Tugas kimia BioorganikAnis Wahyu Fadhilah / 4311411023

Review dari artikel :enzymatic synthesis and Anti-Allergic Activities of curcumin OligosaccharidesKei shimoda1 and hiroki hamada21Department of Chemistry, Faculty of Medicine, Oita University, 1-1 hasama-machi, Oita 879-5593, Japan. 2 Department of Life science, Faculty of science, Okayama University of science, 1-1 ridai-cho, Kita-ku, Okayama 700-0005, Japan.

sintesis enzimatik dan Uji Aktivitas Anti-alergi dari kurkumin oligosakaridaAbstrak: Kurkumin 4'-O-galactooligosaccharides disintesis oleh dua step-enzimatik menggunakan almond -glukosidase dan siklodekstrin glucanotransferase (CGTase). Kurkumin terglukosilasi menjadi curcumin 4'-O--D-glucopyranoside oleh almond -glucosidase menghasilkan 19% rendemen. Curcumin 4'-O--D-glucopyranoside diubah menjadi curcumin 4'-O--galactooligosaccharides, yaitu 4'-O--maltosida (51%) dan 4'-O--maltotrioside (25%), dengan CGTase-katalis glikosilasi berlebih. Curcumin 4'-O--glikosida menunjukkan aktivitas penekanan pada pembentukan antibodi IgE dan efek penghambatan pada pelepasan histamin dari sel mast peritoneum tikus. Kata kunci: curcumin, -glucooligosaccharide, almond -glucosidase, siklodekstrin glucanotransferase, aktivitas anti-alergiPengantarCurcumin [1,7-bis(4-hidroksi-3-metoksifenil) -1,6 heptadien-3-,5-dion] merupakan prinsip penting antara kurkuminoid yang ditemukan di Curcuma longa Linn., yang telah digunakan selama berabad-abad sebagai bumbu. Baru-baru ini, banyak Perhatian telah dibayarkan kepada sifat farmakologi kurkumin karena potensi untuk menjadi sangat berguna obat. Curcumin telah banyak dipelajari untuk antioksidan nya, antikanker, dan efek anti-inflamasi. Terlepas dari sifat farmakologi nya, curcumin tidak larut dalam air dan kurang diserap setelah lisan administrasi.Glikosilasi biologis memungkinkan air-larut dan senyawa organik yang tidak stabil yang akan dikonversi menjadi sesuai yang larut dalam air dan stabil senyawa melalui nyaman satu langkah enzimatik glikosilasi. Selanjutnya, glikosida dari senyawa aktif fisiologis, yaitu vitamin glikosida, telah dilaporkan untuk menjadi agen antiallegic berguna. Nilai terapi kurkumin glikosida adalah kepentingan farmakologis. Di sini kita melaporkan sintesis enzimatik kurkumin 4'-O--glucooligosaccharides dan sifat anti-allegic mereka. Bahan dan Metode UmumKurkumin dibeli dari Tokyo Kasei KogyoCo Ltd dan dimurnikan dengan kolom silika gelkromatografi sebelum digunakan untuk percobaan ini.Almond -glucosidase dibeli dari Wako Kimia Murni Int. Ltd dan cyclodexringlucanotransferase (CGTase) adalah dari Amano Pharmaceutical Co. Ltd. 1H NMR (nuklirresonansi magnetik) (400 MHz), 13C NMR (100 MHz),HH COSY (spektroskopi korelasi), CH COSY, danHMBC (korelasi berganda-ikatan heterobuclear)Spektrum diukur dengan menggunakan Varian XL-400spektrometer di CD3OD dan kimia pergeseran diekspresikan dalam (ppm) mengacu pada tetrametilsilan. The HRFABMS (resolusi tinggiatom cepat spektrometri massa pemboman) spectrum dicatat menggunakan JEOL MStation JMS-700 spektrometer. sintesis kurkumin 4'-O--D-Glucopyranoside Curcumin 4'-O--D-glucopyranoside disiapkan sebagai berikut. Untuk campuran (20 ml) asetonitril dan air (9:1 v/v) yang mengandung 5mmol dari D-glukosa dan 500 U almond -D-glucosidase ditambahkan 5 mmol kurkumin. Campuran diinkubasi dengan pengadukan selama 48jam pada 40C. Campuran reaksi dipekatkan dengan penguapan dengan pengurangan tekanan, dan residu dimurnikan dengan kolom kromatografi pada silika gel untuk memberikan curcumin 4'-O--D-glucopyranoside.sintesis kurkumin 4'-O--GlucooligosaccharidesUntuk larutan yang mengandung 1 mmol kurkumin 4'-O--D-glucopyranoside dan 5 g pati dalam 25 mM penyangga natrium fosfat (pH 7,0) ditambahkan 100 U dari CGTase. Setelah pengadukan campuran reaksi pada 40 C selama 24 jam, campuran disentrifugasi pada 3000 g selama 10 menit. Supernatan dikenakan pada kolom Sephadex G-25 diseimbangkan dengan air untuk menghilangkan CGTase. Fraksi yang mengandung glikosida yang dimurnikan dengan HPLC preparatif untuk memberikan dua curcumin 4'-O--glucooligosaccharides, yaitu curcumin 4'-O--maltosida dan kurkumin 4'-O--maltotrioside.Kegiatan anti-alergiaksi penekan pada IgE pembentukan antibody Aksi penghambatan curcumin 4'-O--glikosida pada pembentukan antibodi IgE diperiksa sebagai berikut. Ovalbumin digunakan sebagai antigen (1mg/tikus), dan Al(OH)3 dan vaksin pertissius digunakan sebagai adjuvant (20mg dan 0,6ml/tikus, masing-masing). Sensitisasi dibuat oleh injeksi campuran (0,6ml) dari antigen dan adjuvant ke dalam cakar masing-masing tikus (jantan, ca. 200 g). Edema Paw diukur 24 jam setelah injeksi dan diperlakukan tikus dibagi dalam kelompok-kelompok dengan rata-rata sama pembengkakan volume. Setiap sampel dilarutkan dalam garam fisiologis yang mengandung 10% Nikkol dan larutan disuntikkan ke tikus setiap hari selama 11 d dimulai pada hari pengelompokan. Hidrokortison digunakan sebagai kontrol positif. Jumlah tersebut IgE diukur dengan kutan pasif metode anafilaksis pada hari ke-15. Hasil dinyatakan sebagai rata-rata tingkat IgE plasma 5 tikus diberikan total 10 mg / kg setiap tes majemuk.Penghambatan pada pelepasan histamine dari tikus sel mast peritonealEfek kurkumin 4'-O--glikosida pada histamine rilis dari sel mast peritoneum tikus diperiksa sebagai berikut. Sel mast Peritoneal dikumpulkan dari rongga perut tikus (Pria tikus Wistar, Nippon SLC) dan dimurnikan ke tingkat yang lebih tinggi dari 95% sesuai dengan metode yang telah dijelaskan sebelumnya. Sel mast tersebut dimurnikan disuspensikan dalam fisiologis larutan buffer yang mengandung 145mM NaCl, 2,7mM KCl, 1,0mM CaCl2, 5,6mM glukosa, dan 20mM HEPES (pH 7,4) untuk memberikan sekitar 104 tiang kapal sel / mL. Sel viabilitas selalu lebih besar dari 90% sebagaimana dinilai oleh tripan tes pengecualian biru. Sel mast yang preincubated dengan senyawa uji (1M) selama 15menit pada suhu 37C, dan kemudian terkena senyawa 48/80 di 0,3mg/ml. Pelepasan histamine ditentukan dengan alat tes fluorometric menurut Metode yang dilaporkan sebelumnya, 18 dan diungkapkan sebagai persentase dari total histamin.

Hasil dan Diskusisintesis kurkumin 4'-O--GlucooligosaccharidesCurcumin 4'-O--D-glucopyranoside (2) adalah disintesis oleh almond -D-glucosidase-katalis reverse-hidrolisis. Inkubasi kurkumin (1) dengan almond -D-glucosidase di hadapan glukosa dalam asetonitril / air (9:1) pelarut memberikan curcumin 4'-O--D-glucopyranoside (2) di 19% hasil. Glikosilasi enzimatik curcumin 4'-O--Dglucopyranoside (2) dengan CGTase diberikan curcumin 4'-O--glucooligosaccharides (Gambar 1). Pati terlarut digunakan sebagai donor-glukosa. Dua glikosilasi produk 3 dan 4 diisolasi oleh preparatif yang HPLC pada kolom YMC-Pack R & D ODS. Itu senyawa 3 dan 4 diidentifikasi sebagai curcumin 4'-O--maltosida (3, 51%) dan curcumin 4'-O--maltotrioside (4, 25%) atas dasar HRFABMS, 1H dan 13C NMR, H-H COSY, C-H COSY, dan HMBC-spectra.

Aktivitas anti-alergiTindakan supresif kurkumin 4'-O--glikosida 2-4 pada pembentukan antibodi IgE diselidiki by di vivobioassay menggunakan ovalbumin sebagai antigen. Rata-rata tikus tingkat IgE plasma setelah pengobatan dari ovalbumin dengan atau tanpa senyawa uji adalah diperiksa dan diringkas dalam Tabel 1. The aktivitas penghambatan kurkumin 4'-O--glikosida 2-4 lebih tinggi dibandingkan dengan hidrokortison. Curcumin 4'-O--D-glucopyranoside (2) dipamerkan tertinggi aktivitas penekan di antara tiga curcumin 4'-O--glikosida; aktivitas penghambatan menurun pada urutan 2, curcumin 4'-O--maltotrioside (4), dan curcumin 4'-O--maltosida (3). Hasil ini menunjukkan bahwa curcumin 4'-O--glikosida 2-4 akan bertindak sebagai agen anti-alergi yang berguna.Efek kurkumin 4'-O--glikosida 2-4 pada senyawa 48/80- terinduksi pelepasan histamin dari tikus sel mast peritoneal diperiksa. Tingkat tinggi histamin (kontrol, 41%) dibebaskan dari tikus sel mast peritoneal, yang telah dirangsang dengan 0,35g / ml senyawa 48/80 (Tabel 2). Curcumin 4'-O--D-glucopyranoside (2) efektif menghambat senyawa 48/80-induced pelepasan histamine dari sel mast peritoneum tikus;% penghambatan 1 adalah 70%. Kegiatan penghambatan curcumin 4'-O--maltosida (3) dan 4'-O--maltotrioside (4) yang 46 dan 58%, masing-masing. Temuan ini menyarankan bahwa curcumin glikosida yang memiliki -glukosida dan -glucooligosides pada posisi C-4 'yang memiliki kuat aktivitas penghambatan terhadap pelepasan histamin dari sel mast. Baru-baru ini, kami melaporkan bahwa glikosilasi enzimatik senyawa aktif secara fisiologis drastic meningkatkan mereka air-kelarutan dan bahwa glikosida bertindak sebagai agen anti-alergi yang potensial. Itu glikosida vitamin E menunjukkan aksi penekan pada pembentukan antibodi IgE dan orang-orang dari polifenol efek penghambatan dipamerkan pada pelepasan histamin dari tikus sel mast peritoneal. Hasil yang diperoleh di sini menunjukkan bahwa dua langkah enzimatik glikosilasi dengan almond -D-glucosidase dan CGTase berguna untuk mempersiapkan curcumin 4'-O--glikosida dan curcumin 4'-O--glikosida memiliki kuat anti-alergi kegiatan

kesimpulanCurcumin 4'-O--glikosida, yaitu 4'-O--glukosida, 4'-O--maltosida, dan 4'-O--maltotrioside, yang berhasil disintesis melalui enzimatik glikosilasi oleh almond -D-glucosidase dan CGTase. Tiga curcumin 4'-O--glikosida menunjukkan tindakan penekanan pada pembentukan antibodi IgE dan efek penghambatan yang signifikan ditunjukan pada histamine melepaskan dari sel mast. Curcumin 4'-O--glukosida menunjukkan aktivitas penghambatan tertinggi untuk kedua IgE

Anis Wahyu Fadhilah / 4311411023