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Terapia Genica per il Deficit di Piruvato Chinasi
María G. Gómez, Sergio López, Rebeca Sanchez, Israel Orman, Juan A. Bueren, Susana Navarro, Jose C. Segovia,
Differentiation and Cytometry Unit. Hematopoietic Innovative Therapies Division
CIEMAT/CIBERER/IIS-FJD Madrid (Spain)
Hematopoietic
Innovative Therapies
IL DEFICIT DI PIRUVATO CHINASI ERITROCITARIA (PKD) 1° PATIENT’S DAY
MILANO, 16 MAGGIO 2015
Fondazione IRCCS Ca’ Granda Ospedale Maggiore Policlinico
Introdurre nella cellula acidi nucleici con l’informazione corretta che permettera’ , in via transitoria o permanente, l’espressione della proteina desiderata
Quale è lo scopo della terapia genica?
La proteina RPK normale, che è difettiva nei pazienti PKD
Come viene effettuata la Terapia Genica?
1. Le cellule vengono estratte dal pazente
2. Un virus viene modificato per impedirne la riproduzione pur mantenedo la capacita’ di penetrare nella cellula (vettore)
3. Il gene di interesse (PKLR sano) viene inserito nel vettore
4. Le cellule del paziente e il virus modificato vengono messi a contatto
5. All’ interno delle cellule avviene la correzione del gene
6. Le cellule corrette vengono iniettate nel paziente e iniziano a produrre la proteina sana
Cellule modificate
Gene
Quali cellule vengono modificate?
Eritrociti/Globuli Rossi ‐Emivita breve: 90 giorni
‐Necessità di essere “mantenuti”
Cellule Staminali Ematopoietiche(HSC)
-Vivono per sempre -Generano nuove cellule staminali ematopoietiche -Il loro lavoro è di produrre cellule del sangue -Sono nel midollo osseo ma possono muoversi altrove
Come funziona?
Eritrociti difettivi Eritrociti normali
Vettore virale che porta il gene RPK
sano
Il “farmaco” della terapia genica
Gene RPK sano
Come puo’ essere testato?
Tipologia di Topo Parametri Eritrocitari
Topo sano Topo con PKD Hb 13,8 g/dL 9,7 g/dl
HCT
46,2% 38,9%
GR 10,5 x 1012/L 6,39 x 1012/L
Sano PKD Sano PKD
Modelli murini per la carenza di piruvato chinasi
Pe
rce
ntu
ale
di re
tic
olo
cit
i
L’esperimento
Trapianto Autologo
Chemio- e/o Radio-terapia
Sono corretti?
30 dpt
60 dpt
90 dpt
Eri
tro
cit
i (1
x10
12/L
)
WT
I risultati: No anemia
Sano PKD Trapiantati con
cellule corrette
Trapiantati con
cellule corrette
Sano PKD
Morfometria della milza
0 50 100 150 200 250 300 350
Peso della milza (mg)
Sano
PKD
Trapiantati con
cellule corrette
I risultati: No splenomegalia
EU/3/14/1130
Disegno e Sviluppo del VIRUS TERAPEUTICO
1
2
Validazione In vitro
3
Studi preclinici in modelli murini (EFFICACIA and SiCUREZZA)
4 Designazione di ORPHAN DRUG
CLINICAL TRIALS
5
Registrazione del farmaco
6
Sviluppo della Terapia genica
Orphan Drug Designation in August, 2014
Vettore Lentivirale che contiene il gene RPK sano
PATIENTS SIDE DRUG SIDE
DISSEMINATION – EXPLOITATION
ForGeTPKD
P9 (SME1):
JC Ramírez
VIVE Biotech
San Sebastian –
Spain
P10:
Farzin Farzaneh
KCL
London – UK
P11:
J Mountford
Univ Glasgow
Glasgow – UK
P3:
P Bianchi
IRCCS
Milan - Italy
P4:
JL Vives
HClinB
Barcelona -
Spain
P6:
S Pissard
INSERM
Paris - France
P5:
L Ribeiro
CHUC
Coimbra -
Portugal
P2:
R van Wijk
UMCU
Utrecht- The
Netherlands
P7:
J Sevilla
SERMAS
Madrid - Spain
P1(Coordinator):
JC Segovia
CIBER
Madrid - Spain
VIRAL VECTOR PLATFORM
P8: E Montini HSR-TIGET
Milan – Italy
P12 (SME2): M Romero
IDETRA - Madrid - Spain
ENER
CA
EU PKD Patient’s association / Spanish Association for Rare Diseases
P13: N Mezzler
ECRIN Paris – France
P14:
I Badell
HPS
Barcelona -
Spain
The consortium
PATIENTS SIDE DRUG SIDE WP3: Final validation
studies of the gene
transfer protocol
PI: CIBER
WP2:Development of GMP a
lentiviral vector platform and
production of clinical grade
lentiviral vector
PI: VIVEbioTECH
WP1 Detalied analysis
of the pathophsiology
– Patient selection
and recruitment
PI: UMCU
WP6: Advanced Lentiviral
Developments for PKD
treatment
PI: VIVEbioTECH
ForGeTPKD
EN
ER
CA
EU PKD Patient’s association / Spanish Association for Rare Diseases
WP4: Collection, Transduction
and Transplantation of
Hematopoietic Progenitors
PI: ECRIN
WP5: Safety and Efficacy
evaluation of the Gene
Therapy Clinical Trial
PI: SERMAS
Gene Therapy
Clinical Trial
WP7: Dissemination and exploitation of the
results PI: IDETRA
WP8: Management
PI: CIBER
The consortium
Schema del Clinical Trial
Potential hospital of origin (Madrid, Barcelona, Spain; Utrecht, The Netherlands; Milan, Italy)
Raccolta di cellule staminali Ematopoietiche (HSC)
(Aferesi)
SERMAS (Madrid, Spain)
Purificazione HSC
Trasduzione Lentivirale
Congelamento HSC transdotte
Condizionamento, infusione HSC e monitoraggio del paziente
CIEMAT (Madrid, Spain)
Fresh, O/N Frozen
Fresh, less than 1 hour
Shipping:
Shipping:
Aumento medio del valore di emoglobina dopo intervento: 2g/dL
Courtesy of S. Pissard, Paris France
Studio Francese (dati preliminari)
Chi puo’ essere arruolato nel Clinical Trial ?
Mai trasfusi 30 %(18)
Surgery
Splenectomia 64 % (9)
splenectomia 52 % (11)
No splenectomia 36 % (5)
No splenectomia 48 %(10)
Nessun dato 12 % (7)
Continuous Transfusion
23 %(14)
Non più trasfusi 35 %(21)
Il vostro supporto
Australia; 44
Belgium; 38 Canada; 27
Cyprus; 1
Denmark; 81 Ecuador; 1
France; 125
Germany; 1
Greece; 7
Ireland; 2 Italy;
1
Latvia; 1
Mexico; 62
New Zealand; 3
Norway; 1
Pakistan; 1
Poland; 1 Portugal; 4
Rumania; 1 Saudi Arabia; 1
Spain; 164 Sweden; 1
UK; 35
USA; 135
Venezuela; 1
The Netherlands; 93 832 answers
Il vostro supporto
Sono un famigliare di un paziente
con la PKD
16% (131)
Sono un amico di un paziente con la PKD 51% (421)
Sono un parente di un bambino/adulto con la PKD
6% (48)
Sono un paziente
con la PKD 4% (37)
Altro 23% (195)
Link to PKD
Il vostro supporto
Differentiation and Cytometry Unit
Susana Navarro
Raquel Chinchón
Israel Orman
Oscar Quintana
María G. Bravo
Omaira Alberquilla
José Bustos
M. García-Gómez
Rebeca Sanchez
Sergio López
Sara Fañanás
Acknowledgements
IMM-UT (Houston) Brian Davis Ana Crane
Cellectis (Paris) Agnes Gouble Roman Galetto
Hospitals J. Sevilla (HNJ, Madrid) L. Riveiro (Portugal) MedCare CIEMAT
DNAvec (Japan) Noemi Fusaki
Patients and Healthy donors
HSR-TIGET E. Montini A. Calabria F. Benedicenti
Hannover University A. Schambach
Hematopoietic
Innovative Therapies Boston Univ. G. Mostoslavsky
King’s College London M. Antoniou
Agios Pharmaceuticals (Boston) Sh. Jin C. Kung P. Kosinski
PKreset
CIMA (Pamplona) X.Aguirre F. Prosper
CTCM (Madrid) F. García-Sanchez
Juan A. Bueren Galsgow Univ. (UK) J. Mountford E. Olivier
José Carlos Segovia Sanz
Differentiation and Cytometry Unit Hematopoietic Innovative Therapies CIEMAT, Madrid (SPAIN)
Thank you!