medium iin

8/16/2019 Medium Iin

1/19

1PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

BAB 1

PENDAHULUAN

A. Latar BelakangMelakukan suatu percobaan didalam laboratorium yang bertujuan

untuk menumbuhkan dan mengembangbiakan atau meneliti suatu

mikrorganisme dibutuhkan suatu medium sebagai tempat tumbuh

mikroorganisme tersebut. Medium merupakan sumber nutrisi bagi

mikroorganisme untuk dapat tumbuh dan berkembang, medium terdiri dari

berbagai jenis dan fungsi sesuai dengan kebutuhan dan apa yang

diinginkan. Umumnya medium dibedakan menjadi medium sintetik dan

nonsintetik. Medium sintetik memiliki komponen-komponen penyusun dari

berbagai zat kimia sedangkan medium nonsintetik berasal dari bahan-

bahan alami. Medium yang digunakan untuk pertumbuhan dan

perkembangan mikroorganisme juga dipengaruhi oleh pH. Dimana pH

tersebut harus sesuai dengan mikroorganisme yang di tumbuhkan

sehingga dapat mikroorganisme dapat tumbuh dengan baik. Dalam

praktikum akan digunakan medium sintetik Tytip oy !roth "T !# dan Mac$onkey %gar "M$%# yang merupakan medium cair dan medium padat

sedangkan untuk medium nonsintetik digunakan kentang dan tauge.

&raktiukum ini bertujuan agar praktikan dapat mengenal jenis-jenis dan

cara pembuatan medium tersebut. ebab dalam bidang farmasi, medium


2/19

2PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

diperlukan untuk menumbuhkan mikroorganisme yang dapat

menghasilkan dan sebagai salah satu cara menguji obat atau antibiotik.

B. Rumusan Masalah %dapun rumusan masalah dari praktikum ini adalah '

(. %pa saja macam-macam medium)*. !agaimana cara pembuatannya)+. !agaimana membuat medium nonsintetis dari kentang)

. !agaimana membuat medium nonsintetis dari tauge)

. !agaimana cara membuat medium sintetis)

C. Maksud Praktikum %dapun maksud dari praktikum ini adalah untuk mengenal macam-

macam medium dan cara pembuatannya.

D. Tujuan Praktikum %dapun tujuan dari praktikum ini adalah untuk membuat medium

agar nonsintetis dari kentang dan tauge serta beberapa medium agar

sintetis.

E. Man aat Praktikum %dapun manfaat dari praktikum ini adalah mengetahui macam-

macam medium, mengetahui cara membuat medium agar nonsintetis dari

kentang dan tauge serta beberapa medium sintetis.


3/19

3PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

BAB !!

"A#!AN PU$TA"A

A. Te%ri Umumrganisme dapat dibedakan menjadi dua golongan berdasarkan

sumber karbon yang digunakan yaitu autotrof yang dapat mensintesis

makanannya dari karbondioksida dan heterotrof yang membutuhkan lebih

dari satu senya/a organik sebagai sumber karbonnya "Hadietomo, (00+#.rganisme autotrof menggunakan senya/a anorganik sebagai

sumber nitrogennya sedangkan heterotrof menggunakan asam amino

atau senya/a protein lainnya seperti peptida, preteosa, dan pepton.

$ontoh medium yang digunakan untuk menumbuhkan mikrorganisme

heterotrof yaitu kaldu nutrient sedangkan sumber nitrogen biasanya

menggunakan ekstrak daging dan pepton. &ertumbuhan bakteri

dipengaruhi oleh keasaman atau pH tertentu sehingga perlu diperhatikan

pH dari medium yang akan digunakan, bakteri dapat tumbuh dengan baik

pada pH 1 "Hadietomo, (00+#.Media kultur adalah bahan nutrisi yang digunakan untuk

pertumbuhan mikrorganisme di laboratorium. !erdasarkan konsistensinya

media di kelompokkan menjadi dua macam yaitu media cair "li2uid media#

dan media padat " olid media#. Media cair merupakan ekstrak dari


4/19

4PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

material biologis maka disebut dengan rich media atau broth. edangkan

media padat membutuhkan bahan pemadat misalnya agar "&rati/i, *334#.Media yang paling umum digunakan yaitu air kaldu, cara

membuatnya dengan merebus daging yang sudah dicacah kemudian

menyaring airnya, air saringan tersebut yang akan digunakan sebagai

medium. %ir saringan ini mengandung pepton dan natrium klorida yang

merupakan sumber nitrogen dan zat anorganik lainnya yang bagus untuk

pertumbuhan bakteri. Tidak lupa juga di perhatikan pHnya agar dapat

disesuaikan dengan pH yang dibutuhkan bakteri untuk tumbuh. Medium-

medium yang mengandung substansi kompleks seperti ekstrak daging,

ekstrak khamir, tripton dan darah disebut juga medium buatan atau

medium kompleks sedangkan medium yang bahan-bahannya dapat

diruliskan rumus kimianya disebut medium sintetis, medium ini lebih rumit

dibanding medium yang lain biasanya digunakan untuk menumbuhkan

mikroorganisme tertentu dalam laboratorium penelitian. Terdapat juga

contoh medium selain yang dijelaskan diatas yaitu medium karbohidrat

yang menggunakan berbagai pada kaldu. &enambahan gula bertujuan

untuk melihat apakah bakteri tersebut menggunakan gula untuk

pertumbuhannya atau tidak. $ontoh dula yang yang sering digunakan

yaitu glukosa, manosa, galaktosa, sukrosa, maltosa, dan laktosa. 5ika

gula digunakan bakteri akan menghasilkan asam atau gas, asam dan gasi

ini dapat diketahui dengan penambahan indikator yang dapat berubah

/arna dalam keadaan asam atau menggunakan tabung kecil yang dibalik


5/19

5PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

pada dasar /adah medium untuk melihat gelembung gas yang tertangkap

pada tabung kecil tersebut "6heeler, (00+#.Media perbenihan merupakan media berisi nutrisi yang digunakan

untuk menumbuhkan bakteri dalam laboratorium. Media ini biasanya

mengandung sumber karbon, nirogen, sulfur, fosfor dan faktor

pertumbuhan organik. 7nokulum merupakan bakteri yang di inokulasikan

kesebuah media perbenihan. Dan bakteri yang timbuh dengan dengan

baik pada media tersebut dinamakan biakan bakteri. Untuk media padat

dapat digunakan agar yang berasal dari rumput laut. Media agar

digunakan untuk medium miring yaitu agar yang dimasukkan dalam

tabung reaksi lalu dimiringkan alasannya karena posisi yang miring

memiliki luas permukaan yang lebih besar sehingga lebih banyak juga

bkateri yang dapat dilihat. Terdapat beberapa jenis medium seperti media

sintetik yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri kemoheterotrof

dimana media, bahan uji dan bakteri disatukan lalu di amati pertumbuhan

bakterinya. Media kompleks, mengandung nutrisi yang tinggi yang berasal

dari ekstrak daging, ragi atau tumbuhan. Medium anaerob, digunakan

untuk menumbuhkan bakteri anaerob, digunakan bejana ynag memiliki

bagian yang mengandung oksigen dan bagian yang tidak mengandung

oksigen pada bagian dasar bejana, media ini dipanaskan terlebih dahulu

untuk menghilangkan oksigennya lalu kemudian dapat digunakan, dengan

memasukkan ca/an petri yang telah di inokulsikan bakteri kedalam

bejana tersebut. Media biakan khusus digunakan untuk menumbuhkan

bakteri yang tidak dapat tumbuh pada aeida yang biasa digunakan dalam


6/19

6PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

laboratorium. Media selektif dan diferensial digunakan untuk melihat

bakteri yang lebih spesifik dan yang terhubung dengan suatu penyakit,

dengan menekan bakteri yang tidak diinginkan dan mendukung bakteri

yang diinginkan untuk tumbuh. Media pengayaan, digunakan untuk

mengisolasi bakteri yang berjumlah sangat sedikit "8adji, *3(3#.Media adalah substrat yang digunakan untuk menumbuhkan

mikroba, media ini harus dalam keadaan steril sebelum digunakan agar

tidak ditumbuhi oleh bakteri yang tidak diinginkan. Untuk membuat media

dapat digunakan bahan-bahan alami ataupu senya/a kimi yang organik

maupun nonorganik. Media dapat dibedakan menurut bentuk, susunan,

dan sifat kimia. Menurut bentuknya media ditentukan oleh ada tidaknya

agar-agar, gelatin, dan sebagainya yang dapat dibedakan menjadi media

padat biasanya ditambahkan agar-agar, digunakan untuk pertumbuhan

bakteri, ragi jamur, dan mikroalgae. Media cair, tidak ditambahkan zat

pemadat. Media semi padat, dengan penambahan zat pemadat 39 dari

yang seharusnya, digunakan untuk penumbuhan mikroba yang

membutuhkan banyak air. !erdasarkan susunannya media, yang dilihat

dari komponen penyusun media tersebut. Dibedakan menjadi media alami

yan menggunakan bahan-bahan alami seperti kentang, tepung, daging,

telur, ikan, umbi-umbian dan lainnya, contohnya telur ynag diguakan untuk

pertumbuhan dan perkembangbiakan :irus. Media sintetik, menggunakan

senya/a kimia sebagai komponen media. Media semi sintetik

menggunakan media yang merupakan campuran dari bahan alami dan

sintetik. Misalnya kaldu nutrisi, toge agar dan /ortel agar. !erdasarkan


7/19


8/19

8PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

ber/arna? tidak berbau atau berbau lemah? rasa

berlendir? jika lembab liat? jika kering rapuh.@elarutan ' &raktis tidak larut dalam air, larut dalam air mendidih&enyimpanan ' Dalam /adah tertutup baik@hasiat A penggunaan ' Bat tambahan

*. A'uades ";7 777, (010 ' 0C#=ama 8esmi ' %2ua Destilata=ama >ain ' %ir uling&emerian ' $airan jernih? tidak ber/arna? tidak berbau? tidak

mempunyai rasa&enyimpanan ' Dalam /adah tertutup baik

(. "entang ) $%lanum tu*er%sum+ "itis.go:#@ingdom ' &lantaeDi:isi ' Trakeophyta@elas ' Magnoliopsida

rdo ' olanales;amili ' olanacea

enus ' Solanumpesies ' Solanum tuberosum

,. Tauge ) -igna radiate+ "it is.go:#@ingdom ' &lantaeDi:isi ' Trakeophyta@elas ' Magnoliopsida

rdo ' ;abales;amili ' ;abaceae

enus ' Vignapesies ' Vigna radiata

. Ma/ C%nke0 Agar a. @omposisi

!acto &epton (1 g!acto &reteosa &eptone + g!acto >actose (3 g

!acto !ile alts =o + (, g!acto %gar (+, g=eutral 8ed 3,3+ g!acto $rystal Eiolet 3,33( g

b. &roduksiDifco >aboratoriesDetroit M7 4*+*-13 4 U %

. Tr0ti& $%0 Br%tha. @omposisi

!actoF Tryptone "&ancreatic Digest of $asein# (1.3 g!acto oytone "&eptic Digest of oybean Meal# +.3 g

lukosa "GDe trose# *. g


9/19

9PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

=atrium @lorida .3 gDipotassium Hydrogen &hosphate *. g

BAB !!!

"A#!AN PRA"T!"UM

A. Alat 2ang Di&akai %dapun alat yang digunakan pada praktikum yaitu autoklaf,

batang pengaduk, erlenmeyer, kain saring, kapas, kertas putih, kulkas,

penangas air, pinset besi, pisau, sendok tanduk besi, /adah plastik.


10/19

10PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

B. Bahan 2ang Digunakan

%dapun bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum yaitu

agar-agar, gula pasir, kentang, tauge, Trytip oy !roth "T !#, Mac$onkey

%gar "M$%#.

C. Cara "erja )An%nim3 451 +1. Pem*uatan media nutrien /air

$ara pembuatan '(. Ditimbang dengan teliti '

Ikstrak daging "ekstrak beef# + gram&epton gram

*. Masing-masing bahan tersebut dilarutkan dalam (33 m> air suling,

diaduk sampai homogen.+. Dipanaskan sehingga larutan medium mendidih selama menit.

. Didinginkan, kemudian dinetralkan larutan medium tersebut

"menggunakan indikator phenol red pada /aktu menetralkan#.

Untuk netralisasi digunakan =a H ( = sedikit demi sedikit sampai

/arna indikator berubah /arna menjadi merah jambu.. %ir yang hilang selama pemanasan supaya diganti dengan

menambahkan air suling sampai :olume tepat (333 m>.C. Disaring dengan kapas atau kain flanel yang bersih.1. Disterilkan dengan menggunakan otoklaf ( menit pada tekanan *

atm.4. Pem*uatan medium nutrien agar

$ara kerja '

(. Dibuat nutrient seperti yang telah disebutkan diatas.*. Ditimbang agar sebanyak ( -*3 gram setiap (333 m> medium.+. Dimasukkan agar tersebut ke dalam medium, kemudian panaskan

sambil diaduk, sehingga semua agar-agar mencair "pemanasan

dilakukan diatas penangas air /ater bath#.. %ir suling yang hilang selama pemanasan supaya diganti dengan

air suling. !ila perlu dilakukan penyetelan pH sekali lagi.


11/19

11PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

. Disaring dalam keadaan panas-panas dengan kapas atau kain

flanel yang bersih.C. Dimasukkan medium tersebut kedalam tabung-tabung reaksi yang

steril dan banyaknya medium yang diisikan tergantung dari pada

keperluannya. Untuk medium agar tegak diisikan (3 m>,

sedangkan untuk medium agar miring diisikan m> medium.1. Disterilkan dengan otoklaf selama ( menit dengan tekanan * atm.

Untuk medium agar miring setelah disterilisasi letakkan miring +3

derajat terhadap garis mendatar dan biarkan memadat.

BAB !-

"A#!AN HA$!L PRA"T!"UM

A. Hasil PraktikumTa*el

"el%m&%k Medium 6arna "%sistensi kegunaan


12/19

12PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

$e*elum $esudah

( T !Merah

kecokelatan

$oklatpekat cair &ertumbuhanbakteri

* &D% kuning@uningkeruh

Mediumpadat "agar#

&ertumbuhan jamur

+Mac$onkey

agar Merahbata

Merahkecokelat

ancair

&ertumbuhan jamurJbakteri

TI%@uningcerah

@uningpucat

padat&ertumbuhan

bakteri J jamur

B. Pem*ahasan

&raktikum ini bertujuan untuk membuat beberapa medium sintetik

dan sintetik, adapun medium sintetik yang digunakan adalah Trytip oy

!roth dan Mac$onkey %gar, sedangkan untuk non sintetik digunakan

kentang dan tauge, masing-masing medium digunakan dikerjakan oleh

kelompok yang telah ditentukan dan kelompok + mengerjakan medium

sintetik mac$onkey agar. Mac$onkey agar digunakan untuk memilah

bakteri gram negatif yang dapat memfermentasi laktosa. !akteri yang

memfermentasi laktosa akan menyebabkan penurunan pH sehingga

mempermudah penyerapan neutral red dan mengubah koloni bakteri

menjadi merah bata. !akteri lain yang tidak dapat memfermentasi laktosa

tidak akan ber/arna. !akteri yang dapat tumbuh antara almonella,

higella, Ischerichia coli, Interococcus dan taphylacocus. Medium

pertama-tama dihitung berapa banyak yang akan ditimbang dan diperoleh

gram dalam 43 m> a2uadest, medium kemudian dimasukkan dalam

erlenmyer (33 m> dan ditambahkan a2uades sampai tanda batas 43 m>,


13/19

13PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

dilarutkan. >alu di panaskan dalam penangas air hingga benar-benar

homogen. Medium didalam erlenmeyer kemudian disterilkan dalam

autoklaf. ebelumnya mulut erlenmeyer ditutup menggunakan kapas dan

dibungkus dengan kertas putih. etelah ( menit disterilkan

menggunakan autoklaf medium didinginkan dan diamati perubahan /arna

serta bentuknya apakah tetap cair atau memadat. M$% sebelum di

panaskan ber/arna merah bata setelah dipanasakan menjadi merah

kecoklatan untuk bentukmya sebelum dan sesudah tetap masih dalam

bentuk cair atau larutan. etelah itu di simpan didalam kulkas.

BAB -

"E$!MPULAN DAN $ARAN

A. "esim&ulanTelah dilakukan pembuatan medium sintetis Mac$onkey %gar, M%$

ber/arna merah dan merupakan medium padat, digunakan sebagai

media seleksi untuk bakteri gram negatif yang dapat memfermentasi

laktosa dengan menyebabkan /arna merah bata pada bakteri yang positif

memfermentasi laktosa.

B. $aran


14/19

14PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

Diharapkan para kakak asisten membimbing kami sebagai praktikan

dengan lebih baik lagi selama praktikum, karena bimbingan asisten sangat

penting demi kelancaran praktikum.

DA7TAR PU$TA"A

Dit5en & M, (010, Farmakope Indonesia , Idisi 777, Depkes 87 ' 5akarta.

Hadioetomo, 8atna ri, (00+, Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek , &T.ramedia &ustaka Utama ' 5akarta.

&rati/i, yl:ia T., *334, Mikrobiologi Farmasi , Irlangga ' 5akarta.

8adji, Maksum, *3(3, Buku Ajar Mikrobiologi Panduan MahasiswaFarmasi & Kedokteran , I $ ' 5akarta.

uria/iria, H. Unus, *33 , Mikrobiologi Dasar , &apas inar inanti '5akarta.

6heeler A Eolk, (00+, Mikrobiologi Dasar , Irlangga ' 5akarta.


15/19

15PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

LAMP!RAN

LAMP!RAN 1. $kema "erja

@elompok +

Dihitung M$% yang akan digunakan dalam 43 m>

Ditimbang M$% sebanyak g

Dimasukkan dalam erlenmeyer

Di tambahkan a2uadest hingga tanda batas

Diaduk hingga larut

Dipanaskan menggunakan /ater bath atau penangas air

Dipanaskan hingga M$% larut dengan baik dalam a2uadestDidinginkan pada suhu ruangan

Dibungkus menggunakan kertas dan menutup mukut erlenmeyer

menggunakan kapas

Disterilisasikan menggunakan autoklaf


16/19

16PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

LAMP!RAN 4 . 8am*ar97%t%

U=7EI8 7T% MU >7M 7=D =I 7%

M%$$ =@IK % %8

U=7EI8 7T% MU >7M 7=D =I 7%

M%$$ =@IK % %8


17/19

17PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

U=7EI8 7T% MU >7M 7=D =I 7%

MID7UM M%$$ =@IK % %8

U=7EI8 7T% MU >7M 7=D =I 7%

T8KT7& K !8 TH


18/19

18PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

LAMP!RAN ( . Perhitungan

a. "el%m&%k 1Dik ' Trytip oy !roth "T !#

Dibuat dalam C3 m>

TSBditimbang =30 g

1000 g x60 mL

¿ 1 ,8 gram

*. "el%m&%k 4Dik ' &otato de tra %gar "&D%#

Dibuat dalam * 3 m>

kentang=

250 g1000 g

x200 g= 50 gram

dextrosa =250 g

1000 g x 10 mL= 2 ,5 gram

agar=

250 g1000 g

x 20 mL= 5 gram

/. "el%m&%k (Dik ' Mac $onkey %gar "M$%# G 3 gram

Dibuat dalam 43 m>

MCA ditimbang =50 g

1000 g x 80 mL

¿ 4 gram d. "el%m&%k ,

Dik ' Tauge Ikstra %gar "TI%#Dibuat dalam (33 m>

tauge =100 g

1000 g x200 g= 20 gram

dextrosa=

100 g1000 g

x10 mL= 1 gram


19/19

19PEMBUATAN MEDIUM

MUH. ARFAH 15020140072

agar=

100 g1000 g

x 20 mL = 2 gram

LAMP!RAN , 7:T:C:P2 L!TERATUR

medium iin

Documents