Ada Biol6gica Colombiana, Vol. 4 No.2, 1999 5

REVISION

FITOPATOLOGIA EN FLORES

Emira Garces de Granada, Martha Orozco de Amezquitay Angela Cristina ZapataDepartamento de Biologfa, Facultad de Ciencias,Universidad Nacional de Colombia,Apartado Aereo 14490, Bogota, Colombia.

Palabras c1aves:Fitopat6geno, Botrytis cinerea, Fusarium oxysporum, control biol6gico.

INTRODUCCION

La generaci6n de nuevos empleos y mayores divisas para el pais, han sido losobjetivos principales de las empresas dedicadas a la exportaci6n de flores,actividad que ha pasado a ocupar un lugar irnportante en la econorniacolombiana; por tal raz6n, se hace necesario el estudio a fondo de la biologiay el control de los pat6genos que mas afectan este sector de la agricultura yaque uno de los factores limitantes en la producci6n de flores de corte son lasenfermedades causadas por hongos, bacterias, nernatodos y virus.

Las enfermedades mas importantes son las ocasionadas par los hongosFusarium oxysporum f. sp. dianthi y Cladosporium echinulatum en clave]. EI hongoPuccinia horiana causa la enfermedad que mas afecta la producci6n de crisan-temo tipo exportaci6n. La enfermedad conocida como "moho gris" causadapor el hongo Botrytis cinerea, es una de las mas comunes en cultivos como elc1avel, el crisanterno, el estatice y la rosa, entre otros (Horst & Nelson, 1976;Pozza et al., 1997). Son tarnbien de importancia las enfermedades bacte-rianas causadas por Agrobacterium tumefaciens cornun en rosa y crisantema;y las inducidas por nernatodos de los generos Pratylenchus, Meloidogyne encrisantemo y Heterodera trifolii en clavel (Garces de Granada, 1985, Garces deGranada, 1987, Burbano & Erazo, 1990). Los virus mas frecuentes son elvirus del Moteado del Clavel (CaMV) que reduce la calidad de las flores yel virus del Marchitamiento Punteado del Tornate (TSWV) principal menteencontrado en crisantemo, gerbera, gypsofila y aster. Existen tam bien otrasenfermedades graves aun no registradas en Colombia (Arbelaez, 1999).

6 Fitopatologta en flores, Gareis de Granada et 01.

ENFERMEDADES CAUSADAS POR LOS HONGOS FITOPATOGENOSBotrytis cinerea y Fusarium oxysporum f. sp. dianthi.

Botrytis cinereaB,OLOGIA DEL HONGO

La forma - genero Botrytis Pers, es ubicada por Agrios (1997), dentro de losDeuteromycetos, los cuales poseen micelio bien desarrollado, septado yramificado; segun Pardo-Cardona (1995), presentan colonias esparcidas,frecuentemente grises, polvorosas; micelio inmerso 0 superficial; esclerosiosque se forman con frecuencia tanto en sustratos naturales como artificiales;conidioforos rectos 0 flexuosos, lisos, cafes, ramificados, a menudodicot6mica, pero tarnbien tricot6micamente, con la ramificaci6n espe-cialmente restringida a la region apical formando un estipe, y una cabezamas 0 menos abierta; ramificaciones general mente hinchadas en su parteterminal formando arnpulas decoloradas 0 palidas; celulas conidicge-nicas infladas, clavadas, esfericas 0 subesfericas, denticuladas; conidiassolitarias, acropleurogenas, simples decoloradas 0 cafes muy palidas, lisas,general mente unicelulares, raras veces con uno 0 dos septos, elipsoidales,ovoides, esfericas 0 subesfericas. A veces ocurre un estado fiahdico conpequenas fialoconidias subesfericas 0 esfericas decoloradas. Incluye im-portantes fitopatogenos, algunos de 105 cuales son 105 estados conidiales deEsclerotinia (Botryotinia).

EI estado sexual 0 teliomorfo de acuerdo con 10 dicho por Agrios (1997),esta referido al genero Botryotinia Whetzel, del orden Heliotales, familiaSclerotiniaceae (jarvis, 1981). Jarvis (1977), seriala que el genero Botrytis en uncultivo puro puede ser dividido en tres tipos: micelial, esporulante yesclerocial. Trabajos posteriores (Chaves & Henao, 1981; Garces de Granada& Arbelaez, 1985), confirman la existencia de un tipo intermedio entre 105tipos esporulante yesclerocial.

EI hongo B. cinerea Pers, posee razas rnorfologicas y tiene diferentes grad 05 devirulencia (Yoder & Whalen, 1973; Chaves & Henao, 1981); esta virulencia variasegun el clima y la variedad dentro de una misma especie vegetal. Lauber(1971), senala la existencia de diferentes razas fisiologicas obtenidas a partirde cinco aislamientos distintos. Adernas confirma que el tarnafio de lasconidias depende del pH, de la relacion C: Ny de 105 nutrientes del mediode cultivo, 10 mismo que de la edad del cultivo y de la humedad relativadel medio.

Ada Biol6gica Colomoiano, Vol. 4 No.2, 1999 7

En general, el hongo requiere de un clima hurnedo y una temperatura de 18°a 23°C para desarrollarse adecuadamente, esporular y que sus esporasgerminen para producir la infecci6n (Agrios, 1986). En condiciones delaboratorio, el ciclo de vida in vitro de B. cinerea presenta un desarrollo rapidoque concluye alrededor de las 24 horas y que comienza con la hidrataci6n delas conidias, luego forma el tubo germinativo y posteriormente las rami-ficaciones hifales para terminar con la formaci6n de los conidi6foros y lasnuevas conidias (Garces de Granada, 1998). La humedad relativa minimarequerida por el hongo para su germinaci6n es de 93%, aunque este factor noes necesario si la planta se encuentra hurneda. Ademas, en el proceso de ger-minaci6n, las esporas de B. cinerea necesitan 5610 20 horas a una temperaturade 25°C y 30 horas a 100e. La infecci6n puede ocurrir a temperaturas entrelos 2°C y los 30°C (Agrios, 1986).

PATOGENICIDAD

Las plantas pueden ser atacadas en el campo, en el transporte 0 durante elalmacenamiento. La penetracion del patogeno se realiza directamente atraves de heridas causadas por insectos 0 por medios rnecanicos. EI hongo esendernico y las esporas estan en el aire durante el periodo de desarrollo. Puedeatacar cualquier parte de la planta, pero los tejidos viejos 0 daiiados son losmas susceptibles. Jarvis (1981), confirma que B. cinerea es un pat6genocornun durante la floracion; las partes florales aportan un excelente sitio deinfecci6n y una vez colonizadas por el rnicelio, se convierten en inoculo poten-cial lista para atacar frutas y otras partes de la planta.

Entre las enfermedades causadas por el genero Botrytis estan, el moho gris dela fresa y de muchas hortalizas, la pudrici6n del caliz en manzanas y el mar-chitamiento 0 aparici6n de moho gris en flores. Botrytis tam bien causapudrici6n en frutas y hortalizas almacenadas, durante el transporte y en lacomercializaci6n de las mismas (Agrios, 1997). Muchas especies de Botrytissecretan enzimas pectinolfticas y otras enzimas que degradan las paredescelulares, faciiitando de est a manera la invasi6n del pat6geno a los tejidos dela planta (jarvis, 1977).

En Colombia B. cinerea a menudo ocasiona perdidas considerables en cultivosde uva, fresa, mora y ornamentales, especialmente en perfodos de alta preci-pitacion (Garces de Granada, 1995). 5u incidencia es grave en climas frioy medio y practicarnente todas las flores y frutas son susceptibles, espe-cialmente las de exportaci6n como: mora, curuba, fresa y uchuva, para solomencionar las que se estan abriendo paso en la exportaci6n (Buritica, 1995).

8 Fitopatologfa en flores, Garces de Granada et 01.

PREDISPOSICION A LA ENFERMEDAD

En la busqueda de estrategias para evitar enfermedades, es ut]] considerar laautoecologfa del pat6geno en todas las fases. Se hace necesario comprenderla fisiologfa de 105 cultivos asf como las condiciones que predisponen lasplantas a las enfermedades (Stephen, 1997).

Se ha confirmado que el etileno afecta las flores y los frutos de algunasplantas y facilita el ataque por el pat6geno (jarvis, 1977). EI incremento deagua y el intercambio gaseoso en los tejidos conducen al aumento de lapermeabilidad celular, predisponiendo asr 105 tejidos a la infecci6n. KamoenyJamart (1974), serialan que un alto contenido de azucar en hojas de begoniahace susceptible la planta a la infecci6n por B. cinerea. Las deficiencias 0 elexceso de nutrientes, al provocar una cierta debilidad en las plantas, puedencausar una mayor incidencia de B. cinerea; as! ocurre con el exceso de nitr6-geno y con la deficiencia de calcio ya que la presencia de este elementoprovoca, una menor producci6n de etileno, el cual favorece el desarrollo delhongo (jarvis, 1981). Se cree que, tanto la aplicaci6n ex6gena de acidogiberelico, como de calcio u otros inhibidores de etileno, reduce la severidadde la enfermedad (Shaul et al., 1992). Hay otros factores que facilitan la infec-cion, tales como las heladas, las quemaduras por el 501 y el viento, la poluci6natmosferica, los insectos, los nematodes y las bacterias (jarvis, 1977, 1981).

En la sabana de Bogota, B. cinerea se desarrolla con facilidad pues las tem-peraturas nocturnas descienden facilrnente hasta los SoC y se registranhumedades relativas del orden de 95% 0 mayores. En la manana, al subir latemperatura de la atm6sfera, y por tanto del invernadero, la diferencia detemperaturas entre el aire y la planta, provoca una condensaci6n de agua enla superficie de 105 tejidos (Rodriguez, 1995).

Para el caso especifico del control, en la presencia y la diseminaci6n deB. cinerea, la primera linea de defensa es el manejo de las condicionesarnbientales, como son: el mantenimiento de una humedad relativa menor del75%, 10 cual se logra alternando la ventilaci6n y el calentamiento del am-biente; aumentando la circulaci6n del aire especialmente en las noches ymanteniendo una temperatura promedio de 15.SoC ya que esta contribuyeala inhibici6n de la germinaci6n de esporas de este pat6geno.

En condiciones de laboratorio, el control quimico de B. cinerea, aislado de rosaMadame Delbard, es altamante efectivo con los fungicidas comercialesRovral, Orthocide, Ronilan, Folicur y Scala, en concentraciones de 500, 1.000

Acta Biol6gica Cotombiana, Vol. 4 No.2, 1999 9

y 2.000 ppm. Es importante determinar en condiciones de campo que gradode efectividad presentan estos fungicidas y las concentraciones adecuadas(Garces de Granada, 1998).

Lascondiciones que permiten la reducci6n de B. cinerea son entre otras: remo-ver el material vegetal contaminado 0 muerto, mantener el follaje libre depelrculas de agua, realizar un programa adecuado de aplicaciones qufrnicas,fertilizar y hacer los riegos en las horas de la manana (Larson, 1992). Sinembargo, la resistencia genetica es el mejor control de algunas enfermedades,siendo este rnetcdo el preferido.

Fusarium oxysporum f. sp. dianthi

Los cuatro tipos de flares colombianas para exportacion mas irnportantes sonel c1avel estandar y miniatura, el pompon y la rosa. EI c1avel ha sido y continuasiendo el principal cultivo de exportacion, el de mayor area sembrada y el demayor empleo de mano de obra. Las enfermedades vasculares del c1avel sonocasionadas por hongos y bacterias. Hasta el momento se han reconocido lasproducidas por las bacterias Pseudomonas caryophylli, Erwinia chrysanthemi Burk.pv. Dianthicola y por los hongos Rhizoctonia solani Kuhn, Phialophora cinerescens(Wollenw.) van Beyma y F. oxysporum Schlencht f. sp. dianthi (Arbelaez, 1987;Asocolflores, 1991).

EI marchitamiento vascular ocasionado por F. oxysporum f. sp. dianthi seconsidera la enfermedad mas importante y limitante del cultivo de clave I enColombia, debido a su facil propagacion a partir de material infectado, a sualta persistencia en el suelo, al alto costo y a la baja eficiencia de las medidasde control aplicadas (Arbelaez, 1988). La enfermedad se caracteriza por laaparicion unilateral de los sfntornas de marchitamiento, acornpanada delamarillamiento parcial de las hojas y el doblamiento de los brotes hacia ellado de la planta enferma, a causa de la interferencia en el crecimiento; enestados iniciales, en las hojas puede observarse la mitad clorotica y la mitadde color verde normal. Se observa adernas, enanismo de los brotes y disrni-nucion del crecimiento de la planta. Los sfntomas de la enfermedad avanzanafectando la planta hacia arriba hasta causar un marchitamiento generalizadoy la muerte (Arbelaez et al., 1996).

AI realizar un corte transversal del tallo, en los haces vasculares se observa unacoloracion blanquesina, amarillenta 0 rnarron con la muerte y la des-cornposicion de los tejidos, sin afectarse la rnedula (Baker, 1980). Las rafeesy los tallos no evidencian dafio inicial importante, perc luego se afectan

10 Fitopato{og(a en [teres, Garces de Granada et al.

severamente con la formaci6n de cavidades, presentando posteriormente unapudrici6n sec a en la base de las plantas yen las rafces, observandose ataquesde organismos secundarios como Fusarium roseum (Holley & Baker, 1991). Estaenfermedad tiene los siguientes sin6nimos: Fusarium dianthi, Fusarium redo/ens,F oxysporum f. sp. redolens, Fusarium redolens f. sp. dianthi (Garibaldi et 01., 1986).

BIOLOGIA DEL HQNGO

EI hongo se caracteriza por producir colonias de rapido crecimiento, can unarasa diaria cercana a un cenurnetro en PDA a 25°C. EI micelio es general-mente aereo, abundante, algodonoso, con una coloraci6n variable de blancoa rosado durazno, pero general mente con un tinte purpura 0 violeta masintenso en la superficie del agar (Booth, 1970). EI hongo se caracteriza porproducir tres clases de esporas:

Microconidias: Esporas unicelulares, sin septos, hialinas, elipsoidales acilfndricas, rectas 0 curvadas, tienen 5-121J.m de largo por 2.5-3.5IJ.m de ancho.

Macroconidias: Esporas de pared delgada, fusiformes, largas, moderada-mente curvas en forma de hoz, con varias celulas de tres a cinco septastransversales, tienen de 27-46 IJ.mde largo por 3.0-4.5 IJ.mde ancho.

Clamidosporas: Esporas formadas a partir de la condensacion de loscontenidos de las hifas y de las conidias, de paredes gruesas mediante lascuales el hongo sobrevive en condiciones ambientales desfavorables y enausencia de plantas hospedantes. Estas esporas se forman simples 0 en pares,terminales 0 intercalares: las damidosporas tienen un tarnafio de 5 a 15 urnde diarnerro.

La morfologia de las colonias es muy variable y el hongo puede presentar dostipos de colonias; una de tipo micelial caracterizada por la produccion deabundante micelio aereo y pocas microconidias y una de tipo pionotal con laformaci6n de poco a ningun micelio aereo y abundantes microconidias(Nelson, 1981). Hasta el momento no se conoce la fase perfecta del hongo(Nelson et al., 1983).

C1eLO DE LA ENFERMEDAD

La enfermedad se inicia con el crecimiento de las hifas 0 con la germinacion delas clamidosporas en dormancia presentes en tejidos muertos del hospedante.Esta respuesta es estimulada por los exudados secretados por las rafees de las

Acta Bio/6gica Colombiana, Vol. 4 No.2, 1999 11

plantas de c1avel recien sembradas. Las hifas del hongo penetran directamentela epidermis de las rarces, pasan a la corteza y a la endodermis y entran a losvases del xilema; tam bien las hifas pueden penetrar a traves de las heridashechas en forma rnecanica 0 por nematodes, insectos 0 rniriapodos. Sinembargo, la infecci6n directa a traves de las rarces es el rnerodo mas cornun depenetraci6n del pat6geno (Baker, 1978; Baayen, 1988).

Una vez dentro, el hongo se mueve por colonizaci6n intracelular a los vasosdel xilema y los invade cuando est an maduros (Nelson et al., 1983). EI pato-geno coloniza por crecimiento del micelio 0 por medio del transporte pasivode microconidias (Baayen, 1988). Este transporte pasivo contribuye a unacolonizaci6n no uniforme, 10 que puede hacer que el material de propagaci6naparentemente sano resulte afectado (Baayen & de Maat, 1987). La coloni-zaci6n del tallo es unilateral debido a que la diseminaci6n lateral y radial delhongo parece inhibida por las paredes celulares y otras barreras laterales(Baayen & Eigerma, 1985). La oclusi6n de los vasos del xilema infectado,juega un papel muy irnportante en la resistencia de las plantas de c1avel y tieneque ver con el marchitamiento de elias. Especialmente en variedades resis-tentes, las plantas tienen la capacidad de regenerar nuevos vasos del xilerna,como un rnetodo para crear nuevas vias de transporte de agua para com-pensar vasos destruidos (Baayen, 1988).

EPIDEMIOLociA

La temperatura 6ptima para el desarrollo del pat6geno esta entre 25 y 30°C,una temperatura minima de SOC y una maxima de 37°C; la esporulaci6n6ptima ocurre entre 20 y 25°C, con 12 horas luz. EI pH 6ptimo es de 7.7 ypuede desarrollarse entre 2.2 y 9.0 (Fletcher & Martin, 1972; Nelson 1981;Traimer et al., 1983). Gasiorkievicz (1960) observ6 una mayor infecci6n conaltos niveles de nitr6geno, bajos niveles de potasio y bajo pH. EI hongo esaer6bico y sus poblaciones se reducen con la saturaci6n del suelo.

Arbelaez et al., (1996), realizaron la recolecci6n de plantas de c1avel afectadas,procurando abarcar todas las zonas productoras de la saban a de Bogota, conel fin de identificar las razas del hongo presentes y efectuar estudios micro-biol6gicos e inoculaciones del pat6geno en variedades diferenciales de clavel.Para la identificaci6n de las razas se han empleado metod os como el anal isisde grupos de compatibilidad vegetativa ya utilizados para caracterizaci6n deaislarnientos no patogenicos de F. oxysporum, pudiendose comprobar queestos aislamientos pertenecen a grupos de compatibilidad diferentes a losaislarnientos patogenicos (Wright et al., 1991; Arbelaez et al., 1996).

12 FitopatoJogfa en flores, Garces de Granada et 01.

Los patrones electroforeticos de las protefnas solubles encontradas en lamayorfa de los aislamientos de la saban a de Bogota, muestran que existenpequerias diferencias dentro de las razas 10 cual coincide con 10 observadopar Sparnaaij (1978) en Holanda, par Scovel (1987) en Israel, par Arbelaez& Calder6n (1991) Ypar Garces de Granada et al., (1992) en Colombia. Canla utilizaci6n de tecnicas electroforeticas de aril esterasa se encontrarondiferencias entre los aislamientos de las razas 2 (Colombia e Italia), 1, 4 Y8(Italia) de F. oxysporum f. sp. dianthi, F oxysporum f. sp. Iycopersici; F. oxysporumno patogenico y Phialophora cinerescens. Existen mayores diferencias entre lasformas especiales de F. oxysporum que entre las especies de Fusarium. Los ais-lamientos considerados como no patogenicos difieren muy poco entre sf(Garces de Granada, ei al., 1999).

Las diferencias en el crecimiento micelial de los diferentes aislamientos deF. oxysporum f. sp. dianthi, principalmente en caracterfsticas como forma, ele-vaci6n y coloraci6n de la colonia no permiten conocer la variabilidad pato-16gica del hongo (Matthews, 1978; Cevallos & Gonzalez, 1989; Arbelaez &

Calder6n, 1991 y Wrigth et 01., 1991).

Para el control del marchitamiento vascular del clavel se realizan practicastales como tratamiento del suelo con vapor, con diversos fumigantes y confungicidas sisternicos, pero el costo de dichas practicas es alto y puede variardependiendo del tipo de tratamiento (Baker, 1980, Arbelaez, 1989). Las difi-cultades para el manejo de las poblaciones de hongos pat6genos par tecnicasconvencionales, hacen que el control biol6gico sea uno de los merodos maspromisorios para el control de las enfermedades; adernas, este puede com-binarse con otros metodos logrando una mayor eficiencia y menores costos(Scher & Baker, 1980).

METODOs DE CONTROL

Los altos niveles de dana en producci6n, en postcosecha y durante el trans-porte, debido al ataque de hongos, bacterias y otros pat6genos vegetales, hanobligado a las empresas productoras de flares a la utilizaci6n de controlesqufmicos, aumentando can ella los costos, asr como los riesgos para las per-sonas que entran en contacto con dichos productos.

Hayen dra se hace un esfuerzo par combinar diversos metodos de controlcontra el ataque de organismos fitopat6genos que afectan cultivos vegetalesde toda clase; se utilizan metodos ffsicos, mecanicos, qufmicos y biol6gicos

Acta Biol6gica Colombiana, Vol. 4 No.2) 1999 13

contra dichos pat6genos. Las practicas para el control de fitopat6genos,generalmente son culturales, medidas de saneamiento, regulaci6n del micro-clima y en una alta proporci6n depend en de los quimicos. En el controlintegrado las herramientas mas irnportantes son la resistencia y el controlcultural, rnientras que los agentes biol6gicos y los qufmicos pueden ser rrn-plementados cuando sea necesario (Marois & Broome, 1985).

Dentro de los rnetodos culturales para eliminar 0 reducir el in6culo de unorganismo fitopat6geno existe, la erradicaci6n del hospedero, en la que todaslas plantas hospederas infectadas 0 con la sospecha de infecci6n sonremovidas y quemadas para eliminar el pat6geno y prevenir mayores per-didas. Otro metcdo consiste en la rotaci6n de los cultivos, la cual se realizaen suelos donde existen pat6genos que infectan plantas de una 0 unas pocasespecies, para ello, mediante el cultivo por tres 0 cuatro afios de plantaspertenecientes a especies 0 familias que no son atacadas por dicho pat6geno,se logra reducir el in6culo y por 10 tanto la incidencia de la enfermedad(Agrios, 1997).

Una forma de control de ciertos pat6genos fungales y de nernatodos se tieneen la creaci6n de condiciones desfavorables para el desarrollo del pat6geno,aumentando la aireaci6n de los sitios en los cuales permanecen las plantas 0

los productos, el espaciamiento de las plantas dentro de los invernaderospara reducir altos niveles de humedad y el drenaje de los suelos que tam bienreduce el nurnero y la actividad. Adicionalmente, la utilizaci6n de fertilizanteso suelos tratados que cambian el pH normal se convierten en un factordesfavorable para el desarrollo del pat6geno. Las inundaciones por largosperiodos 0 terrenos secos y abandonados pueden tarnbien reducir el nurnerode ciertos pat6genos en el suelo por carencia de oxigeno 0 por desecaci6n.

CONTROL QUfMICO

La utilizacion de control qufmico se encuentra muy cuestionada pues aunquees necesaria, su uso en el manejo de las enfermedades debe reducirse gra-dual mente, por requerimientos ambientales nacionales e internacionales(Frinking, 1991). Adernas, las aplicaciones de fungicidas algunas veces tienenun efecto restringido debido a que no alcanzan el sitio indicado para protegerala planta 0 atacar la infecci6n establecida (Buitrago et al., 1982). Los fun-gicidas brindan protecci6n, pero su aplicaci6n es una practica que no logracontrolar completamente las enfermedades; adem as, estas aplicaciones serealizan especial mente si la incidencia de la enfermedad es alta. Las mezclasde dos 0 mas fungicidas han resultado ser inicialmente efectivas y ofrecen una

14 Fitopatologfa en flores, Garces de Granada et ol.

protecci6n por tiempo mas prolongado que haciendo aplicaciones de fun-gicidas simples (Hausbeck & Moorman, 1996). Sin embargo, la resistencia dealgunos hongos a fungicidas limita la opci6n del control quimico. La resisten-cia a benomyl, 10 mismo que la resistencia multiple a otros benzimidasoles y alas dicarboximidas, por parte de hongos como B. cinerea, es usual hoy en dia.

Durante los ultirnos cinco afios se han efectuado varios experimentos con elfin de probar la eficacia de diferentes fungicidas, escogiendo los disponibles ylos recientemente desarrollados. Entre los fungicidas disponibles las mezclasde carbendazim con diethofen carb, procymidone con thiram y chlozolinatecon thiram han mostrado buenos resultados en todas las pruebas para el con-trol especfficamente de B. cinerea. Entre los nuevos fungicidas, con f1udioxolin,solo y en mezcla con ciprodinil, se han obtenido resultados altamente saris-factorios. AI considerar la fitotoxicidad de los fungicidas y bajo condicionesexperimentales, fungicidas como Anilazine, Chlorothalonil, Fluazinam yTebuconazole, causan dafios en las flores (Hausbeck & Moorman, 1996).

Adernas de pensar en el control del in6culo, disminuyendo la esporulaci6n delhongo, se debe trabajar mas en el manejo de las condiciones que afectan lagerminaci6n de las esporas. En Europa se han realizado diversos ensayos eneste senti do a traves del control clirnatico, con la utilizacion de invernaderoscompletamente cerrados, provistos de sistemas de ventilaci6n y calefacci6n.Por esto, en los ultimos aries se han intensificado las investigaciones sobre laclimatizaci6n de los invernaderos (Frinking, 1991). Experimentos efectuadospor Cheah & Irving (1997) aumentando la temperatura dentro de los inver-naderos por varias horas al dta, demostraron que esta es una forma efectivapara el control de B. cinerea.

Los fungicidas benzimidazoles, dicarboximidas, dicloran, hidr6xido cuprico ymancozeb estan disponibles para el control del "moho gris" en invernaderosy son usados para la protecci6n de cosechas. Las experiencias con estos fun-gicidas, han sido ya comprobadas en diferentes paises como el Reino Unido,ttalia, Israel, Grecia y Canada. La eficiencia de tales tratamientos en cultivosbajo invernadero es muy limitada y debe complementarse con la reducci6n dela humedad relativa y la disminuci6n de la presencia de agua libre sobre lashojas (Moorman & Lease, 1992). EI control integrado del moho gris en la rosay otras cosechas ornamentales depende del conocimiento de la biologia delpat6geno y de la planta hospedera.

Para el control de enfermedades vasculares y en especial de la ocasionadapor F oxysporum f. sp. dianthi se han empleado diferentes metodos como

Acta Biol6gica Coiombiana, Vol. 4 No.2, 1999 15

producci6n de materiallibre del pat6geno, la aplicaci6n de vapor al suelo, defumigantes y de fungicidas sistemicos, el uso de algunas practicas culturales ysanitarias, la siembra de variedades resistentes y en los ultimos afios la apli-caci6n de algunos antagonistas biol6gicos (Baker, 1980; Arbelaez, 1987).

EI tratamiento del suelo con vapor ha sido el rnetodo mas eficaz para lareducci6n de la enfermedad causada por F oxysporum y esta eficiencia se halogrado incrementar con la aplicaci6n previa de algunos qufmicos. La apli-caci6n de Metan-sodio, seguido del tratamiento con vapor ha sido el rnetodomas efectivo para la desinfecci6n del suelo en los Estados Unidos; sinembargo su utilizaci6n no es completamente satisfactoria para la destrucciondel pat6geno debido a que la distribuci6n del vapor y del fumigante no esuniforme (Holley & Baker, 1991). Otros qufmicos utilizados en el control deeste hongo son dazomet, metilisotiocianato, formaldehido, bromuro de me-tilo, obteniendose con ellos resultados variables de control, una erradicaci6nparcial del pat6geno pero su aplicaci6n es muy costosa y poco selectiva,ocasionando una reducci6n de formas saprofitas beneficas y de posiblesantagonistas (Arbelaez, 1987).

Dosis de 22.5 ppm de tiabendazol inhiben el crecimiento y esporulaci6n delmicelio de Phoma spp. y el clorotanolil inhibe completamente la esporulaci6n.Se recomienda la esterilizaci6n del suelo con vapor 0 con tratamientosqufmicos 0 la adici6n de arena al suelo antes de cada siembra. Existe unamayor eficiencia en el control de Phoma spp. si adernas se implementa el usode fungicidas, aunque es importante establecer la dosis efectiva mas baja 0

aun mejor, la utilizacion de controladores biol6gicos como aislamientos deTrichoderma sp. los cuales adicionalmente no contribuyen a aumentar lapoluci6n del medio (Prieto etal., 1999).

CONTROL BIOL6GICO

La posibilidad de utilizar microorganismos que se encuentran en la naturalezapara controlar las enfermedades de las plantas, sigue siendo un metodo atrac-tivo y segura para el ambiente. Por tanto, un entendimiento completo de losmecanismos de antagonismo rnicrobiano, puede eventual mente conducir alautilizacion efectiva de los microorganismos benefices para el control, si tene-mos en cuenta los trabajos realizados por muchos investigadores. Existendiferentes formas de control biol6gico como son:

Antagonismo: es el dane directo que un agente de control biol6gico causapor su intervenci6n en los procesos de la vida del pat6geno. Los antagonistas

16 Fitopatologfa en flores, Garces de Granada et at.

incluyen toda c1asede organismos: hongos, bacterias, nematodes. protozoos,virus, viroides y plantas con semilla (plantas trampa) (Baker,1985).

Antibiosis: el terrnino se refiere a la inhibici6n parcial 0 total del crecimientoo desarrollo de un pat6geno ya sea por metabolitos t6xicos del microorga-nismo asociado (toxinas) 0 por antibi6ticos naturales. EI fen6meno de laantibiosis varia en intensidad de acuerdo con la distancia que separe a los dosmicroorganismos y en algunos casos puede resultar mas eficiente que lasotras formas de antagonismo, ya que se puede mantener en forma continuasu actividad lftica y degradatoria sobre el organismo afectado.

Competencia: es la condici6n que se desarrolla entre dos 0 mas especies demicroorganismos que luchan entre sf por cantidades limitadas de nutrientes,agua, oxrgeno, espacio a algun otro requerimiento cornun y que generalmentecondiciona la supresi6n de alguno de ellos.

Lisis: es la destrucci6n 0 descomposici6n del material biol6gico. Este meca-nismo considera dos tipos basicos: endolisis, que es la diluci6n interna delprotoplasma celular antes de la disoluci6n concomitante de la pared y laexolisis que consiste en la disoluci6n de la pared y membrana celular seguidapar el vertimiento de los contenidos celulares.

Hiperparasitismo: es el mecanismo por el cual un pat6geno puede ser limi-tado en su crecimiento por ia presencia de otro microorganismo, el cualutiliza el metabolismo del parasitado.

Estudios realizados por Salande et al., citados por Campo (1994), demos-traron la posible protecci6n de leguminosas con cepas de Rhizobium contrageneros de hongos fitopat6genos, tales como Fusarium spp., Rhizoctonia sp.,Colletotrichum spp., Phytopthora spp., Pythium spp. y Macrophomina phaseolina. EIhongo filamentoso Glioe/adium roseum est a presente en un am plio rango dehabitats alrededor del mundo; G. roseum en conjunto con otros controladoresactua como un antagonista efectivo de B. cinerea en cultivos como fresa, frarn-buesa, tom ate y en plantas ornamentales como geranio, begonia y ciclamen.

EI filtrado crudo de la bacteria Bacillus subtilis, afect6 la germinaci6n de lasconidias, el crecimiento del micelio y la producci6n de conidias deColletotrichum gloesporiodes. La sustancia 0 sustancias producidas por la bac-teria tienen una posible significancia en la epidemiologfa de la antracnosis, yaque esta afect6 varias eta pas del crecimiento del pat6geno. Una reducci6nsignificativa en el crecimiento del micelio, acoplado a una drastica reducci6n

Acta Biof6gica Colombiana, Vol. 4 No.2, 1999 17

en la producci6n de conidias, son aspectos importances que afectan el ciclode vida del pat6geno (Badel & Kelemut, 1994). Con B. subtilis se ha controladoefieientemente a Sclerotium cepivorum (Utkede y Rahe citado por Campo, 1994)y con B. cereus se ha controlado a Phytophtora spp (Handel et al., 1990).

Dentro del grupo de las Pseudomonas se destaca P. cepacia por sus cualida-des de biocontrolador de pat6genos fungales del suelo. La bacteria seencuentra com un mente en el suelo y se ha aislado de la rizosfera de culti-vos horticolas, cereales, leguminosas y frutales, inhibiendo la actividadfitopat6gena de Fusarium sp., Rhizoctonia solani y Helminthosporium sonali(Kawamoto & Lorbeer; Hagerdon et al.; Lambert et al., citadcs por Campo,1994). Adernas se logr6 obtener una reducci6n en la incidencia de la enfer-medad damping off eausada por Pythium spp. de 90% a 60% en plantulas detrigo, tornate, pepino, melon, frfjol y algod6n al aplicar Pseudomonas cepaciaen las respectivas rizosferas. Lievens et al., citados por Campo (1994),consiguieron con dos cepas de P. cepacia controlar el dafio causado porColletotrichum Iindemutianum.

La infecci6n en ramas de rosa se reduja en un 50% cuando Trichodermaharzianum fue aplicado, pero este no fue un control significativo de la marchitezde las flores comparado con las flares no tratadas. Se usaron exitosarnentedos agentes de control biol6gico, contra B. cinerea en flores de rosa durante elalmacenaje a 2.5°C; sin embargo, cuando algunas de las flores fueron puestasa temperatura ambiente (21°C) se desarrol16 la enfermedad. La difieultadpara el uso del control biol6gico contra est a enfermedad en rosa, parecedeberse a la naturaleza latente del pat6geno en este producto.

En los ultirnos aries se han realizado diversos esfuerzos para controlar la en-fermedad provocada por el hongo B. cinerea, conocida como enfermedad del"moho gris", mediante la utilizaci6n de otros rnetodos como el uso de plasticoscon filtro ultravioleta que afectan la esporulacion, reducci6n de la humedad,aumento de la ventilaei6n yel uso de antagonistas biol6gicos entre otros. Losinvernaderos eubiertos con plasticos de onda larga que absorben infrarojo,pueden redueir la humedad relativa por la reducci6n del frio durante la nochedentro del invernadero. Adernas, las cubiertas selectivas de longitud de onda,bloquean la luz ultravioleta incrementando la proporci6n de UV azul, la eualinhibe la germinaci6n de B. cinerea (Hausbeck & Moorman, 1996).

EI control integrado de B. cinerea en rosa y en otros cultivos ornamentalesdepende de un mayor conocimiento de la biologia del pat6geno y de la plantahospedante (Marois & Broome, 1985). Asf como de la combinaei6n de las

, 8 Fitopatologta en Hares, Garces de Granada et at.

diferentes tecnicas rnecanicas, fisicas, qufmicas y biol6gicas, can las cuales seha obtenido cierto exiro.

La capacidad antag6nica de diversas especies y aislamientos de Trichodermaen el control de hongos como F. oxysporum y B. cinerea vana de especie a especiedemostrando mayor efectividad Trichoderma harzianum y Trichoderma hamatum;debido a la gran potencialidad de los suelos colombianos para albergardiversas especies de hongos controladores, en un estudio para analizar elpotencial de estas especies se aislaron setenra aislamientos de Trichoderma spp.y quince de G/iocladium spp. de suelos colombianos, con el prop6sito de evaluarsu actividad como agentes de biocontrol de F. oxysporum f. sp. dianthi en clave!y Phoma chrysanthemicola en pomp6n (Garces de Granada et al., 1999).

Tarnbien fue de gran importancia encontrar que las perdidas de Statice cau-sad as por B. cinerea Pers. son reducidas al combinar el uso de fungicidas comoRonilan, Rovral, Folicur, con Trichoderma hamatum y un manejo cultural comornetodo integrado de control (Dlaz et al., 1999). Existe una gran actividadmicoparasitica de algunos aislamientos de Trichoderma harzlanum y Trichodermahamatum sobre el pat6geno Rhizoctonia solani (Hadar et al., 1978; Chet et al.,1981 y Elad et ai, 1983).

Adicionalmente, se ha establecido que una de las estrategias para el control delmarchitamiento ocasionado por F. oxysporum f. sp. dianthi es mediante el uso dealgunos metodos biol6gicos como Pseudomonas putida (Scher & Baker, 1982),Serratia liquefasciens (Sneh et al., 1985), Bacillus subtilis (Filippi et al., 1987).Igualmente otros investigadores han encontrado resultados satisfactorios decontrol de algunas formas especiales de F. oxysporum con aislamientos no pato-genicos de F. oxysporum, Fusarium solani y Fusarium spp. tales como F. oxysporum f.sp. gladioli (Magie, 1980) F. oxysporum f. sp. melonis (Alabouvette, 1986; Li &Zhang, 1990). F. oxysporum f. sp. cucumerlnum (Paulizt et al., 1987), F. oxysporumf. sp. batatas (Ogawa & Komada, 1988) y F. oxysporum f. sp. radicis -!yeapersici.

La poblaci6n de F. oxysporum puede incrementarse aunque se esten empleandometod os de control biol6gico, debido, a la irrigaci6n ya procesos de fertiliza-ci6n, los cuales proveen al hongo pat6geno de condiciones 6ptimas de hume-dad y nutrici6n para su germinaci6n. En estudios realizados en fincas floricul-toras de la sabana de Bogota, se ha observado que solarnente despues de variosmeses el nivel de infestaci6n pat6gena ha decrecido sugiriendo una colonizaci6ndel suelo por parte del antagonista; por tanto, es recomendable el tratamientodel terreno con los controladores biol6gicos pero con algunos meses de anti-cipaci6n a la siembra para optimizar los resultados (Garcia etal., 1999).

Acta Biologica Colombiana, Vol. 4 No.2, 1999 19

EI uso de aislamientos no patogenicos de F. oxysporum 0 de aislamientos deF. oxysporum f. sp. dianthi de muy baja patogenicidad se vislumbra como unrnetodo biol6gico de gran potencial de control bajo las condicionescolornbianas, que debe evaluarse en cultivos cornerciales, en contraste con eluso de otros agentes biol6gicos como Trichoderma spp., Pseudomonas putiday Serratia liquefasciens cuyos resultados de control de la enfermedad no han sidoefectivos bajo condiciones de invernaderos comerciales de clave]. EI procesopor el cual la planta es protegida de la infecci6n consiste en el estimulo pro-ducido a las defensas de la planta, mediante la producci6n de fitoalexinasy otras sustancias que detienen el desarrollo de la enfermedad.

EI efecto de la inoculaci6n de Trichoderma spp. a raices cortadas de clavel yposteriormente sembradas en sue los tarnbien inoculados con este hongo,permite evaluar el antagonismo y posible parasitismo sobre F. oxysporum f. sp.dianthi. Existe una relaci6n entre F. oxysporum y el nematode Heterodera trifolii,relaci6n en la cual se desarrolla abundante micelio alrededor de los huevos yc1amidosporas del hongo dentro de los quistes del nematode. Para el controlbiol6gico de F. oxysporum se han seleccionado aislamientos de Trichoderma spp.con la implementaci6n de programas para el control del nematode siendoposible el crecimiento de variedades susceptibles de clavel sin el uso detratamientos 0 desinfecci6n quimica en el suelo (Martinez & Pinz6n, 1999).

AGRADECIMIENTOS

Departamento de Biologia, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional deColombia, Sede Bogota.

BIBLIOGRAFIA

AGRIOS, G. N. 1986. Fitopatologia. Editorial Limusa, Mexico D.F.

1997. Plant Pathology, Fourth Edition. Academic Press, San Diego.

ALABOUVETTE, C. 1986. Fusarium wilt - suppressive soils from Chateaurenardregion: review of a 10 year study. Agronomie 6: 273-284.

ARBELAEZ, G. 1987. Fungal and bacterial diseases on carnation in Colombia.Acta Horticulturae 216: 151-157.

20 Fitopatologfa en flores, Garces de Granada et at.

______ 1988. Primer curso internacional sabre pat6genos vasculares delclavel. Enfermedades vasculares del c1avelen Colombia: aspectos hist6ricosy situaci6n actual. Asocolflores. Noviembre 8-11 de 1988. Bogota.

______ 1989. Control de las enfermedades vasculares del clavel enColombia. Agronomfa Colombiana 6: 3-9.

______ 1999. Overview of the cut flowers pathology in Colombia.Acta Horticulturae 482: 91-96.

______ & CALDERON, O. L. 1991. Cuarto Simposio Internacional delClavel. Determinaci6n de las razas fisiol6gicas de Fusarium oxysporumf sp. dianthi del clavel de la sabana de Bogota. Septiembre 9-14 de1991, Bogota.

GARCES DE GRANADA, E., OROZCO DE AMEzQUITA, M.& CALDERON, O. L. 1996. Respuesta de algunas variedades de c1avelestandar a cuatro razas fisiol6gicas de Fusarium oxysporum f sp. dianthi.Agronomfa Colombiana. Vol XIII, 2: 117-127.

ASOCOLFLORES. 1991. Valor de las exportaciones colombianas de flares alos principales mercados mundiales. Revista Asocolflores 27: 50-51.

BAAYEN,R. P. 1988. Fusarium wilt of carnation. Disease development, resistancemechanism of the host and taxonomy of the pathogen. Thesis. University ofUtrecht, Holland.

& ELGERMA, D. M. 1985. Colonization and histopathology ofsusceptible and resistant carnation cultivars infected with Fusarium oxyaporumf sp. dianthi. Netherlands Journal of Plant Pathology 91: 119-135.

& DE MAAT A. L. 1987. Passive transport of microconidia ofFusarium oxysporum f. sp. dianthi in carnation after root inoculation.Netherlands Journal of Plant Pathology. 93: 3-13.

BADEL,j. & KELEMUT,S. 1994. Inhibici6n in vitro de Colletotrichum gloeosporoidesPenz. y otros hongos fitopat6genos par filtrado de cu Itivos de Bacillussubtilis. Fitopatologfa Colombiana. Bogota. 18 (1 ).

BAKER, R. 1978. Inoculum potencial. In j.D. Horsfall and E.B. Cowling (Eds).Plant Pathology: and advanced treatise. Valli. Academic Press. New York.

Acta Biol6gica Colombiana, Vol. 4 No.2, 1999 21

1980. Measures to control Fusarium and Phialophora wilt ofcarnations. Plant Disease 64: 743-749.

1985. Biological control of plant pathogens: definitions. In:M.A Hoy and D.C. Herzog Eds. Biological control in Agricultural. IPMsystems. Academic Press. New York.

BOOTH, C. 1970. Fusarium oxysporum. CMI descriptions of plant pathogenic fungiand bacteria. No. 211. Commonwealth Agricultural Bureaux. London.

BUITRAGO, j., SAAVEDRA,A. & ARBELAEZ, G. 1982. Botrytis cinerea Pers.,agente causal de la pudricion de las flares y de la corona del Estatice(Limonium sinuatum Mill.). Tesis. Facultad de Agronomia, UniversidadNacional de Colombia.

BURBANO, L. E. & ERAZO, A. 1990. Efecto de la utilizacion can nitrogenosabre la incidencia de Fusarium oxysporum f. sp. dianthi y Heterodera trifoliiG. en c1avel. Tesis. Universidad Nacional de Colombia.

BURITICA, P. 1995. Impacto de las enfermedades de las plantas en Colombia.Fourth Edition. ASCOLFI informa 21 (1): 2-12 California.

CAMPO, R. 1994. Control Biologico de Macrophomina phaseolina (Tassi) Goiden frijol (Phaseolus vulgaris L.) con Rizobacterias. FitopatologiaColombiana. Bogota. 18 (1).

CEVALLOS,j. F. & GONzALEZ, D. 1989. Determinacion de las razas fisio-logicas de Fusarium oxysporum f. sp. dianthi en clavel (Dianthus caryophyfus)en la sabana de Bogota. Tesis. Facultad de Ciencias, UniversidadNacional de Colombia.

CHAvES, J. F. & HENAO, j. 1981. Estudio del poder patogenico de Botrytiscinerea sabre cinco especies de flares de exportacion. Tesis. Facultad deAgronomia, Universidad Nacional de Colombia.

CHEAH L. H. & IRVING D. E.1997. Influence of CO, and Temperature on theincidence of Botrytis storage rot in beans. New Zealand Journal of Cropand Horticultural Science. 25(1): 85-88.

CHET, I., HARMAN, G. & BAKER, R. 1981. Trichoderma, its hyphal interactionwith Rizoctonia solani and Pythium sp. Microbial Ecology 7: 29-38.

22 Fitopatolog/a en flores, Garces de Granada et 01.

DfAZ, N. c., BARRERA, M.). & GARCES DE GRANADA, E. 1999 ControllingBotrytis cinerea Pers. In statice (Limonium sinuatum Mill) "Midnight blue"cultivar. Acta Horticulturae 482: 235-238.

ELAD, Y., CHET, I., BOYLE, P. & HEN IS, Y. 1983. Parasitism of Trichodermaspp. on Rhizoctonia solani and Sclerotium rolfsii. Scanning electronmicroscopy and fluorescence microscopy. Phytopathology 73: 85-88.

FILlPI,c., BAGNOLl, G., VOLTERRANI,M. & PISSI,G. 1987. Antagonistic effect ofsoil bacteria on Fusarium oxysporum f sp. dianthi (Prill. And Del.) Snyd. AndHans. III.Relation between protection against Fusarium wilt on carnation andbacterial antagonists colonization of roots. Plant and soil 98: 161-168.

FLETCHER,). T. & MARTIN). A. 1972. Spread and control of Fusarium wilt incarnation. Plant Pathology 25: 81-84.

FRINKING, H. D. 1991. Aerobiology of "Closed" Agricultural Systems. Grana30: 481-485.

GARCES DE GRANADA, E. 1985. EI nernarodo quiste Heterodera trifolii G. unanueva enfermedad del c1avel en Colombia. Agronomia Colombiana.Revista Asocolflores No.5.

1987. EI nogal Uuglans neotr6pica) un hospedante deMeloidogyne en Colombia. Boletin Departamento de Biologfa,Universidad Nacional de Colombia 2 (7).

______ 1995. Simposio Internacional: EI manejo integrado de plagasy enfermedades en floricultura. EI moho gris y el cultivo de flares deexportaci6n en Colombia. Asocolflores.

1998. Algunos aspectos de la biologfa del hongo Botrytiscinerea Pers. "Moho gris" de las flares (en prensa).

______ & ARBELAEZ, G. 1985. Estudio de razas del hongo Botrytisanerea Pers., y su patogenicidad en algunas especies de flares deexportaci6n. Boletin Departamento de Biologfa, Universidad Nacionalde Colombia. 2 (6): 41-56.

_____ , OROZCO DE AMEZQUITA, M., SINISTERRA, G., MEDINA,0., ACOSTA, J., PENARANDA & ARBELAEZ, G. 1992. Soluble protein

Ada Bio/6gica Colombiana, Vol. 4 No.2, 1999 23

contens, isozome characterization, bennomyl response, vegetativecompatibity and micelial growth of Fusarium oxysporum f. sp. dianthi. ActaHorticulturae 307: 73-82.

____ --,---' OROZCO DE AMEZQUITA, M. CARVAJAL, L. M,ARBELAEZ, G., SALAMANCA, M. & LEE, R. 1999. Evaluation of theability of native isolates of Trichoderma spp. and Glioe/adium spp. tocontrol Fusarium oxysporum f. sp. dianthi in carnation and Phomachrysantemicola in crysanthemun. Acta Horticulturae 482: 163-168.

_____ , OROZCO DE AMEZQUITA, M. &ARBELAEZ, G. 1999 Usingaryl esterase electrophoresis techniques to distnguish between Fusariumoxysporum f. sp. dianthi races. Acta Horticulturae 482: 133-137.

GARCIA, P. G., PASCUAS, A. M. & GARCES DE GRANADA, E. 1999 Effect oftwo Trichoderma spp. isolates on Fusarium oxysporum f. sp. dianthi In

carnation (Dianthus caryophyllus). Acta Horticulturae 482: 153-157.

GARIBALDI, A.; LENTO, G. & ROSSI, G. 1986. Indagine sulla difussione deipatotipi di Fusarium oxysporum f. sp. dianthi nelle colrure dianticole liguri.Panorama Floricolo 11: 1-4.

GASIORKIEVICZ, E. C. 1960. Influence of nitrogen and potassium nutritionlevels on the development of Fusarium systemic wilt of carnations.Phythopatology 50: 636.

GOULD, A., KOBAYASHI, D., & BERGEN, M. 1996. Identification of Bacteriafor biological control of Botrytis cinerea on Petunia using a petal diskassay. Plant Disease. Vol. 80 No.9. 1029-1033.

HADAR, Y., CHIT, I. & HEN IS, Y. 1978. Biological control of Rhizoctonia solanidamping off with wheat bran culture of Trichoderma harzianum.Phytopathology 69: 64-68.

HANDEL, J., RAFFEL, S., MESTER, E., WUNDERLICH, L. & GRAU, G. R.1990. Biological Control of "damping off" of Alfalfa seedlingswith Bacillus cereus UW 85. App Enviromental Microbiology.56: 713-718.

HAUSBECK, M., & MOORMAN, G. 1996. Managing Botrytis in greenhouse-grow flower crops. Plant Disease. 80 (11): 1212-1219.

24 Fitopatologfa en flores, Garces de Granada et ol.

HOLLEY, W. D. & BAKER, R. 1991. Carnation Production II. Kendall/HuntPublishing Co. Debuque. Iowa.

HaRTS, R. K. & NELSON. 1976. Diseases of Chrysanthemun. InformationBulletin 85. New York.

JARVIS, W. R. 1977. Botrytis and Botryotinia species: Taxonomy, phisiologyand pathogenecity. Monograph No. 15. Research branch. Canada.Deparment of Agriculture. Otawa. Canada.

______ 1981. Taxonomy, pp. 1 - 18. En: J. R. Coley-Smith, K. Verhoeffand W. R. Jarvis. The biology of Botrytis. Academic Press. London.

KAMOEN,0.,&JAMART,G. 1974. Eed phytotoxisch polysaccharide afgeschiedendoor Botrytiscinerea. Proc. Int. Symp. Fytofarm. Fytiat. 25: 1467-1476.

LARSON R. A. 1992. Introduction to Floriculture. 2a. Edici6n. AcademicPress, Inc. California.

LAUBER, H. P. 1971. Variabilitat und Kernverhaltnisse bei Botrytis cinerea.Schweiz. Landwirtsch. Forsch. 10: 1-64.

L1,J. &ZHANG, S. 1990. Effects of preinoculation of non-pathogenic Fusariumoxysporum on the growth of Fusarium wilt of watermelon. ChineseJournalof Biological Control 6: 165-169.

MAGIE, R. O. 1980. Fusarium disease of gladioli controlled by inoculation ofcorms with non-pathogenic fusaria. Proc. Florida State HorticulturalSociety 93: 172-175.

MAROIS, J. J. & BROOME, C. J. 1985. Biological control of Botrytis cinerea onroses. Society of American Florists. S.A.F. Virginia.

MARTINEZ, G. & PINZON, L. 1999. New strategies in the integrated diseasemanagement of the vascular wilt of carnation (Dianthus caryophylus L.)caused by Fusarium oxysporum f. sp. dianthi (Pril & Del.) Snyd. & Hans.Acta Horticulturae 482: 139-143.

MATTHEWS, P. 1978. Variation of English Isolates of Fusarium oxysporum f. sp.dianthi. Proceedings of the Eucarpia meeting on carnation and gerbera.Alassio: 115-126.

Acta Biol6gica Coiombiona, Vol. 4 No.2, 1999 25

MOORMAN, G. W. & LEASE, R. J. 1992. Benzimidazole and dicarboximideresistant Botrytis cinerea. Pennsylvania greenhouses. Plants Disease. 76(5): 477-480.

NELSON, P. E. 1981. Life cycle and epidemiology of Fusarium oxysporum.51-80. In M. E. Mace, A:A: Bell and C. H. Beckman (Eds.). Fungal wiltdiseases of plants. Academis Press. New York.

NELSON, P. E., TOUSSOUN, T. A. & MARASAS, W. F. O. 1983. Fusariumspecies. An illustrated manual for identification. The Pensylvania StateUniversity Press. University Park of London.

OGAWA, K. & KOMADA, H. 1984. Biological control of Fusarium wilt of sweetpotato by non-pathogenic Fusarium oxysporum. Ann. Phytopathol. Soc.Japan 50: 1-9.

PARDO-CARDONA, V. M. 1995. Hongos Fitopat6genos de Colombia. Cen-tro de Publicaciones. Departamento de Biologfa, Facultad de Ciencias,Universidad Nacional de Colombia, Sede Medellin.

PAULlTZ, T. c., PARK, C. S. & BAKER, R. 1987 Biological control of Fusariumwilt of cucumber with non-pathogenic isolates of Fusarium oxysporum.Canadian Journal of Microbiology 33: 349-353.

POZZA E. A., SOUZA P. E. D., BRITO C. H. D. & CARDOZO M. A. F. C.1996. Ocurrence of fungi and bacteria associated with disease ofornamental plants in Lavras-MG, Brazil. Ciencia e Agrotecnologia. 20(1): 39-44.

PRIETO, L. M., OCHOA, G. R. & GARCES DE GRANADA, E. 1999.Susceptibility of five Dendranthema grandiflora cultivars to Phoma sp. andevaluation of a biocontroller. Acta Horticulturae 482: 219-221.

RODRIGUEZ, A. 1995. Efecto de plastico fotoselectivo y de una pantallaclirnatica en la enfermedad causada por Botrytis cinerea Pers. y en elnegreamiento de los petalos en un cultivo de rosas (Rosa hybrida).Tesis, Facultad de Agronomfa, Universidad Nacional de Colombia.

SCHER, F. M. & BAKER, R. 1980. Mechanisms of biological control in aFusarium - supresive soil. Phythopathology 70: 412-417.

26 Fitopatolog/a en flores, Garces de Granada et al.

SCOVEL, G. 1987. Improved agrotechnical and sanitation methods versusresistant cultivars as a mean of avoiding Fusarium wilt. ActaHorticulturae 216: 55-61.

SHAUL, 0., ELAD, Y., KIRSHNER, B., VOLPIN, H. & ZIESLlN, N. 1992.Control of Botrytis cinerea in cut rose flowers by gibberellic acid, ethyleneinhibitors and calcium. Pudoc Scientific Publishers.

SNEH, B., OGAMI, O. & BAKER, R. 1985. Biological control of Fusarium wiltin carnation with Serratia liquefasciens and Hafnia alvei isolated fromrhizosphere of carnation. Phytopathologishe Zeitschrift 113: 271-276.

SPARNAAIj, L. D. 1978. Current research on carnation with special referenceto breeding. Proceedings of the Eucarpia meeting on carnation andgerbera. Alassio: 47-55.

STEPHEN, N. 1997. Botrytis Gray Mold in Greenhouse Floral Crops. PlantPathology. http://wwvv.ag.ohio-state.edu/-ohioline/. Extension Factsheet.Van Lenjenen and Woers, 1988. Welles, 1992. Ohio State University

TRAIMER, R., PIONNAT, j. C. & METAY,C. 1983. Epidemiology of Fusariumwilt during propagation of carnation. Acta Horticulturae 141: 71-77.

WRIGHT, G. K., PASCOE, I., VAN HESSWIJCK, R., GUEST, D. &WIMALAJEEWA, S. 1991. Fourth International Simposium ofCarnation. Characterization of isolates of Fusarium oxysporum fromcarnation in Victoria. September 9-14, 1991, Bogota.

YODER, O. C. & WHALEN, M. L. 1973. Variation in virulence of Botrytis cinereaisolates to stored cabbage. Phytopathology 63: 210.