uso e interpretacion de las pruebas de diagnostico: serologia

DIAGNOSTICO DE BRUCELOSISDIAGNOSTICO DE BRUCELOSIS

Campaña Nacional contra la Campaña Nacional contra la Brucelosis en los animalesBrucelosis en los animales

USO E INTERPRETACION DE LASUSO E INTERPRETACION DE LASPRUEBAS DE DIAGNOSTICO: PRUEBAS DE DIAGNOSTICO:

SEROLOGIASEROLOGIA


PRUEBAS PRUEBAS SEROLOGICASSEROLOGICAS

• Evalúan la respuesta inmune Evalúan la respuesta inmune

humoral en líquidos orgánicos.humoral en líquidos orgánicos.• NingunaNinguna prueba serológica permite prueba serológica permite

descubrir la totalidad de los casosdescubrir la totalidad de los casos• Importancia del diagnóstico de hato o Importancia del diagnóstico de hato o

poblacional en programas de control y poblacional en programas de control y erradicaciónerradicación


CLASIFICACION DE LAS CLASIFICACION DE LAS PRUEBAS SEROLOGICASPRUEBAS SEROLOGICAS

• CualitativasCualitativas: : Prueba de tarjeta, Prueba de tarjeta, Anillo en leche Anillo en leche ((resultados + ó -)resultados + ó -)

• CuantitativasCuantitativas: : Rivanol, FC’Rivanol, FC’ ((resultados en resultados en títulostítulos))

• Tamiz o de Tamiz o de ““screening”screening”

• ConfirmatoriasConfirmatorias• De vigilancia De vigilancia

epidemiológicaepidemiológica


Toma de muestra de sangre para diagnostico de brucelosis


PRUEBAS TAMIZPRUEBAS TAMIZ

• Alta sensibilidad: pocos o ningún falso Alta sensibilidad: pocos o ningún falso negativonegativo

• Pruebas cualitativasPruebas cualitativas• SencillasSencillas• Prácticas: fácil realizaciónPrácticas: fácil realización• EconómicasEconómicas• Ejemplo: prueba de tarjeta Ejemplo: prueba de tarjeta


PRUEBAS CONFIRMATORIASPRUEBAS CONFIRMATORIAS

• Más específicasMás específicas• Son cuantitativasSon cuantitativas• Mayor número de casos crónicos Mayor número de casos crónicos

diagnosticadosdiagnosticados• Diferencian títulos residuales de la Diferencian títulos residuales de la

vacunación de títulos de origen infecciosovacunación de títulos de origen infeccioso• EjemploEjemplo: Rivanol, Fijación del : Rivanol, Fijación del

Complemento.Complemento.


PRUEBAS DE VIGILANCIA PRUEBAS DE VIGILANCIA EPIDEMIOLOGICAEPIDEMIOLOGICA

• Son cualitativasSon cualitativas• Realización rápidaRealización rápida• Pruebas Pruebas poblacionales o de hatopoblacionales o de hato• Ejemplo: Ejemplo: prueba de anillo en lecheprueba de anillo en leche• En áreas controladas y/o libres para En áreas controladas y/o libres para

descubrir hatos presuntamente descubrir hatos presuntamente infectadosinfectados


DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO II

• Se requieren muestras repetidas.Se requieren muestras repetidas.• Muestra óptima para aislamiento en Muestra óptima para aislamiento en

animales: contenido abomasal, animales: contenido abomasal, placenta, feto, y membranas fetales; placenta, feto, y membranas fetales; leche, nódulos linfáticos supramamariosleche, nódulos linfáticos supramamarios

• TToma aséptica y envío inmediato y en oma aséptica y envío inmediato y en refrigeración de las muestras.refrigeración de las muestras.

• Las muestras deben ser frescas.Las muestras deben ser frescas.


DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO I II I

• Aislamiento a partir de sangre, sólo en Aislamiento a partir de sangre, sólo en animales bacterémicosanimales bacterémicos,, situación muy situación muy improbableimprobable

• Facilidad de contaminación de la Facilidad de contaminación de la muestra, sobre todo en abortos.muestra, sobre todo en abortos.

• Necesidad de personal capacitado:Necesidad de personal capacitado: muestras de alto riesgo al personal. muestras de alto riesgo al personal.

• Tiempo prolongado de crecimiento: Tiempo prolongado de crecimiento: desde 15 días hasta 1 mesdesde 15 días hasta 1 mes


PRUEBAS OFICIALES PARA EL PRUEBAS OFICIALES PARA EL DIAGNOSTICO SEROLOGICO DE DIAGNOSTICO SEROLOGICO DE

BRUCELOSIS - NOMBRUCELOSIS - NOM

Para brucelas lisas:Para brucelas lisas:• Tarjeta (rosa de bengala o “card test”)Tarjeta (rosa de bengala o “card test”)• RivanolRivanol• Fijación del complementoFijación del complemento• Anillo en lecheAnillo en lechePara Para B. ovisB. ovis: : • Inmunodifusión doble y FC’Inmunodifusión doble y FC’


PRUEBA DE TARJETAPRUEBA DE TARJETA

• Prueba tamiz, cualitativa Prueba tamiz, cualitativa • En sueros de bovinos, ovinos, caprinosEn sueros de bovinos, ovinos, caprinos• Detecta IgG e IgM vs cepas lisas de Detecta IgG e IgM vs cepas lisas de

BrucellaBrucella• Requiere suero sanguíneo no hemolisadoRequiere suero sanguíneo no hemolisado• Resultados: (+) ó (-)Resultados: (+) ó (-)• Concentración celular: 8% para bovinos y Concentración celular: 8% para bovinos y

3% para cabras y ovinos 3% para cabras y ovinos


PRUEBA DE RIVANOL (I)PRUEBA DE RIVANOL (I)

• Prueba confirmatoria y cuantitativa para Prueba confirmatoria y cuantitativa para sueros de sueros de bovinosbovinos

• Detecta IgG.Detecta IgG.• Requiere suero sanguíneo no Requiere suero sanguíneo no

hemolisado positivo a prueba de tarjeta.hemolisado positivo a prueba de tarjeta.• Resutados expresados en títulos de Resutados expresados en títulos de

anticuerpos.anticuerpos.


PRUEBA DE RIVANOL (II)PRUEBA DE RIVANOL (II)

• Resultados: títulos 1:25, 1:50, 1:100, 1:200 Resultados: títulos 1:25, 1:50, 1:100, 1:200 y 1:400y 1:400

Interpretación:Interpretación:• Animales no vacunados se consideran Animales no vacunados se consideran

positivos cuando hay aglutinación completa positivos cuando hay aglutinación completa desde 1:25desde 1:25

• Animales vacunados: positivos si hay Animales vacunados: positivos si hay aglutinación completa a partir de aglutinación completa a partir de 1:501:50

• Negativos: cuando no se observa Negativos: cuando no se observa aglutinaciónaglutinación


FIJACION DE COMPLEMENTOFIJACION DE COMPLEMENTO

• Prueba cuantitativa, Prueba cuantitativa, complementaria en todas las complementaria en todas las especies: bovinos, ovinos, caprinosespecies: bovinos, ovinos, caprinos

• Sueros no hemolisados Sueros no hemolisados indispensablesindispensables

• Requiere personal y Requiere personal y

laboratorios especializados.laboratorios especializados.


Bovinos: Bovinos: • No Vacunados: Positivo si el título No Vacunados: Positivo si el título

es mayor o igual a 1:20.es mayor o igual a 1:20.• Vacunados: Positivos a 1:40.Vacunados: Positivos a 1:40.

Caprinos y ovinos: Caprinos y ovinos: • Positivo a partir de 1:8.Positivo a partir de 1:8.

FIJACION DE COMPLEMENTOFIJACION DE COMPLEMENTOInterpretación de Interpretación de resultadosresultados


ANILLO EN LECHE (I)ANILLO EN LECHE (I)

• Prueba de vigilancia epidemiológicaPrueba de vigilancia epidemiológica• CualitativaCualitativa• Requiere muestras de leche fresca, Requiere muestras de leche fresca,

refrigerada: 12 a 72 hs de haber sido refrigerada: 12 a 72 hs de haber sido tomadastomadas

• Se requiere sólo 1 ml para realizar la Se requiere sólo 1 ml para realizar la prueba (muestra mínima: al menos 10 prueba (muestra mínima: al menos 10 ml)ml)


ANILLO EN LECHE (II)ANILLO EN LECHE (II)InterpretaciónInterpretación

En leche de vacas:En leche de vacas:• Positivo = cualquier coloración de un anillo Positivo = cualquier coloración de un anillo

teñido en la superficie de la columna de teñido en la superficie de la columna de lecheleche

• Negativo = ausencia de anillo teñido en la Negativo = ausencia de anillo teñido en la superficiesuperficie

En leche de cabras:En leche de cabras:• Reacción Reacción positivapositiva si se forma un botón si se forma un botón

coloreado al fondo del tubo o grumos coloreado al fondo del tubo o grumos teñidos en la columna de leche. teñidos en la columna de leche. NegativoNegativo si si se tiñe toda la columna.se tiñe toda la columna.


DIAGNOSTICO DE EPIDIDIMITIS DIAGNOSTICO DE EPIDIDIMITIS OVINA POR OVINA POR B. ovisB. ovis

• Tamiz:Tamiz:Prueba de Inmunodifusión doble en Prueba de Inmunodifusión doble en agar, con antígeno soluble en agar, con antígeno soluble en solución salina caliente (HS) de solución salina caliente (HS) de B. B. ovisovis..

• Confirmatoria: Confirmatoria: Fijación de Complemento con Fijación de Complemento con

antígeno de antígeno de B. ovisB. ovis..• Sólo en machos > de 8 meses.Sólo en machos > de 8 meses.

uso e interpretacion de las pruebas de diagnostico: serologia

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