloodsamples (5-7 ml) were collected in tubes containing heparin or EDTA as anticoagulant. Under lam-inar flow blood was diluted in NH4Cl Lysing Buffer and washed with PBS to remove any red cellscontamination. The cells were then incubated for at least 72 hours (37°C) with MCSF and analyzedby flow cytometry to evaluate phenotype and absolute number.Cytofluorimetric analysis200 µL of each sample was incubated for 1hr at RT with saturating amounts of antibodies, washedonce and analyzed by flow cytometry or sorted by using BDFACSAria II Outcomes. We present the phenotypic analyses after in vitro expansion by FACSAriaII cytofluori-metric analysis on sorted stem cells. We identify at least three subpopulations -A typical hematopoietic stem cell population, positive for CD90, CD117 and CD34-A “mesenchymal stem cell like” population, showing CD105, CD50 expression-A “pluripotent-like stem cells” population, expressing the intracellular transcription factors Sox2,Oct3/4 and Nanog. These factors have been shown to be strongly involved in the maintenance of the undifferentiatedstate of pluripotent cells.In addition to the above mentioned markers we also found some positivity for CXCR4, CD29,CD49e and CD49b molecules Conclusions. Isolation of pluripotent stem cells from peripheral blood provides a non-invasivesource of stem cells with potentially superior cellular characteristic to other stem cells used in vet-erinary with regard to immune tolerance, proliferative potential and differentiation potency.The ability to obtain undifferentiated cells in less of 72 hours and the possibility to deliver them bothlocally and systemically should make them valuable candidates for a lot of therapy protocols.In vivo these cells display regenerative tissues capability and have the property to resolve somemetabolic pathologies. The signals required to re-differentiate these cells into specific cell types arestill unclear and under study. Nevertheless, the beneficial use of these stem cells is quite clear. In



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fact, in vivo they show the ability to regenerate different tissues including tendons, ligaments, bones,cartilages and muscles (skeletal and cardiac). Treatment with our cells leads to improvement oreven complete remission of many different pathologies. None of the animal that we successfullytreated in the past five years has shown any side effect such as phenomena of rejection, infection orthe onset of teratomas.Once administered in animals our cells differentiate “in vivo” (and not “in-vitro”, as in other meth-ods using growth factors and/or chemical stimuli). M-CSF derived stem cells acquire phenotype andfunction of macrophages, lymphocytes, epithelial, endothelial, neuronal and hepatocyte cells, ac-cording to the needs and pathologies of the treated animals.

BibliographySmith RK, Korda M, Blunn GW, et al. Isolation and implantation of autologous equine mesenchymal stem cells from bone

marrow into the superficial digital flexor tendon as a potential novel treatment Equine Vet J 2003; 35, 1: 99-102.D’Andrea F, De Francesco F, Ferraro G. A. et al. Large-Scale Production of Human Adipose Tissue from Stem Cells: A New

Tool for Regenerative Medicine and Tissue Banking Tissue Engineering Part C: Methods 2008; 14, 3: 233-242.Katz K. M, Katz RL, Khanna A, et al. Hepatocytes and epithelial cells of donor origin in recipients of peripheral-blood stem

cells. N Engl J Med. 2002; 346: 738-746.

Indirizzo per corrispondenza:Prof.ssa Alessandra GambacurtaUniverità di Roma Torre Vergata Dipartimento di Medicina Sperimentale e Scienze BiochimicheVia Montpellier, 1 - 00133 Roma (RM), Italia Tel. 0672596488 - E-mail: [email protected]



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UN CASO DI CARCINOMA SQUAMOCELLULARE GASTRICO CON METASTASI EPATICHE E POLMONARI

S. Molle, Dr1, P. de Iuliis, Dr2, V. Liguori, Dr2, G. Vichi, Dr2

1Libero Professionista, Roma, Italia2Settore di Anatomia Patologica, Unirelab, Pomezia (RM), Italia

Area di interesse: Medicina interna

Introduzione. Apportare un contributo alla casistica sulle patologie neoplastiche equine mediantela descrizione di un caso di carcinoma squamocellulare gastrico in un cavallo dal punto di vista cli-nico fino all’indagine necroscopica in seguito all’eutanasia del soggetto. Descrizione del caso. Castrone sauro di 17 anni di razza puro sangue russo. Il soggetto presentavainappetenza, decubito con lieve dolore addominale e rialzo febbrile di scarsa entità soprattutto nel-le ore serali. Nell’anamnesi passata il cavallo aveva manifestato una infezione da Babesia equi e B.caballi pertanto venivano effettuati gli esami sierologici che dimostravano una positività residua al-la B. caballi oltre ad una anemia moderata e alterazioni lievi dei valori epatici, pertanto il soggettoveniva trattato con Imidocarb con un lieve miglioramento del quadro clinico che durava circa 96 ore.Una seconda visita clinica più approfondita denotava che all’auscultazione del torace si rilevavanorumori respiratori riconducibili ad aderenze nel parenchima polmonare, alla palpazione transrettalesi rilevava splenomegalia senza ulteriori coinvolgimenti delle strutture addominali. L’ecografiatransaddominale non evidenziava modificazioni di rilievo, l’ecografia transtoracica evidenziava lie-vi alterazioni del parenchima polmonare in assenza di effusioni pertanto veniva ipotizzata la pre-senza di una polmonite batterica subclinica. Il soggetto veniva conseguentemente trattato con unaassociazione di Sulfadiazina e Trimetoprim per via orale e Gentamicina per via endovenosa oltre adAcetilcisteina per via orale ed una terapia di supporto con fluidi ed aminoacidi per via endovenosa.Il quadro clinico mostrava un ulteriore peggioramento con la comparsa di anoressia e scialorrea,permanevano lo stato febbrile e il decubito prolungato senza dolori addominali marcati. Veniva ef-fettuata una nuova terapia antibiotica con Cefquinome e contemporaneamente si procedeva ad unagastroscopia che evidenziava ulcere nel tratto distale dell’esofago e l’impossibilità di accedere allostomaco per via dell’occlusione del cardias. Il soggetto si presentava quindi cachettico, senza alcu-na remissione dell’anoressia, della scialorrea, del decubito e della febbre. Per evitare ulteriori sof-ferenze il soggetto veniva sottoposto ad eutanasia e riferito all’Unirelab. Sulla carcassa è stata ese-guita la necroscopia con esame macroscopico dei vari organi ed apparati e sono stati fatti prelievidi tessuto per indagine istologica. All’esame macroscopico la carcassa si presentava in grave stato cachettico. Venivano rilevate acarico del mesentere diverse formazioni di aspetto lardaceo e consistenza friabile di circa 1 cm didiametro. Lo stomaco presentava diffuse neoformazioni biancastre bottoniformi sulla superficiesierosa; a carico della mucosa di tipo esofageo e ghiandolare era presente una formazione solidabiancastra, di circa 12 cm di diametro, di aspetto a cavolfiore e consistenza fibrosa, occupantequasi interamente il lume ed ostruente parzialmente il cardias. Si rilevavano formazioni nodularia carico del diaframma, del fegato, del lobo polmonare sinistro, delle pleure e del pericardio. Isto-logicamente lo stomaco era interessato da carcinoma squamocellulare con presenza di cellule mo-stranti atipie nucleari di grado moderato, marcata anisocitosi, formazione di ampie perle corneecon focolai di micronecrosi centrale e deposizione di sali di calcio; la neoplasia interessava la sot-tomucosa mantenendo superficialmente le caratteristiche della mucosa esofagea e di quella ghian-dolare. Il polmone presentava pleuropolmonite purulenta di entità moderata-grave con evidenzadi diffuse metastasi carcinomatose; il fegato numerose metastasi ed emboli neoplastici, epatiteacuta, colestasi, steatosi diffusa. Le neoformazioni a carico del mesentere sono invece state iden-tificate come lipomi.



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Conclusioni. Il carcinoma gastrico nel cavallo è una neoplasia abbastanza frequente e spesso sot-todiagnosticata in virtù della scarsa specificità del quadro clinico e del rapido decorso. La metasta-tizzazione a vari organi, specialmente al fegato ed ai polmoni può risultare in un errato percorso dia-gnostico. La diagnosi definitiva spetta spesso e volentieri all’anatomopatologo benché una neopla-sia gastrica debba essere sospetta in tutti i casi di dimagramento cronico.

Bibliografia1. Gastric neoplasia in horses - Taylor SD, Haldorson GJ, Vaughan B, Posterla N - J Vet Intern Med 2009 Sept-Oct (5):

1097-102.2. Gastric adenocarcinoma in a horse with portal vein metastasis and thrombosis: a novel cause of hepatic encephalopa-

thy - Patton KM, Peek SF, Valentine BA - Vet Pathol 2006 Jul 43(4):565-9.3. Gastrointestinal stromal tumors in equids - Del Piero F,Summer BA,Cummings JF, Mandelli G,Blomme EA-Vet Pthol

2001 Nov 38(6):689-97.4. [Diagnosis of stomach carcinoma in the horse] - Deegen E, Venner M - Dtsch Tierartztl Wochenschrift 2000 Dec

107(12):472-6.5. [A shetland pony with a squamous cell carcinoma of the stomach]-Geelen SN,S van Oldruitenburg, Osterbann MN -

Tjdschrs Diergeneeskd 1999 Apr 124(8):248-50.6. Abdominal neoplasia(excluding urogenital tract) - East LM,Savage CJ - Vet Clin North Am Equine Pract 1998 Dec

14(3):475-93.7. Gastric squamous cell carcinoma in three horses - McKenzie EC, Mills JN, Bolton JR - Aust Vet J 1997 Jul

75(7):480-3.8. Squamous cell carcinoma of the equine stomach: a report of five cases - Olsen SN - Vet Rec 1992 Aug 22

131(8):170-3.

Indirizzo per corrispondenza:Dott.ssa Sybille Molle - Via Sulbiate, 47 - 00188 Roma (RM), ItaliaCell. 339 3036047 - E-mail: [email protected]



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THE INFLUENCE OF TRANSPORT STRESS ON SELECTED ENZYMATICANTIOXIDATIVE INDICES IN HORSES

A. Niedzwiedz, MVD, PhD1, J. Nicpon, MVD, PhD, Prof1, M. Zawadzki, MD2

1Department of Internal Diseases with Clinic for Horses Dogs and Cats, The Faculty of Veterinary Medicine,Wroclaw Univeristy of Environmental and Life Sciences, Wroclaw, Poland

2Department of Hygiene, Wroclaw Medical University, Wroclaw, Poland


Purpose of the work. The global literature on oxidative stress in horses contains a number of pub-lications concerning mainly the influence of physical exertion on the antioxidative potential in hors-es. There have been a number of studies investigating relationship between the oxidative stress invarious groups of horses and the method of their use or, in the case of sports horses, the sport dis-cipline in which they are used. Tests on laboratory animals indicates that oxidative stress may beinduced also by psychological stress. Those animals demonstrated increased production of free rad-icals as well as reduced antioxidative potential. However, in the available literature there is lack ofstudies concerning the influence of psychological stress in horses on the oxidative/antioxidative bal-ance. The aim of our study was to demonstrate the effect of transport-related stress on selected en-zymatic indices of the antioxidative system in equine blood. Materials and used methods. The research was carried out with the approval of the 2nd LocalEthics Committee on Animal Experimentation in Wroclaw (resolution No 39/2008). The tests in-volved 60 Polish cold-blooded horses earmarked for slaughter, aged 4-10, including 28 males and32 mares. The test material was the blood collected from one insertion of a needle into externaljugular vein using a disposable syringe and needle. Blood for tests was collected three times: I –directly before transport to the horse abattoir, II - directly after unloading the animals from thetransport semi-trailer, after a journey lasting approx. 8 hours, III - after a 24-hour rest at the sta-ble of the horse abattoir. Outcomes. The average activity of the selenium-dependent glutathione peroxidase (GPx-tBHPO)relative to time diminished during the three subsequent samplings (p< 0.05). The average acitivityof GPx- tBHPO was respectively: I-35.9 U/g, II-34.2 U/g, III-30.4 U/g. Observation of the averageactivity of the selenium-independent glutathione peroxidase (GPx-CHPO) did not reveal any sta-tistically significant differences (p = NS). The average acitivity of GPx-CHPO was respectively: I-79.2 U/g, II-70.7 U/g, III-68.2 U/g. Examination of changes in the average glutathione reductase (RG) activity during the three subse-quent samplings revealed a statistically significant drop in the enzyme activity (p< 0.05) relative totime. The average acitivity of RG was respectively: I-53.7U/g, II-39.9 U/g, III-49.8 U/g. Analysis of the changes in the average glutathione S-transferase (GST) activity during the three sub-sequent samplings did not reveal any statistically significant differences (p=NS). The average aci-tivity of GST was respectively: I-26.75 U/g, II-22.2 U/g, III-23.68 U/g. Conclusions. The measurement of the free radical exposure of the tested horses during transport al-so used enzymatic compounds acting as antioxidants. Among many known compounds of such char-acter, a frequent subject of research are the enzymes connected with selenium metabolism – GPx,GST, and GR. Among the above-mentioned enzymes special attention should be given to glutathioneperoxidase. Own research determined the activity of selenium-dependent and total glutathione per-oxidase whereas the result of the activity of selenium-independent peroxidase constitutes a differ-ence between the two above-mentioned peroxidases. Numerous studies on the enzyme behaviour inhorses during long-distance expeditions gave varied results. Some of the works demonstrated sta-tistically significant increase in the total activity of the glutathione peroxidase in horses subjectedto strenuous effort whereas other research demonstrated a drop in the activity of the said enzyme.



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Differences in the results can be explained by the influence of many factors on the GPx activity insports horses, such as the level of fitness obtained through training, physical condition, or environ-mental conditions.Own research demonstrated a statistically significant drop in the glutathione reductase activity, inparticular in the second sampling, which points to a strong glutathione metabolism disturbanceduring animal transport. An increase in the GR activity in the third sampling demonstrates the abil-ity to restore glutathione haemostasis in the organism of horses in a relatively short period of time.This demonstrates the importance of the glutathione reductase enzyme as an early sweeper of freeradicals in the case of their excessive synthesis. Similar observations were made in the case of stud-ies on laboratory animals subjected to strong stress or toxic substances. Analysis in own research of the glutathione S-transferase activity did not demonstrate a statistical-ly important difference in its level. This seems to be related to the small number of free radicalprocesses, covering polyunsaturated fatty acids contained in cell membranes.

Bibliography1. Leeuwenburgh C. et al.: Oxidative stress and antioxidants in exercise. Curr. Med. Chem. 2001, 8, 829-838.2. Marlin D.J. et al.: Changes in circulatory antioxidant status in horses during prolonged exercise. J. Nutr. 2002,132,

Suppl 2,1622-1627.3. Rosety-Rodriguez M. et al.: Eight week moderate excersise training program increases plasmatic total antioxidant sta-

tus in rats stressed by immobilization. Haema. 2006, 9, 124-126.4. Zidi S.M. et al.: Modulation of restraint stress induced oxidative changes in rats by antioxidant vitamins. J. Nutr.

Biochem. 2003, 14, 633-636.

Corresponding Address:Dr. Artur Niedzwiedz - Uniwersytet Przyrodniczy We Wroclawiu Katedra Chorob Wewnetrznych, Pl. Grunwaldzki 47, Wroclaw/53-025, Poland - E-mail: [email protected]



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A CASE REPORT OF AORTIC-ILIAC THROMBOSIS IN A DARESHURI HORSEFROM SHIRAZ, FARS-IRAN

M. Pourjafar, Associate Professor, K. Badiei, Associate Professor, J. Tajik, Assistant Professor,A.K. Tafti Professor, M. Ghane, Research assistant, A. Hadjimohammadi, Assistant Professor

School of Veterinary Medicine, Shiraz University, Shiraz, Iran


Introduction. Interruption of the blood supply to the large muscles of the hind limbs occurs tovarying degrees in the presence of an aortic-iliac thrombosis. Aortic-iliac thrombosis is an ac-quired disease of unknown pathogenesis primarily affecting the terminal portion of the aorta, andthe internal and external iliac arteries. The most common clinical sign is exercise intolerance man-ifested as hind limb lameness. In this report, we describe a rare occurring condition in aDareShuri horse with a history of chronic lameness in Shiraz-Fars Province, Iran, that was exam-ined because of recumbency. Description of the case. A nine years old recumbent DareShuri Stallion was referred to Shiraz Uni-versity Veterinary Teaching Hospital. Past history revealed complaint of chronic lameness and drag-ging of left hind leg and thereafter dragging of the right hind leg. Soon after the horse was unableto stand without assistance and then became recumbent. Rectal examination revealed dry, firm fe-ces in the rectum. A diagnosis of intestinal impaction was initially made and treatment was ineffec-tive. Further examination revealed an aortic obstruction in the area of the aortic bifurcation of theiliac vessels. Postmortem results supported the clinical findings. The clinical signs of aortic-iliacthrombosis are consistent with the lameness pattern and abdominal distress. At post mortem the le-sion was located at the abdominal aorta itself and extended to aortic quadrifurcation and in the dis-tal portions of the femoral and internal iliac arteries, and consisted of completely occlusive massof well-organized thrombus. Conclusions. The pathogenesis of the lesion is unresolved. Some authors suggest that Strongylusvulgaris larvae are the most common cause of the thrombus while other investigators have sug-gested that trauma and hormonal influences may be more important. This case study describes theclinical picture of a rare extensive thrombus in the abdominal aorta and its related vessels in aDareShuri stallion.

BibliographyTroy, D. (2002) Adams’ Lameness in Horses Lippincott Williams & Wilkins, Fifth Edition, Philadelphia, pp. 1044-1045. Maxie, MG, Physick-Sheard, PW. (1985) Aorto-iliac thrombosis in horses. Vet Pathol, 22:238-249.Azzie, MAJ. (1972) Clinical diagnosis of equine aortic-iliac thrombosis and its histopathology as compared with that of the

Strongyle aneurysm in: Proceedings. 18th AAEP, 43-50.

Corresponding Address:Prof. Mehrdad Pourjafar - Shiraz University Clinical Studies, School Of Veterinary Medicine, Shiraz University, P.O.Box: 71345-1731, Shiraz, Iran., 7134598 Shiraz, Fars, 71345-1731, Iran Phone +98 711 6242666 - Mobile +98 9132833077 - E-mail: [email protected]



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THE INFLUENCE OF AGE AND GENDER ON HAEMATOLOGICALPARAMETERS IN PROTECTED AND ENDENGERED

MURINSULANER HORSES

N. Prvanovic, PhD, DVM, assistant professor1, T. Kostelic, PhD, DVM, assistant professor2, B.Novak, DVM3, M. Cergolj, PhD, DVM, regular professor1, J. Grizelj, PhD, DVM, assistant pro-

fessor1, M. Samardžija, PhD, DVM, assistant professor1, N. Filipovic, PhD, DVM1, M. Lipar,DVM1, T. Dobranic, PhD, DVM, regular professor1

1Faculty of veterinary medicine, Zagreb, Croatia2Faculty of agriculture, Zagreb, Croatia3Private practitioner, Cakovec, Croatia


Purpose of the work. The aim of this study was to establish a set of referral values and the influ-ence of age and gender on haematology parameters in protected and endengered Murinsulanerhorses in Croatia. For that purpose we collected blood from complete healthy population of Murin-sulaner horses. So far haematology data wasn’t published for these animals. In order to protect thepopulation and to give them proper medical care we need to determine specific referral haematol-ogy values. Materials and used methods. Haematology values were established in 33 healthy Murinsulanerhorses, divided in four groups according to sex and age; males (n=5) and females (n=28) and hors-es younger and older than 7 years (n=14 versus n=19). All animals belong to private owners unit-ed in Croatian Organisation for breeding and protection of Murinsulaner horses, located aroundMurinsula region. Whole blood was collected into 8 ml EDTA vacutainer tubes and transported tothe haematology laboratory within 3 hours of collection. All samples were processed in the samedays of collection using IDEXX laserCyte automatic counter, validated for horses. The followingparameters were determined: haemoglobin concentration, red blood cell count (RBC), white bloodcell count (WBC), packed cell volume (PCV), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscularhameoglobin concentration (MCHC), mean corpuscular haemoglobin (MCH), platelet count anddifferencial white blood cell count (percentage of different WBC subtypes). Outcomes. The mean RBC, WBC, haemeoglobin concentration, PCV, MCV, MCH and MCHC arepresented in Table 1. All parameters are within published referral ranges for coldblooded horses.Statistically significant age related changes were observed only for WBC, especially for lympho-cytes. The decrease in WBC count in healthy aged horses may contribute to an age-associated de-crease in immunocompetency, and has already been described in other horse breeds (McFarlane etal., 2001., Cebulj-Kadunc et al., 2003, Satue et al., 2009).Horses haematology values are helpfull in diagnosis making of organic, infectious and several par-asitic deseases. Also, it can be used in recovery monitoring during desease treatment and to assessthe metabolic changes of a single animal or an entire herd. Haematology data for several particu-lar horse breeds as well as for horses in general, are available (Feldman et al., 2000). The normalranges of haematology parameters in healthy individual horse are quite narow, whereas normal val-ues for a breed fall into a broad range (Feldman et al., 2000). The horse is unique in comparisonto most other mammalian species, horse spleen is a very capacious organ, storing up to one thirdof the RBC, and this reserve can be mobilised by excersise, stress or exitement (Satue et al., 2009).The degree of exitement during blood withdraval depends on the temperament and the breed. Forexample, according to Satue et al., 2009; andalusian horses are less nervous than other warm-blooded breeds such as thoroughbreds and arabians, resulting in several lower hamatological ref-erence values for that breed, diagnosis making of slight anaemia is difficult in some cases, whendealing with that animals. In comparation to warmblooded horses, coldblooded breeds have lower



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RBC counts, haemoglobin and PCV values and blood volume. The erithrocite sedimentation ratio(ESR) is relatively higher in cold-blooded animals. The mean N:L ratio in a cold-blooded horse is1.7:1.0. compared to 1.0:1.0 in Thoroughbreds and Arabians. American miniature horses have alower RBC count as do donkey and ponies, and an N:L ratio opposite that of full-sized horses (37:59versus 53:39). In order to improve diagnostic accuracy normal hematology values need to be de-fined for each equine breed because majority of automatic haematology counters use referral val-ues obtained only on commercial horse breeds.

TABLE 1 Haematology referral values for Murinsulaner horses

Parameters Mean ± SD

RBC (106/mm3) 6,98 ± 1,08

Hb (g/l) 125 ± 18,26

PCV (%) 37,55 ± 5,50

MCV (fl) 54,51 ± 8,15

MCH (pg) 18,13 ± 2,72

MCHC (g/l) 330 ± 10,04

PLAT (g/l) 304,91 ± 50,29

WBC (x 109/l) 6,47 ± 1,91

NEUT (%) 62,10 ± 11,92

LYMPH (%) 36,15 ± 11,00

MONO (%) 0

EOS (%) 1,85 ± 2,01

BASO (%) 0

Conclusions. Referral values for Murinsulaner horses are within ranges like other coldbloodedbreeds. Influence of age and sex is difficult to interprete due to extremelly small population has left.There is only obvious age related decrease of WBC count probably due to age related decrease ofimmunocompetency. For more accurate and better results repeated blood sampling is needed, it isdoubtfull their welfare standards for those endengered and protected animals.

Bibliography1. Cebulj-Kadunc Nina, M. Kosec, and V. Cestnik (2003): The variations of white blood cell count in Lipizzan horses, J.

Vet. Med. A 50, 251-253.2. Feldman B. F., J. G. Zinkl, N. C. Jain (2000): Schalm’s Veterinary Haematology,Lippincott Williams&Wilkins, fifth

edition.3. McFarlane D., D. C. Sellon and S. A: Gibbs (2001.): Age related quantitative alterations in lymphocyte subsets and

immunoglobulin isotypes in healthy horses. Am J. Vet. Res. 62 1413-1417.4. Satue K., O. Blanco, A. Munoz., (2009): Age related differences in the hematological profile of Andalusian brood-

mares of Carthusian strain, Veterinarni Medicina, 54: 175-182.

Corresponding Address:Dott.Ssa Nikica Prvanovic - Clinic for obstetrics and reproduction, Faculty of veterinary medicine, Zagreb,Croatia, Heinzelova 55, 10000 Zagreb, Croatia - Phone 00385 12390323 - Mobile 00385 91 5094 071 - [email protected]



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NEUROLOGICAL SYNDROME POSSIBLY ASSOCIATED WITH EQUINEHERPESVIRUS-2 IN A SADDLEBRED BROODMARE

S. Pronost, MS1, E. Richard, DVM, PhD1, P. Tritz, DVM2,3, L. Legrand, MS1,P. Pitel, DVM, PhD1, G. Fortier, DVM, PhD1

1Frank Duncombe Laboratory, Caen, France2Private Practitioner, Remilly, France

3Réseau d’Épidémio Surveillance des Pathologies Équines, Mondeville, France

Topic: Neurology

Introduction. Equine herpesvirus-2 (EHV-2) is a γ-EHV with an endemic distribution within theequine population and recently associated with airway inflammation (Fortier et al. 2009). This virushas historically been associated with keratoconjunctivitis (Kershaw et al. 2001) as well as isolatedcases of naturally-occurring abortion (Leon et al. 2008). On the other hand, EHV-1 (a-EHV) is aneconomically important virus which infection may result in several clinical syndromes in horses,such as upper respiratory disease, neonatal infection, abortion and neurologic disease. Equine her-pes myeloencephalopathy (EHM) is a relatively uncommon manifestation of EHV-1 but may causedevastating losses during outbreaks (Friday et al. 2000; Henninger et al. 2007). A specific patho-type has recently been strongly associated with the neurological aspect of the disease. It is howev-er currently not known why some outbreaks are associated with a high incidence of neurologic dis-ease, whereas others are not, or why different horses show different clinical manifestations of EHV-1 infection during outbreaks. Isolated cases of EHM have also been reported in EHV-4 infections.To date, EHV-2 infection has never been described as a potential aetiological cause of EHM. Description of the case. An 11 year old broodmare, which foaled 6 weeks previously, lied in later-al decubitus during 24h prior to the clinical examination. The foal and the other horse of the samepasture did not show any clinical sign of disease. Resident horses were vaccinated against tetanusbut not again EHV-1/EHV-4. The mare was awake with good appetite and normal deglutition, nonystagmus was present. The heart rate was 60 bpm, and rectal temperature was 38.2 °C. Whenstanding suspended in a sling, a moderate paresia and ataxia of both hindlimbs was observed, aswell as a normal perineal reflex and a reduced tail tonus, leading to a score of 5/10 using the re-cently proposed scoring system (Goehring et al. 2009). Supporting medical treatment was per-formed, including DMSO and glucocorticoids. The mare was daily standing in a sling only duringa couple of hours. After 4 days, perineal reflex and tail tonus were absent; the mare was euthana-tized 3 days later. Ancillary exams being performed included X-rays of the vertebral spine as wellas blood, nasal swabs and cerebrospinal fluid (CSF) samples for laboratory analysis. A neutrophilic(88%) leucocytosis (17.4x109/L) and high levels of fibrinogen (5.71g/L) were present. The consen-sus PCR for herpesviruses (Leon et al. 2008) was positive on both nasal swabs and CSF, whereassequencing and specific PCRs revealed the absence of EHV-1/EHV-4 and the presence of EHV-2 oneach sample. Two serologic tests, using complement fixation against EHV-1 and collected 7 daysapart, both demonstrated negative results (titre < 1:10). Biochemical and cytological analysis of theCSF revealed no increased protein concentration but an increased albumin and immunoglobulin Gquotient, as well as an increased white blood cell count (40 cells /µL). Complementary serologicaland PCR assays allowed excluding the most common infectious causes of neurological troubles;necropsy of the mare could however not be performed. Conclusions. A traumatic cause of ataxia being excluded, this case is to our knowledge the first in-fectious neurologic syndrome being possibly associated with EHV-2, according to the detection ofthe virus in both nasal swab and CSF. The observed clinical signs in this report are compatible withEHM, even being not pathognomonic (Friday et al. 2000; Henninger et al. 2007). Infection seemedto involve the mare only since the other horses of the pasture did interestingly not exhibit clinical



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signs; no sampling was however made on these horses and an eventual subclinical disseminationof the virus remains probable. Considering EHV-1, previous studies also reported infection of sin-gle animal, even if large outbreaks of diseases seem to be more common. The pathogenesis of EHMhas been associated with a restricted endothelial cell infection of the central nervous system (CNS)vasculature followed by ischemic degeneration of nervous tissue (Smith et al. 2001). On the otherhand, the CNS and particularly the trigeminal ganglion were found to be a frequent latency site ofEHV-2 in asymptomatic horses (Rizvi et al. 1997). Even if EHV-2 seems to be the most probable ae-tiological agent of encephalomyelitis in this report, no histopathological evaluation of the CNS wasavailable and the underlying mechanisms leading to the neurological signs in association withEHV-2 detection remain currently unknown.

BibliographyFortier G., Van Erck E., Fortier C., Richard E., Pottier D., Pronost S., Miszczak F., Thiry E., Lekeux P. 2009. Vet Mic, in

press.Friday P, Scarratt W, Elvinger F, Timoney P, Bonda A. 2000. J Vet Intern Med 14, 197-201.Kershaw O, Von O, Glitz F, Deegen E, Ludwig H, Borchers K. 2001. Virus Res 80, 93-99.Leon A, Fortier G, Fortier C, Freymuth F, Tapprest J, Leclercq R, Pronost S. 2008. Vet Mic 126, 20-29.Goehring L, van Maanen C, Berendsen M, Cullinane A, de Groot R, Rottier P, Wesselingh J, Sloet M. 2009. Vet J, in press.Henninger R, Reed S, Saville W, Allen G, Hass G, Kohn C, Sofaly C. 2007. J Vet Intern Med 21, 157-65.Rizvi S, Slater J, Wolfinger U, Borchers K, Field H, Slade A. 1997. J Gen Virol 78, 1115-1118.Smith D, Hamblin A, Edington N, 2001. Equine Vet J 33, 138-142.

Corresponding Address:Dr. Eric Richard - Frank Duncombe Laboratory / Research & Developpement1 Route De Rosel, 14053 Caen Cedex4, France - Phone 0033 231 47 19 19 E-mail: [email protected]



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PRIME ESPERIENZE CLINICHE SULL’UTILIZZO DEL RADIO ELECTRIC ASYMMETRIC CONVEYER (REAC)

IN MEDICINA EQUINA

E. Sanna Passino, DMV1, G.M. Careddu, DMV1, F. Cubeddu, DMV1,2, F. Secci, DMV1,3,G. Rossi, DMV1,3, N. Columbano, DMV, PhD1, G. Masala, DMV1, M.L. Manunta, DMV, PhD1,

V. Fontani, DM, PhD4, A. Castagna, DM, PhD5, S. Rinaldi, DM, PhD4

1Dipartimento di Patologia e Clinica Veterinaria - Sezione di Clinica Chirurgica - Università degli Studi di Sassari, Sassari, Italia

2Scuola di dottorato in Riproduzione, Produzione e Benessere Animale - Università degli Studi di Sassari, Sassari, Italia

3Dottorato di ricerca in Anestesia e Chirurgia Comparata - Università degli Studi di Messina, Messina, Italia

4Istituto Rinaldi Fontani, Firenze, Italia5Libero Professionista, Sassari, Italia

Area di interesse: Neurologia

Scopo del lavoro. È quello di presentare i primi risultati dell’applicazione di due protocolli di trat-tamento con REAC (Radio Electric Asymmetric Conveyer), in alcune patologie traumatiche e de-generative del cavallo. Il REAC è una apparecchiatura terapeutica usata in medicina umana che, purrientrando nell’ampio campo delle apparecchiature elettromedicali, presenta caratteristiche tecno-logicamente innovative, finalizzate al miglioramento delle funzioni neuro psico biologiche di feed-back alle condizioni ambientali. Tra queste funzioni annoveriamo anche quelle “riparative” dei tes-suti. Sulla scorta dei risultati acclarati in medicina umana si è voluta testare l’efficacia del REAC inambito veterinario ove la componente placebo è considerata minima o assente. Materiali e metodi. 5 cavalli di razza, sesso ed età differenti, sono stati sottoposti a un ciclo di trat-tamenti con REAC. Tre soggetti presentavano patologie a carico dei tessuti duri: uno la frattura daavulsione del condilo femorale mediale con lesione del legamento collaterale, l’altro una OCD bi-laterale della grassella, il terzo una deviazione angolare dell’arto anteriore. Due soggetti, invece,presentavano lesioni dei tessuti molli: il primo un linfedema dell’arto posteriore, il secondo una so-luzione di continuo traumatica penetrante dello scroto. Dei quattro protocolli fondamentali relativiai trattamenti con REAC abbiamo utilizzato inizialmente l’Ottimizzazione Neuro Posturale (ONP),finalizzata all’avvio dei corretti meccanismi neuro psico biologici di feedback alle condizioni am-bientali ed al miglioramento delle strategie motorie e posturali. Il trattamento, assolutamente indo-lore e non invasivo, consiste di un’unica seduta della durata di 500ms che si esegue poggiando ilprobe dell’apparecchiatura su uno specifico punto dell’orecchio. In seguito, come secondo proto-collo, abbiamo impiegato l’Attivazione Tissutale (AT) che prevede l’applicazione, tramite un multiprobe, di uno speciale elettrodo laminare posizionato in zona retro cervicale o direttamente sulla zo-na da trattare. Si somministra per 18 sedute a giorni alterni. Anche questo trattamento è assoluta-mente indolore e non invasivo. L’apparecchiatura REAC utilizzata in questo studio è il mod. CRM,prodotto da ASMED Srl Firenze, Italia. Risultati. In tutti i casi trattati si sono osservati segnali di una positiva e globale ottimizzazione dellefunzioni nervose. In particolare si osserva una sostanziale correzione dell’assetto posturale, inclusa lacinematica, l’orientamento nello spazio e la coordinazione neuromotoria. Nei casi caratterizzati da tu-mefazioni o soluzioni di continuo il processo di guarigione è stato rapido ed ottimale. Gli effetti ge-nerali possono essere schematicamente riassunti in una migliore coordinazione motoria, in un miglio-ramento dell’efficienza prestativa, in una maggiore resistenza allo stress, in un miglioramento dellafunzione immunitaria, nella velocizzazione dei processi riparativi. La terapia è indolore, non è invasi-va, è di facile e rapida applicazione, non presenta controindicazioni ed è priva di effetti collaterali.



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Conclusioni. I risultati di questo lavoro, seppur preliminari, ci consentono di affermare che l’im-piego del REAC amplia le nostre opportunità terapeutiche. Infatti, sino ad oggi, non disponevamodi un dispositivo finalizzato a risolvere le componenti adattative disfunzionali che spesso impedi-scono il successo di altri approcci terapeutici. Quasi tutte le terapie abitualmente in uso agisconocon l’intento di sopprimere i sintomi della malattia, lavorando sugli effetti finali della catena adat-tativa. I risultati, seppur brillanti sul momento, possono essere deludenti nel corso del tempo, per-ché i problemi causali possono permanere. I trattamenti con REAC, essendo specificamente indi-rizzati al miglioramento delle funzioni neuro psico biologiche di feedback alle condizioni ambien-tali, possono essere utili sia nella prevenzione che nella riduzione delle componenti adattative dis-funzionali alla base dei diversi quadri patologici.

Bibliografia1. Rinaldi S. et al. - A new diagnostic and therapeutic approach to the General Adaptation Syndrome. Int J Psychophys-

iol 2002; 45: 148-9.2. Rinaldi S. et al. - Dysmetria and biological stress therapy, in ICMART 2009, p.60, Thessaloniki, Greece.3 Rinaldi S. et al. - Neuro-Psycho-Physical Optimization with Conveyor of Modulating Radiance. New Strategy to Fa-

cilitate Neuro-Psycho-Physical Rehabilitation,1th Int Congr Neuroscience Maison de l’UNESCO, Paris, 2005.4. Rinaldi S. et al. - A Randomised controlled trial to evaluate the effectiveness of Neuro Psycho Physical Optimization

(NPPO) with Conveyer of Modulating Radiance (CMR Therapy) in reducing the subjective perception of stress andstress-related pains and physical problems”, Australian New Zealand Clinical Trials Register, 2001.

Indirizzo per corrispondenza:Prof. Dott. Eraldo Sanna Passino - Dipartimento di Patologia e Clinica VeterinariaSezione di Clinica Chirurgica, Via Vienna, 2, 07100 Sassari (SS), ItaliaTel. +39 079 229471 - E-mail: [email protected]



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CHANGES OF BUN AND CREATININE PLASMA LEVELS CONCENTRATIONSDURING PREGNANCY IN SPANISH BROODMARES

K. Satué, DMV, PhD1, P. Montesinos, DMV, Private Practitioner2

1Department of Animal Medicine and Surgery CEU-Cardenal Herrera University, Valencia, Spain2Veterinary Clinic, Valencia, Spain

Topic: Reproduction

Purpose of the work. Pregnancy results in increased metabolic demands (Larsson et al., 2008). Al-though homeostatic mechanisms function to keep substances in blood at relatively constant levels,some changes in clinical biochemistry are likely to occur. Alterations in routine plasma clinical bio-chemistry have not been well studied during pregnancy in horses (Harvey et al., 2005; Satué et al.,2008) and more specifically in Spanish Purebred mare. One purpose of this study was to determineif physiological changes occur in plasma BUN and CREAT in Spanish Purebred mares during preg-nancy and to compare these findings with those reported in other species. A second purpose was todetermine whether changes in plasma BUN and CREAT are substantial enough to indicate the needto establish specific reference intervals for Spanish pregnant mare.Materials and used methods. A total of 31 reproductive Spanish mares with ages between 5 and 17years were studied during pregnancy. Pregnancy was divided into three periods of similar duration I(from the beginning of pregnancy until the day 115), II (from 116 days to 230 days) and III (from 231days until the birth). Venous blood samples were extracted always in the morning, with a monthly fre-quency, and were introduced in tubes with lithium-heparin. Plasma BUN and CREAT concentrationswere measured by spectrophotometry (Metrolab 2300 Plus V3®), using specific reagents (RAL®). A one-way analysis of variance (ANOVA) measures, concomitant with post hoc test of Tukey were realized toanalyze the differences among three periods of pregnancy the above parameters mentioned. The resultsare expressed as means ± SD. It was considered to be a level of significance p< 0.05.Outcomes. Pregnancy in Spanish Purebred mares induced significant increase in CREAT (I period:1.31±0.28; II period: 1.46±0.32; III period: 1.74±0.41) (p < 0.05) and decrease BUN (I period:31.44±7.06; II period: 28.00±5.23; III period: 28.19±5.33) (p < 0.05) concentrations. Conclusions. In conclusion, levels of BUN and CREAT are within the reference ranges in healthyadult horses. Pregnancy has a significant influence in the dynamics of BUN and CREAT in the mare,ensuring the development of reference ranges for this physiological condition. These findings couldbe a reflection, on one side of the distribution of fluid, rather than changes in the production of BUNand CREAT and on the other side, of the increase of glomerular filtration rate during the repro-ductive period. This fact this could be related to certain metabolic events that occur during this pe-riod in the mare.

BibliographyHarvey, J.W.; Pate, M.; Kivipelto, J.; Asquith, R. Clinical biochemistry of pregnant and nursing mares. Vet. Clin. Pathol., 34

(3): 248-254, 2005.Larsson, A., Palm, M., Hansson, L.O., Axelsson, O. Reference values for clinical chemistry tests during normal pregnancy.

BJOG, 115 (7): 874-881, 2008.Satué, S.; Cortés, H.; Muñoz, A. Lipid metabolism during pregnancy in Spanish mares with different body condition scor-

ing. Proceeding of 13th European Society of Veterinary Clinical Pathology and 10th International Society for AnimalClinical Pathology, October, 2008.

Corresponding Address:Dr. Katy Satué - CEU-Cardenal Herrera University Department of Animal Medicine and Surgery,Avd. Seminary, s/n, Moncada, Valencia, Spain - Phone: +34 961369000 - E-mail: [email protected]



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NORMAL VALUES OF SERUM AMYLOID A, HAPTOGLOBIN AND C-REACTIVEPROTEIN IN SPANISH PUREBRED MARES DURING ESTRUS CYCLE

K. Satué, DMV, PhD1, A. Calvo, DMV1

11Department of Animal Medicine and Surgery CEU-Cardenal Herrera University, Valencia, Spain

Topic: Reproduction

Purpose of the work. The acute phase response is the part of the innate defence system of an an-imal against trauma, inflammation or infection. During this response, there is increased pro-duction and release of plasma acute phase proteins (APPs) which include C-reactive protein(CRP), serum amyloid A (SAA) and haptoglobin (Hp) among others. Most of the positive acutephase proteins are synthesized by hepatocytes upon stimulation by the pro-inflammatory cy-tokines, interleukin IL-1, IL-6 and tumour necrosis factor (TNF) and released into the bloodstream (Ceron et al., 2005). APPs in horses demonstrates in infectious, inflammatory aseptic processes, burns, chemicalagents, neoplasia, traumas and immune diseases (Jacobsen and Andersen, 2007; Chistoffersen etal., 2008; Jacobsen et al., 2008; 2009). Several studies realized in human have documented theexisting relation between sexual hormones and the APP (Luppi, 2003; Abbas et al., 2004). In fact,the hormonal treatment with oestrogens induces an increase of lL-6, cytocine proinflammatoryrelated with the synthesis of CRP and AAS. Nevertheless, Ulutas et al. (2009) did not show rela-tion between hormonal state and levels of APP in bitches. In the mare, the existing relation be-tween reproductive cycle and APP’s levels has not been described. For this reason, the purposeof this study was to analyze the relationship between hormonal status and the levels of APP inSpanish Purebred mares during estrous cycle. Materials and used methods. A total of 20 reproductive Spanish mares with ages between 5 and 17years were studied during estrous cycle. Venous blood samples were extracted during follicularphase (FF), when follicle diameter was of > 3.5 cm and estradiol (E) concentration were maximal(19.93±2.26 pg/ml) and luteal phase (LF), from the fifth day diestrous, when levels of progesterone(P) were 22.20±1.04 ng/ml. Blood samples were introduced in tubes with activators of coagulationfor serum separation. Serum AAS and CRP concentrations were measured by means of an auto-mated immunoturbidimetric method adapted to Cobas Mira plus. The Hp measured up by means ofTridelta’s kit and was read in a reader ELISA of plates. Hormones were analyzed by Immulite 1000(DPC) with kits of this commercial firm. A one-way analysis of variance (ANOVA) measures, con-comitant with post hoc test of Tukey were realized to analyze the differences among two periods ofestrous cycle of the above parameters mentioned. There was carried out an analysis of Pearson’sCorrelation to value the relation of the hormonal and APP levels. It was considered to be a level ofsignificance p< 0.05. Outcomes. There have not appeared differences between AAS’s levels (FF: 1.64±0.49; LF:1.12±0.39 mg/L), Hp (FF: 3.15±0.26; LF: 3.93±0.45 g/L) and CRP (FF: 10.68±1.49; LF:10.53±1.32 mg/L) between both phases. The low correlations found among levels of E and P andthe diverse proteins during FF and LF, could not have explained any type of relation of the APPwith the hormonal state of the mare. Conclusions. In conclusion, they have been established reference intervals for APP in healthybreeding mares. The hormonal status in the mare does not alter the dynamics of protein fractionsSAA, CRP and Hp. The results of this study are important in evaluating acute phase protein profilesin cycling mares. These results serve as comparative parameters in this and other horse breeds inthe diagnosis of certain diseases that could affect the mare during this period (as endometritis) andthat could affect their fertility.



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BibliographyAbbas A, Fadel P, Wang Z, Arbique D, Jialal I, Vongpatanasin W. Contrasting effects of oral versus transdermal estrogen on

serum amyloid A (SAA) and high-density lipoprotein–SAA in postmenopausal women. Arterioscler Thromb Vasc Bi-ol. 24: 164-167, 2004.

Ceron JJ, Eckersal PD, Martinez-Subiela S. Acute phase proteins in dogs and cats: current knowledge and future perspec-tive. Vet. Clin. Pathol., 34: 85-99, 2005.

Chistoffersen M., Baagore C., Bojesen A.M., Jacobsen S., Lehn-Jensen H. Inflammatory markers in serum during inducedendometritis in the mare. In: Proceedings of 10th Annual Congress of the European Society of Veterinary ClinicalPathology (ESVCP) and the 8th Biennial Congress of the International Society for Animal Clinical Pathology(ISACP), European Society of Veterinary Clinical Pathology, CAB Abstracts, Barcelona, Spain, pp. 189-190, 2008.

Jacobsen S, Andersen PH. The acute phase protein serum amyloid A (SAA) as a marker of inflammation in horses. EquineVet. Educ., 19: 38-46, 2007.

Jacobsen S, Kjelgaard-Hansen M. Evaluation of a commercially available apparatus for measuring the acute phase proteinserum amyloid A in horses. Vet. Rec., 163: 327-330, 2008.

Jacobsen S, Nielsen JV, Kjelgaard-Hansen M, Toelboell T, Fjeldborg J, Halling-Thomsen M, Martinussen T, Thoefner MB.Acute phase response to surgery of varying intensity in horses: a preliminary study.Vet. Surg., 38 (6): 762-769, 2009.

Luppi P. How immune mechanisms are affected by pregnancy. Vaccine 21: 3352-3357, 2003.Ulutas PA, Musal B, Kiral F, Bildik A. Acute phase protein levels in pregnancy and oestrus cycle in bitches. Res. Vet. Sci.,

86 (3): 373-376, 2009.

Corresponding Address:Dr. Katy Satué - CEU-Cardenal Herrera University Department of Animal Medicine and Surgery,Avd. Seminary, s/n, Moncada, Valencia, Spain - Phone: +34 961369000 - E-mail: [email protected]



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BALF CITOLOGICAL, BACTERIOLOGICAL AND PCR EVALUATION IN FOALS WITH PERIPHERAL LUNG ABSCESSES REVEALED

BY A THORACIC ULTRASOUND

M. Sgorbini, DVM, PhD, MS1, S. Preziuso, DVM, PhD2, A. Caschetto, DVM1, A. R. Attili, DVM2, P. Marmorini, DVM3, M. Corazza, DVM1, V. Cuteri, DVM2

1Department of Veterinary Clinic, San Piero a Grado (PI), Italy2Department of Veterinary Sciences, Matelica (MC), Italy

3Practitioner, Pisa, Italy

Topic: Respiratory Disease

Purpose of the work. The aim of the present work was to study the usefulness of cytology, bacteri-ological culture and PCR of the broncoalveolar fluid (BALF) in foals with abscesses of peripherallung revealed by a thoracic ultrasound. Materials and methods. Inclusion criteria: 14 trotter foals, 7 colts and 7 fillies, aged 1-4.5 months,with abscessation of peripheral lung diagnosed by thoracic ultrasound (5 MHz) were included inthis study. Foals were born in the same stud farm and had the same management. Clinical signs:persistent cough, tachypnea, harshness of pulmonary sounds; some foals showed fever, nasal dis-charge, depression, anorexia. Broncoalveolar lavage (BAL) was performed in all the subjects, withthe standing and not sedated foals. 180 ml of pre-wormed sterile saline was instilled and retrievedvia a two stage sampling catheter passed through the biopsy channel of the endoscope. The exter-nal nostrils were cleaned to reduce contamination and cough during the procedure was avoided byinstillation of local anesthetic. Samples were collected in EDTA tubes for cytology and in steriletubes for microbiology and PCR; specimens were stored at 4°C and processed within 2h. EDTAsamples were used for total cell count and cytocentrifugated. Smears were air-dried and stainedwith Diff Quick. Differential cell count was performed by counting 400 cells/smear. Diagnosis ofpneumonia was carried out with cell total count/µL >300 and an increased neutrophils percentagewith sign of toxicity.1 X±SD were calculated for total cell number/µl, macrophages, lymphocytes,neutrophils, eosinophils percentages. Samples with no anticoagulant were used for bacteriologicand biomolecular examinations. For bacteriology, Blood Agar with and without Streptococcus Se-lective Supplement, Mannitol Salt Agar and MacConkey Agar were used. The DNA for PCR was ob-tained from the enrichment broth inoculated with BALF.2 The DNA was used for PCR to identifyStreptococcus equi subsp. equi, Streptococcus equi subsp. zooepidemicus, Streptococcus dysgalac-tiae subsp. equisimilis, Rhodococcus equi, Staphylococcus aureus e Staphylococcus intermedius.2-4

R. equi positive samples were subsequently tested by PCR for the detection of the vapA gene. Thesame PCRs were carried out to identify the bacterial colonies grown in culture and resembling ß-hemolytic streptococci, R. equi or coagulase positive staphylococci.Results.In foals with R. equi, X±SD for total cell/µl, macrophages, lymphocytes, neutrophils andeosinophils percentages were 1233.3±1270.2 cell/µL, 56.3±1.5%, 4±1%, 39.7±0.58%, respective-ly. In foals with bacterial pneumonia not caused by R. equi, X±SD for total cell/µl, macrophages,lymphocytes, neutrophils and eosinophils percentages were 477.3±173.7 cell/µL, 64.4±10.6%,14.9±6.9%, 19.8±10.6%; 1.1±1.5%. Bacteriology and PCR detected S. zooepidemicus in 5/14, Co-agulase Negative Staphylococci in 4/14 foals, and S. aureus, S. intermedius, a-haemolytic Strepto-cocci, Corynebacterium spp., E. coli, Serratia marcescens, Proteus spp., Pseudomonas aeruginosain 1/14 foal, respectively. R. equi was identified in 3/14 foals, and all the three strains resulted va-pA positive by PCR. In 5/14 animals two ore more different bacteria were detected.Outcomes. In our study, foals with R. equi showed higher total cell number/µL (1233.3±1270.2 vs477.3±173.7 cell/µL) and neutrophils percentage (39.7±0.58% vs 19.8±10.6%) than the subjects



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with pneumonia caused by other bacteria, while lymphocyte percentage resulted considerably low-er (4±1% vs 14.9±6.9%). Bacteriology and PCR detected pathogenic R. equi in 3/14 foals consid-ered “suspected” for rhodococcosis, while more frequently other bacteria potentially responsiblefor the clinical signs were identified. In these cases is thus suggested to carry out further laborato-ry investigations and to clarify the etiology in order to avoid the abuse of incorrect antibiotics andto increase antibiotic resistance. BALF culture is a reliable method to isolate bacteria responsiblefor pneumonia in foals, and it is required for a definitive diagnosis of R. equi. The PCR based onthe vapA gene sequence is necessary to distinguish the so called “high patogenicity” strains fromthe environmental R. equi.5 The finding of S. zooepidemicus in BALF of 5/14 foals suggests thatthese bacteria could be pathogenic in horse.2 In conclusion, our results suggest that thoracic ultra-sound may be considered only a good screening test to rapidly identify pulmonary abscessations.BALF total cell count and cytology seems to be able to grossly differentiate the inflammatory pat-tern of R. equi infection from other bacterial infections, but bacteriology and PCR are required toidentify the etiological agents and to make the antibiotic sensitivity test.

Bibliography1. Hodgson JL, Hodgson DR 2004 Saunders, Philadelphia, USA.2. Laus F et al 2007 Comp Immunol Microbiol Infec Dis 30:247-60.3. Baron F et al. 2004 J Food Prot 67:2302-5.4. Cuteri V et al 2007 SISVet LXI:177-8.5. Hondalus MK 1997 Vet Microbiol 56:257-68.

Corresponding Address:Dott.ssa Micaela Sgorbini - Dipartimento Clinica Veterinaria, via Livornese, snc56122 San Piero a Grado (PI), Italia - Tel 050-2210137 - Cell 329/2299083 - E-mail [email protected]



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APPLICAZIONE DEL TEST DI PROUDAMAN E DEL CA-ELISA NELLADIAGNOSI DI INFESTAZIONI DA ANOPLOCEPHALAE NEL CAVALLO

F. Veronesi, Med Vet, PhD1, I. Moretta, Med Vet1, E. Brianti, Med Vet, PhD2, D. Piergili Fioretti, Biol.1

1Dipartimento di Scienze Biopatologiche ed Igiene delle Produzioni Animali ed Alimentari Sezione Parassitologia, Facoltà di Medicina Veterinaria, Perugia, Italia

2Dipartimento di Sanità Pubblica Veterinaria, Facoltà di Medicina Veterinaria, Messina, Italia

Area di interesse: Gastroenterologia

Introduzione. Negli ultimi anni l’attenzione della Comunità Scientifica si è rivolta verso parassito-si del cavallo sostenute da Anoplocephalidi, principalmente Anoplocephala perfoliata, la cui scarsasensibilità verso i più comuni ed efficaci antielmintici del commercio, sembra aver agito da fattorefavorente l’aumento della prevalenza e l’intensità d’infestazione. Nonostante il crescente interesse,motivato dalla dimostrata associazione tra la presenza del parassita ad alte cariche e sindromi coli-che di tipo spasmodico, costipativo, perforativo e da cambio di posizione del tratto ileo-cieco-coli-co (Proudman e Edwards, 1993), la diagnosi di cestodosi nel cavallo presenta ad oggi forti limiti le-gati all’inadeguatezza delle tecniche tradizionali. Obiettivo del presente studio è stata la valutazio-ne comparativa tra il test di Proudman (Proudman e Edwards, 1992), per la ricerca copromicrosco-pica di uova di Anoplocephalidi, e la ricerca delle IgG(T) verso l’antigene di peso molecolare di 12-13 KDa di A. perfoliata mediante sistema CA-ELISA (capture-enzyme immunosorbent assay)(Proudman e Trees, 1996), considerati i test di maggiore attendibilità diagnostica a disposizione deiliberi professionisti. Materiali e metodi. N. 150 cavalli condotti a macellazione sono stati sottoposti a campionamen-to individuale di feci e sangue venoso da sottoporre rispettivamente a Test di Proudman ed a ri-cerca anticorpale mediante CA-ELISA. Al fine di verificare il reale stato di infestazione di ciascunsoggetto, al momento della macellazione i segmenti intestinali di ileo, cieco e colon ventrale dxsono stati analizzati ed i parassiti presenti contati e caratterizzati secondo criteri morfologici. Sul-la base del carico parassitario gli animali sono stati classificati in 3 distinte categorie di infesta-zione: Ia (<20 esemplari adulti), IIa (20-100), IIIa (>100). Confrontando i risultati ottenuti attra-verso i 2 distinti approcci diagnostici ed i reperti autoptici sono stati calcolati i parametri di per-formance dei test. Infine per confermare il valore semi-quantitativo della metodica CA-ELISA èstata ricercata la relazione intercorrente tra l’intensità del carico parassitario ed i valori di densitàottica (D.O.) ottenuti dalla lettura spettrofotometrica dei sieri attraverso il calcolo del coefficientedi regressione “r”. Descrizione del caso. All’esame autoptico 38 cavalli (25,33%) sono risultati parassitati da A. per-foliata (unica specie riscontrata), confermando come essa rappresenti la specie prevalente in Italia;l’ostio ileo-cecale è risultato il sito di repere principale (63,91%), seguito dalla parete del cieco(21,31%) e da quella dell’ileo (13,88%). Rispetto alle singole classi d’infestazione il 10,52% dei ca-valli apparteneva alla 1a categoria, il 31,57% alla 2a mentre il restante 57,89% alla 3a. N. 25 soggetti (16,66%) sono risultati patenti per uova di A. perfoliata, mentre 29 (19,33%) eranosieropositivi per IgG(T). Complessivamente la concordanza tra dato autoptico e Test di Proudmanè risultata pari al 91,33%; indipendentemente dalla classe d’appartenenza tale procedura diagnosti-ca ha mostrato una specificità assoluta ed una sensibilità che restava invariata tra la Ia e la IIa cate-goria (50%), mentre aumentava considerevolmente negli animali di IIIa categoria (76,19%). Il CA-ELISA ha mostrato un tasso complessivo di concordanza con il dato autoptico del 94,02%; a pari-tà di specificità (100%), la sensibilità dell’immunodiagnosi si è rivelata superiore rispetto a quelladal Test di Proudman (76% versus 63,15%) e proporzionale anch’essa al carico parassitario (50%,Ia; 75%, IIa; 81%, IIIa). La concordanza totale osservata tra i due test è risultata ottima (97%, K =



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90). Infine i dati rivelano come esista una buona correlazione (r2= 0,8012) tra l’intensità d’infesta-zione ed il tasso anticorpale. Conclusioni. I risultati ottenuti dimostrano che l’utilizzo dei 2 test combinati in serie e in parallelonon rappresenta una buona strategia diagnostica dal momento che essi mostrano tra loro un’elevataconcordanza che li rende, sotto il profilo qualitativo, pressoché equivalenti. Un riscontro laborato-ristico negativo, a fronte di un forte sospetto clinico, suggerisce di estendere la ricerca per mezzo diripetute campionature di feci, escludendo nuove determinazioni anticorpali dal momento che, di-versamente dalla negatività coprologica attribuibile ad una escrezione bassa ed intermittente di uo-va, quella sierologica, legata a fattori intrinseci del parassita e/o dell’ospite, a breve termine tende amantenersi costante. Di contro, il vantaggio dell’applicazione del CA-ELISA è legato al valore qua-li-quantitativo assunto dalla prova, già riferito in precedenti indagini (Proudman e Trees 1996;Proudman e Holdstock, 2000), di notevole ausilio a motivo dell’importanza assunta in questa ce-stodosi dalla stima del carico parassitario.

BibliografiaProudman CJ, Edwards GB (1992). Validation of a centrifugation/flotation technique for the diagnosis of equine cestodiasis.

Vet. Rec. 131, 71-2.Proudman CJ, Edwards GB (1993). Are tapeworms associated with equine colic’? A case control study. Equine Vet. J. 25,

224-6.Proudman CJ, Holdstock, (2000)- Investigation of an outbreak of tapeworm-associated colic in a training yard. Equine Vet.

J. Suppl. 32, 37-41.Proudman CJ, Trees AJ, (1996)- Use of excretory/secretory antigens for the serodiagnosis of Anoplocephala perfoliata ces-

todosis. Vet. Parasitol. 61, 239-47.

Indirizzo per corrispondenza:Dott.ssa Fabrizia Veronesi - Facoltà di Medicina Veterinaria di Perugia, Scienze Biopatologiche ed Igiene delle Produzioni Animali ed Alimentari, Sez. ParassitologiaVia San Costanzo, 4 - 06126 Perugia (PG), ItaliaPhone 0755857740 - E-mail: [email protected]



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APPLICAZIONI TERAPEUTICHE DI CELLULE STAMINALI OTTENUTEDAL SANGUE NEL TRATTAMENTO DI LESIONI TENDINEE,

LEGAMENTOSE E CUTANEE

G. Zhoar, DVM1, C. Gabbiani, DVM1, M. Polettini, DVM1, V. Martini, Phd2, A. Gambacurta, Professor2

1Libero professionista, Abano Terme, Venezia, Roma, Italia2Dip. Medicina Sperimentale e Scienze Biochimiche, Facoltà di Medicina e Chirurgia,

Università degli Studi di Roma “Tor Vergata”, Roma, Italia


Introduzione. Questo lavoro è stato svolto per dimostrare la valenza terapeutica rigenerativa dellecellule staminali ottenute dal sangue nel trattamento di patologie tendinee, legamentose e cutanee.La patologia tendinea del tendine flessore superficiale e flessore profondo rappresenta una proble-matica comune nei cavalli atleti. Ad oggi non si è trovata una terapia risolutiva che permetta di recuperare completamente le perfor-mances senza incappare in recidive. La riparazione di lesioni gravi in natura o con l’ausilio di fat-tori favorenti l’infiammazione (focature, rubefacenti, vescicanti) avviene grazie alla formazione ditessuto cicatriziale. Questo tessuto ha una densità ed elasticità diversa da quello tendineo che predispone a recidive. L’o-biettivo è la rigenerazione e non la cicatrizzazione. Il tempo di recupero è un altro fattore da consi-derare, solitamente si tratta di un lungo periodo compreso fra i 4 e gli 8 mesi. L’obiettivo è dimi-nuire questo intervallo.La patologia legamentosa è caratterizzata da un decorso lento e da un’elevata tendenza alla croni-cizzazione. Abbiamo usato le cellule staminali del sangue per trattare lesioni di diversi legamenti: ilegamenti collaterali del piede, il legamento obliquo del nodello, il legamento retto del piede e so-prattutto il legamento sospensore del nodello dove le lesioni sono più frequenti.Le lesioni cutanee che beneficiano delle staminali del sangue sono caratterizzate da elevata perdi-ta di sostanza (es. ustioni di 2°-3° grado), ed impedimento al normale processo di cicatrizzazione(es. infezioni antibiotico resistenti). In questo campo molte volte non ci sono valide alternative te-rapeutiche. Descrizione del caso. 230 lesioni tendinee e legamentose spontanee: 50% tendine flessore superfi-ciale, 10% tendine flessore profondo, 25% legamento sospensore, 10% legamento collaterale tra se-conda e terza falange, 5% altri.Tipologia dei cavalli trattati: 50% salto ostacoli, 10% completo, 10% dressage, 10% quarter horses,10% p.s.i., 10% altri. 50% castroni, 5% maschi, 45% femmine fra 2 e 25 anni. La percentuale ditessuto tendineo o legamentoso lesionato variava dal 15% al 90%.50 lesioni cutanee non provocate resistenti alle terapie convenzionali. In questo studio sono statitrattati 20 cani e 25 cavalli (14 castroni, 1 stallone, 10 femmine tra 4 e 22 anni). Conclusioni. Legamenti e tendini sono stati trattati con cellule staminali autologhe mediante ino-culazione locale sotto controllo ecografico e per via sistemica. I controlli ecografici sono stati ef-fettuati dopo un mese e già si poteva evidenziare un miglioramento dell’ecogenicità; una “buonaecogenicità” della lesione si ottiene dopo 2-4 mesi a seconda dell’estensione del danno e dell’etàdel cavallo. La % del ritorno all’attività sportiva dipende da un gran numero di variabili, ma in ognicaso è molto superiore a quella ottenuta con altri tipi di trattamento. Le ferite sono state trattate con cellule staminali autologhe mediante inoculazione locale e sistemi-ca. In un periodo variabile da 10gg a 4 mesi si otteneva la guarigione registrata da analisi fotogra-fica ripetuta regolarmente. La restitutio ad integrum o la cicatrice sono esiti diversi dovuti ad am-piezza e/o cronicità della lesione.



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BibliografiaHerthel DJ. Enhanced suspensory ligament healing in 100 horses by stem cells and other bone marrow components.Pro-

ceedings American Association of equine Practitioners 2001, 47: 319-321.Koerner J, Dobrila Nesic, Jose Diaz Romero et al. Equine Peripheral Blood-Derived Progenitors in Comparison to Bone

Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells Stem Cells 2006; 24, 6: 1613-1619.Smith RK, Korda M, Blunn GW, rt al. Isolation and implantation of autologous equine mesenchymal stem cells from bone

marrow into the superficial digital flexor tendon as a potential novel treatment Equine Vet J 2003; 35, 1: 99-102.Smith R.K. and Webbon P.M., 2005. Harnessing the stem cell for the treatment of tendon injuries: heralding a new dawn?

British journal of sports medicine, 39, 582-584.

Indirizzo per corrispondenza:Dott.ssa Carlotta Gabbiani - Via S.Gallo, 73B - 30126 Lido di Venezia (VE), Italia Cell. 3460810694 - E-mail: [email protected]



posters. in: proceedings of the 15th annual meeting of the ... · 1centro di studio del cavallo...

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