1

PARAZITOLOGIE MEDICALAAN UNIVERSITAR 2014-2015

LP 2

2

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN:AMIBIAZA, TRICHOMONIAZA,LAMBLIAZA, CRIPTOSPORIDIAZA. 

3

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN AMIBIAZA

4

Agentul etiologic: Entamoeba histolytica (Entamoeba dysenteriae).

-amiba intestinala obligatoriu patogena, hematofaga, capabila sa invadeze tesuturi intestinale si extraintestinale, cu raspandire hematogena pluriviscerala.

5

Morfologie- prezintă 3 stadii:

1.Trofozoit (forma vegetativă):măsoara 20–40μm;este foarte mobilă (prin emiterea a

numeroase pseudopode);histolitică (enzimele proteolitice, se

înfundă în grosimea peretelui colic, provocând microabcese ce pot conflua);

6

citoplasma este diferenţiată în două zone:

ectoplasma hialină (formeaza pseudopode) şi

endoplasma granulară, care contine: hematii, produse ingerate (bacterii); nucleul - sferic, situat excentric, are un cariozom

central cu granule de cromatina dispuse uniform de-a lungul peretelui nucleului;

7

2. Prechist (chist imatur)

3. Chist :măsoara 10-15 μm diametru;este sferic, înconjurat de un perete gros şi

rezistent;chistul matur (infectant) are 4 nuclei;se elimină prin materiile fecale; este forma de rezistenţă şi de diseminare în

mediul extern.

8

Clinic: amibiaza intestinala (dizenterie amibiana) sau extraintestinala

1.Amibiaza intestinală acută (dizenterie amibiană): se caracterizează prin scaune frecvente (5 – 20/zi), afecale, constituite din mucus şi sânge, „scuipat rectal”, însoţite de tenesme;

evoluează, în mod obişnuit, spre cronicizare, caracterizată prin perioade de remisie de durată variabilă, atunci când se evidentiaza forma minuta; alternând cu perioade de acutizare, când se evidentiaza forma histolitică,vegetativa.

9

Amibiaza extraintestinală (amibiaza viscerală)

Amibiaza hepatică – se manifestă prin dureri în hipocondrul drept, hepatomegalie, febră (38 - 39ºC).

Amibiaza pleuropulmonară este secundară unei atingeri hepatice.

10

Diagnosticul parazitologic: -sunt necesare 4-6 probe de scaun, recoltate la

interval de 7-10 zile

1.Examenul microscopic- Se evidentiaza trofozoitii (in faza acuta, diareica) sau chistii (in faza cronica, de acalmie) Preparat nativ cu ser fiziologic sau lugol: examinarea imediata a mucozitatilor

sanguinolente sau a puroiului evidentiaza amibe vii care au miscari lente, numeroase eozinofile, putine polimorfonucleare;

citoplasma contine vacuole si hematii.

11

Frotiu colorat Giemsa :

o Citoplasma este diferentiata in doua zone : ectoplasma hialina colorata in albastru si endoplasma granulara, care contine vacuole si

hematii in diferite stadii de digestie, colorate portocaliu;

o Nucleul este rotund, situat excentric, cromatina nucleara este dispusa regulat, sub forma de granule fine, pe marginea interna a membranei nucleare.

12

Preparate directe Kato-Miura sau preparate de concentrare (Bailanger): in faza cronica si la purtatori, chistul constituie elementul de diagnostic.

13

2.Rectosigmoidoscopia si examenul histopatologic: evidentiaza “abcesul in buton de camasa”- un ulcer cu margini neregulate, bine dezvoltat in profunzime si ingust spre suprafata, plin cu exudat galben-negricios.

14

3.Imunodiagnostic: este indicat in amibiaza extraintestinala;

detectarea serologica a anticorpilor si/sau a antigenelor specifice E.histolytica cu teste imune:ELISA, Latex-aglutinare, PCR.

15

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN TRICHOMONIAZA 

16

Agentul etiologic: Trichomonas vaginalis - flagelat cavitar al aparatului uro-genital 

17

Morfologie: Trofozoitul: ovalar, masoara 15μ lungime, 7μ lăţime; extremitatea anterioară lăţită, cea posterioară

efilată; în regiunea anterioară prezintă:

un nucleu cu 5 cromozomi;un complex chinetostomal din care pleacă:3 – 5 flageli

4 părăsesc anterior celula 1 recurent – parţial fixat pe membrana ondulantă

1 axostil cu rol în susţinere străbate longitudinal celula, exteriorizându-se prin

extremitatea posterioară

paralel cu membrana ondulantă există o formaţiune intracitoplasmatică numită costa

18

o parazitul mai conţine lizozomi, aparat Golgi, organite cu rol în metabolism

nu prezintă forma chistică

19

Clinic: trichomoniaza uro-genitala

La femeie: (simptomele sunt exacerbate pre si post-menstrual)

prurit si arsura vulvo-vaginala;

secretie vaginala abundenta (leucoree) alb-verzuie, spumoasa si fetida (peste alterat);

disurie, dispareunie.

20

La barbat:

frecvent, asimptomatic (purtator);

“picatura matinala’’- uretrita- secretie uretrala alb-verzuie, spumoasa, fetida;

arsura si prurit la nivelul meatului uretral;

disurie, polakiurie.

21

Recoltarea si produsul patologic:

la femeie: se recolteaza secretia vaginala din fundul de sac posterior sau lateral (se recomanda ca recoltarea sa se efectueze in primele 4-5 zile postmenstrual, cand parazitii se gasesc in faza de maxima multiplicare);

secretia vaginala se poate recolta cu ajutorul unei spatule sau a unui tampon de vata, fixat la capatul unei baghete, care apoi se introduce intr-un tub, continand solutie de glucoza 5% in ser fiziologic.

la barbat: se recolteaza secretia uretrala, obtinuta prin masajul prostatei sau urina.

22

Diagnosticul parazitologic: 1.Examenul microscopic: se poate efectua

in preparat nativ sau frotiu.

Preparat nativ - parazitul îşi păstrează mobilitatea câteva ore dacă este păstrat la 20 0 C

se pot observa parazitii vii, rotunzi sau ovalari, cu miscari active.

23

Frotiu colorat Giemsa: se evidentiaza trofozoitul.

- trofozoitul poate fi sferic, oval sau neregulat;

- citoplasma albastra, are un aspect vacuolar cu fine granulatii de culoare rosie;

- nucleul este mare, rosu-violet, situat anterior;

- axostilul (elementul care permite diferentierea de celulele epiteliale) si flagelii se coloreaza in rosu carmin.

24

2. Cultivarea pe medii nutrititive (Diamond, Lash, Lӧffler) – mai ales la persoane asimptomatice.

3. Imunodiagnostic: prin identificarea antigenelor specifice in secretii vaginale/uretrale/urina– mai ales în infecţiile asimptomatice ale bărbatului

-reacţia de aglutinare, RIF, IDR, ELISA.

25

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN LAMBLIAZA (GIARDIOZA)

26

Agentul etiologic: Giardia intestinalis (Giardia lamblia, Lamblia intestinalis)

-flagelat cavitar al intestinului subtire

27

Morfologie: parazitul exista sub doua forme: trofozoit si chist.

Trofozoitul: măsoară 15 µm lungime şi 10µm lăţime; corpul: piriform

faţă dorsală bombată, rugoasă, cu numeroase depresiuni;

faţă ventrală, plată. faţa ventrală prezintă:

2 nuclei anteriori; 4 perechi de flageli cu originea în 8

blefaroplaşti: flagelii anteriori, posteriori şi caudali părăsesc parazitul prin

regiunea anterioară, posterioară, caudală flagelii ventrali sunt situaţi pe faţa ventrală a parazitului

corpi parabazali semilunari; dublu axostil median.

28

Chistul:

oval, 9-15 μ;

perete dublu;

2 sau 4 nuclei la extremităţi;

resturi de flageli în formă de litera S, dispuşi înaxul chistului.

29

Clinic: lambliaza (giardioza)

asimptomatica- la adulti sau purtatori;

diareea este simptomul dominant: 5-10 scaune/zi, mai ales matinale şi postprandiale, păstoase sau lichide, clare sau de culoare galbenă, uneori spumoase sau grăsoase;

dureri abdominale, greturi, anorexie, scadere ponderala;

alergodermii (urticarie, eczeme).

30

Diagnosticul parazitologic:

în primele 3 săptămâni nu apar paraziţi în scaun;

examinarea se repetă de 4 ori la fiecare 7 zile.

31

1.Examenul microscopic: Preparat nativ în ser fiziologic sau lugol: se evidentiaza chistul in scaunul

format/steatoreic (la cronici si la purtatori);

32

se evidentiaza trofozoitul in scaunul diareic (in formele subacute) sau in lichidul duodenal (tubaj duodenal sau enterotest).

(Enterotestul= o capsula gelatinoasa, enterosolubila, atasata la un fir de nailon; ajunsa in intestin gelatina se dizolva, iar parazitii se fixeaza de firul de nailon. Dupa 2 ore, firul se extrage si mucusul impreuna cu parazitii se depun pe o lama de sticla, care se examineaza microscopic.)

33

2.Imunodiagnostic: detectarea Ag în materii fecale (indica o infectie activa)

ELISA, imunoelectroforeza, contraimunoelectroforeza, imunoperoxidaza.

34

DIAGNOSTICUL DE LABORATOR IN CRIPTOSPORIDIAZA

35

Agentul etiologic: Cryptosporidium

-parazit oportunist, a carui patogenitate este conditionata de starea sistemului imun al gazdei;

- habiteaza intracelular in celulele epiteliale ale tractusului digestiv, si mai rar, pulmonar.

36

Morfologie: are doua forme evolutive- trofozoit si oochist

Trofozoitul: masoara intre 2-5µ in diametru; este forma vegetativa; se localizeaza in marginea in perie a celulei

epiteliale intestinale, intracellular.

37

Oochistul:

4-5µ in diametru;

este sferic-ovoid;

este inconjurat de un perete gros;

contine 4 sporozoiti in forma de corn si o masa de reziduri granulare.

38

Clinic: criptosporidioza

La imunocompetenţi: boală diareică autolimitată de scurtă durată

(1-2 săptămâni), cu vindecare spontană;

3-10 scaune/zi, apoase, nesanguinolente şi nepurulente, conţinând uneori mucus; dureri abdominale, greţuri, însoţite uneori de febră.

39

La imunodeficienţi:

boală diareică persistentă asociată cu malabsorbţie;

scaunele diareice sunt apoase, nesanguinolente, holeriforme, 10-20/zi, antrenând pierderi hidroelectrolitice importante, între 1-25 l/zi. Evoluţia este spre agravare progresivă, cronică şi moarte.

40

Diagnosticul parazitologic:

-practicarea a minimum doua examene coprologice la interval de 7 zile (excretia chistilor poate fi discontinua)

-excretia de oochisti este mai intensa in primele 4-5 zile ale bolii, apoi descreste treptat in saptamana a doua si se opreste dupa 1-2 saptamani de la incetarea diareei;

-rareori oochisturile se pot intalni in scaunele formate.

41

1.Examenul microscopic: Frotiu din materii fecale –coloratie Ziehl

Neelsen modificata: oochistul apare ca o formatiune rotunda, cu

dimensiuni de 4-6µ, colorata in rosu, pe fondul verde al detritusurilor celulare, levurilor, germenilor

prezinta un perete celular gros, in interior are elemente granulare colorate in brun inchis, dispuse la periferie

central prezinta o zona necolorata

42

Frotiu din materii fecale –coloratie Giemsa

- oochisturile apar bleu-pal, cu elemente granulare interne rosii pe fond violet inchis

43

2.Examenul histologic al biopsiei duodeno-jejunale: permite evidentierea parazitului in diferite stadii evolutive (schizonti, gametociti).

3. Imunodiagnostic: detectarea coproantigenului gp900 specific pentru oochist (teste ELISA)