タンパク質電気泳動カタログ - thermo fisher scientific · 1 day ago · contents...

タンパク質電気泳動カタログ電気泳動関連製品&ウェスタンブロッティング&検出システム

W E S T E R N W O R K F L O W

SEPARATE TRANSFER DETECT

protein biology

Contents2

Separate

NuPAGE プレキャストゲル 3

NuPAGE ゲル用泳動槽 4

Bolt プレキャストゲル&泳動槽、PowerEase パワーサプライ 5

タンパク質ラダー 6

、タンパク質染色試薬 7

Transfer

Bolt ミニブロットウェット式転写モジュール、 8

2ドライブロッティングシステム 9

Detect

、ウェスタン検出用抗体 10

ウェスタンブロッティング基質 11

ゲルイメージングMY 12

ウェスタンブロッティング用二次抗体 13

3.0 14

2

分離→転写→検出

ウェスタンブロッティングの膨大な作業量にフラストレーションを感じることはありませんか？サーモフィッシャーサイエンティフィックでは、ウェスタンブロッティングの3つのステップにおいて、時間や手間を大幅に削減し、さらにデータ品質を改善する高性能なツールや技術を提供しています。

すべてのウェスタンワークフロー関連製品情報はこちら www.lifetechnologies.com/western

Separate ̶ タンパク質の分離 ̶• ミニゲル泳動槽：“使いやすさ”を追及したデザインで、180種類以上のゲルに対応し、多用途に使用可能です。ゲル 2枚分が並列にレイアウトされており、サンプルアプライや泳動中のモニタリングが簡便に行えます。

• Invitrogen™ Bolt™ゲルおよび Invitrogen™ NuPAGE™ Bis-Trisゲル：低～中程度の分子量のタンパク質を変性条件で分離するのに最適なプレキャストゲルです。中性pHのバッファーシステムにより、分解や劣化を回避してタンパク質の完全性を保ちます。

• Thermo Scientific™ Pierce™ Power Stainer：ポリアクリルアミドゲル電気泳動におけるタンパク質の染色を迅速に行うための装置です。通常6～11分で行えます。

• タンパク質ラダー：化学発光、蛍光、発色、または他の検出システムを用いる染色ゲルおよびイムノブロットにおける信頼できる比例的なバンド強度を提供します。

Transfer ̶ タンパク質の転写 ̶• ミニブロットウェット式転写モジュール：Bolt ミニゲル泳動槽のチャンバー内にセットすることで、シームレスにウェット式（タンク式）のタンパク質転写を行うことができます。市販の転写システムよりもメタノールベースの転写バッファーの使用量を抑えることができます。

• Thermo Scientific™ Pierce™ Power Blotter ：10～300kDaのタンパク質をポリアクリルアミドゲルからニトロセルロース膜またはPVDF膜への高速セミドライ転写を行うために特別にデザインされています。通常5～10分で完了します。

• Invitrogen™ iBlot™ 2 ドライブロッティングシステム：わずか“7分”で転写完了！パワーサプライ内蔵型の再現性および柔軟性の高いブロッティング装置です。さまざまなゲルおよびメンブレンのタイプやゲルサイズに対応しています。

Detect ̶ タンパク質の検出 ̶• Invitrogen™ iBind™ Western System ：ウェスタン解析の抗体反応を自動化したシステムです。最初に抗体液・洗浄液をセットしたら、あとは2.5時間静置して待つだけです。また、システムは外部電源の必要がなく、実験室のどこでも使えます。

• 一次抗体および二次抗体：再現性の高いウェスタンブロットを実現します。完全にバリデーション済みで、特異性が高く、高感度でありながら、お求めやすい価格です。

• HRP用化学発光基質：ウェスタンブロットで優れた性能を発揮します。ECL、ECL Plus、および ™ ™ の化学発光基質は、高感度、長時間発光、強いシグナル強度、および低バックグラウンドでのウェスタンブロットを可能とします。

• Thermo Scientific™ MYECL™ Imager ：ワンタッチ操作でのウェスタンブロットの画像取得が可能なパワフルで使いやすいブロットおよびゲルのCCDイメージャーです。化学発光検出、可視光検出、UV蛍光発光検出に対応し、高感度なマルチモード画像取得と解析が行えます。



• 高い分離能できれいな泳動像バンドの歪曲（スマイリング）も起こりません。

• 中性pH条件下でのサンプル処理によりタンパク質の分解を防ぎます。

• サンプル泳動時間が短縮最短35分での泳動が可能です。

• 室温で12ヵ月保存可能（ビス・トリスゲル）期限切れリスクや冷蔵庫占領の心配がありません。

Separate ̶ タンパク質の分離 ̶ウェスタン解析ワークフローの最初のステップはタンパク質の分離です。サーモフィッシャーサイエンティフィックでは、プレキャストゲル、試薬、ならびに自作ゲル、ラダー、電気泳動チャンバー、および電源用のアクセサリーを含むタンパク質の分離用の数種のオプションを提供しています。

タンパク質ゲル電気泳動関連製品情報はこちら www.lifetechnologies.com/separate

プレキャストゲルプレキャストのミニゲルは、便利で迅速かつ再現性の高い分離を可能にします。サーモフィッシャーサイエンティフィックでは、ゲル濃度、グラジエント、およびウェル数の異なるさまざまな仕様のゲル、ならびに最も一般的な化学試薬およびランニングバッファーをご用意しています。

お客様のタンパク質分離のニーズにフィットするオプション：™ は、系で便利に使用できるプレキャストゲル用のキットです。

• Boltゲルは、センシティブなウェスタン解析用の高容量アプライ可能なくさび型ウェルを採用しています。ゲルは、高解像度での検出および長期保存が可能です。

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/proteingels

NuPAGE プレキャストゲルNuPAGE ゲルは、ユニークな中性pHシステムを採用しており、従来のゲルで見られるような「スマイリング」や解像度の低下などが最小限に抑えられています。また、中性ゲルとバッファーにより、従来のアルカリ環境下で引き起こされるサンプルの化学的な修飾やサンプル劣化を回避することができます。さらに、NuPAGE ゲルからのタンパク質転写も効率よく行われるため、ウェスタン解析によるシグナル検出にも有効です。NuPAGE ゲルは、ビス・トリス系とトリス・アセテート系の2つのゲルタイプがあり、150kDa以上の高分子タンパク質の分離にはトリス・アセテートが適しています。またNuPAGE では、スループットの高いミディサイズのほか、二次元電気泳動用のゲルもご用意しています。

“スマイリング”の無い、きれいな泳動像が得られます

※種類や製品番号は価格表に掲載

2つのゲルタイプから選択

ゲルタイプゲル濃度分離レンジ保存期間泳動時間アプリケーション

ビス・トリス8%, 10%, 12%,4–12%

1.5–200 kDa 12ヵ月 35–50 小～中分子タンパク質の分離

トリス・アセテート 7%, 3–8% 30–400 kDa 8ヵ月 60 高分子タンパク質（＞150kDa）の分離

（A） NuPAGE ゲル

NuPAGE ゲルと従来のトリス-グリシンゲルのタンパク質分離の比較（A）はNuPAGE 4 12％ゲル、（B）は4 20％トリスグリシンゲル（他社製）で泳動。Lanes1, 6, 7, 10 ： Mark12 ； Lane2 ：（4 6 ）；Lane3 ：； Lanes 4,5：； Lane 8 ：；Lane 9：

（B）トリス-グリシンゲル1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10



3

NuPAGE ゲル用泳動槽NuPAGE プレキャストゲルは、一般的なミニゲルサイズ（8 8 ）のほか、よりスループットが高いミディゲルサイズ（8 13 ）があります。ミニゲル用の泳動槽である ™ ™ （写真左）は、同時に2枚までのミニゲルを泳動することができます。また、ミディゲル用の泳動槽である ™ XCell4 ™ （写真右）は、同時に4枚までのミディゲルを泳動することができます。それぞれのミディゲルで最大26サンプルの泳動ができるので、同時に100サンプル以上の泳動が可能です。

従来のアルカリ性ゲルからNuPAGE 中性ゲルへの切替え現在ご使用のトリス・グリシンゲルからNuPAGE ゲルへの変更をご検討の場合には、下表をご参考ください。

現在使用しているゲル推奨する NuPAGE ゲル4% トリス・グリシン 3 8% NuPAGE トリス・アセテート（+TA Buffer）*6% トリス・グリシン 3 8% NuPAGE トリス・アセテート（+TA Buffer）8% トリス・グリシン 7% NuPAGE トリス・アセテート（+TA Buffer）10% トリス・グリシン 10% NuPAGE ビス・トリス（+MOPS Buffer）12% トリス・グリシン 10% NuPAGE ビス・トリス（+MOPS Buffer）14% トリス・グリシン 12% NuPAGE ビス・トリス（+MOPS Buffer）16% トリス・グリシン 12% NuPAGE ビス・トリス（+MES Buffer）18% トリス・グリシン 12% NuPAGE ビス・トリス（+MES Buffer）

現在使用しているゲル推奨する NuPAGE ゲル4 12% トリス・グリシン 3 8% NuPAGE トリス・アセテート（+TA Buffer）または

4 12% NuPAGE ビス・トリス（+MOPS Buffer）4 20% トリス・グリシン 4 12% NuPAGE ビス・トリス（+MES Buffer）8 16% トリス・グリシン 4 12% NuPAGE ビス・トリス（+MOPS Buffer）10 20% トリス・グリシン 12% NuPAGE ビス・トリス（+MOPS Buffer）10% トリシン 10% NuPAGE ビス・トリス（+MES Buffer）16% トリシン 4 12% NuPAGE ビス・トリス（+MES Buffer）または

12% NuPAGE ビス・トリス（+MES Buffer）10 20% トリシン 4 12% NuPAGE ビス・トリス（+MES Buffer）

NuPAGE 用バッファーNuPAGEのミニゲル泳動用には、2種類のバッファー（MESまたはMOPS）が用意されており、1種類のゲルに対して2つの泳動パターンが得られます。解析目的に適した方をご利用ください。

• MESバッファー：低～中分子量用• MOPSバッファー：中～高分子量用

NuPAGE ゲルによるバッファータイプ別の泳動パターン最適な結果を得るためには、タンパク質のバンドがグレーの領域に分離されるゲル濃度&バッファータイプを使用します。

* NuPAGE ビス・トリスゲルを使用して、タンパク質スタンダードを泳動した場合の分離パターン（製品番号 LC5800 製品番号 LC5801 ）

** NuPAGE トリス・アセテートゲルを使用して、未着色タンパク質スタンダードを泳動した場合の分離パターン（製品番号 LC5688）

NuPAGE ミニゲル専用泳動槽

XCell SureLock Mini-Cell （製品番号；EI0001）NuPAGE ミディゲル専用泳動槽

XCell4 SureLock Midi-Cell （製品番号；WR0100）

ビス・トリス*

ゲル濃度

バッファータイプ

泳動パターン

トリス・アセテート**

100%

10%

20%

30%

40%

50%

60%

70%

80%

90%

MES

% o

f len

gth

of g

el

MOPS MES MOPS MES MOPS MES MOPS

10% 4–12% 12% 3–8% 7%8%TA TA

260 kDa

160 kDa

110 kDa

110 kDa

80 kDa

60 kDa

60 kDa

60 kDa

50 kDa

40 kDa

40 kDa

30 kDa

30 kDa

30 kDa

30 kDa

30 kDa

30 kDa

30 kDa

30 kDa

40 kDa

40 kDa

40 kDa

40 kDa

40 kDa

40 kDa

40 kDa

40 kDa

50 kDa

50 kDa

50 kDa

50 kDa

50 kDa

50 kDa

50 kDa

60 kDa

60 kDa

60 kDa

60 kDa

60 kDa

80 kDa

80 kDa80 kDa

80 kDa

80 kDa

80 kDa

80 kDa

20 kDa

15 kDa

15 kDa

15 kDa

15 kDa

15 kDa

15 kDa

15 kDa

20 kDa

10 kDa

3.5 kDa

3.5 kDa3.5 kDa

3.5 kDa10 kDa

10 kDa

10 kDa

10 kDa

10 kDa

10 kDa

20 kDa

20 kDa

20 kDa

20 kDa

20 kDa

20 kDa

110 kDa

110 kDa 110 kDa

110 kDa

110 kDa

110 kDa

160 kDa

160 kDa

160 kDa160 kDa

160 kDa

160 kDa

160 kDa500 kDa

290 kDa240 kDa

160 kDa

116 kDa

97 kDa

66 kDa

55 kDa

55 kDa

66 kDa

97 kDa

116 kDa

160 kDa

240 kDa

290 kDa

500 kDa

260 kDa

260 kDa

260 kDa

260 kDa

260 kDa 260 kDa

260 kDa

初めてでもカンタン！ゲルを差し込んだらレバーを倒すだけでしっかりロック（）• ミニゲル2枚を同時泳動• 液漏れ防止構造• ブロットモジュールと組み合わせるとタンク式転写装置としても使用可能

• ミディゲル4枚を同時泳動• 1ランで100サンプルの分離が可能

• 液漏れ防止構造


詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/nupage



4

Bolt プレキャストゲル&泳動槽Bolt ゲルシステムは、実績の高いNuPAGE システム（3ページ）と同様に、中性pHシステムを採用しており、高い分離能と安定性を備えています。さらに、ウェスタン解析において、効率が良く再現性の高い結果を得られるよう改良が加えられています。また、 Bolt シリーズでは、“使いやすさ”を追求しており、ゲルや泳動槽の構造に工夫が施されています。

PowerEase パワーサプライInvitrogen™ PowerEase™ 90W Power Supply（製品番号；PS0090）は、ミニゲル電気泳動用に特別にデザインされています。直感的なインターフェースにより、シンプルで簡単なプロセスで電力供給を行います。PowerEase 90W Power Supply の特長：• タイマーが内蔵されているため、ゲル電気泳動から離れることが可能• ほとんどの電気泳動デバイスに適合する出力ジャックを装備

PowerEase 300W Power Supply（製品番号；PS0300）は、ハイスループットゲル電気泳動用にデザインされた個別プログラムを保存可能なパワーサプライです。直観的なインターフェースにより、シンプルで簡単なプロセスで電力供給を行います。PowerEase 300W Power Supply の特長：• タイマーが内蔵されているため、ゲル電気泳動から離れることが可能• 10ステップそれぞれに最大10個のカスタムプログラム作成機能• ほとんどの電気泳動デバイスに適合する出力ジャックを4セット装備

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/powerease

“使いやすさ”を追求した新設計

ミニゲル泳動槽• NuPAGE、Blot ゲル共用の泳動槽• ゲル2枚が並列レイアウトで、アプライが容易• スタンドの背景が白く、モニタリングしやすい• 独立チャンバーなので、1枚泳動時にはバッファーを節約

Bolt ゲル B社 TXゲル

Bolt プレキャストゲル• ウェスタン解析に最適な高い分離能と転写効率• くさび型ウェルを採用し、一般的なチップでもアプライしやすい• 最大40 μLのサンプルをアプライ可能（10 well タイプ）• 室温で16カ月保存できる長期安定性

図2. ウェスタン解析におけるBolt ゲルと他社ゲルのデータ比較20μLのサンプルを、Bolt グラジエントゲルまたはB社 TXゲル上で泳動し、ウェスタンブロッティングで検出しました。ウェスタン検出にはケミルミネッセンスキットを使用しました。Lane 1 6Lanes 2–4, 6–7: 250Lane 5 4 6Lane 8: p53Lane 9: GSTLane 10 ウェスタンプロテインスタンダード

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/bolt

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

A B

新しいくさび形ウェル




5

タンパク質ラダーゲル電気泳動およびウェスタンブロットによるタンパク質解析を容易にする着色済みおよび未着色のタンパク質ラダーの幅広いラインナップをフォーマットで提供しています。

着色済みタンパク質ラダーの推奨用途：• おおよその分子量の測定• 電気泳動の進行状況のモニタリング• ウェスタンブロット中のメンブレンへのタンパク質転写効率の確認

未着色のタンパク質ラダーの推奨用途：• あらゆるバッファー系におけるターゲットタンパク質の正確な分子量の測定

高品質で高性能なタンパク質ラダー：• 高性能－シャープなバンドと一貫性のある移動パターンにより容易な分子量推定を実現

• 簡便－タンパク質ラダーは加熱処理なしで、そのままアプライ可能• 信頼性－非常に優れたロット間の一貫性および再現性

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/proteinladders

Protein Ladders

製品製品番号バンド数分子量レンジ未着色 26632 8 Low 3.4–100 kDa

26614 14 10–200 kDa

LC0725 8 20–1,200 kDa

着色済み 26616 10 Low 10–170 kDa26619 9 10–250 kDa

LC5699 9 30–460 kDa

マルチカラー着色済み

26634 10 10–260 kDa

26625 8 40–300 kDa

その他

LC5602 9 Western 20–220 kDa

26635 10 11–250 kDa

LC5928 7 11–155 kDa

LC5606 10 10–160 kDa

IEF Marker 3 10 3921201 13 3–10 pI

IEF Marker 3-1039212-01

Novex pH 3–10 Gel

PageRuler Low Range26632

NuPAGE 4–12% Bis-TrisGel w/MES SDS buffer

Spectra Multicolor Broad Range26634


Spectra Multicolor High Range26625


BenchMark FluorescentLC5928


PageRuler Unstained26614


PageRuler Prestained26616


PageRuler Plus Prestained26619


PageRuler Prestained NIR26635


Visualdetection

Infrareddetection

BenchMark His-taggedLC5606


SimplyBlue stained

InVision stained

NativeMark Unstained Protein StandardLC0725

NativePAGE Bis-Tris GelsGel load volume of 5 μL

Stained using coomassie R-250

3–12% 4–16%

HiMark Pre-stainedLC5699

NuPAGE 3–8% Tris-acetateSDS buffer

kDa

460

268238

171

117

71

55

41

31

MagicMark XPLC5602

NuPAGE Bis-Tris Gel, blotted tonitrocellulose, detected w/WesternBreeze

Chemiluminescent Kit

20

30

40

50

60

80

100

220

120

kDa

用



6

Pierce Power Stainer　（製品番号；22833）ポリアクリルアミドゲル中のタンパク質のクマーシー染色・脱染色が専用試薬を用いることで短時間で完了するように設計されています。未結合色素を電気で除去することにより、バックグラウンドが最小限またはゼロに抑えられ、染色されたタンパク質のみがシャープなバンドとして得られます。

• 約10分以内でタンパク質のクマーシー染色および脱染が可能• ミニゲル1～2枚またはミディゲル1枚を同時に染色および脱染可能• 従来の染色法と同等の染色結果を実現• あらかじめプログラムされたプロトコールを含む直感的なLCD タッチスクリーンインターフェイスを採用

タンパク質染色電気泳動で分離したタンパク質バンドは、さまざまなゲル内検出法で視覚化することができます。迅速な視覚化による確認用にも、少量のタンパク質の検出が可能な高感度染色用にも、簡便で効率的なさまざまなゲル内検出用のタンパク質染色剤を取り揃えています。

多様な製品群から、ご研究に最適のタンパク質染色剤をお選びください。

Protein Stains

Coomassie染色銀染色蛍光タンパク質染色

感度 25 0.5 0.5

簡便性＋＋＋＋＋

作用機序

酸性バッファーの条件下で、色素がタンパク質の塩基性および疎水性残基に結合すると、鈍い赤茶色から濃青色に変化します。

銀イオンがカルボキシル基（AspおよびGlu）、イミダゾール（）、スルフヒドリル（）、およびアミン（）と相互作用し結合します。銀イオンは金属銀に還元され、黒茶色の呈色を示します。

ほとんどの蛍光染色は、タンパク質の官能基を変化させる化学反応による染色よりもシンプルな色素結合メカニズムにより行われます。

検出方法視認視認蛍光イメージングシステムを使用

下流アプリケーションへの適合性質量分析およびシーケンシングに適合特定の組成が質量分析に適合ほとんどの組成が質量分析に適合

製品

：（製品番号：24620）

：（製品番号：24612）

：（製品番号：S6653）

Better：（製品番号：LC6060）

Better：（製品番号：LC6100）

Better：（製品番号：S6650）

Best：（製品番号：24615）

：（製品番号：24600）

Best：（製品番号：S12001）

Pierce Power Stainer および従来のクーマシー染色の比較

Pierce Power Stainer 従来のクーマシー染色※

全所要時間：230分～一晩全所要時間：11分

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/powerstainer

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/proteinstains

*クーマシー染色液：45％メタノール、10％酢酸、0.25％ 250※脱染液：30％エタノール、5％酢酸

7



7

Transfer ̶ タンパク質の転写 ̶ウェスタン解析ワークフローにおける次のステップは、タンパク質をニトロセルロースやPVDFのメンブレンに固定化することです。サーモフィッシャーサイエンティフィックでは、5～10分で転写可能なセミドライ式、および7分で転写可能なドライ式システムを提供しています。詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/transfer

電気泳動と転写反応を1つのタンクでBolt ミニブロットウェット式転写モジュールBolt ミニゲル泳動槽内にセットすることで、ウェット式転写装置となります。Bolt 泳動槽の左右2つあるチャンバーそれぞれにBolt ブロットモジュールをセットでき、トータルで2つのモジュールを使用可能です。このBolt ブロットモジュールは、液漏れを防止し、他のウェット式転写システムと比べて、バッファー量を抑えることができます。また、ブロッティング電極間の抵抗が一定なため、均一な電場が形成され、効率の高いタンパク質転写を行います。

• 独自のガスケットシールにより、バッファーの液漏れを防止し、セットアップ時のエラーを回避• 2つのチャンバーが独立しており、転写バッファーの使用量を半分に抑えることが可能• ウェスタン解析に要する時間を短縮（転写時間は60分）

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/miniblotmodule

Pierce Power Blotter　（製品番号；22834）高性能なタンパク質転写にスピードを備えることで、10～300kDaのタンパク質のポリアクリルアミドゲルからブロッティングメンブレンへの高速かつ高効率な転写を可能とします。• 専用の高速転写バッファー（ 1 ）を用いることで、5～10分で転写が完了

バッファーによる従来方法のセミドライ転写も可能• 10～300kDa のタンパク質のメンブレン転写に対応• 内蔵パワーサプライによりスタンドアローンで作業可能• タッチスクリーンの液晶カラーディスプレイからプログラムを選択して簡単に操作可能

• ミニゲル（7.0 ×8.4 ）4枚またはミディゲル（8.0 ×13.5 ）2枚を同時に転写可能

Bolt ゲルを用いたウェスタンブロットでは、完全長のタンパク質に対応したきれいでシャープなシグナルのみが検出されたのに対し、B社ゲルを用いたウェスタンブロットでは、複数の低分子分解産物が観察されました。がんと関連するプロテインキナーゼ（IKKβ、HCK、EPHB3、MAPK14、FLT1およびDDR2）を（A）Bolt ビス・トリスPlusゲルと（B）B社トリス・グリシンゲルを用いて解析しました。タンパク質サンプルは、各製造元のプロトコールに従って電気泳動用に調製しました。これらの精製キナーゼ（各50 ）をGST融合タンパク質として、プロテインスタンダードと精製組み換えGSTとともにBolt 4–12％ゲルおよびB社4–20％ゲル上で電気泳動しました。サンプルを分離し、Bolt ゲル用のBolt ミニブロットモジュールを用いるか、B社転写システムによりPVDF膜に転写しました。ブロットの検出は、抗GST抗体と

を用いて行いました。その後、露光時間1分でメンブレンを画像化しました。

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/powerblotter

A　　　　　　　　　　　　　　　　　B

Pierce Power Blotter および他社ブロッターによるウェスタンブロッティングの比較

Low (150kDa)

NuPAGE 4-12% Bis-Tris Gel

PVDF

mTOR (289kDa)

分子量レンジ

ゲルタイプ

メンブレン

目的タンパク（サイズ）

Pierce Power Blotter （転写時間10分）B社セミドライブロッター（転写時間10分）従来式セミドライブロッタ―（転写時間60分）タンク式転写（転写時間オーバーナイト）

Bolt ブロットモジュールのみ（製品番号；B1000）



8

iBlot 2 ドライブロッティングシステム　（製品番号；IB21001）転写バッファーを使用しないユニークな“ドライ式”ブロッティング装置です。わずか7分で再現性の高いタンパク質転写が行えます。電源内蔵のためパワーサプライの必要もありません。転写効率を損なうことなく、ウェスタン解析に要する時間と手間を大幅に削減します。

• タンパク質転写は7分で完了• 高い検出感度および再現性• 転写バッファー不要。パワーサプライ不要• さまざまなゲルサイズやメンブレンに適合• タッチスクリーンによる分かりやすく快適な操作性

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/iblot

を発現する A431 細胞抽出液（タンパク質20 ～1.2 ）をウェスタンブロット法により分析。4 12%のBolt ゲル（A,D）、NuPAGE ゲル（B,E）、トリス・グリシンゲル（C,F）を用いて電気泳動を行ない、 2 システムを用いてニトロセルロースまたはPVDFに転写した。

を用いて抗体反応を行い、HRPで検出した。

様々なタンパク質ゲルやメンブレンに適応ニトロセルロース（NC）による検出

PVDFによる検出

B

E

C

F

A

D

9



9

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/ibind

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/antibodies

ウェスタン解析ワークフローの最後のステップは検出です。このステップでは、エピトープ特異的な抗体が目的のタンパク質に結合し、アルカリフォスファターゼ（AP）あるいは西洋ワサビペルオキシダーゼ（HRP）のタグを用いることで、メンブレンに結合しているタンパク質を可視化することができます。サーモフィッシャーサイエンティフィックでは、ウェスタンブロットで使用できる3,500種類を超える一次抗体および1,000種類の二次抗体を提供しています。また、革新的な iBind Western Systemは、ウェスタン解析の抗体反応および洗浄プロセスを自動化でき、マニュアル法よりも感度および再現性に優れたデータを得ることができます。

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/detect

̶ タンパク質の検出 ̶

iBind ウェスタンシステムによる検出はマニュアル法よりも優れた結果を少ない一次抗体使用量で実現A431 細胞抽出液中のタンパク質をミニゲル泳動槽電気泳動システムを用いて分離し、 2 ドライブロッティングシステムを用いてPVDF膜またはニトロセルロース膜に転写しました。ブロットは、（ 1068）（1H12）マウスモノクローナル抗体でプローブした後（1：1,000希釈した抗体を、システムには2μl、マニュアル法には10μl使用）、ヤギ抗マウス（H＋L）ペルオキシダーゼコンジュゲート抗体（システムには1：360希釈を5.55μL使用、マニュアル法には1：1,800希釈を5.55μL使用）で処理しました（パネルCおよびD）。パネルAおよびBでは、ヤギ抗マウス 800CWコンジュゲート（システムには1：3,000希釈、マニュアル法には1：15,000希釈）を二次抗体として使用しました。

蛍光色素や ™ ™ ナノクリスタルコンジュゲートを用いるマルチカラーウェスタン解析は、同一メンブレン上に存在する複数のタンパク質を、移動度が同じものでも同時に評価および比較することを可能とします。また、マルチ解析では、標準化を簡単に行うことができ、ブロットのストリッピングもシングルブロットの比較も不要で、追加の抗体のインキュベーションステップも不要であるため、時間を節約できます。 ™

™ 680および 790ならびに ™ WesternDot™ 585、625、655および800 コンジュゲート二次抗体は、迅速で正確なマルチカラーウェスタン検出に最適です。

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/westerndot

ウェスタンシステムによる検出では、一次抗体使用量がマニュアル法の80％以下に減少できた。

ウェスタンの抗体反応を自動化iBind Western System：（製品番号；SLF1000S）ウェスタン解析のブロッキング～2次抗体反応後の洗浄までのプロセスを自動化したシステムです。新しい（SLF）技術により、反応の順に抗体液と洗浄液のリリースをコントロールします。また、システムは電源を使用しないので、実験室のどこでも使えて、全くの無音で反応が進みます。

は自動化による利便性に加え、マニュアル法よりも感度および再現性に優れたデータが得られます。

• すべての抗体反応および洗浄ステップを自動化• 最初に溶液をセットしたら、あとは反応終了まで待つだけ（約2.5時間）

• マニュアル法よりも高感度に検出し、比の高いクリアなウェスタンデータが取得可能

• 煩雑な作業から解放され、研究のための新たな時間を確保

マルチカラーウェスタン解析

B

D

マニュアル法による検出

A

C

EGFR

Phospho-EGFR

Merged

1 2 3 4 5 6

ウェスタン検出に適切な抗体信頼性と再現性の高いウェスタンブロットデータを取得するためには、適切な抗体を使用することが非常に重要です。サーモフィッシャーサイエンティフィックでは40,000種類を超える特異性の高い抗体を提供しており、高品質のウェスタンデータを得るために役立っています。抗体製品は全て記載のアプリケーションおよび生物種で検証済みです。必要なウェスタン解析のニーズに応じて、さまざまなおよびコンジュゲート二次抗体を提供しています。

• ターゲットタンパク質もしくは抗体に特異的• 必要とする検出レベルに応じた感度が取得可能• 信頼あるデータが安定して取得可能• コストを抑えながら、高品質なデータが取得可能• 記載のアプリケーションおよび生物種での使用について検証済み

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ウェスタンブロッティング基質ウェスタンブロット検出のための適切な化学発光基質をお選びください。ウェスタンブロッティングシステムにおける他のコンポーネントと同様に、多くの化学発光基質を取り揃えています。必要とする検出レベル（感度）、ターゲットタンパク質の量、サンプルの用途に応じて、適切な基質をお選びください。

化学発光基質の特長：• 優れた感度－5種類の基質がピコグラムからフェムトグラムまで検出可能• 強い発光強度－発光時間が長く、複数回の露光が可能• 高いシグナル強度－シグナルは他の発光ベースシステムの2倍• 抗体の節約－基質は一次抗体および二次抗体をより希釈して使用できるように最適化

HRPを使用するウェスタンブロット検出用の5種類の化学発光基質を提供しています：

ウェスタンブロット試薬ブロッキングバッファー、洗浄バッファー、界面活性剤、メンブレンストリッピングバッファー、およびウェスタンブロットエンハンサーなどウェスタンブロッティングに必要とされるタイプの試薬を幅広く提供しています。ブロッキングバッファーとしては、BSA、カゼイン、およびミルクなどの従来のタンパク質ベースのブロッキング試薬に加えて、独自開発の ™ ™ および ™ ™ などのタンパク質を含まないブロッキングバッファーをラインナップしており、ウェスタンブロッティングや他のイムノアッセイ検出法における効率的なブロッキングを可能とします。洗浄バッファーとしては、ウェスタンブロッティングで一般的に用いられるPBS、TBSなどのバッファーをあらかじめブレンドした粉末混合物もラインナップしており、水に入れて溶解するだけで、すぐに使用できます。独自組成のメンブレンストリッピングバッファーは、ブロットされたメンブレンから一次抗体および二次抗体を解離させて取り除くようにデザインされており、メンブレンを別の条件下であるいは異なるタンパク質ターゲットを検出する他の抗体を用いるリプロービングに用いることを可能とします。ニトロセルロースおよびPVDFの転写メンブレンは、ロール、プレカットシート、ならびに化学発光法および他のウェスタンブロット検出法用のX線フィルムのタイプをご用意しています。 ™ ™ を用いると、使用しない場合に比べて、検出感度が3～10倍に増加します。

Pierce ECL Substrate（製品番号：32106）

SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrate（製品番号：32132）

Pierce ECL Plus Substrate（製品番号：34080）

SuperSignal West Dura Extended Duration Substrate（製品番号：34076）

SuperSignal West Femto Substrate（製品番号：34094）

1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5

特　長他社のECL基質よりも低コストで同程度のシグナル検出が可能

他社ECL基質製品よりも低コストでより高感度のシグナル検出が可能

他社ECL Plus基質製品よりも低コストで同程度のシグナル検出が可能

発光時間が長く、イメージング装置での検出に最適

HRP検出用の最高感度の基質

検出レベル～20 ピコグラム～1 ピコグラム～0.5 ピコグラム～250 フェムトグラム～60 フェムトグラム

シグナル持続時間

30分～2時間 6～8時間 5時間 24時間 8時間

選択のポイント

ターゲット量が豊富、サンプル量が豊富、日常的使用

ターゲットが少量、サンプルが限られている、ECL基質よりも高感度な検出用

ターゲットが少量、サンプルが限られている、化学蛍光検出用

ターゲットが少量、サンプルが限られている、CCD画像撮影用

ターゲットが極めて少量、サンプルが貴重、最高感度の検出用

保管温度帯 4℃ 室温 4℃ 室温 4℃または室温

詳細はこちらをご覧ください。

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/chemisubstrates

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画像の取得と解析－ワンタッチ操作でのウェスタンブロットおよびゲルイメージング MYECL Imager　（製品番号；62236）パワフルで使いやすいMY は、合理化され直感的なタッチスクリーンインターフェース、便利な取得オプション、および解析ソフトウェアを備えることにより、高感度なウェスタンブロットおよびゲルのドキュメンテーションツールのセットを提供します。MY には、先進のCCDテクノロジーが組み込まれており、X線フィルムの2倍以上の感度と10倍のダイナミックレンジを示します。本イメージャーは、化学発光検出（ウェスタンブロット）、UV検出（核酸染色ゲル）、および可視光検出（タンパク質染色ゲル）に対応します。

MYECL Imager の特長：• ワンタッチ操作での画像取得• 最大5回のプリセットされた、またはユーザー定義された露光回数の画像を取得• 化学発光画像の露光時に自動的に可視画像を取得• あらゆるモードで発光プラットフォームを視覚化するためのライブカメラを設置

ツールによるウェスタンブロットの最適な露光時間を自動計算

myImageAnalysis Software （MYECL Imager 付属解析ソフトウェア）™ ™ 2.0 は、ゲルドキュメンテーションイメージャーまたはスキャナーにより取得された

電気泳動ゲルおよびブロットのデジタル画像を解析および編集するためにデザインされた、フル機能装備の多機能コンピュータプログラムです。

myImageAnalysis Software v2.0の特長：• アノテーションに対応するファイルタイプ－一般的な画像フォーマット（TIFF、JPEG、PNGなど）• 自動認識－正確で、カスタマイズ可能なレーンおよびバンドの自動認識により、対象バンドに番号を振り、選択し、レーンプロファイル表示、デンシメトリ－情報取得、および解析を行うことが可能

• 画像補正およびアノテーション－画像の切り取り、回転、反転、バンドのサチュレーション確認、およびコントラスト調整後に、シンプルなラベル、ノート、および矢印を追加

• エクスポートおよび共有－データと画像は簡単に ® ®、 ®、および ®プログラムに転送し、さらなる解析・表示を行うことが可能

CCDイメージングとX線フィルムの感度の比較2倍連続希釈した、 1 抗体（A）および抗体（B）でプローブしたHeLa細胞ライセートのウェスタンブロット画像を示します。ブロットは

とインキュベーション後、10秒間フィルムに露光し、MY （3×3ビニング）で取得した画像（上か下）と比較しました。

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/myeclimager

A　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　B

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反応性ターゲットアイソタイプ

精製法ホスト

コンジュゲート

Unconjugated Biotin HRP AlkPhos

製品番号製品番号製品番号製品番号Anti-Human IgA（α chain） affinity purified Goat A18783 A18785 A18781 A18784Anti-Human IgA（α chain） cross-adsorbed Goat A18789 A18791 A18787 A18790Anti-Human IgE（εchain） affinity purified Goat A18795 A18797 A18793 A18796Anti-Human IgE（εchain） cross-adsorbed Goat A18801 A18803 A18799 A18802Anti-Human IgG（H+L） affinity purified Goat A18807 A18809 A18805 A18808Anti-Human IgG Fc affinity purified Goat A18819 A18821 A18817 A18820Anti-Human IgG Fc highly cross-adsorbed Goat A18831 A18833 A18829 A18832Anti-Human IgG Fc cross-adsorbed Goat A18825 A18827 A18823 A18826Anti-Human IgG（H+L） cross-adsorbed Goat A18813 A18815 A18811 A18814Anti-Human IgG/A/M affinity purified Goat A18849 A18851 A18847 A18850Anti-Human IgM（μ chain） affinity purified Goat A18837 A18839 A18835 A18838Anti-Human IgM（μ chain） cross-adsorbed Goat A18843 A18845 A18841 A18844Anti-Human Kappa（κ） Light Chain affinity purified Goat A18855 A18857 A18853 A18856Anti-Human Kappa（κ） Light Chain cross-adsorbed Goat A18861 A18863 A18859 A18862Anti-Human IgG（H+L） affinity purified Rabbit A18905 A18907 A18903 A18906Anti-Human IgM（μ chain） affinity purified Rabbit A18911 A18913 A18909 A18912Anti-Mouse IgG（H+L） affinity purified Chicken A15977 A15979 A15975 A15978Anti-Mouse IgG（H+L） cross-adsorbed Chicken A15983 A15985 A15981 A15984Anti-Mouse IgG（H+L） affinity purified Donkey A16013 A16015 A16011 A16014Anti-Mouse IgG（H+L） highly cross-adsorbed Donkey A16019 A16021 A16017 A16020Anti-Mouse IgG（H+L） affinity purified Goat A16068 A16070 A16066 A16069Anti-Mouse IgG（H+L） cross-adsorbed Goat A16074 A16076 A16072 A16075Anti-Mouse IgG（H+L） highly cross-adsorbed Goat A16080 A16082 A16078 A16081Anti-Mouse IgG Fc affinity purified Goat A16086 A16088 A16084 A16087Anti-Mouse IgG Fc cross-adsorbed Goat A16092 A16094 A16090 A16093Anti-Mouse IgG（H+L） affinity purified Rabbit A16162 A16164 A16160 A16163Anti-Mouse IgG（H+L） cross-adsorbed Rabbit A16168 A16170 A16166 A16169

Anti-Rat IgG（H+L） affinity purified Chicken A18729 A18731 A18727 A18730Anti-Rat IgG（H+L） cross-adsorbed Chicken A18735 A18737 A18733 A18736Anti-Rat IgG（H+L） affinity purified Donkey A18741 A18743 A18739 A18742Anti-Rat IgG（H+L） highly cross-adsorbed Donkey A18747 A18749 A18745 A18748Anti-Rat IgG（H+L） affinity purified Goat A18867 A18869 A18865 A18868Anti-Rat IgG（H+L） cross-adsorbed Goat A18873 A18875 A18871 A18874Anti-Rat IgG（H+L） affinity purified Rabbit A18917 A18919 A18915 A18918Anti-Rat IgG（H+L） cross-adsorbed Rabbit A18923 A18925 A18921 A18924

Anti-Rabbit IgG（H+L） affinity purified Chicken A15989 A15991 A15987 A15990Anti-Rabbit IgG（H+L） cross-adsorbed Chicken A15995 A15997 A15993 A15996Anti-Rabbit IgG（H+L） affinity purified Donkey A16025 A16027 A16023 A16026Anti-Rabbit IgG（H+L） cross-adsorbed Donkey A16031 A16033 A16029 A16032Anti-Rabbit IgG（H+L） highly cross-adsorbed Donkey A16037 A16039 A16035 A16038Anti-Rabbit IgG（H+L） affinity purified Goat A16098 A16100 A16096 A16099Anti-Rabbit IgG（H+L） cross-adsorbed Goat A16106 A16108 A16104 A16107Anti-Rabbit IgG（H+L） highly cross-adsorbed Goat A16112 A16114 A16110 A16113Anti-Rabbit IgG Fc affinity purified Goat A16119 A16122 A16116 A16120Anti-Rabbit IgG Fc cross-adsorbed Goat A16126 A16128 A16124 A16127Anti-Rabbit IgG（H+L） affinity purified Sheep A16174 A16176 A16172 A16175Anti-Goat IgG（H+L） affinity purified Chicken A15965 A15967 A15963 A15966Anti-Goat IgG（H+L） cross-adsorbed Chicken A15971 A15973 A15969 A15972Anti-Goat IgG（H+L） affinity purified Donkey A16001 A16003 A15999 A16002Anti-Goat IgG（H+L） cross-adsorbed Donkey A16007 A16009 A16005 A16008Anti-Goat IgG（H+L） affinity purified Rabbit A16138 A16140 A16136 A16139Anti-Goat IgG（H+L） cross-adsorbed Rabbit A16144 A16146 A16142 A16145Anti-Goat IgG Fc cross-adsorbed Rabbit A16150 A16152 A16148 A16151

Anti-Bovine IgG（H+L） affinity purified Goat A18753 A18755 A18751 A18754Anti-Cat IgG（H+L） affinity purified Goat A18759 A18761 A18757 A18760Anti-Cat IgG（H+L） affinity purified Rabbit A18879 A18881 A18877 A18880

Anti-Chicken IgY（H+L） affinity purified Goat A16056 A16058 A16054 A16057Anti-Chicken IgY（H+L） affinity purified Rabbit A16132 A16134 A16130 A16133

Anti-Dog IgG（H+L） affinity purified Goat A18765 A18767 A18763 A18766Anti-Dog IgG（H+L） affinity purified Goat A18765 A18767 A18763 A18766

Anti-Guinea Pig IgG（H+L） affinity purified Goat A18771 A18773 A18769 A18772Anti-Guinea Pig IgG（H+L） highly cross-adsorbed Goat A18777 A18775 A18778Anti-Guinea Pig IgG（H+L） affinity purified Rabbit A18885 A18887 A18883 A18886Anti-Hamster IgG（H+L） affinity purified Rabbit A18891 A18893 A18889 A18892Anti-Hamster IgG（H+L） cross-adsorbed Rabbit A18897 A18899 A18895 A18898Anti-Llama IgG（H+L） affinity purified Goat A16062 A16064 A16060 A16063Anti-Llama IgG（H+L） affinity purified Rabbit A16156 A16158 A16154 A16157Anti-Sheep IgG（H+L） affinity purified Donkey A16043 A16045 A16041 A16044Anti-Sheep IgG（H+L） highly cross-adsorbed Donkey A16050 A16052 A16047 A16051

ウェスタンブロッティング用二次抗体 ̶ 安心品質をお求め易い価格で

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大きなスクリーンとグラフィカルな表示で操作がスムーズに行えます。

簡単なアッセイ方法

全ての試薬が室温になっていることを確認

スタンダードの数測定したいサンプル数

測定したいサンプル

キットに含まれているスタンダード

トータルボリュームμ

トータルボリューム200μL

すべてのアッセイチューブを秒ボルテックスします。

温室で分（は分）インキュベートします。

でチューブを測定します。

Qubit アッセイキット操作 Qubit 3.0 Fluorometer にて定量

タンパク質アッセイも正確に高感度に測定3つの一般的なタンパク質アッセイにより対象サンプル間の変動が少なく正確で高感度。

Qubit Protein Assay

• 夾雑物による測定誤差のない正確なデータを取得• 蛍光試薬を用い少量サンプルから高感度に測定可能（1μL～20μL）• タンパク質、DNA、RNAをそれぞれ特異的に測定• 場所をとらないコンパクトサイズ〈W13.6×D25.0×H5.5 〉

蛍光光度計 Qubit 3.0 Fluorometer　（製品番号；Q33216）

™ 3.0™ は、高感度、高精度の測定が可能で、少量の貴重なサンプルや高度なワークフローの実験をサポートします。

サンプル濃度を自動で計算し表示

測定結果がレンジ内かはビジュアルでも確認

詳細はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/qubit

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販売店研究用にのみ使用できます。診断目的およびその手続上での使用はできません。記載の社名および製品名は、弊社または各社の商標または登録商標です。標準販売条件はこちらをご覧ください。 www.lifetechnologies.com/TCFor Research Use only.Not for use in diagnostic procedures. © 2015 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved.All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific and its subsidiaries unless otherwise specified. Printed in Japan. PA018-A1505OB

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テクニカルサポート 0120-477-392　 [email protected]　オーダーサポート TEL：03-6832-6980　FAX：03-6832-9584営　業　部 TEL：03-6832-9300　FAX：03-6832-9580

サーモフィッシャーサイエンティフィックライフテクノロジーズジャパン株式会社

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〒108-0023　東京都港区芝浦 4-2-8本社：

タンハ�ク質電気泳動カタロク�_150522-3.indd 1 15/05/22 18:39

タンパク質電気泳動カタログ - thermo fisher scientific · 1 day ago · contents...

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