Rini Sundari Harjono Fakultas Kedokteran Unjani

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

1

Teknologi Hematologi Manual

Semiautomated Automated

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

2

Manual low cost (equipment & reagent) labour intensive competence

consumed time REFERENCE FOR STANDARDIZATION OF THE METHODS

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

3

Automated high capital cost permit rapid performance of large number smaller number of technician more precise accuracy : correct calibration reagents : closed system

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

4

Basic Haematology Tests Hemoglobin (Hb)

Hematokrit (Ht/Hct/PCV) Laju endap darah (LED/ESR) Hitung jumlah sel (leukosit, trombosit, eritrosit) Hitung jenis sel

Morfologi darah tepi Morfologi sumsum tulang30/11/2009Hematologi: Rini HW

5

Antikoagulan EDTA (ethylenediaminetetra-Acetic Acid)1 Sodium Potassium rutin hematologi

Lithium Chellating effect on the calcium molecul in blood FBC 1,2 mg/ml darah (4 mmol)

K2EDTA: sangat mudah larut (1650 g/L) Na2EDTA 108 g/L Li2EDTA 160 g/L (analisis kimia)

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

6

EDTA (ethylenediaminetetra-Acetic Acid)2 K3EDTA (liquid) rekomendasi NCCLS Penciutan eritrosit PCV 2-3%/4 jam Peningkatan MCV ICSH merekomendasikan Na2EDTA

(1,5 + 0,25 mg/mL darah), bukan Na3EDTA >> EDTA :

Eritrosit dan leukosit dan morfologi

30/11/2009

Trombosit membengkak pecah, fragmented , jumlah Basophilic stippling hilang Leukoaglutinasi (netrofil dan limfosit)Hematologi: Rini HW

7

Trisodium Citrate (109 mmol/L) Na3C6H5O2.2HO2

Pemeriksaan koagulasi 1 : 9 Pemeriksaan LED 1 : 4

Campuran EDTA + citrate + dextose (acid

citrate oxidase [ACD] atau larutan Alsever preservasi eritosit untuk pemeriksaan tertentu dan transfusi

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

8

Heparin (109 mmol/L) Lithium atau sodium 10 20 IU/mL darah Kimia, AGD, emergency test

Tidak mempengaruhi ukuran eritrosit

dan tidak lisis : osmotik fragilitas, immunophenotyping Tidak digunakan untuk leukosit dan trombosit

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

9

Stabilitas1 RBC, WBC, PLT Terbaik kurang dari 2 jam 8 jam 24 jam

: suhu kamar : 40 C

NAE 8 jam ? PCV dan MCV meningkat,

fragilitas osmotik meningkat, dan ESR menurun Retikulosit (EDTA, ACD) stabil 24 jam pada suhu 40C, pada suhu kamar jumlah mulai menurun pada jam ke-6 Normoblas mulai hilang dalam 1-2 hari pada suhu kamar30/11/2009Hematologi: Rini HW

10

Stabilitas2 Hemoglobin: dalam 2 3 hari eritrosit lisis

RBC dan PCV MCH dan MCHC Tes koagulasi : sebelum 2 jam (22-240C), 4 jam (40C), 2 minggu (-200C), dan 6 bulan (700C) Apusan : kurang dari 1 jam 3 jam sudah mulai perubahan morfologi

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

11

Homogenitas Mechanical rotating mixer > 2 menit

Tabung dibolak-balik 8-10 kali Jika disimpan dalam suhu 40C hangatkan dalam

suhu kamar homogenisasi

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

12

Hemoglobin

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

13

Hemoglobinometri konsentrasi Hb diperkirakan dari warna (kombinasi

kandungan oksigen, CO, dan besi) oxygen-combining capacity darah: 1,34 mL O2 per g Hb hasil lebih rendah 2% daripada metode lain 0,347 g besi dalam 100 g Hb

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

14

30/11/2009

HAEMOMETER SAHLI (acid-hematin) Hematologi: Rini HW

15

HEMOGLOBIN: TALQVISTBuku pemeriksaan golongan darah metode Talqvist, A. Hasil dinyatakan dalam persentase yang selanjutnya dikonversi ke g/dL (100% setara dengan 15,8 g/dL) B. Hasil langsung dinyatakan dalam g/dL

A30/11/2009 Hematologi: Rini HW

B16

Spektrofotometer Haemoglobincyanide (HiCN; cyanmethaemoglobin):

ICSH Larutan Drabkin pH 8,6 modifikasi ICSH pH 7,0-7,4

Botol gelas borosilicate Jika suhu kamar > 300C simpan di refrigerator pH harus dicek 1 kali/bulan (pH meter)

Larutan jernih dan kuning pucat Panjang gelombang 540 nm Hemoglobin, Hi, HbCO ( SHb)

Spesifik Hb manusia (BM 64458; 16114 monomer)

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

17

Spektrofotometer Oxyhaemoglobin (HbO2) Kesulitan dalam menyiapkan HbO 2 yang stabil Tidak dipengaruhi oleh peningkatan bilirubin Hb, HbCO, Hi, SHb

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

18

Direct reading: Portable haemoglobinometer POCT Oxyhaemoglobin (HbO2) HemoCue System (HemoCue AB) Sodium nitrit dan sodium azide mengubah hemoglobin menjadi azidemethaemoglobin Tidak dipengaruhi: bilirubin, lipid, leukosit Panjang gelombang 565 dan 880 nm Penyimpanan 15-300C DHT Haemoglobinometer

Darah diencerkan 1 : 100 (0,4 g/L ammoniated water) Panjang gelombang 523 nm Hasil 8-10% dari metode standar30/11/2009Hematologi: Rini HW

19

Hematokrit (PCV)

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

20

Dalam kondisi normal:kadar Hb = 3 X jumlah eritrosit

kadar Hmt = 3 X kadar Hb

Hmt = 9 X E

Mikrohematokrit Tabung kapiler 75 mm, diameter 1 mm Plain atau 1 iu heparin

Sentrifus 5 menit, 12000 g PCV > 50% sentrifus 5 menit Darah EDTA 2%, EDTA > 2,2 mg/mL PCV

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

21

MIKROHEMATOKRIT B

A

C

F Dtabung kapiler

plasma

buffy coat

G

eritrosit

creatoseal

E30/11/2009 Hematologi: Rini HW 22

MAKROHEMATOKRIT

DCBahan pemeriksaan darah dengan antikoagulan EDTA

E

A

B

A Tabung Wintrobe B Pipet Pasteur (dengan ujung lancip-panjang) C Cara mengisi darah ke dalam tabung Wintrobe dengan pipet Pasteur D Perhatikan skala E Setelah disentrifus (3000 rpm, 30 menit) akan terpisah bagianbagian seperti tampak pada gambar, baca tinggi (persentase) hematokritHematologi: Rini HW 23

30/11/2009

Jumlah SelLeukosit, Trombosit, Eritrosit

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

24

MIKROSKOP

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

25

HAEMOSITOMETER

IMPROVED NEUBAUER

11

1

10.5

0.5

A

B

A

B

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

26

BILIK HITUNG

BIDANG BESAR L (BIDANG LEUKOSIT)

BIDANG BESAR TENGAH (BIDANG ERITROSIT)

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

27

NILAI ABSOLUT ERITROSIT MCHC (KHER) MCV (VER) MCH (HER)

Hb Hmt

X 100%

HmtEritrosit

X 10 c

Hb

Eritrosit

X 10 g

32-36 < 30 hipokrom

83-101 c (fL) 76-96 c (fL) mikrositer makrositer

27-32 g (pg)

g/dL

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

28

Retikulosit Sisa RNA

BCB, new methylene blue Jumlah retikulosit dalam n lpi Rata-rata jumlah eritrosit/lpi y

x

Jumlah eritrosit dalam n lpi n X y % retikulosit

[x : (nXy)] X 100% Absolute retikulosit % X eritrosit

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

29

Pewarnaan BCB

Pewarnaan Giemza30/11/2009Hematologi: Rini HW

30

LED dan Hitung Jenis Leukosit

30/11/2009

Hematologi: Rini HW

31